CN101371905A - 一种治疗咽喉疾病的中药含片 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种治疗咽喉疾病的中药含片，其特征在于它是由下述重量份的原料药制成的：广东土牛膝40～50、山芝麻12～20、岗梅20～30、野菊花12～20、水杨梅20～30、淡竹叶12～20、一点红12～20、淀粉20～30、糊精20～30、蔗糖40～60；本发明中药含片原料药组分简单，成分原材料价廉易得，制造工艺简单，具有良好的清热解毒、利咽消肿止痛作用，对咽喉疾病的治疗效果显著且没有副作用。

Description

一种治疗咽喉疾病的中药含片

技术领域

本发明涉及一种治疗咽喉疾病的中药含片。

背景技术

咽喉疾病是一种非常多见的上呼吸感染症，在临床治疗咽喉疾病的用药当中，目前广泛使用抗生素类药物，这类药物虽然见效快，但是抗生素治疗只能抑制或者杀灭咽部细菌，不能使原病变消除，且副作用也较大；目前也有使用中成药治疗咽喉疾病的，如中国专利CN1182595A所公开的“一种治疗慢性咽炎、急性咽喉炎的中成药”是采用桔梗、薄荷冰、冰片、赤芍、白砂糖、葡萄糖粉配制而成，先将前四味药按一定比例混合粉碎研细，再将药粉和葡萄糖粉按比例与溶化的白砂糖混合拌匀，制成中成药制剂；专利号CN1187365A，所公开的清咽口服液及其制备方法，是选用南沙参、石斛、陈皮、玄参、生地、金银花、枳壳、黄芩、麦冬、薄荷、桔梗、甘草共十二味中草药经二次高压水煎、过滤、减压压缩、醇提、煮沸等工序精制而成；专利号CN100998697A所公开的一种治疗咽喉疾病的中药口含片及其制备方法，是由牛黄，板蓝根，诃子，桔梗，猪牙皂，连翘，天花粉，珍珠层粉，广东土牛膝，冰片，山豆根，了哥王，填充剂，环糊精，矫味剂，润滑剂等多种成分制成中药含片。现有技术中用于治疗咽喉疾病的中成药物存在成分种类繁多且某些成分价格相对昂贵和不易得，配制工艺相对复杂，且治疗效果不理想等缺点，故此，治疗咽喉疾病的药物有待于进一步改善。

发明内容

本发明的目的是为了克服上述技术中的不足之处，提供一种配方简单，成分原材料价廉易得，制造工艺简单，具有良好的清热解毒、利咽消肿止痛作用，对咽喉疾病的治疗效果显著且没有副作用的治疗咽喉疾病的中药含片。

为了达到上述目的，本发明采用以下的方案：

本发明的解决方案是基于祖国医学对咽喉疾病发病机理的认识及治疗原则，参考现代药理研究成就，从祖国的医药宝库中，筛选出清热解毒、利咽止痛、清火镇痛、化脓消肿的植物药材，按中医理论组方，提取精华，使其发挥清热解毒、利咽消肿止痛等作用。

本发明一种治疗咽喉疾病的中药含片，其特征在于它是由下述重量组分的原料药制成的：

广东土牛膝40～50、山芝麻12～20、岗梅20～30、野菊花12～20、水杨梅20～30、淡竹叶12～20、一点红12～20、淀粉20～30、糊精20～30、蔗糖40～60。

如上所述的一种治疗咽喉疾病的中药含片，其特征是各原料药的重量比是：

广东土牛膝40～45、山芝麻16～18、岗梅25～30、野菊花16～18、水杨梅25～30、淡竹叶16～18、一点红16～18、淀粉20～25、糊精20～25、蔗糖40～50。

为证明本发明对咽喉疾病的疗效，本发明进行了如下的动物实验和临床试验：

一、本发明中药含片对解热镇痛作用的动物实验

1、药物和试剂

(1)、本发明中药含片(0.92g/ml)，取广东土牛膝、岗梅根、山芝麻、野菊花、水杨梅、淡竹叶、一点红等煎煮两次，第一次煎煮2小时，第二次煎煮1.5小时，合并两次滤液，浓缩至密度为0.92g/ml，即可，由中山中医院制剂室提供，批号：060213。

(2)、阿司匹林，由湖南洞庭药业股份有限公司生产，批号050807，规格50mg/片。

(3)、冰醋酸，由广州化学试剂厂生产，批号：91C301-3，分析纯；

(4)、干酵母30克，安琪酵母股份有限公司生产，产品编号101109。

(5)、液体石蜡。

2、主要仪器

恒温水浴箱、秒表、注射器、热板(不锈钢金属盒)和体温表。

3、实验用动物

昆明种小鼠，体重18—22g/只；SD大鼠，体重180—220g/只，雄性。(均购自广东省医学实验动物中心，合格证号：省科委：2002A024，省医学实验动管会：26-2003A003)。

(一)、本发明中药含片对干酵母所致大鼠发热的解热作用的动物实验

1、实验方法：

(1)、配制酵母悬液：秤取干酵母10g，置于乳钵中，逐渐加入蒸馏水研磨为均匀的悬浆，最后定容为50ml(20％)，此液须临用时配制。

(2)、大鼠的准备：在大鼠于实验室环境下适应时，每日用水银体温表从肛内测体温1次，以使其适应体温测量的操作，并可了解大鼠体温恒定与否。每次测量肛温时均要在体温表的水银端沾少量液体石蜡，以减少对大鼠肛门的摩擦。实验当日每小时测体温一次，连续2次，记录数据，取其平均值以作为其正常的体温。

(3)、分组：取体重在180g--220g之间的大鼠，且体重相差不宜超过30g，选取体温变化不超过0.3℃的大鼠用来实验(体温应在36.5℃-38.0℃之间)，共选取60只，取其中10只做预试，其余50只随机分为五组，①空白对照组；②本发明中药含片低剂量(8.28/kg)对照组；③本发明中药含片中剂量(16.56g/kg)对照组；④本发明中药含片高剂量(33.12g/kg)对照组；⑤阿司匹林阳性对照组(0.2g/kg)。每组10只，并标记。于正式实验前8—10小时要开始禁食，不禁水。

(4)、预试合适酵母剂量：将10只用来做预试的大鼠进行如下预试：3只用作酵母剂量为0.5ml/100g的预试，4只用作酵母剂量为0.6ml/100g的预试，3只用作酵母剂量为0.7ml/100g的预试，摸索出最佳酵母注射剂量是0.6ml/100g，因其升温、降温明显，历时较短，注射后4小时即制成发热动物模型，注射后10小时左右开始降温。

(5)、观察解热效果：给每只大鼠从背部皮下注射20％酵母混悬液10ml/kg，每隔一小时测一次肛温，待体温升高1℃左右时(剔除体温升温变化小于0.8℃)，开始给药，本发明中药含片高、中、低三个剂量组、空白对照(蒸溜水)组、阿司匹林组，灌胃给予等容量0.13ml/100g。于给药后1h、2h、3h、4h各测一次肛温。

(6)、统计学处理结果用x±SD表示，数据采用SPSSV10.0软件包进行分析，用t检验，比较各组间的差异显著性。结果见表一。

表一 各组大鼠对干酵母所致发热的解热作用比较(x±SD，n＝10)

与空白对照组比，*P<0.05，**P<0.01；各剂量组比，^P<0.05，^^P<0.01

实验结果表明：与空白组比本发明中药含片各剂量组均有较好的解热作用(P<0.05)，并且在给药后一至两小时时有较好的量效关系，低剂量组与高剂量组比有显著性差异(P<0.05)，但低剂量在给药后一至两小时时没有阿司匹林解热作用好；高、中剂量组的解热效果始终与阿司匹林相近。

(二)、本发明中药含片对醋酸致小鼠疼痛的抑制作用的动物实验

1、实验方法

(1)、配制0.7％的醋酸生理盐水溶液：用移液管准确吸取100％的冰醋酸0.35ml，加入PH值为7.0—7.2的生理盐水制成50ml溶液。

(2)、分组：取18～22g健康小鼠50只，雌雄各半，随机分为五组，①空白对(蒸溜水)照组；②本发明中药含片低剂量(11.96g/kg)对照组；③本发明中药含片中剂量(23.92g/kg)对照组；④本发明中药含片高剂量(47.84g/kg)对照组；⑤阿司匹林阳性对照组(0.2g/kg)。

(3)、灌药：给试验动物连续灌胃给药4天，每天一次，每次按0.9ml/100g容量灌胃给药。末次给药30min后，给各鼠腹腔均注射新配制的0.7％冰醋酸液(新配)0.1ml/10g。

(4)、观察反应：观察注射醋酸液后20min内的扭体反应(伸展后肢、腹部收缩内凹、臀部抬高)次数。

(5)、统计学处理 比较各组的扭体次数，计算镇痛率。数据采用SPSSV10.0软件包进行分析，用t检验，比较给药组与空白对照组之间的差异显著性。实验结果见表二。

镇痛百分率(％)＝(对照组扭体平均次数-实验组扭体平均次数)/对照组扭体平均次数×100％

表二 各组小鼠扭体次数及镇痛率比较

与空白组比，**P<0.01；给药组间比，^P<0.05；与阿司匹林组比，#P<0.05

实验结果表明本发明中药含片可明显减少由于醋酸所致的小鼠扭体反应次数，各剂量组对醋酸所致小鼠疼痛有显著的镇痛作用，与空白组相比有显著性差异(P<0.01)，并呈现一定的量效关系；高剂量组明显优于低剂量组(P<0.01)，并且优于阿司匹林组(P<0.05)，而低剂量和中剂量组与阿司匹林组镇痛作用相近。从镇痛百分率也可得出同样的结论。

(三)、本发明中药含片对热板致小鼠疼痛的影响作用的动物实验

1、实验方法：

将水浴箱加满水，使热板接触水面，在室温为15--20℃的情况下调节恒温水浴箱的水温在55±0.5℃，预热金属盘10分钟。每次取健康雌性小鼠一只放入金属盘内。记录自放入金属盘内至出现舔后脚所需时间(秒)，作为该鼠的痛阈值。弃舔后足时间小于5秒或30秒内仍不舔足者不用，选出痛阈值在5～30秒的小鼠50只，随机分成5组，每组10只，重新测定其正常痛阈一次，取2次测定的平均值作为该小鼠的基础痛阈值(给药前的痛阈值)。

对以下五个实验组：本发明中药含片①低剂量组(11.96g/kg)、②中剂量组(23.92g/kg)、③高剂量组(47.84g/kg)、④空白对照(蒸馏水)组、⑤阿司匹林组(0.2g/kg)，每次按0.9ml/100g容量灌胃给药，每天一次，连续给药3天。测定末次给药后60min、90min、120min时的痛阈值。以小鼠舔后足反应作为痛阈指标，并剔除发生其他反应的小鼠。为防足部烫伤，设截止时间为60秒，若其在热板上60秒仍无痛觉反应，应立即取出，按60秒计其痛阈值。

2、效果比较：

比较各组各时段的痛阈值，计算用药后痛阈提高的百分率。数据采用SPSSV10.0软件包进行分析，用t检验比较给药组与空白对照组之间痛阈差异的显著性。实验结果见表三。

痛阈提高的百分率(％)＝(用药后平均痛阈值-用药前平均痛阈值)/用药前平均痛阈值×100％

表三 各组小鼠各时段痛阈值的比较(x±SD)

与空白组比，**P<0.01；给药组间比，& P<0.05，&& P<0.01；与阿司匹林组比，# P<0.05，## P<0.01

实验结果表明：由于中药发挥作用较缓，故低剂量组在给药一小时后镇痛作用不明显，但在给药一个半小时至两小时后有明显的镇痛作用(P<0.01)。而中剂量组和高剂量组均一直表现出很好的镇痛作用(P<0.01)。在给药一小时后低、中剂量组的镇痛效果不及阿司匹林，高剂量组一直与阿司匹林的镇痛作用相近，但作用时间比阿司匹林较持久。但随着时间的推移低、中剂量组的镇痛作用越来越接近阿司匹林，且在一定的时间内表现出良好的量效关系。从镇痛百分率也可知该复方土牛膝口含片断有很好的镇痛作用，且镇痛百分率的提高与剂量有明显的相关性。

二、本发明中药含片对抗炎作用实验的动物实验

1、药物和试剂

(1)、本发明中药含片(0.92g/ml)，(取广东土牛膝、岗梅根、山芝麻等煎煮两次，第一次煎煮2小时，第二次煎煮1.5小时，合并两次滤液，浓缩至密度为0.92g/ml，即可。)中山中医院制剂室提供，批号：060213；

(2)、阿司匹林，湖南洞庭药业股份有限公司生产，批号050807，规格50mg/片；

(3)、冰醋酸，广州化学试剂厂生产，批号：91C301-3，分析纯；

(4)、伊文思兰，广州化学试剂厂生产，分析纯，批号1641016；

(5)、10％鸡蛋清生理盐水溶液；

(6)、酚红；

(7)、肥皂水；

(8)、乌来糖，化学纯，上海化学试剂供应公司；

(9)、青霉素G钾盐及硫酸链霉素混合液(每毫升含青霉素800U，链霉素650U)；

(10)、20mg灭菌棉球。

2、实验用动物

昆明种小鼠，体重18—22g/只；SD大鼠，体重180—220g/只，雄性。(均购自广东省医学实验动物中心，合格证号：省科委：2002A024，省医学实验动管会：26-2003A003)。

3、实验仪器

(1)、UV—754紫外可见分光光度计(上海第三分析仪器厂)；(2)、微量吸管；(3)、离心机；(4)、T500型电子天平(常熟市双杰测试仪器厂)；(5)、解剖剪刀；(6)、眼科镊；(7)、平镊；(8)、足跖容积测量装置；(9)、4号针头；(10)小烧杯、(11)电子秤、(12)消毒外科手术器械一套。

(一)、本发明中药含片对醋酸所致小鼠腹腔毛细血管通透性增高的影响的动物实验

1、分组

取体重18～22g的健康小鼠50只，雌雄各半，随机分为五组，分别为①空白对照组(蒸馏水组)；②本发明中药含片低剂量(11.96g/kg)对照组；③本发明中药含片中剂量(23.92g/kg)对照组；④本发明中药含片高剂量(47.84g/kg)对照组；⑤阿司匹林(0.2g/kg)对照组。

2、实验方法

连续灌胃给药4天，每天一次，每次给予等容量0.9ml/100g。于末次给药后30min，尾静注射0.5％伊文思蓝生理盐水溶液0.1ml/10g，随即腹腔注射0.8％冰醋酸生理盐水液0.1ml/10g，20分钟后脱颈椎处死，剪开腹部皮肤肌肉，用6ml生理盐水分数次洗涤腹腔，用吸管吸出洗涤液，合并后加入生理盐水至10ml，3000rpm离心15分钟；取上清液于590nm比色测定吸收度。

3、实验结果

结果用x±SD表示，数据采用SPSSV10.0软件包进行分析，用t检验，比较阿司匹林组、给药组与空白对照组之间吸收度的差异显著性。实验结果见表四。

表四 对醋酸所致小鼠腹腔毛细血管通透性增高的影响(x±SD)

与空白组比，*P<0.05，**P<0.01；各给药组间比，^P<0.05；与阿司匹林组比，# P<0.05

由实验结果表明，本发明中药含片可明显抑制醋酸所致的小鼠腹内炎性物质的渗出，各剂量组均有显著的抑制小鼠腹腔内炎性物质渗出的作用，与空白组相比有显著性差异(P<0.05＝，并呈现较好的量效关系，低中、低高、中高剂量组比较时均有显著性差异(P<0.05＝。且高剂量组明显优于阿司匹林组(P<0.05)，而低剂量和中剂量组与阿司匹林组镇痛作用相近。

(二)、本发明中药含片对蛋清致大鼠足跖肿胀的影响的动物实验

1、分组

选用健康大鼠50只，雄性，随机分为五组，分别为①空白对照组(蒸馏水组)；②本发明中药含片低剂量(8.28g/kg)对照组；③本发明中药含片中剂量(16.56g/kg)对照组；④本发明中药含片高剂量(33.12g/kg)对照组；⑤阿司匹林(0.2g/kg)对照组。

2、实验方法

在每鼠左后足跖正面上端作一清晰横线，利用容积测量装置采用排水法测定鼠爪体积(Vn)，分别测二次，取其平均值，即为该鼠给药前的足跖体积。然后分别给实验组按高、中、低三个剂量连续灌胃给药4天，容量均为0.13ml/100g。于末次给药1小时后，用0.25ml注射器吸取刚用生理盐水配制好的10％蛋清(0.1ml/跖)，用4号针头注入大鼠左后脚跖皮下，然后于注入后1h、2h、3h、4h各测大鼠足跖体积1次(Vt)，计算鼠跖的肿胀度和抑制率。

肿胀度＝致炎后足跖体积—致炎前足跖体积

抑制率(％)＝(对照组平均肿胀度-同时相给药组平均肿胀度)/对照组平均肿胀度×100％

3、实验结果

结果用x±SD表示，数据采用SPSSV10.0软件包进行分析，用t检验，比较同一时相内阿司匹林组、给药组与正常对照组之间的肿胀度和抑制率的差异显著性。实验结果见表五：

表五对蛋清所致大鼠足跖肿胀的影响(x±SD，n＝10)

与空白组比，*P<0.05，**P<0.01；各给药组间比，^P<0.05，^^P<0.01；与阿司匹林组比，# P<0.05；()为抑制率

由实验结果表明，本发明中药含片可明显抑制鸡蛋清所致的大鼠足跖肿胀，与空白组相比有显著差异性(P<0.01)；并呈现较好的量效关系，在给药1小时至2小时时低中、低高剂量组相比均有显著性差异(P<0.05)。但在给药1小时后低剂量组没有阿司匹林组(P<0.05)效果好，这可能与中药的显效特点有关，而在随后的时间内各给药组与阿司匹林组的抑制作用相近。但从肿胀抑制率来看，高剂量组明显高于阿司匹林组。

(三)、本发明中药含片对棉球所致大鼠肉芽肿增生的影响的动物实验

1、实验方法

选用体重180g～220g左右大鼠50只，雄性。腹腔注射25％乌来糖(0.45ml/100g)进行麻醉后，在每只大鼠的左右腹股沟处先用碘酒消毒，后用75％酒精棉球脱碘后，各切开皮肤约1cm长的纵切口，用眼科镊子将两个灭菌棉球(每个棉球20mg，高压灭菌，各加入氨苄青霉素每个1mg/0.1ml，50℃烘箱烤干)分别植入大鼠两侧腹股沟皮下，随即缝合皮肤，术后随机分为五组。从手术当天开始对以下五组：①空白对照组(蒸馏水组)；②本发明中药含片低剂量(8.28g/kg)对照组；③本发明中药含片中剂量(16.56g/kg)对照组；④本发明中药含片高剂量(33.12g/kg)对照组；⑤阿司匹林对照组给予阿司匹林(0.2g/kg)，灌胃给药，每天一次，连续9天，药容量为0.13ml/100g，第10天将大鼠颈椎脱臼处死，将棉球连同周围结缔组织一起取出，剔除脂肪组织，在70℃烘箱中放置12h后称重，减去原棉球重量即为肉芽肿净重。统计时剔除切口处发炎者。以肉芽肿及其系数，用t检验，比较阿司匹林组、给药组与正常对照组对肉芽肿抑制的差异显著性。

棉球肉芽抑制率(％)＝(正常对照组棉球肉芽平均净重—给药组棉球肉芽平均净重)/正常对照组棉球肉芽平均净重×100％

肉芽肿系数＝棉球肉芽肿净重(mg)/体重(100g)

2、实验结果

结果用x±SD表示，数据采用SPSSV10.0软件包进行分析，用t检验，比较同一时相内阿司匹林组、给药组与正常对照组之间的肿胀度和抑制率的差异显著性。实验结果见表六：

表六对棉球所致大鼠肉芽增生的影响(x±SD，)

与空白组比，*P<0.05，**P<0.01；各给药组间比，^P<0.05

实验结果表明：以棉球肉芽净重为指标时，与空白组比各给药组均可抑制棉球肉芽肿的生长(P<0.05＝；与阿司匹林组比较二者无显著性差异(P>0.05)；本发明中药含片各剂量组之间比较时可知低剂量组明显弱于高剂量组(P<0.05＝。但以棉球肉芽肿系数为评价指标时，与正常组比低剂量组抑制棉球肉芽肿不明显，中、高剂量组对抑制小鼠肉芽肿有较显著的抑制作用(P<0.05＝，这说明棉球肉芽肿系数排除了因大鼠体重相差较大引起的差异，使实验结果更具有可比性；中、高剂量组与阿司匹林组无显著性差异(P>0.05)。无论按棉球肉芽肿净重还是按棉球肉芽肿系数统计，二者统计结果基本一致，本发明中药含片有抑制棉球所致的大鼠肉芽肿的作用，但从抑制率看，本发明中药含片对棉球肉芽肿的抑制作用稍弱或接近于阿司匹林。

三、本发明中药含片对抗病毒作用的动物实验

1、药物和试剂

①、本发明中药含片(0.92g/ml，取广东土牛膝、岗梅根、山芝麻等煎煮两次，第一次煎煮2小时，第二次煎煮1.5小时，合并两次滤液，浓缩至密度为0.92g/ml，即可。)中山中医院制剂室提供，批号：060213；实验时口含片稀释为1：128～1：1024四个稀释度用于实验。

②、病毒唑，湖北滨湖制药厂生产，批号：970512，体外时用量为180ug/ml；体内时小鼠按临床等效剂量(0.07g/kg/d)灌胃给药。

2、病毒

①柯萨奇B族病4型(CoxB₄)；

②副流感病毒(HVJ)；

③呼吸道合胞病毒(RSV)；

④单纯疱疹病毒(HSV-I)；

以上各病毒分别购自中国预防医学科学院病毒研究所及儿科研究所。

⑤流感病毒亚甲型鼠肺适应株(FM1)，购自中国预防医学科学院病毒研究所。

3、细胞

人喉癌传代细胞Hep-2株，购自中国预防医学科学院病毒研究所。

4、细胞培养液

(1)含10％小牛血清、

(2)0.29mg谷氨酰胺/ml、

(3)100u/ml青、链霉素的Eagle’s MEM(日本日水制药株式会社出品)；

5、细胞维持液

除所含小牛血清为2％外，其他含量均同培养液。

6、主要仪器

①CO₂培养箱(日本Yamato松株式会社产品)。

②倒置显维镜，日本Olympus产品。

7、动物

ICR小鼠，雌雄兼用。体重用14±1g，由北京维通利华实验动物技术有限公司提供，许可证编号：SCXK(京)2002-0003。

(一)、本发明中药含片的体外抗病毒的动物实验

1、药物对Hep-2培养细胞的毒性试验

实验前将本发明中药含片用Eagle’s培养液作1:2～1:512倍比稀释后，加到已长成单层的Hep-2细胞培养板中，100ul/孔，每个稀释度药液做4个复孔，同时设正常细胞对照。将培养板置37℃　5％　CO₂培养箱中培养四天，置显微镜下观察细胞生长情况，确定细胞不出现明显退变的最低稀释倍数(最大浓度)，实验时顺延做到最小有效浓度(即最大稀释倍数)。按Reed-Muench法计算50％毒性浓度(TC₅₀)和最大无毒浓度(TC₀)。结果见表七：

表七　本发明中药含片对培养细胞的TC₀　TC₅₀(ul/ml)

2、对病毒致细胞病变作用的影响

取已长成单层细胞的培养板，倒掉培养液，接种100TCID₅₀的不同病毒液50ul，置37℃　5％　CO₂培养箱中吸附1小时后，倒掉病毒液，用不含小牛血清的Eagle’s维持液洗细胞面2次后，加入相应稀释度的药液100ul/孔。同时设病毒对照、阳性对照药及正常细胞对照。置37℃5％CO₂培养箱中培养，每日倒置显微镜下观察细胞病变，当病毒对照组细胞病变为++++时记录实验结果。细胞病变按六级标准判断，并按Reed-Muench计算50％有效浓度(IC₅₀)和治疗指数(TI)。

注：—：细胞生长正常，无病变出现；

　  ±：细胞病变少于整个单层的10％；

    1：细胞病变约占整个单层细胞的25％以下；

    2：细胞病变约占整个单层细胞的50％以下；

    3：细胞病变约占整个单层细胞的75％以下；

    4：细胞病变约占整个单层细胞的75％以上。

治疗指数(TI)＝TC₅₀/IC₅₀

(二)、本发明中药含片对流感病毒致小鼠死亡的保护作用的动物实验

1、剂量设计

人临床用量为60ml/60kg/d，小鼠体内实验分别采用20ml、10ml、5ml/kg/d三个剂量组(分别相当与人临床用量的2倍、等倍和1/2倍)。

2、病毒引起小鼠死亡最小毒力的测定将病毒用生理盐水稀释成0.5-4LD₅₀的不同病毒液，取小鼠50只，每个稀释度10只，0.05ml/只滴鼻感染。观察动物的死亡情况，取感染后15天内动物死亡率在90％以上的浓度，为实验时的感染量。实验结果显示：2LD50感染时，小鼠的死亡率为90％，故将其定为实验时的感染量。

3、观察对动物死亡保护情况

(1)、分组

取小鼠100只，按体重随机分成5组。分别为①病毒感染对照组本；②病毒唑阳性对照组；③发明中药含片高剂量组；④本发明中药含片中剂量组⑤本发明中药含片低剂量组。

(2)、实验方法

各给药组灌胃给药，每天1次，每次0.2ml/10g体重，连续7天，病毒对照组在同等条件下给予蒸馏水。给药第二天各组小鼠用乙醚轻度麻醉后，以2个LD₅₀流感病毒液滴鼻感染，每只0.05ml。记录感染后小鼠的死亡数，计算死亡率、死亡保护率及平均存活天数、生命延长率。

死亡率％＝死亡动物数/动物总数×100％

死亡保护率％＝(对照组死亡率-实验组死亡率)/对照组死亡率×100％

(3)、实验结果

①、对病毒致细胞病变作用的影响

本发明中药含片在体外对CoxB₄、、RSV、病毒的致细胞病变作用有明显抑制作用，其IC₅₀分别为2.0、2.8ul口含片/ml，TI分别为5.6和4。对HSV-1、副流感-1型病毒的致细胞病变有一定的抑制作用。其IC₅₀分别为4.0、5.0ul口含片/ml，TI分别为2.8和2.24(见表八)。

表八 本发明中药含片体外抗病毒实验

②、本发明中药含片对流感病毒致小鼠死亡的保护作用

小鼠感染病毒15天内，本发明中药含片5ml/kg/d剂量组动物的死亡率为55％；死亡保护率分别为38.39％，与感染对照组相比有显著差异(P<0.05)，表示本发明中药含片在此剂量时对流感病毒感染致小鼠死亡有显著的保护作用(见表九)。

表九 本发明中药含片对流感病毒致小鼠死亡的保护作用

与对照组比较：**P<0.01*P<0.05

本发明中药含片10ml/kg/d、5ml/kg/d二个剂量组小鼠的存活天数较感染组明显延长，与对照组比较有显著性差异。生命延长率分别为17.67％和22.22％。表示本发明中药含片在此剂量时对流感病毒感染致小鼠死亡有明显的保护作用(见表十)。

表十 本发明中药含片对流感病毒致小鼠死亡的保护作用

与对照组比较：**P<0.01*P<0.05

四、本发明中药含片治疗小儿急性咽炎、扁桃体炎的临床试验

1、病例选择

选取符合西医诊断标准，中医诊断辨证为风热外侵或肺胃热盛者。发病在3日之内的小儿急性咽炎、扁桃体炎患者120例，随机分为二组：

①治疗组：60例，男、女各30例，年龄1岁～12岁，平均年龄5.78岁，其中急性咽炎30例，平均病程1.66天；急性扁桃体炎30例，平均病程1.92天.

②对照组：60例，男、女各30例，年龄1～12岁，平均年龄5.81岁，其中急性咽炎30例，平均病程1.68天；急性扁桃体炎30例，平均病程1.93天。

2、主要症状体征

①急性咽炎：咽痛、咽干、灼热、吞咽疼痛、尿黄、大便干结，甚至发热、头痛、四肢酸痛。查：咽部粘膜急性充血、肿胀，腭弓、悬雍垂水肿，咽后壁淋巴滤泡及咽侧索红肿，甚至咽后壁淋巴出现黄色点状渗出物，颌下淋巴结肿大有压痛。

②急性扁桃体炎：咽痛、咽干、灼热、吞咽或咳嗽时疼痛加重，尿黄、大便干结，部分患者有发热、头痛、四肢酸痛。查：咽部粘膜急性弥漫性充血，以扁桃体及两腭弓最严重，腭扁桃体肿大，表面可见黄白色脓点，咽后壁淋巴滤泡及咽侧索红肿，甚至颌下淋巴结肿大有压痛。

3、治疗及观察方法

(1)、给药方法

①治疗组：每次服本发明中药含片5~10g，每日3次，3日为一疗程。

②对照组：患者服用头孢克洛口含片每次0.125g(三岁以下儿童酌减)，每日3次，3日为一疗程。

两组在治疗期间停用其他药物。

(2)观察指标

治疗后第3天、第6天复查，记录症状体征改变情况。

治疗期间记录两组不良反应。

4、治疗结果(如表十一和表十二所示)

表十一急性咽炎两组疗效比较((n，％)

表十一示：两组疗效比较差异有统计学意义(P<0.05)。提示本发明中药口含片治疗急性咽炎疗效明显优于对照组。

表十二急性扁桃体炎两组疗效比较((n，％)

表十二示：两组疗效比较差异有统计学意义(P<0.05)。提示本中药含片治疗急性扁桃体炎疗效明显优于对照组。

不良反应：应用复方土牛膝口含片治疗期间，全部病例未发现不良反应。

综上所述，本发明一种治疗咽喉疾病的中药含片有以下优点：

(一)、本发明一种治疗咽喉疾病的中药含片，采用清热解毒，消肿利咽的广东土牛膝，辅以清热解毒、利咽消肿、散瘀止痛的岗梅根和水杨梅根，同时佐以清热凉血、解毒的一点红，清热躁湿解毒山芝麻，，佐以清热除烦、疏风散热的淡竹叶和菊花，诸药合用，共奏良好的清热解毒、利咽消肿止痛作用，对咽喉疾病的治疗效果显著。

(二)本发明中药含片的配方简单，成分原材料价廉易得，制造工艺简单，从而降低了成本

(三)、本发明中药含片具有良好的清热解毒、利咽消肿止痛作用，对咽喉疾病的治疗效果显著且没有副作用。

(四)本发明中药含片加入最佳配比的辅料麦芽糊精、淀粉、蔗糖，使本发明中药含片入口细腻柔顺、无糊口、无颗粒感具有口感好的优点。

具体实施方式

实施例1

按下述的配比称取原料药：

广东土牛膝400克、山芝麻200克、岗梅300克、野菊花200克、水杨梅300克、淡竹叶200克、一点红200克。

将以上七味药材，加水煎煮二次：第一次煎煮2小时，第二次煎煮1.5小时，合并两次滤液进行过滤，滤液浓缩至适量，加等量(等体积)乙醇静置24小时，取上清液，浓缩至80℃时相对密度为1.20的清膏，备用，称取原料药：淀粉200克、糊精200克、蔗糖400克并与上述的清膏充分混合均匀，待干燥后用粉碎机粉碎，喷入适量冰片和0.5％薄荷脑的乙醇液，立即压片，即得本发明中药含片。

实施例2

按下述的配比称取原料药：

广东土牛膝500克、山芝麻120克、岗梅200克、野菊花120克、水杨梅200克、淡竹叶120克、一点红120克。

将以上七味药材，加水煎煮二次：第一次煎煮2小时，第二次煎煮1.5小时，合并两次滤液进行过滤，滤液浓缩至适量，加等量(等体积)乙醇静置24小时，取上清液，浓缩至80℃时相对密度为1.20的清膏，备用，称取原料药：淀粉300克、糊精300克、蔗糖600克并与上述的清膏充分混合均匀，待干燥后用粉碎机粉碎，喷入适量冰片和0.5％薄荷脑的乙醇液，立即压片，即得本发明中药含片。

实施例3

按下述的配比称取原料药：

广东土牛膝450克、山芝麻180克、岗梅250克、野菊花180克、水杨梅250克、淡竹叶180克、一点红180克。

将以上七味药材，加水煎煮二次：第一次煎煮2小时，第二次煎煮1.5小时，合并两次滤液进行过滤，滤液浓缩至适量，加等量(等体积)乙醇静置24小时，取上清液，浓缩至80℃时相对密度为1.20的清膏，备用，称取原料药：淀粉180克、糊精180克、蔗糖360克并与上述的清膏充分混合均匀，待干燥后用粉碎机粉碎，喷入适量冰片和0.5％薄荷脑的乙醇液，立即压片，即得本发明中药含片。

本发明按照上述配比和方法制造的中药含片，具有清热解毒、利咽消肿止痛作用，对咽喉疾病的治疗效果显著且没有副作用。

Claims (2)

1.一种治疗咽喉疾病的中药含片，其特征在于其特征在于它是由下述重量组分的原料药制成的：

广东土牛膝40～50、山芝麻12～20、岗梅20～30、野菊花12～20、水杨梅20～30、淡竹叶12～20、一点红12～20、淀粉20～30、糊精20～30、蔗糖40～60。

2.根据权利要求1所述的一种治疗咽喉疾病的中药含片，其特征是各原料药的重量比是：

广东土牛膝40～45、山芝麻16～18、岗梅25～30、野菊花16～18、水杨梅25～30、淡竹叶16～18、一点红16～18、淀粉20～25、糊精20～25、蔗糖40～50。