CN101421387B - 多孔培养装置及使用该装置的分析方法 - Google Patents
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Abstract
本发明目的在于提供多孔培养装置,其是一种具有连续温度梯度的培养装置,并解决了在高温侧产生的液体蒸汽向低温侧移动并凝结的问题。其特征在于,在由热传导性材料形成的孔收纳容器中以可装卸的方式收纳有按横列和纵列排列的收存液体的孔,设有用于供给该液体的蒸气饱和了的气体的液体或气体的流路或槽,孔的每横列按规定的温度差持有不同的培养温度,实现该温度沿着纵列形成一定温度差的温度系列,在孔列的外侧,具有沿着在该收纳容器的一边排列成横列的孔而实现所述规定温度系列的最低温度的热源,且在孔列的外侧,具有沿着该一边的对边而实现所述规定温度系列的最高温度的另一热源,并且按照同一温度的横列设有隔离件。
Description
技术领域
本发明涉及能够利用单一装置并在规定的温度范围实现多个不同的培养温度的多孔培养装置及使用该装置的分析方法。
背景技术
在采用微生物细胞等的生物试样的各种分析中,虽然有在琼脂培养基上接种菌等,在培养箱内保持恒温,在一定时间后用肉眼观察的方法,但近年来,多采用在形成有多个孔(穴)的多孔板中进行液体培养的方法。另外,在组合化学等中的化学反应的分析中,有时在多孔板中对多个试样进行分析。
对于该液体培养或试样分析而言,多采用如下的方法,即,将试样放入多孔板的各孔内,在规定温度保温的状态下对其进行规定时间培养后,照射光,测定其透射光或含有荧光的散射光。
以往,是通过在平坦的保温板之上载置多孔板来对这种多孔板进行保温的。另外,在对多孔板进行保温时,使用具有具备这样的保温板的架板的培养装置(参照专利文献1)。
然而,在各种温度条件下进行培养时,需要针对各温度来准备培养装置,且需要将这些多孔板分别放入对应于各温度而设定的多个培养装置,因此操作很烦杂。
另外,在进行各种分析时,还需要将多孔板从培养装置取出,而该操作也很烦杂。
为了解决该问题,发现有如下的培养装置,即,在由热传导性材料形成的容器中排列收纳多个孔,将其一端设为高温,将另一端设为低温的连续温度梯度的培养装置。(参照专利文献2~4)。
专利文献1:特开2003-289848号公报
专利文献2:国际公开WO90/10689号
专利文献3:欧洲专利申请公开0290722号
专利文献4:美国专利4865987号
发明内容
然而,这些连续温度梯度培养装置,在梯度内会引起气体的交换,因此,在高温侧产生的液体蒸汽向低温侧移动并凝结,从而会引起新的问题。具体而言,低温侧的凝结会使孔内产生水滴,稀释的结果会使培养条件发生变化,此外还存在液体从孔中溢出的问题,这些温度梯度培养装置无法适用于实际使用中。
因此,本发明的目的在于提供一种利用一个装置就能够设定多个温度,并且无需花功夫去移动孔,同时在多温度培养装置中,通过控制蒸汽压力来解决因液体蒸汽的移动和液体的凝结所引起的问题的培养装置。
本发明者进行锐意研究的结果是,找到了完全解决上述课题的方法,即,在使由热传导性材料所形成的一端为高温,使另一端为低温的容器中,排列收纳多个孔,按照每一温度将孔列气相地分离,并且在各个孔列上设置用于调节蒸汽压的液体或气体的流路或槽,实现了孔列内的温度分布的均一化,并且积极地修正了由于液体蒸汽的移动所引起的液体量的变化。随着温度的连续梯度的变化,可以同时在一定的温度差的多个温度下进行测定。而且,若针对每一个孔将通过观察用光路的光二维地进行一次扫描,则在分析时就不用花功夫去移动孔,从而完成了本发明。
即,本发明提供一种多孔培养装置,其特征在于,在由热传导性材料形成的孔收纳容器中以可装卸的方式收纳有按横列和纵列排列的收存液体的孔,设有用于供给该液体的蒸气饱和了的气体的液体或气体的流路或槽,孔的每横列按规定的温度差持有不同的培养温度,实现该温度沿着纵列形成一定温度差的温度系列,在孔列的外侧,具有沿着在该收纳容器的一边排列成横列的孔而实现所述规定温度系列的最低温度的热源,且在孔列的外侧,具有沿着该一边的对边而实现所述规定温度系列的最高温度的另一热源,并且按照同一温度的横列设有隔离件。
另外,本发明提供一种多孔培养装置,其中,除了用于供给液体的蒸气饱和了的气体的液体或气体的流路或槽,为了实现在列内氧或特定气体的分压阶段性的变化,在同一温度的横列内设有隔离件。
此外,本发明还提供了培养方法,其采用该多孔培养装置,在该装置的各孔中注入样品,用热源使一边实现规定温度系列的最低温度,用另一热源使该一边的对边实现规定温度系列的最高温度,以规定的温度差实现孔的按照横列的多个不同的培养温度。
此外,本发明还提供了一种样品的分析方法,其采用该多孔培养装置,在该装置的各孔中注入样品,用热源使一边实现规定温度系列的最低温度,用另一热源使该一边的对边实现规定温度系列的最高温度,以规定的温度差实现孔的按照横列的多个不同的培养温度,并进行培养,通过对该孔中的样品照射光,来测定其透射光或含有荧光的散射光。
若使用本发明的培养装置,则可以从规定温度范围的最高温度到最低温度之间形成等间隔温度系列,通过一次培养就可以完成数百次试验的量。而且,在分析时不会花功夫去移动培养装置。另外,由于消除了水从高温侧的孔蒸发并在低温侧结露的问题,因此,能够长时间持续设有温度梯度的培养,由于用少量的试样就可以进行测定,因此,装置较小,通过将装置集合起来可以同时在数千多个条件下同时进行研究。而且,由于在孔列上设有用于调节蒸汽压的液体或气体的流路或槽,因此,实现了横列温度的均一化。此外,通过从流路流入氩气或氮气,能够对孔内的氧分压进行调节,因此很容易实现特定气体的分压的多条件化。
因此,如果使用本发明的培养装置,则可以实现对于以往而言较为困难的、对在各种温度条件下的微生物等进行培养,还可以导出培养的最适温度,以及实现温度条件不明的微生物的增殖等
附图说明
图1是表示本发明的培养装置的一个例子的立体图。
图2是表示实施例的培养装置的一部分的立体图。
图3是表示实施例的培养装置的一部分的立体图。
图4是表示实施例的培养装置的一部分的立体图。
图5是表示实施例中所用的孔部分的立体图。
图6是表示实施例的培养装置的收纳状态的一部分的剖视图。
图7是表示实施例的培养装置的立体图。
图8是使用实施例的培养装置所测定的增殖曲线的图。
图9是使用实施例的培养装置所测定的增殖速度的图。
图10是表示本发明的培养装置的振荡器的一个例子的立体图。
图11是表示本发明培养装置的流路或槽的一个例子的图。
图12是表示本发明培养装置的流路或槽的一个例子的图。
图13是表示本发明培养装置的流路或槽的一个例子的图。
图14是表示本发明培养装置的流路或槽的一个例子的图。
图15是表示本发明培养装置的流路或槽的一个例子的图。
符号说明:
1...多孔培养装置;2...流路;3...流路;4...孔;5...观察用孔;6...打通部、凹部;7...观察用孔;8...螺纹孔;9...海绵;11...上板(盖);12...中间板;13...下板;14...密封件;15...LED;16...缩颈;17...热管;18...低温侧固体热源;19...高温侧固体热源;20...合页;21...电动机;22...减速器;23...凸轮;24...摆杆;25...饱和蒸汽压维持用液体;26...饱和蒸汽压维持用液体、气体的流路;27...饱和蒸汽压维持用液体贮存器;28...隔壁;29...气体1的流路;30...气体2的流路。
具体实施方式
本发明是一种多孔培养装置,其特征在于,在由热传导性材料形成的孔收纳容器中以可装卸的方式收纳有按横列和纵列排列的收存液体的孔,沿同一温度的横列设有用于供给该液体的蒸气饱和了的气体的液体或气体的流路或槽,孔的每横列按规定的温度差持有不同的培养温度,实现该温度沿着纵列形成一定温度差的温度系列,在孔列的外侧,具有沿着在该收纳容器的一边排列成横列的孔而实现所述规定温度系列的最低温度的热源,且在孔列的外侧,具有沿着该一边的对边而实现所述规定温度系列的最高温度的另一热源,并且按照同一温度的横列设有隔离件。
从使之实现多个不同的培养温度这一方面来看,本发明的培养装置的孔收纳容器的材质,需要是热传导性材料。在热传导性材料中,金属在加工的自由度方面较为优选。具体而言,铝、不锈钢、黄铜、铜等较为优选,特别优选为铝和不锈钢。在该收纳容器中,以可装卸的方式收纳有按横列和纵列排列的孔,因此设置有用于收纳这些孔的的凹部。该凹部也可以针对每一个孔而设置,但从针对每一横列实现均一的培养温度这一方面来看,优选设置收纳由多个孔横列连结的多孔的凹部。即、优选的收纳容器的形态为:使作为热源的温度不同的恒温水循环的情况如图3及图4所示,收纳由多个孔横列连结的多孔的凹部被多列设置。通过如此地形成,在孔列的纵向(图3及图4的从恒温水的流路2向流路3的方向),热传导性材料以相同的形状重复存在。其结果,在该热传导性材料的纵向很容易形成培养温度系列。
另外,从确保热传导性方面看,优选该孔收纳部的凹部具有对孔的上部以外的部分完全收纳的深度。为了防止凝结,优选使孔的上部与收纳部温度相同或比收纳部温度高,但在设定较高温度时,优选具有隔热性以防止孔的温度的扩散。
本发明的培养装置中按横列及纵列排列的孔的个数没有特别限定,根据目的适当确定即可,例如,作为横列×纵列可列举8×12个、8×20个、16×20、18×24个。对于该孔而言,优选如图3及4那样以横列的多个孔成为一体并可装卸的方式收纳在所述收纳容器凹部中。这些各孔优选为以个别或多个为单位可进行装卸。另外,为了确保用于进行光学观测的光路,孔的材质优选为透明的塑料、玻璃等。
本发明的培养装置,在孔列的外侧,具有沿着在收纳容器的一边排列成横列的孔而实现所述规定温度范围的最低温度的发热装置或流有最低温度的流体的流路,且在孔列的外侧,具有沿着该一边的对边而实现所述规定温度范围的最高温度的发热装置或流有最高温度的流体的流路。例如,如图4所示,在流路2中流有低温度的流体,流路3中流有高温度的流体,由此,在流路2和流路3之间所形成的孔的各横列就形成了该最低温度和最高温度之间的培养温度系列。这里所采用的流体可例举气体或液体,但优选为液体,特别优选为水(或热水)。
另外,也可以取代设置这样流有流体的流路,而是如图10的18、19那样,在主体(1)上设置固体的发热装置。作为发热装置,可例举加热器或珀耳帖(peltier)元件等。在这种情况下,为了减少沿着该一边的对边的方向的温度的不均,优选在热源和收纳容器凹部之间加入图10的16那样的缩颈,或设置热管17。在图10中,图示了安装有盖(11)的收纳容器(1)。
另外,本发明的培养装置,还沿着同一温度的横列具有用于进行在该横列的孔中的介质上的蒸汽压调节或氧分压调节的液体或气体的流路或槽,并且通过每一个同一温度的横列设置隔壁从而能够维持液体在其温度下的饱和蒸汽压。由此,在适度不同的纵列上蒸汽不会移动,从而就能够解决水从高温侧的样品蒸发,而在低温侧结露的问题。该槽也可以是使液体渗入多孔材料的槽。
此外,在温度均一的列内,通过设置延缓气体扩散的隔离件,且通过使氧分压调节孔列的一侧向大气开放,而从另一侧的流路流入氩气或氮气,就能够对氧分压进行调节。由此,当培养未知的细菌时,能够找到最合适的氧分压条件。另外,可以针对每一纵列来设定氧分压不同的培养条件,且能够同时进行温度和氧分压不同条件下的培养。另外,通过将氧替换为其他气体,可以在均一温度的列内实现化学反应的不同环境。
另外,为了温度的稳定性、且为了防止孔中的液体的蒸发和杂菌的混入,或为了所述的蒸汽压调节或氧分压调节,优选在培养装置上,设置覆盖全孔的盖。此外,和收纳容器主体一样地,在盖的一边,具有实现规定温度系列的最低温度的热源,并且在孔列的外侧,沿该一边的对边,具有实现所述规定温度系列的最高温度的另一热源,从而能够进一步实现温度的稳定化。
另外,也可以在收纳容器和盖之间设置中间板,其也是在一边具有实现规定温度系列的最低温度的热源,并且在孔列的外侧,沿该一边的对边,可以设有实现所述规定温度系列的最高温度的另一热源。
收纳容器和盖根据需要还可以重合中间板,形成用于收纳孔的凹部,制成将同温度的孔放入凹部内的构造,这样就能够进一步实现样品的温度的稳定化。另外,上述中间板也可以是收纳容器的一部分。
另外,若在盖和收纳容器上,在各孔的上下设置比孔的直径小的孔,则可以对样品进行观察,照射光,就可以测定其吸光度的变化、含有荧光的散射光。或者,在各孔的上下一侧具有比孔的直径小的孔观察用孔,在另一侧具有反射观察用光的镜或光源,从而可以同样地进行光学观察。
此外,如果设置在打开该盖时对盖和设置有孔的收纳容器凹部照射紫外线的装置,则能够对培养前后的菌进行杀菌。
本发明装置,还可以具有振荡器。该振荡器是例如通过电动机21经减速器22使凸轮23旋转,并通过摆杆24周期性地使安装有盖的收纳容器·中间板整体,或将它们层叠几层的装置1倾斜的装置(图11)。
本发明方法的一个是使用所述本发明装置以规定的温度系列按照孔的横列阶梯地实现多个不同的培养温度并进行培养的方法。
若是这样,如上所述,以规定的温度系列来形成培养温度梯度,并补偿液体蒸汽压,其结果为,可以对小于数百μL容量的溶液或悬浊液进行处理,在一次实验中就可以实现包括温度在内的数百个以上的不同条件下的培养。
本发明的培养装置,在培养中或在培养后,对该孔中的样品照射光,通过测定其透射光或含有荧光的散射光,可以对样品进行分析。
光的测定方法并没有特别限定,例如可举出由收纳容器的盖的孔照射光,并从收纳容器的下面的孔对孔的透射光进行测定的方法。这时,可以用菲涅耳透镜控制光的角度,并通过市售的电脑用的扫描仪来测定透射光。
另外,用具备多个受光器的移动式装置,能够测定一次来自一列的观察孔的透射光或含有荧光的散射光,然后顺次进行每1列进行一次观察的扫描方式的光强度测定。
也可以自动进行这些一部分或全部的工序。
也可以将如此获得的光学测定值自动送到计算机,自动进行适于通过多孔培养引起的细胞关联实验或化学实验的数值分析,自动计算目的参数的值,从而进行分析。
此外,所述测定方法可通过计算机自动完成,也可以随时间经过进行测定,此外还可以利用计算机来处理所获得的数据,并作为有益信息而记录、保存。
此外,通过将所述的多孔培养装置累积起来,并通过对从多个多孔培养装置获得的数据进行处理,可以将同时研究的不同条件的个数扩大到多孔培养装置的台数倍。
接着,结合附图对本发明进行更详细说明。
作为本发明中所使用的收纳容器,可例举图1所示的容器。
在容器1上形成有收纳多个孔4的凹部,其中收纳有孔4。
在容器1的一边具有流有低温流体的流路2,且在该一边的对边具有流有高温流体的流路3。若使规定温度的流体分别流入流路2和3而进行培养,则流路3附近的孔的温度接近高温流体的温度,而流路2附近的孔的温度接近低温流体的温度,从流路3附近的孔到流路2附近的孔,孔的温度呈阶梯地下降,从而能够实现所希望的温度系列。
因此,利用单一的容器就形成了阶梯的培养温度的系列。
而且,在收纳容器1中收纳孔来进行培养,如果对该孔中的样品照射光,并测定其透射光、含有荧光的散射光,则能够很容易地分析出每一温度下的样品的变化。
此外,本发明装置,沿同一温度的横列,设有用于将该横列的孔中的液体的蒸汽压维持在饱和蒸汽压的液体或气体的流路或槽,并且在同一温度的横列内还可以设有隔离件。图12是直接将饱和蒸汽压维持用液体25注入孔收纳凹部6内的图,或者是将在多孔材料中渗入有饱和蒸汽压维持用液体25的结构放入孔收纳凹部6内。图13是在孔收纳凹部6的周围具有注入有饱和蒸汽压维持用液体25的流路26的结构,图14是具有饱和蒸汽压维持用液体25专用的贮存器27,且利用专用流路26仅将液体的蒸汽导入孔收纳凹部6的结构。
另外,作为更优选的方式的培养装置,可例举图2~图7所示的结构。
图2是表示盖(上板)11的图,图3是表示中间板12的图,图4是表示下板13的图。通过从上顺次将盖(上板)11、中间板12及下板13重叠,使这些部件成为一体地构成培养装置(图7)。
而且,观察中间板可知,打通部为放入有八连孔4(图5)的凹部6(图6),且可以获得稳定的温度条件。
另外,在三个板彼此间流路2和3是贯通的,防止了上下的温度的不均。
而且,在盖11和下板13上设有与各个孔相对应的观察用孔5及7,且能够使分析用的光透过。因此,如果利用该孔,则不仅仅在样品的培养后,在培养中也可以进行吸光强度的分析等。
另外,图15中示出了除了温度之外,用于在保持在均一温度下的一个横列的孔群使好氧-厌氧等气相的环境产生变化的机构。各孔利用隔壁28使其气相独立,在两侧的贮存器中,导入有各种不同的气体29和30,例如空气和氮气,并使之与液体达到饱和。各自的气体通过流路26扩散,距离贮存器的距离不同致两种气体的混合比也不同,因此各自的孔中也提供有不同混合比的气体。
以下,例举实施例等对本发明进行详细说明,但本发明并不受这些实施例的任何限定。
实施例1
作为本发明的培养装置,制作了图1所示的收纳容器1。容器1的外尺寸为347mm×222mm×20mm的铝板。
孔收纳部4直径为6mm,深为13mm。
如图1所示,流路2是在一边有一根管贯通的构造。管为铝制,内径为8mm。流路2与来自恒温槽的管以及去往恒温槽的管连结,使恒温水循环。流路3也一样。
若是这种构造,则从流路3附近向流路2附近,培养装置的温度从最高温度向最低温度缓缓变化,利用一个装置,就能够实现多个阶梯性的不同的培养温度。
此外,本装置沿同一温度的横列,设有用于将该横列的孔中的液体的蒸汽压维持在饱和蒸汽压的液体或气体的流路或槽,并且在同一温度的横列内设有隔离件。即,如图12所示,设置了在孔收纳凹部6内直接注入饱和蒸汽压维持用液体25的构造。
实施例2
除了将实施例1的培养装置的图12所示的部分换成图13所示的部分之外,与实施例1一样地制作培养装置。
实施例3
除了将实施例1的培养装置的图12所示的部分换成图14所示的部分之外,与实施例1一样地制作培养装置。
实施例4
除了将实施例1的培养装置的图12所示的部分换成图15所示的部分之外,与实施例1一样地制作培养装置。
实施例5
制作图2~图7所示的装置作为本发明的培养装置。上板11、中间板12及下板13的外尺寸都是347mm×222mm×14mm的铝板,将它们按照该顺序重合就制成了本发明的培养装置(图7)。在各板的接合部上使用了密封件14。另外,通过将螺丝穿过设于各板上的14个螺纹孔8,用螺丝将三个板固定,从而实现一体化的装置。另外,中央的孔是对用来观察的光源的光强度进行修正所使用的对照光所通过的孔。
孔4如图5所示,是可装卸于收纳容器的八连孔。该八连孔的宽度为12mm,长度76mm,且各自的孔的内径为6mm,深约为13mm。
孔4设置于中间板12的打通部分6和上下板所形成的凹部中。凹部内的剖视图如图6所示。
在图6中,孔4的上部与上板11的里面凹部抵接,下部与下板的孔7的上部抵接。孔4的上面有观察用孔5,且安装有作为观察光源的LED15,其具有620nm波长。孔4的下面有观察用孔7,成为能够使光透过,且利用扫描仪对光的强度进行测定的构造,从而可对孔内的样品进行分析。另外,凹部内的多孔材料9是为了维持孔内的液体的饱和蒸汽压力而对液体进行保持的部件。这样,由上中下板形成的凹部的周边为隔离件,该凹部保持着在各个温度下所确定的蒸汽压,且蒸汽压与其他凹部分离开,通过其与多孔材料中的液体,来防止在高温侧产生的液体蒸汽向低温侧移动并凝结的现象。
流路2的管为铝制,内径为8mm。流路2如图2~图4及7所示,是在三个板的彼此间两根管贯通的构造。其是为了使从恒温水到容器的热传导性更加良好。这两根管,是与未图示的管在容器外连接,流体在容器的一边往复后,流入相连接的其他板的管,接着流过同样的流路。另外,流路3和流路2是一样的构造。
通过这种方式,实施例5的装置,流路较长,并且具有凹部,从而可以实现不会在局部产生温度不均的培养。此外,由于设置了观察孔,因此样品的观察、测定较为容易并且还可以自动化完成。
实施例6
使用实施例5的装置,获得了大肠杆菌的液体培养中的43-50℃系列的增殖曲线。将该培养装置固定在A4尺寸的扫描仪上,以每分钟25次的周期对这两者进行浸透,防止了各孔内的大肠杆菌的沉淀。扫描仪的光轴在中央部以外向上发散,因此,以移动的测光部上所粘贴的光轴垂直的方式对菲涅耳透镜进行修正。
仅将大肠杆菌的变异株和与其相对照的野生株和作为各种条件下的测光效率的修正的相同培养基放入各孔中。将两个八连孔放置于同一温度下,且其有20列,因此可以对合计320个培养同时进行分析。首先,通过扫描仪,每隔20分对320个孔及在中央打开的孔上所安装的修正用LED共计321个进行测定,并修正320个孔的透射光的强度。这样获得的光强度的时间变化也就是通过透射率所测定的增殖曲线表示于图8。在温度稳定60分钟以后可进行测定,培养基的透射率随时间的变化(A)的6例具有再现性,且表示了8种大肠杆菌株(B)在特定温度下的增殖曲线的可靠性。图9表示了如此测定的6种大肠杆菌变异株在各温度下的增殖速度。
产业上的可利用性:
若使用本发明的培养装置,则可以用一个装置来进行在各种温度条件下的培养,并且分析也很容易且可以实现自动化。因此,有希望获得作业省力、减少培养空间、降低运营成本等经济效果。另外,消除了水从高温侧样品蒸发并在低温侧凝结的问题。因此,如果使用本发明的培养装置,则可以实现对于以往而言较为困难的、对在各种温度条件下的微生物等进行培养,还可以导出培养的最合适温度,以及实现温度条件不明的微生物的增殖等。
Claims (11)
1.一种多孔培养装置,其特征在于,在由热传导性材料形成的孔收纳容器中以可装卸的方式收纳有按横列和纵列排列的收存液体的孔,设有用于进行在该横列的孔中的介质上的蒸汽压调节或氧分压调节的液体或气体的流路或槽,孔的每横列按规定的温度差持有不同的培养温度,实现该温度沿着纵列形成一定温度差的温度系列,在孔列的外侧,具有沿着在该收纳容器的一边排列成横列的孔而实现所述规定温度系列的最低温度的热源,且在孔列的外侧,具有沿着该一边的对边而实现所述规定温度系列的最高温度的另一热源,并且按照同一温度的横列设有隔离件。
2.根据权利要求1所述的多孔培养装置,其特征在于,所述孔以横列的多个孔成为一体并可装卸的方式收纳。
3.根据权利要求1或2所述的多孔培养装置,其特征在于,还具有覆盖全部孔的盖。
4.根据权利要求1或2所述的多孔培养装置,其特征在于,还具有振荡器。
5.根据权利要求3所述的多孔培养装置,其特征在于,在收纳容器上安装盖时,通过使在各孔的上下两侧具有比孔径小的观察用孔,或者在各孔的上下一侧具有比孔径小的观察用孔、另一侧具有反射观察用光的镜或光源,从而可以光学观察孔内的物质。
6.根据权利要求3所述的多孔培养装置,其特征在于,在盖的下面还具有中间板。
7.根据权利要求3所述的多孔培养装置,其特征在于,还具有对孔和收纳孔的部位照射紫外线而进行灭菌的装置。
8.根据权利要求1所述的多孔培养装置,其特征在于,除了用于进行在该横列的孔中的介质上的蒸汽压调节或氧分压调节的液体或气体的流路或槽之外,还在同一温度的横列内设有隔离件以实现在纵列内氧或特定气体的分压阶段性的变化。
9.一种培养方法,其特征在于,采用权利要求1~8中任一项所述的多孔培养装置,在该装置的各孔中注入样品,用热源使一边实现规定温度系列的最低温度,用另一热源使该一边的对边实现规定温度系列的最高温度,以规定的温度差实现孔的按照横列的多个不同的培养温度。
10.一种样品的分析方法,其特征在于,使用权利要求1~8中任一项所述的多孔培养装置,对所收纳的孔中的样品照射光,测定该透射光或含有荧光的散射光。
11.根据权利要求10所述的样品的分析方法,其特征在于,用具备多个受光器的移动式装置测定一次发自一列的观察孔的透射光或含有荧光的散射光,然后进行按照每1列顺次进行一次观察的扫描方式的光强度测定。
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US9909962B2 (en) * | 2012-03-09 | 2018-03-06 | Leica Biosystems Richmond, Inc. | Device and method for controlling the temperature in a moving fluid in a laboratory sample processing system |
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CN108051587B (zh) * | 2017-11-03 | 2020-02-14 | 无锡艾科瑞思产品设计与研究有限公司 | 一种具有搅拌功能的食物检测用酶标板 |
CN110272817A (zh) * | 2019-06-19 | 2019-09-24 | 张铁军 | 一种微生物自动培养机构 |
US20220276277A1 (en) * | 2019-08-01 | 2022-09-01 | Nippon Chemiphar Co., Ltd. | Reagent cartridge |
CN110964622A (zh) * | 2019-12-20 | 2020-04-07 | 中国农业大学 | 一种梯度低温生物富集反应器 |
Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4673651A (en) * | 1985-03-15 | 1987-06-16 | Rothenberg Barry E | Multi-cell tray |
US4865987A (en) * | 1987-05-15 | 1989-09-12 | Limitek Oy | Thermal gradient-incubator |
Family Cites Families (8)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
IL71131A (en) * | 1984-03-02 | 1988-09-30 | Product Advanced Ltd | Method and apparatus for heating and/or cooling objects simultaneously at different preselected temperatures |
FI81831C (fi) | 1989-03-06 | 1990-12-10 | Biodata Oy | Temperaturgradient-inkubator foer undersoekning av temperaturavhaengiga fenomen. |
US5255976A (en) * | 1992-07-10 | 1993-10-26 | Vertex Pharmaceuticals Incorporated | Temperature gradient calorimeter |
US6008010A (en) * | 1996-11-01 | 1999-12-28 | University Of Pittsburgh | Method and apparatus for holding cells |
WO2002030561A2 (en) * | 2000-10-10 | 2002-04-18 | Biotrove, Inc. | Apparatus for assay, synthesis and storage, and methods of manufacture, use, and manipulation thereof |
US6673595B2 (en) * | 2001-08-27 | 2004-01-06 | Biocrystal, Ltd | Automated cell management system for growth and manipulation of cultured cells |
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Patent Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4673651A (en) * | 1985-03-15 | 1987-06-16 | Rothenberg Barry E | Multi-cell tray |
US4865987A (en) * | 1987-05-15 | 1989-09-12 | Limitek Oy | Thermal gradient-incubator |
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