CN101411742B - 芪蛭通络胶囊 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种治疗中风病及其恢复期后遗症的芪蛭通络胶囊及其制备方法，它以黄芪、水蛭为君药；人参、麦冬、五味子、地龙为臣药，其中地龙的用量占整个处方总重量的1.5％～2.0％；以清热解毒、活血化瘀类中药为佐使药。原料分别以粉碎、溶剂提取等预处理后，按比例配制，再以β—环糊精包埋物配研，过筛，混匀，制成药剂。本发明配方具有益气、活血、通络的功能，治疗中风病及其恢复期后遗症效果显著。

Description

芪蛭通络胶囊

技术领域

本发明涉及一种治疗中风病及其恢复期后遗症的芪蛭通络胶囊及其制备方法。

背景技术

中风病是好发于中老年人的一种常见病、多发病。是以卒然昏仆，不省人事，伴口眼歪邪、半身不遂、语言不利或不经昏迷仆倒而仅以僻不遂为主症的一种疾病。本病相当于现代医学的急性脑血管病，急性脑血管疾病是由脑部或供应脑的颈部动脉的病变引起的脑局灶性血液循环障碍，而致意识障碍及(或)脑局灶症状。因其发病急聚，故曾命名脑卒中或脑血管意外。该病主要包括出血性脑血管病(珠网膜下腔出血、脑出血)和缺血性脑血管疾病(短暂脑缺血发作、脑血栓、脑栓塞)等。直至目前，脑血管病的发病率、致残率、复发率、死亡率仍较高，市售中西成药品种虽多，但西药多为对症治疗，缺乏整体观念，无法从人的整体上对血液及血管进行根本调节，且副作用明显。不少中药品种虽有疗效，但因治疗思路单一、立法组方囿于常规套路，疗效难以提高。基于上述背景，立足传统中医药学，发挥中医药整体调节优势，挖掘民间中医药治疗中风的丰富独特经验，我们研制开发一种对急性脑血管病适应症较广，起效迅速，疗效高且持久，又无毒副作用的芪蛭通络胶囊。

通过检索，发现中国发明专利200510133939.6说明书中公开了用于治疗中风恢复期后遗症的芪蛭通络胶囊的配方及其制备方法，其主要有26味中药组成，经过药材粉碎、水煎煮提取、挥发油提取等制备而得。但是此专利200510133939.6药物处方中含地龙的量为300～400份，其实施例中地龙的用量为325g，其用量比例与黄芪(君药)基本相同，实施例中二者的用量比为1：1，且为另一味君药水蛭用量的3倍，地龙用量过大可以引发众多不良反应。而且专利200510133939.6中只对当归、川芎、郁金、姜黄四味中药材进行挥发油提取，并未对其他富含挥发油的药材提取挥发油，工艺中采用直接喷入挥发油工艺，致使有效成分减少，且稳定性低。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种疗效高、毒副作用小的治疗中风病及其恢复期后遗症的中药组合物，为此本发明还要提供一种制备该中药组合物的方法。

为解决上述技术问题，本发明所采用的技术方案的基本构思是：本发明芪蛭通络胶囊原料药中地龙的用量比例为25～40份，占整个处方总重量的1.5％～2.0％，且在其制备工艺中同时提取黄芪、人参、麦冬、五味子、川芎、当归、制首乌、毛冬青、赤芍、鸡血藤、丹参、红花、泽兰、郁金、姜黄、天麻、羌活、猪牙皂、地龙等十九味药材的挥发油，采用β—环糊精包埋技术，使本发明制剂溶解度增大，稳定性提高，防止挥发性成分挥发，掩盖药物的不良气味和味道，降低药物的刺激性与毒副作用。

本发明所提出的芪蛭通络胶囊原料药中地龙的用量比例为25～40份，通过一般药理学实验及体外杀精实验比较研究，发现与现有技术提及的中药组合物相比，本发明中药组合物避免了过高剂量地龙导致的血压严重降低的副作用，并且减少了潜在的生殖毒性。

本发明所提出的芪蛭通络胶囊制备方法中，同时对黄芪、人参、麦冬、五味子、川芎、当归、制首乌、毛冬青、赤芍、鸡血藤、丹参、红花、泽兰、郁金、姜黄、天麻、羌活、猪牙皂、地龙等十九味药材进行挥发油提取，并且采用β—环糊精包埋技术，通过气虚血瘀脑缺血模型、大鼠大脑中动脉栓塞模型、血小板聚集试验等药理实验比较研究，发现与现有技术提及的中药组合物相比，本发明中药组合物对脑缺血具有更为有效的保护作用，并且具有更好的抗血小板聚集的作用，上述作用与现有技术提及的中药组合物相比，具有显著的统计学差异。

本品经临床研究表明，本发明中药组合物可参加吞噬细胞功能，具有改善微循环障碍，增加脑部血运，改善缺氧情况，加速纤维蛋白溶解作用，降低血液粘度，促进动静脉管壁内皮细胞的修复，是治疗脑血管的有效物，芪蛭通络胶囊治疗脑血管的疗效已被试验与临床研究资料所证实，经临床观察总结认为，芪蛭通络胶囊临床疗效肯定，无明显的毒副作用，临床应用前景广阔，值得在临床上推广使用。

以下通过试验例来阐述本发明所述的芪蛭通络胶囊的有益效果：

QZC组：指按本发明实施例制备方法而得的制剂；

对照组：按发明专利200510133939.6公开说明书实施例制备方法而得的制剂。

安全性评价比较实验：

一般药理研究

18只Beagle犬，按体重随机分为QZC高剂量组(0.3g/kg)、低剂量组(0.06g/kg)和对照组(0.06g/kg)，每组6只，雌雄兼用。静注戊巴比妥钠30mg/kg麻醉后仰卧置手术台上，背位固定，剪除颈部毛，切开皮肤，剥离并暴露气管及颈总动脉，进行插管，连接换能器及多导生理记录仪，对犬心电图、血压、呼吸频率及幅度等进行同步描记。均十二指肠给药。观察记录给药前及给予供试药混悬液后10、15、30、60、90、120、150、180min动物的心电图、血压、呼吸频率及幅度。研究发现，对照组在给药后15min时间点收缩压开始显著降低(<0.05)，60min达到最低值，90min以后开始逐渐回升，至180min仍在较低水平。QZC低剂量组及高剂量组则表现为轻微缓慢的降低血压的作用。其余指标包括心电图、呼吸等各组均无显著变化。因此认为QZC组较对照组对血压的影响较轻，作用更缓和及安全。结果见表1。

表1 一般药理研究中QZC组和对照组对犬收缩压的影响

与给药前相比，^*P<0.05，^**P<0.01，^***P<0.001

体外杀精实验

选用SD大鼠8只，分为4组，即NS阴性组、NP-9阳性组、QZC组和对照组。处死后收集附睾尾部精液，在25℃保温条件下，取0.1ml精液与试管内QZC组和对照组混悬液[用生理盐水(NS)稀释成浓度为0.2g/ml]0.5ml混合，在尽可能短的时间内用移液管反复吹打5次，使之充分混匀。立即取1滴混合液置载玻片上，低倍镜下观察5个分离的视野，确定精液与药液混合后20、60s精子的活动情况。若所有视野中精子不活动，则药物具有杀精作用。每个实验重复2次，确定所有精子失活所需药物浓度。同时与NS阴性对照和NP-9阳性对照组(浓度为0.75mg/ml，与临床使用中体内浓度相当)进行比较。

精子活动力观察：将精子活动力定为4级。0级：精子不活动；I级：精子活动不良，原地打转或旋转移动，前向运动较弱；II级：精子活动力一般，有中等度向前运动；III级：精子活动力良好，有快速、活泼地向前运动。另外若精子在0级基础上有部分裂解，记作×)。×、0级、I级、II级、III级等分别记分为：5、4、3、2、1分，最后记分取两次试验的平均值。试验结

果作单因素方差分析。

对照组混悬液与精液接触后，镜下瞬间可见精子破裂或头尾断裂的精子残骸。未完全接触到药液的精子呈迅速移动状。记录得分情况并对各组得分情况进行统计学方差分析，结果见表2。WK对大鼠精子的杀精效应具有明显的时间依赖性。QZC组未见有杀精作用。

表2 体外杀精实验统计结果

与阴性组相比，^**P<0.01，^*P<0.05

药理实验一：脑缺血模型

动物分组及给药方式

将大鼠分为2批，分别用于：神经学评分、梗死率和含水量的测定和生化指标的测定。每批大鼠32只，按体重随机分为4组，每组8只，分别为：伪手术组、模型组、QZC组(0.5g/kg)和对照组(0.5g/kg)。各组于手术前7d每天灌胃给药1次，连续7d，末次给药30min后，制备大鼠大脑中动脉闭塞模型(MCAO)。其中伪手术组和模型组每天灌胃给予纯净水。

脑缺血模型制作

通过颈内动脉线栓法复制MCAO模型：大鼠用4％水合氯醛(1mL/100g)腹腔注射麻醉后，仰卧固定在手术台上，颈部正中偏右做一切口，暴露右侧颈总动脉，右侧颈外动脉，右侧颈内动脉。分离并结扎、剪断甲状腺上动脉和枕动脉(均为颈外动脉的分支)。游离颈外动脉，用血管夹夹闭颈总动脉和颈内动脉。在颈外动脉主干上沿插线方向约45°做一切口，将尼龙线(直径约0.26mm)从切口处插进，插至颈内动脉血管夹处时，打开血管夹，再迅速将尼龙线推进，进线深度约距离颈总动脉分叉处18～20cm左右即可感到阻力，此时即可阻塞右侧大脑中动脉的血流。此时用线在颈外动脉根部打一松结。1h后进行复灌，即拔出渔线，扎紧颈外动脉根部的松结，打开颈总动脉血管夹，缝合皮肤，即可完成局灶性脑缺血再灌注模型。伪手术组仅暴露颈总动脉分叉和颈内动脉，而不插线。手术过程中大鼠体温维持在(37±0.5)℃。术后将大鼠放养回笼中，保证食物、水的供应，维持室温在(37±0.5)℃。再灌注24h后进行各种指标的测定。

神经学评分方法及脑梗死率、脑含水量的测定

大鼠缺血1h、再灌注24h后，按文献的方法对动物的行为缺陷进行分级评分。

大鼠缺血1h、再灌注24h后，断头处死大鼠，取出全脑，称脑湿重。在视交叉及其前后各2mm左右，做冠状切片，切成5片后迅速将脑片置含有1％TTC的磷酸缓冲溶液5mL中，避光于37℃水浴温孵30min，其中每隔7～8分钟翻动一次，用眼科镊分离苍白区(梗死区)和非苍白区(正常区)。

将染色后的脑组织置100℃烘箱烘干，计算含水量。

脑组织相关生化指标的测定

大鼠缺血1h、再灌注24h后断头处死，立即于冰浴上取出全脑，快速剔除嗅球、小脑和低位脑干后，将大脑右前约一半组织以冰冷的生理盐水制成10％脑组织匀浆，按试剂盒说明书，测定Na⁺，K⁺-ATPase、SOD活性和细胞内钙含量及MDA的含量。

实验结果

1神经学评分

与伪手术组相比，模型组出现明显的神经功能障碍，大鼠神经学评分显著升高(P<0.01)；与模型组相比，QZC组(0.5g/kg)组和对照组(0.5g/kg)均可改善大鼠的神经功能，降低神经学评分(P<0.05，P<0.01)，QZC组在效果上优于对照组，二组间具有统计学差异(P<0.05)。表明QZC组可显著改善局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠的神经功能，且其作用显著优于对照组。结果见表3。

表3 神经功能评分表

与模型组相比，#P<0.05，##P<0.01

与对照组相比，^*P<0.05

2脑梗死率及脑含水量

与伪手术组相比，模型组的脑梗死率和含水量均显著升高(P<0.01)。与模型组相比，QZC组(0.5g/kg)组和对照组(0.5g/kg)均可明显降低大鼠的脑梗死率(P<0.01)及脑含水量(P<0.05)。QZC组在效果上优于对照组，二组间具有统计学差异(P<0.05)。表明QZC组可缩小局灶性脑缺血再灌注损伤后脑组织梗死范围，减轻脑水肿，且其作用显著优于对照组。结果见表4。

表4 QZC及对照组对脑缺血大鼠脑梗死率及脑含水量的影响(X±S)

与模型组相比，#P<0.05，##P<0.01

与对照组相比，^*P<0.05

药理实验二：缺血性脑卒中气虚血瘀证大鼠模型

动物分组及给药方式

动物分为4组：正常组、模型组、QZC组(0.5g/kg)和对照组(0.5g/kg)。各组于造模期间每天灌胃给药1次，连续21d。观察了局部脑组织血流量(rCBF)、脑水肿、血液流变性、血浆血栓素A₂(TXA₂)及前列环素(PGI₂)的变化

气滞血瘀脑缺血模型制作

根据中医理论“劳则气耗”选择游泳力竭法制备大鼠气虚血瘀状态：将模型组大鼠按4％±0.5％体重负重后分批放入一内径150cm、水深40cm的圆形游泳池，水温控制在(20±1)℃，强迫其不停游泳直至力竭后捞出，力竭指征为游泳动作失调、水淹没鼻尖、身体下沉超过10s不能浮出水面。先适应性游泳训练3d，然后每天力竭性游泳1次，持续21d。于实验第22天，按前述脑缺血模型制作方法造模。将术后大鼠置于电热毯保持体温，术后2h将栓线拉出以恢复MCA血流供应实现再灌注，回笼饲养。于再灌注6h进行Z-longa评分，评分在1～3分的大鼠认为模型制作成功，否则视为造模失败，弃之不用。于再灌注24h取材。

局部脑组织血流量(rCBF)、脑水肿

QZC组和对照组rCBF明显增加，脑含水量显著下降，与模型组比较有显著差异(P<0.01，P<0.05)。QZC组在效果上优于对照组，二组间具有统计学差异(P<0.05)。结果见表5。

表5 QZC组和对照组对气滞血瘀脑卒中模型局部脑组织血流量(rCBF)、脑水肿的作用(X±S)

与模型组相比，#P<0.05，##P<0.01

与对照组相比，^*P<0.05

血浆TXB₂和6-keto-PGF₁。

QZC组和对照组TXB₂、T/K明显降低，6-keto-PGF₁。明显增高，与模型组比较有显著差异(P<0.01，P<0.05)。QZC组对TXB₂/6-keto-PGF₁。平衡状态的调节作用优于对照组，二组间具显著性差异。结果见表6。

表6 QZC组和对照组对气滞血瘀脑卒中模型血浆TXB₂和6-keto-PGF₁。的影响(X±S)

与模型组相比，#P<0.05，##P<0.01

与对照组相比，^*P<0.05

血液流变性

QZC组和对照组血沉(ESR)，血浆比粘度、全血比粘度、血浆纤维蛋白原(FG)、红细胞压积(Hct)及红细胞刚性指数(IR)均显著下降，与模型组比较有显著差异(P<0.01，P<0.05)。其中QZC组血浆比粘度、全血比粘度均显著低于对照组(P<0.05)，提示QZC组较对照组具有更好的改善气滞血瘀脑卒中大鼠血流变的作用。结果见表7。

表7 QZC组和对照组对气滞血瘀脑卒中模型血液流变性的影响(X±S)

与模型组相比，#P<0.05，##P<0.01

与对照组相比，^*P<0.05，^**P<0.01

药理实验三：体外血小板聚集实验

Wistar大鼠40只，随机分为四组，即模型组、阿斯匹林组(2mg/ml)、QZC组和对照组(0.5g/ml)，每组10只。大鼠经2.5％戊巴比妥钠腹腔麻醉，分离右侧颈总动，颈总动脉插管取血，用3.8％枸橼酸钠抗凝(全血:枸橼酸钠为9∶1)，1000r/min离心10min，吸出上层富含血小板的血浆(PRP)，余下的血浆再以3000r/min离心10min，吸出上层贫含血小板的血浆(PPP)，以PPP调整PRP，使血小板数在20万～30万/ml。以PPP管调节透光度为100％，PRP管调节透光度为0，用比浊法测定以ADP为诱导剂的上述各组的最大聚集率。QZC组和对照组均能显著抑制ADP诱导的大鼠血小板聚集，各组与模型组相比，差异非常显著，QZC组对血小板聚集的抑制强于对照组。结果见表8。

表8 QZC组和对照组对ADP诱导的离体大鼠血小板聚集率的影响(X±S)

与模型组相比，#P<0.05，##P<0.01

与对照组相比，^*P<0.05，^**P<0.01

临床试验：

本发明在山西医科大学第二附属医院神经内科进行临床试验病例选择标准：采用中医、西医双重诊断，参照《中药新药治疗(中风病)的临床研究指导原则》、《各类脑血管疾病诊断要点》原则进行，筛选符合中风病诊断标准与中医辩证标准的恢复期与后遗症患者80例。

治疗组：芪蛭通络胶囊，一次4粒，一日2次。

对照组：华佗再造丸，一次一丸，一日2次。

疗程：4周为一个疗程。

观察治疗前后患者的神志、语言、运动功能的恢复程度和神经系统体征。疗效评定标准

基本痊愈：神志清醒，语言流利，瘫肢肌力恢复至4～5级，生活能自理，疗效指数N≥85％。

显效：神志清醒，语言正常，瘫肢肌力恢复至4级，简单生活能自理，疗效指数N≥50％<85％。

有效：神志清醒，语言正常，瘫肢肌力恢复至3级(或进升2级)，或语言表达久佳，瘫肢肌力恢复到3～4级，生活能部分自理，疗效指数N≥20％<50％。

无效，仍不省人事，或智能残缺，失语，瘫肢肌力恢复1级左右，疗效指数N<20％。

疗效评定指数N＝[(治疗前积分—治疗后积分)÷治疗前积分]×100％，以百分数表示。

(1)基本痊愈：≥85％。

(2)显效：≥50％<85％。

(3)有效：≥20％<50％。

(4)无效<20％

临床疗效分析

1对中风疾病疗效分析

表9 对中风疾病疗效比较

两组治疗后对中风疾病疗效比较有显著统计学意义(P<0.05)

结果显示，对中风病疗效，治疗组基本治愈率16.67％；显效率36.67％；总有效率90.0％；对照组基本治愈率0.0％，显效率30.0％，总有效率60.0％，经统计学处理，有显著统计学意义。

2对中风病中医证候疗效比较

表10 对中医证候疗效比较

两组治疗后对中医证候疗效比较有显著统计学意义(P<0.05)

结果显示，对中医疗证候疗效，治疗组基本治愈率20.0％；显效率40.0％；总有效率93.33％；对照组基本治愈率10.0％，显效率30.0％，总有效率70.0％，经统计学处理，有显著统计学意义。

3治疗组疾病疗效与中医证型关系比较

表11 治疗组疾病疗效与中医证型关系比较

两组治疗后对中风疾病疗效比较无显著统计学意义(P>0.05)

结果显示，气虚血瘀组基本治愈率21.43％；显效率32.14％；总有效率89.29％；风痰瘀血组基本治愈率12.5％，显效率40.63％，总有效率90.63％，经统计学处理，无显著统计学意义。

具体实施方式

本发明的芪蛭通络胶囊，其内容物是由下列重量的原料药制成：

黄芪325g      水蛭130g     人参130g     麦冬32.5g

五味子65g     地龙32.5g    毛冬青325g   制首乌162.5g

当归65g       川芎65g      赤芍65g      鸡血藤65g

丹参65g       红花32.5g    泽兰32.5g    土鳖虫32.5g

僵蚕6.5g      郁金65g      姜黄32.5g    全蝎13g

天麻13g       肉桂13g      羌活32.5g    猪牙皂6.5g

胆南星13g     冰片13g

以上原料制成胶囊1000粒。

其制备方法为：以上二十六味，除冰片外，水蛭、土鳖虫、肉桂、全蝎、僵蚕、胆南星粉碎成细粉，过筛，混匀；其余黄芪等十九味，加水煎煮2次，第1次加水10倍量，第2次加水5倍量，每次煎煮2小时，煎煮过程中，

时收集挥发油，挥发油

β—环糊精包

；

，滤过，滤液浓缩至相对密度为1.20～1.25(80℃)的清膏，加入水蛭等细粉，混匀，低温干燥后，粉碎成细粉，再与冰片和挥发油β—环糊精包埋物配研，过筛，混匀，装入胶囊，即得。

Claims (4)

1.一种治疗中风病及其恢复期后遗症的芪蛭通络胶囊，其特征在于它是由下述重量配比的原料制成的药剂：黄芪300～350份，水蛭100～150份，人参100～150份，麦冬25～40份，五味子50～80份，地龙25～40份，毛冬青300～350份，制首乌150～180份，川芎50～80份，当归50～80份，郁金50～80份，土鳖虫25～40份，丹参50～80份，赤芍50～80份，鸡血藤50～80份，姜黄25～40份，红花25～40份，泽兰25～40份，僵蚕5～8份，全蝎10～16份，天麻10～16份，胆南星10～16份，羌活25～40份，肉桂10～16份，猪牙皂5～8份，冰片10～16份；

芪蛭通络胶囊是通过以下工艺步骤制备所得：1)水蛭、土鳖虫、肉桂、全蝎、僵蚕、胆南星粉碎成细粉，过筛，混匀；2)黄芪、人参、麦冬、五味子、地龙、毛冬青、制首乌、川芎、当归、郁金、丹参、赤芍、鸡血藤、姜黄、红花、泽兰、天麻、羌活、猪牙皂十九味，加5～12倍水煎煮1～3次，每次1～3小时，煎煮过程中，同时收集挥发油，挥发油用β～环糊精包结后备用；合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度为1.20～1.25的清膏，加入步骤1)中所制细粉，混匀，低温干燥后，粉碎成细粉，再与冰片、挥发油β～环糊精包埋物配研，过筛，混匀，制成胶囊剂。

2.根据权利要求1所述的一种治疗中风病及其恢复期后遗症的芪蛭通络胶囊，其特征在于：其中各原料重量配比优选为：

黄芪310～330份，水蛭120～140份，人参120～140份，麦冬30～35份，五味子60～70份，地龙25～35份，毛冬青320～350份，制首乌160～175份，川芎60～70份，当归60～70份，郁金60～70份，土鳖虫30～35份，丹参60～70份，赤芍60～70份，鸡血藤60～70份，姜黄25～35份，红花30～35份，泽兰30～40份，僵蚕5～8份，全蝎12～15份，天麻12～15份，胆南星12～15份，羌活30～35份，肉桂12～15份，猪牙皂6～8份，冰片12～15份。

3.根据权利要求1所述的一种治疗中风病及其恢复期后遗症的芪蛭通络胶囊，其特征在于：原料重量最佳配比为：

黄芪325份，水蛭130份，人参130份，麦冬32.5份，五味子65份，地龙32.5份，毛冬青325份，制首乌162.5份，当归65份，川芎65份，赤芍65份，鸡血藤65份，丹参65份，红花32.5份，泽兰32.5份，土鳖虫32.5份，僵蚕6.5份，郁金65份，姜黄32.5份，全蝎13份，天麻13份，肉桂13份，羌活32.5份，猪牙皂6.5份，胆南星13份，冰片13份。

4.权利要求1所述的治疗中风病及其恢复期后遗症的芪蛭通络胶囊的制备方法，其特征在于：

1)水蛭、土鳖虫、肉桂、全蝎、僵蚕、胆南星粉碎成细粉，过筛，混匀；

2)黄芪、人参、麦冬、五味子、地龙、毛冬青、制首乌、川芎、当归、郁金、丹参、赤芍、鸡血藤、姜黄、红花、泽兰、天麻、羌活、猪牙皂十九味，加5～12倍水煎煮1～3次，每次1～3小时，煎煮过程中，同时收集挥发油，挥发油用β～环糊精包结后备用；合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度为1.20～1.25的清膏，加入步骤1)中所制细粉，混匀，低温干燥后，粉碎成细粉，再与冰片、挥发油β～环糊精包埋物配研，过筛，混匀，制成胶囊剂。