CN101568638A - 发酵乳杆菌Ess-1 DSM17851及其在治疗和/或预防念珠菌病以及尿道感染中的应用 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及一种新的发酵乳杆菌菌株，称作Ess－1，其已经被保藏在德国微生物菌种保藏中心，保藏号为DSM17851。发酵乳杆菌菌株Ess－1在抑制念珠菌中示出颇有价值的性质。本发明因此还涉及发酵乳杆菌菌株Ess－1的医药学应用，特别是在治疗和/或预防念珠菌病和尿道感染中的应用。本发明还涉及包含这种新细菌菌株的药品和用品。

Description

发酵乳杆菌Ess-1 DSM17851及其在治疗和/或预防念珠菌病以及尿道感染中的应用
技术领域
本发明涉及对于念珠菌感染即念珠菌病以及细菌感染具有有益作用的益生菌领域。本发明还涉及包含这种细菌的用于个人护理方面的药物组合物和产品以及这种细菌的医药学应用。
背景技术
尿生殖区中的正常菌群由包含超过50种不同的细菌种群的复杂生态系组成(Hill et al.，Scand.J.Urol.Nephrol.1984(86(suppl.))：23-29)。所述正常菌群主要是属于乳杆菌属(Lactobacillus)(LB)的细菌，其是适合育龄妇女阴道环境的革兰氏阳性杆菌。这些细菌还有助于维持阴道中的特殊环境以及生态平衡。阴道环境的pH低于4.5。酵母和肠细菌较少或不存在(Redondo-Lopez et al，Rev.Inf.Dis.1987(12)：856-872)。
一些LB菌株通过多种机制抑制潜在致病菌的生长。LB的代谢导致有机酸、特别是乳酸和乙酸的形成，使得阴道液的pH较低，这对于许多其他微生物是不利的。LB也可以产生可溶物质，直接抑制潜在致病菌和酵母的生长。它们也可以产生过氧化氢，其对于细菌和真菌是毒性的。这些抑制特性在不同LB菌株之间可显著不同(Hooton et al.，JAMA 1990(265)：64-69)。
与尿生殖区相似，皮肤也由一群生物体建群，形成了其正常菌群。所述生物体的数目和性质(identity)在不同皮肤部位各有不同，潮湿和油性皮肤在单位皮肤面积中具有更多的微生物。这些菌群与皮肤的结构屏障一起为宿主提供了对抗入侵的微生物的良好防御。皮肤上细菌的数目从在前臂和背部干燥表面上的几百个细菌每cm2到在潮湿部位如腋和腹股沟上的几万个细菌每cm2。这种正常菌群在防止“外来”生物体在皮肤上建群起重要作用，但是对其需要保持检查以避免皮肤感染。
从口至肛门的胃肠(GI)道具有超过500种不同细菌菌种的丰富菌群，其中一些对于具有重要的健康功能。GI菌群由大约1014个细菌以及少量的共生酵母组成。由于一般健康状态的改变，念珠菌(Candida)可以过度生长并导致痈疽。另外，免疫低下患者中念珠菌的过度生长可导致全身感染，这是非常严重的病症。
天然防御系统的薄弱或者不均衡可使得潜在致病微生物引起临床感染，例如与药物治疗、不良的个人护理或者微生物菌群转变(shift)或粘膜相关的感染。也可以发现微生物菌群转变与不同的病症相关。
酵母生物体总是存在于人体中，但是通常被固有的微生物菌群阻止过度生长。念珠菌病是由于念珠菌导致的感染，影响广泛的器官系统。该感染大多数是由于白色念珠菌(Candida albicans)和光滑念珠菌(C.glabrata)感染所致。其次是由于热带念珠菌(C.tropicalis)、近平滑念珠菌(C.parapsilosis)和克鲁斯氏念珠菌(C.kruseii)导致感染，罕见其它念珠菌导致感染。念珠菌病通常由于激素改变而触发，如在妊娠、月经以及服用避孕药期间。其它常见原因是阴道中pH的失衡、糖尿病和抗生素治疗，以及机体微生物平衡的紊乱。对抗念珠菌感染的天然宿主防御包括机械屏障、非特异性抗微生物物质(多肽、碱性蛋白酶)、吞噬作用以及特异性免疫应答(T-和B-淋巴细胞)，迟发型超敏反应。
在具有免疫能力的人中，暴露于环境中的机体的任何温湿部分均易被感染，导致阴道炎、外阴疹、鹅口疮、结膜炎、眼内炎、尿布疹以及指甲、直肠及及其它皮肤皱褶处的感染。在免疫功能低下的患者中，可以发生全身性疾病如心肌炎、肝脾脓肿、肺部感染、CNS感染以及慢性疾病。念珠菌病可以从局部感染传播导致具有严重并发症的全身感染，如心肌炎、眼内炎和肝脾脓肿。因此，非常重要的是找到针对念珠菌病的有效治疗和预防措施以避免对象出现这种严重病症。
鹅口疮是由白色念珠菌导致的口腔感染的通称，其影响嘴唇周围、颊内部以及舌和上颚的湿润表面。鹅口疮在糖尿病人或者受假牙刺激的人群中常见。患有抑制免疫系统的疾病如癌症和AIDS的人也通常受念珠菌病的困扰。
口腔念珠菌感染可以传播至食管，导致食管炎。这种感染最常见于AIDS患者以及接受癌症化疗的人中。
念珠菌感染也通常见于潮湿皮肤部分如尿布覆盖的皮肤区域、日常带橡胶手套的人手、手指甲基底部皮肤边缘、特别是暴露于潮湿环境中的手、腹股沟周围部位以及臀部皱褶和巨大乳房下的皮肤折叠处。
阴道炎是由于细菌或真菌导致的阴道粘膜炎症。阴道炎本身最初是无害的，但是可以导致妊娠妇女早产或者不孕。
阴道念珠菌病导致阴道瘙痒和刺激症状，具有类似于软白奶酪的发白的软分泌物(limpy discharge)。这通常使得具有症状的女性非常不适，并且另外导致对于正常活动如体育活动和性生活的限制。
阴道念珠菌病通常通过用包含抗真菌剂的乳剂、栓剂、凝胶胶囊、阴道片剂和膏剂进行局部治疗。也可以通过口服药物治疗。抗真菌剂的一个问题是如果重复使用，则真菌对于该药剂的抗性增加。另外，这种治疗通常效力低下，且需要医生处方。
家庭医治如应用酸奶、嗜酸性片剂或者用醋冲洗也用于治疗念珠菌病。然而这些治疗方法的效力较低。尽管酸奶包含乳杆菌，但是其不是特别适合杀死真菌或者降低真菌的生长。如本领域技术人员所已知，这种治疗仅可以有效减轻轻微感染的症状。本领域也已经提出产乳酸细菌可以通过吸收性物品如尿布、卫生巾、短裤衬里(panty liners)和卫生栓而给予，例如WO97/02846、WO99117813、WO99/45099和WO00/35502所述。
目前愈加感兴趣的是发现能恢复健康微生物菌群和/或阻止不希望的微生物不受控制地生长的益生微生物。给予这种益生菌不具有抗真菌剂的不良副作用且优选更有效地治疗和/或预防真菌感染。先前所做的发现这种微生物的尝试已经取得各种各样的成功，但是存在益生菌在阴道中的吸附和存活力较低、阻止真菌生长的效力有限以及在制品贮存期间的存活力降低等问题。选择的益生菌的其它重要特征是在存在氧的条件下的生长能力以及冻干时的存活能力。最重要的是选择的益生菌必须有效地杀死和/或阻止不希望的真菌和/或细菌的生长。先前已经证实益生乳杆菌可有效治疗和预防细菌性阴道炎。然而，在预防和/或治疗阴道念珠菌病中的成功非常有限。因此，仍需要开发有效的益生菌以治疗念珠菌病包括阴道念珠菌病，且其也可以有效地抗细菌感染如尿道感染。
发明概述
本发明的目的是提供益生菌，用以治疗和/或预防念珠菌病和/或细菌感染如尿道感染。
在本发明的第一个方面中，上述目的通过提供一种新的发酵乳杆菌(Lactobacillus fermentum)菌株而实现，该菌株被称作Ess-1，保藏在德国微生物菌种保藏中心(Sammlung von Mikroorganismen und ZellkulturenGmbH)，保藏号为DSM 17851。
另一方面，本发明涉及发酵乳杆菌菌株Ess-1用作药物的应用。
再一方面，本发明涉及发酵乳杆菌菌株Ess-1在制备用于预防和/或治疗念珠菌病的药物组合物中的应用。
另一方面，本发明涉及发酵乳杆菌菌株Ess-1在制备用于预防和/或治疗细菌感染如尿道感染的药物组合物中的应用。
再一方面，本发明涉及包含发酵乳杆菌菌株Ess-1的药物组合物，该组合物任选具有药物可接受的载体、赋形剂和/或稀释剂。
另一方面，本发明涉及包含发酵乳杆菌菌株Ess-1的卫生用品。
本发明还涉及制备用于治疗和/或预防念珠菌病的药物组合物的方法，包括向所述药物组合物中加入发酵乳杆菌菌株Ess-1。
另外，本发明涉及制备用于治疗和/或预防念珠菌病的卫生用品的方法，包括向所述卫生用品中加入发酵乳杆菌菌株Ess-1。
由于已经证实新的发酵乳杆菌菌株Ess-1提供极佳的念珠菌生长抑制作用，因此这种新菌株示出了在用于制备治疗和/或预防念珠菌病的药物中的重要价值。另外，本发明解决了提供将这种新菌株输送至机体相应部位以进行这种治疗和预防的产品和物品的问题。
定义
在本文中，抗真菌剂是用于治疗真菌感染的药物，该药物不是如下阐述的益生菌。
在本文中，益生菌是指活的微生物，当将其以足够量给予宿主时可赋予健康益处。
在本文中，念珠菌病是指由在机体任何部位存在的念珠菌导致的感染，所述部位例如是皮肤、尿生殖区、口、食管或肠。
在本文中，口服补剂是指经口给予的组合物，如喷雾剂、片剂、口香糖等。
在本文中，生物学纯的是指仅含有一种特定的细菌菌株的细菌培养物。
术语“卫生用品(sanitary article)”是指与穿戴者的皮肤贴近放置的产品，以吸收并容纳机体排出物例如尿液、粪便和月经液，该术语也指用于清洁和护理皮肤和尿生殖区且也可以用于将益生菌输送至这些区域的产品。本发明主要涉及一次性卫生用品，是指在使用后不用清洗或另外回收或再使用的卫生用品。一次性卫生用品的例子包括湿擦巾(wet wipe)、干擦巾(dry wipe)、女性卫生产品如卫生巾(sanitary napkin)、短裤衬里(pantyliner)、卫生内裤(sanitary panty)和卫生栓、女性插入物(feminine insert)、婴儿和失禁成人用的尿布和短裤尿布(pant diaper)、失禁用垫(incontinencepad)、尿布插入物(diaper insert)等。
术语“吸收性物品”是指与穿戴者的皮肤贴近放置的物品，以吸收并容纳机体排出物如尿液、粪便和月经液。一次性卫生用品的例子包括女性卫生产品如卫生巾、短裤衬里、卫生内裤和卫生栓，女性插入物，婴儿和失禁成人用的尿布和短裤尿布，失禁用垫、尿布插入物等。
“卫生织物(hygiene tissue)”是擦拭皮肤的任何物品，例如毛巾(washcloth)、贴片(patch)、小毛巾(towelette)、纸巾(napkin)、湿擦巾、干擦巾等。
在本文中，“脂质”是指在水中不溶但是在有机溶剂中可溶的物质。
附图简述
图1示出白色念珠菌和光滑念珠菌对于三个菌株生长的平均抑制作用。■＝白色念珠菌，□＝光滑念珠菌。*dMRSs pH调节为所有滤过物的最低记录pH值(pH 3.7)。0表示无观测到的生长，5表示非常好的生长。
图2示出在如下情况中对于白色念珠菌的生长抑制作用：50mM抗坏血酸(图2a)和50mM丙酸(图2b)、Ess-1滤过物及加入50mM抗坏血酸(图2a)和50mM丙酸(图2b)的Ess-1滤过物。0表示无观测到的生长，5表示非常好的生长。
图3示出在包括Ess-1在内的5种不同的乳杆菌菌株中琥珀酸、乙酸和丙酸的产生情况。所述菌株于MRS肉汤中生长，在对上清进行灭菌过滤后记录肉汤中酸的产生情况。
发明详述
本发明涉及发酵乳杆菌的新菌株，在后文称作Ess-1，其根据布达佩斯条约保藏于德国微生物菌种保藏中心(Mascheroder Weg Ib，D-38124Braunschweig))，保藏号为DSM17851(depositor Essum AB，Box 3160，SE90304Umea，Sweden，于2006年1月6日保藏)。由于该菌株对于念珠菌生长的抑制作用，从而示出在治疗和/或预防念珠菌感染即念珠菌病中的独特性质。菌株Ess-1也示出在治疗和/或预防细菌感染如尿道感染中的有益性质。另外，Ess-1在贮存时的长期存活性质对于操作处理包含该菌株的产品时的便利性非常重要。另外，Ess-1不是严格厌氧的，而是可以在存在氧的条件下生长并且在冻干时可以良好存活。本发明的发酵乳杆菌菌株Ess-1是生物学纯的。
如实施例1所证实，Ess-1表现出对于不同念珠菌菌株生长的独特抑制作用。在这个实验中检测了大量乳杆菌菌株对于念珠菌的生长抑制性质。选择23个最佳菌株进行进一步研究。与用于对比的23个不同乳杆菌菌株中的最佳抑制作用相比，可以证实Ess-1的生长抑制作用是其两倍以上。同样，也证实Ess-1抑制已知导致尿道感染的许多不同细菌菌株的生长。另外，证实当将Ess-1给予阴道中时能在阴道中建群和存活。重要的是Ess-1在月经期间也能在阴道中存活。给予对象后在体内的建群和存活是益生菌成功执行其指定任务的重要因素。然而，在体内建群和存活的不足或者受限通常限制了益生性产乳酸细菌的实际用处。另外，在包含产乳酸细菌的产品的贮存和处理期间的有限存活通常导致产品失效。
在第一方面中，本发明涉及新的发酵乳杆菌菌株，称作菌株Ess-1，其已经保藏在德国微生物菌种保藏中心，保藏号为DSM17851。
由于菌株Ess-1对于念珠菌以及导致尿道感染的细菌的生长的抑制性质，本发明还涉及这种菌株的医学应用。本发明特别涉及菌株Ess-1在制备预防和/或治疗念珠菌病的药物组合物中的应用，所述念珠菌病优选是哺乳动物对象、更优选人的念珠菌病。在另一优选的实施方案中，本发明涉及菌株Ess-1在制备预防和/或治疗尿生殖区中念珠菌病例如阴道念珠菌病的药物组合物中的应用。在另一优选的实施方案中，本发明涉及菌株Ess-1在制备预防和/或治疗食管炎的药物组合物中的应用。本发明的另一优选实施方案涉及菌株Ess-1在制备治疗鹅口疮的药物组合物中的应用。
由于本发明的新Ess-1菌株经实验证实(见“实验部分”)抑制导致感染如尿道感染的许多不同细菌的生长，因此本发明另一方面涉及菌株Ess-1在制备预防和/或治疗细菌感染例如尿道感染的药物组合物中的应用。
一方面，本发明涉及保藏在微生物保藏中心、保藏号为DSM17851的发酵乳杆菌菌株Ess-1在制备口服的药物组合物中的应用。
在一个优选的实施方案中，包含发酵乳杆菌菌株Ess-1的所述药物组合物也包含一或多种药物可接受的载体、赋形剂和/或稀释剂。通常这些物质在使用的浓度和剂量对于受体应该是无毒的。这些物质的例子是缓冲剂，形成凝胶的增稠剂如甘油，聚乙二醇，抗氧化剂(例如抗坏血酸)，低分子量的多肽(少于大约10个残基)，蛋白质，碳水化合物包括葡萄糖、蔗糖和糊精。载体的例子包括糖例如乳糖、葡萄糖和蔗糖；淀粉例如玉米淀粉和马铃薯淀粉；纤维素及其衍生物如羧甲基纤维素钠、乙基纤维素和醋酸纤维素；海藻糖；粉状胺黄树胶，麦芽；明胶；滑石；硬脂酸；硬脂酸镁；硫酸钙；多元醇如丙二醇、甘油、山梨醇、甘露醇以及聚乙二醇；琼脂；海藻酸；无热原水；等渗盐水；以及磷酸盐缓冲液。在本发明的一个优选实施方案中，提供无水环境的载体用作益生菌的载体。这种无水环境在生产、运输和贮存期间延长该细菌的存活。这种载体的一个例子是脂质载体，包括石油衍生脂质，如液体石蜡(矿物油、石蜡油及其它油)、矿脂(凡士林和石油胶)、微晶蜡、地蜡(ozokerite)、地蜡(ceresine)和石蜡。或者，可以使用合成脂质例如二甲硅油、环甲基硅油以及硅酮酯如鲸蜡硬脂基聚甲基硅氧烷(cetearyl methicone)。再者可以使用动物或者植物衍生的脂质，通常使用的是甘油三酯类。所述动物和植物衍生的脂质通常是甘油一酯、甘油二酯和甘油三酯和游离脂肪酸的混合物。所述脂质可以使纯化的、氢化的、精炼的、修饰的以及单独使用或者于不同的混合物中。合适的原始的动物衍生的脂质的例子包括蜂蜡、鸸鹋油、lactic lapida、羊毛脂、鲨鱼肝油和牛脂。合适的植物衍生的原始的脂质包括杏仁油、花生油、鳄梨油/蜡、杨梅蜡、黑醋粟种子油、琉璃苣种子油、巴西果油、茶树油、小烛树蜡、芥花油、巴西棕榈蜡、蓖麻油、可可脂、椰子油、玉米油、棉籽油、玫瑰果油(dog roseseed oil)、月见草油、葡萄籽油、婆罗树脂(illipe butter)、茉莉花蜡、荷荷巴蜡(jojoba wax)、薰衣草蜡、亚麻籽油、芒果籽油(mango seed oil)、橄榄油、橙蜡、棕榈油、棕榈仁油、花生油、米糠蜡(rice wax)、红花油、芝麻油、牛油树脂、大豆油、向日葵蜡(sunflower seed wax)、甜杏仁油、可可油和小麦胚芽油。脂质载体的应用具有增加细菌转移至使用者的额外优点，例如当通过卫生用品如吸收性产品或者卫生织物给予药物组合物时(见例如WO04/060416)。优选的脂质的例子包括矿脂和硅蜡。也可以存在增湿剂和润滑剂如十二烷基硫酸钠以及色素、润滑剂、压片剂、稳定剂和防腐剂。优选的药物可接受的载体是粉末或其它形式的海藻糖或乳杆菌生长因子例如菊粉和/或果糖、聚葡萄糖、拉克替醇或者抗性淀粉。在一个优选的实施方案中，本发明的药物组合物除了发酵乳杆菌Ess-1细胞之外还包含有机酸和/或其盐，例如乙酸、丙酸、乳酸、抗坏血酸、苯丙氨酸、柠檬酸、丁酸、戊酸、己酸、琥珀酸和/或其盐，优选乙酸、丙酸、乳酸、抗坏血酸、苯丙氨酸、柠檬酸或琥珀酸和/或其盐，最优选抗坏血酸、乙酸、丙酸、琥珀酸和/或其盐。通过组合益生菌Ess-1与pKa值不超过5.5的有机酸和/或其盐可以获得协同作用。所述有机酸或相应的盐应该是这种性质，即当将其应用于卫生用品时其不应导致穿戴该卫生用品的人出现任何皮肤刺激症状，因此所述有机酸的pKa值当在25℃水中进行测量时应优选不低于2。如果所述pKa值太高，则所述有机酸或其盐将主要是其酸形式。这意味着添加剂未充分解离为氢离子及其去质子化阴离子形式，这是益生菌或其胞外产物的所述作用的先决条件。因此，适于本发明的有机酸的至少一个pKa值应该低于5.5，优选低于5。另外，在所述药物组合物中也可以单独或者以不同的组合形式加入为细菌增殖所需的营养物质如氨基酸、肽、核酸衍生物、维生素、盐、脂肪酸、葡萄糖、果糖、核糖、麦芽糖和乳糖。
本发明的药物组合物优选以如下形式给予：喷雾剂、乳剂、粉末、栓剂、口服液、胶囊、片剂、阴道置入物或者口服补剂。皮肤治疗组合物可例如根据US 2006/0171936所述制备。
包含菌株Ess-1的产品的其它例子是手套中的粉末、锭剂、口香糖、漱口液或者口腔喷雾剂。
另外，本发明的药物组合物也可以包含去除臭味的物质，例如沸石、硅石、环糊精和活性碳。此外，在本发明的药物组合物中也可以包含具有增加乳杆菌附着能力的物质和/或降低病原性微生物附着的物质。
本发明的药物组合物可以单一剂量给予，但是优选以多剂量给予。所述药物组合物也可以优选与抗真菌剂联合给予。
在一个优选的实施方案中，本发明的药物组合物包含干燥的细菌细胞，如冻干的细胞、喷雾干燥的细胞或者风干的细胞。这种细胞在贮存期间具有良好的存活能力(见冻干的细胞的存活研究的实验部分)。
本发明的药物组合物优选每剂量包含104-1011个菌落形成单位(cfu)、更优选106-1010cfu、还更优选108-1010CFU的发酵乳杆菌菌株Ess-1。
本发明的药物组合物或药品除了Ess-1之外还包含具有益生性质的其它细菌以获得更广泛的临床作用。对于本发明而言优选的这种细菌包括产乳酸细菌，例如来自乳杆菌属(Lactobacillus)、乳球菌属(Lactococcus)、片球菌属(Pediococcus)、芽孢杆菌属(Bacillus)的非致病性成员、双歧杆菌属(Bifidobacterium)的所有成员以及假单胞菌属(Pseudomonas limbergii)的细菌。优选的乳杆菌属成员包括嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)、保加利亚乳杆菌(Lactobacillus bulgaricus)、干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)、Lactobacillus cereale、德氏乳杆菌(Lactobacillus delbrukeii)、发酵乳杆菌、加氏乳杆菌(Lactobacillus gaserii)、詹氏乳杆菌(Lactobacillus jensenii)、植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)、鼠李糖乳杆菌(Lactobacillusrhamnosus)、唾液乳杆菌(Lactobacillus salivarius)、嗜热乳杆菌(Lactobacillusthermophilus)、类干酪乳杆菌类干酪亚种(Lactobacillus papacasai sp.Paracasai)、卷曲乳杆菌(Lactobacillus crispatus)、瑞士乳杆菌(Lactobacillushelveticus)、乳乳杆菌(Lactobacillus lactis)等。选择的细菌更优选是乳乳杆菌、嗜酸乳杆菌、弯曲乳杆菌(Lactobacillus curvatus)或者植物乳杆菌。其它优选的例子包括非致病性球菌菌种，例如S.nalivarius、口腔链球菌(S.oralis)和缓症链球菌(S.mitis)。这种产乳酸细菌的一个更优选的例子包括但不限于植物乳杆菌菌株LB931(EP 1060240，保藏号DSM 11918，德国微生物菌种保藏中心)。
本发明的药物组合物可以掺入多种不同产品中。例如，包含Ess-1的粉末可以在不同类型的保护手套中提供。这种手套通常为手提供潮湿环境，可促进真菌生长，导致手部皮肤和指甲真菌感染。
另一方面，本发明涉及包含保藏在德国微生物菌种保藏中心、保藏号为DSM17851的发酵乳杆菌菌株Ess-1的卫生用品。这种卫生用品可以是吸收性物品，例如女性卫生产品如卫生巾、短裤衬里、卫生内裤或者卫生栓；女性插入物；婴儿或失禁成人的尿布和短裤尿布；失禁用垫；或者尿布插入物。另外，卫生用品也可以是卫生织物如毛巾、贴片、小毛巾、纸巾、湿擦巾或者干擦巾。适于本发明的卫生织物先前已经在WO 04/060416中描述。产乳酸细菌在脂质中在无水环境中“包囊化”以保护细菌在贮存期间免于潮湿以及促进转移至卫生织物的使用者。这种卫生织物也可以任选包含一或多种清洁添加剂如润肤剂、乳化剂、保湿剂、pH-调节剂、螯合剂、粘性修饰剂、抗微生物剂、防腐剂和香味剂，如WO 04/060416所揭示。关于常常加入皮肤清洁产品中的合适物质的详细描述在Woodruffs Ingredientsand Formulary Handbook，John Woodruff，First ed.，1997，Miller Freeman fJKLtd中提供。本发明的吸收性产品或卫生织物也可以进一步包含酸、盐、臭味抑制剂、影响益生菌与不希望的微生物粘附的物质，如上文论述。这种吸收性产品可包括用于与穿戴者的皮肤紧密接触的可渗透性外层，位于穿戴者皮肤远侧的优选液体不透性背衬层(backing sheet)，以及置于所述外层与背衬层之间的吸收性结构。在一些情况中，在所述外层与吸收性结构之间可以放置例如软填料或者同样材料等形式的其它层。所述背衬层优选是透气的。所述益生菌可以置于吸收性物品的不同部分中，例如置于外层、置于吸收性结构中、置于吸收性物品两层之间、置于吸收性产品的疏松插入物产品(loose insert product)中、或者以其它方式放置。本发明的吸收性产品也可以优选包含高吸水性聚合物(SAP)。
本发明的卫生用品除了发酵乳杆菌Ess-1细胞之外还可包含有机酸和/或其盐，例如乙酸、丙酸、乳酸、抗坏血酸、苯丙氨酸、柠檬酸、丁酸、戊酸、己酸、琥珀酸和/或其盐，优选乙酸、丙酸、乳酸、抗坏血酸、苯丙氨酸、柠檬酸或者琥珀酸和/或其盐，最优选抗坏血酸、乙酸、丙酸、琥珀酸和/或其盐，所述酸的pKa值不超过5.5。通过组合益生菌Ess-1细胞与有机酸和/或其盐可以获得协同作用。
本发明的卫生用品优选每个卫生用品包含104-1011个菌落形成单位(cfu)、更优选106-1010cfu、还更优选108-1010CFU的发酵乳杆菌菌株Ess-1。
本发明的益生菌可以直接用于本发明的卫生用品中或者以本发明揭示的药物组合物形式应用到所述产品中。在一个优选的实施方案中，所述细菌是如上述的干燥的细菌，其单独或者作为上述药物组合物直接用于卫生用品。在另一个优选的实施方案中，所述细菌可以首先例如以包含该细菌的悬浮液用于卫生用品中，随后干燥该卫生用品，从而提供在其上具有干燥的细菌的产品，任选与如上述其它药剂组合。在又一个优选的实施方案中，干燥的细菌粉末在加入卫生用品中的脂质中提供。在一个优选的实施方案中，为了降低包含益生菌Ess-1的物品在生产、运输和贮存期间细菌暴露于潮湿环境，将所述卫生用品包装在不透水的包装中。
另一方面，本发明涉及保藏在德国微生物菌种保藏中心、保藏号为DSM17851的发酵乳杆菌菌株Ess-1在生产如下产品中的应用：卫生用品如湿擦巾，干擦巾，女性卫生产品如卫生巾、短裤衬里、卫生内裤和卫生栓；女性插入物；婴儿或失禁成人尿布或短裤尿布；失禁用垫；或者尿布插入物。所述卫生用品优选是吸收性物品例如女性卫生产品如卫生巾、短裤衬里、卫生内裤或者卫生栓；女性插入物；婴儿或失禁成人尿布和短裤尿布；失禁用垫；或者尿布插入物。所述卫生用品也优选可以是卫生织物如毛巾、贴片、小毛巾、纸巾、湿擦巾或干擦巾。
本发明还涉及保藏在德国微生物菌种保藏中心、保藏号为DSM17851的发酵乳杆菌菌株Ess-1在生产药物组合物中的应用，所述药物组合物如上述例如是悬浮液、喷雾剂、乳剂、粉末、栓剂、胶囊、片剂、口服补剂或者阴道置入物等。
包含发酵乳杆菌菌株Ess-1的药物组合物和药品包含治疗有效量的这种细菌菌株。
本发明还涉及治疗和/或预防念珠菌病的方法，包括给予需要治疗的对象治疗有效量的保藏在德国微生物菌种保藏中心、保藏号为DSM17851的发酵乳杆菌菌株Ess-1。本发明还涉及治疗和/或预防细菌感染如尿道感染的方法，包括给予需要治疗的对象治疗有效量的保藏在德国微生物菌种保藏中心、保藏号为DSM17851的发酵乳杆菌菌株Ess-1。在这种方法中，菌株Ess-1通过上述任何药物组合物或产品给予所述对象。对于通过卫生用品如吸收性物品给予所述菌株而言，重要的是所述吸收性物品与所述对象的皮肤紧密接触放置。
本发明的一个重要目的是口服给予Ess-1。本发明的一方面因此涉及口服给予的药物组合物。第一方面，这种口服给予导致胃肠道中真菌和/或细菌生长的抑制并且改善微生物菌群的平衡。然而，胃肠道中存在的真菌和细菌也可以通过肛门转移至尿生殖区。因此对胃肠道中真菌和/或细菌生长的抑制对于胃肠道自身以及尿生殖区均具有有益作用，这是因为降低了病原性真菌和/或细菌传播至该区域所致。也可以实现全身作用，如触发免疫应答物质。口服给予可例如通过将Ess-1包含如下剂型中而提供：胶囊、片剂、锭剂(troches)、锭剂(lozenges)、软锭剂(pastilles)、液相混悬剂、口服干混悬剂、液相口服混悬剂、口香糖、漱口液、软锭剂(pastilles)、口腔喷雾剂、小瓶等。口服给予也可以通过食品给予，例如酸奶、乳、新鲜干酪、冰激凌、发酵乳制品、发酵谷物制品、奶粉等以及儿童食品如稀粥。
另一方面，本发明涉及局部和/或口服给予动物菌株Ess-1的产品用以改善动物健康，例如所述菌株在本发明的药物组合物中或者在动物饲料或饲料添加剂中。另外，Ess-1也可以通过抑制其中真菌和细菌的生长而用于改善动物饲料如青贮饲料的品质。
本发明还涉及制备治疗和/或预防念珠菌病的药物组合物的方法，包括在所述药物组合物中加入保藏在德国微生物菌种保藏中心、保藏号为DSM17851的发酵乳杆菌菌株Ess-1。本发明还涉及制备治疗和/或预防细菌感染如尿道感染的药物组合物的方法，包括在所述药物组合物中加入保藏在德国微生物菌种保藏中心、保藏号为DSM17851的发酵乳杆菌菌株Ess-1。
另外，本发明还涉及制备治疗和/或预防念珠菌病的卫生用品如吸收性产品或卫生织物的方法，包括在所述卫生用品中加入保藏在德国微生物菌种保藏中心、保藏号为DSM17851的发酵乳杆菌菌株Ess-1。本发明还涉及制备治疗和/或预防细菌感染如尿道感染的卫生用品如吸收性产品或卫生织物的方法，包括在所述卫生用品中加入保藏在德国微生物菌种保藏中心、保藏号为DSM17851的发酵乳杆菌菌株Ess-1。
本发明在如下实验部分中得以更详细阐述。然而，所述实施例只是例证本发明，而无限制本发明范围之意。
实施例
实施例1：Ess-1的分离与分型
目的
这项研究最初的目的是分离与其它乳杆菌菌株相比更大程度地抑制白色念珠菌和光滑念珠菌生长的乳杆菌菌株以及对其进行分型。
方法
酵母株
白色念珠菌和光滑念珠菌的临床分离株用作检测菌株。这些菌株分离自阴道念珠菌病妇女和健康女性的阴道。
筛选I
将源自人皮肤、咽喉、牙齿、婴儿粪便、蔬菜和种子的大约140个乳杆菌菌株在MRS肉汤中培养，并且在MRS琼脂平板上划线。将琼脂平板在厌氧条件下在37℃保温。另外，将SAB(Sabouraud)琼脂(LAB M，Bury，UK)倒入所述MRS琼脂上并使其凝固。将白色念珠菌培养物接种于该琼脂上，在37℃厌氧保温平板。目测评估抑制情况。选择与参考菌株植物乳杆菌LB931相比相同或更高程度抑制白色念珠菌的菌株进行进一步筛选(筛选II)。
筛选II
将在dMRSs肉汤(未加入乙酸钠的MRS肉汤)中生长的乳杆菌悬浮液离心和灭菌过滤。滤过物在后文称作无乳杆菌细胞滤过物LCF。将一定体积滤过物转移至微滴定平板的孔中，通风干燥，之后以高3倍浓度再悬浮于无菌蒸馏水中并转移至96孔微滴定平板中。向所有小瓶中加入念珠菌(分别使用白色念珠菌和光滑念珠菌的三个分离株)。通过目测浊度评估抑制情况并由两个人使用模板从5至0刻度进行分级。在纯dMRSs肉汤中念珠菌(Candida sp.)强壮生长的孔分级为5，而无观测到生长的孔分级为0。
API分型和遗传分型
根据厂商指导使用API 50 CHL系统(bioMérieux，France)进行物种水平鉴别。使用API Lab Plus软件分析得自发酵试验的数据。由DSMZ(DeutscheSammlung von Microorganismen und Zellkulturen GmbH)通过对16S rRNA进行部分序列分析进行遗传分型。
结果
根据在筛选I中对于白色念珠菌的生长抑制能力评估所有菌株。选择结果与LB931相当或超过其的23个乳杆菌菌株进行筛选II。在这23个乳杆菌菌株中，有三个菌株是参考菌株，大多数菌株分离自口腔。图1例证了每个乳杆菌菌株的生长抑制，其中每个柱分别代表三个白色念珠菌菌株和三个光滑念珠菌菌株的平均生长。
“Other 1”被证实具有全面抑制念珠菌生长的能力。在对于白色念珠菌和光滑念珠菌二者作用方面，检测的乳杆菌菌株无一与Other 1的活性相似。Other 1被命名为Ess-1，其碳水化合物发酵模式和遗传分型表明其属于发酵乳杆菌物种。
Ess-1的鉴定
由DSMZ(Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und ZellkulturenGmbH)对来自菌株Ess-1(DSM 17851)的16S rDNA进行分析，通过对经PCR扩增的16S rDNA的大约450个核苷酸直接测序进行。如先前所述进行基因组DNA提取、PCR介导的16S rDNA扩增以及PCR产物的纯化(Rainey，F.A.et al.Int.J.Sys.Bacteriol.1996(46)：1088-1092)。纯化的PCR产物使用CEQTMDTCS-Quickstart试剂盒(Beckamn Coulter)根据厂商指导进行测序。序列反应产物使用CEQTM8000Genetic Analysis System电泳。
将所得序列数据输入序列对比编辑器(alignment editor)ae2(Maidak，B.L.et al.Nucl.Acids Res.1999(27)：171-173)中，手工对比并与属于厚壁菌门(Firmicutes)的生物体的代表性16S rRNA基因序列对比(Maidak，B.L.et al.)。为了进行对比，从EMBL数据库或RDP(Maidak，B.L et al.)获得16S rRNA序列。
作为这个分析的结果，下表1列出了这些生物体，其16S rRNA基因序列示出与Ess-1的16S rDNA序列相比的最高相似性值。
表1
  菌株  与Ess-1的16S rRNA基因序列相似性％
  发酵乳杆菌ATCC 14931   99.3
  发酵乳杆菌KRM   99.0
  坏发酵乳杆菌(Lactobacillus malefermentans)DSM 5705   85.5
  Lactobacillus rosslae ATCC BAA-822   88.9
  斯瓦比乳杆菌(Lactobacillus suebicus)DSM 5007   86.9
  牛粪乳杆菌(Lactobacillus vaccinostercus)DSM 20634   87.2
菌株Ess-1的部分16S rDNA基因序列示出与发酵乳杆菌的最高相似性。因此菌株Ess-1可以代表发酵乳杆菌菌株，但是也可以代表乳杆菌属的一种新物种。
实施例2：热处理
目的
这个实验的目的是研究菌株Ess-1产生的念珠菌生长抑制物质的热抗性。
方法
将LCF在90℃热处理20分钟。加入白色念珠菌和光滑念珠菌至终浓度为大约5×104CFU ml-1。将平板在37℃保温大约20小时，目测评估小瓶中念珠菌生长情况，并且从5至0加以分级。所述平板和小瓶如上。
结果
菌株Ess-1的热处理滤过物与用作对比的未处理滤过物相比同样成功地抑制酵母生长。因此，对滤过物的热处理不破坏这种细菌的活性物质。
实施例3：加入盐和酸用LCF抑制白色念珠菌
目的
这项研究的目的是确定盐和酸是否影响念珠菌的生长以及当将其加入菌株Ess-1的LCF中时是否可以实现生长抑制作用的改善。
方法-盐
将LCF等份的pH调节为针对每种盐的pKa值并且通风干燥直至其完全干燥，之后再悬浮于0.3％乙酸钠和丙酸钠中。加入白色念珠菌至终浓度为大约5×104CFU/ml。将级分在37℃保温20小时。通过目测浊度评估抑制并且由两个人使用模板从5至0刻度进行分级。在纯dMRSs肉汤中念珠菌强壮生长的孔分级为5，而无观测到生长的孔分级为0。
方法-酸
向含有LCF的管中加入琥珀酸、乙酸、丙酸和抗坏血酸，终浓度为50mM。将滤过物的pH调节为针对各种酸的pKa-值。加入白色念珠菌和光滑念珠菌至终浓度为大约5×104CFU ml-1。将平板在37℃保温20小时，目测评估孔中念珠菌生长并且从5至0进行分级。
结果
证实不同的酸和酸盐对于白色念珠菌的生长起作用。最初的结果示出滤过物中50mM的浓度是观测到一些酸的作用所需的最低浓度以及0.1-0.3％是观测到盐添加物作用的最低浓度。丙酸钠和丙酸对于白色念珠菌具有最大程度的作用。如图2a和b所例证，当将抗坏血酸(50mM，pKa和pH：4.2)或丙酸(50mM，pKa和pH：4.87)加入Ess-1LCF中时实现生长抑制作用的增加。这个结果表明通过组合Ess-1LCF与有机酸和/或其盐可以获得协同作用。因此推测Ess-1细胞与有机酸和/或其盐的组合产生相似的协同作用。
实施例4：酸分析
目的
这项研究的目的是研究菌株Ess-1是否产生其它乳杆菌菌株不产生或者低水平产生的酸，以及这是否可以解释这种细菌菌株对于酵母的强大生长抑制能力。
方法
将Ess-1及其它乳杆菌菌株在45ml dMRSs肉汤(未加入乙酸钠的MRS肉汤)中培养18小时，在10℃以3000rpm离心15分钟。将上清灭菌过滤(0.22μm，Millex，Billerica，MA，USA)并且在-55℃冷冻直至送到SteinsLaboratorium A7S(
Figure A20068005640200221
Sweden)使用液相层析分析。
结果
从图3中可以看出菌株Ess-1与其它检测的细菌菌株相比产生更多的琥珀酸和更多的乙酸，这可能是这个菌株对于酵母生长具有极佳抑制能力的一个原因。
实施例5：Ess-1经过冻干以及在贮存期间的存活力
目的
这个实验的目的是确定Ess-1在冻干后是否存活以及在之后的贮存期间是否保持存活。
方法
将Ess-1在MRS中生长，在20％海藻糖悬浮液中浓缩10倍。将该悬浮液在-55℃在塑料罐中冷冻。24小时后将该罐置于冻干机(Hetosicc，Hero
Figure A20068005640200222
Denmark)中运行48小时。将终产物研磨成粉，置于密封容器中贮存。为了增加应激(stress)，将该容器置于37℃。在第0、2、5和11周取样品。通过将该粉末悬浮于氯化钠溶液中并且置于琼脂平板上计数存活细菌。
结果
菌株Ess-1在冻干后良好存活且稳定11周，在此期间存活力仅降低一个对数(one log)。在贮存17周后，存活力降低4.5log。这个结果表明该细菌非常良好的存活性，因为通常情况下是在室温或在冰箱中贮存，在该温度存活力降低甚至更慢。
实施例6：在将包含冻干细菌的胶囊给予阴道后菌株Ess-1的存活
目的
研究在给予阴道后Ess-1的存活与建群。
方法
如上述将Ess-1在MRS中生长，在20％海藻糖悬浮液中浓缩10倍并冻干。在将材料研磨成粉后，将该粉末充填进明胶胶囊中(规格2，ApoteketAB，Gothenburg，Sweden)，浓度为大约1×109CFU每个胶囊。参与这项研究的四名志愿者在一个月经周期每周使用一粒该胶囊，在月经之前开始给予。在给予该胶囊前一周，志愿者对象自己每周取一次阴道样品，通过将无菌棉棒置于阴道内3cm转动5次取样。将样品在琼脂平板上培养，计数在形态学上与Ess-1相似并因此认为是Ess-1的万古霉素抗性乳杆菌。
结果
在研究开始时没有妇女具有万古霉素抗性乳杆菌的强壮生长。在月经后取的第二个样品中，所有妇女均出现Ess-1建群。在整个研究过程中在一些妇女的样品及其它妇女的特定样品中进一步发现Ess-1。因此，阴道胶囊可用于在整个月经周期在阴道中建群。数据示于表2。
表2：在参与这项研究的妇女阴道样品中发现的Ess-1的量。这项研究包括四名妇女，在研究开始(之前)时无一具有万古霉素抗性乳杆菌建群。数据以Log10 CFU ml-1表示。标记为“-”的样品缺失。
  研究开始前   样品2   样品3   样品4   样品5   样品6
 妇女1   0   6.22   6.52   4.95   5.43   2.00
 妇女2   0   4.70   0.00   4.54   4.28
 妇女3   0   1.30   4.22   3.85
 妇女4   0   2.41   0.00
实施例7：导致感染如尿道感染的细菌的抑制
目的
这项研究的目的是研究Ess-1是否产生抑制导致感染如尿道感染的细菌的生长的物质。
方法
使用经修改的琼脂覆盖方法。将Ess-1在MRS肉汤中生长20小时。将1ml细菌培养物与2ml 7.5M乙酸钠乳液和22ml MRS琼脂在50℃混合，倒入培养皿中并使其凝固。将该平板在37℃厌氧保温20小时。将与0.75ml6.5M磷酸二氢钾溶液混合的另外一层24ml M17琼脂倒入所述MRS层的上部并使其凝固。将Steer′s钢针复制器(steal pin replicator)浸入含有病原体过夜培养物的Bertram平板的孔中，并且戳入顶部琼脂层上。将该平板干燥30分钟并且在37℃保温24小时，之后读取。无菌MRS肉汤用作对照。在保温后记录顶部琼脂层的pH，将生长情况分类为“生长”或“不生长”。病原性菌株(共23个菌株)分离自尿道感染的妇女，包括大肠杆菌(4株)、克雷伯氏菌属(Klebsiella sp.，4株)、屎肠球菌(E.faecalis，3株)、肠杆菌属(Enterobacter，4株)、B型链球菌(Group B Streptococcus，3株)、金黄色葡萄球菌(S.aureus，2株)、腐生葡萄球菌(S.saprophyticus，1株)和奇异变形杆菌(P.mirabilis，2株)。
结果
Ess-1抑制所有病原体的生长且所有病原体在对照平板上生长良好。顶部琼脂层pH为6.0，因此不以任何方式影响生长。
PCT/RO/134表
关于微生物保藏的说明
(PCT细则13之二)
Figure A20068005640200251
PCT/RO/134表(1998年7月；2004年1月再版)

Claims (32)

1.发酵乳杆菌(Lactobacillus fermentum)菌株Ess-1，其被保藏在德国微生物菌种保藏中心，保藏号为DSM17851。
2.用于医学用途的发酵乳杆菌菌株Ess-1，其被保藏在德国微生物菌种保藏中心，保藏号为DSM17851。
3.保藏在德国微生物菌种保藏中心、保藏号为DSM17851的发酵乳杆菌菌株Ess-1在制备预防和/或治疗念珠菌病的药物组合物中的应用。
4.保藏在德国微生物菌种保藏中心、保藏号为DSM17851的发酵乳杆菌菌株Ess-1在制备预防和/或治疗阴道念珠菌病的药物组合物中的应用。
5.保藏在德国微生物菌种保藏中心、保藏号为DSM17851的发酵乳杆菌菌株Ess-1在制备预防和/或治疗鹅口疮的药物组合物中的应用。
6.保藏在德国微生物菌种保藏中心、保藏号为DSM17851的发酵乳杆菌菌株Ess-1在制备预防和/或治疗食管炎的药物组合物中的应用。
7.保藏在德国微生物菌种保藏中心、保藏号为DSM17851的发酵乳杆菌菌株Ess-1在制备预防和/或治疗细菌感染如尿道感染的药物组合物中的应用。
8.保藏在德国微生物菌种保藏中心、保藏号为DSM17851的发酵乳杆菌菌株Ess-1在制备口服给予的药物组合物中的应用。
9.一种包含保藏在德国微生物菌种保藏中心、保藏号为DSM17851的发酵乳杆菌菌株Ess-1的药物组合物，任选地还包含药物可接受的载体、赋形剂和/或稀释剂。
10.权利要求9的药物组合物，其中所述药物可接受的载体是粉末或其它形式的海藻糖或者乳杆菌生长因子。
11.权利要求9-10任一项的药物组合物，其中所述发酵乳杆菌菌株Ess-1细胞是干燥的，例如是冻干的、喷雾干燥的或者空气干燥的。
12.权利要求9-11任一项的药物组合物，其每剂量包含104-1011菌落形成单位(cfu)、更优选106-1010cfu、还更优选108-1010CFU的发酵乳杆菌菌株Ess-1。
13.权利要求9-12任一项的药物组合物，其进一步包含其它益生菌。
14.权利要求13的药物组合物，其中所述其它益生菌是产乳酸细菌，例如植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)LB931。
15.权利要求9-14任一项的药物组合物，其是悬浮液、喷雾剂、乳剂、粉末、栓剂、胶囊、口服补剂或者阴道置入物。
16.用于口服的权利要求9-15任一项的药物组合物。
17.包含保藏在德国微生物菌种保藏中心、保藏号为DSM17851的发酵乳杆菌菌株Ess-1的卫生用品。
18.权利要求17的卫生用品，其进一步包含有机酸和/或其盐，例如乙酸、丙酸、乳酸、抗坏血酸、苯丙氨酸、柠檬酸、丁酸、戊酸、己酸、琥珀酸和/或其盐。
19.权利要求19-20任一项的卫生用品，其进一步包含其它产乳酸细菌，例如植物乳杆菌LB931。
20.权利要求17-19的卫生用品，其每个产品包含104-1011菌落形成单位(cfu)、更优选106-1010cfu、还更优选108-1010CFU的发酵乳杆菌菌株。
21.权利要求17-20任一项的卫生用品，该卫生用品是吸收性物品，如女性卫生产品如卫生巾(sanitary napkin)、短裤衬里(panty liner)、卫生内裤(sanitary panty)或者卫生栓(tampon)；女性插入物(feminine insert)；婴儿或失禁成人的尿布和短裤尿布(pant diaper)；失禁用垫(incontinencepad)；或者尿布插入物(diaper insert)。
22.权利要求17-20任一项的卫生用品，所述卫生用品是卫生织物(hygiene tissue)如毛巾(washcloth)、贴片(patch)、小毛巾(towelette)、纸巾(napkin)、湿擦巾(wet wipe)或者干擦巾(dry wipe)。
23.保藏在德国微生物菌种保藏中心、保藏号为DSM17851的发酵乳杆菌菌株Ess-1在生产卫生用品如湿擦巾、干擦巾；女性卫生产品如卫生巾、短裤衬里、卫生内裤和卫生栓；女性插入物；婴儿或失禁成人的尿布或短裤尿布；失禁用垫或者尿布插入物中的应用。
24.权利要求23的应用，所述卫生用品是吸收性物品，如女性卫生产品如卫生巾、短裤衬里、卫生内裤或者卫生栓；女性插入物；婴儿或失禁成人的尿布或短裤尿布；失禁用垫或者尿布插入物。
25.权利要求23的应用，所述卫生用品是卫生织物如毛巾、贴片、小毛巾、纸巾、湿擦巾或者干擦巾。
26.保藏在德国微生物菌种保藏中心、保藏号为DSM17851的发酵乳杆菌菌株Ess-1在生产药物组合物中的应用，所述药物组合物例如是悬浮液、喷雾剂、乳剂、粉末、栓剂、胶囊、片剂、口服补剂或者阴道置入物。
27.治疗和/或预防念珠菌病的方法，包括给予需要治疗的对象治疗有效量的保藏在德国微生物菌种保藏中心、保藏号为DSM17851的发酵乳杆菌菌株Ess-1。
28.治疗和/或预防细菌感染如尿道感染的方法，包括给予需要治疗的对象治疗有效量的保藏在德国微生物菌种保藏中心、保藏号为DSM17851的发酵乳杆菌菌株Ess-1。
29.权利要求27-28任一项的方法，其中通过权利要求9-16任一项的药物组合物将所述发酵乳杆菌菌株Ess-1给予所述对象。
30.权利要求27-29任一项的方法，其中通过将权利要求17-22任一项的卫生用品与所述对象的皮肤紧密接触放置而将所述发酵乳杆菌菌株Ess-1给予所述对象。
31.制备用于治疗和/或预防念珠菌病和/或细菌感染的药物组合物的方法，包括在所述药物组合物中加入保藏在德国微生物菌种保藏中心、保藏号为DSM17851的发酵乳杆菌菌株Ess-1。
32.制备用于治疗和/或预防念珠菌病和/或细菌感染的卫生用品的方法，包括在所述卫生用品中加入保藏在德国微生物菌种保藏中心、保藏号为DSM17851的发酵乳杆菌菌株Ess-1。
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