CN101342167A - 药物组合物 - Google Patents

Abstract

公开了一种药物组合物，按最终药物组合物的重量计它包括：作为第一必要组分的0.001～30重量％的水飞蓟提取物；作为第二必要组分的0.001～30重量％的药学上可接受的天然挥发油；作为第三必要组分的0.01～30重量％的磷脂；适量的药学上可接受的等渗调节剂、稳定剂、以及药学上可接受的任选植物油和水。还公开了其制备方法。

Description

药物组合物

技术领域

本发明属于医药技术领域，必要组分涉及药物-水飞蓟提取物；药学上可接受的天然挥发油。它包括按最终药物组合物的重量计：作为第一必要组分的0.001～30％重量的水飞蓟提取物；作为第二必要组分的0.001～30％重量的药学上可接受的天然挥发油；作为第三必要组分的0.01～30％重量的磷脂；以及适量的药学上可接受的等渗调节剂、稳定剂以及药学上可接受的植物油和水。本发明还公开了其制备方法。

背景技术

水飞蓟提取物是从菊科植物紫花水飞蓟种籽中分离出来的主要活性成分。它包括水飞蓟宾、水飞蓟素或水飞蓟素衍生物(水飞蓟丁，水飞蓟宁和异水飞蓟素)。实验表明水飞蓟素提取物具有直接清除活性氧、抑制5′-脂氧合酶、保护肝细胞膜、促进被损伤肝细胞合成DNA及结构蛋白、免疫调节和抗肝纤维化等药理作用。是一种具有良好应用前景的肝病治疗药物[1]。

早在十九世纪末，科学家就对天然精油的杀菌作用进行了研究。上世纪三十年代，法国人Rene-Maurice Gattefosse提出了芳香疗法(Aromatherapy)概念，是指将天然精油用于抗感染方面的治疗。天然精油的抗菌性是精油抗感染作用领域内研究最多的一个分支，而且这种治疗作用也是广为人知且经常使用。现在，天然精油抑制病菌的能力已成为不可辩驳的事实了。1887年Chamberland对天然精油抗菌性进行了研究。1888年，Cadeac和Meunier在Annalesdel’Institut Pasteur上发表了他们的研究成果。许多药学家和医生还通过体外实验证实了天然精油的抗菌作用。Rene-Maurice Gattefosse在1938年出版的Antiseptiques Essentiels一书中对已取得的天然精油抗菌性的研究进行了详细的论述。

进一步的基础性研究发现天然精油中的醇类和倍半萜内酯类化合物具有抗真菌活性。

许多天然精油显示出体外抗病毒活性。

天然精油中存在着各种抗菌、抗病毒、抗真菌和抗寄生虫作用的化合物，这种高活性化合物使得天然精油特别适用于治疗那些难治的疾病或其它精油无效的疾病。研究发现很多病毒对天然精油的芳香物高度敏感，在接受天然精油治疗过程中，患者的正常细胞似乎获得一种对病毒渗透的抵抗力。地球上各种形式生命体中不良寄生物和病毒会导致机体内蛋白质病变，其中一些疾病用现代医学也无法治愈。常规的治疗方法对这些感染症疗效有限，所以，天然精油在治疗各种微生物、病毒导致疑难疾病方面可谓天赐良药[2]。

本发明中的必要成分涉及药物-水飞蓟提取物和天然精油中的天然挥发油。以下是几个比较好的个例。

莪术油 是自植物莪术中提取的挥发油。具有抗病原体、增强免疫作用；具有保肝护肝、治疗肝炎作用；具有抗肿瘤作用；具有抗炎、抗病毒作用。

实验显示：莪术油对小鼠由四氯化碳和硫化乙酰胺引起的实验性肝损伤有保护作用，对谷丙转氨酶有降低作用，可使磺溴酞钠潴留量减少，相应肝组织病变减轻[3]。

张穗等用莪术油注射液治疗小儿急性甲型病毒性肝炎[4]。治疗组为39例给莪术油注射液，对照组用能量组合剂(ATP、辅酶A、肌苷、VitC)，两组均服栀黄口服液。结果显示治疗组治愈率达到95％，有效率100％，而对照组治愈率为86％，有效率100％。治愈天数比较发现，治疗组较对照组少1.39天。临床症状对比，如身黄、目黄、尿黄、厌油、纳差等改善情况表明，治疗组明显优于对照组，有显著性差异。

莪术油最初是作为抗肿瘤药物用于临床。随着病理研究和制剂工艺的开发，莪术油在不同类型的疾病中得到广泛的应用[5]。

薄荷油 将薄荷油与核盘菌、匍茎根霉菌、毛霉菌共处于一个封闭系统中，均可以剂量依赖性地抑制这些真菌的生长和繁殖[6]。在体外蚀斑抑制实验中，薄荷油对单纯疱疹病毒的两种亚型(HSV-1和HSV-2)均显示较强的抑制作用[7]。

红花油 红花油能显著地降低血清中总脂、胆固醇、甘油三醋和日脂蛋白水平。而对磷脂无影响。长期食用具有降血脂、软化血管、稳定血压等效果。并能润燥、散肿止痛、通经祛风[8]。

藿香挥发油 具有抗真菌作用[9]。

桉叶油 倪木兰等，对桉叶油体外抗菌作用的初步实验研究表明：桉叶油对革兰阳性菌有抑菌作用，桉叶油复合液对革兰阳性、阴性菌均有较强抑菌作用。凌天冀等研究了桉叶油对5种细菌的最低杀菌浓度，并对桉叶油与丹参、青霉素、链霉素、卡那霉素与金黄色葡萄球菌和大肠埃希菌等的联合抗菌作用做了初步实验研究，证实桉叶油除有广泛的抗菌作用外，还是一种有效的抗菌增强剂[10]。

中国专利申请(申请号：200410023873.0)描述了水飞蓟宾盐冻干粉针及其制备方法。其中将水飞蓟宾首先制备成无机或有机盐类，进而制备注射剂。

中国专利申请水飞蓟素注射液的制备方法(申请号：02125820.1)也与上述方法类同。

中国专利申请(申请号：200510023553)公开了水飞蓟宾-磷脂复合物。其制备过程是将水飞蓟宾溶入丙酮，经过加热、保温、震荡、回流，真空浓缩后加入到烷烃中，过滤，沉淀，干燥得水飞蓟宾-磷脂复合物，进而制备成制剂。此过程不但复杂，不易工业化生产，而且引入了有机溶剂丙酮、烷烃。在制药工业中，注射剂中有机溶剂难以除尽，残存量难以控制，一直以来是制药工艺中的难题，很容易对产品质量造成影响，并存在不安全因素。

另一个专利申请(申请号：00801319)阐述的是水飞蓟素的口服微乳剂组合物。其特征是，组合物的活性成分仅有水飞蓟提取物。

徐希明等的中国专利CN 1732918A公开了一种水飞蓟宾纳米制剂药物及其制备方法。其特征是，含水飞蓟宾一种活性成分。

目前的水飞蓟提取物制剂在临床使用时存在下列缺点：难溶于水，口服生物利用度低。现有的解决方法可总结为：制成水飞蓟-磷脂复合物、水飞蓟宾环糊精包合物、羟丙基环糊精包合物，与聚乙烯吡咯烷酮、尿素和泊洛沙姆等载体制成分散体。目前研究的焦点集中在解决水飞蓟的溶解性能。

以上专利的共同特点是，只含有水飞蓟提取物-水飞蓟宾、水飞蓟素或其衍生物的单一活性治疗成分。

本发明的特点是协同增效治疗。其活性治疗成分涉及：水飞蓟提取物-水飞蓟宾、水飞蓟素或其衍生物；药学上可接受的天然挥发精油及其混合物。

本发明的优势在于：将水飞蓟提取物与天然挥发性精油有机结合，通过适宜方法制备成乳剂、脂质体，进而制备成口服制剂或注射剂。不但大大提高了水飞蓟提取物的溶解性能，更主要的是这些具有生物活性的天然挥发精油不同程度具有抗菌、抗病毒、抗炎活性和促进吸收功能。由于水飞蓟提取物与天然挥发性精油对肝炎病的作用机理不同，从而以不同途径对肝炎病毒起到治疗作用，达到了协同增效的效果。

发明内容

本发明的目的是提供一种高效含水飞蓟提取物的药物组合物。

本发明涉及一种药物组合物，它包括：

·0.001～30重量％的水飞蓟提取物；

·0.001～30重量％的药学上可接受的天然挥发油；

·0.01～30重量％的磷脂；

·药学上可接受的等渗调节剂、稳定剂、以及适量的药学上可接受的任选植物油和水。

本发明提供所述药物组合物的制备方法，它包括：

·按最终药物组合物的重量计，将0.01～30重量％的磷脂、0.001～30重量％的水飞蓟提取物溶于0.001～30重量％的天然挥发油(指：一种或两种以及两种以上天然挥发油的混合物)中，使其充分溶解，随后缓慢加入任选的药学上可接受的植物油，制得油相；

·将等渗调节剂和余量的磷脂加入水中，搅拌均匀制得水相；

·将所述油相和所述水相在30～60℃条件下搅拌混合并高速剪切制成初乳液；

·将上述初乳液经高压均质制得乳液状注射剂。

本发明提供所述药物组合物脂质体的制备方法，它包括：

·配置pH6～9的生理缓冲溶液；

·按最终组合物的重量计，将0.01-30重量％的磷脂、0.001-30重量％的水飞蓟提取物以及适量的胆固醇和0.001-30％重量的天然挥发油(指：一种或两种以及两种以上天然挥发油的混合物)溶于无水乙醇中，制得乙醇溶液；

·在高速搅拌条件下将所述乙醇溶液加入适量所述缓冲液中，随后除去无水乙醇。

具体实施方式

本发明药物组合物包括0.001～30重量％的水飞蓟提取物，所述水飞蓟提取物在本发明药物组合物中作为活性组分用于治疗例如肝部疾病。

在本发明中，术语“水飞蓟提取物”是指水飞蓟宾、水飞蓟素或水飞蓟素衍生物中的一种或多种以任意比例混合的混合物，较好是指水飞蓟宾和水飞蓟素。

本发明药物组合物较好包括0.01-20重量％的水飞蓟提取物，更好包括0.1-10重量％的水飞蓟提取物，最好包括0.5-5重量％的水飞蓟提取物。

本发明药物组合物还包括0.001～30重量％的药学上可接受的天然挥发精油和适量药学上可接受的任选植物油和水。所述天然挥发精油为植物中提取的任何药学上可接受的挥发油。在本发明中，天然挥发油一方面起助溶剂的作用，另一方面起促进吸收和治疗作用。因此，本发明药物组合物由于添加了天然挥发油而提高了治疗效果。较好的有莪术油、桉叶油、红花油、藿香油、薄荷油。

由于天然挥发油本身具有药学活性，因此在某些用途中无需加入大量的天然挥发油。为了补偿由于天然挥发油可能用量小而使油溶性溶剂量不足的缺陷，本发明药物组合物还可任选地含有其它药学上可接受的植物油，其含量以满足油溶性溶剂的总量即可。该植物油和药学上可接受的天然挥发油的总量保持在30总量％以内。

所述药学上可接受的植物油无特别的限制，可以是本领域的任何可供药用的油。所述植物油的非限定性例子有，例如大豆油、花生油、葵花油、橄榄油、菜籽油、蓖麻油等等。较好的是大豆油。

在本发明药物组合物中，药学上可接受的天然挥发油和任选的植物油的重量百分比较好为0.05-20％，更好为0.1-15％，最好为0.2-10％。

本发明药物组合物还包括0.01～30％重量的磷脂。适用于本发明的磷脂的非限定性例子有，例如蛋黄卵磷脂、大豆磷脂、氢化蛋黄卵磷脂、氢化大豆磷脂、人工合成或半合成卵磷脂、鞘磷脂和磷脂酰胆碱衍生物中的一种或多种的混合物。

本发明药物组合物中磷脂的重量百分比较好为0.1-20％，更好为0.5-15％，最好为1-12％。

本发明药物组合物还包括适量的药学上可接受的等渗调节剂。适用于本发明的等渗调节剂可以是本领域已知的任何等渗调节剂。在本发明的较好实例中，所述等渗调节剂是丙三醇，磷酸氢二钠、磷酸二氢钠。

等渗调节剂的用量是本领域普通技术人员容易确定的，可根据不同等渗调节剂使用不同的剂量。在本发明的一个较好实例中，所述等渗调节剂是丙三醇，用量为：按药物组合物的总重量计，1-5％，较好为2-3％。

本发明药物组合物同时提供了药物组合物乳和药物组合物脂质体的主要组分。药物组合物乳的主要组分为：水飞蓟提取物、天然挥发油、磷脂以及适量植物油、等渗调节剂和水；药物组合物脂质体主要组分为：水飞蓟提取物、天然挥发油、磷脂、稳定剂和水。由于水飞蓟提取物(水飞蓟宾、水飞蓟素或水飞蓟素衍生物)具有直接清除活性氧、抑制5′-脂氧合酶、保护肝细胞膜、促进被损伤肝细胞合成DNA及结构蛋白、免疫调节和抗肝纤维化等作用。天然挥发精油不同程度具有抗病原体、增强免疫作用；保肝护肝、治疗肝炎作用；抗肿瘤作用及其抗炎、抗病毒作用。本发明将水飞蓟提取物(水飞蓟宾、水飞蓟素或水飞蓟素衍生物)和天然挥发油有效结合，制备成药物组合物乳剂或脂质体，使其从不同的药理途径促进机体提高免疫能力，修复被破损肝细胞，药理活性起到协同作用，从而达到提高药物对肝病治疗效果的目的。另外，由于乳剂和脂质体组成材料均为纯天然物质，药物制剂的结构类似于生物膜，因此易与生物融合，促进药物对生物膜的穿透性，提高药物的跨角膜转运效率；更具有与人体的生物相溶性，从而提高药物的治疗指数。动物实验表明：该药物组合物显著提高了药物对四氯化碳所致的小鼠肝损伤的保护作用。

本发明还提供了一种所述药物组合物的制备方法，它包括，按最终药物组合物的重量计，将0.01～30重量％的磷脂全部或其部分、0.001-30％重量的水飞蓟提取物溶于0.001-30重量％的天然挥发油中，使其充分溶解，如果天然挥发油的量不能满足制剂制备的需要，则可再向其中加入适量的其它药学上可接受的植物油，制得油相的步骤。

在本发明所述方法中，用于将磷脂溶于药学上可接受的天然挥发油和任选的其它植物油中的方法无特别的限制。可以采用本领域已知的任何混合方法形成所述油相。

本发明方法还包括将余量的磷脂和等渗调节剂(例如丙三醇)加入水中，搅拌均匀制得水相；随后将所述油相和所述水相在30～60℃条件下搅拌混合制成初乳液。适用于本发明的混合方法无特别的限制，只要它能使所述油相和水相混合成初乳液即可。如高速剪切方法、高速搅拌等。

本发明方法还包括将上述初乳液经高压均质制得乳液，进而制备口服液、注射剂。适用于本发明的高压均质方法可以是本领域的常规方法。

本发明还提供一种所述药物组合物脂质体的制备方法，它包括配制pH 3.5-9的生理缓冲溶液的步骤。配制生理缓冲溶液的方法是本领域众所周知的，例如它可以将适量的磷酸氢二钠与磷酸二氢钠混合在水中形成pH＝7.4的缓冲溶液。

本发明方法还包括，按最终组合物的重量计，将0.01-30重量％的磷脂、0.001-30重量％的水飞蓟提取物和0.001-30重量％的天然挥发油溶于无水乙醇中，制得乙醇溶液的步骤。

还可任选地向制得的乙醇溶液中加入适量稳定剂。适用于本发明的稳定剂无特别的限制，只要能稳定本发明所述脂质体即可。在本发明的一个较好实例中，所述稳定剂实例如胆固醇。

用于形成所述乙醇溶液的方法无特别的限制，可以采用本领域已知的任何混合方法形成所述溶液。在本发明的一个较好实例中，所述形成乙醇溶液的方法包括搅拌下将磷脂溶解在无水乙醇中形成磷脂的乙醇溶液，随后向所述溶液中加入水飞蓟提取物、天然挥发油和适量稳定剂，得到均匀溶液。

本发明方法还包括在高速搅拌条件下将所述乙醇溶液加入所述缓冲液中，随后除去乙醇的步骤。

用于使所述乙醇溶液混入所述缓冲溶液的搅拌速度无特别的限制，只要所述两种溶液能均匀混合即可。在本发明的一个较好实例中，使用转速为5000～10000转/分，较好为7000转/分的高速剪切机剪切下使两者混合。

用于除去乙醇的方法没有特别限制。常用的是超滤法或减压真空蒸馏法，在本发明的一个较好方法是超滤法。

下面实施例用于进一步说明本发明，但是应理解下列实施例仅用于说明而非限定本发明的范围。

实施例1

制备药物组合物乳。

(1)药物组合物乳各组分配比如表1所示(制成1000ml)。

表1

组分名称	重量比(％)	投料量(g)	作用
				莪术油	1.0	10.0	主药
水飞蓟素	0.5	5.0	主药
				大豆油	9.0	90.0	溶剂
蛋黄卵磷脂	1.2	12.0	药物载体、乳化剂
				丙三醇	2.25	22.5	等渗调节剂
注射用水	86.05	860.5	溶剂

(2)药物组合物乳的制备

a.将处方量的蛋黄卵磷脂溶于莪术油中，再向其中加入水飞蓟素使其充分溶解后，再缓慢加入大豆油；得油相液；

b.将丙三醇加入注射用水，搅拌均匀；得水相液；

c.经用购自上海标本模具厂JRJ300-S型的剪切乳化搅拌机在7000rpm下将a步制成的油相药液与b步制成的水溶液在高速下混合制成初乳液；

d.将上述初乳液经高压均质5次；

e.用微孔薄膜过滤，灭菌；

f.分装得口服乳或注射用乳液。

实施例2

制备药物组合物乳。

(1)药物组合物乳各组分配比如表1所示(制成1000ml)。

表2

组分名称	重量比(％)	投料量(g)	作用
				红花油	0.001	0.01	主药
水飞蓟宾	0.001	0.01	主药
				大豆油	9.999	99.99	溶剂
大豆磷脂	1.2	12.0	药物载体、乳化剂

丙三醇	2.25	22.5	等渗调节剂
				注射用水	86.549	865.49	溶剂

(2)药物组合物乳的制备

a.将处方量的大豆磷脂溶于红花油中，再向其中加入水飞蓟宾使其充分溶解后，再缓慢加入大豆油；得油相液；

b.将丙三醇加入注射用水，搅拌均匀；得水相液；

c.经用购自上海标本模具厂JRJ300-S型的剪切乳化搅拌机在7000rpm下将a步制成的油相药液与b步制成的水溶液在高速剪切条件下混合制成处乳液；

d.将上述初乳液经高压均质7次；

e.用微孔薄膜过滤，灭菌；

f.分装得口服乳或注射用乳液。

实施例3

制备药物组合物乳。

(1)药物组合物乳各组分配比如表1所示(制成1000ml)。

表3

组分名称	重量比(％)	投料量(g)	作用
				藿香油	10.0	100.0	主药
水飞蓟宾	10.0	100.0	主药
				大豆油	0	0	0
氢化蛋黄卵磷脂	1.8	18.0	药物载体、乳化剂
				丙三醇	2.25	22.5	等渗调节剂
注射用水	75.95	759.5	溶剂

(2)药物组合物乳剂的制备

a.将处方量的氢化蛋黄卵磷脂溶于藿香油中，再向其中加入水飞蓟宾使其充分溶解后，再缓慢加入大豆油；得油相液；

b.将丙三醇加入注射用水，搅拌均匀；得水相液；

c.经用购自上海标本模具厂JRJ300-S型的剪切乳化搅拌机在7000rpm下将a步制成的油相药液与b步制成的水溶液在高速搅拌条件下混合制成处乳液；

d.将上述初乳液经高压均质3次；

e.用微孔薄膜过滤，灭菌；

f.分装得口服乳或注射用乳液。

实施例4

制备药物组合物乳。

(1)药物组合物乳剂各组分配比如表1所示(制成1000ml)。

表4

组分名称	重量比(％)	投料量	作用
				桉叶油	20.0	200.0g	主药
水飞蓟素	20.0	200.0g	主药
				大豆油	0	0	0
氢化大豆磷脂	2.4	24.0g	药物载体、乳化剂
				丙三醇	2.25	22.5g	等渗调节剂
注射用水	55.35	553.5g	溶剂

(2)药物组合物乳的制备

a.将处方量的氢化大豆磷脂溶于桉叶油中，再向其中加入水飞蓟素使其充分溶解后，再缓慢加入大豆油；得油相液；

b.将丙三醇加入注射用水，搅拌均匀；得水相液；

c.经用购自上海标本模具厂JRJ300-S型的剪切乳化搅拌机在7000rpm下将a步制成的油相药液与b步制成的水溶液在高速搅拌条件下混合制成初乳液；

d.将上述初乳液经高压均质5次；

e.用微孔薄膜过滤，灭菌；

f.分装得口服乳或注射用乳液。

实施例5

制备药物组合物乳。

(1)药物组合物乳各组分配比如表1所示(制成1000ml)。

表5

组分名称	重量比(％)	投料量(g)	作用
				薄荷油	30.0	300.0	主药
水飞蓟素	30.0	300.0	主药
				大豆油	0	0	0

蛋黄卵磷脂	3.0	30.0	药物载体、乳化剂
				丙三醇	2.25	22.5	等渗调节剂
注射用水	34.75	347.5	溶剂

(2)药物组合物乳的制备

a.将处方量的蛋黄卵磷脂溶于薄荷油中，再向其中加入水飞蓟素使其充分溶解后，再缓慢加入大豆油；得油相液；

b.将丙三醇加入注射用水，搅拌均匀；得水相液；

c.经用购自上海标本模具厂JRJ300-S型的剪切乳化搅拌机在7000rpm下将a步制成的油相药液与b步制成的水溶液在高速剪切条件下混合制成初乳液；

d.将上述初乳液经高压均质6次；

e.用微孔薄膜过滤，灭菌；

f.分装得口服乳或注射用乳液。

实施例6

(1)药物组合物乳各组分配比如表6所示(制成1000ml)。

表6

组分名称	重量比(％)	投料量(g)	作用
				桉叶油	1.0	10.0	主药
莪术油	1.0	10.0	主药
				水飞蓟宾	1.0	10.0	主药
大豆油	8.0	80.0	溶剂
				蛋黄卵磷脂	1.2	12.0	药物载体、乳化剂
磷酸氢二钠	6.5	65	等渗调节剂
				磷酸二氢钠	0.23	2.3	等渗调节剂
注射用水	81.07	810.7	溶剂

(2)药物组合物乳的制备

a.将处方量的蛋黄卵磷脂溶于桉叶油和莪术油的混合物中，再向其中加入水飞蓟宾使其充分溶解后，再缓慢加入大豆油；得油相液；

b.将磷酸氢二钠、磷酸二氢钠加入注射用水，搅拌均匀；得水相液；

c.经用购自上海标本模具厂JRJ300-S型的剪切乳化搅拌机在7000rpm下将a步制成的油相药液与b步制成的水溶液在高速搅拌条件下混合制成初乳液；

d.将上述初乳液经高压均质5次；

e.用微孔薄膜过滤，灭菌；

f.分装得口服乳或注射用乳液。

实施例7

(1)药物组合物乳各组分配比如表7所示(制成1000ml)。

表7

组分名称	重量比(％)	投料量(g)	作用
				莪术油	1.0	10.0	主药
藿香油	1.0	10.0	主药
				红花油	1.0	10.0	主药
水飞蓟素	1.0	10.0	主药
				大豆油	7.0	70.0	溶剂
蛋黄卵磷脂	2.4	24.0	药物载体、乳化剂
				丙三醇	2.25	22.5	等渗调节剂
注射用水	84.35	843.5	溶剂

(2)药物组合物射乳的制备

a.称取莪术油、藿香油、红花油混匀，将处方量的蛋黄卵磷脂溶于该混合油中，再向其中加入水飞蓟素使其充分溶解后，缓慢加入大豆油；

b.将丙三醇加入注射用水，搅拌均匀；

c.将a步制成的药液与b步制成的水溶液在30～60℃条件下搅拌混合；

d.经高速剪切制成初乳液；

e.将上述初乳液经高压均质3次；

f.微孔薄膜过滤，灭菌。分装得口服乳或注射乳。

实施例8：

(1)药物组合物乳各组分配比如表8所示(制成1000ml)。

表8

组分名称	重量比(％)	投料量(g)	作用
				莪术油	1.0	10.0	主药
水飞蓟丁	1.0	10.0	主药
				大豆油	9.0	90.0	溶剂
大豆磷脂	1.6	16.0	药物载体、乳化剂
				丙三醇	2.25	22.5	等渗调节剂
注射用水	85.15	851.5	溶剂

(2)药物组合物注射乳的制备

a.将处方量的大豆磷脂溶于莪术油中，再向其中加入水飞蓟丁使其充分溶解后，缓慢加入大豆油；

b.将丙三醇加入注射用水，搅拌均匀；

c.将a步制成的药液与b步制成的水溶液在搅拌条件下混合；

d.经高速剪切制成初乳液；

e.将上述初乳液经高压均质4次；

f.过滤，灭菌。进而制备口服乳或注射乳。

实施例9

(1)药物组合物乳各组分配比如表9所示(制成1000ml)。

表9

组分名称	重量比(％)	投料量(g)	作用
				莪术油	2.0	20.0	主药
水飞蓟宁	1.0	10.0	主药
				大豆油	9.0	80.0	溶剂
氢化卵磷脂	3.6	36.0	药物载体、乳化剂
				丙三醇	2.25	22.5	等渗调节剂
注射用水	83.15	831.5	溶剂

(2)药物组合物乳的制备方法

a.将处方量的氢化卵磷脂溶于莪术油中，再向其中加入水飞蓟宁使其充分溶解后，缓慢加入已预热至约60℃的大豆油；

a.将丙三醇加入注射用水，搅拌均匀；

b.将a步制成的药液与b步制成的水溶液在搅拌条件下混合；

c.经高速剪切制成初乳液；

d.将上述初乳液经高压均质5次；

e.过滤，灭菌。进而制备口服乳或注射乳。

实施例10

(1)药物组合物乳各组分配比如表10所示(制成1000ml)。

表10

组分名称	重量比(％)	投料量(g)	作用
				莪术油	1.0	10.0	主药
薄荷油	1.0	10.0	主药

水飞蓟宁	1.0	10.0	主药
				大豆油	9.0	80.0	溶剂
氢化卵磷脂	3.6	36.0	药物载体、乳化剂
				丙三醇	2.25	22.5	等渗调节剂
注射用水	83.15	831.5	溶剂

(2)药物组合物乳的制备

a.将处方量的氢化卵磷脂溶于莪术油、薄荷油的混合物中，再向其中加入水飞蓟宁使其充分溶解后，缓慢加入已预热至约60℃左右的大豆油；

a.将丙三醇加入注射用水，搅拌均匀；

b.将a步制成的药液与b步制成的水溶液在搅拌混合；

c.经高速剪切制成初乳液；

d.将上述初乳液经高压均质5次；

e.过滤，灭菌。进而制备口服乳或注射乳。

实施例11

(1)药物组合物脂质体各组分配比如表11所示(制成1000ml)。

表11

组分名称	重量比(％)	投料量(g)	作用
				红花油	0.5	5.0	主药
水飞蓟宾	0.5	5.0	主药
				胆固醇	2.0	20.0	稳定剂
蛋黄卵磷脂	16.0	160.0	药物载体
				无水乙醇	10.0	100.0ml	溶剂
磷酸缓冲液	71.0	710.0	等渗溶剂

(2)药物组合物脂质体的制备

a.配置pH＝7.4的磷酸缓冲溶液备用；

b.将处方量的蛋黄卵磷脂、胆固醇、水飞蓟宾、红花油溶于无水乙醇中备用；

c.高速搅拌条件下将b步制成的药液加入a步制成的缓冲液中；

d.超滤除去无水乙醇；

e.用微米薄膜无菌过滤，分装得脂质体口服液或注射用脂质体。

实施例12

动物药效试验

目的：比较水飞蓟提取物的不同剂型-水飞蓟素乳、水飞蓟宾脂质体与水飞蓟宾混悬液对四氯化碳所致的小鼠肝损伤的保护作用。

方法：随机将50只小鼠分成5组，通过对对照组、给药组小鼠血清中天冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)及肝组织学观察，比较药物组合物乳及其脂质体与水飞蓟宾对四氯化碳所致小鼠肝损伤之预防作用的效果。

结果：水飞蓟宾和组合物注射乳剂及其脂质体均能降低小鼠血清ALT、AST活性，能减轻肝脏病理学变化，对四氯化碳造成的急性肝损伤有明显的保护作用，注射乳剂与水飞蓟宾脂质体的作用强于水飞蓟宾。

1.材料

·体重(22±2)g的健康小白鼠50只。

·将水飞蓟宾用0.3％羧甲基纤维素钠配成10mg/ml的悬液备用。

·实施例1制备的：组合物乳10mg/ml。

·实施例11制备的：组合物脂质体10mg/ml。

2.方法

2.1.模型的建立

四氯化碳溶于大豆油，配成0.1％溶液，腹腔注射10ml/kg，造成肝损伤模型。

2.2.动物分组及给药方法

小鼠50只随机分成5组，每组10只，即正常对照组、四氯化碳模型组、水飞蓟宾组、组合物注射乳剂组和组合物脂质体注射剂组。5组小鼠同时连续灌胃5天，1次/天，正常对照组和四氯化碳模型组灌胃0.3％羧甲基纤维素钠10ml/kg，水飞蓟宾组灌胃水飞蓟宾混悬液(10mg/ml)10ml/kg，组合物注射乳组和组合物注射脂质体剂组分别灌胃(10mg/ml)10ml/kg。第6天，模型组、水飞蓟宾组、组合物注射乳组和组合物注射脂质体剂组均腹腔注射0.1％四氯化碳10ml/kg，正常对照组腹腔注射10ml/kg大豆油。24h后(小鼠禁食12h，自由饮水)，摘眼球采血，8000r/min离心5min，分离血清，用全自动生化分析仪测定血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天冬氨酸氨基转移酶(AST)的活性，并取每只小鼠同一叶肝脏部位大致相同的一小块肝组织做病理组织学检查，经石蜡包埋切片和HE染色后在光学显微镜下观察肝细胞损伤程度。

2.3.实验数据统计

数据用x±s表示，组间差异的显著性采用t检验，应用SPSS210.0软件进行分析。

3.结果

3.1.小鼠血清中ALT和AST活性变化结果见表

组别	剂量/[mg/(kg·d)]	ALT/(IU/L)	AST/(IU/L)
				正常对照	0	78.0±11.5	146.2±25.23
四氯化碳模型	0	427.0±184.46	347.50±128.52
				水飞蓟宾	100	198.50±65.24	215.2±45.10
组合物乳	100	120.50±50.71	164.20±34.05
				组合物脂质体	100	115.76±33.15	153.00±23.96

由表1可见，四氯化碳模型组ALT、AST活性较正常，对照组明显升高(P＜0.01)；水飞蓟宾组与四氯化碳模型组比较，ALT、AST活性均有明显下降，均有显著性差异(P＜0.05)。组合物注射乳组、组合物注射脂质体组与四氯化碳模型组相比较，AST、ALT活性均有极显著差异(P＜0.01)。组合物注射乳和脂质体组与水飞蓟宾组的ALT、AST活性相比均有显著性差异(P＜0.05)，与正常对照组的AST、ALT活性均无显著差异。结果表明，组合物注射乳及组合物脂质体对于由四氯化碳引起的小鼠血清ALT、AST活性升高具有抑制作用。

3.2.肝脏病理组织学检查

观察发现，正常对照组小鼠肝组织结构正常，肝细胞排列有序，肝小叶结构完整，无肝细胞肿大及脂肪变性；四氯化碳模型组小鼠中毒后组织学改变明显，有肝小叶失去正常结构，肝细胞索排列紊乱，肝细胞疏松，有不同程度的水肿，体积增大，呈现气球样病变，血管充血(红细胞较多)，有炎症细胞浸润(中性粒细胞为主)，嗜酸性增强，局部细胞坏死等，水飞蓟宾组、组合物乳及组合物脂质体组小鼠均有四氯化碳模型组类似的组织病理改变，但病变程度均明显减轻，尤其组合物脂质体组最轻。

本发明药物组合物的最显著特点是：除解决了水飞蓟提取物的生物相溶性，更将具有肝病治疗的水飞蓟提取物(水飞蓟宾、水飞蓟素或水飞蓟素衍生物)和具有促进吸收和治疗作用的天然挥发油有效结合，起到药理协同作用，从而提高药物的疗效指数。

参考资料

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[10]王文元等，1，8-桉叶油素的研究进展，食品与药品，2007，9(2)：56。

Claims (8)

1.一种药物组合物，按最终药物组合物的重量计它包括：作为第一必要组分的0.001～30重量％的水飞蓟提取物；作为第二必要组分的0.001～30重量％的药学上可接受的天然挥发油；作为第三必要组分的0.01～30重量％的磷脂；适量的药学上可接受的等渗调节剂、稳定剂、以及药学上可接受的任选植物油和水。

2.据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于，所述的水飞蓟提取物是指：水飞蓟宾、水飞蓟素或水飞蓟素衍生物。水飞蓟素包括水飞蓟宾和异水飞蓟宾；水飞蓟素衍生物包括水飞蓟丁，水飞蓟宁和异水飞蓟素。药物组合物含有上述组分中的一种，或任何两种或两种以上任意比例的混合物。

3.据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于，所述的药学上可接受的天然挥发油是指任何植物中提取的药学上可接受的挥发油。如：莪术油、桉叶油、红花油、藿香油、薄荷油。

4.据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于，所述的磷脂可以是：蛋黄卵磷脂、大豆卵磷脂、氢化蛋黄卵磷脂、氢化大豆卵磷脂、人工合成或半合成卵磷脂、鞘磷脂和磷脂酰胆碱衍生物中的一种，或上述任何两种或两种以上任意比例的混合物。

5.权利要求1中所述的药物组合物，其特征在于所述的其它药学上可接受的任选的植物油选自大豆油、花生油、葵花油、橄榄油、红花油、菜籽油、蓖麻油或其两种或多种的混合物。

6.一种药物组合物乳的制备方法，它包括：

·按最终药物组合物的重量计，将0.01-30重量％的磷脂、0.001-30重量％的水飞蓟提取物溶于0.001-30重量％的药学上可接受的天然挥发油和任选的其它植物油中使其充分溶解后，制得油相；

·将余量的磷脂、等渗调节剂加入注射用水，搅拌均匀制得水相；

·将所述油相和所述水相在30～60℃条件下搅拌混合并高速剪切制成初乳液；

·将上述初乳液经高压均质制得乳液，进而制备口服液和注射剂。

7.如权利要求6中所述的药物组合物，其特征在于所述等渗调节剂是指药学常用的任何等渗调节剂，如丙三醇、磷酸氢二钠和磷酸二氢钠，特别指丙三醇。

8.一种药物组合物脂质体的制备方法，它包括：

·配制pH6～9的生理缓冲溶液；

·按最终组合物的重量计，将0.01-30重量％的磷脂、0.001-30重量％的水飞蓟提取物、0.001-30重量％的药学上可接受的天然挥发油以及适量胆固醇溶于适量无水乙醇中，制得乙醇溶液；无水乙醇的用量以能使上述各种物质完全溶解为宜。

在高速搅拌条件下将所述乙醇溶液加入适量所述缓冲液中，随后超滤或减压除去无水乙醇。

将上述药液经无菌过滤制得脂质体，进而制备口服液和注射剂。