CN101343262A - 多西他赛的生产方法 - Google Patents

Abstract

一种多西他赛(docetaxel)的生产方法，以式I的紫杉烷为原料，包括：制备10－DAB、保护羟基、与相关侧链的酯化、脱除保护基和分离纯化等步骤。式I中R₁代表氢原子或式II，R₂代表氢原子或乙酰基，R₃代表氢原子或木糖基，式II中R₄代表苯甲酰基或－CO(CH₂)_nCH₃，n＝2或4，或－COC(CH₃)＝CHCH₃，R₅代表氢原子或－CH₃。

Description

多西他赛的生产方法

技术领域

本发明是关于多西他赛(docetaxel)的生产方法。

背景技术

多西他赛是以紫杉醇(paclitaxel)为基础改进创新的另一种疗效极为显著的抗肿瘤药物，具有广谱的抗白血病和抗实体肿瘤活性，在世界80多个国家和地区批准上市，现在临床用于乳腺癌、卵巢癌、非小细胞肺癌、胃癌和结肠癌等，研究表明对前列腺癌、胰腺癌、软组织肉瘤、头颈部癌、食管癌等也有很好的治疗作用。

多西他赛的结构与紫杉醇极为相似，不同在于多西他赛中3’位的氨基上的叔丁氧羰基代替了苯甲酰基，C-10的羟基代替了乙酰氧基(EP253738，US4814470)。多西他赛不直接存在于天然产物中，只能通过半合成或全合成的方法获得，目前半合成方法已经取得成功。半合成是指用从天然产物中提取分离出的与目标物有相似结构的紫杉烷类(taxane，称为先导化合物)为原料，通过化学反应来得到目标物。多西他赛的半合成方法是利用欧洲红豆杉(Taxusbaccata)中提取出来的10-去乙酰基巴卡亭III(10-deacety baccatingIII，简称10-DAB)为原料，与相关的侧链进行反应而制成。目前普通应用的相关侧链主要有直链型的N-叔丁氧基羰基-(2R，3S)-3-苯基异丝氨酸及其酯(TetrahedronLetter 33：5185，1992)，单一结构的β-内酰胺(J.Org.Chem.56：1681，1991；Tetrahedron48：6985，1992)，含N-叔丁氧基羰基的噁唑烷型五元环酸(CN1087905A)等。还有一些带保护基团的N-叔丁氧基羰基-(2R，3S)-3-苯基异丝氨酸和带保护基团的β-内酰胺类。半合成法制备多西他赛的技术已经足够成熟，新开发出来的相关侧链也非常多，但如何优化工艺过程，提高收率，降低成本，如何充分利用天然产物中提取分离得到的与目标物有相似结构的多种紫杉烷类，广泛开拓先导化合物的来源，对于降低产品价格，综合利用有限资源等，有着十分重要的意义。

发明内容

本发明提供一种新的多西他赛的生产方法，能优化工艺过程，提高收率，充分利用国内已有红豆杉资源，减少原料进口节省外汇开支，降低产品成本和价格。

这种新的多西他赛的生产方法，包括：

第一步，中间体10-去乙酰基巴卡亭III的制备：

其中R₁代表氢原子或下式：

R₂代表氢原子或乙酰基，

R₃代表氢原子或木糖基，

R₄代表苯甲酰基或-CO(CH₂)_n CH₃，n＝2或4，或-COC(CH₃)＝CHCH₃，

R₅代表氢原子或-CH₃，

必要时经氧化裂解或酶解得R₃＝H的化合物，再必要时经还原反应得到R₁＝H，R₂＝H的化合物，即10-去乙酰基巴卡亭III。

式I包含了可从天然红豆杉(全球十一个品种)获得的对肿瘤活性较低的化合物。现在这些化合物有些正在被利用，用于半合成紫杉醇或多西他赛，而绝大部分还仍未被利用。式I代表的化合物中，常见的可用于本发明的有巴卡亭III、10-去乙酰基巴卡亭III、三尖杉宁碱、10-去乙酰基三尖杉宁碱、10-去乙酰基紫杉醇、7-木糖基巴卡亭III、7-木糖基-10-去乙酰基巴卡亭III、7-木糖基-三尖杉宁碱、7-木糖基-10-去乙酰基三尖杉宁碱、7-木糖基-紫杉醇、7-木糖基-10-去乙酰基紫杉醇、7-木糖基-10-去乙酰基紫杉醇C、7-木糖基紫杉醇C等。

特别地，当式I代表的化合物中含有7-木糖基时，则需经氧化裂解或酶解，除去木糖基使R₃＝H。具体方法有高碘酸盐法(US5200534；US5367086；US5856532)和酶法(Semilh，J.Nat.Prod.，1984，47，131；公开号CN1241565A)。

另外，当R₁、R₂都不是氢原子时，一般都要经过还原反应使羰基断开，使R₁、R₂均变成氢原子。

当R₁＝R₂＝R₃＝H时，即是本发明所述的一种中间体——10-去乙酰基巴卡亭III。

特殊地，当R₃代表氢原子，R₂代表乙酰基，R₁为式II且R₅代表氢原子，R₄代表苯甲酰基，则成为具有高抗肿癌活性的紫杉醇。

在紫杉醇结构中，若R₄的苯甲酰基被-CO(CH₂)₄CH₃代替，则成为紫杉醇C(参见J.Nat.Prod.，1994，57，116～122)，紫杉醇C及其同系物并不是天然存在的，但可通过细胞培养法和半合成法获得。

第二步，对第一步所得的中间体10-去乙酰基巴卡亭III中7位和10位的羟基进行保护，即以G分别代替已成为氢原子的R₃、R₂，得到下式：

其中G代表羟基保护基。

第三步，以下式化合物对式III进行酯化，

其中PG代表羟基保护基，可以与式III中的G相同，也可以不同，得到下式：

其中PG同上定义，脱除PG和G得到目标产物-多西他赛。

第四步，多西他赛的纯化：

①脱除PG和G所得的含有多西他赛的产物用有机溶液萃取，

②浓缩萃取液，得到含多西他赛的固体，

③所得固体以硅胶、二氯甲烷/乙酸乙酯系统进行柱层析，收集所得有效成分，干燥，

④有效成分干燥物再经C18、乙腈/水系统柱层析，结晶并将结晶物干燥，得到经HPLC检验纯度≥98％的产品。

如果式I中，R₁和/或R₂为非氢原子，则需进行还原反应，还原剂可选自有机还原剂或无机还原剂。有机还原剂选自肼及其衍生物如水合肼、苯肼，无机还原剂为金属氢化物，选自氢化铝锂(LiAlH₄)，氢化硼锂(LiBH₄)，氢化硼钠(NaBH₄)，氢化硼钾(KBH₄)，及其有关衍生物如三仲丁基氢化硼锂

硫代氢化硼钠(NaBH₂S₃)，氰基氢化硼钠(NaBH₃CN)等。如用氢化铝锂作还原剂，反应需在无水条件下进行，且不能使用含有羟基或巯基的化合物作溶剂，常用无水四氢呋喃作溶剂。以氢化硼盐作还原剂时反应常选用醇类或醚类作为溶剂，如甲醇、乙醇、异丙醇、二甲氧基乙醚等。优选有机还原剂水合肼，在甲醇中进行，可使反应易于控制，且在室温下进行，反应后易于处理。通过TLC法或HPLC法检识反应完成后，用无机酸(盐酸、稀硫酸)或有机酸(乙酸、柠檬酸、乳酸、丙酸)中和，用与反应介质溶剂不相混溶的有机溶剂(酯类如乙酸乙酯、醚类如二甲醚、卤代脂肪烃如二氯甲烷)萃取，得到含10-去乙酰基巴卡亭III的萃取液，去除有机溶剂，经过纯化(结晶或色谱分离)，得到纯度≥95％的10-去乙酰基巴卡亭III(HPLC法)。

对式II进行羟基保护形成式III时，选用的羟基保护基G选自(2，2，2-三氯乙氧基)羰基、2-(2-三氯甲基丙氧基)羰基、三烷基甲硅烷基、二烷基芳香甲硅烷基、烷基二芳基甲硅烷基或三芳基甲硅烷基，其中烷基部分有1～4个碳原子，芳基部分尤指苯基。

式VI中的PG也是羟基保护基，除选自G外，也可选自烷基氧-烷基氧基、烷酰基、芳基烷酰基，其中烷基部分含有1～4个碳原子，芳基部分尤指苯基。

式III和式IV的酯化反应在密闭的容器中，有惰性气体保护，以醚类、酮类、酯类、腈类、脂肪烃、卤代脂肪烃、芳香烃为介质，使用金属碱性催化剂，在-78～0℃进行。惰性气体主要使用氮气，也可以是二氧化碳，反应介质中醚类，主要有四氢呋喃、二甲醚、二异丙基醚、甲基叔丁基醚或二噁唑，酮类如甲基异丁基酮，酯类如乙酸乙酯、乙酸异丙脂或乙酸正丁酯，腈类如乙腈，脂肪烃类如戊烷、己烷、庚烷，卤代脂肪烃如二氯甲烷或1，2-二氯乙烷，芳香烃如苯、甲苯、二甲苯、乙苯、异丙苯或氯苯。金属碱性催化剂包括金属的有机碱、强有机碱，如NaH、n-BuLi、LDA、LiHMDS、NaHMDS、KHMDS。在N₂保护下，以四氢呋喃为介质，使用n-BuLi的正己烷溶液，在-45～-30℃能很好酯化。用有机溶剂萃取后，再去除有机溶剂即得到酯化产物(式V)。

对式V所示的化合物，当羟基保护基G和/或PG为(2，2，2-三氯乙氧基)羰基、2-(2-三氯甲基丙氧基)羰基，或PG为烷基氧-烷基氧基时，脱除是在无机酸或有机酸或其混合物和锌并必要时在铜同时存在下在含有1～3个碳原子的脂肪醇溶液或脂肪酸酯中于0～70℃进行的；当羟基保护基G和/或PG为三烷基甲硅烷基、二烷基芳香甲硅烷基、烷基二芳基甲硅烷基或三芳基甲硅烷基时，脱除是在无机酸或有机酸或其混合物存在下在有机溶剂中于0～70℃进行的。无机酸如盐酸、硫酸，有机酸如甲酸、乙酸、甲磺酸、三氟甲磺酸、对甲苯磺酸，无机酸或有机酸可用催化量或化学计算量或过量。有机溶剂选自醇如甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇，醚如四氢呋喃、二异丙醚、甲基叔丁基醚，酯如乙酸乙酯、乙酸异丙酯、乙酸正丁酯，脂肪烃如戊烷、己烷、庚烷，卤代脂肪烃如二氯甲烷或1，2-二氯乙烷，芳香烃如苯、甲苯、二甲苯及腈如乙腈。脱除反应以碱中和而终止。脱除G和PG是一次反应同时进行的。

当羟基保护基PG是烷酰基和芳香烷酰基时，脱保护是在有机碱或无机碱存在下，在有机溶剂中于≤25℃进行的。有机碱选自伯胺、仲胺、叔胺、四氢吡咯，无机碱选自氨水、碳酸或磷酸的钾盐或钠盐。有机溶剂选自醇类、醚类、烃类及腈类。优选在甲醇中使用二乙胺于≤15℃下进行。脱除反应以酸中和而终止。

当脱除G和PG需分步进行时，既可先脱除G，也可先脱除PG。

用于萃取多西他赛的有机溶剂选自与脱除G和/或PG的有机溶剂不相混淆，且同时也不与水相混溶的有机溶剂，如醚类、酯类、卤代脂肪烃和芳香烃。

纯化多西他赛采用两次柱层析，第一次柱层析为硅胶、二氯甲烷/乙酸乙酯系统，固定相硅胶选用200-300目柱层析用中性偏酸性硅胶，流动相二氯甲烷/乙酸乙酯混合比例为75～55/25～45(V/V)。第二次柱层析为C18、乙腈/水系统，固定相C18的PH＝6.5～7.5，粒径20～45μm，标称孔径

流动相乙腈/水为35～55/65～45(V/V)。第二次柱层析也可以使用性能相当的C18作为固定相。

经过两次层析纯化的产物，最后用有机溶剂结晶。结晶用的有机溶剂选用醇类、腈类如乙腈、酮类、醚类如二甲醚、酯类、卤代脂肪烃类如二氯甲烷或芳香烃类。结晶时，这些溶剂可以单独使用，也可以混合使用。还可以将上述有机溶剂与能与它们混溶而又不溶解(或略微溶解)多西他赛的有机液体如石油醚、三氯甲烷混用，也可以将上述有机溶剂中能与水混溶的部分有机溶剂与水混溶来进行结晶。

本发明提供的制备多西他赛的方法，在原料来源上并不局限于从欧洲红豆杉枝叶中直接提取分离的10-去乙酰基巴卡亭III，而是充分利用了各种红豆杉(全球十一个品种)中提取分离紫杉醇后的多种副产物，通过相应的化学方法或生物方法将其转化为10-去乙酰基巴卡亭III。特别地，通过细胞培养法和半合成法产生的紫杉醇C及其同系物，也可用作本发明的原料，而它们并不是天然存在的。中国没有欧洲红豆杉，因而不能直接通过生产得到天然存在的10-去乙酰基巴卡亭III，但中国有大量种植的南方红豆杉、云南红豆杉和蔓地亚红豆杉，它们所含有的各种副产物的量远远大于紫杉醇，因此，利用这些副产物来生产多西他赛，可减少原料进口，节省外汇开支，明显降低产品成本和价格，并大大提高中国红豆杉植物种植行业的附加值。

本发明采用两次柱层析纯化多西他赛，利用正相层析(硅胶、二氯甲烷/乙酸乙酯系统)和反相层析(C18、乙腈/水系统)分别地去除极性大于或小于多西他赛的杂质，能够高收率地获得纯度较高的产品。

具体实施方式

实施例1

由含7-木糖基的紫杉烷的混合物制备10-DAB(一)

1.2g上述混合物(比例未知)加入到60ml甲醇/氯仿(4∶1)溶液中，加入0.7g高碘酸钠和5ml、0.5M的硫酸，在室温下反应3小时。反应混合物加60ml的水稀释，用60ml氯仿萃取3次。有机相萃取物浓缩干燥，得到无色固体1.2g。该固体物质(1.2g)用40ml甲醇溶解，向溶液中加4ml浓度为50％的醋酸和0.5ml苯肼，混合液在50℃反应2小时。加40ml的水稀释，用40ml氯仿萃取3次。有机相萃取物浓缩干燥，得到固体1.23g。干燥物以二氯甲烷洗涤，过滤，得到的固体以10倍重量的甲醇/二氯甲烷(35/65)混合溶剂溶解，搅拌中往其中加入10～12倍重量的6^#溶剂油使晶体析出，过滤，干燥得类白色HPLC峰面积≥95％的10-DAB0.5克。

实施例2

由含7-木糖基的紫杉烷的混合物制备10-DAB(二)

称取上述混合物(比例未知)10.0g置反应釜中，加入三氯甲烷/甲醇(1∶4)混合溶液200ml，搅拌混悬，另称取高碘酸钠6.5g以15ml0.5mol/L的稀硫酸溶解后加入釜中，水浴加热至40℃，搅拌反应2小时；混合液过滤，滤渣以甲醇洗涤，合并滤液及洗涤液，往混合液中加水稀释，析出的沉淀物以二氯甲烷萃取3次，合并萃取液，减压浓缩，得含7-二醛-10-去乙酰基紫杉醇浓缩物。

将浓缩物置平底烧瓶中以200ml甲醇溶解，搅拌中加入80％的水合肼20ml，在20℃下搅拌反应3.0小时，TLC检识，反应完全后反应混合液以0.5M稀盐酸中和至中性，加水稀释后以乙酸乙酯萃取，有机层进行减压浓缩，干燥。干燥物以100ml二氯甲烷洗涤，过滤，得到的固体以10倍重量的甲醇/二氯甲烷(35/65)混合溶剂溶解，搅拌中往其中加入10～12倍重量的6^#溶剂油使晶体析出，过滤，干燥后得纯度≥95％的10-DAB4.0g。

实施例3

由不含7-木糖基的紫杉烷的混合物制备10-DAB

称取含巴卡亭III/10-去乙酰基紫杉醇/10-去乙酰基三尖杉宁碱/10-去乙酰基紫杉醇C的混合物(比例未知)原料10.0g，用200ml甲醇溶解置平底烧瓶中，搅拌，并加入80％的水合肼14ml，在温度为20℃的条件下，搅拌反应2.0小时，TLC检识(硅胶G，5％硫酸显色)，待原料斑点几乎消失并不再有变化时停止反应。将反应混合液以0.5M稀盐酸中和至中性，加水稀释甲醇浓度降至40％以下。混合液以二氯甲烷萃取，有机萃取层减压浓缩，干燥。干燥物以100ml二氯甲烷洗涤，过滤，得到的固体以10倍重量的甲醇/二氯甲烷(35/65)混合溶剂溶解，搅拌中往其中加入10～12倍重量的6^#溶剂油使晶状析出，过滤，干燥得类白色HPLC峰面积≥95％的10-DAB4.0克。

实施例4

由紫杉醇C制备10-DAB

紫杉醇C10.0g，以200ml甲醇溶解置平底烧瓶中，搅拌中加入1.0g硼氢化钠1.0g，在20℃下搅拌反应1.0小时，TLC检识，反应完全后反应混合液以0.5M稀盐酸中和至中性，加水稀释后以乙酸乙酯萃取，有机层进行减压浓缩，干燥。干燥物以180ml甲醇溶解置平底烧瓶中，搅拌中加入80％的水合肼12ml，在20℃下搅拌反应2.0小时，TLC检识，反应完全后反应混合液以0.5M稀盐酸中和至中性，加水稀释后以乙酸乙酯萃取，有机层进行减压浓缩，干燥。干燥物以100ml二氯甲烷洗涤，过滤，得到的固体以10倍重量的甲醇/二氯甲烷(35/65)混合溶剂溶解，搅拌中往其中加入10～12倍重量的6^#溶剂油使晶体析出，过滤，干燥后得纯度≥95％的10-DAB4.9g。

实施例5

由10-去乙酰基三尖杉宁碱制备10-DAB

10-去乙酰基三尖杉宁碱10g，以200ml甲醇溶解置平底烧瓶中，搅拌中加入80％的水合肼14ml，在20℃下搅拌反应2.0小时，TLC检识，反应完全后反应混合液以0.5M稀盐酸中和至中性，加水稀释后以乙酸乙酯萃取，有机层进行减压浓缩，干燥。干燥物以100ml二氯甲烷洗涤，过滤，得到的固体以10倍重量的甲醇/二氯甲烷(35/65)混合溶剂溶解，搅拌中往其中加入10～12倍重量的6^#溶剂油使晶体析出，过滤，干燥后得纯度≥95％的10-DAB6.5g。

实施例6

由7-木糖-10-去乙酰基三尖杉宁碱制备10-DAB

称取7-木糖-10-去乙酰基紫杉三尖杉宁碱10.0g置反应釜中，加入三氯甲烷/甲醇(1∶4)混合溶液200ml，搅拌混悬，另称取高碘酸钠6.5g以15ml0.5mol/L的稀硫酸溶解后加入釜中，水浴加热至40℃，搅拌反应2小时；混合液过滤，滤渣以甲醇洗涤，合并滤液及洗涤液，往混合液中加水稀释，析出的沉淀物以二氯甲烷萃取3次，合并萃取液，减压浓缩，得含7-二醛-10-去乙酰基三尖杉宁碱浓缩物。

将浓缩物以200ml甲醇溶解置平底烧瓶中，搅拌中加入80％的水合肼20ml，在20℃下搅拌反应3.0小时，TLC检识，反应完全后反应混合液以0.5M稀盐酸中和至中性，加水稀释后以乙酸乙酯萃取，有机层进行减压浓缩，干燥。干燥物以100ml二氯甲烷洗涤，过滤，得到的固体以10倍重量的甲醇/二氯甲烷(35/65)混合溶剂溶解，搅拌中往其中加入10～12倍重量的6^#溶剂油使晶体析出，过滤，干燥后得纯度≥95％的10-DAB4.2g。

实施例7

由10-DAB制备7，10-二Troc-10-DAB

称取10-DAB10.0g，用160ml经

分子筛脱水处理的吡啶(含水量降至≤0.01％)溶解置密闭带搅拌反应器中，通氮气保护，冰水浴，使体系温度≤3℃，搅拌中滴加氯甲酸三氯乙酯[提供(2，2，2-三氯乙氧基)羰基]7.5ml，搅拌反应30min后自然升温，再搅拌2.0h后，TLC检识(硅胶G，5％硫酸显色)反应结束后将混合液放出。混合液加水稀释使吡啶的含量达30％以下后，以二氯甲烷萃取至水层无反应目的物，有机层经0.5M稀盐酸洗涤至无吡啶气味，将有机层减压浓缩、干燥，得淡黄色干燥物。固体用3～5倍量的乙醇水浴加热溶解，趁热往其中加入纯化水使乙醇浓度降至50％，冷却析晶，过滤干燥，得到HPLC峰面积≥95％的7，10-二Troc-10-DAB15.7克。

实施例8

由10-DAB制备7，10-二Tes-10-DAB

称取10-DAB10.0g，用160ml经

分子筛脱水处理的吡啶(含水量降至≤0.01％)溶解置密闭带搅拌反应器中，通氮气保护，冰水浴，使体系温度≤3℃，搅拌中滴加0.7mol的三乙基氯硅烷，搅拌反应10h后，TLC检识(硅胶G，5％硫酸显色)反应结束后将混合液放出。混合液加水稀释使吡啶的含量达30％以下后，以二氯甲烷萃取至水层无反应目的物，有机层经0.5M稀盐酸洗涤至无吡啶气味，将有机层减压浓缩、干燥，得淡黄色干燥物。固体用3～5倍量的乙醇水浴加热溶解，趁热往其中加入纯化水使乙醇浓度降至50％，冷却析晶，过滤干燥，得到HPLC峰面积≥95％的7，10-二Tes-10-DAB13.3克。

实施例9

酯化反应(一)

称取7，10-二Troc-10-DAB10.0g，Ac-β内酰胺多烯紫杉醇侧链[(3R，4S)-3-(acetyloxy)-2-oxo-4-phenyl-1-Azetidinecarboxylic acid，1，1-dimethylethylester]8.0g置密闭带搅拌反应器中，通氮气保护，加入经

分子筛脱水处理的四氢呋喃(含水量降至≤0.01％)160ml溶解，低温冷却使温度-35℃，搅拌中往反应器缓慢滴加2.5M正丁基锂正己烷溶液5.2ml，搅拌反应30min后自然升温，继续搅拌反应，2.0h后取样TLC检识反应结束后将混合液放出。混合液加水稀释后以二氯甲烷萃取至水层无反应目的物，有机层减压浓缩干燥得含2′-acetyl-7，10-二Troc-Docetaxel固体11.8克。

实施例10

酯化反应(二)

称取7，10-二Tes-10-DAB10.0g，Ac-β内酰胺多烯紫杉醇侧链[(3R，4S)-3-(acetyloxy)-2-oxo-4-phenyl-1-Azetidinecarboxylic acid，1，1-dimethylethylester]8.0g置密闭带搅拌反应器中，通氮气保护，加入经分子筛脱水处理的四氢呋喃(含水量降至≤0.01％)160ml溶解，低温冷却使温度-40℃，搅拌中往反应器缓慢滴加2.5M正丁基锂正己烷溶液5.2ml，搅拌反应30min后自然升温，继续搅拌反应，2.0h后取样TLC检识反应结束后将混合液放出。混合液加水稀释后以二氯甲烷萃取至水层无反应目的物，有机层减压浓缩干燥得含2′-acetyl-7，10-二Tes-Docetaxel固体11.2克。

实施例11

由2′-acetyl-7，10-二Troc-Docetaxel制备2′-acetyl-Docetaxel固体取含2′-acetyl-7，10-二Troc-Docetaxel固体2.0g以40ml甲醇溶解，加入锌粒3.0g，冰醋酸12.0ml和纯水5.0ml混合，在65℃搅拌2.0h后停止反应，反应液以碳酸氢钠溶液中和至PH6～7，加水稀释至甲醇浓度降至30％后以二氯甲烷萃取至水层无反应目的物，合并有机层浓缩、干燥得含2′-acetyl-Docetaxel固体1.3克。

实施例12

由2′-acetyl-7，10-二Tes-Docetaxel制备2′-acetyl-Docetaxel固体取含2′-acetyl-7，10-二Tes-Docetaxel固体2.0g以40ml四氢呋喃溶解，冰醋酸10.0ml和纯化水5.0ml混合，在室温下搅拌反应6h，反应液以碳酸氢钠溶液中和至PH6～7，加水稀释，沉淀物以二氯甲烷萃取至水层无反应目的物，合并有机层浓缩、干燥得含2′-acetyl-Docetaxel固体1.3克。

实施例13

由2′-acetyl-Docetaxel制备Docetaxel

取含2′-acetyl-Docetaxel固体2.0g以30ml甲醇溶解，置冰水浴中冷却至10℃，搅拌中加入经预冷却至10℃的二乙胺甲醇溶液(0.5M)30ml搅拌反应，TLC检识，2.0h后停止反应，混合液加0.25M稀盐酸中和至PH6～7，加水稀释至甲醇浓度降至30％后以二氯甲烷萃取至水层无反应目的物，合并有机层浓缩、干燥得含Docetaxel固体1.7克。

实施例14

酯化反应(三)

7，10-二Troc-10-DAB10.0g，EE-β内酰胺多烯紫杉醇侧链[(3R，4S)-3-(1-ethoxyethoxy)-2-oxo-4-phenyl-1-Azetidinecarboxylic acid，1，1-dimethylethyl ester]8.0g置密闭反应器中，通氮气保护，加入经

分子筛脱水处理的四氢呋喃160溶解，低温冷却使温度-40℃，搅拌中往反应器缓慢滴加2.5M正丁基锂正己烷溶液5.2ml，搅拌反应30min后自然升温，继续搅拌反应，2.0h后停止反应，混合液加水稀释后以二氯甲烷萃取，有机层减压浓缩干燥得含2′-(1-ethoxyethoxy)-7，10-Troc-Docetaxel固体12.0克。

实施例15

2′-(1-ethoxyethoxy)-7，10-二Troc-Docetaxel制备Docetaxel取含2′-(1-ethoxyethoxy)-7，10-Troc-Docetaxel固体2.0g以40ml甲醇溶解，加入锌粒3.0g，冰醋酸12.0ml和纯水5.0ml混合，在65℃搅拌2.0h后停止反应，反应液以碳酸氢钠溶液中和至PH6～7以二氯甲烷萃取，有机层减压浓缩干燥得含Docetaxel固体1.2克。

实施例16

Docetaxel的纯化

依实施例13所得的含Docetaxel固体10g以二氯甲烷加热溶解，过滤，冷却至室温。然后以200～300目中性偏酸性硅胶为固定相，二氯甲烷/乙酸乙酯70/30(V/V)混合溶剂为流动相按1mL/min的速度进行层析分离纯化，用TCL或HPLC检识，收集有效成分洗脱液，浓缩、干燥。得到HPLC检测多西紫杉醇含量≥90％的白色固体6.5克。

称取含量≥90％的多西紫杉醇6.0g，用纯乙腈水浴加热，搅拌完全溶解；过滤，然后以PH＝6.5～7.5，粒径20～45μm，标称孔径

的C18为固定相，乙腈/水45/55(V/V)为流动相。在流速为30ml/min的速度进行分离纯化，用紫外检测仪检识，收集，收集有效成分洗脱液，浓缩、干燥。得到HPLC检测多西紫杉醇峰面积≥98％的白色固体5.0克。

经过两次层析纯化的产物，用50ml乙腈水浴加热溶解，将溶液置旋转蒸发器中浓缩回收部分溶剂，待溶液体积为原体积1/2时将溶液取出，冷却析晶，过滤晶体，干燥后得到HPLC检测多西紫杉醇含量≥98％的产品4.8克。

Claims (10)

1、一种多西他赛的生产办法，包括：

(一)10-去乙酰基巴卡亭III的制备：

其中R₁代表氢原子或下式，

R₂代表氢原子或乙酰基，

R₃代表氢原子或木糖基，

R₄代表苯甲酰基或-CO(CH₂)_n CH₃，n＝2或4，或-COC(CH₃)＝CHCH₃

R₅代表氢原子或-CH₃，

必要时经氧化裂解或酶解得R₃＝H的化合物，再必要时经还原反应得到R₁＝H，R₂＝H的化合物，即10-去乙酰基巴卡亭III；

(二)制备下式化合物：

其中G代表羟基保护基；

(三)化合物III与下式化合物酯化，

其中PG代表羟基保护基，可以与式III中的G相同，也可以不同，得到下式化合物：

其中PG同上定义，脱除PG和G得到目标产物-多西他赛；

(四)多西他赛的纯化：

①脱除PG和G所得的含有多西他赛的产物用有机溶液萃取，

②浓缩萃取液，得到含多西他赛的固体，

③所得固体以硅胶、二氯甲烷/乙酸乙酯系统进行柱层析，收集所得有效成分，干燥，

④所得有效成分干燥物再经C 18、乙腈/水系统柱层析，结晶并将结晶物干燥，得到经HPLC检验纯度≥98％的产品。

2、根据权利要求1的方法，其特征在于必要时还原反应的还原剂选自有机还原剂或无机还原剂。

3、根据权利要求1或2的方法，其特征在于有机还原剂选自肼及其衍生物如水合肼、苯肼，无机还原剂选自金属氢化物如氢化铝锂、氢化硼锂、氢化硼钠、氢化硼钾、及其有关衍生物如三仲丁基氢化硼锂、硫代氢化硼钠、氰基氢化硼钠。

4、根据权利要求1的方法，其特征在于式III中的G选自(2，2，2-三氯乙氧基)羰基、2-(2-三氯甲基丙氧基)羰基、三烷基甲硅烷基、二烷基芳香甲硅烷基、烷基二芳基甲硅烷基或三芳基甲硅烷基，其中烷基部分含有1～4个碳原子，芳基部分尤指苯基。

5、根据权利要求1的方法，其特征在于式III中的PG选自权利要求4所定义的G或烷基氧-烷基氧基、烷酰基、芳基烷酰基，其中烷基部分含有1～4个碳原子，芳基部分尤指苯基。

6、根据权利要求1的方法，其特征在于酯化在密闭容器中、有惰性气体保护、以醚类、酮类、酯类、腈类、脂肪烃、卤代脂肪烃、芳香烃为介质，使用金属碱性催化剂，在-78～0℃进行。

7、根据权利要求1的方法，其特征在于当羟基保护基G和/或PG为(2，2，2-三氯乙氧基)羰基、2-(2-三氯甲基丙氧基)羰基，或PG为烷基氧-烷基氧基时，脱除是在无机酸或有机酸或其混合物和锌并必要时在铜同时存在下在含有1～3个碳原子的脂肪醇溶液或脂肪酸酯中于0～70℃进行的；当羟基保护基G和/或PG为三烷基甲硅烷基、二烷基芳香甲硅烷基、烷基二芳基甲硅烷基或三芳基甲硅烷基时，脱除是在无机酸或有机酸或其混合物存在下在有机溶剂中于0～70℃进行的。

8、根据权利要求1的方法，其特征在于当羟基保护基PG为烷酰基和芳基烷酰基时，脱除是在有机碱或无机碱存在下，在有机溶液中于≤25℃进行的。

9、根据权利要求8的方法，其特征在于有机碱选自伯胺、仲胺、叔胺、四氢吡咯，无机碱选自氨水、碳酸或磷酸的钾盐或钠盐。

10、根据权利要求1的方法，其特征在于柱层析纯化多西他赛时二氯甲烷/乙酸乙酯＝55-75/45-25(V/V)，乙腈/水＝35-55/65-45(V/V)，结晶使用的溶剂选自醇类、腈类(如乙腈)、酮类、醚类(如二甲醚)、酯类、卤代脂肪烃(如二氯甲烷)或芳香烃。