CN101559071A

CN101559071A - 5’核苷酸在制备改善免疫功能低下药物、保健食品中的用途

Info

Publication number: CN101559071A
Application number: CNA2009100117230A
Authority: CN
Inventors: 李恕; 李勇; 董锋
Original assignee: ZHENAO GROUP CO Ltd
Current assignee: ZHENAO GROUP CO Ltd
Priority date: 2009-05-27
Filing date: 2009-05-27
Publication date: 2009-10-21

Abstract

本发明涉及一种5’核苷酸产品及其在制备改善免疫功能低下药物、保健食品或食品中的用途。本核苷酸是核糖核酸为原料经酶法降解生产的，纯度在99％以上的5’AMP、5’CMP、5’GMPNa₂、5’UMPNa₂按照22.8∶26.6∶30.2∶20.4配比而成的5’核苷酸混合物。5’核苷酸可显著提高小鼠ConA诱导的淋巴细胞增殖能力，增加溶血空斑数，提高脾脏NK细胞百分比，对于饲料中缺乏核苷酸引起的免疫功能低下具有明显的改善作用。

Description

5’核苷酸在制备改善免疫功能低下药物、保健食品中的用途

技术领域

本发明涉及一种5’核苷酸产品及其新用途，具体来说是以核糖核酸为原料经酶法降解生产5′核苷酸在制备改善免疫功能低下药物、保健食品中的用途。属医药、食品保健领域。

背景技术

近年来，免疫功能低下，包括原发性及继发性免疫功能缺陷、缺乏或受损，受到国内外医学家们的广泛关注，因为它们本身及所诱发的各种并发症，特别是感染，常使病人的病情严重，难以治疗，并可引起严重的后果，甚至危及生命。如果通过开发保健食品，来改善机体免疫功能，经济实用，将对我国的卫生保健行业带来很大的前景。

核酸是生物体细胞中决定生物特性和蛋白质结构与功能的物质，控制着生物体的生长、发育、繁殖和遗传，它是体内多种营养物质的代谢调节因子，是各种营养因子的总协调者和指挥者。由于体内存在核酸的“从头合成”途径，以前认为外源核酸不是人体的必需营养成分，但近些年来国内外大量研究资料日趋表明外源核酸包括核苷酸和核苷在特定生理条件下是不可缺少的营养成分。外源性核酸被摄入人体后，需经核酸酶的作用分解为核苷酸，部分核苷酸再通过碱性磷酸酶和核苷酸酶的作用继续水解为核苷，以核苷酸和核苷的形式被胃肠粘膜细胞吸收。而在体外通过酶解方式将核酸降解成为核苷酸后可以省略体内的分解过程，更加容易被人体消化吸收。因此，口服核苷酸的营养学作用一直是近年来在营养学研究领域中的热点之一。

5’核苷酸是以核糖核酸为原料利用生物酶解技术生产的高纯度5’AMP∶5’CMP∶5’GMPNa₂∶5’UMPNa₂混合物，目前对于5’核苷酸在改善免疫功能低下方面作用及其在药品和保健食品中的应用研究还未见报道。

发明内容

本发明的目的是提供一种5’核苷酸产品及其在制备改善免疫功能低下药物、保健食品中的用途。

本发明提供的5’核苷酸是核糖核酸为原料经酶法降解生产的，纯度在99％以上的5’AMP、5’CMP、5’GMPNa₂、5’UMPNa₂按照22.8∶26.6∶30.2∶20.4配比而成的5’核苷酸混合物。

其中所述的药物、保健食品为粉剂、颗粒剂、胶囊、片剂、丸剂、口服液。

具体实施方案

下面结合具体实施方案对本发明作进一步的说明，这些实例应被理解为仅是举例说明，而非以任何方式限制本发明的范围。

实施例：5’核苷酸改善免疫功能低下的实验研究

一、材料与方法

1.样品：5’核苷酸(5’AMP∶5’CMP∶5’GMPNa₂∶5’UMPNa₂＝22.8∶26.6∶30.2∶20.4)，生产流程：纯度为90％的核糖核酸(RNA)经热变性→核酸酶P1酶解→超滤→吸附于阴树脂→分步洗脱→纳滤脱盐→薄膜浓缩→碳粉脱色→结晶→干燥制成。

1.2实验动物：清洁级雌性Balb/c小鼠180只，6～8周龄，18～22克，由北京大学医学部实验动物中心提供，批准号为SCXK11-00-0004，清洁级动物房饲养，饲养环境温度25℃，湿度60％RH。

1.3检验指标：小鼠脾脏和胸腺重；抗体形成细胞(IgM-PFC/脾)测定，采用Jerne改良玻片法；血清抗体滴度，采用血清半数溶血值HC₅₀；迟发型变态反应(DTH)，采用足跖肿胀法测定；ConA刺激的小鼠脾淋巴细胞增殖功能，采用MTT法；巨噬细胞吞噬功能的检测，采用碳粒廓清法及腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞(半体内法)测定；NK细胞活性测定，采用乳酸脱氢酶(LDH)测定法。

1.4实验方法：将动物分为正常对照组(喂饲普通饲料)，无核苷酸饲料(NF)对照组(喂饲无核苷酸饲料)，在NF饲料中分别添加0.0025％、0.01％、0.04％、0.16％的5’核苷酸作为5’核苷酸实验组。实验动物分为三批进行实验，每批随机分组，每组10只。第一批进行脏器/体重比值测定、抗体生成细胞数的检测，第二批进行碳粒廓清实验，第三批进行ConA诱导的小鼠淋巴细胞转化实验和NK细胞测定。实验期间动物自由进食、饮水。每周称量体重和剩料，4周后实验结束时按照卫生部《保健食品功能学评价程序和检验方法》进行上述指标检测。

1.5统计方法：所有结果以均数±标准差表示，采用SPSS11.0软件进行单因素方差分析，比较各实验组与对照组的差异。但需按方差分析的程序先进行方差齐性检验，方差齐，计算F值，F值＜F_0.05，结论：各组均数间差异无显著性；F值≥F_0.05，P≤0.05，用多个实验组和一个对照组间均数的两两比较方法进行统计；对非正态或方差不齐的数据进行适当的变量转换，待满足正态或方差齐要求后，用转换后的数据进行统计；若变量转换后仍未达到正态或方差齐的目的，改用秩和检验进行统计。

二、结果

1.5’核苷酸小鼠体重和免疫器官重量的影响

由表1可见，小鼠的初始体重各剂量组与正常对照组比较差异无显著性(P＞0.05)，与NF对照组比较差异也无显著性(P＞0.05)。经口给予小鼠不同剂量的5’核苷酸4周后，各剂量组小鼠的体重与正常组比较及NF对照组相比差异均无显著性(P＞0.05)；各剂量组脾脏/体重及胸腺/体重的比值与正常对照组及NF对照组比较，差异也均无显著性(P＞0.05)，即核苷酸对小鼠体重和免疫器官相对重量无明显影响。

表15’核苷酸对小鼠体重及免疫器官相对重量的影响(x±s)

2.5’核苷酸对小鼠细胞免疫功能的影响

由表2可见，给予小鼠NF 4周后，与正常对照组比较，ConA诱导的淋巴细胞增殖能力明显降低(P＜0.05)。而给予小鼠不同剂量的5’核苷酸后，功能有所恢复。与NF对照组比较，0.04g/kgBW组的淋巴细胞增殖能力显著提高(P＜0.05)，即补充5’核苷酸能缓解NF喂养小鼠引起的细胞免疫抑制作用。

3.5’核苷酸对小鼠体液免疫的影响

由表2可见，给予小鼠NF 4周后，与正常对照组比较，溶血空斑数有所下降，但无显著变化(P＞0.05)。给予小鼠不同剂量的5’核苷酸后，与NF对照组比较，0.04g/kgBW组的溶血空斑数显著提高(P＜0.05)，即补充5’核苷酸能提高小鼠的体液免疫功能，并缓解NF喂养小鼠引起的体液免疫抑制作用。

4.5’核苷酸对小鼠单核-巨噬细胞吞噬功能的影响

由表2可见，给予小鼠NF 4周后，与正常对照组比较，碳粒廓清能力有显著降低(P＜0.05)。给予不同剂量的5’核苷酸4周后，0.01、0.04和0.16g/kgBW组的碳粒廓清能力比NF对照组有所提高，但与NF对照组和正常对照组比较均无显著差异(P＞0.05)。

5.5’核苷酸对小鼠脾脏淋巴细胞群百分比的影响

由表2可见，给予小鼠NF 4周后，与正常对照组比较，NF对照组的小鼠脾脏NK细胞百分比均有所降低，但差异无显著性。与NF对照组相比，0.04g/kgBW组的NK细胞百分比显著提高(P＜0.05)，0.16g/kgBW组的NK细胞百分比也显著提高(P＜0.05)。

表2核苷酸对小鼠T、B细胞及巨噬细胞免疫水平的影响(x±s)

^*：与正常对照组比较有显著性差异，P＜0.05

#：与NF对照组比较有显著性差异，P＜0.05

上述结果显示，饲料中缺乏核苷酸可引起免疫功能低下，而补充5’核苷酸对于无核苷酸饲料引起的免疫功能低下具有明显的改善作用。

Claims

1、5′核苷酸在制备改善免疫功能低下药物、保健食品中的用途。

2、如权利要求1，5’核苷酸是核糖核酸为原料经酶法降解生产的，纯度在99％以上的5’AMP、5’CMP、5’GMPNa₂、5’UMPNa₂按照22.8∶26.6∶30.2∶20.4配比而成的5’核苷酸混合物。

3、如权利要求1，其中所述的药物、保健食品为粉剂、颗粒剂、胶囊、片剂、丸剂、口服液。