CN101450090A - 一种药物在抗癌辅助作用方面的新用途 - Google Patents

Abstract

本发明公开了片仔癀在制备具有抗癌辅助作用的药物中的应用以及片仔癀在制备具有免疫调节效应作用的药物中的应用。所述具有抗癌辅助作用是指对抗癌药物具有明显的增效减毒作用以及对化疗药物诱发的骨髓抑制有缓解作用并能对抗白细胞减少。所述具有免疫调节效应是指对体液免疫和细胞免疫具有增强作用。

Description

一种药物在抗癌辅助作用方面的新用途

技术领域

本发明涉及一种药物的新用途，特别涉及片仔癀粉末的新用途。

背景技术

被誉为“国宝神药”的片仔癀是全球独家生产的国家一级中药保护品种，经过数百年的长期临床应用，其疗效得到了广大患者的肯定和推崇。目前片仔癀的功能主治为：清热解毒血瘀所致急慢性病毒性肝炎，痈疽疔疮，无名肿毒，跌打损伤及各种炎症。但近年来，关于片仔癀的民间使用已不仅仅被局限在消肿镇痛等方面了，在保护肝脏、治疗肿瘤、调整免疫等方面甚至更多等临床领域正被积极地应用着。为了更好地保护和传承中国传统中医药方化，使片仔癀这一国家神药能更好地在更多的临床领域发挥其治病救人的功效，对片仔癀进行深入的研发，以挖掘出片仔癀新的适应症已提到日程上了。

癌症的病程发展过程中人体的免疫机能会受到影响，造成免疫功能异常(通常是低下)，而免疫功能低下又使癌症的病程发展加快，且癌症的化、放疗也会对免疫机能产生严重的损伤，造成机体免疫低下，为此在癌症的治疗过程中常常需要配合应用免疫调节药物。目前应用的免疫调节药主要以化学药和生物药为主，中药较少，而化学药和生特药的副作用又均较大，因此寻找有免疫调节作用的中药(或中成药)将很有必要。

发明内容

本发明目的在于公开片仔癀的制药新用途。

上述片仔癀，可以按照常规工艺加入常规辅料制成临床可接受的剂型，包括但不限于片仔癀胶囊、片仔癀口服液、片仔癀颗粒、片仔癀软胶囊、片仔癀片剂。

片仔癀对抗癌药物具有明显的增效减毒作用，适于做抗癌辅助用药。片仔癀粉末与化疗药CTX联用时，无论对S₁₈₀或者U₁₄均表现出明显的增效作用；片仔癀粉末对化疗药物CTX诱发的骨髓抑制，白细胞减少及大剂量注射致死作用，片仔癀粉末不但没有加剧作用，还对CTX骨髓抑制有所缓解并能对抗化疗药引起的白细胞减少；片仔癀对正常小鼠的食量、体重及外周血液白细胞未见显著影响。

片仔癀具有免疫调节效应，对体液免疫和细胞免疫具有较明显的增强作用，在适当剂量下，片仔癀可抑制亢进的免疫反应；而对低下的免疫功能，片仔癀也可显示不同程度的促进恢复作用。当免疫系统受损而出现功能低下时，片仔癀不同程度的显示促恢复作用。表现在刺激T淋巴细胞的增殖、恢复抗体产生能力及巨噬细胞吞噬能力。当外来抗原的刺激致机体免疫系统出现亢进或紊乱时，如对免疫型肝损伤动物，片仔癀可降低其血浆谷氨酶和谷草转氨酶的水平，肝脏的组织病理学改变有所减轻；对迟发型变态反应，片仔癀可下调亢进的免疫反应。片仔癀对细胞免疫之一的迟发超敏反应，有一定的增强作用；大剂量组的增强作用在统计学上均有显著意义(p值均小于0.05)；对体液免疫之一的血清溶血素生成能力，片仔癀表现出增强作用，其中大剂量(1g/kg)组的增强作用更显著，达26.57％，p<0.55。

片仔癀具有很强的镇痛消炎作用。本实验进行的二种炎症模型和二种疼痛模型的试验结果均表明，片仔癀具有较明显的消炎镇痛效果。片仔癀的抑制炎症机制在于对正常机体的免疫系统不影响腺淋巴细胞产生IL-2，但能抑制LPS刺激的巨噬细胞产生IL-1。

临床实践表明，片仔癀有较强的免疫力增强作用，可以减轻癌症疼痛及化疗的毒副作用，改善临床症状，对提高癌症患者的生命质量有显著作用。片仔癀粉末，配合肝动脉化疗栓塞术，治疗原发性肝癌(毒热瘀结证)，对减轻化疗毒副作用，特别是减轻恶心呕吐症状，防止白细胞减少，保护肝功能等方面作用明显。另外在中医证候疗效总有效率以及对癌痛、体力状况的疗效均显著，AFP下降幅度大，且无毒副作用，有很好的临床应用价值。

以下实验例用于说明但不限于本发明。

实验例1 片仔癀对CTX抑制S₁₈₀生长的增效作用

取小鼠50只，雄性，18-21g。按常规于各鼠右前腋窝皮下接种直径2mm的S₁₈₀瘤块，并随机分为5组，每组10只。次日，取3组小鼠腹腔注射化疗药环磷酰胺CTX10mg/kg，d_1，3各一次，其中2组分别i.g片仔癀粉末0.5g/kg，1.0g/kg，1组做为单纯CTX对照组。另取1组单纯i.g片仔癀粉末1.0g/kg，观察单用片仔癀粉末的抑瘤效果，余下1组则i.g水0.25ml/10g，做为模型阴性对照组。每日1次，连续11日。末次给药后24小时，脱颈椎法处死所有小鼠，细心剥离瘤块，剔除周围组织后称重，按下式计算抑瘤率。以各组的瘤重均值及标准差为指标进行t检验。实验重复3遍，详细给药情况及结果见表1。

表1 片仔癀对CTX抑制S₁₈₀生长的增效作用

*P<0.05，**P<0.01，***P<0.001与组2比较

从表1可见，片仔癀粉末与化疗药CTX联合用药时，有统计学意义，表现出明显的增强作用。

实验例2 片仔癀对CTX抑制U₁₄生长的增效作用

取小鼠50只，雌性，19-24g，同上样接种U₁₄瘤块后，随机分为5组，每组10只。次日，取1组i.g片仔癀粉末1.0g/kg，1组i.g水0.25ml/10g，做为模型阴性对照组。其余3组均在i.pCTX10mg/kg，d_1，3后，取2组分别i.g片仔癀粉末0.5g/kg，1.0g/kg，其余1组则作为阳性药单纯CTX对照组。片仔癀粉末每日给药1次，连续11日，末次给药后24小时处死全部小鼠并剥离瘤块，剔清周围组织，称重，计算抑瘤率，以各组瘤重均值及标准差为指标进行t检验。实验重复3遍，详细给药方案及结果见表2。

表2 片仔癀粉末对CTX抑制U₁₄生长的增效作用

从表2可见，片仔癀粉末对CTX抑制U₁₄生长的增效作用有统计学意义。

实验例3 片仔癀对CTX的骨髓抑制的减轻作用

取小鼠50只，雄性，19-22g。随机分为5组，每组10只。其中2组分别i.g片仔癀粉末0.5g/kg，1.0g/kg。1组小鼠i.p化疗药CTX25mg/kg(d_{1， 5})的同时，i.g片仔癀粉末0.5g/kg。其他2组小鼠则分别i.pCTX25mg/kg(d_{1， 5})做为阳性对照药，或者i.g水0.25ml/10g做为正常对照组。片仔癀粉末和水每日1次，疗程8日。末次给药后24小时脱颈椎法处死小鼠，取股骨，剔净周围组织，剪去股骨上、下端，用Hank’s液洗出骨髓并滴于玻片，推片晾干，瑞氏染色后置于Olympus显微镜下计算1000个细胞中的有核细胞数，换算有核细胞百分率。结果进行t检验，详见表3。

表3 片仔癀粉末对小鼠骨髓有核细胞计数的影响

从表3可见，片仔癀对CTX的骨髓抑制的减轻作用有统计学意义。

实验例4 对化疗药诱发白细胞减少及全身毒性反应的影响

取小鼠40只，雌性，20-24g，随机分为4组，每组10只。一组灌服水作正常对照；另3组小鼠i.pCTX100mg/kg(d_1，3，5各1次)，同时有2组小鼠分别i.g片仔癀粉末各0.5g/kg或1.0g/kg，剩下的1组则i.g水0.25ml/10g做为对照组。片仔癀粉末及水均每日1次。至第8日取血计算白细胞数，第15日计算各组小鼠死亡率，与对照组比较，白细胞数进行t检验，死亡率进行X²就检验，结果见表4。

表4 片仔癀粉末对CTX诱发白细胞减少症及全身毒性的影响

从表4可见，片仔癀对CTX诱发的白细胞减少的显著抑制作用，有统计学意义。

实验例5 细胞免疫—迟发超敏反应试验

取S₁₈₀荷瘤小鼠50只，雄性，18-20g，随机分为5组，每组10只。其中3组小鼠分别i.g片仔癀粉末各0.25、0.5以及1.0g/kg，一天一次，阳性对照组于d_1.3.5各i.pCTX25mg/kg，单纯模型对照组小鼠i.g水0.3ml/10g代替药物，每日i次，连续5日。疗程第二日(d₂)，各鼠尾静脉注射10％单细胞悬液50μl致敏；疗程第五日(d₅)，于末次药后1小时，再以10％单红细胞悬液50μl注射于左后足垫，进行攻击。对侧后足足垫注射等体积生理盐水做对照。经过24小时处死受试鼠，以踝关节腔为界，剪下左右脚称重，二者重量差异即为迟发超敏反应指标。以此进行t实验，结果见表5

表5 片仔癀粉末对S₁₈₀荷瘤鼠迟发超敏反应的影响

从表5可见，片仔癀粉末在1.0g/kg剂量时对细胞免疫之一的迟发超敏反应的增强作用有统计学意义。

实验例6 对小鼠特异性细胞免疫-迟发型变态反应的影响

小鼠随机分组，每组10只，雌雄各半。组别包括正常对照组、阳性对照药醋酸泼尼松组、片仔癀粉末各剂量组。醋酸泼尼松及片仔癀粉末po qd×6。d₁除正常对照组外，每鼠腹部去毛，将1％DNFB溶液均匀涂于去毛处，d₆用1％DNFB溶液均匀涂于小鼠右耳进行攻击。24小时后处死小鼠，剪下双耳，用打孔器取下直径1cm的耳片，称重。左右耳重量之差为肿胀度。并比较脾指数和胸腺指数。模型组小鼠右耳经致敏原2，4-二硝基氟苯再次攻击后24小时，耳廓水肿、充血明显，脾及胸腺重量无明显变化。醋酸泼尼松5mg/kg不仅明显减轻右耳肿胀度，且使小鼠的脾及胸明显萎缩。就抑制肿胀度而言，片仔癀粉末呈现剂量一效应关系；且片仔癀粉末1.0g\kg、0.5g\kg胸腺重量明显减轻，说明片仔癀粉末可能通过抑制胸腺细胞增殖而减弱迟发型变态反应，见下表。

表6 片仔癀粉末对小鼠迟发型变态反应的影响

注：药物po qd×6，n＝10，x±S。###P<0.001与正常对照比较，*p<0.05、**p<0.01与模型组比较。

从表6可见：片仔癀粉末可抑制2.4-二硝基氟苯诱发的迟发型超敏反应。

实验例7 体液免疫-S₁₈₀荷瘤鼠血清溶血素生成试验

取S₁₈₀荷瘤鼠50只，雄性，体重20-22g，随机分为5组，每组10只，其中3组分别i.p片仔癀粉末各0.25、0.5以及1.0g/kg，一天一次，阳性对照组i.pCTX25ml/kg，d1.3.5各1次，单纯模型组i.g水0.3ml/10g代替药的，每日1次，连续7日。于疗程第五日，每鼠腹腔注射以v/v的比例3:5的单细胞悬液0.2ml进行免疫。免疫4日后，摘眼球取血1ml，分离血清，并以生理盐水300倍稀释的血清、5％单红细胞以及10％豚鼠血清各0.5ml混匀。空白对照管以生理盐水代替血清。37℃温育30分钟后，以转速2500r/min离心5分钟，取上清液1ml，加都氏液3ml，混匀，放置10分钟，用72型分光光度计测量OD₅₄₀计算半数溶血素HC₅₀的浓度，结果进行t检验，详见表7。

表7 片仔癀粉末对血清溶血素生成的影响

从表7可见，片仔癀粉末1g/kg的大剂量组对CTX抑制小鼠血清溶血素的生成的增强作用有统计学意义。

实验例8 对小鼠特异性细胞免疫—淋巴细胞转化能力的影响

取雄性小鼠随机分组，每组10只，包括正常组、环磷酰胺预处理对照组、左旋咪唑组、片仔癀粉末各剂量组，左旋咪唑及片仔癀粉末po qd×6，除正常组外各组d₂ i.p环磷酰胺80mg/kg，d₇放血处死，每组小鼠脾脏混合后，释放脾细胞，破坏红细胞，洗二次，调各脾细胞浓液至8×10⁶/ml。取该浓度的细胞悬液100μl及100μlConA加至96孔培养板，置37℃、5％CO₂的饱和湿度培养箱中培养48小时，结束前4小时，每孔加MTT2mg/ml。结束培养后，加0.01N HCL-10％SDS溶解液，使紫色结晶完全溶解。在λ为570nm的酶联免疫检测仪上比色。以光密度值代表淋巴细胞增殖能力。见表8，环磷酰胺使小鼠淋巴细胞的转化能力显著受抑。无论有无丝裂原的存在，左旋咪唑均显示了其促淋巴细胞增殖的能力。不加丝裂原刺激时片仔癀粉末各剂量组淋巴细胞增殖能力均较环磷酰胺组明显增强。在ConA存在时，仅片仔癀粉末1.0g/kg及0.5g/kg呈明显协同刺激作用。

表8 片仔癀粉末对淋巴细胞转化试验的影响

注：n＝4，x±s，药物po qd×6，环磷酰胺i.p qd×1；###p<0.001与正常对照比较；*p<0.05，**p<0.01与环磷酰胺对照比较。

从表8可见：片仔癀粉末增强免疫低下鼠淋巴细胞转化能力的作用有统计学意义。

实验例9 对小鼠特异性体液免疫—血清溶血素的影响

实验方法取雄性小鼠随机分组，每组10只，包括正常组、环磷酰胺预处理的阴性对照组、左旋咪唑组、片仔癀粉末各剂量组，左旋咪唑及片仔癀粉末po qd×6，除正常组外各组d₂ i.p环磷酰胺80mg/kg，d₃ i.p2％SRBC0.5ml/只，d₇摘除眼球取血，收集血清，测定血清溶血素含量。见表9，环磷酰胺80mg/kg显著抑制小鼠血清溶血素的产生，左旋咪唑显示了其促免疫恢复作用。片仔癀粉末1.0g/kg、0.5g/kg可部分对抗环磷酰胺的抑制作用，使抗体产生量较环磷酰胺鼠有明显升高。

表9 片仔癀粉末对血清溶血素的影响

注：n＝10，X±S。药物po qd×6，环磷酰胺d₂ i.p qd×1；d₃ 2％SRBC i.p。###p<0.001与正常对照比较；*p<0.05、**p<0.01与环磷酰胺对照比较。从表9可见：片仔癀粉末可增强机体的体液免疫功能，恢复免疫低下鼠的抗体形成能力。

实验例10 对小鼠非特异性免疫—碳廓清能力的影响

小鼠随机分组，每天10只，雌雄各半。组别包括正常对照组、环磷酰胺预处理对照组、左旋咪唑组、片仔癀粉末各剂量组。左旋咪唑及片仔癀粉末po qd×6，除正常组外各组d₂ i.p环磷酰胺80mg/kg，d₇每鼠尾静脉注射印度墨汁，印度墨汁用生理盐水1：4稀释，注射印度墨汁0.1mg/10g体重，于t₁为2分钟和t₂为8分钟后，分别从眼眶静脉取血20μl，加到2ml0.1％NaCO₃溶液中摇匀，用721分光光度计在680nm下比色，测光密度。计算廓清指数K值及吞噬批数α值。见表10，环磷酰胺使小鼠碳廓清能力显著受抑。左旋咪唑可增强小鼠碳廓清能力。片仔癀粉末1.0g/kg剂量组小鼠的碳廓清指数及吞噬指数升高明显，0.5g/kg剂量组对碳廓清能力呈现增强趋势。

表10 片仔癀粉末对小鼠碳廓清能力的影响

注：n＝10，X±S，药物po qd×6，环磷酰胺d₂ i.p qd×1：##p<0.01与正常对照比较：*p<0.05，**P<0.01与阴性对照比较。

从表10可见：片仔癀粉末对提高免疫低下鼠碳廓清能力的作用有统计学意义。

实验例11 卡拉胶诱发急性炎症-小鼠足跖肿胀模型

取ICR系小鼠50只，雄性，体重19-23g，随机分为5组，每组10只，单纯模型组i.g水0.3ml/10g，阳性药对照小鼠i.g阿司匹林0.2g/kg，其余3组分别i.g片仔癀粉末各0.5，1.0以及0.25g/kg，详见表7。以上均每日给药1次，连续3日，末次药后30分钟，给每鼠右后足跖皮下注射1％卡拉胶0.05ml致炎，左后足跖皮下注射0.05ml水代之。经过4小时，脱颈椎法处死小鼠，于踝关节腔交界，剪下每鼠左、右后足称重，以两足重量差做为足肿胀度指标进行统计处理，比较给药组与单纯模型对照组间的差值的统计学意义，作t检验，详见表11。

表11 片仔癀粉末对卡拉胶诱发小鼠足跖肿的影响

从表11可见，片仔癀粉末的拮抗卡拉胶诱发急性炎症之功能有统计学意义。

实验例12 慢性炎症—肉芽肿模型

取ICR系小鼠50只，雌性，17-22g，随机分为5组，每组10只。给药前各鼠侧腹股沟埋植10mg灭菌棉球1粒，经过24小时，每组按表2所示分别i.g片仔癀粉末各0.25，0.5及1.0g/kg，单纯模型组小鼠i.g水0.3ml/10g，阳性药对照组i.g阿司匹林0.2g/kg，每日1次，连续8日。末次给药后24小时，脱颈椎处死实验鼠，剖取肉芽肿，剥净周围组织，擦净污血，放入60℃烘箱内干燥5小时，取出称重。减去10mg棉球干重，即为肉芽肿干重。以单纯模型组为对照进行t检验，结果见表12。

表12 片仔癀粉末对小鼠肉芽肿形成的抑制作用

从表12可见，片仔癀粉末对埋植棉球诱发的慢性炎症的抑制作用有统计学意义。

实验例13 对小鼠白介素-1及白介素-2产生的影响实验方法

白细胞介素-1的制备：取雄性小鼠随机分组，每组10只，包括正常对照组、左旋咪唑组、片仔癀粉末各剂量组。左旋咪唑及片仔癀粉末po qd×6，各组动物d₂ i.p3％巯乙醇酸盐培养液1ml。d₇放血处死，每组随机取5只，无菌收集小鼠腹腔巨噬细胞。2×10⁶巨噬细胞/孔加至4孔平底培养板37℃、5％CO₂孵育2小时，洗去非粘附细胞加10μg/ml的LPS培养24小时。收集上清液，-30℃保存。

细胞介素-1活性的测定：BALB/C小鼠放血处死，取胸腺制备成单个细胞悬液，计数后于96孔培养板中加1×10⁷细胞及待测上清液各0.1ml，同时设ConA-胸腺细胞对照孔，复孔若干，37℃、5％CO₂培养72小时，结束前4小时，每孔加MTT2mg/ml。结束培养后，加0.01N HCl-10％SDS溶解液，使紫色结晶完全溶解。在λ＝570nm的酶联免疫检测仪上比色。以光密度值代表IL-1活力。

白细胞介素-2的制备：分组及给药方案同上。d₇处死，取脾，释放脾细胞，1500rpm×10min离心后，用低渗法破坏红细胞，洗二次，尼龙网过滤得单个细胞悬液，计数，调各脾细胞浓度至5×10⁶/ml。取该浓液的细胞悬液0.1ml及0.1ml ConA3μg/ml加至24孔培养板，置37℃、5％CO₂的饱和湿度箱中培养24小时，收集上清液，-30℃保存。

胞介素-2活力的测定：采用CTLL-2细胞增殖法。调节细胞至1×10⁵/ml。将该细胞悬液100μl及经对倍稀释的待测上清液100μl加入96孔培养板，置37℃、5％CO₂的饱合湿度箱中培养24小时，结束前4小时，每孔加入MTT2mg/ml。结束培养后，加0.01NHCl-10％SDS溶解液，使紫色结晶完全溶解。在λ＝570nm的酶联免疫检测仪上比色。以光密度值代表IL-2活力。

表13 片仔癀粉末对小鼠巨噬细胞产生白细胞介素-1的影响

注：上清液稀释度1：64。n＝4-7，x±s。药物po qd×6，*p<0.05，**p<0.01与正常对照比较。

对IL-1产生的影响：结果见表13，片仔癀粉末1.0g/kg、0.5g/kg明显抑制小鼠巨噬细胞产生IL-1，左旋咪唑2mg/kg对巨噬细胞产生IL-1无明显影响。

表14 片仔癀粉末对小鼠腹腔巨噬细胞产生白细胞介素-2的影响

注：上清液稀释度1：64。N＝4-7，x±s。药物po qd×6，*p<0.05与正常对照组比较。

对IL-2产生的影响：见表14左旋咪唑2mg/kg明显促进小鼠脾淋巴细胞产生IL-2。片仔癀粉末各剂量组对小鼠脾淋巴细胞产生IL-2无明显影响。

从表13及14可见：对免疫功能正常小鼠，片仔癀粉末可抑制小鼠巨噬细胞产生IL-1，但对脾淋巴细胞释放IL-2无明显影响。

实验例14 热板法

取经过筛选，痛阈在5-30秒的雌性小鼠50只，体重18-22g，随机分成5组。每组10只，取3组小鼠分别i.g片仔癀粉末各0.25、0.5及1.0g/kg，阳性药对照组i.g罗通定0.24g/kg，单纯模型对照组小鼠i.g水0.3ml/10g代替药物。给药前先测其痛阈值，以小鼠放入55±1℃电热板后出现舔后足所需时间为反应指标，即为痛阈值，共二次，取其平均值作为给药前的痛阈值。给药后30、60、90以及120分钟，再测各鼠痛阈1次，超过60秒无反应的，以60秒计算，计算痛阈提高率，比较各组给药前后及给药组与模型组的痛阈差异，详见表15。

表15 片仔癀粉末在热板法试验中对小鼠的镇痛作用

注：“*”表示：用药组与空白对照组比较，“*”表示P<0.05，“**”P<0.01，“***”P<0.001

从表15可见，片仔癀粉末显著的镇痛作用有统计学意义。

实验例15 扭体反应

取小鼠50只，雌雄各半，体重18-22g，随机分为5组，每组10只。其中3组分别i.g片仔癀粉末各0.25、0.5以及1.0g/kg，阳性药对照组i.g罗通定0.24g/kg，单纯模型对照组i.g水0.3ml/10g代药，每日给药1次，共4次。末次药后30分钟，每鼠腹腔注射0.5％乙酸0.2ml/只，记录各鼠在15分钟内扭体反应的次数，以单纯模型组对照进行t检验，结果见表16。

表16 片仔癀粉末对乙酸腹腔注射诱发小鼠扭体反应的影响

从表16可见，片仔癀粉末的镇痛作用有统计学意义。

实验例16 片仔癀对原发性肝癌(热毒瘀结证)介入治疗减毒增效的随机双盲、安慰剂、平行对照多中心临床试验

试验设计：安慰剂平行对照、区组随机、双盲、多中心试验；受试；例数：240例；受试药物：片仔癀粉末；对照药物：安慰剂；观察指标：疗效指标：WHO化疗毒性评价、中医证候、癌痛、体力状况、瘤体缓解率、AFP；安全指标：化疗毒性、血、尿、便常规、心、肝、肾功能。

疗效评价标准(详见试验方案：有效性评价标准)；给药方案：试验组：片仔癀粉末，介入治疗当天开始口服，连服28天，2粒/次，3次/日。对照组：安慰剂，介入治疗当天口服，连服28天，2粒/次，3次/日。以上二组均合并介入治疗(肝动脉化疗栓塞术)28天/周期×2；统计分析方法：所有的统计检验均采用双侧检验，给出统计量及确切概率P值，P值小于或等于0.05将被认为所检验的差别有统计意义。不同治疗组各次就诊的计量资料将采用均数±标准差进行统计描述。与筛选期基础值进行比较，采用配对t检验比较组内前后差异。

入组情况：共入组原发性肝癌(毒热瘀结证)240例。其中试验组完成102例，脱落6例，剔除12例；对照组完成105例，脱落6例，剔除9例。可进行ITT分析的病例，试验组和对照组分别为108例和111例。完成试验方案，可进行PP分析的病例，试验组和对照组分别为102例和105例。

试验结果：

减毒作用：化疗急性和亚急性毒副反应，本试验出现的化疗毒副反应以消化道反应(恶心呕吐和腹泻)、发热和疼痛(与试验有关的)、血象及肝功能的改变为主。从化疗毒副反应分度总分变化来看，治疗第一周期，试验组和对照组分度总分的均值分别为2.65±2.06和3.35±2.61，治疗第二周期，试验组和对照组分度总分的均值分别为1.91±1.79和2.90±2.54，试验组低于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。ITT分析与PP分析结论一致。消化道反应(恶心呕吐和腹泻)：治疗第一周期，试验组恶心呕吐和腹泻达到1-2度的分别占30.4％和8.8％，达到3度的占2.0％；对照组达到1-2度的分别占38.2％和9.5％，达到3度的占2.9％。治疗第二周期，试验组恶心呕吐和腹泻达到1-2度的分别占26.4％和3.9％，达到3度的占2.0％；对照组达到1-2度的分别占39.1％和5.7％，3度的占3.8％。其中试验组的恶心呕吐发生率在2个周期中均低于对照组，差异有统计学意义(p<0.05)。

发热和疼痛(与试验有关的)：治疗第一周期，试验组出现发热和疼痛达到1-2度的分别占10.8％和11.8％；对照组出现发热和疼痛达到1-2度的均占13.4％，两组均无达到3-4度的患者.治疗第二周期，试验组出现发热和疼痛达到1-2度的均占8.8％；对照组出现发热和疼痛达到1-2度的分别占15.2％和13.4％，两组均无达到3-4度的患者。

治疗前后白细胞、血红蛋白及血小板检验结果分析：疗后试验组和对照组的白细胞总数均值较疗前均有下降，试验组降幅小于对照组，差异有统计学意义(p<0.05)。

治疗前后肝功能检验结果分析：治疗后试验组和对照组的ALT、AST均值较疗前均有下降，试验组降幅大于对照组，差异有统计学意义(p<0.05)。一般情况下，化疗药物的毒副作用可导致转氨酶升高，但原发性肝癌者往往病情本身可导致不同程度的肝功能损伤，如果治疗有效，肝功能也会随之好转，故两组的肝功能指标总体较疗前有所好转，但试验组优于对照组(p<0.05)，说明片仔癀粉末对于减轻化疗药物对肝脏的损害有肯定作用。

增效作用试验结果：两组的中医证候病情总积分(PP)均比治疗前降低，试验组用药前后的病情总积分分别为8.68±3.37和3.60±2.16，对照组用药前后的病情总积分分别为9.04±3.80和4.86±2.77，疗后试验组的积分低于对照组，积分变化率大于对照组，差异均有统计学意义(p<0.05)。ITT分析与PP分析结论一致。

中医证候疗效总有效率(PP)：试验组和对照组分别为85.3％和59.0％，试验组优于对照组，扣除中心间效应CMH x²检验，差异有统计学意义(p<0.05)。ITT分析与PP分析结论一致。

癌痛VAS评分疗效评价：疗后两组的VAS均值比疗前降低，试验组的降幅大于对照组，但差异无统计学意义。其中试验组从第1周期15天至第2周期0天，VAS均值下降幅度大于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。提示试验组癌痛VAS评分疗效略优于对照组。

止痛药用药情况评价：试验组和对照组可供评价的病例分别为26例和20例。疗后试验组止痛药减量(包括停药)的患者占88.5％，对照组止痛药减量(包括停药)的患者占55.0％，组间差异有统计学意义(p<0.05)。

体力状况评价(pp)：疗后两组的体力状况评分都比疗前上升。其中试验组在第二周期末时的体力状况评分以及前后的差值比对照组高，差异有统计学意义(p<0.05)。ITT分析与PP分析结论一致。

安全性：本试验出现的临床不良事件和实验室检查异常主要表现为肝介入治疗所产生的化疗毒副反应，以消化道反应(恶心呕吐和腹泻)、发热和疼痛(与试验有关的)、血象及肝功能的改变为主，已在化疗毒副反应评价中进行分析。其中血象和肝功能检查异常的原因主要与原发病(原发性肝癌)及介入治疗有关，未出现与试验药物有关的异常变化。肾功能、白蛋白及凝血酶原时间检验结果分析：治疗后两组的肾功能、白蛋白及凝血酶原时间检查结果均未出现与试验药物有关的异常变化。尿、大便常规及心电图检验结果分析：治疗后两组的尿、大便常规及心电图检查均未出现与试验药物相关的异常变化。

其他不良事件和严重不良事件：除前述化疗毒副反应所导致的临床不良反应和实验室检查异常外，试验组和对照组各出现1例1件其他不良事件，程度均为轻度，与试验药物可能无关。本试验试验组和对照组共出现8例严重不良事件，其中试验组3例，对照组5例。8例患者最后都因肝衰竭及肝性脑病死亡。由于肝脏的介入治疗本身具有一定的危险性，有可能导致消化道出血以及肝脏功受损，此外肝癌患者由于病情本身的原因，也有可能出现病情在短期内恶化的情况，本试验出现的8例严重不良事件，经临床判断，均属病情恶化所致，与试验药物无关。两组的严重不良事件，经临床判断，均属病情恶化所致，与试验药物无关。两组的严重不忍受事件发生率比较，经四格表确切概率法检验，差异无统计学意义(p>0.05)。

结论：片仔癀粉末，配合肝动脉化疗栓塞术，治疗原发性肝癌(毒热瘀结证)，对减轻化疗毒副作用，特别是减轻恶心呕吐症状，防止白细胞减少，保护肝功能等方面作用明显。在中医证候疗效总有效率以及对癌痛、体力状况的疗效方面均优于对照组，AFP下降幅度亦大于对照组，且无毒副作用，有很好的临床应用价值。

下述实施例均能实现上述实验例的效果。

具体实施方式

实施例1：

片仔癀胶囊，每粒装0.3g，癌症患者口服，作为辅助用药，每次2粒，每日3次。

实施例2：

片仔癀片剂，每片装0.3g，免疫能力低下者口服，每次2片，每日3次。

实施例3：

片仔癀软胶囊，每粒装0.3g，慢性炎症患者口服，每次2粒，每日2次。

实施例4：

片仔癀颗粒，每袋装0.3g，急性炎症患者口服，每次2袋，每日3次。

实施例5：

片仔癀口服液，每瓶装20毫升，疼痛患者口服，每次1-2瓶，每日3次。

Claims (10)

1、片仔癀在制备具有抗癌辅助作用的药物中的应用。

2、如权利要求1所述的应用，其中所述具有抗癌辅助作用是指对抗癌药物具有明显的增效减毒作用。

3、如权利要求1所述的应用，其中所述具有抗癌辅助作用是指片仔癀与化疗药的增效作用。

4、如权利要求1所述的应用，其中所述具有抗癌辅助作用是指片仔癀对化疗药物诱发的骨髓抑制有缓解作用并能对抗白细胞减少。

5、如权利要求1所述的应用，其中所述具有抗癌辅助作用是指减轻癌症疼痛及化疗毒副作用，改善临床症状。

6、如权利要求1所述的应用，其中所述具有抗癌辅助作用是指配合肝动脉化疗栓塞术治疗原发性肝癌，减轻化疗毒副作用。

7、如权利要求5或6所述的应用，其中所述减轻化疗毒副作用是指减轻恶心呕吐症状，防止白细胞减少或保护肝功能。

8、片仔癀在制备具有免疫调节效应作用的药物中的应用。

9、如权利要求8所述的应用，其中所述具有免疫调节效应是指对体液免疫和细胞免疫具有增强作用；刺激T淋巴细胞的增殖、恢复抗体产生能力及巨噬细胞吞噬能力；在迟发型变态反应中抑制亢进的免疫反应；增强迟发超敏反应或增强血清溶血素生成能力增强。

10、如权利要求8所述的应用，其中所述具有免疫调节效应是指当外来抗原的刺激致机体免疫系统出现亢进或紊乱时，降低其血浆谷氨酶和谷草转氨酶的水平并减轻肝脏的组织病理学改变，促进肝细胞再生。