CN101336615A - 铺地竹芽尖组织培养基及组培快繁方法 - Google Patents
铺地竹芽尖组织培养基及组培快繁方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN101336615A CN101336615A CNA2008100633920A CN200810063392A CN101336615A CN 101336615 A CN101336615 A CN 101336615A CN A2008100633920 A CNA2008100633920 A CN A2008100633920A CN 200810063392 A CN200810063392 A CN 200810063392A CN 101336615 A CN101336615 A CN 101336615A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- tissue culture
- bamboo
- culture medium
- bud
- tcm
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 235000017166 Bambusa arundinacea Nutrition 0.000 title claims abstract description 47
- 235000017491 Bambusa tulda Nutrition 0.000 title claims abstract description 47
- 241001330002 Bambuseae Species 0.000 title claims abstract description 47
- 235000015334 Phyllostachys viridis Nutrition 0.000 title claims abstract description 47
- 239000011425 bamboo Substances 0.000 title claims abstract description 47
- 239000003104 tissue culture media Substances 0.000 title claims abstract description 37
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 12
- 230000006698 induction Effects 0.000 claims abstract description 6
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- 239000002609 medium Substances 0.000 claims description 10
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 claims description 9
- 238000005286 illumination Methods 0.000 claims description 7
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 claims description 7
- 239000007640 basal medium Substances 0.000 claims description 6
- 238000005406 washing Methods 0.000 claims description 6
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 claims description 5
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 claims description 5
- LUBJCRLGQSPQNN-UHFFFAOYSA-N 1-Phenylurea Chemical compound NC(=O)NC1=CC=CC=C1 LUBJCRLGQSPQNN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 claims description 3
- 239000003415 peat Substances 0.000 claims description 3
- SUKJFIGYRHOWBL-UHFFFAOYSA-N sodium hypochlorite Chemical compound [Na+].Cl[O-] SUKJFIGYRHOWBL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- CGIDKJRJBMFXKV-UHFFFAOYSA-N 6-n'-benzylpurine-6,6-diamine Chemical compound N1=CN=C2N=CN=C2C1(N)NCC1=CC=CC=C1 CGIDKJRJBMFXKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 2
- 239000002994 raw material Substances 0.000 claims description 2
- 239000007921 spray Substances 0.000 claims description 2
- 150000004867 thiadiazoles Chemical class 0.000 claims description 2
- 239000010455 vermiculite Substances 0.000 claims description 2
- 235000019354 vermiculite Nutrition 0.000 claims description 2
- 229910052902 vermiculite Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 abstract description 12
- 230000008929 regeneration Effects 0.000 abstract description 9
- 238000011069 regeneration method Methods 0.000 abstract description 9
- 240000005499 Sasa Species 0.000 abstract description 2
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 abstract description 2
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 abstract 2
- 230000008774 maternal effect Effects 0.000 abstract 1
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 abstract 1
- 206010020649 Hyperkeratosis Diseases 0.000 description 4
- 238000009395 breeding Methods 0.000 description 3
- 230000001488 breeding effect Effects 0.000 description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- 230000001932 seasonal effect Effects 0.000 description 2
- CEAZRRDELHUEMR-URQXQFDESA-N Gentamicin Chemical compound O1[C@H](C(C)NC)CC[C@@H](N)[C@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](NC)[C@@](C)(O)CO2)O)[C@H](N)C[C@@H]1N CEAZRRDELHUEMR-URQXQFDESA-N 0.000 description 1
- 229930182566 Gentamicin Natural products 0.000 description 1
- 241000545744 Hirudinea Species 0.000 description 1
- KIPLYOUQVMMOHB-MXWBXKMOSA-L [Ca++].CN(C)[C@H]1[C@@H]2[C@@H](O)[C@H]3C(=C([O-])[C@]2(O)C(=O)C(C(N)=O)=C1O)C(=O)c1c(O)cccc1[C@@]3(C)O.CN(C)[C@H]1[C@@H]2[C@@H](O)[C@H]3C(=C([O-])[C@]2(O)C(=O)C(C(N)=O)=C1O)C(=O)c1c(O)cccc1[C@@]3(C)O Chemical compound [Ca++].CN(C)[C@H]1[C@@H]2[C@@H](O)[C@H]3C(=C([O-])[C@]2(O)C(=O)C(C(N)=O)=C1O)C(=O)c1c(O)cccc1[C@@]3(C)O.CN(C)[C@H]1[C@@H]2[C@@H](O)[C@H]3C(=C([O-])[C@]2(O)C(=O)C(C(N)=O)=C1O)C(=O)c1c(O)cccc1[C@@]3(C)O KIPLYOUQVMMOHB-MXWBXKMOSA-L 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 230000001186 cumulative effect Effects 0.000 description 1
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 238000011010 flushing procedure Methods 0.000 description 1
- 229960002518 gentamicin Drugs 0.000 description 1
- PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N gold Chemical compound [Au] PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000010931 gold Substances 0.000 description 1
- 229910052737 gold Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002917 insecticide Substances 0.000 description 1
- 210000001161 mammalian embryo Anatomy 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 238000004806 packaging method and process Methods 0.000 description 1
- 239000010451 perlite Substances 0.000 description 1
- 235000019362 perlite Nutrition 0.000 description 1
- 229920003023 plastic Polymers 0.000 description 1
- 229920000136 polysorbate Polymers 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 238000005507 spraying Methods 0.000 description 1
- 229940041022 streptomycins Drugs 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 229940063650 terramycin Drugs 0.000 description 1
- 238000012090 tissue culture technique Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
- Y02A40/00—Adaptation technologies in agriculture, forestry, livestock or agroalimentary production
- Y02A40/10—Adaptation technologies in agriculture, forestry, livestock or agroalimentary production in agriculture
- Y02A40/22—Improving land use; Improving water use or availability; Controlling erosion
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
- Y02P60/00—Technologies relating to agriculture, livestock or agroalimentary industries
- Y02P60/40—Afforestation or reforestation
Landscapes
- Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)
Abstract
一种铺地竹芽尖组织培养基由MS基础培养基附加6－BA2.0－3.5mg/L和TDZ 0.001－0.003mg/L组成，能有效地诱导增殖丛生芽和生根，快速培育、繁殖出再生苗。用本组织培养基组培快繁铺地竹经过下列四个步骤：一是外植体的采集与消毒，二是芽的诱导与增殖，三是诱导生根，四是驯化移栽。采用本培养基与组培快繁方法，能使增殖系数达5.2，试管生根率高达100％，试管苗的移栽成活率达95％。本发明突破了成熟竹类外植体组织培养出再生植株的难题，用一种培养基便诱导成功丛生芽、根，培育出再生植株，节省了用地、母株、时间与成本，繁殖不受季节制约，为大量盆景培植、大面积绿化用竹，奠定了快速和充足的竹苗生产基础。
Description
【技术领域】
本发明涉及一种小径混生竹即铺地竹以顶芽或侧芽的芽尖为外植体的组织培养基及组培快繁方法。
【背景技术】
铺地竹(Sasa argenteostria ta)是一种常绿的禾本科植物，为小径混生竹，高0.2-0.4m，地径0.2-0.3cm，叶绿，间有黄色或白色纵条纹，是盆景观赏和坡地保护的优良竹种。长期以来，铺地竹的繁殖采用整丛移植母竹或鞭根移植方法实现，存在着受季节限制、母竹消耗量大、用地多、母竹运输不便、繁殖系数低等不足。近年，我国的竹类组织培养技术探索和实践者渐增，有用孝顺竹的顶芽、侧芽外植体进行诱导，获得愈伤组织并建立悬浮细胞系的消息报道，也还有用金镶玉竹新萌发的嫩芽为材料，经组织培养成再生植株的消息报道。目前，竹组培学界较为普遍的认识是竹类的多数幼嫩材料能诱导出再生植株，而有的只能诱导出愈伤组织。一般情况下胚起源的愈伤组织容易获得再生植株，幼嫩组织或再生植株的各衍生部分也较容易诱导出愈伤组织或再生植株，取自成熟竹的外植体组织培养难度大，很难诱导产生再生植株，经检索，至今未见用成熟铺地竹的芽为外植体，配制有效的组织培养基，对铺地竹进行快繁的方法的报道。
【发明内容】
本发明要解决的技术问题是用成熟的铺地竹的顶芽或侧芽为外植体，配制一种有效的组织培养基，进行诱导来实现铺地竹的快速繁殖。
解决上述问题的技术方案是：
本铺地竹芽尖组织培养基，以MS作基础培养基，还含有6-BA即6-苄氨基腺嘌呤2.0-3.5mg/L、TDZ即噻二唑苯基脲0.001-0.003mg/L，培养基的pH值为5.7。
6-BA较理想的浓度为2.5-3.2mg/L；6-BA最理想的浓度为3mg/L。
TDZ较理想的浓度为0.0015-0.0025mg/L；TDZ最理想的浓度为0.002mg/L。
本铺地竹芽尖组织培养基组培快繁方法经过下列步骤：
(1)外植体的采集与消毒：我国南方4-6月份，选野外铺地竹的优良成熟竹群进行喷药杀菌、杀虫处理1-2周，取顶芽或侧芽带回实验室，用自来水冲洗，再用75％酒精浸泡，后用次氯酸钠处理，再用无菌水冲洗，剥去包裹芽体的箨片，切下含生长点的芽尖作外植体；
(2)芽的诱导与增殖：将切得的芽尖接种于含有6-BA2.0-3.5mg/L和TDZ0.001-0.003mg/L的MS基础培养基中，pH＝5.7，在25±2℃、1600Lux、16h/d光照下培养，每4周继代一次，经1-2次继代，即诱导出丛生芽；
(3)诱导生根：诱导出丛生芽后，仍在相同原培养基中继续经2-3次继代，试管苗生根；
(4)驯化移栽：将生根良好的幼苗移至驯化室、光照强度3000Lux、驯化1-2周，将苗从试管取出，用温水冲洗苗根部培养基，再用冷水冲洗，移栽至盆装基质中，移毕的苗套上袋，每隔3天将袋子剪一小口，9-12d去袋移至温室即成。
步骤(4)的基质的原料及其配比是泥炭、蛭石、珍珠岩的体积比为1∶1∶1，每3升基质加1升水和3克抗生素。
本发明的有益效果是突破了人们用成熟小径丛生竹，尤其是成熟的铺地竹外植体组织培养出再生植株的难题，并且只采用了一种培养基便解决了铺地竹的新芽与根的高效诱导、快速增殖、稳定成活的一整套关键技术问题，成本低，省地、省母竹、不受季节影响，繁殖率高而快速，为大量的盆景培植和大面积绿化用竹奠定了快速而充足供苗的生产基础。
【具体实施方式】
本发明下面结合实施例作进一步详述：把组织培养基的成分及其配比列于表(1)：
表(1)
实施例1(对照表1中实施例1对应的成分及其配比，实施例1-7是配制增殖丛生芽与生根用的有效的组织培养基)：用通用的MS基础培养基附加2.0mg/L的6-BA和0.001mg/L的TDZ配制成组织培养基，用于诱导铺地竹成熟顶芽芽尖外植体的增殖与生根，在权利要求6步骤(2)指明的pH值、温度、光照条件下，继代1-2次即增殖出丛生芽，继代2-3次，生根。
其余实施例2-7均可供芽尖外植体增殖出丛生芽及生根，以实施例4、7优选，实施例5、6较差。其中实施例4是实现诱导芽尖的增殖系数达5.2、试管苗生根率达100％、驯化后试管苗的移栽成活率达95％以上的优秀培养基。
实施例8：本实施例是以铺地竹顶芽或侧芽的芽尖为外植体的组培育苗快繁方法，需经下列步骤：
(1)外植体的采集与消毒：4-6月对野外竹园喷药杀虫灭菌，处理1-2周后，取顶芽或侧芽带回实施室，自来水冲洗2-3h，再用75％酒精浸泡1min，用0.5％的NaClO和占其重量0.2％的吐温在真空状态下处理15min，再用无菌水冲洗5-6遍。将包裹在芽体外的箨片剥去，切下含生长点的长约5mm的芽尖作外植体。
(2)芽的诱导与增殖：将切得的芽尖接种于含有6-BA2.0-3.5mg/L和TDZ 0.001-0.003mg/L的MS基础培养基中，pH＝5.7，在25±2℃、1600Lux、16h/d光照下培养，每4周继代一次，经1-2次继代，即诱导出丛生芽；增殖系数达5.2。
(3)诱导生根：诱导出丛生芽后，仍在相同原培养基中继续经2-3次继代，试管苗生根，生根率达100％。
(4)驯化移栽：将生根良好的幼苗移至驯化室、光照强度3000Lux、驯化1-2周，将苗从试管取出，用温水冲洗苗根部培养基，再用冷水冲洗，移栽至盆装基质中，移毕的苗每盆套上一只透明塑料袋，每隔3天将袋子剪一小口，9-12d去袋移至温室即成。
实施例9：本实施例是有关移栽至盆栽的盆装基质的配制，选泥炭、蛭后、珍珠岩按体积比为1∶1∶1混匀，再按每3升基质加1升水和3克链霉素或土霉素或庆大霉素等的比例加入拌匀即成。选用的抗生素以低价、广谱为宜。
上述实施例中未表明具体条件的按常规操作或按商品包装所注条件操作。
本申请中增殖系数是指试管苗丛生芽的总数与产生这些丛生芽的外植体总数的比值。
Claims (7)
1、一种铺地竹芽尖组织培养基，以MS作基础培养基，其特征是还含有6-BA即6-苄氨基腺嘌呤2.0-3.5mg/L、TDZ即噻二唑苯基脲0.001-0.003mg/L，培养基的pH值为5.7。
2、如权利要求1所述的铺地竹芽尖组织培养基，其特征是所说的6-BA浓度为2.5-3.2mg/L。
3、如权利要求1所述的铺地竹芽尖组织培养基，其特征是所说的6-BA浓度为3mg/L。
4、如权利要求1所述的铺地竹芽尖组织培养基，其特征是所说的TDZ浓度为0.0015-0.0025mg/L。
5、如权利要求1所述的铺地竹芽尖组织培养基，其特征是所说的TDZ浓度为0.002mg/L。
6、一种铺地竹芽尖组织培养基组培快繁方法，其特征是经过下列步骤：
(1)外植体的采集与消毒：我国南方4-6月份，选野外铺地竹的优良成熟竹群进行喷药杀菌、杀虫处理1-2周，取顶芽或侧芽带回实验室，用自来水冲洗，再用75％酒精浸泡，后用次氯酸钠处理，再用无菌水冲洗，剥去包裹芽体的箨片，切下含生长点的芽尖作外植体；
(2)芽的诱导与增殖：将切得的芽尖接种于含有6-BA2.0-3.5mg/L和TDZ0.001-0.003mg/L的MS基础培养基中，pH＝5.7，在25±2℃、1600Lux、16h/d光照下培养，每4周继代一次，经1-2次继代，即诱导出丛生芽；
(3)诱导生根：诱导出丛生芽后，仍在相同原培养基中继续经2-3次继代，试管苗生根；
(4)驯化移栽：将生根良好的幼苗移至驯化室、光照强度3000Lux、驯化1-2周，将苗从试管取出，用温水冲洗苗根部培养基，再用冷水冲洗，移栽至盆装基质中，移毕的苗套上袋，每隔3天将袋子剪一小口，9-12d去袋移至温室即成。
7、如权利要求6所述的铺地竹芽尖组织培养基组培快繁方法，其特征是步骤(4)的基质的原料及其配比是泥炭、蛭石、珍珠岩的体积比为1∶1∶1，每3升基质加1升水和3克抗生素。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CNA2008100633920A CN101336615A (zh) | 2008-08-12 | 2008-08-12 | 铺地竹芽尖组织培养基及组培快繁方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CNA2008100633920A CN101336615A (zh) | 2008-08-12 | 2008-08-12 | 铺地竹芽尖组织培养基及组培快繁方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN101336615A true CN101336615A (zh) | 2009-01-07 |
Family
ID=40210899
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CNA2008100633920A Pending CN101336615A (zh) | 2008-08-12 | 2008-08-12 | 铺地竹芽尖组织培养基及组培快繁方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN101336615A (zh) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103314851A (zh) * | 2013-07-01 | 2013-09-25 | 浙江农林大学 | 混生竹类微繁方法 |
| CN105028212A (zh) * | 2015-08-28 | 2015-11-11 | 浙江农林大学 | 藓竺竹高效再生体系的建立方法 |
| CN110402817A (zh) * | 2019-07-29 | 2019-11-05 | 南京林业大学 | 一种翠竹组培苗瓶外生根的方法 |
-
2008
- 2008-08-12 CN CNA2008100633920A patent/CN101336615A/zh active Pending
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103314851A (zh) * | 2013-07-01 | 2013-09-25 | 浙江农林大学 | 混生竹类微繁方法 |
| CN105028212A (zh) * | 2015-08-28 | 2015-11-11 | 浙江农林大学 | 藓竺竹高效再生体系的建立方法 |
| CN110402817A (zh) * | 2019-07-29 | 2019-11-05 | 南京林业大学 | 一种翠竹组培苗瓶外生根的方法 |
| CN110402817B (zh) * | 2019-07-29 | 2021-10-19 | 南京林业大学 | 一种翠竹组培苗瓶外生根的方法 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN103651121B (zh) | 一种白及分化、壮苗培养基 | |
| CN102369881B (zh) | 一种铁皮石斛腋芽的快速繁殖方法 | |
| CN102301952B (zh) | 一种甘菊繁殖方法 | |
| CN102657088B (zh) | 红豆树组织培养方法 | |
| CN103651122B (zh) | 一种白及原球茎诱导培养基 | |
| CN1989799A (zh) | 一种矮化梨树的育苗方法 | |
| CN102907318B (zh) | 一种利用生物反应器培养体细胞胚快繁三七再生植株的方法 | |
| CN103461143B (zh) | 一种油茶组织培养快速繁殖方法 | |
| CN102845313A (zh) | 狗枣猕猴桃的离体快速繁殖方法 | |
| CN109329029B (zh) | 适合实验室科研研究的地被竹水培培育方法及其培育装置 | |
| CN101933455A (zh) | 一种普陀樟的离体繁殖方法 | |
| CN1806512A (zh) | 绿玉树扦插繁殖和组织培养快速繁殖的方法 | |
| CN103460971B (zh) | 一种提高栝楼组培苗移栽成活率的方法 | |
| CN101810144B (zh) | 瓜叶菊的快速繁殖方法 | |
| CN102550271B (zh) | 耐寒天竺桂种质容器苗商品化培育方法 | |
| CN103609444B (zh) | 常绿萱草的组织培养法 | |
| CN103155868A (zh) | 樱桃砧木zy-1组培快速育苗方法 | |
| CN101743908A (zh) | 红花银桦组培快繁及栽培方法 | |
| CN101336615A (zh) | 铺地竹芽尖组织培养基及组培快繁方法 | |
| CN108391591B (zh) | 一种黄花风铃木组织培养快繁方法 | |
| CN102228006B (zh) | 金荞麦组织培养快速育苗方法 | |
| KR101064947B1 (ko) | 새우난초 엽절편으로부터 재분화된 식물체의 대량생산방법 | |
| CN107624610A (zh) | 一种火焰南天竹组培苗炼苗基质 | |
| CN102640663A (zh) | 一种用营养枝作砧木的茄果类蔬菜嫁接育苗方法 | |
| KR100330123B1 (ko) | 양란 심비디움 신품종 아구리 식물 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C02 | Deemed withdrawal of patent application after publication (patent law 2001) | ||
| WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |
Open date: 20090107 |