CN101365699A - 吡啶并(3,2-d)嘧啶和可用于医疗的药物组合物 - Google Patents

Abstract

本发明涉及拥有出乎意料的药物性能的取代的吡啶并(3，2－d)嘧啶衍生物、其药学上可接受的盐、N－氧化物、溶剂合物、前药和对映体，特别地，它们是高效免疫抑制剂，可用在移植排斥治疗和/或在特定炎症的治疗中。这些衍生物也可用于预防或治疗心血管病症、中枢神经系统紊乱、肿瘤坏死因子－α相关病症、病毒疾病(包括丙型肝炎)、勃起机能障碍和细胞增殖紊乱。

Description

吡啶并(3，2-D)嘧啶和可用于医疗的药物组合物

技术领域

本发明涉及一类新颖的吡啶并(3，2-d)嘧啶衍生物和它们的制备方法，还涉及包含一种或多种所述吡啶并(3，2-d)嘧啶衍生物以及一种或多种药学上可接受的赋形剂的药物组合物。本发明进一步涉及所述新颖吡啶并(3，2-d)嘧啶衍生物作为生物活性成分，更准确地说作为在病症和病理状况，比如—然而并非限于—免疫及自身免疫障碍、器官及细胞移植排斥、细胞增殖失调、心血管病症、中枢神经系统失调和病毒疾病治疗中的药物。

背景技术

大量的吡啶并(3，2-d)嘧啶衍生物是本技术领域中已知的。例如，在2、4和6位上有各种各样取代基的吡啶并(3，2-d)嘧啶衍生物(使用吡啶并(3，2-d)嘧啶部分的标准原子编号)已知是具有生物活性的，比如叶酸的竞争性抑制作用、血小板聚集和粘附抑制作用、抗肿瘤活性、二氢叶酸还原酶和胸苷酸合酶抑制作用，例如参见美国专利2,924,599、美国专利3,939,268、美国专利4,460,591、美国专利5,167,963和美国专利5,508,281。

例如，在2、4、6和7位上有各种各样取代基的吡啶并(3，2-d)嘧啶衍生物(使用吡啶并(3，2-d)嘧啶部分的标准原子编号)还可从美国专利5521190、美国专利申请公开2002/0049207、美国专利申请公开2003/0186987、美国专利申请公开2003/0199526和美国专利申请公开2004/0039000、美国专利申请公开2004/0106616、美国专利6713484、美国专利6730682和美国专利6723726了解。它们中有一些显示出作为抗病毒剂、抗癌剂、表皮生长因子抑制剂、GSK-3蛋白激酶抑制剂等等的活性。

美国专利5654307揭示了在4位用单芳基氨基或苄基氨基取代、且在6位和7位用各自独立地选自低级烷基、氨基、低级烷氧基、单-或二烷基氨基、卤素和羟基的取代基取代的吡啶并(3，2-d)嘧啶衍生物。WO01/083456揭示了4位用吗啉基取代、在2位用羟苯基或吗啉基乙氧基苯基取代的吡啶并(3，2-d)嘧啶衍生物，它们具有PI3K和癌症抑制活性。美国专利6476031一般地揭示了取代的喹唑啉衍生物，包括(在反应方案5中)一系列的在4位上用羟基、氯、或者芳基取代的吡啶并(3，2-d)嘧啶衍生物，杂芳基(包括吡啶基、嘧啶基、吲哚基、苯并咪唑基、苯并三唑基、异喹啉基、喹啉基、苯并噻唑基、苯并呋喃基、噻吩基、呋喃基、吡咯基、噻唑基、噁唑基、咪唑基)，环脂基或杂环脂基可任选地以NH之类的连接物从吡啶并(3，2-d)嘧啶环隔开。WO02/22602和WO02/22607揭示了吡唑和三唑化合物，包括2-(1-三氟甲基苯基)-4-氟苯并吡唑基-吡啶并(3，2-d)嘧啶和2-(1-三氟甲基苯基)-4-甲基三唑基-吡啶并(3，2-d)嘧啶，可用作蛋白激酶抑制剂。WO03/062209揭示了在7位用芳基或或杂芳基取代、在4位用单芳基氨基或单杂芳基氨基取代、且可进一步在2和/或6位取代的吡啶并(3，2-d)嘧啶衍生物，其可用作辣椒素受体调节剂。然而，这些文件中没有一个教导或者提示了具有本发明取代形式的吡啶并(3，2-d)嘧啶衍生物。

然而，在本技术领域中始终梦寐以求的是特异性、治疗活性高的化合物，比如—但不限于—用于治疗免疫和自身免疫障碍、器官和细胞移植排斥、细胞增殖失调、心血管病症、中枢神经系统紊乱、过敏症和病毒疾病的药物。特别地，本技术领域中需要提供小剂量就有效的免疫抑制化合物、抗肿瘤药和抗病毒药，以便替代现有的具有明显副作用的药物，并且减少治疗费用。

目前使用的免疫抑制药物包括抗增殖剂，比如氨甲喋呤(一种在美国专利2512572中揭示的2，4-二氨基吡啶并(3，2-d)嘧啶衍生物)、咪唑硫嘌呤(azathioprine)、和环磷酰胺。因为这些药影响有丝分裂和细胞分裂，所以它们对正常细胞如骨髓细胞和胃肠道内壁有严重的毒性效应，翻转率(turn-over rate)高。因此，骨髓抑制和肝损伤是这些抗增殖药的常见副作用。

用于诱导免疫抑制作用的抗炎化合物包括肾上腺皮质类固醇类，如地塞米松和泼尼松龙。使用这些化合物所观察到的常见副作用是频繁的感染、异常代谢、高血压、和糖尿病。

目前用于防止淋巴细胞活化和随后产生的增殖作用的其它免疫抑制化合物包括环孢菌素、他克莫司和雷怕霉素。环孢菌素及其相关化合物是最常用的免疫抑制药之一。环孢菌素通常被用来防止或者治疗在肾、肝、心脏、胰腺、骨髓、和心-肺移植中的器官排斥，以及用来治疗自身免疫疾病和炎症，例如节段性回肠炎(Crohn’s disease)、再生障碍性贫血、多发性硬化、重症肌无力、眼色素层炎、胆汁性肝硬变、等等。然而，环孢菌素的缺陷是治疗剂量窗口小，包括肾毒性、肝毒性、高血压、多毛症、癌症、和神经毒的毒性效应严重。

此外，具有免疫抑制性能的单克隆抗体，比如OKT3，已被用来防止和/或治疗移植排斥。将这样的单克隆抗体引入病人体内，如同引入许多生物材料一样，会引起若干副作用，比如呼吸困难。对于许多危及生命的疾病，器官移植被认为是一种标准疗法，而且在很多情形中，是死亡之外的唯一选择。对在移植物上的外来细胞表面抗原的免疫应答，由主要组织相容性配合物(major histo-compatibility，以下简称为MHC)编码并存在于所有细胞上，一般会使器官和组织移植失败，除非移植细胞是来自相容的供体，而且正常的免疫应答得到抑制。除同卵双生之外，最好的相容性，因而亦即长期植入率，是利用MHC等同的兄弟供体或MHC等同的非亲属尸体供体来实现的。然而，这样的完美匹配是难以达到的。此外，随着对供体器官需求的增加，目前移植器官越来越短缺。因此，异种移植成为了人们深入细致的研究的一个领域，但是在受者机体内的排斥方面面临许多障碍。

对器官同种异体移植的宿主反应涉及识别外来抗原并由外来抗原活化的T淋巴细胞和B淋巴细胞以及巨噬细胞或者树状细胞之间的复杂多样的细胞间相互作用。对于T细胞增殖，共刺激因子(主要是细胞因子(cytokine))和由活化的副卫细胞(accessory cell)比如巨噬细胞或树状细胞产生的特异性细胞-细胞相互作用是T-细胞增殖必不可少的。这些巨噬细胞和树状细胞或者直接通过特异粘合蛋白质附着于T细胞，或者分泌刺激T细胞的细胞因子，比如IL-12和IL-15。副卫细胞衍生的共刺激信号在T细胞中刺激白细胞介素-2(IL-2)基因转录的活化以及高亲合力IL-2受体的表达。IL-2在抗原刺激下由T淋巴细胞分泌，是正常免疫应答所必需的。IL-2刺激淋巴样细胞增殖，并且通过结合至IL-2特异细胞表面受体(IL-2R)而分化。IL-2还启动细胞毒性T细胞的辅助细胞T细胞活化，并刺激干扰素-γ的分泌，后者进而激活巨噬细胞的细胞破坏性。此外，IFN-γ和IL-4也是在移植器官中MHC类IL表达的重要激活子，由此因增强移植器官的免疫原性而进一步扩大排斥级联。T细胞介导的响应的现行模型认为T细胞主要由树状细胞在次级淋巴器官的T细胞区中致敏。最初的交互作用要求在抗原呈递细胞(以下简称为APC)上的抗原负载MHC分子与T细胞受体/T细胞上CD3配合物之间的细胞—细胞接触。TCR/CD3配合物衔接在CD4T细胞上诱发CD154表达，进而通过CD 40衔接激活APC，导致抗原呈递改善。这部分地是由CD80和CD86在APC上表达的上调引起的，二者都是T-细胞上重要的CD 28共刺激分子的配位体。然而，CD40的衔接也导致MHC-抗原配合物表面表达的延长、4-1BB和OX-40配位体的表达(激活T-细胞上表达的有效共刺激分子)。此外，CD40的衔接导致各种细胞因子(例如，IL-12、IL-15、肿瘤坏死因子-α、IL-1、IL-6、和IL-8)以及化学增活素的分泌，它们都对APC和T-细胞活化和成熟有很大影响。自身免疫疾病如1型糖尿病的发育中涉及类似的机制。在人和非肥大性糖尿病鼠中，胰岛素依赖性糖尿病源随着年龄的增长而增强的对胰岛素产生胰腺β细胞的自发性T-细胞依赖性自身免疫破坏。在此过程之前，先是主要由T淋巴细胞组成的单核细胞对胰岛的渗透(胰岛炎)。自身攻击性T-细胞和抑制基因型免疫现象之间的微妙平衡确定了自身免疫性的表达是否限于胰岛炎。以T-细胞为靶标的治疗策略已经在防止自身免疫病的发展方面取得成功。这些策略包括初生儿胸腺摘除术、环孢菌素给药、和输注抗全T细胞单克隆抗体、抗CD4单克隆抗体、或抗CD25(IL-2R)单克隆抗体。所有排斥预防和自身免疫性逆转策略的目的是要抑制病人对抗原性组织或药剂的免疫应答，使发病率和死亡率最低。因此，许多药物因其免疫抑制性能目前得到了应用或处于研究之中。如上所述，使用最普遍的免疫抑制素是环孢菌素，然而它们有许多的副作用。因此，由于在免疫抑制方面有效而毒性分布低、副作用可控的药剂的选择相对较少，在本技术领域中需要鉴别其他的免疫抑制剂，而且需要用作神经钙蛋白抑制补体的药剂。

癌细胞转移是大多数实体瘤中临床发病率和死亡率的主要根源。癌细胞转移可能是由于肿瘤细胞进入了淋巴管或血管。侵入淋巴管的结果是转移至局部引流的淋巴结。从淋巴结开始，例如黑素瘤细胞往往转移至肺、肝、和脑。对于若干种实体瘤，包括黑素瘤在内，淋巴结转移的存在与否是预报病人存活的最佳指标。现今，据我们所知，没有任何治疗方案能够防止或者有效降低转移。因此，本技术领域中需要具有抗转移效果效果的化合物，用于对癌症病人进行适当的治疗。

脓毒性休克是重病监护室中的主要死亡原因(美利坚合众国每年估计约150,000例死亡，尽管有静脉抗菌素治疗和支持性护理)，而目前对此几无有效治疗。有严重脓毒症的病人常常经历体内包括循环系统在内的各种系统的衰竭以及肾衰竭、出血和凝固。脂多糖(以下简称为LPS)是格兰氏阴性脓毒症-最常见的脓毒症—的主要介质，诱导产生完整系列的巨噬细胞衍生的细胞因子(例如TNF-α、IL-1、IL-6、IL-12、伽玛干扰素(以下称IFN-γ)、等等)。这些细胞因子可诱导其它细胞(例如T细胞、NK细胞)也产生细胞因子(例如IFN-γ)。除此之外，其它巨噬细胞产物(例如一氧化氮，以下简称为NO)在中毒性休克的致病原因中也发挥着某种作用。这些物质(例如NO)可能直接由由细菌引起的交互作用诱发或者间接地经过致炎细胞因子的作用诱发。LPS结合于血清蛋白LPB，如此形成的LPS-LPB配合物可由单核吞噬细胞上的CD14钟似(toll-like)受体4(以下简称为TIR₄)配合物识别。TlR₄是信号转导单元，其活化导致诸如TNF-α、IL-1α、IL-1β和IL-6之类介质的释放。这些细胞因子对于休克的致病原因是重要的。它们的用药产生脓毒性休克的临诊症状，它们的阻断部分地防止LPS-诱发的致死性休克。

现行的用于治疗脓毒性休克的治疗策略针对的是LPS(例如LPS的抗体或LBP-34-23)或者是由LPS诱发的细胞因子(例如肿瘤坏死因子抗体)或者是LPS的受体(例如CD14)。不幸的是，这些途径的最初的临床资料是非常令人失望的，表明中毒性休克的致病原因中所涉及的受体和介体过多。例如，鞭毛蛋白似乎是在格兰氏阴性沙门氏菌休克综合症中发挥作用而且无法由专门针对LPS的治疗策略预防或治疗的另一毒素。

用TNF-α阻断抗体(比如IL-1受体拮抗剂或者PAF受体拮抗剂)在人身上进行的临床试验尚未成功，下调炎症法(例如利用泼尼松龙)或者阻挡内毒素法也一样。这些产品必须是在发病后非常早的时候给药，这在大多数情形中是不可能的。

目前经卫生当局批准的用于治疗患有最严重的脓毒病(包括脓毒性休克)的成年病人的唯一药物，是一种天然人体蛋白质的遗传工程形式，激活蛋白质C，称作Xigris或者drotecogin-α，其仅仅显示出中等效力。此外，因为激活蛋白质C对血液凝固有干涉作用，与相关联的最严重的副作用是出血，包括引起中风的出血。因而

对于有活动性内出血的病人、或者那些因为某些医疗状态包括新近的中风、新近的头部或脊椎手术或严重的的部外伤等很容易出血的病人是禁忌的。因为用来治疗伴随着潜在的严重危险，用

治疗的利益和危险不可不因人而异地慎重权衡。

因此，在本技术领域中激切需要新的药物，或者单独使用，或者与目前已有的治疗方法组合使用，用于治疗由严重的感染所引起的最严重的危及生命的疾病，例如脓毒性休克。

TNF-α一般被认为在哺乳动物对细菌感染的响应中是关键的介质。它是一种强的致炎剂，将影响几乎任何的器官系统的功能，或者直接地，或者通过诱导生成其它的细胞因子，如IL-1或者前列腺素。TNF-α也是一种有效的抗肿瘤药剂。人如果少量地给药，它引起发烧、头痛、厌食、肌肉疼痛、低血压、毛细血管漏综合症、脂类分解作用增速以及骨骼肌蛋白质降解(包括恶病质)。因其严重的副作用，它在癌症治疗中的应用因此受到极大限制。

TNF-α是一种要由活化的巨噬细胞场所的细胞因子，它对转化细胞发挥体外细胞毒素作用，在动物模型中有体内抗肿瘤活性。然而，尽管肿瘤坏死因子-α被用于癌症病人，尤其是治疗黑素瘤和肉瘤，但妨碍其应用的主要障碍是毒性。的确，TNF-α诱发休克类症状，比如肠溶胀和损伤、肝细胞坏死、炎症性细胞因子比如IL-1或IL-6的增强释放、以及低血压，低血压的原因大概是由于释放出了血管扩张的诱导剂，比如一氧化氮及其他致炎细胞因子。心血管毒性通常对剂量限制性的。收缩压在60毫米汞柱以下时，低血压会是严重的问题。在用TNF-α治疗后，呼吸受损是常见的，可能会要求机械式呼吸。在这类治疗中，上消化道和下消化道症状也是常见的。恶心和呕吐令人痛苦，在有些情况下是剂量限制性的。往往会观察到水泻。用TNF-α治疗还会出现神经后遗症。

因此，为了治疗癌症病人，非常期望有抑制TNF-α的毒性效应而又不抑制TNF-α抗肿瘤效果的化合物。目前，针对肝、肺、肾和胰腺等器官的癌症，正在开发几种涉及TNF-α的临床试验，试验的基础是包括以下步骤的程序：分离器官、将肿瘤坏死因子-α注射入该分离的器官、以及治疗后器官的再灌注。然而，甚至对于分离器官的灌注而言，部分TNF-α通常逃脱至总的血液循环中，导致约10％的如此治疗的病人死亡。用这种程序治疗的许多病人也要求重病监护室援救，以便应对TNF-α治疗的毒性副作用。

在分离的器官灌注模型中，TNF-α与烷基化药物的综合治疗受到极大关注。TNF-α目前成功地用于癌症病人的分离肢体灌注，与美法仑和伽玛干扰素结合用于黑素瘤、肉瘤和恶性肿瘤。

胃肠粘膜对化疗药物很敏感。由化疗所引起的粘膜炎通常在治疗开始后迅速发生，胃肠道出现炎症和溃烂，导致腹泻。严重的，可能危及生命的腹泻要求中断化疗，并随后降低治疗剂的剂量。口腔常常是癌症治疗的严重副作用的所在，对病人的生活质量产生不利影响并影响其承受治疗的能力。这些副作用既可因放射疗法引起，也会因化疗引起。TNF-α和IL-1的血清和粘膜水平之间的关系与非血液毒性相关，包括粘膜炎。在单次高剂量辐射后出现的辐射损伤包括细胞凋亡以及辐射坏死。甚至在辐射过程中用屏障防护的正常组织可能会受到相当程度的损伤。研究发现，在实验动物模型中，在通常用于治疗各种各样恶性肿瘤的单次高剂量辐射后的辐射损伤由辐射坏死和细胞凋亡组成，与TNF-α和TGF-β1的表达有关。

辐射会在癌症病人中诱发移值物抗宿主疾病(以下简称GVHD)。这种疾病特别发生在作为癌症比如白血病或者淋巴瘤的治疗接受同种骨髓移植的病人身上，导致约25％的相关病人死亡。在骨髓移植以前，例如白血病病人接受全身或者全淋巴系统辐射以抑制他们的免疫系统。然而，这样的辐射不仅诱发坏死而且诱发致炎细胞因子的释放，主要是TNF-α、IL-1和IL-6，它们进而诱发直接的宿主组织炎症和供体细胞对宿主抗原的活化，导致移值物抗宿主疾病(GVHD)。

顺铂是一种有效的化疗剂，可用于治疗各式各样的小儿和成人恶性肿瘤，包括睾丸癌、生殖细胞癌、头部和颈部癌(宫颈癌)、膀胱癌和肺癌。剂量依赖性和累积性肾毒性是顺铂的主要副作用，有时要求减少剂量或者停止治疗。顺铂的其它副作用包括肾损伤、生育力丧失、发育中婴儿的有害影响、造成白血细胞数下降的暂时性骨髓功能下降、贫血症、造成出血的血小板下降、食欲不振、肢体麻木或麻刺感、味觉丧失、过敏反应、和听觉障碍(难以听到某些高音调声响、经历耳鸣)。高剂量地使用顺铂时，视力模糊也是一种副作用。研究表明，TNF-α是一系列致炎化学增活素和由顺铂在肾中激活的细胞因子中的关键因素。阻断肿瘤坏死因子-α的作用将防止这种细胞因子系列的活化，并且将产生对顺铂肾毒性的防护。因此，为了治疗癌症，非常期望有抑制顺铂的毒性效应而又不抑制顺铂抗肿瘤效果的化合物。

TNF-α过剩也会造成内皮细胞的急剧变化。特别地，肿瘤坏死因子-α是与恶病质有关联的骨骼肌退化的重要介质，恶病质是以极端体重减轻和全身萎缩为特征的虚弱化综合症。恶病质通常是一种继发性病状，其中组织分解代谢过度而合成代谢不足。它常见于遭受慢性病如癌症、心肺疾病、老化、营养吸收障碍、生理应激过度、饮食障碍、和获得性免疫缺乏综合征(AIDS)折磨的病人有些作者认为，在至少50％的处于疾病活动期的癌症病人中发现的TNF-α值升高可以导致恶病质。健康成年人和成年癌症病人的TNF-α水平都有文献记录，例如参见Nenova等人的Archives of Hellenic Medicine(2000)17：619-621。健康儿童以及患恶性肿瘤儿童的血清TNF-α浓度例如由Saarinen等人在Cancer Research(1990)50：592-595中报道。有相当高比例的癌症死亡率是源于恶病质而不是肿瘤。慢性萎缩病(恶病质)会在以下情况下产生：过度的细胞损伤导致物质(肿瘤坏死因子-α、胶原酶、透明质酸酶)的释放，而释放的物质进一步分解代谢所谓的健壮组织，结果无法吸收相关组织的合成代谢重建所需要的养分。

感染上人类免疫缺陷病毒1(HIV-1)的婴儿的表现是生长停滞和严重的体重下降，会导致死亡。某些细胞因子的过度产生是其所牵扯到的一种可能的原因。例如，根据Rautonen等人在AIDS(1991)5：1319-1325中的报道，血清IL-6浓度提高，与感染HIV的儿童体内TNF-α浓度升高有关。Swapan等人在Journal of Virology(2002)76：11710-11714中表示，用抗TNF-α抗体或人绒毛膜促性腺激素降低TNF-α的水平会抑制HIV-1蛋白质的表达并且预防恶病质和死亡。

建议用来治疗恶病质的药物目前还很少。有些高剂量孕激素如醋酸甲地孕酮(一种用于治疗转移性的乳腺癌的药剂)和醋酸甲羟孕酮在零零星星的临床试验中显示对于改善食欲和体重增加可产生统计显著性优点。因此，为了治疗恶病质，非常期望得到能刺激食欲和体重增加而不抑制止同时服用的药物的抗肿瘤效果或者抗病毒效果的化合物。更准确地说，在本技术领域中需要通过服用减少人血清中TNF-α水平的化合物治疗恶病质。

TNF-α在血液恶性肿瘤的产生中也被怀疑发挥了某种作用，是通过在生血环境的可能的双重作用，其中的血液恶性肿瘤包括特发性脊髓发育不良综合征，主要是发生在老年人身上，但偶尔也在儿童身上发生，这些综合症目前被认为是急性白血病的早期阶段。

磷酸二酯酶是一族将环核苷酸细胞内第二信使水解成其非环状形式的酶。环磷腺苷(cAMP)在哺乳动物中调节各种细胞和生理功能，比如细胞分裂、内分泌功能、和免疫应答。CAMP的水平由一类称作磷酸二酯酶的酶控制，它们以酶的方式使cAMP失活。依照其功能以及是从何种类型的细胞中分离出来的，共有十一种类型的磷酸二酯酶。例如，高亲合力磷酸二酯酶(PDE-3)是从人血小板细胞分离的，可调节血小板凝聚。另一种磷酸二酯酶(PDE-4)是各种组织中都有，但是是人白细胞中占主导地位的形式；这种酶调节白细胞活化以及与免疫应答和炎症相关联的功能。这两种磷酸二酯酶是通过调节在相应的细胞中的cAMP细胞水平来实现控制的。因而，抑制磷酸二酯酶可提供一种调节任何的由cAMP控制的细胞和身体功能的方法。已知有非特异性磷酸二酯酶抑制剂的化合物，即抑制所有或多种类型磷酸二酯酶。然而，因为cAMP在遍及全身的许许多多功能中都有涉及，非特异性磷酸二酯酶抑制剂有可能改变所有由cAMP调节的功能，如此，非特异性磷酸二酯酶抑制剂的价值因为其众多副作用而受到限制。磷酸二酯酶-4(以下简称为PDE-4)是cAMP特异性的，是在炎症性和免疫细胞中发现的主要的cAMP代谢酶。因而，抑制PDE-4的分子导致炎症性和免疫细胞中cAMP水平升高，因而对此类细胞具有潜在的免疫调节效果，这可导致炎性和免疫上重要的分子如细胞因子的分泌量减少。TNF-α是此类重要炎性细胞因子的一个例子。预期利用小分子抑制PDE-4可以抑制由炎性细胞比如单核细胞和巨噬细胞产生该细胞因子。例如在美国专利5264437中已经描述了人淋巴细胞磷酸二酯酶-4的制备以及人cAMP磷酸二酯酶测定。从治疗学观点看，这样的生物活性是重要的，因为过度的炎性细胞因子的生产已经与许多炎症性和免疫性疾病关联起来，包括例如类风湿性关节炎、类风湿性脊椎炎哮喘、节段性回肠炎(Crohn’sdisease)、炎性肠病、骨关节炎、灌注伤害、脓毒病和脓毒性休克、慢性阻塞性肺病、移植物抗宿主反应和同种异体移植物排斥。

世界卫生组织估计，全球一亿七千万人(世界总人口的3％)受到HCV的慢性感染。这些慢性携带者有发展成肝硬化和/或肝癌的危险。在10至20年的跟踪研究中，20-30％的病人发展成了肝硬化，其中有1-5％的会在以后的10年内发展成肝癌。目前唯一可供选择的治疗是利用干扰素a-2(或其PEG化形式)，或者单独使用，或者与利巴韦林组合使用。然而，仅约在40％的病人身上观察到了持续的响应，而且治疗有严重的副作用。因而在本技术领域中急需HCV复制的有效且选择性的抑制剂，以便治疗感染HCV的病人。然而，有关HCV复制特异性抑制剂的研究却因在细胞培养非常难以有效地繁殖HCV而受到阻碍。因为HCV瘟病毒属于同一病毒族并且共有许多类似之处(比如，但不限于，基因组的组织、类似的基因产物和复制循环)，瘟病毒可被用来作为HCV的模型病毒和代用品。例如，牛病毒性腹泻病毒(BVDV)与丙肝病毒(HCV)密切有关，可以在开发用于HCV感染的药物中用作代用病毒。

在本技术领域中，急切需要改进对上述疾病的现有预防或者治疗方案，或者寻找其它替代方案。特别地，在本技术领域中需要提供另一种具有显著的TNF-α活性和/或PDE-4活性和/或HCV复制抑制活性的人工合成分子。满足本技术领域中的各种需要构成了本发明的主要目标。

发明概述

本发明的基础是一个出乎意料的发现：现有技术中并无提示的在2、4、6和/或7位上(利用吡啶并(3，2-d)嘧啶部分的标准原子编号)的取代基的特定组合却能满足上文列举的一个或多个需要，尤其具有显著的TNF-α活活性和/或PDE-4活性和/或HCV复制抑制活性。

基于该项发现，本发明第一实施方式涉及一类吡啶并(3，2-d)嘧啶衍生物其药学上可接受的加成盐或其立体异构体或其N-氧化物或其溶剂合物，其通式如下：

其中：

-R₁选自下组：氢、卤素、氰基、羧酸、酰基、硫代酰基、烷氧基羰基、酰氧基、碳酸基、氨基甲酸酯、C_1-7烷基、芳基、氨基、乙酰氨基、N-保护的氨基、(一或二-)C_1-7烷基氨基、(一或二-)芳基氨基、(一或二-)C_3-10环烷基氨基、(一或二-)羟基C_1-7烷基氨基、(一或二-)C_1-4烷基-芳基氨基、巯基C_1-7烷基、C_1-7烷基氧、和式R₆-NR₇R₁₂的基团，其中R₆是化学键或者C_1-3亚烷基，其中R₇和R₁₂独立地选自下组：氢、C_1-7烷基、C_2-7链烯基、C_2-7炔基、芳基、芳基烷基、C_3-10环烷基和杂芳基、或其中R₇和R₁₂一起形成一个杂环，

-R₂选自下组：(一或二-)C_1-12烷基氨基；单芳基氨基；二芳基氨基；(一或二-)C_3-10环烷基氨基；(一或二-)羟基C_1-7烷基氨基；(一或二-)C_1-4烷基芳基氨基；(一或二-)芳基C_1-4烷基氨基；吗啉基；巯基C_1-7烷基；C_1-7烷氧基、高哌嗪基和哌嗪基，其中所述高哌嗪基或者哌嗪基可任选地由选自下组的取代基R₅进行N-取代：甲酰基、酰基、硫代酰基、酰胺、硫代酰胺、磺酰基、亚磺酰基、羧基(carboxylato)、硫代羧基、氨基-取代的酰基、烷氧基烷基、C_3-10环烷基-烷基、C_3-10环烷基、二烷基氨基烷基、杂环取代的烷基、酰基取代的烷基、硫代酰基取代的烷基、酰氨基取代的烷基、硫代酰氨基取代的烷基、羧基取代的烷基、硫代羧基取代的烷基、(氨基取代的酰基)烷基、杂环、羧酸酯、ω-氰基烷基、ω-羧酸酯-烷基、卤代C_1-7烷基、C_2-7链烯基、C_2-7炔基、芳基链烯基、芳氧基烷基、芳基烷基和芳基，其中所述芳基链烯基、芳氧基烷基、芳基烷基和芳基中的每一个中的芳基部分可任选地用独立地选自下组的一个或多的取代基取代：卤素、C_1-7烷基、C_2-7链烯基、C_2-7炔基、卤代C_1-7烷基、硝基、羟基、硫氢基、氨基、C_1-7烷氧基、C_3-10环烷氧基、芳氧基、芳基烷基氧、氧杂环、杂环取代的烷基氧、硫代C_1-7烷基、硫代C_3-10环烷基、硫代芳基、硫代杂环、芳基烷硫基、杂环取代的烷硫基、甲酰基、氨基甲酰基、硫代氨基甲酰基、脲基、硫脲基、磺酰氨基、羟基氨基、烷氧基氨基、巯基氨基、硫代烷基氨基、酰基氨基、硫代酰基氨基、氰基、羧酸或其酯或其硫代酯或其卤化物或其酐或其酰胺、硫代羧酸或其酯或其硫代酯或其卤化物或其酐或其酰胺、烷基氨基、环烷基氨基、链烯基氨基、环烯基氨基、炔基氨基、芳基氨基、芳基烷基氨基、羟基烷基氨基、巯基烷基氨基、杂环氨基、肼基、烷基肼基和苯基肼基；

-R₃和R₄独立地选自下组：氢、卤素、杂芳基和芳基，其中所述杂芳基或芳基可任选地由一个或多个选自下组的取代基取代：卤素、C_1-7烷基、C_2-7链烯基、C_2-7炔基、卤代C_1-7烷基、硝基、羟基、硫氢基、氨基、C_1-7烷氧基、C_3-10环烷氧基、芳氧基、芳基烷基氧、氧杂环、杂环取代的烷基氧、硫代C_1-7烷基、硫代C_3-10环烷基、硫代芳基、硫代杂环、芳基烷硫基、杂环取代的烷硫基、甲酰基、氨基甲酰基、硫代氨基甲酰基、脲基、硫脲基、磺酰氨基、羟氨基、烷氧基氨基、巯基氨基、硫代烷基氨基、酰基氨基、硫代酰基氨基、氰基、羧酸或其酯或其硫代酯或其卤化物或其酐或其酰胺、硫代羧酸或其酯或其硫代酯或其卤化物或其酐或其酰胺、烷基氨基、环烷基氨基、链烯基氨基、环链烯基氨基、炔基氨基、芳基氨基、芳基烷基氨基、羟烷基氨基、巯基烷基氨基、杂环氨基、肼基、烷基肼基和苯基肼基，条件是R₃和R₄不皆为氢，且条件是当R₂是单芳基氨基时，R₄是氢。

在以上所定义的一类化合物中，优选的一组是其中R₁不是氢，即吡啶并(3，2-d)嘧啶部分的2位被取代。另一组优选的化合物是其中R₁是氨基或者N-保护的氨基，比如，但不限于，乙酰氨基。另一组优选的化合物是其中R₁是氨基或者N-保护的氨基的，且其中R₃是取代的芳基。另一组优选的化合物是其中R₁是氨基或者N-保护的氨基，且其中R₃是取代的芳基而R₄是氢。

在第二实施方式中，本发明涉及几组能用作制备通式(I)的一些吡啶并(3，2-d)嘧啶衍生物的中间体的三取代的吡啶并(3，2-d)嘧啶，具体如下：

-一组是2-氨基-4-羟基-6-R₃-取代的吡啶并(3，2-d)嘧啶和2，4-二氨基-6-R₃-取代的吡啶并(3，2-d)嘧啶，其中R₃按照通式(I)定义，但R₃不是氢；

-一组是2-N-保护的-氨基-4-羟基-6-R₃-取代的吡啶并(3，2-d)嘧啶、2-N-保护的-氨基-4-氯-6-R₃-取代的吡啶并(3，2-d)嘧啶和2-N-保护的-氨基-4-三唑基-6-R₃-取代的吡啶并(3，2-d)嘧啶，其中R₃按照通式(I)定义，但R₃不是氢，且N-保护的-氨基可以是但不限于，乙酰氨基和新戊酰氨基；

-一组为2-R₁-取代的-4-羟基-6-R₃-取代的吡啶并(3，2-d)嘧啶、2-R₁-取代的-4-氯-6-R₃-取代的吡啶并(3，2-d)嘧啶和2-R₁-取代的-4-三唑基-6-R₃-取代的吡啶并(3，2-d)嘧啶，其中R₁和R₃按照通式(I)定义，但它们不是氢；

-一组是2，4-二羟基-6-R₃-取代的吡啶并(3，2-d)嘧啶和2，4-二氯-6-R₃-取代的吡啶并(3，2-d)嘧啶，其中R₃按照通式(I)定义，但R₃不是氢；

-一组是2-氯-4-R₂-取代的-6-R₃-取代的吡啶并(3，2-d)嘧啶，其中R₂和R₃按照通式(I)定义，但它们不是氢；

-一组是2-氨基-4-羟基-7-R₄-取代的吡啶并(3，2-d)嘧啶和2，4-二氨基-7-R₄-取代的吡啶并(3，2-d)嘧啶，其中R₄按照通式(I)定义，但R₄不是氢；

-一组是2-N-保护的-氨基-4-羟基-7-R₄-取代的吡啶并(3，2-d)嘧啶、2-N-保护的-氨基-4-氯-7-R₄-取代的吡啶并(3，2-d)嘧啶和2-N-保护的-氨基-4-三唑基-7-R₄-取代的吡啶并(3，2-d)嘧啶，其中R₄按照通式(I)定义，但R₄不是氢，且N-保护的-氨基可以是但不限于乙酰氨基和新戊酰氨基；

-一组是2-R₁-取代的-4-羟基-7-R₄-取代的吡啶并(3，2-d)嘧啶、2-R₁-取代的-4-氯-7-R₄-取代的吡啶并(3，2-d)嘧啶和2-R₁-取代的-4-三唑基-7-R₄-取代的吡啶并(3，2-d)嘧啶，其中R₁和R₄按照通式(I)定义，但它们不是氢；

-一组是2，4-二羟基-7-R₄-取代的吡啶并(3，2-d)嘧啶和2，4-二氯-7-R₄-取代的吡啶并(3，2-d)嘧啶，其中R₄按照通式(I)定义，但R₄不是氢；和

-一组是2-氯-4-R₂-取代的-7-R₄-取代的吡啶并(3，2-d)嘧啶，其中R₂和R₄按照通式(I)定义，但它们不是氢。

在第三实施方式中，本发明涉及未预期到的发现，即在新颖化合物的所述组中存在至少一种所需的生物性质，例如但不限于以下：

-降低淋巴细胞增生的能力，

-降低T-细胞活化的能力，

-降低B-细胞或单核细胞或巨噬细胞活化的能力，

-抑制某些细胞因子释放的能力，

-抑制人TNF-α生成的能力，

-抑制磷酸二脂酶-4活性的能力，和

-抑制丙型肝炎病毒(下面称作HCV)复制的能力。

因此，本发明涉及药物组合物，该药物组合物包含一种或多种药学上可接受的载体，以及作为有效成分的至少一种具有通式(I)的吡啶并(3，2-d)嘧啶衍生物和/或其药学上可接受的加成盐和/或其立体异构体和/或其N-氧化物和/或其溶剂合物。

通式(I的)化合物因具有的上述一种或多种生物性质，这种化合物是高活性的免疫抑制剂，或抗肿瘤剂，或抗-HCV剂，能与一种或多种药学上可接受的载体一起配制成药物组合物用于防治或治疗各种病理状况，例如但不限于：免疫和自体免疫紊乱、器官和细胞移植排异、细胞增殖失调、心血管疾病、中枢神经系统疾病和丙型肝炎。具有通式(I)的化合物还可用于防治或治疗哺乳动物中与TNF-α-相关的疾病，例如但不限于以下疾病：

-脓毒性或内毒素性休克，

-TNF-α-介导的疾病，

-与全身、局部或特定组织或者哺乳动物体内局部发生的TNF-α异常水平相关和/或由它们诱发的病理和病症，

-TNF-α和/或抗癌化疗剂的毒性作用，

-哺乳动物的组织在辐射后由放射性元素引起的伤害，和

-恶病质。

具有通式(I)的化合物还可用于预防或治疗由哺乳动物的磷酸二脂酶-4活性介导的疾病，例如但不限于，勃起机能障碍。

在另一个实施方式中，本发明涉及含至少一种通式(I)的化合物和一种或多种药物的联合制剂，所述一种或多种药物例如但不限于：免疫抑制剂和/或免疫调节剂药物，抗肿瘤药物，抗组胺药，变应性病症病原体的抑制剂，磷酸二脂酶-4抑制剂和抗病毒药剂。在另一个实施方式中，本发明涉及通过给予需要的患者有效量的通式(I)化合物，预防或治疗上述病理状况，所述化合物可以以药物组合物或者与另一种合适的药物的联合制剂的形式给予。

在另一个实施方式中，本发明涉及制备由通式(I)定义的新颖的吡啶并(3，2-d)嘧啶衍生物以及其药学上可接受的盐、N-氧化物、溶剂合物和立体异构体的工艺和方法，例如，通过一组或多组三取代的吡啶并(3，2-d)嘧啶中间体，如本文前面列举的。

在另一个实施方式中，本发明涉及涉及使用单取代的、二取代的和三取代的吡啶并(3，2-d)嘧啶作为磷酸二脂酶-4抑制剂，而与它们的取代方式无关(即，以比通式(I)的上述取代方式范围更宽的取代方式，包括在“背景技术”部分披露的吡啶并(3，2-d)嘧啶的取代方式。在一个特定的实施方式中，这种用途包括治疗患者由磷酸二脂酶-4活性介导的疾病的方法，包括给予有效量，优选是磷酸二脂酶-4抑制量的吡啶并(3，2-d)嘧啶衍生物。这类疾病包括但不限于，勃起机能障碍，如在雄性个体中的血管发生性阳痿(vasculogenic impotence)。

附图简述

图1示出制备通式(I)表示的2，4，6-三取代的吡啶并(3，2-d)嘧啶衍生物的第一种方法的示意图，其中在2位的取代基是氨基，以及其2位的取代基是N-保护的氨基如乙酰氨基的中间体，和/或其中4位的取代基是羟基、氯或三唑基。

图2示出制备通式(I)表示的2，4，6-三取代的吡啶并(3，2-d)嘧啶衍生物的第二种方法的示意图，其中在2位的取代基是氨基，以及其在2位的取代基是N-保护的氨基如乙酰氨基的中间体，和/或其中在4位的取代基是羟基、氯或三唑基。

图3示出制备通式(I)表示的2，4，6-三取代的吡啶并(3，2-d)嘧啶中间体，以及其中在4位的取代基是羟基、氯或三唑基的中间体的方法的示意图。

图4示出制备通式(I)表示的2，4，6-三取代的吡啶并(3，2-d)嘧啶中间体，以及其中在2位和4位的取代基是羟基或氯的中间体的另一种方法的示意图。

图5示出制备通式(I)表示的2，4，7-三取代的吡啶并(3，2-d)嘧啶衍生物的第一种方法的示意图，其中在2位的取代基是氨基，以及其2位的取代基是N-保护的氨基如乙酰氨基的中间体，和/或其中4位的取代基是羟基、氯或三唑基。

图6示出制备通式(I)表示的2，4，7-三取代的吡啶并(3，2-d)嘧啶衍生物的第二种方法的示意图，其中在2位的取代基是氨基，以及其2位的取代基是N-保护的氨基如乙酰氨基的中间体，和/或其中4位的取代基是羟基、氯或三唑基。

图7示出制备通式(I)表示的2，4，7-三取代的吡啶并(3，2-d)嘧啶中间体，以及其中在4位的取代基是羟基、氯或三唑基的中间体的方法的示意图。

图8示出制备通式(I)表示的2，4，6-三取代的吡啶并(3，2-d)嘧啶中间体，以及其中在4位的取代基是羟基或氯的中间体的另一种方法的示意图。

定义

除非另外指出，本文中术语“三取代的”指在吡啶并(3，2-d)嘧啶部分的2，4和6位，或者在吡啶并(3，2-d)嘧啶部分的2，4和7位的三个碳原子(按照吡啶并(3，2-d)嘧啶部分的标准原子编号)被氢以外的一个原子或原子基团取代。术语“四取代的”指在吡啶并(3，2-d)嘧啶部分的2，4，6和7位的全部四个碳原子被氢以外的一个原子或原子基团取代。

除非另外指出，对本文所用的取代基，术语“C_1-7烷基”指有1-7个碳原子的直链或支链的饱和无环烃单价基，例如，甲基，乙基，丙基，正丁基，1-甲基乙基(异丙基)，2-甲基丙基(异丁基)，1，1-二甲基乙基(叔丁基)，2-甲基丁基，正戊基，二甲基丙基，正己基，2-甲基戊基，3-甲基戊基，正庚基等。类似地，术语“C_1-12烷基”指有1-12个碳原子的这类基团，即最多12个碳原子，包括十二烷基。

除非另外指出，对本文所用的取代基，术语“酰基”广义指由源自相应的酸的取代基，所述酸例如有机单羧酸，碳酸，氨基甲酸(形成氨基甲酰基取代基)或硫代酸或亚氨酸(形成脲基(carbamidoyl)取代基)，术语“磺酰基”指源自有机磺酸的取代基，其中所述酸的分子中包含脂族、芳香族或杂环基团。在上面定义的“酰基”范围内更具体的种类指与C_1-7烷基、C_3-10环烷基、芳基、芳烷基聚或杂环基相邻的羰基(氧)基，C_1-7烷基、C_3-10环烷基、芳基、芳烷基聚或杂环基都按本文定义。酰基的合适例子如下。

源自脂族和脂环族单羧酸的酰基和磺酰基在本文中指定为脂族或脂环族酰基和磺酰基，它们包括但不限于以下基团：

-烷酰基(例如甲酰基，乙酰基，丙酰基，丁酰基，异丁酰基，戊酰基，异戊酰基，新戊酰基等)；

-环烷酰基(例如，环丁烷羰基，环戊烷羰基，环己烷羰基，1-金刚烷羰基等)；

-环烷基-烷酰基(例如，环己基乙酰基，环戊基乙酰基等)；

-烯酰基(例如，丙烯酰基，甲基丙烯酰基，丁烯酰基等)；

-烷硫基烷酰基(例如，甲硫基乙酰基，乙硫基乙酰基等)；

-烷磺酰基(例如，甲磺酰基，乙磺酰基，丙磺酰基等)；

-烷氧基羰基(例如，甲氧基羰基，乙氧基羰基，丙氧基羰基，异丙氧基羰基，丁氧基羰基，异丁氧基羰基等)；

-烷基氨基甲酰基(例如，甲基氨基甲酰基等)；

-(N-烷基)-硫代氨基甲酰基(例如，(N-甲基)-硫代氨基甲酰基等)；

-烷基脲基(例如，甲基脲基等)；和

-烷氧酰基(alkoxalyl)(例如，甲氧酰基，乙氧酰基，丙氧酰基等)；

酰基和磺酰基也可以源自芳香族单羧酸，包括但不限于以下基团：

-芳酰基(例如，苯甲酰基，甲苯酰基，二甲苯酰基，1-萘甲酰基，2-萘甲酰基等)；

-芳基烷酰基(例如，苯基乙酰基等)；

-芳基烯酰基(例如，肉桂酰基等)；

-芳氧基烷酰基(例如，苯氧基乙酰基等)；

-芳基硫代烷酰基(例如，苯硫基乙酰基等)；

-芳基氨基烷酰基(例如，N-苯基甘氨酰基等)；

-芳基磺酰基(例如，苯磺酰基，甲苯磺酰基，萘磺酰基等)；

-芳氧基羰基(例如，苯氧基羰基，萘氧基羰基等)；

-芳基烷氧基羰基(例如，苄氧基羰基等)；

-芳基氨基甲酰基(例如，苯基氨基甲酰基，萘基氨基甲酰基等)；

-芳基乙醛酰基(例如，苯基乙醛酰基等)。

-芳硫基氨基甲酰基(例如，苯硫基氨基甲酰基等)；和

-芳基脲基(例如，苯基脲基等)。

酰基还可以源自杂环单羧酸，包括但不限于以下基团：

-杂环-羰基，其中所述杂环基按本文中定义，优选在所述环中有一个或多个选自氮、氧和硫的杂原子的芳香族或非芳香族的5-元至7-元杂环(例如，苯硫酰基(thiophenoyl)，呋喃甲酰基，吡咯羰基，烟酰基等)；和

-杂环-烷酰基，其中所述杂环基按照本文中定义，优选在所述环中有一个或多个选自氮、氧和硫的杂原子的芳香族或非芳香族的5-元至7-元杂环(例如，噻吩乙酰基，呋喃基乙酰基，咪唑基丙酰基，四唑基乙酰基，2-(2-氨基-4-噻唑基)-2-甲氧基亚氨基乙酰基等)。

除非另外指出，对本文所用的取代基，术语“C_1-7亚烷基”相应于上面定义的C_1-7烷基的二价烃基，如亚甲基，二(亚甲基)，三(亚甲基)，四亚甲基，1，6-亚己基等。

除非另外指出，对本文所用的取代基，术语“C_3-10环烷基”指有3-10个碳原子的单环或多环饱和烃单价基，例如，环丙基，环丁基，环戊基，环己基，环庚基，环辛基等，或者指有7-10个碳原子的C_7-10多环饱和烃单价基，例如，降冰片基(norbornyl)，葑基，三甲基三环庚基或金刚烷基。

除非另外指出，对本文所用的取代基，术语“C_3-10环烷基-烷基”指已与C_3-10环烷基(如上面定义)相连的脂族饱和烃单价基团(优选C_1-7烷基，如按上面定义的)，例如但是不限于，环己基甲基，环戊基甲基等。

对本文所用的取代基，除非另外指出，术语“C_3-10环亚烷基”对应于上面定义的C_3-10环烷基的二价烃基。

除非另外指出，对本文所用的取代基，术语“芳基”指有6至最多30个碳原子的任何单环或多环芳香族单价烃基，例如但不限于苯基，萘基，蒽基，phenantracyl，荧蒽基，

基，芘基，联苯基，三联苯基，苉基，茚基，联苯，indacenyl，苯并环丁烯基，苯并环辛烯基等，包括稠合苯并-C_4-8环烷基(后者按上面定义)，例如，茚满基，四氢萘基，芴基等，所有所述的基团都可任选被一个或多个独立选自下组的取代基取代：卤素，氨基，三氟甲基，羟基，硫氢基和硝基，例如4-氟苯基，4-氯苯基，3，4-二氯苯基，4-氰基苯基，2，6-二氯苯基，2-氟苯基，3-氯苯基，3，5-二氯苯基等。

除非另外指出，对本文中所用的取代基，如在吡啶并(3，2-d)嘧啶特定位置的取代基与在所述环的同一位置的碳原子的组合，术语“同素环”指有4至最多15个碳原子但在所述环上不含杂原子的单环或多环的饱和或单不饱和或多不饱和的烃基；例如，所述取代基的组合可以形成C_2-6亚烷基，如四亚甲基，能与吡啶并(3，2-d)嘧啶环上特定位置升高的碳原子环化。

除非另外指出，对本文中所用的取代基(包括在吡啶并(3，2-d)嘧啶环特定位置上的取代基与所述环的同一位置上的碳原子组合在一起)，术语“杂环”指单环或多环的饱和或不饱和的单价烃基，该烃基有2至最多15个碳原子并包含在一个或多个环上的一个或多个杂原子，且所述多环中的每个环有3-10原子(和任选还包含与所述环上的一个或多个碳原子相连的一个或多个杂原子，例如羰基或者硫代羰基或硒代羰基(selenocarbonyl)形式，和/或与所述环上的一个或多或硒氧化物基团)，所述杂原子各自独立地选自氮、氧、硫、硒和磷，还包括其中的杂环与一个或多个芳烃环稠合的基团，例如苯并-稠合，二苯并-稠合和萘并-稠合的杂环基团；这种定义内包含杂环基，例如但不限于：二氮杂

基，噁二嗪基，噻二嗪基，二噻嗪基，三唑酮基，二氮杂

酮基(diazepinonyl)，三氮杂

基，三氮杂

酮基，四氮杂

酮基，苯并喹啉基，苯并噻嗪基，苯并噻嗪酮基(benzothiazinonyl)，苯并氧硫杂环己烯基，苯并二噁烯基，苯并二硫杂环己烯基(benzodithiinyl)，苯并氧氮杂

基(benzoxazepinyl)，苯并硫氮杂

基(benzothiazepinyl)，苯并二氮杂

基，苯并二氧杂环庚三烯基(benzodioxepinyl)，苯并二硫杂环庚三烯基(benzodithiepinyl)，苯并氧氮杂环辛间四烯基(benoxazocinyl)，苯并-硫氮杂环辛间四烯基(beno-thiazocinyl)，苯并二氮杂环辛间四烯基(benodiazocinyl)，苯并氧硫杂环辛间四烯基(benoxathiocinyl)，苯并二氧杂环辛间四烯基(benzodioxocinyl)，苯并三氧杂环庚三烯基(benzotrioxepinyl)，苯并氧硫杂环庚三烯基(benzoxathiazepinyl)，苯并氧二氮杂环庚三烯基，苯并硫-二氮杂

基，苯并三氮杂

基，苯并氧硫杂环庚三烯基(benzoxathiepinyl)，苯并三唑酮基，苯并噁唑酮基，2-吖啶酮基，氮杂螺十一烷基(azaspiroundecyl)，二硫螺癸基，硒代吖嗪基，硒代吡咯基，硒代苯基，次黄嘌呤基(hypoxanthinyl)，氮杂次黄嘌呤基，联吡嗪基，联吡啶基，噁唑烷基，二硒代嘧啶基，benzodioxocinyl，苯并芘基，苯并吡喃酮基，苯并吩嗪基，苯并喹嗪基，二苯并咔唑基，二苯并吖啶基，二苯并吩嗪基，dibenzothiepinyl，二苯并噁庚因基(dibenzoxepinyl)，二苯并吡喃酮基，二苯并喹喔啉基，二苯并硫氮杂

基，二苯并异喹啉基，四氮杂金刚烷基，硫杂四氮杂金刚烷基，oxauracil，噁嗪基，二苯并苯硫基，二苯并呋喃基，噁唑啉基，噁唑酮基，吖吲哚基，azolonyl，噻唑啉基，噻唑啉酮基(thiazolonyl)，噻唑烷基，噻嗪烷基，嘧啶酮，硫代嘧啶酮基(thiopyrimidonyl)，硫代吗啉基，azlactonyl，萘并吲唑基，萘并吲哚基，萘并噻唑基，naphtothioxolyl，萘并羟吲哚基，萘并-三唑基，萘并吡喃基，氧杂二环庚基，氮杂苯并咪唑基，氮杂环庚基，氮杂环辛基，氮杂环壬基，氮杂二环壬基，四氢呋喃基，四氢吡喃基，四氢-吡喃酮基(pyronyl)，tetrahydroquinoleinyl，四氢噻吩基和其二氧化物，二氢噻吩基二氧化物，二羟吲哚基，二噁烯基，二环氧乙烯基，二噁嗪基，噻噁烷基，thioxolyl，硫氧代三唑基，硫代三唑基，硫代吡喃基，硫代吡喃酮基，香豆素基，喹啉基(quinoleinyl)，oxyquinoleinyl，quinuclidinyl，二羟基嘌呤基(xanthinyl)，二氢吡喃基，苯并二氢呋喃基，苯并硫代吡喃酮基，苯并硫代吡喃基，苯并噁嗪基，苯并噁唑基，苯并二噁基，苯并二噁烷基，苯并噻二唑基，苯并三嗪基，苯并噻唑基，苯并噁唑基，吩噻噁基，吩噻唑基，吩噻吩基(苯并硫代呋喃基)，吩吡喃酮基，吩噁唑基，吡啶基，二氢吡啶基，四氢吡啶基，哌啶基，吗啉基，硫代吗啉基，吡嗪基，嘧啶基，哒嗪基，三嗪基，四嗪基，三唑基，苯并三唑基，四唑基，咪唑基，吡唑基，噻唑基，噻二唑基，异噻唑基，噁唑基，噁二唑基，吡咯基，呋喃基，二氢呋喃基，呋喃甲酰基，hydantoinyl，二氧戊环基，二氧杂环戊烯基，二噻烷基，二噻吩基，二硫杂环己烯基，噻吩基，吲哚基，吲唑基，苯并呋喃基，喹啉基，喹唑啉基，喹喔啉基，咔唑基，吩噁嗪基，吩噻嗪基，呫吨基，嘌呤基，苯并噻吩基，萘并噻吩基，噻蒽基，吡喃基，吡喃酮基，苯并吡喃酮基，异苯并呋喃基，苯并吡喃基，吩氧硫杂环己烯基(phenoxathiinyl)，中氮茚基，喹嗪基，异喹啉基，二氮杂萘基，naphthiridinyl，噌啉基，蝶啶基，carbolinyl，吖啶基，萘嵌间二氮苯基，phenanthrolinyl，吩嗪基，吩噻嗪基，咪唑啉基，咪唑烷基，苯并咪唑基，吡唑啉基，吡唑烷基，吡咯啉基，吡咯烷基，哌嗪基，尿苷基(uridinyl)，胸苷基，胞苷基，azirinyl，吖丙啶基，diazirinyl，二吖丙啶基，环氧乙烷基(oxiranyl)，oxaziridinyl，二环氧乙烷基，硫杂丙环基，azetyl，dihydroazetyl，氮杂环丁烷基，oxetyl，氧杂环丁烷基，oxetanonyl，高哌嗪基，高哌啶基，thietyl，thietanyl，二氮杂二环辛基，diazetyl，二氮丙啶酮基(diaziridinonyl)，二吖丙啶亚硫酰基(diaziridinethionyl)，苯并二氢吡喃基，苯并二氢吡喃酮基，硫代苯并二氢吡喃基，硫代苯并二氢吡喃酮基，硫代苯并吡喃基，苯并呋喃基，苯并异噻唑基，苯并咔唑基，苯并色酮基，苯并异咯嗪基，苯并香豆素基，硫代香豆素基，吩间噁嗪基(pheno metoxazinyl)，吩对噁嗪基，吩三嗪基，硫代二嗪基，硫代二唑基，吲哚氧基，硫代吲哚氧基，苯并二嗪基(如，phtalazinyl)，phtalidyl，phtalimidinyl，phtalazonyl，咯嗪基，二苯并吡喃酮基(即呫吨酮基)，xanthionyl，isatyl，异吡唑基，异吡唑啉酮基，尿唑基，尿嗪基，uretinyl，uretidinyl，琥珀酰基，琥珀酰亚氨基，苄基亚磺内酰氨基(benzylsultimyl)，苄基磺内酰氨基(benzylsultamyl)等，包括它们的所有可能的异构体形式，其中，所述杂环上的每一个碳原子还可以独立地被选自下组的取代基取代：卤素，硝基，C_1-7烷基(任选含选自以下的一个或多个官能团或基团：羰基(氧代)，醇(羟基)，醚(烷氧基)，乙缩醛，氨基，亚氨基，肟基，烷基肟基，氨基酸，氰基，羧酸酯或酰胺，硝基，硫代C_1-7烷基，硫代C_3-10环烷基，C_1-7烷基氨基，环烷基氨基，烯基氨基，环烯基氨基，炔基氨基，芳基氨基，芳烷基-氨基，羟基烷基氨基，巯基烷基氨基，杂环-取代的烷基氨基，杂环氨基，杂环-取代的芳基氨基，肼基，烷基肼基，苯基肼基，磺酰基，磺酰氨基和卤素)，C_3-7烯基，C_2-7炔基，卤代C_1-7烷基，C_3-10环烷基，芳基，芳烷基，烷基芳基，烷基酰基，芳基酰基，羟基，氨基，C_1-7烷基氨基，环烷基氨基，烯基氨基，环烯基氨基，炔基氨基，芳基氨基，芳烷基氨基，羟基烷基氨基，巯基烷基氨基，杂环-取代的烷基氨基，杂环氨基，杂环-取代的芳基氨基，肼烷基肼基，苯基肼基，硫氢基，C_1-7烷氧基，C_3-10环烷氧基，芳氧基，芳烷氧基，氧杂环，杂环-取代的烷氧基，卤代C_1-7烷基，卤代C_3-10环烷基，卤代芳基，卤代杂环，芳烷硫基，杂环-取代的烷硫基，甲酰基，羟基氨基，氰基，羧酸或其酯或硫酯或酰胺，硫代羧酸或其酯或硫酯或酰胺；依据3-10个原子的环上的不饱和数，杂环基团可以再划分为杂芳香族(或“杂芳基”)基团和非芳香族杂环基团；当所述非芳香族杂环基团的杂原子是氮时，后者被选自C_1-7烷基、C_3-10环烷基、芳基、芳烷基和烷基芳基的取代基取代。

除非另外指出，对本文中所用取代基，术语“C_1-7烷氧基”，“C_3-10环烷氧基”，“芳氧基”，“芳烷氧基”，“氧代杂环”，“硫代C_1-7烷基”，“硫代C_3-10环烷基”，“芳硫基”，“芳烷硫基”和“硫代杂环”指其中的C_1-7烷基、各C_3-10环烷基、芳基、芳烷基或杂环基(它们各自按上面定义)上的碳原子连接到通过一个单键连接到氧原子或二价硫原子的取代基，例如但不限于：甲氧基，乙氧基，丙氧基，丁氧基，戊氧基，异丙氧基，仲丁氧基，叔丁氧基，异戊氧基，环丙氧基，环丁氧基，环戊氧基，硫代甲基，硫代乙基，硫代丙基，硫代丁基，硫代戊基，硫代环丙基，硫代环丁基，硫代环戊基，苯硫基，苯氧基，苄氧基，巯基苄基，甲苯氧基等。

除非另外指出，对本文中所用取代基，术语卤素指选自氟、氯、溴和碘的任何原子。

除非另外指出，对本文中所用取代基，术语“卤代C_1-7烷基”指C_1-7烷基(如按上面定义)中的一个或多个氢原子独立地被一个或多个卤素(优选氟，氯或溴)取代的C_1-7烷基，例如但不限于：二氟甲基，三氟甲基，三氟乙基，八氟戊基，十二氟庚基，二氯甲基等。

除非另外指出，对本文中所用取代基，术语“C_2-7烯基”指有一个或多个烯键式不饱和度并有2-7个碳原子的直链或支链的无环烃单价基，例如：乙烯基，1-丙烯基，2-丙烯基(烯丙基)，1-丁烯基，2-丁烯基，2-戊烯基，3-戊烯基，3-甲基-2-丁烯基，3-己烯基，2-己烯基，2-庚烯基，1，3-丁二烯基，戊二烯基，己二烯基，庚二烯基，庚三烯基等，包括它们所有可能的异构体。

除非另外指出，对本文中所用取代基，术语“C_3-10环烯基”指有3-8个碳原子的单环单不饱和或多不饱和烃的单价基，例如，环丙烯基，环丁烯基，环戊烯基，环戊二烯基，环己烯基，环己二烯基，环庚烯基，环庚二烯基，环庚三烯基，环辛烯基，环辛二烯基等，或者有7-10个碳原子的C7-10多环单不饱和或多不饱和烃的单价基，例如，二环戊二烯基，葑烯基(包括其所有可能的异构体，如α-pinolenyl)，二环[2.2.1]庚-2-烯基，二环[2.2.1]庚-2，5-二烯基，环-葑烯基等。

除非另外指出，对本文中所用取代基，术语“C_2-7炔基”定义为含有一个或多个三键和任选的至少一个双键并有2-7个碳原子的直链或支链烃基，例如：乙炔基，1-丙炔基，2-丙炔基，1-丁炔基，2-丁炔基，2-戊炔基，1-戊炔基，3-甲基-2-丁炔基，3-己炔基，2-己炔基，1-戊烯-4-炔基，3-戊烯-1-炔基，1，3-己二烯-1-炔基等。

除非另外指出，对本文中所用取代基，术语“芳烷基”，“芳基烯基”和“杂环-取代的烷基”指其上通过碳原子已连接了芳基或杂环基的脂族饱和或烯键式不饱和烃单价基(优选C_1-7烷基或C_2-7烯基，如按上面定义的)，其中所述的脂族基团和/或所述芳基或杂环基可以任选被独立地选自下组的一个或多个取代基取代：卤素，氨基，羟基，硫氢基，C_1-7烷基，C_1-7烷氧基，三氟甲基和硝基，例如不限于苄基，4-氯苄基，4-氟苄基，2-氟苄基，3，4-二氯苄基，2，6-二氯苄基，3-甲基苄基，4-甲基苄基，4-叔丁基苄基，苯基丙基，1-萘基甲基，苯基乙基，1-氨基-2-苯基乙基，1-氨基-2-[4-羟基-苯基]乙基，1-氨基-2-[吲哚-2-基]乙基，苯乙烯基，吡啶基甲基(包括其所有异构体)，吡啶基乙基，2-(2-吡啶基)异丙基，噁唑基丁基，2-噻吩基甲基，吡咯基乙基，吗啉基乙基，咪唑-1-基-乙基，苯并二氧杂环戊烯基甲基和2-呋喃基甲基。

除非另外指出，对本文中所用取代基，术语“烷基芳基”和“烷基-取代的杂环”指其上分别连接一个或多个脂族饱和或不饱和烃单价基，优选一个或多个如上面定义的C_1-7烷基、C_2-7烯基或C_3-10环烷基的的芳基或杂环基(如上面定义的)，例如但不限于：邻-甲苯甲酰基，间-甲苯甲酰基，对-甲苯甲酰基，2，3-二甲苯基，2，4-二甲苯基，3，4-二甲苯基，邻-异丙苯基，间-异丙苯基，对-异丙苯基，邻-花基，间-花基，对-花基，

基，叔丁基苯基，二甲基吡啶基，2-甲基吖丙啶基，甲基-苯并咪唑基，甲基苯并呋喃基，甲基苯并噻唑基，甲基苯并三唑基，甲基苯并噁唑基和甲基苯并硒代噁唑基(benzselenazolyl)。

除非另外指出，对本文中所用取代基，术语“烷氧基芳基”指其上连接一个或多个按上面定义的C_1-7烷氧基，优选一个或多个甲氧基的芳基(如上面定义)，例如但不限于，2-甲氧基苯基，3-甲氧基苯基，4-甲氧基苯基，3，4-二甲氧基苯基，2，4，6-三甲氧基苯基，甲氧基萘基等。

除非另外指出，对本文中所用取代基，术语“烷基氨基”，“环烷基氨基”，“烯基氨基”，“环-烯基氨基”，“芳基氨基”，“芳烷基氨基”，“杂环-取代的烷基-氨基”，“杂环-取代的芳基氨基”，“杂环氨基”，“羟基-烷基氨基”，“巯基烷基氨基”和“炔基氨基”指分别通过单键与氮原子相连的一个(因此是单取代的氨基)或甚至两个(因此为二取代的氨基)C_1-7烷基，C_3-10环烷基，C_2-7烯基，C_3-10环烯基，芳基，芳烷基，杂环-取代的烷基，杂环-取代的芳基，杂环(在这种情形只要氮原子与杂环上的碳原子相连)，单或多羟基C_1-7烷基，单或多巯基C_1-7烷基或C_2-7炔基(它们各自分别按本文中定义，并包括存在任选的取代基，所述单价选自卤素，氨基，羟基，硫氢基，C_1-7烷基，C_1-7烷氧基，三氟甲基和硝基)，例如但不限于：苯胺基，2-溴苯胺基，4-溴苯胺基，2-氯苯胺基，3-氯苯胺基，4-氯苯胺基，3-氯-4-甲氧基苯胺基，5-氯-2-甲氧基苯胺基，2，3-二甲基苯胺基，2，4-二甲基苯胺基，2，5-二甲基苯胺基，2，6-二甲基苯胺基，3，4-二甲基苯胺基，2-氟苯胺基，3-氟苯胺基，4-氟苯胺基，3-氟-2-甲氧基苯胺基，3-氟-4-甲氧基苯胺基，2-氟-4-甲基苯胺基，2-氟-5-甲基苯胺基，3-氟-2-甲基苯胺基，3-氟-4-甲基苯胺基，4-氟-2-甲基苯胺基，5-氟-2-甲基苯胺基，2-碘苯胺基，3-碘苯胺基，4-碘苯胺基，2-甲氧基-5-甲基苯胺基，4-甲氧基-2-甲基苯胺基，5-甲氧基-2-甲基苯胺基，2-乙氧基苯胺基，3-乙氧基-苯胺基，4-乙氧基苯胺基，苄基氨基，2-甲氧基苄基氨基，3-甲氧基苄基-氨基，4-甲氧基苄基氨基，2-氟苄基氨基，3-氟苄基氨基，4-氟-苄基氨基，2-氯苄基氨基，3-氯苄基氨基，4-氯苄基氨基，2-氨基苄基氨基，二苯基甲基氨基，α-萘基氨基，甲基氨基，二甲基氨基，乙基氨基，二乙基氨基，异丙基氨基，丙烯基氨基，正丁基氨基，叔丁基氨基，二丁基氨基，1，2-二氨基丙基，1，3-二氨基丙基，1，4-二氨基丁基，1，5-二氨基戊基，1，6-二氨基己基，吗啉基甲基氨基，4-吗啉基苯胺基，羟基甲基氨基，β-羟基乙基氨基和乙炔基氨基；该定义中还包含混合的二取代的氨基，其中氮原子与两个属于两个不同亚组基团如烷基和烯基的基团相连，或与同亚组的两个基团相连，如甲基乙基氨基；二取代的氨基中，对称-取代的氨基更容易获得，因此从容易制备考虑通常被优选。

除非另外指出，对本文中所用取代基，术语“(硫代)羧酸酯”，“(硫代)羧酸硫酯”和“(硫代)羧酸酰胺”指其中的羧基或硫代连接到醇，硫醇，多元醇，苯酚，苯硫酚，伯胺或仲胺，多胺，氨基-醇或氨的烃残基的基团，所述烃残基选自下组：烷基，烯基，炔基，环烷基，环烯基，芳基，芳烷基，烷基芳基，烷基氨基，环烷基氨基，烯基氨基，环烯基氨基，芳基氨基，芳烷基氨基，杂环-取代的烷基氨基，杂环氨基，杂环-取代的芳基氨基，羟基烷基氨基，巯基-烷基氨基或炔基氨基(分别如上面定义)。

除非另外指出，对本文中所用取代基，术语“氨基-酸”指源自具有化学式H₂N-CHR-COOH的分子的基团，该化学式中R是表征氨基酸型的原子上的侧基；所述分子可以是20种天然氨基酸中的一种或类似的非天然氨基酸中的一种。

除非另外指出，本文中术语“立体异构体”指通式(I)化合物可能具有的所有可能的不同异构体以及构象形式，特别是所有可能的立体化学和构象的异构体形式、所有非对映体，对映体和/或基本分子结构的构象异构体。本发明的某些化合物可以以不同的互变形式存在，后者所述的所有异构体都包含在本发明的范围之内。

除非另外指出，本文中术语“对映体”指本发明化合物的各自独立的光活性形式，具有光学纯度或至少80％对映体过量(按照本领域的标准方法测定)(即至少90％的一种对映体和最多10％的另一种对映体)，优选至少90％，更优选至少98％。

除非另外指出，本文中术语“溶剂合物”包括由本发明的吡啶并(3，2-d)嘧啶衍生物与合适无机溶剂(如水合物)或有机溶剂例如但不限于醇类，酮类，酯类，醚类，腈等形成的任何组成。

发明详述

在本发明的第一实施方式中，新颖的吡啶并(3，2-d)嘧啶衍生物按通式(I)定义，其中取代基R₁，R₂，R₃和/或R₄各自独立地对应于上面给出的定义，特别具有用于以下取代基的通用术语的任何独立的含义(如上面说明的)，所述取代基例如但不限于：“C_1-7烷基”，“C_3-10环烷基”，“C_2-7烯基”，“C_2-7炔基”，“芳基”，“同素环(homocyclic)”，“杂环”，“卤素”，“C_3-10环烯基”，“烷基芳基”，“芳烷基”，“烷基氨基”，“环烷基-氨基”，“烯基氨基”，“炔基氨基”，“芳基氨基”，“芳烷基氨基”，“杂环-取代的烷基氨基”，“杂环氨基”，“杂环-取代的芳基氨基”，“羟基烷基氨基”，“巯基烷基氨基”，“炔基氨基”，“C_1-7烷氧基”，“C_3-10环烷氧基”，“硫代C_1-7烷基”，“硫代C_3-10环烷基”，“硫代C_1-7烷基”，“氨基-酸”等。

本发明的第二实施方式中，新颖的吡啶并(3，2-d)嘧啶中间体是本文前面列举的，其中取代基R₁，R₂，R₃和/或R₄各自可以独立地对应于对通式(I)给出的任何定义，特别是对用于以下取代基的通用术语任何独立的含义(如上面说明的)，所述取代基例如但不限于：“C_1-7烷基”，“C_3-10环烷基”，“C_2-7烯基”，“C_2-7炔基”，“芳基”，“同素环”，“杂环”，“卤素”，“C_3-10环烯基”，“烷基芳基”，“芳基-烷基”，“烷基氨基”，“环烷基氨基”，“烯基氨基”，“炔基氨基”，“芳基-氨基”，“芳烷基氨基”，“杂环-取代的烷基氨基”，“杂环氨基”，“杂环-取代的芳基氨基”，“羟基烷基氨基”，“巯基-烷基氨基”，“炔基氨基”，“C_1-7烷氧基”，“C_3-10环烷氧基”，“硫代C_1-7烷基”，“硫代C_3-10环烷基”，“卤代C_1-7烷基”，“氨基-酸”等.。

在具有通式(I)的一类化合物中，优选的一组是其中的R₂是任选被如上面定义的取代基R₅N-取代的哌嗪基的化合物。所述哌嗪基还可以在一个或多个碳原子上被n个R₀取代基取代，其中，n是0-6的整数，其中，当n至少为2时，各R₀可以彼此独立地定义。在一个或多个碳原子存在一个或多个这种取代基R₀是在具有通式(I)的吡啶并(2，3-d)嘧啶衍生物以及其对应的中间体中引入手性的合适方式。实际上，这种取代基R₀的选择受到取代的哌嗪的商业可得性的限制。更优选R₂是哌嗪-1-基，n为0、1或2，取代基R₀的代表例子是甲基或苯基，例如2-甲基哌嗪-1-基、2-苯基哌嗪-1-基和2，5-二甲基-哌嗪-1-基。在优选的一组化合物中，本发明更具体的实施方式是，其中哌嗪基的两个氮原子中的一个带有取代基R₅的化合物，R₅具有最好与所述氮原子紧邻的羰基(氧)或硫代羰基(硫氧)或磺酰基官能团。换句话说，这种特定的实施方式指当R₅分别选自，酰基，硫代酰基，酰胺，硫代酰胺，磺酰基，亚磺酰基，羧酸酯基和硫代羧酸酯基时，则R₅与其连接的氮原子一起分别形成酰胺，硫代酰胺，脲，硫脲，磺酰氨基，亚磺酰氨基，氨基甲酸酯基(carbamato)或硫代氨基甲酸酯基。

特别有用的通式(I)表示的吡啶并(3，2-d)嘧啶衍生物是通式(I)中的取代基R₂是哌嗪-1-基的那些，所述基团在4位被取代基R₅取代，取代基R₅被选自下组的基团取代：

-COR₈，其中R₈选自：氢；C_1-7烷基；C_3-10环烷基；任选被一个或多个取代基取代的芳基，所述取代基选自下组：卤素，C_1-7烷基，氰基和C_1-7烷氧基；任选被一个或多个卤原子取代的杂环；芳烷基；芳氧基烷基；芳基烷氧基烷基；烷氧基烷基；芳基烷氧基；芳氧基；芳基烯基；杂环-取代的烷基；烷基氨基和芳基氨基；R₈的代表性而非限制性的例子是：甲基，乙基，戊基，环己基，苯基，4-氟苯基，4-氯苯基，3，4-二氯苯基，4-丁基苯基，4-氰基苯基，2-甲氧基苯基，3-甲氧基苯基，4-戊氧基苯基，萘基，2-噻吩基，4-吡啶基，1-四氢吡咯基，2-四氢吡咯基，2-呋喃基，3-呋喃基，2，4-二氯-5-氟-3-吡啶基，二乙基氨基，二异丙基氨基，二苯基氨基，苯基-乙基，4-氯苄基，苯氧基甲基，苄氧基甲基，甲氧基甲基，2-噻吩基甲基，苯乙烯基，苄氧基，苯氧基，1-氨基-2-苯基乙基，1-氨基-2-[4-羟基苯基]乙基和1-氨基-2-[吲哚-2-基]乙基；

-CSR₉，其中R₉选自烷基氨基和芳氧基，例如但不限于：二甲基氨基和苯氧基；

-SO₂R₁₀，其中R₁₀选自芳基和芳烷基，例如但不限于：苯基和苄基；和

-R₁₁，其中R₁₁选自下组：C_1-7烷基，芳基，芳烷基，芳基烯基，烷氧基烷基，杂环-取代的烷基，环烷基烷基，杂环，C_3-10环烷基，烷基氨基烷基，芳氧基烷基，烷氧基芳基，ω-氰基烷基，ω-羧酸酯基烷基和酰氨基烷基。

特别有用的通式(I)表示的吡啶并(3，2-d)嘧啶衍生物是通式(I)中的取代基R₁是通式R₆-NR₇R₁₂的基团的那些，R₆-NR₇R₁₂中R₆是一个键或C_1-3亚烷基，R₇和R₁₂独立地选自下组：氢，C_1-7烷基，C_2-7烯基，C_2-7炔基，芳基，芳烷基，C_3-10环烷基和杂芳基，或者N，R₇和R₁₂一起形成一个杂环。该亚组衍生物中，当R₆是一个键或亚甲基和/或R₇是甲基，乙基，丙基或环丙基甲基和/或N，R₇和R₁₂一起形成吗啉基，2，6-二甲基吗啉基，吡咯烷基，氮杂环庚烷基(azepanyl)，3，3，5-三甲基氮杂环庚烷基，哌啶基，2-甲基哌啶基或2-乙基哌啶基时被优选。在吡啶并(3，2-d)嘧啶环的2位引入取代基的方法在WO 03/062209中详细描述。

本发明还提供了制备新颖的通式(I)的吡啶并(3，2-d)嘧啶衍生物的工艺和方法。作为通用规则，这些化合物的制备基于以下原理，即由合适的吡啶并(3，2-d)嘧啶前体(通常是2，3，6-三取代的吡啶)开始，取代基R₂，R₃，R₄和R₁各自可以独立地引入，不会对已在吡啶并(3，2-d)嘧啶部分的其它位置引入的一个或多个取代基有不利影响或者对以后引入取代基的能力有不利影响。

本发明人开发的制备方法可以与吡啶并(3，2-d)嘧啶衍生物领域已知的合成方法选择地使用，或与这些已知的合成方法组合使用(取决于最终的目标化合物)。例如，合成本发明的吡啶并(3，2-d)嘧啶衍生物的单-和二-N-氧化物可以通过用氧化剂对所述衍生物进行处理方便地制得，所述氧化剂例如但限于过氧化氢(如，在乙酸存在下)或过酸如氯过苯甲酸。制备本发明的吡啶并(3，2-d)嘧啶衍生物的方法将参见附图1至8进行详细说明，除非在后面另外指出，取代基或原子R₂，R₃，R₄和R₁按照发明概述中对通式(I)中的定义，更具体地可对应于上面公开的任何单独的含义。

在各附图涉及的反应步骤的描述中，参照使用特定催化剂和/或特定类型的溶剂。应理解，述及的各催化剂应以本领域技术人员已知对所涉及的反应类型的催化量使用。在以下反应步骤中可以使用的溶剂包括各种有机溶剂，例如在有关反应条件下为惰性的质子溶剂，极性非质子溶剂和非极性溶剂以及含水溶剂。更具体的例子包括芳烃，氯化烃，醚，脂族烃，醇，酯，酮，酰胺，水或它们的混合物，以及超临界溶剂，例如二氧化碳(在超临界条件下进行反应时)。适用于各种类型反应步骤的合适的反应温度和压力条件在此不详细描述，但是不偏离本领域技术人员由所涉及的反应类型和使用的溶剂类型(特别是其沸点)所已知的相关条件。

图1示出制备通式(I)的2，4，6-三取代的吡啶并(3，2-d)嘧啶衍生物的第一种方法的示意图，其中在2位的取代基是氨基，以及其2位的取代基是N-保护的氨基如乙酰氨基的中间体，和/或其中4位的取代基是羟基、氯或三唑基。6-氯-2-氰基-3-硝基吡啶的硝基在步骤(a)中发生催化还原(如在氢气氛中使用铂或钯)或者发生化学还原(如在酸性条件下使用铁或锡)。导致形成吡啶并[3，2-d]嘧啶骨架(scaffold)的闭环反应在步骤(b)中发生，即通过用闭环试剂对6-氯-2-氰基-3-氨基吡啶处理，所述闭环试剂例如但不限于，氯甲脒或胍。然后，在步骤(c)的含水酸性条件下的水解，产生2-氨基-6-氯-吡啶并[3，2-d]嘧啶-4(3H)酮。步骤(d)中，在6位的氯原子用于各种钯催化反应，例如但不限于Suzuki反应(用芳基硼酸处理2-氨基-6-氯-吡啶并[3，2-d]嘧啶-4(3H)酮，产生二芳基衍生物)和Heck反应(用宽泛的各种端烯或端炔处理2-氨基-6-氯-吡啶并[3，2-d]嘧啶-4(3H)酮，因而产生烯基或炔基的化合物)的离去基团。步骤(e)中，在2位的氨基例如通过与乙酸酐或新戊酰酐在作为溶剂的吡啶中反应，受到新戊酰基(图1中未示出)或乙酰基的保护，因此而在2位引入N-保护的氨基，例如但不限于乙酰氨基或新戊酰氨基。对随后的亲核置换反应，在吡啶并[3，2-d]嘧啶骨架的4位的互变的羟基的活化发生在步骤(f)，即通过制备相应的4-(1，2，4-三唑基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶衍生物或4-氯-吡啶并[3，2-d]嘧啶衍生物进行。4-三唑基衍生物可以通过用POCl₃或4-氯苯基二氯化磷酸酯(4-chlorophenylphosphorodichloridate)和1，2，4-三唑在合适溶剂中处理4-氧-吡啶并[3，2-d]嘧啶衍生物制得，所述溶剂例如但不限于吡啶或乙腈。4-氯衍生物可以通过用亚硫酰氯或POCl₃处理4-氧-吡啶并[3，2-d]嘧啶衍生物来制得。氯原子或三唑基在图1中标示为L。三唑基或氯原子的亲核置换反应发生在步骤(g)，即通过与通式R₂H的适当亲核剂在极性非质子溶剂中的反应进行，通式R₂H中的R₂按照通式(I)中定义。当在该方法的步骤(g)以及本文所述的其它方法的相应步骤中引入哌嗪时，需要时该哌嗪-1-基取代基上的仲氮原子与合适的羧酸或硫代-羧酸氯化物或磺酰基氯R₅Cl在室温下在如吡啶的溶剂中进行偶合。能适用于这种方法的步骤(g)以及本文描述的其它方法的相应步骤的市售的N-烷基哌嗪、N-芳基哌嗪和N-烷基芳基哌嗪的代表性但非限制性的例子包括：1-环己基哌嗪，1-环戊基哌嗪，1-(2，6-二氯苄基)哌嗪，1-(3，4-二氯苯基)哌嗪，1-[2-(二甲基氨基)-乙基]哌嗪，1-[3-(二甲基-氨基)丙基]哌嗪，1-(3，4-二甲基苯基)哌嗪，1-(2-乙氧基乙基)哌嗪，1-异丁基哌嗪，1-(1-甲基哌嗪-4-基-甲基)哌嗪，1-(2-硝基-4-三氟甲基苯基)哌嗪，1-(2-苯氧基乙基)哌嗪，1-(1-苯基乙基)哌嗪，2-(哌嗪-1-基)乙酸乙酯，2-(哌嗪-1-基)乙酸N-甲基-N-苯基酰胺，2-(哌嗪-1-基)乙酸N-(2-噻唑基)酰胺，2-[2-(哌嗪-1-基)乙基]-1，3-二氧戊环-3-(1-哌嗪基)丙腈，1-[(2-吡啶基)-甲基]哌嗪和1-噻唑-2-基-哌嗪。在最后步骤(h)中，氨基保护基通过使用标准裂解条件如酸水解或碱水解来裂解。

图2示出制备通式(I)的2，4，6-三取代的吡啶并(3，2-d)嘧啶衍生物的第二种方法的示意图，其中在2位的取代基是氨基，以及其2位的取代基是N-保护的氨基如乙酰氨基和/或其中4位的取代基是羟基、氯或三唑基的中间体。步骤(a)中，使6-氯-2-氰基-3-硝基吡啶进行钯催化的反应，例如但不限于与芳基硼酸的Suzuki反应，产生相应的二芳基衍生物，或者与端烯或端炔的Heck反应，导致形成烯基或炔基衍生物。3-硝基在步骤(b)中或催化还原(如通过使用铂或钯在氢气氛中进行)或化学还原(如通过使用铁或者锡在酸性条件下进行)。导致形成吡啶并[3，2-d]嘧啶骨架的闭环反应在步骤(c)中发生，即通过用闭环试剂对6-R3-取代的-2-氰基-3-氨基吡啶中间体进行处理，所述闭环试剂例如但不限于，氯甲脒或胍。4-氨基可以在酸性条件或者在碱性条件下进行水解，产生2-氨基-6-R3-吡啶并[3，2-d]嘧啶-4(3H)酮。步骤(e)中，2位的氨基，例如分别通过与乙酸酐或新戊酰酐在作为溶剂的吡啶中反应，受到新戊酰基(图2中未示出)或乙酰基的保护，因此而在2位引入N-保护的氨基，例如但不限于乙酰氨基或新戊酰氨基。对随后的亲核置换反应，在吡啶并[3，2-d]嘧啶骨架的4位的互变的羟基的活化发生在步骤(f)，即通过制备相应的4-(1，2，4-三唑基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶衍生物或4-氯-吡啶并[3，2-d]嘧啶衍生物进行。4-三唑基衍生物可以通过用POCl₃或4-氯苯基二氯化磷酸酯(4-chlorophenyl phosphorodichloridate)和1，2，4-三唑在适当溶剂中处理4-氧-吡啶并[3，2-d]嘧啶衍生物来制得，所述溶剂例如但不限于吡啶或乙腈。4-氯衍生物可以通过用亚硫酰氯或POCl₃处理4-氧-吡啶并[3，2-d]嘧啶衍生物来制得。三唑基或氯原子在图2中标示为L。三唑基或氯原子的亲核置换反应发生在步骤(g)，即通过与通式R₂H的适当亲核剂在极性非质子溶剂中的反应进行，通式R₂H中的R₂按照通式(I)中定义。最后的步骤(h)中，氨基保护基通过使用标准解离条件如酸水解或碱水解来解离。或者，在步骤(i)，通过2-氨基-6-R₃-取代的-吡啶并[3，2-d]嘧啶用合适的烷基胺、芳基胺或烷基芳基胺在适量1，1，1，3，3，3-六甲基二硅氮烷试剂存在下处理，烷基氨基，芳基氨基或烷基芳基氨基R₂可以直接引入吡啶并[3，2-d]嘧啶骨架的4位。

图3示出制备通式(I)的2，4，6-三取代的吡啶并(3，2-d)嘧啶中间体的方法的示意图，以及其4位的取代基是羟基、氯或三唑基的中间体。步骤(a)中，使6-氯-2-氰基-3-硝基吡啶进行钯催化的反应，例如但不限于与芳基硼酸的Suzuki反应，产生相应的二芳基衍生物，或者与端烯或端炔的Heck反应，导致形成烯基或炔基衍生物。步骤(b)中，3-硝基或催化还原(如通过使用铂或钯在氢气氛中进行)或化学还原(如通过使用铁或者锡在酸性条件下进行)，同时氰基发生水解成为羧酰胺官能团。2-R₁-取代的-吡啶并[3，2-d]嘧啶骨架的形成发生在步骤(c)，即通过或用原酸酯(例如但不限于，原甲酸三乙酯)或用酰基氯处理6-R₃-取代的-2-羧酰氨基-3-氨基吡啶衍生物，然后用如氢氧化钠的碱处理进行。对随后的亲核置换反应，在吡啶并[3，2-d]嘧啶骨架的4位的互变的羟基的活化发生在步骤(d)，即通过制备相应的4-氯-吡啶并[3，2-d]嘧啶衍生物或相应的4-(1，2，4-三唑基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶衍生物进行。三唑基衍生物可以通过用POCl₃或4-氯苯基二氯化磷酸酯和1，2，4-三唑在适当溶剂中处理4-氧-吡啶并[3，2-d]嘧啶衍生物来制得，所述溶剂例如但不限于吡啶或乙腈。4-氯衍生物可以通过用亚硫酰氯或POCl₃处理4-氧-吡啶并[3，2-d]嘧啶衍生物进行。4位的三唑基或氯原子在图3中标示为L。氯原子或1，2，4-三唑基部分的亲核置换发生在步骤(e)，即通过与通式R₂H的适当亲核剂在极性质子或非质子溶剂中的反应进行，通式R₂H中的R₂按照通式(I)中定义。

图4示出制备通式(I)的2，4，6-三取代的吡啶并(3，2-d)嘧啶中间体的另一种方法的示意图，以及其2位和4位的取代基是羟基或氯的中间体。步骤(a)中，使6-氯-氰基-S-硝基吡啶进行钯催化的反应，例如但不限于与芳基硼酸进行Suzuki反应，产生相应的二芳基衍生物，或者与端烯或端炔的Heck反应，导致形成烯基或炔基衍生物。步骤(b)中，3-硝基或催化还原(如通过使用铂或钯在氢气氛中进行)或化学还原(如通过使用铁或者锡在酸性条件下进行)，同时氰基发生水解成为羧酰胺官能团。导致形成吡啶并[3，2-d]嘧啶骨架的闭环反应在步骤(c)中发生，即通过6-R₃-取代的-2-羧酰氨基-3-氨基吡啶衍生物或用碳酰氯衍生物在非质子溶剂中处理或者用碳酸酯(例如但不限于：碳酸二甲基酯碳酸二乙酯)在质子或非质子溶剂中处理进行。对随后的亲核置换反应，在吡啶并[3，2-d]嘧啶骨架的2位和4位的互变的羟基的活化发生在步骤(d)，即通过制备相应的2，4-二氯-吡啶并[3，2-d]嘧啶衍生物，例如通过4-氧-吡啶并[3，2-d]嘧啶衍生物用亚硫酰氯或POCl₃处理。4位的氯原子的选择性亲核置换发生在步骤(e)，即通过与通式R₂H的适当亲核剂在极性质子或非质子溶剂中的反应进行。步骤(f)中，2-氯衍生物用通式R₁H的合适亲核剂在极性质子或非质子溶剂中于适当温度下处理，以获得所需的2，4，6-三取代的衍生物。

图5示出制备通式(I)的2，4，7-三取代的吡啶并(3，2-d)嘧啶衍生物的第一种方法的示意图，其中在2位的取代基是氨基，以及其2位的取代基是N-保护的氨基如乙酰氨基和/或其中4位的取代基是羟基、氯或三唑基的中间体。5-氯-2-氰基-3-硝基吡啶的硝基首先在步骤(a)中或催化还原(如通过使用铂或钯在氢气氛中进行)或化学还原(如通过使用铁或者锡在酸性条件下进行)。导致形成吡啶并[3，2-d]嘧啶骨架的闭环反应在步骤(b)中发生，即通过用闭环试剂处理5-氯-2-氰基-3-氨基吡啶进行，所述闭环试剂例如但不限于氯甲脒或胍。然后在步骤(c)，在含水酸性条件下的水解产生2-氨基-7-氯-吡啶并[3，2-d]嘧啶-4(3H)酮。步骤(d)中，7位的氯原子用作对各种钯催化反应，例如但不限于Suzuki反应(用芳基硼酸处理2-氨基-7-氯-吡啶并[3，2-d]嘧啶-4(3H)酮，产生二芳基衍生物)和Heck反应(用宽泛的端烯或端炔处理2-氨基-7-氯-吡啶并[3，2-d]嘧啶-4(3H)酮，因而产生烯基或炔基的化合物)的离去基团。步骤(e)中，2位的氨基通过例如与乙酸酐或新戊酰酐在作为溶剂的吡啶中反应，受到新戊酰基(图1中未示出)或乙酰基的保护，因此而在2位引入N-保护的氨基，例如但不限于乙酰氨基或新戊酰氨基。对随后的亲核置换反应，在吡啶并[3，2-d]嘧啶骨架的4位的互变的羟基的活化发生在步骤(f)，即通过制备相应的4-(1，2，4-三唑基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶衍生物或4-氯-吡啶并[3，2-d]嘧啶衍生物。4-三唑基衍生物可以通过4-氧-吡啶并[3，2-d]嘧啶衍生物用POCl₃或4-氯苯基二氯化磷酸酯和1，2，4-三唑在适当溶剂例如但不限于吡啶或乙腈中处理制得。4-氯衍生物可以通过4-氧-吡啶并[3，2-d]嘧啶衍生物用亚硫酰氯或POCl₃处理制得。氯原子或三唑基在图5中标示为L。三唑基或氯原子的亲核置换发生在步骤(g)，即通过与通式R₂H的亲核剂在极性质子溶剂中反应制得，通式R₂H中的R₂按照通式(I)定义。在最后步骤(h)中，氨基保护基通过使用标准裂解条件如酸水解或碱水解来裂解。

图6示出制备通式(I)的2，4，7-三取代的吡啶并(3，2-d)嘧啶衍生物的第二种方法的示意图，其中在2位的取代基是氨基，以及其2位的取代基是N-保护的氨基如乙酰氨基和/或其中4位的取代基是羟基、氯或三唑基的中间体。步骤(a)中，使5-氯-2-氰基-3-硝基吡啶进行钯催化的反应，例如但不限于与芳基硼酸进行Suzuki反应，产生相应的二芳基衍生物，或者与端烯或端炔的Heck反应，导致形成烯基或炔基衍生物。3-硝基在步骤(b)中，或催化还原(如通过使用铂或钯在氢气氛中进行)或化学还原(如通过使用铁或者锡在酸性条件下进行)。导致形成吡啶并[3，2-d]嘧啶骨架的闭环反应在步骤(c)中发生，即通过用闭环试剂处理5-R₄-取代的-2-氰基-3-氨基吡啶中间体进行，所述闭环试剂例如但不限于氯甲脒或胍。4-氨基或在酸性条件或在碱性条件下水解，产生2-氨基-7-R₄-吡啶并[3，2-d]嘧啶-4(3H)酮。步骤(e)中，2位的氨基例如通过与乙酸酐或新戊酰酐(pivaloyl anhydride)在作为溶剂的吡啶中反应，受到新戊酰基(图2中未示出)或乙酰基的保护，因此而在2位引入N-保护的氨基，例如但不限于乙酰氨基或新戊酰氨基。对随后的亲核置换反应，在吡啶并[3，2-d]嘧啶骨架的4位的互变的羟基的活化发生在步骤(f)，即通过制备相应的4-(1，2，4-三唑基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶衍生物或4-氯-吡啶并[3，2-d]嘧啶衍生物。4-三唑基衍生物可以通过4-氧-吡啶并[3，2-d]嘧啶衍生物用POCl₃或4-氯苯基二氯化磷酸酯和1，2，4-三唑在合适溶剂，例如但不限于吡啶或者乙腈中处理制得。4-氯衍生物可以通过4-氧-吡啶并[3，2-d]嘧啶衍生物用亚硫酰氯或POCl₃处理制得。三唑基或氯原子在图6中标示为L。三唑基或氯原子的亲核置换发生在步骤(g)，即通过与通式R2H的亲核剂在极性质子溶剂中反应制得，通式R₂H中的R₂按照通式(I)定义。在最后步骤(h)中，氨基保护基通过使用标准裂解条件如酸水解或碱水解来裂解。或者，在步骤(i)，通过2-氨基-7-R₄-取代的-吡啶并[3，2-d]嘧啶用合适的烷基胺、芳基胺或烷基芳基胺在适量1，1，1，3，3，3-六甲基二硅氮烷试剂存在下处理，烷基氨基，芳基氨基或烷基芳基氨基R₂可以直接引入吡啶并[3，2-d]嘧啶骨架的4位。

图7示出制备通式(I)的2，4，7-三取代的吡啶并(3，2-d)嘧啶中间体的方法的示意图，以及其4位的取代基是羟基、氯或三唑基的中间体。步骤(a)中，使5-氯-2-氰基-3-硝基吡啶进行钯催化的反应，例如但不限于与芳基硼酸进行Suzuki反应，产生相应的二芳基衍生物，或者与端烯或端炔的Heck反应，导致形成烯基或炔基衍生物。步骤(b)中，3-硝基或催化还原(如通过使用铂或钯在氢气氛中进行)或化学还原(如通过使用铁或者锡在酸性条件下进行)，同时氰基水解为羧酰胺官能团。形成2-R₁-取代的-吡啶并[3，2-d]嘧啶骨架在步骤(c)中发生，即通过5-R₄-取代的-2-羧酰氨基-3-氨基吡啶衍生物或用原酸酯(例如但不限于原甲酸三乙酯)或者用酰基氯处理，然后用如氢氧化钠的碱处理。对随后的亲核置换反应，在吡啶并[3，2-d]嘧啶骨架的4位的互变的羟基的活化发生在步骤(d)，即通过制备相应的4-氯-吡啶并[3，2-d]嘧啶衍生物或相应的4-(1，2，4-三唑基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶衍生物。三唑基衍生物可以通过4-氧-吡啶并[3，2-d]嘧啶衍生物用POCl₃或4-氯苯基二氯化磷酸酯和1，2，4-三唑在适当溶剂，例如但不限于吡啶或乙腈中处理制得。4-氯衍生物可以通过4-氧-吡啶并[3，2-d]嘧啶衍生物用亚硫酰氯或POCl₃处理制得。4位的三唑基或氯原子在图7中标示为L。氯原子或1，2，4-三唑基部分的亲核置换发生在步骤(e)，即通过与通式R2H的亲核剂在极性质子或非质子溶剂中反应制得，通式R₂H中的R₂按照通式(I)定义。

图8示出制备通式(I)的2，4，7-三取代的吡啶并(3，2-d)嘧啶中间体的另一种方法的示意图，以及其2位和4位的取代基是羟基或氯的中间体。步骤(a)中，使5-氯-2-氰基-3-硝基吡啶进行钯催化的反应，例如但不限于与芳基硼酸进行Suzuki反应，产生相应的二芳基衍生物，或者与端烯或端炔的Heck反应，导致形成烯基或炔基衍生物。步骤(b)中，3-硝基或催化还原(如通过使用铂或钯在氢气氛中进行)或化学还原(如通过使用铁或者锡在酸性条件下进行)，同时氰基水解为羧酰胺官能团。导致形成吡啶并[3，2-d]嘧啶骨架的闭环反应在步骤(c)中发生，即通过5-R₄-取代的-2-羧酰氨基-3-氨基吡啶衍生物或用碳酰氯衍生物在合适溶剂中处理或用碳酸酯(例如但不限于，碳酸二甲酯或碳酸二乙酯)在质子或非质子溶剂中处理进行。对随后的亲核置换反应，在吡啶并[3，2-d]嘧啶骨架的2位和4位的互变的羟基的活化发生在步骤(d)，即通过制备相应的2，4-二氯-吡啶并[3，2-d]嘧啶衍生物，如通过4-氧-吡啶并[3，2-d]嘧啶衍生物用亚硫酰氯或POCl₃处理制得。4位的氯原子的选择性亲核置换发生在步骤(e)，即通过与通式R₂H的亲核剂在极性质子或非质子溶剂中于适当温度下的反应制得。步骤(f)中，2-氯衍生物用通式R₁H的合适亲核剂在极性质子或非质子溶剂中于适当温度下处理，以获得所需的2，4，7-三取代的衍生物。

在另一个特定实施方式中，本发明涉及一组吡啶并(3，2-d)嘧啶衍生物，以及包含这种吡啶并(3，2-d)嘧啶衍生物为活性成分的药物组合物，所述衍生物具有上面的通式(I)并且可以是药学上可接受的盐形式。后者包括任何治疗活性的无毒性的加成盐，具有通式(I)的化合物能与成盐试剂形成所述的加成盐。这种加成盐可以方便地通过用合适的成盐酸或碱处理本发明的吡啶并(3，2-d)嘧啶衍生物获得。例如，具有碱性的吡啶并(3，2-d)嘧啶衍生物通以其游离碱形式用适量的合适酸按照常规方法进行处理，转化为相应的治疗活性的无毒的酸加成盐。合适的成盐的酸的例子包括，例如，能形成盐的无机酸，例如但不限于：氢卤化物(如，氢氯化物和氢溴化物)，硫酸盐，硝酸盐，磷酸盐，二磷酸盐，碳酸盐，碳酸氢盐等；能形成盐的有机单羧酸或二羧酸，例如，乙酸盐，丙酸盐，羟基乙酸盐，2-羟基丙酸盐，2-氧丙酸盐，乳酸盐，丙酮酸盐，草酸盐，丙二酸盐，琥珀酸盐，马来酸盐，富马酸盐，苹果酸盐，酒石酸盐，柠檬酸盐，甲磺酸盐，乙磺酸盐，苯甲酸盐，2-羟基苯甲酸盐，4-氨基-2-羟基苯甲酸盐，苯磺酸盐，对-甲苯磺酸盐，水杨酸盐，对-氨基水杨酸盐，pamoate，酒石酸氢盐，樟脑磺酸盐，乙二胺四乙酸盐，1，2-乙二磺酸盐，富马酸盐，葡庚糖酸盐，葡糖酸盐，谷氨酸盐，己基间苯二酚盐，羟基萘甲酸盐，羟基乙磺酸盐，扁桃酸盐，甲基硫酸盐，泛酸盐，硬脂酸盐，以及源自以下酸的盐：乙二酸，丙二酸，丁二酸，(Z)-2-丁二酸，(E)2-丁二酸，2-羟基丁二酸，2，3-二羟基丁二酸，2-羟基-1，2，3-丙烷三羧酸和环己烷氨基磺酸等。

具有酸性能的通式(I)的吡啶并(3，2-d)嘧啶衍生物可以按照类似的方式转化为相应的治疗活性的无毒性的碱加成盐形式。合适的成盐的碱的例子包括，例如，无机碱，如金属氢氧化物，例如但不限于：如钙、锂、镁、钾和钠或锌的碱金属和碱土金属的氢氧化物，产生相应的金属盐；有机碱，例如但不限于：氨，烷基胺，苄星(benzathine)，羟基胺(hydrabamine)，精氨酸，赖氨酸，N，N′-二苄基乙二胺，氯普鲁卡因(chloroprocaine)，胆碱，二乙醇胺，乙二胺，N-甲基葡糖胺，普鲁卡因等。

用适当的成盐酸或碱处理本发明的通式(I)的吡啶并(3，2-d)嘧啶衍生物的反应条件类似于涉及同样的酸或碱的标准条件，但是不同的分别具有碱性质或酸性质的有机化合物。考虑到所述吡啶并(3，2-d)嘧啶衍生物在药物组合物中的用途或者在制备用于治疗特定疾病的药物中的用途，宜设计药学上可接受的盐，即，选择成盐的酸或碱，以提供本发明的吡啶并(3，2-d)嘧啶衍生物高水溶性，低毒性，高稳定性和/或低分解率。

本发明还提供了通式(I)表示的吡啶并(3，2-d)嘧啶衍生物或其药学上可接受的盐或其溶剂合物作为生物活性成分即活性成分的用途，特别是用作药物或诊断试剂，或用于制备药物或诊断试剂盒。具体地，所述药物可用于预防或治疗选自以下的病理病症：

-免疫紊乱，特别是器官和细胞移植排异，以及自身免疫紊乱，

-心血管疾病，

-中枢神经系统的疾病，

-TNF-α-相关的疾病，

-病毒疾病，

-由磷酸二脂酶-4活性介导的疾病，和

-细胞增殖紊乱。

下面详细描述所述用途涉及的病理病症和疾病，相应的预防或治疗的方法。关于本发明所述的任何一种用途可限于非医疗用途(如，化妆品组合物中)，非治疗用途，非诊断用途，非人的用途(如，在兽药组合物中)，或排它性体外用途，或者远离动物的细胞用途。

本发明还涉及一种药物组合物，该组合物包含：

(a)通式(I)表示的一种或多种吡啶并(3，2-d)嘧啶衍生物，和

(b)一种或多种药学上可接受的载体。

在另一个实施方式中，本发明提供了通式(I)表示的一种或多种吡啶并(3，2-d)嘧啶衍生物与一种或多种生物活性药物的组合，优选是协同组合，所述一种或多种生物活性药物优选选自免疫抑制药和/或免疫调节药，抗肿瘤药和抗病毒药。在本领域中，通常可以通过使用Chou等人在Adv.Enzyme Reg.(1984)22：27中描述的中值作用原理，对两种独立的药物之间的相互作用进行定量分析，来评价药物组合的协同作用。简要来说，该原理描述了可以使用下式定义的组合指数(下文称为CI)对两种药物之间的相互作用(协同作用、加和作用、拮抗作用)进行量化：

${\mathrm{CI}}_x=\frac{{\mathrm{ED}}_x^{1c}}{{\mathrm{ED}}_x^{1a}}+\frac{{\mathrm{ED}}_x^{2c}}{{\mathrm{ED}}_x^{2a}}$

其中ED_x是第一药物或相应的第二药物单独使用(1a，2a)，或者与第二药物或相应的第一药物组合使用的时候(1c，2c)，得到特定效果所需的量。根据CI<1，CI＝1或CI>1，所述第一药物和第二药物分别具有协同效果、加和效果或拮抗效果。在下文中将会更详细地解释，该原理可应用于许多所需的效果，例如但不限于抗移植物排斥的活性，抗免疫抑制活性或抗免疫调节活性，或者抗细胞增殖活性。

例如，本发明涉及具有抗免疫抑制或抗免疫调节的协同效果的药物组合物或组合制剂，其包含：

(a)一种或多种免疫抑制药和/或免疫调节药，

(b)至少一种通式(I)表示的吡啶并(3，2-d)嘧啶衍生物，

(c)任选的一种或多种药物赋形剂或药学上可接受的载体，

它们同时、独立或依次用于治疗或预防自身免疫疾病和/或移植物排斥。

适用于本发明的协同组合物或组合制剂的免疫抑制药属于一种众所周知的治疗剂种类。它们优选选自环胞霉素A、取代的黄嘌呤(例如己酮可可碱之类的甲基黄嘌呤)，达曲班，西罗莫司，他克莫司，雷帕霉素(及其下文所述的衍生物)，来氟米特(或其主要的活性代谢产物A771726，或其被称为来氟米特的类似物)，霉酚酸及其盐(包括市售的商品名为

的钠盐)，肾上腺皮质类固醇，咪唑硫嘌呤，布喹那，胍立莫司，6-巯基嘌呤，咪唑立宾，氯喹，羟基-氯喹和免疫抑制性质的单克隆抗体(例如依那西普，英夫利昔单抗或kineret)。本发明含义范围内的肾上腺皮质类固醇主要包括糖皮质激素，例如但不限于环丙奈德，去氧皮质酮，氟氢可的松，氟甲氧缩松，氢化可的松，萘非可特，普西缩松，替莫贝松，替泼尼旦，地塞米松，甲基强的松龙，氨甲喋呤，强的松，强的松龙，氟羟强的松龙及其药学上可接受的盐。本文所述的雷帕霉素衍生物包括O-烷基化的衍生物，具体来说是9-脱氧雷帕霉素，26-二氢雷帕霉素，40-O-取代的雷帕霉素和28，40-O，O-二取代的雷帕霉素(见述于美国专利第5,665,772号)，例如40-O-(2-羟基)乙基雷帕霉素-也称为SDZ-RAD-，PEG化的(pegylated)雷帕霉素(见述于美国专利第5,780,462号)，7-脱甲基雷帕霉素的醚(见述于美国专利第6,440,991号)和SDZ-RAD的聚乙二醇质(见述于美国专利第6,331,547号)。

适用于包含在本发明的协同免疫调节药物组合物或组合制剂的免疫调节药优选选自乙酰吗喃，氨普立糖，布西拉明，二甲氨丙醇，地替卡钠，咪喹莫特，lnosine Pranobex，干扰素-β，干扰素-γ，磨茹多糖，左旋咪唑，lisophylline，匹多莫德，罗莫肽，platonin，丙考达唑，丙帕锗，thymomodulin，胸腺喷丁和乌苯美司。

本发明的药物组合物或组合制剂抗免疫抑制或抗免疫调节的协同活性可以很容易地通过一种或多种淋巴细胞活性测试来测定。通常活性是通过淋巴细胞增殖测定的。因此增殖的抑制总是意味着在所采用的试验条件下的免疫抑制。具有不同的对淋巴细胞活化的刺激，具体来说是：

a)不同种类的淋巴细胞在所谓的淋巴细胞培养试验中的共培养(混合的淋巴细胞反应，下文中称为MLR)：表达不同的次要和主要HLA-DR型抗原(同种抗原)的淋巴细胞彼此非特异性激活；

b)CD3试验，其中通过附加的抗体(OKT3)使T淋巴细胞活化。这种抗体对位于淋巴细胞膜内的具有共刺激功能的CD3分子起反应。OKT3和CD3之间的相互作用造成T细胞活化，这种活化是通过Ca²+/钙调节蛋白/神经钙蛋白体系进行的，可以被例如环胞霉素A(下文称为CyA)抑制；

c)CD28试验，其中T淋巴细胞的特异性活化通过外加的针对CD28分子的抗体完成，所述CD28分子也位于淋巴细胞膜上，输送强的共刺激信号。这种活化是依赖于Ca²⁺的，因此不会被CyA抑制。

本发明吡啶并(3，2-d)嘧啶衍生物的免疫抑制或免疫调节活性和包含这些化合物的协同作用的测定优选是基于在体外试验中对一种或多种、优选至少三种淋巴细胞活化的测定，更优选包括上述MLR测试，CD3试验和CD28试验中的至少一种。较佳的是，所用体外试验中的淋巴细胞活化包括针对两种不同的分化抗原簇的至少两种试验，所述分化抗原簇优选属于这些簇的相同通用类型，更优选属于I类跨膜蛋白。较佳的是，所用的淋巴细胞活化体外试验包括针对两种不同分化簇的至少两种试验，所述分化簇优选属于这些簇的同一通用类型，更优选属于I类跨膜蛋白。可任选以其它淋巴细胞激活体外测试为基础测定免疫抑制或免疫调节活性，例如通过TNF-α试验或IL-1试验或IL-6试验或IL-10试验或IL-12试验或属于这些簇的其它通用类型，更优选属于II类跨膜蛋白(例如但不限于CD69、CD71或CD134)的试验。

可通过本文上述的中值作用分析方法(median effect analysis method)评估协同作用。按照本领域的标准操作，这种测试可以，(例如)利用诸如流式细胞仪的设备，这种设备能在分析末期分离和分选大量细胞亚类，再进一步分析这些纯化的批次。

通过在例如Lin等(Transplantation(1997)63：1734-1738)所述的全血试验(下文称为WBA)中进行一种或多种白细胞激活测试不难测定本发明药物组合物在预防或治疗移植物排斥中的协同活性。本文采用的WBA是一种利用全血中存在的淋巴细胞在体外进行的淋巴增殖试验，所述全血体内采集自已体内给予本发明和任选其它免疫抑制药物的动物。因此，该试验反映了通过体外读出试验(read-out assay)评估的这些物质的体内作用。可通过本文上述中值作用分析方法评估协同作用。可在利用各种体内动物器官移植模型，所述模型根据所用供体和受体的种类以及所移植器官的性质而受不同免疫原性的强烈影响。因此，可采用移植器官的存活时间来检测对免疫反应的抑制。

根据本发明的具有抗免疫抑制或抗免疫调节的协同活性的药物组合物或组合制剂可根据预期的应用和制剂的预期效果包含很宽含量范围的式(1)的吡啶并(3，2-d)嘧啶衍生物。通常所述组合制剂中吡啶并(3，2-d)嘧啶衍生物的含量为0.1-99.9重量％，优选1-99重量％，更优选约5-95重量％。本发明还涉及一种具有抗细胞增殖的协同作用的组合物或组合制剂，其包含：

(a)一种或多种抗肿瘤药，

(b)至少一种通式(I)表示的吡啶并(3，2-d)嘧啶衍生物，

(c)任选的一种或多种药物赋形剂或药学上可接受的载体，

它们同时、独立或依次用于治疗或预防细胞增殖性疾病。

适于包含在本发明的协同抗增殖药物组合物或组合制剂中的抗肿瘤药优选选自：半边莲属碱，烷基化剂(包括但不限于烷基磺酸酯，氮丙啶，氮杂环丙烷，甲基蜜胺，氮芥和亚硝基脲)，抗生素，抗代谢物(包括但不限于叶酸类似物，嘌呤类似物和嘧啶类似物)，酶，干扰素和铂络合物。更具体的例子包括阿西维辛；盐酸阿柔比星；阿考达唑；阿克罗宁；阿多来新；阿地白介素；六甲密胺；安波霉素；双氢胺蒽醌；氨鲁米特；安吖啶；阿那曲唑；安曲霉素；门冬酰胺酶；曲林菌素；氮杂胞苷；阿扎替派；阿佐霉素；巴马司他；苯佐替派；比卡鲁胺；比生群；双奈法德；比折来新；博来霉素；布喹那；溴匹立明；白消安；放线菌素C；卡普睾酮；卡醋胺；卡贝替姆；卡铂；卡莫司汀；卡柔比星；卡折来新；西地芬戈；苯丁酸氮芥；西罗霉素；顺铂；顺铂；克立那托；环磷酰胺；阿糖胞苷；达卡巴嗪；放线菌素D；柔红霉素；地西他滨；右奥马铂；地扎胍宁；地吖醌；多西他赛；多柔比星；屈洛昔芬；屈洛昔芬；达佐霉素；依达曲沙；依氟鸟氨酸；依沙芦星；恩洛铂；恩普氨酯；依匹哌啶；表柔比星；表柔比星；依索比星；雌莫司汀；依他硝唑；乙碘油I¹³¹；鬼臼乙叉甙；氯苯乙嘧胺；法倔唑；法扎拉滨；芬维A胺；氟尿苷；氟达拉滨；氟尿嘧啶；氟西他滨；磷喹酮；福司曲星；吉西他滨；Gold 198；羟基脲；伊达比星；异环磷酰胺；伊莫福新；干扰素α-2a；干扰素α-2b；干扰素α-n1；干扰素α-n3；干扰素β-1a；干扰素γ-1b；异丙铂；伊立替康；伊立替康；来曲唑；醋酸亮丙瑞林；利阿唑；洛美曲索；洛莫司汀；洛莫司汀；洛莫司汀；美登素；氧氮芥；甲地孕酮；美仑孕酮；美法仑；美诺立尔；巯基嘌呤；甲氨蝶呤；甲氨蝶呤；美妥替哌；米丁度胺；mitocarcin；丝裂红素；米托洁林；米托马星；丝裂霉素；米托司培；米托坦；米托蒽醌；霉酚酸；诺考达唑；诺拉霉素；奥马铂；奥昔舒仑；紫杉醇；培门冬酶；培利霉素；溴新斯的明；培洛霉素；培磷酰胺；哌泊溴烷；哌泊舒凡；吡罗蒽醌；普卡霉素；普洛美坦；卟菲尔钠；泊非霉素；泼尼莫司汀；丙卡巴肼；嘌呤霉素；吡唑呋喃菌素；利波腺苷；罗谷亚胺；沙芬戈；司莫司汀；辛曲秦；sparfosate；司帕霉素；锗螺胺；螺莫司汀；螺铂；链黑菌素；链佐星；氯化锶89；磺氯苯脲；他利霉素；紫杉烷；紫杉烷；tecogalan；替加氟；替洛蒽醌；替洛蒽醌；鬼臼噻吩甙；替罗昔隆；睾内酪；硫咪嘌呤；硫鸟嘌呤；塞替派；噻唑呋林；替拉扎明；托泊替康；托瑞米芬；曲托龙；曲西立滨；三甲曲沙；曲普瑞林；妥布氯唑；乌拉莫司汀；乌瑞替派；伐普肽；维替泊芬；长春碱；长春新碱；长春地辛；长春匹定；长春甘酯；长春罗新；长春瑞滨；长春罗定；长春利定；伏氯唑；折尼铂；净司他丁；佐柔比星；以及它们药学上可接受的盐。

其它合适的抗肿瘤化合物包括维生素D3衍生物，例如但不限于20-表-1，25二羟基维生素D3；5-乙炔基尿嘧啶；阿比特龙；阿柔比星；acylfulvene；adecypenol；阿多来新；阿地白介素；ALL-TK拮抗物；六甲蜜胺；氨莫司汀；磺胺异噁唑；氨磷汀；氨基乙炔丙酸；氨柔比星；安吖啶；阿那格雷；阿那曲唑；穿心莲内酯；血管生成抑制剂；拮抗剂D；拮抗剂G；安雷利克斯；抗侧背化形态发生蛋白1；抗雄激素物质，例如但不限于贝诺睾酮，塞奥罗奈，环丙孕酮，地马孕酮，奥生多龙，托普雄酮，扎诺特隆和它们的药学上可接受的盐；抗雌激素物质，例如但不限于氯甲孕酮；地马孕酮；萘福昔定；硝米芬；雷洛昔芬；他莫昔芬；托瑞米芬；曲沃昔芬和它们药学上可接受的盐；抗瘤物；反义寡核苷酸；阿非迪霉素；凋亡基因调节剂；凋亡调节剂；脱嘌呤核酸；ara-CDP-DL-PTBA；精氨酸脱氨基酶；asulacrine；阿他美坦；阿莫司汀；axinastatin；阿扎司琼；阿扎毒素；阿扎毒素；浆果赤霉素III衍生物；balanol；巴马司他；BCR/ABL拮抗剂；苯佐利定；本酰基十字孢碱；β-内酰胺衍生物；β-alethine；betaclamycin B；白桦脂酸；bFGF抑制剂；比卡鲁胺；比生群；bisaziridinylspermine；双奈法德；bistratene A；比折来新；breflate；溴匹立明；布度钛；buthionine sulfoximine；卡泊三醇；卡泊三醇C；喜树碱衍生物；金丝雀痘IL-2；卡培他滨；羧酰胺-氨基-三唑；羧酰氨三唑；CaRestM3；CARN 700；软骨衍生的抑制剂；卡折来新；酪蛋白激酶抑制剂；酪蛋白激酶；杀菌肽B；西曲瑞克；二氢卟酚；氯代喹噁啉磺酰胺；西卡前列素；顺式卟啉；氯米芬及其类似物；克霉唑；collismycin A和B；考布他汀及其类似物；conagenin；crambescidin 816；cryptophycin及其衍生物；氯琥珀胆碱A；cyclopentanthraquinones；cycloplatam；cypemycin；阿糖胞苷；细胞溶解性因子；磷酸己烷雌酚；达昔单抗；脱氢代代宁B；地洛瑞林；dexifosfamide；右雷佐生；右维拉帕米；代代宁B；didox；二乙基降甾烷；二氢-5-氮胞苷；二氢泰素；二氧杂霉菌素；二苯基螺莫司汀；二十二(烷)醇；多拉司琼；去氧氟尿苷；屈洛昔芬；屈大麻酚；duocarmycin SA；依布硒；依考莫司汀；依地福新；依决洛单抗；依决洛单抗；乙嘧替氟；爱普列特；雌激素促效剂和拮抗剂；依西美坦；非格司亭；非那雄胺；flavopiridol；氟卓斯汀；fluasterone；fluorodaunorunicin；福酚美克；福美坦；福莫司汀；gadolinium texaphyrin；硝酸镓；加洛他滨；加尼瑞克；明胶酶抑制剂；谷胱甘肽抑制剂；hepsulfam；heregulin；六甲撑二乙酰胺；金丝桃蒽酮，；伊班膦酸；艾多昔芬；伊决孟酮；伊洛马司他；imidazoacridones；咪喹莫特；免疫促进肽；胰岛素样生长激素-1；干扰素促进剂；碘苄胍；碘阿霉素；甘薯苦醇；伊立替康；伊罗普拉；伊索拉定；isobengazole；isohomohalicondrin B；伊他司琼；jasplakinolide；kahalalide F；lamellarin-N；leinamycin；来格司亭；磨茹多糖；leptolstatin；非白血性白血病抑制因子；亮丙瑞林；左旋咪唑；利阿唑；lissoclinamide；洛铂；蚯蚓磷脂；Ionidamine；洛伐他汀；洛索立宾；勒托替康；lutetium texaphyrin；lysofylline；mannostatin A；马立马司他；马索罗酚；maspin；基质溶解抑制剂；基质金属蛋白酶抑制剂；汞溴红；美替瑞林；蛋氨酸酶；甲氧氯普胺；MIF抑制剂；米非司酮；米替福新；米立司亭；米托胍腙；二溴卫矛醇；米托萘胺；mitotoxin成纤维细胞生长因子皂草素；莫法罗汀；莫拉司亭；人绒毛膜促性腺激素单克隆抗体；莫哌达醇；mycaperoxide B；myriaporone；N-acetyldinaline；N-取代的苯酰胺；那法瑞林；那瑞替喷；纳洛酮；喷他佐辛；napavin；naphterpin；那托司亭；奈达铂；奈莫柔比星；奈立膦酸；中性肽链内切酶；尼鲁米特；nisamycin；氧化氮调节剂；一氧化二氮抗氧化剂；卡莫司汀；奥曲肽；okicenone；奥那司酮；昂丹司琼；昂丹司琼；oracin；奥沙特隆；奥沙利铂；oxaunomycin；palauamine；palmitoylrhizoxin；帕米磷酸；人参三醇；帕诺米芬；parabactin；帕折普汀；培得星；戊聚糖；喷司他丁；pentrozole；全氟溴烷；perillyl alcohol；phenazinomycin；乙酸苯酯；磷酸酶抑制剂；溶链菌；毛果芸香碱；吡柔比星；吡曲克辛；placetin A和B；纤溶酶原激活物抑制剂；丙基二吖啶酮；前列腺素J2；蛋白酶体抑制剂；蛋白激酶C抑制剂；蛋白酪氨酸磷酸酶抑制剂；嘌呤核苷磷酸化酶抑制剂；红紫素；吡唑啉吖啶；雷替曲塞；雷莫司琼；ras法尼基蛋白转化酶抑制剂；ras抑制剂；ras-GAP抑制剂；瑞替普汀；1-羟基-亚乙基-1，1-二膦酸铼186；根霉素；维胺酯；rohitukine；罗莫肽；罗喹美克；rubiginone B1；ruboxyl；saintopin；sarcophytol A；沙格司亭；西佐喃；索布佐生；sodium borocaptate；苯基乙酸钠；solverol；生长调节素结合蛋白；索纳明；膦门冬酸；spicamycin D；splenopentin；spongistatin 1；角鲨胺；干细胞分裂抑制剂；stipiamide；基质降解酶抑制剂；sulfinosine；suradista；苏拉明；苦马豆碱；他莫司汀；他莫昔芬；牛磺莫司汀；他扎罗汀；tecogalan；tellurapyrylium；端粒末端转移酶抑制剂；替莫唑胺；tetrachlorodecaoxide；tetrazomine；thaliblastine；噻可拉林；血小板生成素；胸腺法新；胸腺生成素受体激动剂；胸腺曲南；促甲状腺激素；乙基本紫红素锡；环戊二烯钛；topsentin；维甲酸；三乙酰基尿核甙；托烷司琼；妥罗雄脲；酪氨酸激酶抑制剂；tyrphostins；乌苯美司；源自泌尿生殖窦的生长抑制因子；尿激酶受体拮抗剂；variolin B；维拉雷琐；维拉雷琐；verdins；维替泊芬；vinxaltine；vitaxin；诺特隆；亚苄维；以及它们的药学上可接受的盐。

本发明化合物还可与通过因稳定微管使细胞停滞在G2-M期而起作用的抗癌药物联合给药。除了泰素(紫杉醇)，其类似物和衍生物以外，以这种机理作用的抗癌药物的其它例子包括但不限于以下市售的药物和开发中的药物：厄布洛唑，多拉司他汀，米伏布林羟乙基磺酸盐，discodermolide，altorhyrtins，spongistatins，盐酸西马多丁，epothilones desoxyepothilone，16-氮杂-epothilone，2l-氨基epothilone，21-羟基epothilone，26-氟epothilone，auristatin，soblidotin，cryptophycin，vitilevuamide，tubulysin，canadensol，矢车菊黄素，oncocidin，fijianolide，laulimalide，那可丁，nascapine，hemiasterlin，vanadocene，乙酰丙酮酸盐，monsatrol，inanocine，eleutherobins，caribaeoside，caribaeolin，软海绵素，diazonamide，taccalonolide，diozostatin，phenylahistin，myoseverin，resverastatin磷酸钠和它们的药学上可接受的盐。

通过一种或多种测试，例如但不限于检测掺入肿瘤细胞系培养物中³H-胸苷导致的放射性不难测定抗细胞增殖的药物组合物或组合制剂的协同作用。例如，可选择不同肿瘤细胞系来评估测试化合物的抗肿瘤作用，所述细胞系例如但不限于：

-RPMI1788：人外周血白细胞(PBL)高加索肿瘤(细胞)系(Caucasian tumorline)，

-Jurkat：人急性T细胞白细胞(细胞系)；

-EL4：C57BI/6小鼠淋巴瘤(细胞系)或

-THP-1：人单核细胞肿瘤(细胞)系。

根据所选择的肿瘤细胞系和本领域的通用知识，这些测试可采用各种培养基，例如：

-对于RPMI1788和THP-1：RPMI-1640+10％FCS+1％NEAA+1％丙酮酸钠+5×10⁵巯基乙醇+抗生素(G-418 0.45μg/ml)。

-对于Jurkat和EL4：RPMI 1640+10％FCS+抗生素(G-418 0.45μg/ml)。

在细胞增殖协同作用测试的一具体实施方式中，收集肿瘤细胞系，在完全培养基中制备0.27×10⁶个细胞/ml的悬浮液。向微滴定板中一式三份加入该悬浮液(150μl)。向微滴定板的细胞悬浮液中加入完全培养基(对照)或测试浓度的测试化合物(50μl)。细胞在37℃，5％CO₂中培育约16小时。加入³H-胸苷，细胞再培育8小时，然后收集，用β-计数器以每分钟计数(CPM)检测放射性。³H-胸苷细胞计数和由此检测的放射性与细胞系增殖成比例。可通过本文上述中值作用分析方法评估协同作用。

根据本发明的具有抗细胞增殖的协同活性的药物组合物或组合制剂可以根据预期的应用和预期的制剂效果包含很宽含量范围内的通式(I)的吡啶并(3，2-d)嘧啶衍生物。通常所述组合制剂中吡啶并(3，2-d)嘧啶衍生物的含量为0.1-99.9重量％，优选1-99重量％，更优选约5-95重量％。

本发明还涉及具有抗病毒感染的协同效果的药物组合物或组合制剂，其包含

(a)一种或多种抗病毒药，

(b)至少一种式(I)表示的吡啶并(3，2-d)嘧啶衍生物，和

(c)任选的一种或多种药学赋形剂或药学上可接受的载体，

它们用来同时、独立或一次用来治疗或预防病毒感染。

适合用于本发明的协同抗病毒组合物或组合制剂的抗病毒药包括例如属于本领域众所周知种类的逆转录病毒酶抑制剂，例如HIV-1IN抑制剂，核苷逆转录酶抑制剂(例如叠氮胸苷，拉米夫定，去羟肌苷，司他夫定，扎西他滨等)，非核苷逆转录酶抑制剂(例如奈韦拉平，地拉韦啶等)，其它逆转录酶抑制剂(例如foscamet sodium等)和HIV-1蛋白酶抑制剂(例如沙奎那韦，利托那韦，茚地那韦，那非那韦等)。其它合适的抗病毒药包括例如醋孟南，无环鸟苷，阿德福韦，阿洛夫定，alvircept，金刚烷胺，阿拉诺丁，阿立酮，阿替韦啶，阿夫立定，西多福韦，西潘茶碱，阿糖胞苷，地昔洛韦，二噁沙利，依度尿苷，恩韦拉登，恩韦肟，泛昔洛韦，法莫汀，非西他滨，非阿尿苷，氟尿苷，磷利酯，fosfonet，更昔洛韦，碘苷，乙氧丁酮醛，洛布卡韦，美莫汀，甲吲噻踪，喷昔洛韦，吡罗达韦，索金刚胺，索立夫定，替洛隆，曲氟尿苷，伐昔洛韦，阿糖腺苷，韦罗肟，净韦肟，吗啉胍，鬼臼毒素，ribavirine，金刚乙胺，stallimycine，匍枝青霉菌素，曲金刚胺和珍那佐酸以及它们药学上可接受的盐。

本发明的这个方面具体涉及选自以下的病毒复制的抑制：微小RNA(picorna)病毒，toga病毒，bunya病毒，正粘液病毒，副粘液病毒，杆状病毒，逆录病毒，沙粒病毒，乙肝病毒，丙肝病毒，丁型肝炎病毒，腺病毒，痘苗病毒，乳头状瘤病毒，疱疹病毒，冠状病毒，水痘-带状疱疹病毒和带状疱疹病毒，特别是人免疫缺陷症病毒(HIV)。本发明的要素组合物或组合制剂对抗病毒感染的协同活性可以通过一种或多种测试，例如但不限于Elion等人在J.Biol.Chem.(1954)208：477-488中所述的方法和Baba等人在Antimicrob.Agents Chemother.(1984)25：515-517中所述的方法，使用EC₅₀计算分级抑制浓度(下文称为FIC)很容易地确定。当对应于组合化合物FIC的最小FIC指数(例如FIC_x+FIC_y)等于1.0的时候，称该组合为加和性的；当其为1.0-0.5，则该组合称为亚协同型的，当其小于0.5的时候，该组和定义为协同性的。当最小FIC指数为1.0-2.0的时候，该组合定义为亚拮抗的，当其大于2.0时，该组合定义为拮抗的。

根据本发明的具有抗细胞增殖的协同活性的药物组合物或组合制剂可以根据预期的应用和预期的制剂效果包含很宽含量范围内的通式(I)的吡啶并(3，2-d)嘧啶衍生物。通常所述组合制剂中吡啶并(3，2-d)嘧啶衍生物的含量为0.1-99.9重量％，优选1-99重量％，更优选约5-95重量％。

本发明还涉及具有抗磷酸二酯酶-4介导的疾病的协同效果的药物组合物或组合制剂，其包含

(a)一种或多种磷酸二酯酶-4抑制剂，

(b)至少一种式(I)表示的吡啶并(3，2-d)嘧啶衍生物，和

(c)任选的一种或多种药学赋形剂或药学上可接受的载体，

它们用来同时、独立或一次用来治疗或预防磷酸二酯酶-4活性介导的疾病。

根据本发明的具有抗磷酸二酯酶-4活性介导的疾病的协同活性的药物组合物或组合制剂可根据预期的应用和制剂的预期效果包含很宽浓度范围的通式(I)的吡啶并(3，2-d)嘧啶衍生物。通常所述组合制剂中吡啶并(3，2-d)嘧啶衍生物的含量为0.1-99.9重量％，优选为1-99重量％，更优选约为5-95重量％。

合适的磷酸二酯酶抑制剂可选自吡咯烷二酮(例如但不限于麦片、RO20-1724和RS 33793)，喹唑啉酮(例如但不限于硝喹宗，CP-77059和RS-25344)，黄嘌呤衍生物(例如但不限于登布茶碱，阿罗茶碱和BRL 61063)，苯基乙基吡啶(例如但不限于CDP 840)，四氢嘧啶酮(例如但不限于atizoram)，二氮杂草衍生物(例如但不限于C1 1018)，氨基甲酸肟(例如但不限于非明司特)，萘啶酮(例如但不限于RS 17597)，苯并呋喃(例如但不限于2-锭剂-7-甲氧基-苯并呋喃-4-羧酸(3-5-二氯吡啶-4-基)-酰胺，2-苄基-7-甲氧基-苯并呋喃-4-羧酸(3-5-二氯吡啶-4-基)-酰胺，7-甲氧基-2-苯乙基-苯并呋喃-4-羧酸(3-5-二氯吡啶-4-基)-酰胺，5-(2-丁基-7-甲氧基-苯并呋喃-4-基)-四氢嘧啶-2-酮，以及苯基二氢苯并呋喃)，萘衍生物(例如但不限于T 440)，嘌呤衍生物(例如但不限于V-112294A)，咪唑烷酮，环己烷羧酸(例如但不限于ariflo)，苯酰胺(例如，但不限于吡拉米司特)，吡啶并哒嗪酮，苯并噻吩(例如但不限于硫苯司特)，衣他唑酯，S-(+)-海罂粟碱，取代的苯基化合物和取代的联苯化合物，以及吡啶并哒嗪酮。

根据本发明的药物组合物和组合制剂可口服给药或以任意其它合适的形式给药。口服给药是优选的，所述制剂可以是片剂、水分散体、可分散的粉末或颗粒，乳液，硬胶囊或软胶囊，糖浆，酏剂或凝胶的形式。所述剂型可使用本领域已知的用来制造这些药物组合物的任意方法来制备。可包括以下添加剂：甜味剂，芳香剂，着色剂，防腐剂等。下文中详细描述了载体材料和赋形剂，其可包括碳酸钙、碳酸钠、乳糖、磷酸钙或磷酸钠；成粒剂和崩解剂，粘合剂等。本发明的药学组合物或组合制剂可包含在混有任意惰性固体稀释剂或载体材料的明胶胶囊中，或者为软明胶胶囊的形式，其中所述组分与水或油介质混合。水性分散体可包含混有悬浮剂、分散剂或湿润剂的生物活性组合物或组合制剂。油分散体可包含植物油之类的悬浮剂。也可采用直肠给药，例如以栓剂或凝胶的形式进行直肠给药。根据治疗的疾病和病人的状况，还可进行注射给药(例如肌肉注射或腹膜内注射)。

用本发明的药物组合物或组合制剂预防或治疗的自身免疫疾病包括以下两种：

-全身性自身免疫疾病，例如但不限于红斑狼疮、牛皮癣、血管炎、多肌炎、硬皮病、多发性硬化、强直性脊柱炎，类风湿性关节炎和舍格伦综合症；自身免疫内分泌疾病，例如甲状腺炎；

-器官特异性自身免疫疾病，例如，但不限于爱迪生病、溶血性贫血或恶性贫血、肺出血肾炎综合症、格氏病、特发性血小板减少性紫癜，胰岛素依赖性糖尿病、青少年糖尿病、葡萄膜炎、克罗恩病、溃疡性结肠炎、天疱疮、特应性皮炎、自免疫肝病、肝夏科氏肝硬化、自身免疫肺炎、自身免疫心脏炎、重症肌无力、肾小球肾炎和天生不孕症。

本发明的药物组合物或组合制剂预防或治疗的植入物排斥包括植入的或移植的器官或细胞的排斥(包括同种移植和异种移植)，例如但不限于宿主抗移植物反应疾病。在本文中，术语“器官”表示哺乳动物、特别是人体内的所有器官或部分，例如但不限于肾、肺、骨髓、毛发、角膜、眼睛(玻璃体)、心脏、心瓣、肝脏、胰脏、血管、皮肤、肌肉、骨骼、肠或胃。在本文中，术语“排斥”表示造成移植的器官中细胞或组织死亡、或者对移植的器官或受体的功能和生存能力造成负面影响的受体或移植器官的所有反应。具体来说，这意味着急性和慢性的排斥反应。本发明还包括防止或治疗细胞移植和异种移植的排斥。异种移植的主要障碍在于，即使在会造成同种移植物排斥的T淋巴细胞活化之前，遗传免疫系统、特别是T独立B淋巴细胞和巨噬细胞就会被活化。这会造成两种剧烈的早期剂型排斥反应，分别被称为超急性排斥反应和脉管排斥。本发明解决了常规的免疫抑制药(例如环胞霉素A)对异种移植无效的问题。可通过(测定)本发明化合物在接受异种仓鼠心脏移植物的无胸腺T缺乏小鼠中阻止异种移植物排斥的能力来评估其抑制不依赖于T的异种抗体产生以及淋巴细胞激活的能力。

本发明药物组合物或组合制剂预防或治疗的细胞增殖疾病包括某种癌症的任意类型的肿瘤进展或侵袭或转移抑制，优选选自以下的疾病：肺癌、白血病、卵巢癌、肉瘤、卡波西肉瘤、脑膜瘤、结肠癌、淋巴结肿瘤、多形性成胶质细胞瘤、前列腺癌或皮肤癌。

本发明的药物组合物或组合制剂预防或治疗的CNS疾病包括认知疾病，例如痴呆症、脑缺血、外伤、癫痫、精神分裂症、慢性疼痛和精神病，例如但不限于抑郁症、社交恐怖症和强迫症。

本发明化合物或组合制剂预防或治疗的心血管疾病包括但不限于：局部缺血疾病、梗死或再灌注损伤、动脉粥样硬化和中风。

本发明化合物或组合制剂预防或治疗的TNF-α相关疾病包括以下疾病：

-脓毒性或内毒素性休克或脓毒症，特别是治疗开始时白介素-6的血清水平超过1,000pg/ml的患者；

-血管TNF-α-介导的疾病，例如但不限于：弥散性血管内凝结和川崎病(Kawasaki′s pathology)；

-在哺乳动物体内的全身、局部或特定组织类型或位置中发生的与TNF-α水平异常(本文定义为超过正常健康对象中存在的TNF-α水平至少10％和最多500％)相关和/或诱导的疾病和病症；这种组织类型包括但不限于：血液、淋巴、肝脏、肾脏、脾脏、心肌或血管、脑或脊髓白质或灰质、软骨、韧带、腱、肺、胰腺、卵巢、睾丸和前列腺。TNF-α水平异常也可局限于体内的特定区域或细胞中，例如关节、神经血管接合处(nerve blood vessel junction)和骨。这种疾病包括酒精诱导的肝炎；神经变性疾病，例如锥体束外和小脑疾病，包括皮质脊髓系统损伤；基底神经节疾病；运动机能亢进疾病，例如舞蹈症；药物诱导的运动疾病；运动功能减退疾病，例如帕金森病；脊髓小脑变性，例如脊髓性共济失调、多系统变性(包括代-克(Dejerine-Klumpke)综合征)和全身疾病(包括雷弗素姆病、abetalipoprotemia、共济失调和毛细血管扩张)；运动单位疾病，例如神经源性肌萎缩(前角细胞变性，例如肌萎缩侧索硬化、幼儿型脊髓性肌萎缩和青少年脊髓性肌萎缩)；阿耳茨海默病；韦尼克-科尔萨科夫综合征；克雅病；Hallerrorden-Spatz病；和原发性或继发性脊髓发育不良综合征；

-TNF-α和/或抗癌症化疗药物的毒性作用，特别是肿瘤治疗中与TNF-α产生相关的副作用，例如使用顺铂后；

-用辐射元素(radio-elements)对哺乳动物的组织照射后的损伤，例如但不限于辐射诱导的移植物抗宿主病；和

-无论与癌症或其它慢性疾病，例如吸收不良疾病(malabsortive disorder)、过度生理应激(excessive physical stress)、进食障碍疾患和AIDS相关的恶病质和相似的慢性消耗性疾病。

本发明化合物或组合制剂预防或治疗的磷酸二酯酶-4活性介导的疾病包括但不限于：勃起功能障碍、脓毒症和脓毒性休克。PDE-4在炎性和免疫细胞中特别丰富。通过调节cAMP水平，PDE-4能调节白细胞反应，包括单核细胞、T细胞和嗜中性白细胞的促炎作用，气道和血管平滑肌收缩以及通过腺苷酸环化酶连接的G蛋白偶联受体(例如N-甲基-D-天冬氨酸的)的神经递质经信号转导。对PDE-4抑制阻断了细胞转移(cell traffic)和细胞增殖，减少了炎性介质、细胞因子和反应性氧物质的产生。TNF-α是类风湿性关节炎、强直性脊柱炎、克罗恩病和银屑病中重要的靶标。然而，在诸如严重哮喘和晚期类风湿性关节炎的疾病中，嗜中性白细胞确实在病理学炎性过程中起到重要作用。PDE-4抑制剂能抑制多种嗜中性白细胞反应，包括IL-8、白三烯B4和超氧化物阴离子的产生以及脱粒、趋化作用和附着。此外，PDE-4抑制剂的平滑肌放松作用(例如，支气管舒张性)对于治疗哮喘非常有益。抑制PDE-4 B同种型后抑制TNF-α产生依赖于cAMP并且需要蛋白激酶A活性以免LPS-诱导的休克。因此，PDE-4 B在巨噬细胞中高度专门化的功能及其在LPS信号转导中的关键作用是本领域熟知的，从而为利用亚型选择性PDE-4抑制剂来治疗脓毒症和脓毒休克的治疗方案提供了基础。

本文所用的术语“勃起功能障碍”包括任何类型的勃起功能障碍，例如但不限于血管原性、神经原性、内分泌性和精神性阳痿(本文利用“阳痿”表示周期性或持久不能达到或维持性交的硬度足够的勃起)；佩洛尼身体应激(Peyronie′s syndrome)；阴茎异常勃起；早泄；和任何其它能干扰人类性反应三种阶段，即需要、兴奋和性欲高潮的任一种的状况、疾病或病症，而无论病因或成因。

本发明药物可用于预防性应用，即，在可以预计TNF-α水平升高的情况中或者可用于在TNF-α达到有害高水平(如本文定义的)或TNF-α水平升高时降低其水平。

在本文中，关于药物组合物和组合制剂的术语“药学上可接受的载体或赋形剂”表示任意可用来配置所述活性组成部分，即通式(I)的吡啶并(3，2-d)嘧啶衍生物以及任选的免疫抑制药或免疫调节药或抗肿瘤药或抗病毒药，以促进其向待治疗部位的施药或扩散(例如通过溶解、分散或扩散所述组合物)和/或促进其存储、运输或处理，而不会影响其效力的材料或物质。所述药学上可接受的载体可以是固体、液体或能够压缩形成液体的气体，即本发明的组合物可以以浓缩物、乳液、溶液、颗粒、尘粒、喷雾剂、气溶胶、丸剂或分料的形式适当地使用。

适用于所述药物组合物及其制剂的药物载体是本领域技术人员众所周知的。在本发明内对它们的选择没有特别的限制，但是由于本发明的吡啶并(3，2-d)嘧啶衍生物的水溶性通常较低或极低，见于预期的时间释放曲线，需要对能够有助于适当地进行配制的合适的载体组合的选择加以特别的注意。合适的药物载体包括以下添加剂，例如湿润剂、分散剂、粘着剂、粘合剂、乳化剂或表面活性剂、稠化剂、配合剂(complexing agent)、胶凝剂、溶剂、涂料、抗细菌剂和抗真菌剂(例如苯酚、山梨酸、氯代丁醇)，等渗剂(例如糖或氯化钠)等，它们符合药学惯例，即不会对哺乳动物造成永久性伤害的载体和添加剂。本发明的药物组合物可以以任意已知的方式制备，例如以一步法或多步法均匀混合、溶解、喷雾干燥、涂敷和/或掩模活性组分和选择的载体材料以及(合适的时候)表面活性剂之类的其它添加剂，也可通过微粉化制备，例如制得直径通常约为1-10微米的微球形式的药物组合物，也即制备微胶囊以控制地或持续地释放生物活性组分。

适用于本发明的药物组合物的表面活性剂是具有良好乳化性质、分散性质和/或湿润性质的非离子型、阳离子型和/或阴离子型表面活性剂。合适的阴离子型表面活性剂包括水溶性皂和水溶性合成表面活性剂。合适的皂是高级脂肪酸(C₁₀-C₂₂)的碱金属或碱土金属盐、未取代的或取代的铵盐，例如油酸或硬脂酸、或者由椰子油或动物油制得的天然脂肪酸混合物的钠盐或钾盐。合成表面活性剂包括聚丙烯酸的钠盐或钙盐；脂肪族磺酸盐和硫酸盐；磺化苯并咪唑衍生物和丸剂芳基磺酸盐。脂族磺酸盐或硫酸盐通常是以下盐的形式：碱金属盐或碱土金属盐，未取代铵盐或被包含8-22个碳原子的烷基或酰基取代的铵盐，例如木质磺酸、十二烷基磺酸、天然脂肪油得到的脂族醇硫酸盐的混合物的钠盐或钙盐，硫酸酯或磺酸酯的碱金属盐或碱土金属盐(例如月桂基硫酸钠)和磺酸的脂肪醇/环氧乙烷加合物。合适的磺酸酯化的苯并咪唑衍生物优选包含8-22个碳原子。烷基芳基磺酸盐的例子是十二烷基苯磺酸、二丁基萘磺酸、或萘磺酸/甲醛缩合产物的钠盐、钙盐或链烷醇胺盐。相应的磷酸盐也同样适用，例如磷酸酯的盐和对壬基苯酚与环氧乙烷和/或环氧丙烷的加合物或磷脂。适用于该目的的磷脂是脑磷脂或卵磷脂类的天然(源自动物或织物细胞)或合成磷脂，例如磷脂酰乙醇胺、磷脂酰丝氨酸、缩醛磷脂酰丝氨酸、溶血卵磷脂、心磷脂、二辛酰基磷脂酰胆碱、二棕榈酰基缩醛磷脂酰胆碱以及它们的混合物。

合适的非离子型表面活性剂包括分子中包含至少12个碳原子的烷基酚、脂族醇、脂肪酸、脂族胺或酰胺的聚乙氧基化和聚丙氧基化衍生物，烷基芳烃磺酸盐和二烷基磺基丁二酸盐，例如例如脂族醇和酯环醇、饱和和不饱和脂肪酸和烷基酚的聚二醇醚衍生物，所述衍生物优选包含3-10个二醇醚基团，(脂族)烃基中包含8-20个碳原子，烷基酚的烷基部分中包含6-18个碳原子。其它合适的非离子型表面活性剂是聚环氧乙烷与聚丙二醇、烷基链中包含1-10个碳原子的乙二氨基聚丙二醇的水溶性加合物，这些加合物包含20-250个乙二醇醚基团和/或10-100个丙二醇醚基团。这些化合物中通常每1个丙二醇单元通常就包含1-5个乙二醇单元。非离子型表面活性剂的代表性的例子是壬基酚-聚乙氧基乙醇、蓖麻油聚乙二醇醚、聚丙烯/聚环氧乙烷加合物、三丁基苯氧基聚乙氧基乙醇，聚乙二醇和辛基苯氧基聚乙氧基乙醇。以下醇的脂肪酸酯也是合适的非离子型表面活性剂：聚乙烯山梨聚糖(例如聚乙烯山梨聚糖三油酸酯)、甘油、山梨聚糖、蔗糖和季戊四醇。

合适的阳离子型表面活性剂包括季铵盐，优选是氯化物，其包含四个任选地被卤素、苯基、取代苯基或羟基取代的烃原子团；例如包含至少一个C₈-C₂₂烷基(例如十六烷基、月桂基、棕榈基、十四烷基、油基等)作为N取代基、以及未取代的或卤代的低级烷基、苄基和/或羟基-C_1-4烷基作为亚取代基的季铵盐。

适用于该目的的表面活性剂的更详细的描述可参见例如“McCutcheon′sDetergents and Emulsifiers Annual”(美国新泽西州Ridgewood的MC PublishingCrop.，1981)，“Tensid-Taschenbuch”，第二版(维也纳，Hanser Verlag，1981)和Encyclopaedia of Surfactants(美国纽约，Chemical Publishing Co.，1981)。

在本发明的药物组合物和组合制剂中可包含结构形成剂、增稠剂或凝胶形成剂。合适的这样的试剂是特别高分散的硅酸，例如商品名为Aerosil的市售产品；膨润土；蒙脱土四烷基铵盐(例如商品名为Bentone的市售商品)，其中各烷基可包含1-20个碳原子；十六醇十八醇混合物和改性的蓖麻油产品(例如商品名为Antisettle的市售产品)。

本发明的药物组合物和组合制剂中可包含的胶凝剂包括但不限于：纤维素衍生物，例如羧甲基纤维素、乙酸纤维素等；天然树胶，例如阿拉伯胶、黄原胶(xanthum gum)，黄蓍胶、瓜耳胶等；明胶；二氧化硅；合成聚合物，例如卡波姆(carbomer)，以及它们的混合物。明胶和改性纤维素是优选的胶凝剂。

本发明的药物组合物和组合制剂中可包含的其它任选的赋形剂包括添加剂，例如氧化镁；偶氮染料；二氧化钛之类的有机颜料和无机颜料；UV-吸收剂；稳定剂；气味掩蔽剂；增粘剂；抗氧化剂，例如抗坏血酸棕榈酸酯、亚硫酸氢钠、焦亚硫酸钠等，以及它们的混合物；防腐剂，例如山梨酸钾、苯甲酸钠、山梨酸、五倍子酸丙酯、苯甲醇、羟苯甲酸甲酯、羟苯甲酸丙酯等；螯合剂，例如乙二胺四乙酸；调味剂，例如天然香草醛；缓冲剂，例如柠檬酸和乙酸；增量剂或膨胀剂，例如硅酸盐、硅藻土、氧化镁或氧化铝；稠化剂，例如镁盐；以及它们的混合物。

本发明的组合物和联合制剂中可包含用来控制其中生物活性组分的作用时间长度的其它组分。通过选择合适的聚合物载体，例如聚酯、聚氨基酸、聚乙烯基吡咯烷酮、乙烯-乙酸乙烯酯共聚物、甲基纤维素、羧甲基纤维素、硫酸精蛋白等，可以得到控制释放的组合物。通过将活性组分结合入以下物质的颗粒(例如微胶囊)中，可以控制药物释放速率和作用持续时间：聚合物质，例如水凝胶、聚乳酸、羟甲基纤维素、聚甲基丙烯酸甲酯和其它上述聚合物。这些方法包括胶质药物递送体系，例如脂质体、微球体、纳米颗粒、纳米胶囊等。根据给药途径，本发明的药物组合物或组合制剂还可需要保护涂层。

适于可注射应用的药物剂型包括用于其临时制剂的无菌水溶液或分散体和无菌粉末。因此通常用于该目的的载体包括生物相容性水性缓冲剂、乙醇、甘油、丙二醇、聚乙二醇、环糊精之类的配合剂等，以及它们的混合物。

适于尿道递送(例如海绵窦内注射)的(例如用来治疗勃起功能障碍)药物剂型在美国专利第6,127,363号中进行了详细描述，其内容参考结合入本文中。尿道药物递送可包括离子电渗透法、电穿孔或超声透入疗法之类的活性递送机理。用于以这种方式递送药物的器件和方法是本领域众所周知的。例如在WO96/40054中描述了lontophoretically辅助的药物递送。简要来说，通过外电极输送到包含或固定在尿道探针中的第二电极的电流，驱动着活性试剂透过尿道壁。

还可采用其它局部给药方式。例如，选定的活性试剂可通过海绵窦内注射的方式给药，或者可以以软膏、凝胶等的形式局部给药，或者适用常规的透皮药物递送系统进行透皮给药，包括透过阴囊给药。海绵窦内注射可以适用注射器或其任意其它合适的器件尽心。可用于本文的皮下注射器的一个例子见述于美国专利第4,127,118号，注射是通过将针置于各背部静脉的侧面，将其深深地插入其中，从而在阴茎的背侧进行的。对于海绵窦内注射，优选将待给药的活性药物结合入无菌液体制剂(通常是水性或油性介质中的溶液或悬浮体)中。所述溶液或悬浮体可以根据本领域已知的技术，适用合适的载体、分散剂、湿润剂、稀释剂、悬浮剂等进行配置。可用的可接受的载体和溶剂为水、等渗盐水、植物油、脂肪酯和多醇。

由于，对于包含本发明的吡啶并(3，2-d)嘧啶衍生物以及免疫抑制药、或免疫调节药、或抗肿瘤药、或抗病毒药、或磷酸二酯酶-4抑制剂的组合制剂，这两种组分不一定直接同时在被治疗的病人体内发挥协同治疗效果，所以所述组合制剂可以是包含独立但相邻的形式的两种组分的试剂盒或包装袋。在后一种情况下，各试剂可以以适于不同于其它组分的给药途径的形式配置，例如其中一种可以使口服剂型或肠胃外剂型，其它的组分为用于静脉注射或气溶胶的安瓿的形式。

本发明还涉及一种用来预防或治疗选自以下的疾病的方法：CNS疾病、细胞增殖疾病、病毒感染、免疫和自身免疫疾病、植入物排斥、PDE-4-介导的疾病和TNF-α-在患者(优选是哺乳动物、更优选是人类)体内介导的疾病。本发明的方法由以下步骤组成：给予需要治疗的患者有效量的通式(I)的吡啶并(3，2-d)嘧啶衍生物，以及任选的有效量的另一种免疫抑制药、或免疫调节药、或抗肿瘤药物、或抗病毒药、或磷酸二酯酶-4抑制剂、或者包含它们的药物组合物，例如上文详述的那些。有效量通常约为0.01-20、优选约0.1-5毫克/天/千克病人体重。根据治疗的病理情况和病人的情况，所述有效剂量可以分为每天几个亚单元，或者可以每天给药一次以上。被治疗的患者可以是任意的经受所述病理条件的温血动物，优选是哺乳动物、更优选是人类。

本发明的优选化合物是非镇静性的。换言之，足以在测定疼痛缓解的动物模型中造成痛觉丧失的最低剂量的两倍剂量的这种化合物在镇静动物模型试验中只造成暂时的(即，持续时间不超过疼痛缓解持续时间的一半)，或最好没有统计学显著的镇静作用(采用Fitzgerald等，Toxicology(1988)49：433-9所述的方法)。优选足以造成痛觉丧失的最低剂量的五倍剂量不产生统计学显著的镇静作用。更优选静脉内剂量低于10mg/kg/天或口服剂量低于30mg/kg/天时，本文提供的化合物不产生镇静作用。如果需要，可评估本文提供的化合物的毒性(当以免疫调节量或细胞抗增殖量给予对象时，优选的化合物无毒性)和/或副作用(当将治疗有效量的化合物给予对象时，优选的化合物产生与安慰剂相当的副作用)。可采用标准方法评估毒性和副作用。与已有标准一致，本文所用的术语“无毒性”通常应理解为指美国食品药品管理局易于批准用于哺乳动物，优选人的任何物质。也可采用包括细菌反向突变试验，例如Ames测试的试验以及标准致畸和致瘤试验评估毒性。给予上文公开的治疗剂量内的本文提供化合物优选不导致心脏QT间隔延长(例如，在豚鼠、迷你猪或狗中通过心电图测定的)。与对比对照相比，每日给药时，这种剂量在实验室啮齿类动物(例如，小鼠或大鼠)中造成的肝脏肥大不导致肝脏与体重之比增加超过50％。与对比对照相比，这种剂量也优选在狗或其它非啮齿类哺乳动物中造成的肝脏肥大不导致肝脏与体重之比增加超过10％。本发明的优选化合物也不在体内促进肝脏酶从肝细胞的实质性释放，即与对比对照相比，治疗性剂量在实验室啮齿类动物体内使这种酶的血清水平升高不超过50％。

本发明的另一个实施方式包括本发明化合物的各种前体或“药物前体”形式。可能需要以一种化学物质的形式配置本发明的化合物，该化学物质本身并无显著的生物活性，但是在输送到人类或高等哺乳动物体内的时候，将会发生被体内正常功能(即胃或血清内所含的酶)的催化下发生化学反应，所述化学反应具有释放本文所述的化合物的效果。因此术语“前体药物”涉及这些在体内转化为活性药物组分的物质。

本发明的前体药物可以具有任意适于配置的形式，例如一种非限制性的常见的前体药物的形式是酯。但是在此情况下，所述前体药物必须以一种形式存在，其中双键被目标位点存在的酶的作用所断裂。例如，C-C双键可以被所述目标位点存在的一种或多种酶选择性地断裂，因此可适用除了容易发生水解的前体(即酯、酰胺等)以外的前体。出于本发明的目的，在本文中，术语“适用于治疗的前体药物”表示“以一定的形式进行改性的化合物，使得其在与被给予前体药物的人类或哺乳动物的组织接触的时候，在体内通过单独的或多种生物转化形成治疗活性形式，而不会产生异常毒性、辐射或变态反应，从而达到预期的治疗结果”。

下面将参照某些更具体的实施方式和实施例进一步描述本发明，但是本发明不限于此，而是由所附的权利要求书所限制。以下实施例仅用来说明。

实施例1 -合成6-氯-2-羧酰氨基-3-氨基-吡啶

向6-氯-2-氰基-3-硝基-吡啶(3.03克，16.5mmol)在乙醇(166ml)和水(16ml)的溶液中加铁(165mmol，9.2克)和氯化钙(2.75克，24.8mmol)。该反应混合物回流4个小时，然后冷却至室温。沉淀物在塞里塑料(Celite)上过滤除去，而滤液蒸发至干燥。残余物重新溶解在乙酸乙酯中，并用盐水萃取。水层用乙酸乙酯反萃取。合并的有机层在真空中蒸发。残余物被吸附在氧化硅上，通过硅胶柱层析纯化，流动相是乙酸乙酯/己烷混合物，比例为3:7，结果得到标题化合物(1.89克，产率67％)，由其质谱表征如下：MS(m/z)：172，174([M+H]⁺，100)。

实施例2 -合成6-氯-吡啶并(3，2-d)嘧啶-4(3H)-酮

使6-氯-2-羧酰氨基-3-氨基-吡啶(1.34mmol，230mg)在原甲酸三乙酯(10ml)中的悬浮液回流3个小时。形成一种白色悬浮液，将其冷却至室温。沉淀物过滤出来并真空干燥，产生纯的标题化合物(174毫克，产率72％)，由其质谱表征如下：MS(m/z)：182，184([M+H]⁺，100)。

实施例3-制备6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并(3，2-d)嘧啶-4(3H)-酮

向6-氯代-吡啶并[3，2-d]嘧啶-4(3H)-酮(200毫克，1.1mmol)在1，4-二噁烷(20毫升)和水(10毫升)中的溶液里加入3，4-二甲氧基苯基硼酸(240毫克，1.32mmol)，碳酸钾(380毫克，2.75mmol)和四(tetrakis)(三苯基膦)钯(0)(63毫克，0.055mmol).该反应混合物回流3小时，冷却至室温，溶剂经真空蒸发。残余物吸附在氧化硅上，通过硅胶柱层析纯化(流动相是丙酮/二氯甲烷混合物，混合比逐步从30:70达到40:60)，由其质谱表征如下：MS(m/z)：284([M+H]⁺，100)。

实施例4 -制备4-氯-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶

向6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶-4(3H)-酮(150毫克，0.53mmol)在甲苯(30ml)中的悬浮液中加入三氯氧磷(148μl，1.59mmol)和2，6-二甲基吡啶(185μl，1.59mmol)。反应混合物回流过夜，直到获得一黑色溶液。在蒸干后，残余物重新溶解在乙酸乙酯中，用饱和碳酸氢钠溶液萃取。合并的有机层在真空中蒸发。残余物通过硅胶柱层析纯化，流动相是乙酸乙酯/己烷混合物，比例逐步从2:8到3:7，结果得到纯的标题化合物(123毫克，产率77％)，由其质谱表征如下：MS(m/z)：302，304([M+H]⁺，100)。

实施例5 -合成-4-[(2-苯氧乙基)-哌嗪-1-基]-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶

向4-氯-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶(120毫克，0.398mmol)在异丙醇(15ml)中的悬浮液中加入1-(2-苯氧乙基)-哌嗪(0.795mmol，164毫克)。该悬浮液在80℃进行搅拌，之后该悬浮液变成澄清的无色溶液。溶剂在真空中蒸发。残余物重新溶解在乙酸乙酯中并用NaOH溶液(1N)萃取。合并的有机层在真空中蒸发，并通过硅胶柱层析(流动相是甲醇与二氯甲烷按渐次从1:99达到2:98比例的混合物)纯化，结果得到标题化合物(157毫克，产率84％)，由其质谱表征如下：MS(m/z)：472([M+H]⁺，100)。

实施例6- 合成2-羧酰氨基-3-氨基的-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶

向6-(3，4-二甲氧基苯基)-3-硝基吡啶-2-腈(1.42克，5mmol)在乙醇(50ml)和水(5ml)的溶液中加入铁(1.39克，25mmol)和氯化钙(6mmol，666毫克)。该反应混合物回流1小时。另加入一定量的铁(1.39克，25mmol)，反应混合物再回流3个小时。使反应冷却并用过滤纸过滤，随后用沸腾的乙酸乙酯洗涤。滤液在真空中蒸发，残余物在乙酸乙酯和水之间分配。有机层蒸干，残余物通过硅胶柱层析(流动相是乙酸乙酯与己烷按1:1比例的混合物)纯化，结果得到纯的标题化合物(770毫克，产率56％)，由其质谱表征如下：MS(m/z)：273([M+H]+，100)。

实施例7- 制备6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶-4(3H)-酮

使2-羧酰氨基-3-氨基的-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶(770毫克，2.8mmol)在原甲酸三乙酯(28ml)中的悬浮液回流12个小时。然后，使该反应混合物冷却并蒸发至干。残余物通过硅胶柱层析纯化(流动相是乙酸乙酯/己烷混合物，比例逐步从2:8到3:7)，结果得到纯的标题化合物(530毫克，产率67％)，由其质谱表征如下：MS(m/z)：284([M+H]⁺，100)。

实施例8 -合成4-(4-[(3-甲基苯基)氨基]羰基]哌嗪-1-基]-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶

向4-氯-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶(227毫克，0.8mmol)在异丙醇(20ml)中的悬浮液中加入哌嗪-1-羧酸间甲苯基酰胺(351毫克，1.6mmol)。该反应混合物在80℃搅拌3个小时。然后，使该反应混合物冷却并蒸发至干。残余物重新溶解在乙酸乙酯中并用饱和碳酸氢钠溶液萃取。合并的有机层在真空中蒸发。粗制残余物通过硅胶柱层析(流动相是甲醇与二氯甲烷按渐次从1:99达到2:98比例的混合物)纯化，结果得到纯的标题化合物(217毫克，产率56％)，由其质谱表征如下：MZ(m/z)：485([M+H]⁺，100)。

实施例9 -制备2-甲基-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶-4(3H)-酮

使2-羧酰氨基-3-氨基-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶(546毫克，2mmol)在原乙酸三乙酯(25ml)中的悬浮液回流12个小时。然后，使反应混合物冷却并蒸发至干。残余物通过硅胶柱层析纯化(流动相是乙酸乙酯/己烷混合物，比例逐步从2:8到3:7)，结果得到纯的标题化合物(437毫克，产率73％)，由其质谱表征如下：MS(m/z)：297([M+H]⁺，100)。

实施例10 -制备2-甲基-4-氯-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-公元]嘧啶

向2-甲基-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶-4(3H)-酮(416毫克，1.4mmol)在甲苯(28ml)中的悬浮液中加入2，6-二甲基吡啶(490μ1，4.2mmol)和三氯氧磷(4.2mmol，385μl)。该混合物在氮保护气氛下回流5小时。使该反应混合物冷却，用乙酸乙酯(50ml)稀释并用饱和碳酸氢钠溶液萃取。合并的有机层在真空中蒸发，残余物通过硅胶柱层析(流动相是乙酸乙酯与己烷按15:85比例的混合物)纯化，结果得到标题化合物(330毫克，产率75％)，由其质谱表征如下：MS(m/z)：316，318([M+H]⁺，100)。

实施例11 -合成2-甲基-4-(4-[(3-甲基苯基)氨基]羰基]哌嗪-1-基]-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶

向2-甲基-4-氯-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶(330毫克，1.04mmol)在乙腈(20ml)中的悬浮液中加入哌嗪-1-羧酸间甲苯基酰胺(479毫克，2.2mmol)。该反应混合物回流2小时。该混合物冷却并加入乙酸乙酯(100ml)。该反应混合物用饱和碳酸氢钠溶液萃取。合并的有机层蒸发至干。残余物通过第一硅胶柱层析纯化(流动相是甲醇/二氯甲烷混合物，比例逐步从1:99到2:98)，然后执行第二硅胶柱层析纯化，流动相是95:5的乙酸乙酯/己烷混合物，结果得到纯的标题化合物(319毫克，产率62％)，由其质谱表征如下：MS(m/z)：499([M+H]⁺，100)。

实施例12 -合成6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶-2(1H)-4(3H)-二酮

向2-羧酰氨基-3-氨基的-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶(4.10克，15mmol)在1，4-二噁烷(150ml)中的溶液中加入三光气(2.22克，7.5mmol)。

使该溶液回流25分钟然后蒸干。粗制化合物用乙酸(150ml)结晶并用乙酸乙酯、二乙醚洗涤，在真空下在P205上干燥，结果得到纯的标题化合物(3.60克，产率80％)，由其质谱表征如下：MS(m/z)：300([M+H]⁺，100)。

实施例13- 合成2，4-二氯-6-(3，4-二甲氧基苯基]吡啶并[3，2-d]嘧啶

向6-(3，4-二甲氧基苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶-2(1H)-4(3H)-二酮(2.69克，9mmol)在POCl₃(60ml)中的悬浮液中加入三乙胺(3.47ml)。该反应混合物在氮气氛下回流直到完成。反应冷却至室温并蒸干。残余物在水和二氯甲烷之间分配。有机层用盐水洗涤。使合并的有机层蒸发，残余物通过硅胶柱层析(流动相是己烷/乙酸乙酯按6:1比例的混合物)纯化，结果得到纯的标题化合物(产率83％)，由其质谱表征如下：MS(m/z)：336，338([M+H]⁺，100)。

实施例14 -合成2-氯-4-(4-[(3-甲基苯基)氨基]羰基]哌嗪-1-基]-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶

向2，4-二氯-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶(672毫克，2mmol)在THF(10ml)中的悬浮液中加入哌嗪-1-羧酸间甲苯基酰胺(484毫克，2.2mmol)和三乙胺(10mmol，1.40ml)。该反应混合物在室温搅拌10分钟。将混合物蒸干。残余物重新溶解在二氯甲烷，并用盐水萃取。合并的有机层在真空中蒸发，粗制残余物通过硅胶柱层析(流动相是己烷/乙酸乙酯按1:1比例的混合物)纯化，结果得到纯的标题化合物(760毫克，产率73％)，由其质谱表征如下：MS(m/z)：519，521([M+H]⁺，100)。

实施例15 -合成2-二甲基氨基-4-(4-[(3-甲基苯基)氨基]羰基]哌嗪-1-基]-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶

向2-氯-4-(4-[3-甲基苯基)氨基]羰基]哌嗪-1-基)-6-(3，4-二甲氧基苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶(0.35mmol，181毫克)在二噁烷(5ml)中的悬浮液中添加二甲胺(100μl的40％水溶液)。反应在80℃搅拌1.5小时，之后再添加一定量(100μl)的二甲胺溶液。反应再搅拌18小时，然后冷却，并用二氯甲烷(50ml)稀释。该反应混合物用饱和碳酸氢钠溶液萃取。合并的有机层在真空中蒸发。残余物通过硅胶上的制备级薄层层析纯化(流动相是己烷/乙酸乙酯混合物，比例1:9)，结果得到纯的标题化合物(57毫克，产率31％)，由其质谱表征如下：MS(m/z)：528([M+H]⁺，100)。

实施例16 -合成2-[(N羟基甲基]吗啉基]-4-(4-[(3-甲基苯基)氨基]羰基]哌嗪-1-基]-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶

N-(2-羟基乙基)吗啉(55μl，0.5mmol)溶解在无水四氢呋喃(5ml)中，并添加氢化钠60％(20毫克，0.495mmol)。溶液在60℃在氮气氛下搅拌20分钟，然后添加2-氯-4-(4-[3-甲基苯基)氨基的]羰基]哌嗪-1-基)-6-(3，4-二甲氧基苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶(156毫克，0.3mmol)。该反应混合物在60℃搅拌1小时.混合物冷却至室温，用盐水稀释并用乙酸乙酯萃取。合并后的有机层在真空中蒸发，并通过氧化硅上的制备级薄层层析纯化(流动相是甲醇/二氯甲烷混合物，比例为7.5:92.5)，结果得到纯的标题化合物(166毫克，产率90％)，由其质谱表征如下：MS(m/z)：614([M+H]⁺，100)。

实施例17 -合成2-(1-甲基-2-吡咯烷基-乙氧基)吗啉基]-4-(4-[(3-甲基苯基)氨基]羰基]哌嗪-1-基]-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶，

氢化钠60％(20毫克，0.495mmol)溶解在干燥的四氢呋喃(5ml)中，并添加1-甲基-2-吡咯烷-乙醇(62μl，0.45mmol)。该混合物在氮气氛下回流15分钟。然后添加2-氯-4-(4-[3-甲基苯基)氨基的]羰基]哌嗪-1-基)-6-(3，4-二甲氧基苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶(156毫克，0.30mmol)，反应混合物在氮气氛下回流16小时。该反应混合物用蒸馏水稀释并用乙酸乙酯萃取三次。合并后的有机萃取物用盐水洗涤并用Na2SO4上干燥。在过滤并真空蒸发后，粗制产品通过氧化硅上的制备级薄层层析纯化，用二氯甲烷/甲醇混合物(比例9:1)作为流动相，产生79毫克(产率43％)的标题化合物，由其质谱表征如下：MS(m/z)：612([M+H]⁺，100)。

实施例18 -合成2-(2-苯氧基乙氧基)-4-(4-[(3-甲基苯基)氨基]羰基]哌嗪-1-基]-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶

氢化钠60％(25毫克，0.2mmol)和2-苯氧乙醇(63毫克，0.45mmol)溶解在干燥的四氢呋喃(5ml)中。该反应混合物在氮气保护气氛下回流15分钟。然后添加2-氯-4-(4-[3-甲基苯基)氨基]羰基]哌嗪-1-基)-6-(3，4-二甲氧基苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶(156毫克，0.30mmol)，反应混合物在氮气氛下回流3个小时。该反应混合物用蒸馏水稀释并用二氯甲烷萃取。合并后的有机萃取物用Na2SO4干燥。在过滤和真空蒸发后，粗制产品通过氧化硅上的制备级薄层层析纯化，用正己烷/乙酸乙酯混合物(比例1:1)作为流动相。用乙酸乙酯重结晶产生124毫克(收率67％)标题化合物，由其质谱表征如：MS(m/z)：621([M+H]⁺，100)。

实施例19 -合成2-苯基-4-(4-[3-甲基苯基)氨基]羰基]哌嗪-1-基)))-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶

向2-氯-4-(4-[3-甲基苯基]]氨基]羰基]哌嗪-1-基)-6-(3，4-二甲氧基苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶(156毫克，0.30mmol)、碳酸钾(181毫克，1.31mmol)和苯基硼酸(49毫克，0.39mmol)在1，4-二噁烷(4.5ml)和水(1.5ml)的悬浮液用氮气流冲洗10分钟。添加四(三苯基膦)钯(O)(18毫克，15.6μmol)，反应混合物在氮保护气氛下回流30分钟。在冷却后，该混合物用乙酸乙酯稀释并用盐水洗涤两次。

有机层用Na2SO4干燥，随后过滤并在真空中蒸发。用乙酸乙酯重结晶产生74毫克(产率44％)的标题化合物，由其质谱表征如：MSlm/z)：561([M+H]⁺，100)。

实施例20 -合成2-氨基-6-氯-吡啶并[3，2-d]嘧啶-4(3H)-酮

2，4-二氨基-6-氯吡啶并[3，2-d]嘧啶(7.5克，38毫摩尔)(例如根据Colbry等人的J.Heterocycl.Chem.(1984)21：1521报道制备)在6N的盐酸(300ml)中配成悬浮液，该混合物回流5小时。冷却之后，用10N的NaOH将pH值调至碱性(pH约9-10)。将获得的沉淀物过滤，用水洗涤并在100℃干燥，结果得到纯的标题化合物(7.0克，产率95％)，由其质谱表征如下：MS(m/z)：197([M+H]⁺，100)。

实施例21 -合成2-氨基-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶-4(3H)-酮

向经脱气处理的2-氨基-6-氯-吡啶并[3，2-d]嘧啶-4(3H)-酮(7.30克，37毫摩尔)、3，4-二甲氧基苯基硼酸(7.50克，40毫摩尔)和碳酸钾(20.70克，152毫摩尔)在二噁烷(540ml)和水(120ml)的混合物中的悬浮液中添加催化剂量的四(三苯基膦)钯(O)(2.16g，18.5毫摩尔)。该混合物回流24小时，在室温冷却后过滤。滤液用5N的盐酸酸化至pH值为4，所得沉淀物过滤，然后相继地用水、乙醇和二乙醚洗涤，并真空干燥，结果得到纯的标题混合物(8.0克，产率73％)，由其质谱表征如下：MS(m/z)：299([M+H]⁺，100)。

实施例22 -合成2-乙酰氨基-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶-4(3H)-酮

2-氨基-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶-4(3H)-酮(2.0克，6.70毫摩尔)在乙酸酐(180ml)和乙酸(20ml)中制成悬浮液，该混合物回流16小时。热悬浮液过滤，滤液减压浓缩，直到开始结晶。沉淀物过滤出来，得到纯的标题化合物(1.76克，产率77％)，由其质谱表征如下：MS(m/z)：341([M+H]⁺，100)。

实施例23 -合成2-乙酰氨基-4-(1，2，4-三唑基)-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶

1，2，4-三唑(8.28克，120毫摩尔)和三氯氧磷(3.2ml，36mmol)在干的乙腈(150ml)中的悬浮液被加到搅拌着的2-乙酰氨基-6-(3，4-二甲氧基苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶-4(3H)-酮(4.08克，12毫摩尔)和三乙胺(5.2ml，36毫摩尔)在无水乙腈(150ml)中的悬浮液中。该混合物在室温下在氮气保护下搅拌3天，将黄色沉淀物过滤出来，然后相继地用乙醇和乙醚洗涤，并在真空干燥器中用五氧化二磷干燥，结果得到纯的标题化合物(4.3克，产率90％)，由其质谱表征如下：MS(m/z)：392([M+H]⁺，100)，414([M+Na]+；804[2M+Na]+。

实施例24和25 -合成2-氨基-6-(3，4-二甲氧基苯基)-4-烷氧基-吡啶并[3，2-d]嘧啶

使钠(44毫克，2mmol)悬浮在适当的醇(10ml)中，该溶液升温至50℃直到钠全部溶解。然后，添加2-乙酰氨基-4-(1，2，4-三唑基)-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶(160毫克，0.4毫摩尔)，该混合物在室温搅拌16小时。该混合物然后用1N的盐酸溶液中和，挥发性物质减压除去。粗制混合物通过硅胶柱层析纯化，流动相是甲醇/二氯甲烷混合物(比例渐次从2:98到10:90)，如此产生所需化合物，产率范围从40至60％，取决于所用的醇。以下化合物依据这种程序制备：

-2-氨基-4-异丙氧基-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶(实施例44)用异丙醇获得，由其质谱表征如下：MS(m/z)：341([M+H]+，100)，和

-2-氨基-4-(2-苯氧基乙氧基)-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶(实施例45)用2-苯氧基乙醇获得，由其质谱表征如下：MS(m/z)：419([M+H]⁺，100)。

实施例26至36 -合成2-乙酰氨基-4-烷基氨基-6-(3，4-二甲氧基-苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶，2-乙酰氨基-4-环烷基氨基-6-(3，4-二甲氧基-苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶2-乙酰氨基-4-杂芳基烷基氨基-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶2-乙酰氨基-4-芳基氨基-6-(3，4-二甲氧基苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶和2-乙酰氨基-4-杂环氨基-6-(3，4-二甲氧基苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶及相应的2-氨基-4-烷基氨基-6-(3，4-二甲氧基苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶，2-氨基-4-环烷基氨基-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶，2-氨基-4-杂芳基烷基氨基-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶，2-氨基-4-芳基氨基-6-(3，4-二甲氧基苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶和2-氨基-4-杂环氨基-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶，

将一适当的烷基胺、环烷基胺、芳基胺、杂环胺或者杂芳基烷基胺(2当量，0.8毫摩尔)添加到搅拌着的2-乙酰氨基-4-(1，2，4-三唑基)-6-(3，4-二甲氧基苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶(160毫克，0.4毫摩尔)在二噁烷中的悬浮液中。该混合物在50℃加热24小时，挥发性物质减压除去，产生粗制2-乙酰氨基-4-烷基氨基-6-(3，4-二甲氧基苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶、2-乙酰氨基-4-环烷基氨基-6-(3，4-二甲氧基苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶、2-乙酰氨基-4-杂芳基烷基氨基-6-(3，4-二甲氧基苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶、2-乙酰氨基-4-芳基氨基-6-(3，4-二甲氧基苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶或者2-乙酰氨基-4-杂环氨基-6-(3，4-二甲氧基苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶作为中间体。该粗制残余物在0.2N的乙醇钠(20ml)中重新制成悬浮液，且该混合物在室温下搅拌24小时，并用5-6N的氯化氢异丙醇溶液中和，产生粗制的相对应的2-氨基-4-烷基氨基-6-(3，4-二甲氧基苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶、2-氨基-4-环烷基氨基-6-(3，4-二甲氧基苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶、2-氨基-4-杂芳基烷基氨基-6-(3，4-二甲氧基苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶、2-氨基-4-芳基氨基-6-(3，4-二甲氧基-苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶或2-氨基-4-杂环氨基-6-(3，4-二甲氧基-苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶作为最终化合物。粗制残余物通过硅胶柱层析纯化，流动相是甲醇/二氯甲烷混合物(比例渐次从2:98至10:90)，如果需要再加0.5％的浓氨水。这一程序提供所期望最终化合物的产率范围从40至80％。以下最终化合物依据这一程序合成(每一次经过相对应的中间体，其2-氨基以乙酰氨基的形式保护起来)：

-2-氨基-4-[4-(乙氧基羰基)哌啶-1-基]-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶(实施例26)用异哌啶甲酸乙酯获得，由其质谱表征如下：MS(m/z)：438([M+H]+，100)，

-2-氨基-4-(3-甲基苯氨基)-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶(实施例27)用3-甲基苯胺获得，由其质谱表征如下：MS(m/z)：388([M+H]+，100)，

-2-氨基-4-[3，4-亚甲二氧基苯氨基)-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶(实施例28)用3，4-亚甲二氧基苯胺获得，由其质谱表征如下:MS(m/z):418([M+H]+，100)，

-2-氨基-4-(3-溴-苯氨基)-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶(实施例29)用3-溴苯胺获得，由其质谱表征如下：MS(m/z)：452([M+H]+，100)，

-2-氨基-4-(2-氯-5-甲氧基-苯氨基)-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶(实施例30)用2-氯-5-甲氧基苯胺获得，由其质谱表征如下：MS(m/z)：438([M+H]+，100)，

-2-氨基-4-(N-甲基哌嗪基)-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶(实施例31)用N-甲基哌嗪获得，由其质谱表征如下：MS(m/z)：381([M+H]+，100)，

-2-氨基-4-(噻吩基-2-甲基氨基)-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶-2，4-二胺(实施例32)用2-噻吩基甲基胺获得，由其质谱表征如下：MS(m/z)：394([M+H]+，100)，

-2-氨基-4-[4-(2-氨基乙基)吗啉基]-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶(实施例33)用4-(2-氨基乙基)吗啉获得，由其质谱表征如下：MS(m/z)：411([M+H]+，100)，

-2-氨基-4-(2，2-二甲氧基乙基氨基)-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶(实施例34)用2，2-二甲氧基乙基胺获得，由其质谱表征如下：MS(m/z)：386([M+H]+，100)，

-2-氨基-4-(2-氨基甲基)吡啶]-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶(实施例35)用2-(氨基甲基)吡啶获得，由其质谱表征如下：MS(m/z)：389([M+H]+，100)，和

-2-氨基-4-(1，4-二氨基环己基)-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶(实施例36)用反式-1，4-二氨基环己烷获得，由其质谱表征如下：MS(m/z)：395([M+H]⁺，100)。

实施例37 -合成6-(3，4-二甲氧基苯基)-3-硝基吡啶-2-腈

向经过脱气处理的6-氯-2-氰基-3-硝基吡啶(5.51克，30毫摩尔)、3，4-二甲氧基苯基硼酸(6.55克，36毫摩尔)和碳酸钾(16.59克，120毫摩尔)在无水甲苯(300ml)中的悬浮液中添加催化剂量的四(三苯基膦)钯(3.47g，3毫摩尔)。该混合物回流24小时，冷却后挥发性物质蒸发至干。粗制混合物通过硅胶柱层析纯化，流动相包括己烷/二氯甲烷混合物(比例渐次从15:85至0:100)。收集适当部分，蒸发至干，且残余物在乙醚制成悬浮液。将橙色沉淀物过滤出来，用乙醚洗涤并干燥，所得为纯的标题化合物(6.79克，产率79％)。

实施例38 -合成3-氨基-6-(3，4-二甲氧基苯基)吡啶-2-腈

将铁(7.14克，128毫摩尔)分批添加到搅拌着的6-(3，4-二甲氧基苯基)-3-硝基吡啶-2-腈(4.56克；16毫摩尔)在甲醇(80ml)和37％盐酸(25ml)的悬浮液中。该混合物回流5小时，冷却，其pH值通过浓氢氧化铵(30ml)调节至9-10。该混合物用塞里塑料过滤并用甲醇和乙酸乙酯洗涤。滤液蒸发至干，残余物通过硅胶柱层析纯化，用二氯甲烷/乙酸乙酯混合物(比例95:5)作为洗脱液，获得纯的标题混合物(2.62克，产率64％)，由其质谱表征如下：MS(m/z)：256([M+H]⁺，100)。

实施例39- 合成2，4-二氨基-6-(3，4-二甲氧基苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶

将钠(423毫克，18.4毫摩尔)在正丁醇(180ml)中的溶液添加到3-氨基-6-(3，4-二甲氧基苯基)吡啶-2-腈(2.36克；9.20毫摩尔)和盐酸胍(1.76克；18.4毫摩尔)中。该混合物回流4小时，冷却后，溶剂减压蒸发。残余物通过硅胶柱层析纯化，用二氯甲烷/甲醇混合物(比例95:5)作为洗脱液，获得纯的标题混合物(1.88克，产率69％)，由其质谱表征如下：MS(m/z)：298([M+H]+，100))。

实施例40 -合成2-氨基-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶-4(3H)-酮盐酸盐

2，4-二氨基-6-(3，4-二甲氧基苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶(1.27克，4.27毫摩尔)在6N的盐酸(85ml)中制成悬浮液，该混合物回流8小时。在冷却之后，沉淀物过滤出来，用水洗涤并用五氧化二磷干燥，结果得到纯的标题化合物(1.29克，产率90％)，由其质谱表征如下：MS(m/z)：299([M+H]⁺，100)。

实施例41 -合成2-氨基-4-吗啉基-6-(3，4-二甲氧基苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶

2-氨基-6-(3，4-二甲氧基苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶-4(3H)-酮盐酸盐(332毫克；1毫摩尔)在带有催化剂量的对甲苯磺酸和硫酸铵的甲苯(10ml)中制成悬浮液。然后，添加1，1，1，3，3，3-六甲基二硅氨烷(3.2ml；15毫摩尔)和吗啉(0.53ml；6mmol)。该混合物回流24小时并蒸发至干。残余物通过硅胶柱层析纯化，用二氯甲烷/甲醇混合物(比例96:4)作为洗脱液，获得纯的标题混合物(120毫克，产率32％)，由其质谱表征如下：MS(m/z)：368([M+H]⁺，100)。

实施例42 -合成2-氨基-4-(4-{[((3-甲基苯基)氨基]羰基}哌嗪-1-基)-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶

哌嗪(258毫克；3毫摩尔)被添加到搅拌着的2-乙酰氨基-6-(3，4-二甲氧基苯基)-4-(1，2，4-三唑基)吡啶并[3，2-d]嘧啶(586毫克；1。5毫摩尔)在二噁烷(50ml)中的悬浮液中。该混合物在室温下搅拌24小时，挥发物减压除去，产生2-乙酰氨基-4-(N-哌嗪基)-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶作为粗制残余物。后者溶解在DMF中，并添加间甲苯基异氰酸酯(0.66ml，5毫摩尔)。在室温下经过18小时后，溶剂被除去，残余物在二氯甲烷(20ml)和乙醇钠0.2N(20ml)中制成悬浮液。在16个小时中对悬浮液进行搅拌，并用5-6N的氯化氢异丙醇溶液中和。残余物通过硅胶柱层析纯化(流动相是甲醇/二氯甲烷混合物，比例逐步从2:98到5:95)，结果得到纯的标题化合物(350毫克，产率43％)，由其质谱表征如下：MS(m/z)：542([M+H]⁺，100)。

实施例43 -合成2-氨基-4-(4-氟苯基-哌嗪-1-基)-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶

1-(4-氟苯基)-哌嗪(90毫克；0.5毫摩尔)被添加到搅拌着的2-乙酰氨基-6-(3，4-二甲氧基苯基)-4-(1，2，4-三唑基)吡啶并[3，2-d]嘧啶(120毫克；0.3毫摩尔)在二噁烷(10ml)中的悬浮液中。该混合物在60℃搅拌48小时，挥发物减压除去，产生粗制2-乙酰氨基-4-(4-氟苯基-哌嗪-1-基)-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶。后者溶解在二氯甲烷(20ml)和乙醇钠0.2N(20ml)的混合物中。在16个小时中对悬浮液进行搅拌，并用5-6N在异丙醇中的盐酸中和。残余物通过制备级薄层层析纯化(流动相是甲醇/二氯甲烷混合物，比例为5:95)，结果得到纯的标题化合物(40毫克，产率29％)，由其质谱表征如下：MS(m/z)：461([M+H]⁺，100)。

实施例44 -合成2-氨基-4-(4-甲基苯基-哌嗪-1-基)-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶

使用类似于实施例43的步骤，但是从1-(4-甲基苯基)-哌嗪起始，并且经过相对应的2-乙酰氨基中间体产生纯的标题化合物(49％产率)，由其质谱表征如下：MS(m/z)：457([M+H]⁺，100)。

实施例45 -合成2-氨基-4-(苯氧基-乙基-哌嗪-1-基)-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶

使用类似于实施例43的步骤，但是从1-(2-苯氧基)-乙基)-哌嗪起始，并且经过相对应的2-乙酰氨基中间体产生纯的标题化合物(56％产率)，由其质谱表征如下：MS(m/z)：488([M+H]⁺，100)。

实施例46 -合成2-氨基-4-(3-氯苯基-哌嗪-1-基)-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶

使用类似于实施例43的步骤，但是从1-(3-氯苯基)-哌嗪起始，并且经过相对应的2-乙酰氨基中间体产生纯的标题化合物(42％产率)，由其质谱表征如下：MS(m/z)：478([M+H]⁺，100)。

实施例47 -合成2-氨基-4-(2-吡啶基-哌嗪-1-基)-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶

使用类似于实施例43的步骤，但是从1-(2-吡啶基)-哌嗪起始，并且经过相对应的2-乙酰氨基中间体产生纯的标题化合物(37％产率)，由其质谱表征如下：MS(m/z)：444([M+H]⁺，100)。

实施例48 -合成2-氨基-4-[2-(哌嗪-1-基)乙酸N-(2-噻唑基)酰胺]-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶

使用类似于实施例43的步骤，但是从2-(哌嗪-1-基)-乙酸N-(2-噻唑基)-酰胺起始，并且经过相对应的2-乙酰氨基中间体产生纯的标题化合物(52％产率)，由其质谱表征如下：MS(m/z)：507([M+H]⁺，100)。

实施例49 -合成2-氨基-4-(N-乙酰基-哌嗪基)-6-(3，4-二甲氧基苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶

使用类似于实施例43的步骤，但是从N-乙酰基-哌嗪起始，并且经过相对应的2-乙酰氨基中间体产生纯的标题化合物(33％产率)，由其质谱表征如下：MS(m/z)：409([M+H]⁺，100)。

实施例50 -合成2-氨基-4-(1-胡椒基-哌嗪-1-基)-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶

使用类似于实施例43的步骤，但是从1-胡椒基-哌嗪起始，并且经过相对应的2-乙酰氨基中间体产生纯的标题化合物(38％产率)，由其质谱表征如下：MS(m/z)：501([M+H]⁺，100)。

实施例51 -合成2-氨基-4-[1-(2-糠酰)-哌嗪-1-基)-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶

使用类似于实施例43的步骤，但是从1-(2-糠酰)-哌嗪起始，而不是1-(4-氟苯基)-哌嗪，并且经过相对应的2-乙酰氨基中间体产生纯的标题化合物，由其质谱表征如下：MS(m/z)：461([M+H]+，100)。

实施例52 -合成2-氨基-4-(1-苄基-哌嗪-1-基)-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶

使用类似于实施例43的步骤，但是从1-苄基哌嗪起始，并且经过相对应的2-乙酰氨基中间体产生纯的标题化合物(39产率)，由其质谱表征如下：MS(m/z)：457([M+H]⁺，100)。

实施例53 -合成2-乙酰氨基-4-(哌嗪-1-基)-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶

哌嗪(430毫克；3毫摩尔)被添加到搅拌着的2-乙酰氨基-6-(3，4-二甲氧基苯基)-4-(1，2，4-三唑基)吡啶并[3，2-d]嘧啶(977毫克；2.5毫摩尔)在二噁烷(70ml)中的悬浮液中。该反应混合物回流16小时。沉淀物被过滤出来并用少量二噁烷洗涤。滤液蒸发至干，残余物用乙醚洗涤。两部分(沉淀物和洗涤的滤液)合并，得到纯的标题化合物(805毫克，产率79％)，由其质谱表征如下：MS(m/z)：409([M+H]⁺，100)。

实施例54到58 -合成2-氨基-4-(N氨基甲酰-哌嗪-1-基)-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶

向2-乙酰氨基-4-(哌嗪-1-基)-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶(200毫克，0.毫摩尔)在DMF(5ml)中的溶液中添加适当的异氰酸酯(0.75毫摩尔)。反应混合物在室温下搅拌16小时。溶剂在真空中蒸发，产生粗制的2-乙酰氨基-4-(N-氨基甲酰-哌嗪-1-基)-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶作为中间体。将该粗制残余物溶解于二氯甲烷(10ml)和乙醇钠0.2N(10ml)的混合物中，所得悬浮液搅拌16小时并用5-6N在异丙醇中的盐酸溶液中和，产生粗制2-氨基-4-(N-氨基甲酰-哌嗪-1-基)-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶作为最终化合物。该粗制产品通过在氧化硅上的制备级薄层层析纯化，流动相是甲醇/二氯甲烷混合物，比例是10:90，结果得到所期望的化合物，产率从20至40％，取决于所用异氰酸酯。以下最终化合物依据这一程序合成(每一次经过相对应的中间体，其2-氨基以乙酰氨基的形式保护起来)：

-2-氨基-4-(N-3-噻吩基氨基甲酰基-哌嗪-1-基]-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶(实施例54)用3-噻吩基异氰酸酯获得，由其质谱表征如下：MS(m/z)：492([M+H]+，100)，

-2-氨基-4-(N-2，6-二氯-吡啶基-氨基甲酰基-哌嗪-1-基]-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶(实施例55)用2，6-二氯-4-异氰酸酯-吡啶获得，由其质谱表征如下：MS(m/z)：555，557([M+H]+，100)，

-2-氨基-4-(N-4-氟-苯基-氨基甲酰基-哌嗪-1-基]-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶(实施例56)用4-氟-苯基异氰酸酯获得，由其质谱表征如下：MS(m/z)：504([M+H]+，100)，

-2-氨基-4-(N-3-氯-4-氟-苯基-氨基甲酰基-哌嗪-1-基]-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶(实施例57)用3-氯-4-氟-苯基异氰酸酯获得，由其质谱表征如下：MS(m/z)：539([M+H]+，100)，和

-2-氨基-4-(N-3-氯-苯基-氨基甲酰基-哌嗪-1-基]-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶(实施例58)用3-氯-苯基异氰酸酯获得，由其质谱表征如下：MS(m/z)：521([M+H]⁺，100)。

实施例59 -合成2-氨基-4-[(N-4-氯-苯氧基-乙酰基)-哌嗪-1-基]-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶

向2-乙酰氨基-4-(哌嗪-1-基)-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶(200毫克，0.5毫摩尔)在二噁烷(15ml)中的溶液中添加对氯苯氧基乙酰氯(0.75毫摩尔)。反应混合物在50℃搅拌过夜。溶剂在真空中蒸发，产生粗制的2-乙酰氨基-4-[(N-4-氯-苯氧基-乙酰基)-哌嗪-1-基)-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶作为中间体。该粗制残余物溶解在二氯甲烷(10ml)和乙醇钠0.2N(10ml)的混合物中。该悬浮液搅拌16小时并用5-6N氯化氢的异丙醇溶液中和，产生粗制2-氨基-4-[(N-4-氯-苯氧基-乙酰基)-哌嗪-1-基]-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶作为最终化合物。该粗制产物通过氧化硅上的制备级薄层层析纯化(流动相是甲醇/二氯甲烷混合物，比例为10:90)，结果得到纯的标题化合物(98毫克，产率37％)，由其质谱表征如下：MS(m/z)：536([M+H]⁺，100)。

实施例60 -合成2-氨基-4-[(N-苯氧基-乙酰基)-哌嗪-1-基)-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶

使用类似于实施例59所描述的步骤，但是使用苯氧基乙酰氯，而不是对氯苯氧基乙酰氯，并且经过相对应的2-乙酰氨基中间体产生纯的标题化合物，由其质谱表征如下：MS(m/z)：501([M+H]⁺，100)。

实施例61-合成的3-氨基-6-氯代-吡啶-2-羧酰胺

向6-氯-3-硝基-吡啶-2-腈(9.2克，50毫摩尔)在水(100ml)中的悬浮液中添加20ml25％的氨水溶液。该混合物在室温下搅拌20分钟。然后，分批加入硫酸钠(50克，86％，150毫摩尔)，该混合物在室温下再搅拌2小时。过滤收集所形成的沉淀物，用冷水(10ml)洗涤两次，然后用五氧化二磷干燥，得到微黄色固体的标题化合物(7.0克，产率81％)，由其质谱表征如下：MS(m/z)：172.1([M+H]⁺，100)。

实施例62 -合成3-氨基-5-氯-吡啶-2-羧酰胺

该化合物是利用实施例61的程序来合成，但是是从5-氯-3-硝基-吡啶-2-腈作为起始原材料，80％的产率，微黄色的固体，由其质谱表征如下：MS(m/z)：172.1([M+H]⁺，100)。

实施例63 -合成7-氯-吡啶并[3，2-d]嘧啶-4(3H)-酮

使3-氨基-5-氯-吡啶-2-酰胺(3.43克，20毫摩尔)在原甲酸三乙酯(50ml)中的悬浮液回流3小时。冷却至室温后，过滤收集沉淀物并用己烷洗涤。获得的标题化合物是白色固体(3.4克，产率94％)，由其质谱表征如下：MS(m/z)：182.1([M+H]⁺，100)。

实施例64 -合成4，6-二氯-吡啶并[3，2-公元]嘧啶

向6-氯-吡啶并[3，2-d]嘧啶-4(3H)酮(3.0克，16.5毫摩尔)和N，N-二异丙基乙基胺(9ml，50毫摩尔)在甲苯(150ml)中的混合物中添加三氯氧磷(4.7ml，50mmol)。所得反应混合物回流1.5小时。冷却至室温后，溶剂减压除去。残余物溶解在二氯甲烷(200ml)中并用冷水洗涤直到pH＝＝6-7。有机相用硫酸镁干燥，减压过滤和浓缩以产生粗制4，6-二氯-吡啶并[3，2-d]嘧啶，其不经纯化，而是直接用作进一步的反应。

实施例65 -合成4-(哌嗪-1-基)-6-氯-吡啶并[3，2-d]嘧啶

向哌嗪(7.0克)在1，4-二噁烷(100ml)中的溶液中添加粗制4，6-二氯-吡啶并[3，2-d]嘧啶在1，4-二噁烷(50ml)中的溶液。所得混合物在室温下搅拌1小时。减压浓缩后，残余物通过硅胶急骤层析法纯化，流动相是甲醇/二氯甲烷混合物(比例渐次从1:10到1:5)，产生纯的标题化合物，为微黄色固体(3.1g，产率76％)，由其质谱表征如下：MS(m/z)：250.1([M+H]+，100]。

实施例66 -合成4，7-二氯-吡啶并[3，2-d]嘧啶

该化合物是从7-氯-吡啶并[3，2-d]嘧啶-4(3H)-酮利用实施例64的步骤合成的。

实施例67 -合成7-氯-4-(哌嗪-1-基)-6-氯-吡啶并[3，2-d]嘧啶

该标题化合物是以72％的产率从4，7-二氯-吡啶并[3，2-d]嘧啶通过实施例65的步骤合成的，由其质谱表征如下：MS(m/z)：250.1([M+H]+，100)。

实施例68 -合成4-吗啉基-6-氯-吡啶并[3，2-d]嘧啶

该标题化合物是以71％的产率从4，6-二氯-吡啶并[3，2-d]嘧啶和吗啉通过实施例65的步骤合成的，由其质谱表征如下：MS(m/z)：251.1([M+H]⁺，100)。

实施例69 -合成4-[(N-3-氯苯基氨基甲酰)(哌嗪-1-基)-7-氯-吡啶并[3，2-d]嘧啶

向4-(哌嗪-1-基)-7-氯-吡啶并[3，2-d]嘧啶(1.0克，4毫摩尔)在二氯甲烷(40ml)中的溶液中添加3-氯苯基异氰酸酯(615毫克，4毫摩尔)。反应混合物在室温下搅拌1小时。溶剂减压除去，产生纯的标题化合物(1.6克，产率99％)，是白色固体，由其质谱表征如下：MS(m/z)：403.1([M+H]⁺，100)。

实施例70 -合成4-[(N-3-氯苯基氨基甲酰)-(哌嗪-1-基)-6-氯-吡啶并[3，2-d]嘧啶

该化合物是从4-(哌嗪-1-基)-6-氯-吡啶并[3，2-d]嘧啶(2.5克，10毫摩尔)和3-氯苯基异氰酸酯(1.54克，10毫摩尔)利用实施例69的步骤合成的，产生纯的标题化合物(4.0克，99％)，是白色固体，由其质谱表征如下：MS(m/z)：403.1([M+H]⁺，100)。

实施例71至78 -合成4-[(N-3-氯苯基氨基甲酰)-哌嗪-1-基]-7-芳基-吡啶并[3，2-d]嘧啶

向4-[(N-3-氯苯基氨基甲酰)-哌嗪-1-基]-7-氯-吡啶并[3，2-d]嘧啶(0.5毫摩尔)在二噁烷(20ml)和水(5ml)的溶液中添加适当的芳基硼酸(0.5毫摩尔)、碳酸钾(1.5毫摩尔)、和四(三苯基膦)钯(O)(0.025毫摩尔)。对该混合物在95℃加热，直到该原材料在薄层层析上消失。该反应混合物用二氯甲烷(50ml)稀释并用0.5M的碳酸钠溶液(10ml)洗涤，有机相减压浓缩。残余物通过硅胶柱层析纯化，流动相是丙酮/二氯甲烷混合物(比例渐次从1:3至1:2)，产生纯的以下化合物：

-4-[(N-3-氯苯基氨基甲酰)-哌嗪-1-基]-7-(3-氯-4-甲氧苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶(实施例71)用3-氯-4-甲氧基-苯基硼酸(产率81％)获得，是白色固体，由其质谱表征如下：MS(m/z)：509.1([M+H]+，100)，

-4-[(N-3-氯苯基氨基甲酰)-哌嗪-1-基]-7-(3，4-二甲基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶(实施例72)用3，4-二甲基-苯基硼酸(产率80％)获得，是白色固体，由其质谱表征如下：MS(m/z)：473.2([M+H]+，100)，

-4-[(N-3-氯苯基氨基甲酰)-哌嗪-1-基]-7-(3，4-二氯苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶(实施例73)用3，4-二氯苯基硼酸(产率82％)获得，是白色固体，由其质谱表征如下：MS(m/z)：515.1([M+H]+，100)，

-4-[(N-3-氯苯基氨基甲酰)-哌嗪-1-基]-7-(3-氟-4-甲基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶(实施例74)用3-氟-4-甲基-苯基硼酸(产率92％)获得，是白色固体，由其质谱表征如下：MS(m/z)：477.1([M+H]+，100)，

-4-[(N-3-氯苯基氨基甲酰)-哌嗪-1-基]-7-(3-氯-4-氟苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶(实施例75)用3-氯-4-氟-苯基硼酸(产率86％)获得，是白色固体，由其质谱表征如下：MS(m/z)：497.2([M+H]+，100)，

-4-[(N-3-氯苯基氨基甲酰)-哌嗪-1-基]-7-(3，4-亚甲二氧基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶(实施例76)用3，4-亚甲二氧基苯基硼酸(产率87％)获得，是白色固体，由其质谱表征如下：MS(m/z)：489.2([M+H]+，100)，

-4-[(N-3-氯苯基氨基甲酰)-哌嗪-1-基]-7-(3-氯-4-乙氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶(实施例77)用3-氯-4-乙氧基苯基硼酸(产率81％)获得，是白色固体，由其质谱表征如下：MS(m/z)：523.2([M+H]+，100)，和

-4-[(N-3-氯苯基氨基甲酰)-哌嗪-1-基]-7-(3-氟-4-乙氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶(实施例78)用3-氟-4-乙氧基苯基硼酸(产率88％)获得，是白色固体，由其质谱表征如下：MS(m/z)：507.2.2([M+H]⁺，100)。

实施例79至84 -合成4-[(N-3-氯苯基氨基甲酰)-哌嗪-1-基]-6-芳基-吡啶并[3，2-d]嘧啶

重复实施例71至78的步骤，利用4-[(N-3-氯苯基氨基甲酰)-哌嗪-1-基]-6-氯-吡啶并[3，2-d]嘧啶作为起始原料，用于制备以下纯化合物：

-4-[(N-3-氯苯基氨基甲酰)-哌嗪-1-基]-6-(3-氯-4-甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶(实施例79)用3-氯-4-甲氧基-苯基硼酸(产率86％)获得，是白色固体，由其质谱表征如下：MS(m/z)：509.1([M+H]+，100)，

-4-[(N-3-氯苯基氨基甲酰)-哌嗪-1-基]-6-(1，4-苯并二噁烷-6-基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶(实施例80)用1，4-苯并二噁烷-6-硼酸(产率93％)获得，是白色固体，由其质谱表征如下：MS(m/z)：503.2([M+H]+，100)，

-4-[(N-3-氯苯基氨基甲酰)-哌嗪-1-基]-6-(3，4-二甲基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶(实施例81)用3，4-二甲基-苯基硼酸(产率80％)获得，是白色固体，由其质谱表征如下：MS(m/z)：473.2([M+H]+，100)，

-4-[(N-3-氯苯基氨基甲酰)-哌嗪-1-基]-6-(3，4-亚甲二氧基)苯基-吡啶并[3，2-d]嘧啶(实施例82)用3，4-亚甲二氧基苯基硼酸(产率92％)获得，是白色固体，由其质谱表征如下：MS(m/z)：489.2([M+H]+，100)，

-4-[(N-3-氯苯基氨基甲酰)-哌嗪-1-基]-6-(3-氯-4-乙氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶(实施例83)用3-氯-4-乙氧基苯基硼酸(产率92％)获得，是白色固体，由其质谱表征如下：MS(m/z)：523.1([M+H]+，100)，和

-4-[(N-3-氯苯基氨基甲酰)-哌嗪-1-基]-6-(3，4-二氯苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶(实施例84)用3，4-二氯苯基硼酸(产率76％)获得，是白色固体，由其质谱表征如下：MS(m/z)：515.1([M+H]⁺，100)。

实施例85 -合成6-氯-吡啶并[3，2-d]嘧啶--2(1H)-4(3H)-二酮

将三光气(3.05克，10.14毫摩尔)添加至在氮气氛保护下的6-氯-2-羧基酰氨基-3-氨基-吡啶(3.48克，20.28毫摩尔)在无水二噁烷(125ml)的溶液中，结果立即形成沉淀。该暗橙色反应混合物在氮气氛保护下回流搅拌30分钟。在冷却后，溶剂减压除去，残余物通过硅胶急骤层析法纯化，流动相是甲醇/二氯甲烷混合物(比例渐次从5:95至15:95)，产生纯的标题化合物，是白色粉末(2.96克，产率74％)，由其质谱表征如下：MS(m/z)：198([M+H]⁺，100)。

实施例86 -合成6-(3.4-二甲氧基-苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶-2(1H)-4(3H)-二酮

6-氯-吡啶并[3，2-d]嘧啶-2(1H)-4(3H)-二酮(300毫克，1.52毫摩尔)、碳酸钾(840毫克，6毫摩尔)和3，4-二甲氧基苯基硼酸(360毫克，1.98毫摩尔)在1，4-二噁烷(22.5ml)和水(8ml)中的悬浮液用氮气流清洗15分钟。添加四(三苯基膦)钯(O)(90毫克，76毫摩尔)，该混合物加热回流过夜。在冷却后，过滤该反应混合物。固体残余物用热乙酸重结晶，然后相继地用乙酸、乙酸乙酯和二乙醚洗涤，最终干燥，产生纯的标题化合物(297毫克，产率65％)，由其质谱表征如下：MS(m/z)：300([M+H]⁺，100)。

实施例87 -合成2，4-二氯-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶

6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶-2(1H)-4(3H)-二酮(2.39克，7.97毫摩尔)中POCl3(54ml)中制成悬浮液，并添加三乙胺(3.1ml，21.8毫摩尔)。该棕色混合物在回流条件下搅拌2.5小时，并使其冷却至室温。大多数POCl3减压除去，其余的倾入冰/水中并用二氯甲烷萃取。粗制残余物通过硅胶急骤层析法纯化，流动相是正己烷/乙酸乙酯混合物，比例渐次从1.5:1至1:1，以产生纯的标题化合物(1.69克，产率63％)，由其质谱表征如下：MS(m/z)：336[(M+H)+，100]。

实施例88 -合成2-吗啉基-4-[(N-3-甲基-苯基氨基甲酰-哌嗪-1-基]-6-(3，4-二甲氧基苯基]-吡啶并[3，2-d]嘧啶

2-氯-4-[(N-3-甲基-苯基氨基甲酰)-哌嗪-1-基]-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶(156毫克，0.3毫摩尔)在1，4-二噁烷(10ml)中制成悬浮液，并添加吗啉(0.6毫摩尔)。该反应混合物加热回流4小时，使其冷却至室温，并在二氯甲烷和饱和碳酸氢钠水溶液之间分配。来自有机相的固体残余物通过在氧化硅上的制备级薄层层析纯化，利用乙酸乙酯和正己烷混合物(比例1:4)作为流动相，产生纯的标题化合物(21毫克，产率12％)，由其质谱表征如下：MS(m/z)：570([M+H]⁺，100)。

实施例89 -合成2-丁氧基-4-[(N-3-甲基-苯基氨基甲酰)-哌嗪-1-基]-6-(3.4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3.2-d]嘧啶

28毫克(0.毫摩尔)的60重量％的NaH矿物油溶液在氮气保护下在无水四氢呋喃(5ml)中制成悬浮液，随后添加正丁醇(0.6毫摩尔)。然后，添加2-氯-[(N-3-甲基-苯基氨基甲酰)-哌嗪-1-基]-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶(149毫克，0.9毫摩尔)。该混合物在氮气保护下加热回流2.5小时，然后用水稀释。粗制产品用乙酸乙酯从反应混合物中萃取四次。将有机萃取物合并，用硫酸镁干燥并减压蒸发至干。利用正己烷/乙酸乙酯1:4混合物作为洗脱液，氧化硅上的制备级薄层层析产生纯的标题化合物(148毫克，产率93％)，由其质谱表征如下：MS(m/z)：557([M+H]⁺，100)。

实施例90 -合成2-甲氧基-4-[(N-3-甲基-苯基氨基甲酰)-哌嗪-1-基]-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶

24毫克(0.6毫摩尔)的60重量％的NaH矿物油溶液在氮气保护下在无水四氢呋喃(3ml)中制成悬浮液，随后添加甲醇(0.4摩尔)。该混合物在室温下搅拌15分钟，并添加2-氯-4-[(N-3-甲基-苯基氨基甲酰)-哌嗪-1-基]-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶(104毫克，0.2毫摩尔)。该溶液在氮气保护下加热回流1小时，然后用水稀释。该粗制产品用乙酸乙酯从反应混合物中萃取，有机层用盐水洗涤，用MgSO₄干燥，并减压蒸发至干。利用正己烷/乙酸乙酯按1:5比例的混合物作为洗脱液，氧化硅上的制备级薄层层析产生纯的标题化合物(52毫克，产率51％)，由其质谱表征如下：MS(m/z)：515([M+H]⁺，100)。

实施例91 -合成2-(对甲苯氮基)-4-[(N-3-甲基苯基氨基甲酰)-哌嗪-1-基]-6-(3，4-二甲氧基-苯基)-吡啶并[3.2-d]嘧啶

2-氯-4-[(N-3-甲基-苯基氨基甲酰)-哌嗪-1-基]-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶(104毫克，0.2毫摩尔)、碳酸钾(64毫克，0.46毫摩尔)和对甲苯胺(46毫克，0.43毫摩尔)在1，4-二噁烷/正丁醇5:1混合物(2ml)中的白色悬浮液在室温下在氮气保护气氛中搅拌5分钟。其后，添加四(三苯基膦)钯(O)(26毫克，23μmol)，反应混合物在氮气保护下加热回流48小时。在冷却后，该混合物用水稀释，用乙酸乙酯(添加盐水)萃取三次。将有机萃取物合并，用硫酸钠干燥，过滤并减压蒸发。粗制残余物通过氧化硅上的柱层析利用乙酸乙酯/正己烷混合物作为流动相(比例渐次从1:1至3:1)纯化，产生纯的标题化合物(30毫克，产率25％)，由其质谱表征如下：MS(m/z)：590([M+H]⁺，100)。

实施例92 -合成2-[(3-氯-4-氟-苯氨基)-4-[(N-3-甲基-苯基氨基甲酰]-哌嗪-1-基]-6-(3，4-二甲氧基苯基]-吡啶并[3，2-d]嘧啶

2-氯-4-[(N-3-甲基-苯基氨基甲酰)-哌嗪-1-基]-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶(106毫克，0.20毫摩尔)、碳酸钾(62毫克，0.45毫摩尔)和3-氯-4-氟苯胺(60毫克0.40毫摩尔)在1，4-二噁烷/正丁醇5:1混合物(2ml)中的悬浮液用氮气清洗15分钟。然后，添加四(三苯基膦)钯(O)(28毫克，24μmol)，反应混合物在氮气保护下加热回流20小时。在冷却后，混合物在乙酸乙酯和盐水之间分配。有机相减压蒸发，粗制残余物通过氧化硅上的急骤层析法利用乙酸乙酯/正己烷混合物作为流动相(比例渐次从1:1至4:1)纯化，产生纯的标题化合物(60毫克，产率47％)，由其质谱表征如下：MS(m/z)：628([M+H]⁺，100)。

实施例93 -合成2，4-二氨基-6-(4-羟基-3-甲氧苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶

2，4-二氨基-6-氯吡啶并[3，2-d]嘧啶(378毫克，1.93毫摩尔)、碳酸钾(1075毫克，7.78毫摩尔)和2-甲氧基-4-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二噁硼烷-2-基)-苯酚(599毫克，2.32毫摩尔)在1，4-二噁烷(29ml)和水(6ml)中的悬浮液用氮气流清洗30分钟。然后，添加四(三苯基膦)钯(O)(240毫克，0.21毫摩尔)并用的氮气继续清洗15分钟。该反应混合物然后在氮气保护下加热回流2小时。在冷却后，该混合物在二氯甲烷和盐水之间分配，有机相用硫酸钠干燥、过滤并减压蒸发。残余物通过硅胶急骤层析法用10％甲醇和1％Et₃N在二氯甲烷中的溶液作为流动相进行纯化，给出纯的标题混合物(375毫克，产率69％)，由其质谱表征如下：MS(m/z)：284([M+H]⁺，100)。

实施例94 -合成2，4-二氨基-6-(3-氯-4-甲氧苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶

2，4-二氨基-6-氯吡啶并[3，2-d]嘧啶(464毫克，2.37毫摩尔)、碳酸钾(1332毫克，9.64毫摩尔)、3-氯-4-甲氧基苯基硼酸(907毫克，4.86毫摩尔)在1，4-二噁烷(35.5ml)和水(7ml)中的悬浮液用氮气清洗15分钟。然后，添加四(三苯基膦)钯(O)(278毫克，0.24毫摩尔)，反应混合物在氮气保护下加热回流4小时。在冷却后，该混合物在二氯甲烷和饱和碳酸氢钠水溶液之间分配。有机相用硫酸钠干燥、过滤并减压蒸发。粗制残余物通过硅胶急骤层析法纯化，利用甲醇和1％Et3N在二氯甲烷中的溶液作为洗脱液，渐次地使甲醇浓度从5％增至10％，给出纯的标题化合物(277毫克，产率39％)，由其质谱表征如下：MS(m/z)：302([M+H]⁺，100)。

实施例95 -合成2-氨基-6-(4-羟基-3-甲氧基-苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶-4(3H)-酮

使2，4-二氨基-6-(4-羟基-3-甲氧基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶(268毫克，0.5毫摩尔)在6M的含水盐酸(7.6ml)中的悬浮液回流26小时。冷却后的反应混合物在4℃储存16小时。将所获得的黄色沉淀物过滤出来，用水洗涤直到滤液pH值呈中性，干燥得到243毫克(产率90％)纯的标题化合物，由其质谱表征如下：MS(m/z)：285([M+H]⁺，100)。

实施例96 -合成2-氨基-4-(N-吗啉基)-6-(4-羟基-3-甲氧基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶

2-氨基-6-(4-羟基-3-甲氧苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶-4(3H)酮(66毫克，0。23毫摩尔)、对甲苯磺酸一水化物(10毫克，53μmole)、硫酸铵(11毫克，83μmole)、1，1，1，3，3，3-六甲基二硅氨烷(1.15毫摩尔)和吗啉(1.83毫摩尔)在甲苯(2ml)中的悬浮液回流33小时。使该反应混合物冷却并在乙酸乙酯和盐水/饱和碳酸钠水溶液之间分配。水层用乙酸乙酯萃取两次。合并后的有机层用硫酸镁干燥、过滤并减压蒸发。粗制残余物通过在氧化硅上的制备性薄层色谱法用5％甲醇和1％Et₃N在二氯甲烷中的溶液作为流动相进行纯化，给出纯的标题混合物(68毫克，产率84％)，由其质谱表征如下：MS(m/z)：354([M+H]⁺，100)。

实施例97 -合成2-氨基-4-(N-吗啉基)-6-(4-乙氧基-3-甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶

2-氨基-4-(N-吗啉基)-6-(4-羟基-3-甲氧基-苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶(32毫克，90微摩尔量)、无水碳酸钾(30毫克，0.22毫摩尔)和碘乙烷(0.36毫摩尔)在丙酮(2ml)者的黄色悬浮液在氮保护气氛下回流。在24小时后，添加第二等份的碳酸钾和碘乙烷，反应继续24小时。在冷却后，该反应混合物在乙酸乙酯和5％的碳酸氢钠水溶液之间分配。水层用乙酸乙酯反萃取。合并后的有机层用硫酸镁干燥、过滤并减压蒸发。粗制残余物通过在氧化硅上的制备性薄层色谱法用5％甲醇和1％Et₃N在二氯甲烷中的溶液作为流动相进行纯化，给出纯的标题混合物(28毫克，产率76％)，由其质谱表征如下：MS(m/z)：382([M+H]⁺，100)。

实施例98 -合成2-氨基-4-(N-吗啉基)-6-(4-环戊氧基-3-甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶

2-氨基-4-(N-吗啉基)-6-(4-羟基-3-甲氧基-苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶(68毫克，0.9毫摩尔)、无水碳酸钾(53毫克，0.38毫摩尔)和环戊基碘化物(0.75毫摩尔)在二甲基甲酰胺(4ml)中的暗橙色溶液在60℃搅拌。24小时后，添加第二等份的环戊基碘化物，反应是再继续24小时。在冷却后，反应混合物在乙酸乙酯和盐水/5％碳酸氢钠水溶液之间分配。水层用乙酸乙酯萃取两次。合并后的有机层用硫酸镁干燥、过滤并减压蒸发。粗制残余物通过在氧化硅上的制备级薄层色谱法用5％甲醇在二氯甲烷中的溶液作为流动相进行纯化，给出纯的标题混合物(6毫克，产率7％)，由其质谱表征如下：MS(m/z)：422([M+H]⁺，100)。

实施例99 -合成2-氨基-4-(N-吗啉基)-6-(4-异丙氧基-3-甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶

向2-氨基-4-(N-吗啉基)-6-(3-甲氧基-4-羟基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶(107毫克，0.30毫摩尔)在干燥的二甲基甲酰胺(10ml)中的黄色溶液中添加60重量％的NaH在矿物油(0.93毫摩尔)中的溶液，产生一橙色悬浮液。然后，添加2-碘丙烷(6.02毫摩尔)，反应混合物在室温下搅拌40分钟。该反应混合物在乙酸乙酯和盐水之间分配。有机层用硫酸镁干燥、过滤并减压蒸发。粗制残余物通过在氧化硅上的制备性薄层色谱法用5％甲醇、1％Et₃N在二氯甲烷中的溶液作为流动相进行纯化，给出标题混合物(83毫克，产率70％)，由其质谱表征如下：MS(m/z)：396([M+H]⁺，100)。

实施例100 -合成2-氨基-4-(N-哌嗪-1-基)-6-(3-甲氧基-4-羟基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶

2-氨基-6-(4-羟基-3-甲氧苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶-4(3H)酮(227毫克，0.80毫摩尔)、对甲苯磺酸一水化物(88μmole)、硫酸铵(0.12μmole)、1，1，1，3，3，3-六甲基二硅氨烷(3.98毫摩尔)和哌嗪(11.72毫摩尔)在甲苯(3ml)中的悬浮液回流24小时。在冷却后，反应混合物在乙酸乙酯和5％碳酸氢钠水溶液/盐水之间分配。水层用乙酸乙酯萃取三次。合并后的有机层用硫酸镁干燥、过滤并减压蒸发。粗制残余物通过在氧化硅上的制备性薄层色谱法用15％甲醇、1％Et3N在二氯甲烷中的溶液作为流动相进行纯化，给出标题化合物(74毫克，产率62％)，由其质谱表征如下：MS(m/z)：353([M+H]⁺，100)。

实施例101 -合成2-氨基-4-[(N-4-氟苯基-氨基甲酰)-哌嗪-1-基)-6-(4-羟基-3-甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶

4-氟苯基异氰酸酯(0.39毫摩尔)在二甲基甲酰胺(0.5ml)中的溶液被添加到2-氨基-4-(N-哌嗪-1-基)-6-(4-羟基-3-甲氧基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶(0.31毫摩尔)在二甲基甲酰胺(2ml)中的黄色悬浮液中。该混合物在室温下搅拌1小时。溶剂在真空中蒸发。粗制残余物通过在氧化硅上的制备性薄层色谱法用5％甲醇、1％Et₃N在二氯甲烷中的溶液作为流动相进行纯化，给出纯的标题化合物(100毫克，产率66％)，由其质谱表征如下：MS(m/z)：490([M+H]⁺，100)。

实施例102 -合成2-氨基-4-[(N-4-氟苯基-氨基甲酰-哌嗪-1-基)-6-(4-乙氧基-3-甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶

2-氨基-4-[(N-4-氟-苯基-氨基甲酰)-哌嗪-1-基]-6-(4-羟基-3-甲氧苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶(0.13毫摩尔)、无水碳酸钾(0.80毫摩尔)和碘乙烷(1.23毫摩尔)在丙酮(5ml)中的悬浮液回流24小时。在冷却后，反应混合物在乙酸乙酯和盐水之间分配。水层用乙酸乙酯反萃取。合并后的有机层用硫酸镁干燥、过滤并减压蒸发。残余物通过在氧化硅上的制备级薄层色谱法用5％甲醇在二氯甲烷中的溶液作为流动相进行纯化，给出纯的标题化合物(15毫克，产率22％)，由其质谱表征如下：MS(m/z)：518([M+H]⁺，100)。

实施例103 -合成2-氨基-4-[(N-4-氟苯基-氨基甲酰)-哌嗪-1-基]-6-(4-异丙氧基-3-甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶

2-氨基-4-[(N-4-氟-苯基-氨基甲酰)-哌嗪-1-基]-6-(4-羟基-3-甲氧苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶(96μmole)、无水碳酸钾(0.220毫摩尔)和2-碘乙烷(0.96毫摩尔)在丙酮(7ml)中的悬浮液回流20小时。然后，添加另一等份的2-碘丙烷，反应再继续24小时。在冷却后，反应混合物在乙酸乙酯和盐水之间分配，水层用乙酸乙酯萃取若干次。合并后的有机层用硫酸镁干燥、过滤并减压蒸发。粗制残余物通过在硅胶急骤层析法法用10％甲醇在二氯甲烷中的溶液作为流动相进行纯化，给出纯的标题化合物(20毫克，产率39％)，由其质谱表征如下：MS(m/z)：532([M+H]⁺，100)。

实施例104 -合成2-氨基-4-[(N-3-甲基苯基-氨基甲酰)-哌嗪-1-基]-6-(4-羟基-3-甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶

间-甲苯酰基异氰酸酯(0.55毫摩尔)被添加到2-氨基-4-(N-哌嗪-1-基)-6-(4-羟基-3-甲氧苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶(0.55毫摩尔)在二甲基甲酰胺(7ml)中的悬浮液中。该混合物在室温下搅拌20分钟，然后在乙酸乙酯和5％的碳酸氢钠水溶液之间分配。水层用乙酸乙酯萃取两次。合并后的有机层用硫酸镁干燥、过滤并减压蒸发。粗制残余物通过在氧化硅上的制备级薄层层析法用5％甲醇、1％Et₃N在二氯甲烷中的溶液作为洗脱液进行纯化，给出纯的标题化合物(123毫克，产率46％)，由其质谱表征如下：MS(m/z)：486([M+H]⁺，100)。

实施例105 -合成4-(4-甲基苯基-哌嗪-1-基)-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶

向4-氯-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶(0.597毫摩尔)在异丙醇(20ml)中的悬浮液中添加1-(4-甲基)苯基-哌嗪(1.2毫摩。).该反应混合物在80℃加热2小时，之后该悬浮液变成黄色溶液。溶剂在真空中蒸发。残余物在乙酸乙酯中重新溶解，并氢氧化钠溶液(1N)萃取。合并的有机层在真空中蒸发，并通过硅胶柱层析(流动相是甲醇和二氯甲烷混合物，混合比例渐次从1:99至2:98)纯化，产生标题化合物(191毫克，产率73％)，由其质谱表征如下：MS(m/z)：442([M+H]⁺，100)。

实施例106 -合成4-(4-氟苯基-哌嗪-1-基)-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶

执行实施例105的步骤，但是利用1-(4-氟)苯基-哌嗪作为起始原材料，因而产生纯的标题化合物，由其质谱表征如下：MS(m/z)：446([M+H]⁺，100)。

实施例107 -合成4-(N-哌嗪-1-基)-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶

向4-氯-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶(1.47毫摩尔)在异丙醇(50ml)中的悬浮液中添加哌嗪(1.2毫摩)。该反应混合物在80℃加热2小时。挥发性组分在真空中蒸发。粗制残余物通过硅胶急骤层析法纯化，流动相甲醇/二氯甲烷混合物，其中带有0.5％的氨水溶液(比例渐次从2:98至3:97)，产生纯的标题化合物(351毫克，产率68％)，由其质谱表征如下：MS(m/z)：352([摩尔+H]+，100)。

实施例108至112 -合成4-(N-氨基甲酰-哌嗪-1-基)-6-(3，4-二甲氧基-苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶

向4-(N-哌嗪-1-基)-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]-嘧啶(0.26毫摩尔)在二甲基甲酰胺(20ml)中的溶液中添加适当的异氰酸酯(0.39毫摩尔)。该反应混合物在室温下搅拌2小时。溶剂在真空中蒸发，粗制残余物通过硅胶急骤层析法纯化，流动相是甲醇和二氯甲烷的混合物，比例渐次从2:98至3:97，给出纯的标题化合物，产率65至80％，取决于相关的异氰酸酯。以下各个化合物依据这种步骤制造:

-4-[(N-3-氯-4-氟苯基氨基甲酰)-哌嗪-1-基]-6-(3，4-二甲氧基-苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶(实施例108)用3-氯-4-氟苯基异氰酸酯获得，由其质谱表征如下：MS(m/z)：524([M+H]⁺，100)，

-4-[(N-2-噻吩基-氨基甲酰)-哌嗪-1-基]-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶(实施例109)用2-噻吩基异氰酸酯获得，由其质谱表征如下：MS(m/z)：477([M+H]⁺，100)，

-4-[(N-2，6-二氯-吡啶基-氨基甲酰)-哌嗪-1-基]-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶(实施例110)用2，6-二氯-4-异氰酸酯-吡啶获得，由其质谱表征如下：MS(m/z)：541([M+H]⁺，100)，

-4-[(N-4-氟苯基氨基甲酰)-哌嗪-1-基]-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶(实施例111)用4-氟苯基异氰酸酯获得，由其质谱表征如下：MS(m/z)：489([M+H]⁺，100)，

-4-[(N-3-氯苯基氨基甲酰)-哌嗪-1-基]-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶(实施例112)用3-氯苯基异氰酸酯获得，由其质谱表征如下：MS(m/z)：506([M+H]⁺，100]。

实施例113 -合成4-[(N-4-氯苯氧基-乙酰基哌嗪-1-基]-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶

向4-(N-哌嗪-1-基)-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]-嘧啶(0.18毫摩尔)在二甲基甲酰胺(20ml)中的溶液中添加三乙胺(0.26毫摩尔)和对氯苯氧基乙酰氯(0.23毫摩尔)。反应混合物在室温下搅拌3小时，然后用水骤冷。水相用二氯甲烷萃取。合并的有机层在真空中蒸发。粗制残余物通过在硅胶急骤层析法用甲醇/二氯甲烷混合物(比例2:98)作为流动相进行纯化，给出纯的标题化合物(66毫克，产率71％)，由其质谱表征如下：MS(m/z)：521([M+H]⁺，100)。

实施例114 -合成6-(3-甲基-4-甲氧苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶-4(3H)酮

向6-氯-吡啶并[3，2-d]嘧啶-4(3H)酮(1.94毫摩尔)在1，4-二噁烷(40ml)和水(20ml)中的溶液中添加4-甲氧基-3-甲基苯基硼酸(2.33毫摩尔)、碳酸钾(4.85毫摩尔)和四(三苯基膦)钯(O)(0.097毫摩尔)。该反应混合物回流2小时，冷却至室温，溶剂在真空中蒸发。残余物被吸附的在氧化硅上，通过硅胶柱层析纯化(流动相是甲醇/二氯甲烷混合物，比例3:97)，给出标题化合物纯白粉末(398毫克，产率77％)，由其质谱表征如下：MS(m/z)：268([M+H]⁺，100)。

实施例115 -合成4-氯-6-(3-甲基-4-甲氧苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶

向6-(3-甲基-4-甲氧苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶-4(3H)酮(1.41毫摩尔)在甲苯(80ml)中的悬浮液中添加三氯氧化磷(4.23毫摩尔)和2，6-二甲基吡啶(4.23毫摩尔)。反应混合物回流16小时，直到获得一种黑色溶液。在蒸干后，残余物重新溶解在乙酸乙酯中，并用饱和碳酸氢钠溶液萃取。合并的有机层在真空中蒸发。残余物通过硅胶柱层析(流动相是乙酸乙酯/己烷混合物，比例渐次从2:8至3:7)纯化，产生纯的标题化合物(300毫克，产率74％)，由其质谱表征如下：MS(m/z)：287([M+H]⁺，100)。

实施例116 -合成4-(哌嗪-1-基)-6-(3-甲基-4-甲氧苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶

向4-氯-6-(3-甲基-4-甲氧苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶(0.99毫摩尔)在异丙醇(40ml)中的悬浮液中添加哌嗪(1.99毫摩尔)。反应混合物在80℃加热2小时。溶剂在真空中蒸发。粗制残余物通过硅胶急骤层析法纯化(流动相甲醇和二氯甲烷混合物，其中带有0.5％的氨水溶液(比例渐次从2:98至3:97))，产生纯的标题化合物(259毫克，产率78％)，由其质谱表征如下MS(m/z)：336([M+H]⁺100)。

实施例117 -合成4-[(N-3-氯-苯基氨基甲酰)-哌嗪-1-基]-6-(3-甲基-4-甲氧苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶

向4-(N-哌嗪-1-基)-6-(3-甲基-4-甲氧苯基)-吡啶并[3，2-d]-嘧啶(0.25毫摩尔)在DMF(30ml)中的溶液中添加3-氯苯基异氰酸酯(0.38毫摩尔)。该反应混合物在室温下搅拌2小时。溶剂在真空中蒸发，粗制残余物通过硅胶急骤层析法纯化(流动相是甲醇和二氯甲烷混合物，比例渐次从2:98至3:97)，产生纯的标题化合物(81毫克，产率66％)，由其质谱表征如下MS(m/z)：490([M+H]⁺100)。

实施例118 -合成4-[(N-4-氯-苯基氨基甲酰)-哌嗪-1-基]-6-(3-甲基-4-甲氧苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶

执行实施例117的步骤，但是利用4-氯苯基异氰酸酯作为起始原材料。纯的标题化合物分离的产率是81％，由其质谱表征如下：MS(m/z)：490([M+H]⁺，100)。

实施例119 -合成4-[(N-3-氯-苯基氨基甲酰)-哌嗪-1-基]-6-(3-甲氧基-4-羟基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶

向4-[(N-3-氯-苯基氨基甲酰)-哌嗪-1-基]-6-氯-吡啶并[3，2-d]嘧啶(0.51毫摩尔)在1，4-二噁烷(15ml)和水(5ml)中的溶液中添加2-甲氧基-4-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二噁硼烷-2-基)-苯酚(0.51毫摩尔)、碳酸钾(1.53毫摩尔)和四(三苯基膦)钯(O)(0.02毫摩尔)。该反应混合物回流两小时，冷却至室温，溶剂在真空中蒸发。残余物通过硅胶柱层析法纯化(流动相是丙酮/二氯甲烷混合物，混合比例20:80)，，给出标题化合物纯白粉末(135毫克，产率54％)，由其质谱表征如下：MS(m/z)：492([M+H]⁺，100)。

实施例120 -合成4-[(N-3-氯-苯基氨基甲酰)-哌嗪-1-基]-6-(3-甲氧基-4-乙氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶

向4-[(N-4-氯-苯基氨基甲酰)-哌嗪-1-基]-6-(3-甲氧基-4-羟基苯基-吡啶并[3，2-d]嘧啶(0.19毫摩尔)在干燥二甲基甲酰胺(15ml)中的溶液中添加碳酸钾(0.19毫摩尔)。混合物室温下在氮气保护下搅拌30分钟，然后添加乙基碘(0.19毫摩尔)。反应混合物在室温下搅拌16小时。溶剂在真空中蒸发，残余物通过硅胶急骤层析法纯化(流动相是甲醇/二氯甲烷混合物，比例2:98)，给出纯的标题化合物白色粉末(67毫克，产率68％)，由其质谱表征如下：MS(m/z)：520([M+H]⁺，100)。

实施例121 -合成4-[(N-3-氯-苯基氨基甲酰)-哌嗪-1-基]-6-(3-甲氧基-4-异丙氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶

遵从实施例120的步骤，但是利用2-碘丙烷作为起始材料。分离出纯的标题化合物，由其质谱表征如下：MS(m/z)：533([摩尔+h]+，100)。

实施例122 -合成4-[(N-3-氯-苯基乙酰基)-哌嗪-1-基]-6-氯吡啶并[3，2-d]嘧啶

使3-氯苯基乙酸(2毫摩尔)在亚硫酰氯(10ml)中的悬浮液回流1小时。减压除去过量亚硫酰氯，产生粗制3-氯苯乙酸氯化物。粗制残余物重新溶解在二氯甲烷(10ml)中，然后该溶液被添加到4-(哌嗪-1-基)-6-氯-吡啶并[3，2-d]嘧啶(2毫摩尔)在二氯甲烷(10ml)中的溶液中。所得混合物在室温下搅拌1小时。溶剂在真空中蒸发除去。粗制残余物通过硅胶柱层析法纯化(流动相是甲醇/二氯甲烷混合物，混合比例1:40)，给出纯的标题化合物(产率60％)，是微黄色固体，由其质谱表征如下：MS(m/z)：403.1([M+H]⁺，100)。

实施例123 -合成4-吗啉基-6-(3，4-二氯苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶

4-吗啉基-6-氯-吡啶并[3，2-d]嘧啶与3，4-二氯苯基硼酸的反应给出纯的标题化合物(产率97％)，一种微黄色固体，由其质谱表征如下：MS(m/z)：361.2([摩尔+H]+，100)。

实施例124 -合成4-吗啉基-6-(4-氯苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶

4-吗啉基-6-氯-吡啶并[3，2-d]嘧啶与4-氯苯基硼酸的反应给出纯的标题化合物(产率92％)，一种白色固体，由其质谱表征如下：MS(m/z)：341.2([摩尔+H]+，100)。

实施例125 -合成4-[(N-3-氯-苯基乙酰基)-哌嗪-1-基]-6(3，4-二氯苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶

4-[(N-3-氯苯基乙酰基)哌嗪-1-基]-6-氯-吡啶并[3，2-d]嘧啶与3，4-二氯苯基硼酸的反应给出纯的标题化合物(产率86％)，一种微黄色固体，由其质谱表征如下：MS(m/z)：512.2([摩尔+H]+，100)。

实施例126至132 -合成2-氨基-6-芳基-吡啶并[3，2-d]嘧啶-4(3H)-酮

向经过脱气处理的2-氨基-6-氯-吡啶并[3，2-d]嘧啶-4(3H)-酮(6毫摩尔)、适当的芳基硼酸(6.6毫摩尔)和碳酸钾(30毫摩尔)在二噁烷(120ml)和水(30ml)混合物中的悬浮液中添加催化剂量的四(三苯基膦)钯(O)(0.9g)。该混合物回流24小时，在冷却至室温后，过滤该反应混合物。滤液用5N的盐酸酸化至pH值为4，所得沉淀物过滤出来，相继用水、乙醇和二乙醚洗涤，真空干燥产生所要求的化合物，产率在65和85％之间，取决于所用的相关芳基硼酸。以下各个化合物依据这种步骤制造：

-2-氨基-6-(3-甲氧基-4-甲基-苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶-4(3H)-酮(实施例126)用3-甲氧基-4-甲基苯基硼酸获得，由其质谱表征如下：MS(m/z)：317([M+H]⁺，100)，

-2-氨基-6-(3-氯-4-乙氧基-苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶-4(3H)-酮(实施例127)用3-氯-4-乙氧基苯基硼酸获得，由其质谱表征如下：MS(m/z)：317([M+H]⁺，100)，

-2-氨基-6-(3-乙氧基-4-氟-苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶-4(3H)-酮(实施例128)用3-乙氧基-4-氟苯基硼酸获得，由其质谱表征如下：MS(m/z)：301([M+H]⁺，100)，

-2-氨基-6-(3-甲基-4-氟-苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶-4(3H)-酮(实施例129)用3-甲基-4-氟苯基硼酸获得，由其质谱表征如下：MS(m/z)：271([M+H]⁺，100)，

-2-氨基-6-(3，4-二氯-苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶-4(3H)-酮(实施例130)用3，4-二氯苯基硼酸获得，由其质谱表征如下：MS(m/z)：307([M+H]⁺，100)，

-2-氨基-6-(3，4-(亚甲二氧基)-苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶-4(3H)-酮(实施例130)用3，4-(亚甲二氧基)苯基硼酸获得，由其质谱表征如下：MS(m/z)：283([M+H]⁺，100)，和

-2-氨基-6-(1，4-苯并二噁烷-苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶-4(3H)-酮(实施例131)用1，4-苯并二噁烷-苯基硼酸获得，由其质谱表征如下：MS(m/z)：297([M+H]⁺，100)。

实施例133至139 -合成2-乙酰氨基-6-芳基-吡啶并[3，2-d]嘧啶-4(3H)-酮

-2-氨基-6-芳基-吡啶并[3，2-d]嘧啶-4(3H)-酮(2.0克)在乙酸酐(180ml)和乙酸(20ml)中制成悬浮液，该混合物回流16小时。将热悬浮液过滤，滤液减压浓缩直到有结晶出现。沉淀物过滤产率得到纯的标题化合物，产率从70至80％，取决于起始原料中存在的6-芳基取代基。以下化合物依据这种步骤制造：

-2-乙酰氨基-6-(3-甲氧基-4-甲基-苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶-4(3H)-酮(实施例133)，其质谱表征如下：MS(m/z)：325([M+H]⁺，100)，

-2-乙酰氨基-6-(3-氯-4-乙氧基-苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶-4(3H)-酮(实施例134)，其质谱表征如下：MS(m/z)：359([M+H]⁺，100)，

-2-乙酰氨基-6-(3-乙氧基-4-氟-苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶-4(3H)-酮(实施例135)，其质谱表征如下：MS(m/z)：343([M+H]⁺，100)，

-2-乙酰氨基-6-(3-甲基-4-氟-苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶-4(3H)-酮(实施例136)，其质谱表征如下：MS(m/z)：313([M+H]⁺，100)，

-2-乙酰氨基-6-(3，4-二氯苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶-4(3H)-酮(实施例137)，其质谱表征如下：MS(m/z)：349([M+H]⁺，100)，

-2-乙酰氨基-6-(3，4-(亚甲二氧基)-苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶-4(3H)-酮(实施例138)，其质谱表征如下：MS(m/z)：325([M+H]⁺，100)，和

-2-乙酰氨基-6-(1，4-苯并二噁烷-苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶-4(3H)-酮(实施例139)，其质谱表征如下：MS(m/z)：338([M+H]⁺，100)。

实施例140至147 -合成2-乙酰氨基-4-(1，2，4-三唑基)-6-芳基-吡啶并[3，2-d]嘧啶

1，2，4-三唑(120毫摩尔)和三氯氧磷(36毫摩尔)在干燥乙腈(150ml)中的悬浮液被添加到搅拌着的2-乙酰氨基-6-芳基-吡啶并[3，2-d]嘧啶-4(3H)-酮(12毫摩尔)(在实施例133至139获得)和三乙胺(36毫摩尔)在干燥乙腈(150ml)中的悬浮液中。混合物在室温下在氮气保护下搅拌70小时，将黄色沉淀物过滤出来，然后相继地用乙醇和醚洗涤，并在真空干燥器中用五氧化二磷干燥，产生纯的标题化合物。根据所存在的6-芳基取代基，产率在63％和90％之间。以下化合物依据这种步骤制造：

-2-乙酰氨基-4-(1，2，4-三唑基)-6-(3-甲基-4-甲氧苯基)吡啶并-[3，2-d]嘧啶(实施例140)其质谱表征如下：MS(m/z)：376([M+H]⁺，100)，

-2-乙酰氨基-4-(1，2，4-三唑基)-6-(3-氯-4-甲氧基-苯基)吡啶并-[3，2-d]嘧啶(实施例141)其质谱表征如下：MS(m/z)：396([M+H]⁺，100)，

-2-乙酰氨基-4-(1，2，4-三唑基)-6-(3-氯-4-乙氧基-苯基)吡啶并-[3，2-d]嘧啶(实施例142)其质谱表征如下：MS(m/z)：411([M+H]⁺，100)，

-2-乙酰氨基-4-(1，2，4-三唑基)-6-(3-氟-4-乙氧基-苯基)吡啶并-[3，2-d]嘧啶(实施例143)其质谱表征如下：MS(m/z)：395([M+H]⁺，100)，

-2-乙酰氨基-4-(1，2，4-三唑基)-6-(3-甲基-4-氟-苯基)吡啶并-[3，2-d]嘧啶(实施例144)其质谱表征如下：MS(m/z)：365([M+H]⁺，100)，

-2-乙酰氨基-4-(1，2，4-三唑基)-6-(3，4-二氯-苯基)吡啶并-[3，2-d]嘧啶(实施例145)其质谱表征如下：MS(m/z)：400([M+H]⁺，100)，

-2-乙酰氨基-4-(1，2，4-三唑基)-6-(3，4-(亚甲二氧基)苯基)吡啶并-[3，2-d]嘧啶(实施例146)其质谱表征如下；MS(m/z)：377([M+H]⁺，100)，和

-2-乙酰氨基-4-(1，2，4-三唑基)-6-(1，4-苯并二噁烷-苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶-4(3H)-酮(实施例147)，其质谱表征如下：MS(m/z)：381([M+H]⁺，100)。

实施例148至155 -合成2-乙酰氨基-4-(N-哌嗪-1-基)-6-芳基-吡啶并[3，2-d]嘧啶

向2-乙酰氨基-4-(1，2，4-三唑基)-6-芳基-吡啶并[3，2-d]嘧啶(1.25毫摩尔；在实施例140至147中获得)在二噁烷(50ml)中的悬浮液中添加哌嗪(2.5毫摩尔)。反应混合物在50℃搅拌16小时。溶剂被蒸发，粗制残余物通过氧化硅上的制备级薄层层析利用甲醇/二氯甲烷按比例20:80的混合物作为流动相来纯化，给出纯的标题化合物，产率在30和40％之间，取决于所存在的6-芳基取代基。以下化合物依据这种步骤制造：

-2-乙酰氨基-4-(N-哌嗪-1-基)-6-(3-甲基-4-甲氧基-苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶(实施例148)，其质谱表征如下：MS(m/z)：394([M+H]⁺，100)，

-2-乙酰氨基-4-(N-哌嗪-1-基)-6-(3-氯-4-甲氧基-苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶(实施例149)，其质谱表征如下：MS(m/z)：414([M+H]⁺，100)，

-2-乙酰氨基-4-(N-哌嗪-1-基)-6-(3-氯-4-乙氧基-苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶(实施例150)，其质谱表征如下：MS(m/z)：428([M+H]⁺，100)，

-2-乙酰氨基-4-(N-哌嗪-1-基)-6-(3-氟-4-乙氧基-苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶(实施例151)，其质谱表征如下：MS(m/z)：412([M+H]⁺，100)，

-2-乙酰氨基-4-(N-哌嗪-1-基)-6-(3-甲基-4-氟-苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶(实施例152)，其质谱表征如下：MS(m/z)：382([M+H]⁺，100)，

-2-乙酰氨基-4-(N-哌嗪-1-基)-6-(3，4-二氯-苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶(实施例153)，其质谱表征如下：MS(m/z)：418([M+H]⁺，100)，

-2-乙酰氨基-4-(N-哌嗪-1-基)-6-(3，4-(亚甲二氧基)苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶(实施例154)，其质谱表征如下：MS(m/z)：393([M+H]⁺，100)，和

-2-乙酰氨基-4-(N-哌嗪-1-基)-6-(1，4-苯并二噁烷-苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶(实施例155)，其质谱表征如下：MS(m/z)：407([M+H]⁺，100)。

实施例156至162 -合成2-乙酰氨基-4-[(N-3-氯-苯基-氨基甲酰)-哌嗪-1-基]-6-芳基-吡啶并[3，2-d]嘧啶和2-氨基-4-[(N-3-氯-苯基-氨基甲酰]-哌嗪-1-基]-6-芳基-吡啶并[3，2-d]嘧啶

向2-乙酰氨基-4-(哌嗪-1-基)-6-芳基-吡啶并[3，2-d]嘧啶(0.5毫摩尔)在二甲基甲酰胺(5ml)中的溶液中添加3-氯苯基异氰酸酯(0.75毫摩尔)。反应混合物在室温下搅拌16小时。溶剂在真空中蒸发，给出粗制2-乙酰氨基-4-[(N-3-氯-苯基-氨基甲酰)-哌嗪-1-基]-6-芳基-吡啶并[3，2-d]嘧啶作为中间体。将该粗制残余物溶解在二氯甲烷(10ml)和乙醇钠0.2N(10ml)的混合物中。该悬浮液搅拌16小时，并用5-6N的氯化氢异丙醇溶液中和，产生粗制2-氨基-4-[(N-3-氯-苯基-氨基甲酰)-哌嗪-1-基]-6-芳基-吡啶并[3，2-d]嘧啶作为最终产品。粗制产品通过制备级薄层层析法纯化，流动相包括甲醇/二氯甲烷混合物，混合比例10:90，产生纯的标题化合物，产率在20至40％，取决于存在的6-芳基取代基。以下化合物依据这种步骤合成(每一次经过相对应的中间体，其2-氨基用乙酰氨基形式保护)：

-2-氨基-4-[(N-3-氯-苯基-氨基甲酰)-哌嗪-1-基]-6-(3-甲基-4-甲氧基-苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶(实施例156)，其质谱表征如下：MS(m/z)：505([M+H]⁺，100)，

-2-氨基-4-(N-3-氯-苯基-氨基甲酰)哌嗪-1-基]-6-(3-氯-4-甲氧基-苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶(实施例157)，其质谱表征如下：MS(m/z)：525([M+H]⁺，100)，

-2-氨基-4-[(N-3-氯-苯基-氨基甲酰)哌嗪-1-基)-6-(3-氯-4-乙氧基-苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶(实施例158)，其质谱表征如下：MS(m/z)：538([M+H]⁺，100)，

-2-氨基-4-(N-3-氯-苯基-氨基甲酰)哌嗪-1-基]-6-(3-氟-4-乙氧基-苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶(实施例159)，其质谱表征如下：MS(m/z)：523([M+H]⁺，100)，

-2-氨基-4-[(N-3-氯-苯基-氨基甲酰)哌嗪-1-基)-6-(3，4-二氯-苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶(实施例160)，其质谱表征如下：MS(m/z)：528([M+H]⁺，100)，

-2-氨基-4-[(N-3-氯-苯基-氨基甲酰)-哌嗪-1-基]-6-(3，4-(亚甲基二氧)苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶(实施例161)，其质谱表征如下：MS(m/z)：505([M+H]⁺，100)，和

-2-氨基-4-[(N-3-氯-苯基-氨基甲酰)-哌嗪-1-基)-6-(1，4-苯并二噁烷-苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶(实施例162)，其质谱表征如下：MS(m/z)：519([M+H]⁺，100)。

实施例163至165 -合成2-氨基-4-吗啉基-6-芳基-吡啶并[3，2-d]嘧啶

向2-乙酰氨基-6-芳基-吡啶并[3，2-d]嘧啶-4(3H)-酮(1毫摩尔)在甲苯(10ml)中的悬浮液中添加吗啉(4毫摩尔)、对甲苯磺酸(0.1毫摩尔)、硫酸铵(0.1毫摩尔)和1，1，1，3，3，3-六甲基二硅氨烷(8毫摩尔)。该反应混合物回流48小时直到形成一棕棕色色溶液。溶剂在真空中蒸发，所得粗制残余物重新溶解在二氯甲烷中，并相继地用饱和碳酸氢钠水溶液和水萃取。合并后的机层用硫酸钠干燥并在真空中蒸发，产生粗制2-氨基-4-吗啉基-6-芳基-吡啶并[3，2-d]嘧啶作为最终产品。粗制残余物通过氧化硅上的制备级薄层层析利用甲醇/二氯甲烷按比例10:90的混合物作为流动相来纯化，给出纯的最终化合物，产率在20和30％之间，取决于所存在的6-芳基取代基。以下最终化合物依据这种步骤合成(每一次经过相对应的中间体，其2-氨基用乙酰氨基形式保护)：

-2-氨基-4-(吗啉基)-6-(3-甲基-4-甲氧基苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶(实施例163)，其质谱表征如下：MS(m/z)：352([M+H]⁺，100)，

-2-氨基-4-(吗啉基)-6-(3-氯-4-甲氧基苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶(实施例164)，其质谱表征如下：MS(m/z)：372([M+H]⁺，100)，和

-2-氨基-4-(吗啉基)-6-(1，4-苯并二噁烷-苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶(实施例165)，其质谱表征如下：MS(m/z)：366([M+H]⁺，100)。

实施例166至168 -合成2-氨基-4-吗啉基-6-芳基-吡啶并[3，2-d]嘧啶

向2-乙酰氨基-4-(1，2，4-三唑基)-6-芳基-吡啶并[3，2-d]嘧啶(0.5毫摩尔)在二噁烷(5ml)中的悬浮液中添加吗啉(1毫摩尔)。反应混合物在50℃搅拌16小时。溶剂在真空中蒸发，产生粗制2-乙酰氨基-4-吗啉基-6-芳基-吡啶并[3，2-d]嘧啶作为中间产物。将该粗制残余物溶解在二氯甲烷(10ml)和乙醇钠0.2N(10ml)的混合物中。该悬浮液搅拌16小时，并用5-6N的氯化氢异丙醇溶液中和，产生粗制2-氨基-4-吗啉基-6-芳基-吡啶并[3，2-d]嘧啶作为最终产品。粗制产品通过制备级薄层层析法纯化，流动相包括甲醇/二氯甲烷混合物，混合比例10:90，产生纯的标题化合物，产率在20至40％，取决于存在的6-芳基取代基。以下化合物依据这种步骤合成(每一次经过相对应的中间体，其2-氨基用乙酰氨基形式保护)：

-2-氨基-4-吗啉基-6-(3-氟-4-乙氧基-苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶(实施例166)，其质谱表征如下：MS(m/z)：370([M+H]⁺，100)，

-2-氨基-4-吗啉基-6-(3-氯苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶(实施例167)，其质谱表征如下：MS(m/z)：342([M+H]⁺，100)，和

-2-氨基-4-吗啉基-哌嗪-1-基-6-(3，4-(亚甲二氧基)苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶(实施例168)，其质谱表征如下：MS(m/z)：352([M+H]⁺，100)。

实施例169-173：合成2-氨基-6-芳基-吡啶并[3，2-d]嘧啶-4(3H)-酮同系物

一般步骤

向经过脱气处理的2-氨基-6-氯-吡啶并[3，2-d]嘧啶-4(3H)-酮(1.96克，10mmol)、适当的苯基硼酸(11mmol)和碳酸钾(6.9克，50mmol)在二噁烷(180ml)和水(50ml)混合物中的悬浮液中添加催化剂量的四(三苯基膦)钯(O)(750毫克)。该悬浮液回流16小时，最终变成溶液。冷却至室温后，将该反应混合物过滤。滤液用5N的盐酸酸化至pH为4，将所得沉淀物过滤出来。相继地用水、乙醇二乙醚洗涤，并真空干燥产生所期望的产品。

以下化合物依据这种步骤制造：

实施例169：2-氨基-6-(3-甲基-4-氟-苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶-4(3H)-酮

从3-甲基-4-氟-苯基硼酸获得，70％的产率。MS(m/z)：271([M+H]⁺，100)

实施例170：2-氨基-6-(3，4-二氯-苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶-4(3H)-酮

从3，4-二氯苯基硼酸获得，91％的产率。MS(m/z)：307，309([M+H]⁺，100)

实施例171：2-氨基-6-(4-氟-苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶-4(3H)-酮

从4-氟-苯基硼酸获得，78％的产率。MS(m/z)：257([M+H]⁺，100)

实施例172：2-氨基-6-(1，4-苯并二噁烷)-吡啶并[3，2-d]嘧啶-4(3H)-酮

从1，4-苯并二噁烷-6-硼酸获得，82％的产率。MS(m/z)：297([M+H]⁺，100)

实施例173：2-氨基-6-(3.4-亚甲二氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶-4(3H)-酮

从3，4-亚甲二氧基苯基硼酸获得，产率71％。MS(m/z)：283([M+H]⁺+，100)

实施例174-178：合成2-乙酰氨基-6-(芳基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶-4(3H)-酮同系物

2-氨基-6-芳基-吡啶并[3，2-d]嘧啶-4(3H)-酮(10mmol)在乙酸酐(300ml)中制成悬浮液，该混合物回流2小时直到获得一透明溶液。将该溶液减压浓缩直到开始结晶。沉淀物过滤出来，得到纯的标题化合物。以下化合物依据这种步骤合成:

实施例174：2-乙酰氨基-6-(3-甲基-4-氟-苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶-4(3H)-酮

从2-氨基-6-(3-甲基-4-氟-苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶-4(3H)-酮获得，产率90％。

MS(m/z)：313([M+H]⁺，100)

实施例175：2-乙酰氨基-6-(3，4-二氯-苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶-4(3H)-酮

从2-氨基-6-(3，4-二氯-苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶-4(3H)-酮获得，产率90％。

MS(m/z)：349，351([M+H]⁺，100)

实施例176：2-乙酰氨基-6-(4-氟-苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶-4(3H)-酮

从2-氨基-6-(4-氟-苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶-4(3H)-酮获得，产率78％。

MS(m/z)：299([M+H]⁺，100)

实施例177：2-乙酰氨基-6-(1，4-苯并二噁烷)-吡啶并[3，2-d]嘧啶-4(3H)-酮

从2-氨基-6-(1，4-苯并二噁烷)-吡啶并[3，2-d]嘧啶-4(3H)-酮获得，产率68％。

MS(m/z)：339([M+H]⁺，100)

实施例178：2-乙酰氨基-6-(3，4-亚甲二氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶-4(3H)-酮

从2-氨基-6-(3，4-亚甲二氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶-4(3H)-酮获得，产率74％。MS(m/z)：325([M+H]⁺，100)

实施例179：合成2-氨基-4-(吗啉基)-6-(3-甲基-4-氟-苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶

向2-乙酰氨基-6-(3-甲基-4-氟苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶-4(3H)-酮(312毫克，1毫摩尔)在甲苯(10ml)中的悬浮液中添加吗啉(4毫摩尔，0.23ml)、对甲苯磺酸(0.1毫摩尔，19毫克)、硫酸铵(13毫克，0.1毫摩尔)和1，1，1，3，3，3-六甲基二硅氨烷(8毫摩尔)。该反应混合物回流48小时直到形成一棕色溶液。溶剂被在真空中蒸发，产生粗制2-乙酰氨基-4-(吗啉基)-6-(4-甲基-3-氟-苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶。残余物重新溶解在二氯甲烷和乙醇的混合物中(混合比例80/20，10ml)。添加乙醇钠溶液(0.2N的溶液)直到pH值为12，所得混合物在室温下搅拌过夜。溶剂在真空中蒸发。粗制残余物通过氧化硅上的制备级TLC纯化，利用甲醇/二氯甲烷混合物(混合比例10:90)作为流动相，产生纯的2-氨基-4-(吗啉基)-6-(3-甲基-4-氟-苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶(80毫克，25％)。

MS(m/z)：340([M+H]⁺，100)

UV(甲醇，nm)：211，278，361

实施例180-183：合成2-乙酰氨基-4-(1.2.4-三唑基)-6-芳基-吡啶并[3，2-d]嘧啶

一般步骤

1，2，4-三唑(345毫克，5毫摩尔)和三氯氧磷(0.11ml，1.25mmol)在干燥乙腈(10ml)中的悬浮液在氮保护气氛下搅拌15分钟。该悬浮液被添加到另一个2-乙酰氨基-6-芳基-吡啶并[3，2-d]嘧啶-4(3H)-酮(1mmol)和三乙胺(0.4ml，3mmol)在干燥乙腈(10ml)中的悬浮液中。所得混合物在50℃在氮气保护气氛下搅拌24小时。使溶剂在真空中蒸发。粗制残余物重新溶解在二氯甲烷中，并用稀盐酸溶液(HCl 0.01)萃取。使合并后的有机层蒸发，产生标题化合物，其未经任何额外纯化即用于进一步的反应。以下化合物依据这种步骤制造：

实施例180：2-乙酰氨基-4-(1，2，4-三唑基)-6-(3.4-二氯-苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶

从2-乙酰氨基-6-(3，4-二氯-苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶-4(3H)-酮获得，产率80％。

MS(m/z)：400，402([M+H]⁺，100)

实施例181：2-乙酰氨基-4-(1，2，4-三唑基)-6-(4-氟-苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶

从2-乙酰氨基-6-(4-氟-苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶-4(3H)-酮获得，产率72％。

MS(m/z)：350([M+H]⁺，100)

实施例182：2-乙酰氨基-4-(1，2，4-三唑基)-6-(1，4-苯并二噁烷)-吡啶并[3，2-d]嘧啶

从2-乙酰氨基-6-(1，4-苯并二噁烷)-吡啶并[3，2-d]嘧啶-4(3H)-酮获得，产率59％。

MS(m/z)：390([M+H]⁺，100)

实施例183：2-乙酰氨基-4-(1，2，4-三唑基)-6-(3，4-亚甲二氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶

从2-乙酰氨基-6-(3，4-亚甲二氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶-4(3H)-酮获得，产率68％。

MS(m/z)：376([M+H]⁺，100)

实施例184 -合成2-氨基-4-(吗啉基)-6-(3，4-二氯苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶

向2-乙酰氨基-4-(1，2，4-三唑基)-6-(3，4-二氯苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶(400毫克，1毫摩尔)在二噁烷(10ml)中的悬浮液中添加吗啉(174毫克，2摩尔)。该反应混合物在50℃搅拌过夜。使溶剂在真空中蒸发，产生粗制2-乙酰氨基-4-(吗啉基)-6-(3，4-二氯苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶。残余物重新溶解在二氯甲烷和乙醇的混合物中(混合比例80/20，10ml)。添加乙醇钠溶液(0.2N的溶液)直到pH值为12，所得混合物在室温下搅拌过夜。使溶剂在真空中蒸发。粗制残余物通过氧化硅上的制备级TLC纯化，利用甲醇/二氯甲烷混合物(混合比例10:90)作为流动相，产生纯的标题化合物(220毫克，60％)。

MS(m/z)：376，378([M+H]⁺，100)

UV(MeOH，nm)：282，365

实施例185-188 -合成2-乙酰氨基-4-(N-哌嗪-1-基)-6-(芳基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶

向2-乙酰氨基-4-(1，2，4-三唑基)-6-芳基-吡啶并[3，2-d]嘧啶(1毫摩尔)在二噁烷(20ml)中的悬浮液中添加吗啉(172毫克，2毫摩尔)。该反应混合物在50℃搅拌过夜。使溶剂在真空中蒸发，粗制残余物通过氧化硅上的制备级TLC纯化，利用甲醇/二氯甲烷混合物(混合比例10:90)作为流动相，产生纯的标题化合物。以下化合物依据这种步骤制备：

实施例185 -合成2-乙酰氨基-4-(N-哌嗪-1-基)-6-(4-氟苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶

从2-乙酰氨基-4-(1，2，4-三唑基)-6-(4-氟苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶获得，产率68％。

MS(m/z)：368([M+H]⁺，100)

实施例186 -合成2-乙酰氨基-4-(N-哌嗪-1-基)-6-(1，4-苯并二噁烷)-吡啶并[3，2-d]嘧啶

从2-乙酰氨基-4-(1，2，4-三唑基)-6-(1，4-苯并二噁烷)-吡啶并[3，2-d]嘧啶获得。

MS(m/z)：407([M+H]⁺，100)

实施例187：2-乙酰氨基-4-(N-哌嗪-1-基)-6-(3，4-亚甲二氧基苯基)-吡啶并-[3，2-d]嘧啶从2-乙酰氨基-4-(1，2，4-三唑基)-6-(3，4-亚甲二氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶获得。

MS(m/z)：393([M+H]⁺，100)

实施例188：2-乙酰氨基-4-(N-哌嗪-1-基)-6-(3，4-二氯-苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶

从2-乙酰氨基-4-(1，2，4-三唑基)-6-(3，4-二氯苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶获得。

MS(m/z)：416，418([M+H]⁺，100)

实施例189 -合成2-氨基-4-[(N-3-氯-苄基氨基甲酰)-哌嗪-1-基]-6-(4-氟苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶

向2-乙酰氨基-4-(N-哌嗪-1-基)-6-(4-氟苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶(367毫克，1mmol)在DMF(10ml)中的溶液中添加4-氯-苄基异氰酸酯(201毫克，1.2毫摩尔)。该溶液是在室温下搅拌过夜。使溶剂在真空中蒸发，产生粗制2-乙酰氨基-4-[(N-4-氯-苄基-氨基甲酰)-哌嗪-1-基]-6-(4-氟-苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶。残余物重新溶解在二氯甲烷和乙醇的混合物中(混合比例80/20，10ml)。添加乙醇钠溶液(0.2N的溶液)直到pH值为12，所得混合物在室温下搅拌过夜。使溶剂在真空中蒸发。粗制残余物通过氧化硅上的制备级TLC纯化，利用甲醇/二氯甲烷混合物(混合比例10:90)作为流动相，产生纯的标题化合物(280毫克，58％)。

MS(m/z)：492，494([M+H]⁺，100)

UV(MeOH，nm)：245，350，460，560

实施例190 -合成2-氨基-4-[(N-乙酰基-哌嗪-1-基]-6-(3，4-亚甲二氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶

这个化合物根据实施例184的步骤合成，用N-乙酰基-哌嗪和2-乙酰氨基-4-(1，2，4-三唑基)-6-(3，4-亚甲二氧基-苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶作为起始原料。

MS(m/z)：393([M+H]⁺，100)

实施例191 -合成2-氨基-4-[2-(哌嗪-1-基乙酸N-(2-噻唑基)-酰胺)]-6-3，4-亚甲二氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶

这个化合物根据实施例184的步骤制备，用4-[2-(哌嗪-1-基乙酸N-(2-噻唑基)-酰胺)和2-乙酰氨基-4-(1，2，4-三唑基)-6-(3，4-亚甲二氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶作为起始原料。

MS(m/z)：491([M+H]⁺，100)

实施例192 -合成2-氨基-4-[N-(2-糠酰)-哌嗪-1-基]-6-(3，4-亚甲二氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶

这个化合物根据实施例184的步骤获得，用2-糠酰-哌嗪和2-乙酰氨基-4-(1，2，4-三唑基)-6-(3，4-亚甲二氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶作为起始原料。

MS(m/z)：445([M+H]⁺，100)

实施例193 -合成2-氨基-4-[N-(4-氯苯氧基-乙酰基)-哌嗪-1-基]-6-(3，4-亚甲二氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶

向2-乙酰氨基-4-(N-哌嗪-1-基)-6-(3，4-亚甲二氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶(60毫克，0.16毫摩尔)在DMF(10ml)中的溶液中添加4-氯-苯氧基乙酰氯(80毫克，0.4毫摩尔)。溶液在50℃搅拌过夜。使溶剂在真空中蒸发，产生粗制2-乙酰氨基-4-[N-(4-氯苯氧基-乙酰基)-哌嗪-1-基]-6-(3，4-亚甲二氧基-苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶。残余物重新溶解在5ml的二氯甲烷/乙醇混合物(体积比80/20)中。添加乙醇钠溶液(0.2N的溶液)直到pH值为12，所得混合物在室温下搅拌过夜。使溶剂在真空中蒸发。粗制残余物通过氧化硅上的制备级TLC纯化，利用甲醇/二氯甲烷混合物(体积比10:90)作为流动相，产生纯的标题化合物(48毫克，47％)。

MS(m/z)：519，521([M+H]⁺，100)

实施例194 -合成2-氨基-4-[(N-(4-氯苯氧基-乙酰基)-哌嗪-1-基]-6-(3，4-二氯苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶

这个化合物是利用针对合成实施例193所描述的步骤获得的，用2-乙酰氨基-4-(-哌嗪-1-基)-6-(3，4-二氯苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶作为起始原料。

MS(m/z)：542，544([M+H]⁺，100)

实施例195 -合成2-氨基-4-[N-(4-氯苯氧基-乙酰基)-哌嗪-1-基]-6-(1，4-苯并二噁烷)-吡啶并[3，2-d]嘧啶

这个化合物是利用针对合成实施例193所描述的步骤获得的，用2-乙酰氨基-4-(N-哌嗪-1-基)-6-(1，4-苯并二噁烷)-吡啶并[3，2-d]嘧啶作为起始原料。

MS(m/z)：532，534([M+H]⁺，100)。

实施例196 -合成2-氨基-4-[N-(3-甲基-苯基-氨基甲酰)-哌嗪-1-基]-6-(3，4-亚甲二氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶

向2-乙酰氨基-4-(N-哌嗪-1-基)-6-(3，4-亚甲二氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶(60毫克，0.16毫摩尔)在DMF(5ml)中的溶液中添加间甲苯基异氰酸酯(31μ1，0.24mmol)。该溶液在室温下搅拌过夜。使溶剂在真空中蒸发，产生粗制2-乙酰氨基-4-[N-(3-甲基-苯基-氨基甲酰)-哌嗪-1-基]-6-(3，4-亚甲二氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶。残余物重新溶解在二氯甲烷和乙醇的混合物中(混合比例80/20，5ml)。添加乙醇钠溶液(0.2N的溶液)直到pH值为12，所得混合物在室温下搅拌过夜。使溶剂在真空中蒸发。粗制残余物通过氧化硅上的制备级TLC纯化，利用甲醇/二氯甲烷混合物(混合比例10:90)作为流动相，产生纯的标题化合物(32毫克，43％)。

MS(m/z)：484([M+H]⁺，100)。

实施例197：合成2-氨基-4-[N-(3-甲基-苯基-氨基甲酰)-哌嗪-1-基]-6-(3，4-二氯苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶

这个化合物根据实施例196的步骤合成，用2-乙酰氨基-4-(N-哌嗪-1-基)-6-(3，4-二氯苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶作为该原材料。MS(m/z)：507，509([M+H]⁺，100)。

实施例198：合成2-氨基-4-[N-(3-甲基-苯基-氨基甲酰)-哌嗪-1-基]-6-(1，4-苯并二噁烷)-吡啶并[3，2-d]嘧啶

这个化合物根据实施例196的步骤合成，用2-乙酰氨基-4-(N-哌嗪-1-基)-6-(1，4-苯并二噁烷)-吡啶并[3，2-d]嘧啶作为起始原料。

MS(m/z)：498([M+H]⁺，100)。

实施例199：合成2-氨基-4-[N-乙酰基-哌嗪-1-基]-6-(1，4-苯并二噁烷)-吡啶并[3，2-d]嘧啶

这个化合物根据实施例184的步骤合成，用N-乙酰基-哌嗪和2-乙酰氨基-4-(1，2，4-三唑基)-6-(1，4-苯并二噁烷)-吡啶并[3，2-d]嘧啶作为起始原料。

MS(m/z)：407([M+H]⁺，100)。

实施例200-合成2-氨基-4-[N-乙酰基-哌嗪-1-基]-6-(3，4-二氯-苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶

这个化合物根据实施例184的步骤合成，用N-乙酰基-哌嗪和2-乙酰氨基-4-(1，2，4-三唑基)-6-(3，4-二氯苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶作为起始原料。

MS(m/z)：416，418([M+H]⁺，100)。

实施例201：合成2-氨基-4-[2-(哌嗪-1-基乙酸N-(2-噻唑基)-酰胺]-6(1，4-苯并二噁烷)-吡啶并[3，2-d]嘧啶

这个化合物根据实施例184的步骤制备，用2-(哌嗪-1-基乙酸)-N-(2-噻唑基)-酰胺和2-乙酰氨基-4-(1，2，4-三唑基)-6-(3，4-亚甲二氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶作为起始原料。

MS(m/z)：505([M+H]⁺，100)

实施例202：合成2-氨基-4-[2-(哌嗪-1-基乙酸N-(2-噻唑基)-酰胺]-6-(3，4-二氯苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶

这个化合物根据实施例184的步骤制备，用2-(哌嗪-1-基乙酸)-N-(2-噻唑基)-酰胺和2-乙酰氨基-4-(1，2，4-三唑基)-6-(3，4-二氯苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶作为起始原料。

MS(m/z)：514，516([M+H]⁺，100)。

实施例203 -合成2-氨基-4-[N-(2-糠酰)-哌嗪-1-基]-6-(1，4-苯并二噁烷)-吡啶并[3，2-d]嘧啶

这个化合物根据实施例184的步骤获得，用2-糠酰-哌嗪和2-乙酰氨基-4-(1，2，4-三唑基)-6-(1，4-苯并二噁烷)-吡啶并[3，2-d]嘧啶作为起始原料。

MS(m/z)：459([M+H]⁺，100)。

实施例204 -合成2-氨基-4-[N-(4-氟-苯基)-哌嗪-1-基]-6-(4-氟苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶

向2-乙酰氨基-4-(1，2，4-三唑基)-6-(4-氟苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶(367毫克，1毫摩尔)在二噁烷(10ml)中的溶液中添加1-(4-氯苯基)哌嗪(360毫克，2毫摩尔)。该溶液在60℃搅拌16小时。使溶剂在真空中蒸发，产生粗制2-乙酰氨基-4-[N-(4-氟-苯基)-哌嗪-1-基]-6-(4-氟-苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶。残余物重新溶解在二氯甲烷/乙醇混合物中(混合体积比80/20)。添加乙醇钠溶液(0.2N的溶液)直到pH值为12，所得混合物在室温下搅拌16小时。使溶剂在真空中蒸发。粗制残余物通过氧化硅上的制备级TLC纯化，利用甲醇/二氯甲烷混合物(体积比10:90)作为流动相，产生纯的标题化合物(280毫克，69％)，表征如下：

-MS(m/z)：419([M+H]⁺，100)；和

-UV(MeOH，nm)：250，345，560。

实施例205 -合成2-氨基-4-[N-(苯氧基-乙基)-哌嗪-1-基]-6-(4-氟苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶

向2-乙酰氨基-4-(1，2，4-三唑基)-6-(4-氟苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶(367毫克，1毫摩尔)在二噁烷(10ml)中的悬浮液中添加1-(2-苯氧基-乙基)-哌嗪(412毫克，2毫摩尔)。溶液在60℃搅拌过夜。使溶剂在真空中蒸发，产生粗制2-乙酰氨基-4-[N-(苯氧基-乙基-哌嗪-1-基)]-6-(4-氟-苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶。残余物重新溶解在二氯甲烷和乙醇的混合物中(混合比例80/20，10ml)。添加乙醇钠溶液(0.2N的溶液)直到pH值为12，所得混合物在室温下搅拌过夜。使溶剂在真空中蒸发。粗制残余物通过氧化硅上的制备级TLC纯化，利用甲醇/二氯甲烷混合物(混合比例10:90)作为流动相，产生纯的标题化合物(200毫克，45％)。

MS(m/z)：445([M+H]⁺，100)

UV(MeOH，nm)：250，345，495，580。

实施例206：合成2-氨基-4-(苯胺基)-6-(4-氟苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶

向2-乙酰氨基-4-(1，2，4-三唑基)-6-(4-氟苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶(367毫克，1毫摩尔)在二噁烷(20ml)中的悬浮液中添加苯胺(186毫克，2毫摩尔)。溶液在60℃搅拌过夜。使溶剂在真空中蒸发，产生粗制2-乙酰氨基-4-(苯胺基)-6-(4-氟-苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶。残余物重新溶解在二氯甲烷和乙醇的混合物中(混合比例80/20，10ml)。添加乙醇钠溶液(0.2N的溶液)直到pH值为12，所得混合物在室温下搅拌过夜。使溶剂在真空中蒸发。粗制残余物通过氧化硅上的制备级TLC纯化，利用甲醇/二氯甲烷混合物(混合比例10:90)作为流动相，产生纯的标题化合物(160毫克，50％)。

MS(m/z)：332([M+H]⁺，100)

UV(MeOH，nm)：250，350，565

实施例207：合成2-氨基-4-[(N-4-氯-苯氧基-乙酰基)-哌嗪-1-基]-6-(4-氟苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶

向2-乙酰氨基-4-(N-哌嗪-1-基)-6-(4-氟苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶(367毫克，1毫摩尔)在吡啶(10ml)中的溶液中添加4-氯-苯氧基乙酰氯(410毫克，2毫摩尔)。溶液在50℃搅拌过夜。使溶剂在真空中蒸发，产生粗制2-乙酰氨基-4-[(N-4-氯-苯氧基-乙酰基)-哌嗪-1-基]-6-(4-氟-苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶。残余物重新溶解在二氯甲烷和乙醇的混合物中(混合比例80/20，10ml)。添加乙醇钠溶液(0.2N的溶液)直到pH值为12，所得混合物在室温下搅拌过夜。使溶剂在真空中蒸发。粗制残余物通过氧化硅上的制备级TLC纯化，利用甲醇/二氯甲烷混合物(混合比例10:90)作为流动相，产生纯的标题化合物(250毫克，50％)。

MS(m/z)：493，495([M+H]⁺，100)

UV(CH₃OH，nm)：245，345，465，560

实施例208：合成2-乙酰氨基-6-氯-吡啶并[3，2-d]嘧啶-4(3H)-酮

使2-氨基-6-氯-吡啶并[3，2-d]嘧啶-4(3H)-酮(1.96克，10毫摩尔)在乙酸酐(200ml)中的悬浮液回流2小时，直到获得一透明溶液。使溶剂在真空中蒸发直到开始结晶。将沉淀物过滤出来，并真空干燥，产生纯的标题化合物(2克，80％)。

MS(m/z)：239，241([M+H]⁺，100)

实施例209：合成2-氨基-4-吗啉基-6-氯-吡啶并[3，2-d]嘧啶

向2-乙酰氨基-6-氯-吡啶并[3，2-d]嘧啶-4(3H)-酮(2.38克，10毫摩尔)在二噁烷(100ml)中的悬浮液中添加二异丙基乙.胺(5.3ml，30mmol)。该混合物在80℃搅拌10分钟，之后添加三氯氧磷(1.4ml，15mmol)。反应混合物在80℃搅拌90分钟。使溶剂在真空中蒸发。残余物重新溶解在二氯甲烷中并用水萃取。合并后的有机层蒸发到体积为50毫升。然后，添加吗啉(870毫克，10毫摩尔)，反应在室温下搅拌过夜。使溶剂在真空中蒸发。残余物重新溶解在二氯甲烷和乙醇(80/20，100ml)的混合物中。添加乙醇钠溶液(0.2N的溶液)直到pH＝11。混合物在室温下搅拌过夜。使溶剂在真空中蒸发。残余物重新溶解在二氯甲烷中并用水洗涤。合并后的有机层再合并并在真空中蒸发，得到标题化合物(1克，40％)。

MS(m/z)：266，268([M+H]⁺，100)

实施例210：合成2-氨基-4-吗啉基-6-(2-溴-苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶

使2-氨基-4-吗啉基-6-氯-吡啶并[3，2-d]嘧啶(265毫克，1毫摩尔)、碳酸钾(690毫克，5毫摩尔)、四(三苯基膦)钯(O)(100毫克)在二噁烷(10ml)和水(3ml)中的溶液回流。向回流着的溶液中滴加(速度为0.25毫升/分钟)2-溴-苯基硼酸(220毫克，1.1毫摩尔)在二噁烷(2ml)中的溶液。一旦添加完成，反应混合物再回流2小时。使反应混合物冷却下来，溶剂在真空中蒸发。残余物重新溶解在二氯甲烷中并用水萃取。合并后的有机层用硫酸钠干燥，粗制残余物通过氧化硅上的制备级TLC纯化，用甲醇/二氯甲烷混合物(混合比例10:90)作为流动相，得到纯的标题化合物(100毫克，30％)。MS(m/z)：386，388([M+H]⁺，100)

实施例211：合成4-[N-(3-氯-苯基氨基甲酰)-哌嗪-1-基]-6-(3-甲氧基-4-环丙基甲氧基-苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶

遵循实施例120的步骤，但是用环丙基甲基溴作为起始原料。分离出纯的标题化合物，由其质谱表征如下：MS(m/z)：560，562([M+H]⁺，100)。

实施例212：合成4-[N-(3-氯-苯基氨基甲酰)-哌嗪-1-基]-6-(3-羟基-4-甲氧基-苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶

向4-[N-(3-氯-苯基氨基甲酰)-哌嗪-1-基]-6-氯-吡啶并[3，2-d]嘧啶(650毫克，1.61毫摩尔)在1，4-二噁烷(40ml)和水(13ml)中的溶液中添加2-甲氧基-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二噁硼烷-2-基)苯基乙酸酯(470毫克，1.61毫摩尔)、碳酸钾(667毫克，4.83毫摩尔)和四(三苯基膦)钯(O)(93毫克，0.0805毫摩尔)。该反应混合物回流3小时，然后冷却至室温，溶剂在真空中蒸发。残余物通过硅胶柱层析纯化，流动相是丙酮/二氯甲烷混合物(混合比范围从20:80至30:70)，产生标题化合物，一种纯白的粉末(513毫克，63％)。MS(m/z)：506，508([M+H]⁺，100)。

实施例213-215：合成4-[(N-3-氯-苯基氨基甲酰)-哌嗪-1-基]-6-(3-烷氧基-4-甲氧基-苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶同系物

向4-[N-(3-氯-苯基氨基甲酰)-哌嗪-1-基]-6-(3-羟基-4-甲氧基-苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶(100毫克，0.20毫摩尔)在干燥的DMF(10ml)中的溶液中添加碳酸钾(42毫克，0.3毫摩尔)。该混合物在氮气保护下在室温下搅拌30分钟，然后添加适当的烷基卤(0.3mmol)。在搅拌5小时后，仍剩余起始原料，因此再额外添加一定量的烷基卤(0.3mmol)和碳酸钾(0.3mmol)。反应混合物在室温下搅拌过夜。溶剂在真空中蒸发，并通过硅胶急骤层析法纯化，流动相是甲醇/二氯甲烷混合物(混合比范围从2:98至3:97)，产生标题化合物，一种白色粉末，产率从60％至70％，取决于所用的烷基卤。以下化合物依据这种步骤合成：

实施例213：4-[N-(3-氯-苯基氨基甲酰基)-哌嗪-1-基]-6-(3-乙氧基-4-甲氧基-苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶

该化合物是以乙基碘为原料制得的。

MS(m/z)：534，536([M+H]⁺，100)

实施例214：4-[N-(3-氯-苯基氨甲酰基)-哌嗪-1-基]-6-(3-异丙氧基-4-甲氧基-苯基-吡啶并[3，2-d]嘧啶

该化合物是以异丙基碘为原料制得的。

MS(m/z)548，550([M+H]⁺，100)。

实施例215：4-[N-(3-氯-苯基氨基甲酰基)-哌嗪-1-基]-6-(3-环丙基甲氧基-4-甲氧基-苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶的合成。

该化合物是以环丙基甲基溴为原料制得的。

MS(m/z)：560，562([M+H]⁺，100)

实施例216a-2-乙酰氨基-4，6-二氯-吡啶并[3，2-d]嘧啶的合成

向2-乙酰氨基-6-氯-吡啶并[3，2-d]嘧啶-4(3H)-酮(360毫克，1.51毫摩)在二噁烷(30毫升)的悬浮体中加入二异丙基乙胺(788微升，4.53毫摩)和POCl₃(422微升，4.53毫摩)。该反应在100℃加热过夜，直至得到黑色溶液。真空蒸发溶剂。将粗残余物重新溶解在二氯甲烷中，用冰水萃取三次。合并的有机层在真空下蒸发，不经进一步纯化直接用于以后的反应。MS(m/z)：257，259([M+H]⁺，100)。

实施例216b&216c-2-乙酰氨基-4-[(S)-3-(Boc-氨基)吡咯烷]-6-氯-吡啶并[3，2-d]嘧啶的合成

向2-乙酰氨基-4，6-二氯-吡啶并[3，2-d]嘧啶(前面的实施例216a中制得的粗残余物)在二噁烷(20毫升)中的溶液加入(S)-3-(Boc-氨基)吡咯烷(563毫克，3.02毫摩)。该反应混合物在室温下搅拌2小时。该反应用水稀释，用二氯甲烷萃取。合并的有机层在真空中蒸发。粗残余物用硅胶闪式色谱纯化，流动相是比例为4:96的MeOH/CH₂Cl₂混合物，制得两种纯化合物，即：

2-乙酰氨基-4-(S)-3-(Boc-氨基)吡咯烷]-6-氯-吡啶并[3，2-d]嘧啶(216b)(210毫克)；MS(m/z)：257，259([M+H]⁺，100)；和

-2-氨基-4-[(S)-3-(Boc-氨基)吡咯烷]-6-氯-吡啶并[3，2-d]嘧啶(216c)(43毫克)；MS(m/z)：257，259([M+H]⁺，100)。

实施例217 -合成2-氨基-4-[(S)-3-(Boc-氨基)吡咯烷1-6-氯-吡啶并[3，2-d]嘧啶

向2-乙酰氨基-4-[(S)-3-(Boc-氨基)吡咯烷]-6-氯-吡啶并[3，2-d]嘧啶的甲醇(10毫升)溶液中加入碳酸钾(360毫克)的水(5毫升)溶液。该反应在80℃加热2小时。冷却该反应，用水稀释，用二氯甲烷萃取。合并的有机层在真空下蒸发，粗残余物在二氧化硅上通过闪式色谱法纯化，流动相是丙酮/CH₂Cl₂(比例为40:60)混合物，然后使用比例为4:96的CH₃OH/CH₂Cl₂混合物，制得纯的白色固体标题化合物(133毫克，71％)。MS(m/z)：365，367([M+H]⁺，100)。

实施例218：2-氨基-4-[(S)-3-(Boc-氨基)吡咯烷]-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶的合成

向2-氨基-4-[(S)-3-(Boc-氨基)吡咯烷]-6-氯-吡啶并[3，2-d]嘧啶(100毫克，0.27毫摩)在1，4-二噁烷(20毫升)和水(7毫升)的溶液中加入3，4-二甲氧基苯基硼酸(65毫克，0.36毫摩)，碳酸钾(114毫克，0.82毫摩)和四(三苯基膦)钯(O)(16毫克，0.014毫摩)。该反应混合物回流3小时，冷却至室温，真空蒸发掉溶剂。残余物用硅胶柱色谱纯化，流动相是CH₃OH/二氯甲烷混合物(比例为4:96)，制得纯的白色粉末标题化合物(79毫克，63％)。MS(m/z)：467([M+H]⁺，100)。

实施例219 -2-氨基-4-[(S)-3-(氨基)吡咯烷]-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶的合成。

2-氨基-4-[(S)-3-(Boc-氨基)吡咯烷]-6-(3，4-二甲氧基-苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶(113毫克，0.24毫摩)在二氯甲烷(10毫升)和三氟乙酸(4毫升)中的溶液在室温下搅拌30分钟。蒸发溶剂。将盐重新溶解在水中，通过加入33％的氨水溶液使得该溶液呈碱性(pH＝9)。真空蒸发溶剂，残余物通过硅胶闪式色谱纯化，流动相是CH₃OH/CH₂Cl₂比例为4:96的混合物，包含0.5％的33％的氨水溶液，制得纯的白色固体标题化合物(76毫克，87％)。MS(m/z)：367([M+H]⁺，100)。

实施例220 -2-氨基-4-[3-(S)-4-氯-苯氧基-乙酰基-氨基)-吡咯烷-1-基-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶的合成

向2-氨基-4-[(S)-3-(氨基)吡咯烷]-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶(76毫克，0.21毫摩)的DMF(10毫升)溶液加入三乙胺(38微升，0.27毫摩)和对-氯-苯氧基乙酰基氯(51毫克，0.25毫摩)。该反应在60℃搅拌2小时。真空蒸发溶剂，粗残余物通过硅胶闪式色谱纯化，流动相是比例为4:96的CH₃OH/CH₂Cl₂混合物，制得纯的标题化合物(87毫克，78％)。MS(m/z)：535，537([M+H]⁺，100)。

实施例221：2-氨基-4-[3-(S)-3-甲基苯基氨基甲酰基吡咯烷-1-基]-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶的合成

向2-氨基-4-[(S)-3-(氨基)吡咯烷]-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶(113毫克，0.25毫摩)在二氯甲烷(10毫升)中的溶液加入异氰酸间甲苯酯(0.28毫摩，35微升)。该反应在室温下搅拌2小时。真空蒸发溶剂，粗残余物用硅胶闪式色谱纯化，流动相是比例为3:97的CH₃OH/CH₂Cl₂混合物，制得纯的标题化合物(77毫克，62％)。MS(m/z)：500([M+H]⁺，100)。

实施例222 -2-氨基-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶-4(3H)硫酮

2-氨基-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶-4(3H)酮(100毫克，0.34毫摩)和五硫化二磷(163毫克，0.37毫摩)在吡啶(10毫升)中的悬浮体回流4小时。真空蒸发溶剂。将残余物悬浮在少量的水中并过滤，制得标题化合物，其无需进一步纯化直接使用。MS(m/z)：315([M+H]⁺，100)。

实施例223 -2-氨基-4-硫代甲基-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶的合成

将实施例222中制得的粗化合物溶解在1N的NaOH中。然后向该反应混合物中加入甲基碘(18微升，0.29毫摩)，该反应混合物在室温下搅拌2小时。然后另外加入甲基碘(9微升)，该反应在室温下再搅拌1小时。形成黄色沉淀，将其滤去。沉淀吸附在二氧化硅上，用硅胶闪式色谱纯化，流动相是甲醇/二氯甲烷混合物(比例为1:99)，制得纯的标题化合物(52毫克，47％)。MS(m/z)：329([M+H]⁺，100)。

实施例224 -3-氨基-6-氯-吡啶-5-腈的合成

向6-氯-3-硝基-吡啶-2-腈(5.5克，30毫摩)在水(100毫升)中的悬浮体中加入乙酸(5.4毫升，90毫摩)。该混合物在室温下搅拌20分钟。然后缓慢加入Na₂S₂O₄(20克，86％，90毫摩)。该反应混合物在室温下再搅拌2小时。过滤出沉淀，用冷水洗涤(2×10毫升)。沉淀在P₂O₅上干燥，制得黄色固体标题化合物(3.7克，80％)，其表征如下：

-Rf＝0.64(EtOAc/CH₂Cl₂ 1:4)；

-MS(m/z)：154，156([M+H]⁺，100)。

实施例225 -2，4-二氨基-6-氯-吡啶并[3，2-d]嘧啶的合成

对3-氨基-6-氯-吡啶-2-腈(4.6克，30毫摩)，盐酸氯甲脒(6.9克，60毫摩)和二甲砜(12克)组成的混合物在165℃加热30分钟。冷却至室温之后，加入水(500毫升)。该溶液用30％的NaOH溶液中和至pH＝9-10。滤出沉淀，用水洗涤，在P₂O₅上干燥，制得黄色固体标题化合物(4.0克，68％)，其表征如下：

-Rf＝0.40(MeOH/CH₂Cl₂ 1:9)；和

-MS(m/z)：196，198([M+H]⁺，100)。

实施例226 -3-氨基-6-氯-吡啶-2-羧酰胺

向6-氯-3-硝基-吡啶-2-腈(4克，22毫摩)在水中(40毫升)的悬浮体中加入33％的氨的水溶液(8.8毫升)。该悬浮体在室温下搅拌30分钟。然后分几份加入连二硫酸钠(21.8克，124毫摩)。所得的混合物在室温下再搅拌2小时。滤出沉淀，用少量水洗涤，制得标题化合物(2.7克，72％)。MS(m/z)：172，174([M+H]⁺，100)。

实施例227 -2-氨基-6-氯-吡啶并[3，2-d]嘧啶-4(3H)酮的合成

方法A

2，4-二氨基-6-氯-吡啶并[3，2-d]嘧啶(3.5克，17毫摩)在5N的HCl(150毫升)中的悬浮体回流3小时。冷却至室温之后，用30％的NaOH将该混合物中和至pH＝6-7。滤出沉淀，用水洗涤，在P₂O₅上干燥，制得黄色固体标题化合物(3.2克，90％)。

方法B

3-氨基-6-氯-吡啶-2-羧酰胺(2.4克，14毫摩)，盐酸氯甲脒(3.2克，28毫摩)，二甲砜(6克)和环丁砜(0.8毫升)的混合物在165℃加热30分钟。冷却至室温之后，加入水(600毫升)，用25％的氨水溶液将pH值调节到7-8。滤出沉淀，用水洗涤，在P₂O₅上干燥，制得黄色固体标题化合物(2.7克，98％)，其表征如下：

-Rf＝0.33(MeOH/CH₂Cl₂ 1:4)；and

-MS(m/z)：197，199([M+H]⁺，100)。

实施例228 -2-乙酰氨基-6-氯-吡啶并[3，2-d]嘧啶-4(3H)酮的合成

2-氨基-6-氯-吡啶并[3，2-d]嘧啶-4(3H)酮(3.2克，16毫摩)在乙酸酐(20毫升)中的悬浮体回流2小时。冷却至室温之后，滤出沉淀，用二乙醚洗涤，真空干燥，制得淡黄色固体标题化合物(3.2克，85％)，其表征如下：

-Rf＝0.75(MeOH/CH₂Cl₂ 1:4)；和

-MS(m/z)：238，240([M+H]⁺，100)。

实施例229 -2-乙酰氨基-4-吗啉代-6-氯-吡啶并[3，2-d]嘧啶的合成

2-乙酰氨基-6-氯-吡啶并[3，2-d]嘧啶-4(3H)酮(2.4克，10毫摩)，N，N-二异丙基乙胺(5.4毫升，30毫摩)和POCl₃(2.8毫升，30毫摩)在二噁烷(100毫升)中的混合物在室温下搅拌2小时。减压浓缩之后，将残余物重新溶解在二氯甲烷(200毫升)中，用冷水萃取直至pH＝6-7。合并的有机层用MgSO₄干燥，过滤，然后减压浓缩，制得粗2-乙酰氨基-4，6-二氯-吡啶并[3，2-d]嘧啶。将该粗残余物溶解在1，4-二噁烷(100毫升)中，加入吗啉(5毫升)。制得的反应混合物在50℃搅拌1小时。减压浓缩之后，残余物用硅胶闪式色谱纯化，流动相是MeOH/二氯甲烷混合物(比例为1:40)，制得淡黄色固体标题化合物(1.6克，68％)，其表征如下：

-Rf＝0.82(MeOH/CH₂Cl₂ 1:19)；和

-MS(m/z)：308，310([M+H]⁺，100)。

实施例230 -2-氨基-6-氯-4-吗啉代-吡啶并[3，2-d]嘧啶的合成

2-乙酰氨基-4-吗啉代-6-氯-吡啶并[3，2-d]嘧啶(500毫克，1.6毫摩)和K₂CO₃(660毫克，4.8毫摩)在MeOH(30毫升)和水(10毫升)中的悬浮体回流2小时。冷却至室温之后，该混合物用二氯甲烷(100毫升)萃取，用水洗涤，用MgSO₄干燥。过滤和浓缩之后，残余物用硅胶闪式色谱纯化，流动相是MeOH/CH₂Cl₂混合物(比例为1:35)，制得淡黄色固体标题化合物(425毫克，98％)，其表征如下：

-Rf＝0.64(MeOH/CH₂Cl₂ 1:9)；

-UV(MeOH/H₂O)：245，330，和455纳米；

-MS(m/z)：266，268([M+H]⁺，100)。

实施例231-246 -2-氨基-4-吗啉代-6-芳基-吡啶并[3，2-d]嘧啶类似物和2-氨基-4-吗啉代-6-杂芳基-吡啶并[3，2-d]嘧啶类似物的合成

向2-氨基-4-吗啉代-6-氯-吡啶并[3，2-d]嘧啶(53毫克，0.2毫摩)在1，4-二噁烷(15毫升)和水(5毫升)的溶液中加入合适的芳基或杂芳基硼酸(0.2毫摩)，碳酸钾(280毫克，2毫摩)和四(三苯基膦)钯(O)(30毫克，0.026毫摩)。该反应混合物回流3小时，冷却至室温，真空蒸发溶剂。残余物用硅胶柱色谱纯化，流动相是CH₃OH/二氯甲烷混合物，以以下产率制得纯的所需化合物：

实施例231 -2-氨基-4-吗啉代-6-(3，4-二氯苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶

由3，4-二氯苯基硼酸制得淡黄色固体(79％)2-氨基-4-吗啉代-6-(3，4-二氯苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶，其表征如下：

-Rf＝0.55(MeOH/CH₂Cl₂ 1:9)；

-UV(MeOH/H₂O，纳米)：283.8，365.9；

-MS(m/z)：376，378([M+H]⁺，100)。

实施例232 -2-氨基-4-吗啉代-6-(2-呋喃)-吡啶并[3，2-d]嘧啶

由2-呋喃硼酸制得黄色固体(79％)2-氨基-4-吗啉代-6-(2-呋喃)-吡啶并[3，2-d]嘧啶，其表征如下：

-Rf＝0.36(MeOH/CH₂Cl₂ 1:9)；

-UV(MeOH/H₂O，纳米)：212.9，290.9，377.9；

-MS(m/z)：298([M+H]⁺，100)。

实施例233-2-氨基-4-吗啉代-6-(3-噻吩)-吡啶并[3，2-d]嘧啶

由3-噻吩硼酸制得淡黄色固体(73％)2-氨基-4-吗啉代-6-(3-噻吩)-吡啶并[3，2-d]嘧啶，其表征如下：

-Rf＝0.50(MeOH/CH₂Cl₂ 1:9)；

-UV(MeOH/H₂O，纳米)：215.3，279.1，362.5；

-MS(m/z)：314([M+H]⁺，100)。

实施例234-2-氨基-4-吗啉代-6-(4-吡啶基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶

由4-吡啶硼酸制得淡黄色固体(90％)2-氨基-4-吗啉代-6-(4-吡啶基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶，其表征如下：

-Rf＝0.63(MeOH/CH₂Cl₂ 1:9)；

-UV(MeOH/H₂O，纳米)：214.1，236.5，280.3，341，356.6；

-MS(m/z)：309([M+H]⁺，100)

实施例235 -2-氨基-4-吗啉代-6-(5-甲基-2-噻吩基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶

由5-甲基-2-噻吩硼酸制得淡黄色固体(69％)2-氨基-4-吗啉代-6-(5-甲基-2-噻吩基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶，其表征如下：

-Rf＝0.60(MeOH/CH₂Cl₂ 1:9)；

-UV(MeOH/H₂O，纳米)：214.1，298.1，380.3；

-MS(m/z)：328([M+H]⁺，100)。

实施例236 -2-氨基-4-吗啉代-6-(6-甲氧基-2-吡啶基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶

由6-甲氧基-2-吡啶硼酸制得淡黄色固体(75％)2-氨基-4-吗啉代-6-(6-甲氧基-2-吡啶基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶，其表征如下：

-Rf＝0.44(MeOH/CH₂Cl₂ 1:9)；

-UV(MeOH/H₂O，纳米)：214.1，283.8，359.5；

-MS(m/z)：339([M+H]⁺，100)。

实施例237 -2-氨基-4-吗啉代-6-(5-吲哚基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶

由5-吲哚硼酸制得淡黄色固体(90％)2-氨基-4-吗啉代-6-(5-吲哚基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶，其表征如下：

-Rf＝0.25(MeOH/CH₂Cl₂ 1:9)；

-UV(MeOH/H₂O，纳米)：216.5，314.7，422.5，441.9；

-MS(m/z)：347([M+H]⁺，100)。

实施例238 -2-氨基-4-吗啉代-6-(2-噻吩基)-吡啶并[3.2-d]嘧啶

由2-噻吩硼酸制得淡黄色固体(72％)2-氨基-4-吗啉代-6-(2-噻吩基)-吡啶并[3.2-d]嘧啶，其表征如下：

-Rf＝0.70(MeOH/CH₂Cl₂ 1:9)；

-UV(MeOH/H₂O，纳米)：214.1，293.3，377.9；和

-MS(m/z)：314([M+H]⁺，100)。

实施例239 -2-氨基-4-吗啉代-6-(4-甲基-2-噻吩基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶

由4-甲基-2-噻吩硼酸制得了淡黄色固体(76％)2-氨基-4-吗啉代-6-(4-甲基-2-噻吩基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶，其表征如下：

-Rf＝0.45(MeOH/CH₂Cl₂ 1:9)；

-UV(MeOH/H₂O，纳米)：212.9，298.1，380.3；

-MS(m/z)：328([M+H]⁺，100)。

实施例240 -2-氨基-4-吗啉代-6-(3-吡啶基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶

由3-吡啶硼酸合成了淡黄色固体(90％)2-氨基-4-吗啉代-6-(3-吡啶基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶，其表征如下：

-Rf＝0.55(MeOH/CH₂Cl₂ 1:9)；

-UV(MeOH/H₂O，纳米)：214.1，247.1，285，363.5；

-MS(m/z)：309([M+H]⁺，100)。

实施例241 -2-氨基-4-吗啉代-6-(5-氯-2-噻吩基-吡啶并[3，2-d]嘧啶

由5-氯-2-噻吩硼酸硼酸制得淡黄色固体(29％)2-氨基-4-吗啉代-6-(5-氯-2-噻吩基-吡啶并[3，2-d]嘧啶，其表征如下：

-Rf＝0.65(MeOH/CH₂Cl₂ 1:9)；

-UV(MeOH/H₂O，纳米)：212.9，298.1，380.3；和

-MS(m/z)：348([M+H]⁺，100)。

实施例242 -2-氨基-4-吗啉代-6-(3-氯-4-氟苯基-吡啶并[3，2-d]嘧啶

由3-氯-4-氟苯基硼酸制得淡黄色固体(75％)2-氨基-4-吗啉代-6-(3-氯-4-氟苯基-吡啶并[3，2-d]嘧啶，其表征如下：

-Rf＝0.55(MeOH/CH₂Cl₂ 1:9)；

-UV(MeOH/H₂O，纳米)：345，480，560；

-MS(m/z)：360([M+H]⁺100)。

实施例243 -2-氨基-4-吗啉代-6-(3，4-二氟苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶

由3，4-二氟苯基硼酸制得淡黄色固体(75％)2-氨基-4-吗啉代-6-(3，4-二氟苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶，其表征如下：

-Rf＝0.64(MeOH/CH₂Cl₂ 1:9)；

-UV(MeOH/H₂O，纳米)：345，465，560；

-MS(m/z)：344([M+H]⁺，100)。

实施例244 -2-氨基-4-吗啉代-6-(4-氟-3-甲基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶

由4-氟-3-甲基苯基硼酸制得白色固体(81％)2-氨基-4-吗啉代-6-(4-氟-3-甲基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶，其表征如下：

-Rf＝0.60(MeOH/CH₂Cl₂ 1:9)；

-UV(MeOH/H₂O，纳米)：280.3，365.9；

-MS(m/z)：340([M+H]⁺，100)。

实施例245 -2-氨基-4-吗啉代-6-(4-氟苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶

由4-氟苯基硼酸制得白色固体(85％)2-氨基-4-吗啉代-6-(4-氟苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶，其表征如下：

-Rf＝0.64(MeOH/CH₂Cl₂ 1:9)；

-UV(MeOH/H₂O，纳米)：250，470，560；

-MS(m/z)：326([M+H]⁺，100)。

实施例246 -2-氨基-4-吗啉代-6-[4-(3，5-二甲基异噁唑基)]-吡啶并[3，2-d]嘧啶

由3，5-二甲基异噁唑-4-硼酸制得淡黄色固体(62％)2-氨基-4-吗啉代-6-[4-(3，5-二甲基异噁唑基)]-吡啶并[3，2-d]嘧啶，其表征如下：

-Rf0.60(MeOH/CH₂Cl₂ 1:9)；

-UV(MeOH/H₂O，纳米)：214.1，269.6，356.6；

-MS(m/z)：327([M+H]⁺，100)。

实施例247：2-乙酰氨基-4-(N-高哌嗪(homopiperazin)-1-基)-6-氯-吡啶并[3，2-d]嘧啶

该化合物根据实施例229的步骤由高哌嗪(homo哌嗪)合成，制得淡黄色固体纯的标题化合物(49％)，其表征如下：

-Rf＝0.17(MeOH/CH₂Cl₂ 1:4)；

-MS(m/z)：321，323([M+H]⁺，100)。

实施例248 -2-乙酰氨基-4-[(N-3-甲基苯基氨基甲酰基高哌嗪-1-基)-6-氯-吡啶并[3.2-d]嘧啶

向2-乙酰氨基-6-氯-4-(N-高哌嗪-1-基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶(95毫克，0.3毫摩)在二氯甲烷(10毫升)中的溶液加入异氰酸间甲苯酯(40毫克，0.3毫摩)中。该溶液在室温下搅拌1小时。真空蒸发溶剂，制得粗标题化合物，该化合物不经任何纯化直接用于进一步的反应。

实施例249 -2-乙酰氨基-4-[(N-3-甲苯苯基氨基甲酰基)-高哌嗪-1-基]-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶

向粗2-乙酰氨基-6-氯-4-[N-(3-甲基苯基氨基甲酰基)-高哌嗪-1-基]-吡啶并[3，2-d]嘧啶(130毫克，0.3毫摩)在二噁烷(15毫升)和水(5毫升)中的溶液中加入3，4-二甲氧基苯基硼酸(55毫克，0.3毫摩)，碳酸钾(280毫克，2毫摩)和四(三苯基膦)钯(O)(30毫克，0.026毫摩)。该反应混合物回流30分钟。真空蒸发溶剂。该粗残余物通过硅胶闪式色谱纯化，流动相是MeOH/CH₂Cl₂混合物(比例为1:40)，制得纯的标题化合物(126毫克，78％)。MS(m/z)：556([M+H]⁺，100)。

实施例250 -2-氨基-4-[(N-3-甲基苯基氨基甲酰基高哌嗪-1-基]-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶

将2-乙酰氨基-4-[(N-3-甲基苯基氨基甲酰基)-高哌嗪-1-基]-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶(110毫克，0.24毫摩)和碳酸钾(83毫克，0.6毫摩)在甲醇(10毫升)和水(5毫升)中的溶液在50℃加热2小时。真空蒸发溶剂，粗残余物用硅胶闪式色谱纯化，流动相是体积比为1:30的MeOH/CH₂Cl₂混合物，制得纯的标题化合物(96毫克，93％)，其表征如下：

-Rf＝0.55(MeOH/CH₂Cl₂ 1/9)；

-UV(MeOH/H₂O，纳米)：245，490，565；

-MS(m/z)：514([M+H]⁺，100)。

实施例251 -2-乙酰氨基-4-[(R)-3-Boc-氨基吡咯烷-1-基]-6-氯吡啶并[3，2-d]嘧啶

该化合物根据实施例229的步骤，由(R)-3-Boc-氨基-吡咯烷制得，制得淡黄色固体标题化合物(46％)，其表征为：

-Rf＝0.55(MeOH/CH₂Cl₂ 1:9)；

-MS(m/z)：407，409([M+H]⁺，100)。

实施例252 -2-氨基-4-[(R)-3-Boc-氨基吡咯烷-1-基)-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶

该化合物由实施例251的化合物合成。在第一步中，使用3，4-二甲氧基苯基硼酸进行Suzuki偶联(大体步骤见实施例231-246)。在第二步中，乙酰基的碱性水解(使用实施例230的合成步骤)制得纯的标题化合物(81％)，其表征如下：

-Rf＝0.54(MeOH/CH₂Cl₂ 1:9)；

-UV(MeOH/H₂O，纳米)：280，470，565；

-MS(m/z)：467([M+H]+，100)。

实施例253-258 -2-氨基-4-取代的-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶的合成

2-氨基-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶-4(3H)酮(298毫克，1.0毫摩)，1，1，1，3，3，3-六甲基二硅氮烷(1毫升，4.7毫摩)，合适的胺(4.0毫摩)，对甲苯磺酸(20毫克，0.1毫摩)和硫酸铵(20毫克，0.15毫摩)在吡啶(5毫升)中的悬浮体回流12-48小时(根据使用的胺；反应完成时该反应混合物变澄清)。真空蒸发溶剂，用硅胶闪式色谱纯化残余物，流动相是MeOH/二氯甲烷混合物(根据使用的胺，体积比为1:20至1:30)，制得以下产率的黄色固体标题化合物。

实施例253 -2-氨基-4-(亚乙基二氨基-1-N-基)-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶

由乙二胺制得淡黄色固体2-氨基-4-(亚乙基二氨基-1-N-基)-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶(64％)，其表征如下：

-Rf＝0.25(MeOH/CH₂Cl₂ 1:4)；

-MS(m/z)：341([M+H]⁺，100)。

实施例254 -2-氨基-4-(1，3-二氨基丙烷-1-N-基]-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶

由1，3-二氨基丙烷制得淡黄色固体2-氨基-4-(1，3-二氨基丙烷-1-N-基]-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶(68％)，其表征如下：

-Rf＝0.28(MeOH/CH₂Cl₂ 1:4)；

-MS(m/z)：355([M+H]⁺，100)。

实施例255 -2-氨基-4-[(1-Boc-哌啶-4-基)氨基]-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶

由4-氨基-N-Boc-哌啶制得淡黄色固体2-氨基-4-[(1-Boc-哌啶-4-基)氨基]-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶(92％)，其表征如下：

-Rf＝0.58(MeOH/CH₂Cl₂ 1:9)；

-UV(MeOH/H₂O，纳米)：250，480，565；

-MS(m/z)：481([M+H]⁺，100)。

实施例256 -2，4-二氨基-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶

由氯化铵制得淡黄色固体2，4-二氨基-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶(56％)，其表征如下：

-Rf＝0.23(MeOH/CH₂Cl₂ 1:4)；

-UV(MeOH/H₂O，纳米)：245，585；

-MS(m/z)：298([M+H]⁺，100)。

实施例257 -2-氨基-4-[(1-Boc-哌啶-3-基)氨基]-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶

由3-氨基-N-Boc-哌啶制得淡黄色固体(70％)2-氨基-4-[(1-Boc-哌啶-3-基)氨基1-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶，其特征如下：

-Rf＝0.60(MeOH/CH₂Cl₂ 1:9)；

-UV(MeOH/H₂O，纳米)：250，490，565；

-MS(m/z)：481([M+H]⁺，100)。

实施例258 -2-氨基-4-[(1-Cbz-哌啶-3-基)氨基]-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶基[3，2-d]嘧啶

由3-氨基-1-苄基氧基羰基-哌啶制备标题化合物2-氨基-4-[(1-Cbz-哌啶-3-基)氨基]-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶基[3，2-d]嘧啶(63％)。MS(m/z)：515([M+H]⁺，100)。

实施例259 -2-氨基-4-[(R)-3-氨基吡咯烷-1-基]-6-(3，4-二甲氧基-苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶

向2-氨基-4-[(R)-3-Boc-氨基吡咯烷-1-基]-6-(3，4-二-甲氧基苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶(94毫克，0.2毫摩)在二氯甲烷(5毫升)中的悬浮体加入三氟乙酸(2毫升)。制得的溶液在室温下搅拌30分钟。减压除去溶剂。残余物用氯仿萃取，用0.2M的Na₂CO₃溶液洗涤。合并的有机层进行真空蒸发。粗残余物用硅胶闪式色谱纯化，流动相是体积比为2:3的MeOH/CH₂Cl₂混合物，制得纯的标题化合物(70毫克，96％)。MS(m/z)：367([M+H]⁺，100)。

实施例260 -2-氨基-4-[3-(R)-(3-甲基苯基氨基甲酰基)-吡咯烷-1-基]-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶

向2-氨基-4-[(R)-3-Boc-氨基吡咯烷-1-基)]-6-(3，4-二甲氧基-苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶(55毫克，0.12毫摩)在二氯甲烷(5毫升)中的溶液加入三氟乙酸(2毫升)。该混合物在室温下搅拌30分钟。真空蒸发溶剂。向该粗残余物在二氯甲烷(5毫升)中的悬浮体中加入N，N-二异丙基乙胺(0.5毫升)和异氰酸间甲苯酯(16微升)。该反应混合物在室温下搅拌30分钟。真空蒸发溶剂。粗残余物通过硅胶色谱纯化，流动相是MeOH/CH₂Cl₂混合物(比例为1:20)，制得纯的标题化合物(50毫克，85％)，其表征如下：

-Rf＝0.42(MeOH/CH₂Cl₂ 1:9)；

-UV(MeOH/H₂O，纳米)：240，470，560；

-MS(m/z)：500([M+H]⁺，100)。

实施例261 -2-氨基-4-[(3-甲基苯基氨基甲酰基)-乙二胺-1-N-基]-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶的合成

向2-氨基-4-(乙二胺-1-N-基)-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶(70毫克，0.2毫摩)在二氯甲烷(10毫升)中的溶液加入N，N-二异丙基乙胺(200微升)和异氰酸间甲苯酯(26微升)。该溶液在室温下搅拌1小时。真空蒸发溶剂。粗残余物用硅胶闪式色谱纯化，流动相是比例为1:15的MeOH/CH₂Cl₂混合物，制得纯的标题化合物(72毫克，76％)，其表征如下：

-Rf＝0.32(MeOH/CH₂Cl₂ 1:9)；

-UV(MeOH/H₂O，纳米)：250，560；

-MS(m/z)：474([M+H]⁺，100)。

实施例262 -2-氨基-4-[(3-甲基苯基氨基甲酰基)-3-氨基丙烷-氨基-1-N-基]-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶的合成

该化合物由2-氨基-4-(3-氨基丙胺-1-N-基)-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶和异氰酸间甲苯酯制得(使用实施例261所述的合成步骤)，产率为82％，其表征如下：

-Rf＝0.38(MeOH/CH₂Cl₂ 1:9)；

-UV(MeOH/H₂O，纳米)：250，480，560；

-MS(m/z)：488([M+H]⁺，100)。

实施例263 -2-氨基-4-[1-(3-甲基苯基氨基甲酰基)哌啶-4-基)氨基]-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶的合成

该化合物由2-氨基-4-(1-Boc-哌啶-4-基-氨基)-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶制得，为淡黄色固体(82％)，其表征如下：-Rf＝0.40(MeOH/CH₂Cl₂1:9)；

-UV(MeOH/H₂O，纳米)：250，470，560；

-MS(m/z)：514([M+H]⁺，100)。

实施例264 -2-氨基-4-[(3-甲基苯基氨基甲酰基哌啶-3-基)氨基)-6-(3，4-二甲氧基苯基]-吡啶并[3，2-d]嘧啶的合成

该化合物通过Boc-脱保护和用异氰酸间甲苯酯偶联(使用实施例260所述的步骤)，由2-氨基-4-(1-Boc-哌啶-3-基氨基)-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶合成，为淡黄色固体(88％)，其表征如下：

-Rf＝0.32(MeOH/CH₂Cl₂ 1:9)；

-UV(MeOH/H₂O，纳米)：250，370，560；

-MS(m/z)：514([M+H]⁺，100)。

实施例265 -2-氨基-4-[2-(4-氯苯氧基-乙酰基-乙二胺-1-N-基]-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶的合成

向2-氨基-4-(乙二胺-1-N-基)-6-(3，4-二甲氧基-苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶(50毫克，0.15毫摩)在二氯甲烷(10毫升)中的悬浮体加入DIPEA(200微升)和4-氯-苯氧基乙酰基氯(30毫克，0.15毫摩)。该混合物在室温下搅拌1小时。真空蒸发溶剂。残余物用闪式色谱法纯化，流动相是MeOH/CH₂Cl₂混合物(比例为1:20)，制得纯的标题化合物(40毫克，53％)，其表征如下：

-Rf＝0.35(MeOH/CH₂Cl₂ 1:9)；

-UV(MeOH/H₂O，纳米)：250，480，560；

-MS(m/z)：509，511([M+H]⁺，100)。

实施例266 -2-氨基-4-[3-N-(4-氯苯氧基-乙酰基)-3-氨基-丙烷-胺-1-N-基]-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶的合成

该化合物使用实施例265所述的合成步骤，由2-氨基-4-(3-氨基丙胺-N基)-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶和4-氯苯氧基乙酰基氯合成，制得纯的标题化合物(56％)，其表征如下：

-Rf＝0.36(MeOH/CH₂Cl₂ 1:9)；

-UV(MeOH/H₂O，纳米)：250，560；

-MS(m/z)：523，525([M+H]⁺，100)。

实施例267-2-氨基-4-[(3-(R)-(4-氯苯氧基乙酰基-氨基)-吡咯烷-1基]-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶的合成

该化合物是由2-氨基-4-[(3-(R)-Boc-氨基吡咯烷-1-基]-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶分两步合成的。对Boc基团脱保护(使用实施例259所述的步骤)，然后游离的氨基与4-氯苯氧基乙酰基氯偶联(使用实施例265所述的步骤)，制得纯的标题化合物(68％)，其表征如下：

-Rf＝0.30(MeOH/CH₂Cl₂ 1:9)；

-UV(MeOH/H₂O，纳米)：280，470，560；

-MS(m/z)：535，537([M+H]⁺，100)。

实施例268-276-2-氨基-4-取代的-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶的合成

向2-乙酰氨基-4-(1，2，4-三唑基)-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶(0.5毫摩)和N，N-二异丙基乙胺(3毫摩)在1，4-二噁烷(20毫升)中的悬浮体内加入合适的胺(1.5毫摩)。该反应混合物回流2小时。真空蒸发溶剂，将残余物重新溶解在甲醇(20毫升)中。加入K₂CO₃(3毫摩)在水中(5毫升)的溶液，所得的反应混合物回流2小时。冷却至室温之后，该混合物用二氯甲烷(100毫升)萃取。有机相用0.5M的Na₂CO₃溶液洗涤，减压浓缩。残余物用硅胶闪式色谱纯化，流动相是MeOH和二氯甲烷的混合物，制得以下产率的纯的标题化合物。

实施例268-2-氨基-4-[(3-羧酸异丙酰胺)-哌啶-1-基]-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶

该化合物由哌啶-3-羧酸异丁酰胺制得，为淡黄色固体(60％)，其表征如下：

-Rf＝0.25(MeOH/CH₂Cl₂ 1:9)；

-UV(MeOH/H₂O，纳米)：245，560；

-MS(m/z)：465([M+H]⁺，100)。

实施例269 -2-氨基-4-(4-氯苯基-4-羟基哌啶-1-基)-6-(3，4-二甲氧基-苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶

该化合物由4-(4-氯苯基)-4-羟基-哌啶制得，为白色固体(58％)，其表征如下：

-Rf＝0.42(MeOH/CH₂Cl₂ 1:9)；

-UV(MeOH/H₂O，纳米)：285，365，560；

-MS(m/z)：492，494([M+H]⁺，100)。

实施例270 -2-氨基-4-[4-(N-2-苯基乙基乙酰胺-2-基)哌嗪-1-基]-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶

该化合物由N-(2-苯基乙基)-2-哌嗪-1-基-乙酰胺制得，为淡黄色固体(54％)，其表征如下：

-Rf＝0.38(MeOH/CH₂Cl₂ 1:9)；

-UV(MeOH/H₂O，纳米)：245，560；

-MS(m/z)：528([M+H]⁺，100)。

实施例271 -2-氨基-4-[2-(4-苄基哌嗪-1-基)-2-氧代-乙烷-氨基]-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶

该化合物由2-氨基-1-(4-苄基哌嗪-1-基)-乙酮制得，为淡黄色固体(54％)，其表征如下：

-Rf＝0.32(MeOH/CH₂Cl₂ 1:9)；

-UV(MeOH/H₂O，纳米)：265，585；

-MS(m/z)：514([M+H]⁺，100)。

实施例272 -2-氨基-4-[3-(4-乙酰基哌嗪-1-基)-丙-3-酮-1-基-氨基1-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶

该化合物由1-(4-乙酰基哌嗪-1-基)-3-氨基丙-1-酮制得，为淡黄色固体(60％)，其表征如下：

-Rf＝0.30(MeOH/CH₂Cl₂ 1:9)；

-UV(MeOH/H₂O，纳米)：250，505，580；

-MS(m/z)：480([M+H]⁺，100)。

实施例273 2-氨基-4-(N-吡咯烷基-乙酰胺-2-基-哌嗪-1-基)-6-(3，4-二甲氧基苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶

该化合物由2-哌嗪-1-基-1-吡咯烷-1-基-乙酮合成(产率59％)，为淡黄色固体，其表征如下：

-Rf＝0.27(MeOH/CH₂Cl₂ 1:9)；

-UV(MeOH/H₂O，纳米)：245，580；

-MS(m/z)：478([IVH-H]⁺，100)。

实施例274：2-氨基-4-(N-吡啶基乙酰胺-2-基-哌嗪-1-基)-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶的合成

该化合物由2-哌嗪-1-基-N-吡啶-2-基-乙酰胺合成，其为淡黄色固体，(53％)其表征如下：

-Rf＝0.33(MeOH/CH₂Cl₂ 1:9)；

-UV(MeOH/H₂O，纳米)：245，365，560；

-MS(m/z)：501([M+H]⁺，100)

实施例275：2-氨基-4-[N-(哌嗪并(piperazino))-乙酰基-吗啉代]-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶

该化合物由N-[2-(1-哌嗪并)-乙酰基]-吗啉代合成，其为淡黄色固体(57％)，其表征如下：

-Rf＝0.45(MeOH/CH₂Cl₂ 1:9)；

-UV(MeOH/H₂O，纳米)：275，365；

-MS(m/z)：494([M+H]⁺，100)。

实施例276：2-氨基-4-[2-氨基-1-(4-甲基-哌嗪-1-基)-乙酮]-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶

该化合物由2-氨基-1-(4-甲基哌嗪-1-基)-乙酮合成，其为淡黄色固体(57％)，其表征如下：

-Rf＝0.20(MeOH/CH₂Cl₂ 1:4)；

-UV(MeOH/H₂O，纳米)：270，355，495；

-MS(m/z)：438([M+H]⁺，100)。

实施例277和278 -2-乙酰氨基-4-取代的-6-(3，4-二甲氧基-苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶类似物的合成

向2-乙酰氨基-4-(1，2，4-三唑基)-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶(0.5毫摩)和N，N-二异丙基乙胺(3毫摩)在1，4-二噁烷(20毫升)中的悬浮体中加入合适的胺(1.5毫摩)。该反应混合物回流2小时。真空蒸发溶剂，残余物通过硅胶色谱纯化，流动相是甲醇和二氯甲烷的混合物(比例为1:30)制得如下的纯的最终化合物：

实施例277：2-乙酰氨基-4-[(N-吡啶-3-基-乙酰胺)-2-基-哌嗪-1-基]-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶

该化合物由2-哌嗪-1-基-N-吡啶-3-基-乙酰胺合成，其为淡黄色固体(40％)，其表征如下：

-Rf＝0.40(MeOH/CH₂Cl₂ 1:9)；

-UV(MeOH/H₂O，纳米)：245，370；

-MS(m/z)：543([M+H]⁺，100)。

实施例278：2-乙酰氨基-4-[(N-甲基-N-苯基乙酰胺)-2-基-哌嗪-1-基]-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶

该化合物由N-甲基-N-苯基-2-哌嗪-1-基-乙酰胺合成，其为淡黄色固体，(38％)，其表征如下：

-Rf＝0.45(MeOH/CH₂Cl₂ 1:9)；

-UV(MeOH/H₂O，纳米)：255，360；

-MS(m/z)：556([M+H]⁺，100)。

实施例279：3-氨基-6-氯-吡啶-2-羧酰胺的合成

向6-氯-3-硝基-吡啶-2-腈(11.01克，60毫摩)在甲醇(120毫升)中的悬浮体中加入阮内镍(3克，用甲醇洗涤以除去水分)，该混合物在室温、H₂气氛下震摇4小时。过滤除去催化剂，用甲醇(500毫升)洗涤。合并这两种滤液，蒸干。将残余物溶解在二氯甲烷中，用短而宽的硅胶(100克)柱过滤该溶液。该柱子再用CH₂Cl₂/MeOH(200毫升，4:1)洗涤。合并滤液和洗涤液，蒸发至很小的体积。滤出形成的沉淀，得到3-氨基-6-氯-吡啶-2-羧酰胺(8.1克)。将最终的滤液蒸干，残余物用硅胶(30克)柱色谱纯化。该化合物用以下的溶剂体系稀释：CH₂Cl₂(200毫升)，CH₂Cl₂/MeOH100:1(200毫升)。真空蒸发合适的六份，得到另外1.15克的3-氨基-6-氯-吡啶-2-羧酰胺(总产率：9.25克，即90％)其表征如下：

-熔点176-177℃；

-UV(MeOH)：212(3.76)，256(4.14)，348(3.76)；

-元素分析：C₆H₆ClN₃O计算值(171.6)：C 42.00 H 3.52 N 24.49.实测值：C42.42 H 3.54 H 24.11。

实施例280：2-氨基-6-氯-吡啶并[3，2-d]嘧啶-4(3H)-酮的合成

3-氨基-6-氯-吡啶-2-羧酰胺(5.1克，30毫摩)，盐酸氯仿脒(6.99克，60毫摩)，二甲砜(24克)和环丁砜(2.4毫升)的混合物在165⁰C加热30分钟。将该热混合物中加入水(50毫升)。冷却至室温之后，缓慢滴加稀氢氧化铵溶液，直至pH＝7。滤出所得的沉淀，用水洗涤，在100⁰C干燥过夜，制得纯的标题化合物(5.8克，98％)。制得的化合物不经进一步纯化直接用于以后的反应。熔点>330℃；元素分析C₇H₅ClN₄O(196.6)计算值：C 42.77 H 2.56 N 28.50。实测值：C 41.61 H 2.74 N28.76。

实施例281：2-乙酰氨基-6-氯-吡啶并[3，2-d]嘧啶-4(3H)-酮的合成

2-氨基-6-氯-吡啶并[3，2-d]嘧啶-4(3H)-酮(6.2克，31.54毫摩)在乙酸酐(620毫升)中的悬浮体在搅拌下回流4小时。过滤该热混合物，以除去不溶性材料，将滤液蒸干。向残余物中加入甲醇(50毫升)。过滤沉淀，用甲醇洗涤，并进行干燥，制得标题化合物(5.3克，70％)，其表征如下：

-熔点317-319⁰C；

-UV(MeOH)：208(4.13)，216(sh4.17)，280(4.13)，310(sh 3.44)；

-元素分析：C₉H₇ClN₄O₂(238.6)计算值：C 45.30 H 2.96 N 23.48。实测值：C45.61 H 3.53 N 23.28。

实施例282-289 -2-乙酰氨基-4-烷氧基-6-氯-吡啶并[3，2-d]嘧啶的合成

向2-乙酰氨基-6-氯-吡啶并[3，2-d]嘧啶-4(3H)-酮(0.72克，3毫摩)，三苯基膦(1.18克，4，5毫摩)和合适的醇(4.5毫摩)在二噁烷(50毫升)中的混合物加入偶氮二羧酸二异丙酯(0.91克，0.87毫升，4.5毫摩)。该混合物在室温下搅拌24-36小时，然后真空蒸发。残余物用硅胶闪式色谱纯化。该化合物用以下溶剂体系稀释：CH₂Cl₂(500毫升)，CH₂Cl₂/AcOEt 5:1(600毫升)，CH₂Cl₂/AcOEt 4:1(500毫升)，CH₂Cl₂/AcOEt 1:1(300毫升)，CH₂Cl₂/MeOH 100:5(500毫升)。蒸发产物馏分制得所需的4-烷氧基-2-氨基-6-氯吡啶并[3，2-d]嘧啶，根据所用的醇，其产率为45-60％。通过从乙酸乙酯、二乙醚或甲醇结晶2-氨基-4-烷氧基-6-氯-吡啶并[3，2-d]嘧啶，制得分析样品。未反应的2-乙酰氨基-6-氯-吡啶并[3，2-d]嘧啶-4(3H)-酮(40-20％)也在色谱处理过程中分离。根据该大体步骤合成了以下化合物：

实施例282：2-乙酰氨基-4-乙氧基-6-氯-吡啶并[3，2-d]嘧啶

由乙醇(210毫克，4.5毫摩)制得纯的标题化合物(0.48克，60％)，其表征如下：

-熔点233℃；

-UV(MeOH)：237(4.58)，266(4.15)，274(4.14)，321(3.73).

-C₁₁H₁₁ClN₄O₂计算值(266.7)：C 49.54 H 4.16 N 21.01。实测值：C 49.01 H4.30 N 20.70。

实施例283：2-乙酰氨基-4-正丙氧基-6-氯-吡啶并[3，2-d]嘧啶

由正丙醇(270毫克，4.5毫摩)制得纯的标题化合物(0.42克，50％)其表征如下：

-熔点191⁰C；-UV(MeOH)：237(4.58)，266(4.15)，274(4.14)，321(3.73)；和

-C₁₂H₁₃ClN₄O₂(280.7)的计算值：C 51.35 H 4.67 N 19.96。实测值：C 51.16H 4.69 N 19.94。

实施例284：2-乙酰氨基-4-异丙氧基-6-氯-吡啶并[3，2-d]嘧啶

由异丙醇(270毫克，4.5毫摩)制得纯的标题化合物(0.479克，57％)其表征如下：

-熔点244℃；

-UV(MeOH)：237(4.59)，266(4.15)，274(4.15)，321(3.73)；

-C₁₂H₁₃ClN₄O₂的计算值(280.7)：C 51.35 H 4.67 N 19.96。实测值：C 51.30 H4.71 N 20.05。

实施例285：2-乙酰氨基-4-正丁氧基-6-氯-吡啶并[3，2-d]嘧啶

由正丁醇(270毫克，4.5毫摩)制得纯的标题化合物(0.504克，57％)其表征如下：

-熔点158-159℃；

-UV(MeOH)：237(4.59)，266(4.15)，274(4.15)，321(3.73)；

-C₁₃H₁₅CIN₄O₂(294.7)的计算值：C 52.98 H 5.13 N 19.01。实测值：C 52.11H 5.16 N 18.68。

实施例286：2-乙酰氨基-4-异丁氧基-6-氯-吡啶并[3，2-d]嘧啶

由异丁醇(333毫克，4.5毫摩)制得纯的标题化合物(0.46克，52％)，其表征如下：

-熔点168℃；

-UV(MeOH)：237(4.59)，266(4.16)，274(4.15)，321(3.75)；

-C₁₃H₁₅ClN₄O₂(294.7)的计算值：C 52.98 H 5.13 N 19.01。实测值：C 52.87H 5.16 N 19.07。

实施例287：2-乙酰氨基-4-仲丁氧基-6-氯-吡啶并[3，2-d]嘧啶

由仲丁醇(400毫克，4.5毫摩)制得纯的标题化合物(0.442克，50％)，其表征如下：

-熔点143-144⁰C；

-UV(MeOH)：237(4.56)，266(4.13)，274(4.18)，321(3.71)；

-C₁₃H₁₅ClN₄O₂(294.7)的计算值：C 52.98 H 5.13 N 19.01。实测值：C 52.85H 5.13 N 18.92。

实施例288：2-乙酰氨基-4-正戊氧基-6-氯-吡啶并[3，2-d]嘧啶

由正戊醇(333毫克，4.5毫摩)制得纯的标题化合物(0.37克，40％)，其表征如下：

-熔点174℃；

-UV(MeOH)：238(4.60)，266(4.13)，275(4.13)，322(3.72)；

-C₁₄H₁₇ClN₄O₂的计算值(308.8)：C 54.46 H 5.55 N 18.15。实测值：C 54.47H 5.66 N 18.14。

实施例289：2-乙酰氨基-4-苄氧基-6-氯-吡啶并[3，2-d]嘧啶

由苄醇(486毫克，4.5毫摩)搅拌72小时制得纯的淡黄色粉末状标题化合物(240毫克，24％)，其表征如下：

-熔点199-200⁰C；

-UV(MeOH)：207(4.40)，237(4.56)，265(4.15)，274(4.13)，322(3.74)；

-C₁₆H₁₃ClN₄O₂(328.8)计算值：C 58.46 H 3.99 N 17.04。实测值：C 58.56 H4.04 N 17.05。

实施例290-312 -2-氨基-4-烷氧基-和2-氨基-4-苄氧基-6-(氟代苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶的合成

向2-乙酰氨基-4-烷氧基-6-氯-吡啶并[3，2-d]嘧啶(0.5毫摩)，2-，3-或4-氟苯基硼酸(80毫克，0.57毫摩)和碳酸钾(2-4毫摩)在二噁烷(7.3毫升)和水(1.6毫升)的混合物中的脱气的悬浮体中加入四(三苯基膦)钯(O)(29毫克，0.025毫摩)。该混合物回流(浴温120℃)24小时。冷却至室温之后，加入二氯甲烷(30毫升)，该混合物用盐水溶液洗涤。分离有机层，用Na₂SO₄干燥，真空蒸发。制得的粗材料用硅胶闪式色谱纯化。该材料用以下溶剂体系稀释：CH₂Cl₂(100毫升)，CH₂Cl₂/MeOH 100:1(101毫升)，100:2(102毫升)，100:3(103毫升)。蒸发产物馏分制得2-氨基-4-O-取代的-6-(氟苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶晶态固体，产率为70-85％。在一些情况下，检测到相应的2-乙酰氨基衍生物，还作为快速移动的组分分离。分析样品用醚或甲醇重结晶而制备。根据该一般步骤合成了以下化合物：

实施例290 -2-氨基-4-乙氧基-6-(邻氟代苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶

依照与所述一般步骤类似的步骤，用2-氟苯基硼酸(80毫克，0.57毫摩)制得纯的标题化合物(0.657克，77％)，其表征如下：

-熔点182℃；

-UV(MeOH)：231(4.47)，284(4.29)，348(3.89)；

-C₁₅H₁₃FN₄O(284.3)的计算值：C 63.37 H 4.61 N 19.41。实测值：C 62.70 H4.65 N 19.41。

实施例291：2-氨基-4-乙氧基-6-(间-氟代苯基)-吡啶并[3，2-d]-嘧啶

依照与所述一般步骤类似的步骤，使用3-氟苯基硼酸(80毫克，0.57毫摩)制得纯的标题化合物(0.69克，81％)其表征如下：

-熔点174℃；

-UV(MeOH)：234(4.43)，292(4.31)，352(3.92)；

-C₁₅H₁₃FN₄O(284.3)的计算值：C 63.37 H 4.61 N 19.41。实测值：C 62.51 H4.72 N 19.10。

实施例292：2-氨基-4-乙氧基-6-(对氟代苯基)吡啶并[3，2-d]-嘧啶

依照与所述一般步骤类似的步骤，用4-氟苯基硼酸(80毫克，0.57毫摩)制得纯的标题化合物(0.657克，77％)其表征如下：

-熔点188-189⁰C；

-UV(MeOH)：216(4.48)，234(4.44)，287(4.34)，354(3.89)；

-C₁₅H₁₃FN₄O(284.3)：C 63.37 H 4.61 N 19.41的计算值

实测值：C 62.98 H 4.63 N 19.67

实施例293：2-氨基-4-正丙氧基-6-(邻氟代苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶

依照与所述一般步骤类似的步骤，用2-氟苯基硼酸(80毫克，0.57毫摩)制得纯的标题化合物(0.698克，78％)，其表征如下：

-熔点191⁰C；

-UV(MeOH)：231(4.49)，284(4.30)，348(3.90)；

-C₁₅H₁₃FN₄O(298.3)的计算值：C 64.42 H 5.07 N 18.78。实测值：C 64.15 H5.00 N 18.76。

实施例294：2-氨基-4-正丙氧基-6-(对氟代苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶

依照与所述一般步骤类似的步骤，用4-氟苯基硼酸(80毫克，0.57毫摩)制得纯的标题化合物(0.698克，78％)，其表征如下：

-熔点185-186℃；

-UV(MeOH)：216(4.50)，233(4.46)，287(4.35)，353(3.90)；

-C₁₅H₁₃FN₄O(298.3)的计算值：C 64.42 H 5.07 N 18.78。实测值：C 63.86 H5.37 N 18.46。

实施例295：2-氨基-4-异丙氧基-6-(间氟代苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶

依照与所述一般步骤类似的步骤，用3-氟苯基硼酸(80毫克，0.57毫摩)制得纯的标题化合物(0.698克，78％)其表征如下：

-熔点200-201⁰C；

-UV(MeOH)：236(4.38)，292(4.29)，352(3.91)，

-C₁₆H₁₅FN₄O(298.3)的计算值：C 64.42 H 5.07 N 18.78。实测值：C 63.07 H5.08 N 18.06。

实施例296：2-乙酰氨基-4-异丙氧基-6-(对氟苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶

依照与所述一般步骤类似的步骤，用4-氟苯基硼酸(80毫克，0.57毫摩)，从柱色谱的第一馏分分离，制得纯的标题化合物(0.694克，68％)，其表征如下：

-熔点196-197℃；

-UV(MeOH)：239(4.39)，257(4.24)，286(4.30)，334(3.99)；

-C₁₈H₁₇FN₄O₂(340.4)的计算值：C 63.52 H 5.03 N 16.46。实测值：C 62.65 H4.73 N 16.40。

实施例297：2-氨基-4-异丙氧基-6-(对氟苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶

依照与所述一般步骤类似的步骤，用4-氟苯基硼酸(80毫克，0.57毫摩)，由柱色谱的第二馏分分离，制得纯的标题化合物(0.143克，16％)，其表征如下：

-熔点191-192℃；

-UV(MeOH)：216(4.50)，233(4.46)，287(4.35)，353(3.90)；

-C₁₆H₁₅FN₄O(298.3)的计算值：C 64.42 H 5.07 N 18.78。实测值：C 64.25H 5.16 N 18.68。

实施例298：2-氨基-4-正丁基-6-(间氟代苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶

依照与所述一般步骤类似的步骤，用2-氟苯基硼酸(80毫克，0.57毫摩)制得纯的标题化合物(0.75克，80％)，其表征如下：

-熔点147-148℃；

-UV(MeOH)：232(4.42)，284(4.28)，348(3.88)；

-C₁₇H₁₇FN₄O(312.4)的计算值：C 65.37 H 5.49 N 17.94。实测值：C 64.55 H5.56 N 17.62。

实施例299：2-氨基-4-正丁氧基-6-(间氟代苯基)-吡啶并[3.2-d]嘧啶

依照与所述一般步骤类似的步骤，用3-氟苯基硼酸(80毫克，0.57毫摩)制得纯的标题化合物(0.61克，65％)，其表征如下：

-熔点160-161⁰C；

-UV(MeOH)：236(4.38)，292(4.29)，352(3.91)；

-C₁₇H₁₇FN₄O(312.4)的计算值：C 65.37 H 5.49 N 17.94。实测值：C 64.84 H5.65 N 18.03。

实施例300：2-乙酰氨基-4-正丁氧基-6-(对氟代苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶

依照与所述一般步骤类似的步骤，用4-氟代苯基硼酸(80毫克，0.57毫摩)，由柱色谱的第一馏分分离，制得纯的标题化合物(0.16克，15％)，其表征如下：

-熔点170⁰C；

-UV(MeOH)：225(4.32)，239(4.39)，257(4.22)，288(4.32)，334(4.00)；

-C₁₉H₁₉FN₄O₂(312.4)计算值：C 64.40 H 5.40 N 15.81。实测值：C 63.73 H5.54 N 15.50。

实施例301：2-氨基-4-正丁氧基-6-(对氟代苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶

依照与所述一般步骤类似的步骤，由4氟苯基硼酸(80毫克，0.57毫摩)，由柱色谱的第二馏分分离，制得纯的标题化合物(0.73克，78％)其表征如下：

-熔点172-173℃；

-UV(MeOH)：218(4.50)，234(4.39)，288(4.35)，352(3.89)；

-C₁₇H₁₇FN₄O(312.4)的计算值：C 65.37 H 5.49 N 17.94。实测值：C 64.84 H5.65 N 18.03。

实施例302：2-氨基-4-异丁氧基-6-(邻氟代苯基)-吡啶并[3.2-d]嘧啶

依照与所述一般步骤类似的步骤，用2-氟苯基硼酸(80毫克，0.57毫摩)制得纯的标题化合物(0.75克，78％)其表征如下：

-熔点165℃；

-UV(MeOH)：232(4.46)，284(4.32)，348(3.93)；

-C₁₇H₁₇FN₄O(312.4)的计算值：C 65.37 H 5.49 N 17.94。实测值：C 65.60 H5.75 N 18.04。

实施例303：2-氨基-4-异丁氧基-6-(间氟代苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶

依照与所述一般步骤类似的步骤，用3-氟苯基硼酸(80毫克，0.57毫摩)制得纯的标题化合物(0.75克，78％)，其表征如下：

-熔点185℃；

-UV(MeOH)：236(4.39)，292(4.31)，352(3.93)；

-C₁₇H₁₇FN₄O(312.4)的计算值：C 65.37 H 5.49 N 17.94。实测值：C 65.59 H5.55 N 18.00。

实施例304：2-氨基-4-异丁氧基-6-(对氟代苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶

依照与所述一般步骤类似的步骤，由4-氟苯基硼酸(80毫克，0.57毫摩)制得纯的标题化合物(0.806克，86％)，其表征如下：

-熔点196℃；-UV(MeOH)：234(4.40)，287(4.34)，353(3.89)；

-C₁₇H₁₇FN₄O(312.4)的计算值：C 65.37 H 5.49 N 17.94，实测值：C 64.94 H5.42 N 17.90。

实施例305：2-氨基-4-仲丁氧基-6-(邻氟代苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶

依照与所述一般步骤类似的步骤，用2-氟苯基硼酸(80毫克，0.57毫摩)制得纯的标题化合物(0.693克，74％)，其表征如下：

-熔点159℃；

-UV(MeOH)：233(4.42)，284(4.27)，348(3.89)；

-C₁₇H₁₇FN₄O(312.4)的计算值：C 65.37 H 5.49 N 17.94。实测值：C 65.60 H5.42 N 17.70。

实施例306：2-氨基-4-仲丁氧基-6-(间氟代苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶

依照与所述一般步骤类似的步骤，用3-氟苯基硼酸(80毫克，0.57毫摩)制得纯的标题化合物(0.646克，69％)其表征如下：

-熔点158-159℃；

-UV(MeOH)：237(4.39)，292(4.31)，352(3.94)；

-C₁₇H₁₇FN₄O(312.4)的计算值：C 65.37 H 5.49 N 17.94。实测值：C 64.58 H5.19 N 18.04。

实施例307：2-氨基-4-仲丁氧基-6-(对氟代苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶

依照与所述一般步骤类似的步骤，用4-氟苯基硼酸(80毫克，0.57毫摩)制得纯的标题化合物(0.645克，69％)其表征如下：

-熔点148℃；

-UV(MeOH)：234(4.37)，287(4.31)，354(3.87)；

-C₁₇H₁₇FN₄O(312.4)的计算值：C 65.37 H 5.49 N 17.94。实测值：C 65.28 H5.34 N 18.03。

实施例308：2-氨基-4-正戊氧基-6-(邻氟代苯基)吡啶并[3，2-d]-嘧啶

依照与所述一般步骤类似的步骤，用2-氟苯基硼酸(80毫克，0.57毫摩)制得0.803克(82％)，其表征如下：

-熔点136-137℃；

-UV(MeOH)：232(4.43)，284(4.28)，348(3.89)；

-C₁₈H₁₉FN₄O(326.4)的计算值：C 66.24 H 5.87 N 17.17。实测值：C 65.83 H5.62 N 17.14。

实施例309：2-氨基-4-正戊氧基-6-(间氟代苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶

依照与所述一般步骤类似的步骤，由3-氟苯基硼酸(80毫克，0.57毫摩)制得纯的标题化合物(0.783克，80％)其表征如下：

-熔点142-143℃；

-UV(MeOH)：236(4.39)，292(4.30)，351(3.92)；

-C₁₈H₁₉FN₄O(326.4)的计算值：C 66.24 H 5.87 N 17.17。实测值：C 65.36 H5.72 N 16.52。

实施例310：2-氨基-4-苄氧基-6-(邻氟代苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶

依照与所述一般步骤类似的步骤，用2-氟苯基硼酸(80毫克，0.57毫摩)制得纯的标题化合物(0.748克，72％)其表征如下：

-熔点200-202⁰C；

-UV(MeOH)：208(4.45)，232(4.43)，285(4.28)，350(3.90)；

-C₂₀H₁₅FN₄O(346.4)的计算值：C 69.36 H 4.37 N 16.18。实测值：C 69.16 H4.59 N 16.30。

实施例311：2-氨基-4-苄氧基-6-(间氟代苯基)-吡啶并[3，2-d]-嘧啶

依照与所述一般步骤类似的步骤，用3-氟苯基硼酸(80毫克，0.57毫摩)制得纯的标题化合物(0.717克，69％)其表征如下：

-熔点199-200⁰C；

-UV(MeOH)：208(4.43)，235(4.39)，292(4.30)，352(3.92)；

-C₂₀H₁₅FN₄O(346.4)的计算值：C 69.36 H 4.37 N 16.18。

实测值：C 69.07 H 4.44 N 15.60。

实施例312：2-氨基-4-苄氧基-6-(对氟代苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶

依照与所述一般步骤类似的步骤，用4-氟苯基硼酸(80毫克，0.57毫摩)制得纯的标题化合物(0.81克，78％)其表征如下：

-熔点225℃；

-UV(MeOH)：210(4.46)，233(4.43)，287(4.35)，354(3.92)；

-C₂₀H₁₅FN₄O(346.4)的计算值：C 69.36 H 4.37 N 16.18。

实测值：C 69.16 H 4.59 N 16.30。

实施例313：2-氨基-4-(N-哌嗪-1-基)-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶的合成

2-氨基-6-(3，4-二甲氧基-苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶-4(3H)-酮(722毫克，2.42毫摩)，1，1，1，3，3，3-六甲基二硅氮烷(2.6毫升，12毫摩)，哌嗪(840毫克，9.75毫摩)，对甲苯磺酸(60毫克，0.32毫摩)和硫酸铵(47毫克，0.36毫摩)在吡啶(12毫升)中的混合物回流2天。冷却到室温之后，用硅胶蒸发反应混合物。残余物用硅胶闪式色谱纯化，流动相是甲醇和二氯甲烷的混合物(比例为15:85，包含1％的三乙胺)，制得纯的标题化合物(439毫克)。通过在二氧化硅上的用制备的TLC，使用20％MeOH和1％Et₃N的CH₂Cl₂洗脱，对杂质馏分进一步纯化，制得另外的140毫克标题化合物(总产率：579毫克，65％)。MS(m/z)：367([M+H]⁺，100)。

实施例314-318 -2-氨基-4-(N-乙酰基-哌嗪-1-基)-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶的合成

向实施例313的化合物(36毫克，98微摩)在CH₂Cl₂(2毫升)和三乙胺(15微升)中的悬浮体中加入合适的酰基氯(105微摩)。该反应混合物在室温下搅拌45分钟。真空蒸发溶剂，残余物在硅胶上用制备的TLC纯化。用5％的MeOH的CH₂Cl₂溶液洗脱，制得纯的标题化合物，根据使用的酰基氯，其产率为55-90％。

实施例314 -2-氨基-4-[N-(环己酰基)-哌嗪-1-基1-6-(3.4-二甲氧基-苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶

该化合物使用环己酮基氯合成。MS(m/z)：477([M+H]⁺，100)

实施例315：2-氨基-4-[N-(丙酰基)-哌嗪-1-基]-6-(3，4-二甲氧基-苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶

该化合物使用丙酰氯合成。MS(m/z)：423([M+H]⁺，100)。

实施例316：2-氨基-4-[N-(己酰基)-哌嗪-1-基]-6-(3，4-二甲氧基-苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶

该化合物使用己酰氯合成。MS(m/z)：465([M+H]⁺，100)。

实施例317：2-氨基-4-[N-(甲氧基乙酰基)-哌嗪-1-基]-6-(3，4-二甲氧基-苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶(4AZA2613)

该化合物使用甲氧基乙酰基氯合成。MS(m/z)：439([M+H]⁺，100)。

实施例318：2-氨基-4-[N-(甲磺酰基)-哌嗪-1-基]-6-(3，4-二甲氧基-苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶

该化合物使用甲磺酰氯合成。MS(m/z)：445([M+H]+，100)

实施例319 -混合淋巴细胞反应实验

首先将吡啶并[3，2-d]嘧啶衍生物溶解在(10mM)二甲亚砜中(后文称为DMSO)，然后在培养基中进一步稀释，然后用于以下体外试验。市售的培养基由RPMI-1640+10％胎牛血清(FCS)组成。在以下混合淋巴细胞反应(MLR)试验中测试本文所述的一些吡啶并[3，2-d]嘧啶衍生物。

通过在Lymphoprep(Nycomed，Maorstua，Norway)上进行密度梯度离心，从肝素化的外周血中分离出外周血单核细胞(下文中称为PBMC)。使用强烈表达B7-1和B7-2抗原的同种异源的PBMC或Eppstein-Barr病毒-转化的人B细胞[市售可得，商品名为RPM11788(ATCC名称为CCL156)]在以30Gy辐照之后作为刺激物细胞。MLR在三重坑(triplicate well)中进行。在37℃培养5天之后，向每个杯子中加入1μCi的[³H]-胸腺嘧啶。再培养16小时之后，收获细胞，在β-计数器中计数。使用下式计算所述实施例描述的一些化合物对增殖的抑制：

式中cpm是胸腺嘧啶计数/分钟。本领域普通技术人员将MLR实验看作拒绝移植的体外模拟，这是优于该实验是基于反应淋巴细胞识别刺激物白细胞上的同种主要组织相容抗原。IC₅₀值表示达到MLR的50％抑制的吡啶并[3，2-d]嘧啶衍生物的最低浓度(单位为微摩/升)。MLR测试中的IC₅₀值列于下表1。

实施例320 -TNF-α实验

外周血单核细胞(下文称为PBMC)，对脂多糖(下文称为LPS)(一种革兰氏阴性的细菌内毒素)的刺激作出反应，产生各种化学激活，具体来说是人TNF-α。因此PBMC的活性抑制可以通过对LPS的刺激作出反应、产生的TNF-α的抑制水平来测量。抑制测量通过以下步骤进行：在Lymphoprep(购自Nycomed，Norway)上通过密度梯度离心从肝素化的外周血分离PBMC。然后将LPS以1毫克/毫升的量加入完全培养基中的PMBC悬浮体中(10⁶细胞/毫升)。待测的蝶啶衍生物以不同的浓度加入(0.1μM，1μM和10μM)，细胞在37℃下，在5％的CO₂中培养72小时。收集上清液，然后分别用夹层ELISA中的抗-TNF-α抗体测量TNF-α浓度(Duo Set ELISA人TNFα，购自英国R&D Systems)。ELISA的色度读数使用Multiskan RC板式读数仪(购自芬兰ThermoLabsystems)在450纳米(参比波长：690纳米)下测量。使用Ascent软件2.6(同样购自芬兰ThermoLabsystems)进行数据分析：绘制标准曲线(重组体人TNFα)，在标准曲线上确定各样品的量(皮克/毫升)。使用下式计算本发明的吡啶并[3，2-d]嘧啶衍生物对人TNFα生产的抑制％：

实施例321 -1L-1β实验

外周血单核细胞(下文称为PBMC)对脂多糖(LPS)(一种革兰氏阴性的细菌内毒素)的刺激作出反应，产生各种化学激活，具体来说是人IL-1β。因此可通过测量对LPS刺激反应而产生IL-1β的抑制程度来测量PBMC的活性抑制。

这种抑制测量可通过以下步骤进行：在然后将LPS以1毫克/毫升的量加入完全培养基中的PMBC悬浮体中(10⁶细胞/毫升)。待测的蝶啶衍生物以不同的浓度加入(0.1μM，1μM和10μM)，细胞在37℃下，在5％的CO₂中培养72小时。收集上清液，然后分别用夹层ELISA中的抗-IL-1β抗体测量IL-1β浓度。ELISA的色度读数使用Multiskan RC板式读数仪(购自芬兰ThermoLabsystems)在450纳米(参比波长：690纳米)下测量。使用Ascent软件2.6(同样购自芬兰ThermoLabsystems)进行数据分析：绘制标准曲线(重组体人IL-1β)，在标准曲线上确定各样品的量(皮克/毫升)。使用下式计算本发明的吡啶并[3，2-d]嘧啶衍生物对人IL-1β的抑制％：

实施例322 -吡啶并[3，2-d]嘧啶衍生物的生物活性

根据实施例169-171的方法测试了前面的实施例所述的一些吡啶并[3，2-d]嘧啶衍生物的生物活性。

这些吡啶并[3，2-d]嘧啶衍生物的详细命名见下表1，表中还显示了它们在实施例169的MLR测试和实施例170的TNF-α实验中的IC₅₀值(单位为μM)。

实施例171中的IL-1试验中发现的为：

-实施例32的衍生物的IC₅₀值为6.9μM，

-实施例41的衍生物的IC₅₀值为7.9μM，

-实施例42的衍生物的IC₅₀值为1.8μM。

表1

 

实施例	衍生物	MLR(μM)	TNFα(μM)
				5	4-[(2-苯氧乙基)-哌嗪-1-基]-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	0，1	0，65
8	4-(4-[(3-甲基苯基)氨基]羰基]哌嗪-1-基]-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	0，0094	0，07
				11	2-甲基-4-(4-[(3-甲基苯基)氨基]羰基]哌嗪-1-基]-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	0，0026	0，5
14	2-氯-4-(4-[(3-甲基苯基)氨基]羰基]哌嗪-1-基]-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	0，0066
				15	2-二甲基氨基-4-(4-[(3-甲基苯基)氨基]羰基]哌嗪-1-基]-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	0，4	3，3
16	2-[(N羟基乙基]吗啉基]-4-(4-[(3-甲基苯基)氨基]羰基]哌嗪-1-基]-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	0，4
				17	2-(1-甲基-2-吡咯烷基-乙氧基)-4-(4-[(3-甲基苯基)氨基]羰基]哌嗪-1-基]-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	2，7	5，2
18	2-(2-苯氧基乙氧基)-4-(4-[(3-甲基苯基)氨基]羰基]哌嗪-1-基]-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	0，9
				24	2-氨基-4-异丙氧基-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	0，0066	0，5
25	2-氨基-4-苯氧基乙氧基-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	0，3	0，7
				26	2-氨基-4-[(4-羧酸乙酯)哌啶-1-基]-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	2，6	0，06
27	2-氨基-4-(间-甲基苯氨基)-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	5，7	6，4
				28	2-氨基-4-[3，4-亚甲二氧基苯氨基)-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	0，7	0，8
29	2-氨基-4-(间-溴-苯氨基)-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	0，7	0，8
				30	2-氨基-4-(2-氯-5-甲氧基-苯氨基)-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	10
31	2-氨基-4-(4-甲基哌嗪基-1-基)-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	0，9	0，8
				32	2-氨基-4-(噻吩基-2-甲基氨基)-6-(3，4-二甲氧基苯	0，8	0，8

 

	基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶
				33	2-氨基-4-(2-N-吗啉基乙基)氨基-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	1，9	0，7
34	2-氨基-4-(2，2-二甲氧基乙基)氨基-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	0，8	0，6
				35	2-氨基-4-(2-氨基甲基)吡啶]-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	0，8	0，7
36	2-氨基-4-(1，4-二氨基环己基)-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	6，5	2，9
				41	2-氨基-4-吗啉基-6-(3，4-二甲氧基苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶	0，037	0，03
42	2-氨基-4-(4-{[((3-甲基苯基)氨基]羰基}哌嗪-1-基)-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	0，000064	0，06
				43	2-氨基-4-(4-氟苯基-哌嗪-1-基)-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	0，3	0，09
44	2-氨基-4-(4-甲基苯基-哌嗪-1-基)-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	0，16	0，3
				45	2-氨基-4-(苯氧基-乙基-哌嗪-1-基)-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	0，28	0，8
46	2-氨基-4-(3-氯苯基-哌嗪-1-基)-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	0，8	0，5
				47	2-氨基-4-(2-吡啶基-哌嗪-1-基)-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	0，3	0，05
48	2-氨基-4-[2-(哌嗪-1-基)乙酸N-(2-噻唑基)酰胺]-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	0，06	0，06
				49	2-氨基-4-(N-乙酰基-哌嗪基)-6-(3，4-二甲氧基苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶	0，07	0，04
50	2-氨基-4-(1-胡椒基-哌嗪-1-基)-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	7，4	8，5
				51	2-氨基-4-[1-(2-糠酰)-哌嗪-1-基)-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	0，03	0，03
52	2-氨基-4-(1-苄基-哌嗪-1-基)-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	0，8	0，46
				54	2-氨基-4-(N-3-噻吩基氨基甲酰基-哌嗪-1-基]-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	0，002	0，05
55	2-氨基-4-(N-2，6-二氯-吡啶基-氨基甲酰基-哌嗪-1-基]-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	0，3	0，4
				56	2-氨基-4-(N-4-氟-苯基-氨基甲酰基-哌嗪-1-基]-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	0，003	0，07
57	2-氨基-4-(N-3-氯-4-氟-苯基-氨基甲酰基-哌嗪-1-基]-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	0，004	0，3
				58	2-氨基-4-(N-3-氯-苯基-氨基甲酰基-哌嗪-1-基]-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	0，0004	0，26
59	2-氨基-4-[(N-4-氯-苯氧基-乙酰基)-哌嗪-1-基]-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	0，016

 

60	2-氨基-4-[(N-苯氧基-乙酰基)-哌嗪-1-基)-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	0，053
				70	4-[(N-3-氯苯基氨基甲酰)-(哌嗪-1-基)-6-氯-吡啶并[3，2-d]嘧啶	3，4
79	4-[(N-3-氯苯基氨基甲酰)-哌嗪-1-基]-6-(3-氯-4-甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	0，3
				80	4-[(N-3-氯苯基氨基甲酰)-哌嗪-1-基]-6-(1，4-苯并二噁烷-6-基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	0，3
81	4-[(N-3-氯苯基氨基甲酰)-哌嗪-1-基]-6-(3，4-二甲基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	0，5
				82	4-[(N-3-氯苯基氨基甲酰)-哌嗪-1-基]-6-(3，4-亚甲二氧基)苯基-吡啶并[3，2-d]嘧啶	0，3
83	4-[(N-3-氯苯基氨基甲酰)-哌嗪-1-基]-6-(3-氯-4-乙氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	0，5
				84	4-[(N-3-氯苯基氨基甲酰)-哌嗪-1-基]-6-(3，4-二氯苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	0，7
88	2-吗啉基-4-[(N-3-甲基-苯基氨基甲酰-哌嗪-1-基]-6-(3，4-二甲氧基苯基]-吡啶并[3，2-d]嘧啶	0，4
				89	2-丁氧基-4-[(N-3-甲基-苯基氨基甲酰)-哌嗪-1-基]-6-(3.4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3.2-d]嘧啶	2
90	2-甲氧基-4-[(N-3-甲基-苯基氨基甲酰)-哌嗪-1-基]-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	0，14	0，5
				91	2-(对甲苯氮基)-4-[(N-3-甲基苯基氨基甲酰)-哌嗪-1-基]-6-(3，4-二甲氧基-苯基)-吡啶并[3.2-d]嘧啶	0，8
92	2-[(3-氯-4-氟-苯氨基)-4-[(N-3-甲基-苯基氨基甲酰]-哌嗪-1-基]-6-(3，4-二甲氧基苯基]-吡啶并[3，2-d]嘧啶	1，2
				93	2，4-二氨基-6-(4-羟基-3-甲氧苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	5，1
96	2-氨基-4-(N-吗啉基)-6-(4-羟基-3-甲氧基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	0，8	0，6
				97	2-氨基-4-(N-吗啉基)-6-(4-乙氧基-3-甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	0，5	0，3
98	2-氨基-4-(N-吗啉基)-6-(4-环戊氧基-3-甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	7，6
				99	2-氨基-4-(N-吗啉基)-6-(4-异丙氧基-3-甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	0，7	1
100	2-氨基-4-(N-哌嗪-1-基)-6-(3-甲氧基-4-羟基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	3，3	2，4
				101	2-氨基-4-[(N-4-氟苯基-氨基甲酰)-哌嗪-1-基)-6-(4-羟基-3-甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	0，5	0，6
102	2-氨基-4-[(N-4-氟苯基-氨基甲酰-哌嗪-1-基)-6-(4-乙氧基-3-甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	0，04	0，6
				103	2-氨基-4-[(N-4-氟苯基-氨基甲酰)-哌嗪-1-基]-6-(4-异丙氧基-3-甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	0，07	6，4
104	2-氨基-4-[(N-3-甲基苯基-氨基甲酰)-哌嗪-1-	0，4	0，3

 

	基]-6-(4-羟基-3-甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶
				105	4-(4-甲基苯基-哌嗪-1-基)-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	0，8	0，09
107	4-(N-哌嗪-1-基)-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	3，8	2，7
				108	4-[(N-3-氯-4-氟苯基氨基甲酰)-哌嗪-1-基]-6-(3，4-二甲氧基-苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	0，06	0，2
109	4-[(N-2-噻吩基-氨基甲酰)-哌嗪-1-基]-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	0，06	0，13
				110	4-[(N-2，6-二氯-吡啶基-氨基甲酰)-哌嗪-1-基]-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	10	6
111	4-[(N-4-氟苯基氨基甲酰)-哌嗪-1-基]-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	0，03	0，03
				112	4-[(N-3-氯苯基氨基甲酰)-哌嗪-1-基]-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	0，04	0，07
113	4-[(N-4-氯苯氧基-乙酰基哌嗪-1-基]-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	0，04	0，3
				116	4-(哌嗪-1-基)-6-(3-甲基-4-甲氧苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	5，1	8，1
117	4-[(N-3-氯-苯基氨基甲酰)-哌嗪-1-基]-6-(3-甲基-4-甲氧苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	0，5	9
				118	4-[(N-4-氯-苯基氨基甲酰)-哌嗪-1-基]-6-(3-甲基-4-甲氧苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	0，6
119	4-[(N-3-氯-苯基氨基甲酰)-哌嗪-1-基]-6-(3-甲基-4-羟基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	0，6
				120	4-[(N-3-氯-苯基氨基甲酰)-哌嗪-1-基]-6-(3-甲氧基-4-乙氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	0，07	0，8
121	4-[(N-3-氯-苯基氨基甲酰)-哌嗪-1-基]-6-(3-甲氧基-4-异丙氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	0，3
				124	4-吗啉基-6-(4-氯苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	7，2	10
145	2-乙酰氨基-4-(1，2，4-三唑基)-6-(3，4-二氯-苯基)吡啶并-[3，2-d]嘧啶	5，3
				156	2-氨基-4-[(N-3-氯-苯基-氨基甲酰)-哌嗪-1-基]-6-(3-甲基-4-甲氧基-苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶	0，1	5，5
157	2-氨基-4-(N-3-氯-苯基-氨基甲酰)哌嗪-1-基]-6-(3-氯-4-甲氧基-苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶	0，068	1，6
				159	2-氨基-4-(N-3-氯-苯基-氨基甲酰)哌嗪-1-基]-6-(3-氟-4-乙氧基-苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶	0，07	4，8
161	2-氨基-4-[(N-3-氯-苯基-氨基甲酰)-哌嗪-1-基]-6-(3，4-(亚甲基二氧)苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶	0，06
				162	2-氨基-4-[(N-3-氯-苯基-氨基甲酰)-哌嗪-1-基)-6-(1，4-苯并二噁烷-苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶	0，1	10
163	2-氨基-4-(吗啉基)-6-(3-甲基-4-甲氧基苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶	3，6	6，5
				164	2-氨基-4-(吗啉基)-6-(3-氯-4-甲氧基苯基)吡啶并	0，6	1，5

 

	[3，2-d]嘧啶
				165	2-氨基-4-(吗啉基)-6-(1，4-苯并二噁烷-苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶	0，6	0，9
166	2-氨基-4-吗啉基-6-(3-氟-4-乙氧基-苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶	0，7	0，8
				168	2-氨基-4-吗啉基-哌嗪-1-基-6-(3，4-(亚甲二氧基)苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶	2，4
189	2-氨基-4-[(N-4-氯-苄基氨基甲酰)-哌嗪-1-基]-6-(4-氟苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	0，5
				190	2-氨基-4-[(N-乙酰基-哌嗪-1-基]-6-(3，4-亚甲二氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	0，8	4，8
191	2-氨基-4-[2-(哌嗪-1-基乙酸N-(2-噻唑基)-酰胺]-6-3，4-亚甲二氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	0，4	3，5
				192	2-氨基-4-[N-(2-糠酰)-哌嗪-1-基]-6-(3，4-亚甲二氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	8，1
193	2-氨基-4-[N-(4-氯苯氧基-乙酰基)-哌嗪-1-基]-6-(3，4-亚甲二氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	0，04	5，8
				196	2-氨基-4-[N-(3-甲基-苯基-氨基甲酰)-哌嗪-1-基]-6-(3，4-亚甲二氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	0，03	5，3
199	2-氨基-4-[N-乙酰基-哌嗪-1-基]-6-(1，4-苯并二噁烷)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	4，8	2，9
				201	2-氨基-4-[2-(哌嗪-1-基乙酸N-(2-噻唑基)-酰胺]-6(1，4-苯并二噁烷)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	0，8	3，4
203	2-氨基-4-[N-(2-糠酰)-哌嗪-1-基]-6-(1，4-苯并二噁烷)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	5，7
				204	2-氨基-4-[N-(4-氟-苯基)-哌嗪-1-基]-6-(4-氟苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	6，4
205	2-氨基-4-[N-(苯氧基-乙基)-哌嗪-1-基]-6-(4-氟苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	5，5
				207	2-氨基-4-[(N-4-氯-苯氧基-乙酰基)-哌嗪-1-基]-6-(4-氟苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	0，03
210	2-氨基-4-吗啉基-6-(2-溴-苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	1，8	7，2
				211	4-[N-(3-氯-苯基氨基甲酰)-哌嗪-1-基]-6-(3-甲氧基-4-环丙基甲氧基-苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	0，4
212	4-[N-(3-氯-苯基氨基甲酰)-哌嗪-1-基]-6-(3-羟基-4-甲氧基-苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	0，04	0，9
				213	4-[N-(3-氯-苯基氨基甲酰基)-哌嗪-1-基]-6-(3-乙氧基-4-甲氧基-苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	0，057	0，06
214	4-[N-(3-氯-苯基氨基甲酰基)-哌嗪-1-基]-6-(3-异丙氧基-4-甲氧基-苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	0，05	0，3
				215	4-[N-(3-氯-苯基氨基甲酰基)-哌嗪-1-基]-6-(3-环丙基甲氧基-4-甲氧基-苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	0，2	0，8
219	2-氨基-4-[(S)-3-(氨基)吡咯烷]-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	5，5	1，9
				220	2-氨基-4-[3-(S)-4-氯-苯氧基-乙酰基-氨基)-吡咯烷	4，3	1，8

 

	-1-基-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶
				221	2-氨基-4-[3-(S)-3-甲基苯基氨基甲酰基吡咯烷-1-基]-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	1，3
223	2-氨基-4-硫代甲基-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	0，9	0，8
				230	2-氨基-6-氯-4-吗啉代-吡啶并[3，2-d]嘧啶	>10
232	2-氨基-4-吗啉代-6-(2-呋喃)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	5，3	5，3
				233	2-氨基-4-吗啉代-6-(3-噻吩)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	4，4	3，7
234	2-氨基-4-吗啉代-6-(4-吡啶基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	0，7	0，5
				235	2-氨基-4-吗啉代-6-(5-甲基-2-噻吩基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	3，4	1，8
236	2-氨基-4-吗啉代-6-(6-甲氧基-2-吡啶基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	5，3
				237	2-氨基-4-吗啉代-6-(5-吲哚基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	0，8	2，6
238	2-氨基-4-吗啉代-6-(2-噻吩基)-吡啶并[3.2-d]嘧啶	0，8	2，8
				239	2-氨基-4-吗啉代-6-(4-甲基-2-噻吩基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	4，6	4，9
240	2-氨基-4-吗啉代-6-(3-吡啶基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	1，3	0，7
				241	2-氨基-4-吗啉代-6-(5-氯-2-噻吩基-吡啶并[3，2-d]嘧啶	2，2	5，4
242	2-氨基-4-吗啉代-6-(3-氯-4-氟苯基-吡啶并[3，2-d]嘧啶	2，6
				243	2-氨基-4-吗啉代-6-(3，4-二氟苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	2，3	6，0
244	2-氨基-4-吗啉代-6-(4-氟-3-甲基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	3，8	7，2
				245	2-氨基-4-吗啉代-6-(4-氟苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	2，3
246	2-氨基-4-吗啉代-6-[4-(3，5-二甲基异噁唑基)]-吡啶并[3，2-d]嘧啶	5，5	1，6
				250	2-氨基-4-[(N-3-甲基苯基氨基甲酰基高哌嗪-1-基]-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	0，0085	0，6
255	2-氨基-4-[(1-Boc-哌啶-4-基)氨基]-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	0，06	0，04
				256	2，4-二氨基-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	0，6
257	2-氨基-4-[(1-Boc-哌啶-3-基)氨基]-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	0，3	0，6
				258	2-氨基-4-[(1-Cbz-哌啶-3-基)氨基]-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶基[3，2-d]嘧啶	0，9	0，3
260	2-氨基-4-[3-(R)-(3-甲基苯基氨基甲酰基)-吡咯烷-1-基]-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	2，1
				261	2-氨基-4-[(3-甲基苯基氨基甲酰基)-乙二胺-1-N-基]-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	0，008	0，8
262	2-氨基-4-[(3-甲基苯基氨基甲酰基)-3-氨基丙烷-氨基-1-N-基]-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	0，5	6，9
				263	2-氨基-4-[1-(3-甲基苯基氨基甲酰基)哌啶-4-基)氨	0，07	0，5

 

	基]-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶
				264	2-氨基-4-[(3-甲基苯基氨基甲酰基哌啶-3-基)氨基)-6-(3，4-二甲氧基苯基]-吡啶并[3，2-d]嘧啶	0，5	1，8
265	2-氨基-4-[2-(4-氯苯氧基-乙酰基-乙二胺-1-N-基]-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	0，3	3，9
				266	2-氨基-4-[3-N-(4-氯苯氧基-乙酰基)-3-氨基-丙烷-胺-1-N-基]-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	0，7	0，9
267	2-氨基-4-[(3-(R)-(4-氯苯氧基乙酰基-氨基)-吡咯烷-1-基]-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	0，7	2，5
				268	2-氨基-4-[(3-羧酸异丙酰胺)-哌啶-1-基]-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	0，5	0，7
269	2-氨基-4-(4-氯苯基-4-羟基哌啶-1-基)-6-(3，4-二甲氧基-苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	3，1
				270	2-氨基-4-[4-(N-2-苯基乙基乙酰胺-2-基)哌嗪-1-基]-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶		0，3
271	2-氨基-4-[2-(4-苄基哌嗪-1-基)-2-氧代-乙烷-氨基]-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	0，7	0，5
				272	2-氨基-4-[3-(4-乙酰基哌嗪-1-基)-丙-3-酮-1-基-氨基1-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶		0，7
273	2-氨基-4-(N-吡咯烷基-乙酰胺-2-基-哌嗪-1-基)-6-(3，4-二甲氧基苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶		0，08
				274	2-氨基-4-(N-吡啶基乙酰胺-2-基-哌嗪-1-基)-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶		0，08
275	2-氨基-4-[N-(哌嗪并)-乙酰基-吗啉代]-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶		0，097
				276	2-氨基-4-[2-氨基-1-(4-甲基-哌嗪-1-基)-乙酮]-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶		0，6
184/231	2-氨基-4-(吗啉代)-6-(3，4-二氯苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	3，9

表1(终)

实施例323-356 -2-乙酰氨基-4-芳基芳基氨基-6-(3，4-二甲氧基-苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶和2-氨基-4-芳基氨基-6-(3，4-二甲氧基苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶的制备

重复实施例26-36的步骤，其不同之处在于使用其它的芳胺(下文关于各实施例所述)作为原料，以良好的产率制得以下2-氨基-4-芳族氨基-6-(3，4-二甲氧基-苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶，每一次都通过包含以乙酰氨基的形式保护的2-氨基的对应的中间体制备：

-由2-溴苯胺制得的2-氨基-4-(2-溴苯胺基)-6-(3，4-二甲氧基-苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶(实施例323)，

由4-溴苯胺制得的2-氨基-4-(4-溴苯胺基)-6-(3，4-二甲氧基-苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶(实施例324)，

由2-氯苯胺制得的2-氨基-4-(2-氯苯胺基)-6-(3，4-二甲氧基-苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶(实施例325)，

由3-氯苯胺制得的2-氨基-4-(3-氯苯胺基)-6-(3，4-二甲氧基-苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶(实施例326)，

由4-氯苯胺制得的2-氨基-4-(4-氯苯胺基)-6-(3，4-二甲氧基-苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶(实施例327)，

由3-氯-4-甲氧基苯胺制得的2-氨基-4-(3-氯-4-甲氧基苯胺基)-6-(3，4-二甲氧基-苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶(实施例328)，

5-氯-2-甲氧基苯胺制得的由2-氨基-4-(5-氯-2-甲氧基苯胺基)-6-(3，4-二甲氧基-苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶(实施例329)，

由2，3-二甲基苯胺制得的2-氨基-4-(2，3-二甲基苯胺基)-6-(3，4-二甲氧基-苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶(实施例330)，

由2，4-二甲基苯胺制得的2-氨基-4-(2，4-二甲基苯胺基)-6-(3，4-二甲氧基-苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶(实施例331)，

由2，5-二甲基苯胺制得的2-氨基-4-(2，5-二甲基苯胺基)-6-(3，4-二甲氧基-苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶(实施例332)，

由2，6-二甲基苯胺制得的2-氨基-4-(2，6-二甲基苯胺基)-6-(3，4-二甲氧基-苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶(实施例333)，

由3，4-二甲基苯胺制得的2-氨基-4-(3，4-二甲基苯胺基)-6-(3，4-二甲氧基-苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶(实施例334)，

由2-氟苯胺制得的2-氨基-4-(2-氟苯胺基)-6-(3，4-二甲氧基-苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶(实施例335)，

由3-氟苯胺制得的2-氨基-4-(3-氟苯胺基)-6-(3，4-二甲氧基-苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶(实施例336)，

由4-氟苯胺制得的2-氨基-4-(4-氟苯胺基)-6-(3，4-二甲氧基-苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶(实施例337)，

由3-氟-2-甲氧基苯胺制得的2-氨基-4-(3-氟-2-甲氧基苯胺基)-6-(3，4-二甲氧基-苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶(实施例338)，

由3-氟-4-甲氧基苯胺制得的2-氨基-4-(3-氟-4-甲氧基苯胺基)-6-(3，4-二甲氧基-苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶(实施例339)，

由2-氟-4-甲基苯胺制得的2-氨基-4-(2-氟-4-甲基苯胺基)-6-(3，4-二甲氧基-苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶(实施例340)，

由2-氟-5-甲基苯胺制得的2-氨基-4-(2-氟-5-甲基苯胺基)-6-(3，4-二甲氧基-苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶(实施例341)，

由3-氟-2-甲基苯胺制得的2-氨基-4-(3-氟-2-甲基苯胺基)-6-(3，4-二甲氧基-苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶(实施例342)，

由3-氟-4-甲基苯胺制得的2-氨基-4-(3-氟-4-甲基苯胺基)-6-(3，4-二甲氧基-苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶(实施例343)，

由4-氟-2-甲基苯胺制得的2-氨基-4-(4-氟-2-甲基苯胺基)-6-(3，4-二甲氧基-苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶(实施例344)，

由5-氟-2-甲基苯胺制得的2-氨基-4-(5-氟-2-甲基苯胺基)-6-(3，4-二甲氧基-苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶(实施例345)，

由2-氟-4-碘苯胺制得的2-氨基-4-(2-氟-4-碘苯胺基)-6-(3，4-二甲氧基-苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶(实施例346)，

由2-碘苯胺制得的2-氨基-4-(2-碘苯胺基)-6-(3，4-二甲氧基-苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶(实施例347)，

由3-碘苯胺制得的2-氨基-4-(3-碘苯胺基)-6-(3，4-二甲氧基-苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶(实施例348)，

由4-碘苯胺制得的2-氨基-4-(4-碘苯胺基)-6-(3，4-二甲氧基-苯基)吡啶并[3，2d]嘧啶(实施例349)，

由2-甲氧基-5-甲基苯胺制得的2-氨基-4-(2-甲氧基-5-甲基苯胺基)-6-(3，4-二甲氧基-苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶(实施例350)，

由4-甲氧基-2-甲基苯胺制得的2-氨基-4-(4-甲氧基-2-甲基苯胺基)-6-(3，4-二甲氧基-苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶(实施例351)，

由5-甲氧基-2-甲基苯胺制得的2-氨基-4-(5-甲氧基-2-甲基苯胺基)-6-(3，4-二甲氧基-苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶(实施例352)，

由2-乙氧基苯胺(邻氨基苯乙醚)制得的2-氨基-4-(2-乙氧基苯胺基)-6-(3，4-二甲氧基-苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶(实施例353)，

由3-乙氧基苯胺(间氨基苯乙醚)制得的2-氨基-4-(3-乙氧基苯胺基)-6-(3，4-二甲氧基-苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶(实施例354)，

由4-乙氧基苯胺(对氨基苯乙醚)制得的2-氨基-4-(4-乙氧基苯胺基)-6-(3，4-二甲氧基-苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶(实施例355)，

由α-萘胺制备的2-氨基-4-(α-萘基氨基)-6-(3，4-二甲氧基-苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶(实施例356)。

实施例357-367 -2-乙酰氨基-4-芳基烷基氨基-6-(3，4-二甲氧基苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶和2-氨基-4-芳基烷基氨基-6-(3，4-二甲氧基苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶的制备

重复实施例26-36的步骤，其不同之处在于使用其它的芳基烷基胺(在下文中关于各实施例所述)作为原料，以良好的产率制得以下2-氨基-4-芳基烷基氨基-6-(3，4-二甲氧基-苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶，每一次都是经由包含以乙酰氨基形式保护的2-氨基的对应的中间体制得的：

由苄胺制得的2-氨基-4-苄基氨基-6-(3，4-二甲氧基苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶(实施例357)，

由2-甲氧基苄胺制得的2-氨基-4-(2-甲氧基苄基氨基)-6-(3，4-二甲氧基苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶(实施例358)，

由3-甲氧基苄胺制得的2-氨基-4-(3-甲氧基苄基氨基)-6-(3，4-二甲氧基苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶(实施例359)，

由4-甲氧基苄胺制得的2-氨基-4-(4-甲氧基苄基氨基)-6-(3，4-二甲氧基苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶(实施例210)，

由2-氟苄胺制得的2-氨基-4-(2-氟苄基氨基)-6-(3，4-二甲氧基苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶(实施例360)，

由3-氟苄胺制得的2-氨基-4-(3-氟苄基氨基)-6-(3，4-二甲氧基苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶(实施例361)，

由4-氟苄胺制得的2-氨基-4-(4-氟苄基氨基)-6-(3，4-二甲氧基苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶(实施例362)，

由2-氯苄胺制得的2-氨基-4-(2-氯苄基氨基)-6-(3，4-二甲氧基苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶(实施例363)，

由3-氯苄胺制得的2-氨基-4-(3-氯苄基氨基)-6-(3，4-二甲氧基苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶(实施例364)，

由4-氯苄胺制得的2-氨基-4-(4-氯苄基氨基)-6-(3，4-二甲氧基苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶(实施例365)，

由2-氨基苄胺制得的2-氨基-4-(2-氨基苄基氨基)-6-(3，4-二甲氧基苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶(实施例366)，

由氨基二苯基甲苯制得的2-氨基-4-联苯基甲基氨基-6-(3，4-二甲氧基苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶(实施例367)，

实施例368-378 -2-乙酰氨基-4-烷基氨基-6-(3，4-二甲氧基-苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶和2-氨基-4-烷基氨基-6-(3，4-二甲氧基苯基)吡啶并[3.2-d]嘧啶的制备。

重复实施例26-36的步骤，其不同之处在于使用其它的烷基胺(下文中关于各实施例描述)作为原料，以高产率制得以下的2-氨基-4-烷基氨基-6-(3，4-二甲氧基-苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶，每次都是由包含以乙酰氨基形式保护的2-氨基的相应的中间体制得的：

由1，2-二氨基丙烷制得的2-氨基-4-(1，2-二氨基丙基)-6-(3，4-二甲氧基苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶(实施例368)，

由1，3-二氨基丙烷制得的2-氨基-4-(1，3-二氨基丙基)-6-(3，4-二甲氧基苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶(实施例369)，

由1，4-二氨基丁烷制得的2-氨基-4-(1，4-二氨基丁基)-6-(3，4-二甲氧基苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶(实施例370)，

由1，5-二氨基戊烷制得的2-氨基-4-(1，5-二氨基戊基)-6-(3，4-二甲氧基苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶(实施例371)，

由1，6-二氨基己烷制得的2-氨基-4-(1，6-二氨基己基)-6-(3，4-二甲氧基苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶(实施例372)，

由1，2-二氨基环己烷制得的2-氨基-4-(1，2-二氨基环己基)-6-(3，4-二甲氧基苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶(实施例373)，

由1，7-二氨基庚烷制得的2-氨基-4-(1，7-二氨基庚基)-6-(3，4-二甲氧基苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶(实施例374)，

由1，8-二氨基辛烷制得的2-氨基-4-(1，8-二氨基辛基)-6-(3，4-二甲氧基苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶(实施例375)，

由1，9-二氨基壬烷制得的2-氨基-4-(1，9-二氨基壬基)-6-(3，4-二甲氧基苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶(实施例376)，

由1，10-二氨基癸烷制得的2-氨基-4-(1，10-二氨基癸基)-6-(3，4-二甲氧基苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶(实施例377)，

由1，12-二氨基十二烷制得的2-氨基-4-(1，12-二氨基十二烷基)-6-(3，4-二甲氧基苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶(实施例378)。

实施例379 -磷酸二酯酶-4抑制活性

由培养的细胞制备了磷酸二酯酶-4(PDE-4)提取物，然后使细胞溶解和均一化。均一化之后，离心收集上清液，将其施加在Sephacryl S-200柱上。将发现具有PDE-4活性的馏分用于以后的实验步骤。

使用以下的同位素两步法检测了前面的实施例中描述的一些吡啶并[3，2-d]嘧啶衍生物的PDE-4抑制活性。将待测的衍生物(在1％的DMSO中)与0.2微克PDE-4酶混合，在25℃、包含50mMTris-HCl和5mM MgCl₂的pH 7.5的缓冲液中预先培养15分钟。然后加入放射性同位素标记的环状[³H]AMP+cAMP以提供1.01μM的最终浓度，在25℃下培养20分钟。活性的PDE-4酶将环状[³H]AMP水解成5′-[³H]AMP。通过在100℃培养该反应混合物而使反应终止。在37℃加入来自大响尾蛇的蛇毒(10微升，10毫克/毫升)10分钟，通过所述蛇毒中包含的核苷酸酶的影响进一步使5′-[³H]AMP水解生成[³H]腺苷。然后通过加入200微升阴离子交换树脂(AG1-X2)，该树脂结合除了[³H]腺苷以外的所有带电荷的核苷酸，从而使反应终止。使树脂沉降5分钟，然后取出50微升的水相，将其与0.2毫升闪烁流体混合。使用液体闪烁计数器测量溶液的放射性。

表2显示了在此试验中测试的以前的实施例的一些衍生物在某些浓度下的IC₅₀值(单位为μM)或者抑制百分数。

表2

 

实施例	衍生物	PDE-4(％抑制)
			8	4-(4-[(3-甲基苯基)氨基]羰基]哌嗪-1-基]-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	0，016(IC50)
11	2-甲基-4-(4-[(3-甲基苯基)氨基]羰基]哌嗪-1-基]-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	69％，在0，5μM
			24	2-氨基-4-异丙氧基-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	29％，在0，5μM
26	2-氨基-4-[4-(羧酸乙酯)哌啶-1-基]-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	0，25(IC50)
			41	2-氨基-4-吗啉基-6-(3，4-二甲氧基苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶	0，041(IC50)
42	2-氨基-4-(4-{[((3-甲基苯基)氨基]羰基}哌嗪-1-基)-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	0，061(IC50)
			43	2-氨基-4-(4-氟苯基-哌嗪-1-基)-6-(3，4-二甲	在0，09μM，61％

 

	氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶
			45	2-氨基-4-(苯氧基-乙基-哌嗪-1-基)-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	在0，7μM，76％
47	2-氨基-4-(2-吡啶基-哌嗪-1-基)-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	在0，05μM，64％
			48	2-氨基-4-[2-(哌嗪-1-基)乙酸N-(2-噻唑基)酰胺]-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	在0，06μM，59％
49	2-氨基-4-(N-乙酰基-哌嗪基)-6-(3，4-二甲氧基苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶	在0，04μM，48％
			51	2-氨基-4-[1-(2-糠酰)-哌嗪-1-基)-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	在0，03μM，63％
54	2-氨基-4-(N-3-噻吩基氨基甲酰基-哌嗪-1-基]-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	在0，1μM，62％
			56	2-氨基-4-(N-4-氟-苯基-氨基甲酰基-哌嗪-1-基]-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	在0，1μM，74％
57	2-氨基-4-(N-3-氯-4-氟-苯基-氨基甲酰基-哌嗪-1-基]-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	在0，1μM，74％
			58	2-氨基-4-(N-3-氯-苯基-氨基甲酰基-哌嗪-1-基]-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	在0，1μM，75％
59	2-氨基-4-[(N-4-氯-苯氧基-乙酰基)-哌嗪-1-基]-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	0，034(IC50)
			79	4-[(N-3-氯苯基氨基甲酰)-哌嗪-1-基]-6-(3-氯-4-甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	在10μM，67％
80	4-[(N-3-氯苯基氨基甲酰)-哌嗪-1-基]-6-(1，4-苯并二噁烷-6-基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	在10μM，17％
			81	4-[(N-3-氯苯基氨基甲酰)-哌嗪-1-基]-6-(3，4-二甲基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	在10μM，12％
82	4-[(N-3-氯苯基氨基甲酰)-哌嗪-1-基]-6-(3，4-亚甲二氧基)苯基-吡啶并[3，2-d]嘧啶	在10μM，31％
			83	4-[(N-3-氯苯基氨基甲酰)-哌嗪-1-基]-6-(3-氯-4-乙氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	在10μM，49％
84	4-[(N-3-氯苯基氨基甲酰)-哌嗪-1-基]-6-(3，4-二氯苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	在10μM，22％
			91	2-(对甲苯氮基)-4-[(N-3-甲基苯基氨基甲酰)-哌嗪-1-基]-6-(3，4-二甲氧基-苯基)-吡啶并[3.2-d]嘧啶	10μM(IC50)
108	4-[(N-3-氯-4-氟苯基氨基甲酰)-哌嗪-1-基]-6-(3，4-二甲氧基-苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧	在0，2μM，59％

 

	啶
			109	4-[(N-2-噻吩基-氨基甲酰)-哌嗪-1-基]-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	在0，09μM，58％
112	4-[(N-3-氯苯基氨基甲酰)-哌嗪-1-基]-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	在0，07μM，56％
			113	4-[(N-4-氯苯氧基-乙酰基哌嗪-1-基]-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	在0，4μM，77％
117	4-[(N-3-氯-苯基氨基甲酰)-哌嗪-1-基]-6-(3-甲基-4-甲氧苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	在10μM，54％
			118	4-[(N-4-氯-苯基氨基甲酰)-哌嗪-1-基]-6-(3-甲基-4-甲氧苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	在10μM，62％
120	4-[(N-3-氯-苯基氨基甲酰)-哌嗪-1-基]-6-(3-甲基-4-乙氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	在0，8μM，67％
			121	4[(N3-氯-苯基氨基甲酰)-哌嗪-1-基]-6-(3-甲氧基-4-异丙氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	54％10μM
157	2-氨基-4-(N-3-氯-苯基-氨基甲酰)哌嗪-1-基]-6-(3-氯-4-甲氧基-苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶	在0，9μM，57％
			159	2-氨基-4-(N-3-氯-苯基-氨基甲酰)哌嗪-1-基]-6-(3-氟-4-乙氧基-苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶	在0，1μM，16％；在10μM，71％；IC50＝2，44μM
161	2-氨基-4-[(N-3-氯-苯基-氨基甲酰)-哌嗪-1-基]-6-(3，4-(亚甲基二氧)苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶	在10μM，68％
			162	2-氨基-4-[(N-3-氯-苯基-氨基甲酰)-哌嗪-1-基)-6-(1，4-苯并二噁烷-苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶	在10μM，63％；IC50＝7，84μM
189	2-氨基-4-[(N-3-氯-苄基氨基甲酰)-哌嗪-1-基]-6-(4-氟苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	在10μM，32％
			207	2-氨基-4-[(N-4-氯-苯氧基-乙酰基)-哌嗪-1-基]-6-(4-氟苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	在10μM，34％
211	4-[N-(3-氯-苯基氨基甲酰)-哌嗪-1-基]-6-(3-甲氧基-4-环丙基甲氧基-苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	在10μM，16％
			212	4-[N-(3-氯-苯基氨基甲酰)-哌嗪-1-基]-6-(3-羟基-4-甲氧基-苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	在0，9μM，43％
213	4-[N-(3-氯-苯基氨基甲酰基)-哌嗪-1-基]-6-(3-乙氧基-4-甲氧基-苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	在0，06μM，78％
			214	4-[N-(3-氯-苯基氨基甲酰基)-哌嗪-1-基]-6-(3-异丙氧基-4-甲氧基-苯基-吡啶并[3，2-d]嘧啶	在0，3μM，61％
261	2-氨基-4-[(3-甲基苯基氨基甲酰基)-乙二胺-1-N-基]-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶	在10μM，86％

表2(终)

实施例380-抗-HCV实验/复制子实验

Huh-5-2细胞系[具有HCV持久复制子13891uc-ubi-neo/NS3-375.1的细胞系；具有荧光虫荧光素酶-泛激素-新霉素磷酸转移酶融合蛋白质和EMCV-IRES驱动的NS3-5B HCV多蛋白的复制子]在附加了10％的胎牛血清、2mM L-谷氨酰胺(购自Life Technologies)，1×非必需氨基酸(购自Life Technologies)；100IU/ml青霉素，100微克/毫升链霉素和250微克/毫升G418(Geneticin，购自LifeTechnologies)的RPMI培养基(购自Gibco)中培养。细胞以7000细胞/坑的密度接种在96坑观察板(购自Packard)中包含与上述相同的组分、但是不含G418的培养基中。使细胞附着和增殖24小时。此时，除去培养基，将待测的吡啶并[3，2-d]嘧啶衍生物的系列稀释液加入不含G418的培养基中。包含干扰素-α 2a(500IU)作为阳性对照。这些板在37℃、5％的CO₂中再培育72小时。Huh-5细胞中HCV复制子的复制造成细胞的荧光素酶活性。通过加入50微升1×Glo-lysis缓冲剂(购自Promega)15分钟，然后加入50微升Steady-Glo荧光素酶实验试剂(购自Promega)而测量荧光素酶活性。

使用光度计测量荧光素酶活性，每个单独的孔中的信号表示为未进行处理的培养物的百分数。Huh-5-2细胞的平行培养液以7000细胞/孔的密度接种在传统的96孔细胞培养板(购自Becton-Dickinson)上，以类似的方式进行处理，只是不加入Glo-lysis缓冲液或Steady-Glo荧光素酶试剂。通过MTS法(购自Promega)测量该培养液的密度。

表3中的结果由以下数据表示：

-50％抑制细胞生长浓度(CC₅₀)，即使得细胞生长受到50％抑制的浓度，

-50％有效浓度(EC₅₀)，即保护50％的细胞单层免受病毒诱发的细胞病变作用的浓度。

表3显示了在此试验中测试的一些衍生物的EC₅₀和CC₅₀值(单位为μM，即微摩尔/升)。

表3

 

衍生物	EC50	CC50
			实施例27	0.5	>50
实施例36	1.0	7.7

Claims (14)

1.一种通式如下的吡啶并(3，2-d)嘧啶衍生物或其药学上可接受的加成盐或其立体异构体或其N-氧化物或其溶剂合物：

-R₁选自下组：氢、卤素、氰基、羧酸、酰基、硫代酰基、烷氧羰基、酰氧基、碳酸酯基、氨基甲酸酯、C_1-7烷基、芳基、氨基、乙酰氨基、N-保护的氨基、(一或二-)C_1-7烷基氨基、(一或二-)芳基氨基、(一或二-)C_3-10环烷基氨基、(一或二-)羟基C_1-7烷基氨基、(一或二-)C_1-4烷基芳基氨基、巯基C_1-7烷基、C_1-7烷基氧、和式R₆-NR₇R₁₂的基团，其中R₆是化学键或者C_1-3亚烷基，其中R₇和R₁₂独立地选自下组：氢、C_1-7烷基、C_2-7烯基、C_2-7炔基、芳基、芳基烷基、C_3-10环烷基和杂芳基、或其中R₇和R₁₂一起形成一个杂环，

-R₂选自下组：(一或二-)C_1-12烷基氨基；单芳基氨基；二芳基氨基；(一或二-)C_3-10环烷基氨基；(一或二-)羟基C_1-7烷基氨基；(一或二-)C_1-4烷基芳基氨基；(一或二-)芳基C_1-4烷基氨基；吗啉基；巯基C_1-7烷基；C_1-7烷氧基、高哌嗪基和哌嗪基，其中所述高哌嗪基或者哌嗪基可任选地由取代基R₅进行N-取代，R₅选自下组：甲酰基、酰基、硫代酰基、酰胺、硫代酰胺、磺酰基、亚磺酰基、羧基、硫代酰基、氨基-取代的酰基、烷氧基烷基、C_3-10环烷基-烷基、C_3-10环烷基、二烷基氨基烷基、杂环取代的烷基、酰基取代的烷基、硫代酰基取代的烷基、酰氨基取代的烷基、硫代酰氨基取代的烷基、羧基取代的烷基、硫代羧基取代的烷基、(氨基的取代的酰基)烷基、杂环、羧酸酯、ω-氰基烷基、ω-羧酸酯-烷基、卤代C_1-7烷基、C_2-7烯基、C_2-7炔基、芳基烯基、芳氧基烷基、芳基烷基和芳基，其中所述芳基烯基、芳氧基烷基、芳基烷基和芳基中的每一个中的芳基部分可任选地用一个或多的取代基取代，所述取代基独立地选自下组：卤素、C_1-7烷基、C_2-7烯基、C_2-7炔基、卤代C_1-7烷基、硝基、羟基、硫氢基、氨基、C_1-7烷氧基、C_3-10环烷氧基、芳氧基、芳基烷基氧、氧杂环、杂环取代的烷氧基、硫代C_1-7烷基、硫代C_3-10环烷基、硫代芳基、硫代杂环、芳基烷硫基、杂环取代的烷硫基、甲酰基、氨基甲酰基、硫代氨基甲酰基、脲基、硫脲基、磺酰氨基、羟氨基、烷氧基氨基、巯基氨基、硫代烷基氨基、酰基氨基、硫代酰基氨基、氰基、羧酸或其酯或其硫代酯或其卤化物或其酐或其酰胺、硫代羧酸或其酯或其硫代酯或其卤化物或其酐或其酰胺、烷基氨基、环烷基氨基、烯基氨基、环烯基氨基、炔基氨基、芳基氨基、芳基烷基氨基、羟基烷基氨基、巯基烷基氨基、杂环氨基、肼基、烷基肼基和苯基肼基；

R₃和R₄独立地选自下组：氢、卤素、杂芳基和芳基，其中所述杂芳基或芳基可任选地由一个或多个选自下组的取代基取代：卤素、C_1-7烷基、C_2-7烯基、C_2-7炔基、卤代C_1-7烷基、硝基、羟基、硫氢基、氨基、C_1-7烷氧基、C_3-10环烷氧基、芳氧基、芳基烷基氧、氧杂环、杂环取代的烷氧基、硫代C_1-7烷基、硫代C_3-10环烷基、硫代芳基、硫基-杂环、芳基烷硫基、杂环取代的烷硫基、甲酰基、氨基甲酰基、硫代氨甲酰、脲基、硫脲基、磺酰氨基、羟氨基、烷氧基氨基、巯基氨基、硫代烷基氨基、酰基氨基、硫代酰基氨基、氰基、羧酸或其酯或其硫代酯或其卤化物或其酐或其酰胺、硫代羧酸或其酯或其硫代酯或其卤化物或其酐或其酰胺、烷基氨基、环烷基氨基、烯基氨基、环烯基氨基、炔基氨基、芳基氨基、芳基烷基氨基、羟烷基氨基、巯基烷基氨基、杂环氨基、肼基、烷基肼基和苯基肼基，条件是R₃和R₄不皆为氢，且条件是当R₂是单芳基氨基时，R₄是氢。

2.如权利要求1所述的吡啶并(3，2-d)嘧啶衍生物，其特征在于，R₄是氢。

3.如权利要求1所述的吡啶并(3，2-d)嘧啶衍生物，其特征在于，R₁不是氢。

4.如权利要求1所述的吡啶并(3，2-d)嘧啶衍生物，其特征在于，R₁是氨基或乙酰氨基。

5.如权利要求1所述的吡啶并(3，2-d)嘧啶衍生物，其特征在于，R₁是氨基或乙酰氨基，而且R₃是取代的芳基。

6.如权利要求1所述的吡啶并(3，2-d)嘧啶衍生物，其特征在于，R₁是氨基或乙酰氨基，R₃是取代的芳基，R₄是氢。

7.如权利要求1所述的吡啶并(3，2-d)嘧啶衍生物，其特征在于，R₂是哌嗪-1-基，所述基团可任选在4位被取代基R₅取代的，R₅选自下组：

-COR₈，其中R₈选自氢；C_1-7烷基；C_3-10环烷基；任选被选自卤素、C_1-7烷基、氰基和C_1-7烷氧基卤素的一个或多个取代基取代的芳基；任选被一个或多个卤原子取代的杂环；芳烷基；芳氧基烷基；芳基烷氧基烷基；烷氧基烷基；芳基烷氧基；芳氧基；芳基烯基；杂环-取代的烷基；烷基氨基，芳基氨基和烷基芳基氨基；

-CSR₉，其中R₉选自烷基氨基和芳氧基；

-SO₂R₁₀，其中R₁₀选自芳基和芳烷基；和

-R₁₁，其中R₁₁选自下组：C_1-7烷基，芳基，芳烷基，芳基烯基，烷氧基烷基，杂环-取代的烷基，环烷基烷基，杂环，C_3-10环烷基，烷基氨基烷基，芳氧基烷基，烷氧基芳基，ω-氰基烷基，ω-羧酸基烷基和酰氨基烷基。

8.如权利要求1所述的吡啶并(3，2-d)嘧啶衍生物，其特征在于，所述吡啶并(3，2-d)嘧啶衍生物选自下组化合物：

-4-[(2-苯氧基乙基)-哌嗪-1-基]-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶，

-4-(4-[3-甲基苯基]氨基)羰基)哌嗪-1-基)-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶，

-2-甲基-4-(4-[3-甲基苯基]氨基)羰基)哌嗪-1-基)-6-(3，4-二甲氧基-苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶，

-2-二甲基氨基-4-(4-[3-甲基苯基]氨基)羰基)哌嗪-1-基)-6-(3，4-二甲氧基苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶，

-2-[(N-羟基乙基)吗啉基]-4-(4-[3-甲基苯基]氨基)羰基)哌嗪-1-基)-6-(3，4-二甲氧基苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶，

-2-(1-甲基-2-吡咯烷基-乙氧基)-4-(4-[3-甲基苯基]氨基)羰基)哌嗪-1-基)-6-(3，4-二甲氧基苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶，

-2-(2-苯氧基乙氧基)-4-(4-[3-甲基苯基]氨基)羰基)哌嗪-1-基)-6-(3，4-二甲氧基苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶，

-2-苯基-4-(4-[3-甲基苯基]氨基)羰基)哌嗪-1-基)-6-(3，4-二甲氧基-苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶，

-2-氨基-4-吗啉基-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶，

-2-氨基-4-异丙氧基-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶，

-2-氨基-4-苯氧基乙氧基-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶，

2-氨基-4-(4-[3-甲基苯基]氨基)羰基)哌嗪-1-基)-6-(3，4-二甲氧基-苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶，

-2-氨基-4-[(4-羧酸乙基酯)-哌嗪-1-基]-6-(3，4-二甲氧基苯基)吡啶并[3，2-d]嘧啶，

-2-氨基-4-(间-甲苯基氨基)-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶，

-2-氨基-4-苯并二氧戊环基氨基-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶，

-2-氨基-4-(间-溴苯基氨基)-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶，

-2-氨基-4-(4-甲基哌嗪-1-基)-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶，

-2-氨基-4-(噻吩-2-基甲基)氨基-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶，

-2-氨基-4-(2-N-吗啉基乙基)氨基-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶，

-2-氨基-4-(2，2-二甲氧基乙基)氨基-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶，

-2-氨基-4-(吡啶-2-基甲基)氨基-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶，

-2-氨基-4-(2-氯-5-甲氧基苯基)氨基-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶，

-2-氨基-4-(4-氨基环己基氨基)-6-(3，4-二甲氧基苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶，

-2-N-吗啉基乙氧基-4-(4-[3-甲基苯基]氨基)羰基)哌嗪-1-基)-6-氯-吡啶并[3，2-d]嘧啶，和

-2-氯-4-(4-[3-甲基苯基]氨基)羰基)哌嗪-1-基)-6-(3，4-二甲氧基-苯基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶。

9.药物组合物，该组合物包含一种或多种药学上可接受的载体和具有下面通式的吡啶并(3，2-d)嘧啶衍生物或其药学上可接受的加成盐或其立体异构体或其N-氧化物或其溶剂合物：

式中：

-R₁选自下组：氢、卤素、氰基、羧酸、酰基、硫代酰基、烷氧羰基、酰氧基、碳酸酯基、氨基甲酸酯、C_1-7烷基、芳基、氨基、乙酰氨基、N-保护的氨基、(一或二-)C_1-7烷基氨基、(一或二-)芳基氨基、(一或二-)C_3-10环烷基氨基、(一或二-)羟基C_1-7烷基氨基、(一或二-)C_1-4烷基芳基氨基、巯基C_1-7烷基、C_1-7烷基氧、和式R₆-NR₇R₁₂的基团，其中R₆是化学键或者C_1-3亚烷基，其中R₇和R₁₂独立地选自下组：氢、C_1-7烷基、C_2-7烯基、C_2-7炔基、芳基、芳基烷基、C_3-10环烷基和杂芳基，或R₇和R₁₂一起形成一个杂环，

-R₂选自下组：(一或二-)C_1-12烷基氨基；单芳基氨基；二芳基氨基；(一或二-)C_3-10环烷基氨基；(一或二-)羟基C_1-7烷基氨基；(一或二-)C_1-4烷基芳基氨基；(一或二-)芳基C_1-4烷基氨基；吗啉基；巯基C_1-7烷基；C_1-7烷氧基、高哌嗪基和哌嗪基，其中所述高哌嗪基或者哌嗪基可任选被取代基R₅发生N-取代，R₅选自下组：甲酰基、酰基、硫代酰基、酰胺、硫代酰胺、磺酰基、亚磺酰基、羧基、硫代羧基、氨基-取代的酰基、烷氧基烷基、C_3-10环烷基-烷基、C_3-10环烷基、二烷基氨基烷基、杂环取代的烷基、酰基取代的烷基、硫代酰基取代的烷基、酰氨基取代的烷基、硫代酰氨基取代的烷基、羧基取代的烷基、硫代羧基取代的烷基、(氨基的取代的酰基)烷基、杂环、羧酸酯、ω-氰基烷基、ω-羧酸酯-烷基、卤代C_1-7烷基、C_2-7烯基、C_2-7炔基、芳基烯基、芳氧基烷基、芳基烷基和芳基，其中所述芳基烯基、芳氧基烷基、芳基烷基和芳基中各自的芳基部分可任选地用一个或多个取代基取代，所述取代基独立地选自下组：卤素、C_1-7烷基、C_2-7烯基、C_2-7炔基、卤代C_1-7烷基、硝基、羟基、硫氢基、氨基、C_1-7烷氧基、C_3-10环烷氧基、芳氧基、芳基烷基氧、氧杂环、杂环取代的烷氧基、硫代C_1-7烷基、硫代C_3-10环烷基、硫代芳基、硫代杂环、芳基烷硫基、杂环取代的烷硫基、甲酰基、氨基甲酰基、硫代氨基甲酰基、脲基、硫脲基、磺酰氨基、羟氨基、烷氧基氨基、巯基氨基、硫代烷基氨基、酰基氨基、硫代酰基氨基、氰基、羧酸或其酯或其硫代酯或其卤化物或其酐或其酰胺、硫代羧酸或其酯或其硫代酯或其卤化物或其酐或其酰胺、烷基氨基、环烷基氨基、烯基氨基、环烯基氨基、炔基氨基、芳基氨基、芳基烷基氨基、羟基烷基氨基、巯基烷基氨基、杂环氨基、肼基、烷基肼基和苯基肼基；

-R₃和R₄独立地选自下组：氢、卤素、杂芳基和芳基，其中所述杂芳基或芳基可任选地被一个或多个选自下组的取代基取代：卤素、C_1-7烷基、C_2-7烯基、C_2-7炔基、卤代C_1-7烷基、硝基、羟基、硫氢基、氨基、C_1-7烷氧基、C_3-10环烷氧基、芳氧基、芳基烷基氧、氧杂环、杂环取代的烷氧基、硫代C_1-7烷基、硫代C_3-10环烷基、硫代芳基、硫基-杂环、芳基烷硫基、杂环取代的烷硫基、甲酰基、氨基甲酰基、硫代氨甲酰、脲基、硫脲基、磺酰氨基、羟氨基、烷氧基氨基、巯基氨基、硫代烷基氨基、酰基氨基、硫代酰基氨基、氰基、羧酸或其酯或其硫代酯或其卤化物或其酐或其酰胺、硫代羧酸或其酯或其硫代酯或其卤化物或其酐或其酰胺、烷基氨基、环烷基氨基、烯基氨基、环烯基氨基、炔基氨基、芳基氨基、芳基烷基氨基、羟烷基氨基、巯基烷基氨基、杂环氨基、肼基、烷基肼基和苯基肼基，条件是R₃和R₄不皆为氢，且条件是当R₂是单芳基氨基时，R₄是氢。

10.如权利要求9所述的药物组合物，该组合物还包含一种或多种选自下组的生物活性药物：免疫抑制剂和/或免疫调节剂药物、抗肿瘤药物、磷酸二脂酶-4抑制剂和抗病毒药剂。

11.一种治疗患者由磷酸二脂酶-4活性介导的疾病的方法，该方法包括给予有效量的，优选抑制磷酸二脂酶-4量的吡啶并(3，2-d)嘧啶衍生物。

12.如权利要求11所述的治疗方法，其特征在于，所述吡啶并(3，2-d)嘧啶衍生物具有以下通式，或者是其药学上可接受的加成盐或其立体异构体或其N-氧化物或其溶剂合物：

式中：

-R₁选自下组：氢、卤素、氰基、羧酸、酰基、硫代酰基、烷氧羰基、酰氧基、碳酸酯基、氨基甲酸酯、C_1-7烷基、芳基、氨基、乙酰氨基、N-保护的氨基、(一或二-)C_1-7烷基氨基、(一或二-)芳基氨基、(一或二-)C_3-10环烷基氨基、(一或二-)羟基C_1-7烷基氨基、(一或二-)C_1-4烷基芳基氨基、巯基C_1-7烷基、C_1-7烷基氧、和式R₆-NR₇R₁₂的基团，其中R₆是化学键或者C_1-3亚烷基，其中R₇和R₁₂独立地选自下组：氢、C_1-7烷基、C_2-7烯基、C_2-7炔基、芳基、芳基烷基、C_3-10环烷基和杂芳基，或R₇和R₁₂一起形成一个杂环，

-R₂选自下组：(一或二-)C_1-12烷基氨基；单芳基氨基；二芳基氨基；(一或二-)C_3-10环烷基氨基；(一或二-)羟基C_1-7烷基氨基；(一或二-)C_1-4烷基芳基氨基；(一或二-)芳基C_1-4烷基氨基；吗啉基；巯基C_1-7烷基；C_1-7烷氧基、高哌嗪基和哌嗪基，其中所述高哌嗪基或者哌嗪基可任选被取代基R₅发生N-取代，R₅选自下组：甲酰基、酰基、硫代酰基、酰胺、硫代酰胺、磺酰基、亚磺酰基、羧基、硫代羧基、氨基-取代的酰基、烷氧基烷基、C_3-10环烷基-烷基、C_3-10环烷基、二烷基氨基烷基、杂环取代的烷基、酰基取代的烷基、硫代酰基取代的烷基、酰氨基取代的烷基、硫代酰氨基取代的烷基、羧基取代的烷基、硫代羧基取代的烷基、(氨基的取代的酰基)烷基、杂环、羧酸酯、ω-氰基烷基、ω-羧酸酯-烷基、卤代C_1-7烷基、C_2-7烯基、C_2-7炔基、芳基烯基、芳氧基烷基、芳基烷基和芳基，其中所述芳基烯基、芳氧基烷基、芳基烷基和芳基中各自的芳基部分可任选地用一个或多个取代基取代，所述取代基独立地选自下组：卤素、C_1-7烷基、C_2-7烯基、C_2-7炔基、卤代C_1-7烷基、硝基、羟基、硫氢基、氨基、C_1-7烷氧基、C_3-10环烷氧基、芳氧基、芳基烷基氧、氧杂环、杂环取代的烷氧基、硫代C_1-7烷基、硫代C_3-10环烷基、硫代芳基、硫代杂环、芳基烷硫基、杂环取代的烷硫基、甲酰基、氨基甲酰基、硫代氨基甲酰基、脲基、硫脲基、磺酰氨基、羟氨基、烷氧基氨基、巯基氨基、硫代烷基氨基、酰基氨基、硫代酰基氨基、氰基、羧酸或其酯或其硫代酯或其卤化物或其酐或其酰胺、硫代羧酸或其酯或其硫代酯或其卤化物或其酐或其酰胺、烷基氨基、环烷基氨基、烯基氨基、环烯基氨基、炔基氨基、芳基氨基、芳基烷基氨基、羟基烷基氨基、巯基烷基氨基、杂环氨基、肼基、烷基肼基和苯基肼基；

-R₃和R₄独立地选自下组：氢、卤素、杂芳基和芳基，其中所述杂芳基或芳基可任选地被一个或多个选自下组的取代基取代：卤素、C_1-7烷基、C_2-7烯基、C_2-7炔基、卤代C_1-7烷基、硝基、羟基、硫氢基、氨基、C_1-7烷氧基、C_3-10环烷氧基、芳氧基、芳基烷基氧、氧杂环、杂环取代的烷氧基、硫代C_1-7烷基、硫代C_3-10环烷基、硫代芳基、硫基-杂环、芳基烷硫基、杂环取代的烷硫基、甲酰基、氨基甲酰基、硫代氨甲酰、脲基、硫脲基、磺酰氨基、羟氨基、烷氧基氨基、巯基氨基、硫代烷基氨基、酰基氨基、硫代酰基氨基、氰基、羧酸或其酯或其硫代酯或其卤化物或其酐或其酰胺、硫代羧酸或其酯或其硫代酯或其卤化物或其酐或其酰胺、烷基氨基、环烷基氨基、烯基氨基、环烯基氨基、炔基氨基、芳基氨基、芳基烷基氨基、羟烷基氨基、巯基烷基氨基、杂环氨基、肼基、烷基肼基和苯基肼基，条件是R₃和R₄不皆为氢。

13.如权利要求11所述的治疗方法，其特征在于，所述疾病是勃起机能障碍。

14.如权利要求11所述的治疗方法，其特征在于，所述给药是经输尿管给药。

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