CN101601856A - 放线菌素类化合物放线菌素v在制备抗肝癌药物中的应用 - Google Patents
放线菌素类化合物放线菌素v在制备抗肝癌药物中的应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN101601856A CN101601856A CNA2009100406940A CN200910040694A CN101601856A CN 101601856 A CN101601856 A CN 101601856A CN A2009100406940 A CNA2009100406940 A CN A2009100406940A CN 200910040694 A CN200910040694 A CN 200910040694A CN 101601856 A CN101601856 A CN 101601856A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- actinomycin
- compounds
- liver cancer
- tumor
- actv
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- RJURFGZVJUQBHK-UHFFFAOYSA-N actinomycin D Chemical compound CC1OC(=O)C(C(C)C)N(C)C(=O)CN(C)C(=O)C2CCCN2C(=O)C(C(C)C)NC(=O)C1NC(=O)C1=C(N)C(=O)C(C)=C2OC(C(C)=CC=C3C(=O)NC4C(=O)NC(C(N5CCCC5C(=O)N(C)CC(=O)N(C)C(C(C)C)C(=O)OC4C)=O)C(C)C)=C3N=C21 RJURFGZVJUQBHK-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 128
- 108010092160 Dactinomycin Proteins 0.000 title claims abstract description 46
- 229960000640 dactinomycin Drugs 0.000 title claims abstract description 45
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 title claims abstract description 21
- 239000003814 drug Substances 0.000 title claims abstract description 15
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 9
- 229940079593 drug Drugs 0.000 title claims description 11
- 201000007270 liver cancer Diseases 0.000 title claims description 11
- 208000014018 liver neoplasm Diseases 0.000 title claims description 11
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 9
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 claims abstract description 5
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 claims abstract description 5
- 241000187747 Streptomyces Species 0.000 claims abstract description 4
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims abstract description 4
- 239000000287 crude extract Substances 0.000 claims abstract description 3
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 4
- 239000002775 capsule Substances 0.000 claims description 3
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 claims description 3
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 claims description 2
- 239000008187 granular material Substances 0.000 claims description 2
- 239000006187 pill Substances 0.000 claims description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 claims description 2
- 238000000926 separation method Methods 0.000 claims description 2
- 239000003826 tablet Substances 0.000 claims description 2
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 abstract description 19
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 abstract description 8
- 229940041181 antineoplastic drug Drugs 0.000 abstract description 7
- 238000000034 method Methods 0.000 abstract description 6
- 241000233866 Fungi Species 0.000 abstract description 4
- 230000001644 anti-hepatocarcinoma Effects 0.000 abstract description 3
- 239000000284 extract Substances 0.000 abstract description 2
- 150000002611 lead compounds Chemical class 0.000 abstract description 2
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 29
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 14
- RJURFGZVJUQBHK-IIXSONLDSA-N actinomycin D Chemical compound C[C@H]1OC(=O)[C@H](C(C)C)N(C)C(=O)CN(C)C(=O)[C@@H]2CCCN2C(=O)[C@@H](C(C)C)NC(=O)[C@H]1NC(=O)C1=C(N)C(=O)C(C)=C2OC(C(C)=CC=C3C(=O)N[C@@H]4C(=O)N[C@@H](C(N5CCC[C@H]5C(=O)N(C)CC(=O)N(C)[C@@H](C(C)C)C(=O)O[C@@H]4C)=O)C(C)C)=C3N=C21 RJURFGZVJUQBHK-IIXSONLDSA-N 0.000 description 14
- 206010073071 hepatocellular carcinoma Diseases 0.000 description 11
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 9
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 7
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 7
- 238000011746 C57BL/6J (JAX™ mouse strain) Methods 0.000 description 6
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 6
- 230000004614 tumor growth Effects 0.000 description 6
- 201000009030 Carcinoma Diseases 0.000 description 5
- 238000011161 development Methods 0.000 description 5
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 5
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 5
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 5
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 5
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 4
- 238000004737 colorimetric analysis Methods 0.000 description 4
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 4
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 4
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 4
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 4
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 3
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 3
- 230000008859 change Effects 0.000 description 3
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 3
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 3
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 3
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 2
- 238000005481 NMR spectroscopy Methods 0.000 description 2
- 108700020559 actinomycin K Proteins 0.000 description 2
- 239000012531 culture fluid Substances 0.000 description 2
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 239000007928 intraperitoneal injection Substances 0.000 description 2
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 2
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 description 2
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 2
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 2
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 239000002689 soil Substances 0.000 description 2
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 2
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 2
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 1
- 238000001644 13C nuclear magnetic resonance spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 238000005160 1H NMR spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 241000186361 Actinobacteria <class> Species 0.000 description 1
- 206010013457 Dissociation Diseases 0.000 description 1
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- 206010020843 Hyperthermia Diseases 0.000 description 1
- 244000283207 Indigofera tinctoria Species 0.000 description 1
- 206010025323 Lymphomas Diseases 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- 238000011887 Necropsy Methods 0.000 description 1
- 240000002853 Nelumbo nucifera Species 0.000 description 1
- 235000006508 Nelumbo nucifera Nutrition 0.000 description 1
- 235000006510 Nelumbo pentapetala Nutrition 0.000 description 1
- 108010019160 Pancreatin Proteins 0.000 description 1
- 102000011195 Profilin Human genes 0.000 description 1
- 108050001408 Profilin Proteins 0.000 description 1
- 240000002044 Rhizophora apiculata Species 0.000 description 1
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 1
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 229940100198 alkylating agent Drugs 0.000 description 1
- 239000002168 alkylating agent Substances 0.000 description 1
- 230000000735 allogeneic effect Effects 0.000 description 1
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000000118 anti-neoplastic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 230000004888 barrier function Effects 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 108700004675 bleomycetin Proteins 0.000 description 1
- QYOAUOAXCQAEMW-UTXKDXHTSA-N bleomycin A5 Chemical compound N([C@H](C(=O)N[C@H](C)[C@@H](O)[C@H](C)C(=O)N[C@@H]([C@H](O)C)C(=O)NCCC=1SC=C(N=1)C=1SC=C(N=1)C(=O)NCCCNCCCCN)[C@@H](O[C@H]1[C@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](CO)O1)O[C@@H]1[C@H]([C@@H](OC(N)=O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)O)C=1N=CNC=1)C(=O)C1=NC([C@H](CC(N)=O)NC[C@H](N)C(N)=O)=NC(N)=C1C QYOAUOAXCQAEMW-UTXKDXHTSA-N 0.000 description 1
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 1
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 1
- 230000005907 cancer growth Effects 0.000 description 1
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 1
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 1
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 1
- 229940088547 cosmegen Drugs 0.000 description 1
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 1
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 1
- 230000037213 diet Effects 0.000 description 1
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 1
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 238000010494 dissociation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000005593 dissociations Effects 0.000 description 1
- 208000018459 dissociative disease Diseases 0.000 description 1
- 238000002330 electrospray ionisation mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 125000000623 heterocyclic group Chemical group 0.000 description 1
- 238000003919 heteronuclear multiple bond coherence Methods 0.000 description 1
- 238000005570 heteronuclear single quantum coherence Methods 0.000 description 1
- 230000036031 hyperthermia Effects 0.000 description 1
- 239000007943 implant Substances 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 1
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 1
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 231100000053 low toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 238000001819 mass spectrum Methods 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- HAWPXGHAZFHHAD-UHFFFAOYSA-N mechlorethamine Chemical compound ClCCN(C)CCCl HAWPXGHAZFHHAD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960004961 mechlorethamine Drugs 0.000 description 1
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 1
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 1
- 230000035764 nutrition Effects 0.000 description 1
- 229940055695 pancreatin Drugs 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 239000003910 polypeptide antibiotic agent Substances 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 229960000329 ribavirin Drugs 0.000 description 1
- HZCAHMRRMINHDJ-DBRKOABJSA-N ribavirin Natural products O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1N=CN=C1 HZCAHMRRMINHDJ-DBRKOABJSA-N 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 238000012306 spectroscopic technique Methods 0.000 description 1
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 1
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- -1 tetramethyl ribavirin Chemical compound 0.000 description 1
- 230000000699 topical effect Effects 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 description 1
- 241001446247 uncultured actinomycete Species 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
Images
Landscapes
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
本发明提供了放线菌素类化合物放线菌素V在制备抗肝癌的药物中的应用。其中,放线菌素类化合物放线菌素V(ActV)于南海海洋链霉菌Streptomyces zhapoensis H41-26的发酵培养物的乙酸乙酯粗提物中分离得到,分子量为1268。本发明的放线菌素类化合物从真菌中提取,方法简单,成本低廉;可作为治疗肝癌等其他实体肿瘤的先导化合物,用于制备抗肿瘤药物,特别是作为肝癌化疗药物将具有非常广阔的应用前景。
Description
技术领域
本发明涉及医药技术领域,具体涉及放线菌素类化合物放线菌素V,特别是一类源于海洋链霉菌属微生物具有抗肿瘤活性的放线菌素V在制备抗肝癌药物中的应用。
背景技术
海洋微生物由于其所处的特殊环境,如高盐度、高压、低营养、低温(特别是深海)或局部高温和无光照以及不同的生物之间的关系等等,发展出了各种独特的代谢方式,这不仅确保其在极端环境中生存,也为人类提供了在陆地微生物中难以发现的大量新颖代谢产物,其中不少具有潜在的实际应用价值。已被认为是寻找药理活性物质的新源泉。再者,海洋微生物因其易于采集和培养,且人工发酵产生的代谢产物比高等生物所含的物质更易提纯,成本更低,而且符合可持续发展的资源开发原则,所以从中筛选到的活性化合物更利于工业化生产。
自从20世纪40年代应用第一个抗肿瘤药物——氮芥成功地治疗恶性淋巴瘤以来,抗肿瘤药物的研究已取得了很大的发展。我国现代抗肿瘤药物的研制始于20世纪50年代,首先研制的就是放线菌素K,以后又合成了几种烷化剂,如N-甲酰溶肉瘤素、消瘤芥、甲氧芳芥、甘磷酰芥等。60年代以后,从我国土壤中陆续分离提取的更生霉素(新福霉素)、平阳霉素、博安霉素等也进入临床。这里所提及的放线菌素K和更生霉素均属于放线菌素类制剂,其主要成分即为放线菌素D。放线菌素类制剂是由许多结构近似的色多肽类物质所组成。各种放线菌素均有相同的杂环部分发色基团和由不同氨基酸构成的多肽部分。迄今发现的放线菌素至少有50种以上,而主要只有放线菌素D(Actinomycin C1,Dactionmycin或Cosmegen)在发挥临床应用价值。放线菌素D发现于上世纪中期,是从Str.parvullus培养液中提取的一种多肽抗生素;1957年我国上海药物所从广西桂林土壤中分离出的Str.melanochromogenes No.1779培养液中提取的一种抗生素,被定名为更生霉素,实验证明两者理化性质完全相同。已于上个世纪60年代在我国进入临床使用。
放线菌素D属DNA嵌合类抗癌药,抗肿瘤的主要机理是放线菌素D能插入DNA的双螺旋链,通过与模板DNA结合形成复合物,改变DNA的模板性质,抑制DNA和mRNA的合成,进而抑制蛋白质的合成而抑制肿瘤细胞生长。但是药理学研究表明放线菌素D在体内代谢缓慢,在宿主细胞核内容易产生积累,导致其毒性较大,限制了它在临床上的使用。另外放线菌素D对增殖期细胞的毒性与非增值细胞毒性的差别说明其选择性的毒性并未完全由RNA的合成被普遍的抑制而引起的,其更加深入的抗肿瘤活性机理还有待深入研究。故寻找新型放线菌素类制剂或对放线菌素D结构进行改造,以降低其毒性,提高其抗肿瘤活性是开发高效低毒放线菌素类抗肿瘤制剂的目标。
发明内容
为克服上述技术缺陷,本发明提供了放线菌素类化合物放线菌素V在制备抗肝癌药物中的应用。
所述抗肝癌的药物组合物中含有放线菌素V,所述放线菌素V具有如下结构:
所述放线菌素V的分子量为1268。
本发明的放线菌素类化合物放线菌素V(ActV)来源于海洋红树林内生真菌。发明人由南海海洋链霉菌Streptomyces zhapoensis H41-26的发酵培养物的乙酸乙酯粗提物中分离得到化合物ActV,该菌株由广东省农业科学院植物保护研究所从广东省阳江市西南端海陵岛闸坡的海泥中分离得到。ActV的分子量为1268,纯度为=96%。尽管ActV曾以少量的形式与ActD一起从陆地放线菌被分离得到,但以ActV为优势产物从海洋放线菌分离出来还是第一次。其结构运用核磁共振(H-NMR,13C-NMR,HSQC,HMBC)、高分辨质谱(ESI-MS)等现代波谱技术进行鉴定,并与现有文献报道的图谱进行对照确认。
优选的,所述抗肝癌的药物为肝癌化疗药物。
该药用可以是药物上可接受的任意一种剂型。包括具有适当组成的任何固体(片剂、丸剂、胶囊剂、颗粒剂)等或液体(溶液剂、混悬剂或乳剂)或者口服、局部给药或肠胃外给药,它们可以包含所述纯化合物或者与任何载体或其它药理学活性化合物相结合。当进行肠胃外给药时,需要对这些组合物进行灭菌处理。
本发明化合物或组合物的给药可以通过任何适当的方法进行,如静脉输注、口服制剂、腹膜内和静脉内给药。优选输注时间最多为48小时。包含本发明化合物的药用组合物可以通过以缓释配方中的脂质体或毫微球包囊方式或通过其它标准传递方式进行给药。
所述化合物的正确剂量将根据具体剂型、应用模式和具体部位、患者及所要治疗的肿瘤而变化、还需考虑其它因素如年龄、体重、性别、饮食、给药时间、排泄速率、患者症状、药物结合、反应敏感性和疾病严重程度,可以在最大允许剂量范围内连续给药或者定期给药。
与现有抗肿瘤药物相比,本发明具有如下有益效果:
本发明的放线菌素类化合物来源于海洋真菌,从真菌中提取化合物的方法简单,而优化的培养方法将使大量发酵生产本化合物的成本低廉;本发明通过体外以及体内实验证明新型海洋源性放线菌素ActV具有很强的抗肿瘤活性,可作为治疗肝癌等其他实体肿瘤的先导化合物,可用于制备抗肿瘤药物。本发明的放线菌素类化合物放线菌素V药物组合物可以与其它药物一起使用以提供联合治疗。所述其它药物可以形成该同一组合物的一部分,或者作为单独组合物在相同时间或不同时间进行给药,对其它药物的特性没有特别限制。本发明提供了一种对罹患癌症的任何哺乳动物(特别是人类)进行化合物联合治疗的方法,该方法包括给予患者治疗有效量的本发明化合物或其药用组合物。
附图说明
图1是本发明实施例1中MTT比色法检测ActV对人肝癌细胞系HepG2、Hep3B和鼠肝癌细胞Hepa1-6三种细胞体外剂量依赖性抑制细胞增殖的生物学活性的一个优选实施例的结果图;
图2是本发明实施例2中对C57BL/6J小鼠皮下接种鼠源性肝癌细胞Hepa1-6体内抗肿瘤活性检测中ActV的两个不同剂量(10μg/kg和50μg/kg)对体内肿瘤生长抑制曲线图;
图3是本发明实施例2中对C57BL/6J小鼠皮下接种鼠源性肝癌细胞Hepa1-6体内抗肿瘤活性检测中小鼠体重随给药时间变化曲线图;
图4是本发明实施例2中对C57BL/6J小鼠皮下接种鼠源性肝癌细胞Hepa1-6体内抗肿瘤活性检测中ActV两个不同剂量(10μg/kg和50μg/kg)及对照组的荷瘤小鼠和剥离后肿瘤的照片。
具体实施方式
为使本发明更加容易理解,下面结合具体实施例,进一步阐述本发明。应理解,这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。
实施例1 ActV抑制人肝癌细胞和鼠肝癌细胞生长的剂量-效应关系
将人肝癌细胞系HepG2、Hep3B和鼠肝癌细胞Hepa1-6三种细胞消化后计数,按每孔1.0×104个细胞分别接种至96孔细胞培养板中,置于37℃、5%CO2孵箱中孵育培养。24小时后更换为含浓度依次为0μM、0.001μM、0.05μM、0.1μM、0.5μM、1μM、2μM、3μM、4μM的ActV的培养基,每个浓度均设3个平行复孔,继续培养48小时后,显微镜下观察细胞形态及生长的变化。随后每孔加入5mg/mL MTT溶液20μl,37℃作用4小时,离心后弃上清液,加入DMSO 150μl,振荡器振荡10min充分溶解结晶,置酶标仪上测定波长为570nm下的吸光度A值,按以下公式计算抑制率。细胞生长抑制率(%)=(对照组平均A值-实验组平均A值)/对照组平均A值×100%。对照组即ActV浓度为0μM的培养孔。使用半数抑制浓度(IC50)计算软件Bliss’s software计算IC50,应用SPSS软件进行数据统计分析。
ActV对人肝癌细胞系HepG2、Hep3B和鼠肝癌细胞Hepa1-6三种细胞的生长抑制作用呈现明显的剂量依赖性,四甲基二氮唑蓝(MTT)比色法测定ActV对人肝癌细胞系HepG2、Hep3B和鼠肝癌细胞Hepa1-6三种细胞作用48小时的IC50见表1,表1是MTT比色法测定ActV对人肝癌细胞系HepG2、Hep3B和鼠肝癌细胞Hepa1-6三种细胞作用48小时的IC50,其剂量-效应曲线见图1。
表1
具体来说,采用MTT比色法检测ActV对人肝癌细胞系HepG2、Hep3B和鼠肝癌细胞Hepa1-6生长的影响。建立荷鼠肝癌细胞Hepa1-6的C57BL/6J小鼠同种肿瘤移植模型,随机分为3组,其中一组作为对照,不用ActV处理,另外两组分别以10μg/kg和50μg/kg两种剂量的ActV每2天腹腔注射给药一次,观察并记录ActV的体内抑瘤作用。
实施例2利用同种移植肝癌动物模型检测ActV的体内抗肿瘤活性
采用细胞经皮下接种植入C57BL/6J小鼠颈背部位建立同种移植肝癌动物模型。将鼠源性肝癌细胞Hepa1-6用1×PBS洗涤,用含0.02%EDTA的0.05%胰蛋白酶消化1分钟左右,然后用胰酶抑制剂终止消化。在4℃,1000rpm离心5分钟后,细胞沉淀重悬于1×PBS中并且将浓度调节至2×106细胞/ml。在用于SPF级实验动物饲育的屏障环境动物实验室,将0.1ml肿瘤细胞悬液经皮下注射接种于小鼠颈背部。肿瘤大小用游标刻度卡钳测量,并且体积利用如下公式测算肿瘤:体积=宽度×宽度×长度×0.52。在肿瘤体积为至少100-200mm3(体重的0.5-1%)后(其在5-7天内发生),将小鼠随机分为2组,分别以10μg/kg和50μg/kg两种剂量ActV每2天腹腔注射给药一次,观察并记录ActV的体内抑瘤作用。当对照组肿瘤最大体积接近2000mm3时终止实验且处死小鼠并尸体剖检。
结果证明,不同剂量的给药组与对照组相比,在实验过程中,肿瘤生长明显受到抑制作用(见图2),而且两组不同剂量(10μg/kg和50μg/kg)给药组之间肿瘤生长抑制率分别为47.79%和74.65%,体现了剂量依赖性,见表2,表2是ActV体内抑制肿瘤生长抑制率的数据方差分析(按体积计算)。
表2
并且小鼠表征指标之一的体重随给药时间的变化并不明显(见图3)。初步提示在高剂量长期给药情况下,表现出毒性较低、安全性较高的特点。
实验终止时,剥离荷瘤小鼠体内的肿瘤,称重,比较对照组和两组不同给药剂量的实验组之间肿瘤质量,计算肿瘤生长抑制率,10μg/kg组的抑制率为43.44%,50μg/kg组的抑制率为72.22%,见表3,表3ActV体内抑制肿瘤生长抑制率的数据方差分析(按质量计算),表3结果说明是有统计学意义,并且与比较组间肿瘤体积的结果一致。图4是对C57BL/6J小鼠皮下接种鼠源性肝癌细胞Hepa1-6体内抗肿瘤活性检测中ActV两个不同剂量(10μg/kg和50μg/kg)及对照组的荷瘤小鼠和剥离后肿瘤的照片。
表3
最后所应当说明的是,以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非对本发明保护范围的限制,尽管参照较佳实施例对本发明作了详细说明,本领域的普通技术人员应当理解,可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换,而不脱离本发明技术方案的实质和范围。
Claims (6)
1、放线菌素类化合物放线菌素V在制备抗肝癌药物中的应用。
3、根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述放线菌素V的分子量为1268。
4、根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述放线菌素V是由南海海洋链霉菌Streptomyces zhapoensis H41-26的发酵培养物的乙酸乙酯粗提物中分离纯化得到的。
5、根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述抗肝癌药物的剂型包括片剂、丸剂、胶囊剂、颗粒剂、溶液剂、混悬剂或乳剂。
6、根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述抗肝癌药物为肝癌化疗药物。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CNA2009100406940A CN101601856A (zh) | 2009-06-30 | 2009-06-30 | 放线菌素类化合物放线菌素v在制备抗肝癌药物中的应用 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CNA2009100406940A CN101601856A (zh) | 2009-06-30 | 2009-06-30 | 放线菌素类化合物放线菌素v在制备抗肝癌药物中的应用 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN101601856A true CN101601856A (zh) | 2009-12-16 |
Family
ID=41467850
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CNA2009100406940A Pending CN101601856A (zh) | 2009-06-30 | 2009-06-30 | 放线菌素类化合物放线菌素v在制备抗肝癌药物中的应用 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN101601856A (zh) |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN102391967A (zh) * | 2011-11-17 | 2012-03-28 | 中国科学院微生物研究所 | 一株链霉菌及其在生产放线菌素中的应用 |
CN110386992A (zh) * | 2018-04-16 | 2019-10-29 | 中国科学院上海生命科学研究院 | 具有α-糖苷酶抑制活性的酰基他定类化合物、其制备方法及应用 |
-
2009
- 2009-06-30 CN CNA2009100406940A patent/CN101601856A/zh active Pending
Cited By (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN102391967A (zh) * | 2011-11-17 | 2012-03-28 | 中国科学院微生物研究所 | 一株链霉菌及其在生产放线菌素中的应用 |
CN102391967B (zh) * | 2011-11-17 | 2013-01-16 | 中国科学院微生物研究所 | 一株链霉菌及其在生产放线菌素中的应用 |
CN110386992A (zh) * | 2018-04-16 | 2019-10-29 | 中国科学院上海生命科学研究院 | 具有α-糖苷酶抑制活性的酰基他定类化合物、其制备方法及应用 |
CN110386992B (zh) * | 2018-04-16 | 2022-06-07 | 中国科学院分子植物科学卓越创新中心 | 具有α-糖苷酶抑制活性的酰基他定类化合物、其制备方法及应用 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN101972247A (zh) | 15-苄亚基-14-脱氧-11,12-脱氢穿心莲内酯衍生物的药物用途 | |
CN107556361A (zh) | 裂环羽扇豆烷衍生物及其抗肿瘤用途 | |
CN101601856A (zh) | 放线菌素类化合物放线菌素v在制备抗肝癌药物中的应用 | |
CN102002081B (zh) | 9-O-β-D-葡萄糖基化四氢小檗红碱、其制法及其用途 | |
CN109867649B (zh) | 一种双黄酮类化合物及其制备方法与应用 | |
CN1823787A (zh) | 灵芝酸在制备癌转移抑制剂中的应用 | |
CN109810113A (zh) | 一种生物碱化合物及其制备方法与应用 | |
CN114805470A (zh) | 一种偏诺皂苷元-精氨酸衍生物及其制备方法和在制备抗非小细胞肺癌药物中的用途 | |
CN101317835B (zh) | 斑蝥素及其衍生物在制备肿瘤化疗增敏药物中的应用 | |
CN106749088A (zh) | 一类新型溴酚‑噻唑类化合物及其制备和药物与用途 | |
CN101862313A (zh) | 蒽环类化合物在制备抗乳腺癌药物中的应用 | |
CN115300624A (zh) | 人参皂苷联合pd-1阻断剂在制备抗头颈鳞癌药物中的应用 | |
CN108796022A (zh) | 柴胡皂苷元a和d的制备方法及应用 | |
CN106265619A (zh) | Dfmo或dfmo和姜提取物在制备食管癌和肝癌的预防及临床治疗的药物中的应用 | |
CN102688228A (zh) | 含有芹菜素及芹菜素类衍生物和冬凌草甲素及冬凌草甲素类衍生物的药物组合物及其应用 | |
CN101541717A (zh) | 一种反式苯丙烯酸衍生物及其制备方法和应用 | |
CN102335180B (zh) | 乌苏烷类化合物在制备抗肿瘤药物中的应用 | |
CN105085221B (zh) | 具有抗真菌和抗肿瘤活性的化合物及其制备方法与应用 | |
CN105017352B (zh) | 一种吲哚生物碱苷及其应用 | |
CN103467258B (zh) | 一种木脂素类化合物及其制备方法和用途 | |
CN101538247A (zh) | 一种生物碱类化合物及其制备方法 | |
CN106138067A (zh) | 蟾蜍二烯内酯类化合物在制备抗胃癌药物中的应用 | |
CN110496225A (zh) | 千金藤碱与自噬抑制剂联用在制备治疗肝癌药物中的应用 | |
CN109602775B (zh) | 乳苣醇提物在制备抗乳腺癌药物中的用途 | |
CN103880678A (zh) | 苯甲酸衍生物及其制备与降糖应用 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
C10 | Entry into substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
C12 | Rejection of a patent application after its publication | ||
RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20091216 |