CN101528157B - 医疗试剂盒和使用该试剂盒的方法 - Google Patents

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Abstract

提供了一种医疗试剂盒以及使用该医疗试剂盒的方法。为了实现该目的，提供了一种无菌的/经消毒的医疗试剂盒，该医疗试剂盒包括按以下方式配置的软骨再生试剂盒(10)、骨再生试剂盒(20)或者脐带血储存试剂盒(30)，所述配置通过将所有的过程分成以下相应的步骤而使每一个过程都能按照用于每一步骤的功能专一性的试剂盒组进行：分离细胞的步骤、培养细胞的步骤、收集细胞的步骤和储存细胞的步骤，以及将所需要的细胞植入到机体的靶位点的步骤。因此，使用软骨再生试剂盒(10)通过以下方式使所述软骨再生：收集软骨组织，分离软骨细胞，改变软骨细胞的培养基和对软骨细胞进行传代培养，制备软骨细胞治疗产品，用于分离/培养/制备/冷冻保存细胞的培养基，以及用于分离/培养/冷冻保存细胞的培养基。使用骨再生试剂盒(20)通过以下方式使骨再生：收集骨髓，分离成骨细胞，改变成骨细胞的培养基和对成骨细胞进行传代培养，制备成骨细胞治疗产品。此外，使用脐带血储存试剂盒(30)通过以下方式来储存脐带血：收集脐带血，分离造血干细胞，和冷冻保存造血干细胞。

Description

医疗试剂盒和使用该试剂盒的方法
技术领域
本发明涉及医疗试剂盒和使用该试剂盒的方法。更具体地说，本发明涉及使用一种试剂盒的方法，所述试剂盒与用于软骨和骨的再生的细胞治疗产品的制备和植入、以及脐带血的储存和脐带血的处理有关。尤其是，本发明能够制备和提供对于期望细胞的分离、培养、收集、植入和储存过程所必需的单一的试剂盒形式的各种材料、培养基和溶液，以容易并方便地使用。因此，本发明能够解决制备细胞治疗产品和储存脐带血的常规技术中存在的一些问题，例如生产成本过高、生产周期过长和劳动成本高。因此，本发明能够显著地改善产品的质量和可靠性，从而非常有助于提高消费者的满意程度。
背景技术
由于用于移植的供体器官严重短缺，对组织再生的研究兴趣越来越浓，这是本领域公知的。然而，很难开发出细胞治疗产品以替代组织再生，而且不易创建储存脐带血的方法。尤其是，细胞治疗产品不是治疗的方法，在目前的医药领域，细胞治疗产品可广泛地通过商购获得。此外，绝没有将无菌的医疗器械和培养基制备在单独一套的形式的试剂盒中，这样所述细胞治疗产品可以容易地并方便地进行制备，随后移植到靶区域。
此外，组织工程学是通过恢复、重建、再生或者置换受损组织或器官的功能，以给器官或者组织提供正常的生物功能的生物技术的领域。以前，尽管组织工程学不为生物学家或者工程师所熟知，但是现在，组织工程学已经是众所周知的并快速成长的科学分枝。组织工程学已经称为值得关注的领域，并被称为“20世纪最有前途的研究领域之一”，并被时代杂志选中(2005五月)。这被认为是由于从事多个领域的专家不断地、不厌倦地努力的结果。同样地，在韩国，组织工程学正引起浓厚的兴趣并快速地成长。
在组织工程学的早期，研究的主要目的是在体外制备在解剖学上或者组织学上与人的组织和器官相似的组织和器官。其后，组织工程学重视这样形成的组织的功能。通过不断地、大量地研究，遍及各个领域的组织工程学的产品和技术在临床应用方面进行了大量的努力，最初的研究从人造皮肤开始。最近，组织再生还与组织重建一起被介绍。
组织工程学的基本构成元件之一是细胞。例如，在组织工程学的研究中已经使用同种异体细胞、异种细胞或自体同源细胞。为了避免在移植的植入时可能发生的免疫排斥反应，同种异体细胞或异种细胞被诱导而分泌出对人体必需的物质，从而改善体内组织的生物功能。然而，同种异体细胞或异种细胞的应用受到实际应用的限制，从而导致优先使用不会导致免疫排斥反应的自体同源的细胞。已经使用自体同源的细胞进行了大量的研究。目前，在许多领域完成动物试验后，正在积极地进行的实际的临床试验，并报道了一些令人满意的结果。与人造生物材料不同，优选利用自体同源细胞的注射治疗是因为没有外来物反应的风险。在临床上，已经尝试使用各种组织的制剂通过注射治疗。尤其是，可以说内窥镜的引入和协助扩展了组织工程学的应用范围。
然而，制备利用这些自体同源细胞的细胞治疗产品的总过程有些复杂，因此，不能容易地进行。在处理制备细胞治疗产品所使用的各种塑料器皿、溶液和培养基，以及将细胞植入到机体的缺陷部位时可能发生污染。此外，由于细胞培养时间被延长，患者可能错过及时植入的机会。
发明内容
因此，考虑到上文讨论的常规技术中存在的问题而完成本发明，本发明的第一个目的是提供一种使用试剂盒的方法，所述试剂盒与用于软骨和骨的再生细胞治疗产品的制备和植入、以及脐带血的储存和脐带血的处理有关。尤其是，本发明能够制备和提供对于期望的细胞的分离、培养、收集、植入和储存过程必需的单一试剂盒形式的各种材料、培养基和溶液，以容易并方便地使用。因此，本发明能够解决制备细胞治疗产品和储存脐带血的常规技术中存在的一些问题，例如，生产成本过高、生产周期过长和劳动成本高。
本发明的第二个目的是提供一种无菌的并已消毒的医疗试剂盒，该医疗试剂盒能够对从收集的软骨组织、骨髓组织和脐带血中得到细胞进行可靠的分离、培养、收集和储存，并将期望的细胞植入到机体的靶位置。为了实现这个目的，所述医疗试剂盒配置成单独的试剂盒组的形式，通过将所有的过程分成相应的步骤而使每一个过程都能按照相应于每一步骤的功能专一性的试剂盒组进行。
本发明的第三个目的是使所有的过程实现标准化，所述所有的过程包括按照相应步骤制备用于软骨和骨再生的细胞治疗产品的过程，和制备适合标准化过程的试剂盒的过程。因此，本发明能够使所述试剂盒在每一次使用时都容易并且方便，这将激活并提升细胞治疗产品的生产，并且通过组织工程学使新的治疗产品商品化。
本发明的第四个目的是使储存脐带血的方法标准化，这与上述用于软骨和骨再生的试剂盒的配置相同；还能够制备相应于每一个过程的功能专一化的试剂盒，并使每一次使用该试剂盒较为方便。因此，与常规的储存/处理方法相比，本发明在储存脐带血时能够实现降低成本、缩短时间和减少人力的优点。
本发明的第五个目的是提供一种医疗试剂盒和使用该试剂盒的方法，通过显著地改善产品的质量和可靠性能够提高消费者的满意程度。
根据本发明的一个方面，上述和其它目的可以通过提供用于软骨再生的无菌的/已消毒的医疗试剂盒实现，该医疗试剂盒包括按以下方式配置的软骨再生试剂盒，所述配置通过将所有的过程分成以下相应步骤而使每一个过程都能按照用于每一步骤的功能专一性的试剂盒组进行：分离细胞的步骤、培养细胞的步骤、收集细胞和储存细胞的步骤，以及将所需要的细胞植入到机体的靶位点的步骤。所述软骨再生试剂盒包括：软骨组织收集试剂盒、软骨细胞分离试剂盒、软骨细胞培养基改变和传代培养试剂盒、以及软骨细胞治疗产品的制备试剂盒。因此，使用所述的软骨再生试剂盒通过以下方式以使软骨再生：收集软骨组织，分离软骨细胞，改变软骨细胞培养基和对软骨细胞进行传代培养，制备软骨细胞治疗产品，用于分离/培养/制备/冷冻保存细胞的培养基，以及，用于分离/培养/冷冻保存细胞的培养基。
根据本发明的另一个方面，提供了用于骨再生的无菌的/已消毒的医疗试剂盒，该医疗试剂盒包括按以下方式配置的骨再生试剂盒，所述配置通过将所有的过程分成以下相应的步骤而使每一个过程都能按照用于每一步骤的功能专一性的试剂盒组进行：分离细胞的步骤、培养细胞的步骤、收集细胞和储存细胞的步骤，以及将所需要的细胞植入到机体的靶位点的步骤。所述骨再生试剂盒包括：骨髓收集试剂盒、成骨细胞分离试剂盒、成骨细胞培养基改变和传代培养试剂盒、以及成骨细胞治疗产品的制备试剂盒。因此，使用所述的骨再生试剂盒通过以下方式以使骨再生：收集骨髓，分离成骨细胞，改变成骨细胞培养基和对成骨细胞进行传代培养，制备成骨细胞治疗产品。
根据本发明的另一个方面，提供了用于储存造血干细胞的无菌的/已消毒的试剂盒，该试剂盒包括按以下方式配置的脐带血储存试剂盒，所述配置通过将所有的过程分成以下相应步骤使每一个过程都能按照用于每一步骤的功能专一性的试剂盒组进行：分离细胞的步骤、培养细胞的步骤、收集细胞和储存细胞的步骤，以及将所需要的细胞植入到机体的靶位点的步骤。所述脐带血储存试剂盒包括：脐带血收集试剂盒、造血干细胞分离试剂盒、和造血干细胞冷冻保存试剂盒。因此，使用所述的脐带血储存试剂盒通过以下方式储存脐带血：收集脐带血，分离造血干细胞和对造血干细胞进行冷冻保存。
附图说明
通过以下描述并结合附图对本发明进行的详细说明，本发明上述的和其它目的、特点和其它优点将能够被更清楚地理解，其中：
图1为适用于本发明的软骨再生试剂盒的配置示意图；
图2为适用于本发明的骨再生试剂盒的配置示意图；
图3为适用于本发明的脐带血储存试剂盒的配置示意图；
图4为适用于本发明的软骨组织收集试剂盒的照片；
图5为适用于本发明的软骨细胞分离试剂盒的照片；
图6为适用于本发明的软骨细胞培养基改变试剂盒的CRM-P1培养基改变试剂盒的照片；
图7为适用于本发明的软骨细胞培养基改变试剂盒的CRM-P2培养基改变试剂盒的照片；
图8为适用于本发明的软骨细胞培养基改变试剂盒的CRM-P3培养基改变试剂盒的照片；
图9为适用于本发明的软骨细胞传代培养试剂盒的CRM-P1传递培养试剂盒的照片；
图10为适用于本发明的软骨细胞传代培养试剂盒的CRM-P2传递培养试剂盒的照片；
图11为适用于本发明的软骨细胞治疗产品的制备试剂盒中的细胞收集试剂盒的CRM-收集试剂盒的照片；
图12为适用于本发明的软骨细胞治疗产品的制备试剂盒中的递送试剂盒的CRM-递送试剂盒的照片；
图13为适用于本发明的软骨细胞治疗产品的制备试剂盒中的植入试剂盒的CRM-植入试剂盒的照片；
图14为适用于本发明的用于分离/培养/制备/冷冻保存细胞的培养基试剂盒的照片；
图15为适用于本发明的用于分离/培养/冷冻保存细胞的培养基试剂盒的照片；
图16为适用于本发明的脐带血收集试剂盒的照片；
图17为适用于本发明的造血干细胞分离试剂盒的照片；
图18为适用于本发明的用于分离/冷冻保存造血干细胞的培养基试剂盒的照片。
具体实施方式
在下文中，将参照附图更详细地描述实现上述目的的本发明的优选实施方式。
适用于本发明的一种医疗试剂盒以及使用该试剂盒的方法的构成如图1-18所示。
关于下文中对本发明的描述，如果涉及本发明的已知功能或者结构的描述可能使本发明的主体不清楚，则在详细描述时将被省去。
下文中将描述的术语是考虑到其在本发明中的功能而确定的，可以根据厂商的目的或者相关领域的通常实践而发生变化。因此，本文中使用的术语应当根据本发明的说明书的内容定义。
首先，本发明的技术构成一般由用于软骨再生的试剂盒、用于骨再生的试剂盒、和用于储存脐带血的试剂盒组成。
更确切地说，用于软骨再生的试剂盒10为塑料器皿试剂盒，该试剂盒包括：
1.软骨组织收集试剂盒(CRM-输送试剂盒)(CRM-Transport Kit)；
2.软骨细胞分离试剂盒(CRM-起始试剂盒[CRM-分离试剂盒、CRM-初级试剂盒])(CRM-Initiation Kit[CRM-Isolation Kit，CRM-Primary Kit])；
3.软骨细胞培养基改变和传代培养分离试剂盒(CRM-加工试剂盒[CRM-P1传代试剂盒、CRM-P2传代试剂盒、CRM-P1培养基改变试剂盒、CRM-P2培养基改变试剂盒、CRM-P3培养基改变试剂盒])(CRM-ProcessingKit[CRM-P1 Subculture Kit，CRM-P2 Subculture Kit，CRM-P1 Medium ChangeKit，CRM-P2 Medium Change Kit，CRM-P3 Medium Change Kit])；和
4.软骨细胞治疗产品的制备试剂盒(CRM-产品试剂盒[CRM-收集试剂盒、CRM-递送试剂盒、CRM-培养基包装试剂盒、CRM-植入试剂盒])(CRM-Product Kit[CRM-Collection Kit，CRM-Delivery Kit，CRM-MediumPackaging Kit，CRM-Implantation Kit])，它们分别由各种亚-试剂盒组成。所述软骨再生试剂盒还包括：用于分离/培养/制备/冷冻保存细胞的培养基试剂盒(CRM-RF试剂盒[CSB-I、CSB-II、CSM、CPM、CCM、CCB])和用于分离/培养/冷冻保存细胞的培养基试剂盒(CRM-FZ试剂盒[Cartisepor、STA、PCF、Pass溶液、细胞储液、CSM AD溶液、CPM AD溶液、Neutro溶液])，它们有助于细胞的分离、培养、收集和植入。
此外，用于骨再生的试剂盒20为塑料器皿试剂盒，该试剂盒包括：
1.骨髓收集试剂盒(BRM-输送试剂盒)(BRM-Transport Kit)；
2.成骨细胞分离试剂盒(BRM-开始试剂盒[BRM-分离试剂盒、BRM-初级试剂盒])(BRM-Initiation Kit[BRM-Isolation Kit，BRM-Primary Kit])；
3.成骨细胞培养基改变和传代培养试剂盒(BRM-加工试剂盒[BRM-P1传代试剂盒、BRM-P2传代试剂盒、BRM-P14培养基改变试剂盒、BRM-P2培养基改变试剂盒、BRM-P3培养基改变试剂盒])(BRM-Processing Kit[BRM-P1 Subculture Kit，BRM-P2 Subculture Kit，BRM-P1 4.Medium ChangeKit，BRM-P2 Medium Change Kit，BRM-P3 Medium Change Kit])；
4.成骨细胞治疗产品的制备试剂盒(BRM-产品试剂盒[BRM-收集试剂盒、BRM-递送试剂盒、BRM-培养基包装试剂盒、BRM-植入试剂盒])(BRM-Product Kit[BRM-Collection Kit，BRM-Delivery Kit，BRM-MediumPackaging Kit，BRM-Implantation Kit])；
5.用于分离/培养/制备/冷冻保存成骨细胞的培养基试剂盒(BRM-RF试剂盒[OSB、BSB、BSM、BPM、BCM、BCB、BDB、BNB])；和
6.用于分离/培养/冷冻保存成骨细胞的培养基试剂盒(BRM-FZ试剂盒[STA、PCF、Pass溶液、细胞储液、OSM AD溶液、OPM AD溶液、Neutro溶液])，为单独成套的形式。最后，用于储存脐带血的试剂盒30由三个试剂盒组成：
1.脐带血收集试剂盒(USC RM-输送试剂盒)(USC RM-Transport Kit)；
2.造血干细胞分离试剂盒(USC RM-加工试剂盒)(USC RM-ProcessingKit)；和
3.造血干细胞冷冻保存试剂盒(USC RM-储存试剂盒)(USCRM-Storage Kit)，还包括：用于分离和冷冻保存造血干细胞的培养基(USCRM-RF试剂盒)和用于分离和冷冻保存造血干细胞的培养基(USC RM-FZ试剂盒)。
在下文中将更详细描述本发明。
如图1所示，根据本发明，提供了一种用于软骨再生的无菌的/消毒的试剂盒。该试剂盒包括按以下方式配置的软骨再生试剂盒10，所述配置通过将所有的过程分成以下相应步骤而使每一个过程都能按照用于每一步骤的功能专一性的试剂盒组进行：分离细胞的步骤、培养细胞的步骤、收集细胞和储存细胞的步骤，以及将所需要的细胞植入到机体的靶位点的步骤。所述软骨再生试剂盒10包括：软骨组织收集试剂盒11、软骨细胞分离试剂盒12、软骨细胞培养基改变和传代培养试剂盒13、以及软骨细胞治疗产品的制备试剂盒14。
在本文中，所述软骨组织收集试剂盒11包括：用于收集软骨组织的硬组织收集试剂盒；通用容器，该通用容器为用于组织递送的内部容器；输送瓶，该输送瓶为用于组织递送的外部容器；用于移取1ml溶液的蓝色的枪头(1ml)；聚苯乙烯泡沫塑料盒，该聚苯乙烯泡沫塑料盒为用于在冷却条件下递送组织的内部盒；用于将所述输送瓶引入到所述聚苯乙烯泡沫塑料盒中的海绵；以及，用于保持冷却状态的Koolit冷却剂。
此外，所述软骨细胞分离试剂盒12包括：移液用的巴斯德吸液管；作为具有密封盖的细胞培养容器(25cm2培养瓶)的T25(密封)；置于50ml离心管上的细胞过滤器，用于将得到的细胞和培养基的悬浮液通过该过滤器以分离细胞；用于离心以洗涤细胞的管；在混合锥虫蓝和含有细胞的培养基时用的E-管；用于移取1ml溶液的蓝色的枪头；用于转移溶液的吸液管；用于溶液过滤的注射器过滤器；T25细胞培养瓶；以及，用于细胞冷冻保存的冻存管。
此外，适用于本发明的软骨细胞培养基改变和传代培养试剂盒13包括：用于移液的巴斯德吸液管；用于离心以洗涤细胞的管；用于转移溶液的吸液管；用于转移大量溶液的吸液管；用于移取少量溶液的黄色的枪头；在混合锥虫蓝和含有细胞的培养基时使用的E-管；T75细胞培养瓶；以及，用于细胞冷冻保存的冻存管。
本发明的软骨细胞治疗产品的制备试剂盒14包括：用于移液的巴斯德吸液管；用于细胞冷冻保存的冻存管；在混合锥虫蓝和含有细胞的培养基时使用的E-管；用于离心以洗涤细胞的管；用于转移溶液的吸液管；用于转移大量溶液的吸液管；置于50ml离心管上的细胞过滤器，用于将得到的细胞和培养基的悬浮液通过该过滤器以分离细胞；用于移取溶液的含有过滤器的蓝色枪头；用于塞瓶的橡皮盖和铝盖；用于容纳用于制备软骨细胞治疗产品的细胞的1ml的V-形瓶；聚苯乙烯泡沫塑料盒，该聚苯乙烯泡沫塑料盒为用于在冷却条件下递送组织的内部盒；用于将所述含有软骨细胞治疗产品的所述V形瓶引入到所述聚苯乙烯泡沫塑料盒中的海绵；用于保持冷却状态的Koolit冷却剂；以及，用于将细胞植入到缺陷区域的装置2组。
此外，所述软骨再生试剂盒10还包括：用于分离/培养/制备/冷冻保存细胞的培养基试剂盒15和用于分离/培养/冷冻保存细胞的培养基试剂盒16。
实施例
将参照以下实施例更详细地描述本发明。提供的这些实施例仅用于说明本发明的目的，而不应解释为是对本发明的范围和精神实质的限制。
如上构成的本发明使用所述软骨再生试剂盒10通过以下方式实现软骨的再生：收集软骨组织，分离软骨细胞，改变软骨细胞培养基和对软骨细胞进行传代培养，制备软骨细胞治疗产品，用于分离/培养/制备/冷冻保存细胞的培养基，以及用于分离/培养/冷冻保存细胞的培养基。本发明的实施例将在下面描述。
实施例1
软骨组织收集过程包括：
1.打开容纳在软骨RM试剂盒中的CRM-输送试剂盒的外包装纸；
2.只把具有内包装的聚苯乙烯泡沫塑料盒转移到外科疗室而留下已去掉的外包装；和
3.使用聚苯乙烯泡沫塑料盒中的无菌的硬质组织收集器收集软骨组织，将收集的软骨组织置于含有红色培养基的软骨组织输送容器中，用聚苯乙烯泡沫塑料盒和外包装纸盒对所述软骨组织的输送容器进行双重包装，并然后将该包装物转移到细胞培养室中。
此外，CRM-起始试剂盒的所述分离软骨细胞的过程包括：
1.从CRM-起始试剂盒中取出CRM-分离试剂盒，用足量的70％的乙醇对该CRM-分离试剂盒进行喷雾，然后将CRM-分离试剂盒转移到净化台中；
2.使用50ml的管在净化台中称量由CRM-输送试剂盒输送的软骨组织；
3.将所述软骨组织转移到50ml的管中，使用25ml吸液管将CSB-I等分地引入到管中，并洗涤所述软骨组织；
4.通过巴斯德吸液管除去洗涤软骨组织的溶液，并重复步骤3；
5.将洗涤的软骨组织转移到皿中，并使用10号和11号刀片将所述组织剪切成块；
6.将剪切的软骨组织转移到15ml的管中；
7.使用10ml吸液管将CSB-I等分地引入到管中；
8.在1200rpm下将含有所述软骨组织的管离心1分钟；
9.洗涤所述组织，并使用巴斯德吸液管除去上清；
10.重复步骤8和9三次；
11.提供两个T25培养瓶(密封)，并使用10ml吸液管将Cartisepor等分地引入到一个T25培养瓶中，并将Cartisepor和抗生素的混合物等分地引入到另一个培养瓶中；
12.将1/3的洗涤过的软骨组织转移到含有CSB-I的培养瓶中，并将剩余2/3的洗涤过的软骨组织转移到含有CSB-II的培养瓶中；
13.将所述组织转移到所述培养瓶中后，将它们在37℃下于CO2培养箱中孵育12-16小时，然后在37℃下，以100rpm搅拌30分钟；和
14.将细胞过滤器置于50ml的管上，过滤培养瓶中的悬浮液，和
CRM-初级试剂盒的所述分离软骨细胞的过程包括：
1.从软骨RM试剂盒中取出乙烯树脂包装的CRM-初级试剂盒，用足量的70％的乙醇对CRM-初级试剂盒进行喷雾，然后将它转移到净化台中；
2.使用10ml的吸液管将CRM等分地引入到50ml的管中；
3.离心并洗涤所述管中的物质，通过巴斯德吸液管移去上清，将CSM再次等分地引入到所述管中，随后洗涤；
4.将1/20的细胞和PCF在冻存管中混合，并冷冻保存所述混合物；以及
5.第二天将未附着在T25培养瓶上的悬浮细胞回收到15ml的管中，并将回收的细胞接种到T25培养瓶中。
此外，本发明的CRM-P1培养基改变试剂盒的改变软骨细胞培养基和传代培养的过程包括：
1.从软骨RM试剂盒中取出乙烯树脂包装的CRM-P1培养基改变试剂盒，用足量的70％的乙醇对CRM-P1培养基改变试剂盒进行喷雾，然后将CRM-P1培养基转移到净化台中；
2.使用巴斯德吸液管移去培养瓶中的培养基；
3.通过25ml的吸液管将CSM等分地引入到50ml的管中；和
4.将管中的等分的规定量的CSM再次等分地引入到培养瓶中；和
CRM-P1传代培养试剂盒的所述改变软骨细胞培养基和传代培养的过程包括：
1.从软骨RM试剂盒中取出乙烯树脂包装的CRM-P1传代培养试剂盒，用足量的70％的乙醇对CRM-P1传代培养试剂盒进行喷雾，然后将CRM-P1传代培养试剂盒转移到净化台中；
2.在50ml的管中将T25培养瓶中的培养基集中并混合；
3.取出一部分培养基加到50ml的管和E-管中作为样品；
4.用巴斯德吸液管移去剩余的培养基；
5.将CSB-II等分地引入到培养瓶中，摇晃以洗涤所述培养瓶，然后用巴斯德吸液管移去上清；
6.重复步骤5三次；
7.用10ml的吸液管将Pass溶液等分地引入到培养瓶中，并将该培养瓶在培养箱中保持约3分钟；
8.用10ml的吸液管将Neutro溶液等分地引入到培养瓶中；
9.将细胞收集到15ml的管中；
10.用CSM洗涤所述培养瓶；
11.使用黄色的枪头将规定量的细胞等分地引入到CCB中，随后进行细胞计数；
12.在细胞计数后，将所述细胞接种到T75培养瓶中；和
13.在冻存管中将剩余的细胞和细胞储液混合，冷冻保存混合物；和
CRM-P2培养基改变试剂盒的软骨细胞培养基的改变和传代培养的过程包括：
1.从软骨RM试剂盒中取出乙烯树脂-包装的CRM-P2培养基改变试剂盒，用足量的70％的乙醇对CRM-P2培养基改变试剂盒进行喷雾，然后将CRM-P2培养基改变试剂盒转移到净化台中；
2.使用巴斯德吸液管移去培养瓶中培养基；
3.通过25ml吸液管将CPM等分地引入到50ml的管中；和
4.将管中的等分的规定量的CPM再次等分地引入到培养瓶中；和
CRM-P2传代培养试剂盒的软骨细胞培养基的改变和传代培养的过程包括：
1.从软骨RM试剂盒中取出乙烯树脂包装的CRM-P2传代培养试剂盒，用足量的70％的乙醇对CRM-P2传代培养试剂盒进行喷雾，然后将CRM-P2传代培养试剂盒转移到净化台中；
2.在50ml的管中将T75培养瓶中的培养基集中并混合；
3.取出一部分培养基加到50ml的管和E-管中作为样品；
4.用巴斯德吸液管移去剩余的培养基；
5.将CSB-II等分地引入到培养瓶中，摇晃以洗涤所述培养瓶，然后用巴斯德吸液管移去上清；
6.重复步骤5三次；
7.用10ml的吸液管将Pass溶液等分地引入到培养瓶中，并将该培养瓶在培养箱中保持约3-5分钟；
8.用10ml的吸液管将Neutro溶液等分地引入到培养瓶中；
9.在15ml的管中收集细胞；
10.用CSM在轻轻摇晃下洗涤所述培养瓶；
11.使用黄色的枪头将规定量的细胞等分地引入到CCB中，随后进行细胞计数；
12.在细胞计数后，将所述细胞接种到T150培养瓶中；和
13.在冻存管中将剩余的细胞和细胞储液混合，冷冻保存混合物；和
CRM-P2培养基改变试剂盒的所述软骨细胞培养基的改变和传代培养的过程包括：
1.从软骨RM试剂盒中取出乙烯树脂包装的CRM-P2培养基改变试剂盒，用足量的70％的乙醇对CRM-P2培养基改变试剂盒进行喷雾，然后将CRM-P2培养基改变试剂盒转移到净化台中；
2.使用巴斯德吸液管移去培养瓶中培养基；
3.通过25ml吸液管将CPM等分地引入到50ml的管中；和
4.将管中的等分的规定量的CPM再次等分地引入到培养瓶中；和
CRM-P2传代培养试剂盒的软骨细胞培养基的改变和传代培养的过程包括：
1.从软骨RM试剂盒中取出乙烯树脂包装的CRM-P2传代培养试剂盒，用足量的70％的乙醇对CRM-P2传代培养试剂盒进行喷雾，然后将CRM-P2传代培养试剂盒转移到净化台中；
2.用50ml的管将T75培养瓶中的培养基集中并混合；
3.取出一部分培养基加到50ml的管和E-管中作为样品；
4.用巴斯德吸液管移去剩余的培养基；
5.将CSB-II等分地引入到培养瓶中，摇晃以洗涤所述培养瓶，然后用巴斯德吸液管移去上清；
6.重复步骤5三次；
7.用10ml的吸液管将Pass溶液等分地引入到培养瓶中，并将该培养瓶在培养箱中保持约3-5分钟；
8.用10ml的吸液管将Neutro溶液等分地引入到培养瓶中；
9.在15ml的管中收集细胞；
10.用CSM在轻轻摇晃下洗涤所述培养瓶；
11.使用黄色的枪头将规定量的细胞等分地引入到CCB中，随后进行细胞计数；
12.在细胞计数后，将所述细胞接种到T150培养瓶中；和
13.在冻存管中将剩余的细胞和细胞储液混合，冷冻保存混合物；和
CRM-P3培养基改变试剂盒的所述软骨细胞培养基的改变和传代培养的过程包括：
1.从软骨RM试剂盒中取出乙烯树脂包装的CRM-P3培养基改变试剂盒，用足量的70％的乙醇对CRM-P3培养基改变试剂盒进行喷雾，然后将CRM-P3培养基改变试剂盒转移到净化台中；
2.使用巴斯德吸液管移去培养瓶中培养基；
3.通过25ml的吸液管将CPM等分地引入到50ml的管中；和
4.将管中等分的规定量的CPM再次等分地引入到培养瓶中。
此外，适用于本发明的CRM-收集试剂盒的所述制备软骨细胞治疗产品的过程包括：
1.从软骨RM试剂盒中取出乙烯树脂包装的CRM-收集试剂盒，用足量的70％的乙醇对CRM-收集试剂盒进行喷雾，然后将CRM-收集试剂盒转移到净化台中；
2.在递送成品之前3天，用25ml的吸液管取出一部分培养基置于50ml的管中作为样品；
3.在递送产品当天，用50ml的管将T150培养瓶中的培养基集中并混合；
4.取出一部分培养基加到50ml的管和E-管中作为样品；
5.用巴斯德吸液管移去所述培养瓶中的剩余的培养基；
6.用25ml的吸液管将CSB-II等分地引入到培养瓶中，随后进行洗涤；
7.重复步骤6三次；
8.用10ml的吸液管将Pass溶液等分地引入到培养瓶中，并将该培养瓶在培养箱中保持约4-5分钟；
9.用10ml的吸液管将Neutro溶液等分地引入到培养瓶中；
10.将细胞过滤器分别置于50ml的管上；
11.用25ml的吸液管将所述培养瓶中的经Pass溶液处理后的悬浮液等分地引入到其上放置有细胞过滤器的管中；
12.使用黄色的枪头将细胞等分地引入到CCB中，随后进行细胞计数，共计数三次；
13.使用过滤器的蓝色枪头将CCM等分地引入到1ml的瓶中，将细胞和CCM进行混合；和
14.将橡皮盖和铝盖装到1ml的瓶上；和
CRM-递送试剂盒和CRM-培养基包装试剂盒的所述制备软骨细胞治疗产品的过程包括：
1.打开容纳在软骨RM试剂盒中的CRM-递送试剂盒和CRM-培养基包装试剂盒的外包装纸；
2.只把具有内包装的聚苯乙烯泡沫塑料盒转移到外科疗室而留下已去掉的外包装；和
3.从转移到外科疗室中的盒中取出1号和4号小瓶，将所述小瓶和CRM-植入试剂盒混合以备使用；和
CRM-植入试剂盒的软骨细胞治疗产品的制备过程包括：
1.使用CRM-植入试剂盒中的混合枪头，将用于混合物中的培养基和底物与装置2组中的软骨细胞治疗产品进行混合；和
2.使混合的底物和培养基组合物完全溶解，将18号针装到注射器上，将所述组合物注射到患者的软骨缺陷部位。
另一方面，本发明的构成还可以如图2所示。
更确切地说，所图2所示，根据本发明提供了一种无菌的/已消毒的用于骨再生的试剂盒。该用于骨再生的试剂盒包括按以下方式配置的骨再生试剂盒20，所述配置通过将所有的过程分成以下相应的步骤而使每一个过程都能按照用于每一步骤的功能专一性的试剂盒组进行：分离细胞的步骤、培养细胞的步骤、收集细胞和储存细胞的步骤，以及将所需要的细胞植入到机体的靶位点的步骤。所述骨再生试剂盒20包括：骨髓收集试剂盒21、成骨细胞分离试剂盒22、成骨细胞培养基改变和传代培养试剂盒23、以及成骨细胞治疗产品的制备试剂盒24。
在本文中，所述骨髓收集试剂盒21包括：通用容器，该通用容器为用于组织递送的内部容器；用于移取1ml溶液的蓝色的枪头；聚苯乙烯泡沫塑料盒，该聚苯乙烯泡沫塑料盒为用于在冷却条件下递送组织的内部盒；用于将所述输送瓶引入到所述聚苯乙烯泡沫塑料盒中的海绵；以及，用于保持冷却状态的Koolit冷却剂。
此外，所述成骨细胞分离试剂盒22包括：用于移液的巴斯德吸液管；置于离心管上的细胞过滤器，将得到的细胞和培养基的悬浮液通过该过滤器以分离细胞；用于离心以洗涤细胞的管；为了细胞计数将锥虫蓝和含有细胞的培养基混合时使用的E-管；用于移取1ml溶液的蓝色的枪头；用于转移溶液的吸液管；T75细胞培养瓶；以及，用于细胞冷冻保存的冻存管。
此外，所述成骨细胞培养基改变和传代培养试剂盒23包括：用于移液的巴斯德吸液管；用于离心以洗涤细胞的管；用于转移溶液的吸液管；用于转移大量溶液的吸液管；用于移取少量溶液的黄色的枪头；在混合锥虫蓝和含有细胞的培养基时使用的E-管；T75细胞培养瓶；以及，用于细胞冷冻保存的冻存管。
本发明的成骨细胞治疗产品的制备试剂盒24包括：用于移液的巴斯德吸液管；用于细胞冷冻保存的冻存管；为了细胞计数将锥虫蓝和含有细胞的培养基混合时使用的E-管；用于离心以洗涤细胞的管；用于转移液的吸液管；置于离心管上的细胞过滤器，将得到的细胞和培养基悬的浮液通过该过滤器以分离细胞；用于移取溶液的含有过滤器的蓝色枪头；用于塞瓶的橡皮盖和铝盖；用于容纳用于制备成骨细胞治疗产品的细胞的1ml的V形瓶；聚苯乙烯泡沫塑料盒，该聚苯乙烯泡沫塑料盒为用于在冷却条件下递送成骨治疗产品的内部盒；用于将所述含有成骨细胞治疗产品的所述V形瓶引入到所述聚苯乙烯泡沫塑料盒中的海绵；以及，用于保持冷却状态的Koolit冷却剂。
此外，所述骨再生试剂盒20还包括：用于分离/培养/制备/冷冻保存细胞的培养基试剂盒25和用于分离/培养/冷冻保存细胞的培养基试剂盒26。
如上构成的本发明使用所述骨再生试剂盒20通过以下方式实现骨的再生：收集骨髓，分离成骨细胞，成骨细胞培养基的改变和传代培养，制备成骨细胞治疗产品。本发明的实施例将在下面描述。
实施例2
骨髓收集过程包括：
1.打开容纳在骨RM试剂盒中含有的BRM-输送试剂盒的外包装纸；
2.只把具有内包装的聚苯乙烯泡沫塑料盒转移到外科疗室而留下已去掉的外包装；和
3.将骨髓置于聚苯乙烯泡沫塑料盒中的含有红色培养基的骨髓组织输送容器中，用聚苯乙烯泡沫塑料盒和外包装纸盒对骨髓组织输送容器进行双重包装，并然后将该包装物转移到细胞培养室中。
此外，BRM-起始试剂盒的所述分离成骨细胞的过程包括：
1.从BRM-起始试剂盒中取出BRM-分离试剂盒，用足量的70％的乙醇对BRM-分离试剂盒进行喷雾，然后将BRM-分离试剂盒转移到净化台中；
2.使用50ml的管在净化台中称量由BRM-输送试剂盒输送的骨髓组织；
3.将所述骨髓组织转移到50ml的管中，使用25ml的吸液管将BSB-I等分地引入到管中，并洗涤所述骨髓；
4.通过巴斯德吸液管除去洗涤的骨髓组织的溶液，并重复步骤3；
5.使用25ml的吸液管将BDB溶液加入到洗涤过的骨髓组织中；
6.在经过预定的时间后，使用10ml的吸液管吸出规定量的BDB溶液，并用BDB溶液中和所述骨髓组织；
7.在中和后，用BSM溶液再次洗涤中和过的骨髓组织；和
8.将经洗涤的有核细胞转移到T75培养瓶中，并将细胞保持在37℃的CO2培养箱中；和
BRM-初级试剂盒的所述分离成骨细胞的过程包括：
1.从骨RM试剂盒中取出乙烯树脂-包装的BRM-初级试剂盒，用足量的70％的乙醇对BRM-初级试剂盒进行喷雾，然后将BRM-初级试剂盒转移到净化台中；
2.使用10ml的吸液管将置于37℃的CO2培养箱中T75培养瓶中的悬浮细胞层转移到50ml的管中；和
3.对所述50ml的管进行离心，使用25ml的吸液管将细胞和BSM溶液混合，并将混合物接种到T75培养瓶中。
此外，本发明的BRM-P1培养基改变试剂盒的所述成骨细胞培养基的改变和传代培养的过程包括：
1.从骨RM试剂盒中取出乙烯树脂包装的BRM-P1培养基改变试剂盒，用足量的70％的乙醇对BRM-P1培养基改变试剂盒进行喷雾，然后将BRM-P1培养基改变试剂盒转移到净化台中；
2.使用巴斯德吸液管移去培养瓶中培养基；
3.通过25ml的吸液管将BSM等分地引入到50ml的管中；和
4.将管中的等分的规定量的BSM再次等分地引入到培养瓶中；和
BRM-P1传代培养试剂盒的所述成骨细胞培养基的改变和传代培养的过程包括：
1.从骨RM试剂盒中取出乙烯树脂包装的BRM-P1传代培养试剂盒，用足量的70％的乙醇对BRM-P1传代培养试剂盒进行喷雾，然后将BRM-P1传代培养试剂盒转移到净化台中；
2.在50ml的管中将T25培养瓶中的培养基集中并混合；
3.取出一部分培养基加到50ml的管和E-管中作为样品；
4.用巴斯德吸液管移去剩余的培养基；
5.将BSB-II等分地引入到培养瓶中，摇晃以洗涤所述培养瓶，然后用巴斯德吸液管移去上清；
6.重复步骤5三次；
7.用10ml吸液管将Pass溶液等分地引入到培养瓶中，并将该培养瓶在培养箱中保持约3分钟；
8.用10ml的吸液管将Neutro溶液等分地引入到培养瓶中；
9.在15ml的管中收集细胞；
10.用BSM洗涤所述培养瓶；
11.使用黄色的枪头将规定量的细胞等分地引入到BCB中，随后进行活细胞计数；
12.在活细胞计数后，将所述细胞接种到T75培养瓶中；和
13.在冻存管中将剩余的细胞和细胞储液混合，冷冻保存混合物；和
BRM-P2培养基改变试剂盒的所述成骨细胞培养基的改变和传代培养的过程包括：
1.从骨RM试剂盒中取出乙烯树脂包装的BRM-P2培养基改变试剂盒，用足量的70％的乙醇对BRM-P2培养基改变试剂盒进行喷雾，然后将BRM-P2培养基改变试剂盒转移到净化台中；
2.使用巴斯德吸液管移去培养瓶中培养基；
3.通过25ml吸液管将BPM等分地引入到50ml的管中；和
4.将管中的等分的规定量的BPM再次等分地引入到培养瓶中；和
BRM-P2传代培养试剂盒的所述成骨细胞培养基的改变和传代培养的过程包括：
1.从骨RM试剂盒中取出乙烯树脂包装的BRM-P2传代培养试剂盒，用足量的70％的乙醇对CRM-P2传代培养试剂盒进行喷雾，然后将BRM-P2传代培养试剂盒转移到净化台中；
2.在50ml的管中将T75培养瓶中的培养基集中并混合；
3.取出一部分培养基加到50ml的管和E-管中作为样品；
4.用巴斯德吸液管移去剩余的培养基；
5.将BSB-II等分地引入到培养瓶中，摇晃以洗涤所述培养瓶，然后用巴斯德吸液管移去上清；
6.重复步骤5三次；
7.用10ml的吸液管将Pass溶液等分地引入到培养瓶中，并将该培养瓶在培养箱中保持约3-5分钟；
8.用10ml的吸液管将Neutro溶液等分地引入到培养瓶中；
9.在15ml的管中收集细胞；
10.用BSM在轻轻摇晃下洗涤所述培养瓶；
11.使用黄色的枪头将规定量的细胞等分地引入到BCB中，随后进行细胞计数；
12.在细胞计数后，将所述细胞接种到T150培养瓶中；和
13.在冻存管中将剩余的细胞和细胞储液混合，冷冻保存混合物；和
BRM-P3培养基改变试剂盒的所述成骨细胞培养基的改变和传代培养的过程包括：
1.从骨RM试剂盒中取出乙烯树脂-包装的BRM-P3培养基改变试剂盒，用足量的70％的乙醇对BRM-P3培养基改变试剂盒进行喷雾，然后将BRM-P3培养基改变试剂盒转移到净化台中；
2.使用巴斯德吸液管移去培养瓶中培养基；
3.通过25ml的吸液管将BPM等分地引入到50ml的管中；和
4.将管中的等分的规定量的BPM再次等分地引入到培养瓶中。
此外，本发明的BRM-收集试剂盒的所述制备成骨细胞治疗产品的过程包括：
1.从骨RM试剂盒中取出乙烯树脂包装的BRM-收集试剂盒，用足量的70％的乙醇对BRM-收集试剂盒进行喷雾，然后将BRM-收集试剂盒转移到净化台中；
2.在递送成品之前3天，用25ml的吸液管取出一部分培养基置于50ml的管中作为样品；
3.在递送产品当天，在50ml的管中将T150培养瓶中的培养基集中并混合；
4.取出一部分培养基加到50ml的管和E-管中作为样品；
5.用巴斯德吸液管移去所述培养瓶中的剩余的培养基；
6.用25ml的吸液管将CSB-II等分地引入到培养瓶中，随后进行洗涤；
7.重复步骤6三次；
8.用10ml的吸液管将Pass溶液等分地引入到培养瓶中，并将该培养瓶在培养箱中保持约4-5分钟；
9.用10ml的吸液管将Neutro溶液等分地引入到培养瓶中；
10.将细胞过滤器分别置于50ml的管上；
11.用25ml的吸液管将所述培养瓶中处理的Pass溶液悬浮液等分地引入到其上放置有细胞过滤器的管中；
12.使用黄色的枪头将细胞等分地引入到BCB中，随后进行细胞计数，共计数三次；
13.使用过滤器的蓝色枪头将BCM等分地引入到1ml的瓶中，将细胞和BCM混合；和
14.将橡皮盖和铝盖装到1ml的瓶上；和
BRM-递送试剂盒和BRM-培养基包装试剂盒的所述制备成骨细胞治疗产品的过程包括：
1.打开容纳在骨RM试剂盒中的BRM-递送试剂盒和BRM-培养基包装试剂盒的外包装纸；
2.只把具有内包装的聚苯乙烯泡沫塑料盒转移到外科疗室而留下已去掉的外包装；和
3.从转移到外科疗室中的盒中取出1号和4号小瓶，将所述小瓶和BRM-植入试剂盒进行混合以备使用；和
BRM-植入试剂盒的所述制备成骨细胞治疗产品的过程包括：
1.使用BRM-植入试剂盒中的混合枪头，将用于混合物中的培养基和底物与装置2组中的成骨细胞治疗产品混合；和
2.使混合的底物和培养基的组合物完全溶解，将针装到注射器上，将所述组合物注射到患者的骨缺陷部位。
或者，本发明的的构成还可以如图3所示。
确切地说，如图3所示，根据本发明提供了一种用于储存脐带血的无菌的/已消毒的试剂盒。该试剂盒包括按以下方式配置的脐带血储存试剂盒30，所述配置通过将所有的过程分成以下相应的步骤而使每一个过程都能按照用于每一步骤的功能专一性的试剂盒组进行：分离细胞的步骤、培养细胞的步骤、收集细胞和储存细胞的步骤，以及将所需要的细胞植入到机体的靶位点的步骤。所述脐带血储存试剂盒包括：脐带血收集试剂盒31、造血干细胞分离试剂盒32、以及造血干细胞冷冻保存试剂盒33。
在本文中，所述脐带血收集试剂盒31包括：用于收集大量血液的血液收集袋；用于递送血液收集袋的储存盒；用于在输送前对所述血液收集袋进行保存的拉链袋；以及，附着在所述储存盒的表面上的粘着剂。
此外，所述造血干细胞分离试剂盒32包括：用于对除去血红细胞的造血干细胞进行浓缩的加工袋；为了控制质量而在抽取样品时使用的注射器；置于离心管上的细胞过滤器，将得到的细胞和培养基的悬浮液通过该过滤器以分离细胞；用于离心以洗涤细胞的管；用于进行无菌操作的乳胶手套；用于容纳用于造血干细胞的储存的细胞的CCZ瓶；用于塞瓶的铝封；用于移取溶液的蓝色的枪头；以及，在混合锥虫蓝和含有细胞的培养基时使用的E-管。
此外，适用于本发明的造血干细胞冷冻保存试剂盒33包括：用于冷冻所述造血干细胞的冷冻袋；用于保护所述冷冻袋的低温冷阱(cryowrap)；以及，用于存放所述冷冻袋和所述低温冷阱的筒。
适用于本发明的脐带血储存试剂盒30包括：用于分离和冷冻保存造血干细胞的培养基试剂盒34和用于分离和冷冻保存造血干细胞的培养基试剂盒35。
如上构成的本发明使用所述脐带血储存试剂盒通过以下方式实现脐带血的储存：收集脐带血，分离造血干细胞和对造血干细胞进行冷冻保存。本发明的实施例将在下面描述。
实施例3
所述脐带血的收集过程包括：
1.将容纳在USC RM试剂盒中的USC RM-输送试剂盒的储存盒输送到外科疗室；
2.打开输送出的储存盒中的拉链袋，使用无菌血液收集袋来收集脐带血；和
3.将收集的血液置于所述USC RM-输送试剂盒的储存盒中，并将所述血液转移到加工房间。
此外，所述分离造血干细胞的过程包括：
1.使用10ml的注射器从所述血液收集袋中取出规定量的血液，将这些血液等分地引入到EPP管中；
2.使用30ml的注射器向所述管中加入规定量的UES溶液，随后进行搅拌，并在室温下静置；
3.在静置一定时间后，通过半自动血浆分离器将第一血浆层(primaryplasma layer)分离到所述加工袋中；
4.重复步骤2和3；
5.将所述加工袋置于斗中，随后进行称重和离心；
6.在离心后，将所述加工袋从所述斗上分离；
7.将所述加工袋放置到自动血浆分离器上；
8.使用自动血浆分离器将所述血浆等分地引入到15ml的管中；
9.使用自动血浆分离器将剩余的血浆置于50ml的管中；和
10.使用10ml的注射器从所述50ml的管中取出血浆，等分地引入到真空采血管中。
此外，所述造血干细胞冷冻保存的过程包括：
1.将加工袋悬浮，用10ml的注射器取出悬浮后的加工袋中的物质，并将这些物质等分地引入到EPP中；
2.用10ml的注射器取出细胞储液，并将该储液加入到悬浮在冰水总的所述加工袋中，随后均匀混合；
3.用70％的乙醇对所述加工袋的外表面进行消毒；
4.将经冷冻的袋连接到所述加工袋上，从而回收得到浓缩的有核细胞层，并除去气泡；
5.将所述经冷冻的袋置于经双重包装的袋中，随后进行压紧包装并进行灭菌；和
6.将经双重包装的袋中的所述冷冻袋插入到所述筒中。
工业实用性
从上述的描述可以清楚地看出，本发明提供了一种使用试剂盒的方法，所述试剂盒与用于软骨和骨的再生细胞治疗产品的制备和植入、以及脐带血的储存和脐带血的处理有关。尤其是，本发明能够制备和提供对于期望的细胞的分离、培养、收集、植入和储存过程必需的单一试剂盒形式的各种材料、培养基和溶液，以容易并方便地使用。因此，本发明能够解决制备细胞治疗产品和储存脐带血的常规技术中存在的一些问题，例如生产成本过高、生产周期过长和劳动成本高。
此外，本发的试剂盒是一种无菌的已消毒的医疗试剂盒，该试剂盒能够对从收集的软骨组织、骨髓组织和脐带血中得到的细胞进行可靠地分离、培养、收集和储存，并将期望的细胞植入到机体的靶位置。为了实现这个目的，所述医疗试剂盒配置以单独的试剂盒组的形式，通过将所有的过程分成相应的步骤而使每一个过程都能按照相应于每一步骤的功能专一性的试剂盒组进行。
此外，本发明使所有过程实现标准化，所述所有过程包括按照相应步骤制备用于软骨和骨再生的细胞治疗产品的过程，和制备适合标准化过程的试剂盒的过程。因此，本发明能够使所述试剂盒在每一次使用时都容易并且方便，这将激活并提升细胞治疗产品的生产，并且通过组织工程学使新的治疗产品商品化。
此外，本发明还使储存脐带血的方法标准化，这与上述用于软骨和骨再生的试剂盒的配置相同；还能够制备相应于每一个过程的功能专一化的试剂盒，和使每一次使用该试剂盒更方便。因此，与常规的储存/处理方法相比，本发明在储存脐带血时能够实现降低成本、缩短时间和减少人力的优势。
结果，本发明能够显著地改善产品的质量和可靠性，从而有益于提高消费者的满意程度。
尽管为了说明的目的公开了本发明的优选的实施方式，但是本领域的技术人员能够理解的是：在不背离所附权利要求中公开的本发明的范围和精神实质的情况下可以进行各种改变、添加和置换。

Claims (12)

1.一种用于软骨再生的无菌的/已消毒的医疗试剂盒，该医疗试剂盒包括按以下方式配置的软骨再生试剂盒（10），所述配置通过将所有的过程分成以下相应的步骤而使每一个过程都能按照用于每一步骤的功能专一性的试剂盒组进行：分离细胞的步骤、培养细胞的步骤、收集细胞的步骤和储存细胞的步骤，以及将所需要的细胞植入到机体的靶位点的步骤，其中，所述软骨再生试剂盒（10）包括：软骨组织收集试剂盒（11）、软骨细胞分离试剂盒（12）、软骨细胞培养基改变和传代培养试剂盒（13）、以及软骨细胞治疗产品的制备试剂盒（14），其中，所述软骨组织收集试剂盒（11）包括：用于收集软骨组织的硬质组织收集试剂盒；通用容器，该通用容器为用于组织递送的内部容器；输送瓶，该输送瓶为用于组织递送的外部容器；用于移取1ml溶液的蓝色的枪头；聚苯乙烯泡沫塑料盒，该聚苯乙烯泡沫塑料盒为用于在冷却条件下递送组织的内部盒；用于将所述输送瓶引入到所述聚苯乙烯泡沫塑料盒中的海绵；以及，用于保持冷却状态的Koolit冷却剂。
2.根据权利要求1所述的医疗试剂盒，其中，所述软骨细胞分离试剂盒（12）包括：移液用的巴斯德吸液管；作为具有密封盖的细胞培养容器的T25；置于50ml离心管上的细胞过滤器，用于使得到的细胞和培养基的悬浮液通过该过滤器以分离出细胞；用于离心以洗涤细胞的管；在混合锥虫蓝和含有细胞的培养基时用的E-管；用于移取1ml溶液的蓝色的枪头；用于转移溶液的吸液管；用于溶液过滤的注射器过滤器；T25细胞培养瓶；以及，用于细胞冷冻保存的冻存管。
3.根据权利要求1所述的医疗试剂盒，其中，所述软骨细胞培养基改变和传代培养试剂盒（13）包括：用于移液的巴斯德吸液管；用于离心以洗涤细胞的管；用于转移溶液的吸液管；用于移取少量溶液的黄色的枪头；在混合锥虫蓝和含有细胞的培养基时使用的E-管；T75细胞培养瓶；以及，用于细胞冷冻保存的冻存管。
4.根据权利要求1所述的医疗试剂盒，其中，所述软骨细胞治疗产品的制备试剂盒（14）包括：用于移液的巴斯德吸液管；用于细胞冷冻保存的冻存管；在混合锥虫蓝和含有细胞的培养基时使用的E-管；用于离心以洗涤细胞的管；用于转移溶液的吸液管；置于50ml离心管上的细胞过滤器，用于将得到的细胞和培养基的悬浮液通过该过滤器以分离细胞；用于移取溶液的过滤器的蓝色枪头；用于塞瓶的橡皮盖和铝盖；用于容纳用于制备软骨细胞治疗产品的细胞的1ml的V形瓶；聚苯乙烯泡沫塑料盒，该聚苯乙烯泡沫塑料盒为用于在冷却条件下递送组织的内部盒；用于将含有软骨细胞治疗产品的所述V形瓶引入到所述聚苯乙烯泡沫塑料盒中的海绵；用于保持冷却状态的Koolit冷却剂；以及，用于将细胞植入到缺陷区域的装置（2）组。
5.根据权利要求1所述的医疗试剂盒，其中，所述软骨再生试剂盒（10）还包括：用于分离/培养/制备/冷冻保存细胞的培养基试剂盒（15）和用于分离/培养/冷冻保存细胞的培养基试剂盒（16）。
6.一种医疗试剂盒的使用方法，该方法使用权利要求1中所述的软骨再生试剂盒（10）通过以下方式使软骨再生：收集软骨组织，分离软骨细胞，软骨细胞培养基的改变和传代培养，制备软骨细胞治疗产品，用于分离/培养/制备/冷冻保存细胞的培养基试剂盒（15），以及用于分离/培养/冷冻保存细胞的培养基试剂盒（16）。
7.一种无菌的/已消毒的用于骨再生的试剂盒，该用于骨再生的试剂盒包括按以下方式配置的骨再生试剂盒（20），所述配置通过将所有的过程分成以下相应的步骤而使每一个过程都能按照用于每一步骤的功能专一性的试剂盒组进行：分离细胞的步骤、培养细胞的步骤、收集细胞的步骤和储存细胞的步骤，以及将所需要的细胞植入到机体的靶位点的步骤，其中，所述骨再生试剂盒（20）包括：骨髓收集试剂盒（21）、成骨细胞分离试剂盒（22）、成骨细胞培养基改变和传代培养试剂盒（23）、以及成骨细胞治疗产品的制备试剂盒（24），其中，所述骨髓收集试剂盒（21）包括：通用容器，该通用容器为用于组织递送的内部容器；用于移取1ml溶液的蓝色的枪头；聚苯乙烯泡沫塑料盒，该聚苯乙烯泡沫塑料盒为用于在冷却条件下递送组织的内部盒；用于将输送瓶引入到所述聚苯乙烯泡沫塑料盒中的海绵；以及，用于保持冷却状态的Koolit冷却剂。
8.根据权利要求7所述的用于骨再生的试剂盒，其中，所述成骨细胞分离试剂盒（22）包括：移液用的巴斯德吸液管；置于离心管上的细胞过滤器，用于将得到的细胞和培养基的悬浮液通过该过滤器以分离细胞；用于离心以洗涤细胞的管；为了细胞计数而将锥虫蓝和含有细胞的培养基混合时使用的E-管；用于移取1ml溶液的蓝色的枪头；用于转移溶液的吸液管；T75细胞培养瓶；以及，用于细胞冷冻保存的冻存管。
9.根据权利要求7所述的用于骨再生的试剂盒，其中，所述成骨细胞培养基改变和传代培养试剂盒（23）包括：用于移液的巴斯德吸液管；用于离心以洗涤细胞的管；用于转移溶液的吸液管；用于移取少量溶液的黄色的枪头；在混合锥虫蓝和含有细胞的培养基时使用的E-管；T75细胞培养瓶；以及，用于细胞冷冻保存的冻存管。
10.根据权利要求7所述的用于骨再生的试剂盒，其中，所述成骨细胞治疗产品的制备试剂盒（24）包括：用于移液的巴斯德吸液管；用于细胞冷冻保存的冻存管；为了细胞计数而将锥虫蓝和含有细胞的培养基混合时使用的E-管；用于离心以洗涤细胞的管；用于转移溶液的吸液管；置于离心管上的细胞过滤器，用于将得到的细胞和培养基悬的浮液通过该过滤器以分离细胞；用于移取溶液的过滤器的蓝色枪头；用于塞瓶的橡皮盖和铝盖；用于容纳用于制备成骨细胞治疗产品的细胞的1ml的V形瓶；聚苯乙烯泡沫塑料盒，该聚苯乙烯泡沫塑料盒为用于在冷却条件下递送成骨治疗产品的内部盒；用于将含有成骨细胞治疗产品的所述V形瓶引入到所述聚苯乙烯泡沫塑料盒中的海绵；以及，用于保持冷却状态的Koolit冷却剂。
11.根据权利要求7所述的用于骨再生的试剂盒，其中，所述骨再生试剂盒（20）还包括：用于分离/培养/制备/冷冻保存细胞的培养基试剂盒（25）和用于分离/培养/冷冻保存细胞的培养基试剂盒（26）。
12.一种医疗试剂盒的使用方法，该方法使用权利要求7中所述的骨再生试剂盒（20）通过以下方式以使骨再生：收集骨髓，分离成骨细胞，成骨细胞培养基的改变和传代培养，制备成骨细胞治疗产品。
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