CN101484455A - 稠杂环化合物及其作为mglur5调节剂的应用 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种新的化合物，其制备方法，其治疗用途和包括该新化合物的药物组合物。

Description

稠杂环化合物及其作为MGLUR5调节剂的应用

发明领域

本发明涉及新的化合物、其在治疗中的应用和包含所述新的化合物的药物组合物。

发明背景

谷氨酸为哺乳动物中枢神经系统(CNS)中主要的兴奋性神经递质。谷氨酸通过结合并从而活化细胞表面受体而产生其对中枢神经元的作用。这些受体已经根据受体蛋白质的结构特点、受体将信号转导到细胞内的手段和药理学特征被分为二个主要类型，促离子型谷氨酸受体(ionotropic glutamate receptor)和促代谢型谷氨酸受体(metabotropicglutamate receptor)。

促代谢型谷氨酸受体(mGluR)为与G蛋白质偶联的受体，其在结合谷氨酸之后活化多种细胞内第二信使系统。在完整的哺乳动物神经元中的mGluR的活化引起一种或多种以下响应：磷脂酶C活化；磷酸肌醇(PI)水解增加；细胞内钙释放；磷脂酶D活化；腺苷酸环化酶的活化或抑制；环腺苷酸(cAMP)的形成增加或减少；鸟苷酰环化酶的活化；环单磷酸鸟苷(cGMP)的形成增加；磷脂酶A₂的活化；花生四烯酸释放增加；电压控制的和配体控制的离子通道活性的增加或降低。Schoepp等人，Trends Pharmacol.Sci.14：13(1993)，Schoepp，Neurochem.Int.24：439(1994)，Pin等人，Neuropharmacology 34：1(1995)，Bordi andUgolini，Prog.Neurobiol.59：55(1999)。

已经通过分子克隆鉴定了八种不同的mGluR亚型，称mGluR₁到mGluR8。Nakanishi，Neuron 13：1031(1994)，Pin等人，Neuropharmacology 34：1(1995)，Knopfel等人，J.Med.Chem.38：1417(1995)。另外的受体多样性通过某些mGluR亚型的可变剪接形式的表达而发生。Pin等人，PNAS 89：10331(1992)，Minakami等人，BBRC199：1136(1994)，Joly等人，J.Neurosci.15：3970(1995)。

促代谢型谷氨酸受体亚型可根据氨基酸序列同源性、受体利用的第二信使系统和它们的药理学特征被再分成三组，第I组、第II组和第III组mGluR。第I组mGluR包括mGluR1、mGluR5及其可变剪接变体。激动剂与这些受体的结合引起磷脂酶C活化和随后的细胞内钙的转移。

神经病症、精神病症和疼痛病症

阐明第I组mGluR的生理学作用的努力表明，这些受体的活化引起神经元的兴奋。不同的研究证明，第I组mGluR激动剂可以在施用于海马、大脑皮质、小脑和丘脑以及其他CNS区域中的神经元时产生突触后兴奋。证据表明这种兴奋是由于突触后mGluR的直接活化，但是还已表明存在有突触前mGluR的活化，引起神经递质的释放增加。Baskys，Trends Pharmacol.Sci.15：92(1992)，Schoepp，Neurochem.Int.24：439(1994)，Pin等人，Neuropharmacology 34：1(1995)，Watkins等人，Trends Pharmacol.Sci.15：33(1994)。

促代谢型谷氨酸受体参与在哺乳动物CNS中的许多正常过程中。mGluRs的活化已被证明是诱导海马长时增强和小脑长时抑制所需要的。Bashir等人，Nature 363：347(1993)，Bortolotto等人，Nature 368：740(1994)，Aiba等人，Cell 79：365(1994)，Aiba等人，Cell 79：377(1994)。此外，已经证明了mGluR的活化在伤害感受和痛觉丧失中的作用，Meller等人，Neuroreport 4：879(1993)，Bordi and Ugolini，BrainRes.871：223(1999)。另外，mGluR活化已经表现出在多种其他正常过程中起调节作用，所述过程包括突触传递、神经元发育、细胞凋亡性神经元死亡、突触可塑性、空间学习、嗅觉记忆、心搏动的中枢控制、觉醒、运动控制和前庭眼球反射的控制。Nakanishi，Neuron 13：1031(1994)，Pin等人，Neuropharmacology 34：1，Knopfel等人，J.Med.Chem.38：1417(1995)。

另外，第I促代谢型谷氨酸受体，特别是mGluR5，已经表现出在多种病理生理学过程和影响CNS的病症中起作用。这些病症包括中风、头创伤、缺氧和缺血损伤、低血糖、癫痫症、神经变性病症比如阿尔茨海默氏病和疼痛。Schoepp等人，Trends Pharmacol.Sci.14：13(1993)，Cunningham等人，Life Sci.54：135(1994)，Hollman等人，Ann.Rev.Neurosci.17：31(1994)，Pin等人，Neuropharmacology 34：1(1995)，Knopfel等人，J.Med.Chem.38：1417(1995)，Spooren等人，TrendsPharmacol.Sci.22：331(2001)，Gasparini等人Curr.Opin.Pharmacol.2：43(2002)，Neugebauer Pain 98：1(2002)。这些病症的大部分病理学被认为是由于谷氨酸诱导的CNS神经元过度兴奋。因为第I组mGluR看起来通过突触后的机制和增强的突触前谷氨酸释放来增加谷氨酸介导的神经元兴奋，它们的活化可能对所述病理学有责任。因此，第I组mGluR受体的选择性拮抗剂可能在治疗上是有利的，特别是作为神经保护剂、镇痛药或抗惊厥药。

在阐明促代谢型谷氨酸受体(特别是第I组)的神经生理学作用方面的新进展已经确定了这些受体在治疗急性和慢性神经病和精神障碍和慢性及急性疼痛病中是有前途的药物靶标。

胃肠道病症

食管下括约肌(LES)易于间歇性松弛。结果，因为机械屏障在这时暂时丧失，来自胃的流体可以进入食管，这种情况以下简称为“返流”现象。

胃-食管返流病(GERD)是最常见的上胃肠道疾病。当前的药物疗法针对减少胃酸分泌，或针对中和食管中的酸。返流的主要机制已被认为是取决于张力减退的食管下括约肌。然而，例如，Holloway & Dent(1990)Gastroenterol.Clin.N.Amer.19，pp.517-535，中表明，大多数的返流急性发作在暂时性食管下括约肌松弛(TLESR)过程中发生，即不是由吞咽引起的松弛。还表明，在患有GERD的患者中，胃酸分泌通常是正常的。

根据本发明的新的化合物被认为可用于抑制暂时性食管下括约肌松弛(TLESR)并由此用于治疗胃-食管返流病(GERD)。

众所周知，某些化合物可以在人中引起对新心脏复极化(cardiacrepolarisation)的不良作用，即在心电图(ECG)上观察到的QT间隔的延长。在极端情况下，这种药物诱导的QT间隔的延长能够导致一种心率紊乱，称之为Torsades de Pointes(TdP；Vandenberg等人hERG K⁺channels：friend and foe.Trends Pharmacol Sci 2001；22：240-246)，其最终导致心室颤动和突然死亡。这种综合征的主要事件是通过这些化合物来抑制被延迟的校正钾电流(IKr)的快速组元。化合物与携带这种电流的通道蛋白的孔形成α亚单位-所述亚单位由人ether-a-go-go相关基因(hERG)编码-结合。因为IKr在心脏动作电位的复极化中起关键作用，所以它的抑制减缓了复极化，并且这表现为QT间隔的延迟。尽管QT间隔延迟本身不是安全考虑，但是其具有心血管不利作用的危险，并且在少量人中可以导致TdP并且恶化为心室颤动。

通常，本发明化合物具有对hERG-编码的钾通道的低活性。在这点上，体外抗hERG的低活性是体内低活性的指示。

为了提高药物功效，最好药物具有良好的代谢稳定性。体外抗人微粒体代谢的稳定性是对于体内代谢具有稳定性的指示。

由于其生理学和病理生理学意义，因此需要对mGluR亚型、尤其第I组受体亚型、最尤其mGluR5表现高选择性的新的强效mGluR激动剂和拮抗剂。

本发明的目的是提供对促代谢谷氨酸受体(mGluR)、特别是对mGluR5受体表现活性的化合物。尤其是，本发明化合物主要是外周作用的，即具有通过血脑屏障的有限能力。

发明详述

本发明涉及式I的化合物：

其中

R¹是甲基，卤素或氰基；

R²是氢或氟；

R³是氢，氟或C₁-C₃烷基；

R⁴是氢或C₁-C₃烷基；

Y是C₁-C₂亚烷基；

X是

或

和Z是

或

R⁵是氢，C₁-C₃烷基，C₁-C₃卤代烷基，C₁-C₃烷氧基，C₁-C₃卤烷氧基，C₁-C₃酰胺烷基，C₁-C₃N′烷基酰胺烷基，C₁-C₃N′N-二烷基酰胺烷基，氰基或C₁-C₃氰基烷基；

R⁶是氢，C₁-C₃烷基，C₁-C₃卤代烷基，C₁-C₃烷氧基，C₁-C₃卤烷氧基，C₁-C₃酰胺烷基，C₁-C₃ N′-烷基酰胺烷基，吡唑基(pyrazoyl)，C₁-C₃N′N-二烷基酰胺烷基，氰基或C₁-C₃氰基烷基；

R⁷是氢，氟或C₁-C₃烷基；

以及其药用可接受的盐，水合物，同工异构体(isoforms)，互变异构体和/或对映异构体；

前提是式I的化合物不是

3-{5-[3-(2，6-二甲氧-嘧啶-4-基)-6，7-二氢-5H-[1，2，4]三唑并[4，3-a]嘧啶-8-基甲基]-四唑-2-基}-苄腈；

8-[2-(3-氯-苯基)-2H-四唑-5-基甲基]-3-吡啶-3-基-5，6，7，8-四氢-4H-1，2，3a，8-四氮杂-薁；或者

8-{1-[2-(3-氯-苯基)-2H-四唑-5-基]-乙基}-3-吡啶-3-基-5，6，7，8-四氢-[1，2，4]三唑并[4，3-a]嘧啶。

在一个实施方案中，R¹是卤素或氰基。

在进一步的实施方案中，R¹是氯。在进一步的实施方案中，R¹是氟。在进一步的实施方案中，R¹是氰基。在进一步的实施方案中，R¹是甲基。

在进一步的实施方案中，R²是氢。

在进一步的实施方案中，R³是氢或氟。

在进一步的实施方案中，R⁴是氢或甲基。

在进一步的实施方案中，R⁵是氢、C₁-C₃烷基、C₁-C₃卤代烷基、C₁-C₃烷氧基、C₁-C₃卤烷氧基、C₁-C₃酰胺烷基、C₁-C₃ N′烷基酰胺烷基、C₁-C₃N′N-二烷基酰胺烷基或C₁-C₃氰基烷基；和R⁶是氢，C₁-C₃烷基，C₁-C₃卤代烷基，C₁-C₃烷氧基，C₁-C₃卤烷氧基，C₁-C₃酰胺烷基，C₁-C₃ N′-烷基酰胺烷基，吡唑基(pyrazoyl)、C₁-C₃ N′N-二烷基酰胺烷基或C₁-C₃氰基烷基；

在进一步的实施方案中，R⁵是氢、C₁-C₂烷基或C₁-C₂烷氧基。

在进一步的实施方案中，R⁶是氢、C₁-C₂烷基或C₁-C₂烷氧基。

在进一步的实施方案中，R⁷是C₁-C₂烷基或C₁-C₂烷氧基。

在进一步的实施方案中，其中Y是亚甲基。

在进一步的实施方案中，其中Y是亚乙基。

在进一步的实施方案中，Z是

或

另一实施方案是包含治疗有效量的式I化合物作为活性组分以及一种或多种可药用稀释剂、赋形剂和/或惰性载体的药物组合物。

下文更详细描述的其他实施方案，涉及式I化合物在治疗法、治疗mGluR5介导的疾病、制备用于治疗mGluR5介导的疾病的药物中的应用。

还其他的实施方案涉及治疗mGluR5介导的疾病的方法，该方法包括向哺乳动物给药治疗有效量的式I化合物。

在另一实施方案中，提供抑制mGluR5受体活化的方法，该方法包括用有效量的式I化合物处理含有所述受体的细胞。

本发明化合物可用于治疗中，尤其是用于治疗神经病学、精神病学、疼痛和肠胃疾病的治疗。

本领域技术人员还将理解，本发明的某些化合物可以溶剂化物例如水合物以及非溶剂化物的形式存在。大家还理解，本发明包括所有这样的式I化合物的溶剂化物形式。

式I化合物的盐也属于本发明的范围之内。通常，本发明化合物的可药用盐是使用本领域众所周知的标准方法获得的，例如，通过将足够碱性的化合物例如烷基胺，与适宜的酸例如HC1、乙酸或甲磺酸反应，获得具有生理学可接受的阴离子的盐。通过在水介质中将具有适当酸性质子例如羧酸或酚的本发明化合物，用一当量碱金属或碱土金属的氢氧化物或醇盐(例如乙醇盐或甲醇盐)或者适宜的碱性有机胺(例如胆碱葡甲胺)处理，任何用常规纯化技术进行纯化，可以制备相应的碱金属(例如钠、钾或锂)或碱土金属(例如钙)盐。另外，通过加入烷基化剂例如中性胺，可以制备季铵盐。

在本发明的一个实施方案中，可以将式I化合物转化为它的可药用盐或溶剂化物，特别是，酸加成盐例如盐酸盐、氢溴酸盐、磷酸盐、乙酸盐、富马酸盐、马来酸盐、酒石酸盐、柠檬酸盐、甲磺酸盐或对甲苯磺酸盐。

用于式I中的一般术语具有以下含意：

本文所用卤素选自氯、氟、溴或碘。

C₁-C₃烷基是具有1-3个碳原子的直链或支链烷基，例如甲基、乙基了、正丙基或异丙基。

C₁-C₃烷氧基具有1-3个碳原子的烷氧基，例如甲氧基、乙氧基、异丙氧基或正丙氧基。

C₁-C₃卤代烷氧基是具有1-3个碳原子的卤代烷氧基，例如其中至少一个碳原子被卤原子取代的甲氧基、乙氧基或正丙氧基。

C₁-C₃酰胺烷基是具有1-3个碳原子的连接到酰胺基官能的羰基的酰胺基，例如通过酰胺官能的碳原子连接到亚甲基或亚乙基的NH₂CO

C₁-C₃ N′烷基酰胺烷基是具有1-3个碳原子的连接到酰胺基官能的羰基的N-取代的酰胺基，例如通过酰胺官能的碳原子连接到亚甲基或亚乙基的RNHCO

C₁-C₃ N′N-二烷基酰胺烷基是具有1-3个碳原子的连接到酰胺基官能的羰基的N，N-二取代的酰胺基，例如通过酰胺官能的碳原子连接到亚甲基或亚乙基的R^aR^bNCO

C₁-C₃氰基烷基是具有1-3个碳原子的连接到氰基官能的碳的氰基，例如NCCH₂-或NCCH₂CH₂-。

吡唑基(pyrazoyl)是通过氮连接的单取代的吡唑。

所有化学名称都是使用称为AutoNom的软件产生的，该软件是经由ISIS绘图存取的。

在上式I中，X可以在两个可能取向中的一个上存在。

药物组合物

本发明的化合物可以配制成包含式I的化合物或其可药用盐或其溶剂化物与可药用载体或赋形剂的常规药物组合物。可药用载体可以是固体或液体。固体形式的制剂包括，但不限于粉剂、片剂、可分散的颗粒、胶囊、扁囊剂和栓剂。

固体载体可以是一种或多种物质，其也可充当稀释剂、调味剂、增溶剂、润滑剂、混悬剂、粘合剂或片剂崩解剂。固体载体也可以是包封物质。

在粉剂中，载体为细碎的固体，其与本发明的细碎的化合物或活性组分成混合物形式。在片剂中，活性组分与具有所需结合性质的载体以适宜的比例混合，并且被压制成所需的形状和尺寸。

为了制备栓剂组合物，首先熔化低熔点的蜡比如脂肪酸甘油酯和可可脂的混合物，并通过例如搅拌将活性成分分布在其中。然后，将熔融均相混合物倒入适宜尺寸的模具中，并使其冷却和凝固。

适宜的载体包括，但不限于碳酸镁、硬脂酸镁、滑石、乳糖、糖、果胶、糊精、淀粉、西黄蓍胶、甲基纤维素、羧甲基纤维素钠、低熔点的蜡、可可脂等。

术语组合物也意在包括活性成分和用作载体的包封物质的制剂，得到其中所述活性组分(有或者没有其他的载体)被因此与其相关的载体包围的胶囊。同样地，包括扁囊剂。

片剂、粉剂、扁囊剂和胶囊可用作适于口服给药的固体剂型。

液体形式的组合物包括溶液、悬浮液和乳液。例如，活性化合物的无菌水或水丙二醇溶液可以是适于非肠道给药的液体制剂。液体组合物也可以配制成在含水聚乙二醇溶液中的溶液。

用于口服给药的水溶液可以通过将活性组分溶于水中并根据需要加入适宜的着色剂、调味剂、稳定剂和增稠剂来制备。用于口服使用的含水悬浮液可以通过将细碎的活性组分与粘性物质分散在水中来制备，所述粘性物质比如天然合成的树胶、树脂、甲基纤维素、羧甲基纤维素钠和药物制剂领域已知的其他混悬剂。旨在用于口服使用的示例性的组合物可包含一种或多种着色剂、甜味剂、调味剂和/或防腐剂。

根据给药方式，所述药物组合物包括约0.05％w(重量百分数)至约99％w，更特别是从约0.10％w至50％w的本发明的化合物，所有的重量百分数基于所述组合物的总重量。

用于实施本发明的治疗有效量可以由本领域普通技术人员使用已知的标准(所属标准包括个体患者的年龄、体重和反应)确定，并结合正治疗或正预防的疾病来理解。

医疗应用

本发明的化合物可用于治疗与mGluR5的兴奋性活化有关的病症，并且用于抑制由mGluR5的兴奋性活化引起的神经元损伤。所述化合物可用于在包括人在内的的哺乳动物中产生mGluR5的抑制作用。

包括mGluR5在内的的第一组mGluR受体在中枢和周围神经系统及其他组织中高度表达。因此，预期本发明化合物非常适合用于治疗mGluR5介导的病症，比如急性和慢性神经病症和精神病症、胃肠道病症和慢性和急性疼痛病症。

本发明涉及上文定义的式I化合物在治疗方面的应用。

本发明涉及上文定义的式I化合物在治疗mGluR5介导的疾病方面的应用。

本发明涉及上文定义的式I化合物在治疗以下病症方面的应用：阿尔茨海默病老年性痴呆、AIDS诱导的痴呆、帕金森症、肌萎缩性脊髓侧索硬化症、亨廷顿氏舞蹈病、偏头痛、癫痫症、精神分裂症、抑郁症、焦虑症症、急性焦虑症症、眼科病症比如视网膜病、糖尿病性视网膜病、青光眼、听觉神经病症比如耳鸣、化疗诱导的神经病症、疱疹后神经痛和三叉神经痛、耐受性、依赖性、Fragile X综合症、孤独症、精神发育阻滞、精神分裂症和唐氏综合征。

本发明涉及上文定义的式I化合物在治疗以下病症方面的应用：与偏头痛有关的疼痛、炎性疼痛、神经性疼痛病症比如糖尿病性神经病、关节炎和类风湿性疾病、下腰痛、术后疼痛和与多种包括癌症的病症有关的疼痛、心绞痛、肾或胆绞痛、月经痛、偏头痛和痛风。

本发明涉及上文定义的式I化合物在治疗中风、头部创伤、缺氧和缺血性损伤、低血糖症、心血管疾病和癫痫症方面的应用。

本发明还涉及上定义的式I化合物在制备治疗第I组mGluR受体介导的病症和任一种上述病症的药物中的用途。

本发明的一个实施方案涉及式I化合物在治疗胃肠道病症中的应用。

本发明的另一个实施方案涉及式I化合物在制备以下应用的药物中的用途：用于抑制暂时性食管下括约肌松弛、用于治疗GERD、用于预防胃食管返流、用于治疗回流、用于治疗哮喘、用于治疗喉炎、用于治疗肺病、用于处理发育停滞、用于治疗易激性肠疾病(IBS)和用于治疗功能性消化不良(FD)。

本发明的另一实施方案涉及式I化合物在治疗膀胱过动症或尿失禁方面的应用。

术语“TLESR”，暂时性食管下括约肌松弛，本文根据Mittal，R.K.，Holloway，R.H.，Penagini，R.，Blackshaw，L.A.，Dent，J.，1995；Transientlower esophageal sphincter relaxation.Gastroenterology 109，pp.601-610中的定义。

本文中的术语“返流”是指因为机械屏障在这时暂时丧失，来自胃的流体能够进入食管。

本文中的术语“GERD”，胃食管返流病，本文根据van Heerwarden，M.A.，Smout A.J.P.M.，2000；Diagnosis of reflux disease.Baillière’s Clin.Gastroenterol.14，pp.759-774中的定义。

上文式I化合物可用于治疗或预防肥胖或超重(例如促进体重减轻和保持体重减轻)，预防或逆转体重增加(例药物诱导的或戒烟之后的如反弹)，调节食欲和/或饱腹感、饮食性疾病(例如暴饮、厌食症、贪食症和强迫症)和异食癖(对药品、土豆、烟草、酒精、任何开胃营养物或非必须食物项目)。

本发明还在罹患所述疾病或处于所述疾病危险中的人中提供治疗mGluR5介导的疾病和上文所列的任何疾病的方法，该方法包括向患者给予有效量的上文定义的式I化合物。

治疗或预防性治疗特定疾病所需的剂量必然根据被治疗的宿主、给药途径和被治疗的疾病的严重性而变化。

在本说明书的上下文中，除非有相反的特别说明，术语“治疗法”和“治疗”包括阻止或预防。术语“治疗的”和“治疗地”应当作相应的理解。

在该说明书里，除非另有说明，术语“拮抗剂＂和“抑制剂”是指通过任何方式部分地或完全地阻断引起配体产生响应的转导通道的化合物。

除非另有说明，术语“病症”指与促代谢型谷氨酸受体活性有关的任何病症和疾病。

本发明的一个实施方案是式I化合物与酸分泌抑制剂的联合。本发明“联合”可以作为“固定联合(fix combination)”或作为“部分联合的药盒(kit of parts combination)”存在。“固定联合”被定义为其中(i)至少一种酸分泌抑制剂；和(ii)至少一种式I化合物存在于一个单元中的联合。“部分联合的药盒”被定义为其中(i)至少一种酸分泌抑制剂；和(ii)至少一种式I化合物存在于一个以上单元的联合。“部分联合的药盒”可以同时、依次或分别给药。酸分泌抑制剂与按照本发明使用的式I化合物的比例范围在1:100-100:1，例如1:50-50:1或者1:20-20:1或者1:10-10:1。所述两种药物可以相同的比率依次给药。酸分泌抑制剂的实例是H2阻滞剂，例如西咪替丁、雷尼替丁；以及质子泵抑制剂例如吡啶基甲基亚磺酰基苯并咪唑化合物例如奥美拉唑、艾美拉唑、兰索拉唑、泮托拉唑、雷贝拉唑或相关的物质例如来明拉唑。

非医疗应用

除了它们在治疗药物中的用途之外，式I的化合物、其盐和水合物还可在用于体外和体内试验系统的开发和标准化中用作药理学工具，所述试验系统用于在实验动物如猫、狗、兔、猴、大鼠和小鼠中评价mGluR相关活性的抑制剂的作用，作为寻找新的治疗剂的研究的一部分。

制备方法

本发明的另一方面提供制备式I化合物或者其盐的方法。

在下述对这些方法的整个说明中，应当理解，在适当的时候，以有机合成领域技术人员容易理解的方式对各种反应物和中间体加上适宜的保护基并随后将其除去。使用这样的保护基的常规方法以及适宜的保护基的实例在例如＂Protective Groups in Organic Synthesis＂，T.W.Green，P.G.M.Wuts，Wiley-Interscience，New York，1999中描述。贯穿这种方法的以下描述，应将理解的是交叉偶联能够以有机合成领域的技术人员容易理解的方式进行。交叉偶联的常规程序例如描述在以下文献中：Organometallics in Synthesis”，M.Schlosser(Ed.)，John Wiley andSons(2001).

缩略语

atm         大气压

aq.         水，含水的

BINAP      2，2′-二(二苯基膦基)-1，1′-联萘

Boc        叔丁氧基羰基

CDI        N，N’-羰基二咪唑

DCC        N，N-二环己基碳二亚胺

DCM        二氯甲烷

DBU        二氮杂(1，3)双环[5.4.0]十一烷

DEA        N，N-二异丙基乙胺

DIBAL-H    氯化二异丁基铝

DIC        N，N’-二异丙基碳二亚胺

DMAP       N，N-二甲基-4-氨基吡啶

DMF        二甲基甲酰胺

DMSO       二甲亚砜

DPPF       二苯基膦基二茂铁

EA         乙酸乙酯

EDCI       N-[3-(二甲基氨基)丙基]-N′-乙基碳二亚胺盐酸盐

EDC        1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺

Et₂O       乙醚

EtOAc      乙酸乙酯

EtOH       乙醇

EtI        碘乙烷

Et         乙基

Fmoc       9-芴基甲氧基羰基

h          小时

HetAr      杂芳基

HOBt       N-羟基苯并三唑

HBTU       O-(苯并三唑-1-基)-N，N，N′，N′-四甲基脲鎓六氟磷酸盐

HPLC       高效液相色谱法

LAH        氢化铝锂

LCMS       HPLC质谱法

MCPBA      间氯苯甲酸

MeCN       乙腈

MeOH       甲醇

Min             分钟

MeI             碘甲烷

MeMgCl          氯化甲基镁

Me              甲基

n-BuLi          1-丁基锂

NaOAc           乙酸钠

NMR             核磁共振

NMP             N-甲基吡咯烷酮

nBuLi           1-丁基锂

o.n.            过夜

RT，rt，r.t.    室温

TEA             三乙胺

THF             四氢呋喃

nBu             正丁基

OMs             甲磺酸酯或甲烷磺酸酯

OTs             对甲苯磺酸酯，甲苯磺酸酯或4-甲基苯磺酸酯

PCC             氯铬酸吡啶鎓

PPTS            对甲苯磺酸吡啶鎓

TBAF            氟化四丁基铵

pTsOH           对甲苯磺酸

SPE             固相萃取(通常含有用于小型色谱的硅胶)

sat.            饱和的

式I的1，2，4-噁二唑化合物的一般合成

LG＝离去基团

R＝来自中间体前体的基团

R′＝如式I中定义的基团

方案1

式I的化合物，其中X是1，2，4-噁二唑(V)，可以通过式IV的化合物的环化来制备，所述的式IV的化合物又可以由适当活化的式III的化合物与式II的化合物形成。

式II的化合物可以由合适的腈制备，式III的化合物可以以下述非限制性方式来活化：i)作为酰基氯，其是使用合适的试剂如草酰氯或亚硫酰氯由酸形成的；ii)作为酸酐或混合酸酐，其是由用试剂如氯甲酸烷基酯处理形成的；iii)使用传统方法来在酰胺偶联反应中活化酸，如EDCI与HOBt或脲鎓盐如HBTU；iv)作为烷基酯，当使用强碱如叔丁醇钠或氢化钠/溶剂如乙醇或甲苯，在高温(50-110℃)，对羟基脒进行去质子化时。

这种化合物II和III转变为类型V的化合物可以按照两个连续的步骤通过类型IV的分离的中间体来进行，如上所述，或者原位形成的中间体的环化可以在酯形成期间自然地发生。酯IV的形成可以使用适当的非质子溶剂如二氯甲烷，四氢呋喃，N，N-二甲基甲酰胺或甲苯，任选地适当的有机碱如三乙胺，二异丙基乙胺等或无机碱如碳酸氢钠或碳酸钾来完成。形成噁二唑的式IV的化合物的环化可以在粗制的酯上进行，借助蒸发和置换溶剂，使用更高沸点的溶剂如DMF，或者借助水溶液萃取而提供半提纯的材料，或者借助通过标准色谱法提纯的材料。环化可以这样来完成，在合适的溶剂如吡啶或N，N-二甲基甲酰胺中通过通常加热或者通过微波辐射(100-180℃)；或者使用较低温度的方法，利用试剂如氟化四丁铵/四氢呋喃；或者通过任何其它合适的已知的文献方法。

上述反应的进一步的实例可见于：Poulain等，Tetrahedron Lett.，(2001)，42，1495-98，Ganglott等，Tetrahedron Lett.，(2001)，42，1441-43，和Mathvink等，Bioorg.Med.Chem.Lett.(1999)，9，1869-74，因此将其引入作为参考文献。

用于制备式I的化合物的腈和酸的合成

通过各种方法可以获得芳基腈，所述方法包括：在适当的溶剂如N，N-二甲基甲酰胺中，使用适当的氰化物源如氰化锌，在钯或镍催化下，芳基卤或三氟甲基磺酸盐的氰化作用。在适当的溶剂如含水醇中，在酸性或碱性条件下，通过水解，相应的酸可获自腈。芳基酸还可以从各种其它来源获得，包括碘-或溴-锂交换，随后用CO2捕获而直接得到酸。

使用任何相容方法来活化酸，羧酸可以被转变为伯酰胺，包括通过酰基氯或混合酸酐，随后在非质子溶剂如二氧杂环己烷中，在合适的碱、氢氧化铵、甲醇氨(methanolic ammonia)或氨存在下，捕获以任何氨源，包括氯化铵。这种酰胺中间体可以被转化为腈，使用各种脱水试剂如草酰氯或亚硫酰氯。将酸转化为腈的这种反应序列还可被用于非芳族酸，包括适当地被保护的氨基酸衍生物。在氨基酸中或者在任何其它酸原材料的远位置中，胺的合适的保护基，可以是任何基团，其除去了胺官能度的碱性和亲核性，包括氨基甲酸酯保护基，如Boc。

利用市售可得的类似物，一些酸是更容易制备的。例如，6-甲基吡啶-4-羧酸是通过2-氯-6-甲基吡啶-4-羧酸的脱氯作用制备的。某些类型的被取代的氟-苄腈和苯甲酸可通过溴-二氟代苯获得，通过在高温(80-120℃)在相容溶剂如N，N-二甲基甲酰胺中在碱如碳酸钾的存在下用合适的亲核试剂如咪唑置换一个氟基团延长的时间周期来实现。溴代基团可以随后被精心制成如上的酸或腈。

1，3-二取代的和1，3，5-三取代的苯甲酸和苄腈可以通过利用容易可得的被取代的间苯二甲酸衍生物来制备。二酯的单水解允许酸与各种试剂的选择性反应，最典型地，活化剂如亚硫酰氯，草酰氯或氯甲酸异丁酯等。由活化的酸，许多产物是可得的。除通过如上所述的脱水形成腈所用的伯酰胺外，还原成羟基甲基类似物可以在混合酸酐或酰基氯上进行，使用各种还原剂如氢化硼钠，在相容溶剂如四氢呋喃中。羟基甲基衍生物可以进一步被还原为甲基类似物，使用催化氢化，利用适当的催化剂源如钯/碳，在适当的溶剂如乙醇中。羟基甲基基团还可用于任何适用于苄醇(benzylic alcohols)的反应，如酰化、烷基化、转变为卤素等。这种类型的卤代甲基苯甲酸还可由甲基衍生物的溴化获得，当不是市售可得的时候。通过羟基甲基衍生物的烷基化所获得的醚还可通过，使用适当的碱如碳酸钾或氢氧化钠，在适当的溶剂如四氢呋喃或醇中，与适当的醇的反应由卤代甲基芳基苯甲酸酯衍生物获得。当存在其它取代基时，这些还可用于标准转变反应。用酸和亚硝酸钠处理苯胺可以获得重氮盐，使用四氟硼酸，其可被转变成卤化物如氟化物。在合适的碱如碳酸钾的存在下，苯酚与烷基化剂反应而形成芳族醚。

式I的化合物的异噁唑前体的形成

或

或G³＝Cl，Br或OH

                方案2

式IX的化合物，其中G1和/或G2是来自如式I所定义的中间体或基团的部分，可以在碱性条件下使用合适的碱如碳酸氢钠或三乙胺在合适的温度(0℃-100℃)在溶剂如甲苯中通过式VI和VII的化合物之间的1，3-偶极环加成作用来制备。类型VI的化合物的合成先前已经在文献中进行了描述，例如Kim，Jae Nyoung；Ryu，Eung K；J.Org.Chem.(1992)，57，6649-50。与类型VII的乙炔的1，3-偶极环加成作用还可以使用类型VIII的被取代的硝基甲烷，在碱如三乙胺存在下在高温(50-100℃)通过用亲电子试剂如PhNCO活化来进行。Li，C-S.；Lacasse，E.；Tetrahedron Lett.(2002)43；3565-3568。若干类型VII的化合物是市售可得的，或者可以通过本领域技术人员熟知的标准方法来合成。

                   方案3

或者，式I的化合物，使用碱性条件(参见方案3)，使用碱如氢化钠或叔丁醇钾，其可获自甲基酮X和酯的克莱森(Claisen)缩合，可得到式XI的化合物，通过缩合和随后环化，使用羟胺，例如以盐酸盐的形式，在高温(60-120℃)，而得到中间体XII。

当然，对于两种方法来说，中间体如IX和XII的随后的官能团转变可能是必需的。在如XII中的酯基团的情况下，这些转变可包括但不限于以下三种程序之任一种：a)完全还原，使用合适的还原剂如LAH，在溶剂如THF中。b)部分还原，使用合适的选择性还原剂，如DIBAL，随后加成烷基金属试剂。c)加成烷基金属试剂，如卤化烷基镁，在溶剂如甲苯或THF中，随后还原，例如借助于氢化硼钠/甲醇。

式I的化合物的四唑前体的形成

                       方案4

式I的化合物，其中X是四唑，如在中间体XVI(M＝H或甲基)中的，是通过芳基磺酰腙XIV与源自苯胺XIII的重氮盐之间的缩合制备的(方案4)。四唑中间体XV，获自重氮盐XIII和肉桂醛的芳基磺酰腙(M＝H或Me)，可以被分解而提供醛(M＝H)或酮(M＝Me)XV，直接地，在一锅法中，使用试剂如臭氧或通过二醇使用二羟基化试剂如四氧化锇，随后是使用试剂如乙酸铅(IV)的随后的分解。[J.Med.Chem.2000，43，953-970]

烯烃还可以在一锅中被转化为醇，通过臭氧分解，随后用还原剂如氢化硼钠进行还原。醛XV(M＝H)可被还原为式XVII(M＝H)的伯醇，使用众所周知的还原剂如硼氢化钠或锂，在溶剂如甲醇、THF或DMF中，在0-80℃之间的温度下。仲醇，其中M不是H，还可由式XVI(M＝H)的醛形成，通过有机金属试剂例如格氏试剂(例如MeMgX)的加成反应，在溶剂如THF中，在-78℃到80℃之间的温度下，并且典型地在0℃和室温之间进行。

氨基[1，2，4]三唑中间体的制备

                        方案5

参照方案5，通过用携带离去基团(LG)的适当的酰化剂，在合适的溶剂如THF、吡啶或DMF中，在-20至100℃，处理碳腙(carbonohydrazonic)二酰胺XX来获得氨基[1，2，4]三唑XXII。反应最初导致打开了中间体XXI，其自然地形成三唑环，或者能够在例如吡啶或者DMF中在50-200℃加热来实现。LG可以是氯或任何其他适合的LG，例如通过相应的酸的原位处理形成的(LG是OH)，使用如下文中所述的标准活化试剂。碳腙(carbonohydrazonic)二酰胺XX可以由异硫脲XVIII形成，其中S-烷基(例如S-Me，如方案4所示的)部分用作离去基团，当用肼处理时，在溶剂如吡啶、甲醇、乙醇、2-丙醇、THF、DMSO等中，在-20至180℃。打开的中间体XXI还可以通过在与就和肼的反应所述相同条件下用酰肼处理异硫脲而直接形成。异硫脲是通过在丙酮、EtOH、THF、DCM等等中在-100至100℃用例如MeI或EtI的S-烷基化相应的硫脲而获得的。

参考方案6，醇中间体可以例如通过标准方法被转化为相应卤化物(例如LG＝Cl、Br等)，通过利用例如与碘、N-溴代琥珀酰亚胺或N-氯代琥珀酰亚胺的结合的三苯基膦，或者通过用三溴化磷或亚硫酰氯的处理。以类似的方式，通过使用适当的磺酰卤或磺酰酸酐，在非亲核碱与醇的存在下，醇可以被转化为其它的LG如甲磺酸盐或甲苯磺酸盐，从而获得相应的磺酸盐。烷基氯或磺酸盐可以被转化为相应的溴化物或碘化物，通过用溴化物盐，例如LiBr，或碘化物盐的处理。

随后描述的非限制性制备最终化合物的方法是通过绘图举例说明和例举的，其中中间体的一般基团，或其它结构单元相应于式I的那些。应将理解的是含任何其它一般基团或结构单元的中间体，相比于式I的那些，可被用于举例说明的反应中，条件是这种基团或单元不妨碍反应并且其可以在随后的阶段被化学转化为式I的相应基团或单元，这是本领域技术人员熟知的。

通过连接到亲核的三唑氮

                    方案6

参考方案6，式I的化合物可以通过经过亲核置换离去基团(LG)的键形成来制备，其中三唑NH部分作为亲核试剂。处于其阴离子形式的三唑的氮原子，在合适的溶剂如LDA或nBuLi/THF、二乙醚或甲苯，或者NaH或NaOtBu/例如DMF，或者K₂CO₃/乙腈或酮如2-丁酮中，在-100至150℃的温度，通过用碱处理相应的质子化中性原子而形成。LG优选地是氯、溴、OMs和OTs。亲核反应还可以以立体选择性方式来进行，通过使用对映异构纯的或富集的原材料，其中离去基团LG连接到立构中心。任选地，催化或化学计量数量的碱金属碘化物，如LiI，可以存在于反应中，以便于其通过原位置换离去基团而碘代。

                       方案7

式I的化合物还可以由中间体XXIV来制备，通过在溶剂如DMSO或醇中，在50℃-150℃的温度，根据方案7，与酰肼的反应。中间体XXIV可以由XXIII和XIX形成，通过用碱如NaH或NaOtBu/DMF或NMP或K₂CO₃/乙腈处理，在-100至150℃的温度。

本发明的实施方案现将通过以下非限制性的实施例来举例说明。

一般方法

所有的起始原料是市售可得的或以前在文献中所描述的。1H和13C NMR谱在Bruker 300(300MHz Bruker)，DPX400(400MHz)或Varian+400光谱仪(100MHz)之一上记录，使用TMS或残留溶剂信号作为参照。NMR测量以δ尺度(δ)来进行。质谱记录在QTOF GlobalMicromass或WatersLCMS上，后者由Alliance 2795(LC)和ZQ单四极质谱仪组成。所述质谱仪装备有以正离子或负离子模式操作的电喷射离子源。离子喷射电压为±3kV，质谱仪从m/z 100-700扫描，扫描时间0.8s。柱：X-Terra MS，Waters，C8，2.1 x 50mm，3.5μm，柱温设定为40℃。施加线性梯度，以0％-100％乙腈/4分钟操作，流动速率0.3mL/min。流动相：乙腈/10mM乙酸铵/5％乙腈/MilliQ Water。制备色谱法在具有二极管阵列检测器的Gilson自动制备HPLC上进行。柱：XTerra MS C8，19 x 300mm，7μm。梯度，乙腈/0.1M乙酸铵/5％乙腈/Milliq Water，通常以20％-60％乙腈进行，13min。流率：20mL/min。MS-触发的prep-LC在Waters自动提纯LC-MS系统上进行，其具有二极管阵列检测器和ZQ质量检测器。柱：XTerra MS C8，19 x 100mm，5μm.梯度，乙腈/0.1M乙酸铵/5％乙腈/Milliq Water，通常以0％-100％乙腈进行，10min。流率：20mL/min。有时候，通过chromatotron的提纯是在旋转硅胶/石膏(Merck，60 PF-254，含有硫酸钙)涂布的玻璃片上进行的，后者具有2mm的涂层，使用TC Research 7924T chromatotron。或者，在产物提纯期间使用Chem Elut萃取柱(Varian，cat # 1219-8002)和Mega BE-SI(Bond Elut Silica)SPE柱(Varian，cat # 12256018；12256026；12256034)。

微波加热是在以2450MHz产生连续辐照的Smith SynthesizerSingle-型微波谐振腔中进行的(Personal Chemistry AB，Uppsala，Sweden)。

实施例

本发明现将通过下列非限制性的实施例来说明。

实施例1：2-氯-N-羟基-乙脒

使用Shine等，J.Heterocyclic Chem.(1989)26：125-128的方法的变体，使用冷水浴，将氯乙腈(20g，265mmol)、盐酸羟胺(18.4g，265mmol)和水(66mL)的溶液冷却至15℃。按部分地将碳酸钠(14g，132mmol)添加到反应混合物，保持温度低于30℃。使用温水浴，在30℃搅拌反应混合物1小时。将固体氯化钠添加到反应混合物。用二乙醚萃取水相(4次，150mL)。将合并的有机相干燥(硫酸钠)，过滤并且在真空中浓缩。粗制残余物用二乙醚/己烷混合物研磨而分离标题化合物(13.5g)，为柠檬黄固体。

¹H NMR(CDCl₃)：δ(ppm)4.71(宽峰s，2H)，4.04(s，2H)。

实施例2：3-氯甲基-5-m-甲苯基-[1，2，4]噁二唑

在室温下，将3-甲基-苯酰氯(802μL，6.1mmol)填加到2-氯-N-羟基-乙脒(440mg，4.1mmol)/二氯甲烷(10mL)的悬浮液。搅拌30分钟后，添加三乙胺(622μL，4.5mmol)并且再搅拌1小时。用二氯甲烷稀释反应混合物，用水和盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤并且在真空中浓缩。使用10-20％乙酸乙酯/己烷的快速柱色谱法得到814mg的无环酯中间体。将DMF添加到该中间体中并且随后在135℃加热4小时来进行环化至噁二唑。在冷却后，用水(3次)和盐水洗涤反应混合物，用无水硫酸钠干燥，过滤和浓缩。在硅胶上使用5％乙酸乙酯/己烷，通过快速柱色谱法提纯，得到标题化合物469mg(54％，在2步骤中)，白色固体。

¹H NMR(CDCl₃)：δ(ppm)7.99(s，1H)，7.97(m，1H)，7.43(d，2H)，4.68(s，2H)，2.45(s，3H)。

实施例3：3-(3-氯甲基-[1，2，4]噁二唑-5-基)-苄腈

如对实施例2所述的，使用实施例1的标题化合物(4.05g，37.4mmol)和3-氰基苯甲酰氯(6.2g，37.4mmol)，制备标题化合物，得到3.57g(43％)。

¹H NMR(CDCl₃)：δ(ppm)8.47(宽峰s，1H)，8.41(dd，1H)，7.91(dd，1H)，7.72(t，1H)，4.70(s，2H)；GC-MS(M+)：219。

实施例4：3-氯甲基-5-(3-氯-苯基)-1，2，4-噁二唑

3-氯苯酸(2.82g，18mmol)，EDCI(3.46g，18mmol)，HOBt(2.76g，18mmol)和实施例1的标题化合物(1.75g，16.2mmol)[Chem.Ber.1907，40，1639]在DMF(40mL)中。在DMF(40mL)中在135℃加热所得的中间体。使用2％丙酮/己烷，在硅胶上，通过SPE色谱法进行提纯，得到标题化合物(1.46g，39％收率)。

¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：δ(ppm)8.17(m，1H)，8.07(dd，1H)，7.60(m，1H)，7.55(t，1H)，4.69(s，2H)。

实施例5：1-[5-(3-氯苯基)-1，2，4-噁二唑-3-基]乙基甲磺酸酯

步骤A：N′，2-二羟基丙亚酰胺基酰胺

在室温将盐酸羟胺，44.2g(0.64mol)和25.5g(0.64mol)氢氧化钠溶解在乙醇(500mL)中并且搅拌3小时。在过滤后，将8.11g(0.11mol)2-羟基丙腈添加到该滤液中，随后搅拌4小时。在浓度至干燥后，获得副标题化合物，其直接用于下一步中。

¹H NMR(DMSO-d6)：δ(ppm)8.88(s，1H)，5.15(s，1H)，5.02(s，1H)，4.00(q，1H)，1.19(d，3H)。

步骤B：1-[5-(3-氯苯基)-1，2，4-噁二唑-3-基]乙醇

在冰浴上，使用23.5mL DEA/THF(200ml)，冷却获自步骤A的粗制的材料(6.45g)。向该浆料中添加21.94g 3-氯苯甲酰氯。将混合物升温至室温并且搅拌2小时。添加Et₂O(200ml)，用饱和NH₄Cl水溶液洗涤并且再萃取水层，在合并与浓缩有机层随后在真空中干燥以后得到27.24g，其直接用于下一步。将所述材料溶解在乙醇(250ml)中并且回流1小时，随后添加14.0g(170mmol)乙酸钠/水(40mL)。在回流过夜后，冷却至室温并且添加水(250ml)，在真空中浓缩该混合物至其体积的约1/2，得到沉淀物，其被滤出并且从EtOAc/庚烷中再结晶，得到6.45g(25％)的副标题化合物。

¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：δ(ppm)8.14(s，1H)，8.02(d，1H)，7.57(d，1H)，7.47(t，1H)，5.04-5.14(m，1H)，2.51(d，1H)，1.67(d，3H)。

步骤C：1-[5-(3-氯苯基)-1，2，4-噁二唑-3-基]乙基甲磺酸酯

将甲烷磺酰氯(40μL，0.49mmol)添加到TEA(95μL，0.67mmol)和步骤5B(100mg，0.45mmol)的副标题化合物/DCM(5ml)的混合物中。在搅拌15分钟后，用水和盐水洗涤混合物，干燥并且浓缩，获得标题化合物，收率135mg。

¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：δ(ppm)8.1(t，1H)，8.0(m，1H)，7.6(m，1H)，7.5(t，1H)，5.9(q，1H)，3.1(s，3H)，1.9(d，3H)。

实施例6.1：4-(3-氯-苯基)-2，4-二氧-丁酸乙酯

在0℃，将氢化钠(60％油分散体，1.24g，31.1mmol)按部分地添加到3-氯苯乙酮(4.0g，25.9mmol)和草酸二乙酯(4.54g，31.1mmol)/DMF(32mL)溶液中。在室温下搅拌混合物1小时并且然后在80℃加热半小时。在冷却后，用3N HCl处理混合物并随后用乙酸乙酯稀释。用水(三次)和饱和盐水洗涤有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤和浓缩。然后使用0-10％乙酸乙酯/己烷，在二氧化硅上，通过快速柱色谱法提纯所得的残余物，得到标题化合物(4.43g，67％，黄色固体)。

¹H NMR(CDCl₃)：δ(ppm)15.12(宽峰s，1H)，7.98(s，1H)，7.88(d，1H)，7.58(d，1H)，7.47(t，1H)，7.05(s，1H)，4.39(m，2H)，1.41(m，3H)。

根据实施例6.1的方法制备以下实施例

实施例7.1：5-(3-氯-苯基)-异噁唑-3-羧酸乙酯

在80℃加热实施例6.1的标题化合物(3.0g，11.8mmol)和盐酸羟胺(2.46g，35.4mmol)/甲醇(60ml)溶液4小时。在冷却后，过滤混合物，用冷的甲醇洗涤，得到标题化合物，为具有甲酯的混合物(2.0g，71％，白色固体)。

¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：δ(ppm)7.82(s，1H)，7.72(m，1H)，7.47(m，2H)，4.03(s，3H)。

根据实施例7.1的方法制备以下实施例

实施例8.1：[5-(3-氯-苯基)-异噁唑-3-基]-甲醇

在室温下将氢化锂铝(320mg，8.4mmol)慢慢地加入到实施例7.1中获得的混合物(2.0g，8.4mmol)/THF(100ml)溶液中。在1小时后，用水猝灭反应混合物并随后用乙酸乙酯萃取。用水和饱和盐水洗涤有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，和浓缩。使用15-40％乙酸乙酯/己烷，通过快速柱色谱法，然后提纯所得的残余物，得到标题化合物(1.32g，75％，黄色固体)。

¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：δ(ppm)7.78(s，1H)，7.68(m，1H)，7.43(m，2H)，6.63(s，1H)，4.84(d，2H)，2.23(t，1H)。

实施例8.2：[5-(3-甲基-苯基)-异噁唑-3-基]-甲醇

以相似的方式，使用DIBAL-H作为还原剂并且在-78℃至0℃进行反应，获得标题化合物，白色固体(952mg，17％收率)。

¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：δ 7.62(s，1H)，7.60(d，1H)，7.37(t，1H)，7.26(d，1H)，6.59(s，1H)，4.84(s，2H))，2.44(s，3H)。

根据实施例8.2的方法制备以下实施例

实施例9.1：甲磺酸5-(3-氯-苯基)-异噁唑-3-基甲基酯

在0℃将三乙胺(965mg，9.5mmol)和甲磺酰氯化物(820mg，7.2mmol)添加到实施例8.1的标题化合物(1.0g，4.8mmol)/DCM(50ml)溶液。在1小时后，用冷的饱和碳酸氢钠猝灭反应混合物并随后用饱和盐水洗涤有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，得到标题化合物，为浅棕色固体(1.4g，100％)。

¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：δ(ppm)7.80(s，1H)，7.70(m，1H)，7.45(m，2H)，6.73(s，1H)，5.37(s，2H)，3.16(s，3H)。

根据实施例9.1的方法制备以下实施例

实施例10：1-[5-(3-氯-苯基)-异噁唑-3-基]-乙酮

在装备有搅拌棒的螺丝帽小瓶中，添加甲基碘化镁(3M，二乙醚)(0.79mL，2.38mmol)，甲苯(1mL)，四氢呋喃(0.39mL，4.77mmol)和三乙胺(1mL，7.15mmol)。将溶液冷却至0℃并且向其中添加实施例7.1的标题化合物(300mg，1.19mmol)/甲苯(5ml)的溶液。在0℃搅拌所得的混合物5小时。用1M盐酸(含水，6.5mL，6.5mmol)猝灭反应混合物，用甲苯(35mL)稀释，顺序地用水(50ml)、饱和碳酸氢钠(含水，30mL)、水(50ml)和盐水(30ml)洗涤。在真空中浓缩有机相。将分离的残余物溶解在甲醇(8ml)和20％氢氧化钾(含水，1mL)中。在45℃搅拌该混合物30分钟。此时，在真空中浓缩混合物。将分离的残余物溶解在甲苯(60ml)中，顺序地用水(50ml)、饱和碳酸氢钠(含水，50mL)和水(50ml)洗涤。在真空中浓缩有机相。使用2％乙酸乙酯/己烷，在硅胶上提纯粗制的残余物，来分离标题化合物，白色固体(156mg，60％)。

¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：δ(ppm)7.77(m，1H)，7.66(m，1H)，7.42(m，2H)，6.90(s，1H)，2.69(s，3H)。

实施例11：甲磺酸1-[5-(3-氯-苯基)-异噁唑-3-基]-乙酯

步骤A：1-[5-(3-氯-苯基)-异噁唑-3-基]-乙醇

在装备有搅拌棒的螺丝帽小瓶中，添加实施例10的标题化合物(100mg，0.45mmol)，氢化硼钠(34mg，0.90mmol)和甲醇(3ml)。在室温搅拌所得的混合物3小时。用水(30ml)和盐水(30ml)猝灭反应，用二氯甲烷萃取(3次，30mL)。干燥合并的有机相(硫酸钠)，过滤和浓缩，在真空中，而分离副标题化合物，白色固体(110mg)。

¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：δ(ppm)7.69(m，1H)，7.59(m，1H)，7.37(m，2H)，6.59(s，1H)，5.07(q，1H)，3.45(宽峰s，1H)，1.58(d，3H).

步骤B

在装备有搅拌棒的螺丝帽小瓶中，添加步骤12A的副标题化合物(110mg，0.49mmol)、二氯甲烷(3ml)和三乙胺(0.34mL，2.46mmol)。将混合物冷却至0℃并且向其中添加甲烷磺酰氯(0.08mL，0.98mmol)。在室温搅拌反应混合物30分钟。用饱和碳酸氢钠(含水，40mL)猝灭反应并且用二氯甲烷萃取(3次，30mL)。用盐水(40mL)洗涤合并的有机相，干燥(硫酸钠)，过滤和浓缩，在真空中，来分离标题化合物，棕色油。

¹H NMR 300MHz，溶剂)：δ(ppm)7.76(d，1H)，7.66(m，1H)，7.42(m，2H)，6.69(s，1H)，5.90(q，1H)，3.05(s，3H)，1.82(d，3H)。

实施例12：3-(3-羟甲基-异噁唑-5-基)-苄腈

步骤A：5-(3-碘苯基)异噁唑-3-羧酸甲酯

在0℃按部分地向3-碘苯乙酮(25.18g，102.3mmol)和草酸二甲酯(14.5g，123mmol)/DMF(125mL)溶液中添加氢化钠(60％油分散体，4.9g，123mmol)。在室温搅拌该混合物1小时并且然后在115℃加热1小时。在冷却后，用3M HCl处理混合物并随后用乙酸乙酯稀释。用水和饱和盐水洗涤有机层三次，用无水硫酸钠干燥，过滤和浓缩。色谱提纯(二氧化硅，0-10％乙酸乙酯/己烷)，得到标题化合物，黄色固体(24.2g，71.3％)。

¹H NMR 300MHz，溶剂)：δ(ppm)15.01(宽峰s，1H)，8.34(d，1H)，7.95(m，2H)，7.28(s，1H)，7.25(m，1H)，3.98(s，3H)。

步骤B：5-(3-碘-苯基)-异噁唑-3-羧酸甲酯

在回流下加热步骤12A的副标题化合物(33.9g，102mmol)和盐酸羟胺(21.3g，306mmol)/甲醇(450mL)的溶液4小时。在冷却后，过滤混合物和用冷的甲醇洗涤，得到副标题化合物(24.1g，72％，棕色固体)。

¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：δ(ppm)8.18(m，1H)，7.82(t，2H)，7.26(t，1H)，6.97(s，1H)，4.03(s，3H)。

步骤C：5-(3-氰基苯基)异噁唑-3-羧酸甲酯

在80℃搅拌获自步骤12B的产物、氰化锌(1.0g，3.04mmol)、四(三苯基膦)钯(O)(351mg，0.30mmol)/DMF(10mL)达10min。用乙酸乙酯稀释混合物并且滤过硅藻土，用水和饱和盐水洗涤三次，用无水硫酸钠干燥，过滤和浓缩。色谱提纯(二氧化硅，5-70％乙酸乙酯/己烷)得到副标题化合物，黄色固体(660mg，91％)。

¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：δ(ppm)8.12(m，1H)，8.07(dd，1H)，7.81(dd，1H)，7.67(dd，1H)，7.06(s，1H)，4.05(s，3H)。

步骤D：[5-(3-氰基苯基)异噁唑-3-羧酸

向步骤12C的产物(660mg，2.89mmol)/THF(10ml)中，添加LiOH(6.9ml的0.5M溶液)并且在70℃搅拌该混合物30分钟。冷却混合物，用水稀释和用1N HCl酸化至pH为2，过滤而得到597mg的产物，白色固体(96％收率)。

¹H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ(ppm)14.10(宽峰s，1H)，8.48(s，1H)，8.27(d，1H)，8.01(d，1H)，7.78(dd，1H)，7.60(s，1H)。

步骤E：3-(3-羟甲基-异噁唑-5-基)-苄腈

向步骤12D的产物(497mg，2.3mmol)/THF(10mls)悬浮液中，在0℃添加Et3N(323uL，2.3mmol)，氯甲酸乙酯(222uL，2.3mmol)并且在0℃搅拌反应1小时。过滤混合物并且在0℃向滤液滴加NaBH4(219mg，5.8mmol)/H2O(5ml)。添加完成后，在0℃搅拌反应1.5小时并且添加1N HCl。然后用醚稀释混合物，用水和饱和盐水洗涤有机层三次，用无水硫酸钠干燥，过滤和浓缩。色谱提纯(二氧化硅，0-10％乙酸乙酯/己烷)，得到标题化合物，白色固体(420mg，76％)。

¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：δ(ppm)8.08(d，1H)，8.05(dd，1H)，7.75(dd，1H)，7.41(dd，1H)，6.72(s，1H)，4.86(d，2H)，2.10(t，1H)。

实施例13：甲磺酸5-(3-氰基-苯基)-异噁唑-3-基甲基酯

在0℃将甲磺酰氯化物(111uL，1.43mmol)和三乙胺(265uL，1.9mmol)添加到3-[3-(1-羟乙基)异噁唑-5-基]苄腈(200mg，0.95mmol)/二氯甲烷(10mL)溶液。在0℃搅拌反应混合物30分钟，然后用冷的饱和碳酸氢钠洗涤。用盐水洗涤有机层，用硫酸钠干燥和在真空中浓缩而得到标题化合物，其被使用而无需进一步提纯(237mg的灰白色固体，90％)。

¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：δ(ppm)8.10(d，1H)，8.04(dd，1H)，7.77(dd，1H)，7.65(t，1H)，6.81(s，1H)，5.39(s，2H)，3.14(s，3H)。

实施例14.1：肉桂醛甲苯磺酰腙

肉桂醛(8.80g，66.6mmol)被添加到p-甲苯磺酰胺(12.44g，66.79mmol)/乙醇(70ml)。反应立即变为固体并且再添加乙醇(20ml)。在室温下搅拌反应1小时并且然后过滤。用甲醇洗涤固体并且通过下降的压力干燥，得到标题化合物，白色固体(17.5g，87％)。

¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：δ(ppm)8.23(s，1H)，7.88(d，2H)，7.60(d，1H)，7.34(m，6H)，6.83(m，2H)，2.43(s，3H)。

实施例14.2：2-甲基肉桂醛甲苯磺酰腙

将2-甲基-3-苯基丙烯醛(15.0g，102.6mmol)添加到p-甲苯磺酰胺(19.2g，102.9mmol)/乙醇(70ml)。反应立即变为固体并且还添加乙醇(20ml)。在室温下搅拌反应8小时并且然后过滤。用甲醇洗涤固体并且通过下降的压力干燥，得到标题化合物，白色固体(30.94g，96％)。

¹H NMR(300MHz，CD3OD)：δ(ppm)7.80(d，2H)，7.60(s，1H)，7.35(m，6H)，7.26(m，1H)，6.67(s，1H)，2.42(s，3H)，2.01(s，3H)，

实施例15：3-[5-((E)-苯乙烯基)-四唑-2-基]-苄腈

将亚硝酸钠(1.58，22.8mmol)的(15mL)水溶液通过滴液漏斗添加到3-氨基苄腈/水(15mL)、浓盐酸(10mL)和乙醇(20mL)溶液。使反应在0℃搅拌10分钟。将该溶液倒入滴液漏斗并且添加冰。将其滴加到肉桂醛甲苯磺酰腙(6.73g，22.4mmol)/吡啶(60mL)溶液中。使混合物搅拌过夜。用二氯甲烷萃取3次进行含水后处理。用盐水洗涤合并的层，用硫酸钠干燥，过滤和浓缩。通过柱色谱法(20％ EtOAc/己烷)部分提纯粗产物而得到6.12g(14％收率)的标题化合物，为浅紫色固体，其被直接用于下一步中。

实施例16.1：3-(3-氯-苯基)-5-苯乙烯基-2H-四唑

通过滴液漏斗将亚硝酸钠(540.9mg，7.839mmol)的水溶液(5mL)添加到3-氯苯胺/水(7mL)、浓盐酸(3mL)和乙醇(7mL)溶液。使反应在0℃搅拌10分钟。将该溶液倒入滴液漏斗并且添加冰。将其滴加到肉桂醛甲苯磺酰腙(2.3g，7.7mmol)/吡啶(20mL)溶液中。使其搅拌过夜。用DCM萃取3次进行含水后处理。用盐水洗涤合并的层，用硫酸钠干燥，过滤和浓缩。通过柱色谱法(20％EtOAc/己烷)提纯粗产物，得到标题化合物，为浅紫色固体(433mg，19％)。

¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：δ(ppm)8.21(m，1H)，8.09(dt，1H)，7.89(d，1H)，7.61(m，2H)，7.49(m，5H)，7.24(d，1H)。

实施例16.2：2-(3-氯苯基)-5-[(E)-1-甲基-2-苯基乙烯基]-2H-四唑

通过滴液漏斗将亚硝酸钠(654mg，9.5mmol)的水溶液(5ml)添加到3-氯苯胺(0.92mL，8.7mmol)/水(10mL)、浓盐酸(11.9ml)和乙醇(7ml)溶液。使反应在0℃搅拌10分钟。将该溶液倒入滴液漏斗并且添加冰。将其滴加到2-甲基肉桂醛甲苯磺酰腙(2.5g，7.9mmol)/吡啶(10ml)溶液中。在0℃将其搅拌1.5小时。用二氯甲烷萃取混合物3次。用盐水洗涤合并的层，用硫酸钠干燥，过滤和浓缩。通过柱色谱法(20％EtOAc/己烷)提纯粗产物，得到标题化合物，为红色固体(736mg，28％)。

¹H NMR(CDCl₃)δ(ppm)8.23(s，1H)，8.11(dd，1H)，7.94(s，1H)，7.55-7.30(m，7H)，2.50(d，3H)。

实施例17：5-苯乙烯基-2-间甲苯基-2H-四唑

通过向肉桂醛甲苯磺酰腙(1.21g，4.1mmol)/吡啶(30mL)溶液中添加由间甲苯基胺(0.44mL，4.1mmol)制备的重氮盐与亚硝酸钠水溶液(286mg，4.1mmol，在3mL水中)、盐酸(5.5mL，17.8mmol)/乙醇(4mL)，获得标题化合物(320mg，30％，暗黄色固体)。通过柱色谱法(3-6％EtOAc/己烷)提纯粗产物。

¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：δ(ppm)8.00(s，1H)，7.98(d，1H)，7.88(d，1H)，7.63(m，2H)，7.38-7.47(m，4H)，7.33(d，1H)，7.26(d，1H)，2.55(s，3H)。

实施例18：用于苯基四唑中间体的臭氧分解，随后用氢化硼钠醛/酮还原的一般程序

将苯基四唑溶解在二氯甲烷中并且将其冷却至-78℃。将臭氧鼓泡通过溶液达10-30分钟。使用10％ EtOAc:己烷TLC溶剂体系，检查反应的进程。一旦反应显现完成，将氢化硼钠(70mg/mmol四唑)和MeOH(～5mL/mmol)添加到溶液。使溶液平衡回到室温并且静置过夜。将水(5mL)和饱和氯化铵(5mL)添加到溶液中。在低压下浓缩混合物并且使用DCM、水和盐水进行含水后处理。使用无水硫酸钠干燥溶液。使用10％-35％ EtOAc:己烷溶剂体系进行标准快速柱。对样品进行NMR分析。下表显示了所进行的全部反应。

根据实施例18的一般程序，制备以下实施例。

实施例19：1-[2-(3-氯-苯基)-2H-四唑-5-基]-乙酮

将实施例16.3的标题化合物(1.50g，5.06mmol)溶解在二氯甲烷(79mL)中，并且将臭氧鼓泡通过溶液达15分钟。溶液从橙色变为深橙黄色。使用10％ EtOAc:己烷TLC溶剂体系检查反应完成。鼓泡氧气通过溶液达另外5分钟，而除去任何剩余的过量的臭氧。将二甲基硫醚(5mL)添加到溶液中并且使混合物平衡至室温。在真空条件下除去溶剂，剩下油状棕色物质。使用～15厘米二氧化硅和～3cm砂来制备3厘米快速柱。使用5％EtOAc:己烷溶剂体系操作所述柱。含产物的洗脱级分，其中收集和在低压下浓缩。使产物进行核磁分析。快速柱色谱法(二氧化硅，5％ EtOAc:己烷)得到893mg(79.4％收率)的标题化合物。

¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：δ(ppm)8.22(s，1H)，8.11(m，1H)，7.54(d，1H)，2.85(s，3H)。

实施例20：1-[2-(3-氯-苯基)-2H-四唑-5-基]-2-苯基-乙烷-1，2-二醇

将实施例16的标题化合物(127.0mg，0.446mmol)称入小瓶中并且添加柠檬酸(171mg，0.892mmol)，随后叔丁醇和水(3mL)的1:1混合物。添加锇酸钾氧化物水合物(0.3mg)，随后4-甲基吗啉N-氧化物(在1.5mL的水中)，并且使反应搅拌过夜。过滤反应，并且用水和1M盐酸洗涤，得到标题化合物，为米色固体(95.4mg，68％)。

¹H NMR(300MHz，CD₃OD)：δ(ppm)8.09(s，1H)，8.012(dt，1H)，7.58(m，2H)，7.25(m，5H)，5.15(s，2H)。

实施例21：1-苯基-2-(2-间甲苯基-2H-四唑-5-基)-乙烷-1，2-二醇

使用柠檬酸(2.1g，10.9mmol)、锇酸钾氧化物水合物(小勺)、4-甲基吗啉N-氧化物(710mg，6.1mmol)/叔丁醇和水(52mL)的1:1混合物，由实施例17的标题化合物(1.44g，5.5mmol)获得标题化合物(2.26g，所用粗制的，在下一步后确定的收率)。不进一步提纯来自萃取的粗产物，但在下一步中直接使用。

实施例22：2-(3-氯-苯基)-2H-四唑-5-甲醛

将实施例21的标题化合物的粗产物(50.0mg，0.158mmol)称重入小瓶并且添加甲苯(3mL)。在搅拌下添加碳酸钾(47.0mg，0.340mmol)和乙酸铅(IV)(70.0mg，0.158mmol)。使反应搅拌2.5小时。过滤反应，将乙酸乙酯添加到该滤液并且进行含水后处理。用盐水洗涤有机层，用硫酸钠干燥，过滤和浓缩。通过柱色谱法(40％ EtOAc/己烷)提纯粗产物，得到纯的产物，白色固体(22.3mg，68％)。

¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：δ(ppm)10.34(s，1H)，8.27(s，1H)，8.14(m，1H)，7.58(d，2H)。

实施例23：3-(5-甲酰-四唑-2-基)-苄腈

将实施例15的标题化合物(400mg，1.46mmol)溶解在二氯甲烷(20mL)中，将臭氧鼓泡通过溶液达15分钟。溶液从红色变为黄色。使用20％ EtOAc:己烷TLC溶剂体系，然后检查反应完成。然后向溶液添加二甲基硫醚(1.5mL)并且使混合物平衡至室温过夜。然后在真空条件下除去溶剂。快速柱色谱法(二氧化硅，20-30％ EtOAc:己烷)得到270mg(91.7％收率)的产物。

¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：δ(ppm)10.36(s，1H)，8.57(s，1H)，8.54(d，1H)。

实施例24：2-间甲苯基-2H-四唑-5-甲醛

使用碳酸钾(2.02g，14.6mmol)和乙酸铅(IV)(2.52g，5.7mmol)/甲苯(35mL)和二氯甲烷(20mL)，由实施例23的标题化合物的粗产物(粗制的，来自5.5mmol以上反应)，获得标题化合物(870mg，84％，2步骤)。通过柱色谱法(10％ EtOAc/己烷)提纯粗产物。

¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：δ(ppm)10.34(s，1H)，8.06(s，1H)，8.03(d，1H)，7.50(t，1H)，7.40(d，1H)，2.50(s，3H)。

实施例25：3-(5-羟甲基-四唑-2-基)-苄腈

将二甲基甲酰胺(7mL)添加到实施例24的标题化合物(237mg，1.19mmol)并且将混合物冷却至0℃。Et₂O(5mL)和氢化硼钠(952mg，23.8mmol)，其中然后被添加到反应中，并且使反应进行15分钟。在这段时间后，将反应转移到分液漏斗，滴加3M HCl(10mL)至反应中。然后使用二氯甲烷、水和盐水进行含水后处理。用无水硫酸钠干燥有机层，过滤，和浓缩。快速柱色谱法(二氧化硅，35％ EtOAc:己烷)得到标题化合物，白色固体(201mg，85％)

¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：δ(ppm)8.47(s，1H)，8.45(d，1H)，7.81(d，1H)。

实施例26.1：1-[2-(3-氯-苯基)-2H-四唑-5-基-乙醇

在氩气下将实施例22的标题化合物(75.6mg，0.362mmol)溶解在THF(2mL)中并且将烧瓶浸入冰中。滴加溴化甲基镁(1M溶液/丁基醚0.51mL，0.507mmol)，同时在冰中冷却反应。在0℃，15分钟后，移走冰浴并且在室温下搅拌反应2小时。添加盐酸(1M)来猝灭反应并且使用乙酸乙酯萃取3次，进行含水后处理。用盐水洗涤合并的有机层，用硫酸钠干燥，过滤和浓缩。通过柱色谱法(3％ MeOH/DCM)提纯粗产物，得到标题化合物，为透明的油(62.4mg，77％)。

¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：δ(ppm)8.18(s，1H)，8.06(m，1H)，7.50(m，2H)，5.32(m，1H)，2.69(d，1H)，1.76(d，3H)。

根据实施例26的方法制备以下实施例

实施例27：(2-间甲苯基-2H-四唑-5-基)-甲醇

使用硼氢化锂(3.5mL，7mmol)/THF(10ml)，由2-间甲苯基-2H-四唑-5-甲醛(229mg，1.22mmol)获得标题化合物(221mg，96％，米色固体)。通过柱色谱法(20-30％ EtOAc/己烷)提纯粗产物。

¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：δ(ppm)7.97(s，1H)，7.94(d，1H)，7.46(t，1H)，7.33(d，1H)，5.08(d，2H)，2.50(s，3H)，2.40(t，1H)。

实施例28：用于四唑甲磺酸酯形成的一般程序

将1-[2-(3-取代的-苯基)-2H-四唑-5-基]-(乙/甲)醇溶解在二氯甲烷(10mL/mmol)中并且冷却至0℃。将三乙胺(2当量)和甲磺酰氯(1.5当量)添加到反应并且搅拌该混合物1小时。将冷的碳酸氢钠添加到溶液中并且使用二氯甲烷和盐水进行含水后处理。然后用无水硫酸钠干燥有机层，过滤，和浓缩。下表描述了所进行的甲磺硫化。

实施例29.1：氨基-三唑合成：2-(甲基硫代)-4，5，6，7-四氢-1H-1，3-二氮杂

将甲基碘(0.55mL，1.15mmol)添加到1，3-二氮杂环庚烷(diazepane)-2-硫酮(thione)(J.Med.Chem.1981，24，1089)(1.00g，7.68mmol)/丙酮(8mL)溶液。使反应混合物回流15min。将EtOH添加到热溶液中来溶解固体。在冷却至室温后，添加己烷并且通过过滤收集沉淀物，用己烷洗涤，并且干燥而得到1.79g(86％)的粗制的标题化合物，其被直接用于下一步中。

实施例29.2：2-甲基硫烷基-1，4，5，6-四氢-嘧啶

在70℃，在密封烧瓶中，在甲醇(100ml)中搅拌四氢-嘧啶-2-硫酮(thione)(45g，387mmol)和碘代甲烷(48mL，774mmol)过夜。用二乙醚稀释反应并且形成沉淀物，将其过滤。将固体溶解在氢氧化钠(30g)/水(400mL)中并且用按份的氯仿进行萃取。有机萃取物用硫酸钠干燥，过滤和浓缩而得到标题化合物(68g，98％)。

实施例30：1，3-二氮杂环庚(diazepan)-2-酮腙氢碘酸盐

将水合肼(0.44mL，7.23mmol)添加到2-(甲基硫代)-4，5，6，7-四氢-1H-1，3-二氮杂

氢碘酸盐(1.79d，6.58mmol)/EtOH(12mL)溶液。使反应混合物回流5小时并且将其冷却至室温。添加Et₂O并且通过过滤收集产物，用Et₂O洗涤，在真空条件下干燥，而得到1.46g(100％)的粗制的标题化合物，其被直接用于下一步。

实施例31：3-吡啶-3-基-6，7，8，9-四氢-5H-[1，2，4]三唑并[4，3-a][1，3]二氮杂

在160℃在微波反应器中加热1，3-二氮杂环庚(diazepan)-2-酮腙氢碘酸盐(1.00g，3.9mmol)和烟酰氯(nicotinoyl chloride)盐酸盐(695mg，3.9mmol)的混合物10分钟。将反应混合物纯化到饱和Na₂CO₃溶液中，并且用DCM进行萃取。有机相被干燥和浓缩。快速色谱法(DCM/MeOH20:1)得到1.74g的粗制的标题化合物，其被直接用于下一步。

¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：δ(ppm)8.66(d，2H)，7.44(d，2H)，3.15(m，2H)，3.86(m，2H)，1.89(s，4H)。

实施例31，备选的合成

将烟酰肼(nicotinoyl hydrazide)(5g，36mmol)添加到2-(甲基硫代)-4，5，6，7-四氢-1H-1，3-二氮杂

(2.32g，30mmol)/n-BuOH(20mL)溶液。在180℃加热反应混合物20分钟并且将其冷却至室温。使混合物直接经受硅胶快速色谱法(EtOAc和5％ MeOH/NH3)而得到4.95g的标题化合物。

实施例32：用于形成环状三唑中间体的一般程序

将酰基氯添加到小瓶，随后吡啶(0.5mL/mmol)。然后将肼(1当量)添加到溶液并且在130℃回流过夜。使用碳酸钾来碱化溶液并且然后使用EtOAc、水和盐水进行含水后处理。用无水硫酸钠干燥有机层，过滤，和浓缩。使用10-20％ MeOH:EtOAc溶剂体系，操作SPE/快速柱。洗脱级分被收集和浓缩。下表描述了所形成的氨基三唑。

以相似的方式，合成了以下化合物：

实施例33：3-(2-甲氧基-吡啶-4-基)-5，6，7，8-四氢-[1，2，4]三唑并[4，3-a]嘧啶

将实施例32.9的标题化合物(200mg)和钯/碳催化剂10％(100mg)合并。用氢气冲洗反应。还将EtOH(3.2mL)和三乙胺(0.6mL)加入到小瓶中。在室温下搅拌溶液过夜。然后将溶液滤过硅藻土。运行10％ 1MNH3 MeOH/DCM二氧化硅快速柱以便除去任何痕量的盐。浓缩溶液并且进行NMR。浓缩溶液而得到白色固体粉末(163mg，75％收率)。

¹H NMR(CDCl₃)，δ(ppm)：8.27(d，1H)，7.28(m，1H)，6.99(s，1H)，6.05(宽峰s，1H)，4.14(t，2H)，4.1(s，3H)，3.6(t，2H)，2.1(m，2H)

实施例34：5-(5，6，7，8-四氢-[1，2，4]三唑并[4，3-a]嘧啶-3-基)-烟腈(nicotinonitrile)

通过单结点微波辐照，在200℃加热实施例32.5的标题化合物(395mg，1.4mmol)、NaCN(138mg，2.8mmol)和NiBr₂(308mg，1.4mmol)/NMP(3mL)的悬浮液45分钟。在冷却后，用二氯甲烷(50mL)和13％氨水(50mL)稀释反应并且分离各层。用六份二氯甲烷萃取水层(总体积为400mL)。干燥(硫酸钠)合并的有机层，过滤和浓缩。通过反相HPLC提纯残余物，用含5％乙腈的乙腈/0.1M乙酸铵的梯度在pH＝5下进行洗脱，而得到标题化合物(65mg，20％)，在冷冻干燥后呈固体。

¹H NMR(400MHz，CD₃OD)：δ(ppm)9.13(d，1H)，8.99(d，1H)，8.48(t，1H)，4.15(t，2H)，3.42(t，2H)，2.07(m，2H)。

实施例35.1：3-吡啶-3-基-8-(2-间甲苯基-2H-四唑-5-基甲基)-5，6，7，8-四氢-[1，2，4]三唑并[4，3-a]嘧啶

向螺口小瓶中添加实施例32.7的标题化合物(60mg，0.3mmol)、叔丁醇钠(58mg，0.6mmol)、N，N-二甲基甲酰胺(2mL)和四氢呋喃(3mL)。在55℃加热反应混合物20min，向反应混合物中滴加实施例28.2的标题化合物/N，N-二甲基甲酰胺(1mL)的溶液。在55℃搅拌该混合物1小时，在真空中浓缩。在DCM(10ml)中稀释残余物，添加水(10mL)。用DCM(10ml)萃取水相两次，用盐水(20mL)洗涤合并的有机相两次，用无水硫酸钠干燥并且在真空中浓缩。使用2M氨/甲醇：二氯甲烷＝5∶95，在硅胶上提纯粗制的残余物，得到黄色油作为产物(20.7mg，25％)。

¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：δ(ppm)8.88(d，1H)，8.66(dd，1H)，8.04(dd，1H)，7.91(m，2H)，7.42(m，2H)，7.29(dd，1H)，5.17(s，2H)，4.09(t，2H)，3.6(t，2H)，2.46(s，3H)，2.23(m，2H)。

以相似的方式，合成了以下化合物：

实施例36.1：4-{8-[5-(3-氯-苯基)-[1，2，4]噁二唑-3-基甲基]-5，6，7，8-四氢-[1，2，4]三唑并[4，3-a]嘧啶-3-基}-1H-吡啶-2-酮

将实施例35.18的标题化合物(45mg，0.11mmol)和盐酸吡啶(1.0g，8.7mmol)混合成固体并且在油浴中在145℃加热10分钟。将反应混合物溶解在水(50ml)中并且用DCM萃取(4次，10mL)。将合并的有机层浓缩并且使用MeCN/0.15％ TFA/水：MeCN 95:5的梯度借助于制备反相HPLC来提纯而得到标题化合物(32％)。

¹H NMR(400MHz，CD₃OD)：δ(ppm)8.11(s，1H)，8.04(d，1H)，7.67(m，1H)，7.57(m，2H)，6.82(s，1H)，6.73(d，1H)，4.96(s，2H)，4.22(t，2H)，3.69(t，2H)，2.25(m，2H)。

以相似的方式，合成了以下化合物：

实施例37：5-甲基-2H-哒嗪-3-酮

在四氢呋喃中，在室温下，强力搅拌5-羟基-4-甲基-5H-呋喃-2-酮(10.0g，87.6mmol)和水合肼(4.38g，87.6mmol)1.5小时。固体开始沉淀，在60℃加热反应过夜。将粗制的反应混合物浓缩到硅胶上并且通过柱色谱法提纯(0-10％甲醇/1:1EtOAc/二氯甲烷)而得到7.7g(80％)的标题化合物。

¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：δ(ppm)11.38(宽峰s，1H)，7.66(s，1H)，6.74(s，1H)，2.25(s，3H)。

实施例38：6-氧-1，6-二氢-哒嗪-4-羧酸

在浓硫酸(13mL)中搅拌实施例37的标题化合物(0.90g，8.2mmol)并且将其加热到45℃。在30分钟内按份地添加高锰酸钾(3.6g，12mmol)而避免温度升高。在45℃，再使反应搅拌30分钟。然后使反应冷却至室温并且将冰添加到反应混合物。通过真空过滤收集所得的沉淀物，用冷水和二乙醚洗涤而得到0.98g(87％)的标题化合物，为浅绿色固体。

¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：δ(ppm)13.39(宽峰s，1H)，8.12(s，1H)，7.22(s，1H)。

实施例39.1：6-氧-1，6-二氢-哒嗪-4-羧酸乙酯

将实施例38的标题化合物(1.0g，7.13mmol)添加到乙醇(16mL)和乙酰氯(4mL)溶液，将所得的悬浮液加热到75℃并且搅拌过夜。反应混合物被浓缩，用水稀释，用二氯甲烷萃取。有机相用硫酸钠干燥，过滤和浓缩而得到标题化合物。

¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：δ(ppm)10.91(宽峰s，1H)，8.26(s，1H)，7.53(s，1H)，4.43(q，2H)，1.40(t，3H)。

以相似的方式，合成了以下化合物：

实施例40：6-氧-1，6-二氢-嘧啶-4-羧酸

向氢氧化钠(1.92g，48.1mmol)/水(100ml)溶液中添加二乙基草乙酸钠(10.6g，50.4mmol)和甲脒乙酸盐(5.0g，48mmol)，并且在室温下使反应搅拌过夜。用盐酸将反应混合物酸化至pH为2，随后将其冷却至0℃。形成沉淀，通过真空过滤将其收集。所获得的产物是标题化合物(1.12g)，并且将其粗制地用于下一步中。

¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：δ(ppm)8.24(s，1H)，6.84(s，1H)。

实施例41.1：6-氧-1-(2-三甲基甲硅烷基-乙氧基甲基)-1，6-二氢-哒嗪-4-羧酸乙酯

在0℃在二甲基甲酰胺(20mL)和二异丙基乙胺(1.39mL，8.02mmol)中搅拌实施例39.1的标题化合物(0.90g，5.35mmol)并且添加(2-氯甲氧基-乙基)-三甲基-甲硅烷(1.88mL，10.7mmol)，使反应继续在0℃搅拌2小时，然后在室温过夜。用EtOAc稀释反应混合物并且用水和盐水洗涤。有机相用硫酸钠干燥，过滤和浓缩到硅胶上。通过柱色谱法(0-20％ EtOAc/己烷)提纯产物，得到标题化合物，为透明的油(0.85g，53％)。

¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：δ(ppm)8.23(d，1H)，7.51(s，1H)，5.50(s，2H)，4.41(q，2H)，3.71(m，2H)，1.41(t，3H)，0.97(m，2H)，0.00(s，9H)。

以相似的方式，合成了以下化合物：

实施例42.1：6-氧-1-(2-三甲基甲硅烷基-乙氧基甲基)-1，6-二氢-哒嗪-4-羧酸酰肼

在乙醇中搅拌实施例41.2的标题化合物(0.85g，2.85mmol)。将水合肼(0.720g，14.2mmol)添加到溶液中并且在50℃搅拌反应1小时。将反应浓缩并且用甲醇和二乙醚研磨以生产沉淀物，其通过真空过滤来收集，得到标题化合物(0.56g，57％)。

¹H NMR(300MHz，(CD₃)₂SO)：δ(ppm)10.18(宽峰s，1H)，8.16(d，1H)，7.22(d，1H)，5.33(s，2H)，4.68(s，2H)，3.62(t，2H)，0.85(t，2H)，0.05(s，9H)。

以相似的方式，合成了以下化合物：

实施例43.1：5-(5，6，7，8-四氢-[1，2，4]三唑并[4，3-a]嘧啶-3-基)-2-(2-三甲基甲硅烷基-乙氧基甲基)-2H-哒嗪-3-酮

与异丙醇(2mL)和三乙胺(321μL，2.30mmol)一起，将实施例29的标题化合物(0.10g，0.768mmol)和实施例42.1的标题化合物(0.24g，0.844mmol)结合到微波反应器中并且在180℃反应20min。在冷却至室温后，过滤反应混合物来收集沉淀物并且将固体溶解在甲醇和二氯甲烷中并且浓缩到硅胶上，通过柱色谱法(0-20％甲醇/1:1 EtOAc/二氯甲烷)提纯，得到标题化合物(0.21g，79％)。

¹H NMR(300MHz，DMSO)：δ(ppm)8.38(s，1H)，7.38(s，1H)，7.02(s，1H)，5.34(s，2H)，4.16(t，2H)，3.65(t，2H)，1.91(m，3H)，0.87(3H)，-0.04(s，9H)。

以相似的方式，合成了以下化合物：

实施例44：8-{(R)-1-[5-(3-氯-苯基)-异噁唑-3-基]-乙基}-3-(2-甲氧基-吡啶-4-基)-5，6，7，8-四氢-[1，2，4]三唑并[4，3-a]嘧啶

使用Chiralpak AS柱，通过手性HPLC分离实施例35.21的标题化合物，用甲醇(100％)洗脱而得到标题化合物，白色固体(0.551g)。

¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：δ(ppm)8.27(d，1H)，7.75(m，1H)，7.65(m，1H)，7.41(m，2H)，7.30(m，1H)，6.99(m，1H)，6.62(s，1H)，5.87(q，1H)，4.09(m，2H)，3.99(s，3H)，3.43(m，1H)，3.27(m，1H)，2.10(m，2H)，1.75(m，3H)。

实施例45：2-叔丁氧基羰基氨基-丙酸甲酯

将Boc-D-Ala-OH(4.0g，21mmol)和碳酸钾(11.7g，84.6mmol)溶解在二甲基甲酰胺(90mL)中并且将碘代甲烷(1.6mL，25mmol)添加到反应混合物。使反应在室温下搅拌过夜。在乙酸乙酯和水之间分配反应混合物。用按份的水和盐水洗涤有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤和浓缩而得到标题化合物，为无色油(3.53g，82％)。

¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：δ(ppm)5.14(宽峰s，1h)，4.33(宽峰s，1H)，3.51(s，3H)，1.49(s，9H)。

实施例46：(1-甲基-2-氧-乙基)-氨基甲酸叔丁基酯

在-78℃将实施例45的标题化合物(3.53g，17.4mmol)溶解在甲苯(35mL)中并且在1小时内滴加DIBAL-H(26.6mL，39.9mmol)。在-78℃在10分钟内将甲醇(70mL)添加到反应中。将反应移到冰浴，添加10％w/v柠檬酸/水(250ml)并且搅拌反应1小时。用按份的乙酸乙酯萃取反应并且用水、盐水洗涤有机萃取物，用无水硫酸钠干燥，过滤和浓缩而得到标题化合物(2.57g，85％)，为白色半固体。

¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：δ(ppm)9.51(s，1H)，5.21(宽峰s，1H)，4.24(宽峰s，1H)，1.53(s，9H)，1.35(d，3H)。

实施例47：(2-肟基(hydroxyimino)-1-甲基-乙基)-氨基甲酸叔丁基酯

在0℃将实施例46的标题化合物(2.57g，14.8mmol)溶解在甲醇(38mL)和水(38mL)中，添加碳酸钠(0.94g，8.9mmol)和盐酸羟胺(1.24g，17.8mmol)，在0℃搅拌反应30min。然后使反应升温至室温4小时。反应混合物被浓缩至一半体积并且用按份的乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤有机萃取物，用无水硫酸钠干燥，过滤和浓缩而得到标题化合物(2.6g，94％)，为白色半固体，其被进一步使用。

实施例48：[(1R，2Z)-2-氯-2-(肟基(hydroxyimino))-1-甲基乙基]氨基甲酸叔丁基酯

在40℃将实施例47的标题化合物(2.61g，13.9mmol)溶解在二甲基甲酰胺(32mL)中并且按3部分将N-氯代琥珀酰亚胺(2.04g，15.3mmol)添加到反应中。在40℃加热反应1小时。在乙酸乙酯和水之间分配反应混合物。用盐水洗涤有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤和浓缩而得到标题化合物(2.97g，96％)，为无色油。

¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：δ(ppm)8.42(s，1H)，4.91(宽峰s，1H)，4.69(宽峰s，1H)，1.46(s，9H)，1.41(d，3H)。

实施例49：{1-[5-(3-氯-苯基)-异噁唑-3-基]-乙基}-氨基甲酸叔丁基酯

在0℃，向二氯甲烷(54mL)中的实施例48的标题化合物(2.97g，13.3mmol)中，添加氯苯基乙炔(4.9mL，40mmol)和三乙胺(3.7mL，26.7mmol)。在0℃搅拌反应30分钟，然后升温至室温过夜。反应混合物被浓缩，然后用乙酸乙酯稀释。用0.1M盐酸、饱和碳酸氢钠溶液、水和盐水洗涤有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤和浓缩。产物通过柱色谱法(20％EtOAc/己烷)提纯而得到标题化合物。

¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：δ(ppm)7.81(s，1H)，7.76(m，1H)，7.65(m，2H)，6.51(s，1H)，4.98(宽峰s，2H)，1.52(d，3H)，1.48(s，9H)。

实施例50：{(1R)-1-[5-(3-氯苯基)异噁唑-3-基]乙基}胺

在0℃将三氟乙酸(49mL)添加到实施例49(7.93g，24.6mmol)/二氯甲烷(94mL)溶液。在这一温度搅拌所得的混合物90分钟，然后将其添加到冷的饱和NaHCO3中，所得的中和的混合物用二氯甲烷(30mL)萃取。有机萃取物用盐水洗涤，用硫酸镁(无水)干燥，在真空中除去溶剂。然后，使用5％(2M氨甲醇)/二氯甲烷作为洗脱液，通过快速柱硅胶色谱法提纯残余物，得到4.65g(85％)的标题化合物，为浅黄色固体。

¹H NMR(CDCl₃)：δ(ppm)7.71(s，1H)，7.66(m，1H)，7.43(m，2H)，6.56(s，1H)，4.31(q，1H)，1.65(宽峰s，2H)，1.50(d，3H)。

实施例51.1：乙酸1-[2-(3-氯-苯基)-2H-四唑-5-基]-乙酯

将实施例18.1的标题化合物(3.71g，16.50mmol)溶解在甲苯(90mL)中，添加Novozyme 435(0.65g)，然后乙酸乙烯酯(2.3mL，24.74mmol)。在室温下搅拌反应过夜。过滤反应混合物，用乙酸乙酯洗涤。浓缩有机相，通过柱色谱法(20-40％ EtOAc/己烷)提纯而得到标题化合物，为无色油(2.13g)。

¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：δ(ppm)8.17(s，1H)，8.05(m，1h)，7.50(m，2H)，6.29(q，1H)，2.16(s，3H)，1.79(d，3H)。

由相同的反应，获得了以下化合物：

实施例52：2-{1-[2-(3-氯-苯基)-2H-四唑-5-基]-乙基}-异吲哚-1，3-二酮

在室温将实施例51.2的标题化合物(1.62g，7.21mmol)与邻苯二甲酰亚胺(2.12g，14.4mmol)、三苯膦(3.80g，14.5mmol)和四氢呋喃(50mL)结合。添加偶氮二羧酸二乙酯(2.28mL，14.5mmol)并且在室温搅拌反应过夜。在乙酸乙酯和水之间分配反应混合物。用乙酸乙酯萃取水层，用盐水洗涤所合并的有机层，用硫酸镁干燥，过滤和浓缩。通过柱色谱法(30％ EtOAc/己烷)提纯产物而得到标题化合物，白色固体(2.46g，96％)。

¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：δ(ppm)8.12(s，1H)，7.89(m，1H)，7.76(m，2H)，7.45(m，2H0，5.87(q，1H)，2.06(d，3H)。

实施例53：1-[2-(3-氯-苯基)-2H-四唑-5-基]-乙胺

在0℃，在甲醇(50mL)中搅拌实施例52的标题化合物(2.46g，6.95mmol)，将水合肼(2.0mL，41.70mmol)添加到溶液中。在0℃搅拌反应2小时。将盐酸(2M，50mL)添加到反应并且使其在室温下搅拌过夜。形成白色沉淀物，过滤和用水洗涤。用二氯甲烷洗涤含水洗涤物并且用碳酸钾水溶液碱化至pH＝14，然后用按份的乙酸乙酯萃取。合并有机物并且用盐水洗涤，用硫酸镁干燥，过滤和浓缩而得到标题化合物，呈油的形式(1.54g，99％)。

¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：δ(ppm)8.16(s，1H)，8.05(m，1H)，7.47(m，2H)，4.50(q，1H)，1.77(宽峰s，2H)，1.64(d，3H)。

实施例54：(3-氧-丙基)-氨基甲酸叔丁基酯

在室温在二氯甲烷(350mL)中搅拌N-(3-羟丙基)-氨基甲酸叔丁基酯(15.38g，87.74mmol)和氯铬酸吡啶(41.61g，193mmol)过夜。使所得的溶液滤过二氧化硅柱，用20％ EtOAc/己烷洗涤。将有机物浓缩到硅胶上并且通过柱色谱法(40％ EtOAc/己烷)提纯而得到标题化合物，为无色油(6.11g，40％)。

¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：δ(ppm)3.42(m，2H)，2.71(m，2H)，1.42(s，9H)。

实施例55.1：(3-{1-[2-(3-氯-苯基)-2H-四唑-5-基]-乙基氨基}-丙基)-氨基甲酸叔丁基酯

在室温下，在二氯甲烷(50mL)中，将实施例53的标题化合物(2.59g，11.60mmol)和实施例54的标题化合物(3.01g，17.4mmol)在一起搅拌。向其中慢慢地添加Na(OAc)₃BH(3.69g，17.4mmol)并且搅拌反应2小时。用饱和碳酸氢钠溶液稀释反应，用按份的二氯甲烷萃取，用硫酸钠干燥，过滤和浓缩。通过柱色谱法(5％ 2M NH3/MeOH/EtOAc)提纯产物而得到标题化合物，为无色油(3.89g，88％)。

¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：δ(ppm)8.17(s，1H)，8.06(m，1H)，7.47(m，2H)，5.00(宽峰s，1H)，4.26(q，1H)，3.21(宽峰s，2H)，2.65(t，2H)，1.68(m，3H)，1.59(d，3H)，1.42(s，9H)。

以相似的方式，合成了以下化合物：

实施例56.1：N^*1^*-{1-[2-(3-氯-苯基)-2H-四唑-5-基]-乙基}-丙烷-1，3-二胺

在0℃将实施例55.2的标题化合物(3.89g，10.2mmol)溶解在二氯甲烷(50mL)中并且向反应中滴加三氟乙酸(20mL)。在0℃使其搅拌3小时，然后浓缩，用氯仿(100ml)稀释。用饱和碳酸氢钠溶液(100ml)碱化所述反应并且用按份的氯仿萃取水层。将合并的有机萃取物用硫酸钠干燥，过滤和浓缩而得到标题化合物，而无需进一步提纯(2.87g，认定为100％收率)。

以相似的方式，合成了以下化合物：

实施例57.1：1-{1-[2-(3-氯-苯基)-2H-四唑-5-基]-乙基}-四氢-嘧啶-2-硫酮(thione)

在-78℃，将实施例56.1的标题化合物(2.87g，10.2mmol)溶解在二氯甲烷(50mL)中，滴加硫代羰基二咪唑(3.0g，15.3mmol)/二氯甲烷(50mL)。在-78℃搅拌反应30min，随后加热回流过夜。冷却反应混合物，用水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤和浓缩到硅胶上。通过柱色谱法(40-60％EtOAc/己烷)提纯而得到标题化合物，白色固体(2.26g，69％)。

¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：δ(ppm)8.15(s，1H)，8.05(m，1H)，7.48(m，2H)，7.29(q，1H)，6.77(s，1H)，3.35(m，4H)，2.09(m，2H)，1.77(d，3H)。

以相似的方式，合成了以下化合物：

实施例58.1：1-{1-[2-(3-氯-苯基)-2H-四唑-5-基]-乙基}-2-甲基硫烷基-1，4，5，6-四氢-嘧啶

在室温下，将实施例57.1的标题化合物(2.26g，7.00mmol)、叔丁醇钠(0.672g，7.00mmol)和碘代甲烷(0.66mL，10.50mmol)/四氢呋喃(30mL)在一起搅拌2小时。反应混合物被浓缩并且在乙酸乙酯和水之间分配。用盐水洗涤有机相，用硫酸钠干燥，过滤和浓缩而得到标题化合物，黄色油(2.35g，定量)。

¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：δ(ppm)8.16(s，1H)，8.05(m，1H)，7.48(m，2H)，5.72(q，1H0，3.51(m，2H)，3.30(m，1H)，3.12(m，1H)，2.38(s，3H)，1.85(m，2H)，1.74(s，3H)。

以相似的方式，合成了以下化合物：

实施例59.1：5-(8-{1-[2-(3-氯-苯基)-2H-四唑-5-基]-乙基}-5，6，7，8-四氢-[1，2，4]三唑并[4，3-a]嘧啶-3-基)-2H-哒嗪-3-酮

在120℃，在DMSO中将实施例58.1的标题化合物(0.094g，0.28mmol)和实施例42.3的标题化合物(0.077g，0.56mmol)在一起搅拌24小时。反应混合物被浓缩并且用乙酸乙酯稀释，用按份的水洗涤。用盐水洗涤有机层，用硫酸钠干燥，过滤和浓缩到硅胶上。通过柱色谱法(0-8％ 2M NH3/MeOH/EtOAc)提纯产物而得到标题化合物，浅黄色固体(0.036g，41％)。

¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：δ(ppm)8.58(s，1H)，8.14(s，1H)，8.03(m，1H)，7.49(m，2H)，7.26(s，1H)，6.18(q，1H)，4.15(m，2H)，2.239t，2H)，1.85(d，4H)。

以相似的方式，合成了以下化合物：

实施例60：6-(8-{(R)-1-[5-(3-氯-苯基)-异噁唑-3-基]-乙基}-5，6，7，8-四氢-[1，2，4]三唑并[4，3-a]嘧啶-3-基)-3H-嘧啶-4-酮

将实施例59.2的标题化合物(0.16g，0.48mmol)溶解在二氯甲烷(2.5mL)中并且将其冷却至0℃。添加二甲基氯化铝(1.0M/己烷，1.5mL)并且在0℃搅拌反应30分钟，升温至室温1小时。用甲醇(0.5mL)、柠檬酸(0.5g)/水(3mL)猝灭反应。用按份的氯仿萃取反应混合物并且有机萃取物用硫酸钠干燥，过滤和浓缩。通过柱色谱法(2-15％ 2MNH3/MeOH/二氯甲烷)提纯产物而得到标题化合物(0.021g，10％)，为浅黄色固体。

¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：δ(ppm)8.44(s，1H)，7.74(s，1H)，7.64(m，1H)，7.39(m，3H)，6.61(s，1H)，5.87(q，1H)，4.48(m，1H)，4.36(m，1H)，3.40(m，1H)，3.22(m，1H)，2.11(宽峰s，2H)，1.75(d，3H)。

实施例61.1：4-(8-{(R)-1-[5-(3-氯-苯基)-异噁唑-3-基]-乙基}-5，6，7，8-四氢-[1，2，4]三唑并[4，3-a]嘧啶-3-基)-1H-吡啶-2-酮

将实施例44的标题化合物(0.05g，0.114mmol)溶解在乙酸(1mL)中并且添加溴化氢/乙醇(1mL)。在80℃加热反应过夜。用水稀释反应并且用碳酸钠水溶液猝灭。用按份的二氯甲烷萃取水相，有机萃取物用硫酸钠干燥，过滤和浓缩而得到标题化合物，为浅色固体(0.049g，100％)。

¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：δ(ppm)7.98(s，1H)，7.61(m，1H)，7.44(d，1H)，7.37(m，2H)，6.94(dt，1H)，6.68(s，1H)，6.59(s，1H)，5.85(q，1H)，4.09(m，3H)，3.42(m，1H)，3.26(m，1H)，2.10(m，2H)，1.73(d，3H)。

以相似的方式，合成了以下化合物：

实施例62：4-(8-{(R)-1-[5-(3-氯-苯基)-异噁唑-3-基]-乙基}-5，6，7，8-四氢-[1，2，4]三唑并[4，3-a]嘧啶-3-基)-1-甲基-1H-吡啶-2-酮

将实施例61.2的标题化合物(0.040g，0.094mmol)溶解在二甲基甲酰胺(0.5mL)和氢化钠(0.005g，0.113mmol)中并且将其加热到50℃达1.5小时。然后添加碘代甲烷(0.2g，0.14mmol)并且在50℃搅拌反应过夜。用二氯甲烷稀释反应并且用按份的水洗涤。有机相用硫酸钠干燥，过滤和浓缩，通过柱色谱法(0-10％ 2M NH3/MeOH/二氯甲烷)提纯而得到标题化合物(0.022g)。

¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：δ(ppm)7.73(m，1H)，7.62(m，1H)，7.38(m，2H)，6.88(dt，1H)，6.67(m，1H)，6.59(s，1H)，5.85(q，1H)，4.10(m，3H)，3.58(s，3H)，3.39(m，1H)，3.28(m，1H)，2.09(m，2H)，1.75(d，3H)。

实施例62：1-[5-(3-氯-苯基)-异噁唑-3-基甲基]-2-甲基硫烷基-1，4，5，6-四氢-嘧啶

将实施例9.1的标题化合物(90mg，0.35mmol)放入2mL DMF中并且将其冷却至0℃。向其中添加氢化钠(55％/矿物油)(30mg，0.7mmol)。搅拌浆料1小时。以一份将实施例29.2的标题化合物(100mg，0.35mmol)添加到上述浆料中。在0℃搅拌该混合物1小时。添加水(15mL)，产物沉淀，在真空条件下干燥而得到45mg(40％)白色固体产物。

¹H NMR(400MHz，CDCl₃)：δ(ppm)7.70(m，1H)，7.60(m，1H)，7.35(m，2H)，6.55(s，1H)，4.55(s，2H)，3.47(t，2H)，3.25(t，2H)，2.47(s，3H)，1.84(m，2H)。

生物学评价

在表达mGluR5D的细胞系中的mGluR5拮抗作用的功能性评价

可以使用用于药理学活性的标准测定来分析本发明的化合物的性质。谷氨酸受体测定的实例是本领域众所周知的，如在例如Aramori等人，Neuron 8：757(1992)，Tanabe等人，Neuron 8：169(1992)，Miller等人，J.Neuroscience 15：6103(1995)，Balazs，等人，J.Neurochemistry69：151(1997)中所描述。将在这些出版物中描述的方法引入本文作为参考。方便地，本发明化合物可利用测量表达mGluR5的细胞中的细胞内钙[Ca²⁺]_i转移的测定(FLIPR)或测定肌醇磷酸更新的另一种测定(IP3)进行研究。

FLIPR测定

将如在WO97/05252中所述的表达人类mGluR5d的细胞以100,000个细胞每孔的密度接种在带有胶原涂层的、具有透明底部和黑色侧面的96孔板上，并且在接种24小时后进行试验。所有的测定在包含127mM的NaCl、5mM的KCl、2mM的MgCl₂、0.7mM的NaH₂PO₄、2mM的CaCl₂、0.422mg/ml的NaHCO₃、2.4mg/ml的HEPES、1.8mg/ml的葡萄糖和1mg/ml的BSA Fraction IV(pH 7.4)的缓冲液中进行。将96孔板中的细胞培养物加载在上述缓冲液中60分钟，所述缓冲液含有在0.01％聚氧丙烯酸(pluronic acid)(自有的(proprietary)非离子型表面活性剂多元醇-CAS编号9003-11-6)中的4μM发荧光的钙指示剂fluo-3(Molecular Probes，Eugene，Oregon)的乙酰氧基甲基酯形式。在装载期后，除去fluo-3缓冲液，并用新鲜的测定缓冲液替换。使用0.800W和0.4秒CCD摄像机快门速度和激发波长和发射波长分别为488nm和562nm的激光装置进行FLIPR试验。用存在于每个细胞板的孔中的160μl的缓冲液引发每个试验。加入来自拮抗剂板的40μl，随后加入来自激动剂板的50μl。以90秒的间隔分开拮抗剂加入和激动剂加入。在所述两次加入的每次之后，立即以1秒间隔采样荧光信号50次并随后以5秒间隔采样3次。响应是以采样期间对激动剂响应的峰高度与本底荧光之间的差异来测量。使用线性最小二乘法拟合程序确定IC₅₀。IP3测定

另一个对mGluR5d的功能测定描述在WO97/05252中，其是基于磷脂酰肌醇更新。受体活化刺激磷脂酶C活性，并导致肌醇1，4，5-三磷酸(IP₃)的形成增加。

将稳定地表达人类mGluR5d的GHEK以40×10⁴细胞/孔接种在包含1μCi/孔[3H]肌醇的介质中的24孔聚-1-赖氨酸涂层板上。培养细胞过夜(16小时)，然后，洗涤三次，在37℃在补充有1单位/ml的谷丙转氨酶和2mM的丙酮酸盐的HEPES缓冲盐水(146mM NaCl、4.2mMKCl、0.5mM MgCl₂、0.1％葡萄糖、20mM HEPES、pH 7.4)中培养1小时。将细胞在HEPES缓冲盐水中洗涤一次，并在包含10mM LiCl的HEPES缓冲盐水中预培养10分钟。在37℃培养化合物两份15分钟，然后加入谷氨酸(80μM)或DHPG(30μM)，并且再培养30分钟。通过加入在冰上的0.5ml的高氯酸(5％)终止该反应，并在4℃培养至少30分钟。将样品收集在15ml的聚丙烯管中，并使用离子交换树脂(DowexAGl-X8甲酸盐晶型，200-400目，BIORAD)柱分离肌醇磷酸。首先通过用8ml的30mM甲酸铵洗脱甘油基磷脂酰肌醇来进行肌醇磷酸分离。接着，用8ml的700mM甲酸铵/100mM甲酸洗脱所有的肌醇磷酸，并收集在闪烁瓶中。然后，将该洗脱液与8ml的闪烁剂混合，通过闪烁计数测定[3H]肌醇的结合。将来自两份样品的dpm计数绘成图，使用线性最小二乘法拟合程序确定IC₅₀。

缩略语

BSA        胎牛血清蛋白

CCD        电荷耦合装置

CRC        浓度反应曲线

DHPG       3，5-二羟基苯基甘氨酸

DPM        每分钟衰变数

EDTA       乙二胺四乙酸

FLIPR      荧光成像板阅读器

GHEK       含有谷氨酸转运体的人类胚肾

GLAST      谷氨酸/天冬氨酸转运蛋白

HEPES      4-(2-羟基乙基)-1-哌嗪乙磺酸(缓冲剂)

IP₃        肌醇三磷酸酯

通常，本发明化合物在上面测定中具有活性，其IC₅₀值小于10000nM。在本发明的一个方面，IC₅₀值小于1000nM。在本发明的另一个方面，IC₅₀值小于100nM。

在大鼠中测定脑中药物与血浆中药物的比例

在雌性Sprague Dawley大鼠中评估脑中药物与血浆中药物的比例。把化合物溶解在水或另一适宜的载体中。对于测定脑中药物与血浆中药物的比例，将化合物以皮下或静脉注射、或者静脉输注、或者口服给药的方式给药。在给药后的预先确定的事件点，用心脏穿刺获取血液样本。通过切开心脏终结大鼠生命，并立即把脑保存。将血液样本收集在肝素化的试管中并离心30分钟，以便从血细胞中分离出血浆。把血浆移至96-孔板中，并在-20℃贮藏至分析。把脑分成两半，并把每一半置于预先涂了焦油的试管中并在-20℃贮藏至分析。分析之前，将脑样本解冻，并把3ml/g脑组织的蒸馏水加到试管中。将脑样本在冰浴中超声波处理直到样本均匀为止。将脑和血浆用乙腈沉淀。离心后，将上清液用0.2％甲酸稀释。在短的反相HPLC柱上进行分析，进行快速梯度洗脱，并且使用具有电子喷雾和选择反应监测(SRM)获得的电离三联四极装置进行MSMS检测。液-液萃取可以用作另一样本纯化手段。加入适宜的缓冲剂后，通过摇晃，把样本萃取到有机溶剂中。把等份试样的有机层转移至新的小瓶中，并在氮气流下蒸发至干。将残余物重组后，准备把样本注射到HPLC柱上。

通常，本发明化合物是外周限制的，在大鼠中，脑中的药物与血浆中药物的比例<0.5。在一个实施方案中，该比例小于0.15。

测定体外稳定性

由Sprague-Dawley大鼠肝样本制备大鼠肝微粒体。人肝微粒体由人肝样本制备，或由BD Gentest获得。将化合物在pH 7.4的0.1mol/L磷酸钾缓冲液中，在辅因子NADPH(1.0mmol/L)存在下，以0.5mg/mL的总微粒体蛋白浓度于37℃培养。化合物的初始浓度为1.0μmol/L。开始培养后，在5个时间点0、7、15、20和30分钟，对样本进行分析。通过加入3.5倍体积的乙腈，将收集的样本中的酶活性立即停止。用LC-MS测定每一个收集的样本中剩余化合物的浓度。mGluR5抑制剂的消除常数(k)是作为In[mGluR5抑制剂]对培养时间(分钟)的曲线的斜率计算的。然后将该消除常数用于计算mGluR5抑制剂的半衰期(T1/2)，其随后被用来计算肝微粒体中的mGluR5抑制剂的内在清除率(CLint)：

CLint.＝(1n2×培养体积)/(T1/2×蛋白浓度)＝μl/min/mg

筛选具有抗TLESR活性的化合物

使用经训练能够站立在Pavlov悬带上的两个性别的成年Labrador猎狗。形成粘膜至皮肤皮肤食管造口，并在任何实验前让狗完全恢复。运动性测定

简单地说，在禁食同时自由供给水约17小时后，把多腔套管/侧孔装配装置(Dentsleeve，Adelaide，South Australia)经由食管造口引入以测量胃、食管下括约肌(LES)和食管压力。使用低顺从测压灌注泵(Dentsleeve，Adelaide，South Australia)给装配装置灌注水。把空气灌注管置于口腔方向以测量吞咽，并且把监测pH的锑电极置于LES以上3cm。在个人计算机上以10Hz放大并获得所有信号。

当获得没有禁食胃/LES第III阶段运动原活动的基准测量时，在前腿静脉血管中静脉内给药(i.v.，0.5ml/kg)安慰剂(0.9％ NaCl)或试验化合物。静脉内给药10分钟后，以100ml/min的速度，至30ml/kg的最终体积，通过装配装置的中心腔，把营养食物(10％蛋白胨，5％ D-葡萄糖，5％ Intralipid，pH 3.0)灌注到胃内。营养物室温灌注之后，以500ml/min的速度进行空气灌注，直到获得10±1mmHg的胃内压力为止。然后用灌注泵进一步灌注空气或者从胃中排去空气，以便在整个试验中将压力保持在该水平上。从营养物灌注开始到空气灌注结束的试验时间为45分钟。该方法已经被确认为触发TLESR的可靠方法。

TLESR被定义为食管下括约肌压力(根据胃内压力)以>1mmHg/s的速率降低。在其发作(在这种情况下松弛被归类为吞咽诱导的)前，松弛不应当先于咽信号<2s。LES和胃之间的压力差应当小于2mmHg，并且完全松弛的持续时间长于1s。

样本结果显示于下表：

Claims (34)

1.式(I)的化合物

其中

R¹是甲基，卤素或氰基；

R²是氢或氟；

R³是氢，氟或C₁-C₃烷基；

R⁴是氢或C₁-C₃烷基；

Y是C₁-C₂亚烷基；

X是

或

和Z是

或

R⁵是氢、C₁-C₃烷基、C₁-C₃卤代烷基、C₁-C₃烷氧基、C₁-C₃卤烷氧基、C₁-C₃酰胺烷基、C₁-C₃N′烷基酰胺烷基、吡唑基、C₁-C₃N′N-二烷基酰胺烷基，氰基或C₁-C₃氰基烷基；

R⁶是氢、C₁-C₃烷基、C₁-C₃卤代烷基、C₁-C₃烷氧基、C₁-C₃卤烷氧基、C₁-C₃酰胺烷基、C₁-C₃N′烷基酰胺烷基、C₁-C₃N′N-二烷基酰胺烷基，氰基或C₁-C₃氰基烷基；

R⁷是氢，氟或C₁-C₃烷基；

以及其药用可接受的盐，水合物，同工异构体，互变异构体和/或对映异构体；

前提是式I的化合物不是

3-{5-[3-(2，6-二甲氧-嘧啶-4-基)-6，7-二氢-5H-[1，2，4]三唑并[4，3-a]嘧啶-8-基甲基]-四唑-2-基}-苄腈；

8-[2-(3-氯-苯基)-2H-四唑-5-基甲基]-3-吡啶-3-基-5，6，7，8-四氢-4H-1，2，3a，8-四氮杂-薁；或者

8-{1-[2-(3-氯-苯基)-2H-四唑-5-基]-乙基}-3-吡啶-3-基-5，6，7，8-四氢-[1，2，4]三唑并[4，3-a]嘧啶。

2.根据权利要求1的化合物，其中R⁵是氢、C₁-C₃烷基、C₁-C₃卤代烷基、C₁-C₃烷氧基、C₁-C₃卤烷氧基、C₁-C₃酰胺烷基、C₁-C₃N′烷基酰胺烷基、吡唑基、C₁-C₃N′N-二烷基酰胺烷基或C₁-C₃氰基烷基；和R⁶是氢、C₁-C₃烷基、C₁-C₃卤代烷基、C₁-C₃烷氧基、C₁-C₃卤烷氧基、C₁-C₃酰胺烷基、C₁-C₃N′烷基酰胺烷基、C₁-C₃N′N-二烷基酰胺烷基或C₁-C₃氰基烷基。

3.根据权利要求1或2的化合物，其中R¹是卤素或氰基。

4.根据权利要求3的化合物，其中R¹是氯。

5.根据权利要求3的化合物，其中R¹是氟。

6.根据权利要求3的化合物，其中R¹是甲基。

7.根据权利要求3的化合物，其中R¹是氰基。

8.根据权利要求1-7中任一项的化合物，其中R²是氢。

9.根据权利要求1-8中任一项的化合物，其中R³是氢或氟。

10.根据权利要求1-9中任一项的化合物，其中R⁴是氢或甲基。

11.根据权利要求1-10中任一项的化合物，其中R⁵是氢、C₁-C₂烷基或C₁-C₂烷氧基。

12.根据权利要求1-11中任一项的化合物，其中R⁶是氢、C₁-C₂烷基或C₁-C₂烷氧基。

13.根据权利要求1-12中任一项的化合物，其中R⁷是C₁-C₂烷基或C₁-C₂烷氧基。

14.根据权利要求1-13中任一项的化合物，其中Y是亚甲基。

15.根据权利要求1-13中任一项的化合物，其中Y是亚乙基。

16.根据权利要求1-15中任一项的化合物，其中Z是

或

17.根据权利要求16的化合物，其中Z是

或

18.根据权利要求16的化合物，其中Z是

或

19.一种化合物，其选自

3-吡啶-3-基-8-(2-间甲苯基-2H-四唑-5-基甲基)-5，6，7，8-四氢-[1，2，4]三唑并[4，3-a]嘧啶；

8-{[5-(3-氯苯基)-1，2，4-噁二唑-3-基]甲基}-3-吡啶-3-基-5，6，7，8-四氢[1，2，4]三唑并[4，3-a]嘧啶；

8-{1-[5-(3-氯苯基)异噁唑-3-基]乙基}-3-吡啶-3-基-5，6，7，8-四氢[1，2，4]三唑并[4，3-a]嘧啶；

8-{1-[5-(3-氯苯基)-1，2，4-噁二唑-3-基]乙基}-3-吡啶-3-基-5，6，7，8-四氢[1，2，4]三唑并[4，3-a]嘧啶；

8-{1-[2-(3-氯苯基)-2H-四唑-5-基]乙基}-3-吡啶-3-基-5，6，7，8-四氢[1，2，4]三唑并[4，3-a]嘧啶；

3-吡啶-3-基-8-(5-间甲苯基-异噁唑-3-基甲基)-5，6，7，8-四氢-4H-1，2，3a，8-四氮杂-薁；

8-[5-(3-氯-苯基)-异噁唑-3-基甲基]-3-(5-甲基-吡啶-3-基)-5，6，7，8-四氢-4H-1，2，3a，8-四氮杂-薁；

8-[5-(3-氯-苯基)-异噁唑-3-基甲基]-3-(6-甲基-吡啶-3-基)-5，6，7，8-四氢-4H-1，2，3a，8-四氮杂-薁；

3-{3-[3-(2，6-二甲氧-嘧啶-4-基)-4，5，6，7-四氢-1，2，3a，8-四氮杂-薁-8-基甲基]-[1，2，4]噁二唑-5-基}-苄腈；

3-{5-[3-(2，6-二甲氧-嘧啶-4-基)-4，5，6，7-四氢-1，2，3a，8-四氮杂-薁-8-基甲基]-四唑-2-基}-苄腈；

8-[5-(3-氯-苯基)-异噁唑-3-基甲基]-3-(2，6-二甲氧-嘧啶-4-基)-5，6，7，8-四氢-4H-1，2，3a，8-四氮杂-薁；

3-{3-[3-(2，6-二甲氧-嘧啶-4-基)-4，5，6，7-四氢-1，2，3a，8-四氮杂-薁-8-基甲基]-异噁唑-5-基}-苄腈；

3-{3-[3-(6-吡唑-1-基-吡啶-3-基)-6，7-二氢-5H-[1，2，4]三唑并[4，3-a]嘧啶-8-基甲基]-[1，2，4]噁二唑-5-基}-苄腈；

8-{[2-(3-氯苯基)-2H-四唑-5-基]甲基}-3-吡啶-3-基-5，6，7，8-四氢[1，2，4]三唑并[4，3-a]嘧啶；

5-{8-[5-(3-氯-苯基)-[1，2，4]噁二唑-3-基甲基]-5，6，7，8-四氢-[1，2，4]三唑并[4，3-a]嘧啶-3-基}-烟腈；

3-[3-(3-嘧啶-5-基-6，7-二氢-5H-[1，2，4]三唑并[4，3-a]嘧啶-8-基甲基)-[1，2，4]噁二唑-5-基]-苄腈；

8-[5-(3-氯-苯基)-[1，2，4]噁二唑-3-基甲基]-3-嘧啶-5-基-5，6，7，8-四氢-[1，2，4]三唑并[4，3-a]嘧啶；

4-{8-[2-(3-氯-苯基)-2H-四唑-5-基甲基]-5，6，7，8-四氢-4H-1，2，3a，8-四氮杂-薁-3-基}-1-甲基-1H-吡啶-2-酮；

4-{8-[5-(3-氯-苯基)-[1，2，4]噁二唑-3-基甲基]-5，6，7，8-四氢-[1，2，4]三唑并[4，3-a]嘧啶-3-基}-1H-吡啶-2-酮；

4-{8-[5-(3-氯-苯基)-[1，2，4]噁二唑-3-基甲基]-5，6，7，8-四氢-[1，2，4]三唑并[4，3-a]嘧啶-3-基}-6-甲基-1H-吡啶-2-酮；

5-(8-{1-[2-(3-氯-苯基)-2H-四唑-5-基]-乙基}-5，6，7，8-四氢-[1，2，4]三唑并[4，3-a]嘧啶-3-基)-2H-哒嗪-3-酮；

5-(8-{1-[5-(3-氯-苯基)-异噁唑-3-基]-乙基}-5，6，7，8-四氢-[1，2，4]三唑并[4，3-a]嘧啶-3-基)-2H-哒嗪-3-酮；

5-{8-[5-(3-氯-苯基)-异噁唑-3-基甲基]-5，6，7，8-四氢-[1，2，4]三唑并[4，3-a]嘧啶-3-基}-2H-哒嗪-3-酮；

6-(8-{(R)-1-[5-(3-氯-苯基)-异噁唑-3-基]-乙基}-5，6，7，8-四氢-[1，2，4]三唑并[4，3-a]嘧啶-3-基)-3H-嘧啶-4-酮；

4-(8-{(R)-1-[2-(3-氯-苯基)-2H-四唑-5-基]-乙基}-5，6，7，8-四氢-[1，2，4]三唑并[4，3-a]嘧啶-3-基)-1H-吡啶-2-酮；

4-(8-{(R)-1-[5-(3-氯-苯基)-异噁唑-3-基]-乙基}-5，6，7，8-四氢-[1，2，4]三唑并[4，3-a]嘧啶-3-基)-1-甲基-1H-吡啶-2-酮；和

4-(8-{(R)-1-[5-(3-氯-苯基)-异噁唑-3-基]-乙基}-5，6，7，8-四氢-[1，2，4]三唑并[4，3-a]嘧啶-3-基)-1H-吡啶-2-酮

以及其药用可接受的盐，水合物，同工异构体，互变异构体和/或对映异构体。

20.用于治疗的根据权利要求1-19中任一项的化合物。

21.包含根据权利要求1-19中任一项的化合物作为活性组分以及药理学和药用可接受的载体的药物组合物。

22.根据权利要求1-19中任一项的化合物或者其药用可接受的盐或旋光异构体在制备用于抑制短暂性食管下括约肌松弛的药物中的用途。

23.根据权利要求1-19中任一项的化合物或者其药用可接受的盐或旋光异构体在制备用于治疗或预防胃食管返流疾病的药物中的用途。

24.根据权利要求1-19中任一项的化合物或者其药用可接受的盐或旋光异构体在制备用于治疗或预防疼痛的药物中的用途。

25.根据权利要求1-19中任一项的化合物或者其药用可接受的盐或旋光异构体在制备用于治疗或预防焦虑症的药物中的用途。

26.根据权利要求1-19中任一项的化合物或者其药用可接受的盐或旋光异构体在制备用于治疗或预防肠易激综合征(IBS)的药物中的用途。

27.抑制短暂性食管下括约肌松弛的方法，包括向需要这样抑制的个体给药有效量的根据权利要求1-19中任一项的化合物。

28.治疗或预防胃食管返流疾病的方法，包括向需要这样治疗或预防的个体给药有效量的根据权利要求1-19中任一项的化合物。

29.治疗或预防疼痛的方法，包括向需要这样治疗或预防的个体给药有效量的根据权利要求1-19中任一项的化合物。

30.治疗或预防焦虑症的方法，包括向需要这样治疗或预防的个体给药有效量的根据权利要求1-19中任一项的化合物。

31.治疗或预防肠易激综合征(IBS)的方法，包括向需要这样治疗或预防的个体给药有效量的根据权利要求1-19中任一项的化合物。

32.包含(i)至少一种根据权利要求1-19中任一项的化合物和(ii)至少一种酸分泌抑制剂的联合。

33.权利要求32的联合，其中所述酸分泌抑制剂选自西咪替丁、雷尼替丁、奥美拉唑、艾美拉唑、兰索拉唑、泮托拉唑、雷贝拉唑或来明拉唑。

34.一种化合物，其选自

5-(3-甲基-苯基)-异噁唑-3-羧酸乙酯；

[5-(3-甲基-苯基)-异噁唑-3-基]-甲醇；

甲磺酸5-(3-甲基-苯基)-异噁唑-3-基甲基酯；

3-(3-羟甲基-异噁唑-5-基)-苄腈；

甲磺酸5-(3-氰基-苯基)-异噁唑-3-基甲基酯；

3-(5-甲基-吡啶-3-基)-5，6，7，8-四氢-4H-1，2，3a，8-四氮杂-薁；

3-(6-甲基-吡啶-3-基)-5，6，7，8-四氢-4H-1，2，3a，8-四氮杂-薁；

3-(2，6-二甲氧-嘧啶-4-基)-5，6，7，8-四氢-4H-1，2，3a，8-四氮杂-薁；

3-(6-吡唑-1-基-吡啶-3-基)-5，6，7，8-四氢-[1，2，4]三唑并[4，3-a]嘧啶；

3-(5-溴-吡啶-3-基)-5，6，7，8-四氢-[1，2，4]三唑并[4，3-a]嘧啶；

3-嘧啶-5-基-5，6，7，8-四氢-[1，2，4]三唑并[4，3-a]嘧啶；

3-(2-甲氧基-6-甲基-吡啶-4-基)-5，6，7，8-四氢-[1，2，4]三唑并[4，3-a]嘧啶；

1-[2-(3-氯-苯基)-2H-四唑-5-基]-乙酮；

5-(5，6，7，8-四氢-[1，2，4]三唑并[4，3-a]嘧啶-3-基)-烟腈；

8-[5-(3-氯-苯基)-[1，2，4]噁二唑-3-基甲基]-3-(2-甲氧基-吡啶-4-基)-5，6，7，8-四氢-[1，2，4]三唑并[4，3-a]嘧啶；

8-[5-(3-氯-苯基)-[1，2，4]噁二唑-3-基甲基]-3-(2-甲氧基-6-甲基-吡啶-4-基)-5，6，7，8-四氢-[1，2，4]三唑并[4，3-a]嘧啶；

6-氧-1-(2-三甲基甲硅烷基-乙氧基甲基)-1，6-二氢-哒嗪-4-羧酸乙酯；

6-氧-1-(2-三甲基甲硅烷基-乙氧基甲基)-1，6-二氢-嘧啶-4-羧酸乙酯；

6-氧-1-(2-三甲基甲硅烷基-乙氧基甲基)-1，6-二氢-哒嗪-4-羧酸酰肼；

6-氧-1-(2-三甲基甲硅烷基-乙氧基甲基)-1，6-二氢-嘧啶-4-羧酸酰肼；

5-(5，6，7，8-四氢-[1，2，4]三唑并[4，3-a]嘧啶-3-基)-2-(2-三甲基甲硅烷基-乙氧基甲基)-2H-哒嗪-3-酮；

6-(5，6，7，8-四氢-[1，2，4]三唑并[4，3-a]嘧啶-3-基)-3-(2-三甲基甲硅烷基-乙氧基甲基)-3H-嘧啶-4-酮；

8-{(R)-1-[5-(3-氯-苯基)-异噁唑-3-基]-乙基}-3-(2-甲氧基-吡啶-4-基)-5，6，7，8-四氢-[1，2，4]三唑并[4，3-a]嘧啶；

{1-[5-(3-氯-苯基)-异噁唑-3-基]-乙基}-氨基甲酸叔丁基酯；

{(1R)-1-[5-(3-氯苯基)异噁唑-3-基]乙基}胺；

2-{1-[2-(3-氯-苯基)-2H-四唑-5-基]-乙基}-异吲哚-1，3-二酮；

1-[2-(3-氯-苯基)-2H-四唑-5-基]-乙胺；

(3-{1-[2-(3-氯-苯基)-2H-四唑-5-基]-乙基氨基}-丙基)-氨基甲酸叔丁基酯；

(3-{1-[5-(3-氯-苯基)-异噁唑-3-基]-乙基氨基}-丙基)-氨基甲酸叔丁基酯-4-酮；

N^*1^*-{1-[2-(3-氯-苯基)-2H-四唑-5-基]-乙基}-丙烷-1，3-二胺；

N^*1^*-{1-[5-(3-氯-苯基)-异噁唑-3-基]-乙基}-丙烷-1，3-二胺；

1-{1-[2-(3-氯-苯基)-2H-四唑-5-基]-乙基}-四氢-嘧啶-2-硫酮；

1-{1-[5-(3-氯-苯基)-异噁唑-3-基]-乙基}-四氢-嘧啶-2-硫酮；

1-{1-[2-(3-氯-苯基)-2H-四唑-5-基]-乙基}-2-甲基硫烷基-1，4，5，6-四氢-嘧啶；

1-{1-[5-(3-氯-苯基)-异噁唑-3-基]-乙基}-2-甲基硫烷基-1，4，5，6-四氢-嘧啶；

6-(8-{1-[5-(3-氯-苯基)-异噁唑-3-基]-乙基}-5，6，7，8-四氢-[1，2，4]三唑并[4，3-a]嘧啶-3-基)-3-(2-三甲基甲硅烷基-乙氧基甲基)-3H-嘧啶-4-酮；

1-[5-(3-氯-苯基)-异噁唑-3-基甲基]-2-甲基硫烷基-1，4，5，6-四氢-嘧啶；和

8-{1-[5-(3-氯-苯基)-异噁唑-3-基]-乙基}-3-(2-甲氧基-吡啶-4-基)-，6，7，8-四氢-[1，2，4]三唑并[4，3-a]嘧啶。