CN101541948A - 对植物病害具有防除能力的微生物和使用该微生物的植物病害防除剂 - Google Patents

对植物病害具有防除能力的微生物和使用该微生物的植物病害防除剂 Download PDF

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Abstract

本发明的目的在于提供对环境负荷少、抵抗性病原菌产生的可能性极低、并且对多种植物病害(特别是叶菜、根菜类的软腐病、溃疡病)具有优异防除能的微生物，含有该微生物的植物病害防除剂，将该植物病害防除剂施用于植物和/或该植物的栽培土壤的植物病害防除方法。使用含有对植物病害具有防除能力的罗氏假单胞菌(Pseudomonas rhodesiae)、优选对植物病害具有防除能力的罗氏假单胞菌FERM BP－10912或其变异株的菌体的植物病害防除剂。

Description

对植物病害具有防除能力的微生物和使用该微生物的植物病害防除剂
技术领域
本发明涉及对植物病害具有防除能力的微生物、含有该微生物的菌体的植物病害防除剂、以及使用该微生物的植物病害防除方法。
背景技术
本申请要求基于2006年11月8日申请的日本专利申请第2006-302263号的优先权。
一直以来，对于各种农园艺作物的细菌性病害，使用无机和有机铜剂、春雷霉素、链霉素、土霉素等抗生素。此外，作为合成抗细菌剂在1989年注册了噁喹酸，对作物增产带来很大帮助。然而，无机和有机铜剂容易对农园艺作物产生药害，在使用时期、使用作物方面有限制。此外，持续使用抗生素时，具有病原菌对该抗生素产生耐药性等问题。对于噁喹酸，近年也发现耐药性菌，从而设有使用限制。
因此，为了克服药害、耐药性菌的问题，作为代替以往的合成杀菌剂、或者进行合用的方法，对生物农药的关心提高。生物农药与以往的合成杀菌剂相比，具有环境污染极少、与生态体系和谐而且防除效果也优异等优点。作为用于防除农园艺作物的细菌性病害的微生物农药，已知例如特别用于叶菜类、根菜类的软腐病防除的非病原性胡萝卜软腐欧文氏菌(Erwinia carotovora)、特别用于作为稻种子传染性的细菌性病害的细菌性稻谷枯病、细菌性苗立枯病防除的假单胞菌(Pseudomonassp.)CAB-02、深绿木霉(Trichoderma atroviride)等，含有该微生物的农园艺用杀菌剂组合物已经开发上市。此外，在专利文献1中记载了对于作为莴苣的腐败病菌的菊苣假单胞杆菌(Pseudomonas cichorii)具有防除效果的荧光假单胞菌(Pseudomonas fluorescens)G7090株。
然而，一般地说，微生物农药的对象植物病害有限，大多无法期待对其他植物病害也具有效果。例如，非病原性胡萝卜软腐欧文氏菌的对象病害限于叶菜或根菜类的软腐病，假单胞菌CAB-02或深绿木霉的对象病害限于稻病害，荧光假单胞菌的对象病害限于莴苣的腐败病，对其他细菌性病害几乎无法期待效果。此外，非病原性胡萝卜软腐欧文氏菌是通过非病原性胡萝卜软腐欧文氏菌产生的称为细菌素的抗菌性蛋白质来防除病原性胡萝卜软腐欧文氏菌的，因此担心会出现对该抗菌性蛋白质的抵抗性(例如非专利文献1)。
专利文献1：特开2001-247423号公报
非专利文献1：拮抗微生物所致的作物病害的生物防除III-5非病原Erwinia carotovora所致的蔬菜软腐病的防除、Kumiai Chemical Industry公司、65-76：2003
发明内容
本发明是鉴于所述情况而完成的，本发明的课题在于提供对环境负荷少、抵抗性病原菌产生的可能性极低、并且对多种植物病害(特别是叶菜或根菜类的软腐病、腐败病、柑橘的溃疡病、桃的细菌性穿孔病等)具有优异防除能力的微生物，含有该微生物菌体的植物病害防除剂，将该植物病害防除剂施用于植物和/或该植物的栽培土壤的植物病害防除方法。
本发明人等为了解决上述课题，着眼于在莴苣中常有的微生物，进行了对植物病害具有防除能力的微生物的检索。其结果，发现了对莴苣软腐病具有高防除效果的微生物。研究该微生物的细菌学性质和16SrDNA基因的碱基序列，推定是罗氏假单胞菌(Pseudomonasrhodesiae)的新株。本发明是基于上述见解而完成的。
即，本发明涉及(1)对植物病害具有防除能力的罗氏假单胞菌(Pseudomonas rhodesiae)；(2)对植物病害具有防除能力的罗氏假单胞菌FERM BP-10912；(3)为罗氏假单胞菌FERM BP-10912的变异株、并且对植物病害具有防除能力的变异株；(4)如(1)～(3)中任一项所述的罗氏假单胞菌、罗氏假单胞菌FERM BP-10912、或罗氏假单胞菌FERM BP-10912的变异株，其中，植物病害是选自溃疡病、细菌性穿孔病、软腐病、细菌性斑点病、细菌性黑斑病、青枯病、细菌性褐斑病、细菌性茎坏疽病、细菌性稻谷枯病、细菌性苗立枯病、白叶枯病、腐败病和黑腐病中的1种或2种以上的植物病害；(5)如(1)～(3)中任一项所述的罗氏假单胞菌、罗氏假单胞菌BP-10912或罗氏假单胞菌BP-10912的变异株，其中，植物病害是由于如下病原菌所致的植物病害，即选自黄单胞菌(Xanthomonas)属、欧文氏菌(Erwinia)属、假单胞菌(Pseudomonas)属、劳尔氏菌(Ralstonia)属和伯克霍尔德氏菌(Burkholderia)属中的1种或2种以上的病原菌。
此外，本发明涉及(6)含有对植物病害具有防除能力的罗氏假单胞菌的菌体的植物病害防除剂；(7)如上述(6)所述的植物病害防除剂，其中，罗氏假单胞菌的菌体是选自上述(2)所述的罗氏假单胞菌FERM BP-10912的菌体、和上述(3)所述的罗氏假单胞菌FERM BP-10912的变异株的菌体的1种或2种以上的菌体；(8)如上述(6)所述的植物病害防除剂，其中，植物病害是选自溃疡病、细菌性穿孔病、软腐病、细菌性斑点病、细菌性黑斑病、青枯病、细菌性褐斑病、细菌性茎坏疽病、细菌性稻谷枯病、细菌性苗立枯病、白叶枯病、腐败病和黑腐病中的1种或2种以上的植物病害。
进而，本发明涉及(9)植物病害的防除方法，其特征在于，将上述(1)～(3)中任一项所述的罗氏假单胞菌、罗氏假单胞菌FERM BP-10912或罗氏假单胞菌FERM BP-10912的变异株施用于植物和/或该植物的栽培土壤。
本发明的植物病害的防除剂和防除方法对环境负荷少、抵抗性病原菌产生的可能性极低、并且对多种植物病害具有更长期的优异防除能力。此外，在植物病害中，特别是对叶菜或根菜类的软腐病、腐败病、黑腐病、柑橘的溃疡病、桃的细菌性穿孔病等发挥优异效果，在这一点上与以往的微生物农药相比尤为显著有利。
附图说明
图1是表示基于16SrDNA基因的核苷酸序列制作的、本发明的罗氏假单胞菌050572I9株(罗氏假单胞菌FERM BP-10912株)的系统树的图。
具体实施方式
<1>本发明的微生物
本发明的微生物只要是对植物病害具有防除能力的罗氏假单胞菌(Pseudomonas rhodesiae)就没有特别限制。在此，所谓“对植物病害具有防除能力”，是指对任意植物病害的病原菌具有拮抗作用。本发明的微生物通过对植物病害的病原菌发挥拮抗作用，预防或治愈由该病原菌引起的植物病害，尤其对预防植物病害的效果优异。
在此所说的“预防植物病害”，是指除了将本发明的微生物施用于没有被植物病害病原菌感染或病症没有出现的植物或者其栽培土壤这一点不同以外、其他都是在同样适合的条件下进行栽培的情况下，施用了本发明微生物的植物的病害程度比未施用本发明微生物的植物低。此外，上述的“治愈植物病害”，是指除了将本发明的微生物施用于被植物病害病原菌感染而出现病症的植物这一点不同以外、其他都是在同样适合的条件下进行栽培的情况下，施用了本发明微生物的植物的病害程度比未施用本发明微生物的植物低。
所谓“病害程度低”，是指例如发病度(或率)低、防除价(preventivevalue)大于0。防除价优选更大的值，若在30以上则是优异的，若在50以上则更优异，若60或70以上则特别优异。
作为本发明的微生物，可优选列举罗氏假单胞菌050572I9株、罗氏假单胞菌JCM11940株和这些菌株的变异株，其中，从作为植物病害防除剂而具有更优异性质出发，可更优选列举罗氏假单胞菌050572I9株和该菌株的变异株。另外，罗氏假单胞菌050572I9株是由本申请人在2006年9月12日在独立行政法人产业技术综合研究所专利生物保藏中心(日本国茨城县筑波市东1丁目1号1中央第6)作为保藏号FERM P-21025进行日本国内保藏，然后在2007年9月25日作为国际保藏号FERM BP-10912进行国际保藏。此外，罗氏假单胞菌JCM11940株在独立行政法人理化学研究所筑波研究所BioResource Center(日本国茨城县筑波市高野台3丁目1号-1)作为JCM11940进行保藏。
本说明书中的“某菌株X的变异株”只要是具有与该菌株X同样的菌学性质、并且对植物病害具有防除能力的菌株即可，也包括由该菌株X诱导的任意变异株。变异包括利用化学变异剂、紫外线等的人工变异、以及自然变异。作为某菌株X的变异株，可优选列举关于后述表1中记载的菌学性质具有与菌株X相同的菌学性质、并且对植物病害具有防除能力的变异株。
在本发明的微生物中，作为优选微生物的罗氏假单胞菌050572I9株(FERM BP-10912株)的菌学性质如下。
为革兰氏阴性杆菌，不形成芽孢，细胞全长为2.0～2.5μm、全宽为0.7～0.8μm，看到运动性。在肉汁琼脂培养基上呈现平滑圆形的菌落，在King’s B培养基上产生荧光性色素。在41℃没有看到生长，过氧化氢酶活性为阳性，OF培养基试验氧化，硝酸盐的还原为阴性，吲哚产生为阴性，尿素酶活性为阴性，明胶的分解为阳性，β-半乳糖苷酶活性为阴性，β-葡萄糖苷酶活性为阴性。此外，在LOPAT试验中，果聚糖产生为阳性，土豆块茎腐败为阴性，烟草过敏性反应为阴性，氧化酶活性为阳性，精氨酸的分解为阳性。淀粉同化性为阴性，关于糖、有机酸等碳化合物的同化性，D-葡萄糖为阳性，L-阿拉伯糖为阳性，D-甘露糖为阳性，D-甘露醇为阳性，N-乙酰基-D-葡糖胺为阳性，麦芽糖为阴性、葡糖酸钾为阳性，正癸酸为阳性，己二酸为阴性，dL-苹果酸为阳性，柠檬酸钠为阳性，乙酸苯酯为阴性，蔗糖为阳性，海藻糖为阳性，阿东糖醇为阴性，山梨醇为阳性，丁酸为阳性，丙酸为阳性，丙二醇为阳性。各项目的测定方法等如后述实施例所记载。
本发明的微生物只要对至少1种植物病害具有防除能力即可，但是优选对选自溃疡病、细菌性穿孔病、软腐病、细菌性斑点病、细菌性黑斑病、青枯病、细菌性褐斑病、细菌性茎坏疽病、细菌性稻谷枯病、细菌性苗立枯病、白叶枯病、腐败病、和黑腐病中的1种以上、优选2种以上、更优选对上述所有的植物病害都具有防除能力。此外，本发明的微生物特别优选至少对软腐病、腐败病、黑腐病、溃疡病、细菌性穿孔病中的任一种以上、优选2种以上、更优选对所有病害都具有防除能力。
作为这些植物病害的病原菌，可以列举属于Xanthomonas属、Erwinia属、Pseudomonas属、Ralstonia属、Burkholderia属等的1种或2种以上的病原菌等。更详细地说，虽然在表1中示出，但是与本发明相关的病原菌并不限于这些病原菌等。
【表1】
  植物病害  植物病害(英文)   病原菌   对象植物例
  溃疡病  Canker   野油菜黄单胞菌柑橘病原变种   柑橘类
  细菌性穿孔病  Bacterial shot hole   野油菜黄单胞菌桃李致病变种   桃等
  软腐病  Bacterial soft rot   胡萝卜软腐欧文氏菌胡萝卜软腐亚种   莴苣、白菜等叶菜类，萝卜、土豆等根菜类，向日葵、洋兰、仙客来等花卉类
  细菌性斑点病  Bacterial spot   边缘假单胞菌边缘致病变种野油菜黄单胞菌萝卜致病变种丁香假单胞菌黄瓜致病变种   黄瓜等萝卜甜瓜
  细菌性黑斑病  Bacterial leaf spotBacterial black spot   丁香假单胞菌斑生致病变种绿黄假单胞菌   萝卜、白菜西红柿
  青枯病  Bacterial wilt   茄科雷尔氏菌(Ralstonia solanacearum)   西红柿、茄子、青椒等
  细菌性褐斑病  Necrotic leaf spot   野油菜黄单胞菌黄瓜致病变种   黄瓜等
  细菌性茎坏疽病  Pith necrosis   皱纹假单胞菌荧光假单胞菌   西红柿、茄子等
  细菌性稻谷枯病  Bacterial grain rot   荚壳伯克霍尔德氏菌   稻
  细菌性苗立枯病  Bacterial seedlingblight   植物伯克霍尔德氏菌   稻
  白叶枯病  Bacterial leaf blight   水稻黄单胞菌水稻致病变种(Xanthomonas oryzae pv.oyzaer) 稻
  腐败病  Bacterial spot   菊苣假单胞菌边缘假单胞菌边缘致病变种   莴苣、白菜、甘蓝等
  黑腐病  Black rot   野油菜黄单胞菌野油菜致病变种   甘蓝等
此外，作为成为本发明微生物适用对象的植物，只要是本发明的微生物能够发挥防除能力的植物就没有特别限制。例如，可以列举属于十字花科、茄科、葫芦科、百合科、豆科、菊科、藜科、禾本科、蔷薇科、石竹科、报春花科、芸香科、葡萄科、猕猴桃科、柿科、伞形科、旋花科、或天南星科的植物，其中可优选列举白菜等属于十字花科的植物、莴苣等属于菊科的植物、土豆等属于茄科的植物、柠檬、脐橙等属于芸香科的植物、桃等属于蔷薇科的植物等。
<2>本发明的植物病害防除剂
本发明的植物病害防除剂只要含有本发明的罗氏假单胞菌的菌体就没有特别限制。本发明的植物病害防除剂中含有的本发明的罗氏假单胞菌的菌株种类可以是1种，也可以是2种以上。
本发明的植物病害防除剂，通过其中所含的本发明的罗氏假单胞菌的菌体对植物病害的病原菌发挥拮抗作用，预防或治愈由该病原菌引起的植物病害。本发明的植物病害防除剂可以作为植物病害的预防剂或植物病害的治疗剂使用，作为植物病害的预防剂的效果特别优异。
罗氏假单胞菌主要呈现营养细胞的形态，但本发明的罗氏假单胞菌的菌体可以是以罗氏假单胞菌的营养细胞为代表的、罗氏假单胞菌的活菌所示出的任意形态(例如休眠细胞)的菌体。此外，本发明的植物病害防除剂中使用的罗氏假单胞菌的菌体的形态种类可以是1种，也可以是2种以上。
本发明的植物病害防除剂中使用的罗氏假单胞菌的菌体可以通过如下方式得到，例如以罗氏假单胞菌050572I9株(FERM BP-10912株)的16SrDNA基因的序列(参照序列号1)和/或该菌株的上述菌学性质为指标进行分离、将所获得的罗氏假单胞菌等本发明的罗氏假单胞菌进行培养而得到。作为本发明的罗氏假单胞菌的培养方法，只要是罗氏假单胞菌的菌体增殖的方法，无论培养基的种类或培养条件等如何，可以是任意的方法，例如，固体培养时，可以列举使用标准琼脂培养基、普通琼脂培养基、马铃薯葡萄糖琼脂培养基等在20～35℃下进行静置培养的方法，液体培养时，可以列举使用从上述琼脂培养基中除去琼脂而得到的各种液体培养基等在20～35℃下振荡并进行搅拌培养的方法。
作为罗氏假单胞菌的菌体，即使是罗氏假单胞菌的菌体自身、含有该菌体的悬浮液、含有该菌体的培养液、或它们的浓缩物、糊状物、干燥物、稀释物(以下，有时称为“罗氏假单胞菌的菌体等”)等任意形态，也都可以用于本发明的植物病害防除剂。
本发明的植物病害防除剂中所含的罗氏假单胞菌的菌体浓度，只要无损本发明的效果就没有特别限制，例如可以优选列举将本发明的植物病害防除剂稀释到1000～2000倍时，换算成菌体浓度为1×102～1×1011cfu/ml、优选1×104～1×109cfu/ml的范围内。
本发明的植物病害防除剂只要无损本发明的效果，除了本发明的罗氏假单胞菌的菌体等以外，还可以含有任意成分。作为任意成分，只要无损本发明的效果就没有特别限制，可以列举载体、表面活性剂、分散剂、辅助剂等。此外，根据需要，可以添加抗氧化剂、着色剂、润滑剂、紫外线吸收剂、防静电剂、防腐剂等。
作为上述的载体，可以列举碳酸钙、氯化钾、硫酸钠、硫酸钙、硫酸铵等无机盐类；柠檬酸、苹果酸、硬脂酸等有机酸以及它们的盐；葡萄糖、乳糖、蔗糖等糖类；氧化铝粉、硅胶、沸石、羟基磷灰石、磷酸锆、磷酸钛、氧化钛、氧化锌、水滑石、高岭石、蒙脱石、滑石、粘土、硅藻土、膨润土、白碳、高岭土、蛭石等固体载体。
此外，作为上述表面活性剂(可以作为分散剂使用)，只要是能够在通常的农园艺用制剂中使用的表面活性剂就没有特别限定，具体地说，有以下的非离子性表面活性剂、阴离子性表面活性剂、阳离子性表面活性剂、两性表面活性剂。
作为非离子性表面活性剂，可以列举山梨糖醇酐脂肪酸酯(C12～18)、POE山梨糖醇酐脂肪酸酯(C12～18)、蔗糖脂肪酸酯等糖酯型表面活性剂；POE脂肪酸酯(C12～18)、POE树脂酸酯、POE脂肪酸二酯(C12～ 18)等脂肪酸酯型表面活性剂；POE烷基醚(C12～18)等醇型表面活性剂；POE烷基(C8～12)苯基醚、POE二烷基(C8～12)苯基醚、POE烷基(C8～12)苯基醚甲醛缩聚物等烷基苯酚型表面活性剂；聚氧乙烯-聚氧丙烯嵌段聚合物；烷基(C12～18)聚氧乙烯-聚氧丙烯嵌段聚合物醚等聚氧乙烯-聚氧丙烯嵌段聚合物型表面活性剂；POE烷基胺(C12～18)、POE脂肪酰胺(C12～18)等烷基胺型表面活性剂；POE脂肪酸双苯基醚等双苯酚型表面活性剂；POA苄基苯基(或苯基苯基)醚、POA苯乙烯基苯基(或苯基苯基)醚等多芳香环型表面活性剂；POE醚和酯型硅和氟系表面活性剂等硅系、氟系表面活性剂；POE蓖麻油、POE硬化蓖麻油等植物油型表面活性剂；等。
作为阴离子性表面活性剂，可以列举烷基硫酸盐(C12～18、Na、NH4、烷醇胺)、POE烷基醚硫酸盐(C12～18、Na、NH4、烷醇胺)、POE烷基苯基醚硫酸盐(C12～18、NH4、烷醇胺)、POE苄基(或苯乙烯)苯基(或苯基苯基)醚硫酸盐(Na、NH4、烷醇胺)、聚氧乙烯、聚氧丙烯嵌段聚合物硫酸盐(Na、NH4、烷醇胺)等硫酸盐型表面活性剂；烯烃(烷烃)磺酸盐(C12～22、Na、Ca、烷醇胺)、AOS(C14～16、Na、烷醇胺)、二烷基磺基丁二酸盐(C8～12、Na、Ca、Mg)、烷基苯磺酸盐(C12、Na、Ca、Mg、NH4、烷基胺、烷醇、胺、环己烷基胺)、单或二烷基(C3～6)萘磺酸盐(Na、NH4、烷醇胺、Ca、Mg)、萘磺酸盐-甲醛缩聚物(Na、NH4)、烷基(C8～12)二苯基醚二磺酸盐(Na、NH4)、木质素磺酸盐(Na、Ca)、POE烷基(C8～12)苯基醚磺酸盐(Na)、POE烷基(C12～18)醚磺基琥珀酸半酯(Na)等磺酸盐型表面活性剂；羧酸型脂肪酸盐(C12～ 18、Na、K、NH4、烷醇胺)、N-甲基-脂肪酸肌氨酸盐(C12～18、Na)、树脂酸盐(Na、K)等POE烷基(C12～18)醚磷酸酯(Na、烷醇胺)、POE单或二烷基(C8～12)苯基醚磷酸酯(Na、烷醇胺)、POE苄基(或苯乙烯)化苯基(或苯基苯基)醚磷酸酯(Na、烷醇胺)、聚氧乙烯-聚氧丙烯嵌段聚合物(Na、烷醇胺)、磷脂酰胆碱-磷脂酰乙醇亚胺(卵磷脂)、烷基(C8～12)磷酸酯等磷酸酯型表面活性剂；等。
作为阳离子性表面活性剂，可以列举烷基三甲基氯化铵(C12～18)、甲基-聚氧乙烯-烷基氯化铵(C12～18)、烷基-N-甲基吡啶鎓溴化物(C12～ 18)、单或二烷基(C12～18)甲基化氯化铵、烷基(C12～18)五甲基丙二胺二氯化物等铵型表面活性剂；烷基二甲基苯扎氯铵(C12～18)、苄索氯铵(辛基苯氧乙氧基乙基二甲基苄基氯化铵)等苄烷铵型表面活性剂；等。
作为两性表面活性剂，可以列举二烷基(C8～12)二氨基乙基甜菜碱、烷基(C12～18)二甲基苄基甜菜碱等甜菜碱型表面活性剂；二烷基(C8～ 12)二氨基乙基甘氨酸、烷基(C12～18)二甲基苄基甘氨酸等甘氨酸型表面活性剂；等。
表面活性剂和/或分散剂可以单独使用1种或将2种以上混合使用。
作为上述的辅助剂，可以列举例如羧甲基纤维素、聚乙二醇、阿拉伯胶、淀粉等。
本发明的植物病害防除剂的形态没有特别限制，可以采用通常的农园艺用药能够采用的形态，例如粉剂、可湿性粉剂、乳剂、悬浮(flowable)剂、粒剂等形态。
作为本发明的植物病害防除剂所适用的植物病害，只要是本发明的罗氏假单胞菌显示防除能力的病原菌感染植物所引起的植物病害就没有特别限制。可以列举例如溃疡病、细菌性穿孔病、软腐病、细菌性斑点病、细菌性黑斑病、青枯病、细菌性褐斑病、细菌性茎坏疽病、细菌性稻谷枯病、细菌性苗立枯病、白叶枯病、腐败病和黑腐病等。
此外，作为本发明的植物病害防除剂所适用的植物病害，可以列举选自溃疡病、细菌性穿孔病、软腐病、细菌性斑点病、细菌性黑斑病、青枯病、细菌性褐斑病、细菌性茎坏疽病、细菌性稻谷枯病、细菌性苗立枯病、白叶枯病、腐败病和黑腐病中的一种以上、优选2种以上、更优选全部的植物病害。尤其是至少软腐病、腐败病、黑腐病、溃疡病、细菌性穿孔病中的任何一种以上、优选2种以上、更优选全部的病害。
<3>本发明的植物病害的防除方法
本发明的植物病害的防除方法只要是将本发明的植物病害防除剂施用于植物和/或该植物的栽培土壤的方法就没有特别限制，与使用通常的化学农药的情况相同，可以根据植物病害的种类或适用植物的种类等而适当选择。例如，通过将本发明的植物病害防除剂直接涂布或散布于植物等，可以将本发明的植物病害防除剂施用于植物，或者通过将本发明的植物病害防除剂混合、散布或灌注于栽培植物的土壤(植物的栽培土壤)等，可以将本发明的植物病害防除剂施用于植物的栽培土壤。其中，将本发明的植物病害防除剂施用于植物的栽培土壤时，可以将本发明的植物病害防除剂施用于土壤后种植植物，此外，还可以将植物种植于土壤中后将本发明的植物病害防除剂施用于该土壤。此外，也可以如特开2001-302407号公报记载的那样，在向设施内送风的送风装置的送风口附近设置本发明的植物病害防除剂，与从送风口送出的空气一起散布农药。
将本发明的植物病害防除剂施用于植物和/或该植物的栽培土壤时，可以将本发明的植物病害防除剂用适当量的水等稀释后使用。作为将本发明的植物病害防除剂施用于植物和/或该植物的栽培土壤的量，可以根据植物病害的种类、适用植物的种类等的不同而不同，因此无法一概而定，但向土壤中散布处理时，换算成罗氏假单胞菌的菌体浓度，通常可以设为1×102～1×1011cfu/ml、优选1×104～1×109cfu/ml的范围。
此外，散布次数可以根据植物病害的种类或适用植物的种类、病害程度等适当选择。
以下，通过实施例更具体地说明本发明，本发明的技术范围并不限于这些例示。
实施例
〔实施例1〕菌的鉴定和植物病害防除可湿性粉剂组合物的制备
1.对莴苣软腐病具有防除能力的菌株的筛选
将田地中采取的莴苣叶在少量的灭菌水中均质化，将得到的悬浮液涂抹于标准琼脂培养基(酪蛋白制胨0.5％(w/v)、酵母提取物0.25％(w/v)、葡萄糖0.1％(w/v)、琼脂1.5％(w/v)、灭菌后的pH为6.9～7.1)(日水制药社制)上，在25℃培养2天，采取生长的微生物菌落，进而以成为单一菌落的方式进行分离、获取。对于所获取的多个微生物菌株，进行后述实施例中记载的莴苣软腐病防除效果试验(室内试验)，筛选对莴苣软腐病的病原菌(胡萝卜软腐欧文氏菌)具有防除效果的微生物菌株。对于所筛选的菌株，进而实施与后述的白菜软腐病防除效果试验(田地试验)同样的莴苣软腐病防除效果试验(田地试验)，在田地试验中也筛选了对莴苣软腐病具有防除效果的050572I9株。
2.16SrDNA基因的解析
对于050572I9株，为了解析16SrDNA基因的核苷酸序列，由050572I9株尝试16SrDNA的分离。具体地说，首先，按照常法由050572I9株分离基因组DNA。将得到的基因组DNA为模板，使用在16SrDNA的分离中经常使用的27F引物(序列号2)和1544R引物(序列号3)进行PCR扩增。通过使用琼脂糖凝胶的电泳确认PCR产物的有无后，分别对含有多种聚核苷酸的该PCR产物进行序列测定，从而确定多种核苷酸序列。基于所得的多种核苷酸序列信息进行汇编，确定16SrDNA的全长的核苷酸序列。以序列号1表示050572I9株的16SrDNA基因的核苷酸序列。
基于050572I9株的16SrDNA基因的核苷酸序列，使用BLAST进行同源性检索。此外，使用ClustalW解析050572I9株的16SrDNA基因的核苷酸序列，将得到的解析结果用Tree View进行处理，由此制作与050572I9株相关的系统树(图1)。通过该系统树，可知050572I9株的分类学上所处位置。其结果强烈提示050572I9株是罗氏假单胞菌的可能性。
3.菌学性质的解析
由上述2.的16SrDNA基因的序列解析结果认为，050572I9株是假单胞菌属的微生物、其中特别是罗氏假单胞菌或荧光假单胞菌的可能性很高。为了确定050572I9株的种类，按照后述规定的方法研究050572I9株的菌学性质。050572I9株的菌学性质如下。为革兰氏阴性杆菌，没有形成芽孢，细胞全长为2.0～2.5μm，全宽为0.7～0.8μm，看到了运动性。在肉汁琼脂培养基上呈现平滑圆形菌落，在King’s B培养基上产生荧光性色素。在41℃没有看到生长，过氧化氢酶活性为阳性，OF培养基试验为氧化，硝酸盐的还原为阴性，吲哚产生为阴性，尿素酶活性为阴性，明胶的分解为阳性，β-半乳糖苷酶活性为阴性，β-葡萄糖苷酶活性为阴性。此外，在LOPAT试验中，果聚糖产生为阳性，土豆块茎腐败为阴性，烟草过敏性反应为阴性，氧化酶活性为阳性，精氨酸的分解为阳性。淀粉同化性为阴性，关于糖、有机酸等碳化合物的同化性，D-葡萄糖为阳性，L-阿拉伯糖为阳性，D-甘露糖为阳性，D-甘露醇为阳性，N-乙酰基-D-葡糖胺为阳性，麦芽糖为阴性，葡糖酸钾为阳性，正癸酸为阳性，己二酸为阴性，dL-苹果酸为阳性，柠檬酸钠为阳性，乙酸苯酯为阴性，蔗糖为阳性，海藻糖为阳性，阿东糖醇为阴性，山梨醇为阳性，丁酸为阳性，丙酸为阳性，丙二醇为阳性。将其综合在表中如下所示。
【表2】
Figure A20078004030100151
上述表2的项目中，对于硝酸盐的还原、吲哚产生、OF试验、精氨酸的分解、尿素酶活性、明胶的分解、β-半乳糖苷酶活性、β-葡萄糖苷酶活性、D-葡萄糖的同化性、L-阿拉伯糖的同化性、D-甘露糖的同化性、D-甘露醇的同化性、N-乙酰基-D-葡糖胺的同化性、麦芽糖的同化性、葡糖酸钾的同化性、正癸酸的同化性、己二酸的同化性、dL-苹果酸的同化性、柠檬酸钠的同化性、乙酸苯酯的同化性，使用API20NE(BioMerieux Japan公司制)，按照所附的实验方案进行试验。氧化酶活性使用Oxidase Reagent(BioMerieux Japan公司制)进行试验，过氧化氢酶活性使用ID color Catalase(BioMerieux Japan公司制)进行试验。此外，对于King’s B培养基试验中使用的King’s B培养基，使用荣研化学株式会社制的King’s B培养基来进行。对于革兰氏染色，使用Color Gram2(BioMerieux Japan公司制)来进行。对于果聚糖产生试验，在添加5％蔗糖的普通琼脂培养基的平板上画线移植菌株，在25℃培养3天，将形成白色并具有粘性的大大隆起为圆屋顶状的菌落判断为阳性。
对于土豆块茎腐败试验，如下进行。
将剥皮后以7～8mm的厚度切成圆片的土豆水洗后浸于醇中立即进行火焰消毒，然后装入培养皿中，保持在过湿状态。在切成圆片的土豆切片上涂布浓菌液，在25℃培养2天。将在接种菌后的切片的大部分中观察到腐败的评价为阳性，将接种地方稍微腐败程度的评价为阴性。这次，作为土豆使用“とかちこがね”。
对于烟草过敏性反应试验如下进行。
用注射器向烟草(White Burley或Bright Yellow)的叶肉内注入菌液。菌液使用菌浓度为1×108cells/ml的和菌浓度为1×109cells/ml的两种。将注入有各种菌液的烟草栽培5天，将菌液的浸润部发生脱水症状、呈现褐色或暗绿色的判定为阳性。将即使注入任何菌液，也不发生变化或黄化的程度的判断为阴性。
淀粉的同化性试验如下进行。首先，在普通琼脂培养基(在水1L中含有琼脂35g和可溶性淀粉10g)上画线移植菌株，在30℃培养2～3天。培养后，将Lugol的碘溶液(在水30ml中含有碘0.1g和碘化钾0.2g)注到上述的琼脂培养基上，将在菌的菌落周围看到透明部分的情况判定为阳性。
糖或有机酸等碳化合物的同化性是在后述组成的基础培养基5ml中添加碳化合物(D-葡萄糖、蔗糖、海藻糖、阿东糖醇、山梨醇、丁酸、丙酸、丙二醇中的任意之一)0.1重量％或0.2重量％(对于D-葡萄糖、蔗糖、海藻糖、阿东糖醇、山梨醇为0.2重量％；对于丁酸、丙酸、丙二醇为0.1重量％)来制作培养基，在所制作的培养基上种植菌体，在30℃培养2～3天(对于丁酸为5天)后，将看到菌增殖的判定为阳性。
·基础培养基(1L)的组成
  1M Na2HPO4和1M KH2PO4缓冲液(pH 6.8)   40mL
  (NH4)2SO4   1.0g
  Hutner无机盐溶液   20mL
  蒸馏水   余量
·Hutner的无机盐溶液(1L)的组成
  次氮基三乙酸   10g
  MgSO4·7H2O   14.45g
  CaCl2·2H2O   3.335g
  (NH4)6Mo7O24·4H2O   9.25mg
  FeSO4·7H2O   99mg
  盐类原液(Metals”44”)   50ml
将次氮基三乙酸溶于蒸馏水，用氢氧化钾中和后，添加其余的盐类。
·盐类原液(100ml的组成)
  EDTA   250mg
  ZnSO4·7H2O   1,095mg
  FeSO4·7H2O   500mg
  MnSO4·H2O   154mg
  CuSO4·5H2O   39.2mg
  Co(NO3)2·6H2O   24.8mg
  Na2B4O7·10H2O   17.7mg
为了明确050572I9株是罗氏假单胞菌、荧光假单胞菌中的哪一种，对于作为公知菌株的罗氏假单胞菌JCM11940株、荧光假单胞菌NBRC14160株，与上述同样地进行上述表2的项目试验。将其结果示于表2。
此外，已知荧光假单胞菌对西红柿表现病原性而使西红柿细菌性茎坏疽病发病，但为了研究050572I9株对西红柿是否具有这样的病原性，进行以下那样的试验。
将050572I9株在液体培养基中培养直至A600(波长600nm的吸光度)达到1.0，将该培养液散布接种于以西红柿苗的叶柄基部为中心的主茎和叶柄部分。栽培7天后，观察苗，结果没有看到西红柿细菌性茎坏疽病的病症。栽培14天后和栽培21天后观察苗，但同样没有看到西红柿细菌性茎坏疽病的病症。此外，使西红柿苗带伤后，在该部分接种050572I9株的上述培养液并进行同样的试验，但是同样没有看到西红柿细菌性茎坏疽病的病症。进而，用注射器向西红柿苗的内部注入接种050572I9株的上述培养液，进行同样的试验，同样没有看到西红柿细菌性茎坏疽病的病症。
由表2的结果可知，050572I9株与荧光假单胞菌NBRC14160株的不同点是有无明胶的分解力、精氨酸的分解力、蔗糖的同化性、阿东糖醇的同化性、丙酸的同化性和丙二醇的同化性。另一方面，050572I9株与罗氏假单胞菌JCM11940株的不同点仅是有无硝酸盐的还原能力。
此外，进行菌体的形状观察，结果050572I9株(细胞全长2.0～2.5μm、细胞宽幅0.7～0.8μm)与罗氏假单胞菌JCM11940株(细胞全长2.0～2.5μm、细胞宽幅0.7～0.8μm)为大致相同的大小，与此相对，荧光假单胞菌NBRC14160株(细胞全长2.2～2.7μm、细胞宽幅0.8～1.0μm)的全长和宽幅比050572I9株稍大。
进而，050572I9株与荧光假单胞菌不同，不会使西红柿细菌性茎坏疽病发病。
将以上结果综合考虑，考虑到050572I9株与罗氏假单胞菌的同源性高于荧光假单胞菌，因此将050572I9株鉴定为罗氏假单胞菌。本发明人等将该050572I9株命名为罗氏假单胞菌050572I9株。罗氏假单胞菌是生物安全第1级的微生物。
另外，用农业环境技术研究所的数据库检索050572I9株的API20NE的解析结果，虽然是极低的几率，为9％，但是由于提示050572I9株是边缘假单胞菌边缘致病变种的可能性，因此为了验证该可能性，通过以下的试验研究050572I9株是否对已知边缘假单胞菌边缘致病变种发挥病原性的白菜和莴苣显示病原性。
将对050572I9株进行液体培养而得到的培养液进行离心分离，回收菌体。将回收的菌体用水悬浮，添加水进行调整，使得该菌体悬浮液的A600达到1.0。在该菌体悬浮液中浸渍白菜中脉部的切片。从菌体悬浮液中取出切片，在28℃温育4天。其后，观察该白菜切片，结果完全不显示边缘假单胞菌边缘致病变种成为病原菌的白菜腐败病的病症(产生水浸状的绿褐色斑点)。
使用莴苣代替白菜进行同样的试验，但同样完全不显示边缘假单胞菌边缘致病变种成为病原菌的莴苣腐败病的病症(产生水浸状的病斑、叶脉褐变并扩大)。此外，如上述表2所示，050572I9株也不会引起土豆的块茎腐败。由这些可以确认，050572I9株不是边缘假单胞菌边缘致病变种。
4.菌体悬浮液的制备
在300ml容量的三角烧瓶中装入标准液体培养基(酵母提取物0.25％，胨0.5％，葡萄糖0.1％，pH7.0)150ml，进行加热灭菌。接种罗氏假单胞菌050572I9株(FERM BP-10912株)的前培养物0.1ml，在往复振荡机中于30℃、以100rpm培养3天。将得到的培养液进行离心分离并取出上清，将沉淀用水清洗，再次离心后取出上清并用水清洗沉淀。如此制备罗氏假单胞菌050572I9株的菌体悬浮液。
5.植物病害防除可湿性粉剂组合物的制造
将上述4.中制备的菌体悬浮液冷冻干燥。该干燥物的活菌数是1.0×1011cfu/g。将菌体干燥物10重量份与萘磺酸(钠)甲醛缩聚物9重量份、硫酸钙及其水合物81重量份混合均匀，得到可湿性粉剂组合物。可湿性粉剂组合物是以罗氏假单胞菌050572I9株为有效成分的药剂。
〔试验例1〕
莴苣软腐病防除效果试验(室内试验)
将上述4.中得到的菌体悬浮液用水稀释来制备处理液(A600＝0.1)。将处理液散布于莴苣中脉部切取叶的切取口。作为比较例，将Biokeeper(注册商标)可湿性粉剂(中央硝子株式会社制)的1000倍稀释液同样地散布处理。将散布处理的各种莴苣在加湿条件下于28℃温育5小时后，将莴苣软腐病的病原菌(胡萝卜软腐欧文氏菌：Erwinia carotovora)的水悬浮液(A600＝0.5)接种于各个莴苣的切取口。接种处理后在28℃温育4天后，按以下的基准调查发病程度，基于以下的式1和式2算出发病度和防除价。
基准0：无病变
基准1：病变小于中脉部的10％
基准2：病变为中脉部的10～50％
基准3：病变为中脉部的50～75％
基准4：病变超过中脉部的75％
Figure A20078004030100211
n1～n4是对应于各个基准1～4的叶数
防除价＝(1-(处理区的发病度/无处理区的发病度))×100
将莴苣软腐病防除效果试验(室内试验)的结果示于表3。
【表3】
由表3可知，确认罗氏假单胞菌050572I9株的防除价为72.4以及对莴苣软腐病具有高防除效果。此外，罗氏假单胞菌050572I9株显示出比使用非病原性胡萝卜软腐欧文氏菌的Biokeeper(注册商标)可湿性粉剂更优异的防除价。
〔试验例2〕
白菜软腐病防除效果试验(田地试验)
将上述4.中得到的菌体悬浮液用水稀释来制备处理液(A600＝0.1)。将处理液散布处理于定植在田地的白菜。作为比较例，将Biokeeper(注册商标)可湿性粉剂(中央硝子株式会社制)的1000倍稀释液、或Coppersin(注册商标)可湿性粉剂(明治制果株式会社制)的1000倍稀释液同样地散布处理。散布处理隔1周实施2次。此外，白菜软腐病的病源菌(胡萝卜软腐欧文氏菌)在第1次散布处理的当天，散布接种其水悬浮液(A600＝0.1)。自第2次散布1周后，用以下的基准调查发病程度，基于以下的式3、式4和式5算出发病度、发病株率和防除价。
基准0：无发病
基准1：在外叶的一部分看到发病
基准2：在外叶和结球叶的一部分看到发病
基准3：在结球叶的大部分看到发病
Figure A20078004030100221
n1～n3是分别对应于基准1～3的株数
发病株率＝(发病株数/全部调查株数)×100
Figure A20078004030100222
将白菜软腐病防除效果试验(田地试验)的结果示于表4。
【表4】
由表4可知，确认罗氏假单胞菌050572I9株对发病度的防除价为72.2、对发病株率的防除价为72.3、对白菜软腐病具有高防除效果。此外，罗氏假单胞菌050572I9株的防除价是与作为以碱性氯化铜为主要成分的化学系防除剂的Coppersin(注册商标)可湿性粉剂同等的防除价，是比使用非病原性胡萝卜软腐欧文氏菌的Biokeeper(注册商标)可湿性粉剂更高的防除价。
〔试验例3〕
柑橘溃疡病防除效果试验(室内试验)
将上述4.中得到的菌体悬浮液用水稀释来制备处理液(A600＝0.1)。将处理液散布于用手术刀划伤的柑橘(柠檬)叶。作为比较例，将Agrept(注册商标)可湿性粉剂(明治制果株式会社)的1000倍稀释液同样地散布处理。其后，在加湿条件下于28℃温育5小时，然后在伤口上接种柑橘溃疡病菌(野油菜黄单胞菌柑橘病原变种：Xanthomonascampestris pv.citri)的水悬浮液(A600＝0.5)。接种处理后在28℃温育7天，按以下的基准调查发病程度，基于以下的式6和式7算出发病度和防除价。
基准0：未见病斑
基准1：稍见病斑
基准2：看到病斑
基准3：看到显著病斑
Figure A20078004030100231
n1～n3是对应于各个基准1～3的病斑数
防除价＝(1-(处理区的发病度/无处理区的发病度))×100
将柑橘溃疡病防除效果试验(室内试验)的结果示于表5。
【表5】
Figure A20078004030100241
由表5可知，确认罗氏假单胞菌050572I9株的防除价为81.8，对柑橘溃疡病具有高防除效果。罗氏假单胞菌050572I9株的防除价比作为以链霉素硫酸盐为主要成分的化学系防除剂的Agrept(注册商标)可湿性粉剂的防除价更高。
〔试验例4〕
柑橘溃疡病防除效果试验(田地试验)
将上述4.中得到的的菌体悬浮液用水稀释来制备处理液(A600＝0.05)。将处理液对脐橙树木整体进行散布处理。作为比较例，将Coppersin(注册商标)可湿性粉剂(明治制果株式会社制)的1000倍稀释液同样地散布处理。散布处理自落花10天后和其后每2～3周1次，实施共计3次。自最终散布7天后，按以下的基准调查脐橙的叶和果实的发病程度，基于以下的式8、式9、式10和式11算出发病度、发病叶率、发病幼果率和防除价。
基准0：无病斑
基准1：病斑数为1～3个
基准2：病斑数为4～10个
基准3：病斑数为11～20个
基准4：病斑数为21个以上
Figure A20078004030100242
n1～n4是对应于各个基准1～4的叶和幼果数
发病叶率＝(发病叶数/全部调查叶数)×100
发病幼果率＝(发病幼果数/全部调查幼果数)×100
对于发病叶率、发病幼果率的防除价也同样地计算。
将柑橘溃疡病防除效果试验(田地试验)的结果示于表6(柑橘叶)和表7(柑橘幼果)。
【表6】
Figure A20078004030100252
【表7】
Figure A20078004030100253
由表6和表7可知，罗氏假单胞菌050572I9株显示出对叶子发病度的防除价为72.5、对发病叶率的防除价为67.5的高防除价。此外，对幼果发病度的防除价为77.5、对发病幼果率的防除价为60.7的高防除价。
〔试验例5〕
莴苣软腐病防除效果试验(室内试验)
将上述4.中得到的菌体悬浮液用水稀释来制备处理液(A600＝0.05)。此外，将对与上述4.同样培养和制备罗氏假单胞菌JCM11940的菌体悬浮液和与上述5.同样进行制剂制备的可湿性粉剂用水稀释来制备处理液(A600＝0.05)。进而，将与上述4.同样地培养和制备荧光假单胞菌NBRC14160的菌体悬浮液用水稀释而制备处理液(A600＝0.05)。
将对4.中得到的菌体悬浮液稀释而成的上述处理液散布于莴苣中脉部切取叶的切取口。此外，将对含有罗氏假单胞菌JCM11940的菌体悬浮液稀释而成的上述处理液同样地散布于莴苣中脉部切取叶的切取口。进而，作为比较例，将对含有荧光假单胞菌NBRC14160的菌体悬浮液稀释而成的上述处理液同样地散布于莴苣中脉部切取叶的切取口。
将经散布处理的各个莴苣在加湿条件下于25℃温育5小时后，将莴苣软腐病菌(胡萝卜软腐欧文氏菌)的水悬浮液(A600＝0.5)接种于伤口。接种处理后在25℃温育5天后，按以下的基准调查发病度，基于以下的式12和式13算出发病度和防除价。
基准0：无病变
基准1：病变小于中脉部的10％
基准2：病变为中脉部的10～50％
基准3：病变为中脉部的50～75％
基准4：病变超过中脉部的75％
Figure A20078004030100261
n1～n4是对应于各个基准1～4的叶数
防除价＝(1-(处理区的发病度/无处理区的发病度))×100
将莴苣软腐病防除效果试验(室内试验)的结果示于表8。
【表8】
Figure A20078004030100271
由表8可知，虽然罗氏假单胞菌JCM11940株比050572I9株差，但是防除价为57.1且对莴苣软腐病具有防除效果。然而，确认与罗氏假单胞菌为近缘种的荧光假单胞菌的防除价为0.0且对莴苣软腐病没有防除效果。
〔试验例6〕
莴苣腐败病防除效果试验(室内试验)
将上述4.中得到的菌体悬浮液用水稀释来制备处理液(A600＝0.05)。在处理液中将以莴苣中脉部为中心的切取叶片浸渍处理10分钟。作为比较例，将Vegikeeper〔注册商标〕可湿性粉剂(中央硝子株式会社制)的1000倍稀释液同样地浸渍处理。将经药剂处理的各个莴苣叶在加湿条件下于25℃温育5小时后，将莴苣腐败病菌(菊苣假单胞菌PCL2001)的水悬浮液(A600＝0.01)在切片的断面两侧各接种20μl。处理后，在25℃温育5天，按下述的基准调查发病度。
基准0：无病变
基准1：病症小于中脉部的10％
基准2：病症为中脉部的10～50％
基准3：病症为中脉部的50～75％
基准4：病症超过中脉部的75％
Figure A20078004030100281
n1～n4是对应于各个基准1～4的叶数
防除价＝(1-(处理区的发病度/无处理区的发病度))×100
【表9】
由表9可知，确认罗氏假单胞菌(Pseudomonas rhodesiae)050572I9株的防除价为87.5且对莴苣腐败病具有高防除效果。此外，罗氏假单胞菌(Pseudomonas rhodesiae)050572I9株显示出比Vegikeeper〔注册商标〕可湿性粉剂优异的防除价。
〔试验例7〕
甘蓝黑腐病防除效果试验(室内试验)
将上述4.中得到的菌体悬浮液用水稀释来制备处理液(A600＝0.05)。将以甘蓝叶的叶脉为中心而切取得到的叶片在处理液中进行10分钟浸渍处理。作为比较例，将Vegikeeper(注册商标)可湿性粉剂(中央硝子株式会社制)的1000倍稀释液同样地进行浸渍处理。将经药剂处理的各个甘蓝叶在加湿条件下于25℃温育5小时后，将甘蓝黑腐病菌(野油菜黄单胞菌野油菜致病变种CAX303)的水悬浮液(A600＝1.0)在切片的断面两侧各接种20μl。处理后，在25℃温育8天，按下述的基准调查发病度。
基准0：无病变
基准1：病症仅在切口的一部分产生
基准2：病症产生到叶脉的一部分
基准3：病症在叶脉整体产生
基准4：病症在叶脉整体产生且产生到叶面
n1～n4是对应于各个基准1～4的叶数
防除价＝(1-(处理区的发病度/无处理区的发病度))×100
【表10】
Figure A20078004030100292
由表10可知，明确罗氏假单胞菌050572I9株的防除价为60.0且对甘蓝黑腐病具有高防除效果。此外，罗氏假单胞菌050572I9株显示出比Vegikeeper(注册商标)可湿性粉剂优异的防除价。
〔试验例8〕
桃细菌性穿孔病防除效果试验(田地试验)
将上述4.中得到的菌体悬浮液用水稀释来制备处理液(A600＝0.1)。将处理液对桃树木整体进行散布处理。散布处理在落花后立即进行第1次，在其7天后、22天后、34天后、49天后进行处理，实施共计5次。自第2次散布15天后、第4次散布6天后、自最终散布8天后对GL1m周边的树周围的新梢叶调查健全叶数和患病叶数，算出防除价。
【表11】
Figure A20078004030100301
由表11明确，罗氏假单胞菌050572I9株对生长期的桃显示出防除价达50～65左右之高的桃细菌性穿孔病防除效果。
               序列表
<110>日本曹达株式会社
<120>对植物病害具有防除能力的微生物和使用该微生物的植物病害防除剂
<130>Case775
<150>JP 2006-302263
<151>2006-11-8
<160>3
<170>PatentIn version 3.4
<210>1
<211>1422
<212>DNA
<213>罗氏假单胞菌
<400>1
ggcctaacac atgcaagtcg agcggtagag agaagcttgc ttctcttgag agcggcggac     60
gggtgagtaa tgcctaggaa tctgcctggt agtgggggat aacgttcgga aacggacgct    120
aataccgcat acgtcctacg ggagaaagca ggggaccttc gggccttgcg ctatcagatg    180
agcctaggtc ggattagcta gttggtgggg taatggctca ccaaggcgac gatccgtaac    240
tggtctgaga ggatgatcag tcacactgga actgagacac ggtccagact cctacgggag    300
gcagcagtgg ggaatattgg acaatgggcg aaagcctgat ccagccatgc cgcgtgtgtg    360
aagaaggtct tcggattgta aagcacttta agttgggagg aagggccatt acctaatacg    420
tgatggtttt gacgttaccg acagaataag caccggctaa ctctgtgcca gcagccgcgg    480
taatacagag ggtgcaagcg ttaatcggaa ttactgggcg taaagcgcgc gtaggtggtt     540
tgttaagttg gatgtgaaat ccccgggctc aacctgggaa ctgcattcaa aactgactga     600
ctagagtatg gtagagggtg gtggaatttc ctgtgtagcg gtgaaatgcg tagatatagg     660
aaggaacacc agtggcgaag gcgaccacct ggactgatac tgacactgag gtgcgaaagc     720
gtggggagca aacaggatta gataccctgg tagtccacgc cgtaaacgat gtcaactagc     780
cgttgggagc cttgagctct tagtggcgca gctaacgcat taagttgacc gcctggggag     840
tacggccgca aggttaaaac tcaaatgaat tgacgggggc ccgcacaagc ggtggagcat     900
gtggtttaat tcgaagcaac gcgaagaacc ttaccaggcc ttgacatcca atgaactttc     960
tagagataga ttggtgcctt cgggaacatt gagacaggtg ctgcatggct gtcgtcagct    1020
cgtgtcgtga gatgttgggt taagtcccgt aacgagcgca acccttgtcc ttagttacca    1080
gcacgttatg gtgggcactc taaggagact gccggtgaca aaccggagga aggtggggat    1140
gacgtcaagt catcatggcc cttacggcct gggctacaca cgtgctacaa tggtcggtac    1200
aaagggttgc caagccgcga ggtggagcta atcccataaa accgatcgta gtccggatcg    1260
cagtctgcaa ctcgactgcg tgaagtcgga atcgctagta atcgcgaatc agaatgtcgc    1320
ggtgaatacg ttcccgggcc ttgtacacac cgcccgtcac accatgggag tgggttgcac    1380
cagaagtagc tagtctaacc ttcgggggga cggttaccac gg                       1422
<210>2
<211>20
<212>DNA
<213>人工的
<220>
<223>16S 27F引物
<400>2
agagtttgat cctggctcag    20
<210>3
<211>20
<212>DNA
<213>人工的
<220>
<223>16S 1544R引物
<400>3
agaaaggagg tgatccagcc    20

Claims (9)

1、一种对植物病害具有防除能力的罗氏假单胞菌。
2、一种对植物病害具有防除能力的罗氏假单胞菌FERMBP-10912。
3、一种变异株，其是罗氏假单胞菌FERM BP-10912的变异株，而且对植物病害具有防除能力。
4、如权利要求1～3中任一项所述的罗氏假单胞菌、罗氏假单胞菌FERM BP-10912或罗氏假单胞菌FERM BP-10912的变异株，其中，植物病害是选自溃疡病、细菌性穿孔病、软腐病、细菌性斑点病、细菌性黑斑病、青枯病、细菌性褐斑病、细菌性茎坏疽病、细菌性稻谷枯病、细菌性苗立枯病、白叶枯病、腐败病和黑腐病中的1种或2种以上的植物病害。
5、如权利要求1～3中任一项所述的罗氏假单胞菌、罗氏假单胞菌FERM BP-10912或罗氏假单胞菌FERM BP-10912的变异株，其中，植物病害是由于如下病原菌所致病的植物病害，即选自黄单胞菌属、欧文氏菌属、假单胞菌属、雷尔氏菌属和伯克霍尔德氏菌属中的1种或2种以上的病原菌。
6、一种植物病害防除剂，其含有对植物病害具有防除能力的罗氏假单胞菌的菌体。
7、如权利要求6所述的植物病害防除剂，其中，罗氏假单胞菌的菌体是选自权利要求2所述的罗氏假单胞菌FERM BP-10912的菌体和权利要求3所述的罗氏假单胞菌FERM BP-10912的变异株的菌体中的一种或两种以上的菌体。
8、如权利要求6所述的植物病害防除剂，其中，植物病害是选自溃疡病、细菌性穿孔病、软腐病、细菌性斑点病、细菌性黑斑病、青枯病、细菌性褐斑病、细菌性茎坏疽病、细菌性稻谷枯病、细菌性苗立枯病、白叶枯病、腐败病和黑腐病中的1种或2种以上的植物病害。
9、一种植物病害的防除方法，其特征在于，将权利要求1～3中任一项所述的罗氏假单胞菌、罗氏假单胞菌FERM BP-10912或罗氏假单胞菌FERM BP-10912的变异株施用于植物和/或该植物的栽培土壤。
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