CN101583630A - 精细粒度的真菌提取物几丁质-葡聚糖 - Google Patents

精细粒度的真菌提取物几丁质-葡聚糖 Download PDF

Info

Publication number
CN101583630A
CN101583630A CNA2007800499018A CN200780049901A CN101583630A CN 101583630 A CN101583630 A CN 101583630A CN A2007800499018 A CNA2007800499018 A CN A2007800499018A CN 200780049901 A CN200780049901 A CN 200780049901A CN 101583630 A CN101583630 A CN 101583630A
Authority
CN
China
Prior art keywords
chitin
dextran
granularity
composition
skin
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CNA2007800499018A
Other languages
English (en)
Inventor
山德里内·戈蒂埃
让-米歇尔·布吕耶尔
韦罗妮克·马凯
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Kitozyme SA
Original Assignee
Kitozyme SA
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Kitozyme SA filed Critical Kitozyme SA
Publication of CN101583630A publication Critical patent/CN101583630A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08J—WORKING-UP; GENERAL PROCESSES OF COMPOUNDING; AFTER-TREATMENT NOT COVERED BY SUBCLASSES C08B, C08C, C08F, C08G or C08H
    • C08J9/00—Working-up of macromolecular substances to porous or cellular articles or materials; After-treatment thereof
    • C08J9/28—Working-up of macromolecular substances to porous or cellular articles or materials; After-treatment thereof by elimination of a liquid phase from a macromolecular composition or article, e.g. drying of coagulum
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L29/00—Foods or foodstuffs containing additives; Preparation or treatment thereof
    • A23L29/20—Foods or foodstuffs containing additives; Preparation or treatment thereof containing gelling or thickening agents
    • A23L29/269—Foods or foodstuffs containing additives; Preparation or treatment thereof containing gelling or thickening agents of microbial origin, e.g. xanthan or dextran
    • A23L29/271—Curdlan; beta-1-3 glucan; Polysaccharides produced by agrobacterium or alcaligenes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L31/00—Edible extracts or preparations of fungi; Preparation or treatment thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/20—Reducing nutritive value; Dietetic products with reduced nutritive value
    • A23L33/21—Addition of substantially indigestible substances, e.g. dietary fibres
    • A23L33/22—Comminuted fibrous parts of plants, e.g. bagasse or pulp
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L5/00—Preparation or treatment of foods or foodstuffs, in general; Food or foodstuffs obtained thereby; Materials therefor
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/72—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic macromolecular compounds
    • A61K8/73—Polysaccharides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P39/00—General protective or antinoxious agents
    • A61P39/06—Free radical scavengers or antioxidants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q17/00—Barrier preparations; Preparations brought into direct contact with the skin for affording protection against external influences, e.g. sunlight, X-rays or other harmful rays, corrosive materials, bacteria or insect stings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q19/00—Preparations for care of the skin
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08B—POLYSACCHARIDES; DERIVATIVES THEREOF
    • C08B37/00—Preparation of polysaccharides not provided for in groups C08B1/00 - C08B35/00; Derivatives thereof
    • C08B37/0003—General processes for their isolation or fractionation, e.g. purification or extraction from biomass
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08B—POLYSACCHARIDES; DERIVATIVES THEREOF
    • C08B37/00—Preparation of polysaccharides not provided for in groups C08B1/00 - C08B35/00; Derivatives thereof
    • C08B37/0006—Homoglycans, i.e. polysaccharides having a main chain consisting of one single sugar, e.g. colominic acid
    • C08B37/0024—Homoglycans, i.e. polysaccharides having a main chain consisting of one single sugar, e.g. colominic acid beta-D-Glucans; (beta-1,3)-D-Glucans, e.g. paramylon, coriolan, sclerotan, pachyman, callose, scleroglucan, schizophyllan, laminaran, lentinan or curdlan; (beta-1,6)-D-Glucans, e.g. pustulan; (beta-1,4)-D-Glucans; (beta-1,3)(beta-1,4)-D-Glucans, e.g. lichenan; Derivatives thereof
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08B—POLYSACCHARIDES; DERIVATIVES THEREOF
    • C08B37/00—Preparation of polysaccharides not provided for in groups C08B1/00 - C08B35/00; Derivatives thereof
    • C08B37/0006—Homoglycans, i.e. polysaccharides having a main chain consisting of one single sugar, e.g. colominic acid
    • C08B37/0024—Homoglycans, i.e. polysaccharides having a main chain consisting of one single sugar, e.g. colominic acid beta-D-Glucans; (beta-1,3)-D-Glucans, e.g. paramylon, coriolan, sclerotan, pachyman, callose, scleroglucan, schizophyllan, laminaran, lentinan or curdlan; (beta-1,6)-D-Glucans, e.g. pustulan; (beta-1,4)-D-Glucans; (beta-1,3)(beta-1,4)-D-Glucans, e.g. lichenan; Derivatives thereof
    • C08B37/0027—2-Acetamido-2-deoxy-beta-glucans; Derivatives thereof
    • C08B37/003—Chitin, i.e. 2-acetamido-2-deoxy-(beta-1,4)-D-glucan or N-acetyl-beta-1,4-D-glucosamine; Chitosan, i.e. deacetylated product of chitin or (beta-1,4)-D-glucosamine; Derivatives thereof
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08L—COMPOSITIONS OF MACROMOLECULAR COMPOUNDS
    • C08L5/00—Compositions of polysaccharides or of their derivatives not provided for in groups C08L1/00 or C08L3/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08L—COMPOSITIONS OF MACROMOLECULAR COMPOUNDS
    • C08L5/00—Compositions of polysaccharides or of their derivatives not provided for in groups C08L1/00 or C08L3/00
    • C08L5/08—Chitin; Chondroitin sulfate; Hyaluronic acid; Derivatives thereof
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P19/00—Preparation of compounds containing saccharide radicals
    • C12P19/04—Polysaccharides, i.e. compounds containing more than five saccharide radicals attached to each other by glycosidic bonds
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A23L33/125—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives containing carbohydrate syrups; containing sugars; containing sugar alcohols; containing starch hydrolysates
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q19/00—Preparations for care of the skin
    • A61Q19/08—Anti-ageing preparations
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08J—WORKING-UP; GENERAL PROCESSES OF COMPOUNDING; AFTER-TREATMENT NOT COVERED BY SUBCLASSES C08B, C08C, C08F, C08G or C08H
    • C08J2201/00—Foams characterised by the foaming process
    • C08J2201/04—Foams characterised by the foaming process characterised by the elimination of a liquid or solid component, e.g. precipitation, leaching out, evaporation
    • C08J2201/048—Elimination of a frozen liquid phase
    • C08J2201/0482—Elimination of a frozen liquid phase the liquid phase being organic
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08J—WORKING-UP; GENERAL PROCESSES OF COMPOUNDING; AFTER-TREATMENT NOT COVERED BY SUBCLASSES C08B, C08C, C08F, C08G or C08H
    • C08J2201/00—Foams characterised by the foaming process
    • C08J2201/04—Foams characterised by the foaming process characterised by the elimination of a liquid or solid component, e.g. precipitation, leaching out, evaporation
    • C08J2201/048—Elimination of a frozen liquid phase
    • C08J2201/0484—Elimination of a frozen liquid phase the liquid phase being aqueous
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08J—WORKING-UP; GENERAL PROCESSES OF COMPOUNDING; AFTER-TREATMENT NOT COVERED BY SUBCLASSES C08B, C08C, C08F, C08G or C08H
    • C08J2305/00—Characterised by the use of polysaccharides or of their derivatives not provided for in groups C08J2301/00 or C08J2303/00
    • C08J2305/08—Chitin; Chondroitin sulfate; Hyaluronic acid; Derivatives thereof
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08L—COMPOSITIONS OF MACROMOLECULAR COMPOUNDS
    • C08L2205/00—Polymer mixtures characterised by other features
    • C08L2205/02—Polymer mixtures characterised by other features containing two or more polymers of the same C08L -group

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Materials Engineering (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Sustainable Development (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Dispersion Chemistry (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Birds (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Hematology (AREA)

Abstract

本发明涉及一种微米颗粒形式的几丁质－葡聚糖共聚物。本发明具体而言提供了一种用于制备化妆组合物、特别是皮肤病学或皮肤化妆组合物的包含微米颗粒形式的几丁质－葡聚糖的共聚物。具体而言，本发明涉及一种用于面部或身体护理，例如使皮肤水合、紧致或光滑、以及发挥抗老化功效包括抗皱效应的化妆组合物。本发明的目的也是提供一种例如能够用于组织工程或细胞培养中或者能够用作化妆品或制药工业中的原料的多孔材料。

Description

精细粒度的真菌提取物几丁质-葡聚糖
技术领域
本发明涉及具有精细的可控粒度(颗粒尺寸)、特别是具有极细粒度的粉末形式的几丁质-葡聚糖共聚物，其尤其可以用于化妆品领域中，本发明特别涉及几丁质/β-葡聚糖共聚物在预防或减少皮肤老化征兆中的应用。
本发明还涉及多孔材料形式的这种聚合物，特别是其在组织工程学中的应用。
背景技术
已知某些多糖能够发挥相对于表皮上层的水合作用，或者甚至使得可以预防或减少皮肤老化的某些征兆。具体而言，基于β-葡聚糖、裂褶多糖(施佐菲兰，schizophyllan)、木葡聚糖(xyloglucan)、透明质酸、半乳甘露聚糖和几丁质的成分通常用于化妆护理产品中。
这些多糖不同于α-羟酸型成分(其通过使表皮脱落而发挥作用)，其促进细胞迅速再生，但是可能损伤表皮下层。大多数抗老化成分对皮肤细胞或胶原的再生起作用。目前，胶原再生的机理在与化妆产品方面的立法的相容性上存在着问题，对于化妆产品，经皮渗透是不能要求保护的。治疗皮肤老化的征兆超越了皱纹和细胞再生的概念，而今很难找到以全面且确实有效的方式解决该问题的可用的活性剂。
在具有“抗老化”功效的多糖中，源于酵母菌、真菌、谷物或植物的β-葡聚糖是一类由通过β-型键接彼此连接的D-葡萄糖单元组成的纯多糖，所连接的碳根据提取它们的物种而不同，具有或多或少的支链结构：源于酵母菌酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)的β葡聚糖为β(1，3)(1，6)；源于真菌裂褶菌(Schizophyllum commune)的裂褶多糖主链为β(1，3)(在β(1，6)位分支有短链)；源于谷物如燕麦、大麦或小麦的β-葡聚糖为β(1，4)；源于植物的木葡聚糖主链为β(1，4)(在β(1，6)位分支有短链)。β-葡聚糖在含水介质中的溶解性取决于其结构、大分子链的长度以及链的三维构造。
在化妆品工业中β-葡聚糖由于其新生(再生恢复，revitalize)和抗炎作用、UV辐射防护作用、缓和、免疫刺激、抗老化、抗皱纹和抗粉刺作用等(根据所考虑的分子不同，发挥的功效不同)而被认为是有益的，这些作用可以导致皮肤老化或粉刺的症状改善。在化妆品中所需的β-葡聚糖一般是水溶性的，使得它们能够被并入到乳液的水相中，这限制了对于能够用于化妆品中的分子的选择。实际上，不溶性的β-葡聚糖具有非常有利的化妆和皮肤科特性，但是因为它们是坚硬、刺激性等的颗粒形式而不能被并入到化妆制剂中。很少有能够用于化妆品中的水溶性β-葡聚糖以富含β-葡聚糖的提取物或溶液形式提供。
此外，几丁质水溶性衍生物(主要是羧甲基几丁质和壳聚糖)的化妆应用是已知的，例如用于护理霜中，作为成膜剂、保湿剂、改善成脂肪团的皮肤外观的制剂，例如，或者还用于微球的制备。然而，用于化妆应用的几丁质、及其衍生物在工业上是从甲壳类动物-虾、蟹-的壳中获得的，甲壳类动物是造成过敏反应的主要起因之一。而且，对包含几丁质衍生物的霜剂过敏的病例已经公开(Cleenewerck MB，Martin P，Laurent D.Allergic contact dermatitisdue to a moisturizing body cream with chitin.Contact Dermatitis 31，196，1994；Pereira F，Pereira C，Lacerda MH.Contact dermatitis due toa cream containing chitin and a carbitol.Contact Dermatitis 38，290，1998)。
就本发明发明人所知，由甲壳类动物的壳开始或由微藻(microscopic algae)开始而获得的几丁质(由N-乙酰基-D-葡糖胺单元构成的聚合物)，还未知能够预防或减少皮肤老化的效应。壳聚糖是衍生于几丁质的聚合物，带有阳离子电荷，由D-葡糖胺/N-乙酰基-D-葡糖胺单元构成，其衍生物(琥珀酰胺)及其盐(例如，乳酸盐、抗坏血酸盐、羟乙酸盐、琥珀酸盐)，都因为其显著的成膜性、水合性、抗菌性和抗老化特性、改进脂肪团外观的特性、以及改进制剂触感的特性，而用于化妆品工业中。
本发明发明人已经证实，从真菌中分离和纯化由两种类型的链几丁质[聚(N-乙酰基-D-葡糖胺)]和β-葡聚糖[聚(D-葡萄糖)]构成的共聚物是可能的。某些真菌如黑曲霉(Aspergillus niger)(子囊菌类)菌丝体的细胞壁由三维网络中相互共价连接的两种多糖构成，称之为“几丁质-葡聚糖”。
现在，这种几丁质-葡聚糖共聚物能够借助于连续步骤的工艺、以高纯度和可获利的方式而有利地生产，如专利EP1483299B1(US2005/130273 A1或WO 03/06882 4A1)所描述的。所获得的精细白色无味的粉末中，几丁质-葡聚糖共聚物含量大于90％。这种粉末不溶于任何溶剂，无论是含水溶剂还是有机溶剂，经推理这损害了其在化妆品工业中的应用。各种应用描述于专利申请FR 05 07066和FR 06 51415中。
基于含几丁质和β-葡聚糖的真菌提取物的组合物的医学应用，尤其是作为伤口愈合活性剂，先前已经进行了描述。然而，这些各种应用(例如，以敷料(dressing)形式)经推理并不适用于化妆制剂。
发明内容
本发明的主要目的是解决以适用于化妆应用(并且尤其是在皮肤化妆或皮肤病学中)，和/或适用于医学或药学应用，和/或适合用作人或动物的食品补充剂的形式提供几丁质-葡聚糖共聚物所构成的新的技术问题。
本发明的一个目的还是解决以悬浮液、乳液或分散体形式，尤其是能够用于化妆品领域、特别是皮肤化妆或皮肤病学领域的形式提供几丁质-葡聚糖共聚物所构成的新的技术问题。
本发明的一个目的特别是提供一种用于身体和/或面部护理，如水合(吸水，hydrating)、紧致(firming)、防护、抗皱(具体通过轮廓测量术(profilometry)进行的皮肤外形评价而进行描述)或抗老化护理的皮肤化妆组合物。
本发明的一个目的还是通过提供一种表现为无害性、皮肤和眼睛耐受性、以及非常好的低变应原性(hypoallergenicity)，同时又易于大量获得并与作为化妆成分的用途成本相容的天然来源的物质来解决以上提及的技术问题。
本发明的一个目的还是优化食品补充组合物而使之能够易于口服给药，并提高生物利用率和几丁质-葡聚糖共聚物对健康的功效。
本发明的一个目的还是提供一种几丁质-葡聚糖粉末，该几丁质-葡聚糖粉末使得能够根据所设想的用途例如皮肤化妆和皮肤病学组合物、食品补充组合物、功能性食物组合物、用于饮料处理的工艺助剂(technological aid)或用于医疗器材的组合物如伤愈产品，而调节和优化其物理化学性质和生物性质。
本发明的一个目的还是提供一种非动物来源并具有优良纯度的天然物质，其显著特征在于通过可确保重复性和可溯性的生产工艺而获得。
本发明的一个目的还是提供一种多糖类天然物质，其作为粉末和在悬浮液中是稳定的，易于配制，与所有最常用的成分相容，而且使得可以制备稳定的化妆制剂，其特征是极佳地适用于其应用(例如与均匀度极佳的织物)，且其感官质量(sensory quality)(粘度、质地、触感)都是优异的。
本发明的一个目的是提供一种化妆活性剂，用于预防或降低皮肤老化效应，以持久方式水合皮肤，赋予皮肤弹性和/或紧致皮肤，赋予皮肤均匀和平滑的外观，降低皮肤多鳞状态(squamous state)，保护皮肤免受外界侵袭如干燥和/或重金属污染，以及使皮肤恢复其屏障功能。本发明的一个目的还是提供一种具有保水能力和相当强的粘度改性能力的化妆成分。
本发明的一个目的还是提供一种能够用于例如组织工程学或细胞培养中、或者能够用作化妆品或制药工业原料的多孔材料。
为了解决以上提及的技术问题，本发明发明人从人们已知晓的β-葡聚糖型物质在化妆品工业中的作用开始。然而，在获得的粉末(例如根据PCT专利申请WO 03068824描述的方法)为不溶于水相或有机相的范围内，任何基于几丁质-葡聚糖共聚物的组合物经推理则不可能是可利用的。
然而本发明发明人已经意想不到地发现，通过使用具有极细且可控粒度的几丁质-葡聚糖共聚物粉末，可以解决以上提及的技术问题。这种解决方案完全是意想不到的，因为本领域的技术人员认为这种共聚物的精细研磨颗粒也是不可溶的，并且所述共聚物将与不溶性β-葡聚糖形式相同，即为坚硬且对皮肤产生刺激作用的颗粒形式。
首先，本发明发明人意想不到地可以制备几丁质-葡聚糖的稳定分散体和几丁质-葡聚糖的稳定悬浮液(尤其是在水中而无添加剂)，其次，能够制备特别包含高浓度几丁质-葡聚糖的稳定乳液。
对于术语“几丁质-葡聚糖”，本发明发明人意指根据本发明的几丁质-葡聚糖共聚物。
具体而言，本发明涉及一种主要包含几丁质-葡聚糖共聚物的真菌源多糖，所述多糖具有精细的粒度。
本发明还涉及包含至少一种精细研磨的几丁质-葡聚糖共聚物的真菌提取物的精细研磨粉末。
有利地，具有精细粒度的颗粒由以重量计至少70％粒度小于500微米(μm)、优选小于355微米(μm)的颗粒构成。
同样优选以重量计至少50％、优选60％的颗粒的粒度小于250微米(μm)、并优选小于150微米(μm)。
短语“小于X微米的粒度”意指所具有的粒度使得它们能够通过筛孔尺寸为X微米的筛网的颗粒。
一个实施方式使得可以获得以重量计至少50％的颗粒，其粒度小于65目(约149μm)、优选小于100目(约230μm)。
根据需要，通过选择(尤其是在筛分(screening)或分级(classification)后)具有特定粒度的部分(fraction)，有利地控制粒度。在实施例中根据其通性提到的部分也以引用方式包含于本文中，尤其是关于共聚物的类型，其可以是本发明中描述的那些中的任何之一。
有利地，几丁质-葡聚糖共聚物所包含的几丁质N-乙酰基-D-葡糖胺单元与β-葡聚糖的D-葡萄糖单元的比率为在95∶5和15∶85(m/m)之间。
有利地，真菌来源的多糖包含以相对于真菌来源提取物总质量的质量计大于70％、优选大于85％的几丁质-葡聚糖共聚物。
有利地，D-葡萄糖单元之间的键接主要是β(1，3)型。
优选真菌提取物源于子囊菌类真菌(尤其是黑曲霉)、和/或担子菌类真菌(尤其是香菇(冬菇)和/或双孢蘑菇)的菌丝体。
有利地，几丁质-葡聚糖共聚物几丁质部分的至少85％是N-乙酰基-D-葡糖胺单元，而至多15％是D-葡糖胺单元。
具有微米粒度的真菌提取物优选是几丁质-葡聚糖共聚物的水解产物。
有利地，几丁质与β-葡聚糖的比率为在90∶10和30∶70(m/m)之间。
本发明还涉及包含根据以上限定的精细粒度的多糖或真菌提取物的组合物，尤其是悬浮液、乳液或分散体形式的组合物。
有利地，该组合物是化妆组合物，特别是皮肤化妆或皮肤病学组合物。
优选地，按总组合物的重量计，具有精细粒度的多糖或真菌提取物使用浓度为0.01％～10％，且优选0.05％～5％。
本发明还涉及以上限定的组合物在实现化妆护理，优选皮肤化妆或皮肤病学护理中的应用，其特征在于该护理选自身体或面部护理、尤其是以持久和显著方式改进皮肤水合作用、尤其是长期内提高皮肤的保水能力、改进皮肤屏障功能、发挥抗老化效应、改善皮肤外观、改善皮肤均匀性(尤其是通过使其更平滑、更均匀、更柔软、更健康)、改进皮肤紧致性和弹性、以及促进表皮对真皮的附着所构成的组中。
短语“具有抗老化功效的产品”意指使得能够尤其是通过改进皮肤的保护和/或皮肤的防护活性、减少外来侵袭如辐射、空气干燥、寒冷、污染(尤其是重金属造成的污染)或释放自由基的侵袭、尤其是由UV辐射造成的侵袭的影响，以及通过减少皮肤皱纹而延缓皮肤老化的产品或组合物。
本发明还涉及以上限定的组合物，其用于在减小皱纹深度、或者延缓或预防皱纹出现。
化妆组合物有利地包含0.1％～2％具有精细粒度的几丁质-葡聚糖共聚物。
本发明还涉及以上限定的组合物作为食品补充剂组合物的应用，其优选用于获得选自抗氧化作用、降血液胆固醇或降血脂作用、对免疫系统的刺激作用、降血糖作用(尤其在糖尿病的情况下)构成的组中的作用，以及在于预防和/或治疗和/或抵抗选自血脂异常症、动脉粥样硬化、肥胖症、肥胖相关的疾病、心血管疾病、代谢综合征、糖尿病和高尿酸血症构成的组的病理学的作用。
优选在这种食物补充组合物中，具有精细粒度的真菌提取物共聚物用作活性成分。
本发明还涉及包含如上所限定的至少一种真菌源共聚物或提取物作为活性成分的药物组合物。
本发明尤其涉及由根据本发明的真菌源多糖或提取物获得的多孔材料在组织工程学中的应用，因此也涉及由根据本发明的真菌源多糖或提取物获得的多孔材料。这种多孔材料具体而言可以通过冻干法获得。
本发明还涉及至少一种如上限定的真菌源的多糖或提取物，作为组合物、尤其是化妆组合物、优选皮肤病学或皮肤化妆组合物的赋形剂的应用。
本发明还涉及用于制备具有精细粒度的真菌提取物的方法，其包括：
a)从真菌生物质(biomass)中提取和纯化几丁质-葡聚糖共聚物，这种真菌提取物的所述共聚物在水中或有机溶剂中是不可溶的，
b)从干燥或溶剂化的几丁质-葡聚糖开始，对颗粒进行过滤、干燥、研磨以及分级，这些步骤同时或单独进行而与它们的次序无关，使得可以获得微米颗粒，其中以重量计至少70％、优选75％、更优选80％的颗粒具有小于500微米(μm)、优选小于355微米(μm)的粒度。
优选地，用于制备具有精细粒度的真菌提取物的方法中的步骤b)使得能够获得以所获得的总颗粒重量计至少50％、优选60％、且更优选70％的粒度小于250微米、优选小于125μm的颗粒。
因此在步骤b)中可以同时进行过滤、干燥和研磨步骤，然后进行单独的分级步骤。
本发明还涉及用于实施根据本发明的方法的设备或装置。
具体实施方式
根据本发明的组合物使得可以获得具有愉悦的柔软触感、尤其是在化妆品领域中特别有利的制剂。
具体而言，所获得的乳液或悬浮液的稳定性、质地、颜色、触感、粘度和流变极佳地适用于生产面部或身体护理霜，包括婴儿的护理霜。最后，几丁质-葡聚糖共聚物优良的皮肤耐受性(人体体外和体内)和眼睛耐受性(体外)以及低敏感测验(人体体内，根据Maibach-Marzulli程序)已经得到证实。
本发明发明人提出的溶液全部是更加有利的，因为来源于真菌源，尤其但非排他地子囊菌类的纯化的几丁质-葡聚糖共聚物可以作为工业副产品大量获得。
特别优选使用黑曲霉的菌丝体作为真菌源。
根据本发明，从子囊菌类真菌菌丝体提取的几丁质-葡聚糖共聚物，尽管是水不溶性的，但是能够容易地进行配制，尤其是以化妆组合物形式配制。
本发明发明人已经意想不到地发现，当来源于真菌源的几丁质-葡聚糖化合物是具有精细粒度的粉末形式时，其完全适用于制备使得可以解决以上提及的技术问题的组合物。
根据PCT专利申请WO 03/068824或法国专利申请FR 0507066中描述的方法而有利地获得的几丁质-葡聚糖粉末，以可获得精细的可控粒度的方式、尤其是通过过滤、研磨、干燥和/或颗粒分级方法进行制备。当需要精细粒度时，选择用于获得以重量计至少70％、优选75％、更优选80％的颗粒具有小于500微米(μm)、优选小于355微米(μm)粒度的颗粒的方法。
有利地，颗粒由以重量计至少50％、优选60％、更优选70％粒度小于250微米(μm)、优选小于150微米(μm)的颗粒组成。
优选用于制备几丁质-葡聚糖粉末的方法以这样的方式实施，使得主要获得粒度小于250μm的颗粒。
有利地，根据本发明的颗粒基本上由粒度小于125μm或者甚至小于90μm的颗粒组成，而尤其是在分级之后获得从而获得较窄分布。
可以通过本领域技术人员已知的任何一种技术实施制备该粉末的方法。选择使得可以尽可能好地并且以明确方式控制粒度的技术，是有利的。
术语“粒度”意指几丁质-葡聚糖粉末大致为球形的形状、粒度和粒度分布。表征了粉末化成分的该参数，首先影响了其能够进行配制的方式，即其能够被引入到固体或液体组合物如食品基质、化妆霜、饮食或化妆液体、或医疗或药物设备中的方式。根据所获得的粒度，尤其是根据所需的外观或最终形状，所获得的组合物将或多或少是均匀的。
颗粒的粒度和粒度分布通过传统技术如光衍射(例如，来自Malvern Instruments的Mastersizer 2000激光衍射系统)、扫描电子显微随后进行图像分析、或者在连续筛网上筛分随后进行重量测定而进行表征。
有利地，本发明发明人已经意想不到地证实，通过调节粒度分布而获得小于125μm的粒度，可以获得包含几丁质-葡聚糖聚合物的均匀霜剂。这使得尤其是在乳液形成后甚至以高浓度(例如2％)引入该共聚物，而实现完全均匀的质地成为可能，其感观质量(粘度、质地、触感)都很优良。颗粒中具有最小粒度的部分因此有利地被使用。
当粒度较大时，该成分就不再提供这些感观质量，当霜剂铺展时产品形成明显的颗粒(grain)，和/或制剂随时间变化而不稳定，这在局部组合物的情况下、尤其是在护理霜中是不期望的。
有利地，具有精细可控粒度的粉末能够用于制备“功能性”食品如饼干、软糖、糖果产品、食疗棒(dietetic bar)、面包、饮品、黄油、人造黄油等。
有利地，具有精细粒度的粉末能够以含水分散体形式使用，可以是医疗设备如伤愈和/或止血系统的组合物部分。意想不到地，具有精细粒度的几丁质-葡聚糖，通过本领域技术人员众所周知的致孔技术(porogenic technique)，能够以具有良好机械稳定性和大于80％、优选大于90％孔隙率的内聚性多孔材料形式进行使用。多孔材料能够起始于仅含几丁质-葡聚糖的软膏形式的浓缩含水分散体、或起始于几丁质-葡聚糖与其他不溶性可分散化合物的混合物的分散体、或起始于几丁质-葡聚糖在溶解有聚合物或另一种物质的水相中的分散体而进行制备。所获得物质的孔隙率测定和机械性能取决于制剂参数，尤其是几丁质-葡聚糖的粒度、混合物的组成、起始分散体的浓度，以及分散体实施参数。
为了制备皮肤化妆和皮肤病学产品，具有精细粒度的几丁质-葡聚糖，粒度优选小于125μm，有利地对水相和油相中存在的组分均具有良好的亲和性，这能够促进并入工艺。
具有精细粒度的几丁质-葡聚糖粉末能够根据各种方法进行工业生产，取决于所需要的粒度，从干粉形式的几丁质-葡聚糖开始，或从含水或有机介质中溶解的几丁质-葡聚糖开始，否则从并入到更复杂介质如水包油或油包水乳液中的几丁质-葡聚糖开始。对于“制备具有精细粒度粉末的方法”，本发明发明人通过“用于制备具有精细粒度的粉末的方法”，意指适用于固体、溶剂化固体和溶剂化复杂介质如乳液、胶状悬浮液等的任何过滤、干燥、研磨、均质化、粒度减小和颗粒分级的固-液和固-固过程。
在以溶剂化几丁质-葡聚糖开始时，可以使用各种工业分离方法，例如采用锥形干燥器和Nütsche过滤器、板式过滤器、带式过滤器、流化床干燥器和喷雾设备，以实现几丁质-葡聚糖完全或部分干燥。这些方法可以直接施用于溶剂化几丁质-葡聚糖，或者在对溶剂化几丁质-葡聚糖研磨后施用。为获得具有精细可控粒度的粉末，可向完全或部分干燥的产品、或溶剂化产品，施用各种工业破碎方法(fragmentation process)，例如甩刀式研磨、锤式研磨、辊式研磨、切刀研磨、刀片研磨、盘式研磨和反向喷气研磨方法，以及碎裂法(disintegrating process)，例如超声波法和微粉化法。能够使用用于分离粉末的各种工业方法以减小粒度分布宽度或选出特定的粒度，例如采用动态和静态筛分和分级设备。
因此，本发明涉及用于获得水不可溶性或在有机溶剂中不可溶的、且具有精细粒度的真菌源几丁质-葡聚糖粉末的方法，用于制备在水溶液或有机溶液中稳定的几丁质-葡聚糖共聚物，尤其是用于制备悬浮液或乳液。
用于获得具有精细粒度的粉末的步骤在乳液、悬浮液或分散体制备之前或之后实施。
该悬浮液或分散体或乳液包含通常用于化妆品领域中的物质，有利地使得可以配制化妆组合物。
化妆组合物相对于总组合物的重量通常包含以重量计0.01％～10％的根据本发明的组合物，具体而言是以重量计0.01％～10％的悬浮液或乳液形式的根据本发明的组合物。
通过“几丁质-葡聚糖共聚物的衍生物”，本发明发明人意指根据物理、化学和酶促方法，通过物理或化学改造，起始于几丁质-葡聚糖而获得的所有化合物。
本发明特别涉及包含含β-葡聚糖链的聚合物的真菌源多糖，所述β-葡聚糖链主要包含经由(1，3)位键接的D-葡萄糖单元连接，优选相对于β-葡聚糖总质量百分数包含以质量计至少80％的β-葡聚糖链，其中D-葡萄糖键接处于(1，3)位置，尤其是用于化妆制剂的生产。
几丁质-葡聚糖共聚物根据KitoZyme S.A.在2005年7月4日提交的PCT专利申请WO 03/068824和法国专利申请FR 0507066描述的方法能够有利地获得。该方法具体描述在申请FR 0507066的第18页14行以及以下列等等。黑曲霉优选用作该方法中的真菌源。
D-葡萄糖单元键接和α(1，6)-几丁质和β-葡聚糖链之间的比例决定于真菌和菌株。例如，本发明发明人已经证明，黑曲霉菌丝体包含的几丁质-葡聚糖共聚物中几丁质与β-葡聚糖的质量比为在30∶70和60∶40之间，D-葡萄糖单元键接主要是β(1，3)型。
共聚物一般是白色粉末形式。无论温度和pH如何，都基本不溶于水和有机溶剂中。这种共聚物是吸湿性的，一般能够在水中吸收约10倍其质量(的水)。该几丁质-葡聚糖粉末例如能够通过工业方法、以这样一种方式进行生产从而获得根据本发明的具有精细粒度的产品。
本发明涉及一种有利地进行纯化的真菌源、优选子囊菌类真菌如黑曲霉的菌丝体的提取物。纯化的提取物的水解产物，即低分子量的几丁质和β-葡聚糖共聚物，也是本发明的一部分。本发明也涵盖，在术语“几丁质-葡聚糖共聚物”或“几丁质-葡聚糖”范围内的，起始于几丁质-葡聚糖，根据物理、化学和酶促方法，通过物理或化学改造而获得的所有化合物，所要达到的程度是，几丁质-葡聚糖共聚物的性质仍保持为适用于所设想的应用，且共聚物在本发明的粒度范围内仍不溶于水和有机溶剂，但是能够以分散体、乳液或悬浮液的形式配制。
尤其是黑曲霉(其为食品和制药工业柠檬酸工业化生产的副产品)的可用性和质量，使其成为用于化妆品工业中的原物质之选。其他包含几丁质和β-葡聚糖多糖的真菌源也可以使用，例如担子菌类，尤其是真菌香菇(冬菇)和双孢蘑菇。
对于“真菌源多糖”，本发明发明人意指真菌细胞壁的纯化提取物，其主要包含共聚物形式的几丁质和β-葡聚糖多糖及其衍生物。纯化的提取物相对于提取物总质量优选包含以质量计大于70％的几丁质-葡聚糖含量，优选大于80％，优选大于85％且更优选大于90％。
对于“几丁质-葡聚糖”，本发明发明人意指从真菌细胞壁提取的纯共聚物，其包含N-乙酰基-D-葡糖胺单元连接，且可选地包含少部分的通过α-构象中的(1，6)-型键接(几丁质连接)而彼此连接的D-葡糖胺单元，以及少部分的通过β(1，3)、β(1，3)(1，6)或β(1，3)(1，4)型、优选β(1，3)型键接(β-葡聚糖连接)而彼此连接的D-葡糖胺单元。
人们普遍认为，真菌细胞壁多糖能够根据其在碱性介质中的溶解性而分成两类，而细胞壁骨架是不可溶的。人们也已经知道，不溶部分依赖于物种由各种比例的几丁质和β-葡聚糖聚合物构成，β-葡聚糖单元通过各种结构的键接而连接，而几丁质和β-葡聚糖连接之间的键接是稳定的，例如由Siestma & Wessels有关酿酒酵母(接合菌)、粗糙链孢霉(子囊菌)、构巢曲霉(Aspergillus nidulans)(子囊菌)和灰盖鬼伞(Coprinus cinereus)(担子菌)[Siestma JH & WesselsJG.(1981)Solubility of(1，3)-beta-D-(1，6)-beta-D-glucan in fungalwalls：importance of presumed linkage between glucan and chitin.(1981)J.Gen.Microbiol.125：209]所示。人们已知，黑曲霉不溶性部分的几丁质和β-葡聚糖连接是彼此共价连接的，例如Stagg CM和Feather MS[Biochim.Biophys.(1973)Acta 320：64]所提及的。用于确定几丁质和β-葡聚糖连接之间的共价连接性质的方法，例如，已经由Fontaine等有关烟曲霉[Fontaine T，Simenel C，Dubreucq G，AdamO，Delepierre M，Lemoine J，Vorgias CE，Diaquin M & LatgéJP.(2000)Molecular organization of the alkali-insoluble fraction of Aspergillusfumigatus cell wall，J.Bio.Chem.275：27594]和Kollar等有关酵母酿酒酵母[Kollar R，Petrakovas E，Ashwell G，Robbins P & Cabib E.(1995)Architecture of the yeast cell wall，the linkage between chitinand beta(1，3)glucan，J.Biol.Chem.270：1170]进行了描述。
根据本发明的真菌提取物能够从各类真菌的菌丝体细胞壁获得，包括接合菌类、担子菌类、子囊菌类(黑曲霉是其中的部分)和半知菌类，和/或其混合物。所述真菌源应该进行选择从而使得可以进行如上和此后定义的多糖的提取。存在包含β-葡聚糖(但是这些单元特别地溶于水)，或者不含或包含很少几丁质结构链的真菌源，因此这就使得不可能获得本发明的多糖。本发明涵盖了使得可能获得本申请中定义的几丁质-葡聚糖聚合物的所有真菌。
几丁质与β-葡聚糖的比率为95∶5～5∶95，优选70∶30～10∶90(m/m)。几丁质-葡聚糖共聚物的几丁质部分优选包含至少85％的N-乙酰基-D-葡糖胺单元和至多15％的D-葡糖胺单元，优选至少90％的N-乙酰基-D-葡糖胺单元和至多10％的D-葡糖胺单元。
本发明尤其涉及包含溶剂和至少一种根据本发明的具有精细粒度的共聚物的悬浮液或分散体。这种悬浮液或分散体根据常用方法进行制备。
本发明还涉及包含根据本发明具有精细粒度的共聚物的乳液。该乳液采用水或油作为连续相根据常用方法进行制备。
有利地，首先制备乳液，然后加入几丁质-葡聚糖共聚物。这使得能够特别地在用于在工业上制备其所通常应用的工业的温度条件下制备乳液，而无需承受共聚物降解的风险。
根据本发明的化合物特别地以化妆或药物组合物的形式、优选局部形式进行制备。因此，对于这些组合物，赋形剂例如包含至少一种选自防腐剂、抗氧化剂、稳定剂、调节剂、保湿剂、润肤剂、乳化剂、表面活性剂、增稠剂、消光剂(matting agent)、形成纹理剂(质构剂，texturing agent)、提供光泽的试剂、成膜剂、增溶剂、颜料、染料、香味剂和遮光剂构成的组中的化合物。这些赋形剂优选选自氨基酸及其衍生物、聚合甘油、酯、纤维素聚合物和衍生物、羊毛脂衍生物、磷酯、蔗糖基稳定剂、天然和合成蜡、植物油、甘油三酯、未皂化化合物、硅及其衍生物、蛋白水解产物、脂溶性/水溶性酯、甜菜碱、氧化胺、甘氨酸和对羟基苯甲酸酯组成的组。
作为能够用于本发明组合物中的油，例如，可以提及的有：动物源的烃基油(hydrocarbon-based oil)，如全氢化角鲨烯(异三十烷，perhydrosqualene)；植物源的烃基油，如含4～10碳原子的脂肪酸的液态甘油三酸酯，例如庚酸或辛酸的甘油三酸酯，或者可替换地例如葵花籽油、玉米油、豆油、鳗髓油(marrow oil)、葡萄籽油、芝麻油、榛子油、杏仁油、澳大利亚坚果油、阿拉伯油(arara oil)、蓖麻油、鳄梨油、羊脂酸/羊蜡酸甘油三酸酯、荷荷芭油(希蒙得木油，jojoba oil)、牛油果油；合成酯和醚，尤其是脂肪酸的酯和醚，羟基化酯，多羟基酯；以及季戊四醇酯；线性或分支的无机或合成源的烃，如挥发性或不挥发性的石蜡油，及其衍生物，液体矿脂；脂肪醇；部分烃基和/或硅基的氟化油(fluoro oil)；硅油如具有线性或环状硅链的挥发性或不挥发性的聚甲基硅氧烷(PDMS)，其在室温下是液态或软膏状，尤其是环聚二甲基硅氧烷(环甲硅油)；苯基硅；及其混合物。各种赋形剂在配制实施例中进行举例说明。
其他可以存在于油相中的脂肪物质例如为包含8～30个碳原子的脂肪酸，如硬脂酸、月桂酸、棕榈酸和油酸；蜡，如羊毛脂、蜂蜡、石蜡或微晶蜡、合成蜡；硅酮树脂；以及硅酮弹性体。
有利地，以上提及的组合物以选自含水或油溶液、霜剂或水凝胶或油凝胶(尤其是在罐或管中)，特别是洗浴凝胶、香波；乳状液；乳液，微乳液或纳米乳液，尤其是水包油或油包水乳液、或复合乳液、或硅基乳液；洗剂，尤其是在玻璃或塑料瓶中或在量瓶或气溶胶中的洗剂；安瓿剂；液体皂；皮肤病学清洁棒(cleansing bar)；油膏；泡沫；无水产品，优选液体、软膏或固体，例如条状形式，特别是唇膏形式构成的组中的形式进行配制。
本发明还涉及口服给予人类或动物，优选哺乳动物的组合物，使得可获得选自抗氧性、降血液胆固醇或降血脂效应、对免疫系统的刺激效应、降血糖效应(尤其是糖尿病的情况下)构成的组的功效，以及预防和/或治疗和/或抵抗选自血脂异常症、动脉粥样硬化、肥胖症、肥胖相关的疾病、心血管疾病、代谢综合征、糖尿病和高尿酸血症组成的组的病理学的功效。控制几丁质-葡聚糖粉末的粒度，尤其是获得具有精细粒度的粉末，有利地使产品可具有更好的生物利用度。
本发明还涉及如上所限定的包含至少一种多糖或真菌源提取物作为活性成分的药用或食品补充组合物。
本发明还涉及处理、预防或抵抗病理学(尤其是以上所提及的)的方法，其包括将有效量的包含至少一种以上和此后描述中限定的多糖的组合物口服给予需要该多糖的个体。
本发明还涉及在人体或动物、优选哺乳动物中用于减少体重或预防或抵抗体重增加的方法。这种方法尤其涉及美容护理(estheticcare)。
本发明还涉及化妆护理方法，尤其是针对身体或面部的化妆护理，这种护理有利地选自以上提及的护理类型。
因此，本发明涉及本发明的产品在制造特别需要用于以上描述的方法之一的组合物中或发挥以上或此后描述的功效之一中的用途。
本领域的那些技术人员易于通过传统方法确定将使用的本发明产品的有效量。在化妆或制药工业中，以总组合物的重量计，根据本发明0.01％～10％有效量的真菌源多糖有利地被使用。优选使用以总组合物重量计0.05％～5％，更优选0.1％～2％。当局部施用时，每天1次或两次施用是有利的。
相对于以食物补充剂的形式给予的组合物的总重量，所利用的根据本发明的产品的有效量一般为以重量计0.001％～100％。如果产品以凝胶胶囊、粒剂或片剂形式给予，它们能够以纯的或以其他任何浓度使用，并伴随其他活性组分或赋形剂。如果它们被并入到食品中，则产品的浓度小于15％，优选小于10％。根据个体的体重，每天每个体给予1～30g根据本发明的产品是有利的。
本发明还涵盖a)通过使用具有精细可控粒度的颗粒形式的真菌提取物而获得的内聚性多孔固体材料，和b)包含合成的或天然源(动物或植物)的聚合物基质的内聚性多孔复合固体材料，其中分布具有精细可控粒度的颗粒形式的真菌提取物颗粒。
较概括地，本发明的内聚性多孔材料通过采用具有精细可控粒度的颗粒形式的几丁质聚合物或几丁质-葡聚糖聚合物而获得。
以及较具体地，本发明涵盖内聚性多孔复合材料，其基质是壳聚糖且其中分布具有精细可控粒度的颗粒形式的几丁质和/或几丁质-葡聚糖颗粒。
对于本发明的目的，“复合”材料是至少两种材料的组装体(assembly)。
对于本发明的目的，“内聚性”材料是特征为即使在外力和应力(压缩、拉伸、拉长等)作用下仍具有保持稳定和整体形式的能力的材料，这与脆性材料相反。因此，内聚性材料能够进行塑造而给出适用于其用途(例如，如具有特定解剖形状的移植物)的形状和大小。
对于本发明的目的，“多孔”材料是特征为存在尺寸、数目、形态、互联性、各向同性/各向异性的程度等可调节且可控制的孔隙的材料。
现有技术公开了许多与制备天然聚合物如壳聚糖或合成聚合物如聚氨酯、PLA(聚乳酸)、PGA(聚乙醇酸)、PLGA(乳酸和乙醇酸的共聚物)等的多孔材料有关的文献。现有技术也公开了一些与制备富含包含几丁质或壳聚糖-葡聚糖的真菌提取物的组合物有关的文献。然而，还没有与从这些真菌提取物制备内聚性多孔固体材料有关的文献。例如，专利RU2086247公开了以制备阻燃系统为目的，起始于低级真菌(黑曲霉)的菌丝体而获得的包含壳聚糖-葡聚糖复合物的组合物。制备方法包括直接采用生物质进行冲洗和碱处理的步骤，接着进行冻干步骤。然而，该文献并未提到以多孔材料形式获得的产品。多糖甲壳素(sacchachitin)是富含从真菌松杉灵芝(Ganoderma tsugae)实体提取的几丁质的组合物，其对伤口愈合的作用已经由SH Su等(Development of fungal mycelia as skinsubstitutes：effects on wound healing and fibroblasts，Biomaterials 20，61-68，1999；Fungal mycelia as the source of chitin and polysaccharidesand their applications as skin substitutes，Biomaterials 18，1169-1174，1997)和Hung等(Cytotoxicity and immunogenicity of Sacchachitin andmechanism of action on skin wound healing，J Biomed Mater Res 56，93-100，2001)进行描述。
JP2006273912公开了一种由β-葡聚糖和壳聚糖构成的模制材料(molded material)。其并未公开这些材料是多孔的。而且，它们并不包含其组合物中的几丁质-葡聚糖共聚物。
现有技术因此并未公开任何有关从真菌提取物如几丁质或几丁质-葡聚糖共聚物获得的具有精细可控粒度的颗粒形式的内聚性多孔材料的文献。
包含壳聚糖和第二化合物的多孔材料已经广泛地进行描述。在第二化合物的许多实例中，可以提及的有合成聚合物如PGA(Biomaterials，24(2003)，1047-1057)，或聚丙烯酸(MacromolecularBioscience，3(10)，2003，540-545)，天然聚合物如明胶(PolymerInternational，49(12)，2000，1596-1599，CN1097980)，胶原(WO0016817，KR2002017552，CN1406632，CN1387922，RU2254145)，纤维素或丝(JP2000027027)，氧化纤维素(US2006172000)，无机化合物如羟基磷灰石(Journal of BiomaterialScience，Polymer edition，13(9)，2002，1021-1032)。
US2003190346涵盖用于制备由壳聚糖和几丁质水凝胶构成的复合海绵的方法，本发明的具体形式未被预见。CN1485097涵盖起始于壳聚糖/几丁质来制备海绵的方法。该文献并未明确指出是否其是复合材料还是由壳聚糖或几丁质构成的材料。该文献的摘要公开了用于制备海绵的第一步骤在于溶解起始原料，其表明其涉及制备主要含壳聚糖的海绵，因为众所周知几丁质是不溶性的，除非在非常特殊的条件(二甲基乙酰胺-LiCl系统)下。
没有文献公开包含壳聚糖和几丁质-葡聚糖共聚物的复合材料。实际上，本领域的技术人员熟知，无论溶剂是什么，几丁质-葡聚糖共聚物都是不溶的。人们也已熟知，用于制备复合材料尤其是生物可降解复合材料的方法包括，在以制备固体材料为目的移至去除溶剂的相之前，首先溶解并均匀混合溶解的化合物。因此，在制备固体(尤其是多孔的)几丁质或几丁质-葡聚糖材料或在制备由聚合物基质如可生物降解的材料作为第一化合物和几丁质或几丁质-葡聚糖材料作为第二化合物构成的固体(尤其是多孔的)复合材料中遇到的技术问题，是如何在第一步以使其与包含壳聚糖的溶液混合为目的溶解几丁质或几丁质-葡聚糖。
本发明通过提出使用能够与作为基质的可生物降解聚合物的溶液混合的悬浮液、分散体或乳液形式的具有精细可控粒度的几丁质和/或几丁质-葡聚糖共聚物而提供了解决该问题的技术方案。
类似地，本发明通过使用包含具有精细可控粒度的几丁质和/或几丁质-葡聚糖共聚物的悬浮液、分散体或乳液而提供了制备多孔几丁质和/或几丁质-葡聚糖固体的技术方案。
本发明的内聚性多孔材料涵盖：
a)从真菌提取物，优选具有精细可控粒度的颗粒形式的几丁质聚合物和/或几丁质-葡聚糖共聚物，更优选具有精细可控粒度的几丁质-葡聚糖共聚物而制备的内聚性多孔材料；
b)包含一种聚合物作为基质，也称为分散剂和真菌提取物，优选具有精细可控粒度的颗粒形式的几丁质聚合物或几丁质-葡聚糖聚合物作为第二化合物，也称为受分散剂(dispersed agent)的内聚性多孔复合材料。
具体而言，本发明还涉及：
包含至少一种真菌提取物，优选粒度小于500微米(μm)颗粒形式的至少一种几丁质聚合物和/或一种几丁质-葡聚糖共聚物的多孔材料。
有利地，多孔材料包含以上限定的真菌提取物。
本发明还涉及用于制备多孔材料的方法，其特征在于包含以下步骤：在溶剂中分散，或乳化，或悬浮粒度小于500微米(μm)的颗粒形式的至少一种真菌提取物，然后除去该溶剂而获得包含该真菌提取物的多孔材料。
用于多孔材料‘a’的几丁质聚合物和/或几丁质-葡聚糖共聚物颗粒的粒度小于250μm，更优选小于90μm，甚至更加优选小于63μm。优选使用具有该精细可控粒度的几丁质-葡聚糖共聚物颗粒。
本发明还涉及包含基质和受分散剂的多孔复合材料，所述基质也称为分散剂，是至少一种类型的聚合物，而受分散剂是至少一种真菌提取物，优选为粒度小于500微米(μm)的颗粒形式的几丁质聚合物或几丁质-葡聚糖共聚物。
有利地，多孔材料包含如上限定的真菌提取物。
多孔复合材料‘b’包含粒度小于250μm，更优选小于90μm，甚至更加优选小于63μm的本发明的几丁质或几丁质-葡聚糖颗粒。优选使用具有该精细可控粒度的几丁质-葡聚糖共聚物颗粒。
本发明涵盖用于制备包含基质和分散于基质中的制剂的多孔复合材料的方法，其特征在于其包括：(i)溶解能够形成多孔复合材料基质的聚合物的步骤，(ii)在聚合物的溶液中，分散、或乳化、或悬浮粒度小于500微米(μm)的颗粒形式的至少一种真菌提取物的步骤，(iii)从包含真菌提取物的聚合物溶液中除去该溶剂的步骤，(iv)获得包含形成基质的多孔聚合物和形成受分散剂的真菌提取物的复合材料。
多孔材料或多孔复合材料能够形成一层或多层复合材料。
多孔复合材料‘b’的聚合物基质可以是天然、动物或植物源(细胞外基质(ECM)聚合物)的。具体而言，天然源的聚合物(也称为生物聚合物)可以选自糖胺聚糖(GAG)，特别是透明质酸或透明质酸盐(酯)、硫酸软骨素或肝素、骨胶原、海藻酸盐、葡聚糖、壳聚糖及其混合物构成的组。
也可以选择选自聚氨酯、聚丙烯酸酯等，或者生物可降解的合成聚合物构成的组，尤其是选自合成的生物可降解的聚酯如基于乳酸、乙醇酸、ε-己内酯和对二氧环己酮的均聚物和共聚物，或者任何其他天然聚酯，如聚羟基链烷酸酯族的那些材料，例如基于羟丁酸酯、羟戊酸酯、聚原酸酯等的均聚物和共聚物，或者衍生于其组合或天然聚合物和合成聚合物组合的聚合物基质构成的组的合成聚合物。优选基质是生物可降解的聚合物。
优选生物可降解的聚合物基质是具有任何分子质量和任何程度乙酰化的壳聚糖。
几丁质或几丁质-葡聚糖聚合物与壳聚糖聚合物(或生物可降解聚合物)的质量比为5∶95～95∶5，优选为20∶80～80∶20。优选的组合物所具有的质量比为40∶60～60∶40，优选45∶55～55∶45，且更优选约50∶50。
本发明的内聚性多孔材料具有任何形状、任何几何结构和任何尺寸，优选为多孔膜、三维多孔载体(如平面载体、多孔泡沫)的形式、多孔微载体或珠粒形式、多孔纤维形式、多孔管等形式。
内聚性多孔材料具有至少0.005g/cm3的密度。
内聚性多孔复合材料的杨氏模量(其表示抗压强度)为至少0.05Mpa。该多孔材料的机械性能能够进行进行调节，特别是根据受分散剂颗粒的粒度、基质与受分散剂的质量比和制备方法，尤其是根据起始壳聚糖溶液的浓度进行调节。意想不到地，已经注意到壳聚糖与几丁质-葡聚糖共聚物的质量比为约50∶50，具有最佳的抗压强度。
本发明的材料涵盖了各种孔径和总孔隙率、各种形态(圆形、细长形、纤丝形等)、各种程度的互联，或孔隙各向同性或各向异性的程度、孔隙壁的各种粗糙程度等，作为几丁质或几丁质-葡聚糖颗粒悬浮液浓度、选自精细可控粒度的粒度、这些颗粒与聚合物基质的重量比和制备这些材料的方法的函数。
本发明的内聚性多孔材料具有的优点是提供的几丁质和几丁质-葡聚糖材料能够容易地处理和调节并且能够在需要这些化合物的有益功效的化妆或药物应用中临时或永久(以绷带、垫料、移植物、贴片等形式)地进行给予，或者与其他活性剂组合(例如浸渍、吸附、吸收、嵌孔等)。
类似地，本发明的多孔复合材料具有的优点是结合生物可降解聚合物基质和具有精细可控粒度的几丁质和/或几丁质-葡聚糖共聚物的有益作用。而且，几丁质和/或几丁质-葡聚糖的精细颗粒能够固定在聚合物基质的孔结构中，赋予其粗糙结构，而获得较高比表面的特征。这些特征能够构成一种优势，用来将这种材料应用到诸如细胞培养或组织重建的应用领域中，对于这些领域细胞粘附的风险较高。
用于制备内聚性多孔材料‘a’和内聚性多孔复合材料‘b’的方法包括的第一步为，以制备材料‘a’为目的在水中或者以制备物质‘b’为目的在聚合物基质的溶液中，悬浮、乳化或分散具有精细可控粒度的几丁质和/或几丁质-葡聚糖颗粒。在第二步中，根据本领域中技术人员已知的热解技术对混合物进行干燥或除去溶剂。在热解技术中，冻干、在超临界流体(超临界CO2)中起泡沫、熔盐提取、浸渍-沉淀、静电纺丝和固体自由成形都适用于实施这个步骤。优选干燥步骤是冻干法。
根据本发明对于制备，该方法包括的第一步(i)在于，根据质量比05∶95～30∶70、优选05∶95～20∶80，在水中悬浮具有精细可控粒度的本发明几丁质聚合物和/或几丁质-葡聚糖共聚物，接着均质化至少30min，以制备膏剂为目的。在第二步(ii)中，通过任何冷冻方法，尤其是通过将该膏剂放置于-18℃的制冷机中，冷冻该膏剂。在第三步(iii)中，冷冻的混合物进行冻干而获得内聚性多孔材料。
根据本发明的用于制备内聚性多孔复合材料的一个具体实施方式，该方法包含的第一步(i)为将生物可降解聚合物基质溶解于溶剂中，根据实验条件使其能够完全溶解。优选壳聚糖以1％～10％的比例溶解在浓度为0.5％～5％，优选0.5％～2％的稀酸溶液中。在能够用于这个步骤的酸中，无机酸如例如盐酸、氢氟酸、磷酸等，或有机酸如例如乙酸、甲酸、乳酸、乙醇酸、葡萄糖酸、柠檬酸、琥珀酸、谷氨酸等都是适合的。在第二步(ii)中，具有精细可控粒度的几丁质和/或几丁质-葡聚糖颗粒分散于包含聚合物基质的溶液中，均质化至少一分钟，然后倾倒于根据尺寸、几何结构和将要制备的多孔复合材料的性质而选择的制模中。基质聚合物与受分散剂的质量比为10∶90～90∶10。在第三步(iii)中，混合物通过任何冷冻技术进行冷冻。在最后步骤(iv)中，冷冻的混合物进行冻干。所获得的复合材料是多孔的。孔隙的密度、尺寸和形态，以及该物质的机械性能，尤其是抗压强度性能，根据本发明的这种实施方式，能够作为聚合物基质的浓度、聚合物基质与受分散剂的质量比、基质溶剂的性质、制模的类型、该制模的填充体积以及冷冻条件的函数进行调节。
在附图中：
图1示出用于记录几丁质-葡聚糖共聚物固相碳13核磁共振(13C-NMR)谱图的条件。
图2示出几丁质-葡聚糖共聚物固相13C-NMR谱图。
图3示出根据本发明的几丁质-葡聚糖颗粒(批次L26)，尤其是粒度为100～200μm的部分(部分100～200)、粒度＜100μm的部分(部分＜100)、粒度为500～1000μm的部分(部分500～1000)和粒度为250～500μm的部分(部分250-500)的四个扫描电子显微照片。
图4示出根据本发明的颗粒(批次L32)通过喷雾工艺进行干燥后的扫描电子显微照片(放大倍数×750)。
图5示出个体16周后获得的光学轮廓测量图，显示作为皮肤上距离的函数的皱纹高度(Rz)(左前臂：几丁质-葡聚糖基霜剂T1.5；右前臂：无效对照霜剂T0)。该图表明微轮廓(microcontour)被显著降低(采用几丁质-葡聚糖的平均值Rz 7.0μm而采用无效对照剂9.6μm)并且皮肤更加绷紧。
图6示出多孔几丁质-葡聚糖物质的两幅扫描电子显微照片。
图7示出纵截面上几丁质-葡聚糖和壳聚糖(几丁质-葡聚糖/壳聚糖10∶90，m/m)的混合多孔材料的扫描电子显微照片。
图8A～C示出三种样品获得的几丁质-葡聚糖和壳聚糖的复合多孔材料的扫描电子显微照片(图8A：壳聚糖/几丁质-葡聚糖比例(m/m)25/75，图8B：壳聚糖/几丁质-葡聚糖比例(m/m)50/50，图8C：壳聚糖/几丁质-葡聚糖比例(m/m)75/25)。对于每一样品，几丁质-葡聚糖颗粒的粒度都小于63μm。左边的照片示出纵截面，而右边的照片示出横截面。
图9A和9B示出采用粒度大于250μm的几丁质-葡聚糖颗粒获得的四种样品所获得的几丁质-葡聚糖和壳聚糖的复合多孔材料的扫描电子显微照片。
图9A左侧照片：壳聚糖/几丁质-葡聚糖比例(m/m)25/75而粒度为250～500μm。
图9A右侧照片：壳聚糖/几丁质-葡聚糖比例(m/m)25/75而粒度为500～1000μm。
图9B左侧照片：壳聚糖/几丁质-葡聚糖比例(m/m)50/50而粒度为250～500μm。
图9B右侧照片：壳聚糖/几丁质-葡聚糖比例(m/m)50/50而粒度为500～1000μm。
基于阅读了参照仅仅以举例说明的方式给出而不以任何方式限制本发明范围的实施例的解释性描述，本发明的其他目的、特征和优点对于本领域的技术人员将显而易见。
实施例是本发明的组成部分，而基于其全文所作的描述(包括实施例)，相对于任何现有技术似乎为新的任何特征，根据本发明功能和一般性，都是本发明的组成部分。
因此，每一实施例都具有一个普遍性的范围。
而且，在这些实施例中，除非另外指明，所有百分数都以重量百分数给出；除非另外指明，温度都以摄氏度表示；除非另外指明，压力都为大气压。
实施例
获得以下获取的几丁质-葡聚糖共聚物的方法在专利申请WO03/068824和FR 05.07066中进行了描述。
实施例‘A’系列：关于几丁质-葡聚糖共聚物及其具有各种可控 粒度的颗粒的制备
实施例A1：从黑曲霉菌丝体制备几丁质-葡聚糖共聚物
将一团50kg(干重)的湿黑曲霉菌丝体悬浮于0.5N的盐酸溶液中，然后过滤。然后将固体物质悬浮于1N的氢氧化钠溶液中，然后过滤。固体物质用水冲洗4次，然后采用压滤机过滤并用锥形干燥器干燥。随后将其悬浮于乙醇中，然后过滤，干燥。获得约15kg的几丁质-葡聚糖(批次L25)。
根据这种方法获得的8批次的几丁质-葡聚糖的分子特性和组成在表1中给出。
几丁质/葡聚糖质量比是根据以下简单描述的方法由图1所示的条件下记录的固相碳13核磁共振(NMR)谱图计算得到的。几丁质-葡聚糖化合物(批次L28)的谱图如图2所示。β-葡聚糖的比例是由以下四个共振带的面积确定的：104ppm(几丁质和β-葡聚糖的碳1)，23ppm(几丁质的CH3碳)，55ppm(几丁质的碳2)和61ppm(几丁质和β-葡聚糖的碳6)，以纯几丁质作为参照。例如，可以根据式1进行计算，其中I’是碳信号的面积，而其中[]CG是指所分析的几丁质-葡聚糖比值，[]C是参照几丁质的值。C1是几丁质和β-葡聚糖的碳1，C2是几丁质的碳2。
Figure A20078004990100361
(式1)
表1中8批次几丁质-葡聚糖的几丁质/葡聚糖质量比平均为39∶61±2(m/m)。
D-葡糖胺(NGIc)单元的比例表示为几丁质部分的摩尔％，能够由NMR谱图进行估算，如Heux等[Heux L，Brugnerotto J，Desbrières J，Versali MF & Rinaudo M.(2000)Solid state NMR fordetermination of the degree of acetylation of chitin and chitosan.Biomacromolecules 1：746]所描述的。D-葡糖胺单元的比例通过用氢氧化钠在盐酸过量的悬浮液中进行电位滴定而进行测定。
几丁质-葡聚糖(批次L26)的微生物质量和搜索病原体的结果在表2中给出。
几丁质-葡聚糖粉末(批次L25)的粒度分布在表3中给出。
表A1.1-各批次几丁质-葡聚糖共聚物的分子特性和组成
  批次   几丁质-葡聚糖比值   NGlc(滴定)   灰分   蛋白质   类脂   重金属
  (m/m)   mol％   (％)   (％)   (％)   (ppm)
  L25   41∶59±4*   0   1.5   4.2   0.5   ＜LQ**
  L26   36∶64±5   0   0.4   4.6   0   ＜LQ
  L27   42∶58±7   0   1.3   3.5   0   ＜LQ
  L28   39∶61±7   0   1.5   2.5   2.1   ＜LQ
  L29   40∶60±6   0   1.7   3.1   0.1   ＜LQ
  L30   37∶63±1   0   1.9   1.5   1.2   8.7
  L31   40∶60±4   0   2.5   4.3   1.3   ＜LQ
*几丁质-葡聚糖比例四个计算结果的标准偏差；
**LQ：分析的离子耦合等离子体法的灵敏度极限(5.3ppm)
表A1.2-几丁质-葡聚糖批次(L26)的微生物质量
  微生物的数量/g
 总嗜温好氧微生物   ＜20cfu/g
 好氧胞子   ＜10cfu/g
 酵母和霉菌   ＜20cfu/g
 病原体
 肠杆菌(Enterobacteriaceae)   无
 大肠杆菌(Escherichia coli)   无
 葡萄球菌凝固酶+(Staphyococcus coagulase+)   无
 假单胞菌(Pseudomonas spp)   无
 沙门氏菌(Salmonella spp)   无
因此由上表可以理解，根据本发明的共聚物具有高纯度。
表A1.3-几丁质-葡聚糖批次(L25)的粒度分布
  累积比例(％，m/m)   直径(μm)   非累积比例(％，m/m)   粒度范围(μm)
  100％   小于1000μm   13％   710-1000
  87％   小于710μm   20％   500-710
  67％   小于500μm   16％   355-500
  51％   小于355μm   14％   250-355
  37％   小于250μm   11％   180-250
  26％   小于180μm   13％   125-180
  14％   小于125μm   11％   90-125
  3％   小于90μm   3％   0-90
由该表可理解，根据实施例1的方法获得的颗粒的粒度分布非常广。
实施例A2：通过研磨制备具有各种粒度的几丁质-葡聚糖粉末
为了以可控的可变方式减小粒度，将根据实施例1获得的15kg几丁质-葡聚糖(批次L25)在装有各种几何形状并具有20～100目筛网尺寸的过滤器的锤式粉碎机(Fitzmill型号D，Fitzpatrick)中进行研磨(表1中标号A、B、C、D)。由此获得四批次的几丁质-葡聚糖粉末，其粒度分布通过在校准的筛网上进行筛分和重量分析进行测定，如表1中所示。
表A2.1：采用各种类型的筛网通过研磨获得的几丁质-葡聚糖批次的粒度分布
  几丁质-葡聚糖批次   研磨筛网   分布(μm)   ％(m/m)
  L25D   100目   500-1000   19％
  250-500   25％
  200-250   1％
  100-200   28％
  ＜100   27％
  L25A   65目   500-1000   25％
  250-500   41％
  100-250   25％
  ＜100   7％
  L25C   40目   250-500   44％
  200-250   14％
  100-200   29％
  ＜100   11％
  L25B   20目   500-1000   25％
  250-500   40％
  200-250   10％
  100-200   17％
  ＜100   7％
由该表可以理解，小粒度的颗粒，例如小于200μm，通过采用精细筛网(例如100或65目)研磨几丁质-葡聚糖粉末可容易地获得。
采用各种筛网研磨的各批次几丁质-葡聚糖，通过在校准的筛网上筛分，进行部分的组合，粉末在铂金属化之后通过扫描电子显微术进行观察(图4)。在对每种样品中约100个颗粒进行分析后计算颗粒的长度和宽度(表A2.2)。
表A2.2：通过SEM观察研磨的几丁质-葡聚糖(批次L25)部分的尺寸
 粒度范围(μm)   长度(μm)  宽度(μm)
  ＜50   54±11   37±9
  90-100   134±26   80±20
  100-200   207±66   113±33
  200-250   358±85   190±58
  250-500   514±118   329±88
  500-1000   1029±245   683±132
由该表可以理解，正如图4中扫描电子显微观察所示，锤式粉碎技术产生卵形的非球形颗粒。
批次L25的100～200μm部分是用于制备实施例C.1的试验霜剂(标号T1.5)的产品。
实施例A3：制备通过喷雾溶剂化的几丁质-葡聚糖而获得的具 有精细可控粒度的几丁质-葡聚糖粉末
为了获得具有精细粒度的为球形颗粒的几丁质-葡聚糖粉末，采用混合机在3.75升水中制备包含0.15kg几丁质-葡聚糖(批次L25)的膏剂。该膏剂在200℃的温度下喷雾干燥。获得0.15kg粉末，其累积粒度分布在表A3.1中给出。图5中的照片示出通过扫描电子显微术观察到的颗粒。
表A3.1：喷雾干燥后几丁质-葡聚糖批次(L25)的粒度分布
  ％比例(累积)   直径(μm)
  96％   小于250μm
  93％   小于180μm
  73％   小于125μm
  35％   小于90μm
从该结果可理解，溶剂化几丁质-葡聚糖喷雾技术使得可以主要是其中73％的颗粒具有小于125μm的直径的精细均匀粒度。
实施例A4：制备通过在Nütsche过滤器中干燥溶剂化的几丁质 -葡聚糖而获得的具有精细可控粒度的几丁质-葡聚糖粉末
为了获得精细的几丁质-葡聚糖粉末，将乙醇中溶剂化的包含50kg几丁质-葡聚糖的膏剂在温度为60℃的Nütsche过滤器中干燥12h。获得50kg几丁质-葡聚糖粉末(批次L16)，累积粒度分布在表A4.1中给出。由此获得的几丁质-葡聚糖粉末的堆积(或填充)密度，根据欧洲药典(European Pharmacopeia)2.9.15的方法测定，为0.71g/cm3。
表A4.1：干燥后的几丁质-葡聚糖批次(批次L16)的粒度分布
  ％比例(累积)   直径(μm)
  75％   小于355μm
  70％   小于250μm
  67％   小于180μm
  60％   小于125μm
  30％   小于90μm
从该结果可以理解，采用在乙醇中溶剂化的几丁质-葡聚糖通过Nütsche过滤器干燥几丁质-葡聚糖的技术，使得可以主要获得其中60％的颗粒具有小于125μm的直径的精细的均匀粒度。
获得的粉末通过筛分进行分级(或分离，fractionate)以致从中选出粒度小于90μm的颗粒。这部分用于制备实施例14～20的制剂。粒度小于90μm的这部分，通过扫描电子显微术观察，表现出经图像分析而测定的43±18μm的平均尺寸。粒度小于90μm的部分的堆积密度，根据欧洲药典2.9.15的方法测定，为0.61g/cm3。
实施例A5：通过研磨和筛分制备粒度小于125μm的几丁质- 葡聚糖粉末
为了获得粒度小于125μm的粉末，在盘式粉碎机中研磨干燥的几丁质-葡聚糖批次[L07073CG]，然后在引入到工业筛分设备中的筛网尺寸等于125μm(或120目)的校准筛网上进行筛分。每一研磨循环后获得的粒度分布在表A5.1中给出。
表A5.1：研磨前几丁质-葡聚糖粉末的粒度分布
  直径(μm)   研磨前的累积比例(％，m/m)   第一研磨循环后的累积比例(％，m/m)   第二研磨循环后的累积比例(％，m/m)
  小于1000μm   100％   100％   100％
  小于250μm   27％   97％   100％
  小于180μm   14％   87％   94％
  小于125μm   3％   52％   73％
  小于90μm   0％   34％   53％
  小于50μm   0％   14％   27％
通过这些表可以理解研磨和筛分步骤对于增加颗粒获取产量的重要性和功效。第一次研磨后获得比例高得多的粒度小于125μm的粉末。在第二次研磨后这个比例进一步增加。这个实施例表明高比例(大于50％m/m)的颗粒具有小于90μm的粒度，甚至大比例(超过25％m/m)的颗粒具有小于50μm的粒度。
实施例B系列：旨在用于耐受性研究的几丁质-葡聚糖基简单 霜剂的制备实施例和几丁质-葡聚糖耐受性研究的结果
这些实施例的目的具体地是表明颗粒(无论其粒度如何)形式的几丁质-葡聚糖共聚物的无害性。这些简单组合物局限为以耐受性研究为目的、用于将几丁质-葡聚糖共聚物涂散在皮肤上的载体(support)。
实施例B1：旨在用于耐受性研究的几丁质-葡聚糖基简单霜剂 的制备
基于几丁质-葡聚糖(批次L31)制备乳液型霜剂，将几丁质-葡聚糖引入到水相中，将获得的膏剂采用切碎机(Ultraturax，10000rpm)均质化约1h：简单乳液包含0～2.5％各种浓度(表B1.1)的几丁质-葡聚糖。空白对照制剂(对照C0)在相同条件下进行制备，不含几丁质-葡聚糖。
表B1.1：基于几丁质-葡聚糖浓度为X％的(标号CX)简单化妆霜剂的组成
  成分   INCI   浓度(％)
  水(适量添加至100％)   水溶液   适量(qs)
  Simulgel EPG   丙烯酸钠/丙烯酰基二甲基牛磺酸钠共聚物，聚异丁烯，辛酰癸酰葡糖苷   3％
  Nexbase 2006FG   氢化聚癸烯   10％
  几丁质-葡聚糖(粉末，L31)   几丁质，β-葡聚糖   X％X＝0或0.5或1.0或1.5或2.0或2.5％
  Phenochem   苯氧乙醇(60％)，对羟基苯甲酸甲酯，对羟基苯甲酸乙酯，对羟基苯甲酸丙酯，对羟基苯甲酸丁酯，对羟基苯甲酸异丁酯 0.8％
  EDTA二钠盐   EDTA二钠盐   0.05％
由此，制备出C0、C0.5、C1.0、C1.5、C2.0和C2.5。
实施例B2：基于几丁质-葡聚糖的各种浓度的简单霜剂的皮肤 耐受性和水合能力(hydrating capacity)的研究
方案：一系列的四种水包油乳液型霜剂，包含0.5％～2％的几丁质-葡聚糖浓度，其组成在实施例B1中给出，通过将其施用到13位志愿者的前臂上进行试验，这些志愿者平均年龄46岁(从32～61岁)，他们的皮肤在该部位是敏感的。这些霜剂与无几丁质-葡聚糖的无效对照霜剂(标号C0)进行比较。产品在每一前臂上限定的区域(6.25cm2的三个区域)每天施用两次。
每2周进行三种类型的生物度量学测试，共进行6周，以研究这些产品的耐受性和有效性。初始临床检测显示，在任何个体中都没有异常。在最后一次施用产品之后，间隔至少10小时，在上午进行评价。
生物度量学(biometrological)测试-过有象角质仪(corneometry)、通过测量根据CIE标准L*a*b*(Minolta Chroma
Figure A20078004990100431
CR200)评估的反射比色法(reflectance colorimetry)给出的参数a*来寻找任何可能的红斑、刺激征兆。通过测定以g/m2/hr计的经表皮水分流失(TEWL，transepidermal water loss)(
Figure A20078004990100432
C+K Electronic)寻找屏障功能的任何损害。对于正常皮肤，TEWL为5～7g/m2/hr，而对于干燥皮肤，则为15～20g/m2/hr。测定阻塞(occlusion)下的角质层的水分渗透动力学。“水分累积速率”(RWA)每过30秒周期(RWA 30)通过在T30s和T0s时的值之差与在T0s时的值的比值进行评价。该值越高，角质层就越干燥，水分就越易于渗透，使得其可以渗漏而不会将其吸收，这与TEWL是等价的。
统计：在每一评价时间，通过Friedman非参数检验随后是Dunn检验进行产品间的比较。对于每一产品，根据相同的方法随时间进行比较。对于每一参数，通过Friedman非参数配对检验随后是Dunn检验找寻不同时间获得的值之间的显著差异。
结果：a*、TEWL和RWA30的值，在5种霜剂于0、2、4和6周施用后至少10h进行测定，列于表B2.1中。高达所研究几丁质-葡聚糖的最大浓度，其为2.0％，在6周的周期内没有观察到红斑、刺激或皮肤屏障受损的征兆，如由没有增加的a*和TEWL值所证实的。另一方面，也证实了，在阻塞下的角质表面的水分累积速率(RWA30)，在施用几丁质-葡聚糖基霜剂后显著降低，这表明皮肤在表面具有更好的保水能力。对于浓度1.5％和2.0％，从施用的第二周开始，对于浓度0.5％和1.0％，从第四周开始，观察到这种效应。
表B2.1-反射比色法(a*)、经皮肤的水分流失(TEWL)和水分渗透动力学(RWA30，每30秒周期的水分累积速率)的结果
  时间(周)   霜剂标号   a＊   TEWLg/m2/hr   RWA30
  0周   C0(对照)   5.36±0.60   5.52±0.72   1.05±0.48
  C0.5   5.39±0.62   5.50±0.60   1.11±0.49
  C1.0   5.39±0.60   5.49±0.70   1.15±0.46
  C1.5   5.42±0.55   5.41±0.66   1.14±0.50
  C2.0   5.38±0.56   5.49±0.62   1.16±0.49
  2周   C0(对照)   5.4±0.51   5.45±0.66   0.96±0.481
  C0.5   5.4±0.51   5.42±0.69   1.01±0.531
  C1.0   5.4±0.41   5.42±0.63   0.88±0.46
  C1.5   5.3±0.51   5.36±0.56   0.74±0.472
  C2.0   5.1±0.42   5.25±0.60   0.65±0.422
  4周   C0(对照)   5.47±0.491   5.65±1.05   0.91±0.421
  C0.5   5.49±0.411   5.58±0.86   0.83±0.46
  C1.0   5.42±0.381   5.57±0.88   0.70±0.392
  C1.5   5.24±0.312   5.53±0.85   0.62±0.362
  C2.0   5.20±0.312   5.42±0.96   0.57±0.382
  6周   C0(对照)   5.42±0.671   5.48±0.761   0.83±0.361
  C0.5   5.39±0.551   5.47±0.681   0.76±0.421
  C1.0   5.38±0.541   5.38±0.71   0.68±0.351
  C1.5   5.32±0.531   4.98±1.452   0.56±0.352
  C2.0   5.18±0.492   5.21±0.492   0.46±0.342
1，2带有不同上标数字的值，在同时间测定的系列中，相互之间显著不同(p＜0.02)。
实施例B3：通过体外在角质层上进行角膜磨镶术 (corneoxenometry)研究对基于几丁质-葡聚糖的各种浓度的简单霜 剂的耐受性
方案：从15个健康的志愿者的前臂获取氰基丙烯酸酯表面活组织切片，以对角质层取样。包含0％～2％的各种浓度的几丁质-葡聚糖的霜剂是实施例5(0.5％～2.5％)中的那些。它们用水稀释至50∶50(v/v)，使得能够保证产品与角质层之间的紧密接触。将溶液沉积到角质层样品上2h。在该接触过程结束时，样品用水彻底漂洗。干燥后，用碱性品红和甲苯胺蓝的醇溶液对它们染色1min。用水漂洗并干燥后，每样品的颜色通过反射比色法L*和Chroma C*模式测定。L*和C*的差值对应于温和度(mildness)的色度学指数(CIM)。CIM大于40表示产品对皮肤是非常温和的。
结果：5种霜剂计算的CIM值列于表3.1中。无论所施用的制剂中几丁质-葡聚糖浓度如何，这些值都大于70，并且它们反映出6种产品的优异耐受性。
表B3.1：角质层与包含几丁质-葡聚糖基霜剂的2倍稀释的溶液接触2h后的温和度色度学指数(CIM＝L*-C*)
  N＝15标号 C0 C0.5 C1.0 C1.5 C2.0
  平均CIM   78.6   79.3   74.0   78.4   77.6
  标准偏差   6.7   4.3   8.3   5.4   7.1
  中值CIM   75.0   80.8   75.0   80.0   78.1
实施例B4：几丁质-葡聚糖刺激性和敏化潜力(sensitizing potential)的临床评价
对具有正常皮肤的50名志愿者(37±2岁)，根据Maibach-Marzulli方案，进行6周的几丁质-葡聚糖的敏化潜力和低变应原性(hypoallergenicity)的临床评价。通过将几丁质-葡聚糖(L25)分散于水中制备浓度为10％的膏剂。该膏剂通过Finn
Figure A20078004990100451
封闭贴(occlusion patch)施用到皮肤上。观察红斑、浮肿、干燥和起泡外观的可能征兆，以便辨别出产品的刺激潜势(诱导相，inductionphase)和敏化潜力(激发相，challenge phase)。
从所有的观察结果考虑，可以认为几丁质-葡聚糖是非刺激性的和非过敏性的。因此，其能够适用于权利要求“低变应原性的”。
实施例B5：对志愿者进行几丁质-葡聚糖原发性皮肤刺激的体 内研究
通过施用10％含水膏剂(如实施例B4中)形式的几丁质-葡聚糖(L25)24h(采用Finn
Figure A20078004990100461
封闭贴将其施用到皮肤)，评价几丁质-葡聚糖在皮肤上的原发性刺激(primary irritation)。对10个个体进行该研究。在皮肤病学控制下，在粘附贴片后30min和24h进行观察，旨在检测皮肤的红斑、浮肿和结构改变的征兆。该研究的所有结果表明，几丁质-葡聚糖(以10％分散于水中)能够分类为对皮肤无刺激性。
实施例B6：几丁质-葡聚糖的眼睛刺激(体外，HET-CAM方 法)
根据Luepke等[Fd Chem Toxic 23，287，1985](作为动物试验(OJ of 26/12/1996)的一种替代由官方认可的)，通过HET-CAM测试在受孕的母鸡的卵绒毛膜尿囊膜(母鸡卵测试-绒毛膜尿囊膜)上对几丁质-葡聚糖(L25)的眼睛刺激进行评价。以5％的浓度分散于水中的几丁质-葡聚糖在膜表面沉积而使之接触20秒。试验在四个卵上重复进行。5％几丁质-葡聚糖获得最低分，这就将其归类于实际上对母鸡卵绒毛膜尿囊膜是非刺激性的。
实施例C系列：基于具有精细可控粒度的几丁质-葡聚糖的悬浮液、分散体和乳液的制备
实施例C1：几丁质-葡聚糖基日霜，旨在用于研究对老年志愿 者的性能
表C1.1：对照试验霜剂(标号T0)与基于几丁质-葡聚糖(批次L25)的浓度为1.5％的试验霜剂(标号T1.5)的比较
  相   成分   INCI   功能   浓度(％)
  A   水   水溶液   适量
  Fucogel 1000PP   生物糖胶-1   保湿剂   5
  甘油   甘油   冷稳定剂   2
  RiceNS   触感   1
  Neocare CG90   棕榈葡萄糖苷   乳化剂   0.2
  Keltrol T   黄原胶   防乳化   0.1
  Veegum HS5％溶液   水溶液，硅酸铝镁   防乳化   20
Euxyl K300   苯氧乙醇、对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丙酯、对羟基苯甲酸丁酯   防腐剂   0.8
  B   Inutec Sp1   菊粉氨基甲酸月桂酯   稳定剂   0.3
  Sabonal C161850/50   棕榈醇   增稠剂   3.5
  牛油树脂   牛油树   润肤剂   1.5
  硬脂酸   硬脂酸   消光剂   2
  Antiox cos   大豆甘氨酸(soyaglycine)、维生素E、抗坏血酸棕榈酸酯、卵磷脂   抗氧化剂   0.5
  荷荷巴油   荷荷巴油   润肤剂   4
  琉璃苣油   琉璃苣   润肤剂   5
  澳洲坚果油   澳洲胡桃   润肤剂   5
  Neoderm CSO   鲸蜡硬脂基辛酸酯   改进适用性   1
  Neoderm CSN   异壬酸十六烷酯   改进适用性   1
  Neoderm PTC   季戊四醇四辛酸酯/癸酸酯   变形效应   1.5
  Velvesil DM   二甲基硅氧烷、鲸蜡硬脂基聚二甲基硅氧烷交联聚合物   触感   4
  SF1256   环戊硅氧烷、环己硅氧烷   施用时防止皮肤漂白   1
C   几丁质-葡聚糖(L25部分100-200μm)   几丁质、β-葡聚糖   活性剂   XX＝0(标号T0)或1.5(标号T1.5)
D   Cool Woman341992-N   香精   香精   0.5
试验霜剂(标号T1.5)的制备工序
相A的成分在8℃下混合，然后在75℃下混合相B的成分。将相B加到相A中，混合物用混合器进行均质化，然后冷却。最后在40℃下加入成分C和S。
表C1.2-T0和T1.5霜剂的特性
  霜剂标号  T0   T1.5
  pH  ND   5-7
  粘度(mPa.s)  18000   19000
  密度  ND   1000
实施例C2：几丁质-葡聚糖粒度对包含各种粒度的几丁质-葡聚 糖的几丁质-葡聚糖基化妆霜剂的制备和感觉特性的影响
含具有各种粒度的各批次几丁质-葡聚糖的日霜，以浓度为1.5％根据实施例C1的相同方案制备：1个未研磨、未筛分批次(L25)，以及实施例A2的3个研磨和分级的批次(L25)。所获得霜剂的配制方便性和特性列于表C2.1中。
表C2.1：用具有各种粒度的几丁质-葡聚糖(L25)粉末制备的霜剂特性；感觉状况(视觉状况和触感)分成1～5类，分值5对应于最佳感觉印象。配制方便性分成0～5类，分值1对应于配制最方便。
  几丁质-葡聚糖的粒度   N/A(对照)   未研磨、未筛分  200-250μm   100-200μm   50-90μm
  配制方便性   1   5   4   2   1
  感觉：视觉方面   3   5   4   3   2
  感觉：触感   2   3   2   1   1
  粘度(mPa.s)   18000   19000   19000   20000   29000
由该表易于理解，粒度越精细，将几丁质-葡聚糖引入化妆霜剂就越容易，感觉印象就越佳。也可以看出，引入精细研磨的几丁质-葡聚糖，尤其是采用部分50～90μm，使得可以赋予霜剂相当大的粘度，这对于配方设计师是非常有利的。
实施例C3：几丁质-葡聚糖粉末的粒度对唇膏的制备和特性的影响
采用4种不同粒度的几丁质-葡聚糖粉末和表C3.1中的成分制备唇膏制剂。粒度小于125、90、50和30μm的粉末根据实施例A5的方法以1.5％的浓度生产。直径小于30μm的粒度部分在使用喷气粉碎机进行附加微粉化步骤后获得。
表C3.1
成份   INCI名称   ％
  A 蜂蜡   白蜂蜡   7
豆角脂(carob butter)   辛基十二烷醇、巴西棕榈树(巴西棕榈)蜡 14.25
椰子油   可可椰子   26
可可脂   可可树   14.25
杏仁油   普通杏树   15
甜扁桃油   甜扁桃   12
Zenigloss UPH   蓖麻异硬脂酸琥珀酸酯、氢化蓖麻油   10
  B 几丁质-葡聚糖；直径＜125μm；＜90μm；＜50μm或＜30μm 几丁质，β葡聚糖 1.5
天然杏香料H1504   辛酸/癸酸甘油三酯，杏   0.2
香草精H1202   辛酸/癸酸甘油三酯，香果兰   0.1
沙棘油   俄罗斯大果沙棘   0.1
方案：相A的成分在60℃下混合，然后混合物冷却到45℃。相B的成分与相A混合并将混合物搅拌2～3min。立即将混合物引入到最后的包装中，凝固点约40℃。获得的唇膏的感觉特性列于表C3.2中。
表C3.2：作为几丁质-葡聚糖粒度的函数的唇膏感觉特性
 几丁质-葡聚糖颗粒直径 ＜125μm ＜90μm ＜50μm ＜30μm
 感觉：视觉状况* 1 1 2 3
 感觉：触感、嘴唇上的感觉* 5 5 5 5
*感觉状况(视觉状况和触感)分成1～6类，分值6对应于最佳感觉印象。
由该实施例可以看出，为了能够获得专业品质、均匀外观和唇上具有愉悦触感的唇膏，有必要使用直径小于30μm的几丁质-葡聚糖粉末。采用直径大于30μm的粉末，唇膏就会显得不均匀，并且几丁质-葡聚糖颗粒就会明显可见并能够被感受到。
实施例C4：防晒乳液的制备
“油包水”型防晒乳液采用几丁质-葡聚糖(1.5％)和表C4.1中的成分制备。使用根据实施例A5制备的具有三种不同粒度的几丁质-葡聚糖粉末：＜125μm，＜90μm和＜50μm。
表C4.1
  成分   INCI名称   ％
  A   Parsol MCX   乙基己基甲氧基肉桂酸   5
  Parsol 5000   4-甲氧基二苯甲酰甲烷   4
  Parsol SLX   聚硅氧烷-15   3
  Parsol 1789   丁基甲氧基二苯甲酰甲烷   2
  Neoderm AB   C12-C15烷基苯甲酸酯   7
  SF1256   环戊硅氧烷，环己硅氧烷   4
  Neoderm IPP   棕榈酸异丙酯   2
  Neoderm ISN   异壬酸异壬酯   7
  Inutec sp1   菊粉氨基甲酸月桂酯   0.8
  Sabonal C161850/50   棕榈醇   4
  橄榄油   油橄榄   1
  山梨醇硬脂酸酯   失水山梨醇硬脂酸酯   0.5
  B 水 水溶液 22.15
Euxyl K300   苯氧乙醇、对羟基甲酸甲酯、对羟基甲酸乙酯、对羟基甲酸丙酯、对羟基甲酸丁酯 1
  C1216   蔗糖月桂酸酯   0.2
  PEG-8   PEG-8   2
  2％黄原胶   黄原胶   7.5
  EDTA二钠   EDTA二钠   0.05
  Inutec H25P   菊粉   1
  Veegum HS 5％   硅酸镁铝   20
  白莲花香精   香精   0.3
  UV Titan M170   二氧化钛   4
几丁质-葡聚糖＜125μm；＜90μm；＜50μm   几丁质，β-葡聚糖   0或1.5
表C4.2：作为几丁质-葡聚糖粒度的函数的防晒乳液特性
  几丁质-葡聚糖的直径 ＜125μm  ＜90μm  ＜50μm
  配制方便性* 5  5  5
  感觉：视觉状况* 2  4  4
  感觉：触感* 4  4  4
*感觉状况(视觉状况和触感)分成1～5类，分值5对应于最佳感觉印象。配制方便性分成0～5类，分值5对应于配制最方便性。
由该实施例可以看出，对于象这种防晒乳液的油包水乳液型制剂，优选使用直径小于90μm的几丁质-葡聚糖粉末以确保视觉状况与厂商的要求一致。
根据其他试验，具有直径小于125μm的颗粒的共聚物适用于油包水乳液。
实施例C5-滋润溶液(tonic solution)的制备
含水滋润溶液采用几丁质-葡聚糖(1.5％)和表5.1中的成分制备。使用的几丁质-葡聚糖粉末具有两种不同的粒度：＜30μm和＜10μm。该粉末按照实施例C3进行制备。
表C5.1
  成分   INCI名称   ％
  A   Isoceteth-20   Isoceteth-20   0.4
  Sensiva-SC50   乙基己基甘油   0.1
  Neocare P3C   聚甘油-3癸酸酯   0.2
  Euxyl K500   山梨酸钾、苯甲酸钠、咪唑啉基脲   0.6
  MPDIOL   甲基丙二醇   4
  水   水溶液   90.2
  Fucogel 1000PP   生物糖胶-1   3
  B 乳酸 至pH 5.0～6.0
  着色剂   CI47051   0.1
  C   几丁质-葡聚糖＜30μm和＜10μm   几丁质，β-葡聚糖   1.5
方案：相A的成分按序混合。缓慢加入水。用B调节pH至5～6，加入几丁质-葡聚糖并混合几分钟。
表C5.2：作为几丁质-葡聚糖粒度的函数的滋润溶液的特性
  几丁质-葡聚糖颗粒的直径   ＜30μm   ＜10μm
  配制方便性＊   5   5
  感觉：视觉状况＊   1   4
  颗粒溶解性   0   4
*配制方便性和感觉状况(视觉状况和触感)分成1～5类，分值5对应于最佳感觉印象。配制方便性分成0～5类，分值5对应于制剂最方便性。
从该实施例看出，为了制备具有可接受外观的滋润溶液并且为了使几丁质-葡聚糖颗粒保持在稳定的悬浮液内，颗粒的直径必须小于10μm。
实施例C6：含BDIH-可认证成分的晚霜的制备
“油包水”乳液型晚霜采用几丁质-葡聚糖(1.5％)和表C6.1中的成分制备。这些成分满足制造药品、营养品、食品补充剂与身体护理产品的德国商业及工业联合会(BDIH)的认证要求。该霜剂能够获得BDIH标识，表明其已经被该联合会认证。
使用根据实施例C3制备的具有三种不同粒度的几丁质-葡聚糖粉末：＜125μm，＜90μm和＜50μm。
表C6.1
  成分   INCI名称   ％
  A   Neoderm TCC   辛酸/癸酸甘油三酸酯   11.5
  Neoderm CO   鲸蜡醇脂基辛酸酯   11.5
  Isolan GTI   聚甘油-4-二异硬脂酸酯   4
  蓖麻蜡   氢化蓖麻油   1.5
  B   水   水溶液   适量
  甘油   甘油   3
  硫酸镁   硫酸镁   0.5
  Euxyl K300   苯氧乙醇、对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丙酯、对羟基苯甲酸丁酯   0.8
  C   KiOsmetine-CG＜125μm或＜90μm   几丁质，β-葡聚糖   1.5
表C6.2：作为几丁质-葡聚糖粒度的函数的晚霜特性
  几丁质-葡聚糖颗粒的直径 ＜125μm  ＜90μm  ＜50μm
  配制的方便性＊ 5  5  5
  感觉：视觉状况＊ 2  4  4
  感觉：触感＊ 2  4  4
*感觉状况(视觉状况和触感)分成1～5类，分值5对应于最佳感觉印象。配制方便性分成0～5类，分值5对应于配制最方便性。
由该实施例可以看出，为了配制油包水乳液型护理产品，如这种晚霜，优选使用直径小于90μm的几丁质-葡聚糖粉末以确保视觉状况与厂商的要求一致。
实施例C7：“硅包水(water-in-silicon)”乳液型护理制剂的制备
采用浓度1.5％几丁质-葡聚糖和表C7.1a和C7.1b中的成分制备两种“硅包水”乳液型护理制剂。
表C7.1a：制剂1的成分
Figure A20078004990100541
表C71b：制剂2的成分
Figure A20078004990100542
方案：在50-60℃的温度下混合相A的成分。向相A中加入相B的成分，混合物均质化。搅拌下加入C，并将混合物均质化直至达到完全结合。加入D，并将混合物均质化直至达到完全结合。
实施例C8：日间护理产品的配制
包含1.5％几丁质-葡聚糖的日间护理产品，例如能够根据C1中描述的配方进行制备。
实施例C9：身体护理乳的配制
以下描述了不采用几丁质-葡聚糖(a)和采用几丁质-葡聚糖(b)的两种身体护理乳配方。
  a   b
A   水   水溶液   49.5   48
  Euxyl K300   苯氧乙醇、对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丙酯、对羟基苯甲酸丁酯、对羟基苯甲酸异丁酯   防腐剂   1   1
  溶液CarbopolETD20202％   水溶液，丙烯酸酯/C10-30烷基丙烯酸酯交联聚合物   稳定剂，增稠剂   20   20
  溶液WalocelHM4002％   水溶液，羟丙基甲基纤维素   施用时使开裂最小化   10   10
B   Pemulen TR-2   丙烯酸酯/C10-30烷基丙烯酸酯交联聚合物   稳定剂   0.3   0.3
  失水山梨醇月桂酸酯   失水山梨醇月桂酸酯   助稳定剂   0.1   0.1
  摩洛哥坚果油   亚冈油   植物油   5   5
  荷荷巴油   荷荷巴油提取物   植物蜡   5   5
  Neoderm 105   新戊酸异癸酯   5   5
  Neoderm PTC   季戊四醇四辛酸酯，四癸酸酯   2   2
  SF1256   环戊硅氧烷，环己硅氧烷   挥发性硅油   2   2
  香精   香精   0.1   0.1
C   几丁质-葡聚糖(L16，＜90μm)   几丁质，β-葡聚糖   重塑剂，紧肤剂   0   1.5
D   氢氧化钠   氢氧化钠   将pH调节至4.8-5.4   适量   适量
方案：将相A的成分混合。将相B的成分混合。将相B加入相A，以400rpm将混合物进行均质化10min。将粉末C加入到B/A混合物，以400rpm将混合物均质化1小时。用相D将pH调节至4.8～5.4。
实施例C10：用于胸部的紧肤霜的制备
包含1.5％几丁质-葡聚糖的胸部紧肤霜，例如能够根据以下描述的配方制备。
  成分   INCI  功能   ％
  A   水   水溶液   37.55
  EUXYL K300   苯氧乙醇、对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸丁酯、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丙酯、对羟基苯甲酸异丁酯  防腐剂   0.9
  甘油   甘油  稳定剂   3
  RICENS   二甲基咪唑酮大米淀粉  触感   2
  Veegum HS 5％   硅酸铝镁  稳定剂   10
  Keltrol T   黄原胶   0.15
  C1216   蔗糖月桂酸酯  助乳化剂   0.2
  B   SF1256   环戊硅氧烷，环己硅氧烷  挥发性硅油   9
  乳木果油   牛油果树  处理   12
  橄榄油   油橄榄  处理   10
  Neoderm IPP   棕榈酸异丙酯  铺展   6
  Neoderm PTC   季戊四醇四辛酸酯/癸酸酯  濡湿效应(damper effect)   1.5
  Sabonal C161850/50   棕榈醇  粘度调节剂   3
  Neowax FL65   硬脂酸甘油酯，PEG-100硬脂酸酯  助稳定剂   2
  米蜡   水稻  硬度   0.2
  Inutec SP1   菊粉氨基甲酸月桂酯  稳定剂   0.8
  C   Ginger ychee506340   香精   0.5
  几丁质-葡聚糖(L16，部分＜90μm)   几丁质，β-葡聚糖  紧肤剂   1.5
  D   Caroblend(0.05％Caroquest MCT)   99.95％(PPG-15硬脂基醚)，0.05％(类胡萝卜素，辛酸/癸酸甘油三酯)  着色剂   0.2
程序：相A的成分在80℃下混合，然后在85℃下混合相B的成分。将相B加入相A中，并以10000rpm均质化混合物5min，然后冷却至40℃。在搅拌下向乳液中加入相C和D的成分。
实施例C11：身体护理乳的制备
例如，能够根据以下配方制备包含1.5％几丁质-葡聚糖的身体护理乳。
Figure A20078004990100571
程序：在75℃下混合相A的成分，然后在80℃下混合相B的成分。将相A加入相B中，并以10000rpm均质化混合物3分钟，然后冷却至40℃。搅拌下向乳液中加入相C和D的成分，然后以10000rpm使混合物均质化1分钟。加入几丁质-葡聚糖粉末(E)，整个混合物搅拌60分钟(最终量为200g)。
实施例C12：手霜的配制
包含1.5％几丁质-葡聚糖的手霜例如可以根据以下所述配方制备。
  成分   INCI   功能   ％
  A   水   水溶液   适量
  甘油   甘油   寒冷条件下的稳定性   3
  Euxyl K300   苯氧乙醇、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸丙酯、对羟基苯甲酸丁酯、对羟基苯甲酸异丁酯   防腐剂   0.8
  Keltrol T   黄原胶   抗乳化   0.1
  Neocare Olive   橄榄油水解小麦蛋白，棕榈醇，油酸甘油酯，硬脂酸甘油酯，氢氧化钠   乳化剂   4
  Inutec SP1   菊粉氨基甲酸月桂酯   助稳定剂   0.3
  二甲硅油M350   二甲硅油   防白化(nti-whitening)   5
  B   乳木果油   牛油果树   植物油   3
  SF1214   环戊硅氧烷，二甲硅油   硅树脂   1
  Neoderm PTC   季戊四醇癸酸酯/辛酸酯   抑制效应   2
  Neoderm TCC   癸酸甘油三酸酯酯/辛酸甘油三酸酯酯   中性油   3
  杏仁油   普通杏   植物油   3
  Sabonal C161850/50   棕榈醇   稳定剂   3
  几丁质-葡聚糖(L16，部分＜90μm)   几丁质，β-葡聚糖   保护和再生剂   1.5
  C   泛醇   泛醇   再生剂   1
  香精   香料   香精   0.2
方案：将相A的成分在65℃下进行混合，然后将相B的成分在65℃进行混合。将相A加入相B，以10000rpm将混合物进行均质化3分钟，然后冷却到40℃。将成分C加入到乳液中，冷却混合物，然后混合至少30分钟。
实施例C13：抗粉刺洗剂的配制
包含1.5％几丁质-葡聚糖的抗粉刺洗剂，例如可根据以下所述配方进行制备。
Figure A20078004990100591
程序：将相A的成分进行混合。将相B的成分进行混合。将相A加入相B，以10000rpm将混合物进行均质化3分钟(最终量200g)。
实施例C14：抗牛皮癣护理产品的配制
包含1.5％几丁质-葡聚糖的抗牛皮癣护理产品例如可以根据以下所述配方进行制备。
Figure A20078004990100592
程序：混合相A的成分。混合相C的成分，并将相C升温到75℃。搅拌下将相C加入到相A中，并以10000rpm均质化混合物3分钟，然后冷却至40℃。混合相B的成分，然后将相B加入到C/A乳液中。混合物然后以10000rpm均质化1min(最终量为400g)。
实施例‘D’系列：几丁质-葡聚糖基化妆霜的定期施用对皮肤特 性的影响
实施例D1：每日施用基于浓度为1.5％的几丁质-葡聚糖的日霜 达4个月对老年个体皮肤生物测定参数的影响
该实施例举例说明了实施例C1描述的包含1.5％的几丁质-葡聚糖的霜剂(标号T1.5)对皮肤各种特性的影响，尤其是在皮肤老化的情况下，霜剂和其对照剂应用于老年个体前臂4个月的周期。由于对照霜剂是本身具有强水合性的制剂，该研究明显地证明了研磨的几丁质-葡聚糖的作用。
方案：该研究在20位年龄为58±4岁的男性志愿者上进行，任意地分别在他们的一只前臂上以每日两次的频率施用几丁质-葡聚糖基霜剂(T1.5)和对照霜剂达4个月。在每一个评价时间，通过Friedman非参数检验随后是Dunn检验进行产品间比较。对于每一产品，根据相同的方法随时间进行比较。对于每一参数，在不同时间获得的值之间的显著差异通过Friedman非参数配对检验然后是Dunn检验进行寻找(p值)。
结果-
1.通过squamometry X评价粗糙皮肤表面结构：SquamometryX是从角质层表面通过在测力计提供的在110g/cm2压力下施用透明自粘盘(transparent self-adhesive disk)约10秒来进行取样。角质层样品用甲苯胺蓝和碱性品红溶液染色。通过反射比色法(Minolta色度仪)测定的色度C*定义的颜色评价干燥症的状态。“正常”皮肤是光滑和良好水合的，所具有的squamometry指数C*约5～7。该值越高，角质层越厚，而皮肤就越粗糙和干燥。
在研究开始(M0)时，将要接受试验制剂的两个部位具有相等的squamometry指数值。随后获得的色度C*值列于表D1.1中。对于制剂T0，在处理1个月后(M1)(p＜0.05)，以及随后的几个月(p＜0.001)都观察到显著降低。对于制剂T1.5，改进非常显著且从处理第2个月(M2)以来就存在(p＜0.001)。在第一和第三个月(M3)(p＜0.01)，以及第一和第四个月(M4)(p＜0.001)也是这种情况。两种制剂的效能之间的比较显示，T1.5从处理的第一个月末和随后的几个月内是显著较好的(p＜0.001)。
表D1.1-显示皮肤鳞片状态的Squamometry指数(色度C*)
  时间(月)   C＊霜剂T1.5   C＊对照T0   产品间比较
  M0   11.95±2.26   11.82±2.27   NS
  M1   8.79±2.3   10.49±2.59   p＜0.001
  M2   7.3±2.6   9.81±3.56   p＜0.0001
  M3   6.62±2.2   9.54±3.21   p＜0.0001
  M4   5.8±1.8   9.22±3.46   p＜0.0001
时间之间的比较(p)
  对照T0   M1   M2   M3   M4
  M0   p＜0.05   p＜0.001   p＜0.001   p＜0.001
  M1   NS   NS   NS
  M2   NS   NS
  M3   NS
  霜剂T1.5   M1   M2   M3   M4
  M0   NS   p＜0.001   p＜0.001   p＜0.001
  M1   NS   p＜0.01   p＜0.001
  M2   NS   NS
  M3   NS
NS：值没有显著差异；M0表示0月等。
2.通过紫外光增强的可视化作用(ULEV)评价肤色的不均匀性：ULEV法(Visioscan)是非侵害性方法，其展示皮肤的鳞片状态，尤其是正发生脱离的精细鳞片，并表征角质层角质细胞(corneocyte)的内聚性。测定值表示为受该方法影响的皮肤表面的百分数。当皮肤是光滑的而角质层是内聚性的，ULEV百分数则低，达5％～6％的数值。
在研究中的开始时间(the time of inclusion)(M0)，以及处理一个月之后(M1)，受脱鳞过程(desquamation process)影响的皮肤表面的百分数在两个处理部位相似，约8-9％。随后获得的值列于表D1.2中。对照制剂T0从第一个月就提供了显著改进(p＜0.001)，而研究的剩余时间所述改进持续存在，在第四个月达到7.4％的值。制剂T1.5也提供了显著的改进，这从第一个月就能看到(p＜0.01)，在随后的几个月期间变得更强烈(p＜0.001)。这能够通过第一和第四个月之间(p＜0.01)以及第二和第四个月之间(p＜0.05)的改进看出。相对于对照霜剂，所处理的两个部位之间的比较显示出制剂T1.5在第二个月(p＜0.01)以及在第三个月和第四个月(p＜0.001)的优异性。
表D1.2：受脱鳞过程影响的皮肤表面的百分数(通过ULEV“紫外光增强的可视化作用”，Visioscan测定)
  时间(月)   ％霜剂T1.5   ％对照T0   产品间比较
  M0   8.85±2.29   8.82±2.26   NS
  M1   7.95±2.04   8.57±2.04   p＜0.01
  M2   6.23±2.18   7.83±2.67   p＜0.001
  M3   6.06±2.12   8.24±2.88   p＜0.001
  M4   5.11±1.6   7.38±2.03   p＜0.0001
时间之间比较(p)
  对照T0   M1   M2   M3   M4
  M0   p＜0.001   p＜0.001   p＜0.001   p＜0.001
  M1   NS   NS   NS
  M2   NS   NS
  M3   NS
  霜剂T1.5   M1   M2   M3   M4
  M0   p＜0.01   p＜0.001   p＜0.001   p＜0.001
  M1   NS   NS   p＜0.01
  M2   NS   p＜0.05
  M3   NS
NS：值没有显著差异；M0表示0月等。
3.通过光学轮廓测量术(optical profilometry)评价皮肤的形貌(relief)：皮肤的形貌通过光学轮廓仪(Hitachi照相机)进行非侵害性观察，分析轮廓测量照片以计算皮肤粗糙的平均深度，Rz(μm)。
在研究中的开始时间(M0)，两个部位的Rz值没有显著差异。随后获得的平均深度值列于表D1.3中。制剂T0在处理的第四个月末Rz值显著降低(p＜0.01)。制剂T1.5从处理的第二个月直至研究结束Rz值高度显著降低(p＜0.001)。在处理的第一个月和第三个月之间改进也显著(p＜0.05)，在处理的第一个月和第四个月之间(p＜0.001)以及第二个月和第四个月之间(p＜0.05)改进也显著。与对照霜剂相比，发现制剂T1.5从第一个月(p＜0.01)以及在随后几个月中(p＜0.001)更为有效。
图5示出了施用T1.5霜剂和T0霜剂16周之后一个个体的两前臂上获得的轮廓测量照片。
表D1.3：通过光学轮廓测量术测定的皮肤粗糙度的平均深度Rz(μm)
  时间(月)   Rz(μm)霜剂T1.5   Rz(μm)对照T0   产品间比较
  M0   8.85±2.29   8.82±2.26   NS
  M1   7.95±2.04   8.57±2.04   p＜0.01
  M2   6.23±2.18   7.83±2.67   p＜0.001
  M3   6.06±2.12   8.24±2.88   p＜0.001
  M4   5.11±1.6   7.38±2.03   p＜0.0001
时间之间的比较(p)
  对照T0   M1   M2   M3   M4
  M0   NS   NS   NS   p＜0.01
  M1   NS   NS   NS
  M2   NS   NS
  M3   NS
  霜剂T1.5   M1   M2   M3   M4
  M0   NS   p＜0.001   p＜0.001   p＜0.001
  M1   NS   p＜0.05   p＜0.001
  M2   NS   p＜0.05
  M3   NS
NS：值没有显著差异；M0表示0月等。
4.通过测定皮肤中的共振运行时间评价皮肤的张紧性/弹性：在皮肤中的共振运行时间(RRTM，任意值)通过弹性纤维组织测试探头(Reviscometer)在皮肤上贴附的两个条带之间进行测定。RRTM是皮肤固有张力和张紧性的良好指标，因为皮肤张紧性和绷紧性越强，其形成凸起的皱褶就越少，超声波传播就越迅速。因此，RRTM越短，构成皮肤的部分就越绷紧。RRTM也受到角质层状态、其内聚力的影响；角质层越正常，RRTM就越短。
研究开始时和实验一个月后，两个部位之间RRTM值是相似的。随后获得的值如表D1.4所示。制剂T0在处理期间对RRTM值并未带来任何改变。制剂T1.5在三个月(p＜0.01)和四个月(p＜0.001)后诱导RRTM显著降低，第一个月与第二个月之间(p＜0.01)、第三个月和第四个月之间(p＜0.001)也分别显著降低。与对照制剂相比较，霜剂T1.5在两个月和三个月后(p＜0.01)以及四个月后(p＜0.001)也显著地更为有效。
表D1.4：共振运行时间测定(RRTM任意单位，弹性纤维组织测试探头)
  时间(月)   霜剂T1.5   对照T0   产品间比较
  M0   326±64   327±61   NS
  M1   329±58   329±54   NS
  M2   306±68   329±60   p＜0.01
  M3   302±60   322±52   p＜0.01
  M4   291±59   322±56   p＜0.0001
时间之间的比较(p)
  对照T0   M1   M2   M3   M4
  M0   NS   NS   NS   NS
  M1   NS   NS   NS
  M2   NS   NS
  M3   NS
  霜剂T1.5   M1   M2   M3   M4
  M0   NS   NS   p＜0.01   p＜0.001
  M1   p＜0.01   p＜0.001   p＜0.001
  M2   NS   NS
  M3   NS
NS：值没有显著差异；M0表示0月等。
5.通过测定电容评价角质层水合作用：角质层的水合作用通过采用角质层含水量测试议(Corneometer)测定电容(任意值)进行评价。皮肤的电容与皮肤含水量和角质层的角质细胞的水合状态成比例。良好的水合皮肤电容为65，非常干燥的皮肤为30～40。
在研究开始时两部位上电容值相似。随后获得的值如表D1.5中所示。对照制剂T 0在一个月(p＜0.05)和四个月(p＜0.001)之后使得可能显著增加电容。在两个月和三个月的中间时间内，施用霜剂没有观察到对电容测定值的影响。制剂T 1.5使得在第一个月后(p＜0.05)，以及在第二个月和第四个月(p＜0.001)电容值可显著增大。在第一个月和第四个月之间也观察到电容显著增加(p＜0.05)。在一个月之后(p＜0.05)霜剂T 1.5比对照霜剂显著更为有效，而在2和4月(p＜0.001)甚至更加显著有效。
表D1.5：通过皮肤电容的测定(角质层含水量测试议)评价角质层的水合作用
  时间(月)   霜剂T1.5   对照T0   产品间比较
  M0   57.7±4.0   54.8±3.1   n
  M1   61.3±3.0   57.3±13.1   p＜0.05
  M2   62.9±2.7   57.2±12.9   p＜0.001
  M3   63.5±1.8   57.2±12.6   p＜0.001
  M4   64.6±1.9   58.0±12.5   p＜0.001
时间之间的比较(p)
  对照T0   1   2   3   4
  M0  p＜0.05   NS   NS   p＜0.001
  M1   NS   NS   NS
  M2   NS   NS
  M3   NS
  霜剂T1.5   1   2   3   4
  M0  p＜0.05   p＜0.001   p＜0.001   p＜0.001
  M1   NS   NS   p＜0.05
  M2   NS   NS
  M3   NS
NS：值没有显著差异；M0表示0月等。
结论：种生物测定参数都表示出几丁质-葡聚糖基霜剂(T1.5)与包含除了几丁质-葡聚糖之外的相同成分的对照霜剂(T0)相比的优越性。老年皮肤更加光滑、鳞片更少、更加水合、更加紧致和干燥特征更弱。结果表明几丁质-葡聚糖基霜剂发挥了一系列作用，使得皮肤可重获其弹性，而由此表现得更加光滑，少起伏形貌，更加容光焕发，使得可以将其描述成抗老化成分。该结果可以部分地通过相当强的持久水合效果得以解释，正如通过有象角质仪和电容测试所指示的，但是其他更深的持久作用机理也被涉及，其使得皮肤可恢复其屏障功能而具有其激发的代谢和防护活性。
实施例D2：每日施用基于浓度为1.5％的几丁质-葡聚糖的日霜 达4个月对在老年个体的眼部区域的皮肤的皱纹和表面局部拓扑学 (surface topology)的影响研究
该实施例举例说明了基于浓度为1.5％的几丁质-葡聚糖的霜剂对皮肤各种特性的影响，特别是在皮肤老化的情况下，将测试霜剂和其对照霜剂每日施用到老年个体眼角的区域，达4个月的周期。日霜是采用表D2.1中的成分、根据实施例A5生产的粒度小于125μm的几丁质-葡聚糖颗粒而制备的水包油型乳液，而对照霜剂不含几丁质-葡聚糖。
表D2.1：包含粒度＜125μm的几丁质-葡聚糖的日霜(测试)和不含几丁质-葡聚糖的霜剂(对照)
  成分   INCI名称   ％
  A   水   水溶液   20.1
  甘油   甘油   3
  EULYPE 9010   苯氧乙醇，乙基己基甘油   1
  Cellolize QP5200 2％   羟乙基纤维素   25
  2％黄原胶   黄原胶   20
  Neocare SC15   蔗糖椰油酸酯   0.6
  Corn P04   二淀粉磷酸酯   3
  B   失水山梨醇硬脂酸酯   失水山梨醇月桂酸酯   4.5
  Inutec SP1   菊粉氨基甲酸月桂酯   0.2
  Neoderm TCC   癸酸/辛酸甘油三酸酯   8
  Neoderm PTC   季戊四醇四辛酸酯/癸酸酯   2
  杏仁油   普通杏   5
  荷荷巴油   牛油果树   2
  Parsol 1789   丁基甲氧基二苯甲酰甲烷   1
  Sabonal C 1618 50/50   棕榈醇   3
  C   香精   香料   0.1
  乳酸   乳酸
  D   几丁质-葡聚糖＜125μm   几丁质，β-葡聚糖   0或1.5
方案：在21个59±1岁(52～65岁)女性志愿者上实施单盲、个体内研究(single-blind，intra-individual study)，这些志愿者都有深度鱼尾纹，她们向眼角区域的皮肤(鱼尾纹)以每天两次施用几丁质-葡聚糖基霜剂(测试霜剂)和不含几丁质-葡聚糖的霜剂(对照)4个月。在研究开始和随后在应用1、2、3和4个月之后，皮肤形貌(relief)参数采用皮肤成像分析仪(Skin Image)所分析的
Figure A20078004990100682
凝胶中的皮肤印迹的照片进行表征。照片以35°角拍摄以便可以使阴影区域可视化(或显像，visualization)。
Figure A20078004990100683
图像分析软件给出总的皱纹表面积，所有具有0.03mm2最小表面积的皱纹都被检测到。由此给出皱纹的数量和平均深度，尤其是皮肤的微形貌的皱纹。参数上的变化随后通过以下比较进行计算：
·比较时间t时所有志愿者的参数平均值与时间零时的参数平均值(Δ1)
·比较时间t时所有志愿者用包含几丁质-葡聚糖的测试霜剂处理的区域的参数平均值与采用对照霜剂处理的区域的参数平均值(Δ2)
根据以下公式：
Δ 1 ( % ) = X t - X t 0 X t 0 · 100
Δ2＝(XTt-XTt0)-(XPt-XPt0)和
Δ 2 ( % ) = Δ 2 X Tt 0 + ( X Pt - X Pt 0 ) · 100
其中：Xt和Xt0是采用测试霜剂或对照霜剂在时间t和t0时获得的参数X的平均值；
XTt和XTt0是采用测试霜剂(包含几丁质-葡聚糖)在时间t和t0时获得的参数X的平均值；
XPt和XPt0是采用对照霜剂(无几丁质-葡聚糖)在时间t和t0时获得的参数X的平均值。
统计：通过Friedman非参数配对试验接着采用Dunn检验寻找两种参数(时间t对时间0，或测试霜剂对对照霜剂)之间的显著差异。
结果：
表D2.2：对于包含几丁质-葡聚糖霜剂(测试)和不含几丁质-葡聚糖的霜剂(对照)在时间t时与时间0时比较皮肤形貌(skinrelief)参数平均值的变化
Figure A20078004990100691
NS：差异不显著
表D2.3：采用包含几丁质-葡聚糖的测试霜剂处理的区域，与用对照霜剂处理的区域的参数平均值变化相比，在时间t时所有志愿者皮肤形貌参数平均值的变化
Figure A20078004990100692
从该实施例能够推断，包含1.5％粒度小于125μm的几丁质-葡聚糖的水包油乳液型霜剂使得能够使鱼尾纹区域的皮肤表面光滑，明显减少皱纹的数量和深度，尤其是微形貌的皱褶。皮肤的形貌通过以下进行表征：
·与时间零(Δ1)和使用对照霜剂(Δ2)比较，从使用几丁质-葡聚糖基霜剂3个月以来总起皱表面积显著降低；
·与时间零(Δ1)和使用对照霜剂(Δ2)比较，使用几丁质-葡聚糖基霜剂4个月以后，微形貌的皱褶深度和数目显著降低
实施例‘D3’：有精细可控粒度的几丁质-葡聚糖的组合物的抗老 化效应。在几丁质-葡聚糖存在下的重构人体表皮和人体成纤维细胞 其培养模型中原骨胶原I产生的研究
所使用的生物模型包含源于正常人体表皮(PF2，第八代)的人体表皮(0.5cm2，5天)和成纤维细胞，其放置于24孔板中(每孔一种重构表皮和120000成纤维细胞)，在DMEM/HAM F12补充的共培养基中培养。
采用表D3.1中的成分、粒度小于125μm的几丁质-葡聚糖(批次L25)制备的水包油乳液型简单制剂，局部施用于表皮(5mg/cm2)。进行两个研究：细胞毒性研究(表皮和成纤维细胞的细胞存活力)，和在培养基中对原骨胶原I产生的研究。
表D3.1
成分   INCI名称   ％
  A 水   水溶液   适量
甘油   甘油   35％
乳酸   适量(至pH 4.5)   适量
  B Neoderm TCC   癸酸/辛酸甘油三酸酯   5
Simulgel EPG   丙烯酸钠/丙烯酰二甲基牛磺酸酯共聚物，聚异丁烯，辛基/癸基葡糖苷   2.8
  C 几丁质-葡聚糖＜125μm；＜90μm；＜50μm   几丁质，β-葡聚糖   1.5
细胞毒性：在局部施用测试霜剂之后，与成纤维细胞共培养的表皮用5％CO2在37℃下培养48小时。成纤维细胞和表皮的细胞存活力通过用MTT(溴化3-(4，5-二甲基噻唑-2-基)-2，5-二苯基四唑)对活细胞进行比色标记，以及通过对成纤维细胞形态学进行视觉评价，来进行评估。用测试霜剂处理的培养物的细胞存活力与未处理的培养物(对照)的细胞存活力进行比较。对每个处理类型中三个培养物进行。结果如表D3.2中所示。
表D3.2-局部施用含1.5％几丁质-葡聚糖的霜剂在48小时接触时间后对成纤维细胞共培养物中重构表皮和成纤维细胞的存活力的影响
  局部处理   表皮的存活力(％)   成纤维细胞的存活力(％)
  无(对照)   100   100
  包含1.5％几丁质-葡聚糖的测试霜剂   94   100
原骨胶原I的产生-表皮/成纤维细胞共培养物置于3种不同条件下：
-局部施用包含1.5％几丁质-葡聚糖的测试霜剂；
-未处理(对照)；
-添加TGF-β和抗坏血酸的溶液以补充培养基并使成纤维细胞导致的骨胶原产生最大化(参照)。
每种条件下3个培养物用5％CO2在37℃下温育48小时。培养基中溶液的原骨胶原I的浓度通过ELISA分析(原骨胶原I型C-肽EIA试剂盒，BioWhittaker MK101)进行测定。各组的结果之间的比较通过采用Dunnett多重比较检验的方差分析(ANOVA)进行计算(表D3.3)。
表D3.3：霜剂局部施用几丁质-葡聚糖基霜剂对表皮/成纤维细胞共培养基(n＝3)中原骨胶原I型产生的影响：与对照组比较为参数p
  处理  原骨胶原I的浓度(ng/mD  p
  对照(无)   3458±252(100％)  -
  局部施用包含1.5％几丁质-葡聚糖的霜剂   6693±412(194％)  p＜0.01
  用TGF-β/抗坏血酸补充培养基(参照)   9980±571(289％)  p＜0.01
由该实施例可以得知，与未处理的对照组相比，向成纤维细胞共培养的重构表皮局部施用基于浓度为1.5％的粒度小于125μm的几丁质-葡聚糖的霜剂，对于表皮和成纤维细胞是无毒的，这也非常显著地促进了培养基中原骨胶原I型的产生(其由表皮细胞和/或成纤维细胞分泌)。基于浓度为1.5％的粒度小于125μm的几丁质-葡聚糖的霜剂因此对皮肤发挥了抗老化作用，原骨胶原I型是骨胶原的前体，它是真皮细胞外基质的主要成分。
实施例‘D4’：含具有精细可控粒度的几丁质-葡聚糖的组合物的 抗老化作用。几丁质-葡聚糖对暴露于UVB辐射的人体细胞活组织 中郎格汉斯细胞(Langerhans cell)的保护作用的评价
方案：朗格汉斯细胞是主要位于表皮最深层中的树突细胞。它们不含黑色素并且对诸如暴露于UV辐射的外界侵袭非常敏感。在外应力的情况下，它们倾向于从表皮迁移到真皮，然后激发淋巴细胞的活化。存在于表皮中的健康朗格汉斯细胞的数目因此用作应力相关和老化相关的皮肤损伤的指示。所用模型是源于活检组织的皮肤外植体(4cm2)，在6-孔板上在培养基(DMEM，2mM L-谷氨酸，50IU/ml-50μg/ml青霉素-链霉素)、10％胎牛血清中于37℃(95％空气和5％CO2)培养。对以下3种处理的效果进行比较：
-无局部施用的对照；
-局部施用5mg/cm2根据实施例29制备的含1.5％粒度小于125μm的几丁质-葡聚糖的霜剂；
-局部施用5mg/cm2具有保护因子20的防晒霜(参照)。
进行两种研究：细胞毒性研究，以及研究几丁质-葡聚糖基霜剂对受到或未受到UVB辐射照射的外植体中朗格汉斯细胞数目的影响。
细胞毒性：通过处理后24h的外植体细胞的细胞存活力(通过如实施例29中的MTT试验的方式进行可视化)进行表征。结果列于表D4.1中。
表D4.1：在表皮上局部施用含1.5％几丁质-葡聚糖的霜剂在48h接触时间后对皮肤外植体的存活力的影响
  局部处理   表皮的存活力(％)
  无(对照)   100
  包含1.5％几丁质-葡聚糖的霜剂   94
UVB辐射对外植体中存在的健康朗格汉斯细胞数目的影响：执行第一次局部施用，外植体培养24h，然后，第二次局部施用后1h，在UVB+组中用UVB辐射(0.75J/cm2)照射外植体，而在UVB-组中不进行照射。然后对外植体培养16h。每组使用两个外植体。
免疫组织化学：冷冻外植体，将每个外植体的三个部分固定于丙酮/甲醇混合物中，然后用抗-CD1a-FITC抗体((AbCysLO-CD1a-F05)培养并进行Hoechst细胞核染色1h。通过荧光显微术观察这些部分。对仅仅具有标记荧光和通过树突的存在而证实的“正常”形态学的朗格汉斯细胞进行计数。
与未进行UVB照射的对照相比的保护程度根据以下公式进行计算：
Figure A20078004990100741
其中：
-LC处理UV+是暴露于UVB辐射的处理外植体中朗格汉斯细胞的数目。
-LC对照UV+是暴露于UVB辐射的未处理外植体中朗格汉斯细胞的数目。
-LC对照UV-是未暴露于UVB辐射的未处理外植体中朗格汉斯细胞的数目。
结果列于表D4.2中。
表D4.2：与未处理的对照和用因子-20防晒霜处理的参照相比，用几丁质-葡聚糖基霜剂处理并暴露(UVB+)或未暴露(UVB-)于UVB辐射的皮肤外植体的表皮中用抗CD1a抗体标记的朗格汉斯细胞(LC)的数目；保护程度
  局部处理   健康LC(数目/mm2)UVB-   健康LC(数目/mm2)UVB+  P(％)
  对照   194.3±53.7   35.2±34.7  0
  1.5％几丁质-葡聚糖霜剂   233.3±69.6   116.4±57.7  51
  SPF20防晒霜(对照)   187.4±58.1   230.9±68.4  100
从该实施例推断，局部施用基于浓度为1.5％的粒度小于125μm的几丁质-葡聚糖的霜剂，使得可以在暴露于UVB辐射的皮肤外植体的表皮中维持大部分的朗格汉斯细胞。计算得出对UVB暴露相关性损伤的保护程度为51％，因子-20防晒霜的保护程度为100％。这种抗UVB辐射的保护作用有助于几丁质-葡聚糖化合物的抗老化功效。
实施例‘E’：口服给予粒度小于500μm的几丁质-葡聚糖粉末对 于表征人体中心血管危险的参数的影响
该实施例旨在证实口服给予人体粒度小干500μm的几丁质-葡 聚糖的抗动脉粥样硬化、抗氧化、降血液胆固醇和降血脂功效
所使用的模型是具有正常体重或体重稍微超重、且具有在标准饮食后为1.3～2.5g/L的胆固醇血症的人。粒度小于500μm的几丁质-葡聚糖(根据实施例A5的方法获得)以4.5g/天的速率，在主食前30min分3次摄取。在4个星期的周期内研究功效。对照组接受4.5g/天当量的对照。所述对照是内用的药物级的重高岭土。30位20～50岁的男性个体，体重指数为18～28kg/m2，胆固醇血症1.3～2.5g/L，将他们随机、单盲地分成两组(10个对照/20个进行处理)。对研究考量的血液参数进行医学咨询和测试，并且在挑选个体过程中填写食物问卷调查。食物消耗、生化和抗氧化参数和人体测量参数在研究过程中测定3次(开始时、第二周时和研究结束时)。血样使得可以分析表E1中重申的生化和抗氧化参数。人体测量测定涉及体重监控、身高测定、腰围测定(waist measurement)、臂围测定、大腿围和动脉压测定。
定期消耗具有可控粒度的粉末形式的植物多糖，如几丁质-葡聚糖，对代谢疾病如高胆固醇血、心血管疾病或广义地，代谢综合症和肥胖症发挥预防功效。
表E1：在对人体试验过程中监控的生化和抗氧化参数
  个体选择   研究开始(第一天)   研究半程(第15天)   研究结束(第29天)
  血液学：血红蛋白血细胞比容全血血小板
  生物化学：葡萄糖脲肌酸酐尿酸TGOTGPγ-GT胰岛素甘油三酸酯总胆固醇HDL-胆固醇   生物化学：葡萄糖脲肌酸酐尿酸TGOTGPγ-GT胰岛素甘油三酸酯总月旦固醇HDL-胆固醇   生物化学：葡萄糖脲肌酸酐尿酸TGOTGPγ-GT胰岛素甘油三酸酯总胆固醇HDL-胆固醇   生物化学：葡萄糖脲肌酸酐尿酸TGOTGPγ-GT胰岛素甘油三酸酯总胆固醇HDL-胆固醇
  氧化作用评价：异前列烷脂类过氧化物氧化的LDL氧化的蛋白还原的谷胱甘肽氧化的谷胱甘肽维生素Cβ-胡罗卜素α-和γ-生育酚   氧化作用评价：异前列烷脂类过氧化物氧化的LDL氧化的蛋白还原的谷胱甘肽氧化的谷胱甘肽维生素Cβ-胡罗卜素α-和γ-生育酚   氧化作用评价：异前列烷脂类过氧化物氧化的LDL氧化的蛋白还原的谷胱甘肽氧化的谷胱甘肽维生素Cβ-胡罗卜素α-和γ-生育酚
表E2-摄取几丁质-葡聚糖对生化和抗氧化参数的影响
Figure A20078004990100761
应该注意到，口服摄取粒度小于500μm的几丁质．葡聚糖，显著地改进了人体内脂质和抗氧化剂分布和相关参数。这使得能够推断，定期消耗几丁质-葡聚糖对于预防动脉硬化症以及广义地关于有关病理学是有益的。
实施例‘F’系列：至少包含具有精细可控粒度的几丁质-葡聚糖 的多孔内聚性物质
实施例F1：多孔材料形式的几丁质-葡聚糖的应用
通过均质化100g具有精细粒度的几丁质-葡聚糖粉末(L25，部分＜90μm)和900g水至少1小时而制备几丁质-葡聚糖膏剂。将该膏剂在-18℃下冷冻，然后冻干。获得具有良好机械强度的内聚性多孔材料。通过扫描电子显微术观察(图6)，显示出非常通气的、各向同性的原纤结构。
实施例F2：内聚性多孔复合材料形式的几丁质-葡聚糖和壳聚 糖的应用
制备2％壳聚糖在1％乙酸中的溶液。将具有精细粒度的几丁质-葡聚糖粉末(L16，部分＜90μm)分散于其中，分散体均质化2分钟。将分散体在-18℃下冷冻然后冻干。获得具有良好机械强度的内聚性多孔材料。通过扫描电镜显微术观察(图7，纵截面)，显示出非原纤性互联多孔结构，孔道呈现出一定方向。
实施例F3：具有壳聚糖作为聚合物基质以及几丁质-葡聚糖共 聚物颗粒作为受分散剂的多孔复合材料的制备：粒度对机械和形态 学特性的影响
根据实施例A5的方法制备各种几丁质-葡聚糖粒度。颗粒直径小于63μm的部分和直径为125～250μm、250～500μm以及500～1000μm的部分通过筛分进行分离。
分子质量42K(通过毛细管测粘法测定分子质量)和11％乙酰化程度的壳聚糖溶解于乙酸(1％)中从而形成浓度等于2％(m/m)的溶液。将给定重量的具有可控粒度的几丁质-葡聚糖加入到给定体积的该溶液中。通过磁力搅拌2～3min使4mL体积的悬浮液均质化，随后倾倒于模(菱形)中并冷冻。然后将样品放置于冻干器架上从而通过在真空下升华48h而除去溶剂。
通过改变壳聚糖和几丁质-葡聚糖的重量比例以及几丁质-葡聚糖粉末的粒度而制备具有各种组成的内聚性多孔复合材料。
通过改变模的尺寸来生产具有各种规格的泡沫形式的复合材料-实施例：六边形聚苯乙烯称量船，小规格：4mL溶液；大规格：15mL溶液。所制备的泡沫的配制参数在以下表F3.1中重申。
表F3.1：壳聚糖/几丁质-葡聚糖混合物和内聚性多孔复合材料的性能
  标号   壳聚糖/几丁质-葡聚糖的比例(m/m)   几丁质-葡聚糖部分   密度(g/cm3)   杨氏模量(MPa)
  A2   25/75   ＜63μm   0.104   0.16±0.02
  B2   50/50   ＜63μm   0.052   0.47±0.15
  C2   75/25   ＜63μm   0.038   0.14±0.09
  A3   25/75   125-250μm   0.114   0.23±0.01
  B3   50/50   125-250μm   0.060   0.07±0.01
  C3   75/25   125-250μm   0.037   0.15±0.05
  A5   25/75   500-1000μm   0.114   0.06±0.02
  B5   50/50   500-1000μm   0.060   0.25±0.06
  C5   75/25   500-1000μm   0.039   0.31±0.01
通过冻干获得的泡沫形式的复合材料根据通过扫描电子显微术(SEM)在微结构方面进行表征。泡沫的抗压强度通过杨氏模量表示，在装配低测力计(force cell)的Instron 5566拉伸-压缩试验机上通过轴向压缩试验进行测定。样品承受0.03N的预加负荷，以0.2mm/min的速度变形。从应力/应变曲线的初始线性区域测定杨氏模量。密度通过重量分析(泡沫的体积/质量)进行测定。结果报告于表F 3.1中。SEM显微照片如图8所示。
由此，从表F3.1可以理解，泡沫的密度随着几丁质-葡聚糖比例的增加而增加。令人惊讶的是，可以注意到对于相等的壳聚糖/几丁质-葡聚糖比例(50/50)，杨氏模量最高，而对于比例75/25和25/75却显著较低。由此，约50％几丁质-葡聚糖颗粒的比例构成用于改进泡沫机械强度、以及在这一点上的轴向抗压强度的最佳比例。
并且通过图8可注意到，几丁质-葡聚糖颗粒均匀分布于泡沫的厚度，其密度随着其初始比例逻辑性地增加。各处发现的颗粒都处于孔道中并且经常正好固定于孔道壁上。
通过SEM对样品A5和B5(几丁质-葡聚糖粒度为500～1000μm)以及样品A4和B4(粒度250～500μm)获得的图像记录(图9)显示，不再存在结构均匀性。冻干后样品的下半部中颗粒尺寸及沉积物过大且集中。该实施例证实，以在多孔复合材料中应用几丁质-葡聚糖共聚物为目的，该共聚物应该具有精细的可控粒度。

Claims (28)

1.一种包含至少一种几丁质-葡聚糖共聚物的真菌提取物，所述几丁质-葡聚糖共聚物为微米颗粒形式，其中以重量计至少70％的所述颗粒具有小于500微米(μm)的粒度。
2.根据权利要求1所述的真菌提取物，其特征在于，以重量计至少70％的所述几丁质-葡聚糖共聚物颗粒具有小于355微米(μm)的粒度。
3.根据权利要求1或2所述的真菌提取物，其特征在于所述几丁质-葡聚糖共聚物包含比率为95∶5～15∶85(m/m)的所述几丁质的N-乙酰基-D-葡糖胺单元与β-葡聚糖的D-葡萄糖单元。
4.根据权利要求1～3中任一项所述的真菌提取物，其特征在于，相对于所述真菌源提取物的总质量，所述真菌源的多糖包含以质量计大于70％的几丁质-葡聚糖共聚物。
5.根据权利要求1～4中任一项所述的真菌提取物，其特征在于，其来源于选自由子囊菌类真菌、黑曲霉类真菌、担子菌类真菌、香菇(冬菇)类真菌和双孢蘑菇(草菇)类真菌及它们的任意混合物构成的组中的真菌。
6.根据权利要求1～5中任一项所述的真菌提取物，其特征在于，所述真菌提取物是所述几丁质-葡聚糖共聚物的水解产物。
7.根据权利要求1～6中任一项所述的真菌提取物，其特征在于，所述微米颗粒由以重量计至少50％的粒度小于250微米(μm)的颗粒构成。
8.根据权利要求1～6中任一项所述的真菌提取物，其特征在于，所述微米颗粒具有小于125μm，优选在50微米(μm)和90微米(μm)之间的粒度。
9.根据权利要求1～6中任一项所述的真菌提取物，其特征在于，所述微米颗粒具有小于90微米(μm)的粒度。
10.一种包含根据权利要求1～9中任一项所限定的真菌提取物的组合物。
11.根据权利要求10所述的组合物，其特征在于，所述组合物是化妆组合物。
12. 根据权利要求10或11所述的组合物，其特征在于，所述多糖或所述真菌提取物以总体组合物的按重量计0.01％～10％的浓度使用。
13.一种悬液、乳液或分散体形式的组合物，包含溶剂和至少一种根据权利要求1～9中任一项所限定的真菌提取物。
14.一种根据权利要求10～13中任一项所限定的组合物在实施化妆、皮肤化妆或皮肤病学护理中的应用，其特征在于，所述护理选自由用于改善皮肤的水合、提高皮肤的保水能力、改善皮肤的屏障功能、改善皮肤保护和/或皮肤的防护活性、发挥抗老化功效、改善皮肤外观、改善皮肤的均匀度、改善皮肤的紧致性和皮肤的张紧性、以及改善表皮对真皮的附着的身体或面部护理构成的组。
15.根据权利要求10～13中任一项所限定的组合物在减少皱纹或者延缓或预防皱纹出现中的应用。
16.根据权利要求10～13中任一项所限定的组合物作为食品补充剂组合物的应用，优选用于获得选自抗氧化、降低血液胆固醇或降低血脂作用、对免疫系统的刺激作用、尤其是在糖尿病的情况下的降血糖作用构成的组中的作用，以及在预防和/或抵抗选自血脂异常症、动脉粥样硬化、肥胖症、肥胖相关疾病、心血管疾病、代谢综合征、糖尿病和高尿酸血症构成的组中的病理学的作用。
17.一种食品补充剂组合物，包含根据权利要求1～9中任一项所限定的至少一种真菌源提取物作为活性成分。
18.一种药物组合物，包含根据权利要求1～9中任一项所限定的至少一种真菌源提取物作为活性成分。
19.根据权利要求1～9中任一项所限定的真菌源提取物或者根据权利要求10～13中任一项所限定的组合物作为组合物的赋形剂的应用。
20.一种用于制备真菌提取物的方法，包括：
a)从真菌生物质中提取和纯化几丁质-葡聚糖共聚物，这种真菌提取物中的所述聚合物不溶于水或有机溶剂，
b)从干燥的或溶解的几丁质-葡聚糖开始，进行过滤、干燥、研磨以及对研磨后获得的颗粒分级的步骤，这些步骤同时或单独进行，并且与它们的次序无关，使得可以获得其中以重量计至少70％的颗粒粒度小于500微米(μm)的微米颗粒。
21.一种多孔材料，包含粒度小于500微米(μm)的颗粒形式的至少一种真菌提取物，优选至少一种几丁质聚合物和/或一种几丁质-葡聚糖共聚物。
22.根据权利要求21所述的多孔材料，其特征在于，所述多孔材料包含根据权利要求1～9中任一项所限定的真菌提取物。
23.根据权利要求21或22所述的多孔材料，其特征在于，所述真菌提取物具有小于250微米、优选小于90微米、更优选小于63微米的粒度。
24.一种用于制备多孔材料的方法，其特征在于，包括以下步骤：在溶剂中分散或乳化或悬浮至少一种粒度小于500微米的颗粒形式的真菌提取物，然后除去这种溶剂并获得包含所述真菌提取物的多孔材料。
25.一种包含基质和被分散剂的多孔复合材料，所述基质，也称为分散剂，是至少一种类型的聚合物，而所述被分散剂是粒度小于500微米(μm)的颗粒形式的至少一种真菌提取物，优选几丁质聚合物或几丁质-葡聚糖共聚物。
26.根据权利要求25所述的多孔复合材料，其特征在于，所述多孔材料包含根据权利要求1～9中任一项所限定的真菌提取物。
27.根据权利要求25或26所述的多孔复合材料，其特征在于，所述真菌提取物具有小于250微米、优选小于90微米、更优选小于63微米的粒度。
28.一种用于制备包含基质和分散在所述基质中的试剂的多孔复合材料的方法，其特征在于，包括(i)溶解能够形成所述多孔复合材料的所述基质的聚合物的步骤，(ii)将至少一种粒度小于500微米的颗粒形式的真菌提取物分散、或乳化、或悬浮在所述聚合物的溶液中的步骤，(iii)从包含所述真菌提取物的所述聚合物的溶液中除去所述溶剂的步骤，(iv)获得包含形成所述基质的所述多孔聚合物和形成所述被分散剂的所述真菌提取物的复合材料。
CNA2007800499018A 2006-11-20 2007-11-20 精细粒度的真菌提取物几丁质-葡聚糖 Pending CN101583630A (zh)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
FR0654998 2006-11-20
FR0654998A FR2908771B1 (fr) 2006-11-20 2006-11-20 Chitine-glucane d'extrait fongique de granulometrie fine

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN101583630A true CN101583630A (zh) 2009-11-18

Family

ID=37963641

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CNA2007800499018A Pending CN101583630A (zh) 2006-11-20 2007-11-20 精细粒度的真菌提取物几丁质-葡聚糖

Country Status (8)

Country Link
US (1) US20100003292A1 (zh)
EP (1) EP2094735A1 (zh)
CN (1) CN101583630A (zh)
AU (1) AU2007324534B2 (zh)
BR (1) BRPI0718987A2 (zh)
CA (1) CA2670006A1 (zh)
FR (1) FR2908771B1 (zh)
WO (1) WO2008061999A1 (zh)

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN106591219A (zh) * 2016-12-22 2017-04-26 叶宗耀 一种表皮细胞培养基
US20220152429A1 (en) * 2014-01-29 2022-05-19 Pour Moi Beauty, Llc. Skincare system
CN115651096A (zh) * 2022-11-04 2023-01-31 齐鲁工业大学 一种从真菌中提取甲壳素-葡聚糖的方法

Families Citing this family (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR2941151B1 (fr) * 2009-01-22 2012-05-11 Caster Extrait de lentinus pour son action sur la cellulite et les amas graisseux.
EP2429598A2 (en) * 2009-05-13 2012-03-21 Kitozyme S.A. Adhesive composition
RU2631609C2 (ru) 2012-03-23 2017-09-25 Фарма73, С.А. Порошок природного биокомпозита, получаемый из биомассы pichia pastoris, способ его получения и применения в качестве эксципиента
CA2949752A1 (en) 2014-05-21 2015-11-26 Pharma73, S.A. Chitin-glucan complex, its preparation, and uses
US10092609B2 (en) 2015-01-16 2018-10-09 James A. Wieser Process for preparing medicinal mycological preparations
JP2019510036A (ja) 2016-03-31 2019-04-11 ゴジョ・インダストリーズ・インコーポレイテッド プロバイオティクス／プレバイオティクス有効成分を含む清浄剤組成物
US10806769B2 (en) 2016-03-31 2020-10-20 Gojo Industries, Inc. Antimicrobial peptide stimulating cleansing composition
AU2017365019A1 (en) 2016-11-23 2019-07-11 Gojo Industries, Inc. Sanitizer composition with probiotic/prebiotic active ingredient
KR20240056665A (ko) * 2018-08-31 2024-04-30 닛산 가가쿠 가부시키가이샤 접착성 세포의 부유 배양용 배지 조성물
WO2021046073A1 (en) 2019-09-05 2021-03-11 Dupont Nutrition Biosciences Aps Feed composition
CN114727637B (zh) * 2019-11-18 2024-07-26 三菱商事生命科学株式会社 成形食品加工用组合物

Family Cites Families (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3914413A (en) * 1971-02-10 1975-10-21 Leslie L Balassa Process for facilitating wound healing with N-acetylated partially depolymerized chitin materials
IT1104351B (it) * 1978-06-14 1985-10-21 Muzzarelli Riccardo Il complesso glucano chitosano il metodo della sua produzione a partire da muffe funghi e lieviti e i suoi usi
GB2259709A (en) * 1991-09-19 1993-03-24 British Textile Tech Production of chitin/chitosan
BE1014638A6 (fr) * 2002-02-12 2004-02-03 Univ Liege Methode de preparation de derives de la paroi cellulaire a partir de biomasse.
WO2004033502A1 (ja) * 2002-10-08 2004-04-22 Ricom Corporation キトサン含有多糖、その製造方法及び用途

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20220152429A1 (en) * 2014-01-29 2022-05-19 Pour Moi Beauty, Llc. Skincare system
CN106591219A (zh) * 2016-12-22 2017-04-26 叶宗耀 一种表皮细胞培养基
CN115651096A (zh) * 2022-11-04 2023-01-31 齐鲁工业大学 一种从真菌中提取甲壳素-葡聚糖的方法

Also Published As

Publication number Publication date
FR2908771B1 (fr) 2011-07-29
EP2094735A1 (fr) 2009-09-02
BRPI0718987A2 (pt) 2014-02-18
WO2008061999A1 (fr) 2008-05-29
FR2908771A1 (fr) 2008-05-23
CA2670006A1 (fr) 2008-05-29
AU2007324534A1 (en) 2008-05-29
US20100003292A1 (en) 2010-01-07
AU2007324534B2 (en) 2014-01-16

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN101583630A (zh) 精细粒度的真菌提取物几丁质-葡聚糖
CN104870479B (zh) 透明质酸化合物与葡甘露聚糖的聚合物
CN101878230B (zh) 乳液中的交联透明质酸
EP2939657B1 (en) Skin-exterior anti-ageing composition and production method therefor
CN102112106B (zh) 包含经发酵和酶处理的绿豆种子提取物、用于皮肤抗老化的化妆品组合物
US7820211B2 (en) Cosmetic material containing sweet pea extract
KR20150005928A (ko) 피부，점막 및／또는 손발톱의 치료 및／또는 관리를 위한 엑소폴리사카라이드
TW201105362A (en) Collagen production enhancer, and external composition for skin and cosmetic each comprising same
CN109862875A (zh) 一种活性混合物
CN105263583B (zh) 圆穗蓼提取物的化妆品用途或皮肤病用途
TW202122065A (zh) 含有纖維素之顏料
CN101547939A (zh) 透明质酸丙二醇酯及使用其的皮肤外用剂
CN108852928A (zh) 一种抗衰老舒敏保湿凝胶及其制备方法
JP2003137768A (ja) 抗老化剤
JP2005162663A (ja) 皮膚用基剤
KR101953676B1 (ko) 악마의 발톱 초음파 추출물을 함유하는 피부 보습용 화장료 조성물
KR101440844B1 (ko) 아마씨 점액 또는 점액 추출물을 함유하는 화장료 조성물
JP2009024075A (ja) 多糖体、その製造方法及びその用途
KR101690144B1 (ko) 한천을 유효성분으로 함유하는 피부 보습 및 피부 각질형성 세포 분화 촉진용 화장료 조성물의 제조방법 및 이에 따라 제조된 화장료 조성물
WO2019142921A1 (ja) 化粧用組成物
CN101484128A (zh) 包含至少一种c-糖苷衍生物和至少一种透明质酸的组合物及其美容用途
KR101814537B1 (ko) 바이오셀룰로오스의 분말을 유효성분으로 함유하는 셀룰라이트 감소 및 예방용 피부외용 조성물
CN105636653A (zh) 圭亚那塔皮漆木提取物的化妆品或皮肤病学用途
KR101814538B1 (ko) 바이오셀룰로오스의 분말을 유효성분으로 함유하는 셀룰라이트 감소 및 예방용 화장료 조성물
JP2005179286A (ja) ヒアルロン合成促進剤の皮膚老化防止剤への利用

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C02 Deemed withdrawal of patent application after publication (patent law 2001)
WD01 Invention patent application deemed withdrawn after publication

Open date: 20091118