CN101351458A

CN101351458A - 作为促淀粉样变蛋白成像剂的同位素标记的苯并噻唑化合物

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Publication number: CN101351458A
Application number: CNA2006800502158A
Authority: CN
Inventors: 威廉·E·克伦克; 小切斯特·A·马西斯
Original assignee: University of Pittsburgh
Current assignee: University of Pittsburgh
Priority date: 2005-12-01
Filing date: 2006-11-30
Publication date: 2009-01-21
Also published as: CA2631905A1; NO20082837L; BRPI0619251A2; EP1971584A2; JP2009519239A; WO2007064773A3; US20090142269A1; AU2006320556A1; RU2008126463A; AU2006320556A8; WO2007064773A2

Abstract

本发明提供了分离的利奈唑胺(linezolid)杂质去氟利奈唑胺、其制备方法及其作为参比标准物的用途。

Description

作为促淀粉样变蛋白成像剂的同位素标记的苯并噻唑化合物

技术领域

本发明一般而言涉及同位素标记的苯并噻唑化合物领域，所述苯并噻唑化合物是促淀粉样变蛋白(amyloidogenic protein)的底物，所述促淀粉样变蛋白例如Aβ1-42(一种淀粉样蛋白)，其在脑中的沉积物与阿尔茨海默病相关。

背景技术

I.脑淀粉样变性

阿尔茨海默病(“AD”)是一种以记忆力丧失和其它认知缺陷为特征的神经变性疾病(McKhann等，Neurology 34：939(1984))。它在美国是痴呆的最常见原因。AD可侵袭年轻至40-50岁年龄的人，然而，由于不通过危险的脑组织活检就难以确定此疾病的存在，因此发作时间未知。AD的流行性随年龄而增加，估计至85-90岁受影响的人群高达40-50％(Evans等，JAMA 262：2551(1989)；Katzman，Neurology 43：13(1993))。

研究表明脑中的淀粉样蛋白沉积是阿尔茨海默病(AD)的发病机理中早期的致病事件。淀粉样蛋白沉积的发展导致在脑中涉及学习和记忆的区域形成神经炎斑和神经原纤维缠结。典型的阿尔茨海默病神经炎斑包括围绕淀粉样物质核心的营养不良神经突。淀粉样物质核心的主要成分是称为β-淀粉样蛋白(amyloid-beta，Aβ)的蛋白。

实际上，AD是通过检查脑组织(通常是尸检)才被确诊的(Khachaturian，Arch.Neurol.42：1097(1985)；McKhann等，Neurology34：939(1984))。在神经病理学上，该疾病是以神经炎斑(NP)、神经原纤维缠结(NFT)和神经元缺失并伴有多种其它发现的存在为特征的(Mann，Mech.Ageing Dev.31：213(1985))。阿尔茨海默病死亡者的脑组织尸检切片显示出淀粉样蛋白以神经炎斑的蛋白样细胞外核心的形式存在，这是AD所特有的。

这些神经炎斑的淀粉样蛋白核心包含称为β-淀粉样蛋白(Aβ)的蛋白，所述β-淀粉样蛋白以主要为β-折叠片的构型排布(Mori等，J.Biol.Chem.267：17082(1992)；Kirschner等，PNAS 83：503(1986))。神经炎斑是此疾病早期和不变的方面(Mann等，J.Neurol. Sci.89：169；Mann，Mech Ageing Dev.31：213(1985)；Terry等，J.Neuropathol Exp.Neurol 46：262(1987))。

Aβ的最初沉积可能在临床症状变得明显之前很久就出现了。目前推荐的用于诊断AD的“最小显微标准”基于在脑中发现的神经炎斑的数目(Khachaturian，Arch.Neurol，supra(1985))。然而，对于神经炎斑计数的评价必须推迟到死后。

含有淀粉样蛋白的神经炎斑是AD和唐氏综合征以及载脂蛋白E4等位基因纯合的人(其极易得AD)在脑的选择性区域的显著特征(Corder等，Science 261：921(1993)；Divry，P.，J Neurol.Psych.27：643-657(1927)；Wisniewski等，in Zimmerman，H.M.(编)：PROGRESS INNEUROPATHOLOGY(Grune和Stratton，N.Y.1973)第1-26页)。

通过使用硫黄素S或刚果红将脑切片染色很容易显示脑淀粉样蛋白(Puchtler等，J.Histochem.Cytochem.10：35(1962))。刚果红染色的淀粉样蛋白的特征在于二向色性的外观，表现为黄-绿偏光色。所述二向色性结合是淀粉样蛋白β折叠片状结构的结果(Glenner，G.N.Eng.J.Med.302：1283(1980))。关于淀粉样蛋白的生物化学和组织化学的详细讨论可见于Glenner，N. Eng.J.Med.，302：1333(1980)。

迄今为止，对于AD的诊断大多通过临床标准评价、脑组织活检和死后尸检研究而获得。开发用于体内诊断阿尔茨海默病的方法的研究努力包括(1)基因检测，(2)免疫测定方法，和(3)成像技术。

Aβ代谢异常对于AD的发展而言必需且足够的证据是基于在几个常染色体显性形式AD的罕见家族中Aβ前体蛋白的点突变的发现(Hardy，Nature Genetics 1：233(1992)；Hardy等，Science 256：184(1992))。这些突变在N末端和C末端切割点附近发生，所述切割点对于Aβ由其前体蛋白生成来说是必需的(St.George-Hyslop等，Science 235：885(1987)；Kang等，Nature 325：733(1987)；Potter WO 92/17152)。然而，对大量AD家族的基因分析已经证实了AD在遗传上是异质的(St.George-Hyslop等，Nature 347：194(1990))。与21号染色体标记的连锁仅在具有早发型AD的一些家族中显示出来，而在具有晚发型AD的家族中未显示。更近些时候，在14号染色体上的基因(预计其产物包含多个跨膜域并组装完整的膜蛋白)已由Sherrington等鉴别出来(Sherrington等，Nature 375：754-760(1995))。该基因可导致最多70％的常染色体显性的早发型AD。初步数据表明此14号染色体突变导致Aβ产生的增加(Scheuner等，Soc.Neurosci.Abstr.21：1500(1995))。在具有早发型AD的Volga German家族中，已经在1号染色体上鉴定了非常相似的基因的突变(Levy-Lahad等，Science 269：973-977(1995))。

对于载脂蛋白E基因型的筛选已表明其可在AD的诊断中作为辅助手段(Scott，Nature 366：502(1993)；Roses，Ann.Neurol.38：6-14(1995))。然而，此项技术出现了困难，因为载脂蛋白E4等位基因仅仅是AD的一个风险因子，而不是疾病标记物。其在很多AD患者中缺失，并且在很多不痴呆的老年人中存在(Bird，Ann.Neurol.38：2-4(1995))。

已经开发了用于检测AD患者中神经化学标记物存在的免疫测定方法，并用于检测脑脊液中与AD相关的淀粉样蛋白(Warner，Anal.Chem.59：1203A(1987)；Potter的国际专利申请公开92/17152；Glenner等的美国专利4,666,829)。这些诊断AD的方法还未被证明可检测所有患者中的AD(尤其是在该疾病的早期阶段)，并且是相对侵入性的，需要脊椎穿刺。而且，还进行了开发作为用于Aβ成像探针的单克隆抗体的尝试(Majocha等，J.Nucl Med.，33：2184(1992)；Majocha等，WO89/06242；以及Majocha等，美国专利5,231,000)。抗体探针的主要缺点是难于使这些大分子穿过血脑屏障。使用抗体进行AD的体内诊断，将需要血脑屏障方面的显著异常以进入脑内。关于在AD中可靠地存在血脑屏障方面的异常这一点，还没有令人信服的起作用的证据(Kalaria，Cerebrovascular&Brain Metabolism Reviews 4：226(1992))。

放射性标记的Aβ肽已被用于标记AD脑切片中扩散型、紧密型和神经炎型的斑块(参见Maggio等，WO 93/04194)。然而，这些肽同样具有抗体的所有缺点。具体地说，肽类通常不是以成像所必需的量穿过血脑屏障，因为这些探针与扩散性斑块反应，它们对于AD而言可能并非是特异性的。

神经炎斑和神经纤维缠结是AD的两个最有特征性的病理学标志(Klunk和Abraham，Psychiatric Development，6：121-152(1988))。斑块最早在新皮质中出现，在那里它们相对均匀地分布(Thai等，Neurology58：1791-1800(2002))。神经纤维缠结最先出现在边缘区域(比如跨内嗅区皮质(transentorhinal cortex))并以可预见的局部解剖模式向新皮质发展(Braak和Braak，Acta Neuropathologica 82：239-259(1991))。Arnold等描绘了AD患者脑中的NFT和神经炎斑的分布(Arnold等，Cereb.Cortex 1：103-116(1991))。与NFT相比，神经炎斑一般来说更均匀地分布于皮质各处，只是在边缘的圆周异型皮质(periallocortex)和异型皮质(NFT密度最高的区域)内神经炎斑显著较少。通过硫黄素S染色，颞叶和枕叶具有最高的神经炎斑密度，边缘叶和额叶具有最低的神经炎斑密度，顶叶具有中间的神经炎斑密度(Arriagada等，Neurology42：1681-1688(1992))。Arriagada等研究了假定不痴呆的老年个体脑中AD型病理变化的局部分布。他们的研究表明，大多数年龄超过55岁的个体具有至少几个NFT和斑块。免疫组织化学限定的SP亚型具有与众不同的Aβ-免疫反应性斑块分布模式，所述Aβ-免疫活性斑块在新皮质区的存在比边缘区多得多，Alz-50免疫反应性斑块很少发生并限制在包含Alz-50阳性神经元和NFT的区域内。这些模式表明在老化和AD中导致NFT和SP的病理过程的共同性.

关于斑块和缠结是否为发现于AD中的神经变性过程的副产物或者它们是否为神经元细胞死亡的原因还存在争论(Ross，Current Opinionin Neurobiol.96：644-650(1996)；Terry，J of Neuropath.& Exp.Neurol.55：1023-1025(1996)；Terry，J Neural Transmission-Suppl.53：141-145(1998))。有证据清楚表明，新皮质和海马突触的缺失与发病前的认知状况密切相关。一些研究者提出由微管相关蛋白τ的过度磷酸化引起的微管结构和功能的紊乱特别是在突触缺失，一般是在AD中起关键的病因学作用(Terry，J.of Neuropath.& Exp.Neurol.55：1023-1025(1996)；Terry，J of Neural Transmission-Suppl.53：141-145(1998))。已经提出氧化损伤和膜破坏在AD中发挥重要作用(Perry，Free Radical Biology&Medicine28：831-834(2000)；Pettegrew等，Annals of the New York Academy ofSciences 826：282-306(1997))。血管因素(包括敏感的、长期的脑灌注不足)也与AD的发病机制相关(De la Torre，Annals of the New YorkAcademy of Sciences 903：424-436(2000)；Di Iorio等，Aging(Milano)11：345-352(1999))。尽管全部这些因素均可能在AD的发病机制中起到一些作用，但越来越多的证据指向β-淀粉样蛋白(Aβ)肽的过程，所述β-淀粉样蛋白肽是一种聚集成原纤维状的β折叠片状结构的4 kD肽(Glenner和Wong，Biochemical&Biophysical Research Communications120：885-890(1984))。已经提出由于以下几个原因Aβ在AD的发病机制中发挥重要作用：1)Aβ沉积物是唐氏综合征中AD的最早的神经病理标记，可比NFT形成早几十年(Mann等，Neurodegeneration 1：201-215(1992)；Naslund等，JAMA 283：1571-1577(2000))；2)β-淀粉样变对于AD和密切相关的疾病而言是相对特异性的(Selkoe，Trends in Neurosciences16：403-409(1993))；3)Aβ对培养的神经元而言是有毒的(YanknerNeurobiol. Aging 13：615-616(1992)；Mattson等，J.Neuroscience12：376-389(1992)；Shearman等，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 91：1470-1474(1994))，这种毒性似乎依赖于β-折叠二级结构和向至少是低聚体的聚集(Lambert等Proc.Natl.Acad.Sci.USA 95：6448-6453(1989)；Pike等，J.Neuroscience 13：1676-1687(1993)；Simmons等，Molecular Pharmacology45：373-379(1994))。虽然Aβ确定以单体、低聚体和纤维状/斑块部分平衡分布而存在，但Aβ的低聚体形式被强烈地表示为关键的神经毒性成分(Selkoe，Alzheimer disease，R.D.Terry等编，293-310页，LippincottWilliams and Wilkins，Philadelphia(1999)；Selkoe，Science 298，789-91(2002))。对低聚体Aβ的毒性作用的识别已形成了对AD“淀粉样蛋白级联假说”的几种对立学说折衷的基础(Terry，Ann.Neurol.49：684(2001))。也许Aβ在AD发病机制中的作用的最强有力的证据来自淀粉样蛋白前体蛋白(APP)基因突变的发现，所述基因导致一些形式的早发型家族AD(Goate等，Nature 349：704-706(1991))。另外，所有家族形式的常染色体显性的AD均具有升高水平的更迅速聚集的Aβ的42个氨基酸形式(Younkin Rinsho Shinkeigaku-Clinical Neurology 37：1099(1997))。相比之下，未显示τ蛋白的突变引起AD。相反，τ突变(染色体17)与伴有帕金森病的额颞叶痴呆症相关联(Goedert等，Neuron21：955-958(1998))。最近的证据已经表明，脑中Aβ水平与AD中认知下降之间有良好的相关性，并且淀粉样蛋白的沉积似乎在AD的发病机制中是非常早期的、也许是最先的事件，其早于任何认知损伤(Naslund等，JAMA 283：1571-1577(2000))。淀粉样蛋白沉积物的存在可调节多种生物化学途径，所述生物化学途径导致其它蛋白的沉积、星形胶质细胞和小胶质细胞的活化、以及最终的神经元细胞死亡和随后的认知功能紊乱。

II.局限性和全身性的淀粉样变

淀粉样变是一种缓慢发展的病况，其可导致明显的病态和死亡。多种疾病过程落入“淀粉样变”类目的范围内，其特征在于多种不溶性纤维状蛋白(通常称为“淀粉样蛋白”)以足以损伤正常功能的量在一个或更多个器官中的细胞外组织沉积。

淀粉样蛋白沉积物位于细胞外并且不被机体所代谢或清除。淀粉样蛋白可通过与碘的淀粉样染色反应而大体辨别；因此命名为淀粉样蛋白。显微镜下，淀粉样蛋白通过其细胞外分布、通过其在使用刚果红染色时的着色光学性质、以及通过其蛋白原纤维结构而区分。因此，在光学显微镜下，淀粉样蛋白是一种均质的、高度折光性的物质，其对刚果红染料具有亲和力，无论是在固定组织中还是在体内。在电子显微镜下，淀粉样蛋白由100A°(10 nm)的线型非支化的原纤维组成；在x射线衍射下，其具有交叉的β图谱。

与淀粉样变相关的疾病均以积聚的淀粉样蛋白沉积物为特征。淀粉样蛋白沉积物的特征在于存在一种或更多种促淀粉样变蛋白，所述促淀粉样变蛋白源自具有异常结构或在血清中异常增加的前体蛋白。

淀粉样蛋白形成的原因及其在组织中的沉积是未知的。在不同生物化学类型的淀粉样变中，病因机理可能不同。例如，在继发性淀粉样变中，可能存在前体蛋白(急性期反应物：血清淀粉样蛋白A)的代谢缺陷，然而，在遗传性淀粉样变中似乎存在遗传性变体蛋白。在原发性淀粉样变中，骨髓细胞的单克隆群产生完整轻链的片段，所述轻链片段可以被异常处理而形成淀粉样蛋白。

已经在生物化学方面定义了三种主要类型的淀粉样蛋白和几种较不常见的形式。第一种类型具有和免疫球蛋白轻链可变区部分同源的N末端序列，被称为AL，产生于原发性淀粉样变和与多发性骨髓瘤相关的淀粉样变中。第二种类型具有称为AA蛋白的非免疫球蛋白的独特的N末端序列，产生于继发性淀粉样变的患者中。第三种类型与家族性淀粉样多神经病相关，通常为具有单个氨基酸替换的转甲状腺素蛋白(transthyretin)(前白蛋白)分子。已经发现其它的遗传性淀粉样蛋白是由某些家族的突变体凝溶胶蛋白、几种其它家族的突变体载脂蛋白A-I、和其它遗传性脑动脉淀粉样蛋白的突变体蛋白构成的。在与长期血液透析相关的淀粉样蛋白中，2-微球蛋白已构成了淀粉样蛋白。与皮肤老化和内分泌器官相关的淀粉样蛋白可能代表其它生物化学类型的淀粉样变。发现于阿尔茨海默病的组织病理学损伤中的淀粉样蛋白由蛋白质构成。与各种类型的淀粉样变相关的化学分析已带来了更细化的分类。一种独特的蛋白——称为AP(或血清AP)的五聚素(pentraxin)——普遍与所有类型的淀粉样蛋白相关，并形成诊断检测的基础。

目前公认三种主要的全身性临床类型。淀粉样变被分类为原发性或自发性的(AL型)(当没有相关疾病时)，和继发性、获得性或反应性的(AA型)(当与慢性疾病或传染性疾病(结核病、支气管扩张、骨髓炎、麻风)或炎性疾病(类风湿性关节炎、肉芽肿性回肠炎)相关时)。淀粉样蛋白还与多发性骨髓瘤(AL)、霍奇金病(AA)、其它肿瘤、以及家族性地中海热(AA)相关。淀粉样变可伴有老化。第三种主要类型出现于不与其它疾病相关的家族性类型中，常常具有神经病、肾病和心脏病的与众不同的类型。

在原发性(AL)淀粉样变中，可能涉及心、肺、皮肤、舌、甲状腺和肠道。局限性的淀粉样蛋白“肿瘤”可能见于呼吸道和其它部位。常常涉及实质器官(肝、脾、肾)和血管系统，特别是心脏。

继发性(AA)淀粉样变显示出特别容易在脾、肝、肾、肾上腺和淋巴结发生。然而，没有器官系统不受影响，可广泛累及血管，虽然临床上对心脏的显著累及并不常见。肝和脾常常扩大、变硬和如橡胶状。肾通常扩大。脾的部分具有大的、半透明的蜡状区域，其中正常的马尔皮基氏体被灰白的淀粉样蛋白所取代，形成了西米脾。

遗传性淀粉样变的特征在于外周感觉和运动神经病(常为自主性神经病)、以及心血管和肾的淀粉样蛋白。腕管综合征和玻璃体异常可能发生。

与某些恶性肿瘤(例如多发性骨髓瘤)相关的淀粉样蛋白具有与自发性(AL)淀粉样蛋白相同的分布；与其它恶性肿瘤(例如甲状腺髓样癌)相关的淀粉样蛋白则可能仅在与所述肿瘤或转移相关的局部发生。淀粉样蛋白常常见于患有成人发作型糖尿病的个体的胰腺中。

虽然可以基于特定的临床症状和体征怀疑淀粉样变的发生，但仅可通过活组织检查对其确诊。目前，腹部皮下脂肪垫穿刺抽吸和直肠粘膜的活组织检查是最好的筛查办法。其它可用的活组织检查部位是齿龈、皮肤、神经、肾和肝。组织切片应该使用刚果红染料染色并通过偏光显微镜观察淀粉样蛋白所特有的绿色双折射。同位素标记的血清AP已被用于闪烁扫描试验以对淀粉样变进行确诊。需要开发更好的诊断方法以提供早期诊断，由此使有效治疗成为可能。

在抑制淀粉样蛋白沉积物和糖尿病治疗之间的关联方面存在一些思考，参见例如WO 02/16333。对于明确测量胰腺中淀粉样蛋白的水平而言，用于诊断糖尿病的胰腺成像是一种合适的方法，其相关性似乎指示糖尿病的诊断。

III.替代指标(surrogate marker)

AD被认为影响着约4百万美国人和可能全世界2-3千万的人。AD在发达国家被公认为一个主要的公共健康问题。随着正在进行中的对AD分子基础的阐明，已经发现了几个治疗靶点。例如，已经批准了4种胆碱酯酶抑制剂用于AD患者的全身性治疗-他克林(Cognex，Warner-Lambert，Morris Plains，New Jersey)；多奈哌齐(Aricept，Eisai，Inc.，Teaneck，New Jersey，和Pfizer，Inc.，New York，New York)；卡巴拉汀(rivagstigmine)(Exelon，Novartis，Basel，Switzerland)；和加兰他敏(Reniinyl，Janssen，Titusville，New Jersey)。目前正在开发的潜在的新AD治疗剂涉及免疫疗法、分泌酶(secretase)抑制剂或抗炎药。然而，迄今为止，还没有可用的药物已被证实改变认知下降的过程。

通过以下引自Hock等，2003，Neuron，38：547-554的针对使用免疫疗法作为抗淀粉样蛋白疗法的话来举例说明开发抗淀粉样蛋白治疗的主要障碍：“我们不知道在我们研究的患者中的脑Aβ-淀粉样蛋白负荷是否降低；将需要体内成像技术来回答此问题”。在治疗前和随后跟踪治疗效果时量化淀粉样蛋白负荷的能力是有效开发此类药物的关键。

IV.诊断淀粉样变的前驱形式

与阿尔茨海默病(AD)密切相关的病况的特征在于单独的记忆障碍或者数个认知区域的损伤，但未足够严重到符合阿尔茨海默病诊断标准的程度。此病况称为轻度认知障碍(MCI)并可代表AD的前驱期。轻度认知障碍定义为从正常认知状况到痴呆的中间状态或过渡状态。具有轻度认知障碍的患者通常具有超出预期年龄和教育的记忆障碍，但还不是痴呆。

存在一些被诊断为轻度认知障碍的患者将发展成AD的指征。还存在轻度认知障碍可能代表复杂的异常状况(heterogeneous condition)以及一些患有轻度认知障碍的患者将不会发展成AD或其它痴呆性病症的指征。

在区分痴呆与AD的界限方面引起了广泛的注意。大多数的这种注意致力于正常老化和痴呆(或者更具体地说是阿尔茨海默病(AD))的界限或过渡状态。几项研究的综述指出，这些个体发展成AD的风险提高，从每年1％增加到25％。这些比例的变化可能反映出诊断标准、测量仪器和小样本量方面的不同。参见Dawe等，Int′t J.Geriatr.Psychiatry 7：473(1992)。

诊断患有MCI的患者也逐渐受到了治疗试验的关注。阿尔茨海默病合作研究组织是一个对老化进行研究的阿尔茨海默病研究小组的合作团体，其正着手进行旨在改变MCI患者到AD发展进程的治疗剂的多中心试验。参见Grundman等，Neurology，1996，A403。

可能会出现关于MCI诊断标准的问题。一些研究者相信，实际上所有这些患有轻度疾病的患者都在神经病理学上患有AD，因此这可能不是有用的区别。参见Morris等，Neurology 41：469(1991)。其他人指出虽然这些患者中有很多发展成AD，但并非所有都是这样的，因此，这种区分是一个重要的方面。参见Grundman，见上文；Petersen等，JAMA273：1274(1995)；Petersen等，Ann N YAcad.Sci. 802：58(1996)。

V.促淀粉样变蛋白的底物

已推测了促淀粉样变蛋白的可能底物，从染料物质(如刚果红和金黄胺G衍生物(参见例如美国专利6,168,776)到出于使不溶性的Aβ成像目的已被标记的序列特异性肽。这些肽包括标记的Aβ肽本身、腐胺-钆-Aβ肽、放射性标记的Aβ、[¹¹¹In]-Aβ、[¹²⁵I]-Aβ、γ射线放射性标记的Aβ、Aβ-DTPA衍生物、放射性标记的腐胺、基于KVLFF的配体和其衍生物(参见国际公开WO93/04194和美国专利6,331,440)。

硫黄素T是1959年由Vassar和Culling(Arch.Pathol.68：487(1959))首次作为选择性淀粉样蛋白染料描述的碱染料。Schwartz等(Zbl.Path.106：320(1964))于1964年首次证实了硫黄素S(一种酸性染料)作为淀粉样蛋白染料的用途。硫黄素T和硫黄素S的性质均被详细研究过(Kelenyi J.Histochem.Cytochem.15：172(1967)；Burns等J.Path.Bact.94：337(1967)；Guntern等Experientia 48：8(1992)；LeVine Meth.Enzymol.309：274(1999))。硫黄素S普遍用于AD脑中淀粉样蛋白沉积的死后检查研究，其已表明是用于证实老年斑块的最灵敏的技术之一(Vallet等，Acta Neuropathol.83：170(1992))。硫黄素T常被用作研究可溶性淀粉样蛋白进入β片原纤维的聚集的试剂(LeVine Prot.Sci.2：404(1993))。已提出与硫黄素T相关的季铵衍生物用作淀粉样蛋白成像剂，但还没提出这些试剂被脑摄取的证据(Caprathe等，美国专利6,001,331)。

因此，需要同位素标记的苯并噻唑类物质，其能够穿透血脑屏障并与用于在诊断阿尔茨海默病中成像的不溶性淀粉样蛋白沉积物相结合。

发明内容

本发明通过在一个实施方案中提供结合淀粉样蛋白的式(I)化合物或其可药用盐而满足此需要和其它需要：

在式(I)中，Y是H、NO₂、-NR’₃ ⁺、F、Cl、Br、I或-(CR’₂)_n-X，其中X是F、Cl、Br或I。变量n是选自1～5的整数。

R’是H或低级烷基。

R₃-R₁₀独立地选自H、F、Cl、Br、I、C₁-C₅烷基、(CH₂)_1-3-OR₁₁、CF₃、-(CH₂)_1-3-X、-O-(CH₂)_1-3-X、CN、-CO-R₁₁、-N(R₁₁)₂、-N(R’)₃ ⁺、-NO₂、-CO-N(R₁₁)₂、-O-(CO)-R₁₁、OR₁₁、SR₁₁、COOR₁₁、R_ph、-CR₁₁＝CR₁₁-R_ph和-C(R₁₁)₂-C(R₁₁)₂-R_ph。如上所提及的，X是F、Cl、Br或I。R_ph是任选被选自以下的一个或更多个取代基取代的苯基：F、Cl、Br、I、C₁-C₅烷基、(CH₂)_1-3-OR₁₁、CF₃、-(CH₂)_1-3-X、-O-(CH₂)_1-3-X、CN、-CO-R₁₁、-N(R₁₁)₂、-CO-N(R₁₁)₂、-O-(CO)-R₁₁、OR₁₁、SR₁₁和COOR₁₁，其中每个R₁₁独立地为H或C₁-C₅烷基。

此外，取代基Y或R³-R¹⁰包含至少一种选自以下的可检测标记物：¹³¹I、¹²³I、¹²⁴I、¹²⁵I、⁷⁶Br、⁷⁵Br、¹⁸F、¹⁹F、¹¹C、¹³C、¹⁴C和³H。

在另一个实施方案中，提供了一种药物组合物，其包含有效量的如上所述的结合淀粉样蛋白的式(I)化合物和可药用载体。

另一个实施方案是一种用于体内检测一种或更多种淀粉样蛋白沉积物的方法。所述方法包括：(i)给哺乳动物施用有效量的式(I)的结合淀粉样蛋白的化合物，其中所述化合物会结合所述哺乳动物内的任何一种或更多种淀粉样蛋白沉积物；和(ii)检测该化合物与在所述哺乳动物体内的一种或更多种淀粉样蛋白沉积物的结合。

另一个任选地与本文中所述的任意其它实施方案结合的实施方案是式(I)化合物用于体内检测一种或更多种淀粉样蛋白沉积物的用途。在另一个实施方案中，本发明提供了式(I)化合物在制备用于体内检测一种或更多种淀粉样蛋白沉积物的药物中的用途。

又一个实施方案是一种用于体外检测一种或更多种淀粉样蛋白沉积物的方法。所述方法包括(i)使机体组织接触有效量的式(I)的结合淀粉样蛋白的化合物，其中所述化合物将会结合所述组织内的任何一种或更多种淀粉样蛋白沉积物；和(ii)检测所述化合物与所述组织内的一种或更多种淀粉样蛋白沉积物的结合。

另一个任选地与本文中所述的任意其它实施方案结合的实施方案是式(I)化合物用于体外检测一种或更多种淀粉样蛋白沉积物的用途。在另一个实施方案中，本发明提供了式(I)化合物在制备用于体外检测一种或更多种淀粉样蛋白沉积物的药物中的用途。

另一个实施方案是一种用于区分患有阿尔茨海默病的脑与正常脑的方法。所述方法包括(i)获取来自正常哺乳动物和疑似患有阿尔茨海默病的哺乳动物的(a)小脑和(b)同一脑的另一个区域的组织；

(ii)使所述组织与结合淀粉样蛋白的式(I)化合物接触；

(iii)量化结合至该化合物的淀粉样蛋白；

(iv)计算(a)在脑中除小脑以外的其它区域内淀粉样蛋白的量与(b)小脑中淀粉样蛋白的量的比例；以及

(v)将正常哺乳动物的比例与疑似患有阿尔茨海默病的哺乳动物的比例进行比较。

另一个任选地与本文中所述的任意其它实施方案结合的实施方案是式(I)化合物用于区分患有阿尔茨海默病的脑与正常脑的用途。在另一个实施方案中，本发明提供了式(I)化合物在制备用于区分患有阿尔茨海默病的脑与正常脑的药物中的用途。

另一个实施方案是在人或动物活检或尸检组织中检测淀粉样蛋白沉积物的方法。所述方法包括步骤(a)使用式(I)的结合淀粉样蛋白的化合物或其可药用盐的溶液孵育福尔马林固定的或新鲜冷冻的组织以形成被标记的沉积物，和(b)检测所述被标记的沉积物。

另一个任选地与本文中所述的任意其它实施方案结合的实施方案是式(I)化合物用于在人或动物活检或尸检组织中检测淀粉样蛋白沉积物的用途。在另一个实施方案中，本发明提供了式(I)化合物在制备用于在人或动物活检或尸检组织中检测淀粉样蛋白沉积物的药物中的用途。

在另一个实施方案中，提供了一种在活检或尸检组织中量化淀粉样蛋白的方法。所述方法包括以下步骤：

a)使结合淀粉样蛋白的式(I)化合物或其可药用盐的放射性标记衍生物与活检组织或尸检组织的匀浆一起孵育，其中所述化合物的至少一个取代基被选自¹²⁵I、³H和含碳取代基(其中至少一个碳是¹⁴C)的放射性标记物所标记；

b)将与组织结合的式(I)化合物的放射性标记的衍生物与未与组织结合的式(I)化合物的放射性标记的衍生物分离，

c)量化与组织结合的式(I)化合物的放射性标记的衍生物，以及

d)通过与标准物比较，将与组织结合的式(I)化合物的放射性标记的衍生物的单位转换为每100 mg组织中淀粉样蛋白的微克数的单位。

另一个任选地与本文中所述的任意其它实施方案结合的实施方案是式(I)化合物在活检或尸检组织中量化淀粉样蛋白的用途。在另一个实施方案中，本发明提供了式(I)化合物在制备用于在活检或尸检组织中量化淀粉样蛋白的药物中的用途。

在另一个实施方案中，提供了一种使结合淀粉样蛋白的式(I)化合物或其可药用盐与脑组织中的淀粉样蛋白斑块选择性结合但不与脑组织中的神经原纤维缠结(所述脑组织中包含此二者)结合的方法。所述方法包括在体外结合或染色试验中使淀粉样蛋白斑块与低于约10nM的浓度的式(I)化合物接触。

另一个任选地与本文中所述的任意其它实施方案结合的实施方案是式(I)化合物用于使所述化合物与脑组织中的淀粉样蛋白斑块选择性结合但不与脑组织中的神经原纤维缠结(所述脑组织中包含此二者)结合的用途。在另一个实施方案中，本发明提供了式(I)化合物在制备用于使所述化合物与脑组织中的淀粉样蛋白斑块选择性结合但不与脑组织中的神经原纤维缠结(所述脑组织中包含此二者)结合的药物中的用途。

在另一个实施方案中，提供了一种使结合淀粉样蛋白的式(I)化合物或其可药用盐在体内与脑组织中的淀粉样蛋白斑块选择性结合但不与脑组织中的神经原纤维缠结(所述脑组织中包含此二者)结合的方法。所述方法包括施用有效量的式(I)化合物或其可药用盐，从而使在体内所施用化合物的血液浓度保持低于约10nM。

另一个任选地与本文中所述的任意其它实施方案结合的实施方案是式(I)化合物用于使所述化合物在体内与脑组织中的淀粉样蛋白斑块选择性结合但不与脑组织中的神经原纤维缠结(所述脑组织中包含此二者)结合的用途。在另一个实施方案中，本发明提供了式(I)化合物在制备用于使所述化合物在体内与脑组织中的淀粉样蛋白斑块选择性结合但不与脑组织中的神经原纤维缠结(所述脑组织中包含此二者)结合的药物中的用途。

另一个实施方案是用于检测对象中至少一种淀粉样蛋白沉积物的体内或体外方法，所述淀粉样蛋白沉积物包含至少一种促淀粉样变蛋白。所述方法包括以下步骤：

(a)给患有与淀粉样变相关的疾病的患者施用可检测量的药物组合物，所述药物组合物包含至少一种结合淀粉样蛋白的式(I)化合物或其可药用盐以及可药用载体，以及

(b)检测所述化合物与包含至少一种促淀粉样变蛋白的淀粉样蛋白沉积物的结合。

另一个任选地与本文中所述的任意其它实施方案结合的实施方案是式(I)化合物用于检测对象中至少一种淀粉样蛋白沉积物的用途，所述淀粉样蛋白沉积物包含至少一种促淀粉样变蛋白。在另一个实施方案中，本发明提供了式(I)化合物在制备用于检测对象中至少一种淀粉样蛋白沉积物的药物中的用途，所述淀粉样蛋白沉积物包含至少一种促淀粉样变蛋白。

在另一个实施方案中，提供了一种鉴别患者处于与淀粉样蛋白沉积相关疾病的前驱期的方法，包括：

(a)给表现有临床痴呆征兆或轻度认知障碍临床征兆的患者施用结合淀粉样蛋白的式(I)化合物或其可药用盐；然后

(b)对所述患者成像以获取数据，以及

(c)参考标准化水平，分析所述数据以确定所述患者体内的淀粉样蛋白水平，从而鉴别所述患者处于与淀粉样蛋白沉积相关疾病的前驱期。

另一个任选地与本文中所述的任意其它实施方案结合的实施方案是式(I)化合物用于鉴别患者处于与淀粉样蛋白沉积相关疾病的前驱期的用途。在另一个实施方案中，本发明提供了式(I)化合物在制备用于鉴别患者处于与淀粉样蛋白沉积相关疾病的前驱期的药物中的用途。

在另一个实施方案中，提供了一种确定淀粉样变治疗疗效的方法。所述方法包括：

(a)给有此需要的患者施用有效量的结合淀粉样蛋白的式(I)化合物或其可药用盐；

(b)对所述患者成像；然后

(c)给所述有此需要的患者施用至少一种抗淀粉样蛋白剂；

(d)随后给所述有此需要的患者施用有效量的式(I)化合物；

(e)对所述患者成像；以及

(f)将采用所述至少一种抗淀粉样蛋白剂治疗前所述患者中淀粉样蛋白沉积的水平与采用所述至少一种抗淀粉样蛋白剂治疗后所述患者中淀粉样蛋白沉积的水平进行比较。

另一个任选地与本文中所述的任意其它实施方案结合的实施方案是式(I)化合物用于确定在淀粉样变治疗中的疗效的用途。在另一个实施方案中，本发明提供了式(I)化合物在制备用于确定淀粉样变治疗疗效的药物中的用途。

具体实施方式

本发明探索了同位素标记的苯并噻唑衍生物在体内穿透血脑屏障并结合促淀粉样变蛋白的能力。

这种结合的一个实例是苯并噻唑化合物能够与在神经炎(但未扩散)斑块中沉积的Aβ结合、与在脑血管淀粉样蛋白中沉积的Aβ结合以及与由在NFT中沉积的蛋白所构成的淀粉样蛋白结合。

特异性结合Aβ合成肽的表征：亲和力、动力学、最大结合

如前所述，使用在磷酸盐缓冲盐水(pH 7.4)中的2-(4’-[³H]甲氨基-苯基)-苯并噻唑([³H]BTA-1)和合成Aβ(l-40)分析苯并噻唑衍生物结合的特征(Klunk等，Life Sci.69：1471(2001)；Mathis等，Bioorg.Med.Chem.Lett.12：295(2002))。

Aβ(l-40)的氨基酸序列如下：

1	2	3	4	5	6	7	8	9	10	11	12
1	2	3	4	5	6	7	8	9	10	11	12	Asp	Ala	Glu	Phe	Arg	His	Asp	Ser	Gly	Tyr	Glu	Val
												Asp	Ala	Glu	Phe	Arg	His	Asp	Ser	Gly	Tyr	Glu	Val
												13	14	15	16	17	18	19	20	21	22	23	24
His	His	Gln	Lys	Leu	Val	Phe	Phe	Ala	Glu	Asp	Val	13	14	15	16	17	18	19	20	21	22	23	24
His	His	Gln	Lys	Leu	Val	Phe	Phe	Ala	Glu	Asp	Val
25	26	27	28	29	30	31	32	33	34	35	36
25	26	27	28	29	30	31	32	33	34	35	36	Gly	Ser	Asn	Lys	Gly	Ala	Ile	Ile	Gly	Leu	Met	Val
												Gly	Ser	Asn	Lys	Gly	Ala	Ile	Ile	Gly	Leu	Met	Val
												37	38	39	40
Gly	Gly	Val	Val									37	38	39	40

定义

“烷基”意指饱和的直链或支链烃基。实例包括但不限于甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、叔丁基、正戊基和正己基。

“烯基”意指包含至少一个碳碳双键的不饱和的直链或支链烃基。实例包括但不限于乙烯基、丙烯基、异丙烯基、丁烯基、异丁烯基、叔丁烯基、正戊烯基和正己烯基。

“炔基”意指包含至少一个碳碳叁键的不饱和的直链或支链烃基。实例包括但不限于乙炔基、丙炔基、异丙炔基、丁炔基、异丁炔基、叔丁炔基、戊炔基和己炔基。

“烷氧基”意指通过氧键连接的烷基。

“低级”在与烷基、烯基、炔基或烷氧基一起使用时意指C1-C8部分。

“卤素”意指氟、氯、溴或碘基团。

“放射性卤素”意指放射性的卤素，即放射性氟、放射性氯、放射性溴或放射性碘。

“有效量”意指为产生所希望的效果而需要的量。“有效量”的实例包括能够在体内或体外对一种或更多种淀粉样蛋白沉积物进行检测和成像的量，其导致供药用的可接受毒性和生物利用度水平和/或防止细胞降解和与原纤维形成相关的毒性。

“可药用载体”意指药学上可接受的材料、组合物或载体，比如液体或固体的填充剂、稀释剂、赋形剂或溶剂包封材料，其参与将对象化合物从一个器官或机体的一部分携带或运送到另一个器官或机体的另一部分。每种载体在与制剂其它成分相容以及适用于患者的意义上来说是“可接受的”。可用作可药用载体的材料的实例包括但不限于：(1)糖类，比如乳糖、葡萄糖和蔗糖；(2)淀粉，比如玉米淀粉和马铃薯淀粉；(3)纤维素及其衍生物，比如羧甲基纤维素钠、乙基纤维素和醋酸纤维素；(4)粉末化黄耆胶；(5)麦芽；(6)明胶；(7)滑石；(8)赋形剂，比如可可脂和栓剂蜡；(9)油类，比如花生油、棉籽油、红花油、芝麻油、橄榄油、玉米油和大豆油；(10)二醇类，比如丙二醇；(11)多元醇类，比如甘油、山梨醇、甘露醇和聚乙二醇；(12)酯类，比如油酸乙酯和月桂酸乙酯；(13)琼脂；(14)缓冲剂，比如氢氧化镁和氢氧化铝；(15)藻酸；(16)无热原水；(17)等渗盐水；(18)林格氏溶液；(19)乙醇；(20)pH缓冲溶液；(21)聚酯、聚碳酸酯和/或聚酸酐；以及(22)在药物制剂中使用的其它无毒的相容性物质，例如在REMINGTON’S PHARMACEUTICAL SCIENCES，15^th ed.(MackPublishing Co.，1975)第1405-1412页和1461-1487页，以及THENATIONAL FORMULARY XIV，14^th ed.(American PharmaceuticalAssociation，1975)中提到的。

“可药用盐”意指本发明化合物的酸或碱的盐，所述盐具有所期望的药理活性，其既不是生物学上所不希望的也不是其它方面所不希望的。所述盐可由酸形成，包括但不限于乙酸盐、己二酸盐、藻酸盐、天冬氨酸盐、苯甲酸盐、苯磺酸盐、硫酸氢盐、丁酸盐、柠檬酸盐、樟脑酸盐、樟脑磺酸盐、环戊烷丙酸盐、二葡萄糖酸盐(digluconate)、十二烷基硫酸盐、乙磺酸盐、延胡索酸盐、葡庚糖酸盐(glucoheptanoate)、甘油磷酸盐、半硫酸盐(hemisulfate)、庚酸盐、己酸盐、盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、2-羟基乙烷磺酸盐、乳酸盐、马来酸盐、甲磺酸盐、2-萘磺酸盐、烟酸盐、草酸盐、硫氰酸盐、甲苯磺酸盐和十一酸盐。碱盐的实例包括但不限于铵盐、碱金属盐如钠盐和钾盐、碱土金属盐如钙盐和镁盐、与有机碱成的盐比如二环己基胺盐、N-甲基-D-葡糖胺、以及与氨基酸(比如精氨酸和赖氨酸)成的盐。在一些实施方案中，可使用包括以下的试剂将含碱性氮的基团季铵化：低级烷基卤化物比如甲基、乙基、丙基和丁基的氯化物、溴化物和碘化物；硫酸二烷基酯比如硫酸二甲酯、硫酸二乙酯、硫酸二丁酯和硫酸二戊酯；长链卤化物比如癸基、月桂基、肉豆蔻基和硬脂基的氯化物、溴化物和碘化物；以及芳烷基卤化物比如苯乙基溴化物。

“前药”意指本发明化合物的衍生物，其在表现出其药理作用之前经历生物转化(比如代谢)。配制前药的目的在于改善化学稳定性、改善患者接受性和顺应性、改善生物利用度、延长作用持续时间、提高器官选择性、改善制剂(例如提高水溶性)、和/或减少副作用(例如毒性)。由本发明化合物使用常规方法(比如那些在BURGER′S MEDICINALCHEMISTRY AND DRUG CHEMISTRY，5^th ed.，Vol.1(1995)，第172-178页和第949-982页中描述的方法)可容易地制备前药。

本文中所用的术语“胃肠外”包括皮下、静脉内、动脉内、肌内、腹膜内、鞘内、心室内、胸骨内、颅内和骨内注射以及输注技术。

“动物”意指具有感觉和自主运动能力的活的有机体，为生存而需要氧和有机食物。实例包括但不限于人类、马科、猪科、牛科、鼠科、狗科和猫科物种中的成员。在人的情况下，“动物”也可以称为“患者”。

“哺乳动物”意指温血的脊椎动物。

“对象”是哺乳动物，例如人。一个具体的实例是疑似患有痴呆的人。

“治疗”意指：

(i)预防动物的疾病、病症或病况的发生，所述动物可能易患所述疾病、病症和/或病况但还没有被诊断为已患上这些疾病、病症和/或病况；

(ii)抑制疾病、病症或病况，即阻止其发展；和/或

(iii)缓解疾病、病症或病况，即引起疾病、病症和/或病况的减退。

术语“疗法”包括治疗疾病和/或预防疾病。

术语“治疗”不一定意味着完全治愈。对任何不想要的症状或疾病的任何病理作用的任何程度的缓解或者疾病进程的延缓都可以认为是治疗。而且，治疗可以包括使患者的健康状况或外观的整体感觉变差的行为。例如，在癌症患者中施用化学疗法可能使患者感觉“恶心”，但这仍被认为是治疗。

术语“预防”意指降低有机体感染或发展与淀粉样蛋白沉积相关的疾病的可能性。例如，术语“预防”意指降低相对于对照组发展疾病的个体的百分比，所述对照组不施用抗淀粉样蛋白剂。

术语“可检测量”意指施用的可检测化合物的量足以使检测所述化合物与淀粉样蛋白的结合成为可能。

“成像有效量”意指施用的可检测的化合物的量足以使所述化合物与淀粉样蛋白的结合的成像成为可能。

术语“体内成像”意指允许检测如本文中所述的标记的苯并噻唑化合物的任何方法。

术语“用于检测的体内或体外方法”意指允许检测所标记的式(I)的苯并噻唑衍生物的任何方法。

术语“基线”意指在开始抗淀粉样蛋白疗法之前患者的淀粉样蛋白沉积的量和分布。

除非上下文中另有明确说明，否则当其在本申请中出现时，单数术语的定义可外推应用于其复数形式；同样，当其在本申请中出现时，复数术语的定义可外推应用于其单数形式。

淀粉样蛋白成像剂

本发明的淀粉样蛋白成像剂是任意的式(I)化合物或其可药用盐：

其中R’、R₃-R₁₀和Y如上所定义。

式(I)化合物又称为“苯并噻唑化合物”、“苯并噻唑衍生物”或“淀粉样蛋白成像剂”，具有以下各特征：(1)在体外与合成Aβ特异性结合，(2)在体内穿过未受损的血脑屏障的能力，(3)与包含至少一种促淀粉样变蛋白的淀粉样蛋白沉积物特异性结合，其中所述促淀粉样变蛋白选自AL、AH、ATTR、Aβ2M、AA、AApoAI、AApoAII、AGel、ALys、AFib、ACys、ABri、ADan、APrP、ACal、AlAPP、AANF、APro、AIns、AMed、AKer、A(tbn)和ALac，(4)结合至在神经炎(但未扩散)斑块中沉积的Aβ上、结合至在脑血管淀粉样蛋白中沉积的Aβ上、以及结合至由在NFT中沉积的蛋白所构成的淀粉样蛋白上，和(5)在合适的剂量水平下还是无毒的并且具有令人满意的作用持续时间。

在一个实施方案中，R₃-R₁₀可以独立地选自H、F、Cl、Br、I、-N(R₁₁)₂和OR₁₁。在与该实施方案或本文中所描述的任何其它实施方案相结合的实施方案中，R₈和R₉可独立地为OR₁₁。

在另一个任选地与本文中所描述的其它实施方案相结合的实施方案中，R₇和R₁₀可以各自为H。在另一个实施方案中，R₃、R₄、R₅和R₆可以各自为H。

在本发明的其它实施方案中，Y可以为F、Cl、Br、I或-NO₂。Y的一个具体实例是F。

在另一个实施方案中，结合淀粉样蛋白的式(I)化合物中R₃、R₄、R₅和R₆、R₇以及R₁₀各自为H，R₈和R₉独立地为OR₁₁。

举例说明的式(I)化合物包括但不限于以下表1中的那些：

表1

在另一些任选地与本文中所描述的任何其它实施方案相结合的实施方案中，本发明涉及下表2中的另外的化合物。如同式(I)所描述的化合物一样，以下化合物适合本文中所描述的方法、组合物和用途：

表2

使用方法

本发明的化合物可用于确定在动物的器官或身体部位(包括脑)中的一种或更多种淀粉样蛋白沉积物的存在、位置和/或量。所述一种或更多种淀粉样蛋白沉积物包括但不限于一种或更多种Aβ沉积物。考虑将遵循的淀粉样蛋白沉积时间顺序，本发明的化合物还可以用于将淀粉样蛋白沉积与临床症状(与疾病、病症或病况相关)的发作相联系。本发明的化合物可最终用于诊断以淀粉样蛋白沉积为特征的疾病、病症或病况，比如AD、家族性AD、唐氏综合征、淀粉样变、II型糖尿病、轻度认知障碍以及载脂蛋白E4等位基因的纯合子。本发明的化合物还可用作评价抗淀粉样蛋白疗法的替代指标。

成像技术

本发明的一个方法确定患者的器官或身体部位(比如脑)内淀粉样蛋白沉积物的存在和位置。所述方法包括给患者施用可检测量的药物组合物，所述药物组合物包含结合淀粉样蛋白的称为“可检测化合物”的本发明化合物或其水溶性可药用盐。“可检测量”意指所施用的可检测化合物的量足以使检测所述化合物与淀粉样蛋白的结合称为可能。“成像有效量”意指所施用的可检测化合物的量足以使所述化合物与淀粉样蛋白的结合的成像称为可能。

本发明采用淀粉样蛋白成像剂与非侵入性神经成像技术相结合，所述非侵入性神经成像技术如磁共振波谱(MRS)或磁共振成像(MRI)、或γ成像比如正电子发射断层扫描(PET)或单光子发射计算机断层扫描(SPECT)，用于在体内量化淀粉样蛋白沉积。所述方法涉及给患者成像以建立淀粉样蛋白沉积的基线。对于γ成像而言，测量由被检验器官或部位发出的辐射，并表达为总结合或比例，所述比例为在一个组织中的总结合被在同一体内成像期间在同一对象的另一个组织中的总结合归一化(例如，除以)。体内总结合被定义为通过体内成像技术在组织内检测的全部信号，而不需要通过第二次注射相同量的标记化合物与大量过量的未标记的但化学上相同的化合物进行校正。该方法还可包括在进行抗淀粉样蛋白疗法之后患者的至少一个成像期。该方法还可包括在治疗之前和之后使用至少一种抗淀粉样蛋白剂给患者成像。成像可在治疗期间的任何时间进行。

为体内成像的目的，可用的检测仪器的类型是选择给定的标记物的一个主要因素。例如，放射性同位素和¹⁹F可用于本发明方法中的体内成像。所用的仪器类型将指导对放射性核素或稳定同位素的选择。例如，所选的放射性核素必须具有某种通过给定类型的仪器可检测的衰变。另一个考虑因素涉及放射性核素的半衰期。半衰期应足够长以便其在最大标靶吸收时间下仍可被检测到，还应足够短以便主体不遭受到有害辐射。可使用γ成像检测本发明的放射性标记的化合物，其中检测所发出的具有合适波长的γ辐射。γ成像的方法包括但不限于SPECT和PET。在一个实施方案中，比如对于SPECT检测而言，所选的放射性标记物将不释放粒子，但会产生大量的140-200keV的光子。对于PET检测而言，所述放射性标记物将是发射正电子的放射性核素如¹⁹F，其将湮灭以形成两束511keV的能被PET照相机检测到的γ射线。

在本发明中，制备结合淀粉样蛋白的化合物/成像剂，其可用于淀粉样蛋白沉积的体内成像和量化。这些化合物将与非侵入性的神经成像技术联用，所述非侵入性的神经成像技术比如磁共振波谱(MRS)或磁共振成像(MRI)、正电子发射断层扫描(PET)和单光子发射计算机断层扫描(SPECT)。根据本发明，可通过本领域中已知的一般有机化学技术，采用¹⁹F或¹³C将苯并噻唑化合物标记用于MRS/MRI。例如，参见ADVANCED ORGANIC CHEMISTRY：REACTION，MECHANISMS，AND STRUCTURE，3^rd ed.(1985)，其内容通过引用并入本文中。也可以通过本领域众所周知的技术(如Fowler，J.和Wolf，A.在POSITRON EMISSION TOMOGRAPHY ANDAUTORADIOGRAPHY 391-450(Raven Press，1986)中所描述的，其内容通过引用并入本文中)采用¹⁸F、¹¹C、⁷⁵Br或⁷⁶Br将苯并噻唑化合物标记用于PET。还可以通过本领域中已知的几种技术(参见例如Kulkarni，Int.J.Rad.Appl.&Inst.(Part B)18：647(1991)，其内容通过引用并入本文中)，采用¹²³I将苯并噻唑化合物标记用于SPECT。此外，可使用任何合适的放射性碘同位素(例如但不限于¹³¹I、¹²⁵I或¹²³I)，通过经由重氮化碘(diazodium iodide)直接使重氮化的氨基衍生物碘化(参见Greenbaum，F.Am.J.Pharm.108：17(1936))、或通过将不稳定的重氮化的胺转化为稳定的三氮烯、或通过将非放射性的卤代前体转化为稳定的三烷基锡衍生物然后可通过本领域中众所周知的几种方法将所述三烷基锡衍生物转化为碘化合物(参见Satyamurthy和Barrio，J.Org.Chem.48：4394(1983)，Goodman等，J.Org.Chem.49：2322(1984)，以及Mathisetal，J.Labell Comp.and Radiopharm.1994：905；Chumpradit等，J.Med.Chem.34：877(1991)；Zhuang等，J.Med.Chem.37：1406(1994)；Chumpradit等，J.Med.Chem.37：4245(1994))而标记所述苯并噻唑化合物。例如，使苯并噻唑的稳定的三氮烯衍生物或三烷基锡衍生物与含有¹³¹I、¹²⁵I、¹²³I、⁷⁶Br、⁷⁵Br、¹⁸F或¹⁹F的卤化剂反应。因此，所述苯并噻唑的稳定的三烷基锡衍生物是新型的前体，其可用于合成许多本发明的放射性标记的化合物。同样，这些三烷基锡衍生物在本发明的一个实施方案加以考虑。

还可以使用已知的金属放射性标记物例如锝-99m(^99mTc)对苯并噻唑化合物进行放射性标记。可实现引入结合这些金属离子的配体的取代基修饰，而不需要由放射性标记领域的普通技术人员进行过多的实验。然后可以将所述金属放射性标记的苯并噻唑用于检测淀粉样蛋白沉积物。制备Tc^99m的放射性标记的衍生物是本领域中众所周知的。参见例如Zhuang等“Neutral and stereospecific Tc-99m complexes：[99mTc]N-benzyl-3，4-di-(N-2-mercaptoethyl)-amino-pyrrolidines (P-BAT)”Nuclear Medicine & Biology 26(2)：217-24，(1999)；Oya等，“Small andneutral Tc(v)OBAT，bisaminoethanethiol(N2S2)complexes for developingnew brain imaging agents”Nuclear Medicine & Biology 25(2)：135-40，(1998)；和Horn等，“Technetium-99m-labeled receptor-specificsmall-molecule radiopharmaceuticals：recent developments andencouraging results”Nuclear Medicine & Biology 24(6)：485-98，(1997)。

本发明的方法可使用通过核磁共振波谱可检测到的同位素，用于体内成像和光谱的目的。在磁共振波谱中可用的元素包括但不限于¹⁹F和¹³C。

用于本发明目的的合适的放射性同位素可以是β发射体、γ发射体、正电子发射体和x射线发射体。这些放射性同位素包括¹³¹I、¹²³I、¹⁸F、¹¹C、⁷⁵Br和⁷⁶Br。根据本发明，用于磁共振成像(MRI)或磁共振波谱(MRS)的合适的稳定的同位素包括¹⁹F和¹³C。用于体外量化在活检组织或尸检组织的匀浆中的淀粉样蛋白的合适的放射性同位素包括¹²⁵I、¹⁴C和³H。用于PET体内成像的示例性放射性标记物是¹¹C或¹⁸F，用于SPECT成像的是¹²³I，用于MRS/MRI的是¹⁹F，用于体外研究的是³H或¹⁴C。然而，根据本发明，可使用使成像剂可见的任何常规方法。

根据本发明的一个实施方案，涉及在活检或尸检组织中检测淀粉样蛋白沉积物的方法，所述方法包括使福尔马林固定的组织与本发明的结合淀粉样蛋白的苯并噻唑化合物一起孵育。在一个实施方案中，所述溶液为以本发明的结合淀粉样蛋白的苯并噻唑化合物饱和的25-100％的乙醇(余量为水)。在孵育时，所述化合物在组织中将所述淀粉样蛋白沉积物染色或标记，所述被染色或标记的沉积物可通过任何标准方法被检测或观察到。这些检测方法包括显微技术，比如亮视野显微术、荧光显微术、激光共聚焦显微术和交叉极化显微术。

量化在活检或尸检组织中的淀粉样蛋白的方法包括将标记的本发明的苯并噻唑衍生物或其水溶性的无毒盐与活检组织或尸检组织的匀浆一起孵育。通过本领域中众所周知的方法获得组织并将其均匀化。在一个实施方案中，所述标记物是放射性标记物，但是其它标记物比如酶、化学发光化合物和免疫荧光化合物对本领域技术人员来说也是众所周知的。示例性的放射性标记物包括但不限于¹²⁵I、¹⁴C和³H，包含在本文中所描述结构式的化合物之一上取代的取代基中。含有淀粉样蛋白沉积物的组织将结合至本发明的结合淀粉样蛋白的苯并噻唑化合物的标记衍生物上。然后通过本领域技术人员已知的任何机理(比如过滤)，将已结合组织与未结合组织分离开。然后可以通过本领域技术人员已知的任何方法将已结合组织量化。然后可通过与标准曲线比较(通过孵育已知量的淀粉样蛋白与放射性标记的苯并噻唑衍生物而得到)，可将与组织结合的放射性标记的苯并噻唑衍生物的单位转化为每100mg组织中淀粉样蛋白的微克数的单位。

区分患有阿尔茨海默病的脑与正常脑的方法包括从正常对象和从疑似患有阿尔茨海默病的对象的(a)小脑和(b)同一脑的除小脑外的其它区域中获取组织。使用本领域技术人员众所周知的方法将这些组织制成单独的匀浆，然后将其与结合淀粉样蛋白的放射性标记的式(I)的苯并噻唑化合物孵育。然后计算每种组织类型(例如小脑、非小脑、正常的、异常的)中结合至放射性标记的结合淀粉样蛋白的苯并噻唑化合物的组织量，并计算非小脑组织中结合与小脑组织中结合的比例(对于正常组织而言以及对于疑似患有阿尔茨海默病的患者而言)。然后比较这些比例。如果来自疑似患有阿尔茨海默病的脑的所述比例在得自正常脑的所述比例的90％以上，则作出阿尔茨海默病的诊断。正常的比例可从前述所得的数据中得到，或者作为替代方案，可在研究疑似的脑组织的同时计算所述正常的比例。

相比于淀粉样蛋白斑块，本发明化合物与神经原纤维缠结的特异性结合在小于10nM的浓度下尤其明显，此浓度包含了PET放射性示踪剂的体内浓度范围。在这些仅包含缠结而不包含斑块的低浓度下，当相比于既不含有斑块也不含有缠结的对照脑组织时，没有产生明显的结合。然而，将含有主要为斑块和一些缠结的脑组织的匀浆与本文中描述的结构式的化合物一起孵育，导致与没有斑块和缠结的对照组织相比在结合上的显著增加。此数据表明这些化合物的一个优点是其在低于10nM时对于Aβ沉积物的特异性。这些低浓度在PET研究中是可检测的，使用放射性标记的本文中描述的式子的化合物(其对可能的Aβ沉积物是特异性的)进行PET检测。这些化合物的用途使得PET可对Aβ沉积物进行检测，所述Aβ沉积物例如发现于斑块和脑血管淀粉样蛋白中的那些。由于已经报道了在额叶皮质中的Aβ水平在缠结形成前增加，因此这将提示本发明的用作PET示踪剂的放射性标记化合物对AD皮质中的最早变化是特异性的(Naslund等，JAMA 283：1571(2000))。体内检测一种或更多种淀粉样蛋白沉积物的方法

如上所述，在一个实施方案中，本发明还提供了一种用于体内检测一种或更多种淀粉样蛋白沉积物的方法，包括：

(i)给动物施用有效量的式(I)化合物，其中所述化合物在所述动物内会结合至任何一种或更多种淀粉样蛋白沉积物上；和

(ii)在所述动物体内检测所述化合物与淀粉样蛋白沉积物的结合。

在所述化合物与所述一种或更多种淀粉样蛋白沉积物结合已经过了足够长的时间后，例如在施用后30分钟至48小时后，可采用本领域中已知的任何方法检测所述结合。检测方法的实例包括但不限于测定法(比如免疫测定法、量热法、光密度测量法、光谱法和色谱法)、非侵入性神经成像技术(比如磁共振波谱(MRS)、磁共振成像(MRI)和γ成像技术比如单光子发射计算机断层扫描术(SPECT)和正电子发射光谱(PET))。对于γ成像而言，测量由被检测的器官或部位发出的辐射并将其表示为总结合或比例，所述比例为在一个组织内的总结合被在同一体内成像过程中在所述对象的另一个组织内的总结合归一化(例如除以)。体内总结合被定义为通过体内成像技术在组织中检测到的全部信号，而不需要通过第二次注射同样量的标记化合物与大量过量的未标记的但化学上相同的化合物来校正。

可用的检测仪器的类型可以是选择放射性卤素或碳同位素的一个因素。例如，所选择的放射性同位素应具有可被给定仪器检测到的衰变类型。另一个考虑因素涉及所述放射性同位素的半衰期。半衰期应足够长，以便放射性同位素在标靶的最大摄取时间时仍可检测到，还应足够短，以便宿主不必承受有害的辐射。对于SPECT检测而言，所选的放射性同位素可能没有粒子发射出，但可能产生大量的在140-200keV范围内的光子。对于PET检测而言，所选的放射性同位素可以是发射正电子的放射性同位素，其湮灭而产生两束可被PET照相机检测到511keV的γ射线。

可用的放射性同位素包括但不限于：用于活检组织或尸检组织的匀浆中淀粉样蛋白的体外量化的¹²⁵I、¹⁴C和³H；用于PET体内成像的¹¹C和¹⁸F；用于SPECT成像的¹²³I；用于MRS/MRI的¹⁸F；用于体内研究的³H或¹⁴C；以及用于磁共振波谱的¹⁸F和¹³C。在一个实施方案中，所述检测通过γ成像、磁共振成像或磁共振波谱实现。在另一个实施方案中，所述γ成像是PET或SPECT。

体外检测一种或更多种淀粉样蛋白沉积物的方法

本发明还提供了一种用于体外检测一种或更多种淀粉样蛋白沉积物的方法，包括：

(i)使机体组织与有效量的式(I)化合物接触，其中所述化合物会在所述组织内结合任何一种或更多种淀粉样蛋白沉积物；和

(ii)检测所述化合物在所述组织内与一种或更多种淀粉样蛋白沉积物的结合。

可以通过本领域内已知的任何方法检测所述结合。检测方法的实例包括但不限于显微技术，比如亮视野显微术、荧光显微术、激光共聚焦显微术和交叉极化显微术。

在一个实施方案中，所述组织是福尔马林固定的或新鲜冷冻的活检或尸检组织。在另一个实施方案中，所述组织是匀浆化的。在又一个实施方案中，本发明化合物处于溶液中，所述溶液还含有25-99％的乙醇，所述溶液的余下部分为水。在另一个实施方案中，所述溶液含有0-50％的乙醇和0.0001～100μM的所述化合物。在又一个实施方案中，所述方法还包括(iii)从所述组织中分离出与所述化合物结合的一种或更多种淀粉样蛋白沉积物；和(iv)量化所述与本发明化合物结合的一种或更多种淀粉样蛋白沉积物。可通过本领域中已知的任何方法(比如过滤)将所述结合的一种或更多种淀粉样蛋白沉积物从所述组织中分离。通过与标准曲线(通过孵育已知量的淀粉样蛋白与本发明化合物或其可药用盐、水合物、溶剂化物或前药而产生)比较，可将结合的一种或更多种淀粉样蛋白沉积物的量转化为每100mg组织中一种或更多种淀粉样蛋白沉积物的μg数的单位。

区分患有阿尔茨海默病的脑与正常脑的方法

本发明还提供了区分患有阿尔茨海默病的脑与正常脑的方法，包括：

(i)获取来自正常动物或疑似患有阿尔茨海默病的动物的(a)小脑和(b)同一脑的其它区域的组织；

(ii)使所述组织与式(I)化合物接触；

(iii)量化与所述化合物结合的淀粉样蛋白；

(iv)计算脑中除小脑以外的区域中淀粉样蛋白的量相对于小脑中淀粉样蛋白的量的比例；以及

(v)将正常动物的该比例与疑似患有阿尔茨海默病的动物的该比例进行比较。

如果疑似患有阿尔茨海默病的动物的该比例为例如正常动物的该比例的90％以上，则可做出阿尔茨海默病的诊断。对于此方法而言。“正常”动物是未患有阿尔茨海默病的动物。

施用和药物组合物

根据本发明，可对预期有淀粉样蛋白或淀粉样蛋白原纤维形成的对象施用包含式(I)的淀粉样蛋白成像剂的药物组合物，所述对象例如临床诊断有阿尔茨海默病或与淀粉样蛋白沉积有关的其他疾病的患者。

给对象的施用可以是局部的或全身性的，并且可以与其它物质一起施用，例如，静脉内、动脉内、鞘内(通过脊髓液)等。根据检查的身体部位，施用还可以是皮内或腔内的。在所述化合物与淀粉样蛋白结合已经过足够时间(例如30分钟至48小时)后，通过常规成像技术比如MRS/MRI、SPECT、平面闪烁成像、PET以及任何新兴的成像技术等检测被检查对象的所述部位。确切的方案必须根据如上所指出的患者的具体因素、被检查的身体部位、施用方法和所用的标记物类型而变化；具体方法的确定对于本领域技术人员来说将是常规的。对于脑成像而言，作为一个实例，测量结合的放射性标记的本发明苯并噻唑化合物或类似物的量(总结合或特异结合)，并与和患者小脑结合的标记的苯并噻唑化合物的量以比例形式进行比较。然后将该比例与年龄匹配的正常脑中的相同比例进行比较。对于器官成像而言，作为另一个实例，测量结合的放射性标记的本发明硫黄素衍生物或类似物的量(总结合或特异结合)，并与和患者器官结合的标记的硫黄素衍生物的量以比例形式进行比较。然后将此比例与年龄匹配的正常器官中的相同比例进行比较。

本发明的淀粉样蛋白成像剂可以以如上所述的可注射组合物的形式施用，也可以配制成众所周知的药物递送系统(例如口服、直肠、胃肠外(静脉内、肌肉内或皮下)、脑池内、阴道内、腹膜内、局部(粉末、软膏或滴剂)，或作为口腔喷雾剂或鼻喷雾剂)。用于此目的的典型组合物包含可药用载体。例如，所述组合物每毫升含有NaCl的磷酸盐缓冲液中可以包含约10mg人血清白蛋白和约0.5到500微克标记的苯并噻唑化合物。其它的可药用载体包括水溶液、无毒的赋形剂(包括盐类)、防腐剂、缓冲剂等，例如在REMINGTON’S PHARMACEUTICALSCIENCES，15th Ed.Easton：Mack Publishing Co.pp.1405-1412和1461-1487(1975)以及THE NATIONAL FORMULARY XIV.，14th Ed.Washington：American Pharmaceutical Association(1975)中所描述的，其内容通过引用并入本文中。

非水溶剂的实例是丙二醇、聚乙二醇、植物油和可注射的有机酯比如油酸乙酯。含水载体包括水、醇/水溶液、盐水溶液、胃肠外赋形剂比如氯化钠、林格氏葡萄糖等。静脉内赋形剂包括流体和营养补充剂。防腐剂包括抗微生物剂、抗氧化剂、螯合剂和惰性气体。根据本领域中的常规技术调节pH和所述药物组合物各种成分的确切浓度。参见Goodman和Gilman的THE PHARMACOLOGICAL BASIS FORTHERAPEUTICS(7th Ed.)。

PET扫描方案可包括在注射放射性药物后15-60分钟完成的标准的全身扫描(从头覆盖至骨盆)，或对特定的身体部位(例如心、肺、肝、肾)进行的扫描。该扫描方案与使用[F-18]2-氟-2-脱氧葡萄糖(FDG)进行的全身扫描或聚焦身体部位PET肿瘤扫描相似。也就是说，静脉内注射淀粉样蛋白特异性的放射性药物，规定放射性示踪剂分布于全身、感兴趣器官中放射性示踪剂的吸收、以及从血液和不存在淀粉样蛋白的其它器官中清除的时间，对全身或特定身体部位进行20-40分钟的扫描以对结合淀粉样蛋白的放射性示踪剂成像。此外，所述成像扫描可用于随后的被扫描组织的直接活组织采样。

通常，标记的式(I)苯并噻唑化合物的可检测的量将由本领域普通医师根据考虑的因素比如患者的年龄、病况、性别和疾病的程度、禁忌证、伴随疗法(如果有的话)以及其它变量进行调整而变化。本发明化合物的约0.001μg/kg/天至约10,000mg/kg/天的数量级的剂量水平可用于本发明的方法。在一个实施方案中，所述剂量水平是约0.001μg/kg/天至约10μg/kg/天。在另一个实施方案中，所述剂量水平是约0.01μg/kg/天至约1.0μg/kg/天。在另一个实施方案中，所述剂量水平是约0.1mg/kg/天至约100mg/kg/天。

对任何特定患者来说的具体剂量水平将根据多种因素而变化，所述因素包括所采用的具体化合物的可能毒性；患者的年龄、体重、一般健康状况、性别和饮食；施用时间；排泄率；药物联用；以及施用形式。通常，体外的剂量效应结果提供患者施用的合适剂量的有用指导。动物模型的研究也是有用的。确定合适剂量水平的考虑因素在本领域中是众所周知的，并且在普通医师的技能范围内。

可使用用于调节药物递送的时间和次序的任何已知的施用方案，并且在必要时可重复以实现本发明方法中的治疗。所述方案可包括预治疗和/或与其它一种或更多种治疗剂的共同施用。

在一个实施方案中，将式(I)化合物施用给疑似患有以淀粉样蛋白沉积为特征的疾病、病症或病况的动物或处在患有上述疾病、病症或病况的风险中的动物。例如，所述动物可为老年人。

在另一个实施方案中，当通过与合成的Aβ肽或AD脑组织的结合进行测量时，本发明化合物以约0.0001μM至约10.0μM的解离常数(K_D)结合Aβ。

本发明还提供一种药物组合物，其包含：

(i)有效量的至少一种本发明化合物；和

(ii)可药用载体。

所述组合物可包含一种或更多种其它的药学上可接受的成分，包括但不限于一种或更多种润湿剂、缓冲剂、助悬剂、润滑剂、乳化剂、崩解剂、吸收剂、防腐剂、表面活性剂、色素、调味剂、甜味剂和治疗剂。

可将所述组合物配制成固体、液体、凝胶或混悬剂形式以用于：(1)口服施用，例如灌剂(drench)(水溶液或混悬液或者非水溶液或混悬液)、片剂(例如靶向口颊、舌下或全身吸收的)、大药丸、粉末、颗粒、用于舌的糊剂、硬明胶胶囊剂、软明胶胶囊剂、口腔喷雾剂、乳剂和微乳剂；(2)通过皮下、肌肉内、静脉内或硬膜外注射的胃肠外施用，例如无菌溶液、混悬液或持续释放制剂；(3)局部施用，例如乳膏、软膏、控释贴剂或用于皮肤的喷雾剂；(4)阴道内或直肠内施用，例如阴道栓、乳膏或泡沫；(5)舌下施用；(6)眼部施用；(7)透皮施用；或(8)鼻腔施用。

在一个实施方案中，可将所述组合物配制用于静脉内施用，并且所述载体包括流体和/或营养补充剂。在另一个实施方案中，所述组合物能够在体内与淀粉样蛋白特异性结合，能够穿过血脑屏障，在合适的剂量水平下无毒和/或具有令人满意的持续作用时间。在另一个实施方案中，所述组合物在每毫升含有NaCl的磷酸盐缓冲液中包含约10mg的人血清白蛋白和约0.5至500mg的本发明化合物。

此外，本发明的苯并噻唑化合物可用于确定淀粉样变治疗疗效的方法中。所述方法包括使用淀粉样蛋白成像作为替代指标的方法。替代指标是一种特殊类型的生物标记，其可用于替代作为药物批准用途的临床终点的临床测量。例如，胆固醇水平的测量现在是动脉粥样硬化的可接受替代指标。本发明涉及使用淀粉样蛋白成像作为抗淀粉样蛋白疗法疗效的替代指标。

本发明提供了一种评价抗淀粉样蛋白疗法成功的方法。在一些实施方案中，本发明提供了一种用于评价抗淀粉样蛋白疗法临床成功的方法。在一些实施方案中，所述方法可用于评价随后具有很少或没有临床症状的轻度损伤对象中的临床成功。确定淀粉样变治疗疗效的基本方法包括：

(a)给有此需要的患者施用有效量的如上所述的式(I)化合物或可药用盐；

(b)对所述患者成像；然后

(c)给有此需要的患者施用至少一种抗淀粉样蛋白剂；

(d)随后给有此需要的患者施用有效量的式(I)化合物；

(e)对所述患者成像；以及

(f)将采用至少一种抗淀粉样蛋白剂治疗剂之前所述患者中淀粉样蛋白沉积物的水平与采用至少一种抗淀粉样蛋白剂治疗之后所述患者中淀粉样蛋白沉积物的水平进行比较。

可检测的标记物包括可使用本领域技术人员已知的成像技术检测到的任何原子或基团。通常，所述可检测标记物选自：³H，¹³¹I，¹²⁵I，¹²³I，⁷⁶Br，⁷⁵Br，¹⁸F，CH₂-CH₂-X^＊，O-CH₂-CH₂-X^＊，CH₂-CH₂-CH₂-X^＊，O-CH₂-CH₂-CH₂-X^＊(其中X^＊＝¹³¹I、¹²³I、⁷⁶Br、⁷⁵Br或¹⁸F)，¹⁹F，¹²⁵I，含碳取代基(选自低级烷基、(CH2)nOR’、CF₃、CH₂-CH₂X、O-CH₂-CH₂X、CH₂-CH₂-CH₂X、O-CH₂-CH₂-CH₂X(其中X＝F、Cl、Br或I)、CN、(C＝O)-R’、(C＝O)N(R’)₂、O(CO)R’、COOR’、CR’＝CR’-R_ph和CR₂’-CR₂’-R_ph，其中至少一个碳是¹¹C、¹³C或¹⁴C)，和W-L^＊或V-W-L^＊形式的螯合基(具有螯合的金属基团)(其中V选自-COO-、-CO-、-CH₂O-和-CH₂NH-；W是-(CH₂)_n，其中n＝0、1、2、3、4或5；且L^＊是

其中M^＊是^99mTc)。

在一个实施方案中，所述可检测标记物是放射性标记物。

抗淀粉样蛋白疗法

本发明的另一个实施方案是确定需要进行淀粉样变治疗的患者的治疗淀粉样变的疗效的方法。所述方法包括给患者施用式(I)化合物，然后对患者成像。成像后，给患者施用至少一种抗淀粉样蛋白剂/抗淀粉样蛋白疗法。施用量、给药途径、以及疗法的持续时间由本领域技术人员基于患者的年龄、重量和病况进行确定。这样的确定在本领域技术人员的范围内。合适的量包括但不限于0.01～100mg/kg。合适的给药途径包括但不限于口服、皮下和静脉内。合适的治疗持续时间包括但不限于每天不确定地给予一次单剂量至四剂量。合适的成像时间包括但不限于在第一次给药后即刻到最近一次给药后十年。示例性的成像时间包括但不限于在最近一次给药后的7天至6个月。

“抗淀粉样蛋白剂”或“抗淀粉样蛋白疗法”是治疗或预防淀粉样变的任何药剂或药剂组合。与淀粉样蛋白沉积、淀粉样变相关的疾病的实例包括阿尔茨海默病、唐氏综合征、2型糖尿病、遗传性脑出血淀粉样变(荷兰人)、淀粉样蛋白A(活性的)、继发性淀粉样变、MCI、家族性地中海热、伴有荨麻疹和耳聋的家族性淀粉样蛋白肾病(穆-韦综合征)、淀粉样蛋白λL-链或淀粉样蛋白κL-链(自发性的，与骨髓瘤或巨球蛋白血症相关)、Aβ2M(长期血液透析)、ATTR(家族性淀粉样蛋白多神经病(葡萄牙人、日本人、瑞典人))、家族性淀粉样蛋白心肌病(丹麦人)、分离的心脏淀粉样蛋白(isolated atrial amyloid)、系统性老年淀粉样变、AIAPP或淀粉不溶素(amylin)胰岛素瘤、心房钠利尿因子(分离的心房淀粉样蛋白)、降钙素原(甲状腺髓样瘤)、凝溶胶蛋白(家族性淀粉样变(芬兰人))、半胱氨酸蛋白酶抑制剂C(伴有淀粉样变的遗传性脑出血(冰岛人))、AApo-A-I(家族性淀粉样蛋白多神经病-Iowa)、AApo-A-II(小鼠加速衰老)、与纤维蛋白原相关的淀粉样蛋白；以及去唾液酸糖蛋白(Asor)或Pr P-27(瘙痒病、克雅病、格-施-沙综合征(Gertsmann-

syndrome)、牛海绵状脑病)或在载脂蛋白E4等位基因纯合的人的情况下、以及与载脂蛋白E4等位基因纯合性相关的病况或亨廷顿病。本发明涉及与淀粉样蛋白斑块沉积相关的疾病。在一个实施方案中，所述与淀粉样蛋白沉积相关的疾病是AD。

根据式(I)的本发明的苯并噻唑可作为抗淀粉样蛋白疗法疗效的替代指标而用于淀粉样蛋白成像。施用淀粉样蛋白成像剂以建立淀粉样蛋白沉积的基线并随后在使用抗淀粉样蛋白剂给患者治疗之前和之后对患者成像均可确定抗淀粉样蛋白疗法的功效。由于可以施用淀粉样蛋白成像剂并且可以在任何抗淀粉样蛋白疗法之前和之后对患者成像，因此所述方法可用于确定抗淀粉样蛋白治疗的功效，。所述方法涉及确定对治疗与淀粉样蛋白沉积有关的疾病无效的抗淀粉样蛋白疗法，以及确定对治疗与淀粉样蛋白沉积有关的疾病有效的抗淀粉样蛋白疗法。本领域内的普通技术人员可以根据合适的方案确定所述抗淀粉样蛋白疗法的条件和剂量。因此，本发明涉及确定目前已知的抗淀粉样蛋白疗法的功效，以及还有待发现的抗淀粉样蛋白疗法的功效。示例性的非限制性的抗淀粉样蛋白疗法描述如下。

在一些实施方案中，可以通过本发明的方法确定乙酰胆碱酯酶抑制剂在治疗淀粉样变中的功效。乙酰胆碱酯酶疗法是基于AD退化模式的研究，其中鉴别在基底前脑中神经元组的显著减少。这些细胞均使用递质乙酰胆碱，其损失意味着较少的乙酰胆碱在皮层中在其前体终端处被释放。基于这些发现已经开发出了几种药物，比如他克林、多奈哌齐、卡巴拉汀和加兰他敏，并推测它们通过抑制酶乙酰胆碱酯酶而起作用(Ingram，V.，American Scientist，2003，91(4)：312-321)。

在另一些实施方案中，通过本发明的化合物，根据已描述的方法，确定在治疗淀粉样变中靶向负责形成淀粉样蛋白前体蛋白(APP)的有毒片段的酶的抗淀粉样蛋白疗法。在一些实施方案中，所述淀粉样蛋白前体蛋白(APP)的有毒片段是错误折叠的Aβ肽。例如，一些科学家认为Aβ1-42片段的过度产生是AD的根本原因。Aβ1-42片段是通过由β-分泌酶(BACE1)(其产生氨基酸末端)和-γ分泌酶(其切割APP的羧基末端)切割APP而形成的。这些分泌酶的抑制剂可用作抗淀粉样蛋白疗法(Ingram，V.，American Scientist，2003，91(4)：312-321)。

在一些实施方案中，可通过本发明的方法确定免疫疗法策略在淀粉样变治疗中的功效。免疫疗法通过利用患者的免疫系统定位并破坏淀粉样蛋白斑块而起作用，科学家们正积极探索多种免疫疗法策略。免疫疗法策略可以是被动的或主动的。例如，在主动免疫疗法中，患者可接受Aβ肽的注射剂或喷鼻剂，导致抗淀粉样蛋白免疫应答。另一方面，被动免疫疗法可能涉及旁路β淀粉样蛋白，使用已在对β淀粉样蛋白应答中产生的抗血清代替。已经研究了涉及抗Aβ肽的抗体的免疫疗法来治疗AD。例如，AN-1792是一种预先聚集的合成的淀粉样蛋白β(Aβ；1-42长度)连同QS-21佐剂的制剂(Hock，C.等，2003，Neuron，38：547-554)。大约有300名AD患者在由于副作用而停止临床试验之前已采用此制剂进行了治疗(Birmingham，K.和Frantz，S.，2002，Nature Medicine，8：199-200)。

在另一些实施方案中，通过本发明的方法确定神经保护策略在淀粉样变治疗中的功效。例如，很多临床医师推荐患者服用高剂量(1000-2000IU/天)的维生素E。已提出用于淀粉样变治疗的其它类型的神经保护策略是高剂量的维生素C、钙通道调节剂、自由基清除剂和金属离子螯合剂(Selkoe，等，Annu.Rev.Pharmacol.Toxicol.，2003，43：545-84)。

在一些实施方案中，通过本发明的方法确定抗炎药(NSAID)策略在淀粉样变治疗中的功效。涉及NSAID的治疗基于如下证据：皮质中的细胞炎症反应是由Aβ肽的渐进性累积而引起的。示例性的抗炎药是泼尼松、非特异性的环氧合酶抑制剂以及环氧合酶2抑制剂(Clark，M.等，Annals ofInternal Medicine，2003，138(5)：400-410；以及Hardy，John，Annu.Rev.Med.，2004，55：15-25)。

在一些实施方案中，本发明的方法可确定降胆固醇疗法的功效，所述降胆固醇疗法包括但不限于3-羟基-3-甲基戊二酰基辅酶A还原酶抑制剂(他汀类)。涉及降胆固醇药物(比如他汀类)的治疗是基于流行病学的证据，即用他汀类治疗的患者具有降低的AD发病率，并且他汀类可改变Aβ的代谢以降低Aβ水平(Wolozin，B(2002)Cholesterol and Alzheimer′sdisease.Biochemical Society Transactions.30：525-529)。示例性的降低胆固醇的他汀类药物包括洛伐他汀、普伐他汀、瑞舒伐他汀、氟伐他汀、阿伐他汀和辛伐他汀。其它的降胆固醇药包括烟酸、消胆胺、非诺贝特、考来维仑(Colesevelam)和依替米贝(ezetimibe)。

在另一些实施方案中，通过本发明的方法确定消除聚集的Aβ1-42的神经毒性的小分子在淀粉样变治疗中的功效。这样的药物在施用时(例如在疾病进程的早期)，将会在对神经元形成任何永久性损伤之前给逐渐累积的Aβ肽“解毒”(Clark，M.等，Annals of Internal Medicine，2003，138(5)：400-410)。

在一些实施方案中，通过本发明的方法确定“诱饵肽(decoy peptide)”在淀粉样变治疗中的功效。诱饵肽是与累积的Aβ1-42肽结合并迫使其采取无毒结构的小分子。示例性的诱饵肽是小分子肽(5、6或9个氨基酸长)，选自能够与标记的Aβ1-42形成紧密结合的大的蛋白片段库(Clark，M.等，Annals of Internal Medicine，2003，138(5)：400-410)。

在另一些实施方案中，通过本发明的方法确定胆固醇动态平衡调节在淀粉样变治疗中的功效。近来发现降胆固醇药的长期使用与低的AD发病率相关联。同时，已表明高胆固醇饮食增加动物的Aβ病变，并且已表明降胆固醇药减少APP转基因小鼠的病变。正在进行临床试验，以研究胆固醇动态平衡调节在AD治疗中的作用(Hardy，John，Annu.Rev.Med.，2004，55：15-25)。

认为某些抗体比如命名为m266的抗体(DeMattos，RB，Bales，KR，Cummins，DJ，Dodart，JC Paul，SM，Holtzman，DM(2001)“Peripheralanti-A beta antibody alters CNS and plasma A beta clearance anddecreases brain A beta burden in a mouse model of Alzheimer’s disease”Proc.Natl.Acad.Sci.USA 98：8850-8855)或除抗体以外的分子(Matsuoka，Y，Saito，M，LaFrancois，J，Saito，M，Gaynor，K，Olm，V，Wang，L，Casey，E，Lu，Y，Shiratori，C，Lemere，C，Duff，K(2001)“Novel therapeutic approachfor the treatment of Alzheimer’s disease by peripheral administration ofagents with an affinity to beta-amyloid”Journal of Neuroscience，23：29-33)通过与血液中的Aβ肽结合而降低脑淀粉样蛋白，从而产生“外周降低(peripheral sink)”并将Aβ的平衡由脑向血液转移，在血液中可将Aβ从机体中清除。这样的药剂在本文中被称为“外周降低剂(peripheral sinkagent)”。

评价抗淀粉样蛋白疗法的功效

使用根据式(I)的苯并噻唑来测定治疗淀粉样变的疗效的方法包括给有此需要的患者施用式(I)的化合物并对患者成像。在成像后，将至少一种抗淀粉样蛋白剂施用给患者。然后，给患者施用有效量的式(I)化合物并再次对患者成像。最后，将使用抗淀粉样蛋白剂治疗以前患者的淀粉样蛋白沉积的基线水平与使用抗淀粉样蛋白剂治疗以后患者的淀粉样蛋白沉积的水平进行比较。这样的比较在熟练的执业医师的范围内。

在一些实施方案中，在使用抗淀粉样蛋白剂治疗以前患者的淀粉样蛋白沉积的水平将高于使用抗淀粉样蛋白剂治疗以后患者的淀粉样蛋白沉积的水平。这样的结果表明抗淀粉样蛋白剂/抗淀粉样蛋白疗法可有效治疗与淀粉样蛋白沉积相关的疾病。

例如，AN-1792是一种预先聚集的合成淀粉样蛋白β(Aβ；1-42个氨基酸长)连同QS-21佐剂的制剂。约300个AD患者在由于副作用而停止临床试验前已采用此制剂进行了治疗(Birmingham，K.和Frantz，S.，2002，Nature Medicine，8：199-200)。虽然有此挫折，但对此方法保持乐观的人已经提出了两个发现。第一，在唯一已公开的关于AN-1792治疗的AD患者的尸检报告中，有几个不寻常的发现，包括：(i)新皮层的广泛区域具有很少的Aβ斑块；(ii)缺少Aβ斑块的皮层区域含有与未免疫的AD相似的缠结密度、神经纤丝和脑淀粉样蛋白血管病(CAA)，但缺少与斑块相关的营养不良的神经突和星形角质细胞簇；(iii)在某些缺乏斑块的区域，Aβ-免疫反应性与小胶质细胞相关(Nicoll，J.等，2003，Nature Medicine，9：448-452)。第二，在30名AN-1792治疗患者的小的亚组中，产生抗Aβ抗体的那些患者(如通过组织淀粉样蛋白斑块免疫活性法(TAPIR)所测定的)与没有这些抗体的患者相比，显示出认知功能和日常生活活动性的明显较低的下降率，如通过简易精神状况检查(Mini Mental StateExamination)、痴呆残疾性评价以及由韦氏记忆量表(Wechsler MemoryScale)延期回忆的视觉配对辅助测试(the Visual Paired Associates Test)所示出的那样(Hock等，Neuron 38：547-54(2003))。

在另一个实施方案中，本发明涉及在给不符合AD临床诊断标准的患者脑中的淀粉样蛋白沉积物成像的方法中给患者施用式(I)的化合物。这些患者包括但不限于表现出临床痴呆病征的患者或具有轻度认知障碍的患者，例如表现出可疑病因的痴呆病症的患者，其中来自患者淀粉样蛋白成像的数据揭示了某些淀粉样蛋白沉积物是AD或另一种淀粉样蛋白沉积病症的前驱症状。

本发明的另一个实施方案是鉴别患者处于淀粉样蛋白沉积疾病的标准临床诊断的前驱期的方法。所述方法包括使用淀粉样蛋白成像剂以获取患者的定量和定性数据。根据本发明，定量和定性的淀粉样蛋白成像将允许对淀粉样蛋白沉积疾病做出较早的且更准确的诊断，并将有助于抗淀粉样蛋白疗法的开发。本方法的目标患者可以是表现出临床痴呆病征的患者或表现出轻度认知障碍临床病征的患者。

本领域技术人员了解医师可采用确认痴呆临床病征的不同标准。这些标准包括但不限于Diagnostic and Statistical Manual of Mental Disorders，第3版(DSM-III)Alzheimer’s Disease Diagnostic and Treatment Center(ADDTC)，International Statistical Classification of Diseases，修订第10版(ICD-10)，National Institute of Neurological Disorders and StrokeAssociation Internationale pour Ia Recherche et l′Enseignment enNeurosciences (NINDS-AIREN)以及Diagnostic and Statistical Manual ofMental Disorders，第4版(DSM-IV)。参见Pohjasvaara等，Stroke，2000 31；2952-2957。

具有轻度认知障碍的患者的临床表征完全在医师的技能范围内。对患者阐明这一病况的测试涉及进行一系列的心理测验。所述临床诊断方法在例如Petersen等，Arch.Neurol.Vol.56，p 303-308，1999年3月中进行了全面综述和讨论。

仅基于临床测试，鉴定为MCI的对象可能被诊断为AD(以每年约10-15％的比例)，仍诊断为MCI，或者转而被诊断为“正常”(每年10-15％)(Larrieu，S，Letenneur，L，Orgogozo，JM，Fabrigoule，C，Amieva，H，Le，C，Barberger-Gateau，P，Dartigues，JF(1926)Incidence and outcome ofmild cognitive impairment in a population-based prospective cohort.Neurology.59：1594-1599)。

因此，存在值得考虑的与此临床诊断相关的预测不确定性。鉴定临床诊断为MCI的患者中脑淀粉样蛋白沉积的存在或不存在的能力有可能大大增加预测转化为AD的准确性。

与淀粉样蛋白沉积相关的疾病种类包括但不限于阿尔茨海默病、唐氏综合征、2型糖尿病、遗传性脑出血淀粉样变(荷兰人)、淀粉样蛋白A(活性的)、继发性淀粉样变、家族性地中海热、伴有荨麻疹和耳聋的家族性淀粉样蛋白肾病(穆-韦综合征)、淀粉样蛋白λL-链或淀粉样蛋白κL-链(自发性的，与骨髓瘤或巨球蛋白血症相关)、Aβ2M(长期血液透析)、ATTR(家族性淀粉样蛋白多神经病(葡萄牙人、日本人、瑞典人))、家族性淀粉样蛋白心肌病(丹麦人)、分离的心脏淀粉样蛋白、系统性老年淀粉样变、AIAPP或淀粉不溶素胰岛素瘤、心房钠利尿因子(分离的心房淀粉样蛋白)、降钙素原(甲状腺髓样瘤)、凝溶胶蛋白(家族性淀粉样变(芬兰人))、半胱氨酸蛋白酶抑制剂C(伴有淀粉样变的遗传性脑出血(冰岛人))、AApo-A-I(家族性淀粉样蛋白多神经病-Iowa)、AApo-A-II(小鼠加速衰老)、与纤维蛋白原相关的淀粉样蛋白；以及去唾液酸糖蛋白或Pr P-27(瘙痒病、克雅病、格-施-沙综合征、牛海绵状脑病)或在载脂蛋白E4等位基因纯合的人的情况下、以及与载脂蛋白E4等位基因纯合性相关的病况或亨廷顿病。在一个实施方案中，所述与淀粉样蛋白沉积相关的疾病是淀粉样蛋白斑块沉积疾病。与淀粉样蛋白沉积相关的一种具体疾病是AD。

因此，根据本发明，鉴别患者处于淀粉样蛋白沉积疾病前驱症状的基本方法必须具有：

(a)给有此需要的表现出临床痴呆病征的患者或表现出轻度认知障碍病征的患者施用有效量的上述式(I)化合物或其可药用盐；

(b)对所述患者成像以获取数据；以及

(c)分析所述数据以确定所述患者中的淀粉样蛋白的水平(参照标准患者)。

一个实施方案涉及诊断表现出可疑病因的痴呆患者的方法。该方法包括基于发现的淀粉样蛋白沉积来确定可疑病因的痴呆是否可能是AD或另一种淀粉样蛋白沉积病症。该方法包括给患者施用式(I)化合物、对所述患者成像以获取数据以及基于发现的淀粉样蛋白沉积来确定该可疑病因的痴呆是否是AD。

术语“可疑病因的痴呆性疾病”指这样的病况：人表现出临床评价(所述临床评价由痴呆性病症诊断领域的技术人员所共同做出的神经学、精神病学、医学和神经心理学方面的评价组成)，并且在临床评价后，所述评价者发现可能存在某些痴呆性病症的证据(基于主观记忆陈诉、通过与所述偏离正常机能者熟悉的病史陈诉者对记忆陈诉的描述、或者在本领域技术人员普遍使用的神经心理和临床测试方面的较差表现)，但不能发现任何单一临床上定义的痴呆型病症(比如AD、额颞叶痴呆、路易体痴呆、血管性痴呆、由于重性抑郁导致的假性痴呆、克雅病以及本领域技术人员已知的其它病症)的足够证据，或者发现该人表现多于一种单一痴呆性病症的证据，达到对于该人中这两种(或更多种)痴呆性病症的区分成问题的程度。

本发明的此实施方案使用淀粉样蛋白成像剂与非侵入性神经成像技术相结合，所述非侵入性神经成像技术比如磁共振波谱(MRS)或磁共振成像(MRI)、或γ成像比如正电子发射断层扫描(PET)或单光子发射计算机断层扫描(SPECT)，用于在体内量化淀粉样蛋白沉积。这些成像技术获得关于多个脑区域的数据。通过描绘“感兴趣区域或ROI”而得到对具体区域的量化。

根据本实施方案，可将使用上述成像技术之一获得的患者数据与来自标准患者的数据比较，并基于区分前驱症状患者与淀粉样蛋白沉积疾病的标准临床诊断的标准得出结论。

采用同样方案，可比较得自用于患者的成像技术的数据以便：

确定可疑病因的痴呆病症系由淀粉样蛋白沉积疾病所引起；

区分阿尔茨海默病与额颞叶痴呆；

监测患者以确定阿尔茨海默病的发作；

诊断临床已诊断为轻度认知障碍的患者的阿尔茨海默病；

鉴别患者处于阿尔茨海默病前驱期；

鉴别患者患有与淀粉样蛋白沉积相关的病症，其中所述患者表现有可疑病因的痴呆性病症；或者

鉴别患者患有阿尔茨海默病，其中所述患者表现有可疑病因的痴呆性病症。

淀粉样蛋白成像的数据分析

所得数据可用标准吸收值(SUV)或用药代动力学模型参数比如相对于参比组织如小脑的洛根分布体积比(Logan distribution volume ratio)(DVR)来定量表示。超过SUV或DVR典型对照值一倍标准差以上的对象被认为是“阳性”测试，并被认为处于淀粉样蛋白沉积疾病如AD的临床诊断的前驱期。具体地，如果对象在额叶皮质、顶叶皮质或后扣带回皮质中在40-60分钟的平均SUV大于1.0，则可认为其为“阳性”。此值将AD患者与初始人研究中的对照清楚地区分开(Klunk等，2004，Ann.Neurol.，55(3)：306-19)(参见图2)。同样，如果对象在额叶皮质、顶叶皮质或后扣带回皮质中的洛根DVR值超过1.5，则可认为其为“阳性”(参见图3)。这些脑区域和确切的截止值仅作为实例给出，进一步的研究可发现其它可用的脑区域，所述截止值可被改进，并且可应用其它的模型技术(比如房室模型、图解分析、参比组织模型或光谱分析)确定这些截止值。此外，可由图像定性解释扫描数据，比如图1中的图反映了SUV、洛根DVR或其它参数的区域性脑分布，其中解释PET扫描的领域的普通技术人员能确定淀粉样蛋白的定性量和分布与临床诊断的淀粉样蛋白沉积疾病的前驱期一致。

在本发明的另一个实施方案中，对含有至少一种淀粉样蛋白沉积物的对象或处于含有至少一种淀粉样蛋白沉积物的风险的对象进行体内或体外检测，所述淀粉样蛋白沉积物即包含至少一种促淀粉样变蛋白的沉积物，所述检测通过必须包含以下步骤的方法进行：

(a)给患有与淀粉样变相关疾病的对象施用可检测量的包含至少一种上述式(I)化合物及其可药用盐的药物组合物；和

(b)检测所述化合物与包含至少一种促淀粉样变蛋白的淀粉样蛋白沉积物的结合，其中所述促淀粉样变蛋白选自AL、AH、ATTR、Aβ2M、AA、AApoAI、AApoAII、AGel、ALys、AFib、ACys、ABri、ADan、APrP、ACal、AlAPP、AANF、APro、AIns、AMed、AKer、A(tbn)和ALac。

在原发性全身淀粉样变(AL)中，所述促淀粉样变蛋白可以是由无性系的浆细胞产生的异常一致的单克隆免疫球蛋白轻链(κ或λ)。原纤维在肾、心、肝和其它器官/组织中沉积。

在少数情况下，免疫球蛋白链淀粉样变原纤维仅包含重链序列而不含轻链序列。在这些情况下，所述疾病称为“重链淀粉样变”(AH)。

在转甲状腺素蛋白淀粉样变中，所述前体蛋白是正常或突变序列的TTR(一种在肝脏和脉络丛中合成的转运蛋白)。TTR是4个同样的每个127个氨基酸亚基组成的四聚体。正常序列的TTR在老年(＞70岁)个体的心室中形成淀粉样蛋白沉积物；此疾病又称为“老年性心脏淀粉样变”。TTR心脏淀粉样变的流行性随年龄而逐渐增加，影响着25％或更多的超过90岁的老年人群。正常序列的ATTR可以是偶然尸检所见，或者其可引起临床症状(例如心力衰竭和心律失常)。

TTR的点突变增加了TTR形成淀粉样蛋白的趋势。形成淀粉样变的TTR突变是作为具有可变外显率的常染色体显性疾病遗传的。已知超过60种的形成淀粉样变的TTR突变。最普遍的TTR突变是TTR Val30Met(在葡萄牙、日本和瑞典常见)和TTR Val122Ile(3.9％的非洲裔美国人携带)。形成淀粉样变的TTR突变主要引起在外周神经、心脏、胃肠道和玻璃体中的沉淀物。

在β2微球蛋白淀粉样变中，所述前体蛋白是正常的β微球蛋白(β2M)，其为主要组织相容性复合体的轻链组分。在临床环境下，β2M与进行透析的患者相关，在罕见情况下与不进行透析的肾衰竭患者相关。

β2M通常在肾脏中发生分解代谢。在肾衰竭患者中，蛋白质在血清中累积。常规的透析膜不会除去β2M；因此，透析患者的血清水平可高达参比范围值的30-60倍。所涉及的典型器官包括腕关节韧带、可能的滑膜(引起关节病和骨囊肿)和心脏、胃肠道、肝、肺、前列腺、肾上腺和舌。

淀粉样蛋白A(AA)淀粉样变是全世界内系统性淀粉样变的最普遍形式。其发生于感染性或非感染性病因的慢性炎性疾病的过程中。在AA中，肾、肝和脾是主要的涉及部位。

载脂蛋白AI淀粉样变(AApoAI)是一种由apoAI基因的点突变引起的常染色体显性的淀粉样变。通常，此淀粉样变是一种显著的肾淀粉样蛋白。一些家族具有外周神经病或心脏病。ApoAI(可能来自正常序列)还是老年人主动脉中局限性淀粉样蛋白斑块中的原纤维前体。

载脂蛋白AII淀粉样变(AApoAII)是一种由apoAII基因的点突变引起的常染色体显性的淀粉样变。所述的具有此症状的两个家族各自在终止密码子上携带点突变，导致形成异常长的蛋白质。

凝溶胶蛋白淀粉样变(AGel)中的前体蛋白是调节肌动蛋白的蛋白凝溶胶蛋白。淀粉样蛋白原纤维包括含有点突变的凝溶胶蛋白片段。

纤维蛋白原淀粉样变(AFib)是一种由纤维蛋白原α链基因的点突变引起的常染色体显性的淀粉样变。

溶菌酶淀粉样变(ALys)是一种由溶菌酶基因的点突变引起的常染色体显性的淀粉样变。

半胱氨酸蛋白酶抑制剂C淀粉样变(ACys)中的前体蛋白是半胱氨酸蛋白酶抑制剂C，其为一种含有点突变的半胱氨酸蛋白酶抑制剂。此病况临床上命名为HCHWA(冰岛型)。ACys是常染色体显性的。临床症状包括在生命中开始的第二个十年或第三个十年中发生多次中风和精神状态改变。发病机制在于突变的半胱氨酸蛋白酶抑制剂之一广泛分布于组织中，但原纤维仅在脑血管中形成；因此，认为局部病况在原纤维形成中起到作用。

朊病毒蛋白淀粉样变(APrP)中的前体蛋白是一种朊病毒蛋白，其为一种质膜糖蛋白。病因是感染性的(即库鲁病)或遗传性的(即克雅病(CJD)、格-施-沙(GSS)综合征、致死性家族性失眠(FFI))。感染单位是朊病毒蛋白，其引起由宿主染色体基因编码的同源蛋白质的构象改变。CJD、GSS和FFI的患者在朊病毒蛋白基因上携带常染色体显性的形成淀粉样蛋白的突变；因此，甚至在缺少感染性触发剂的情况下也形成淀粉样变。

在降钙素淀粉样变中(ACal)，所述前体蛋白是降钙素(一种由甲状腺合成的调节钙的激素)。具有甲状腺髓样癌的患者可能在肿瘤中发生局限性的淀粉样蛋白沉积，其由正常序列的降钙素原(ACal)组成。推测的发病机制是局部钙形成增加，导致足够高的引起聚合和原纤维形成的局部肽浓度。

在胰岛淀粉样蛋白多肽淀粉样变(AIAPP)中，所述前体蛋白是胰岛淀粉样蛋白多肽(IAPP)，又称为淀粉不溶素。IAPP是一种由胰岛β细胞分泌的蛋白，与胰岛素共同储存在分泌颗粒中并与胰岛素一起释放。通常，IAPP调节骨骼肌中的胰岛素活性。IAPP淀粉样蛋白发现于胰岛素瘤中以及很多患有2型糖尿病的患者的胰腺中。

心房钠利尿因子淀粉样变与前体蛋白心房钠利尿因子(ANF)相关，所述心房钠利尿因子是一种控制盐和水动态平衡的激素，其由心房合成。淀粉样蛋白沉积物局限于心房。此病况在老年人中高度流行。心房钠利尿因子淀粉样变(AANF)在患有长期存在的充血性心力衰竭的患者中最为常见，大概是由于持续产生ANF所致。

在促乳素淀粉样蛋白(APro)中，促乳素或促乳素片段发现于垂体淀粉样蛋白中。此病况常见于老年人中，并且还已报道于具有产生促乳素的垂体瘤患者的淀粉样瘤(amyloidoma)中。

皮肤的淀粉样蛋白与一些抗角蛋白抗体反应而产生局限性形式的淀粉样变。然而，对原纤维的确切身份没有在角蛋白淀粉样物质中得到化学确认，但是它们被称作角蛋白淀粉样蛋白(AKer)。

主动脉内淀粉样蛋白发生于大多数超过60岁的人中。内淀粉样蛋白(AMed)源自乳凝集素(lactadherin)的蛋白水解片段，所述乳凝集素为一种由哺乳动物上皮表达的糖蛋白。

家族性英国型痴呆(FBD)的神经病理学特征在于独特的形成淀粉样蛋白的蛋白ABri的沉积。它是前体蛋白BRI的异常形式的片段。

在家族性丹麦型痴呆(FDD)中，在BRI基因3’区域的密码子265和266之间的十聚体副本源自名为ADan的淀粉样肽(比由正常BRI基因产生的野生型肽长11个残基)。已发现ADan沉积物广泛分布于FDD病例的CNS中。ADan的沉积物主要是非原纤维聚合体。

ABri和ADan肽是源自较大的称为BRI前体蛋白并由13号染色体上的BRI基因编码的膜锚定前体蛋白的片段。

牙源性钙化上皮瘤(Pindborg tumor)的特征在于产生大量的淀粉样蛋白并存在钙化的板层小体。与此综合征相关的淀粉样蛋白尚未命名，但通常称为A(tbn)。

淀粉样蛋白原纤维可以在缺乏血清淀粉样蛋白P(SAP)成分和硫酸肝素蛋白聚糖的情况下由几种天然多肽(比如胰岛素)形成。这产生了淀粉样蛋白AIns，其前体为胰岛素。

另一种蛋白乳铁传递蛋白作为家族性上皮下角膜淀粉样变中的主要原纤维蛋白而报道。推测结构异常或异常增加的血清浓度产生淀粉样蛋白ALac。

通过本发明的硫黄素化合物检测促淀粉样变蛋白。所述硫黄素化合物靶向至少一种促淀粉样变蛋白，所述促淀粉样变蛋白源自至少一种选自以下的蛋白前体：免疫球蛋白轻链、免疫球蛋白重链、转甲状腺素蛋白、β2微球蛋白、(载脂蛋白)血清AA((Apo)serum AA)、载脂蛋白AI、载脂蛋白AII、凝溶胶蛋白、溶菌酶、纤维蛋白原α链、半胱氨酸蛋白酶抑制剂C、ABriPP、ADanPP、朊病毒蛋白、降钙素(原)、胰岛淀粉样多肽、心房利钠因子、促乳素、胰岛素、乳凝集素、角膜上皮素(kerato-epithelin)、与牙源性钙化上皮瘤相关的前体蛋白(tbn)以及乳铁传递蛋白。使得受影响组织发生不同综合征或疾病的正是这些蛋白标靶。参见Buxbaum，Curr.Opin Rheumatol 16：67-75(2003)。还参见Merlini和Westermark，J InternMed 255：159-178(2004)。

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给出以下实施例以举例说明本发明。然而，应当理解，本发明并不限于在这些实施例中所描述的具体条件或细节。通过整个说明书，任何以及全部的可公开获得的文件的参考，包括美国专利，均通过引用具体并入本文中，如同在本文中将其全部列出一样。

实施例

合成实施例

实施例1：5-甲氧基-2-(4’-氟苯基)苯并噻唑的合成

方案：试剂和条件：a.Na₂S.9H₂O，回流，20h，b.4-氟代苯甲醛，DMSO，110℃，5h

a.2-氨基-4-甲氧基苯硫酚：在氮气下并在搅拌下将在水(45mL)中的4-氯-3-硝基苯甲醚(5.0g，26.7mmol)和Na₂S.9H₂O(17.3g，72.1mmol)的混合物回流20小时。将反应混合物冷却至室温并以5％HCl中和至pH7。以乙酸乙酯(20mL×3)萃取水溶液。合并萃取物，以MgSO₄干燥并蒸发至干，得到所期望的化合物(4.1g，98.9％)。

b.5-甲氧基-2-(4’-氟代苯基)苯并噻唑：将2-氨基-4-甲氧基苯酚(50mg，0.33mmol)和4-氟苯甲醛(45mg，0.36mmol)在DMSO(1mL)中的混合物在110℃下加热5小时。将反应混合物冷却至室温，倒入水(5mL)中，并以乙酸乙酯(3×2mL)萃取。合并萃取物并以水清洗，以MgSO₄干燥，蒸发至干，将残留物通过制备性TLC(己烷∶乙酸乙酯4∶1)纯化，得到所期望化合物的类白色固体(35mg，40.9％)。

¹H-NMR(300MHz，丙酮-d₆)δ：8.13-8.20(m，2H)，7.94(d，J＝8.8Hz，1H)，7.56(d，J＝2.4Hz，1H)，7.32(t，J1＝J2＝8.7Hz，2H)，7.10(dd，J₁＝2.4Hz，J₂＝8.8Hz，1H)，3.93(s，3H).

实施例2：6-甲氧基-2-(2’-羟基-4’-氟苯基)苯并噻唑的合成

方案：PPA，140℃，2.5h

向2-羟基-4-氟苯甲酸(61mg，0.39mmol)和2-氨基-5-甲氧基苯硫酚(93mg，0.6mmol)的混合物中加入多聚磷酸(“PPA”)(2.4g)。在搅拌下于140℃将混合物加热2.5小时。冷却至室温以后，向混合物中缓慢加入饱和的NaHCO₃以中和PPA，并用EtOAc萃取混合物。合并有机层并蒸发至干。使用制备性硅胶TLC(己烷/乙酸乙酯3/1)分离残留物，得到标题产物(25mg，0.091mmol，产率23％)。

¹H-NMR(300MHz，CDCl₃，ppm)：δ12.68(宽峰，1H)，7.82(d，1H)，7.57(dd，1H)，7.31(d，1H)，7.07(dd，1H)，6.76(dd，1H)，6.41(m，1H)，3.88(s，3H).

实施例3：6-甲氧基-2-(4’-氟苯基)苯并噻唑的合成

方案：DMSO，120℃，2h

将2-氨基-5-甲氧基苯酚(155mg，1mmol)和4-氟苯甲醛(123mg，1mmol)在DMSO(2mL)中的混合物在120℃下加热2小时。将反应混合物冷却至室温，倒入水(10mL)中，并以乙酸乙酯(3×10mL)萃取。合并萃取物并以水清洗，以MgSO₄干燥，蒸发至干，将残留物通过快速柱(己烷/乙酸乙酯95/5)纯化，得到所期望化合物的类白色固体(103mg，39.8％)。

¹H-NMR(300MHz，丙酮-d₆ppm)δ：8.14(dd，J1＝5.3Hz，J2＝9.0Hz，2H)，7.92(d，J＝8.9Hz，1H)，7.63(d，J＝2.5Hz，1H)，7.33(t，J₁＝J₂＝8.7Hz，2H) 7.15(dd，J₁＝2.6Hz，J₂＝8.9Hz，1H)，3.91(s，3H).

实施例4：2-(2’-氨基-4’-氟苯基)苯并噻唑的合成

方案：PPA，130℃，18h

在搅拌下将2-氨基-4-氟苯甲酸(310mg，2mmol)、2-氨基苯硫酚(250mg，2mmol)和PPA(～2g)的混合物于130℃下加热18小时。在冷却至室温后，向混合物中缓慢加入饱和的NaHCO₃以中和PPA，并以EtOAc萃取溶液。合并萃取物并蒸发至干，通过快速柱(己烷/乙酸乙酯4/1)纯化残留物，得到所期望的产物(140.7mg，产率28.8％)。

¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆，ppm)：δ8.30-8.09(m，2H)，7.79(dd，J₁＝6.4Hz，J₂＝8.8Hz，1H)，7.71(s，2H，NH₂)，7.49-7.64(m，2H)，6.75(dd，J₁＝2.6Hz，J₂＝11.8Hz，1H)，6.58(dt，J₁＝J₂＝8.3Hz，J₃＝2.6Hz，1H).

通过类似方法，利用本领域技术人员已知的常规有机转化和取代制备上述表1和表2中所公开的其它苯并噻唑化合物。

生物学实施例

进入小鼠脑的研究

将在乙醇中的[F-18]-6-甲氧基-2-(4’-氟苯基)苯并噻唑用生理盐水稀释以制备每mL含有约500微居里的溶液。将野生型瑞士Webster小鼠称重，通过侧尾静脉注射约30微居里，并在注射后的不同时间处死。在死亡时通过心脏穿刺取出全血样品，迅速取下脑并解剖为小脑和全脑(无脑干)。还除去每只小鼠的股骨以测定[¹⁸F]氟的代谢程度。在带有校准注射液部分的γ射线井式计数器中测定这些部分，将样品按注射时间进行衰变校正。称重样品，确定每克组织注射剂量的百分数(％ID/g)并按小鼠体重归一化((％ID＊kg)/g)。

进入狒狒脑的研究

将40kg的狒狒麻醉、固定并置于通风设备上。将狒狒置于PET扫描仪中以对脑成像，进行透射扫描以校正衰减。给狒狒静脉内注射含有8mCi的[F-18]-6-甲氧基-2-(4’-氟苯基)苯并噻唑的溶液，并在注射后2小时中在一系列逐渐增加的数据采集时间的箱中对脑成像。采集数据后，将图像重构并画出感兴趣的区域。对于每个区域中产生校正衰变和注意力的时间-活性曲线(TAC)，以测定每个脑区域中放射性的定量时间过程。这些TAC表明了放射性示踪剂的极好的脑穿透性以及放射性从正常狒狒脑中的快速清除。这些体内性质连同所述配体在体外与聚集的淀粉样蛋白的相对高的亲和力表明所述化合物是潜在有用的淀粉样蛋白成像剂。

与Aβ合成肽的结合亲和力的表征

如前所述，使用合成的Aβ(1-40)和2-(4’-[³H]甲氨基-苯基)-苯并噻唑([³H]BTA-1)在磷酸盐缓冲盐水(pH 7.4)中对苯并噻唑衍生物结合的特征进行分析(Klunk等，Life Sci.69：1471(2001)；Mathis等，Bioorg.Med.Chem.Lett.，12：295(2002))。下表列出了示例性的苯并噻唑化合物的抑制常数(Ki)，用于表示与合成的Aβ(1-40)竞争对[³H]BTA-1的结合。Ki值低于20nM的化合物示例性地用作体内PET放射性示踪剂。

Claims

1.一种结合淀粉样蛋白的式(I)化合物或其可药用盐：

其中

Y是H、NO₂、-NR’₃ ⁺、F、Cl、Br、I或-(CR’₂)_n-X；

其中

X是F、Cl、Br或I；和

n为1～5；

R’是H或低级烷基；

R₃-R₁₀独立地选自H、F、Cl、Br、I、C₁-C₅烷基、(CH₂)_1-3-OR₁₁、CF₃、-(CH₂)_1-3-X、-O-(CH₂)_1-3-X、CN、-CO-R₁₁、-N(R₁₁)₂、-N(R’)₃ ⁺、-NO₂、-CO-N(R₁₁)₂、-O-(CO)-R₁₁、OR₁₁、SR₁₁、COOR₁₁、R_ph、-CR₁₁＝CR₁₁-R_ph和-C(R₁₁)₂-C(R₁₁)₂-R_ph，其中

X是F、Cl、Br或I；和

R_ph是任选被选自以下的一个或更多个取代基取代的苯基：F、Cl、Br、I、C₁-C₅烷基、(CH₂)_1-3-OR₁₁、CF₃、-(CH₂)_1-3-X、-O-(CH₂)_1-3-X、CN、-CO-R₁₁、-N(R₁₁)₂、-CO-N(R₁₁)₂、-O-(CO)-R₁₁、OR₁₁、SR₁₁和COOR₁₁，

每个R₁₁独立地为H或C₁-C₅烷基；和

Y或R³-R¹⁰包含至少一种选自以下的可检测标记物：¹³¹I、¹²³I、¹²⁴I、¹²⁵I、⁷⁶Br、⁷⁵Br、¹⁸F、¹⁹F、¹¹C、¹³C、¹⁴C和³H。

2.根据权利要求1的结合淀粉样蛋白的化合物，其中R₃-R₁₀独立地选自H、F、Cl、Br、I、-N(R₁₁)₂和OR₁₁。

3.根据权利要求2的结合淀粉样蛋白的化合物，其中R⁸和R⁹独立地为OR₁₁。

4.根据权利要求3的结合淀粉样蛋白的化合物，其中R₇和R¹⁰各自为H。

5.根据权利要求4的结合淀粉样蛋白的化合物，其中R₃、R₄、R₅和R₆各自为H。

6.根据权利要求1的结合淀粉样蛋白的化合物，其中Y选自F、Cl、Br、I和-NO₂。

7.根据权利要求6的结合淀粉样蛋白的化合物，其中Y为F。

8.根据权利要求1的结合淀粉样蛋白的化合物，其中R₃、R₄、R₅和R₆、R₇以及R₁₀各自为H，R₈和R₉独立地为OR₁₁。

9.根据权利要求1的结合淀粉样蛋白的化合物，其中Y包含可检测的标记物。

10.根据权利要求1的结合淀粉样蛋白的化合物，其中所述化合物选自：

11.根据权利要求1的结合淀粉样蛋白的化合物，其具有下式：

12.根据权利要求1的结合淀粉样蛋白的化合物，其具有下式：

13.根据权利要求1的结合淀粉样蛋白的化合物，其具有下式：

14.一种药物组合物，其包含：

(i)有效量的根据权利要求1的结合淀粉样蛋白的化合物；和

(ii)可药用载体。

15.一种体内检测一种或更多种淀粉样蛋白沉积物的方法，包括：

(i)给哺乳动物施用有效量的根据权利要求1的结合淀粉样蛋白的化合物，其中所述化合物会结合所述哺乳动物内的任何一种或更多种淀粉样蛋白沉积物；和

(ii)检测该化合物与哺乳动物体内一种或更多种淀粉样蛋白沉积物的结合。

16.根据权利要求15的方法，其中所述一种或更多种淀粉样蛋白沉积物位于所述哺乳动物的脑内。

17.根据权利要求15的方法，其中所述哺乳动物是疑似患有阿尔茨海默病、家族性阿尔茨海默病、唐氏综合征或载脂蛋白E4等位基因纯合的人。

18.根据权利要求15的方法，其中所述检测是通过γ成像、磁共振成像或磁共振波谱实现的。

19.根据权利要求18的方法，其中所述检测是通过γ成像实现的。

20.根据权利要求19的方法，其中所述γ成像是PET或SPECT。

21.根据权利要求15的方法，其中静脉内施用所述化合物。

22.一种体外检测一种或更多种淀粉样蛋白沉积物的方法，包括：

(i)使机体组织接触有效量的根据权利要求1的结合淀粉样蛋白的化合物，其中所述化合物会结合所述组织内的任何一种或更多种淀粉样蛋白沉积物；和

(ii)检测所述化合物与所述组织内一种或更多种淀粉样蛋白沉积物的结合。

23.根据权利要求22的方法，其中所述化合物处于溶液中，所述溶液还含有25-99％的乙醇，所述溶液的余下部分为水。

24.根据权利要求22的方法，其中所述溶液包含0-50％的乙醇和0.0001～100μM的所述化合物。

25.根据权利要求22的方法，其中所述检测通过亮视野显微术、荧光显微术、激光共聚焦显微术和交叉极化显微术实现。

26.根据权利要求22的方法，其中所述方法还包括：

(iii)从所述组织中分离出与所述化合物结合的一种或更多种淀粉样蛋白沉积物；和

(iv)量化与所述化合物结合的所述一种或更多种淀粉样蛋白沉积物。

27.一种区分患有阿尔茨海默病的脑与正常脑的方法，包括：

(i)获取来自正常哺乳动物和疑似患有阿尔茨海默病的哺乳动物的(a)小脑和(b)同一脑的其它区域的组织；

(ii)使所述组织与根据权利要求1的结合淀粉样蛋白的化合物接触；

(iii)量化与所述化合物结合的淀粉样蛋白；

(iv)计算(a)脑中除小脑以外的区域中淀粉样蛋白的量相对于(b)小脑中淀粉样蛋白的量的比例；以及

(v)将正常哺乳动物的该比例与疑似患有阿尔茨海默病的哺乳动物的该比例进行比较。

28.根据权利要求27的方法，其中将对象中(i)所述化合物与除小脑之外的脑区域的结合与(ii)所述化合物与小脑的结合的比例和正常对象中的该比例进行比较。

29.一种在人或动物活检或尸检组织中检测淀粉样蛋白沉积物的方法，所述方法包括以下步骤：

(a)使用结合淀粉样蛋白的式(I)化合物或其可药用盐的溶液孵育福尔马林固定的或新鲜冷冻的组织以形成被标记的沉积物：

其中

Y是H、NO₂、-NR’₃ ⁺、F、Cl、Br、I或-(CR’₂)_n-X；

其中

X是F、Cl、Br或I；和

n为1～5；

R’是H或低级烷基；

X是F、Cl、Br或I；和

每个R₁₁独立地为H或C₁-C₅烷基；和

Y或R³-R¹⁰包含至少一种选自以下的可检测标记物：¹³¹I、¹²³I、¹²⁴I、¹²⁵I、⁷⁶Br、⁷⁵Br、¹⁸F、¹⁹F、¹¹C、¹³C、¹⁴C和³H；

(b)检测所述被标记的沉积物。

30.根据权利要求29的方法，其中所述溶液含有25-100％的乙醇，所述溶液的余下部分为水，其中所述溶液被式(I)化合物饱和。

31.根据权利要求30的方法，其中所述溶液包含含有0-50％乙醇的水缓冲液，其中所述溶液含有0.0001～100μM的式(I)化合物。

32.根据权利要求29的方法，其中所述检测通过选自以下的显微技术而实现：亮视野显微术、荧光显微术、激光共聚焦显微术和交叉极化显微术。

33.一种量化活检或尸检组织中的淀粉样蛋白的方法，所述方法包括以下步骤：

a)使结合淀粉样蛋白的式(I)化合物或其可药用盐的放射性标记衍生物与活检组织或尸检组织的匀浆一起孵育，其中所述化合物中至少一个取代基被选自¹²⁵I、³H和含碳取代基的放射性标记物所标记，其中至少一个碳是¹⁴C；

其中

Y是H、NO₂、-NR’₃ ⁺、F、Cl、Br、I或-(CR’₂)_n-X；

其中

X是F、Cl、Br或I；和

n为1～5；

R’是H或低级烷基；

X是F、Cl、Br或I；和

每个R₁₁独立地为H或C₁-C₅烷基；和

b)将与组织结合的式(I)化合物的放射性标记衍生物和未与组织结合的式(I)化合物的放射性标记衍生物分离，

c)量化与组织结合的式(I)化合物的放射性标记衍生物，以及

d)通过与标准物比较，将与组织结合的式(I)化合物的放射性标记衍生物的单位转换为每100mg组织中淀粉样蛋白的微克数的单位。

34.一种使结合淀粉样蛋白的式(I)化合物或其可药用盐与脑组织中的淀粉样蛋白斑块选择性结合但不与脑组织中的神经原纤维缠结结合的方法，所述脑组织中包含淀粉样蛋白斑块和神经原纤维缠结二者，所述方法包括在体外结合或染色试验中使所述淀粉样蛋白斑块与浓度低于约10nM的式(I)化合物接触：

其中

Y是H、NO₂、-NR’₃ ⁺、F、Cl、Br、I或-(CR’₂)_n-X；

其中

X是F、Cl、Br或I；和

n为1～5；

R’是H或低级烷基；

X是F、Cl、Br或I；和

每个R₁₁独立地为H或C₁-C₅烷基；和

35.一种在体内使结合淀粉样蛋白的式(I)化合物或其可药用盐与脑组织中的淀粉样蛋白斑块选择性结合但不与脑组织中的神经原纤维缠结结合的方法，所述脑组织中包含淀粉样蛋白斑块和神经原纤维缠结二者，所述方法包括施用有效量的式(I)化合物或其可药用盐，以在体内使所施用化合物的血液浓度保持低于约10nM：

其中

Y是H、NO₂、-NR’₃ ⁺、F、Cl、Br、I或-(CR’₂)_n-X；

其中

X是F、Cl、Br或I；和

n为1～5；

R’是H或低级烷基；

X是F、Cl、Br或I；和

每个R₁₁独立地为H或C₁-C₅烷基；和

36.一种用于检测对象中包含至少一种促淀粉样变蛋白的至少一种淀粉样蛋白沉积物的体内或体外方法，所述方法包括以下步骤：

(a)给患有与淀粉样变相关的疾病的患者施用可检测量的药物组合物，所述药物组合物包含至少一种结合淀粉样蛋白的式(I)化合物或其可药用盐以及可药用载体，

其中

Y是H、NO₂、-NR’₃ ⁺、F、Cl、Br、I或-(CR’₂)_n-X；

其中

X是F、Cl、Br或I；和

n为1～5；

R’是H或低级烷基；

X是F、Cl、Br或I；和

每个R₁₁独立地为H或C₁-C₅烷基；和

Y或R³-R¹⁰包含至少一种选自以下的可检测标记物：¹³¹I、¹²³I、¹²⁴I、¹²⁵I、⁷⁶Br、⁷⁵Br、¹⁸F、¹⁹F、¹¹C、¹³C、¹⁴C和³H；和

37.根据权利要求36的方法，其中所述对象患有与系统性淀粉样变相关的疾病。

38.根据权利要求37的方法，其中所述至少一种淀粉样蛋白沉积物位于所述对象的中胚层组织内。

39.根据权利要求38的方法，其中所述组织选自外周神经、皮肤、舌、关节、心或肝。

40.根据权利要求37的方法，其中所述至少一种淀粉样蛋白沉积物位于实质器官内。

41.根据权利要求40的方法，其中所述器官选自脾、肾、肝和肾上腺。

42.根据权利要求37的方法，其中所述与系统性淀粉样变相关的疾病选自多发性骨髓瘤、巨球蛋白血症、淋巴瘤、慢性炎性疾病、类风湿性关节炎、感染性疾病、皮肌炎、硬皮病、局限性肠炎、溃疡性结肠炎、结核病、慢性骨髓炎、支气管扩张、皮肤脓肿、肺脓肿、癌症、霍奇金病、家族遗传性淀粉样变、家族性地中海热、家族性痴呆和家族性淀粉样多神经病。

43.根据权利要求42的方法，其中所述皮肤脓肿或肺脓肿由皮下使用海洛因而引起。

44.根据权利要求36的方法，其中所述检测选自γ成像、磁共振成像和磁共振波谱。

45.根据权利要求44的方法，其中所述检测通过γ成像进行，并且所述γ成像是PET或SPECT。

46.根据权利要求36的方法，其中所述药物组合物通过静脉内注射施用。

47.根据权利要求36的方法，其中所述对象因慢性肾衰竭而正在接受透析。

48.根据权利要求36的方法，其中所述对象正患有与局限性淀粉样变相关的疾病。

49.根据权利要求48的方法，其中所述至少一种淀粉样蛋白沉积物位于选自以下的组织内：腱鞘、关节、主动脉、甲状腺、胰岛、老化垂体、医源性组织、心房和角膜。

50.根据权利要求48的方法，其中所述至少一种淀粉样蛋白沉积物位于胰腺内。

51.根据权利要求48的方法，其中所述与局限性淀粉样变相关的疾病选自原发性骨髓瘤、家族性痴呆、海绵状脑病、c细胞甲状腺肿瘤、胰岛素瘤、催乳素瘤和牙源性钙化上皮瘤。

52.一种鉴别患者处于与淀粉样蛋白沉积相关疾病的前驱期的方法，包括：

(a)给表现有临床痴呆征兆或轻度认知障碍临床征兆的患者施用结合淀粉样蛋白的式(I)化合物或其可药用盐：

其中

Y是H、NO₂、-NR’₃ ⁺、F、Cl、Br、I或-(CR’₂)_n-X；

其中

X是F、Cl、Br或I；和

n为1～5；

R’是H或低级烷基；

X是F、Cl、Br或I；和

每个R₁₁独立地为H或C₁-C₅烷基；和

Y或R³-R¹⁰包含至少一种选自以下的可检测标记物：¹³¹I、¹²³I、¹²⁴I、¹²⁵I、⁷⁶Br、⁷⁵Br、¹⁸F、¹⁹F、¹¹C、¹³C、¹⁴C和³H；然后

(b)对所述患者成像以获取数据；以及

53.根据权利要求52的方法，其中所述患者被诊断为轻度认知障碍。

54.根据权利要求52的方法，其中所述淀粉样疾病是阿尔茨海默病。

55.根据权利要求52的方法，其中所述成像选自γ成像、磁共振成像和磁共振波谱。

56.根据权利要求55的方法，其中所述成像通过γ成像进行，并且所述γ成像是PET或SPECT。

57.根据权利要求52的方法，其中所述数据将可疑病因的痴呆性疾病确定为由淀粉样蛋白沉积疾病引起。

58.根据权利要求57的方法，包括区分阿尔茨海默病与额颞叶痴呆。

59.根据权利要求53的方法，还包括监测所述患者以确定阿尔茨海默病的发作。

60.根据权利要求52的方法，其还包括在临床诊断为轻度认知障碍的患者中诊断阿尔茨海默病。

61.根据权利要求52的方法，其中所述与淀粉样蛋白沉积相关的疾病是阿尔茨海默病。

62.根据权利要求52的方法，其中所述患者表现出可疑病因的痴呆性病症。

63.根据权利要求62的方法，其中所述患者患有未诊断的AD。

64.根据权利要求52的方法，其中所述患者患有未诊断的AD。

65.一种确定淀粉样变治疗疗效的方法，包括：

(a)给有此需要的患者施用有效量的结合淀粉样蛋白的式(I)化合物或其可药用盐：

其中

Y是H、NO₂、-NR’₃ ⁺、F、Cl、Br、I或-(CR’₂)_n-X；

其中

X是F、Cl、Br或I；和

n为1～5；

R’是H或低级烷基；

X是F、Cl、Br或I；和

每个R₁₁独立地为H或C₁-C₅烷基；和

(b)对所述患者成像；然后

(c)给所述有此需要的患者施用至少一种抗淀粉样蛋白剂；

(d)随后给所述有此需要的患者施用有效量的式(I)化合物；

(e)对所述患者成像；以及

66.根据权利要求65的方法，其中所述药剂包含一种或更多种针对Aβ肽的抗体。

67.根据权利要求65的方法，其中所述药剂包含β分泌酶和/或γ分泌酶的一种或更多种抑制剂。

68.根据权利要求65的方法，其中所述药剂包含与Aβ1-42结合的小分子。

69.根据权利要求68的方法，其中所述药剂是诱饵肽。

70.根据权利要求65的方法，其中所述淀粉样变是阿尔茨海默病。

71.根据权利要求65的方法，其中所述成像选自γ成像、磁共振成像和磁共振波谱。

72.根据权利要求71的方法，其中所述成像通过γ成像进行，并且所述γ成像是PET或SPECT。

73.根据权利要求68的方法，其中所述药剂是外周降低剂。

74.选自以下的化合物：

75.根据权利要求74的化合物，其中所述化合物选自：

76.一种药物组合物，其包含：

(i)有效量的根据权利要求74的结合淀粉样蛋白的化合物；和

(ii)可药用载体。

77.一种体内检测一种或更多种淀粉样蛋白沉积物的方法，包括：

(i)给哺乳动物施用有效量的根据权利要求74的结合淀粉样蛋白的化合物，其中所述化合物会在所述哺乳动物体内结合任何一种或更多种淀粉样蛋白沉积物；和

(ii)检测所述化合物在所述哺乳动物体内与一种或更多种淀粉样蛋白沉积物的结合。

78.一种体外检测一种或更多种淀粉样蛋白沉积物的方法，包括：

(i)使机体组织与有效量的根据权利要求74的结合淀粉样蛋白的化合物接触，其中所述化合物会在所述组织内结合任何一种或更多种淀粉样蛋白沉积物；和

79.一种区分患有阿尔茨海默病的脑与正常脑的方法，包括：

(i)获取来自正常哺乳动物和疑似患有阿尔茨海默病的哺乳动物的(a)小脑和(b)同一脑的另一个区域的组织；

(ii)使所述组织与根据权利要求74的结合淀粉样蛋白的化合物接触；

(iii)量化与所述化合物结合的淀粉样蛋白；

(iv)计算(a)在脑中除小脑以外的区域内淀粉样蛋白的量与(b)小脑中淀粉样蛋白的量的比例；以及

80.一种在人或动物的活检或尸检组织中检测淀粉样蛋白沉积物的方法，所述方法包括以下步骤：

(a)使用根据权利要求74的结合淀粉样蛋白的化合物或其可药用盐的溶液孵育福尔马林固定的或新鲜冷冻的组织以形成被标记的沉积物，和

(b)检测所述被标记的沉积物。

81.一种在活检或尸检组织中量化淀粉样蛋白的方法，所述方法包括以下步骤：

a)使根据权利要求74的结合淀粉样蛋白的化合物或其可药用盐的放射性标记衍生物与活检组织或尸检组织的匀浆一起孵育，其中所述化合物中至少一个取代基被选自¹²⁵I、³H和含碳取代基的放射性标记物所标记，其中所述含碳取代基中至少一个碳是¹⁴C；

b)将与组织结合的式(I)化合物的放射性标记衍生物与未与组织结合的式(I)化合物的放射性标记衍生物分离，

c)量化所述与组织结合的式(I)化合物的放射性标记衍生物，以及

d)通过与标准物比较，将与组织结合的式(I)化合物的放射性标记衍生物的单位转换为每100mg组织的淀粉样蛋白的微克数单位。

82.一种使权利要求74的结合淀粉样蛋白的化合物或其可药用盐与脑组织中的淀粉样蛋白斑块选择性结合但不与脑组织中的神经原纤维缠结结合的方法，所述脑组织中含有淀粉样蛋白斑块和神经原纤维缠结二者，所述方法包括在体外结合或染色试验中使所述淀粉样蛋白斑块与浓度低于约10nM的所述化合物接触。

83.一种使权利要求74的结合淀粉样蛋白的化合物或其可药用盐在体内与脑组织中的淀粉样蛋白斑块选择性结合但不与脑组织中的神经原纤维缠结结合的方法，所述脑组织中含有淀粉样蛋白斑块和神经原纤维缠结二者，所述方法包括施用有效量的所述化合物或其可药用盐，以使所施用化合物的血液浓度在体内保持低于约10nM。

84.一种用于检测对象中含有至少一种促淀粉样变蛋白的至少一种淀粉样蛋白沉积物的体内或体外方法，所述方法包括以下步骤：

(a)给患有与淀粉样变相关疾病的对象施用可检测量的药物组合物，所述药物组合物包含至少一种根据权利要求74的结合淀粉样蛋白的化合物或其可药用盐以及可药用载体，和

85.一种鉴别患者处于与淀粉样蛋白沉积相关疾病的前驱期的方法，包括：

(a)给表现有临床痴呆征兆或轻度认知障碍临床征兆的患者施用根据权利要求74的结合淀粉样蛋白的化合物或其可药用盐；

(b)对所述患者成像以获取数据，以及

86.一种确定淀粉样变治疗疗效的方法，包括：

(a)给有此需要的患者施用有效量的根据权利要求74的结合淀粉样蛋白的化合物或其可药用盐；

(b)对所述患者成像；然后

(c)给所述有此需要的患者施用至少一种抗淀粉样蛋白剂；

(d)随后给所述有此需要的患者施用有效量的根据权利要求74的化合物；

(e)对所述患者成像；以及