CN101439069B

CN101439069B - 豨莶草叶提取物、其制备方法及其应用

Info

Publication number: CN101439069B
Application number: CN2007101706572A
Authority: CN
Inventors: 程志红
Original assignee: Shanghai Institute of Pharmaceutical Industry
Current assignee: Shanghai Institute of Pharmaceutical Industry
Priority date: 2007-11-22
Filing date: 2007-11-22
Publication date: 2012-05-09
Anticipated expiration: 2027-11-22
Also published as: CN101439069A

Abstract

本发明公开了一种豨莶草叶提取物，该提取物是以豨莶草的叶为原料，通过醇提的方法得到。本发明还公开了该豨莶草叶提取物的制备方法。本发明进一步公开了以该豨莶草叶提取物为活性成分的药物组合物，以及本发明的豨莶草叶提取物在治疗风湿性关节炎、类风湿性关节炎、痛风以及肩周炎等疾病中的应用。

Description

豨莶草叶提取物、其制备方法及其应用

技术领域

本发明涉及天然药物化学领域，具体说，涉及中药豨莶草叶的提取物、其制备方法、以该提取物为活性成分的药物组合物及该提取物在制备治疗风湿性关节炎、类风湿性关节炎、痛风、肩周炎的药物制剂中的应用。

背景技术

风湿性关节炎是风湿热的临床表现之一。典型的表现是游走性多关节炎，常对称累及膝、踝、肩、腕、肘、髋等大关节；局部呈红、肿、热、痛的炎症表现，但不化脓。部分病人几个关节同时发病，手、足小关节或脊柱关节等也可累及。目前，全世界其关节受影响的成人占91.7％，儿童占55.7％，而由于其病变导致的致残致死人数高居世界流行病前列。类风湿性关节炎几乎见于所有的种族和民族。多数人群中，类风湿性关节炎的患病率为0.3％～1.5％。类风关可以发生在任何年龄，但更多见于30岁以后，女性高发年龄为45～54岁，男性随年龄增加而逐渐增加。女性易患本病，女性与男性罹患本病的比例为3∶1。随着社会和经济的发展、生活节奏加快、精神压力及社会竞争的增加，此类疾病的发病率还有逐年升高的趋势。

风湿性关节炎等炎性疾病的特征在于：关节内衬和/或其他内部器官的炎症，以及存在数目升高的淋巴细胞和高水平的促炎细胞因子。这种自体免疫发炎反应，其实是自体免疫性疾病患者的免疫系统产生错乱，而错将本身组织器官当成外来物质，加以攻击的一种类似对付病菌病毒或外来不正常组织的反应，免疫系统会分泌大量相关的发炎因子，促使体内自由基浓度大量提高，以便杀死攻击的目标，但因为自体免疫性疾病患者的免疫系统所攻击的是本身的正常细胞而非不正常或外来物质，因此会造成被攻击的器官严重发炎最终坏死，可谓一种类自杀反应，最常被不正常的自体免疫反应作为目标的有关节软组织、肾脏、心脏等，患者体内自由基浓度很高，全身组织多处发炎及严重疼痛，真正的致病原因到目前都不完全清楚。

抗风湿类药物种类繁多，西药有青霉胺、水杨酸制剂、消炎痛、丙酸衍生物类、吲哚衍生物类、免疫抑制剂、抗疟药等。但西药的副作用日益被国际社会所关注和评价，2003年，FDA专家小组开会对4个治疗类风湿性关节炎药物及其潜在危险性进行了评估。莱氟米特(leflunomide，Arava)是法国最大的制药厂安万特公司生产的一种治疗风湿性关节炎的药品，引发了54例肝衰竭或肝损伤和8例死亡病例，另外，该药也可造成出生缺陷。因此，寻求治疗效果明显而且又安全可靠的抗风湿药物迫在眉睫。

豨莶草始载于唐代《新修本草》，味辛、苦，性寒；归肝、肾经；主要功效为：祛风湿，利关节，解毒；临床上常用于治疗风湿痹痛，筋骨无力，腰膝酸软，四肢麻痹，半身不遂，风疹湿疮、高血压等症。豨莶草主要含有二萜类、倍半萜类、黄酮类等成分。其中的主要活性成分为对映海松烯型二萜、对映贝壳杉烷型二萜及其苷类成分。《中国药典》中收录了以豨莶草全草提取物制得的制剂豨莶丸。

发明内容

针对上述抗风湿类药物存在较大副作用的缺陷，本发明依祖国传统中医学理论，从常用中药豨莶草(Siegesbeckia)的叶中提取具有抗关节炎作用的有效活性部位，并通过现代药剂学技术制备成用于治疗风湿性关节炎、类风湿性关节炎、痛风、肩周炎等疾病的药物制剂。

本发明的目的在于提供一种豨莶草叶提取物，其特征在于，该提取物是以豨莶草的叶为原料，通过醇提的方法得到。

所述的豨莶草叶的原植物可以是菊科植物腺梗豨莶、毛梗豨莶和豨莶中的一种或其混合物。

本发明的另一个目的是提供该中药豨莶草叶提取物的制备方法，包括以下步骤：取干燥的豨莶草叶，粉碎，加6～12倍50％～95％的乙醇回流提取2～4次，每次0.5～1.0小时，过虑，合并滤液，浓缩至50℃时相对密度为1.05～1.15的溶液，过已处理好的大孔吸附树脂柱，收集25％～80％乙醇洗脱流份(即以25％乙醇洗脱后，弃去洗脱液，继以80％乙醇洗脱，收集洗脱流份)，浓缩回收乙醇，继续浓缩到50℃时相对密度为1.10～1.20的浸膏，真空干燥，得到豨莶草叶的提取物。

所述的大孔吸附树脂为弱极性或中等极性的大孔树脂，例如D101，D201，D301，AB-8等。

本发明进一步的目的是提供一种药物组合物，其中含有有效量的豨莶草叶提取物和药学上可接受的载体。所述的载体是指药学领域常规的药物载体，如：豨释剂、赋形剂如一定浓度的乙醇溶液，填充剂如淀粉、蔗糖等，粘合剂如羧甲基纤维素钠、聚乙烯吡咯烷酮等，润湿剂如甘油等，表面活性剂如十六烷醇等，崩解剂如低取代的羟丙基纤维素等，润滑剂如硬脂酸镁等。

该药物组合物可以按照药学领域的常规生产方法制成经胃肠道吸收的具有全身作用的普通口服制剂或具有缓控释特点的长效口服制剂。其中普通口服制剂可以是片剂(片剂包括普通片、糖衣片和膜包衣片)、胶囊剂和颗粒剂等，长效口服制剂可以是亲水缓释骨架片等。

本发明的药物组合物优选含有重量百分比为20％-80％的豨莶草叶提取物，最优选含有重量百分比为45％-55％的豨莶草叶提取物。

本发明制剂的给药量可根据给药途径、患者的年龄、体重、所治疗的疾病的类型和严重程度等进行变化，其日剂量可以是50～300mg/成人。

本发明的另一目的是提供上述豨莶草叶提取物和药物组合物在制备治疗风湿性关节炎、类风湿性关节炎、痛风、肩周炎的药物制剂中的应用。

本发明较之现有技术的优点在于：

经实验研究发现，豨莶草中具有抗关节炎作用的各有效成分主要富集于叶中而并非枝茎中，且从干燥的叶中提取纯化该有效部位比从全草中提取类似成分更具有操作简便和节约成本等优点。通过药理实验发现，从豨莶草的叶中提取得到的该有效部位具有抗菌、免疫抑制、抗疟等作用，可用于治疗风湿性关节炎、类风湿性关节炎、痛风以及肩周炎等疾病。该豨莶草叶提取物和药物组合物具有安全、低毒、有效、低成本、高得率的优点，为治疗关节炎、痛风、肩周炎等疾病提供了新的手段。

具体实施方式

实施例1

(1)取干燥的豨莶草叶1500g，粉碎，加10倍95％的乙醇回流提取2次，每次1.0小时，过虑，合并滤液，浓缩至50℃时相对密度为1.15的溶液，过已处理好的大孔吸附树脂柱D101，以25％乙醇洗脱后，弃去洗脱液，继以80％乙醇洗脱，收集洗脱流份，浓缩回收乙醇，继续浓缩到50℃时相对密度为1.20的浸膏，真空干燥，得到豨莶草叶的提取物。

(2)本发明制剂处方为：

豨莶草叶的提取物150克，药用辅料为淀粉75克，微晶纤维素75克，2％PVP乙醇溶液10ml，CMS-Na 20克，硬脂酸镁5克；

(3)称取各制剂组分；将豨莶草叶的提取物、填充剂以及崩解剂过80目筛，混合均匀，加入粘合剂，湿法制粒，在50℃下干燥2小时，加润滑剂压片，得素片，包糖衣，包衣增重5％，得到豨莶草叶糖衣片1000片。

实施例2

(1)取干燥的豨莶草叶1200g，粉碎，加8倍70％的乙醇回流提取3次，每次0.5小时，过虑，合并滤液，浓缩至50℃时相对密度为1.05的溶液，过已处理好的大孔吸附树脂柱D201，以25％乙醇洗脱后，弃去洗脱液，继以80％乙醇洗脱，收集洗脱流份，浓缩回收乙醇，继续浓缩到50℃时相对密度为1.10的浸膏，真空干燥，得到豨莶草叶的提取物。

(2)本发明制剂处方为：

豨莶草叶的提取物150克，药用辅料为淀粉75克，微晶纤维素75克，乳糖100克，2％PVP乙醇溶液12ml，硬脂酸镁10克；

(3)称取各制剂组分，将豨莶草叶的提取物和填充剂过80目筛，混合均匀，加入粘合剂，湿法制粒，在50℃下干燥2小时，加入润滑剂，灌装1号胶囊，得豨莶草叶胶囊1000粒。

实施例3

(1)取干燥的豨莶草叶1800g，粉碎，加6倍50％的乙醇回流提取4次，每次1小时，过虑，合并滤液，浓缩至50℃时相对密度为1.12的溶液，过已处理好的大孔吸附树脂柱D301，以25％乙醇洗脱后，弃去洗脱液，继以80％乙醇洗脱，收集洗脱流份，浓缩回收乙醇，继续浓缩到50℃时相对密度为1.15的浸膏，真空干燥，得到豨莶草叶的提取物。

(2)豨莶草叶的提取物200克，药用辅料为HPMC(K4M)200克，硬脂酸镁10克；

(3)称取各制剂组分，将豨莶草叶的提取物和以上辅料过80目筛，混合均匀，压片，得到豨莶草叶的缓释片1000片。

实施例4

(1)取干燥的豨莶草叶1950g，粉碎，加12倍90％的乙醇回流提取3次，每次0.75小时，过虑，合并滤液，浓缩至50℃时相对密度为1.10的溶液，过已处理好的大孔吸附树脂柱AB-8，以25％乙醇洗脱后，弃去洗脱液，继以80％乙醇洗脱，收集洗脱流份，浓缩回收乙醇，继续浓缩到50℃时相对密度为1.20的浸膏，真空干燥，得到豨莶草叶的提取物。

(2)豨莶草叶的提取物260克，药用辅料为淀粉30克，微晶纤维素30克；乳糖35克，2％PVP乙醇溶液10ml，硬脂酸镁10克。

(3)分别称取豨莶草叶的提取物260克，药用辅料为淀粉20克，微晶纤维素20克，乳糖15克，2％PVP乙醇溶液10ml，硬脂酸镁10克；将豨莶草叶的提取物和填充剂过80目筛，混合均匀，加入粘合剂，湿法制粒，在50℃下干燥2小时，加入润滑剂，灌装1号胶囊，得豨莶草叶胶囊1000粒。

实施例5

抗小鼠迟发性超敏发应作用

取健康ICR小鼠，体重为20～22g，雄性。随机分为5组，分别为阴性对照组(蒸馏水组)、阳性对照组(地塞米松组)、豨莶丸组(上海雷允上药业有限公司)、XXCY(本发明豨莶草叶提取物)小剂量组、XXCY大剂量组。动物每日给药或蒸馏水1次，给药剂量见表1，连续服用9日。第3日用脱毛剂硫化钠腹部脱毛，给药第4天，腹部涂抹1％2，4-二硝基氟苯(DNFB)50μl致敏，给药第8天每只小鼠右耳廓涂抹1％2，4-二硝基氟苯(DNFB)20μl致敏，攻击24h后，于第9日给药后1h，脱颈椎处死，小鼠延耳廓基线剪下两耳称重并计算肿胀度。

实验结果显示本发明豨莶草叶提取物能明显抑制2，4-二硝基氟苯(DNFB)致小鼠迟发超敏反应中小鼠耳廓肿胀度。

表1、检验比较均数方差

组别	剂量(mg/Kg)	N	肿胀度(mg)
				蒸馏水组地塞米松组豨莶丸组XXCY小剂量组XXCY大剂量组	--3.5100080160	1212121212	25.3±3.97.2±4.8^20.6±2.318.1±6.2^11.2±1.2^**

与蒸馏水组比较，^**P＜0.01

实施例6

抗二甲苯致小鼠耳肿胀的作用

取小鼠40只，雄性，18～22g，随机分为蒸馏水组、复方丹参组、豨莶丸组(上海雷允上药业有限公司)、XXCY大剂量组、XXCY小剂量组。灌胃给药或等剂量蒸馏水，每日1次，连续4次。没此给药后1h，将二甲苯均匀涂于小鼠右耳前后两面。40μl/只。30min后处死动物，剪下两耳，用7mm打空器分别在同一部位打下圆耳片，称重，计算肿胀度并进行组间统计。

表2、本发明豨莶草叶提取物对小鼠实验性耳肿胀的影响

组别	动物数	剂量(mg/Kg)	肿胀度(mg)
				蒸馏水组复方丹参组豨莶丸组XXCY小剂量组XXCY大剂量组	1010101010	--1500100080160	24.8±3.59.9±2.9^20.1±2.114.7±3.6^11.4±3.0^**

与蒸馏水组比较，^**P＜0.01

实施例7

抗佐剂性关节炎的作用

取健康SD大鼠32只，体重为120～140g，雄性。随机分为5组，每组8只，分别为阴性对照组(0.8％吐温-蒸馏水，简称蒸馏水组)、阳性对照组(地塞米松组)、豨莶丸组(上海雷允上药业有限公司)、XXCY大剂量组和XXCY小剂量组。每组动物每日给药1次，动物致炎前测左右后肢足拓容积。第1日动物给药后，每只大鼠又足拓皮下注射完全弗氏佐剂0.1mL/只致炎，致炎后于一定时间测量大鼠左右足拓容积，观察鼠尾部是否有结节。计算肿胀率并进行组间统计分析，结果见表3。

表3、本发明豨莶草叶提取物抗佐剂性关节炎的作用

组别

剂量(mg/Kg)

肿胀率(％)

1h

2h

4h

8h

12h

24h

蒸馏水组地塞米松组豨莶丸组XXCY小剂量组XXCY大剂量组

--10100080160

47.2±6.017.4±7.0^**42.4±5.038.1±5.6^**26.58±4.6^**

63.8±3.418.8±4.9^**41.9±3.142.6±3.8^**35.1±6.2^**

66.3±6.219.6±7.3^**40.5±4.746.2±8.1^**38.4±4.2^**

69.1±2.916.8±5.4^**42.6±2.856.7±4.1^**44.7±2.8^**

47.1±3.417.3±2.4^**47.2±4.945.2±5.846.9±2.7

48.2±5.826.1±4.4^**45.3±6.439.8±4.5^**33.5±6.1^**

与相同时间的蒸馏水组比较，^**P＜0.01

Claims

1.一种豨莶草叶提取物，其特征在于，该提取物是以豨莶草的叶为原料，通过醇提的方法得到，所述醇提方法包括以下步骤：取干燥的豨莶草叶，粉碎，加6～12倍50％～95％的乙醇回流提取2～4次，每次0.5～1.0小时，过滤，合并滤液，浓缩至50℃时相对密度为1.05～1.15的溶液，过大孔吸附树脂柱，收集25％～80％乙醇洗脱流份，浓缩回收乙醇，继续浓缩到50℃时相对密度为1.10～1.20的浸膏，真空干燥，得到豨莶草叶的提取物。

2.如权利要求1所述的豨莶草叶提取物，其特征在于，所述的豨莶草叶的原植物是菊科植物腺梗豨莶、毛梗豨莶和豨莶中的一种或其混合物。

3.如权利要求1或2所述的豨莶草叶提取物的制备方法，包括以下步骤：

取干燥的豨莶草叶，粉碎，加6～12倍50％～95％的乙醇回流提取2～4次，每次0.5～1.0小时，过滤，合并滤液，浓缩至50℃时相对密度为1.05～1.15的溶液，过大孔吸附树脂柱，收集25％～80％乙醇洗脱流份，浓缩回收乙醇，继续浓缩到50℃时相对密度为1.10～1.20的浸膏，真空干燥，得到豨莶草叶的提取物。

4.如权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述的大孔吸附树脂为弱极性或中等极性的大孔树脂。

5.如权利要求4所述的制备方法，其特征在于，所述的大孔吸附树脂选自D101、D201、D301和AB-8中的一种。

6.一种药物组合物，其中含有有效量的权利要求1的豨莶草叶提取物和药学上可接受的载体。

7.如权利要求6所述的药物组合物，其中豨莶草叶提取物的重量百分比为20％～80％。

8.如权利要求7所述的药物组合物，其中豨莶草叶提取物的重量百分比为45％～55％。

9.权利要求1或2所述的豨莶草叶提取物在制备治疗炎性疾病的药物中的应用。

10.如权利要求9所述的应用，其中所述的炎性疾病为风湿性关节炎、类风湿性关节炎、痛风和肩周炎。