CN101597273B - 一种低聚体葡萄籽原花青素的制备方法 - Google Patents
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Abstract
一种低聚体葡萄籽原花青素的制备方法,将葡萄籽清水冲洗干净后,加入乙醇溶液中浸提,过滤除去葡萄籽,收集提取液;再将上述提取液用NaOH溶液调节,轻微搅拌,析出砖红色原花青素粗沉淀物,抽滤并收集沉淀物;将沉淀物置于乙醇溶液中溶解,收集含有溶解原花青素的滤液;再将滤液用纳滤膜过滤,收集阻留沉淀在滤膜上的低聚体原花青素,将沉淀物分别用丙酮和乙醇洗涤,置干燥箱中干燥后即得低聚体原花青素产品。
Description
技术领域:
本发明涉及一种低聚体葡萄籽原花青素的制备方法,采用乙醇溶液浸提、酸碱条件纯化、纳滤膜分离的方法制备低聚体原花青素,属于生物技术天然活性物质提取领域。
背景技术:
原花青素,国外多称为procyanidine或proanthocyanidins,是一种由不同数量的儿茶素或表儿茶素单体聚合而成的天然植物化学物,广泛存在于桔、柠檬、橄榄、葡萄等多种植物体中,具有良好的抗氧化、清除自由基功效,在食品、保健品、药品等领域有较多应用。其中葡萄籽易于保藏和处理,并且含有丰富的原花青素,所以在现有的技术中多是以葡萄籽为原料提取原花青素。葡萄籽原花青素含有2-10个儿茶素单体,通常将含有2-4个单体的儿茶素称为低聚体原花青素(oligomersic procyanidine),含有4个以上单体的儿茶素称为高聚体原花青素(polymersic procyanidine)。目前认为低聚体原花青素的生物活性大于高聚体原花青素,因而在原花青素产品中低聚体成分含量高低成为评价产品质量的主要指标。目前国内外市场销售和应用的原花青素产品主要是采用溶剂浸提结合柱层析分离纯化的方法制备,其低聚体含量为30%左右,该方法存在着提取工艺复杂、提取率低、分离柱应用寿命短、生产成本高等诸多缺陷。
发明内容:
本发明的目的为了克服目前原花青素提取方法存在的产品中低聚体含量低、工艺复杂、生产成本高的缺陷,提供一种用超滤膜和纳滤膜分离纯化低聚体葡萄籽原花青素的新方法,低聚体成分含量可高达60%以上,比目前国内外同类产品增加约一倍。
为实现上述发明目的,本方法主要技术内容为:先用乙醇溶液浸提获得葡萄籽原花青素粗提取物,再分别在酸性和碱性条件下进行纯化处理,去除非原花青素类物质,经采用超滤膜初滤除去其中的高聚体成分后,最后用纳滤膜分离获得低聚体原花青素产品。具体提取分离方法如下:
1、乙醇溶液浸提取适量葡萄籽,用清水冲洗干净,置于2-3倍体积的30%-40%的乙醇溶液中浸提20-30小时,过滤除去葡萄籽,收集提取液。
2、酸碱条件纯化将上述提取液用NaOH溶液调节PH值8.0-9.0,轻微搅拌2-3分钟,静置5-10小时,析出砖红色原花青素粗沉淀物,抽滤并收集沉淀物。再将该沉淀置于10倍体积的、PH值3.0-5.0的、30%-40%的乙醇溶液中,使原花青素沉淀溶解,抽滤弃除不溶解的非原花青素沉淀物,收集含有溶解原花青素的滤液。
3、滤膜分离将上述含有溶解原花青素的滤液先用孔径0.001μm的超滤膜、压力为0.25MPa过滤,弃除阻留沉淀在滤膜上的高聚体原花青素,再将滤液在压力为1.0Mpa条件下,用孔径0.0001μm的纳米膜过滤,收集阻留沉淀在滤膜上的低聚体原花青素,将沉淀物分别用10-15ml丙酮和乙醇各洗涤一次,50-60℃干燥后即得低聚体原花青素产品。
具体实施方案:
本发明可按下列实施例进行具体说明其制备过程和效果。
实施例:
1、取100克葡萄籽,用清水冲洗干净后,加入200ml35%乙醇溶液中浸提20小时,过滤除去葡萄籽,收集提取液。
2、将上述提取液用NaOH溶液调节PH值8.5,轻微搅拌3分钟,静置6小时,析出砖红色原花青素粗沉淀物,抽滤并收集沉淀物,约为1.5克。将沉淀物置于15ml、PH值4.0的、35%的乙醇溶液中溶解,抽滤除去不溶解的非原花青素沉淀物,收集含有溶解原花青素的滤液。
3、将上述滤液用孔径为0.001μm的超滤膜、压力为0.25MPa过滤除去沉淀物,再将滤液在压力为1.0Mpa条件下,用孔径0.0001μm的纳滤膜过滤,收集阻留沉淀在滤膜上的低聚体原花青素,将沉淀物分别用10ml丙酮和乙醇各洗涤一次,置60℃干燥箱中干燥30分钟后即得低聚体原花青素产品。
Claims (1)
1.一种低聚体葡萄籽原花青素的制备方法,包括:溶液浸提、纯化处理、滤膜分离、干燥过程,其特征在于:葡萄籽清水冲洗干净后,加入200ml35%乙醇溶液中浸提20小时,过滤除去葡萄籽,收集提取液;再将上述提取液用NaOH溶液调节pH值8.5,轻微搅拌3分钟,静置6小时,析出砖红色原花青素粗沉淀物,抽滤并收集沉淀物;将沉淀物置于15ml、pH值4.0的、35%的乙醇溶液中溶解,抽滤除去不溶解的非原花青素沉淀物,收集含有溶解原花青素的滤液;将上述滤液用孔径为0.001μm的超滤膜、压力为0.25MPa过滤除去沉淀物,再将滤液在压力为1.0MPa条件下,用孔径0.0001μm的纳滤膜过滤,收集阻留沉淀在滤膜上的低聚体原花青素,将沉淀物分别用10ml丙酮和乙醇各洗涤一次,置60℃干燥箱中干燥30分钟后即得低聚体原花青素产品。
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