CN101627129A

CN101627129A - 用于测量生理健康的生物介体的组合物和多路检验

Info

Publication number: CN101627129A
Application number: CN200780037405A
Authority: CN
Inventors: E·萨蒂亚拉; S·S·汉纳
Original assignee: Societe dAssistance Technique pour Produits Nestle SA
Current assignee: Nestec SA
Priority date: 2006-10-06
Filing date: 2007-10-04
Publication date: 2010-01-13
Anticipated expiration: 2027-10-04
Also published as: AU2007318208B2; WO2008057160A3; US20120122717A1; ZA200903094B; RU2009116433A; CA2665164A1; CN101627129B; EP2069524A2; AU2007318208A1; EP2069524A4; WO2008057160A2; BRPI0717803A2; JP2010505420A; US20100196880A1; RU2520080C2; MX2009003583A

Abstract

本发明提供了包含探针集组的多路检验，所述探针集组用于开发能使用非常少量的生物样品同时测量多种生物相关蛋白的多路检验，以快速评测动物(尤其是伴侣动物)的健康状态，以及配制用于改善动物健康状态的营养方案。本发明提供了探针以及使用其来评测动物健康状态以及它们对其中的治疗或营养干涉的应答的方法。

Description

用于测量生理健康的生物介体的组合物和多路检验

相关领域描述

细胞因子、脂肪因子和激素属于基本生物介体(mediator)，安排针对刺激和应激的生理应答，它们因此可用作为健康状态的“信号”和/或疾病的指征。对这些介体的改变(静态的和随时间的)的评估提供了对生物系统或生物体针对应激因子的应答的一些理解。

多路分析是方便的，其允许使用Luminex xMAP平台等设备(instrument)来研究多种分析物。此类多路分析能在单次检验中同时定量测量多至100种分析物。此类检验因此适用于积累对生物介体的研究(例如本文所述的那些)中所需要的数据，以及上述研究中所涉及的样品的本质。

虽然用于测量许多生物介体的技术是已知的，但仍需要探针集组(panel)以开发使用非常小量的生物样品就能同时测量多种生物相关蛋白质的多路检验，用于快速评测动物(尤其是伴侣动物)的健康状态，以及，用于配制改善动物健康状态的营养方案。特别地，人们需要用于评测动物健康状态的探针和方法以及可用于影响改善动物健康的治疗性或营养性的干涉(intervention)。

发明内容

因此，本发明的一个目的是提供探针集组以开发使用非常小量的生物样品就能同时测量多种生物相关蛋白质的多路检验。

本发明的另一目的是提供快速评测动物健康状态的方法。

本发明的另一目的是提供改善动物健康状态的营养方案。

本发明的还一目的是提供试剂盒形式的产品，其含有本发明的多路检验和关于如何针对多种意图来使用所述检验的指导的组合。

这些目的和其它目的中的一种或多种是使用新颖的可被检测的分子探针的集合(collection)来实现的，所述探针的集合用于测定单种样品中分析物的预设组中每种的活性、存在或表达。分析物的组包含至少一种细胞因子或针对其的基因、一种趋化因子或针对其的基因、一种激素或针对其的基因以及一种脂肪因子因子或针对其的基因，并且，对于组中的每种分析物而言，分子探针的集合包含至少一种适于检测该分析物活性、存在或表达的探针。在一些实施方式中，分析物的组还包含一种或多种神经元生长因子(neuronal growth factor)或针对其的基因、并非神经元生长因子的生长因子或针对其的基因、可溶受体或针对其的基因，或者它们的组合。

本发明的其它和另外目的、特征以及优点对于本领域普通技术人员来说将是易于获知的。

附图简述

图1：代谢综合征的图示，显示了胰岛素抗性保持的重要作用以及心脏病、中风和/或炎症的最终风险。

图2：对LPS刺激的细胞因子应答：将PBMC与不同浓度的LPS一起培养3、6或18小时。针对细胞因子检验C/S。显示了针对IL-6[A]、TNFα[B]、IL-18[C]和IL-8[D]的数据。X轴：LPS剂量ng/ml，Y轴是平均荧光强度[MFI]或[MF]，Z轴代表了时间点。

发明详述

定义

术语基因的“活性”包括与基因发挥的重要生物作用相关的任何量度。例如，对基因转录的测量，或在静态时间点或实时测量自其转录的RNA种类的多度。本领域技术人员将知道，对本文中所用的基因的“活性”的测量还可包括对特别的组织、细胞类型或器官中来自特定基因mRNA的量的测量，其可以是实时的或者不是实时的。类似地，本领域技术人员还将知道，可以以若干种有用的方式来测量蛋白质分析物。对蛋白质和其它分析物的测量可包括分析物的存在或不存在、活性(例如酶活性或其它生物学活性)、结合性质、半寿期、周转(turn-over)或分析物的其它可被测量的属性。

术语“分析物”包括“从基因表达的”蛋白质，其为在细胞中被翻译为的天然蛋白质形式以及具有翻译后易位、加工、修饰等的蛋白质的形式。因此，在一些情况下，蛋白质分析物可以是翻译后截短的，或者，例如可被磷酸化，或者具有其它修饰，例如对任何氨基酸残基的主链或侧链的修饰。术语分析物还包括此类蛋白质的代谢衍生物和在细胞中发现的一种或多种聚一种或多种其它取代基的蛋白质的复合体，而无论是否具有活性。在一些优选的实施方式中，分析物是蛋白质或肽，探针是抗体。探针集合中的每种抗体特异性地识别组中的仅一种蛋白质，并且对于所选择的组中的每种蛋白质而言，集合中有至少一种此类抗体。本领域技术人员将知道，一旦已经选择了一组此类蛋白质，如果这些蛋白质的氨基酸序列已知的话，普通技术操作者通常能够设计出对应于基因或mRNA(这些蛋白质是由此表达的)的一组核酸探针或其它探针。因此，这些应用也可用于本发明。

术语“动物”表示可用于本发明的具有细胞因子、激素、脂肪因子、神经元生长因子、并非神经元生长因子的生长因子或可溶受体的任何动物，其包括但不限于：人、鸟类、牛、犬、马科动物、猫科动物、hicrine、鼠科动物、羊科动物和猪科动物，优选地，人、鼠科动物、猿、犬科动物和猫科动物。

在提到分子探针的小组(group)时，术语“集合”表示多种。通常，对多种没有限制，虽然100种或更少的探针是优选的。

术语“分子探针”表示可用于检测基因、其相应RNA或其蛋白质表达产物的存在或活性的任何分子。

术语“集组”是术语集合的同义词。术语集组一些时候更倾向于描述在筛选样品中集合的应用。在本文中使用的集合优选(但并不一定)用于以多路方式检测相应的分析物的组，即，针对多种探针中每种的结果全都从单个反应或检验容器中获得。通常，探针集合对应于分析物的组，其中，多种探针中每种都对应于所述组中特定的分析物。在某些实施方式中，分析物是基因或基因产物(蛋白质)，探针允许对小组(或组)中每种基因(或其表达产物)的表达或活性加以测量。更优选地，分析物是从基因表达的蛋白质。

术语“单个包装”表示，试剂盒的组分物理上联结(associated)于一个或多个容器中，或与一个或多个容器相联结，它们被认为是用于生产、分发、销售或使用的单位。容器包括但不限于：袋、盒、瓶、热缩塑料(shrinkwrap)包装、钉合或另外被固定的组分，或者它们的组合。单个包装可以是物理上相联结的各检验组分的容器，使得它们被认为是用于生产、分发、销售或使用的单位。

术语“虚拟包装”表示：试剂盒的组分与针对一种或多种物理或虚拟试剂盒组分的引导(direction)(指导用户如何获得其它组分)相联结，例如，在含有一种组分和指导用户进入网站、接触记录信息、看到可视信息或接触医护人员或指导员(instructor)以获得如何使用所述试剂盒的指导的包装中。

本发明

在一个方面，本发明提供了可被检测的分子探针的集合，它们用于在单份样品中测定预设的分析物的组中每种的活性、存在或表达。分析物的组包含至少一种细胞因子或针对其的基因、一种趋化因子或针对其的基因、一种激素或针对其的基因以及一种脂肪因子或针对其的基因。对于组中的每种分析物而言，分子探针的集合包含至少一种适于检测该分析物活性、存在或表达的探针。探针的这些集合意欲用于优选在单个反应容器中在方便的检验模式中进行的检测方法。这些集组与合适的模式识别和途径分析技术组合起来，有助于预测或评估生理应激因子或干涉的功能后果。

优选地，分子探针包含蛋白质、核酸或其组合，但可包含小分子或其它化合物及其结构或组合。包含蛋白质的探针的例子包括抗体、抗体片段、受体、结合蛋白质、酶等。它们可用于探测蛋白质分析物，还可用于探测多种其它分析物。核酸探针包括经由互补性的Watson-Crick型碱基配对产生其特异性的那些以及从其它相互作用产生其特异性或其特异性包括其它相互作用的那些。例如，适配体——可被设计来特异性识别某些分析物(例如蛋白质或其它分子)的核酸，可用于本发明。核酸酶，例如DNA核酶和核酶是本领域已知的，它们具有已知的特异性并且可用作为本文中的探针。探针还可包含用于结合分子和受体的配体。所有这些分子作为针对分析物(例如基因的表达产物或者甚至是基因本身)的探针的用途是本领域已知的，并且因此本领域技术人员将知道如何针对在本发明中的使用来选择和改造此类分子。

探针可以是人造的或从自然界分离的。在一些优选的实施方式中，分子探针是抗体。在一种实施方式中，集合中的每种抗体可特异性识别相应蛋白质的组中的一种蛋白质分析物以及由此作用于鉴定所述蛋白质分析物。探针可以以任何方便的形式使用，例如在溶液或悬浮液中。在某些实施方式中，它们可与底物(例如载体或珠粒)结合，或被放在阵列、微阵列等中，以制造有用的、方便的和/或能提供信息的检验系统。

在某些实施方式中，预设的分析物的组是基因的组或蛋白质的组。在某些实施方式中，选择蛋白质分析物的组，并且开发基于相应的基因或mRNA的组的检验。基于理性基础、基于其与将从集组获得的信息之间的关系来选择分析物的组。在一种优选的实施方式中，基于每种分析物与个体健康状态之间的关系来选择分析物的组。

在一种实施方式中，分析物的组是下述蛋白质的组，所述蛋白质包含至少一种细胞因子、一种趋化因子、一种激素和一种脂肪因子。对于组中的每种分析物而言，分子探针的集组包含至少一种适于检测该分析物的存在、活性或表达的探针，即，针对将要测定其存在、活性或表达的组中每种分析物而言，有相应的探针。在又一实施方式中，其中分子探针的集合是前述的蛋白质分析物的组，此时分析物的组还包含至少一种其它类型的益生生物中的一种或多种。

在另一实施方式中，分析物的组包含具有至少一种编码细胞因子的基因、一种编码趋化因子的基因、一种编码激素的基因以及一种编码脂肪因子的基因的基因之组。在一种实施方式中，基因分析物的组还包含编码神经元生长因子(neuronal growth factor)的至少一种基因、编码另外的生长因子(即，并非神经元生长因子的生长因子)的至少一种基因或者编码可溶受体的至少一种基因或者它们的任何组合。

虽然对于根据本发明的单个集合中存在的探针数量没有实际限制，但是在某些实施方式中，优选地，上限是每个集合100个探针。较小的探针集合也是合适的。例如，大约90-100、80-90、70-80或60-70个探针的集组也都适用于本发明。类似地，大约10-20、20-30、30-40、40-50或50-60的集合也适于使用。从4至100之间的其它特定探针数也包括在本发明内(虽然并没有特别枚举)，4-100个探针之间的所有可能的范围也都包括在本发明内，虽然并没有特别枚举。探针范围是特别有用的，当一些丰余性可能是最初想要的，而在后来发现并不必要的时，或者可选地当随着发现或意识到了另外的探针的更多体内作用，所述另外的探针可被确定为有用的，以与特定的集合包括在一起时。在其它一些实施方式中，例如，当探针可能结合至阵列或微阵列时，每个集合超过100个探针可能是有用的，并且可能因此是优选的。

在一种实施方式中，分子探针的集合包含可被检测的探针，用于检测基因的组中每种的蛋白质(即，编码的基因产物)，由此测定组中每种基因的表达。在此类实施方式中，优选地，每种探针对于检测组中一种基因的被编码蛋白质来说是特异性的。在一些实施方式中，实验上可接受一定程度的交叉反应性。当探针自身就是生物分子(例如抗体)时，这特别有可能成为现实。某些抗体的交叉反应性是本领域内有认知的。本领域技术人员将知道，抗体与紧密相关的抗原(例如一些蛋白质)的交叉反应性可能制造问题，尤其是当交叉反应性严重的时候。在一种实施方式中，通过使用单特异性抗体，例如经高度纯化的抗体，或针对可免疫区分的特异性表位的单克隆抗体，来使得交叉反应性最小化或消失。在另一实施方式中，可基于结合性质，例如结合常数，或对结合强度的量度等来区分交叉反应性和想要的活性。在另一实施方式中，使用适当并且谨慎的对照，或其它手段，例如对结果的计算机分析，将允许针对某些类型的交叉反应性来校正实验数据。

虽然对于分析物的组有很多选择(如本文所讨论的)，但是选择分析物的理性途径是优选的。优选在考虑到意欲用途的目标的情况下，来设计或选择分子探针的集合。为达成此目的，通过理性途径来预设分析物的组，所述途径依赖于已知的、预测的或本文披露的某些分析物的存在或活性与动物健康的若干方面之间的关系。动物中炎症的状况(state)以及某些激素和其它生物化学信号或信号引导物(conductor)的相对存在等因素有助于提供与动物健康状态相连的详细信息。

因此，在一种实施方式中，分析物的组是包含一种或多种细胞因子的蛋白质的组。优选地，细胞因子包括干扰素α、干扰素γ、白细胞介素12 p40、白细胞介素18、干扰素β、干扰素ω、淋巴毒素βR、淋巴毒素、白细胞介素6、白细胞介素8、肿瘤坏死因子α、白细胞介素4、白细胞介素10、转化生长因子β-1、肿瘤坏死因子β、白细胞介素3、白细胞介素5、白细胞介素7、白细胞介素13、白细胞介素15、白细胞介素1α、白细胞介素1β、白细胞介素2、白细胞介素11、白细胞介素12p70、白细胞介素16、白细胞介素17、受活化调节的正常T表达并且可能分泌的(RANTES)(Regulated upon Activation，Normal T Expressed presumable Secreted)、白细胞介素21、白细胞介素9或转化生长因子β受体III中的一种或多种。

在若干实施方式中，蛋白质的组包含一种或多种趋化因子，例如B-淋巴细胞化学诱导物、源于上皮细胞的嗜中性粒细胞活化肽、嗜酸细胞活化趋化因子(eotaxin)、嗜酸细胞活化趋化因子-2、单核细胞趋化蛋白2、单核细胞趋化蛋白3、巨噬细胞移动抑制因子、巨噬细胞炎性蛋白1α、骨髓祖代抑制因子1(myeloid progenitor inhibitory factor 1)、巨噬细胞刺激蛋白、粒细胞趋化蛋白2、干扰素γ诱导蛋白10、白血病抑制因子、巨噬细胞集落刺激因子、单核细胞趋化蛋白1、源于巨噬细胞的趋化因子、巨噬细胞炎性蛋白1β、巨噬细胞炎性蛋白1δ、嗜中性粒细胞活化肽2、肺和活化调控的趋化因子、源于基质细胞的因子α、胸腺和活化调控的趋化因子、betacellulin、6 Ckine、酸性成纤维细胞生长因子(fibroblast growth factoracidic)、CXXXC趋化分子、hemofiltrate CC趋化因子1、单核细胞趋化蛋白4、巨噬细胞炎性蛋白3β、血小板因子4、NF-κ-B的受体激活子、皮肤T细胞吸引趋化因子、嗜酸细胞活化趋化因子-3、成纤维细胞生长因子-4、促滤泡素抑制素、生长相关的癌基因γ、干扰素γ诱导型T细胞α化学诱导物、白血病抑制因子受体α、中期因子、巨噬细胞炎性蛋白3α、pleiptrophin、源于基质细胞的因子β、胸腺表达的趋化因子、转化生长因子α、TNF相关的激活蛋白诱导的细胞因子、血管黏附蛋白-1、CXCL9或CCL1。当然，所述的组除了可包含本文所例示的细胞因子之外，还可包含前述趋化因子。

在若干实施方式中，蛋白质的组包含一种或多种激素。优选的是激素促乳素、胰岛素样生长因子结合蛋白2、瘦蛋白、胰岛素、抵抗素、脂连蛋白、胰高血糖素、胰高血糖素相关肽1或PYY。本领域技术人员将知道可以选择其它激素。优选地，激素的活性或存在受下文讨论的选用的营养方案影响，或者激素的活性或存在与动物健康状态之间有关系。在本文中，以及对于本文所列举的每种类别而言(在对蛋白质的组的理性预设内)，将某些激素包括进去并不排除包括进其它分子，其还可能包括进其它分子，例如细胞因子、趋化因子、脂肪因子和本文所述的其它一些。

在另一实施方式中，蛋白质的组包括一种或多种脂肪因子，其包括但不限于单核细胞趋化蛋白1、瘦蛋白、抵抗素、脂连蛋白、IL-6、TNF-α或凝血酶可活化的纤维蛋白溶解抑制剂。

在某些实施方式中，蛋白质分析物的预设组还包含神经元生长因子、并非神经元生长因子的生长因子或可溶受体或其组合中的一种或多种。

用于本文的神经元生长因子包括但不限于睫状神经营养因子、胶质细胞系衍生神经营养因子、脑衍生神经营养因子、神经营养蛋白3、神经营养蛋白4或β-神经生长因子。

生长因子优选选自血管生成素、表皮生长因子、成纤维细胞生长因子-7、成纤维细胞生长因子-9、粒细胞巨噬细胞集落刺激因子、黑素瘤生长刺激活性(melanoma growth-stimulating activity)、制瘤素M、胎盘生长因子、转化生长因子β-3、双调蛋白成纤维细胞生长因子-6、粒细胞集落形成刺激因子、干细胞因子、血管内皮生长因子、心肌营养蛋白-1、生长相关的癌基因β、肝素结合的EGF样生长因子、肝细胞生长因子、疱疹病毒进入介体、基质金属蛋白酶10、基质金属蛋白酶7、基质金属蛋白酶9、金属蛋白酶1的组织抑制剂、血管内皮生长因子D、血管内皮生长因子受体2、碱性成纤维细胞生长因子(fibroblast growth factor basic)、胰岛素样生长因子I、胰岛素样生长因子II、胰岛素样生长因子结合蛋白1、胰岛素样生长因子结合蛋白3、胰岛素样生长因子结合蛋白4、胰岛素样生长因子结合蛋白6、基质金属蛋白酶1、基质金属蛋白酶2或金属蛋白酶2的组织抑制剂。

可溶受体sCD23、Fas(CD95)、白细胞介素1受体拮抗物、白细胞介素2可溶受体α、TNF相关凋亡诱导配体、尿激酶型纤溶酶激活物受体、fms样酪氨酸激酶-3配体、可溶糖蛋白130、白细胞介素1可溶受体I、白细胞介素6可溶受体、肿瘤坏死因子受体I、肿瘤坏死因子受体II、血管上皮钙黏着蛋白、CCL28、细胞毒性T-淋巴细胞相关分子4、死亡受体6、Fas配体、细胞间黏附分子3、白细胞介素2受体γ、白细胞介素5受体α、L-选择蛋白、血小板内皮细胞黏附分子-1、干细胞因子受体、TNF相关凋亡诱导配体受体4、活化的白细胞细胞黏附(Activated Leukocyte CellAdhesion)、CD27、CD30、CD40、睫状神经营养因子受体、细胞间黏附分子1、胰岛素样生长因子I受体、白细胞介素1可溶受体II、白细胞介素2受体β、白细胞介素10受体β、巨噬细胞集落刺激因子受体、血小板衍生生长因子受体α或TNF相关凋亡诱导配体受体4等，都可用于本发明。

在另一优选的实施方式中，分析物的组是下述基因的组，所述基因的组包含编码一种或多种细胞因子的一种或多种基因。优选地，被编码的细胞因子包括本文列举的细胞因子中的一种或多种：干扰素α、干扰素γ、白细胞介素12p40、白细胞介素18、干扰素β、干扰素ω、淋巴毒素βR、淋巴毒素、白细胞介素6、白细胞介素8、肿瘤坏死因子α、白细胞介素4、白细胞介素10、转化生长因子β-1、肿瘤坏死因子β、白细胞介素3、白细胞介素5、白细胞介素7、白细胞介素13、白细胞介素15、白细胞介素1α、白细胞介素1β、白细胞介素2、白细胞介素11、白细胞介素12p70、白细胞介素16、白细胞介素17、受活化调节的正常T表达并且可能分泌的(RANTES)、白细胞介素21、白细胞介素9或转化生长因子β受体III。

在某些实施方式中，基因的组包含编码一种或多种下述趋化因子的一种或多种基因：B-淋巴细胞化学诱导物、源于上皮细胞的嗜中性粒细胞活化肽、嗜酸细胞活化趋化因子(eotaxin)、嗜酸细胞活化趋化因子-2、单核细胞趋化蛋白2、单核细胞趋化蛋白3、巨噬细胞移动抑制因子、巨噬细胞炎性蛋白1α、骨髓祖代抑制因子1、巨噬细胞刺激蛋白、粒细胞趋化蛋白2、干扰素γ诱导蛋白10、白血病抑制因子、巨噬细胞集落刺激因子、单核细胞趋化蛋白1、源于巨噬细胞的趋化因子、巨噬细胞炎性蛋白1β、巨噬细胞炎性蛋白1δ、嗜中性粒细胞活化肽2、肺和活化调控的趋化因子、源于基质细胞的因子α、胸腺和活化调控的趋化因子、betacellulin、6 Ckine、酸性成纤维细胞生长因子(fibroblast growth factor acidic)、CXXXC趋化分子、hemofiltrate CC趋化因子1、单核细胞趋化蛋白4、巨噬细胞炎性蛋白3β、血小板因子4、NF-κ-B的受体激活子、皮肤T细胞吸引趋化因子、嗜酸细胞活化趋化因子-3、成纤维细胞生长因子-4、促滤泡素抑制素、生长相关的癌基因γ、干扰素γ诱导型T细胞α化学诱导物、白血病抑制因子受体α、中期因子、巨噬细胞炎性蛋白3α、pleiptrophin、源于基质细胞的因子β、胸腺表达的趋化因子、转化生长因子α、TNF相关的激活蛋白诱导的细胞因子、血管黏附蛋白-1、CXCL9或CCL1。当然，所述的组除了针对本文例示的细胞因子的那些基因外，还可包含针对上述趋化因子的一种或多种基因。

在若干实施方式中，基因的组包含编码多种激素的一种或多种基因。优选的是编码激素促乳素、胰岛素样生长因子结合蛋白2、瘦蛋白、胰岛素、抵抗素、脂连蛋白、胰高血糖素、胰高血糖素相关肽1或PYY的基因。优选地，所编码的激素的活性或表达与动物的健康状态之间有关系。将编码激素的一种或多种基因包括进分析物的组并不排除包括进编码其它分子的一种或多种基因，所述其它分子例如细胞因子、趋化因子、脂肪因子和本文所述的其它一些。

在另一实施方式中，基因的组包含编码脂肪因子——单核细胞趋化蛋白1、瘦蛋白、抵抗素、脂连蛋白、IL-6、TNF-α或凝血酶可活化的纤维蛋白溶解抑制剂中一种或多种的一种或多种基因。针对其它脂肪因子的基因也可用于本发明。

在某些实施方式中，预设的基因的组还包含编码神经元生长因子、并非神经元生长因子的生长因子或可溶受体的一种或多种基因。优选的神经元生长因子、并非神经元生长因子的生长因子和可溶受体包括但不限于本文针对蛋白质的组列举的那些。其它此类分子也可被考虑用于本发明。

在若干种实施方式中，分析物的组包含一种或多种初级或次级代谢产物。因此，在一种实施方式中，分析物的组包括一种或多种类花生酸，这是一类经氧合的疏水分子，它们主要作为生物功能的自分泌和旁分泌介体发挥作用。例如，白三烯已知能用作为炎性应答中的物质。一些对于移动嗜中性粒细胞具有趋化作用，因此有助于将必要的细胞带给牵涉的组织。白三烯还是强大的血管收缩剂，特别是小静脉的。它们在支气管收缩中发挥作用，并且还可增加血管透过性。适用于本发明的白三烯包括但不限于LTA4、LTB4、LTC4、LTD4、LTE4和LTF4。适合用作为用于本发明的分析物的其它类花生酸包括血栓烷和前列腺素H衍生物，前列腺素类。还有其它一些类花生酸化合物，例如缓解因子(resolvins)、异呋喃(isofurans)、异前列烷(isoprostanes)、脂氧素、环氧二十碳三烯酸(EET)、神经保护素D(neuroprotectin D)和20碳内源性大麻素(endocannabinoid)也适合用于本发明作为分析物。此外，类花生酸受体，例如，白三烯受体CysLT1(1型半胱氨酰白三烯受体)、CysLT2(2型半胱氨酰白三烯受体)和BLT1(白三烯B4受体)，前列腺素类受体PGD2：DP-(PGD2)，PGE2：EP1-(PGE2)、EP2-(PGE2)、EP3-(PGE2)、EP4-(PGE2)，PGF2α：FP-(PGF2α)，PGI2(前列环素)：IP-(PGI2)和TXA2(血栓烷)：TP-(TXA2)也可在本发明的任何方面或实施方式中用作为分析物。

在优选的实施方式中，分子探针的集合包含针对IL-2、IL-4、IL-6、IL-7、IL-8、IL-10、IL-18、IFNγ、IP-10、TNF-α、MCP-1、GLP-1、胰高血糖素、胰岛素、脂连蛋白和抵抗素中每种的特异性探针。在某些实施方式中，探针的集合还包含针对IL-15、KC和瘦蛋白中一种或多种的特异性探针。

在另一实施方式中，分子探针的集合包含使用适用于生产用于犬科动物检验的犬科动物特异性分子的探针：集组；细胞因子/趋化因子；分析物：GMCSF、IL-2、IL-4、IL-6、IL-7、IL-8、IL-10、IL-18、IFNγ、IP-10、TNF-α、MCP-1、IL-15、KC。集组；内分泌；分析物：GLP-1、胰高血糖素、胰岛素、瘦蛋白。集组；脂肪因子；分析物：脂连蛋白、抵抗素。在另一实施方式中，分子探针的集合包含使用适用于生产猫科动物检验的猫科动物分子的探针：集组；细胞因子/趋化因子；分析物：GMCSF、IL-2、IL-4、IL-6、IL-1β、IL-8、IL-10、IL-18、IFNγ、Fas、TNF-α、MCP-1、Flt-3配体。集组；内分泌；分析物：GLP-1、胰高血糖素、胰岛素、瘦蛋白。集组；脂肪因子；分析物：脂连蛋白、抵抗素。

在一种实施方式中，分子探针能检测预设的分析物组中每种分析物的存在、活性、表达等。优选地，分析物的组是本文所示的蛋白质和/或基因的组。更优选地，基因来自人、猿、犬科动物或猫科动物。在一些优选的实施方式中，探针的集合对于检测犬科动物或猫科动物蛋白质的组的存在或活性来说是特异性的。

在一种实施方式中，分子探针的集合是特异于测量或检测来自犬科动物的蛋白质分析物(即，一组基因的表达产物)的多种抗体。优选地，探针提供了对每种蛋白质的表达量(例如，样品中存在的每种特定蛋白质的量)的定量测定。在某些实施方式中，较之相对量而言，结果更为定性地提供了信息，例如，显示了样品间的不同或改变，或者来自个体的样品中随时间的改变。在其它一些实施方式中，针对对应于所选蛋白质的基因的组获得类似测量。

在若干实施方式中，对于所描述的分子探针的集合而言，将每种探针与基质或支持物相连结(attach)，其中，每种此类连结的探针保持下述能力：提供对与基质接触的样品中分析物组中每种的存在或活性的量的定量测定。本领域技术人员将知道，本文所述的类型的探针可以以多种方式被连结、固定或支持，以允许开发更便捷的检验。在此类实施方式中，可将探针的整个集合连结至单个基质，并且例如可通过对蛋白质(或表达的基因产物)的组加以空间分离来区别它们，例如通过电泳，或者通过对分离的或可个别检测的信号(对应于每种探针)的检测来区别它们。在一些实施方式中，探针被空间布置为阵列或微阵列。本发明中也可使用阵列(例如“芯片”)等。备选地，每种探针可与分别的基质相连结，使用这样的探针也是本领域已知的。可与探针连结的基质的例子包括多种膜、聚合物、支持物、珠粒、芯片、阵列、检验孔等。ELISA和FACS等检验方法可用于检测与基质相连结的此类探针。理想地，此类连结可协助对下述多路检验的设计，所述检验中，可在单个反应容器中检验预设的基因的组中的多种基因。将分子探针与多种类型的聚合物或玻璃珠粒相连结可提供用于开发多路检验的简单形式，所述多路检验使用，例如，差异标记法或FACS作为区分一种探针和另一种的方法。因此，在一种实施方式中，提供这样的分子探针集合，其中，每种探针与单独(separate)的基质相连结，集合中每种探针可被互相独立地检测。探针还可共价或通过其它手段与多种分子组分(例如信号和可例如扩增或淬灭信号或协助检验开发的其它分子)相连结，这样是有用的。备选地，此类信号增强剂或淬灭剂以及其它分子可与并非物理或化学连结至其的探针组合使用。

本文中，有些时候，通过它们的简称和其它速记命名参考来代指多种细胞因子、趋化因子、激素和脂肪因子以及神经元生长因子、生长因子和可溶受体。下面给出了此类缩写和其它参考名的列表，它们被示为“参考名，系统名(如果有的话，括号内)和名称”。

细胞因子：IFN-α，干扰素α；IFN-γ，干扰素γ；IL-12(p40)、白细胞介素12p40；IL-18，白细胞介素18；IFN-β、干扰素β；IFN-ω、干扰素ω；淋巴毒素βR，(TNFRSF3)，淋巴毒素βR；淋巴细胞趋化因子(Lptn)，(XCL1)，淋巴毒素；IL-6，白细胞介素6；IL-8，(CXCL8)，白细胞介素8；TNF-α，肿瘤坏死因子α；IL-4，白细胞介素4；IL-10，白细胞介素10；TGF-β1，转化生长因子β-1；TNF-β，肿瘤坏死因子β；IL-3，白细胞介素3；IL-5，白细胞介素5；IL-7，白细胞介素7；IL-13，白细胞介素13；IL-15，白细胞介素15；IL-1α，白细胞介素1α；IL-1β，白细胞介素1β；IL-2，白细胞介素2；IL-11，白细胞介素11；IL-12(p70)，白细胞介素12p70；IL-16，白细胞介素16；IL-17，白细胞介素17；RANTES，(CCL5)，受活化调节的：正常T表达并且可能分泌的；IL-21，白细胞介素21；IL-9，白细胞介素9和TGF-βRIII，转化生长因子β受体III。

趋化因子。BLC，(BCA-1)，B-淋巴细胞化学诱导物；ENA-78，(CXCL5)，源于上皮细胞的嗜中性粒细胞活化肽；Eot，(CCL11)，嗜酸细胞活化趋化因子；Eot-2，(CCL24)，嗜酸细胞活化趋化因子-2；MCP-2，(CCL8)，单核细胞趋化蛋白2；MCP-3，(CCL7)，单核细胞趋化蛋白3；MIF，巨噬细胞移动抑制因子；MIP-1α，(CCL3)，巨噬细胞炎性蛋白1α；MPIF，骨髓祖代抑制因子1；MSP，巨噬细胞刺激蛋白；GCP-2，(CXCL6)，粒细胞趋化蛋白2；I-309，(CCL1)，无；IP-10，(CXCL10)，干扰素γ诱导蛋白10；LIF，白血病抑制因子；M-CSF，巨噬细胞集落刺激因子；MCP-1，(CCL2)，单核细胞趋化蛋白1；MDC，(CCL22)，源于巨噬细胞的趋化因子；MIG，(CXCL9)，无；MIP-1β，(CCL4)，巨噬细胞炎性蛋白1β；MIP-1δ，(CCL15)，巨噬细胞炎性蛋白1δ；NAP-2，嗜中性粒细胞活化肽2；PARC，肺和活化调控的趋化因子；SDF-1α，源于基质细胞的因子α；TARC，(CCL17)，胸腺和活化调控的趋化因子；BTC，Betacellulin；6Ckine，(CCL21)，6CKine；FGF酸，(FGF-1)，酸性成纤维细胞生长因子；CXXXC趋化分子，(CX3CL1)，CXXXC趋化分子；HCC-1，(CCL14)，Hemofiltrate CC趋化因子1；MCP-4，(CCL13)，单核细胞趋化蛋白4；MIP-3β，(CCL19)，巨噬细胞炎性蛋白3β；PF4，(CXCL4)，血小板因子4；RANK，(TNFRSF11A)，NF-κ-B的受体激活子；CTACK，(CCL27)，皮肤T细胞吸引趋化因子；Eot-3，(CCL26)，嗜酸细胞活化趋化因子-3；FGF-4，成纤维细胞生长因子-4；促滤泡素抑制素，促滤泡素抑制素；GRO-γ，(CXCL3)，生长相关的癌基因γ；I-TAC，(CXCL11)，干扰素γ诱导型T细胞α化学诱导物；sLIF-Rα(gp190)，白血病抑制因子受体α；中期因子，中期因子；MIP-3α，(CCL20)，巨噬细胞炎性蛋白3α；Pleiptrophin，(PTN)，Pleiptrophin；SDF-1β，(CXCL12)，源于基质细胞的因子β；TECK，(CCL25)，胸腺表达的趋化因子；TGF-α，转化生长因子α；TRANCE(RANK L)，(TNFSF11)，TNF相关的激活蛋白诱导的细胞因子；sVAP-1和血管黏附蛋白-1。

激素。促乳素，促乳素；IGFBP-2，胰岛素样生长因子结合蛋白2；瘦蛋白/OB，瘦蛋白；胰岛素，胰岛素；抵抗素，抵抗素；脂连蛋白，脂连蛋白；胰高血糖素，胰高血糖素；GLP-1，胰高血糖素样肽1和PYY，肽YY。

脂肪因子。MCP-1，单核细胞趋化蛋白1；瘦蛋白，瘦蛋白；抵抗素，抵抗素；脂连蛋白，脂连蛋白；IL-6，IL-6；TNF-α，TNF-α和tPAI-1，凝血酶可活化的纤维蛋白溶解抑制剂。

神经元生长因子。CNTF，睫状神经营养因子；GDNF，胶质细胞系衍生神经营养因子；BDNF，脑衍生神经营养因子；NT-3，神经营养蛋白3；NT-4，神经营养蛋白4和β-NGF，β-神经生长因子。

生长因子。ANG，血管生成素；EGF，表皮生长因子；FGF-7，成纤维细胞生长因子-7；FGF-9，成纤维细胞生长因子-9；GM-CSF，粒细胞巨噬细胞集落刺激因子；GRO-α(MGSA)，(CXCL1)，黑素瘤生长刺激活性；OSM，制瘤素M；PlGF，胎盘生长因子；TGF-β3、转化生长因子β-3；AR，双调蛋白；FGF-6，成纤维细胞生长因子-6；G-CSF，粒细胞集落形成刺激因子；SCF，干细胞因子；VEGF，血管内皮生长因子；CT-1，心肌营养蛋白-1；GRO-β，(CXCL2)，生长相关的癌基因β；HB-EGF，肝素结合的EGF样生长因子；HGF，肝细胞生长因子；HVEM，(TNFRSF14)，疱疹病毒进入介体；MMP-10(总)，基质金属蛋白酶10；MMP-7(总)，基质金属蛋白酶7；MMP-9(总)，基质金属蛋白酶9；TIMP-1，金属蛋白酶1的组织抑制剂；VEGF-D(FlGF)，血管内皮生长因子D；VEGF-R2，(Flk-1/KDR)，血管内皮生长因子受体2；碱性FGF，(FGF-2)，碱性成纤维细胞生长因子；IGF-I，胰岛素样生长因子I；IGF-II，胰岛素样生长因子II；IGFBP-1，胰岛素样生长因子结合蛋白1；IGFBP-3，胰岛素样生长因子结合蛋白3；IGFBP-4，胰岛素样生长因子结合蛋白4；IGFBP-6，胰岛素样生长因子结合蛋白6；MMP-1(总)，基质金属蛋白酶1；MMP-2(总)基质金属蛋白酶2和TIMP-2，金属蛋白酶2的组织抑制剂。

可溶受体。sCD23，无；Fas，Fas(CD95)；IL-1ra，白细胞介素1受体拮抗物；IL-2sRα，白细胞介素2可溶受体α；TRAIL，(TNFSF10)，TNF相关凋亡诱导配体；uPAR，尿激酶型纤溶酶激活物受体；Flt-3L，fms样酪氨酸激酶-3配体；sgp130，可溶糖蛋白130；IL-1sRI，白细胞介素1可溶受体I；IL-6sR，白细胞介素6可溶受体；TNF RI，肿瘤坏死因子受体I；TNF-RII，肿瘤坏死因子受体II；sVE-钙黏着蛋白，血管上皮钙黏着蛋白；CCL28，CCL28；CTLA-4，细胞毒性T-淋巴细胞相关分子4；DR6，(TNFRSF21)，死亡受体6；Fas配体，(TNFSF6)，Fas配体；ICAM-3，(CD50)，细胞间黏附分子3；IL-2Rγ，白细胞介素2受体γ；IL-5Rα，(CD125)，白细胞介素5受体α；L-选择蛋白，(CD62L)，L-选择蛋白；PECAM-1，(CD31)，血小板内皮细胞黏附分子-1；SCF R，干细胞因子受体；TRAIL R4，(TNFRSF10D)，TNF相关凋亡诱导配体受体4；ALCAM，(CD166)，活化的白细胞细胞黏附；CD27，(TNFRSF7)，CD27；CD30，(TNFSF8)，CD30；CD40，CD40；CNTF Rα，睫状神经营养因子受体；ICAM-1，(CD54)，细胞间黏附分子1；IGF-IR，胰岛素样生长因子I受体；IL-1sRII，白细胞介素1可溶受体II；IL-2Rβ，白细胞介素2受体β；IL-10Rβ，白细胞介素10受体β；M-CSF R，巨噬细胞集落刺激因子受体；PDGF Rα，血小板衍生生长因子受体α和TRAILR4，(TNFRSF10D)，TNF相关凋亡诱导配体受体4。

在另一方面，本发明提供了评测动物健康状态的方法，所述方法通过测定一组分析物的相对活性或表达来进行。通常，所述方法包括下述步骤：

a)从动物获得生物样品，其中所述样品至少可能含有感兴趣的分析物的预设组。该组分析物包含至少一种细胞因子、趋化因子、激素和脂肪因子。

b)将样品与用于测定分析物的预设组中每种的活性或存在的分子探针的集合相接触，其中，对于组中每种分析物而言，分子探针的集合都包含至少一种适于检测该分析物的存在或可被测量的活性的探针。当样品中存在对应于该探针的分析物时，集合中的每种探针都能产生可被独立检测的信号。

c)将样品与集合接触之后，检测产生的可被独立检测的信号。

d)将可被检测的信号与样品中分析物的预设组中每种的至少相对存在或活性关联起来；

e)将样品中分析物的预设组中每种的相对存在或活性与已知的或测定的健康状态的参数关联起来；以及

f)根据步骤e)中进行的关联来确定动物的健康状态。

在另一实施方式中，分析物的组包含基因的组，所述方法包括下述步骤：

a)从动物获得生物样品，其中所述样品至少可能含有感兴趣的基因的预设组或这些基因的表达产物。该组基因包含各自编码细胞因子、趋化因子、激素和脂肪因子的至少一种基因。

b)将样品与用于测定基因的预设组中每种的活性或表达的分子探针的集合相接触，其中，对于组中每种基因而言，分子探针的集合都包含至少一种适于检测该基因活性或表达的探针。当样品中存在对应于该探针的基因或基因表达产物时，集合中的每种探针都能产生可被独立检测的信号。

d)将可被检测的信号与样品中基因的预设组中每种的至少相对活性或表达关联起来；

e)将样品中基因的预设组中每种的相对活性或表达与已知的或测定的健康状态的参数关联起来；以及

f)根据步骤e)中进行的关联来确定动物的健康状态。

所述方法具有很多实际和潜在的用途。表1显示了一些此类用途的部分列表。

表1

待评测的生理状况	本领域诊断的目前状态	待用提供的方法来测量的参数
待评测的生理状况	本领域诊断的目前状态	待用提供的方法来测量的参数	胰岛素抗性	葡糖耐量测试	脂连蛋白的减少；胰岛素、IL-6和TNF-α的增加；瘦蛋白和抵抗素的变化
对II型糖尿病的诱因	葡糖耐量测试以建立胰岛素抗性	脂连蛋白的减少；胰岛素、IL-6和TNF-α的增加(例如，以证明低级炎症)；瘦蛋白和抵抗素的变化	胰岛素抗性	葡糖耐量测试	脂连蛋白的减少；胰岛素、IL-6和TNF-α的增加；瘦蛋白和抵抗素的变化
对II型糖尿病的诱因	葡糖耐量测试以建立胰岛素抗性	脂连蛋白的减少；胰岛素、IL-6和TNF-α的增加(例如，以证明低级炎症)；瘦蛋白和抵抗素的变化	膳食干涉，例如，卡路里限制	无	对细胞因子/趋化因子/内分泌分子改变的分析可用于从分子角度解释基础的生理学，以及，例如，开发针对体重减轻的改进策略
炎症		建立促炎细胞因子和抗炎细胞因子的改	膳食干涉，例如，卡路里限制	无	对细胞因子/趋化因子/内分泌分子改变的分析可用于从分子角度解释基础的生理学，以及，例如，开发针对体重减轻的改进策略

	进状况(例如，上调)，系统中改善的稳态导致对炎症或免疫挑战的更好操纵
	进状况(例如，上调)，系统中改善的稳态导致对炎症或免疫挑战的更好操纵	变态反应	开发基于T辅助1细胞因子和T辅助2细胞因子的替代标记，以预测变态反应的发展和/或膳食干涉的效果。
衰老	开发针对衰老的替代标记，以对延迟或防止衰老或促进长寿的营养方案进行评估	变态反应	开发基于T辅助1细胞因子和T辅助2细胞因子的替代标记，以预测变态反应的发展和/或膳食干涉的效果。

在某些实施方式中，分析物的组除了包含本文讨论的细胞因子、趋化因子、激素和脂肪因子之外，还包含一种或多种的神经元生长因子、并非神经元生长因子的生长因子或可溶受体。当分析物是基因时，该组包含根据前述限制的对应的基因。优选地，可被检测的探针特异于检测每种蛋白质(或基因的组中每种的被编码的基因产物)的存在或活性或者每种基因的活性或表达。

可被检测的探针包含抗体、抗体片段、配体、受体或结合蛋白、核酸(例如DNA或RNA)。优选地，当所述的组包含蛋白质时，探针的集合包含针对每种蛋白质的抗体。

在本文针对探针的集合讨论的方法的一种实施方式中，蛋白质或基因的组包含一种或多种是细胞因子干扰素α、干扰素γ、白细胞介素12 p40、白细胞介素18、干扰素β、干扰素ω、淋巴毒素βR、淋巴毒素、白细胞介素6、白细胞介素8、肿瘤坏死因子α、白细胞介素4、白细胞介素10、转化生长因子β-1、肿瘤坏死因子β、白细胞介素3、白细胞介素5、白细胞介素7、白细胞介素13、白细胞介素15、白细胞介素1α、白细胞介素1β、白细胞介素2、白细胞介素11、白细胞介素12p70、白细胞介素16、白细胞介素17、受活化调节的正常T表达并且可能分泌的(RANTES)、白细胞介素21、白细胞介素9或转化生长因子β受体III的蛋白质或编码它们的一种或多种基因。

在若干实施方式中，除了前述之外或备选地，分析物的预设组包含是趋化因子B-淋巴细胞化学诱导物、源于上皮细胞的嗜中性粒细胞活化肽、嗜酸细胞活化趋化因子(eotaxin)、嗜酸细胞活化趋化因子-2、单核细胞趋化蛋白2、单核细胞趋化蛋白3、巨噬细胞移动抑制因子、巨噬细胞炎性蛋白1α、骨髓祖代抑制因子1、巨噬细胞刺激蛋白、粒细胞趋化蛋白2、干扰素γ诱导蛋白10、白血病抑制因子、巨噬细胞集落刺激因子、单核细胞趋化蛋白1、源于巨噬细胞的趋化因子、巨噬细胞炎性蛋白1β、巨噬细胞炎性蛋白1δ、嗜中性粒细胞活化肽2、肺和活化调控的趋化因子、源于基质细胞的因子α、胸腺和活化调控的趋化因子、betacellulin、6 Ckine、酸性成纤维细胞生长因子(fibroblast growth factor acidic)、CXXXC趋化分子、hemofiltrate CC趋化因子1、单核细胞趋化蛋白4、巨噬细胞炎性蛋白3β、血小板因子4、NF-κ-B的受体激活子、皮肤T细胞吸引趋化因子、嗜酸细胞活化趋化因子-3、成纤维细胞生长因子-4、促滤泡素抑制素、生长相关的癌基因γ、干扰素γ诱导型T细胞α化学诱导物、白血病抑制因子受体α、中期因子、巨噬细胞炎性蛋白3α、pleiptrophin、源于基质细胞的因子β、胸腺表达的趋化因子、转化生长因子α、TNF相关的激活蛋白诱导的细胞因子、血管黏附蛋白-1、CXCL9或CCL1的一种或多种蛋白质或编码它们的一种或多种基因。

在还其它一些实施方式中，基因或蛋白质的预设组包括是激素促乳素、胰岛素样生长因子结合蛋白2、瘦蛋白、胰岛素、抵抗素、脂连蛋白、胰高血糖素、胰高血糖素相关肽1或PYY的一种或多种蛋白质或编码它们的一种或多种基因。

在一种实施方式中，基因或蛋白质的预设组还包括是脂肪因子单核细胞趋化蛋白1、瘦蛋白、抵抗素、脂连蛋白、IL-6、TNF-α或凝血酶可活化的纤维蛋白溶解抑制剂的一种或多种蛋白质或编码它们的一种或多种基因。

在其它一些实施方式中，基因或蛋白质的预设组进一步还各种各样地包含编码下述蛋白质中一种或多种的一种或多种基因或一种或多种所述蛋白质本身：神经元生长因子睫状神经营养因子、胶质细胞系衍生神经营养因子、脑衍生神经营养因子、神经营养蛋白3、神经营养蛋白4或β-神经生长因子；生长因子血管生成素、表皮生长因子、成纤维细胞生长因子-7、成纤维细胞生长因子-9、粒细胞巨噬细胞集落刺激因子、黑素瘤生长刺激活性、制瘤素M、胎盘生长因子、转化生长因子β-3、双调蛋白成纤维细胞生长因子-6、粒细胞集落形成刺激因子、干细胞因子、血管内皮生长因子、心肌营养蛋白-1、生长相关的癌基因β、肝素结合的EGF样生长因子、肝细胞生长因子、疱疹病毒进入介体、基质金属蛋白酶10、基质金属蛋白酶7、基质金属蛋白酶9、金属蛋白酶1的组织抑制剂、血管内皮生长因子D、血管内皮生长因子受体2、碱性成纤维细胞生长因子、胰岛素样生长因子I、胰岛素样生长因子II、胰岛素样生长因子结合蛋白1、胰岛素样生长因子结合蛋白3、胰岛素样生长因子结合蛋白4、胰岛素样生长因子结合蛋白6、基质金属蛋白酶1、基质金属蛋白酶2或金属蛋白酶2的组织抑制剂；或可溶受体sCD23、Fas(CD95)、白细胞介素1受体拮抗物、白细胞介素2可溶受体α、TNF相关凋亡诱导配体、尿激酶型纤溶酶激活物受体、fms样酪氨酸激酶-3配体、可溶糖蛋白130、白细胞介素1可溶受体I、白细胞介素6可溶受体、肿瘤坏死因子受体I、肿瘤坏死因子受体II、血管上皮钙黏着蛋白、CCL28、细胞毒性T-淋巴细胞相关分子4、死亡受体6、Fas配体、细胞间黏附分子3、白细胞介素2受体γ、白细胞介素5受体α、L-选择蛋白、血小板内皮细胞黏附分子-1、干细胞因子受体、TNF相关凋亡诱导配体受体4、活化的白细胞细胞黏附(Activated Leukocyte CellAdhesion)、CD27、CD30、CD40、睫状神经营养因子受体、细胞间黏附分子1、胰岛素样生长因子I受体、白细胞介素1可溶受体II、白细胞介素2受体β、白细胞介素10受体β、巨噬细胞集落刺激因子受体、血小板衍生生长因子受体α或TNF相关凋亡诱导配体受体4。

在方法的一种优选的实施方式中，分析物的预设组包含编码IL-2、IL-4、IL-6、IL-7、IL-8、IL-10、IL-18、IFNγ、IP-10、TNF-α、MCP-1、GLP-1、胰高血糖素、胰岛素、脂连蛋白和抵抗素中每种的基因中的一种或多种。在另一实施方式中，分析物的组包含前述蛋白质本身。在多种实施方式中，动物是人、鼠科动物、猿、犬科动物或猫科动物。在某些实施方式中，分析物的预设组还包含编码IL-15、KC或瘦蛋白的一种或多种基因或者这些蛋白质本身。

在该方法的一种优选实施方式中，分析物来自犬科动物，探针是特异于所述蛋白质或编码它们的基因的表达产物的抗体。在一种实施方式中，分子探针的集合允许对蛋白质的量或每种基因的表达进行定量测定。

所述方法可用连结至基质的每种探针来实施，其中，每种这样连结的探针保持为：能提供在与基质相接触的样品中，对对应于该探针的基因表达量的定量测定。

在一些实施方式中，所述方法还包括下述步骤：将样品与分子探针集合和二抗的组相接触，所述二抗组包含一种或多种下述抗体，所述抗体能例如检测抗体的特定部分或类型的存在，检测组中每种基因的表达产物与集合中对应探针之间的特异性结合。针对此类检测使用二抗是开发基于抗体的检验(例如某些ELISA方法和若干种所谓的“夹心”技术)的技术人员所理解的。探针或二抗还可与信号产生或扩增系统(例如酶)相连。

在某些实施方式中，所述方法包括使用下述分子探针的集合，其中，每种探针与单独的基质(例如珠粒或聚合支持材料)相连结。

所述方法包括使用生物样品，其优选是下述样品，所述样品可能含有预设组中基因，或者可能含有其表达产物，容易且相对无痛获得，丰富或者其缺乏对动物无害，并且可重复产生。多种此类生物样品是技术人员已知的，例子包括多种组织和液体的样品。例子包括血液、血清、血浆、尿液、组织提取物、脑脊液(CFS)、滑液和细胞提取物。组织培养细胞、提取物、上清液和用过的(spent)培养基也可用于本发明。优选的样品是血液、血清和血浆。样品大小并不关键，样品可以是可用的、可实践的并且有分析意义的任何大小的样品。少于1ml的样品是优选的。通常，样品少于100μl，例如75或50μl。更少的样品也可用于本发明。足够少到允许在标准实验室装备中检验的样品当然是优选的，小型化的检验也如是。

在另一方面，本发明提供了用于改善动物健康的配制营养方案的方法。所述方法包括：

a)选择动物中感兴趣的分析物的预设组，其中，所述分析物的活性或其存在可与动物的健康状态以及动物的营养方案关联起来，所述的组包含细胞因子、趋化因子、激素和脂肪因子中每种的至少一种蛋白质或编码细胞因子、趋化因子、激素和脂肪因子中每种的至少一种基因；

b)从动物获得生物样品，其中所述样品可能含有分析物的预设组或其表达产物，所述样品可指示动物目前的营养方案；

c)通过将样品与用于测定分析物预设组或其表达产物中每种的存在或活性的分子探针集合相接触来测定基线量度，其中，针对组中的每种分析物，分子探针的集合包含至少一种适用于检测该分析物的活性或存在的探针，当对应于该探针的分析物或分析物的表达产物存在于样品中时，每种探针能产生可被独立检测的信号；

d)将样品与集合接触之后检测产生的可被独立检测的信号；

e)将可被检测的信号与分析物的预设组或其表达产物中每种在样品中的存在或相对活性关联起来；

f)将样品中基因的预设组中每种的表达或相对活性与已知的健康状态参数关联起来；

g)根据其来确定目前营养方案的情况下动物的健康状态；

h)配制一种或多种测试营养方案或补充物，用于在动物中进行测试，这通过较之动物目前的营养方案调节常量营养物的含量或来源、微量营养物的含量或来源、补充膳食组分或膳食的卡路里含量中的一种或多种来实现；

i)以能有效改变分析物的预设组中一种或多种的活性、存在或表达的时间和量，向动物提供一种或多种测试营养方案或补充物或其组合；

j)对于每种测试营养方案或补充物或其组合而言，用来自动物的新样品重复步骤b)至g)，以确定测试营养方案或补充物或其组合是否能改善动物的健康状态；以及

k)选择改善了动物健康状态的配制的营养方案或补充物或其组合。

本领域技术人员将知道，步骤j)提到了重复步骤b)至g)，但是这些步骤是用步骤j)后取自动物的新样品来重复的，即，在动物获得了新的营养方案之后。

与本文提供的其它方法和组合物一样，对预设的分析物的选择基本上是理性选出下述分析物的过程，所述分析物的存在、活性或表达可与健康状态和营养方案关联起来，并且将提供有用的结果。要避免选与健康状态零关联和与任何营养方案零关联的分析物，虽然此类分析物可作为对照或测试分析物等被包括进来。

本文所述的方法可用于用本文所述的任何动物来配制任何营养方案。在多种优选的实施方式中，在动物是肥胖的，具有糖尿病，具有易患糖尿病趋势的症状，具有不想要的炎症水平，具有不想要的胰岛素抗性水平，具有代谢综合征、早发性动脉粥样硬化、异常葡萄糖代谢或异常脂肪代谢的情况下，所述方法相当有用。很多此类状况是本领域已知的，它们松散或更严格地与营养方案(特别是长期营养方案)相关。在一种实施方式中，配制的营养方案、补充物或其组合能改善动物中的免疫功能，降低炎症、降低胰岛素抗性或其组合。

在多种实施方式中，配制的营养方案、补充物或其组合具有下述作用中的一种或多种：(1)在动物中降低炎症，以及一种或多种的增加抗炎细胞因子、降低促炎细胞因子或减少炎症的细胞因子介体；(2)在动物中降低胰岛素抗性以及一种或多种的增加脂连蛋白、减少抵抗素或减少瘦蛋白；或(3)降低血脂异常、炎症、高血压、改变的血管反应性或内脏肥胖中的一种或多种或改善纤维蛋白溶解。在一些特别的实施方式中，分析物的组包含本文针对本发明的其它方面所述的分析物中的任何和每种。

在优选的实施方式中，分析物的预设组包含编码IL-2、IL-4、IL-6、IL-7、IL-8、IL-10、IL-18、IFNγ、IP-10、TNF-α、MCP-1、GLP-1、胰高血糖素、胰岛素、脂连蛋白和抵抗素中每种的一种或多种基因或相应蛋白质。此外，编码IL-15、KC或瘦蛋白的一种或多种基因或者相应的蛋白质可被包括进来。

在某些实施方式中，动物是人、鼠科动物、猿、犬科动物或猫科动物。在优选的实施方式中，分析物是来自犬科动物的蛋白质，分子探针是允许对此类蛋白质的量进行定量测定的抗体。在一些实施方式中，每种探针与基质相连结，并且保留下述能力：当样品接触基质时，提供对对应于该探针的分析物的量的定量测定。

所述方法还包括下述另一步骤：将样品和分子探针的集合与二抗的组接触，所述二抗例如包含能增加特异性或通过扩增增加信号的一种或多种抗体的二抗。在一种实施方式中，每种探针都与单独的基质相连结。

如本文所述，样品可以是任何生物样品，例如组织或体液。例子包括血液、血清、血浆、尿、组织提取物、脑脊液(CFS)、滑液和细胞提取物。离体样品，例如经稳定或短暂培养的组织或细胞或上清液、用过的培养基、其溢泌物等也可用于本发明。包含血清或血浆或由它们构成的样品对于用于本方法来说是有用的。

在另一个方面，本发明提供了适于在单份样品中测定分析物预设组中每种的活性、存在或表达的试剂盒。试剂盒在单个包装中的分别的容器中或在虚拟包装中的分别的容器中(按照试剂盒组分的需要)包含多路检验，其包含本文定义的可被检测的分子探针的集合，以及下述中的一种或多种：(1)如何使用多路检验来测定分析物的预设组中每种的活性、存在或表达的指导，(2)如何使用多路检验来评测动物健康状态的指导，(3)使用多路检验来配制用于改善动物健康的营养方案的指导，以及(4)适于动物消耗的一种或多种成分。在某些实施方式中，试剂盒包含多路检验和食物组合物(例如用于宠物的营养完全食物)或营养补充物(例如维生素和矿物质)，它们可用于配制用于改善动物健康的营养方案。

当试剂盒包含虚拟包装时，所述试剂盒限于与一种或多种物理试剂盒组分组合在虚拟环境中的指导。试剂盒可包含额外的物品，例如，用于将可用于多路检验的试剂混合起来的设备与用于支持和/或操作多路检验的设备。

在另一个方面，本发明提供了传达指导或信息的手段，所述指导或信息涉及使用用于下述目的中一种或多种的多路检验，所述目的是(1)在单份样品中测定分析物预设组中每种的活性、存在或表达，(2)评测动物健康状态或(3)配制用于改善动物健康的营养方案。所述手段包括含有信息或指导的文件、数字存储介质、光存储介质、声音显示设备(audiopresentation)或直观显示设备(visual display)。在某些实施方式中，传达手段是含有此类信息或指导的显示网页、可见显示的摊亭(kiosk)、小册子、产品标签、包装说明书、广告、印刷品、公开通知、磁带、录像带、DVD、CD-ROM、计算机可读芯片、计算机可读卡、计算机可读盘、计算机存储器(computer memory)或其组合。有用的信息包括下述中的一种或多种：(1)用于操作与多路检验一起使用的生物样品的方法和技术，(2)如果对多路检验及其使用有问题的话，用于Indic duals的联系信息。

本发明并不限于本文中所述的特定方法、流程和试剂，因为它们均都可变化。此外，本文所用的术语仅是为了描述特定实施方式的目的，而并不意欲限制本发明的范围。除非上下文有明确的指示，在本文和所附权利要求中使用时，单数形式“一个/种”、“这个/种”(“a”、“an”和“the”)包括复数指代，例如，提到“一种细胞因子”包括多种此类细胞因子。类似地，“包含”及其各种词性形式将被理解为包括性的而非排除性的。

除非另有定义，本文所用的所有科技术语和任何首字母缩写词具有与本发明所属领域的普通技术人员通常所理解的那样相同的含义。虽然与本文所述的那些相似或等同的任何组合物、方法、产品或其它手段或材料可用于实践本发明，但是本文描述了优选的组合物、方法、产品或其它手段或材料。

实施例

将通过下述实施例来进一步阐述本发明，虽然应当理解，这些实施例仅是为了阐述的目的包括进来的，除非另有特别指明，其并不意欲限制本发明的范围。

实施例1

用包含鱼油和维生素E的改良膳食方案进行的小鼠研究。该实验的目的是鉴定受改良的膳食影响的分子途径，以及理解与寿命期增加相关的作用机制。实验设计：组I：从10-16个月喂饲改良膳食的小鼠[n＝19]；组II：从10-16个月喂饲对照膳食的小鼠[n＝19]；组III：从17-23个月喂饲改良膳食的小鼠[n＝7]；以及组IV：从17-23个月喂饲对照膳食的小鼠[n＝9]。实验：使用75μl血浆样品，采用多路方法来测量27种蛋白质(MIP-1α、GM-CSF、MCP-1、KC、RANTES、IFN-γ、IL-1β、IL-1α、G-CSF、IP-10、IL-2、IL-4、IL-5、IL-6、IL-7、IL-10、IL-12、TNF-α、IL-9、IL-13、IL-15、IL-17、胰岛素、瘦蛋白、tPAI-1、抵抗素和脂连蛋白)的水平。使用Luminex设备，采用对应于27种所选蛋白质的探针集组来进行多路测量。时间点：使用雄性C57B1/6小鼠。在10月或17月龄对小鼠启动膳食方案。用改良(“测试”)膳食或对照膳食对小鼠进行为期6个月的喂饲——从10-16月龄(“Y”，年轻小鼠，组I和II)或从17-23月龄(“O”，年长小鼠，组III和IV)。从经无痛致死的小鼠获得血液样品，对器官加以速冻，产生组织库。针对27种蛋白质分析物来分析生物样品。结果示于表2。

表2A-细胞因子

表2-续

表2-续

表2B：脂肪因子

表2C脂连蛋白

根据表2A、2B和2C，数据显示，改良的膳食方案降低了小鼠中炎症[p≤0.05]。促炎细胞因子IL-6[Y]和IL-12[O]减少；炎性介体IL-7[Y，O]、IL-15[O]和IL-17[O]减少；抗炎细胞因子IL-10[O]和IL-13[O]增加。“O”表示仅在年长小鼠中显著，“Y”表示仅在年轻小鼠中显著，而“OY”表示在年轻和年长小鼠中都显著。从表型上来看，较之对照组，测试组中较年长的小鼠仅具有极少的过敏性皮炎发病率，这表明衰老过程所典型的炎症过程的降低。组I和组III中促炎细胞因子IL-6和IL-12分别减少。细胞因子相关的炎性介体(IL-7、IL-15和IL-17)减少。组I和III中IL-7减少，而组III中IL-15和IL-17减少。组III中的抗炎细胞因子IL-10和IL-13增加，这与对炎症的上述观察相符。改良的营养方案逆转了胰岛素抗性[p≤0.05]。在组III的小鼠中，观察到脂连蛋白的增加。在组I的小鼠中，观察到抵抗素和瘦蛋白每种都降低。明显地，测试膳食降低了炎症，逆转了胰岛素抗性，而这两者都与老龄的典型特征相关。数据还显示，若干种生物标记可用于检验动物的健康状态。

实施例2

多路检验开发和优化

材料和方法：以三个步骤开发多路检验：[1]试剂获取/表征：获得特异于犬科动物分子的抗体用于犬科动物检验，开发夹心免疫测定，表征它们的性能，并将它们组合起来开发多路检验集组，如针对犬科动物检验所显示的那样；[2]方法开发：然后对各检验加以优化，以消除交叉反应性、增强敏感度和动态范围；以及[3]初步验证：然后用(a)来自健康狗的正常血清和血浆(b)来自用脂多糖[LPS]刺激过的狗PBMCs的培养上清液[C/S]来验证多路检验集组。犬科动物检验-[集组；细胞因子/趋化因子；分析物：GMCSF、IL-2、IL-4、IL-6、IL-7、IL-8、IL-10、IL-18、IFNγ、IP-10、TNF-α、MCP-1、IL-15、KC。集组；内分泌；分析物：GLP-1、胰高血糖素、胰岛素、瘦蛋白。集组；脂肪因子；分析物：脂连蛋白、抵抗素]。结果示于表3中。

结果和讨论：[1]试剂获取/分析：选用20种犬科动物分子(覆盖营养和治疗兴趣的不同关键领域)作为靶标。筛选出对这些分子特异的若干抗体对。它们包括犬科动物特异性抗体，并且，当犬科动物特异性抗体不可获得情况下，筛选鼠科动物、啮齿动物或人类分子产生的抗体。产生与犬科动物蛋白质最佳信号的抗体对被选来开发基于珠粒的夹心免疫测定[Luminex xMAP平台]。[2]方法开发：进一步针对交叉反应性、敏感性和动态范围对选自步骤[1]的检验加以优化，以获得最终的多路集组。优化之后，多路集组中的交叉反应性可被忽略。用“血清基质”中多种浓度的分析物去构建“标准曲线”。对针对IL-4&IL-18[犬科动物细胞因子集组]和瘦蛋白&胰岛素[内分泌激素集组]的标准曲线的分析表明，它们较之其余分析物具有略低的敏感性。针对IL-8的抗体看起来给出了比其它细胞因子更高的背景信号。但是，这些检验特征并不干扰对生理水平的测量，因为这些分析物中大多数的正常水平都在pg/ml的范围中。[3]验证：使用正常血清/血浆来对这些多路集组进行初步验证。表3A概括了细胞因子&趋化因子的数据[39只健康狗，德国牧羊犬、拉布拉多寻回犬、髯犬、西伯利亚爱斯基摩狗，2至6岁]。表3B概括了两份血清样品(含有防止GLP-1降解的抑制剂)中犬科动物内分泌激素的数据。表3C概括了从脂肪因子集组获得的数据[来自17只猎兔犬和杂种狗(mongrel)的血清样品]。

表3A：正常犬科动物血清&血浆中的细胞因子(pg/ml表示的浓度)

表3B：正常犬科动物血清样品中的激素

样品	瘦蛋白(ng/mL)	胰高血糖素(pg/mL)	GLP-1(pM)	胰岛素(ng/mL)
样品	瘦蛋白(ng/mL)	胰高血糖素(pg/mL)	GLP-1(pM)	胰岛素(ng/mL)	Morgan	10.12	148.37	80.94	1.30
Stoli	ND	94.96	ND	1.50	Morgan	10.12	148.37	80.94	1.30

表3C：正常犬科动物血清样品中的脂连蛋白(Acrp30)和抵抗素

N＝17	cAcrp30(ng/ml)	c抵抗素(ng/ml)
N＝17	cAcrp30(ng/ml)	c抵抗素(ng/ml)	最小	3.08	5.10
最大	32.37	253.05	最小	3.08	5.10
最大	32.37	253.05	中值	14.90	15.03

还进行了实验，以证实这些集组检测到了用LPS刺激之后PBMC分泌的细胞因子。代表性数据示于图2。IL-6、TNF-a、IL-8和IL-18的LPS剂量和时间依赖性分泌可被清楚观察到。

结论：已经成功开发了能在血清、血浆和组织培养上清液中测量20种不同犬科动物蛋白质的多路集组。集组包括针对多种蛋白质(以前并没有针对它们的检验)的检验。用正常血清/血浆样品对集组的初步验证表明，集组能测量血清/血浆中的这些分子。在来自用LPS处理的PBMC的培养上清液上进行的检验表明，集组中的检验能检测预计应答于LPS刺激以时间和剂量依赖性方式分泌的细胞因子，即IL-6、TNF-a、IL-8和IL-18。目前正用合适的营养和临床研究来进行进一步的验证实验。与合适的模式识别和通路分析技术组合，这些集组将有助于预测/评估生理应激因子和干涉的功能性结果。

应当理解，对本文所述的优选实施方式的多种改变和改良对于本领域技术人员来说将是明显的。可进行此类改变和改良，而不偏离本发明主题的宗旨和范围，也不会削弱其想达到的优点。因此，此类改变和改良意欲被所附权利要求覆盖。

本文引用或提到的所有专利、专利申请、出版物和其它参考文献都通过引用以法律允许的程度并入本文。对这些参考文献的讨论仅意欲用于概括其中提出的主张。任何此类专利、专利申请、出版物或参考文献或其任何部分都没有被承认是本发明的相关现有技术，挑战此类专利、专利申请、出版物和其它参考文献的精确性和相关性的权利被特别保留。

Claims

1.可被检测的分子探针的集合，其用于在单份样品中测定分析物的预设组中每种的活性、存在或表达，所述的组包含至少一种细胞因子或针对其的基因、一种趋化因子或针对其的基因、一种激素或针对其的基因以及一种脂肪因子或针对其的基因；其中，对于所述组中每种分析物而言，所述分子探针的集合包含至少一种适于检测该分析物的活性、存在或表达的探针。

2.权利要求1的分子探针的集合，其中，分析物的所述组还包含一种或多种的神经元生长因子或针对其的基因、并非神经元生长因子的生长因子或针对其的基因、可溶受体或针对其的基因，或者它们的组合。

3.权利要求2的分子探针的集合，其包含用于检测分析物的所述组中每种基因的编码基因产物的可被检测的探针，由此测定所述组中每种基因的表达。

4.权利要求3的分子探针的集合，其中每种探针对于检测所述组中的一种分析物来说是特异性的。

5.权利要求3的分子探针的集合，其中所述可被检测的探针包含抗体、抗体片段、配体、受体、结合蛋白或核酸。

6.权利要求1的分子探针的集合，其中分析物的所述组包含一种或多种的细胞因子干扰素α、干扰素γ、白细胞介素12 p40、白细胞介素18、干扰素β、干扰素ω、淋巴毒素βR、淋巴毒素、白细胞介素6、白细胞介素8、肿瘤坏死因子α、白细胞介素4、白细胞介素10、转化生长因子β-1、肿瘤坏死因子β、白细胞介素3、白细胞介素5、白细胞介素7、白细胞介素13、白细胞介素15、白细胞介素1α、白细胞介素1β、白细胞介素2、白细胞介素11、白细胞介素12p70、白细胞介素16、白细胞介素17、受活化调节的正常T表达并且可能分泌的(RANTES)、白细胞介素21、白细胞介素9，或转化生长因子β受体III，或编码任何前述细胞因子的基因。

7.权利要求6的分子探针的集合，其中分析物的所述组包含一种或多种的趋化因子B-淋巴细胞化学诱导物、源于上皮细胞的嗜中性粒细胞活化肽、嗜酸细胞活化趋化因子、嗜酸细胞活化趋化因子-2、单核细胞趋化蛋白2、单核细胞趋化蛋白3、巨噬细胞移动抑制因子、巨噬细胞炎性蛋白1α、骨髓祖代抑制因子1、巨噬细胞刺激蛋白、粒细胞趋化蛋白2、干扰素γ诱导蛋白10、白血病抑制因子、巨噬细胞集落刺激因子、单核细胞趋化蛋白1、源于巨噬细胞的趋化因子、巨噬细胞炎性蛋白1β、巨噬细胞炎性蛋白1δ、嗜中性粒细胞活化肽2、肺和活化调控的趋化因子、源于基质细胞的因子α、胸腺和活化调控的趋化因子、betacellulin、6 Ckine、酸性成纤维细胞生长因子、CXXXC趋化分子、hemofiltrate CC趋化因子1、单核细胞趋化蛋白4、巨噬细胞炎性蛋白3β、血小板因子4、NF-κ-B的受体激活子、皮肤T细胞吸引趋化因子、嗜酸细胞活化趋化因子-3、成纤维细胞生长因子-4、促滤泡素抑制素、生长相关的癌基因γ、干扰素γ诱导型T细胞α化学诱导物、白血病抑制因子受体α、中期因子、巨噬细胞炎性蛋白3α、pleiptrophin、源于基质细胞的因子β、胸腺表达的趋化因子、转化生长因子α、TNF相关的激活蛋白诱导的细胞因子、血管黏附蛋白-1、CXCL9，或CCL1，或编码任何前述的基因。

8.权利要求7的分子探针的集合，其中分析物的所述组包含一种或多种的激素促乳素、胰岛素样生长因子结合蛋白2、瘦蛋白、胰岛素、抵抗素、脂连蛋白、胰高血糖素、胰高血糖素相关肽1，或PYY，或编码任何前述的基因。

9.权利要求8的分子探针的集合，其中分析物的所述组包含一种或多种的脂肪因子单核细胞趋化蛋白1、瘦蛋白、抵抗素、脂连蛋白、IL-6、TNF-α，或凝血酶可活化的纤维蛋白溶解抑制剂，或编码任何前述的基因。

10.权利要求9的分子探针的集合，其中分析物的所述预设组还包含一种或多种的神经元生长因子睫状神经营养因子、胶质细胞系衍生神经营养因子、脑衍生神经营养因子、神经营养蛋白3、神经营养蛋白4，或β-神经生长因子，或编码任何前述的基因。

11.权利要求9的分子探针的集合，其中分析物的所述预设组还包含一种或多种的生长因子血管生成素、表皮生长因子、成纤维细胞生长因子-7、成纤维细胞生长因子-9、粒细胞巨噬细胞集落刺激因子、黑素瘤生长刺激活性、制瘤素M、胎盘生长因子、转化生长因子β-3、双调蛋白成纤维细胞生长因子-6、粒细胞集落形成刺激因子、干细胞因子、血管内皮生长因子、心肌营养蛋白-1、生长相关的癌基因β、肝素结合的EGF样生长因子、肝细胞生长因子、疱疹病毒进入介体、基质金属蛋白酶10、基质金属蛋白酶7、基质金属蛋白酶9、金属蛋白酶1的组织抑制剂、血管内皮生长因子D、血管内皮生长因子受体2、碱性成纤维细胞生长因子、胰岛素样生长因子I、胰岛素样生长因子II、胰岛素样生长因子结合蛋白1、胰岛素样生长因子结合蛋白3、胰岛素样生长因子结合蛋白4、胰岛素样生长因子结合蛋白6、基质金属蛋白酶1、基质金属蛋白酶2，或金属蛋白酶2的组织抑制剂，或编码任何前述的基因。

12.权利要求9的分子探针的集合，其中分析物的所述预设组还包含一种或多种的可溶受体sCD23、Fas(CD95)、白细胞介素1受体拮抗物、白细胞介素2可溶受体α、TNF相关凋亡诱导配体、尿激酶型纤溶酶激活物受体、fms样酪氨酸激酶-3配体、可溶糖蛋白130、白细胞介素1可溶受体I、白细胞介素6可溶受体、肿瘤坏死因子受体I、肿瘤坏死因子受体II、血管上皮钙黏着蛋白、CCL28、细胞毒性T-淋巴细胞相关分子4、死亡受体6、Fas配体、细胞间黏附分子3、白细胞介素2受体γ、白细胞介素5受体α、L-选择蛋白、血小板内皮细胞黏附分子-1、干细胞因子受体、TNF相关凋亡诱导配体受体4、活化的白细胞细胞黏附、CD27、CD30、CD40、睫状神经营养因子受体、细胞间黏附分子1、胰岛素样生长因子I受体、白细胞介素1可溶受体II、白细胞介素2受体β、白细胞介素10受体β、巨噬细胞集落刺激因子受体、血小板衍生生长因子受体α，或TNF相关凋亡诱导配体受体4，或编码任何前述的基因。

13.权利要求9的分子探针的集合，其包含针对IL-2、IL-4、IL-6、IL-7、IL-8、IL-10、IL-18、IFNγ、IP-10、TNF-α、MCP-1、GLP-1、胰高血糖素、胰岛素、脂连蛋白和抵抗素中每种的特异性探针。

14.权利要求13的分子探针的集合，其能检测来自动物的分析物的预设组中每种的活性、存在或表达，所述动物是人、鼠科动物、猿、犬科动物或猫科动物。

15.权利要求14的分子探针的集合，其还包含用于检测一种或多种IL-15、KC和瘦蛋白或编码任何前述的基因的存在或活性的特异性探针。

16.权利要求13的分子探针的集合，其中所述分析物来自犬科动物，所述探针是抗体。

17.权利要求16的分子探针的集合，其提供对每种分析物的活性、存在或表达量的定量测定。

18.权利要求17的分子探针的集合，其中每种探针与基质相连结，其中每种此类连结的探针保持下述能力：提供对与所述基质接触的样品中每种分析物的所述活性、存在或表达量的定量测定。

19.权利要求18的分子探针的集合，其中每种探针与单独的基质相连结。

20.权利要求19的分子探针的集合，其中每种探针可相对集合中其它探针而言被彼此独立地检测。

21.通过测定一组基因的相对活性或表达来评测动物健康状态的方法，所述方法包括下述步骤：

从动物获得生物样品；所述样品可能含有感兴趣的分析物的预设组或这些分析物的表达产物，所述组至少包含细胞因子、趋化因子、激素和脂肪因子或编码前述每种的基因；

将所述样品与用于测定分析物的预设组中每种的活性、存在或表达的分子探针集合相接触，其中，对于所述组中每种分析物而言，所述分子探针的集合包含至少一种适于检测该分析物的活性、存在或表达的探针，当所述样品中存在对应于该探针的分析物或其表达产物时，每种探针能产生可被独立检测的信号；

将所述样品与所述集合接触之后，检测产生的所述可被独立检测的信号，

将所述可被检测的信号与所述样品中分析物的预设组中每种的相对活性、存在或表达关联起来；

将所述样品中分析物的预设组中每种的相对活性、存在或表达与已知的健康状态的参数关联起来；以及

根据上述内容来确定动物的健康状态。

22.权利要求21的方法，其中，分析物的所述组还包含一种或多种的神经元生长因子、并非神经元生长因子的生长因子、可溶受体，或者它们的组合，或者编码任何前述的基因。

23.权利要求22的方法，其中，所述可被检测的探针对于检测分析物的所述组中每种分析物的存在、活性或表达来说是特异性的。

24.权利要求23的方法，其中，所述可被检测的探针是抗体、抗体片段、配体、受体或结合蛋白。

25.权利要求21的方法，其中，分析物的所述组包含一种或多种的细胞因子干扰素α、干扰素γ、白细胞介素12p40、白细胞介素18、干扰素β、干扰素ω、淋巴毒素βR、淋巴毒素、白细胞介素6、白细胞介素8、肿瘤坏死因子α、白细胞介素4、白细胞介素10、转化生长因子β-1、肿瘤坏死因子β、白细胞介素3、白细胞介素5、白细胞介素7、白细胞介素13、白细胞介素15、白细胞介素1α、白细胞介素1β、白细胞介素2、白细胞介素11、白细胞介素12p70、白细胞介素16、白细胞介素17、受活化调节的正常T表达并且可能分泌的(RANTES)、白细胞介素21、白细胞介素9，或转化生长因子β受体III，或者编码任何前述的基因。

26.权利要求25的方法，其中分析物的所述预设组包括一种或多种的趋化因子B-淋巴细胞化学诱导物、源于上皮细胞的嗜中性粒细胞活化肽、嗜酸细胞活化趋化因子、嗜酸细胞活化趋化因子-2、单核细胞趋化蛋白2、单核细胞趋化蛋白3、巨噬细胞移动抑制因子、巨噬细胞炎性蛋白1α、骨髓祖代抑制因子1、巨噬细胞刺激蛋白、粒细胞趋化蛋白2、干扰素γ诱导蛋白10、白血病抑制因子、巨噬细胞集落刺激因子、单核细胞趋化蛋白1、源于巨噬细胞的趋化因子、巨噬细胞炎性蛋白1β、巨噬细胞炎性蛋白1δ、嗜中性粒细胞活化肽2、肺和活化调控的趋化因子、源于基质细胞的因子α、胸腺和活化调控的趋化因子、betacellulin、6 Ckine、酸性成纤维细胞生长因子、CXXXC趋化分子、hemofiltrate CC趋化因子1、单核细胞趋化蛋白4、巨噬细胞炎性蛋白3β、血小板因子4、NF-κ-B的受体激活子、皮肤T细胞吸引趋化因子、嗜酸细胞活化趋化因子-3、成纤维细胞生长因子-4、促滤泡素抑制素、生长相关的癌基因γ、干扰素γ诱导型T细胞α化学诱导物、白血病抑制因子受体α、中期因子、巨噬细胞炎性蛋白3α、pleiptrophin、源于基质细胞的因子β、胸腺表达的趋化因子、转化生长因子α、TNF相关的激活蛋白诱导的细胞因子、血管黏附蛋白-1、CXCL9，或CCL1，或编码任何前述的基因。

27.权利要求26的方法，其中分析物的所述预设组包括一种或多种的激素促乳素、胰岛素样生长因子结合蛋白2、瘦蛋白、胰岛素、抵抗素、脂连蛋白、胰高血糖素、胰高血糖素相关肽1，或PYY，或编码任何前述的基因。

28.权利要求27的方法，其中分析物的所述预设组包括一种或多种的脂肪因子单核细胞趋化蛋白1、瘦蛋白、抵抗素、脂连蛋白、IL-6、TNF-α，或凝血酶可活化的纤维蛋白溶解抑制剂，或编码任何前述的基因。

29.权利要求28的方法，其中分析物的所述预设组还包含一种或多种的神经元生长因子睫状神经营养因子、胶质细胞系衍生神经营养因子、脑衍生神经营养因子、神经营养蛋白3、神经营养蛋白4，或β-神经生长因子，或编码任何前述的基因。

30.权利要求29的方法，其中分析物的所述预设组还包含一种或多种的生长因子血管生成素、表皮生长因子、成纤维细胞生长因子-7、成纤维细胞生长因子-9、粒细胞巨噬细胞集落刺激因子、黑素瘤生长刺激活性、制瘤素M、胎盘生长因子、转化生长因子β-3、双调蛋白成纤维细胞生长因子-6、粒细胞集落形成刺激因子、干细胞因子、血管内皮生长因子、心肌营养蛋白-1、生长相关的癌基因β、肝素结合的EGF样生长因子、肝细胞生长因子、疱疹病毒进入介体、基质金属蛋白酶10、基质金属蛋白酶7、基质金属蛋白酶9、金属蛋白酶1的组织抑制剂、血管内皮生长因子D、血管内皮生长因子受体2、碱性成纤维细胞生长因子、胰岛素样生长因子I、胰岛素样生长因子II、胰岛素样生长因子结合蛋白1、胰岛素样生长因子结合蛋白3、胰岛素样生长因子结合蛋白4、胰岛素样生长因子结合蛋白6、基质金属蛋白酶1、基质金属蛋白酶2，或金属蛋白酶2的组织抑制剂，或编码任何前述的基因。

31.权利要求30的方法，其中分析物的所述预设组还包含一种或多种的可溶受体sCD23、Fas(CD95)、白细胞介素1受体拮抗物、白细胞介素2可溶受体α、TNF相关凋亡诱导配体、尿激酶型纤溶酶激活物受体、fms样酪氨酸激酶-3配体、可溶糖蛋白130、白细胞介素1可溶受体I、白细胞介素6可溶受体、肿瘤坏死因子受体I、肿瘤坏死因子受体II、血管上皮钙黏着蛋白、CCL28、细胞毒性T-淋巴细胞相关分子4、死亡受体6、Fas配体、细胞间黏附分子3、白细胞介素2受体γ、白细胞介素5受体α、L-选择蛋白、血小板内皮细胞黏附分子-1、干细胞因子受体、TNF相关凋亡诱导配体受体4、活化的白细胞细胞黏附、CD27、CD30、CD40、睫状神经营养因子受体、细胞间黏附分子1、胰岛素样生长因子I受体、白细胞介素1可溶受体II、白细胞介素2受体β、白细胞介素10受体β、巨噬细胞集落刺激因子受体、血小板衍生生长因子受体α，或TNF相关凋亡诱导配体受体4，或编码任何前述的基因。

32.权利要求21的方法，其中，分析物的所述预设组包含IL-2、IL-4、IL-6、IL-7、IL-8、IL-10、IL-18、IFNγ、IP-10、TNF-α、MCP-1、GLP-1、胰高血糖素、胰岛素、脂连蛋白和抵抗素中每种，或者各自编码前述每种的至少一种基因。

33.权利要求32的方法，其中所述动物是人、鼠科动物、猿、犬科动物或猫科动物。

34.权利要求33的方法，其中分析物的所述预设组还包含一种或多种的IL-15、KC，或瘦蛋白，或编码任何前述的基因。

35.权利要求33的方法，其中所述分析物来自犬科动物，所述探针是抗体。

36.权利要求35的方法，其中分子探针的所述集合允许对每种分析物的活性、存在或表达的量进行定量测定。

37.权利要求36的方法，其中每种探针与基质相连结，其中每种此类连结的探针保持下述能力：提供对与所述基质接触的样品中对应于该探针的分析物的所述活性、存在或表达量的定量测定。

38.权利要求37的方法，其还包括将所述样品和分子探针的所述集合与二抗的组相接触，所述二抗的组包含一种或多种通过增加特异性或检测信号来协助检测的抗体。

39.权利要求37的方法，其中每种探针与单独的基质相连结。

40.权利要求39的方法，其中所述样品是血清或血浆。

41.配制用于改善动物健康的营养方案的方法，所述方法包括：

a)选择动物中感兴趣的分析物的预设组，其中，所述分析物的活性、存在或表达能与所述动物的健康状态以及所述动物的营养方案关联起来，所述的组包含细胞因子、趋化因子、激素和脂肪因子中每种的至少一种或编码任何前述的基因中每种的至少一种；

b)从所述动物获得生物样品，其中所述样品可能含有分析物的所述预设组或其表达产物，所述样品可指示所述动物目前的营养方案；

c)通过将样品与用于测定所述分析物预设组中每种的活性、存在或表达的分子探针的集合相接触来测定基线量度，其中，针对所述组中的每种分析物，分子探针的所述集合包含至少一种适用于检测该分析物的活性、存在或表达的探针，当对应于该探针的分析物或其表达产物存在于所述样品中时，每种探针能产生可被独立检测的信号；

d)将所述样品与所述集合接触之后，检测产生的可被独立检测的信号；

e)将所述可被检测的信号与分析物的所述预设组中每种在所述样品中的相对活性、存在或表达关联起来；

f)将所述样品中分析物的所述预设组中每种的相对活性、存在或表达与已知的健康状态参数关联起来；

g)根据其来确定所述目前营养方案的情况下所述动物的健康状态；

h)配制一种或多种测试营养方案或补充物，用于在所述动物中进行测试，这通过较之所述动物目前的营养方案调节常量营养物的含量或来源、微量营养物的含量或来源、补充膳食组分或膳食的卡路里含量中的一种或多种来实现；

i)以能有效改变分析物的所述预设组中一种或多种的活性、存在或表达的时间和量，向所述动物提供一种或多种测试营养方案或补充物或其组合；

j)对于每种测试营养方案或补充物或其组合而言，用来自所述动物的新样品重复步骤b)至g)，以确定所述测试营养方案或补充物或其组合是否改善所述动物的健康状态；以及

k)选择改善所述动物健康状态的配制的营养方案或补充物或其组合。

42.权利要求41的方法，其中所述动物是肥胖的，具有糖尿病，具有易患糖尿病趋势的症状，具有不想要的炎症水平，具有不想要的胰岛素抗性水平，具有代谢综合征、早发性动脉粥样硬化、异常葡萄糖代谢或异常脂肪代谢。

43.权利要求42的方法，其中，所述配制的营养方案、补充物或其组合在动物中降低炎症、降低胰岛素抗性，或其组合。

44.权利要求43的方法，其中，所述配制的营养方案、补充物或其组合在动物中降低炎症，以及一种或多种的增加抗炎细胞因子、降低促炎细胞因子或减少炎症的细胞因子介体。

45.权利要求44的方法，其中，所述促炎细胞因子包括干扰素α、干扰素γ、白细胞介素12p40、白细胞介素18、干扰素β、干扰素ω、淋巴毒素βR、淋巴毒素、白细胞介素6、白细胞介素8或肿瘤坏死因子α中的一种或多种；并且其中，抗炎细胞因子包括白细胞介素4、白细胞介素10、白细胞介素13、转化生长因子β-1或肿瘤坏死因子β。

46.权利要求44的方法，其中所述促炎细胞因子是IL-6或IL-12、IFN，所述抗炎细胞因子是IL-10和IL-13。

47.权利要求42的方法，其中所述配制的营养方案、补充物或其组合在所述动物中降低胰岛素抗性，以及一种或多种的增加脂连蛋白、减少抵抗素或减少瘦蛋白。

48.权利要求42的方法，其中所述配制的营养方案、补充物或其组合降低血脂异常、炎症、高血压、改变的血管反应性或内脏肥胖中的一种或多种或改善纤维蛋白溶解。

49.权利要求41的方法，其中分析物的所述组还包含一种或多种的神经元生长因子、并非神经元生长因子的生长因子、可溶受体，或其组合，或编码任何前述的基因。

50.权利要求41的方法，其中所述可被检测的探针对于检测分析物的所述组中的每种是特异的。

51.权利要求41的方法，其中所述可被检测的探针是抗体、抗体片段、配体、受体或结合蛋白。

52.权利要求41的方法，其中，分析物的所述组包含一种或多种的细胞因子干扰素α、干扰素γ、白细胞介素12p40、白细胞介素18、干扰素β、干扰素ω、淋巴毒素βR、淋巴毒素、白细胞介素6、白细胞介素8、肿瘤坏死因子α、白细胞介素4、白细胞介素10、转化生长因子β-1、肿瘤坏死因子β、白细胞介素3、白细胞介素5、白细胞介素7、白细胞介素13、白细胞介素15、白细胞介素1α、白细胞介素1β、白细胞介素2、白细胞介素11、白细胞介素12p70、白细胞介素16、白细胞介素17、受活化调节的正常T表达并且可能分泌的(RANTES)、白细胞介素21、白细胞介素9，或转化生长因子β受体III，或者编码任何前述的基因。

53.权利要求52的方法，其中分析物的所述预设组包括一种或多种的趋化因子B-淋巴细胞化学诱导物、源于上皮细胞的嗜中性粒细胞活化肽、嗜酸细胞活化趋化因子、嗜酸细胞活化趋化因子-2、单核细胞趋化蛋白2、单核细胞趋化蛋白3、巨噬细胞移动抑制因子、巨噬细胞炎性蛋白1α、骨髓祖代抑制因子1、巨噬细胞刺激蛋白、粒细胞趋化蛋白2、干扰素γ诱导蛋白10、白血病抑制因子、巨噬细胞集落刺激因子、单核细胞趋化蛋白1、源于巨噬细胞的趋化因子、巨噬细胞炎性蛋白1β、巨噬细胞炎性蛋白1δ、嗜中性粒细胞活化肽2、肺和活化调控的趋化因子、源于基质细胞的因子α、胸腺和活化调控的趋化因子、betacellulin、6 Ckine、酸性成纤维细胞生长因子、CXXXC趋化分子、hemofiltrate CC趋化因子1、单核细胞趋化蛋白4、巨噬细胞炎性蛋白3β、血小板因子4、NF-κ-B的受体激活子、皮肤T细胞吸引趋化因子、嗜酸细胞活化趋化因子-3、成纤维细胞生长因子-4、促滤泡素抑制素、生长相关的癌基因γ、干扰素γ诱导型T细胞α化学诱导物、白血病抑制因子受体α、中期因子、巨噬细胞炎性蛋白3α、pleiptrophin、源于基质细胞的因子β、胸腺表达的趋化因子、转化生长因子α、TNF相关的激活蛋白诱导的细胞因子、血管黏附蛋白-1、CXCL9，或CCL1，或编码任何前述的基因。

54.权利要求53的方法，其中分析物的所述预设组包括一种或多种的激素促乳素、胰岛素样生长因子结合蛋白2、瘦蛋白、胰岛素、抵抗素、脂连蛋白、胰高血糖素、胰高血糖素相关肽1，或PYY，或编码任何前述的基因。

55.权利要求54的方法，其中分析物的所述预设组包括一种或多种的脂肪因子单核细胞趋化蛋白1、瘦蛋白、抵抗素、脂连蛋白、IL-6、TNF-α，或凝血酶可活化的纤维蛋白溶解抑制剂，或编码任何前述的基因。

56.权利要求55的方法，其中分析物的所述预设组还包含一种或多种的神经元生长因子睫状神经营养因子、胶质细胞系衍生神经营养因子、脑衍生神经营养因子、神经营养蛋白3、神经营养蛋白4，或β-神经生长因子，或编码任何前述的基因。

57.权利要求56的方法，其中分析物的所述预设组还包含一种或多种的生长因子血管生成素、表皮生长因子、成纤维细胞生长因子-7、成纤维细胞生长因子-9、粒细胞巨噬细胞集落刺激因子、黑素瘤生长刺激活性、制瘤素M、胎盘生长因子、转化生长因子β-3、双调蛋白成纤维细胞生长因子-6、粒细胞集落形成刺激因子、干细胞因子、血管内皮生长因子、心肌营养蛋白-1、生长相关的癌基因β、肝素结合的EGF样生长因子、肝细胞生长因子、疱疹病毒进入介体、基质金属蛋白酶10、基质金属蛋白酶7、基质金属蛋白酶9、金属蛋白酶1的组织抑制剂、血管内皮生长因子D、血管内皮生长因子受体2、碱性成纤维细胞生长因子、胰岛素样生长因子I、胰岛素样生长因子II、胰岛素样生长因子结合蛋白1、胰岛素样生长因子结合蛋白3、胰岛素样生长因子结合蛋白4、胰岛素样生长因子结合蛋白6、基质金属蛋白酶1、基质金属蛋白酶2，或金属蛋白酶2的组织抑制剂，或编码任何前述的基因。

58.权利要求57的方法，其中分析物的所述预设组还包含一种或多种的可溶受体sCD23、Fas(CD95)、白细胞介素1受体拮抗物、白细胞介素2可溶受体α、TNF相关凋亡诱导配体、尿激酶型纤溶酶激活物受体、fms样酪氨酸激酶-3配体、可溶糖蛋白130、白细胞介素1可溶受体I、白细胞介素6可溶受体、肿瘤坏死因子受体I、肿瘤坏死因子受体II、血管上皮钙黏着蛋白、CCL28、细胞毒性T-淋巴细胞相关分子4、死亡受体6、Fas配体、细胞间黏附分子3、白细胞介素2受体γ、白细胞介素5受体α、L-选择蛋白、血小板内皮细胞黏附分子-1、干细胞因子受体、TNF相关凋亡诱导配体受体4、活化的白细胞细胞黏附、CD27、CD30、CD40、睫状神经营养因子受体、细胞间黏附分子1、胰岛素样生长因子I受体、白细胞介素1可溶受体II、白细胞介素2受体β、白细胞介素10受体β、巨噬细胞集落刺激因子受体、血小板衍生生长因子受体α，或TNF相关凋亡诱导配体受体4，或编码任何前述的基因。

59.权利要求41的方法，其中，分析物的所述预设组包含IL-2、IL-4、IL-6、IL-7、IL-8、IL-10、IL-18、IFNγ、IP-10、TNF-α、MCP-1、GLP-1、胰高血糖素、胰岛素、脂连蛋白和抵抗素中每种或各自编码前述每种的至少一种基因。

60.权利要求59的方法，其中所述动物是人、鼠科动物、猿、犬科动物或猫科动物。

61.权利要求60的方法，其中分析物的所述预设组还包含一种或多种的IL-15、KC，或瘦蛋白，或编码任何前述的基因。

62.权利要求60的方法，其中所述分析物来自犬科动物，所述探针是抗体。

63.权利要求62的方法，其中分子探针的所述集合允许对每种分析物的活性、存在或表达进行定量测定。

64.权利要求63的方法，其中每种探针与基质相连结，其中每种此类连结的探针保持下述能力：提供对与所述基质接触的样品中对应于该探针的分析物的所述活性、存在或表达量的定量测定。

65.权利要求64的方法，其包括另外的步骤：即将所述样品和分子探针的所述集合与二抗的组相接触，所述二抗的组包含一种或多种通过增加特异性或检测信号来协助检测的抗体。

66.权利要求65的方法，其中每种探针与单独的基质相连结。

67.权利要求66的方法，其中所述样品是组织或体液。

68.权利要求67的方法，其中所述液体是血清或血浆。

69.可被检测的分子探针的集合，其用于在单份样品中测定蛋白质分析物的预设组的存在，所述的组包含针对IL-2、IL-4、IL-6、IL-7、IL-8、IL-10、IL-18、IFNγ、IP-10、TNF-α、MCP-1、GLP-1、胰高血糖素、胰岛素、脂连蛋白和抵抗素中每种的特异性探针；其中每种探针是对检测所述组中一种蛋白质来说特异的抗体或抗体片段，每种探针相对于所述集合中每种其它探针而言是可被独立检测，每种此类探针与基质相连结，其中，每种连结的探针能提供：对在与所述基质接触的样品中的所述组中对应蛋白质的定量测定；其中，所述蛋白质被来自动物的基因编码，所述动物是人、鼠科动物、猿、犬科动物或猫科动物。

70.权利要求68的分子探针的集合，其还包含针对IL-15、KC和瘦蛋白中一种或多种的特异性探针。

71.权利要求69的分子探针的集合，其中蛋白分析物的所述组还包含：

细胞因子干扰素α、干扰素γ、白细胞介素12p40、白细胞介素18、干扰素β、干扰素ω、淋巴毒素βR、淋巴毒素、白细胞介素6、白细胞介素8、肿瘤坏死因子α、白细胞介素4、白细胞介素10、转化生长因子β-1、肿瘤坏死因子β、白细胞介素3、白细胞介素5、白细胞介素7、白细胞介素13、白细胞介素15、白细胞介素1α、白细胞介素1β、白细胞介素2、白细胞介素11、白细胞介素12p70、白细胞介素16、白细胞介素17、受活化调节的正常T表达并且可能分泌的(RANTES)、白细胞介素21、白细胞介素9，或转化生长因子β受体III中的一种或多种；和

趋化因子B-淋巴细胞化学诱导物、源于上皮细胞的嗜中性粒细胞活化肽、嗜酸细胞活化趋化因子、嗜酸细胞活化趋化因子-2、单核细胞趋化蛋白2、单核细胞趋化蛋白3、巨噬细胞移动抑制因子、巨噬细胞炎性蛋白1α、骨髓祖代抑制因子1、巨噬细胞刺激蛋白、粒细胞趋化蛋白2、干扰素γ诱导蛋白10、白血病抑制因子、巨噬细胞集落刺激因子、单核细胞趋化蛋白1、源于巨噬细胞的趋化因子、巨噬细胞炎性蛋白1β、巨噬细胞炎性蛋白1δ、嗜中性粒细胞活化肽2、肺和活化调控的趋化因子、源于基质细胞的因子α、胸腺和活化调控的趋化因子、betacellulin、6 Ckine、酸性成纤维细胞生长因子、CXXXC趋化分子、hemofiltrate CC趋化因子1、单核细胞趋化蛋白4、巨噬细胞炎性蛋白3β、血小板因子4、NF-κ-B的受体激活子、皮肤T细胞吸引趋化因子、嗜酸细胞活化趋化因子-3、成纤维细胞生长因子-4、促滤泡素抑制素、生长相关的癌基因γ、干扰素γ诱导型T细胞α化学诱导物、白血病抑制因子受体α、中期因子、巨噬细胞炎性蛋白3α、pleiptrophin、源于基质细胞的因子β、胸腺表达的趋化因子、转化生长因子α、TNF相关的激活蛋白诱导的细胞因子、血管黏附蛋白-1、CXCL9，或CCL1中的一种或多种；以及

激素促乳素、胰岛素样生长因子结合蛋白2、瘦蛋白、胰岛素、抵抗素、脂连蛋白、胰高血糖素、胰高血糖素相关肽1，或PYY中的一种或多种；以及

脂肪因子单核细胞趋化蛋白1、瘦蛋白、抵抗素、脂连蛋白、IL-6、TNF-α，或凝血酶可活化的纤维蛋白溶解抑制剂中的一种或多种；以及

下述中的一种或多种：

神经元生长因子睫状神经营养因子、胶质细胞系衍生神经营养因子、脑衍生神经营养因子、神经营养蛋白3、神经营养蛋白4，或β-神经生长因子；或

生长因子血管生成素、表皮生长因子、成纤维细胞生长因子-7、成纤维细胞生长因子-9、粒细胞巨噬细胞集落刺激因子、黑素瘤生长刺激活性、制瘤素M、胎盘生长因子、转化生长因子β-3、双调蛋白成纤维细胞生长因子-6、粒细胞集落形成刺激因子、干细胞因子、血管内皮生长因子、心肌营养蛋白-1、生长相关的癌基因β、肝素结合的EGF样生长因子、肝细胞生长因子、疱疹病毒进入介体、基质金属蛋白酶10、基质金属蛋白酶7、基质金属蛋白酶9、金属蛋白酶1的组织抑制剂、血管内皮生长因子D、血管内皮生长因子受体2、碱性成纤维细胞生长因子、胰岛素样生长因子I、胰岛素样生长因子II、胰岛素样生长因子结合蛋白1、胰岛素样生长因子结合蛋白3、胰岛素样生长因子结合蛋白4、胰岛素样生长因子结合蛋白6、基质金属蛋白酶1、基质金属蛋白酶2，或金属蛋白酶2的组织抑制剂；或

可溶受体sCD23、Fas(CD95)、白细胞介素1受体拮抗物、白细胞介素2可溶受体α、TNF相关凋亡诱导配体、尿激酶型纤溶酶激活物受体、fms样酪氨酸激酶-3配体、可溶糖蛋白130、白细胞介素1可溶受体I、白细胞介素6可溶受体、肿瘤坏死因子受体I、肿瘤坏死因子受体II、血管上皮钙黏着蛋白、CCL28、细胞毒性T-淋巴细胞相关分子4、死亡受体6、Fas配体、细胞间黏附分子3、白细胞介素2受体γ、白细胞介素5受体α、L-选择蛋白、血小板内皮细胞黏附分子-1、干细胞因子受体、TNF相关凋亡诱导配体受体4、活化的白细胞细胞黏附、CD27、CD30、CD40、睫状神经营养因子受体、细胞间黏附分子1、胰岛素样生长因子I受体、白细胞介素1可溶受体II、白细胞介素2受体β、白细胞介素10受体β、巨噬细胞集落刺激因子受体、血小板衍生生长因子受体α，或TNF相关凋亡诱导配体受体4。

72.适用于在单份样品中测定分析物的预设组中每种的活性、存在或表达的试剂盒，按照试剂盒组分的需要，所述试剂盒在单个包装中的分别的容器中或在虚拟包装中的分别的容器中包含多路检验，所述多路检验包含可被检测的分子探针的集合，以及下述中的一种或多种：(1)如何使用所述多路检验来测定分析物的预设组中每种的活性、存在或表达的指导，(2)如何使用所述多路检验来评测动物健康状态的指导，(3)使用所述多路检验来配制用于改善动物健康的营养方案的指导，以及(4)适于动物消耗的一种或多种成分。

73.传达涉及使用用于下述目的中一种或多种的多路检验的信息或指导的方法，所述目的是(1)在单份样品中测定分析物预设组中每种的活性、存在或表达，(2)评测动物健康状态或(3)配制用于改善动物健康的营养方案，所述方法包括含有所述信息或指导的文件、数字存储介质、光存储介质、声音显示设备或直观显示设备。

74.权利要求73的方法，其选自显示网页、可见显示的摊亭、小册子、产品标签、包装说明书、广告、印刷品、公开通知、磁带、录像带、DVD、CD-ROM、计算机可读芯片、计算机可读卡、计算机可读盘、计算机存储器或其组合。