CN101596273A - 益心舒中药制剂中麦冬的质量控制方法 - Google Patents

Abstract

本发明是一种益心舒中药制剂中麦冬的质量控制方法，属于药品的技术领域。益心舒中药制剂是以人参、黄芪、丹参、麦冬、五味子等七味药组成，具有益气复脉，活血化瘀，养阴生津的功效，目前临床上广泛用于治疗心绞痛、心肌缺血、各型心率失常、房性早搏、胸痛及冠心病心绞痛患等。本发明提供了一种益心舒中药制剂中麦冬的质量控制方法，该方法的提供直接向有关的生产益心舒制剂中麦冬的品质提供了检测的指标、检测的手段、技术方法等等；以便更好的控制该中药制剂的质量，保证用药的安全性和疗效，能够更好的指导生产，为消费者提供一种品质优良的产品。

Description

益心舒中药制剂中麦冬的质量控制方法

技术领域：

本发明涉及益心舒中药制剂中麦冬的质量控制方法，属于药品的技术领域。

背景技术：

如今，在中药制剂作为最具发展潜力的药物资源已经被全世界所认知的情况下，我国政府已经建立了一系列广泛的政策来应对传统中药制剂标准化，现代化的要求。其中最重要的就是如何控制中药制剂的质量。目前我们最常用的方法就是选择中药材的主要活性成分或其指标性成份，对这些成分的鉴别和含量测定以达到控制这些中药制剂质量的目的。但是，这种只针对中药及中药制剂指标性成分进行控制的方法并不能科学而全面的确保中药的药效。麦冬提取物具有明显的抗心肌缺血作用，并呈现一定的量效关系，麦冬有促进心肌损伤愈合和缩小梗塞范围及坏死区域的作用，对实验性动物心肌缺血缺氧性损害有预防和治疗作用。而益心舒中药制剂是以人参、麦冬、五味子等七味药经加工制成的制剂，临床上广泛用于治疗心绞痛、心肌缺血、各型心率失常、房性早搏、胸痛及冠心病心绞痛患等。其中麦冬具有抗血栓、抗心肌缺血、抗炎、抗肿瘤、降血糖等作用，所以在益心舒制剂中麦冬的质量直接关系到该制剂的疗效，目前，虽然对麦冬的有效成分麦冬皂苷和高异黄酮等有效成分的药理作用报道较多，但对于其药材及其相关制剂的对于有效成分的检测值得研究，从而确保相关制剂的品质，所以对于麦冬的质量控制方法的提高从而确保益心舒中药制剂的疗效显得十分必要。

发明内容

本发明的目的在于：提供一种益心舒中药制剂中麦冬的质量控制方法，这种方法向相关的生产、检测机构提供了检测的指标、检测的手段、技术方法等等；以便更好的控制益心舒中药制剂的质量，为临床提供一种疗效确切的益心舒中药制剂，保证用药的安全和疗效，同时能够更好的指导生产，使消费者能全面认识益心舒中药制剂的品质。

本发明涉及益心舒中药制剂中麦冬的质量控制方法，它包括麦冬的产地、采集、加工、鉴别、含测项目作为该制剂中麦冬质量控制的指标。

本发明所述的益心舒中药制剂中麦冬的质量控制方法，是采用以下方法的部分或全部：

对于麦冬的产地为浙江、四川、贵州、云南、广西、安徽、福建地区。

对于麦冬的采集时间为每年的3-8月份采挖。

对于麦冬的采集加工方法采用以下部分或全部：

方法1：将挖取后的麦冬，剪下块根，洗净泥土，暴晒之后，堆通风处，使其返潮，蒸发水汽，摊开再晒，如此反复几次后。晒干，除净须根、杂质即可。

方法2：将挖取后的麦冬，剪下块根，洗净泥土，晒干，堆通风处。

对于麦冬的炮制加工方法采用以下部分或全部：

方法1：取原药材，除去杂质，洗干净，微润，切碎或轧扁，干燥。

方法2：取原药材淋水少许微润，加朱砂拌匀，取出，晾干。

对于麦冬的鉴别方法采用以下部分或全部：

方法1：采用薄层色谱法，使用硅胶G或硅胶GF₂₅₄或硅胶H为薄层板，以麦冬对照药材、麦冬皂苷D、鲁斯可皂苷元、薯蓣皂苷元、麦冬皂苷B、假叶树皂苷元、β-谷甾醇、葡萄糖中全部或部分品种作为对照品，样品经前处理，适当展开剂展开，置紫外光灯下检视、氨气熏后再置紫外光灯下检视、或喷以相应显色剂显色的方法；

方法2：采用高效液相色谱法或蒸发光散射检测器与高效液相色谱联用法，样品经前处理，使用C8或C18类型填料的色谱柱，以适当的流动相，以麦冬对照药材、麦冬皂苷D、鲁斯可皂苷元、薯蓣皂苷元、麦冬皂苷B、假叶树皂苷元、β-谷甾醇、葡萄糖中全部或部分品种作为对照品，检测波长在200～600nm范围内；

对于麦冬含量采用采用以下部分或全部：：

方法1：蒸发光散射检测器(ELSD)作为检测手段，利用HPLC法测定麦冬中麦冬皂苷B或/和麦冬皂苷D的含量，使用C18类型填料的色谱柱，以乙睛、水在常规的合适比例条件下为流动相，检测波长在200～600nm。

方法2：HPLC法测定麦冬中高异黄酮的，以甲基麦冬黄烷酮A或/和甲基麦冬黄烷酮B作为检测指标，使用C18类型填料的色谱柱，以甲醇、乙腈、甲酸、水在常规的合适比例条件下为流动相，检测波长在200～600nm。

本发明所述的益心舒中药制剂中麦冬的质量控制方法，是采用以下方法的作为质量控制方法：

对于麦冬的产地为四川、云南地区。

对于麦冬的采集时间为每年的3-8月份采挖。

对于麦冬的采集加工方法为：将挖取后的麦冬，剪下块根，洗净泥土，暴晒1-5天之后，堆通风处，使其返潮，蒸发水汽1-5天，摊开再晒，如此反复2-5次后。晒干，除净须根、杂质即可。

对于麦冬的炮制加工方法为取原药材，除去杂质，洗干净，微润，切碎或轧扁，干燥。

对于麦冬的鉴别方法为采用薄层色谱法，使用硅胶G薄层板，以麦冬对照药材、麦冬皂苷D、麦冬皂苷B的全部或部分品种作为对照品，样品经前处理，适当展开剂展开，置紫外光灯下检视、氨气熏后再置紫外光灯下检视、或喷以相应显色剂显色的方法；

对于麦冬含量采用以下方法：蒸发光散射检测器(ELSD)作为检测手段，利用HPLC法测定麦冬中麦冬皂苷D的含量，使用C18类型填料的色谱柱，以甲醇、乙睛、水在常规的合适比例条件下为流动相，检测波长在200～600nm。

本发明所述的益心舒中药制剂中麦冬的质量控制方法，是采用以下方法的作为质量控制方法：

对于麦冬的产地为：四川绵阳地区。

对于麦冬的采集期为：每年3月份且生长期在两年以上。

对于麦冬的采集加工方法为：将挖取后的麦冬，剪下块根，洗净泥土，暴晒3-4天，堆通风处，使其返潮，蒸发水汽3日，摊开再晒，如此反复2-3次。晒干后，除净须根、杂质即可。

对于麦冬的炮制加工方法为：取原药材，除去杂质，洗干净，微润，切碎或轧扁，干燥。

对于麦冬的鉴别方法为：取麦冬药材粗粉20g，加硅藻土20g，加水50ml搅拌均匀，在80℃干燥20分钟，加乙酸乙酯120ml，加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇2ml使溶解，作为供试品溶液。另取麦冬对照药材1g，加水100ml煎煮15分钟，滤过，滤液用盐酸调节pH至1，用乙醚30ml振摇提取一次，乙醚液挥干，残渣加乙醇1ml溶解，作为对照药材溶液。吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-丙酮(4∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点清晰。分别置日光及紫外光灯(365nm)下检视，供试品色谱中，分别在与对照品色谱相应位置上，显相同颜色的斑点或荧光斑点。

对于麦冬的含测方法为：以蒸发光散射检测器(ELSD)作为检测手段，利用HPLC法测定麦冬中麦冬皂苷D的含量

色谱条件色谱柱：AltlimaCI：色谱柱(250x4.6mm，5um)：柱温：30℃；进样量：20ul，流速1ml/min，流动相为乙睛和水，梯度洗脱。蒸发光散射检测器：漂移管温度：100℃；雾化器气体压力：2.9bar。

对照品溶液的制备精密称取麦冬皂昔D对照品适量，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，即得。

供试品溶液的制备取麦冬60℃干燥4小时，研成粗粉，混匀，取粗粉约100g，精密称定，置500ml具塞三角瓶中，精密加入甲醇100ml，称重，热水回流4小时，放冷，再称重，用甲醇补足减失重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液50ml，减压回收甲醇至干，残渣加水25ml使溶解，转移至分液漏斗中，用乙醚提取2次，每次15ml，弃去乙醚层，水层再用水饱和的正丁醇提取4次(20ml、20ml、15ml、15m)，合并正丁醇提取液，置另一分液漏斗中，用正丁醇饱和的氨试液洗涤2次，每次5ml，弃去水层，提取液减压回收正丁醇，残渣加甲醇使溶解，转移至10ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。

测定法分别精密吸取上述对照液与供试品溶液20ul，注入高效液相色谱仪，用蒸发光散射检测器进行检测，即得。

与现有技术相比，本发明提供的质量控制方法能更好的、更进一步的控制一种益心舒中药制剂的产品质量，保证用药的安全性，使用本发明后，使生产该产品的单位或检测机构从源头原料麦冬来控制，确保该益心舒的疗效，能够保证药物制成品的质量；我们在进行试验时发现：为了达到益心舒中药制剂的确切疗效，就必须从源头开始控制，包括麦冬的产地、采集、加工、鉴别、含测项目。这样更有利于指导生产，让消费者全面认识产品品质、放心使用这类药品。同时本发明针对麦冬中含量测定指标成分进行了研究，结果发现，麦冬中主要含皂昔类成分，黄酮类和糖类，根据药理实验表明，皂昔类成分为活性物质，其中麦冬皂昔D为其中一大类成分。因此，自制了麦冬皂昔D作为麦冬药材的化学对照品，对麦冬进行了含量测定。由于皂昔为一类极性较大，结构复杂的化合物，无紫外吸收，再加上麦冬皂昔测定经常受糖的干扰，若采用紫外检测末端吸收法，则灵敏度低，且有干扰峰，无法使用。因此，我们选择蒸发光散射检测器(ELSD)作为检测手段，利用HPLC法测定川麦冬中皂昔的含量，达到了满意的结果。

为证明利用本发明提供的麦冬质量控制方法能更好的控制益心舒中药制剂的产品质量，得到的药物具有有效的效果，申请人进行了一系列实验；

试验例1  益心舒中药制剂中麦冬产地的考察

本实验通过对相同采集时期以及相同加工方法的四川麦冬和杭州麦冬的益心舒中药制剂中麦冬皂苷类成分的含量测定来考察不同产地的麦冬品质。

1.1  仪器与试剂

美国wATERS510型泵；法国SEDEX75型蒸发光散射检测器(ELSD)；甲醇，乙为色谱纯，水为双蒸水；SrAd3y色谱数据工作站：麦冬皂昔标准品(麦冬皂普D、麦冬皂普B)：麦冬药材采集于四川和杭州及江苏。

1.2  试验方法

1.2.1  色谱及检测条件

色谱柱：依利特Hypersi lODSCl8柱(4.6又200mnf，25pm)；柱温：25Co；流动相：A相为乙睛，B相为蒸馏水，采用梯度洗脱；流速：0.8ml/min；ELDS检测器漂移管温度：40℃；载气流速：3.4BAr；理论塔板数按麦冬皂昔D计算应不低于4000。

1.2.2  对照品溶液制备

精密称取麦冬皂昔D标准品10.00mg，以水溶解，定容于10ml容量瓶中，摇匀，配制成1.000mg/ml的对照品溶液。

精密称取麦冬皂普B标准品10.00mg，以水溶解，定容于10ml容量瓶中，摇匀，配制成1.000mg/ml的对照品溶液。

精密称取麦冬皂普D”标准品8.00mg，以水溶解，定容于10ml容量瓶中，摇匀，配制成0.800mg/ml的对照品溶液。

1.2.3  供试品溶液制备

不同产地麦冬药材，分别精密称取10g样品，以20ml的30％乙醇浸24h，加液20ml渗渡，渗滚液浓缩，定容至50ml，取2ml，稀释并定容于10ml容量瓶中，0.45pm微孔滤膜过滤，滤液为供试品溶液，待测。

1.2.4  测定法

分别吸取对照品及各供试品溶液10pl注入液相色谱仪，将峰面积及浓度均取常用对数后用外标法计算。

1.3  结果和讨论

1.3.1  样品测定结果

不同产地麦冬药材制剂样品，单位(mg/g)，结果见表1-1

1.3.2  讨论

研究结果表明，不同产地麦冬中的皂普类成分含量差异较大，说明不同产地药材的种内变异造成药材品质的差异。其中以四川麦冬和杭州麦冬为佳，其中四川麦冬品质更佳，其中四川麦冬中总皂苷的含量最高，故认为综合评价其品质优良。

试验例2  益心舒中药制剂中麦冬采集时期的考察

本实验通过对不同采集期四川麦冬中麦冬皂苷D的含量测定来考察的麦冬品质。

2.1  仪器与材料

蒸发光散射检测器(ELSD)作为检测手段，利用HPLC法测定麦冬中麦冬皂苷D的含量，一年生、二年生、三年生、四年生麦冬。

2.2  试验方法

2.2.1  色谱条件  色谱柱：Altl imaCI：色谱柱(250x4.6mm，5um)：柱温：30℃；进样量：20ul，流速1ml/min，流动相为乙睛和水，梯度洗脱。蒸发光散射检测器：漂移管温度：100℃；雾化器气体压力：2.9bar。

2.2.2  对照品溶液的制备

精密称取麦冬皂昔D标准品12.02mg，以水溶解，定容于10ml容量瓶中，摇匀，配制成1.202mg/ml的对照品溶液。

精密称取麦冬皂普B标准品10.00mg，以水溶解，定容于10ml容量瓶中，摇匀，配制成1.000mg/ml的对照品溶液。

精密称取麦冬皂普D”标准品8.00mg，以水溶解，定容于10ml容量瓶中，摇匀，配制成0.800mg/ml的对照品溶液。

2.2.3  供试品溶液的制备  取麦冬60℃干燥4小时，研成粗粉，混匀，取粗粉约100g，精密称定，置500ml具塞三角瓶中，精密加入甲醇100ml，称重，热水回流4小时，放冷，再称重，用甲醇补足减失重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液50ml，减压回收甲醇至干，残渣加水25ml使溶解，转移至分液漏斗中，用乙醚提取2次，每次15ml，弃去乙醚层，水层再用水饱和的正丁醇提取4次(20ml、20ml、15ml、15m)，合并正丁醇提取液，置另一分液漏斗中，用正丁醇饱和的氨试液洗涤2次，每次5ml，弃去水层，提取液减压回收正丁醇，残渣加甲醇使溶解，转移至10ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。

2.2.4  测定法  分别精密吸取上述对照液与供试品溶液20ul，注入高效液相色谱仪，用蒸发光散射检测器进行检测，即得。

2.3  结果及讨论

2.3.1  结果

不同采集期麦冬药材样品，单位(mg/g)，结果见表2-1

2.3.2  讨论

研究结果表明，不同采集期麦冬中的皂普类成分含量差异较大，说明不同采集期采集的药材的种内变异造成药材品质的差异。其中以两年以后产的麦冬为佳，三年以后产的麦冬虽然总皂苷的含量比两年期的高，但是考虑到增加的总皂苷并不明显，所以以两年期后采集的麦冬为佳。

试验例3益心舒中药制剂中麦冬的加工方法考察

本实验通过对四川麦冬不同的加工方法，依其总皂苷的含量为指标来评价麦冬加工方法的考察。

3.1  仪器与材料

蒸发光散射检测器(ELSD)作为检测手段，利用HPLC法测定麦冬中麦冬皂苷D的含量。

样品A：挖取后的麦冬，剪下块根，洗净泥土，暴晒3-4天，堆通风处，使其返潮，蒸发水汽3日，摊开再晒，如此反复2-3次。晒干后，除净须根、杂质即可。

样品B：挖取后的麦冬，剪下块根，洗净泥土，晒干后，除净须根、杂质即可。

3.2  试验方法

3.2.1  色谱条件  色谱柱：AltlimaCI：色谱柱(250x4.6mm，5um)：柱温：30℃；进样量：20ul，流速1ml/min，流动相为乙睛和水，梯度洗脱。蒸发光散射检测器：漂移管温度：100℃；雾化器气体压力：2.9bar。

3.2.2  对照品溶液的制备

精密称取麦冬皂昔D标准品12.02mg，以水溶解，定容于10ml容量瓶中，摇匀，配制成1.202mg/ml的对照品溶液。

精密称取麦冬皂普B标准品10.00mg，以水溶解，定容于10ml容量瓶中，摇匀，配制成1.000mg/ml的对照品溶液。

精密称取麦冬皂普D”标准品8.00mg，以水溶解，定容于10ml容量瓶中，摇匀，配制成0.800mg/ml的对照品溶液。

3.2.3  供试品溶液的制备  取麦冬60℃干燥4小时，研成粗粉，混匀，取粗粉约100g，精密称定，置500ml具塞三角瓶中，精密加入甲醇100ml，称重，热水回流4小时，放冷，再称重，用甲醇补足减失重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液50ml，减压回收甲醇至干，残渣加水25ml使溶解，转移至分液漏斗中，用乙醚提取2次，每次15ml，弃去乙醚层，水层再用水饱和的正丁醇提取4次(20ml、20ml、15ml、15m)，合并正丁醇提取液，置另一分液漏斗中，用正丁醇饱和的氨试液洗涤2次，每次5ml，弃去水层，提取液减压回收正丁醇，残渣加甲醇使溶解，转移至10ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。

3.2.4  测定法  分别精密吸取上述对照液与供试品溶液20ul，注入高效液相色谱仪，用蒸发光散射检测器进行检测，即得。

3.3  结果及讨论

3.3.1  结果

不同加工方法麦冬药材样品，单位(mg/g)，结果见表3-1

3.3.2  讨论

研究结果表明，依照样品A采集加工的麦冬以及依照样品B采集加工的麦冬中的皂普类成分含量差异较大，说明不同的样品加工方法对麦冬中的总皂苷成分影响较大，其中样品A的加工方法为佳。可以保证麦冬中总皂苷的含量，所以以样品A加工方法的麦冬为佳。

试验例4  益心舒中药制剂中麦冬鉴别的稳定性考察

本实验通过对5批麦冬进行鉴别方法学考察，以确定该方法的稳定性。

4.1  标准溶液的制备

4.1.1  取麦冬药材20g，加硅藻土20g，加水50ml搅拌均匀，在80℃干燥20分钟，加乙酸乙酯120ml，加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇2ml使溶解，作为供试品溶液。

4.1.2  另取麦冬对照药材1g，加水100ml煎煮15分钟，滤过，滤液用盐酸调节pH至1，用乙醚30ml振摇提取一次，乙醚液挥干，残渣加乙醇1ml溶解，作为对照药材溶液。

4.2  鉴别  吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-丙酮(4∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点清晰。分别置日光及紫外光灯(365nm)下检视，供试品色谱中，分别在与对照品色谱相应位置上，显相同颜色的斑点或荧光斑点。

4.3结果供试品与对照药材和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；同时5批样品均比较稳定，说明此方法可以作为麦冬药材的鉴别方法来进行麦冬药材的鉴别。

试验例5  益心舒中药制剂中麦冬含测的方法学考察

5.1  仪器条件：蒸发光散射检测器(ELSD)，高效液相色谱法测定。

5.2  色谱条件：色谱柱：AltlimaCI：色谱柱(250x4.6mm，5um)：柱温：30℃；进样量：20ul，流速1ml/min，流动相为乙睛和水，梯度洗脱。蒸发光散射检测器：漂移管温度：100℃；雾化器气体压力：2.9bar。

5.3  测定法

5.3.1  对照品溶液的制备  精密称取麦冬皂昔D对照品适量，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，即得。

5.3.2  供试品溶液的制备  取益心舒制剂约10g，精密称定，置500ml具塞三角瓶中，精密加入甲醇100ml，称重，热水回流4小时，放冷，再称重，用甲醇补足减失重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液50ml，减压回收甲醇至干，残渣加水25ml使溶解，转移至分液漏斗中，用乙醚提取2次，每次15ml，弃去乙醚层，水层再用水饱和的正丁醇提取4次(20ml、20ml、15ml、15m)，合并正丁醇提取液，置另一分液漏斗中，用正丁醇饱和的氨试液洗涤2次，每次5ml，弃去水层，提取液减压回收正丁醇，残渣加甲醇使溶解，转移至10ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。

5.3.3  分别精密吸取上述对照液与供试品溶液20ul，注入高效液相色谱仪，用蒸发光散射检测器进行检测，即得。

5.4  精密度试验

取益心舒中药制剂粗粉按1.2.3方法制备供试品溶液，吸取10ul，重复进样6次，测定样品中麦冬皂苷D的含量见表六，RSD为1.8％，测定方法精密度良好。

麦冬皂苷D的含量测定的精密度试验5-1，单位(mg/g)

5.5  稳定性试验

取四川麦冬药材(080403)粗粉，按1.2.3项下供试液的制备方法制备供试液，分别于0h、1h、2h、4h、8h小时进样10ul，测定峰面积的RSD为2.2说明供试品溶液在8h内稳定性良好。

5.6  重复性试验

取四川麦冬药材(080403)粗粉，按供试品溶液方法平行制备5份，分别进样10μl，进样，测定含量。计算麦冬皂苷D的平均含量为0.6mg/g，RSD为1.5％，测定方法重复性良好，结果见表。

麦冬皂苷D含量测定的重复性试验5-2，单位(mg/g)

5.7  样品测定

按前述方法制备供试液和对照溶液，分别进样10μl，记录色谱图，测定峰面积，按外标法计算含量，5个批样品中麦冬皂苷D的含量测定结果见表四。

5批样品中麦冬皂苷D含量测定结果5-3，单位(mg/g)

试验例6  不同产地的麦冬在益心舒中药制剂中麦冬总皂苷的影响

本实验通过对四川麦冬、广西麦冬在益心舒中药制剂中麦冬总皂苷的含量为指标来评价麦冬对益心舒的影响。

6.1  仪器与材料

蒸发光散射检测器(ELSD)作为检测手段，利用HPLC法测定麦冬中麦冬皂苷D的含量。

6.2  试验方法

6.2.1  色谱条件  色谱柱：AltlimaCI：色谱柱(250x4.6mm，5um)：柱温：30℃；进样量：20ul，流速1ml/min，流动相为乙睛和水，梯度洗脱。蒸发光散射检测器：漂移管温度：100℃；雾化器气体压力：2.9bar；四川麦冬的益心舒制剂(川制)、广西麦冬的益心舒制剂(广制)。

6.2.2  对照品溶液的制备

精密称取麦冬皂昔D标准品12.02mg，以水溶解，定容于10ml容量瓶中，摇匀，

配制成1.202mg/ml的对照品溶液。

精密称取麦冬皂普B标准品10.00mg，以水溶解，定容于10ml容量瓶中，摇匀，配制成1.000mg/ml的对照品溶液。

精密称取麦冬皂普D”标准品8.00mg，以水溶解，定容于10ml容量瓶中，摇匀，配制成0.800mg/ml的对照品溶液。

6.2.3  供试品溶液的制备  分别取四川麦冬的益心舒制剂、广西麦冬的益心舒制剂，精密称定，置500ml具塞三角瓶中，精密加入甲醇100ml，称重，热水回流4小时，放冷，再称重，用甲醇补足减失重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液50ml，减压回收甲醇至干，残渣加水25ml使溶解，转移至分液漏斗中，用乙醚提取2次，每次15ml，弃去乙醚层，水层再用水饱和的正丁醇提取4次(20ml、20ml、15ml、15m)，合并正丁醇提取液，置另一分液漏斗中，用正丁醇饱和的氨试液洗涤2次，每次5ml，弃去水层，提取液减压回收正丁醇，残渣加甲醇使溶解，转移至10ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。

6.2.4  测定法  分别精密吸取上述对照液与供试品溶液20ul，注入高效液相色谱仪，用蒸发光散射检测器进行检测，即得。

6.3  结果及讨论

6.3.1  结果

不同产地麦冬的益心舒制剂样品，单位(mg/g)，结果见表6-1

6.3.2  讨论

研究结果表明，四川麦冬的益心舒制剂以及广西麦冬的益心舒制剂中的皂普类成分含量差异较大，说明不同产地的麦冬对益心舒制剂中皂苷类成分影响较大，以上对比中四川麦冬的益心舒制剂可保证总皂苷的含量为最佳。

Claims (4)

1、益心舒中药制剂中麦冬的质量控制方法，其特征在于：它是将麦冬的产地、采集、加工、鉴别、含测项目一项或多项作为该制剂中麦冬质量控制的指标。

2、根据权利要求1所述的益心舒中药制剂中麦冬的质量控制方法，其特征在于采用以下方法的部分或全部：

(1)麦冬的产地为：浙江、四川、贵州、云南、广西、安徽、福建地区。

(2)麦冬的采集时间为：每年的3-8月份采挖。

(3)麦冬的采集加工方法为：

方法1：将挖取后的麦冬，剪下块根，洗净泥土，暴晒之后，堆通风处，使其返潮，蒸发水汽，摊开再晒，如此反复几次后。晒干，除净须根、杂质即可。

方法2：将挖取后的麦冬，剪下块根，洗净泥土，晒干，堆通风处。

(4)麦冬的炮制加工方法为：

方法1：取原药材，除去杂质，洗干净，微润，切碎或轧扁，干燥。

方法2：取原药材淋水少许微润，加朱砂拌匀，取出，晾干。

(5)麦冬的鉴别方法为：

方法1：采用薄层色谱法，使用硅胶G或硅胶GF₂₅₄或硅胶H为薄层板，以麦冬对照药材、麦冬皂苷D、鲁斯可皂苷元、薯蓣皂苷元、麦冬皂苷B、假叶树皂苷元、β-谷甾醇、葡萄糖中全部或部分品种作为对照品，样品经前处理，适当展开剂展开，置紫外光灯下检视、氨气熏后再置紫外光灯下检视、或喷以相应显色剂显色的方法；

方法2：采用高效液相色谱法或蒸发光散射检测器与高效液相色谱联用法，样品经前处理，使用C8或C18类型填料的色谱柱，以适当的流动相，以麦冬对照药材、麦冬皂苷D、鲁斯可皂苷元、薯蓣皂苷元、麦冬皂苷B、假叶树皂苷元、β-谷甾醇、葡萄糖中全部或部分品种作为对照品，检测波长在200～600nm范围内；

(6)麦冬含量采用以下方法：

方法1：蒸发光散射检测器(ELSD)作为检测手段，利用HPLC法测定麦冬中麦冬皂苷B或/和麦冬皂苷D的含量，使用C18类型填料的色谱柱，以乙睛、水在常规的合适比例条件下为流动相，检测波长在200～600nm。

方法2：HPLC法测定麦冬中高异黄酮的，以甲基麦冬黄烷酮A或/和甲基麦冬黄烷酮B作为检测指标，使用C18类型填料的色谱柱，以甲醇、乙腈、甲酸、水在常规的合适比例条件下为流动相，检测波长在200～600nm。

3、根据权利要求1或2所述的益心舒中药制剂中麦冬的质量控制方法，其特征在于：

(1)麦冬的产地为：四川、云南地区。

(2)麦冬的采集时间为：每年的3-8月份采挖。

(3)麦冬的采集加工方法为：将挖取后的麦冬，剪下块根，洗净泥土，暴晒1-5天之后，堆通风处，使其返潮，蒸发水汽1-5天，摊开再晒，如此反复2-5次后。晒干，除净须根、杂质即可。

(4)麦冬的炮制加工方法为：取原药材，除去杂质，洗干净，微润，切碎或轧扁，干燥。

(5)麦冬的鉴别方法为：采用薄层色谱法，使用硅胶G薄层板，以麦冬对照药材、麦冬皂苷D、麦冬皂苷B的全部或部分品种作为对照品，样品经前处理，适当展开剂展开，置紫外光灯下检视、氨气熏后再置紫外光灯下检视、或喷以相应显色剂显色的方法；

(6)麦冬含量采用以下方法：蒸发光散射检测器(ELSD)作为检测手段，利用HPLC法测定麦冬中麦冬皂苷D的含量，使用C18类型填料的色谱柱，以甲醇、乙睛、水在常规的合适比例条件下为流动相，检测波长在200～600nm。

4、根据权利要求1～3所述的益心舒中药制剂中麦冬的质量控制方法，其特征在于：

(1)麦冬的产地为：四川绵阳地区。

(2)麦冬的采集期为：每年3月份且生长期在两年以上。

(3)麦冬的采集加工方法为：将挖取后的麦冬，剪下块根，洗净泥土，暴晒3-4天，堆通风处，使其返潮，蒸发水汽3日，摊开再晒，如此反复2-3次。晒干后，除净须根、杂质即可。

(4)麦冬的炮制加工方法为：取原药材，除去杂质，洗干净，微润，切碎或轧扁，干燥。

(5)麦冬的鉴别方法为：取麦冬药材粗粉20g，加硅藻土20g，加水50ml搅拌均匀，在80℃干燥20分钟，加乙酸乙酯120ml，加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇2ml使溶解，作为供试品溶液。另取麦冬对照药材1g，加水100ml煎煮15分钟，滤过，滤液用盐酸调节pH至1，用乙醚30ml振摇提取一次，乙醚液挥干，残渣加乙醇1ml溶解，作为对照药材溶液。吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-丙酮(4∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点清晰。分别置日光及紫外光灯(365nm)下检视，供试品色谱中，分别在与对照品色谱相应位置上，显相同颜色的斑点或荧光斑点。

(6)麦冬的含测方法为：以蒸发光散射检测器(ELSD)作为检测手段，利用HPLC法测定麦冬中麦冬皂苷D的含量

色谱条件色谱柱：AltlimaCI：色谱柱(250x4.6mm，5um)：柱温：30℃；进样量：20ul，流速1ml/min，流动相为乙睛和水，梯度洗脱。蒸发光散射检测器：漂移管温度：100℃；雾化器气体压力：2.9bar。

对照品溶液的制备精密称取麦冬皂昔D对照品适量，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，即得。

供试品溶液的制备取麦冬60℃干燥4小时，研成粗粉，混匀，取粗粉约100g，精密称定，置500ml具塞三角瓶中，精密加入甲醇100ml，称重，热水回流4小时，放冷，再称重，用甲醇补足减失重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液50ml，减压回收甲醇至干，残渣加水25ml使溶解，转移至分液漏斗中，用乙醚提取2次，每次15ml，弃去乙醚层，水层再用水饱和的正丁醇提取4次(20ml、20ml、15ml、15m)，合并正丁醇提取液，置另一分液漏斗中，用正丁醇饱和的氨试液洗涤2次，每次5ml，弃去水层，提取液减压回收正丁醇，残渣加甲醇使溶解，转移至10ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。测定法分别精密吸取上述对照液与供试品溶液20ul，注入高效液相色谱仪，用蒸发光散射检测器进行检测，即得。