CN101422142B - 一种诱虫带菌迁飞方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种诱虫带菌迁飞方法，包括下述步骤：(1)菌种的选择：白僵菌种(Beauveria bassiana)GZUIFR-GL5-08i，CCTCCNo.M208202；(2)孢子粉制备：(3)设置仓储诱虫箱：在仓储外及内放置有醇化烟叶或粮食、种子等储藏物的容器，于其中均匀撒施白僵菌孢子粉，并同时在其中挂害虫性外信息素诱芯和置清水一盆；(4)检查害虫带菌迁飞情况。本发明对害虫有持续性的控制作用，能大大的降低其危害程度从而减少损失。

Description

一种诱虫带菌迁飞方法
技术领域
本发明属于害虫生物防治领域，具体说来涉及采用虫生真菌制剂防治仓库害虫的方法。
背景技术
烟草甲(Lasioderma Serricorne Fabricius)和烟草粉螟(Ephesia elutella)是世界性贮烟害虫，并危害多种农作物。据调查，烟草甲每年对我国贮存烟草造成的损失达1.64％。以往对烟草害虫的防治主要有控制温度、机械杀虫的物理法，使用农药喷雾、熏蒸杀虫的化学法，仓库管理害虫的监测法，以及微生物杀虫法。近年来，随着人们生态环境保护意识的不断提高、生物防治知识和经验的积累，在大量化学药品被禁用的情况下，迫切希望应用害虫的天敌以控制烟草甲和烟草粉螟。苏云菌芽孢杆菌(Bt)对多种害虫具有高毒力，但目前还未筛选出对烟草甲和烟草粉螟具有高毒力的菌株。虫生真菌主要是通过孢子萌发入侵昆虫表皮和天然孔口，并在其体内大量繁殖最后引起昆虫死亡。据统计，全世界登记的真菌生物农药的58个产品中，就有24个来源于虫生真菌的7个种。曾经有关于球孢白僵菌(Beauveria bassiana)对小猿叶甲(Phaedon brassicae)的致病力研究，和金龟子绿僵菌(Metarhizium anisopliae)防治椰心叶甲(Brontispa longissima)的报道。目前已有球孢白僵菌对烟草甲和烟草粉螟感染的实验室效果报道。但用虫生真菌防治仓储害虫的研究却未见到任何信息。流行病对昆虫的控制力，不仅表现在致死效果上，还表现在昆虫种群衰弱后取食量降低，感病群体性比降低，以及产卵量降低等方面。要用真菌对仓储害虫达到持久控制的效果，营造良好的生态平衡，首要解决的问题是将真菌病原引入虫群中。
发明内容
本发明的目的是克服上述缺点而提供一种对害虫有持续性的控制作用，能大大的降低其危害程度从而减少损失的诱虫带菌迁飞方法。。
本发明的一种诱虫带菌迁飞方法，包括下述步骤：
(1)菌种的选择：白僵菌种(Beauveria bassiana)GZUIFR-GL5-08i，在S氏培养基上25±1℃培养14天时，菌落直径为52mm，菌落表面绒毛状菌丝致密，具有奶油黄色孢子粉复被，有孢子型角变，菌落背面淡黄色；老培养体具有孢梗束，个体为合轴式产孢结构；分生孢子单生，光滑、透 明、球形或近球形2～3×2～2.5μm；该菌种已于2008年11月5日保藏在中国典型培养物保藏中心(地址：中国 武汉 武汉大学)，名称为：白僵菌种GZUIFR-GL5-08i，保藏号：CCTCCM208202；
(2)孢子粉制备：
培养基：麸皮80％，玉米粉15％，黄豆粉5％，加水量1∶12；在三角瓶中25±1℃固态发酵，经黑暗、光照交替培养12天后，温度为23～28℃开放式培养15～20天，并自然风干、磨粉、过100目网筛，制成4X1010孢子/克，水分含量3.7％，活孢率为84％的白僵菌孢子粉；
(3)设置仓储诱虫箱：在仓储外及内放置有醇化烟叶或粮食、种子等储藏物的容器，于其中均匀撒施白僵菌孢子粉，并同时在其中挂害虫性外信息素诱芯和置清水一盆；
(4)检查害虫带菌迁飞情况：于7、14、21和30天后在水盆中直接观察到害虫感病迁飞距离和罹病死亡情况。
本发明的方法与现有技术相比，由以上技术可知，选择的白僵菌种(Beauveria bassiana)GZUIFR-GL5-08i在S氏培养基上30±1℃培养14天时，其菌落直径与25±1℃相近，且分泌更多的红色素，产孢量亦更大，而且能在35±1℃下成活。此菌安全，能适应仓库温度、湿度，且有较高产孢量。利用烟草甲和烟草粉螟成虫的迁飞习性，诱虫带菌迁飞，这样就把致病菌带到仓库中的各个角落，引起害虫的流行病。使仓储害虫感染真菌之后再进入仓储物品堆中，由于施用的真菌是于人绝对安全的真菌，而且因其在一定的恒温恒湿环境中能较好地生长繁殖，所以对害虫有持续性的控制作用。这样可以大大的降低危害程度减少损失。
附图说明
图1为实验例3的仓库1试验纸箱摆放位置；
图2为实验例3的仓库2试验纸箱摆放位置；
图3为实验例3的仓库3试验纸箱摆放位置。
具体实施方式
本发明的一种诱虫带菌迁飞方法，包括下述步骤：
(1)菌种的选择：从自然保护区分离一株球孢白僵菌(Beauveria bassiana)GL5，经紫外线诱变获得能在相对湿度较低环境下生长的突变株(Beauveria bassiana)GZUIFR-GL5-08i，在S氏培养基上25±1℃培养14天时，菌落直径为52mm，菌落表面绒毛状菌丝致密，具有奶油黄色孢子粉复被，有孢子型角变，菌落背面淡黄色；老培养体具有孢梗束，个体为合轴式产孢结构；分生孢子单生，光滑、透明、球形或近球形2～3X2～2.5μm；此菌在S氏培养基上30±1℃培养14天时，其菌落直径与25±1℃ 相近，且分泌更多的红色素，产孢量亦更大，而且能在35±1℃下成活。此菌安全，能适应仓库温度、湿度，且有较高产孢量。
(2)孢子粉制备：
培养基：麸皮80％，玉米粉15％，黄豆粉5％，加水量1∶1.2；在三角瓶中25±1℃固态发酵，经黑暗、光照交替培养12天后，室温(23～28℃)开放式培养半个月至20天，并自然风干，磨粉过100目网筛，制成4X1010孢子/克，水分含量3.7％，活孢率为84％的白僵菌孢子粉；
(3)设置仓储诱虫箱：在仓储外及内放置有醇化烟叶或粮食、种子等储藏物的容器，于其中均匀撒施白僵菌孢子粉，并同时在其中挂害虫性外信息素诱芯和置清水一盆；
(4)检查害虫带菌迁飞情况：于7、14、21和30天后在水盆中直接观察到害虫感病迁飞距离和罹病死亡情况。
以通过实验例来进一步说明本发明的有益效果
实验例1：仓库外带菌迁飞实验1
在醇化库的顶楼放置三个装有2kg烟叶和有害虫的纸箱(1130x930x735mm)。A纸箱作为CK空白对照，B和C纸箱中均匀的喷洒浓度为4×1010个孢子/g的孢子粉，5g每箱，然后每个箱子的内壁贴两枚烟虫性外信息素的诱芯，再在箱内放入一盆清水。AB，BC，CA间的距离均为5m，经测定箱内温度T：35℃，湿度RH：75％。
试验结果表明，于处理后第7天从空白对照纸箱水盆中，观察到漂浮有烟草甲和烟草粉螟满布白色菌丝的罹病尸体。首先，经对虫尸粘片镜检，确证为白僵菌感染致死；第二，说明感染菌的虫子能迁飞；第三，表明使用的菌株能耐较高温和低湿的环境。而在B、C处理箱中，感染致死的虫尸则明显更多。随着试验时间的延长，直到40天对照箱中的罹病虫尸还在继续增加，可见其真菌感染作用的长效性。
实验例2：仓库外带菌迁飞实验2
在烟厂技术中心实验室内放置四个纸箱。A纸箱中具有被烟草甲蛀过的香烟卷和烟丝，并见有许多烟草甲爬动，此纸箱作为虫源。而B，C纸箱内装没有虫害的烟叶各0.5kg，纸箱(340x320x215mm)，D纸箱作为CK空白对照；A，B和C纸箱中均匀的喷洒孢子粉，0.5g每箱，浓度为4×1010个孢子/g；于每个箱子内壁贴一枚烟虫性外信息素的诱芯，再在箱内放入一盆清水。A到CK距离为2m，经测定箱内温度T：30℃，湿度RH：75％。
试验结果表明，于7、14、21和30天检查发现，与虫源接近的空白D纸箱水盆中的虫尸明显多于B，C纸箱。而且，在喷洒真菌孢子粉试验之后的屋子，再未见到虫子猖獗。
实验例3：仓库内带菌迁飞实验
在烟厂醇化仓库三楼选取三个同样规格的仓库单元。每单元使用孢子粉的总量均为5g。试验纸箱摆放位置见图1-3，图中黑色表示纸箱中喷施了孢子粉。于每个箱子内壁贴一枚烟虫性外信息素的诱芯，再在箱内放入一盆清水。本实验可得施用不同孢子粉浓度的效果和虫体迁飞距离的信息。
仓库1试验纸箱摆放位置见图1，图中：EA，EB，EC，ED距离为20cm；孢子粉用量为5.00g
仓库2试验纸箱摆放位置见图2，图中：CA，CE，CD之间距离皆是20cm；而CB的距离则是40cm，孢子粉用量为5.00g。
仓库2试验纸箱摆放位置见图2，图中：EA，EB，EC，ED距离均是20cm；每箱孢子粉用量为1.25g。
试验结果表明，试验后的第1周就发现仓库1中，距离E处理箱20cm的空白对照箱的水盆里有感染死亡虫尸；第2周时所设置的15个纸箱水盆中均有覆被白色菌丝的烟草甲和烟草粉螟的尸体。感染真菌的害虫能迁飞40cm远的距离，是仓库中最长的对角线距离即仓库2中C至B距离。
实验例4：管道害虫感染实验
仓库中的管道是害虫躲藏之处，是化学农药熏蒸和物理方法清扫不到的死角，在仓库中的上部和下部通风管道口，喷施真菌制剂，并放入一小盆清水，以便直观检测烟草甲和粉虱的感染罹病情况。
实验得结果表明，管道下的水盆里亦有感染死亡的害虫。

Claims (1)

1.一种诱虫带菌迁飞方法，包括下述步骤：
(1)菌种的选择：白僵菌种(Beauveria bassiana)GZUIFR-GL5-08i，CCTCC No.M208202；
(2)孢子粉制备：
培养基：麸皮80％，玉米粉15％，黄豆粉5％，加水量1∶1.2；在三角瓶中25±1℃固态发酵，经黑暗、光照交替培养12天后，温度为23～28℃开放式培养15～20天，并自然风干、磨粉、过100目网筛，制成4X1010孢子/克，水分含量3.7％，活孢率为84％的白僵菌孢子粉；
(3)设置仓储诱虫箱：在仓储外及内放置有醇化烟叶或粮食、种子储藏物的容器，于其中均匀撒施白僵菌孢子粉，并同时在其中挂害虫性外信息素诱芯和置清水一盆；
(4)检查害虫带菌迁飞情况：水盆中直接观察到害虫感病迁飞距离和罹病死亡情况。
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