BRPI0710980A2 - composto, composição farmacêutica, uso de um composto, métodos para a inibição de relaxamentos do esfìncter esofágio inferior transitórios, para o tratamento ou prevenção de uma doença ou condição, e, combinação - Google Patents

Abstract

COMPOSTO, COMPOSIçãO FARMACêUTICA, USO DE UM COMPOSTO, METODOS PARA A IMBIçãO DE RELAXAMENTOS DO ESFìNCTER ESOFáGICO INFERIOR TRANSITóRIOS, PARA O TRATAMENTO OU PREVENçãO DE UMA DOENçA OU CONDIçãO, E, COMIBINAçãO.A presente invenção é direcionada a novos compostos, a um processo para a sua preparação, seu uso em terapia e composições farmacêuticas que compreende os novos compostos.

Description

"COMPOSTO, COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA, USO DE UMCOMPOSTO, MÉTODOS PARA A INIBIÇÃO DE RELAXAMENTOS DOESFÍNCTER ESOFÁGICO INFERIOR TRANSITÓRIOS, PARA OTRATAMENTO OU PREVENÇÃO DE UMA DOENÇA OU CONDIÇÃO,E, COMBINAÇÃO"

Campo da invenção

A presente invenção é direcionada a novos compostos, seu usoem terapia e composições farmacêuticas compreendem os ditos novoscompostos.

Fundamentos da invenção

O glutamato é o neurotransmissor excitador principal nosistema nervoso central de mamífero (CNS). O glutamato produz seus efeitosnos neurônios centrais pela adição a e desse modo ativando os receptores desuperfície celular. Estes receptores foram divididas em duas classesprincipais, os receptores de glutamato ionotrópico e metabotrópico, com basenas características estruturais das proteínas receptoras, os meios pelos quaisos receptores transduzem sinais na célula e perfis farmacológicos.

Os receptores de glutamato metabotrópico (mGluRs) sãoreceptores ligados por proteína G que ativam uma variedade de sistemasmensageiros secundários intracelulares seguindo a ligação de glutamato. Aativação de mGluRs em neurônios de mamífero intacto evoca uma ou maisdas seguintes respostas: ativação de fosfolipase C; aumenta em hidrólise defosfonositídeo (PI); liberação de cálcio intracelular; ativação de fosfolipase D;ativação ou inibição de adenil ciclase; aumenta ou diminui na formação demonofosfato de adenosina cíclica (cAMP); ativação de guanilil ciclase;aumenta na formação de monofosfato de guanosina cíclica (cGMP); ativaçãode fosfolipase A2; aumenta na liberação de ácido araquidônico e aumenta oudiminui na atividade de canais iônicos barrados por voltagem e ligando.Schoepp et al., Trends Pharmacol. Sei. 14:\3 (1993), Schoepp, Neurochem.Int. 24:439 (1994), Pin et al., Neuropharmacology 34:1 (1995), Bordi andUgolini, Prog. Neurobiol. 59:55 (1999).

A clonagem molecular identificou oito subtipos de mGluRdistintos, denominado mGluRl até mGluR8. Nakanishi, Neuron 73:1031(1994), Pin et al, Neuropharmacology 34:1 (1995), Knopfel et al., J. Med.Chem. 35:1417 (1995). Outra diversidade de receptor ocorre por intermédioda expressão de formas divididas alternativamente de certos subtipos mGluR.Pin et al., PNAS <59:10331 (1992), Minakami et al., BBRC 199:1136 (1994),Joly et al, J. Neurosci. 75:3970 (1995).

Os subtipos de receptor de glutamato metabotrópico podem sersub-divididos em três grupos, mGluRs do Grupo I, Grupo II e Grupo III, combase em homologia de seqüência de aminoácido, os sistemas mensageirossecundários utilizados pelos receptores e por suas característicasfarmacológicas. O mGluR de Grupo I compreende mGluRl, mGluR5 e suasvariantes alternativamente unidas. A ligação de agonistas a estes receptoresresulta na ativação de fosfolipase Cea mobilização subseqüente de cálciointracelular.

Distúrbio neurológicos, psiquiátricos e dor

As tentativas em elucidar os papéis fisiológicos de mGluR deGrupo I sugere que a ativação destes receptores evita a excitação neuronal.Vários estudos demonstraram que agonistas de mGluR de Grupo I podemproduzir excitação pós-sinápticas na aplicação aos neurônios no hipocampo,córtex cerebral, cerebelo e tálamo, bem como outras regiões do CNS.Evidências indicam que esta excitação é devida à ativação direta de mGluRspós-sinápticas, mas isto foi sugerido que ativação de mGluRs pré-sinápticosocorre, resultando na liberação de neurotransmissor aumentada. Baskys,Trends Pharmacol Sei. 15:92 (1992), Schoepp, Neurochem. Int. 24:439(1994), Pin et al., Neuropharmacology 34:1(1995), Watkins et al., TrendsPharmaeol Sei. 15:33 (1994).Os receptores de glutamato metabotrópico foram implicadosem diversos processos normais no CNS mamífero. A ativação de mGluRs foimostrada ser requerida para a indução de potenciação de longo prazo dehipocampo e depressão de longo prazo cerebelar. Bashir et al., Nature363-341 (1993), Bortolotto et al., Nature 368:140 (1994), Aiba et al., Cell79:365 (1994), Aiba et al., Cell 79-311 (1994). Um papel para a ativação demGluR em nocicepção e analgesia também foi demonstrada, Meller et al.,Neuroreport 4: 879 (1993), Bordi and Ugolini, Brain Res. 871:223 (1999).

Além disso, a ativação de mGluR foi sugerida desempenhar um papelmodulador em uma variedade de outras processos normais incluindo atransmissão sináptica, desenvolvimento neuronal, morte neuronalapoptóptico, plasticidade sináptica, aprendizado especial, memória olfativa,controle central da atividade cardíaca, vigília, controle motor e controle doreflexo vestibulo-ocular. Nakanishi, Neuron 13: 1031 (1994), Pin et al.,Neuropharmacology 34:1, Knopfel et al., J. Med. Chem. 38:1417 (1995).

Além disso, os receptores de glutamato metabotrópicos doGrupo I e mGluR5 em particular, foram sugeridos desempenhar papéis emuma variedade de processos patofisiológicos e distúrbios que afetam o CNS.

Estes incluem acidente vascular cerebral, trauma de cabeça, danos anóxicosou isquêmicos, hipoglicemia, epilepsia, distúrbios neurodegenerativos, taiscomo mal de Alzheimer e dor. Schoepp et al., Trends Pharmacol. Sei. /4:13(1993), Cunningham et al., Life Sei. 54:135 (1994), Hollman et al., Ann. Rev.Neurosci. 173\ (1994), Pin et al., Neuropharmacology 34:1 (1995), Knopfelet al., J. Med. Chem. 35:1417 (1995), Spooren et al., Trends Pharmacol. Sei.22:331 (2001), Gasparini et al. Curr. Opin. Pharmacol. 2:43 (2002),Neugebauer Pain 98:1 (2002). Muito da patologia nestas condições é pensadoocorrer devido a excitação induzida por glutamato excessiva de neurônios doCNS. porque o mGluR dos Grupos I parece aumentar a excitação neuronalmediada por glutamato por intermédio de mecanismos pré-sinápticos eliberação de glutamato pré-sinático intensificada, sua ativação provavelmentecontribui com a patologia. Conseqüentemente, os antagonistaas seletivos dereceptores de mGluR do Grupo I podem ser terapeuticamente benéficos,especificamente como agente neuroprotetores, analgésicos ou anti-convulsivos.

Os avanços recentes na elucidação dos papéisneurofisiológicos de receptores de glutamato metabotrópicos no geral e Grupoem particular, estabeleceu estes receptores como alvos medicamentospromissores na terapia de distúrbios neurológicos e psiquiátricos agudos ecrônicos e distúrbios de dor crônica e aguda.Distúrbios gastrointestinais

O esfíncter esofágico inferior (LES) está propenso a relaxarintermitentemente. Como uma conseqüência, o fluido do estômago podepassar no esôfago visto que a barreira está temporariamente perdida emalguns períodos, um evento a seguir referido como "refluxo".

A doença do refluxo gastro-esofágico (GERD) e a doença dotrato gastrointestinal superior mais prevalescente. A farmacoterapia correnteajuda na redução da secreção do ácido gástrico ou na neutralização do ácidono esôfago. O mecanismo principal por trás do refluxo foi consideradodepender de um esfíncter esofágico inferior hipotônico. Entretanto, porexemplo, Holloway & Dent (1990) Gastroenterol. Clin. N. Amer. 19, pp. 517-535, mostrou que a maioria dos episódio de refluxo ocorre duranterelaxamentos do esfíncter esofágico inferior transitórios (TLESRs), isto é, osrelaxamentos não são disparados pelos atos de engolir. Também foi mostradoque a secreção de ácido gástrico usualmente, é normal em pacientes comGERD.

Os novos compostos de acordo com a presente invenção sãoassumidos serem úteis para a inibição de relaxamentos do esfíncter esofágicoinferior transitórios (TLESRs) e, desta maneira, para o tratamento de distúrbiodo refluxo gastro-esofágico (GERD).

E bem conhecido que certos compostos podem causar efeitosindesejáveis na repolarização cardíaca no homem, observado como umaprolongação do intervalo QT em eletrocardiogramas (ECG). Emcircunstâncias extremas, este prolongamento induzido por medicamento dointervalo QT pode levar a um tipo de arritmia cardíaca denominada Torsadesde Pointes (TdP; Vandenberg et ai. hERG K+ channels: friend and foe. TrendsPharmacol Sci 2001; 22: 240-246), que leva ultimamente à fibrilaçãoventricular e morte súbita. O evento primário nesta síndrome é a inibição docomponente rápido da corrente de potássio retificadora atrasada (DCr) porestes compostos. Os compostos ligam-se às sub-unidades alfa formadoras deabertura do canal de proteína que carrega esta corrente — sub-unidades que sãocodificadas para o gene relacionado com éter rápido humano (hERG). Vistoque o IKr desempenha um papel na repolarização da ação cardíaca potencial,sua inibição diminui a repolarização e esta é manifestada como umprolongamento do intervalo QT. Enquanto o prolongamento do intervalo QTque não é um assunto seguro por si, este carrega um risco de efeitos adversoscardiovasculares e em uma porcentagem pequena de pessoas isto pode estepode levar ao TdP e à degeneração na fibrilação ventricular.

No geral, os compostos da presente invenção tem atividadebaixa contra o canal de potássio codificado por hERG. Nesta consideração,baixa atividade contra hERG in vitro é indicativo de atividade baixa in vivo.

Também é desejável que os grupos possuam boa estabilidademetabólica a fim de intensificar a eficácia do medicamento. Estabilidadecontra o metabolismo cromossômico humano in vitro é indicativo deestabilidade com relação ao metabolismo in vivo.

Por causa de sua significância fisiológica e patofisiológica,existe uma necessidade quanto a novos agonistas e antagonistaas de mGluRpotentes que apresentam uma seletividade alta com relação aos subtipos demGluR, particularmente o Subtipo do receptor do Grupo I, maisparticularmente o mGluR5.

O objetivo da presente invenção é fornecer compostos queapresentam uma atividade em receptores de glutamato metabotrópicos(mGluRs), especialmente no receptor de mGluR5. Em particular, oscompostos de acordo com a presente invenção são predominantemente, deação periférica, isto é, tem uma capacidade limitada de passar a barreirasangue-cérebro.

DESCRIÇÃO DA INVENÇÃO

A presente invenção diz respeito a um composto da fórmula I:

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em que

R1 é metila, halogênio ou ciano;

R2 é hidrogênio ou flúor;

R3 hidrogênio, flúor ou alquila CpC3;

R4 é hidrogênio ou alquila CrC3;

Y é alquileno C1-C2;

Xé

<formula>formula see original document page 7</formula>

e Z é<formula>formula see original document page 8</formula>

R5 é hidrogênio, alquila C1-C3, haloalquila C1-C3, alcóxi C1-C3,haloalcóxi CrC3, amido alquila C1-C3, N'alquilamido alquila CrC3, N'N-dialquilamido alquila C1-C3, ciano ou cianoalquila C1-C3;

R6 é hidrogênio, alquila C1-C3, haloalquila C1-C3, alcóxi C1-C3,haloalcóxi C1-C3, amido alquila C1-C3, N'-alquilamido alquila C1-C3,pirazoíla, Ν'Ν-dialquilamido alquila C1-C3, ciano ou cianoalquila C1-C3;

R7 hidrogênio, flúor ou alquila C1-C3;bem como sais, hidratos, isoformas, tautômeros e/ouenantiômeros farmaceuticamente aceitáveis destes;

com a condição de que o composto da fórmula I não seja

3-{5-[3-(2,6-Dimetóxi-pirimidin-4-il)-6,7-diidro-5H-[l,2,4]triazolo[4,3-a]pirimidin-8-ilmetil]-tetrazol-2-il}-benzonitrila;

8-[2-(3-Cloro-fenil)-2H-tetrazol-5-ilmetil]-3-piridin-3-il-5,6,7,8-tetraidro-4H-1,2,3a,8-tetraaza-azuleno; ou

8- {1 - [2-(3 -Cloro-fenil)-2H-tetrazol-5-il] -etil} -3 -piridin-3 -il-5,6,7,8-tetraidro-[l,2,4]triazolo[4,3-a]pirimidina.

Em uma forma de realização R1 é halogênio ou ciano.

Em uma outra forma de realização, R1 é cloro. Em uma outraforma de realização, R1 é flúor. Em uma outra forma de realização, R1 éciano. Em uma outra forma de realização, R1 é metila.

·

Em uma outra forma de realização, R é hidrogênio.

Em uma outra forma de realização, R3 é hidrogênio ou flúor.

Em uma outra forma de realização, R4 é hidrogênio ou metila.

Em uma outra forma de realização, R5 é hidrogênio, alquilaC1-C3, haloalquilaC1-C3, alcóxi C1-C3, haloalcóxi C1-C3, amido alquila C1-C3,N'alquilamido alquila CrC3, Ν'Ν-dialquilamido alquila CrC3 oucianoalquila C1-C3 e R6 é hidrogênio, alquila C1-C3, haloalquila C1-C3, alcóxiC1-C3, haloalcóxi C1-C3, amido alquila C1-C3, N'-alquilamido alquila C1-C3,pirazoíla, Ν'Ν-dialquilamido alquila C1-C3ou cianoalquila C1-C3;

Em uma outra forma de realização, R5 é hidrogênio, alquilaC1-C2 ou alcóxi C1-C2.Em uma outra forma de realização, R6 é hidrogênio, alquilaC1-C2 ou alcóxi C1-C2.

Em uma outra forma de realização, R é alquila CrC2 oualcóxi CrC2.

<formula>formula see original document page 10</formula>

Em uma outra forma de realização, em que Y é metileno.

Em uma outra forma de realização, em que Y é etileno.

Em uma outra forma de realização, Z é

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Uma outra forma de realização é uma composiçãofarmacêutica que compreende como o ingrediente ativo uma quantidadeterapeuticamente eficaz do composto de acordo com a fórmula I, emassociação com um ou mais diluentes, excipientes e/ou veículos inertes.

Outras formas de realização, como descrito em mais detalhesabaixo, diz respeito a um composto de acordo com a fórmula I para o uso naterapia, no tratamento de distúrbios mediados por mGluR5, na fabricação deum medicamento para o tratamento de distúrbios mediados por mGluR5.

Ainda, outras formas de realização dizem respeito a ummétodo de tratamento de distúrbios mediados por mGluR5, que compreendeadministrar a um mamífero uma quantidade terapeuticamente eficaz docomposto de acordo com a fórmula I.

Em uma outra forma de realização, é fornecido um métodopara a inibição da ativação de receptores de mGluR5, que compreende trataruma célula contendo o dito receptor com uma quantidade eficaz do compostode acordo com a fórmula I.

Os compostos da presente invenção são úteis na terapia, emparticular para o tratamento de distúrbios neurológicos, psiquiátricos, dor egastrointestinais.

Também será estimado por aqueles habilitados na técnica quecertos compostos da presente invenção podem existir nas formas solvatadas,por exemplo, hidratadas, bem como não solvatadas. Ainda será entendido quea presente invenção abrange todas as tais formas solvatadas dos compostos dafórmula I.

Dentro do escopo da invenção também estão os sais doscompostos da fórmula I. No geral, os sais farmaceuticamente aceitáveis decompostos da presente invenção são obtidos usando-se procedimentos padrãobem conhecidos na técnica, por exemplo, pela reação de um compostosuficientemente básico, por exemplo, um alquil amina com um ácidoadequado, por exemplo, HCl, ácido acético ou um ácido metanossulfônico,para produzir um sal com um ânion fisiologicamente aceitável. Também épossível fabricar um sal de metal alcalino (tal como sódio, potássio ou lítio)ou um de metal alcalino terroso (tal como um cálcio) correspondente pelotratamento de um composto da presente invenção tendo um prótonadequadamente ácido, tal como um ácido carboxílico ou um fenol, com umequivalente de um hidróxido ou alcóxido de metal alcalino ou de metalalcalino terroso (tal como o etóxido ou o metóxido) ou uma amina orgânicaadequadamente básica (tal como colina ou meglumina) em um meio aquoso,seguido pelas técnicas de purificação convencionais. Adicionalmente, sais deamônio quaternários podem ser preparados pela adição de agentes alquilantes,por exemplo, a aminas neutras.

Em uma forma de realização da presente invenção, o compostoda fórmula I pode ser convertido a um sal farmaceuticamente aceitável ousolvato deste, particularmente, um sal de adição ácida, tal como umcloridreto, bromidreto, fosfato, acetato, fumarato, maleato, tartarato, citrato,metanossulfonato ou p-toluenossulfonato.

Os termos gerais usados na definição da fórmula I têm osseguintes significados:

Halogênio como usado neste é selecionado de cloro, flúor,bromo ou iodo.

Alquila C1-C3 é um grupo alquila reto ou ramificado, tendo de1 a 3 átomos de carbono, por exemplo metila, etila, n-propila ou isopropila.

Alcóxi C1-C3 é um grupo alcóxi tendo de 1 a 3 átomos decarbono, por exemplo metóxi, etóxi, isopropóxi ou n-propóxi.

Haloalcóxi CrC3 é um grupo alcóxi tendo de 1 a 3 átomos decarbono, por exemplo metóxi, etóxi ou n-propóxi em que pelo menos um dosátomos de carbono é substituído por um átomo halogênio.

Amido alquila CrC3 é um grupo amido tendo de 1 a 3 átomosde carbono ligados à carbonila da função amido, por exemplo NH2CO ligadopor intermédio do átomo de carbono da função amida a um grupo metileno ouetileno

N'alquilamido alquila CrC3 é um grupo amido N-substituídotendo de 1 a 3 átomos de carbono ligados à carbonila da função amido, porexemplo RNHCO ligado por intermédio do átomo de carbono da funçãoamida a um grupo metilno ou etileno

Ν'Ν-dialquilamido alquila CrC3 é um grupo amido N5N-disubstituído tendo de 1 a 3 átomos de carbono ligados à carbonila da funçãoamido, por exemplo RaRbNCO ligado por intermédio do átomo de carbono dafunção amida a um grupo metileno ou etilenoCianoalquila CrC3 é um grupo ciano tendo de 1 a 3 átomos decarbono ligados ao carbono da função ciano, por exemplo NCCH2- ouNCCH2CH2-.

Pirazoíla é um pirazol monossubstituído, ligado através donitrogênio.

Todos os nomes químicos foram gerados usando-se umsoftware conhecido como AutoNom acessado através de ISIS draw.

Na fórmula I acima, X pode estar presente em qualquer dasduas considerações possíveis.

Composição farmacêutica

Os compostos da presente invenção podem ser formulados emcomposição farmacêuticas convencionais que compreendem um composto dafórmula I ou um sal farmaceuticamente aceitável ou solvato deste, emassociação com um veículo ou excipiente farmaceuticamente aceitável. Osveículos farmaceuticamente aceitáveis podem ser sólidos ou líquidos. Aspreparações na forma sólida, mas não limitadas a, pós, tabletes, grânulosdispersáveis, cápsulas, selos e supositórios.

Um veículo sólido pode ser uma ou mais substâncias, quetambém podem atuar como diluentes, agentes flavorizantes, solubilizantes,lubrificantes, agentes de suspensão, aglutinantes ou agentes desintegrantes detablete. Um veículo sólido também pode ser um material encapsulador.

Nos pós, o veículo é um sólido finamente dividido, que estáem mistura com o composto finamente dividido da invenção ou o componenteativo. Em tabletes, o componente ativo é misturado com o veículo tendo aspropriedades de ligação necessárias em proporções adequadas e compactadona forma e no tamanho desejados.

Para a preparação das composições de supositório, uma ceracom ponto de fusão baixo, tal como uma mistura de glicerídeos de ácidograxo e manteiga de cacau é primeiro fundida e o ingrediente ativo édispersado neste, por exemplo, por agitação. A mistura homogênea fundida éentão vertida em moldes de tamanho conveniente e deixada esfriar esolidificar.

Os veículos adequados incluem, mas não limitadas a,carbonato de magnésio, estearato de magnésio, talco, lactose, açúcar, pectina,dextrina, amido, tragacanto, metil celulose, carboximetil celulose sódica, cerade ponto de fusão baixo, manteiga de cacau e outros.

O termo composição também é pretendido incluir aformulação do componente ativo com material encapsulador como umveículo que fornece uma cápsula em que o componente ativo (com ou semoutros veículos) é circundado por um veículo que está, desta maneira, emassociação com este. Similarmente, selos estão incluído.

Tabletes, pós, selos e cápsulas podem ser usados como formasde dosagem sólidas adequadas para a administração oral.

As composições na forma líquida incluem soluções,suspensões e emulsões. Por exemplo, água estéril ou soluções de propilenoglicol aquosas dos compostos ativos podem ser preparações líquidasadequadas para a administração parenteral. As composições líquidas tambémpodem ser formuladas em solução em solução aquosa de polietileno glicol.

As soluções aquosas para a administração oral podem serpreparadas pela dissolução do componente ativo em água e adicionando-secorantes adequados, agentes flavorizantes, estabilizantes e agentesespessantes quando desejado. As suspensões aquosas para o uso oral podemser feitas pela dispersão do componente ativo finamente dividido em águajunto com um material viscoso, tal como gomas sintéticas, resinas, metilcelulose, carboximetil celulose sódica e outros agentes de suspensãoconhecidos na técnica da formulação farmacêutica. As Composiçõesexemplares pretendidas para o uso oral podem conter um ou mais agentescorantes, adoçantes, flavorizantes e/ou conservantes.Dependendo do modo de administração, a composiçãofarmacêutica incluirá de cerca de 0,05% em peso (por cento em peso) a cercade 99% em peso ou de cerca de 0,10% em peso a 50% em peso, de umcomposto da invenção, todas as porcentagens em peso sendo com base nopeso total da composição.

Uma quantidade terapeuticamente eficaz para a prática dapresente invenção pode ser determinada por uma pessoa habilitada na técnicausando-se critérios conhecidos incluindo idade, peso e resposta do pacienteindividual e interpretada dentro do contexto da doença que está sendo tratadaou que está sendo evitada.

Uso Médico

Os compostos de acordo com a presente invenção são úteis notratamento de condições associadas com ativação de mGluR5 excitador e parainibir o dano neuronal causado pela ativação de mGluR5 excitadora. Oscompostos podem ser usados para inibir um efeito inibidor de mGluR5 emmamíferos, incluindo o homem.

Os receptores de mGluR do Grupo I incluindo mGluR5 sãoaltamente expressados no sistema nervoso central ou periférico em outrostecidos. Desta maneira, é esperado que os compostos da invenção sejam bemadaptados para o tratamento de distúrbios mediados por mGluR5, tais comodistúrbios neurológicos e psiquiátricos agudos e crônicos, distúrbiosgastrointestinais e distúrbios de dor crônica e aguda.

A invenção diz respeito a compostos da fórmula I, comodefinido anteriormente, para o uso na terapia.

A invenção diz respeito a compostos da fórmula I, comodefinido anteriormente, para o uso no tratamento de distúrbios mediados pormGluR5.

A invenção diz respeito a compostos da fórmula I, comodefinido anteriormente, para o uso no tratamento de demência senil da mal deAlzheimer, demência induzida pela AIDS, mal de Parkinson, esclerose lateralamiotrófica, coréia de Huntington, enxaqueca, epilepsia, esquizofrenia,depressão, ansiedade, ansiedade aguda, distúrbios oftalmológicos, tais comoretinopatias, retinopatias diabéticas, glaucoma, distúrbios neuroáticosauditivos, tais como zumbido no ouvido, neuropatias desenvolvidas porquimioterapia, neuralgia pós-herpética e neuralgia trigeminal, tolerância,dependência,, X frágil, autismo, retardo mental, esquizofrenia e síndrome deDown.

A invenção diz respeito a compostos da fórmula I, comodefinido acima, para o uso no tratamento de dor relacionada com a enxaqueca,dor inflamatória, distúrbios de dor neuropática, tais como neuropatiasdiabéticas, artrite e doenças reumatóides, dor da lombar, dor de pós-operatório dor associada com várias condições incluindo câncer, angina,cólica renal ou biliar, menstruação, enxaqueca e gota.

A invenção diz respeito a compostos da fórmula I comodefinido anteriormente, para o uso no tratamento de acidente vascularcerebral, trauma de cabeça, danos anóxicos ou isquêmicos, hipoglicemia,doenças cardiovasculares e epilepsia.

A presente invenção diz respeito ao uso de um composto dafórmula I como definido anteriormente, na fabricação de um medicamentopara o tratamento de distúrbios mediados pelo receptor do Grupo I de mGluRe qualquer distúrbio listado acima.

Uma forma de realização da invenção diz respeito ao uso deum composto de acordo com a fórmula I no tratamento de distúrbiosgastrointestinais.

Uma outra forma de realização da invenção diz respeito ao usode um composto da fórmula I para a fabricação de um medicamento para ainibição de relaxamentos do esfíncter esofágico inferior transitórios, para otratamento de GERD, para a prevenção de refluxo gastroesofágico, para otratamento de regurgitação, para o tratamento de asma, para o tratamento delaringite, para o tratamento de doença pulmonar, para controlar a insuficiênciado florescimento, para o tratamento de doença do intestino irritável (IBS) epara o tratamento de dispepsia funcional (FD).

Uma outra forma de realização da presente invenção dizrespeito ao uso de um composto da fórmula I para o tratamento de bexigasuperativa ou incontinência urinária.

A expressão "TLESR", relaxamentos do esfíncter esofágicoinferior transitórios, é definido aqui de acordo com Mittal, R.K., Holloway,R.H., Penagini, R., Blackshaw, L.A., Dent, J., 1995; Transient loweresophageal sphincter relaxation. Gastroenterology 109, pp. 601-610.

A expressão "refluxo" é definida aqui como fluido doestômago sendo capaz de passar no esôfago, visto que a barreira estátemporariamente perdida em alguns períodos.

A expressão "GERD", doença do refluxo gastro-esofágico, édefinida aqui de acordo com van Heerwarden, M.A., Smout A.J.P.M., 2000;Diagnosis of reflux disease. Baillière's Clin. Gastroenterol. 14, pp. 759-774.

Os compostos da fórmula I acima, são úteis para o tratamentoou prevenção de obesidade ou sobrepeso, (por exemplo, promoção da perdade peso e manutenção da perda de peso), prevenção ou reversão do ganho depeso (por exemplo, religação, induzido por medicamento ou subseqüente àcessação do ato de fumar), para a modulação de apetite e/ou saciedade,distúrbios de alimentação (por exemplo, ataque de voracidade alimentar,anorexia, bulimia e compulsivo) e ânsias (para medicamentos, tabaco, álcool,quaisquer macronutrientes apetitosos ou itens alimentícios não essenciais).

A invenção também fornece um método de tratamento dedistúrbios mediados por mGluR5 e qualquer distúrbio listado acima, em umpaciente que sofre de ou em risco da dita condição, que compreendeadministrar ao dito paciente uma quantidade eficaz de um composto dafórmula I, como definido anteriormente.

A dose requerida para o tratamento terapêutico ou preventivode um distúrbio particular será necessariamente variado dependendo dohospedeiro tratado, da via de administração e da gravidade da doença sendotratada.

No contexto do presente relatório descritivo, o termo "terapia"e "tratamento" inclui prevenção ou profilaxia, a não ser que existamindicações específicas ao contrário. Os termos "terapêutico" e"terapeuticamente" devem ser construídos conseqüentemente.

Neste relatório descritivo, a não ser que estabelecido de outramaneira, o termo "antagonista" e "inibidor" deve significar um composto que,por quaisquer meios, parcial ou completamente, bloqueiam o caminho detransdução que leva à produção de uma resposta pelo ligando.

O termo "distúrbio", a não ser que estabelecido de outramaneira, significa qualquer condição ou doença associadas com atividade dereceptor de glutamato metabotrópico.

Uma forma de realização da presente invenção é umacombinação de um composto da fórmula I e um agente inibidor da secreçãoácida. Uma "combinação" de acordo com a invenção pode estar presentecomo uma "combinação fixa" ou como um "kit de combinações de partes".

Uma "combinação fixa" é definida como uma combinação em que o (i) pelomenos um agente inibidor de secreção ácida e (ii) pelo menos um compostoda fórmula I está presente em uma unidade. Um "kit de combinações departes" é definido como uma combinação em que o (i) pelo menos um agenteinibidor de secreção ácida e (ii) pelo menos um composto da fórmula I estãopresentes em mais do que uma unidade. Os componentes do "kit decombinações de partes" podem ser administrados, simultânea, seqüencial ouseparadamente. A razão molar do agente inibidor de secreção ácida aocomposto da fórmula I usado de acordo com a invenção dentro da faixa de1:100 a 100:1, tal como de 1:50 a 50:1 ou de 1:20 a 20:1 ou de 1:10 a 10:1.Os dois medicamentos podem ser administrados separadamente na mesmarazão. Os exemplos de agente inibidor de secreção ácidas agentesbloqueadores de H2, tais como cimetidina, ranitidina; bem como inibidores dabomba de próton, tais como piridinilmetilsulfmil benzimidazóis, tais comoomeprazol, esomeprazol, lansoprazol, pantoprazol, rabeprazol ou substânciasrelacionadas, tais como leminoprazol.

Uso não médico

Além do seu uso na medicina terapêutica, os compostos dafórmula I, bem como sais e hidratos de tais compostos, são úteis comoferramentas farmacológicas no desenvolvimento e padronização de sistemasde teste in vivo ou in vitro para a avaliação dos efeitos de inibidores deatividade relacionado com mGluR em animais de laboratório tais como gatos,cães, coelhos, macacos, ratos e camundongos, como parte da pesquisa denovos agentes terapêuticos.

Métodos de preparação

Um outro aspecto da presente invenção fornece um processopara a preparação de um composto da fórmula I ou um sal deste.

Por todo a seguinte descrição de tais processos devem serentendido que, quando apropriado, os grupos de proteção adequados serãoadicionados a, e subseqüentemente removido dos vários reagentes eintermediários de uma maneira que será facilmente entendida por uma pessoahabilitada na técnica da síntese orgânica. Os procedimentos convencionaispara o uso de tais grupos de proteção bem como os exemplos de grupos deproteção adequados são descritos, por exemplo, em "Protective Groups inOrganic Synthesis", T.W. Green, P.G.M. Wuts, Wiley-Interscience, NewYork, 1999. Por todo a seguinte descrição de tais processos devem serentendido que as ligações cruzadas podem ser realizadas de uma maneira queserá facilmente entendida por uma pessoa habilitada na técnica da sínteseorgânica. Os procedimentos convencionais para a ligação cruzada sãodescritos, por exemplo, em "Organometallics in Synthesis", M. Sclosser(Ed.), John Wiley and Sons (2001).

Abreviações

atm Atmosfera

aq. Aquoso

BINAP 2,2'-bis(difenilfosfino)-1,1 '-binaflila

Boc terc-butoxicarbonila

CDI N,N'-Carbonildiimidazol

DCC N,N-Diciclo-hexilcarbodiimida

DCM Diclorometano

DBU Diaza(l,3)biciclo[5.4.0]undecano

DEA N,N-Diisopropil etilamina

DIBAL-H Hidreto de diisobutilalumínio

DIC N,N'-Diisopropilcarbodiimida

DMAP N,N-Dimetil-4-aminopiridina

DMF Dimetilformamida

DMSO Sulfóxido de dimetila

DPPF Difenilfosfinoferroceno

EA Acetato de etila

EDCI Cloridreto de N-[3-(dimetilamino)propil]-N'-etilcarbodiimida

EDC l-Etil-3-(3-dimetilaminopropil)carbodiimida

Et2O Éter dietílico

EtOAc Acetato de etila

EtOH Etanol

EtI Iodoetano

Et Etila

Fmoc 9-fluorenilmetiloxicarbonila

h hora(s)HetAr Heteroarila

HOBt N-Hidroxibenzotriazol

HBTU hexafluorofosfato de 0-(Benzotriazol-1 -il)-N,N,N',N'-tetrametilurônio

HPLC Cromatografia líquida de alto desempenho

LAH Hidreto de lítio alumínio

LCMS Espectroscopia de massa de HPLC

MCPBA ácido m-Clorobenzóico

MeCN Acetonitrila

MeOH Metanol

min Minutos

MeI Iodometano

MeMgCl Cloreto de metil magnésio

Me Metila

n-BuLi 1-Butillítio

NaOAc Acetato de sódio

NMR Ressonância magnética nuclear

NMP N-Metil pirrolidinona

nBuLi I-Butil lítio

o.n. Durante a noite

RT, rt, r.t. Temperatura ambiente

TEA Trietilamina

THF Tetraidrofurano

«Bu butila normal

OMs Mesilato ou metano sulfonato éster

OTs Tosilato, sulfonato de tolueno ou 4-metilbenzeno sulfonato éster

PCC Clorocromiato de piridínio

PPTS P-toluenossulfonato de piridínio

TBAF Fluoreto de tetrabutilamôniopTsOH ácido p-toluenossulfônico

SPE Extração de fase sólida (usualmente contendo gel de sílica para amini-cromatografia)

sat. Saturada

Síntese geral de compostos de 1,2,4-oxadiazol da fórmula I

<formula>formula see original document page 22</formula>

LG = Grupo de partida

R = grupo(s) de precursores intermediários

R1 = grupos como definidos na fórmula I

Esquema 1

Um composto da fórmula I, em que X é um 1,2,4-oxadiazol(V) pode ser preparado através da ciclização de um composto da fórmula IV,que, por sua vez, pode ser formado a partir de um composto ativadoadequadamente da fórmula III com um composto da fórmula II.

Os compostos da fórmula II podem ser preparados a partir danitrila adequada. O composto da fórmula III pode ser ativado das maneirasseguintes não limitantes: I) como o cloreto do ácido formado a partir do ácidousando-se um reagente adequado tal como cloreto de oxalila ou cloreto detionila; ii) como um anidrido ou anidrido misturado formado do tratamentocom um reagente tal como cloroformiato de alquila; iii) usando métodostradicionais para ativar ácidos em reações de ligação amida tal como as EDCIcom HOBt ou HBTU semelhante a sais de urônio; iv) como um éster alquílicoonde a hidroxiamidina é desprotonada usando-se um terc-butóxido de sódiode base semelhante forte ou hidreto de sódio em um solvente tal como etanolou tolueno em temperaturas elevadas (50 a 110°C).

Esta transformação de compostos II e III em compostos dotipo V podem ser realizados como duas etapas consecutivas por intermédio deum intermediário isolado do tipo IV, como descrito acima, ou a ciclização dointermediário formado in situ pode ocorrer espontaneamente durante aformação do éster. A formação do éster IV pode ser realizada usando umsolvente apróptico apropriado tal como diclorometano, tetraidrofurano, N5N-dimetilformamida ou tolueno, com opcionalmente uma base orgânicaapropriada tal como trietilamina, diisopropiletilamina e outros ou uma baseinorgânica tal como bicarbonato de sódio ou carbonato de potássio. Aciclização dos compostos da fórmula IV para formar um oxadiazol pode serrealizado no éster bruto com a evaporação e substituição do solvente com umsolvente de ebulição maior tal como DMF ou com extração aquosa parafornecer um material semi-purificado ou com material purificado pelosmétodos de cromatografia padrão. A ciclização pode ser realizada peloaquecimento convencionalmente ou pela irradiação de microondas (100 a180°C), em um solvente adequado tal como piridina ou N5N-dimetilformamida ou usando-se um método de temperatura menor utilizandoreagentes semelhantes a fluoreto de tetrabutilamônio em tetraidrofurano oupor qualquer outro método adequado conhecida na literatura.

Exemplos adicionais das reações descritas acima podem serobservadas em Poulain et al., Tetrahedron Lett., (2001), 42, 1495-98,Ganglott et al., Tetrahedron Lett., (2001), 42, 1441-43, e Mathvink et al,Bioorg. Med. Chem. Lett. (1999), 9, 1869-74, que são nestes incluídos comoreferência.

Síntese de Nitrilas e ácidos para o uso na preparação dos compostos dafórmula I

Aril nitrilas são disponíveis por uma variedade de métodosincluindo cianação de um haleto de arila ou triflato sob paládio oucatalisadores de níqueis usando uma fonte de cianida apropriada tal comocianida de zinco em um solvente apropriado tal como N,N-dimetilformamida.O ácido correspondente é disponível a partir da nitrila pela hidrólise sobcondições ácidas ou básicas em um solvente apropriado tal como álcooisaquosos. Ácidos arílicos também estão disponíveis a partir de uma variedadede outras fontes, incluindo trocador de lítio bromo ou iodo seguido peloaprisionamento com CO2 para dar diretamente o ácido.

Ácidos carboxílicos podem ser convertidos para amidas primárias usando qualquer método compatível para ativar o ácido, incluindopor intermédio do cloreto ácido ou anidrido misturado, seguido peloaprisionamento com qualquer fonte de amônia, incluindo cloreto de amôniona presença de uma base adequada, hidróxido de amônio, amônia metanólicoou amônia em um solvente apróptico tal como dioxano. Este intermediárioamida pode ser convertido à nitrila usando-se uma variedade de reagentes dedesidratação tal como cloreto de oxalila ou cloreto de tionila. Esta seqüênciade reação para converter um ácido em uma nitrila pode ser aplicado porácidos não aromáticos, incluindo derivados de aminoácido protegidosadequadamente, um grupo de proteção adequada para uma amina, em umaminoácido ou em uma posição remota de qualquer outro material de partidaácido, pode ser qualquer grupo que remove a basificidade e nucleofilicidadeda funcionalidade da amina, incluindo tal grupo de proteção de carbamatocomo Boc.

Alguns ácidos são mais facilmente preparados tornando-sevantajosos por análogos disponíveis comercialmente. Por exemplo, ácido 6-metilpiridino-4-carboxílico é preparado pela descloração de ácido 2-cloro-6-metilpiridino-4-carboxílico. Certos tipos de fluoro-benzonitrilas substituídas eácidos benzóicos são disponíveis de bromo-difluoro-benzeno por intermédiodo deslocamento de um grupo flúor com um nucleófilo adequado tal comoimidazol na presença de uma base tal como carbonato de potássio em umsolvente compatível tal como Ν,Ν-dimetilformamida em temperaturaselevadas (80 a 120°C) por períodos estendidos de tempo. O grupo bromopode ser subseqüentemente elaborado no ácido ou nitrila como acima.

Ácido 1,3-Dissubstituído e 1,3,5-trissusbstitutído benzóicos ebenzonitrilas podem ser preparados por tirar vantagem dos derivados ácidosisoftálicos substituídos rapidamente disponíveis. Monohidrólise do diésterpermite a reação seletiva do ácido com uma variedade de reagentes, maistipicamente agentes de ativação tal como cloreto de tionila, cloreto de oxalilaou cloroformiato de isobutila e outros. A partir do ácido ativado, diversosprodutos são disponíveis. Além disso à amida primária usada a partir danitrila pela desidratação como mencionado acima, redução ao análogo dehidroximetila pode ser realizado no anidrido misturado ou cloreto ácidousando-se uma variedade de agentes redutores tal como boroidreto de sódioem um solvente compatível tal como tetraidrofurano. O derivadohidroximetila ainda pode ser reduzido ao análogo de metila usandohidrogenação catalítica com uma fonte apropriada de catalisador tal comopaládio ou carbono em um solvente apropriado tal como etanol. O grupohidroximetila também pode ser usado em qualquer reação adequada porálcoois benzílicos tal como acilação, alquilação, transformação por halogênioe outros. Ácidos Halometilbenzóicos deste tipo também podem ser obtidos apartir de brominação do derivado de metila onde não é comercialmentedisponível. Éteres obtidos pela alquilação do derivado de hidroximetilastambém pode ser obtido a partir dos derivados de benzoato de halometilarilapela reação com o álcool apropriado usando uma base apropriada tal comocarbonato de potássio ou hidróxido de sódio em um solvente apropriado talcomo tetraidrofurano ou o álcool. Quando outros substituintes estão presentes,estes podem ser utilizados em reações de transformação padrão. Tratamentode anilinas com ácido e nitrito de sódio pode produzir um sal diazônio, quepode ser transformado em um haleto tal como fluoreto usando ácidotetrafluorobórico. Fenóis reagem na presença de uma base adequada tal comocarbonato de potássio com agentes alquilantes para formar éteres aromáticos.Formação de precursor de isoxazol dos compostos da fórmula I

<formula>formula see original document page 26</formula>

Esquema 2

Um composto da fórmula IX, em que Gl e/ou G2 é umaporção a partir do intermediário ou grupos como definido pela fórmula I podeser preparado por uma ciclo adição 1,3-dipolar entre compostos da fórmula VIe VII sob condições básicas usando-se uma base adequada tal comobicarbonato de sódio ou trietilamina em temperaturas adequadas (0°C a100°C) em solventes tal como tolueno. Síntese dos compostos do tipo VI foipreviamente descrito na literatura, por exemplo, Kim, Jae Nyoung; Ryu, EungK; J. Org. Chem. (1992), 57, 6649-50. A cicloadição 1,3-Dipolar comacetilenos do tipo VII podem ser efetuados usando nitrometanos substituídosdo tipo VIII por intermédio da ativação com um reagente eletrofílico tal comoPhNCO na presença de uma base tal como trietilamina em temperaturaselevadas (50 a 100°C). Li, C-S.; Laçasse, E.; Tetrahedron Lett. (2002) 43;3565 - 3568. Diversos compostos do tipo VII são comercialmente disponíveis,ou podem ser sintetizados pelos métodos padrão como conhecido por aqueleshabilitados na técnica.<formula>formula see original document page 27</formula>

Esquema 3

Alternativamente, os compostos da fórmula I, que sãodisponíveis a partir da condensação de Claisen de um metil cetona X em uméster usando condições básicas (ver Esquema 3) usando tais bases comohidreto de sódio ou terc-butóxido de potássio, pode produzir compostos dafórmula XI por intermédio da condensação e ciclização subseqüente usandohidroxilamina, por exemplo na forma de solução salina do ácido clorídrico,em temperaturas elevadas (60 a 120°C) para permitir o intermediário XII. Éentendido que para ambos os métodos, transformações de grupo funcionalsubseqüente dos intermediários tal como IX e XII pode ser necessários. Nocaso de um grupo éster como em XII, estas transformações podem incluirmais não limitar os três procedimento seguintes: a) Redução completausando-se um agente redutor adequado tal como LAH em solventes tal comoTHF. b) Redução parcial usando-se um agente redutor seletivo adequado talcomo DIBAL seguido pela adição de um reagente alquilmetálico. c) Adiçãode um reagente alquilmetálico tal como um haleto de magnésio de alquila emsolventes tal como tolueno ou THF, seguido pela redução como por exemploboroidreto de sódio em metanol.

Formação de precursores de tetrazol dos compostos da fórmula I<formula>formula see original document page 28</formula>

Esquema 4

Os compostos da fórmula I em que X é tetrazol, como nosintermediários XVI (Μ = H ou Metila) são preparados através da condensaçãoentre arilsulfonilidrazonas XIV com derivados de sais de diazônios a partir deanilinas XIII (Esquema 4). O intermediário tetrazol XV, obtidos a partir dossais de diazônio de XIII e as arilsulfonilidrazonas de cinamaldeídos (M=H ouMe) pode ser clivado para fornecer um aldeído (M=H) ou cetona (M=Me) XVdiretamente em um processo de pote único usando-se um reagente tal comoozônio ou por intermédio de diol usando-se um reagente de diidroxilação talcomo tetróxido de ósmio seguido pela clivagem subseqüente usando-se umreagente tal como acetato de chumbo (IV). [J.Med.Chem. 2000, 43, 953 - 970]

A olefina pode ser convertida em um pote único ao álcool porintermédio de ozonólise seguido pela redução com um agente redutor talcomo boroidreto de sódio. Aldeídos XV (M=H) podem ser reduzidos porálcoois primários da fórmula XVII (M=H) usando agentes redutores bemconhecidos tal como boroidreto de sódio e lítio, e um solvente tal comometanol, THF ou DMF em temperaturas entre 0 a 80 0C. Os álcooissecundários em que M não é H pode ser formado a partir dos aldeídos dafórmula XVI (M=H) por intermédio da adição das reações de um reagenteorganometálico, por exemplo reagentes Grignard (por exemplo MeMgX), emum solvente tal como THF em temperaturas entre -78°C a 80°C e sãotipicamente realizados entre 0°C em temperatura ambiente.

Preparação de intermediários de amino[l,2,4]triazóis

<formula>formula see original document page 29</formula>

Esquema 5

Com referência ao Esquema 5, amino[l,2,4]triazóis XXII sãoobtidos pelo tratamento de diamidas carbonoidrazônicas XX com um agentede acilação próprio realizando um grupo de partida (LG) em solventeadequado tal como THF, piridina ou DMF a -20 a 100°C. A reaçãoinicialmente leva a um intermediário aberto XXI que forma um anel de triazolespontaneamente, ou pode ser feito de modo que o aquecimento de 50 a200°C em piridina por exemplo ou DMF. O LG pode ser cloro ou qualqueroutro LG adequado como por exemplo gerado pelo tratamento in situ do ácidocorrespondente (LG é OH) com reagentes de ativação padrão como descritoneste abaixo. Diamidas carbonoidrazônicos XX podem ser geradas a partir deisotiouréias XVIII, em que a S-alquila (por exemplo S-Me como mostrado noEsquema 4) porções atuam como grupo de partida no tratamento comhidrazina em solventes tal como piridina, metanol, etanol, 2-propanol, THF,DMSO ou outros a -20 a 180°C. O intermediário aberto XXI também podeser diretamente gerado pelo tratamento de isotiouréias com acilidrazinas sobas mesmas condições como descrito para a reação com hidrazina. Isotiouréiassão obtidos pela S-alquilação das tiouréias correspondentes com por exemploMeI ou EtI em acetona, EtOH, THF, DCM ou outros de -100 a 100°C.

Com referência ao Esquema 6, intermediários de álcool podempor exemplo ser convertidos pelos métodos padrão aos haletoscorrespondentes (por exemplo, LG = Cl, Br etc.) pelo uso de por exemplotrifenilfosfina em combinação com iodo, N-bromosuccinimida ou N-clorosuccinimida, ou alternativamente pelo tratamento com tribrometofosforoso ou cloreto de tionila. Nos álcoois de maneira similar pode sertransformado por outro LG tal como mesilatos ou tosilatos pela utilização dohaleto de sulfonila apropriado ou anidrido de sulfonila na presença de umabase nucleofílica junta com o álcool para obter os sulfonatos correspondentes.Cloretos de alquila ou sulfonatos podem ser convertidos aos brometos ouiodetos correspondentes pelo tratamento com sais de brometo, por exemploLiBr, ou sais de iodo.

Os métodos não limitantes descritos subseqüentemente depreparação de compostos finais são ilustrados e exemplificados pelosdesenhos em que um grupo genérico, ou outros elementos estruturais dosintermediários correspondentes aqueles da fórmula I. É bem entendido queum intermediário que contém qualquer outro grupo genérico ou elementoestrutural aquela fórmula I pode ser usado nas reações exemplificadas,fornecida neste grupo ou elemento que não impediram a reação e que pode serquimicamente convertido ao grupo correspondente ou elemento da fórmula Iem um estágio posterior que é conhecido ao habilitado na técnica.Pela conexão ao nitrogênio triazol nucleofílico<formula>formula see original document page 31</formula>

Esquema 6

Com referência ao Esquema 6, compostos da fórmula I podemser preparadas pela formação de ligação através da substituição denucleofílico de um grupo de partida (LG) em que uma porção de triazol NH éatuada como nucleófilo. O átomo de nitrogênio do triazol nesta formaaniônica, gerado pelo tratamento do átomo neutro protonado correspondentecom bases em solvente adequados tal como LDA ou nBuLi em THF3 éterdietílico ou tolueno, ou NaH ou NaOtBu por exemplo DMF, ou K2CO3 emacetonitrila ou cetonas tal como 2-butanona em uma temperatura de -100 a150°C. O LG é preferivelmente cloro, bromo, OMs e OTs. A reaçãonucleofílica também pode não ser retiradas em uma maneira estéreo seletivapela utilização de materiais de partida enantiomericamente puros ouenriquecidos em que um grupo de partida LG é ligado ao estereocentro.Opcionalmente, as quantidades catalíticas ou esteométricas de um iodetoalcalino metálico, tal como Lil, pode estar presente para facilita o mesmoatravés do deslocamento in situ do grupo de partida ao iodo.<formula>formula see original document page 32</formula>

Fórmula I

Esquema 7

Os compostos da fórmula I também podem ser preparados deintermediários XXIV pela reação com uma hidrazida em um DMSOsemelhante ao solvente ou um álcool em uma temperatura de 5 O0C a 15O0Cde acordo com o Esquema 7. O intermediário XXIV pode ser formado a partirde XXIII e XIX pelo tratamento com a base semelhante a NaH ou NaOtBuem DMF ou NMP ou K2CO3 em acetonitrila em uma temperatura de -100 a 150°C.

As formas de realização da presente invenção serão agorailustradas pelos exemplos não limitantes seguintes.

Métodos gerais

Todos os materiais de partida são comercialmente disponíveisou descritos prematuramente na literatura. O espectro Ή e liC NMR foramregistrados em um Bruker 300 a 300 MHz Bruker, DPX400 a 400 MHz ouespectrômetro Varian +400 a 100 MHz5 usando TMS ou sinal de solventeresidual como referência. As medições de NMR foram feitas na escala delta(δ). O espectro de massa foram registrados em uma micromassa QTOFGlobal ou um Waters LCMS que consiste de um Alliance 2795 (LC) e umamassa de espectrômetro quádrupla simples ZQ. A massa de espectrômetro foiequipada com uma fonte de íon de eletropulverizador operado em um modode íon positivo ou negativo. A voltagem do pulverizador de íon foi ±3 kV e amassa do espectrômetro foi varrido a partir de m/z 100 a 700 com um tempode varredura de 0,8 segundos. A coluna: X-Terra MS, Waters, C8, 2,1 χ 50mm, 3,5 μm e a temperatura de coluna foi apresentada a 40°C. Um gradientelinear foi aplicado realizado de 0% a 100% de acetonitrila em 4 minutos, taxade fluxo de 0,3 mL/minuto. Fase móvel: acetonitrila /10 mM de acetato deamônio em 5% de acetonitrila em MilliQ Water. A cromatografia preparativafoi realizada em um HPLC auto preparativo de Gilson com um detector desérie de diodo. Coluna: XTerra MS C8, 19 χ 300 mm, 7 μm. Gradiente comacetonitrila /0,1 M de acetato de amônio em 5% de acetonitrila em MilliQWater, no geral realizado de 20% a 60% de acetonitrila, em 13 minutos. Taxade fluxo: 20 ml/ minutos. LC preparativo disparado por MS foi realizado emum sistema de auto purificação Waters LC-MS com um detector de série dediodo e um detector de massa ZQ. Coluna: XTerra MS C8, 19 χ 100 mm, 5μm. Gradiente com acetonitrila /0,1 M de acetato de amônio em 5% deacetonitrila em MilliQ Water, realizado e 0% a 100% de acetonitrila, em 10minutos. Taxa de fluxo: 20 ml/ minuto. Em alguns casos a purificação poruma cromatografia foi realizada em gel de sílica de rotação / sulfato de cálciohidratado (Merck, 60 PF-254 com sulfato de cálcio) revestido com lâminas devidro, com a camada de revestimento de 2 mm usando-se um TC Research7924T chromatotron. Alternativamente coluna de extração Chem Elut(Varian, cat #1219-8002) e Mega BE-SI (ligação sílica Elut) colunas SPE(Varian, cat # 12256018; 12256026; 12256034) foram usados durante apurificação dos produtos.

O aquecimento de microondas foi realizado em uma cavidadede microondas do modo simples do sintetizador Smith produzindo irradiaçãocontínua a 2450 MHz (Personal Chemistry AB, Uppsala, Sweden).

Exemplos

A invenção será ilustrada agora pelos seguintes exemplos nãolimitantes.

Exemplo 1: 2-CIoro-N-hidróxi-acetamidina

<formula>formula see original document page 34</formula>

Usando uma modificação do procedimento de Shine et ai., J.Heterocyclic Chem. (1989) 26:125-128, uma solução de cloroacetonitrila (20g, 265 mmol), cloridreto de hidroxilamina (18,4 g, 265 mmol) e água (66 ml)foram esfriados a 15°C usando um banho de água fria. Carbonato de sódio(14 g, 132 mmol) foi adicionado em forma de porção à mistura de reação,mantendo a temperatura abaixo de 30°C. A mistura de reação foi agitada a3O0C por 1 hora usando um banho de água aquecido. O sólido de cloreto desódio foi adicionado à mistura de reação. A fase aquosa foi extraída com éterdietílico (4 vezes de 150 ml). A fase orgânica combinada foi secada (sulfatode sódio), filtrada e concentrada à vácuo. O resíduo bruto foi triturado comuma mistura de éter dietílico em hexanos para isolar o composto título (13,5g) como um sólido amarelo limão.

1H RMN (CDCl3): δ (ppm) 4,71 (amplo s, 2 H), 4,04 (s, 2 H).

Exemplo 2: 3-CIorometil-5-m-tolil-[1,2,4]oxadiazol

<formula>formula see original document page 34</formula>

adicionado a uma suspensão de 2-cloro-N-hidróxi-acetamidina (440 mg, 4,1mmol) em diclorometano (10 ml) em temperatura ambiente. Após agitaçãopor 30 minutos, trietilamina (622 μΐ,, 4,5 mmol) foi adicionado e agitado poruma hora adicional. A mistura de reação foi diluída com diclorometano,lavada com água e salmoura, secada em anidro de sulfato de sódio, filtrada econcentrada à vácuo. A cromatografia de coluna por vaporização instantâneausando 10 a 20% de acetato de etila em hexanos produzindo 814 mg dointermediário do éster acíclico. O DMF foi adicionado a este intermediário e

Cloreto de 3-Metil-benzoila (802 μΐ,, 6,1 mmol) foientão aquecido a 135°C por 4 horas para o efeito da ciclização por oxadiazol.Após o esfriamento a mistura de reação foi lavada com água (3 vezes) esalmoura, secada em anidro de sulfato de sódio, filtrada e concentrada. Apurificação por cromatografia de coluna por vaporização instantânea em gelde sílica usando 5% de acetato de etila em hexanos produzindo o compostotítulo 469 mg (54% em 2 etapas) como um sólido branco.

1H RMN (CDCl3): δ (ppm) 7,99 (s, 1 H), 7,97 (m, 1 H), 7,43 (d, 2 H), 4,68 (s,2 H), 2,45 (s, 3 H).

Exemplo 3: 3-(3-Clorometil-[l,2,4]oxadiazol-5-il)-benzonitrila

<formula>formula see original document page 35</formula>

O composto título foi preparado como descrito pelo Exemplo 2usando o composto título do Exemplo 1 (4,05 g, 37,4 mmol) e cloreto de 3-cianobenzoíla (6,2 g, 37,4 mmol) para dar 3,57 g (43%).1H RMN (CDCl3): δ (ppm) 8,47 (amplo s, 1 H), 8,41 (dd, 1 H), 7,91 (dd, 1H), 7,72 (t, 1 H), 4,70 (s, 2 H); GC-MS (M+): 219,

Exemplo 4: 3-Clorometil-5-(3-cloro-fenil)-l,2,4-oxadiazol

<formula>formula see original document page 35</formula>

Ácido 3-Clorobenzóico (2,82 g, 18 mmol), EDCI (3,46 g, 18mmol), HOBt (2,76 g, 18 mmol) e o composto título do Exemplo 1 (1,75 g,16,2 mmol) [Chem. Ber. 1907, 40, 1639] em DMF (40 ml). O intermediárioresultante foi aquecido a 135°C em DMF (40 ml). A purificação porcromatografia em gel de sílica SPE usando 2% de acetona em hexanosproduzem o composto título (1,46 g, 39% de rendimento).1H RMN (300 MHz, CDCl3): δ (ppm) 8,17 (m, 1 H), 8,07 (dd, 1 H), 7,60 (m,1H), 7,55 (t, 1 H), 4,69 (s, 2H).

Exemplo 5: metassulfonato de l-[5-(3-clorofenil)-l,2,4-oxadiazoI-3-il]etila<formula>formula see original document page 36</formula>

Etapa A: N', 2-diidroxipropanimidamida

<formula>formula see original document page 36</formula>

Cloridreto de hidroxilamina, 44,2 g (0,64 mol) e 25,5 g (0,64mol) hidróxido de sódio foram dissolvidos em etanol (500 ml) emtemperatura ambiente e agitado por 3 horas. Após a filtração, 8,11 g (0,11mol) 2-hidroxipropanonitrila foram adicionados ao filtrado, seguida pelaagitação por 4 horas. Após a concentração por secura o composto do sub-título foi obtido pelo qual foi diretamente usado na próxima etapa.1H RMN (DMSO-d6): δ (ppm) 8,88 (s, 1 H), 5,15 (s, 1 H), 5,02 (s, 1 H), 4,00(q, 1H), 1,19 (d, 3 H).

Etapa B: l-[5-(3-clorofenil)-l,2,4-oxadiazol-3-il]etanol

<formula>formula see original document page 36</formula>

O material bruto da Etapa A (6,45 g) foi esfriado em um banhode gelo com 23,5 ml de DEA em THF (200 ml). Para esta pasta 21,94 g decloreto de 3-clorobenzoila foi adicionado. A mistura foi aquecida emtemperatura ambiente e agitada por 2 horas. A adição de Et2O (200 ml),lavado com NH4Cl aquoso saturado e extraído novamente da camada aquosadando após a combinação e concentração das camadas orgânicas seguida pelasecagem à vácuo 27,24 g, pelo qual foi diretamente usada na próxima etapa.O material foi dissolvido em etanol (250 ml) e submetido à refluxo por 1hora, seguido pela adição de 14,0 g (170 mmol) de acetato de sódio em água(40 ml). Após submeter ao refluxo durante a noite, esfriamento emtemperatura ambiente e adição de água (250 ml) a mistura foi concentrada àvácuo por cerca de !/2 deste volume, resultando em um precipitado que foifiltrado e recristalizado a partir de EtOAc / heptano para produzir 6,45 g(25%) do composto do sub-título.1H RMN (300 MHz, CDCl3): δ (ppm) 8,14 (s, 1 Η), 8,02 (d, 1 Η), 7,57 (d, 1Η), 7,47 (t, 1 Η), 5,04 - 5,14 (m, 1 Η), 2,51 (d, 1 Η), 1,67 (d, 3 Η).

Etapa C: metassulfonato de l-[5-(3-clorofenil)-l,2,4-oxadiazol-3-il]etila

Cloreto de metano sulfonila (40 μΐ, 0,49 mmol) foi adicionadoa uma mistura de TEA (95 μΐ, 0,67 mmol) e o composto do sub-título daEtapa 5B (100 mg, 0,45 mmol) em DCM (5 ml). Após agitação por 15minutos a mistura foi lavada com água e salmoura, secada e concentrada e ocomposto título foi obtido em 135 mg de rendimento.

1H RMN (300 MHz, CDCl3): δ (ppm) 8,1 (t, 1 H), 8,0 (m, 1 H), 7,6 (m, 1 H),7,5 (t, 1 H), 5,9 (q, 1 H), 3,1 (s, 3 H), 1,9 (d, 3 H).

Exemplo 6.1: éster etílico do ácido 4-(3-Cloro-fenil)-2,4-dioxo-butírico

<formula>formula see original document page 37</formula>

Hidreto de sódio (60% de dispersão de óleo, 1,24 g, 31,1mmol) foi adicionado em porções a uma solução de 3-cloroacetofenona (4,0g, 25,9 mmol) e oxalato de dietila (4,54 g, 31,1 mmol) em DMF (32 ml) a0°C. A mistura agitada em temperatura ambiente por 1 hora foi entãoaquecido a 80°C por uma hora e meia. Após o esfriamento, a mistura foitratada com 3N de HCl e então diluída com acetato de etila. A camadaorgânica foi lavada com água (três vezes) e salmoura saturada, secada emanidro de sulfato de sódio, filtrada e concentrada, o resíduo resultante foientão purificado por cromatografia de coluna por vaporização instantânea emsílica usando 0 a 10% de acetato de etila em hexanos para produzir ocomposto título (4,43 g, 67%, sólido amarelo).

1H RMN (CDCl3): δ (ppm) 15,12 (amplo s, 1 H), 7,98 (s, 1 H), 7,88 (d, 1 H),7,58 (d, 1 H), 7,47 (t, 1 H), 7,05 (s, 1 H), 4,39 (m, 2 H), 1,41 (m, 3H).

O exemplo abaixo foi preparado de acordo com o procedimento do Exemplo 6.1<formula>formula see original document page 38</formula>

Exemplo 7.1: éster etílico do ácido 5-(3-Cloro-fenil)-isoxazol-3-carboxílico

Uma solução do composto título do Exemplo 6.1 (3,0 g, 11,8mmol) e cloridreto de hidroxilamina (2,46 g, 35,4 mmol) em metanol (60 ml)foi aquecido a 80°C por 4 horas. Após o esfriamento, a mistura foi filtrada elavada com metanol frio para produzir o composto título em mistura com oéster metílico (2,0 g, 71%, sólido branco).

1H RMN (300 MHz, CDCl3): δ (ppm) 7,82 (s, 1 H), 7,72 (m, 1 H), 7,47 (m, 2H), 4,03 (s, 3H).

O exemplo abaixo foi preparado de acordo com oprocedimento do Exemplo 7.1

<formula>formula see original document page 38</formula><formula>formula see original document page 39</formula>

Hidreto de lítio alumínio (320 mg, 8,4 mmol) foi levementeadicionado a uma solução da mistura obtida no Exemplo 7.1 (2,0 g, 8,4mmol) em THF (100 ml) em temperatura ambiente. Após 1 hora, a mistura dereação foi extinto com água e então extraído com acetato de etila. A camadaorgânica foi lavada com água e salmoura saturada, secada em anidro desulfato de sódio, filtrada e concentrada. O resíduo resultante foi entãopurificado por cromatografia de coluna por vaporização instantânea usandoa 40% de acetato de etila em hexano para produzir o composto título (1,32g, 75%, sólido amarelo).

1H RMN (300 MHz, CDCl3): δ (ppm) 7,78 (s, 1 H), 7,68 (m, 1 H), 7,43 (m, 2H), 6,63 (s, 1 H), 4,84 (d, 2 H), 2,23 (t, 1H).

Exemplo 8.2: [5-(3-Metil-feniI)-isoxazol-3-il]-metanol

<formula>formula see original document page 39</formula>

Em uma maneira similar usando DIBAL-H como o agente deredução e realização da reação a -78°C a 0°C, o composto título foi obtidocomo um sólido branco (952 mg, 17% de rendimento).1H RMN (300 MHz, CDCl3): δ 7,62 (s, 1 H), 7,60 (d, 1 H), 7,37 (t, 1 H), 7,26(d, 1 H), 6,59 (s, 1 H), 4,84 (s, 2H) ), 2,44 (s, 3H).

O exemplo abaixo foi preparado de acordo com oprocedimento do Exemplo 8.2:

<table>table see original document page 40</column></row><table> Exemplo 9.1: éster 5-(3-cloro-fenil)-isoxazol-3-ilmetílico do ácidometanossulfônico

Trietil amina (965 mg, 9,5 mmol) e cloreto demetanossulfonila (820 mg, 7,2 mmol) foram adicionados a uma solução docomposto título do Exemplo 8.1 (1,0 g, 4,8 mmol) em DCM (50 ml) a 0°C.Após 1 hora, a mistura de reação foi extinto com bicarbonato de sódiosaturado frio e então a camada orgânica foi lavada com salmoura saturada,secada em anidro de sulfato de sódio, filtrada e concentrada para produzir ocomposto título como um sólido marrom claro (1,4 g, 100%).

1H RMN (300 MHz, CDCl3): δ (ppm) 7,80 (s, 1 H), 7,70 (m, 1 H), 7,45 (m, 2H), 6,73 (s, 1 H), 5,37 (s, 2 H), 3,16 (s, 3H).

O exemplo abaixo foi preparado de acordo com oprocedimento do Exemplo 9.1

<table>table see original document page 40</column></row><table> Exemplo 10: l-[5-(3-Cloro-feniI)-isoxazol-3-iI]-etanona<formula>formula see original document page 41</formula>

Em um frasco com tampa de rosca equipado com barra deagitação adicionado com iodeto de metil magnésio (3 M em éter dietílico)(0,79 ml, 2,38 mmol), tolueno (1 ml), tetraidrofurano (0,39 ml, 4,77 mmol) etrietilamina (1 ml, 7,15 mmol). A solução esfriada abaixo de O0C e por estasolução adicionada do composto título do Exemplo 7.1 (300 mg, 1,19 mmol)em tolueno (5 ml). A mistura resultante foi agitada a 0°C por 5 horas. Amistura de reação foi extinta com 1 M de ácido clorídrico (aquoso, 6,5 ml, 6,5mmol), diluído com tolueno (35 ml), seqüencialmente lavado com água (50ml), bicarbonato de sódio saturado (aquoso, 30 ml), água (50 ml) e salmoura(30 ml). A fase orgânica foi concentrada à vácuo. O resíduo isolado foidissolvido em metanol (8 ml) e 20% de hidróxido de potássio (aquoso, 1 ml).

A mistura foi agitada a 45°C por 30 minutos. Neste ponto a mistura foiconcentrada à vácuo. O resíduo isolado foi dissolvido em tolueno (60 ml),seqüencialmente lavado com água (50 ml), bicarbonato de sódio saturado(aquoso, 50 ml) e água (50 ml). A fase orgânica foi concentrada à vácuo. Oresíduo bruto foi purificado em gel de sílica usando 2% de acetato de etila emhexanos para isolar o composto título como um sólido branco (156 mg, 60%).1H RMN (300 MHz, CDCl3): δ (ppm) 7,77 (m, 1 H), 7,66 (m, 1 H), 7,42 (m, 2H), 6,90 (s, 1 H), 2,69 (s, 3H).

Exemplo 11: Éster l-[5-(3-cloro-fenil)-isoxazol-3-il]-etílico do ácidometanossulfônico

<formula>formula see original document page 41</formula>

Etapa A: l-[5-(3-Cloro-fenil)-isoxazol-3-il]-etanol

<formula>formula see original document page 41</formula>

Em um frasco com tampa de rosca equipado com barra deagitação adicionado o composto título do Exemplo 10 (100 mg, 0,45 mmol),boroidreto de sódio (34 mg, 0,90 mmol) e metanol (3 ml). A misturaresultante foi agitada em temperatura ambiente por 3 horas. A reação foiextinta com água (30 ml) e salmoura (30 ml), extraída com diclorometano (3vezes com 30 ml). A fase orgânica combinada foi secada (sulfato de sódio),filtrada e concentrada, à vácuo para isolar o composto do sub-título como umsólido branco (110 mg).

1H RMN (300MHz, CDCl3): δ (ppm) 7,69 (m, 1 H), 7,59 (m, 1 H), 7,37 (m, 2H), 6,59 (s, 1 H), 5,07 (q, 1 H), 3,45 (amplo s, 1 H), 1,58 (d, 3H).

EtapaB

<formula>formula see original document page 42</formula>

Em um frasco com tampa de rosca equipado com barra deagitação adicionado o composto do sub-título da Etapa 12A (110 mg, 0,49mmol), diclorometano (3 ml) e trietilamina (0,34 ml, 2,46 mmol). A misturafoi esfriado a 0°C e para adicionar o cloreto de metano sulfonila (0,08 ml,0,98 mmol). A mistura de reação foi agitada em temperatura ambiente por 30minutos. A reação foi extinta com bicarbonato de sódio saturado (aquoso, 40ml) e extraído com diclorometano (3 vezes de 30 ml). A fase orgânicacombinada foi lavada com salmoura (40 ml), secada (sulfato de sódio),filtrada e concentrada, à vácuo para isolar o composto título como um óleo marrom.

1H RMN 300 MHz, solvente): δ (ppm) 7,76 (d, 1 H), 7,66 (m, 1 H), 7,42 (m,2H), 6,69 (s, 1 H), 5,90 (q, 1 H), 3,05 (s, 3 H), 1,82 (d, 3H).

Exemplo 12: 3-(3-Hidroximetil-isoxazol-5-il)-benzonitrila

<formula>formula see original document page 42</formula>

Etapa A: Carboxilato de 5-(3-iodofenil)isoxazol-3-metilaHidreto de sódio (60% de dispersão de óleo, 4,9 g, 123 mmol)foi adicionado em porções a uma solução de 3-iodoacetofenona (25,18 g,102,3 mmol) e oxalato de dimetila (14,5 g, 123 mmol) em DMF (125 ml) a0°C. A mistura foi agitada em temperatura ambiente por 1 hora e foi entãoaquecido a 115°C por 1 hora. Após o esfriamento, a mistura foi tratada com 3M de HCl e então diluído com acetato de etila. A camada orgânica foi lavadatrês vezes com água e salmoura saturada, secada em anidro de sulfato desódio, filtrada e concentrada. A purificação por cromatografia (sílica, 0 a 10%de acetato de etila em hexanos) produzindo o composto título como um sólidoamarelo (24,2 g, 71,3%).

1H RMN 300 MHz, solvente): δ (ppm) 15,01 (amplo s, 1 H), 8,34 (d, 1 H),7,95 (m, 2 H), 7,28 (s, 1H), 7,25 (m, 1 H), 3,98 (s, 3H).

Etapa B: éster metílico do ácido 5-(3-Iodo-fenil)-isoxazol-3-carboxílico

<formula>formula see original document page 43</formula>

Uma solução do composto do sub-título da Etapa 12A (33,9 g,102 mmol) e cloridreto de hidroxilamina (21,3 g, 306 mmol) em metanol (450ml) foi aquecido um refluxo por 4 horas. Após o esfriamento, a mistura foifiltrada e lavada com metanol frio para produzir o composto do sub-título(24,1 g, 72%, sólido marrom).

1H RMN (300 MHz, CDCl3): δ (ppm) 8,18 (m, 1 H), 7,82 (t, 2 H), 7,26 (t, 1H), 6,97 (s, 1 H), 4,03 (s, 3H).

Etapa C: Carboxilato de 5-(3-cianofenil)isoxazol-3-metila

<formula>formula see original document page 43</formula>

O produto da Etapa 12B, cianeto de zinco (1,0 g, 3,04 mmol),tetraquis(trifenilfosfina)paládio(0) (351 mg, 0,30 mmol) em DMF (10 ml) foiagitado a 80°C por 10 minutos. A mistura foi diluída com acetato de etila efiltrado através de Celite, lavado três vezes com água e salmoura saturada,secada em anidro de sulfato de sódio, filtrada e concentrada. A purificaçãopor cromatografia (sílica, 5 a 70% de acetato de etila em hexanos) produzindoo composto do sub-título como um sólido amarelo (660 mg, 91%).

1H RMN (300 MHz, CDCl3): δ (ppm) 8,12 (m, 1 H), 8,07 (dd, 1 H), 7,81 (dd,1H), 7,67 (dd, 1 H), 7,06(s, 1 H), 4,05 (s, 3H).

Etapa D: Acido [5-(3-cianofenil)isoxazol-3-carboxilico

<formula>formula see original document page 44</formula>

Para o produto da Etapa 12C (660 mg, 2,89 mmol) em THF(10 ml), foi adicionado LiOH (6,9 ml de uma solução de 0,5 M) e a misturafoi agitada a 70°C por 30 minutos A mistura foi esfriada, diluída com água eacidificado com IN de HCl ao pH 2 e filtrado para dar 597 mg do produtocomo um sólido branco (96% de rendimento).

1H RMN (300 MHz, DMSO-d6): δ (ppm) 14,10 (amplo s, 1 H), 8,48 (s, 1 H),8,27 (d, 1 H), 8,01 (d, 1 H), 7,78 (dd, 1 H), 7,60(s, 1H).

Etapa E: 3-(3-Hidroximetil-isoxazol-5-il)-benzonitrila

A uma suspensão do produto da Etapa 12D (497 mg, 2,3mmol) em THF (10 ml) a 0°C foi adicionado Et3N (323 ul, 2,3 mmol),etilcloroformiato (222 ul, 2,3 mmol) e a reação foi agitada a 0°C por 1 hora.

A mistura foi filtrada e NaBH4 (219mg, 5,8 mmol) em H2O (5ml) foiadicionado às gotas ao filtrado a 0°C. Após a adição foi completa, a reação foiagitada a 0°C por 1,5 horas e IN de HCl foi adicionado. A mistura foi entãodiluída com éter, a camada orgânica foi lavada três vezes com água esalmoura saturada, secada em anidro de sulfato de sódio, filtrada econcentrada. A purificação por cromatografia (sílica, 0 a 10% de acetato deetila em hexanos) produzindo o composto título como um sólido branco (420 mg, 76%).1H RMN (300 MHz, CDCl3): δ (ppm) 8,08 (d, 1 Η), 8,05 (dd, 1 Η), 7,75(dd, 1Η), 7,41 (dd, 1 Η), 6,72(s, 1 Η), 4,86(d, 2 Η), 2,10(t, 1Η).

Exemplo 13: Ácido metanossulfônico do éster 5-(3-ciano-fenil)-isoxazol-3-ilmetílico

<formula>formula see original document page 45</formula>

Cloreto de metanossulfonila (111 ul, 1,43 mmol) e trietilamina(265 ul, 1,9 mmol) foram adicionados a uma solução de 3-[3-(l-hidroxietil)isoxazol-5-il]benzonitrila (200 mg, 0,95 mmol) em diclorometano(10 ml) a 0°C. A mistura de reação foi agitada a 0°C por 30 minutos, entãolavada com bicarbonato de sódio saturado frio. A camada orgânica foi lavadacom salmoura, secada com sulfato de sódio e concentrada à vácuo para dar ocomposto título que foi usado sem purificação adicional (237 mg de umsólido branco, 90%).

1H RMN (300 MHz, CDCl3): δ (ppm) 8,10 (d, 1 H), 8,04 (dd, 1 H), 7,77 (dd,1 H), 7,65 (t, 1 H), 6,81 (s, 1 H), 5,39 (s, 2 H), 3,14 (s, 3 H),

Exemplo 14.1: Cinamaldeído tosil hidrazona

<formula>formula see original document page 45</formula>

Cinamaldeído (8,80 g, 66,6 mmol) foi adicionado àsulfonamida de p-tolueno (12,44 g, 66,79 mmol) em etanol (70 ml). A reaçãoimediatamente retornado com sólido e etanol (20 ml) foi novamenteadicionado. A reação foi deixada agitar em temperatura ambiente por umahora e foi então filtrado. O sólido foi lavado com metanol e secado pelapressão reduzida para produzir o composto título como um sólido branco(17,5 g, 87%).

1H RMN (300 MHz, CDCl3): δ (ppm) 8,23 (s, 1 H), 7,88 (d, 2 H), 7,60 (d, 1H), 7,34 (m, 6H), 6,83 (m, 2 H), 2,43 (s, 3H).

Exemplo 14.2: 2-Metil Cinamaldeído tosil hidrazona2-Metil-3-fenilacrilaldeído (15,0 g, 102,6 mmol) foiadicionado por sulfonamida de p-tolueno (19,2 g, 102,9 mmol) em etanol(70mL). A reação imediatamente retornado com sólido e etanol (20mL) foinovamente adicionado. A reação foi deixada agitar em temperatura ambientepor 8 horas e foi então filtrado. O sólido foi lavado com metanol e secado pelapressão reduzida para produzir o composto título como um sólido branco(30,94 g, 96%).

1H RMN (300 MHz, CD30D): δ (ppm) 7,80 (d, 2 H), 7,60 (s, 1 H), 7,35 (m,6H), 7,26 (m, 1 H), 6,67 (s, 1 H), 2,42 (s, 3 H), 2,01 (s, 3 H),Exemplo 15: 3-[5-((E)-estiril)-tetrazol-2-il]-benzonitrila

<formula>formula see original document page 46</formula>

Uma solução aquosa (15 ml) de nitrito de sódio (1,58, 22,8mmol) foi adicionado a uma solução de 3-aminobenzonitrila em água (15 ml),concentrada de ácido clorídrico (10 ml) e etanol (20 ml) por intermédio de umfunil de gotejamento. A reação foi deixada agitar a 0°C por dez minutos. Estasolução foi vertida em um funil de gotejamento e gelo foi adicionado. Este foiadicionado às gotas um uma solução de cinamaldeído tosil hidrazona (6,73 g,22,4 mmol) em piridina (60 ml). A mistura foi deixada agitar durante a noite.O trabalho aquoso foi realizado pela extração com diclorometano três vezes.As camadas combinadas foram lavadas com salmoura, secadas em sulfato desódio, filtradas e concentradas. O produto bruto foi parcialmente purificadopor cromatografia de coluna (20% de EtOAc / hexanos para dar 6,12 g (14%de rendimento) do composto título como um sólido púrpura claro que foiusado diretamente na próxima etapa.

Exemplo 16.1: 3-(3-cloro-fenil)-5-estiril-2H-tetrazol<formula>formula see original document page 47</formula>

Uma solução aquosa (5 ml) de nitrito de sódio (540,9 mg,7,839 mmol) foi adicionado a uma solução de 3-cloroanilina em água (7 ml),concentrada ácido clorídrico (3 ml) e etanol (7 ml) por intermédio de um funilde gotejamento. A reação foi deixada agitar a 0°C por dez minutos. Estasolução foi vertida em um funil de gotejamento e gelo foi adicionado. Este foiadicionado às gotas um uma solução de cinamaldeído tosil hidrazona (2,3 g,7,7 mmol) em piridina (20 ml). Esta foi deixada agitar durante a noite. Otrabalho aquoso foi realizado pela extração com DCM três vezes. As camadascombinadas foram lavadas com salmoura, secadas em sulfato de sódio,filtradas e concentradas. O produto bruto foi purificado por cromatografia decoluna (20% de EtOAc /hexanos) para produzir o composto título como umsólido púrpura claro (433 mg, 19%).

1H RMN (300 MHz5 CDCl3): δ )(ppm) 8,21 (m, 1 H), 8,09 (dt, 1 H), 7,89 (d,1 H), 7,61 (m, 2 H), 7,49 (m, 5 H), 7,24 (d, 1H).

Exemplo 16.2: 2-(3-clorofeniI)-5-[(E)-l-metil-2-fenilvinil]-2H-tetrazol

<formula>formula see original document page 47</formula>

Uma solução aquosa (5 ml) de nitrito de sódio (654 mg, 9,5mmol) foi adicionado a uma solução de 3-cloroanilina (0,92 ml, 8,7 mmol)em água (10 ml), concentrada ácido clorídrico (ll,9mL) e etanol (7mL) porintermédio de um funil de gotejamento. A reação foi deixada agitar a 0°C pordez minutos. Esta solução foi vertida em um funil de gotejamento e gelo foiadicionado. Este foi adicionado às gotas um uma solução de 2-metilcinamaldeído tosil hidrazona (2,5g, 7,9 mmol) em piridina (IOmL). Esta foideixada agitar a 0°C por 1,5 horas. A mistura foi extraída com diclorometanotrês vezes. As camadas combinadas foram lavadas com salmoura, secada emsulfato de sódio, filtradas e concentradas. O produto bruto foi purificado porcromatografia de coluna (20% de EtOAc / hexanos) para produzir o compostotítulo como um sólido vermelho (736 mg, 28%).

1H RMN (CDCl3) δ (ppm) 8,23 (s, 1 H), 8,11 (dd, 1 H), 7,94 (s, 1 H), 7,55-7,30 (m, 7H), 2,50 (d, 3H).

Exemplo 17: 5-estiril-2-m-toIil-2H-tetrazol

<formula>formula see original document page 48</formula>

O composto título (320 mg, 30%, sólido amarelo escuro) foiobtido pela adição o sal diazônio preparado de m-tolilamina (0,44 ml, 4,1mmol) com nitrito de sódio aquoso (286 mg, 4,1 mmol em 3 ml de água),ácido clorídrico (5,5 ml, 17,8 mmol) em etanol (4 ml), a uma solução decinamaldeído tosil hidrazona (1,21 g, 4,1 mmol) em piridina (30 ml). Oproduto bruto foi purificado por cromatografia de coluna (3 a 6% de EtOAc /hexanos).

1H RMN (300 MHz, CDCl3): δ (ppm) 8,00 (s, 1 H), 7,98 (d, 1 H), 7,88(d, 1H), 7,63 (m, 2 H), 7,38-7,47 (m, 4 H), 7,33 (d, 1 H), 7,26 (d, 1 H), 2,55 (s,3H).

Exemplo 18: Procedimento geral para Ozonolíse dos intermediários deFenil tetrazol seguido pela redução aldeído / cetona com boroidreto desódio.

Os fenil tetrazóis foram dissolvidos em diclorometano eesfriados a -78°C. Ozônio foi borbulhado através da solução por um períodode 10 a 30 minutos. O progresso da reação foi checada usando um sistema desolvente TLC com 10% de EtOAc: Hexano. Uma vez a reação parecercompleta, o boroidreto de sódio (70 mg / mmol tetrazol) e MeOH (~ 5 ml/mmol) foram adicionados à solução. A solução foi deixada equilibrarnovamente até a temperatura ambiente e deixada durante a noite. Agua (5 ml)e cloreto de amônia saturada (5 ml) foram adicionados à solução. A misturafoi concentrada sob baixa pressão e o trabalho aquoso foi realizado usandoDCM, água e salmoura. Anidro de sulfato de sódio foi usado para secar asolução. Uma coluna de vaporização instantânea padrão foi realizada usandoum sistema de solvente de 10% a 35% de EtOAc: hexanos. As amostrasforam submetidas à análise RMN. A seguinte tabela representa todas asreações realizadas.

Os exemplos abaixo foram preparados de acordo com oprocedimento genético pelo Exemplo 18.

Exemplo 19: l-[2-(3-CIoro-feniI)-2H-tetrazol-5-il]-etanona

<formula>formula see original document page 49</formula>

O composto título do Exemplo 16.3 (1,50 g, 5,06 mmol) foidissolvido em diclorometano (79 ml) e ozônio foi borbulhado através dasolução por um período de 15 minutos. A solução tornou-se laranja a uma corlaranja escura. A perfeição da reação foi checada usando um sistema desolvente TLC 10% de EtOAc: hexanos. Oxigênio foi borbulhado através dasolução por 5 minutos adicionais para remover qualquer excesso restante deozônio. Sulfeto de dimetila (5 ml) foi adicionado à solução e a mistura foideixada equilibrar em temperatura ambiente. O solvente foi removido sobvácuo e uma substância marrom oleosa permaneceu. Uma coluna devaporização instantânea de 3 cm foi preparada contendo -15 cm de sílica e~3cm de areia. A coluna foi realizada usando um sistema de solvente de 5%de EtOAc: hexanos. As frações eluídas contendo o produto onde coletadas econcentrada sob baixa pressão. O produto foi submetido à análise magnéticanuclear. Cromatografia de coluna por vaporização instantânea (sílica, 5% deEtOAc: hexanos) produziu 893 mg (79,4% de rendimento) do compostotítulo.

1H RMN (300 MHz, CDCl3): δ (ppm) 8,22 (s, 1 H), 8,11 (m, 1 H), 7,54 (d, 1H), 2,85 (s, 3H).

Exemplo 20: l-[2-(3-Cloro-fenil)-2H-tetrazol-5-il]-2-fenil-etano-l,2-diol

<formula>formula see original document page 50</formula>

O composto título do Exemplo 16 (127,0 mg, 0,446 mmol) foipesado em um frasco e ácido cítrico (171 mg, 0,892 mmol) foi adicionadoseguido pela mistura de 1: 1 de t-butanol e água (3 ml). Óxido de osmato depotássio hidratado (0,3mg) foi adicionado seguido pelo 4-metil morfolina N-óxido (em 1,5 ml de água) e a reação foi deixada agitar durante a noite. Areação foi filtrada e lavada com água e 1 M de ácido clorídrico para produziro composto título como um sólido bege (95,4 mg, 68%).1H RMN (300 MHz, CD3OD): δ (ppm) 8,09 (s, 1 H), 8,012 (dt, 1 H), 7,58 (m,2H), 7,25 (m, 5 H), 5,15 (s, 2H).

Exemplo 21: l-Fenil-2-(2-m-toHl-2H-tetrazol-5-il)-etano-l,2-diol<formula>formula see original document page 51</formula>

O composto título (2,26 g, usado bruto, produz determinadoapós a próxima Etapa) foi obtido a partir do composto título do Exemplo 17(1,44 g, 5,5 mmol) usando ácido cítrico (2,1 g, 10,9 mmol), óxido de osmatode potássio hidratado (espátula pequena), 4-metil morfolina N-óxido (710 mg,6,1 mmol) na mistura de 1: 1 de t-butanol e água (52 ml). O produto bruto daextração não foi ainda purificado mas usado diretamente na próxima etapa.

Exemplo 22: 2-(3-Cloro-fenil)-2H-tetrazol-5-carbaIdeído

<formula>formula see original document page 51</formula>

O produto bruto do composto título do Exemplo 21 (50,0 mg,0,158 mmol) foi pesado em um frasco e tolueno (3 ml) foi adicionado.Carbonato de potássio (47,0 mg, 0,340 mmol) e acetato de chumbo (IV) (70,0mg, 0,158 mmol) foram adicionados com agitação. A reação foi deixadaagitar por 2,5 horas. A reação foi filtrada e acetato de etila foi adicionado aofiltrado e o trabalho aquoso foi realizado. A camada orgânica foi lavada comsalmoura, secada em sulfato de sódio, filtrada e concentrada. O produto brutofoi purificado por cromatografia de coluna (40% de EtOAc / hexanos) paraproduzir o produto puro como um sólido branco (22,3 mg, 68%).

1H RMN (300 MHz, CDCl3): δ (ppm) 10,34 (s, 1 H), 8,27 (s, 1 H), 8,14 (m, 1H), 7,58 (d, 2H).

Exemplo 23: 3-(5-FormiI-tetrazol-2-il)-benzonitrila

<formula>formula see original document page 51</formula>O composto título do Exemplo 15 (400 mg, 1,46 mmol) foidissolvido em diclorometano (20 ml) e ozônio foi borbulhado através dasolução por um período de 15 minutos. A solução mudou da cor vermelhapara amarela. A perfeição da reação foi então checada usando um sistema desolvente TLC EtOAc: hexanos a 20%. Sulfeto de dimetila (1,5 ml) foi entãoadicionado à solução e a mistura foi deixada equilibrar em temperaturaambiente durante a noite. O solvente foi então removido sob vácuo.Cromatografia de coluna por vaporização instantânea (sílica, 20 a 30% deEtOAc: hexanos) produziu 270 mg (91,7% de rendimento) do produto.1H RMN (300 MHz, CDCl3): δ (ppm) 10,36 (s, 1 H), 8,57 (s, 1 H), 8,54 (d, 1H).

Exemplo 24: 2-m-ToliI-2H-tetrazol-5-carbaldeído

<formula>formula see original document page 52</formula>

O composto título (870 mg, 84% em 2 etapas) foi obtido apartir do produto bruto do composto título do Exemplo 23 (bruto a partir de5,5 mmol da reação acima) usando carbonato de potássio (2,02 g, 14,6 mmol)e acetato de chumbo (IV) (2,52 g, 5,7 mmol) em tolueno (35 ml) ediclorometano (20 ml). O produto bruto foi purificado por cromatografia decoluna (10% EtOAc / hexanos).

1H RMN (300 MHz, CDCl3): δ (ppm) 10,34 (s, 1 H), 8,06 (s, 1 H), 8,03 (d, 1H), 7,50 (t, 1 H), 7,40 (d, 1 H), 2,50 (s, 3H).

Exemplo 25: 3-(5-Hidroximetil-tetrazoI-2-il)-benzonitrila

<formula>formula see original document page 52</formula>

Dimetil formamida (7 ml) foi adicionado ao composto títulodo Exemplo 24 (237 mg, 1,19 mmol) e a mistura foi esfriada a 0°C. Et2O (5ml) e boroidreto de sódio (952 mg, 23,8 mmol) foram então adicionados àreação e a reação foi deixada proceder por 15 minutos. Após este período detempo, a reação foi transferida a um funil separador e 3 M de HCl (10 ml) foiadicionado às gotas à reação. O trabalho aquoso foi então realizado usandodiclorometano, água e salmoura. A camada orgânica foi secada em anidro desulfato de sódio, filtrada e concentrada. Cromatografia de coluna porvaporização instantânea (sílica, 35% de EtOAc: hexanos) dão o compostotítulo como um sólido branco (201 mg, 85%)

1H RMN (300 MHz, CDCl3): δ (ppm) 8,47 (s, 1 H), 8,45 (d, 1 H), 7,81 (d,1H).

Exemplo 26.1: l-[2-(3-cloro-fenil)-2H-tetrazoI-5-il-etanoI

O composto título do Exemplo 22 (75,6 mg, 0,362 mmol) foidissolvido em THF (2 ml) sob argônio e o frasco foi colocado em imersão emgelo. Brometo de metil magnésio (1 M de solução / éter butílico 0,51 ml,0,507 mmol) foi adicionado às gotas enquanto a reação foi esfriada em gelo.

Após quinze minutos a 0°C, o banho de gelo foi removido e a reação foideixada agitar em temperatura ambiente por duas horas. Acido clorídrico (1M) foi adicionado para extinguir a reação e o trabalho aquoso foi realizadoextraindo com acetato de etila três vezes. As camadas orgânicas combinadasforam lavadas com salmoura, secada em sulfato de sódio, filtrada econcentrada. O produto bruto foi purificado por cromatografia de coluna (3%MeOH / DCM) para produzir o composto título como um óleo claro (62,4 mg,77%).

1H RMN (300 MHz, CDCl3): δ (ppm) 8,18 (s, 1 H), 8,06 (m, 1 H), 7,50 (m, 2H), 5,32 (m, 1 H), 2,69 (d, 1 H), 1,76 (d, 3H).

O exemplo abaixo foi preparado de acordo com oprocedimento do Exemplo 26

<table>table see original document page 54</column></row><table> Exemplo 27: (2-m-Tolil-2H-tetrazol-5-il)-metanol

O composto título (221 mg, 96%, sólido bege) foi obtido de 2-m-tolil-2H-tetrazol-5-carbaldeído (229 mg, 1,22 mmol) usando boroidreto delítio (3,5 ml, 7 mmol) em THF (10 ml). O produto bruto foi purificado porcromatografia de coluna (20 a 30% de EtOAc / hexanos).

1H RMN (300 MHz, CDCl3): δ (ppm) 7,97 (s, 1 H), 7,94 (d, 1 H), 7,46 (t, 1H), 7,33 (d, 1 H), 5,08 (d, 2 H), 2,50 (s, 3 H), 2,40 (t, 1H).

Exemplo 28: Procedimento geral Para formação de mesilato de tetrazol

1-[2-(3-Substituído-fenil)-2H-tetrazol-5-il]-(et/met)anol foidissolvido em diclorometano (10 ml/mmol) e esfriado a 0°C. Trietilamina (2equivalentes) e cloreto de mesila (1,5 equivalentes) foram adicionados a umareação e a mistura foi agitada por 1 hora. Bicarbonato de sódio frio foiadicionado à solução e o trabalho aquoso foi realizado usando diclorometanoe salmoura. A camada orgânica foi então secada em anidro de sulfato desódio, filtrada e concentrada. A seguinte tabela descreve as mesilações, queforam realizadas.

<table>table see original document page 54</column></row><table><formula>formula see original document page 55</formula>

Exemplo 29.1: Síntese de amino-triazol: 2-(metiltio)-4,5,6,7-tetraidro-lH-1,3-diazepina

<formula>formula see original document page 55</formula>

Iodeto de metila (0,55 ml, 1,15 mmol) foi adicionado a umasolução de l,3-diazepano-2-tiona (J. Med. Chem. 1981, 24, 1089) (1,00 g,7,68 mmol) em acetona (8 ml). A mistura de reação foi submetida à refluxopor 15 minutos. EtOH foi adicionado à solução de calor para dissolver ossólidos. Após o esfriamento em temperatura ambiente o hexano foiadicionado e o precipitado foi coletado pela filtração, lavado com hexano esecado para dar 1,79 g (86%) do composto título bruto que foi usadodiretamente na próxima etapa.

Exemplo 29.2: 2-Metilsulfanil-l,4,5,6-tetraidro-pirimidina

<formula>formula see original document page 55</formula>Tetraidro-pirimidino-2-tiona (45 g, 387 mmol) e iodometano(48 ml, 774 mmol) foram agitados em metanol (100 ml) em um frasco seladoa 70°C durante a noite. A reação foi diluída com éter dietílico e o precipitadoformado pelo qual foi filtrado. O sólido foi dissolvido em hidróxido de sódio(30 g) em água (400 ml) e extraído com porções de clorofórmio. Os extratosorgânicos foram secados em sulfato de sódio, filtrados e concentrados paradar o composto título (68 g, 98%).

Exemplo 30: Iodidreto de l,3-diazepan-2-ono hidrazona

<formula>formula see original document page 56</formula>

Hidrato de hidrazina (0,44 ml, 7,23 mmol) foi adicionado auma solução de iodidreto de 2-(metiltio)-4,5,6,7-tetraidro-1H-1,3-diazepina(1,79 d, 6,58 mmol) em EtOH (12 ml). A mistura de reação foi submetida àrefluxo por 5 horas e esfriados em temperatura ambiente Et2O foi adicionadoe o produto foi coletado pela filtração, lavado com Et2O e secado sob vácuopara dar 1,46 g (100%) do composto título bruto que foi usado diretamente napróxima etapa.

Exemplo 31: 3-piridin-3-il-6,7,8,9-tetraidro-5H-[l,2,4]triazol[4,3-a][ 1,3 ]diazepina

<formula>formula see original document page 56</formula>

Uma mistura de iodidreto de hidrazona de l,3-diazepan-2-ona(1,00 g, 3,9 mmol) e cloridreto de cloreto de nicotinoila (695 mg, 3,9 mmol)foi aquecido em um reator de microondas a 160°C por 10 minutos. A misturade reação foi vertida em solução saturada de Na2COs e extraída com DCM. Afase orgânica foi secada e concentrada. Cromatografia por vaporizaçãoinstantânea (DCM / MeOH 20: 1) dão 1,74 g do composto título bruto que foiusado diretamente na próxima etapa.1H RMN (300 MHz, CDCl3): δ (ppm) 8,66 (d, 2 Η), 7,44 (d, 2 Η), 3,15 (m, 2Η), 3,86 (m, 2 Η), 1,89 (s, 4 Η).Exemplo 31, síntese alternativa

Nicotinoil hidrazida (5 g, 36 mmol) foi adicionada a umasolução de 2-(metiltio)-4,5,6,7-tetraidro-lH-l,3-diazepina (2,32 g, 30 mmol)em n-BuOH (20 ml). A mistura de reação foi aquecida a 180°C por 20minutos e esfriado em temperatura ambiente da mistura foi diretamentesubmetida à cromatografia por vaporização instantânea de gel de sílica(EtOAc e 5% de MeOH / NH3) para dar 4,95 g do composto título.

Exemplo 32: Procedimento geral para formação de intermediários detriazol cíclicos

O cloreto ácido foi adicionado por um frasco seguido pelapiridina (0,5 ml/ mmol). A hidrazina (1 equivalente) foi então adicionado àsolução e submetido à refluxo a 13O0C durante a noite. A solução foibasificada usando carbonato de potássio e trabalho aquoso foram entãorealizados usando EtOAc, água, e salmoura. A camada orgânica foi secada emanidro de sulfato de sódio, filtrada e concentrada. Um SPE / coluna devaporização instantânea foi realizada usando um 10 a 20% de sistema desolvente MeOH: EtOAc. As frações de eluição foram coletadas econcentradas. A seguinte tabela descreve os aminotriazóis formados.

Em uma maneira similar os compostos seguintes foramsintetizados:

<table>table see original document page 57</column></row><table><table>table see original document page 58</column></row><table><table>table see original document page 59</column></row><table>

Exemplo 33: 3-(2-Metóxi-piridin-4-il)-5,6,7,8-tetraidro-[1,2,4]triazol[4,3-ajpirimidina

O composto título do Exemplo 32.9 (200 mg) e o paládio deum catalisador de carbono 10% (100 mg) foram combinados. A reação foisubmetida à refluxo com gás de hidrogênio. EtOH (3,2 ml) e trietilamina (0,6ml) também foram adicionados ao frasco. A solução foi agitada durante anoite em temperatura ambiente. A solução foi então filtrada através de Celite.

A 10% IM de NH3 MeOH em coluna de vaporização instantânea de sílicaDCM foi realizada a fim de remover quaisquer tirantes do sal. A solução foiconcentrada e RMN foi retirado. A solução foi concentrada para dar a pó desólido branco (163 mg, 75% de rendimento).

1H RMN (CDCl3), δ (ppm): 8,27 (d, 1 H), 7,28 (m, 1 H), 6,99 (s, 1 H), 6,05(amplo s, 1 H), 4,14 (t, 2 H), 4,1 (s, 3 H), 3,6 (t, 2 H), 2,1 (m, 2H)

Exemplo 34: 5-(5,6,7,8-tetraidro-[l ,2,4]triazol[4,3-a]pirimidin-3-il)-nicotinonitrila

A suspensão do composto título do Exemplo 32.5 (395 mg, 1,4mmol), NaCN (138 mg, 2,8 mmol) e NiBr2 (308 mg, 1,4 mmol) em NMP (3ml) foi aquecido a 200°C pela irradiação de microondas de nó simples por 45minutos. Após o esfriamento uma reação foi diluída com diclorometano (50ml) e 13% amônia aquosa (50 ml) e as camadas foram separadas. A camadaaquosa foi extraída com seis porções de diclorometano (um volume total de400 ml). As camadas orgânicas combinadas foram secadas (sulfato de sódio),filtradas e concentradas. O resíduo foi purificado pelo HPLC de fase reversaeluído com um gradiente de acetonitrila em 0,1 M acetato de amôniocontendo 5% de acetonitrila ao pH 6,5 para dar o composto título (65 mg,20%) como um sólido após congelar e secar.

1H RMN (400 MHz, CD3OD): δ (ppm) 9,13 (d, 1 H), 8,99 (d, 1 H), 8,48 (t, 1H), 4,15 (t, 2 H), 3,42 (t, 2 H), 2,07 (m, 2H).

Exemplo 35.1: 3-Piridin-3-il-8-(2-m-tolil-2H-tetrazol-5-ilmetil)-5,6,7,8-tetraidro-[l ,2,4]triazol[4,3-a]pirimidina

<formula>formula see original document page 60</formula>

Para um frasco com tampa de rosca adicionado do compostotítulo do Exemplo 32.7 (60 mg, 0,3 mmol), terc-butóxido de sódio (58 mg, 0,6mmol), N, N-dimetil formamida (2 ml) e tetraidrofurano (3 ml). A mistura dereação foi aquecida a 550C por 20 minutos, a solução do composto título doExemplo 28.2 em N, N-dimetilformamida (1 ml) foi adicionado às gotas àmistura de reação. A mistura foi agitada a 55°C por 1 hora, e concentrada àvácuo. O resíduo foi diluído em DCM (10 ml), água (10 ml) foi adicionada. Afase aquosa foi extraída duas vezes com DCM (10 ml), a fase orgânicacombinada foi lavada duas vezes com salmoura (20 ml) secada em anidro desulfato de sódio e concentrada à vácuo. O resíduo bruto foi purificado em gelde sílica usando 2 M de amônia em metanol: diclorometano = 5: 95, óleoamarelo foi dado como produto (20,7 mg, 25%).

1H RMN (300 MHz, CDCl3): δ (ppm) 8,88 (d, 1 H), 8,66 (dd, 1 H), 8,04 (dd,1 H), 7,91 (m, 2 H), 7,42 (m, 2 H), 7,29 (dd, 1 H), 5,17 (s, 2 H), 4,09 (t, 2 H),3,6 (t, 2 H), 2,46 (s, 3 H), 2,23 (m, 2H).

Em uma maneira similar os compostos seguintes foramsintetizados:

<table>table see original document page 61</column></row><table><table>table see original document page 62</column></row><table><table>table see original document page 63</column></row><table><table>table see original document page 64</column></row><table>

Exemplo 36.1: 4-{8-[5-(3-Cloro-fenil)-[l,2,4]oxadiazol-3-ilmetil]-5,6,7,8-tetraidro-[l,2,4]triazol[4,3-a]pirimidin-3-il}-1H-piridin-2-ona

<formula>formula see original document page 64</formula>

O composto título do Exemplo 35.18 (45 mg, 0,11 mmol) ecloridreto de piridina (1,0 g, 8,7 mmol) foram misturados como sólidos eaquecidos a 145° C em um banho de óleo por 10 minutos. A mistura de reaçãofoi dissolvida em água (50 ml) e extraída com DCM (4 vezes 10 ml). Ascamadas orgânicas combinadas foram concentradas e purificadas com HPLCde fase reversa preparativa usando um gradiente de MeCN em 0,15% de TFAem água: MeCN 95: 5 para dar o composto título (32%).

1H RMN (400 MHz, CD3OD): δ (ppm) 8,11 (s, 1 H), 8,04 (d, 1 H), 7,67 (m, 1H), 7,57 (m, 2 H), 6,82 (s, 1 H), 6,73 (d, 1 H), 4,96 (s, 2 H), 4,22 (t, 2 H), 3,69(t, 2 H), 2,25 (m, 2 H).

Em uma maneira similar o seguinte composto foi sintetizado:<formula>formula see original document page 65</formula>

Exemplo 37: 5-Metil-2H-piridazin-3-ona

<formula>formula see original document page 65</formula>

5-hidróxi-4-metil-5H-furan-2-ona (10,0 g, 87,6 mmol) ehidrato de hidrazina (4,38 g, 87,6 mmol) foram agitados vigorosamente emtemperatura ambiente por 1,5 horas em tetraidrofiirano. Um sólido iniciadopelo precipitado e a reação foi aquecida a 60°C durante a noite. A mistura dereação bruta foi concentrada em gel de sílica e purificada por cromatografiade coluna (0 a 10% de metanol em 1:1 EtOAc / diclorometano) para dar 7,7 g(80%) do composto título.

1H RMN (300 MHz, CDCl3): δ (ppm) 11,38 (amplo s, 1 H), 7,66 (s, 1 H),6,74 (s, 1 H), 2,25 (s, 3H).

Exemplo 38: Acido 6-Oxo-l,6-diidro-piridazino-4-carboxílico

<formula>formula see original document page 65</formula>

O composto título do Exemplo 37 (0,90 g, 8,2 mmol) foiagitado em ácido sulfurico concentrado (13 ml) e aquecido a 45°C.Permanganato de potássio (3,6 g, 12 mmol) foi adicionado porção às gotasdurante 30 minutos para evitar a elevação da temperatura. A reação foideixada agitar por 30 minutos adicionais a 45°C. A reação foi então esfriada àtemperatura ambiente e gelo foi adicionado à mistura de reação, o precipitadoresultante foi coletado pela filtração à vácuo, lavando com água fria e éterdietílico para dar 0,98 g (87%) do composto título como um sólido verdepálido.

1H RMN (300 MHz, CDCl3): δ (ppm) 13,39 (amplo s, 1 H), 8,12 (s, 1 H),-7,22 (s, 1H).

Exemplo 39.1: éster etílico do ácido 6-Oxo-l,6-diidro-piridazino-4-carboxílico

<table>table see original document page 66</column></row><table>

O composto título do Exemplo 38 (1,0 g, 7,13 mmol) foiadicionado a uma solução de etanol (16 ml) e cloreto de acetila (4 ml) e asuspensão resultante foi aquecida a 75°C e agitada durante a noite. A misturade reação foi concentrada, diluída com água e extraída com diclorometano. Afase orgânica foi secada em sulfato de sódio, filtrada e concentrada para dar ocomposto título.

1H RMN (300 MHz, CDCl3): δ (ppm) 10,91 (amplo s, 1 H), 8,26 (s, 1 H),7,53 (s, 1 H), 4,43 (q, 2 H), 1,40 (t, 3H).

Em uma maneira similar o seguinte composto foi sintetizado:

Exemplo 40: Acido 6-Oxo-l,6-diidro-pirimidino-4-carboxílico

<formula>formula see original document page 66</formula>

A uma solução de hidróxido de sódio (1,92 g, 48,1 mmol) emágua (100 ml) foi adicionado dietiloxalacetato de sódio (10,6 g, 50,4 mmol) eacetato de formamidina (5,0 g, 48 mmol) e a reação foi deixada agitar durantea noite em temperatura ambiente. A mistura de reação foi acidificada ao pH 2com ácido clorídrico e então esfriado a 0°C. Um precipitado pelo qual foicoletado pela filtração à vácuo. O produto obtido foi o composto título (1,12g) e foi usado bruto na próxima etapa.

1H RMN (300 MHz, CDCl3): δ (ppm) 8,24 (s, 1 H), 6,84 (s, 1H).

Exemplo 41.1: éster etílico do ácido 6-Oxo-1-(2-trimetilsilanil-etoximetil)-1,6-diidro-piridazino-4-carboxílico

<formula>formula see original document page 67</formula>

O composto título do Exemplo 39.1 (0,90 g, 5,35 mmol) foiagitado em dimetilformamida (20 ml) e diisopropil etilamina (1,39 ml, 8,02mmol) a 0°C e (2-clorometóxi-etil)-trimetil-silano (1,88 ml, 10,7 mmol) foiadicionado e a reação foi deixada continuar para agitar a 0°C por 2 horas eentão durante a noite em temperatura ambiente. A mistura de reação foidiluída com EtOAc e lavada com água e salmoura. A fase orgânica foi secadaem sulfato de sódio, filtrada e concentrada em gel de sílica. O produto foipurificado por cromatografia de coluna (0 a 20% de EtOAc / hexanos) paraproduzir o composto título como um óleo claro (0,85 g, 53%).

1H RMN (300 MHz, CDCl3): δ (ppm) 8,23 (d, 1 H), 7,51 (s, 1 H), 5,50 (s, 2H), 4,41 (q, 2 H), 3,71 (m, 2 H), 1,41 (t, 3 H), 0,97 (m, 2 H), 0,00 (s, 9H).

Em uma maneira similar o seguinte composto foi sintetizado:

<table>table see original document page 67</column></row><table>

Exemplo 42.1: hidrazida do ácido 6-Oxo-1-(2-trimetilsilanil-etoximetil)-1,6-diidro-piridazino-4-carboxílico<formula>formula see original document page 68</formula>

O composto título do Exemplo 41.2 (0,85 g, 2,85 mmol) foiagitado em etanol. Hidrato de hidrazina (0,720 g, 14,2 mmol) foi adicionado àsolução e a reação foi agitada a 50°C por 1 hora. A reação foi concentrada etriturada com metanol e éter dietílico para produzir um precipitado que foicoletado pela filtração à vácuo como o composto título (0,56 g, 57%).1H RMN (300 MHz, (CD3)2SO): δ (ppm) 10,18 (amplo s, 1 H), 8,16 (d, 1 H),7,22 (d, 1 H), 5,33 (s, 2 H), 4,68 (s, 2 H), 3,62 (t, 2 H), 0,85 (t, 2 H), 0,05 (s, 9H).

Em uma maneira similar o seguinte composto foi sintetizado:

<formula>formula see original document page 68</formula>

Exemplo 43.1: 5-(5,6,7,8-Tetraidro-[l,2,4]triazol[4,3-a]pirimidin-3-il)-2-(2-trimetilsilanil-etoximetiI)-2H-piridazin-3-ona

<formula>formula see original document page 68</formula>

O composto título do Exemplo 29 (0,10 g, 0,768 mmol) e ocomposto título do Exemplo 42.1 (0,24 g, 0,844 mmol) foram combinados emum reator de microondas com isopropanol (2 ml) e trietilamina (321 μΙ., 2,30mmol) e reagido a 180°C por 20 minutos. Após o esfriamento em temperaturaambiente, a mistura de reação foi filtrada para coletar um precipitado e osólido foi dissolvido em metanol e diclorometano e concentrado em gel desílica e purificado por cromatografia de coluna (0 a 20% metanol em 1:1EtOAc/diclorometano) para produzir o composto título (0,21 g, 79%).

5 1H RMN (300 MHz, DMSO): δ (ppm) 8,38 (s, 1 H), 7,38 (s, 1 H), 7,02 (s, 1H), 5,34 (s, 2 H), 4,16 (t, 2 H), 3,65 (t, 2 H), 1,91 (m, 3 H), 0,87 (3 H), -0,04(s, 9H).

Em uma maneira similar o seguinte composto foi sintetizado:

<table>table see original document page 69</column></row><table>

Exemplo 44: 8-{(R)-1-[5-(3-Cloro-fenil)-isoxazol-3-il]-etil}-3-(2-metóxi-piridin-4-il)-5,6,7,8-tetraidro- [1,2,4] triazol [4,3-a] pirimidina

<formula>formula see original document page 69</formula>

O composto título do Exemplo 35.21 foi separado pelo HPLCquiral usando uma coluna Chiralpak AS, eluindo-se com metanol (100%) paradar o composto título como um sólido branco (0,551 g).

1H RMN (300 MHz, CDCl3): δ (ppm) 8,27 (d, 1 H), 7,75 (m, 1 H), 7,65 (m, 1H), 7,41 (m, 2 H), 7,30 (m, 1 H), 6,99 (m, 1 H), 6,62 (s, 1 H), 5,87 (q, 1 H),4,09 (m, 2 H), 3,99 (s, 3 H), 3,43 (m, 1 H), 3,27 (m, 1 H), 2,10 (m, 2 H), 1,75(m, 3H).

Exemplo 45: éster metílico do ácido 2-terc-Butoxicarbonilamino-propiônico<formula>formula see original document page 70</formula>

Boc-D-Ala-OH (4,0 g, 21 mmol) e carbonato de potássio (11,7g, 84,6 mmol) foi dissolvido em dimetilformamida (90 ml) e iodometano (1,6ml, 25 mmol) foi adicionado à mistura de reação. A reação foi deixada agitarem temperatura ambiente durante a noite. A mistura de reação foi divididaentre acetato de etila e água. A camada orgânica foi lavada com porções deágua e salmoura, secada em anidro de sulfato de sódio, filtrada e concentradapara dar o composto título como um óleo incolor (3,53 g, 82%).

1H RMN (300 MHz, CDCl3): δ (ppm) 5,14 (amplo s, 1 H), 4,33 (amplo s, 1H), 3,51 (s, 3 H), 1,49 (s, 9H).

Exemplo 46: éster terc-butílico do ácido (l-MetiI-2-oxo-etil)-carbâmico

<formula>formula see original document page 70</formula>

O composto título do Exemplo 45 (3,53 g, 17,4 mmol) foidissolvido em tolueno (35 ml) a -78°C e DIBAL-H (26,6 ml, 39,9 mmol) foiadicionado às gotas em 1 hora. Metanol (70 ml) foi adicionado a uma reaçãoem 10 minutos a -78°C. A reação foi movida em um banho de gelo e 10% dew/v de ácido cítrico em água (250 ml) foi adicionado e a reação foi deixadaagitar por 1 hora. A reação foi extraída com porções de acetato de etila e osextratos orgânicos foram lavadas com água, salmoura, secados em anidro desulfato de sódio, filtrados e concentrados para dar o composto título (2,57 g,85%) como um sólido branco amarelado.

1H RMN (300 MHz, CDCl3): δ (ppm) 9,51 (s, 1 H), 5,21 (amplo s, 1 H), 4,24(amplo s, 1 H), 1,53 (s, 9H), 1,35 (d, 3H).

Exemplo 47: éster terc-butílico do ácido (2-Hidroxiimino-l-metil-etil)-<formula>formula see original document page 71</formula>

O composto título do Exemplo 46 (2,57 g, 14,8 mmol) foidissolvido em metanol (38 ml) e água (38 ml) a O0C e carbonato de sódio(0,94 g, 8,9 mmol) e cloridreto de hidroxilamina (1,24 g, 17,8 mmol) foramadicionados e a reação foi deixada agitar a 0°C por 30 minutos. A reação foientão deixado aquecer em temperatura ambiente por 4 horas. A mistura dereação foi concentrada ao volume médio e extraída com porções de acetato deetila. Os extratos orgânicos foram lavados com salmoura, secados em anidrode sulfato de sódio, filtrados e concentrados para dar o composto título (2,6 g,94%) como um sólido branco amarelado que ainda foi usado.

Exemplo 48: [(lR,2Z)-2-cloro-2-(hidroxiimino)-l-metiletil]carbamato deterc-butila

O composto título do Exemplo 47 (2,61 g, 13,9 mmol) foidissolvido em dimetilformamida (32 ml) a 40°C e N-clorossuccinimida (2,04g, 15,3 mmol) foi adicionado a uma reação em 3 porções. A reação foiaquecida a 40°C por 1 hora. A mistura de reação foi separada entre acetato deetila e água. A camada orgânica foi lavada com salmoura, secada em anidrode sulfato de sódio, filtrada e concentrada para dar o composto título (2,97 g,96%) como um óleo incolor.

1H RMN (300 MHz, CDCl3): δ (ppm) 8,42 (s, 1 H), 4,91 (amplo s, 1 H), 4,69(amplo s, 1 H), 1,46 (s, 9H), 1,41 (d, 3H).Exemplo 49: éster do ácido de terc-butila {l-[5-(3-CIoro-fenil)-isoxazol-3-il]-etil}-carbâmico

<formula>formula see original document page 72</formula>

Para o composto título do Exemplo 48 (2,97 g, 13,3 mmol) foiem diclorometano (54 ml) foi adicionado acetileno de clorofenila (4,9 ml, 40mmol)) e trietilamina (3,7 ml, 26,7 mmol) a 0°C. A reação foi deixada agitara 0°C por 30 minutos antes de aquecer em temperatura ambiente durante anoite. A mistura de reação foi concentrada, e então diluída com acetato deetila. A camada orgânica foi lavada com 0,1 M de ácido clorídrico, solução debicarbonato de sódio saturado, água e salmoura, secada em anidro de sulfatode sódio, filtrada e concentrada. O produto foi purificado por cromatografiade coluna (20% de EtOAc / hexanos) para dar o composto título.

1H RMN (300 MHz, CDCl3): δ (ppm) 7,81 (s, 1 H), 7,76 (m, 1 H), 7,65 (m, 2H), 6,51 (s, 1 H), 4,98 (amplo s, 2 H), 1,52 (d, 3 H), 1,48 (s, 9H).

Exemplo 50: {(lR)-l-[5-(3-Clorofenil)isoxazol-3-il]etil}amina

<formula>formula see original document page 72</formula>

Ácido trifluoroacético (49 ml) foi adicionado a uma solução deExemplo 49 (7,93 g, 24,6 mmol) em diclorometano (94 ml) a 0°C. A misturaresultante foi agitada a esta temperatura por 90 minutos e então adicionada aoNaHCO3 saturado frio e a mistura neutralizada resultante foi extraída comdiclorometano (30 ml). O extrato orgânico foi lavado com salmoura e secadoem sulfato de magnésio (anidros) e o solvente foi removido à vácuo. Oresíduo foi então purificado pela cromatografia de coluna por vaporizaçãoinstantânea de gel de sílica com 5% (2 M de amônia metanol) emdiclorometano como eluente dando 4,65 g (85%) do composto título como umsólido amarelo claro.

1H RMN (CDCl3): δ (ppm) 7,71 (s, 1 H), 7,66 (m, 1 H), 7,43 (m, 2 H), 6,56(s, 1 H), 4,31 (q, 1 H), 1,65 (amplo s, 2 H), 1,50 (d,3H).

Exemplo 51.1: éster etílico do ácido l-[2-(3-cloro-fenil)-2H-tetrazol-5-il]-etílico

O composto título do Exemplo 18.1 (3,71 g, 16,50 mmol) foidissolvido em tolueno (90 ml) e Novozyme 435 (0,65 g) foi adicionadoseguido pelo acetato de vinila (2,3 ml, 24,74 mmol). A reação foi deixadaagitar durante a noite em temperatura ambiente. A mistura de reação foifiltrada, lavada com acetato de etila. A fase orgânica foi concentrada epurificada por cromatografia de coluna (20 a 40% de EtOAc / hexanos) paradar o composto título como um óleo incolor (2,13 g).1H RMN (300 MHz, CDCl3): δ (ppm) 8,17 (s, 1 H), 8,05 (m, 1 H), 7,50 (m, 2H), 6,29 (q, 1 H), 2,16 (s, 3 H), 1,79 (d, 3H).

A partir da mesma reação, o seguinte composto foi obtido:

<table>table see original document page 73</column></row><table>

Exemplo 52: 2-{l-[2-(3-Cloro-fenil)-2H-tetrazol-5-il]-etil}-isoindol-l,3-diona

<formula>formula see original document page 73</formula>

O composto título do Exemplo 51.2 (1,62 g, 7,21 mmol) foicombinado com ftalimida (2,12 g, 14,4 mmol), trifenil fosfina (3,80 g, 14,5mmol) e tetraidrofurano (50 ml) em temperatura ambiente. Azodicarboxilatode dietila (2,28 ml, 14,5 mmol) foi adicionado e a reação foi agitada emtemperatura ambiente durante a noite. A mistura de reação foi separada entreacetato de etila e água. A camada aquosa foi extraída com acetato de etila e osorgânicos combinados foram lavados com salmoura, secados em sulfato demagnésio, filtrados e concentrados. O produto foi purificado porcromatografia de coluna (30% de EtOAc / hexanos) para dar o compostotítulo como um sólido branco (2,46 g, 96%).

1H RMN (300 MHz, CDCl3): δ (ppm) 8,12 (s, 1 H), 7,89 (m, 1 H), 7,76 (m, 2H), 7,45 (m, 2H0, 5,87 (q, 1 H), 2,06 (d, 3H).

Exemplo 53: l-[2-(3-Cloro-fenil)-2H-tetrazol-5-il]-etilamina

<formula>formula see original document page 74</formula>

O composto título do Exemplo 52 (2,46 g, 6,95 mmol) foiagitado em metanol (50 ml) a 0°C e hidrato de hidrazina (2,0 ml, 41,70 mmol)foi adicionado à solução. A reação foi agitada a 0°C por 2 horas. Acidoclorídrico (2M, 50 ml) foi adicionado a uma reação e foi deixada agitar emtemperatura ambiente durante a noite. Um precipitado branco formado foifiltrada e lavado com água. As lavagens aquosas foram lavadas comdiclorometano e basificadas com carbonato de potássio aquoso ao pH 14 eentão extraído com porções de acetato de etila. Os orgânicos foramcombinados e lavados com salmoura, secados em sulfato de magnésio,filtrados e concentrados para dar o composto título como um óleo (1,54 g,99%).

1H RMN (300 MHz, CDCl3): δ (ppm) 8,16 (s, 1 H), 8,05 (m, 1 H), 7,47 (m, 2H), 4,50 (q, 1H), 1,77 (amplo s, 2 H), 1,64 (d, 3H).

Exemplo 54: éster terc-butílico do ácido (3-Oxo-propil)-carbâmico

<formula>formula see original document page 74</formula>N-(3-hidroxipropil)-carbamato de terc-butila (15,38 g, 87,74mmol) e clorocromato de piridínio (41,61 g, 193,0 mmol) foram agitados emdiclorometano (350 ml) em temperatura ambiente durante a noite. A soluçãoresultante foi filtrada através de um tampão de sílica, lavagem com 20% deEtOAc / hexanos. O orgânico foi concentrado em gel de sílica e purificadopor cromatografia de coluna (40% de EtOAc / hexanos) para dar o compostotítulo como um óleo incolor 6,11 g, 40%).

1H RMN (300 MHz, CDCl3): δ (ppm) 3,42 (m, 2 H), 2,71 (m, 2 H), 1,42 (s, 9H).

Exemplo 55.1: éster terc-butílico do ácido (3-{l-[2-(3-Cloro-feniI)-2H-tetrazol-5-il]-etilamino}-propil)-carbâmico

<formula>formula see original document page 75</formula>

O composto título do Exemplo 53 (2,59 g, 11,60 mmol) e ocomposto título do Exemplo 54 (3,01 g, 17,4 mmol) foram agitados juntos emdiclorometano (50 ml) em temperatura ambiente. Para este ser levementeadicionado Na(OAc)3BH (3,69 g, 17,4 mmol) e a reação ser agitada por 2horas. A reação foi diluída com solução de bicarbonato de sódio saturado,extraída com porções de diclorometano, secada em sulfato de sódio, filtrada econcentrada. O produto foi purificado por cromatografia de coluna (5% de2M de NH3 em MeOH/EtOAc) para dar o composto título como um óleoincolor (3,89 g, 88%).

1H RMN (300 MHz, CDCl3): δ (ppm) 8,17 (s, 1 H), 8,06 (m, 1 H), 7,47 (m, 2H), 5,00 (amplo s, 1 H), 4,26 (q, 1 H), 3,21 (amplo s, 2 H), 2,65 (t, 2 H), 1,68(m, 3 H), 1,59 (d, 3 H), 1,42 (s, 9H).

Em uma maneira similar o seguinte composto foi sintetizado:

<formula>formula see original document page 75</formula><table>table see original document page 76</column></row><table>

Exemplo 56.1: N*l*-{l-[2-(3-Cloro-fenil)-2H-tetrazol-5-il]-etiI}-propano-1,3-diamina

<formula>formula see original document page 76</formula>

O composto título do Exemplo 55.2 (3,89 g, 10,2 mmol) foidissolvido em diclorometano (50 ml) a 0°C e ácido trifluoroacético (20 ml)foi adicionado às gotas à reação. Este foi permitido agitar a 0°C por 3 horasantes de ser concentrado e diluído com clorofórmio (100 ml). A reação foibasificada com solução de bicarbonato de sódio saturado (100 ml) e a camadaaquosa foi extraída com porções de clorofórmio. Os extratos orgânicoscombinados foram secados em sulfato de sódio, filtrados e concentrados paradar o composto título sem purificação adicional (2,87 g, assume 100% derendimento).

Em uma maneira similar o seguinte composto foi sintetizado:

<table>table see original document page 76</column></row><table>

Exemplo 57.1: l-{l-[2-(3-Cloro-fenil)-2H-tetrazol-5-il]-etil}-tetraidro-pirimidino-2-tiona

<formula>formula see original document page 76</formula>

O composto título do Exemplo 56.1 (2,87 g, 10,2 mmol) foidissolvido em diclorometano (50 ml) a -78°C e tiocarbonil diimidazol (3,0 g,15,3 mmol) em diclorometano (50 ml) foi adicionado às gotas. A reação foideixada agitar a -78°C por 30 minutos e então aquecida ao refluxo durante anoite. A mistura de reação foi esfriada, lavada com água, secada em sulfato desódio, filtrada e concentrada em gel de sílica. Foi purificado porcromatografia de coluna (40 a 60% de EtOAc / hexanos) para dar o compostotítulo como um sólido branco (2,26 g, 69%).

1H RMN (300 MHz, CDCl3): δ (ppm) 8,15 (s, 1 H), 8,05 (m, 1 H), 7,48 (m, 2H), 7,29 (q, 1 H), 6,77 (s, 1 H), 3,35 (m, 4 H), 2,09 (m, 2 H), 1,77 (d, 3H).

Em uma maneira similar o seguinte composto foi sintetizado:

<formula>formula see original document page 77</formula>

Exemplo 58.1: l-{l-[2-(3-Cloro-fenil)-2H-tetrazol-5-il]-etil}-2-metilsulfaniI-l,4,5,6-tetraidro-pirimidina

<formula>formula see original document page 77</formula>

O composto título do Exemplo 57,1 (2,26 g, 7,00 mmol), terc-butóxido de sódio (0,672 g, 7,00 mmol) e iodometano (0,66 ml, 10,50 mmol)em tetraidrofurano (30 ml) foram agitados juntos em temperatura ambientepor 2 horas. A mistura de reação foi concentrada e separada entre acetato deetila e água. A fase orgânica foi lavada com salmoura, secada em sulfato desódio, filtrada e concentrada para dar o composto título como um óleoamarelo (2,35 g, quant.).

1H RMN (300 MHz, CDCl3): δ (ppm) 8,16 (s, 1 H), 8,05 (m, 1 H), 7,48 (m, 2H), 5,72 (q, 1H0, 3,51 (m, 2 H), 3,30 (m, 1 H), 3,12 (m, 1 H), 2,38 (s, 3 H),1,85 (m, 2 H), 1,74 (s, 3H).

Em uma maneira similar o seguinte composto foi sintetizado:<formula>formula see original document page 78</formula>

Exemplo 59.1: 5-(8-{l-[2-(3-Cloro-fenil)-2H-tetrazol-5-il]-etil}-5,6,7,8-tetraidro-[l,2,4]triazoI[4,3-a]pirimidin-3-il)-2H-piridazin-3-ona

O composto título do Exemplo 58.1 (0,094 g, 0,28 mmol) e ocomposto título do Exemplo 42.3 (0,077 g, 0,56 mmol) foram agitados juntosem DMSO a 120°C por 24 horas. A mistura de reação foi concentrada ediluída com acetato de etila e lavada com porções de água. A camadaorgânica foi lavada com salmoura, secada em sulfato de sódio, filtrada econcentrada em gel de sílica. O produto foi purificado por cromatografia decoluna (0 a 8% de 2M de NH3 em MeOH/EtOAc) para dar o composto títulocomo um sólido amarelo pálido (0,036 g, 41%).

1H RMN (300 MHz, CDCl3): δ (ppm) 8,58 (s, 1 H), 8,14 (s, 1 H), 8,03 (m, 1H), 7,49 (m, 2 H), 7,26 (s, 1 H), 6,18 (q, 1 H), 4,15 (m, 2 H), 2,23 9t, 2 H),1,85 (d, 4H).

Em uma maneira similar os compostos seguintes foramsintetizados:

<formula>formula see original document page 78</formula><formula>formula see original document page 79</formula>

Exemplo 60: 6-(8-{(R)-l-[5-(3-Cloro-fenil)-isoxazol-3-il]-etiI}-5,6,7,8-tetraidro-[l92,4]triazol[453-a]pirimidin-3-il)-3H-pirimidin-4-ona

<formula>formula see original document page 79</formula>

O composto título do Exemplo 59.2 (0,16 g, 0,48 mmol) foidissolvido em diclorometano (2,5 ml) e esfriado a 0°C. Cloreto de alumíniode dimetila (1,0 M em hexanos, 1,5 ml) foi adicionado e a reação foi agitada aO0C por 30 minutos e aquecido em temperatura ambiente por 1 hora. A reaçãofoi extinta com metanol (0,5 ml) ácido cítrico (0,5 g) em água (3 ml). Amistura de reação foi extraída com porções de clorofórmio e os extratosorgânicos foram secados em sulfato de sódio, filtrados e concentrados. Oproduto foi purificado por cromatografia de coluna (2 a 15% de 2M de NH3em MeOH/diclorometano) para dar o composto título (0,021 g, 10%) comoum sólido amarelo claro.

1H RMN (300 MHz, CDCl3): δ (ppm) 8,44 (s, 1 H), 7,74 (s, 1 H), 7,64 (m, 1H), 7,39 (m, 3 H), 6,61 (s, 1 H), 5,87 (q, 1 H), 4,48 (m, 1 H), 4,36 (m, 1 H),3,40 (m, 1 H), 3,22 (m, 1 H), 2,11 (amplo s, 2 H), 1,75 (d, 3H).

Exemplo 61.1: 4-(8-{(R)-l-[5-(3-Cloro-fenil)-isoxazoI-3-il]-etil}-5,6,7,8-tetraid ro- [1,2,4] triazol [4,3-a] pirimidin-3-il)-lH-piridin-2-ona<formula>formula see original document page 80</formula>

O composto título do Exemplo 44 (0,05 g, 0,114 mmol) foidissolvido em ácido acético (1 ml) e brometo de hidrogênio em etanol (1 ml)foi adicionado. A reação foi aquecida a 80°C durante a noite. A reação foidiluída com água e extinta com carbonato de sódio aquoso. A fase aquosa foiextraída com porções de diclorometano e os extratos orgânicos foram secadosem sulfato de sódio, filtrados e concentrados para dar o composto título comoum sólido pálido (0,049 g, 100%).

1H RMN (300 MHz, CDCl3): δ (ppm) 7,98 (s, 1 H), 7,61 (m, 1 H), 7,44 (d, 1H), 7,37 (m, 2 H), 6,94 (dt, 1 H), 6,68 (s, 1 H), 6,59 (s, 1 H), 5,85 (q, 1 H),4,09 (m, 3 H), 3,42 (m, 1 H), 3,26 (m,l H), 2,10 (m, 2 H), 1,73 (d, 3H).

Em uma maneira similar o seguinte composto foi sintetizado:

<table>table see original document page 80</column></row><table> Exemplo 62: 4-(8-{(R)-1-[5-(3-Cloro-fenil)-isoxazol-3-il]-etil}-5,6,7,8-tetraidro-[1,2,4]triazol[4,3-a]pirimidin-3-il)-1-metil-1H-piridin-2-ona

<formula>formula see original document page 80</formula>

O composto título do Exemplo 61.2 (0,040 g, 0,094 mmol) foidissolvido em dimetilformamida (0,5 ml) com hidreto de sódio (0,005 g,0,113 mmol) e aquecido a 50°C por 1,5 horas. Iodometano (0,2 g, 0,14 mmol)foi então adicionado e a reação foi deixada agitar durante a noite a 5 0°C. Areação foi diluída com diclorometano e lavada com porções de água. A faseorgânica foi secada em sulfato de sódio, filtrada e concentrada e purificadapor cromatografia de coluna (0 a 10% de 2M de NH3 emMeOH/diclorometano) para dar o composto título (0,022 g).

1H RMN (300 MHz5 CDCl3): δ (ppm) 7,73 (m, 1 H), 7,62 (m, 1 H), 7,38 (m, 2H), 6,88 (dt, 1 H), 6,67 (m, 1 H), 6,59 (s, 1 H), 5,85 (q, 1 H), 4,10 (m, 3 H),3,58 (s, 3 H), 3,39 (m, 1 H), 3,28 (m, 1 H), 2,09 (m, 2 H), 1,75 (d, 3H).

Exemplo 62: l-[5-(3-CIoro-fenil)-isoxazol-3-ilmetil]-2-metilsulfanil-1,4,5,6-tetraidro-pirimidina

<formula>formula see original document page 81</formula>

O composto título do Exemplo 9.1 (90 mg, 0,35 mmol) foiretirado em 2 ml de DMF e esfriado a 0o C. Hidreto de sódio (55% em óleomineral) (30 mg, 0,7 mmol) foi adicionado a este. A pasta foi agitada por 1hora. O composto título do Exemplo 29.2 (100 mg, 0,35 mmol) foi adicionado(15 ml) foi adicionada e o produto precipitado foi secado sob vácuo paraproduzir 45 mg (40%) produto de sólido branco.

1H RMN (400 MHz, CDCl3): δ (ppm) 7,70 (m, 1 H), 7,60 (m, 1 H), 7,35 (m, 2H), 6,55 (s, 1 H), 4,55 (s, 2 H), 3,47 (t, 2 H), 3,25 (t, 2 H), 2,47 (s, 3 H), 1,84(m, 2H).

Avaliação biológica

Estimativa funcional de antagonismo de mGluR5em linhas que expressam mGluR5D

As propriedades dos compostos da invenção podem seranalisados usando-se ensaios padrão para a atividade farmacológica.Exemplos de ensaios de receptor de glutamato são bem conhecidos na técnicacomo descrito em por exemplo Aramori et al., Neuron 8:757 (1992), Tanabeet al., Neuron 8:169 (1992), Miller et al., J. Neuroscience 15: 6103 (1995),Balazs, et al., J. Neurochemistry 69:151 (1997). A metodologia descritanestas publicações é incorporada neste por referência. Convenientemente, osá pasta acima em uma porção. A mistura foi agitada por 1 hora a 0o C. Aguacompostos da invenção podem ser estudados por meio de um ensaio (FLEPR)que mede a mobilização de cálcio intracelular, [Ca2+]i em células queexpressam mGluR5 ou um outro ensaio (IP3) que mede as rotações de fosfatode inositol.

Ensaio de FLIPR

As células que expressam mGluR5D humano como descritono W097/05252 são semeadas em uma densidade de 100.000 células porreservatório em placas de 96 reservatório de fundo claro revestido comcolágeno com laterais negras e os experimentos são realizados 24 h seguindoa semeadura. Todos os ensaios são realizados em um tampão contendo 127mM de NaCl, 5 mM de KCl5 2 mM de MgCl2, 0,7 mM de NaH2PO4, 2 mM deCaCl2, 0,422 mg/ml de NaHCO3, 2,4 mg/ml de HEPES, 1,8 mg/ml de glicosee 1 mg/ml de fração de BSA IV (pH 7,4). As culturas celulares nas placas de96 reservatórios são carregadas por 60 minutos no tampão mencionado acimacontendo 4 μΜ da forma de éster acetoximetílico do indicador de cálciofluorescente fluo-3 (Molecular Probes, Eugene, Oregon) no ácido plurônico a0,01% (a poliol tensoativo não iônico registrado - Número CAS 9003-11-6).Seguindo o período de carregamento, o tampão de fluo-3 é removido esubstituído por um tampão de ensaio fresco. Os experimentos FLIPR sãorealizados usando-se um ajuste por laser de 0,800 W e uma velocidade deobturador de câmera CCD de 0,4 segundos com comprimentos de onda deexcitação e de emissão de 488 nm e 562 nm, respectivamente. Cadaexperimento é iniciado com 160 μl de tampão presente em cada reservatórioda placa celular. Uma adição de 40 μl da placa de antagonista foi seguida poruma adição de 50 μΕ da placa de agonista. Um intervalo de 90 segundossepara das adições de antagonista e de agonista. O sinal fluorescente éamostrado 50 vezes em intervalos de 1 segundo seguido por 3 amostras emintervalos de 5 segundos imediatamente após cada uma das duas adições. AsRespostas são medidas como a diferença entre a altura do pico da respostapara o agonista, menos a fluorescência de fundo dentro do período daamostra. As determinações IC5o são feitas usando-se um programa de ajustede quadrados mínimos lineares.

Ensaios de IP3

Um ensaio adicional funcional para mGluR5D é descrito noW097/05252 e é fundamentado em rotações de fosfatidilinositol. A ativaçãode receptor estimula a atividade de fosfolipase C e leva à formação aumentadade inositol l,4,5,trifosfato (IP3).

GHEK que expressa estavelmente o mGluR5D humano esemeado em placas revestidas de poli-L-lisina de 24 reservatórios em 40 χ IO4células / reservatório em meio contendo 1 μΟίΛ^εη^ΐόπο [3H] myo-inositol.As células foram incubadas durante a noite (16 h), depois lavadas três vezes eincubadas por 1 horas a 37°C em solução salina tamponada por HEPES (146mM de NaCl, 4,2 mM de KCl, 0,5 mM de MgCl2, 0,1% glicose, 20 mM deHEPES, pH 7,4) suplementado com 1 unidade/ml de glutamato piruvatotransaminase e 2 mM de piruvato. As células são lavadas uma vez em soluçãosalina tamponada por HEPES e pré-incubada por 10 minutos em soluçãosalina tamponada por HEPES contendo 10 mM de LiCl. Os compostos sãoincubados em duplicata a 37°C por 15 minutos, então glutamato (80 μΜ) ouDHPG (30 μΜ) é adicionado e incubado por um adicional de 30 minutos. Areação é terminada pela adição de 0,5 ml de ácido perclórico (5%) em gelo,com incubação a 4°C por pelo menos 30 minutos. As amostras são coletadasem tubos de polipropileno de 15 ml e fosfatos de inositol são separadosusando-se colunas de resina trocadora de íon (forma de formiato da DowexAGl-X8, trama 200 a 400, BIORAD). A separação de fosfato de inositol foirealizada pela primeira eluição de glicero fosfatidil inositol com 8 ml deformiato de amônio 30 mM. A seguir, os fosfatos de inositol total são eluídoscom 8 ml de formiato de amônio 700 mM / ácido fórmico 100 mM ecoletados em frascos de vaporização instantânea. Este eluato é entãomisturado com 8 ml de vaporização instantânea e a incorporação de [3H]inositol é determinada pela contagem de cintilação. As contagens de dpm dasamostras em duplicata são plotadas e as determinações de IC5o são geradasusando-se um programa de ajuste de quadrados mínimos lineares.

Abreviações BSA Albumina de soro bovino CCD Dispositivo acoplado de carga CRC Curva de resposta de concentração DHPG 3,5-diidroxifenilglicina DPM Desintegrações por minuto EDTA ácido etileno diamino tetracético FLIPR leitor de placa formador de imagem Fluorométrico GHEK Rim embriônico humano contendo GLAST GLAST transportador de glutamato/aspartato HEPES ácido 4-(2-hidroxietil)-l-piperazinoetanossulfônico (tampão) IP3 trifosfato de

No geral, os compostos foram ativos no ensaio acima comvalores de IC50 menores do que 10000 nM. Em um aspecto da invenção, ovalor de IC50 é menor do que 1000 nM. Em um aspecto adicional da invenção,o valor de IC50 é menor do que 100 nM.

Determinação da razão de cérebro para plasma no rato

As razões de cérebro para plasma são estimadas em ratosSprague Dawley fêmeas. O composto é dissolvido em água ou em um outroveículo apropriado. Para a determinação da razão de cérebro para plasma, ocomposto é administrado como uma injeção de bolo subcutânea ou umaintravenosa ou uma infusão intravenosa ou uma administração oral. Em umponto de tempo pré determinado após uma amostra de sangue ser retirada compunção cardíaca. O rato é finalizado cortando-se o coração aberto e o cérebroé imediatamente retido. As amostras de sangue são coletadas em tubosheparinizados e centrifugados dentro de 30 minutos, a fim de separar oplasma das células sangüíneas. O plasma é transferido a placas de 96reservatório e armazenados a -20°C até a análise. Os cérebros são divididospela metade e cada metade é colocada em um tubo pré-tarado e armazenado a-20°C até a análise. Antes da análise, as amostras cerebrais são descongeladose 3 ml de água destilada por g de tecido cerebral é adicionado nos tubos. Asamostras cerebrais são sonicadas em um banho de gelo até as amostras seremhomogeneizadas. Tanto as amostras de cérebro quanto de plasma sãoprecipitadas com acetonitrila. Após a centrifugação, o sobrenadante é diluídocom 0,2% de ácido fórmico. A análise é realizada em uma coluna de HPLCde fase reversa curta com eluição de gradiente rápida e detecção de MSMSusando-se um instrumento de pólo quádruplo triplo com ionização poreletropulverização e aquisição de monitoramento de reação selecionada(SRM). A extração líquido-líquido pode ser usada como uma amostraalternativa limpa. As amostras são extraídas, por agitação, a um solventeorgânico após a adição de um tampão adequado. Uma alíquota da camadaorgânica é transferida a um frasco novo e evaporado até a secura sob umacorrente de nitrogênio. Após a constituição dos resíduos, as amostras estãoprontas para a injeção da coluna de HPLC.

No geral, os compostos de acordo com a presente invenção sãoperifericamente restritos com um medicamento no cérebro sobre omedicamento no plasma no rato de < 0,5. Em uma forma de realização, arazão é menor do que 0,15.

Determinação da Estabilidade in vitro

Os microssomas de fígado de rato são preparados a partir deamostras de fígado de rato Sprague-Dawley. Os icrossomas de fígado humanosão preparados a partir de amostras de fígado humano ou adquiridos da BDGentest. Os compostos são incubados a 37° C em uma concentração deproteína de microssoma total e 0,5 mg/ml em um tampão de fosfato depotássio de 0,1 mol/L em pH 7,4, na presença do cofator, NADPH (1,0mmol/L). A concentração inicial de composto é de 1,0 μηιοΙ/L. as amostrassão retiradas para a análise em 5 pontos de tempo, 0, 7, 15, 20 e 30 minutosapós o início da incubação. A atividade enzimática na amostra coletada éimediatamente interrompida pela adição de um volume de 3,5 vezes deacetonitrila. A concentração de composto permanecendo em cada uma dasamostras coletadas é determinada por meio de LC-MS. A constante da taxa deeliminação (k) do inibidor mGluR5 é calculada como a inclinação daplotagem In[inibidor de mGluR5] contra o tempo de incubação (minutos). Aconstante da taxa de eliminação é então usada para calcular a vida média (T1/2) do inibidor de mGluR5, que é subseqüentemente usada para calcular apureza intrínseca (CLint) do inibidor de mGiuR5 em microssomas de fígadocomo:

CLint. = (1η2 χ volume de incubação)/(T 1/2 χ concentração de proteína) =μl/min/mg

Avaliação dos compostos ativos contra TLESR

Labradores retrievers adultos de ambos os sexos, treinadospara ficar em um gancho de Pavlov, são usados. Esofagostomias mucosa-a-pele são realizadas e os cães são deixados recuperar-se completamente antesde quaisquer experimentos serem realizados.

Medição de motilidade

Em resumo, após jejum por aproximadamente 17 h comofornecimento livre de água, uma montagem de luva/furo lateral multilúmen(Dentsleeve, Adelaide, South Australia) é introduzida através daesofagostomia para a medição do esfíncter esofágico inferior gástrico (LES) epressões esofágicas. A montagem é borrifada com água usando-se umabomba de perfusão manométrica de submissão baixa (Dentsleeve, Adelaide,South Australia). Um tubo pulverizado com ar é passado na direção oral paramedir o ato de engolir, e um eletrodo de antimônio monitorou o pH, 3 cmacima do LES. Todos os sinais são amplificados a adquiridos em umcomputador pessoal a 10 Hz.

Quando uma medição de linha de base do jejum gástrico /atividade motora de fase III de LES foi obtida, placebo (NaCl a 0,9%) oucomposto de teste são intravenosamente administrados (i.v., 0,5 ml/kg) emuma veia da perna dianteira. Dez minutos após a administração i.v., umafarinha nutriente (10% de peptona, 5% de D-glicose, 5% de Intralipid, pH 3,0)é submetido à infusão no estômago através do lúmen central da montagem a100 ml/minuto a um volume final de 30 ml/kg. A infusão da farinha denutriente é seguida pela infusão de ar em uma taxa de 500 ml/minuto até umapressão intragástrica de 10±1 mmHg ser obtida. A pressão é então mantidaneste nível por todo o experimento usando-se a bomba de infusão para ainfusão de ar adicional ou para ventilar o ar do estômago. O tempoexperimental do início da infusão de nutriente para finalizar a insuflação de aré de 45 minuto. O procedimento foi validado como um meio seguro dedisparar TLESRs.

O TLESRs é definido como uma pressão de esfíncteresofágico inferior (com referência à pressão intragástrica) em uma taxa de>1 mmHg/s. o relaxamento não deve ser precedido por um sinal faringeal <2s antes de seu início caso no qual o relaxamento é classificado comoinduzido pelo ato de engolir. A diferença de pressão entre o LES e oestômago deve ser menor do que 2 mmHg e a duração do relaxamento maiscompleto maior do que 1 s.

Os resultados do espécime são mostrados na seguinte Tabela:

<table>table see original document page 87</column></row><table>

Claims (34)

1. Composto, caracterizado pelo fato de que é da fórmula (I)<formula>formula see original document page 88</formula>R1 é metila, halogênio ou ciano;R é hidrogênio ou flúor;R hidrogênio, flúor ou alquila C1-C3;R4 é hidrogênio ou alquila C1-C3;Y é alquileno C1-C2;Xé<formula>formula see original document page 88</formula><formula>formula see original document page 89</formula> R5 é hidrogênio, alquila Ci-C3, haloalquila CrC3, alcóxi CrC3,haloalcóxi Ci-C3, amido alquila Ci-C3, N'alquilamido alquila CrC3, pirazoíla,Ν'Ν-dialquilamido alquila Ci-C3, ciano ou cianoalquila CrC3;R6 é hidrogênio, alquila CrC3, haloalquila Ci-C3, alcóxi CrC3,haloalcóxi C1-C3, amido alquila CrC3, N'alquilamido alquila CrC3, Ν'Ν-dialquilamido alquila Ci-C3, ciano ou cianoalquila CrC3;R7 hidrogênio, flúor ou alquila CrC3;bem como sais, hidratos, isoformas, tautômeros e/ouenantiômeros farmaceuticamente aceitáveis destes;com a condição de que o composto da fórmula I não seja3-{5-[3-(2,6-Dimetóxi-pirimidin-4-il)-6,7-diidro-5H-[l,2,4]triazolo[4,3-a]pirimidin-8-ilmetil]-tetrazol-2-il}-benzonitrila;8-[2-(3-Cloro-fenil)-2H-tetrazol-5-ilmetil]-3-piridin-3-il-- 5,6,7,8-tetraidro-4H-1,2,3a,8-tetraaza-azuleno ou- 8-{1-[2-(3-Cloro-fenil)-2H-tetrazol-5-il]-etil}-3-piridin-3-il-- 5,6,7,8-tetraidro-[l,2,4]triazolo[4,3-a]pirimidina.

2. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizadopelo fato de que R5 é hidrogênio, alquila C1-C3, haloalquila C1-C3, alcóxiC1-C3, haloalcóxi C1-C3, amido alquila C1-C3, N'alquilamido alquila C1-C3,pirazoíla, Ν'Ν-dialquilamido alquila C1-C3 ou cianoalquila C1-C3 e R6 éhidrogênio, alquila C1-C3, haloalquila C1-C3, alcóxi C1-C3, haloalcóxi C1-C3,amido alquila C1-C3, N'alquilamido alquila C1-C3, Ν'Ν-dialquilamido alquilaC1-C3 ou cianoalquila C1-C3.

3. Composto de acordo com a reivindicação 1 ou 2,caracterizado pelo fato de que R1 é nalogênio ou ciano.

4. Composto de acordo com a reivindicação 3, caracterizadopelo fato de que R1 é cloro.

5. Composto de acordo com a reivindicação 3, caracterizadopelo fato de que R1 é flúor.

6. Composto de acordo com a reivindicação 3, caracterizadopelo fato de que R1 é metila.

7. Composto de acordo com a reivindicação 3, caracterizadopelo fato de que R1 é ciano.

8. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicaçõesde 1 a 7, caracterizado pelo fato de que R2 é hidrogênio.

9. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicaçõesde 1 a 8, caracterizado pelo fato de que R é hidrogênio ou flúor.

10. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicaçõesde 1 a 9, caracterizado pelo fato de que R4 é hidrogênio ou metila.

11. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicaçõesde 1 a 10, caracterizado pelo fato de que R5 é hidrogênio, alquila C1-C2 oualcóxi C1-C2.

12. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicaçõesde 1 a 11, caracterizado pelo fato de que R6 é hidrogênio, alquila CrC2 oualcóxi CrC2.

13. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicaçõesde 1 a 12, caracterizado pelo fato de que R7 é alquila CrC2 ou alcóxi CrC2.

14. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicaçõesde 1 a 13, caracterizado pelo fato de que Y é metileno.

15. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicaçõesde 1 a 13, caracterizado pelo fato de que Y é etileno.

16. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicaçõesde 1 a 15, caracterizado pelo fato de que Z é <formula>formula see original document page 89</formula>

17. Composto de acordo com a reivindicação 16, caracterizadopelo fato de que Z é<formula>formula see original document page 92</formula>

18. Composto de acordo com a reivindicação 16, caracterizadopelo fato de que Z é <formula>formula see original document page 92</formula>

19. Composto, caracterizado pelo fato de que é selecionado de-3-Piridin-3-il-8-(2-m-tolil-2H-tetrazol-5-ilmetil)-5,6,7,8-tetraidro-[1,2,4]triazolo[4,3-a]pirimidina;-8- {[5 -(3 -clorofenil)-1,2,4-oxadiazol-3 -il] metil}-3-piridin-3-il-5,6,7,8-tetraidro[l,2,4] triazolo[4,3-a]pirimidina;-8- {1 - [5-(3-clorofenil)isoxazol-3 -iljetil} -3 -piridin-3 -il-5,6,7,8-tetraidro[l,2,4]triazolo[4,3-a]pirimidina;-8-{l-[5-(3-clorofenil)-l,2,4-oxadiazol-3-il]etil}-3-piridin-3-il-5,6,7,8--tetraidro[ 1,2,4]triazolo[4,3-a]pirimidina;-8-{l-[2-(3-clorofenil)-2H-tetrazol-5-il]etil}-3-piridin-3-il-5,6,7,8--tetraidro[l,2,4]triazolo[4,3-a]pirimidina;-3-Piridin-3-il-8-(5-m-tolil-isoxazol-3-ilmetil)-5,6,7,8-tetraidro-4H-l,2,3a,8--tetraaza-azuleno;-8-[5-(3-Cloro-fenil)-isoxazol-3-ilmetil]-3-(5-metil-piridin-3-il)-5,6,7,8-tetraidro-4H-1,2,3a,8-tetraaza-azuleno;-8- [5 -(3 -Cloro-fenil)-isoxazol-3 -ilmetil]-3 -(6-metil-piridin-3-il)-5,6,7,8-tetraidro-4H-1,2,3a,8-tetraaza-azuleno;-3-{3-[3-(2,6-Dimetóxi-pirimidin-4-il)-4,5,6,7-tetraidro-l,2,3a,8-tetraaza-azulen- 8-ilmetil] - [ 1,2,4] oxadiazol-5 -il} -benzonitrila;-3-{5-[3-(2,6-Dimetóxi-pirimidin-4-il)-4,5,6,7-tetraidro-l,2,3a,8-tetraaza-azulen-8-ilmetil]-tetrazol-2-il}-benzonitrila;-8-[5-(3-Cloro-fenil)-isoxazol-3-ilmetil]-3-(2,6-dimetóxi-pirimidin-4-il)--5,6,7,8-tetraidro-4H-l,2,3a,8-tetraaza-azuleno;-3-{3-[3-(2,6-Dimetóxi-pirimidin-4-il)-4,5,6,7-tetraidro-l,2,3a,8-tetraaza-azulen-8-iimetii]-isoxazoi-5-il}-benzonitrila;-3-{3-[3-(6-Pirazol-l-il-piridin-3-il)-6,7-diidro-5H-[l,2,4]triazolo[4,3-a]pirimidin-8-ilmetil]-[l,2,4]oxadiazol-5-il}-benzonitrila;8-{[2-(3-clorofenil)-2H-tetrazol-5-il]metil}-3-piridin-3-il-5,6,7,8-tetraidro[l,2,4]triazolo[4,3-a]pirimidina;-5-{8-[5-(3-Cloro-fenil)-[l,2,4]oxadiazol-3-ilmetil]-5,6,7,8-tetraidro-[l,2,4]triazolo[4,3-a]pirimidin-3-il}-nicotinonitrila;-3-[3-(3-Pirimidin-5-il-6,7-diidro-5H-[l,2,4]triazolo[4,3-a]pirimidin-8-ilmetil)-[ 1,2,4]oxadiazol-5-il]-benzonitrila;-8-[5-(3-Cloro-fenil)-[l,2,4]oxadiazol-3-ilmetil]-3-pirimidin-5-il-5,6,7,8-tetraidro-[l,2,4]triazolo[4,3-a]pirimidina;-4-{8-[2-(3-Cloro-fenil)-2H-tetrazol-5-ilmetil]-5,6,7,8-tetraidro-4H-l,2,3a,8-tetraaza-azulen-3 -il} -1 -metil-1 H-piridin-2-ona;-4-{8-[5-(3-Cloro-fenil)-[l,2,4]oxadiazol-3-ilmetil]-5,6,7,8-tetraidro-[l,2,4]triazolo[4,3-a]pirimidin-3-il}-lH-piridin-2-ona;-4-{8-[5-(3-Cloro-fenil)-[l,2,4]oxadiazol-3-ilmetil]-5,6,7,8-tetraidro-[ 1,2,4]triazolo [4,3 -a]pirimidin-3 -il} -6-metil-1 H-piridin-2-ona;-5-(8-{l-[2-(3-Cloro-fenil)-2H-tetrazol-5-il]-etil}-5,6,7,8-tetraidro-[ 1,2,4]triazolo[43-a]pirimidin-3-il)-2H-piridazin-3-ona;-5 -(8- {1 - [5 -(3-Cloro-fenil)-isoxazol-3 -il] -etil} -5,6,7,8-tetraidro-[ 1,2,4]triazolo[4,3-a]pirimidin-3-il)-2H-piridazin-3-ona;-5-{8-[5-(3-Cloro-fenil)-isoxazol-3-ilmetil]-5,6,7,8-tetraidro--[l,2,4]triazolo[4,3-a]pirimidin-3-il}-2H-piridazin-3-ona;-6-(8-{(R)-l-[5-(3-Cloro-fenil)-isoxazol-3-il]-etil}-5,6,7,8-tetraidro-[l,2,4]triazolo[4,3-a]pirímidin-3-il)-3H-pirimidin-4-ona;-4-(8-{(R)-l-[2-(3-Cloro-fenil)-2H-tetrazol-5-il]-etil}-5,6,7,8-tetraidro-[l,2,4]triazolo[4,3-a]pirimidin-3-il)-lH-piridin-2-ona;-4-(8-{(R)-l-[5-(3-Cloro-fenil)-isoxazol-3-il]-etil}-5,6,7,8-tetraidro-[ 1,2,4]triazolo[4,3-a]pirimidin-3-il)-1 -metil-lH-piridin-2-ona; and-4-(8-{(R)-i-[5-(3-Cioro-fenii)-isoxazoi-3-ii]-etii}-5,6,7,8-tetraidro-[l,2,4]triazolo[4,3-a]pirimidin-3-il)-lH-piridin-2-onabem como sais, hidratos, isoformas, tautômeros e/ou enantiômerosfarmaceuticamente aceitáveis destes.

20. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicaçõesde 1 a 19, caracterizado pelo fato de que é para o uso na terapia.

21. Composição farmacêutica, caracterizada pelo fato de quecompreende um composto como definido nas reivindicações de 1 a 19 comoum ingrediente ativo, junto com um veículo farmacológica oufarmaceuticamente aceitável.

22. Uso de um composto como definido em qualquer uma dasreivindicações de 1 a 19 ou um sal farmaceuticamente aceitável ou umisômero óptico deste, caracterizado pelo fato de ser para a fabricação de ummedicamento para a inibição de relaxamentos do esfíncter esofágico inferiortransitórios.

23. Uso de um composto como definido em qualquer uma dasreivindicações de 1 a 19 ou um sal farmaceuticamente aceitável ou umisômero óptico deste, caracterizado pelo fato de ser para a fabricação de ummedicamento para o tratamento ou prevenção de doença do refluxogastroesofágico.

24. Uso de um composto como definido em qualquer uma dasreivindicações de 1 a 19 ou um sal farmaceuticamente aceitável ou umisômero óptico deste, caracterizado pelo fato de ser para a fabricação de ummedicamento para o tratamento ou prevenção da dor.

25. Uso de um composto como definido em qualquer uma dasreivindicações de 1 a 19 ou um sal farmaceuticamente aceitável ou umisômero óptico deste, caracterizado pelo fato de ser para a fabricação de ummedicamento para o tratamento ou prevenção de ansiedade.

26. Uso de um composto como definido em qualquer uma dasreivindicações de 1 a 19 ou um sal farmaceuticamente aceitável ou umisômero óptico deste, caracterizado pelo fato de ser para a fabricação de ummedicamento para o tratamento ou prevenção de síndrome do intestinoirritável (IBS).

27. Método para a inibição de relaxamentos do esfíncteresofágico inferior transitórios, caracterizado pelo fato de que uma quantidadeeficaz de um composto como definido em qualquer uma das reivindicações de-1 a 19 é administrado a um paciente em necessidade de tal inibição.

28. Método para o tratamento ou prevenção de uma doença oucondição sendo doença do refluxo gastroesofágico, caracterizado pelo fato deque uma quantidade eficaz de um composto como definido em qualquer umadas reivindicações de 1 a 19 é administrado a um paciente em necessidade detal tratamento ou prevenção.

29. Método para o tratamento ou prevenção de uma doença oucondição sendo dor, caracterizado pelo fato de que uma quantidade eficaz deum composto como definido em qualquer uma das reivindicações de 1 a 19 éadministrado a um paciente em necessidade de tal tratamento ou prevenção.

30. Método para o tratamento ou prevenção de uma doença oucondição sendo ansiedade, caracterizado pelo fato de que uma quantidadeeficaz de um composto como definido em qualquer uma das reivindicações de-1 a 19 é administrado a um paciente em necessidade de tal tratamento ouprevenção.

31. Método para o tratamento ou prevenção de uma doença oucondição sendo síndrome do intestino irritável (IBS), caracterizado pelo fatode que uma quantidade eficaz de um composto como definido em qualqueruma das reivindicações de 1 a 19 é administrado a um paciente emnecessidade de tal tratamento ou prevenção.

32. Combinação, caracterizada pelo fato de que compreende(i) pelo menos um composto como definido em qualquer uma dasreivindicações de 1 a 19 e (ii) pelo menos um agente inibidor de secreçãoácida.

33. Combinação de acordo com a reivindicação 32caracterizada pelo fato de que o agente inibidor de secreção ácida éselecionado de cimetidina, ranitidina, omeprazol, esomeprazol, lansoprazol,pantoprazol, rabeprazol ou leminoprazol.

34. Composto, caracterizado pelo fato de que é selecionado deéster etílico do ácido 5-(3-Metil-fenil)-isoxazol-3-carboxílico;[5-(3-Metil-fenil)-isoxazol-3-il]-metanol;éster 5-(3-Metil-fenil)-isoxazol-3-ilmetílico do ácido metanossulfônico;-3-(3-Hidroximetil-isoxazol-5-il)-benzonitrila;éster 5-(3-ciano-fenil)-isoxazol-3-ilmetílico do ácido metanossulfônico;-3-(5-Metil-piridin-3-il)-5,6,7,8-tetraidro-4H-l,2,3a,8-tetraaza-azuleno;-3-(6-Metil-piridin-3-il)-5,6,7,8-tetraidro-4H-l,2,3a,8-tetraaza-azuleno;-3-(2,6-Dimetóxi-pirimidin-4-il)-5,6,7,8-tetraidro-4H-l,2,3a,8-tetraaza-azuleno;-3-(6-Pirazol-l-il-piridin-3-il)-5,6,7,8-tetraidro-[l,2,4]triazolo[4,3-a]pirimidina;-3-(5-Bromo-pirídin-3-il)-5,6,7,8-tetraidro-[l,2,4]triazolo[43-a]pirimidina;-3-Pirimidin-5-il-5,6,7,8-tetraidro-[l,2,4]triazolo[43-a]pirimidina;-3-(2-Metóxi-6-metil-piridin-4-il)-5,6,7,8-tetraidro-[l,2,4]triazolo[4,3-a]pirimidina;-1 -[2-(3-Cloro-fenil)-2H-tetrazol-5-il]-etanona;-5-(5,6J,8-Tetraidro-[l,2,4]triazolo[43-a]pirimidin-3-il)-mcotinonitrila;-8-[5-(3-Cloro-fenil)-[l,2,4]oxadiazol-3-ilmetil]-3-(2-metóxi-piridin-4-il)--5,6,7,8-tetraidro-[l,2,4]triazolo[4,3-a]pirimidina;-8- [5 -(3-Cloro-fenil)- [1,2,4] oxadiazol-3 -ilmetil] -3 -(2-metóxi-6-metil-piridin--4-il)-5,6,7,8-tetraidro-[l,2,4]triazolo[4,3-a]pirimidina;éster etílico do ácido 6-Oxo-l-(2-trimetilsilanil-etoximetil)-l,6-diidro-piridazino-4-carboxílico;éster etílico do ácido 6-Oxo-l-(2-trimetilsilanil-etoximetil)-l,6-diidro-pirimidino-4-carboxílico;hidrazida do ácido 6-Oxo-l-(2-trimetilsilanil-etoximetil)-l,6-diidro-piridazino-4-carboxílico;hidrazida do ácido 6-Oxo-l-(2-trimetilsilanil-etoximetil)-l,6-diidro-pirimidino-4-carboxílico;-5-(5,6,7,8-Tetraidro-[l,2,4]triazolo[4,3-a]pirimidin-3-il)-2-(24rimetilsilanil-etoximetil)-2H-piridazin-3-ona;-6-(5,6,7,8-Tetraidro-[l,2,4]triazolo[4,3-a]pirimidin-3-il)-3-(24rimetilsilametoximetil)-3 H-pirimidin-4-ona;-8- { (R)-1 - [5 -(3 -Cloro-fenil)-isoxazol-3 -il] -etil} -3 -(2-metóxi-piridin-4-il)--5,6,7,8-tetraidro-[l,2,4]triazolo[4,3-a]pirimidina;{l-[5-(3-Cloro-fenil)-isoxazol-3-il]-etil}-carbâmico;{ (1R)-1 - [5 -(3 -Clorofenil)isoxazol-3 -il] etil} amina;-2-{l-[2-(3-Cloro-fenil)-2H-tetrazol-5-il]-etil}-isoindol-l,3-diona;-l-[2-(3-Cloro-fenil)-2H-tetrazol-5-il]-etilamina;éster terc-butílico do ácido (3-{l-[2-(3-Cloro-fenil)-2H-tetrazol-5-il]-etilamino}-propil)-carbâmico;éster terc-butílico-4-ona do ácido (3-{l-[5-(3-Cloro-fenil)-isoxazol-3-il]-etilamino}-propil)-carbâmico;Ν* 1 *-{ l-[2-(3-Cloro-fenil)-2H-tetrazol-5-il]-etil}-propano-l,3-diamina;N*l*-{l-[5-(3-Cloro-fenil)-isoxazol-3-il]-etil}-propano-l,3-diamina;-1 - {1 - [2-(3 -Cloro-fenil)-2H-tetrazol-5 -il] -etil} -tetraidro-pirimidino-2-tiona;-1 - {1 -[5-(3-Cloro-fenil)-isoxazol-3-il]-etil} -tetraidro-pirimidino-2-tiona;-1 - {l-[2-(3-Cloro-fenil)-2H-tetrazol-5-il]-etil}-2-metilsulfanil-1,4,5,6-tetraidro-pirímidina;-l-{l-[5-(3-Cloro-fenil)-isoxazol-3-il]-etil}-2-metilsulfanil-l,4,5,6-tetraidro-pirimidina;ó-(8-{1- [5-(3-Cloro-fenii)-isoxazol-3-ii]-etil}-5,6,7,8-tetraidro--[l,2,4]triazolo[4,3-a]pirimidin-3-il)-3-(2-trimetilsilanil-etoximetil)-3H-pirimidin-4-ona;-l-[5-(3-Cloro-fenil)-isoxazol-3-ilmetil]-2-metilsulfanil-1,4,5,6-tetraidro-pirimidina e-8-{l-[5-(3-Cloro-fenil)-isoxazol-3-il]-etil}-3-(2-metóxi-piridin-4-il)-,6,7,8-tetraidro-[l,2,4]triazolo[4,3-a]pirimidina.