CN101468975A

CN101468975A - 高纯度丹酚酸b、制备方法及其应用

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Publication number: CN101468975A
Application number: CNA2007101449395A
Authority: CN
Inventors: 苑立超
Original assignee: Individual
Current assignee: Individual
Priority date: 2007-12-27
Filing date: 2007-12-27
Publication date: 2009-07-01

Abstract

高纯度丹酚酸B、制备方法及其应用，现有技术的不足是得到的丹酚酸B纯度都低于92％，获得92以上丹酚酸B的步骤非常多，成本非常高，无法用于工业化生产。本发明的方法：a.两次热水提取；b.提取液过滤后通过大孔吸附树脂层析，用水洗脱后，用20－90％的C1－C5的低级醇解吸，将解吸液减压浓缩后，得到丹酚酸B的粗品；c.丹酚酸B的粗品进一步经纤维素层析，以低级醇或丙酮洗脱，以水或C1－C5的低级醇解吸，合并含丹酚酸B的组分，减压浓缩，冷冻干燥，得到高纯度的丹酚酸B；d.在a、b、c步骤中要用pH值调节物质将pH值调节至1－6.5。本方法用于制备高纯度丹酚酸B。

Description

高纯度丹酚酸B、制备方法及其应用

技术领域：

本发明涉及植物药材的提取、分离范畴，具体来说是一种从中药材丹参中提取并分离丹酚酸B的方法。

背景技术：

唇形科植物丹参(Salvia miltiorrhiza Bge)，为多年生草本植物，具有祛瘀止痛，活血通经，清心除烦的功效。现代临床中，广泛将其用于预防和治疗心脑血管疾病，肾病，肝病等。因提取物中成分复杂，难于向世界推广。

丹酚酸B是从丹参中分离得到的一种水溶性的酚酸类物质，其分子式为C₃₆H₃₀O₁₆，分子量为718.614，结构式为：

临床医学证明，丹酚酸B具有保护心脏、心血管等功能。

现有技术中的丹酚酸B的提取和分离方法，是将药材粉碎成末，或微波破壁，或浸提，或煎提，进一步通过大孔吸附树脂、聚酰胺层析等方法获得。现有技术的不足是得到的丹酚酸B纯度都低于92％，获得92以上丹酚酸B的步骤非常多，成本非常高，无法用于工业化生产。

发明内容：

本发明的目的是提供一种新的丹酚酸B的制备方法，得到的丹酚酸B，纯度高，成本低适合工业化生产。

上述的目的通过以下的技术方案实现：

一种高纯度丹酚酸B的制备方法：

a.首先将中药材丹参粉碎，第一次在去离子水100度微沸的条件下加入粉碎的丹参提取1小时，用丹参重量5倍量的水；然后在小于50度PH1—6.5的条件下提取2---3次，每次时间40分钟，用丹参重量3倍量的水；

b.提取液过滤后通过大孔吸附树脂层析，用水洗脱后，用20---90％的C1---C5的低级醇解吸，将解吸液减压浓缩后，得到丹酚酸B的粗品；

c.丹酚酸B的粗品进一步经纤维素层析，以低级醇或丙酮洗脱，以水或C1---C5的低级醇解吸，合并含丹酚酸B的组分，减压浓缩，冷冻干燥，得到高纯度的丹酚酸B。

d.在a、b、c步骤中要用PH值调节物质将PH值调节至1—6.5。

所述的高纯度丹酚酸B的制备方法，所述的大孔吸附树脂为D101或520或D1300或AB-8号的大孔吸附树脂层析。

所述的高纯度丹酚酸B的制备方法，所述的C1—C5的低级醇为乙醇。

所述的高纯度丹酚酸B的制备方法，所述的纤维素层析为羧甲基纤维素/纤维素粉/羟丙基纤维素/甲基纤维素/乙基纤维素/微晶纤维素/羟丙甲基纤维素/色层析用纤维素滤纸或纤维素滤纸。

所述的高纯度丹酚酸B的制备方法，所述的纤维素层析的洗脱溶剂，为浓度80％以上的乙醇。

所述的高纯度丹酚酸B的制备方法，在所述的步骤c的纤维素层析的过程中，通过薄层层析或HPLC检测方法，检测洗脱液和解吸液中丹酚酸B的含量，将解吸液分段合并，真空减压浓缩，冷冻干燥，既可得到高纯度的丹酚酸B。

所述的高纯度丹酚酸B的制备方法，所述的PH值调节物质为无机酸、有机酸、酸性氨基酸或其混合物或氢氧化钠。

一种用以上权利要求所述的方法制备的丹酚酸B，得到的丹酚酸B的纯度大于等于98％。

一种以上的制作方法制做的丹酚酸B在制备治疗心脑血管疾病、肾病、肺炎、肺心病、胰腺炎、糖尿病、颈椎病、眼底血管性疾病、眼底神经性疾病、偏头痛、慢性胃炎、眩晕、骨伤科疾病、老年痴呆症的药物方面的应用。

这个技术方案有以下有益效果：

在现有的技术中，含有丹酚酸B的药品都作为中药存在，一般的丹酚酸B的含量都在80％以下，剩余的20％的成分都说不清楚，也导致了临床应用时产品的质量不稳定，副作用大，容易导致不良反应.本发明从植物中提取到单体，明确了有效药物成分，减少了毒副作用，为丹酚酸B西药化生产提供了可行之路.

而且，本发明采用的溶剂价格低廉，基本无毒，降低了药品成本。工艺简单，设备投资少，得到的丹酚酸B的纯度高，并且确定的工艺路线适合工业化生产。

具体实施方式：

下述各实施例仅用于说明本发明的最佳实施方式，而并非对本发明的限制。

实施例1：

取丹参药材1000g粉碎，加去离子水在100℃微沸的条件下加热提取1小时，用丹参重量5倍的水，然后在50℃、PH4.8的条件下浸提2次，每次40分钟，用丹参重量3倍的水。提取液滤过，使用D101大孔吸附树脂层析，以水洗脱去杂质，再用40％的乙醇解吸，回收乙醇.冷冻干燥.所得产物用乙醇溶解后，用纤维素粉层析柱层析，用95％的乙醇洗脱去除杂质，再用水解吸得到含丹酚酸B的成分，减压浓缩，通过混合纤维素微孔滤膜过滤，冷冻干燥后，得到纯度为99％的丹酚酸B。

实施例2：

取丹参药材1500g粉碎，加去离子水在100℃微沸的条件下加热提取1小时，用5倍的水，然后在50℃、PH4.8的条件下浸提2次，每次40分钟，用3倍的水。提取液过滤，使用D1300大孔吸附树脂层析，以水洗脱去杂质，再用30％的乙醇解吸，回收乙醇.冷冻干燥.所得产物用乙醇溶解后，用纤维素粉层析柱层析，用90％的乙醇洗脱去除杂质，再用水解吸得到含丹酚酸B的成分，减压浓缩，通过混合纤维素微孔滤膜过滤，冷冻干燥后，得到纯度为98％的丹酚酸B。

实施例3

取丹参药材2000g粉碎，加去离子水在100℃微沸的条件下加热提取1小时，用5倍的水，然后在50℃、PH4.8的条件下浸提2次，每次40分钟，用3倍的水。提取液过滤，使用D1300大孔吸附树脂层析，以水洗脱去杂质，再用50％的乙醇解吸，减压回收乙醇.蒸干.所得产物用乙醇溶解后，用纤维素粉层析柱层析，用95％的乙醇洗脱去除杂质，再用水解吸得到含丹酚酸B的成分，减压浓缩，通过混合纤维素微孔滤膜过滤，冷冻干燥后，得到纯度为98.5％的丹酚酸B。

实施例4

取丹参药材1500g粉碎，加去离子水在100℃微沸的条件下加热提取1小时，用5倍的水，然后在50℃、PH4.8的条件下浸提2次，每次40分钟，用3倍的水。提取液过滤，使用D1300大孔吸附树脂层析，以水洗脱去杂质，再用30％的乙醇解吸，回收乙醇.冷冻干燥.所得产物用乙醇溶解后，用微晶纤维素层析柱层析，用95％的乙醇洗脱去除杂质，再用水解吸得到含丹酚酸B的成分，减压浓缩，通过混合纤维素微孔滤膜过滤，冷冻干燥后，得到纯度为98％的丹酚酸B。

实施例5：

取丹参药材1000g粉碎，加去离子水在100℃微沸的条件下加热提取1小时，用5倍的水，然后在50℃、PH4.8的条件下浸提2次，每次40分钟，用3倍的水。提取液过滤，使用D1300大孔吸附树脂层析，以水洗脱去杂质，再用30％的乙醇解吸，回收乙醇.冷冻干燥.所得产物用乙醇溶解后，用微晶纤维素层析柱层析，用无水乙醇洗脱去除杂质，再用水解吸得到含丹酚酸B的成分，减压浓缩，通过混合纤维素微孔滤膜过滤，冷冻干燥后，得到纯度为98.5％的丹酚酸B。

实施例6：

取丹参药材1000g粉碎，加去离子水在100℃微沸的条件下加热提取1小时，用5倍的水，然后在50℃、PH4.8的条件下浸提2次，每次40分钟，用3倍的水。提取液过滤，使用D101大孔吸附树脂层析，以水洗脱去杂质，再用30％的乙醇解吸，回收乙醇.冷冻干燥.所得产物用乙醇溶解后，用微晶纤维素层析柱层析，用无水乙醇洗脱去除杂质，再用水解吸得到含丹酚酸B的成分，减压浓缩，通过混合纤维素微孔滤膜过滤，冷冻干燥后，得到纯度为98.3％的丹酚酸B。

实施例7：

在以上实施例中，所述的纤维素层析为羧甲基纤维素也可以用纤维素粉/羟丙基纤维素/微晶纤维素/色层析用纤维素滤纸或纤维素滤纸替换。

实施例8：

在以上实施例中，所述的纤维素层析的洗脱溶剂，特指使用浓度80％以上的乙醇。

实施例9：

取丹参药材1000g粉碎，加去离子水在100℃微沸的条件下加热提取1小时，用5倍的水，然后在50℃、PH4.8的条件下浸提2次，每次40分钟，用3倍的水。提取液过滤，使用D101大孔吸附树脂层析，以水洗脱去杂质，再用40％的乙醇解吸，回收乙醇.冷冻干燥.所得产物用乙醇溶解后，用羧甲基纤维素层析柱层析，用95％乙醇洗脱去除杂质，再用水解吸得到含丹酚酸B的成分，减压浓缩，通过混合纤维素微孔滤膜过滤，冷冻干燥后，得到纯度为98.3％的丹酚酸B。

实施例10：

取丹参药材1000g粉碎，加去离子水在100℃微沸的条件下加热提取1小时，用5倍的水，然后在50℃、PH4.8的条件下浸提2次，每次40分钟，用3倍的水。提取液过滤，使用D101大孔吸附树脂层析，以水洗脱去杂质，再用40％的乙醇解吸，回收乙醇.冷冻干燥.所得产物用乙醇溶解后，用微晶纤维素层析柱层析，用95％乙醇洗脱去除杂质，再用水解吸得到含丹酚酸B的成分，减压浓缩，通过混合纤维素微孔滤膜过滤，得到的滤液用2％的NaOH调PH为6，立即冷冻干燥，得到纯度为98.3％的丹酚酸B。

实施例11：

取丹参药材1000g粉碎，加去离子水在100℃微沸的条件下加热提取1小时，用5倍的水，然后在50℃、PH4.8的条件下浸提2次，每次40分钟，用3倍的水。提取液过滤，使用D520大孔吸附树脂层析，以水洗脱去杂质，再用50％的乙醇解吸，回收乙醇.冷冻干燥.所得产物用乙醇溶解后，用色层析用纤维素滤纸层析柱层析，用95％乙醇洗脱去除杂质，再用水解吸得到含丹酚酸B的成分，减压浓缩，通过混合纤维素微孔滤膜过滤，得到的滤液用2％的NaOH调PH为6，立即冷冻干燥，得到纯度为98.2％的丹酚酸B。

实施例12：

取丹参药材1000g粉碎，加去离子水在100℃微沸的条件下加热提取1小时，用5倍的水，然后在50℃、PH4.8的条件下浸提2次，每次40分钟，用3倍的水。提取液过滤，使用D520大孔吸附树脂层析，以水洗脱去杂质，再用50％的乙醇解吸，回收乙醇.冷冻干燥.所得产物用乙醇溶解后，用纤维素滤纸层析柱层析，用95％乙醇洗脱去除杂质，再用水解吸得到含丹酚酸B的成分，减压浓缩，通过混合纤维素微孔滤膜过滤，得到的滤液用2％的NaOH调PH为6，立即冷冻干燥，得到纯度为98.2％的丹酚酸B。

实施例13：用以上的方法制备的丹酚酸B，得到的丹酚酸B的含量大于等于98％。

实施例14：

以上的制作方法制做的丹酚酸B在制备治疗心脑血管疾病、肾病、肺炎、肺心病、胰腺炎、糖尿病、颈椎病、眼底血管性疾病、眼底神经性疾病、偏头痛、慢性胃炎、眩晕、骨伤科疾病、老年痴呆症的药物方面的应用。

Claims

1.一种高纯度丹酚酸B的制备方法，其特征是：

c.丹酚酸B的粗品进一步经纤维素层析，以低级醇或丙酮洗脱，以水或C1---C5的低级醇解吸，合并含丹酚酸B的组分，减压浓缩，冷冻干燥，得到高纯度的丹酚酸B；

d.在a、b、c步骤中要用PH值调节物质将PH值调节至1—6.5。

2.根据权利要求1所述的高纯度丹酚酸B的制备方法，其特征是：所述的大孔吸附树脂为D101或520或D1300或AB-8号的大孔吸附树脂层析。

3.根据权利要求1或2所述的高纯度丹酚酸B的制备方法，其特征是：所述的C1—C5的低级醇，为乙醇。

4.根据权利要求1或2或3所述的高纯度丹酚酸B的制备方法，其特征是：所述的纤维素层析为羧甲基纤维素/纤维素粉/羟丙基纤维素/甲基纤维素/乙基纤维素/微晶纤维素/羟丙甲基纤维素/色层析用纤维素滤纸或纤维素滤纸。

5.根据权利要求1或2或3或4所述的高纯度丹酚酸B的制备方法，其特征是：所述的纤维素层析的洗脱溶剂，为浓度80％以上的乙醇；所述的纤维素层析的解吸溶剂为水或浓度低于95％的乙醇。

6.根据权利要求1或2或3或4或5所述的高纯度丹酚酸B的制备方法，其特征是：在所述的步骤c的纤维素层析的过程中，通过薄层层析或HPLC检测方法，检测洗脱液和解吸液中丹酚酸B的含量，将解吸液分段合并，真空减压浓缩，冷冻干燥，既可得到高纯度的丹酚酸B。

7.根据权利要求1或2或3或4或5或6所述的高纯度丹酚酸B的制备方法，其特征是：所述的PH值调节物质为无机酸、有机酸、酸性氨基酸或其混合物或氢氧化钠。

8.一种用以上权利要求所述的方法制备的丹酚酸B，得到的丹酚酸B的纯度大于等于98％。

9.一种以上的制作方法制做的丹酚酸B在制备治疗心脑血管疾病、肾病、肺炎、肺心病、胰腺炎、糖尿病、颈椎病、眼底血管性疾病、眼底神经性疾病、偏头痛、慢性胃炎、眩晕、骨伤科疾病、老年痴呆症的药物方面的应用。