CN101502675A

CN101502675A - 一种注射用含大分子水凝胶的透明质酸或其盐的混悬液及其制备方法

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Publication number: CN101502675A
Application number: CNA2008100091908A
Authority: CN
Inventors: 凌沛学; 陈建英; 贺艳丽; 郭学平; 王勤; 赵成如; 刘杰; 汪敏; 荣晓花
Original assignee: Shandong Academy of Pharmaceutical Sciences
Current assignee: Shandong Academy of Pharmaceutical Sciences
Priority date: 2008-02-04
Filing date: 2008-02-04
Publication date: 2009-08-12
Anticipated expiration: 2028-02-04
Also published as: CN101502675B

Abstract

本发明涉及一种注射用含大分子水凝胶的透明质酸或其盐的混悬液及其制备方法。本发明混悬液的特征在于由透明质酸或其盐的等渗溶液作为载体，添加水不溶性的、在等渗溶液中充分溶胀的大分子化合物含水凝胶颗粒构成。本发明混悬液的制备步骤包括：制备交联高分子化合物或聚合物颗粒，使其在等渗溶液中充分溶胀形成凝胶颗粒，然后与溶解于等渗溶液的透明质酸或其盐溶液混合。本发明含大分子水凝胶的透明质酸或其盐的混悬液用于制备美容或医疗用途的注射剂，具有易于注射、局部作用时间长、可塑性强、生物相容性好等特点，在注射局部作为一种隔离、润滑垫，使周围组织获得充分的修复，这一特点在应用于骨关节腔注射治疗关节炎时表现尤其突出。

Description

一种注射用含大分子水凝胶的透明质酸或其盐的混悬液及其制备方法

技术领域

本发明属于医药领域，涉及一种注射用含大分子水凝胶的透明质酸或其盐的混悬液以及它的制备方法。更具体的说，本发明涉及一种可注射于皮肤软组织、以及关节腔的含大分子水凝胶的透明质酸或其盐混悬液，其产品，及其在美容和医疗领域的应用。

背景技术

透明质酸(hyalouronic acid，HA)是构成皮肤、玻璃体、关节滑液和软骨组织的重要成分，具有良好的润滑性、黏弹性和非免疫原性(Laurent TC等，Ann.Rheum.Dis.1995，54：429～432)。至今有大量的HA临床产品，包括眼科黏弹剂和骨科的黏弹性补充剂，治疗骨性关节炎(OA)、类风湿性关节炎(RA)的关节腔注射剂，以及术后粘连的防治剂等(凌沛学和贺艳丽等，中国生化药物杂志，1998，19：200～204)，高分子的HA溶液也被用于注入面部皮肤，减轻皱纹，改进皮肤外观和结构(RU2272634、RU2194512)或改进唇部形状，阻止皮肤衰老(RU2159111)。但是，天然的HA容易被肌体组织中的酶降解，良好的水溶性使其在组织中容易被扩散，因此它在动物组织局部存留的时间并不令人满意。

已有研究证明关节疾病与滑液黏弹性降低密切相关，外源性HA对骨关节炎的治疗作用主要基于对滑液黏弹性的提高，即所谓“黏弹性补充疗法”(Balazs等，J.Rheumatol，1993，20：3～9)。当外源性HA在关节腔中长时间存在，依靠软骨组织的自身修复作用，使骨关节炎得以痊愈，而以往的产品(日本生化学工业株式会社的Artz

、加拿大Bioniche公司的Suplazyn

和中国山东博士伦福瑞达的施沛

)由于代谢较快，需要多次注射，多次注射又增加了刺激反应和感染的机会。

为了得到效果持久的产品，多种材料如聚四氟乙烯、牛胶原蛋白、硅胶、羟基磷灰石和聚丙烯酰胺等曾作为组织填充剂，但由于较多的副作用或潜在的过敏反应使这些产品趋于淘汰。现在，已有技术得到交联的HA产物(US4713448、US4582865、WO9009401、WO9515168、US2003114406、EP1265116等)克服了天然HA易分散、易降解的缺陷，而保留了其良好的生物相容性和非免疫原性，是目前较为理想的组织填充材料。如二乙烯基砜交联的HA凝胶hylan系列产品(美国Allergan的，Biomatrix公司的

)，现已广泛用作粘连性手术植入物、骨关节病治疗首选生物医学材料、药物缓释基质、软组织增大替代物、美容整形材料等；缩水甘油醚交联的HA凝胶

系列和

(由瑞士Q-Med AB公司生产)，前者应用于隆唇、改善面部皱纹和褶皱，后者应用于关节腔注射治疗关节炎。它们在体内的存留时间可达到4～6个月或更长时间，安全性好于其它合成聚合物和牛胶原蛋白。

此外，一些聚合物生物材料如聚乳酸(polylactic acid，PLA)、聚乙醇酸(polyglycolic acid，PGA)、聚甲基丙烯酸甲酯(polymethyl methacrylate，PMMA)或聚天门冬氨酸(Polyasparticacid，PAA)也陆续应用于组织填充，通过特殊的聚合、分散技术获得适宜大小的聚合物颗粒，可应用于注射除皱，如荷兰Hafod Bioscience B.V公司的爱贝

(

)，为含有直径为32～40μm的PMMA微球体的牛胶原蛋白悬浮液，是一种高效，持久的塑形材料，但由于含有牛胶原蛋白，存在过敏反应和感染动物传染病的危险，限制了使用人群。

为了防止填充物从局部植入位点的迁移和能够方便的从局部植入位点取出，具有黏弹性的凝胶被制成粒径1～5mm的颗粒，分散在生理盐溶液中，用于制备软组织填充注射剂(WO2005097218、CN1950039)。

本发明采用HA或其盐的等渗溶液作载体，添加特定比例的水不溶性的、在等渗溶液中充分溶胀的交联多糖化合物和/或聚合物的含水凝胶颗粒。HA等渗溶液提供了一个润滑、富有弹性的空间，使悬浮其中的、具有一定刚性的凝胶颗粒更易于注射，同时，由于HA与组织细胞良好的亲和性及其对炎症因子的调节作用，可以改善凝胶颗粒的组织相容性，减少局部炎症反应。

本发明由于含有一定比例的HA或其盐的溶液，注射于关节腔，可即刻加强关节滑液的润滑作用，其中的含水凝胶颗粒使关节滑液对外力的缓冲作用增强，二者的混合体作为一种有效的隔离、润滑垫，可长时间的存在于关节腔，使损伤的软骨获得充分的修复，消除炎症产生的根源。

本发明中加入的凝胶颗粒尺寸为平均粒径1～1000μm，适用于制备长时间存留于植入位点、不需要从局部植入位点取出的软组织填充注射剂。如面部美容注射剂和关节腔注射剂。与大颗粒相比，较小的颗粒填充于皮肤更有利于塑型，可以达到自然、柔和地消除皱纹，如前所述系列产品均是采用10000～200000个/ml的颗粒；在组织有限的空间中，如关节腔，较小的颗粒对周围组织的机械性刺激和损伤也比较小；注射大颗粒填充剂需要使用较大的注射针头，如前所述粒径1～5mm的黏弹性颗粒(WO2005097218、CN1950039)在生理盐水溶液中，使用15～50N的压力，需要用20号或更大的针头才能推出，

的说明书中建议使用18～22G(内径0.7～1.2μm)的针头，而本发明1～1000μm的黏弹性颗粒仅需要23G(内径0.6μm)或更细的针头即可推出，使用较细小针头可减少对注射部位肌体组织的损伤和降低感染的机会。

此外，大颗粒填充剂为了满足可注射的要求，必须降低颗粒的硬度，使其具有充分的流动性，这就限制了颗粒的交联程度，即限制了颗粒在体内的存留时间，本发明采用较小颗粒，同时以未交联的、高润滑性的HA或其盐溶液作载体，既避免了对颗粒交联程度的限制，又满足了便于注射的要求。根据本发明制备的以透明质酸钠(sodium hyaluronate，SH)溶液为载体、以缩水甘油醚交联SH的凝胶颗粒产品，单次注射对关节炎的治疗作用可达到与4次注射未交联SH溶液类似的效果，本发明可调节SH的交联程度，延长其在关节腔的作用时间，且局部刺激作用较小。

综上所述，本发明含大分子水凝胶的HA或其盐的混悬液具有易于注射、局部作用时间长、可塑性强、生物相容性好等特点，注射于关节腔治疗关节炎的效果好，维持时间长。

发明内容

本发明的目的是提供一种注射用含大分子水凝胶的HA或其盐的混悬液及其制备方法，以及使用该大分子水凝胶的HA或其盐混悬液用于制备美容或医疗用途的注射剂，如制备用于消除面部皱纹的皮内或皮下注射剂和用于治疗关节炎的关节腔注射剂。

本发明注射用含大分子水凝胶的HA或其盐的混悬液，特征在于本混悬液以HA或其盐的等渗溶液作为载体，添加水不溶性的、在等渗溶液中充分溶胀的大分子化合物含水凝胶颗粒构成。其中所述HA或其盐的等渗溶液与水不溶性、在等渗溶液中充分溶胀的大分子化合物含水凝胶颗粒的体积比为3:1～1:3，优选3:2～2:3，更优选1:1。

本发明含大分子水凝胶的HA或其盐混悬液，其中所述大分子化合物含水凝胶颗粒的平均粒径为1～1000μm，优选10～500μm，更优选50～250μm。具体描述，在显微镜下观察，测量所述含水凝胶颗粒的最大径长，其中50％以上的颗粒径长范围在1～1000μm，优先选择50％以上的颗粒径长范围在10～400μm，更优先选择50％以上的颗粒径长范围在50～200μm。

本发明含大分子水凝胶的HA或其盐混悬液，其中所述的HA或其盐可以是SH、透明质酸钾(potassium hyaluronate，KH)、透明质酸钙(calcium hyaluronate，CaH)、透明质酸镁(magnesium hyaluronate，MgH)、透明质酸铵(ammonium hyaluronate，NH₄H)、透明质酸四丁基铵(tetrabutyl ammonium hyaluronate，TBuAH)、透明质酸铋(bismuth hyaluronate，BiH)和透明质酸锌(zinc hyaluronate，ZnH)中的一种HA盐，也可以是其中任意两种或两种以上的HA盐的混合物，优先选用SH。

本发明含大分子水凝胶的HA或其盐混悬液，其中所述的大分子化合物可以是交联多糖化合物也可以是聚合物。所述的交联多糖化合物来源于HA、硫酸软骨素(chondroitin sulfate，CS)、肝素(heparin，HP)、纤维素(cellulose，CL)、淀粉(starch，ST)、葡聚糖(dextran，DX)、海藻酸(alginic acid，AA)或壳聚糖(chitosan，CT)以及它们的其衍生物中的一种，经过交联后得到的产物；也可以是其中任意两种或两种以上的多糖混合后，经过交联后得到的产物，例如HA和CS的混合交联产物，HA和CT混合的交联产物，HA、HP和CS三种多糖混合的交联产物等等；还可以选择它们的交联产物中任意两种或两种以上的混合物，例如交联HA和交联CS的混合物，交联HA、交联去硫酸HP和交联CS三种交联产物的混合物，HA和CT混合的交联产物和交联CS的混合物等等；优先选择HA的交联产物，更优选采用1，4-丁二醇二缩水甘油醚(1，4-Bis(2，3-epoxypropoxy)butane，BDDE)交联的HA产物。所述的聚合物可以是PLA、乙交酯-丙交酯共聚物[Poly(DL-lactide-co-glycolide)，PLGA]、聚乙二醇-聚丙交酯嵌段共聚物[poly(DL-lactide)-poly(ethylene glycol)，PLA-PEG或PELA]、PMMA、PAA或PGA中的任意的一种，也可以是其中任意两种或两种以上的混合物。

由于一些交联多糖，如交联的HA、CS等，其水凝胶几乎可以是无色透明的，用这样的水凝胶颗粒制备本发明混悬液外观为无色透明的黏稠体；另一些交联多糖或聚合物，如交联ST、CL、PAA等，其水凝胶带有乳光，不透明，用这样的水凝胶颗粒制备本发明混悬液外观为带有乳光的黏稠体；还有一些交联多糖或聚合物，如交联CT、PLA、PMMA等，其水凝胶为白色，不透明，用这样的水凝胶颗粒制备本发明混悬液外观为乳白色的黏稠体。

本发明含大分子水凝胶HA或其盐混悬液可用于制备美容或医疗用途的注射剂，例如制备改善面部皱纹、减少皮肤褶皱的、局部注射于皮下或皮内的美容注射剂和制备治疗关节炎的关节腔注射剂。

本发明注射用含大分子水凝胶的HA或其盐的混悬液的制备方法，包括如下步骤：

①：制备大分子化合物凝胶颗粒；

②：将①所得凝胶颗粒在等渗溶液中充分溶胀、平衡，得到水不溶性的、在等渗溶液中充分溶胀的大分子化合物含水凝胶颗粒；

③：将②所得水不溶性的、在等渗溶液中充分溶胀的大分子化合物含水凝胶颗粒与HA或其盐的等渗溶液混合均匀。

本发明所述的制备方法，其中所述的HA或其盐选自SH、KH、CaH、MgH、NH₄H、TBuAH、BiH和ZnH中的一种，也可以选择其中任意两种或两种以上的HA盐的混合物，优选SH。

本发明所述的制备方法，其中所述的大分子化合物为交联多糖化合物、聚合物或它们的混合物。所述的交联多糖化合物为HA、CS、HP、CL、ST、DX、AA或CT及其衍生物中的一种的交联产物、任意两种或两种以上混合的交联产物，或它们的交联产物任意两种或两种以上的混合物，优选HA的交联产物，更优选采用BDDE交联的SH产物。所述的聚合物为PLA、PLGA、PELA、PMMA、PASP或PGA中的任意的一种，也可以是其中任意两种或两种以上的混合物。

本发明所述的制备方法，其中所述的等渗溶液为250～350mOsmol/L的氯化钠溶液或磷酸盐缓冲溶液(PBS)，优选250～350mOsmol/L、pH6.5～7.5的PBS。例如0.9％氯化钠溶液(生理盐水)，或含有0.3mM磷酸二氢钠、1.6mM硫酸氢二钠、146.5mM氯化钠、用盐酸调节pH6.5～7.5的缓冲溶液。

本发明制备方法工艺简单、产品质量易于控制；制备获得的含大分子水凝胶的HA或其盐混悬液无菌、无热原，水凝胶颗粒大小适宜且均匀细腻，易于注射。

本发明含大分子水凝胶的HA或其盐的混悬液适合用于制备美容和医疗用途的注射剂，具有易于注射、局部作用时间长、可塑性强、生物相容性好等特点，尤其是用于制备治疗关节炎的关节腔注射剂，在关节腔可长时间的作为一种隔离、润滑垫，对外力的具有足够的缓冲作用，使软骨组织获得充分的修复的，具有注射次数少、局部刺激少而疗效好的特点。

具体实施方式

以下实施例是为了更好地说明本发明，不是限制本发明。

实施例一

由BDDE交联的SH凝胶颗粒和1％SH溶液组成的混悬液。制备方法如下：

将10g SH(平均分子量70万道尔顿)与含有0.5g BDDE的65ml 1％ NaOH溶液混合，于50℃反应3h，用去离子水于70℃纯化10h，为了便于比较，将反应得到的凝胶平均分成两份，一份挤压使凝胶通过60目筛(A)，另一份挤压使凝胶通过20目筛(B)，分别收集凝胶颗粒，加入等体积2倍等渗浓度的PBS(每1000ml含有NaH₂PO₄·2H₂O 90mg，Na₂HPO₄·12H₂O 1.12g，NaCl 17g)，65℃保温4h，200目筛网过滤，分别得到两份SH凝胶，平均粒径约250μm的颗粒380ml(A)和平均粒径约1200μm的颗粒375ml(B)。

另取2.5g SH(平均分子量180万道尔顿)，溶解于250ml等渗PBS(每1000ml含有NaH₂PO₄·2H₂O 45mg，Na₂HPO₄·12H₂O 0.56g，NaCl 8.5g，pH 7.2)，得到等渗SH溶液。

将上述得到两份凝胶颗粒分别和125ml SH溶液混合，用100℃流通蒸汽灭菌两次，每次30min，无菌分装于一次性注射器，即得样品A和B。

在15～50N的压力下，样品A用6号针头可以容易地推出，样品B需要用12号的针头才能推出。使用较小针头可减少对注射部位肌体组织的损伤和降低感染的机会。

实施例二

将10g SH(平均分子量120万道尔顿)溶解于80ml含有0.5g BDDE的1％ NaOH溶液中。于50℃反应4h，用去离子水于70℃纯化10h，挤压使凝胶通过80目筛，收集凝胶颗粒，加入等体积2倍等渗浓度的PBS，65℃保温4h，2000rpm离心15min，收集凝胶沉淀，得到平均粒径150μm的SH凝胶颗粒约780ml。

另取7.8g SH(平均分子量120万道尔顿)，溶解于780ml等渗PBS，得到等渗SH溶液。

将上述得到的凝胶颗粒和SH溶液混合，按实施例一描述的方法灭菌、包装，即得。

在15～50N的压力下，该样品用5号针头可以容易地推出。

实施例三

由PLA微球和1％SH溶液组成的混悬液。制备方法如下：

按文献[胡一桥等，中国药学杂志，1999，34(12)：822～826]方法制备PLA微球：取PLA(相对分子量20KD)，溶于3～5倍二氯甲烷，加入含1％司盘—80(Span—80)的液体石蜡溶液(二氯甲烷的3～5体积)，于15℃搅拌乳化(200～500rpm)，形成稳定乳剂，于15℃将溶剂挥发干净，用无水乙醇和去离子水洗涤数次，过滤，减压干燥并过150目筛，制得平均粒径50～80μm PLA微球，环氧乙烷灭菌后投入事先湿热灭菌的等渗PBS，平衡24h。

取0.6g SH(平均分子量180万道尔顿)，溶解于60ml等渗PBS，得到等渗SH溶液。用100℃流通蒸汽灭菌两次，每次30min。

于无菌条件下取上述制备的PLA微球40ml和SH溶液混合均匀，包装，即得。

在15～50N的压力下，该样品用5号针头可以很容易推出。

实施例四

由PELA微球和1％SH溶液组成的混悬液。制备方法如下：

按文献[任杰等，同济大学学报，2003，31(2)：191～195]方法制备PELA微球：取丙交酯、聚乙二醇和氧化锌(催化剂)混合均匀，充氮、抽真空后进行聚合反应。取反应冷却后的共聚物，加入10倍量乙酸乙酯溶解，离心弃沉淀，向溶液中加入1/2乙酸乙酯体积的正庚烷，弃去上层清液，加蒸馏水使底部油状物沉淀，抽滤，蒸馏水洗多次，收集沉淀物，室温干燥，取干燥物溶于3～5倍二氯甲烷中，在1/3二氯甲烷体积的水溶液中加入PEG—6000和Span—80，使其浓度分别达10％和0.05％，于250rpm搅拌混合均匀，然后将共聚物溶液逐滴加入，500rpm搅拌约10～40min，3500rpm离心，去离子水洗涤数次，过滤，减压干燥并过80目筛，制得平均粒径80～100μm PELA微球，环氧乙烷灭菌后投入事先湿热灭菌的等渗PBS，平衡24h。

取0.5g SH(平均分子量180万道尔顿)，溶解于50ml等渗PBS，得到等渗SH溶液。用100℃流通蒸汽灭菌两次，每次30min。

于无菌条件下取上述制备的PELA嵌段共聚物微球50ml和SH溶液混合均匀，包装，即得。

在15～50N的压力下，该样品用5号针头可以容易地推出。

实施例五

由PMMA微球和1％SH溶液组成的混悬液。制备方法如下：

参考文献(胡杰等，高分子学报，2003，4：540～545)方法，采用乙醇/水混合溶剂作为分散介质制备PMMA微球，改变聚合反应的条件和配比可以得到适宜的粒径。将2.5g聚乙烯吡咯烷酮(PVP)溶于55％乙醇溶液60ml，投入10g甲基丙烯酸甲酯(MMA)、1g丙烯酸(MAA)和0.15g偶氮二异丁腈(AIBN)，通氮气，预分散30min，将温度升至70℃反应50min，然后降温至55℃反应24h，结束反应，降温收集分散液，用乙醇/水反复清洗后离心沉降，循环反复3次，再用等渗PBS反复浸泡、清洗后，离心沉降得到平均粒径约10～50μm的PMMA微球。

取0.4g SH(平均分子量180万道尔顿)，溶解于40ml等渗PBS，得到等渗SH溶液。

取上述制备的PMMA微球10ml和上述SH溶液混合，按实施例一描述的方法灭菌、包装，即得。

在15～50N的压力下，该样品用5号针头可以容易地推出。

实施例六

由PASP凝胶颗粒和1％SH溶液组成的混悬液。制备方法如下：

参考文献方法[①方莉和谭天伟，化学反应工程与工艺，2003，19(4)：295～299；②CN1814650]制备PASP：以天门冬氨酸(L-ASP)为原料、磷酸作为催化剂、环丁砜作为溶剂，常压下加热至180～200℃，反应4.5h，反应过程中将所生成的水份除去。反应完成后，将反应生成物依次用甲醇和水反复冲洗至中性，40℃条件下减压干燥，制得分子量约40～50万的反应中间体聚琥珀酰亚胺(PSI)。粉碎PSI，过140～150目筛，加入30倍去离子水，持续搅拌8～10h，间隔时间加入交联剂己二胺至浓度达0.5％，搅拌结束后加入3～4倍乙醇，放置3天，收集沉淀于25℃减压干燥，粉碎干燥品，过140～150目筛，加入20倍50％乙醇溶液，搅拌30min，搅拌过程中滴加20％ NaOH溶液至反应液呈胶体状态，加入3～5倍乙醇，放置3d，收集沉淀于40℃减压干燥，得PASP固体。将5g PASP分散于去离子水中，充分溶胀后过60目筛，加入等体积2倍等渗浓度的PBS，65℃保温4h，200目筛网过滤，得到平均粒径200μm的PASP水凝胶颗粒约450ml。

取0.45g SH(平均分子量180万道尔顿)，溶解于50ml等渗PBS，得到等渗SH溶液。

取上述制备的PASP水凝胶颗粒和上述SH溶液混合，按实施例一描述的方法灭菌、包装，即得。

在15～50N的压力下，该样品用5号针头可以容易地推出。

动物实验研究

1.颗粒对软骨组织的刺激(兔关节腔局部刺激性实验)

取本发明实施例一中A、B两个样品，分别注入兔膝关节，注射2次，0.2ml/次，间隔一周，第二次注射48h后取标本作组织学检查，比较两个样品对关节组织的刺激性。

两个样品注入兔膝关节后均未发现明显发红、肿涨现象。软骨和滑膜组织学检查表明，注射A样品的关节滑膜有少量炎症细胞浸润，注射B样品的关节滑膜出现轻度增生及大量炎症细胞浸润，炎症较前者重；二者关节软骨组织未见明显异常。

试验表明，含有大凝胶颗粒的B样品对关节组织的刺激性较含有小凝胶颗粒的A样品严重。

2.对关节炎的治疗效果

通过考察单次注射本发明样品对退化过程中兔膝关节面软骨的保护作用研究本发明对关节炎的治疗效果。

用文献方法(鬼头康彦等)在兔膝关节腔内注入木瓜蛋白酶造成骨关节病变模型，取本发明实施例一A的样品与高分子SH溶液(1％)作为试验样品分别注入病变关节。给药方法：于木瓜蛋白酶末次注射的第7d，一次性注射本发明样品0.2ml，为给药I组；注射1％ SH 4次，每次0.2ml，隔周注射一次，为给药II组。于首次给药第28d处死动物，打开关节进行大体观察后，取标本作组织学检查，对软骨和滑膜作Mankin’s评分。

造模后病变动物关节出现肿胀，约一周后消失，用药动物关节未见明显肿胀，处死动物的关节腔打开后，发现空白对照组关节软骨表面颜色较正常关节明显变淡，用药组关节软骨表面颜色也有改变，Mankin’s评分结果见表1：

表1 各组动物的Mankin’s评分

^*：给药I、II组与空白对照组相比具有显著性差异，p<0.01

试验表明，单次注射本发明实施例二的样品对退化过程中兔膝关节面软骨的保护作用与4次注射高分子1％SH溶液的效果相同，达到了减少注射次数而维持治疗效果的目的。

3.在体内存留的时间

通过大鼠皮下植入试验考察本发明在体内的存留时间。

取本发明实施例二和实施例四的样品分别注射植入大鼠背部皮下，间隔时间处死动物，打开背部皮肤观察植入部位情况。2个月后观察，两个植入样品均未发生扩散、变色，植入物周围形成了较薄的包囊，周围组织无粘连、无血管增生，4、6个月后观察植入物的包囊稍加厚，周围组织无异常变化，12个月后观察，个别动物背部植入物完全吸收，包囊消失，周围组织与正常组织无异。实施例二样品在皮下的存留时间约10～14个月；实施例四样品在皮下的存留时间约8～12个月。

Claims

1、种注射用含大分子水凝胶的透明质酸或其盐的混悬液，特征在于由透明质酸或其盐的等渗溶液作为载体，添加水不溶性的、在等渗溶液中充分溶胀的大分子化合物含水凝胶颗粒构成。

2、权利要求1所述的混悬液，其中所述透明质酸或其盐的等渗溶液与水不溶性、在等渗溶液中充分溶胀的大分子化合物含水凝胶颗粒的体积比为3∶1～1∶3，优选3∶2～2∶3，更优选1：1。

3、权利要求1或2所述的混悬液，其中所述大分子化合物含水凝胶颗粒的平均粒径为1～1000μm，优选10～500μm，更优选50～250μm。

4、权利要求1或2所述的混悬液，其中所述大分子化合物为交联多糖化合物或聚合物。

5、权利要求1或2所述的透明质酸或其盐为透明质酸钠、透明质酸钾、透明质酸钙、透明质酸镁、透明质酸铵、透明质酸四丁基铵、透明质酸铋和透明质酸锌中的一种、任意两种或两种以上的混合物，优选透明质酸钠。

6、权利要求4所述的混悬液，其中交联多糖化合物为透明质酸、硫酸软骨素、肝素、纤维素、淀粉、葡聚糖、海藻酸或壳聚糖及其衍生物中的一种的交联产物、任意两种或两种以上混合的交联产物，或它们的交联产物任意两种或两种以上的混合物，优选透明质酸的交联产物，更优选采用1，4-丁二醇二缩水甘油醚交联的透明质酸钠产物。

7、权利要求4所述的混悬液，其中聚合物为聚乳酸、乙交酯-丙交酯共聚物、聚乙二醇-聚丙交酯嵌段共聚物、聚甲基丙烯酸甲酯、聚天门冬氨酸或聚乙醇酸中的一种、任意两种或两种以上的混合物。

8、权利要求1、2、6或7任一所述的混悬液在制备用于美容或医疗用途的注射剂中的应用。

9、一种注射用含大分子水凝胶的透明质酸或其盐的混悬液的制备方法，包括如下步骤：

①：制备大分子化合物凝胶颗粒；

③：将②所得水不溶性的、在等渗溶液中充分溶胀的大分子化合物含水凝胶颗粒与透明质酸或其盐的等渗溶液混合均匀。

10、权利要求9所述的制备方法，其中所述大分子化合物为交联多糖化合物或聚合物。

11、权利要求9所述的制备方法，其中所述透明质酸或其盐选自透明质酸钠、透明质酸钾、透明质酸钙、透明质酸镁、透明质酸铵、透明质酸四丁基铵、透明质酸铋和透明质酸锌中的一种、任意两种或两种以上的混合物，优选透明质酸钠。

12、权利要求9所述的制备方法，其中所述等渗溶液为250～350mOsmol/L的氯化钠溶液或磷酸盐缓冲溶液，优选250～350mOsmol/L、pH6.5～7.5的磷酸盐缓冲溶液。

13、权利要求10所述的制备方法，其中交联多糖化合物为透明质酸、硫酸软骨素、肝素、纤维素、淀粉、葡聚糖、海藻酸或壳聚糖及其衍生物中的一种的交联产物、任意两种或两种以上混合的交联产物，或它们的交联产物任意两种或两种以上的混合物，优选透明质酸的交联产物，更优选采用1，4-丁二醇二缩水甘油醚交联的透明质酸钠产物。

14、权利要求10所述的制备方法，其中聚合物为聚乳酸、乙交酯-丙交酯共聚物、聚乙二醇-聚丙交酯嵌段共聚物、聚甲基丙烯酸甲酯、聚天门冬氨酸或聚乙醇酸中的一种、任意两种或两种以上的混合物。

15、权利要求9-14任一所述的制备方法制得的含大分子水凝胶的透明质酸或其盐混悬液。

16、权利要求15所述的混悬液在制备用于美容或医疗用途的注射剂中的应用。

17、权利要求15所述的混悬液在制备用于治疗关节炎的关节腔内注射制剂中的应用。