CN101332259B - 虫草多糖含片及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种虫草多糖含片及其制备方法,其中:虫草多糖提取物50%-70%、罗汉果提取物5%-15%、绿茶提取物2%-10%,复合填充剂20%-30%,其制备方法为,取虫草多糖提取物、罗汉果提取物、绿茶提取物分别过100目筛,加入复合填充剂后,混合,将混合均匀的药粉置槽型混合机中,然后加入配好的润湿剂,搅拌,之后将混合充分的软料投入摇摆式颗粒机中过尼龙筛造粒,再把颗粒入真空干燥机中进行干燥,整粒,混匀后用压片机器压片。该发明组方合理、活性成分均衡,风味独特,适合一种适合大多数人服用的保健食品。
Description
技术领域
本发明涉及一种生物工程技术领域的含片及其其制备方法,具体地,本发明涉及一种虫草多糖含片及其制备方法。
背景技术
虫草属真菌是药用真菌中的一个大类,属真菌门((Eumycota),子囊菌亚门(Ascmycotina),核菌纲(Pyenomycetes)、壳菌目(Sphaerides),麦角菌科((Clavicipiracese),虫草属(Cordyceps)。此属现报道的已有350余种,国内发现有30余种,有的种可以入药,有的种不能入药,更多的未作研究。虫草属中的蛹虫草(Cordyceps militaris)是寄生在夜蛾科等蛹体上的一个品种,在世界各地均有分布,50年代徐家忠在吉林地区采集报道,故而称为:东北虫草,北冬虫夏草,简称北虫草。它是国内外公认的可以食用药用的一种真菌,是最有潜力替代冬虫夏草C.sinensis入药的品种。目前,全国北虫草栽培面积较大,以各种食用菌栽培企业附带栽培为主,年产量约100吨左右,北虫草的主要商品形式为子实体,产品加工处于初级阶段,如浸泡勾对成酒、粉碎装入胶囊等。
真菌多糖是真菌中具有生物活性的主要有效组分之一,冬虫夏草C.sinensis等虫草属真菌的药物化学、药理学研究表明,虫草属真菌具有丰富的生物活性物质和广泛的药理作用。上世纪在70年代末至90年代初期,对C.sinensis及其代用品真菌多糖的研究多集中在C.sinensis等几种名贵中药有性型的多糖,但由于冬虫夏草C.sinensis等虫草严格的寄生性与特殊的生境成为制约其工业化生产的瓶颈,且野生资源遭有限,市场价格节节攀升。为此国内外学者在C.sinensis代用品方面做了许多富有成效的工作。一是在虫草资源开发面上的展开,对虫草属中C.sinensis外的其它虫草尤其是民间有药用史的虫草做了系统的药物化学、药理和毒理等比较研究,以及人工批量培植方面的研究。比如北虫草C.militaris、凉山虫草C.liangshanensis Zhang,Liu et Hu、霍克斯虫草C.hawkesii(Gray)Cooke、甘肃虫草C.gansuensisZhang,Wang et Yan、香棒虫草C.barnesisThwaites ex Berk.Et Br.、巴西虫草C.brasiliensis P.Henn等等。二是在虫草资源层次上的深入,致力于虫草无性型及相关真菌等代用品的研究开发,如C.sinensis的相关真菌蝙蝠蛾拟青霉Paecilomyces hepiali Chen et Dai、中华头孢霉Cephalosporiumsinensis Chen、蝙蝠蛾被毛孢霉Mortierella hepiali Chen et Lu等已相继产业化。由于多糖研究的复杂性,至今C.sinensis及其代用品真菌多糖多限于研究阶段。
虫草多糖(Cordyceps Polysacchride,CP)是一类高分子复合物,它作为虫草主要活性成分之一,是虫草中量最高的药理活性物质。从目前对天然冬虫夏草以及人工培育的虫草真菌中分离纯化出的多种多糖组分的研究结果看:(1)虫草属真菌多糖组成:主要有葡聚糖、半乳甘露聚糖和半乳葡甘露聚糖几类。从单糖组成看多含半乳糖、葡萄糖、甘露糖以及少量蛋白质。(2)药理作用:虫草属真菌多糖是种生物效应调节剂,能控制细胞的分裂和分化,调节细胞的生长和衰老;具有广泛的免疫调节功能,能预防和治疗机体免疫系统受到严重损伤的癌症和爱滋病以及其它免疫缺损疾病,还具有抗衰老、抗病毒、抗辐射、抗凝血、降血糖、降血脂等活性。研究已表明C.sinensis及其代用品真菌多糖具有多种生物活性。(3)提取和检测:虫草多糖大多采用水提醇沉的工艺;多糖测定方法主要有碱性酒石酸铜测定法、比色法(蒽酮、苯酚硫酸法)。当成品中的多糖含量大于1%(质量浓度)时,最好选取碱性酒石酸铜滴定法。
经查新,虫草的深加工特别是多糖产品,以胶囊为剂型为主,如虫草多糖胶囊分别由江苏沃尔德实业有限公司、深圳市汇康生物科技有限公司等生产;另外还有少量的口服液产品,如虫草多糖口服液,分别由江苏沃尔德实业有限公司,天津市宝恒生物科技有限公司等生产。总之,虫草多糖产品剂型单一,配伍简单,严重制约了多糖产品开发的进程。另外,从国内外生产的口含片的功效来看,大多局限于润喉和局部消炎作用。
发明内容
本发明的目的在于克服现有技术中的不足,提供一种虫草多糖含片及其制备方法,使其利用北虫草提取虫草多糖(Cordyceps Polysaccharides),并将虫草多糖和罗汉果提取物配伍,既兼顾了免疫调节的功效,又发挥了口含片清咽润喉的作用。
本发明是通过以下技术方案实现的:
本发明所述的虫草多糖含片,包含的组分及其重量百分比含量为:虫草多糖提取物50%-70%、绿茶提取物2%-10%、罗汉果提取物5%-15%、填充剂20%-30%。本发明既兼顾功效成分,又能明显改善产品风味。
进一步,优选的重量百分比为:虫草多糖提取物55%-65%、绿茶提取物4%-8%、罗汉果提取物7%-12%、复合填充剂20%-29%。
所述虫草多糖提取物,其中多糖含量按照重量百分比计算大于30%。
所述罗汉果提取物,其中罗汉果甜甙按照重量百分比计算大于80%。
所述绿茶提取物,其中茶多酚按照重量百分比计算大于80%。
所述虫草多糖提取物、罗汉果提取物、绿茶提取物均可从国家认定的生产厂家购买,如西安奥晶科技发展有限公司(罗汉果提取物,产品编号:DW-829;绿茶提取物,产品编号:BZ-007等,2007购买),复合填充剂通过市场购买,符合国家食品卫生要求。
本发明上述的虫草多糖含片的制备方法,具体为:将虫草多糖提取物、绿茶提取物、罗汉果提取物、填充剂按比例充分混合,将混合均匀的药粉置槽型混合机中,然后加入乙醇溶液作为润湿剂,搅拌,之后将混合充分的软料投入摇摆式颗粒机中过尼龙筛造粒,再把颗粒入真空干燥机中进行干燥,整粒,用压片机器压片。
所述虫草多糖提取物(Cordyceps militaris polysaccharides extracts)是指来源于北虫草(Cordyceps militaris)子实体、固体发酵基质中,通过水提醇沉工艺获得的粗多糖(crude polysaccharides),以葡萄糖为对照品,苯酚硫酸法测定多糖含量大于30%。
所述罗汉果提取物(Momordica grosvenori(Luo-Han-Guo)P.E.)是指从罗汉果(Siraitia grosvenori)中提取的罗汉果甙的总称,包括罗汉果甙(mogroside)IV、V、VI等,通过UV/HPLC方法检测,罗汉果总甜甙应大于80%。
所述绿茶提取物(Green Tea Extract)是指从茶叶中提取的純天然复合合物,主要成分茶多酚含量应大于80%。
上述三种提取物的提取工艺均采用现有公知的方法进行提取。
所述复合填充剂采用现有技术,比如:喷雾干燥甘露醇200SD为主要填充剂,附加适量的柠檬酸(或薄荷脑)、10%的聚乙烯吡咯烷酮(PVP)乙醇溶液,硬脂酸镁、甘露醇和阿斯巴甜等。
所述充分混合,是指投入多项运动混合机中混合20min左右。
所述润湿剂,其配制方法为:将纯化水乙醇混合,搅拌,使均匀分散,配制成体积百分比为90%-95%的乙醇溶液,作为润湿剂。
所述过尼龙筛,是指过14目尼龙筛。
所述颗粒入真空干燥机中进行干燥,是指:干燥温度为55-60℃,时间为2小时,真空度控制在0.053-0.060Mpa,颗粒的水分控制在5%~7%。
所述整粒,是指:把干燥过程中部分互相粘结成块的颗粒经过筛(14目)整粒,未能通过筛网的块或粗粒,可加以研碎,使成适宜的(能过12-14目尼龙筛)颗粒并过筛。
所述压片,是指:在5.0-7.0kg压力条件下,使用压片机器压片;在压片前一些挥发性的成分(如薄荷脑),先用乙醇溶解或与其它成分混合研磨使共熔后,再喷射在颗粒上混匀,然后再进行压片。
按照中药现代化的理念,物质间“相生相克,相辅相成”,相互配伍,相互协同。大量的研究表明,虫草多糖是人体免疫调节和免疫保护剂;罗汉果中含有大量的果糖、蛋白质和多种维生素,其性凉味甜,具有抗菌消炎,止咳润肺等功效,因此它具有清肺、利咽和甜味调节的双重功能,本发明把虫草多糖和罗汉果提取物配伍,既兼顾了免疫调节的功效,又发挥了口含片清咽润喉的作用,使人们在休闲娱乐中达到防病治病的目的,同时解决了现有的北虫草产品单一,多糖产品口感差、成型不好,营养成分单一等问题。
附图说明
图1虫草多糖口含片的制作工艺
图2葡萄糖的标准曲线
图3罗汉果糖苷V的TLC检测结果,其中:1、对照品2、供试品。
具体实施方式
下面结合实验室具体的试验数据和结合具体实施例,进一步阐述本发明。这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法,通常按照常规条件,或按照制造厂商所建议的条件。
本发明整个虫草多糖口含片的制作过程可总结为:虫草多糖提取物、罗汉果提取物、绿茶提取物、+填充剂→(加95%乙醇)制粒→(过14目尼龙筛)干燥(55-60℃,2h)→整粒(过12目不锈钢筛)→压片→灭菌→包装。制作工艺如图1所示,环境要求10万级洁净区。虫草多糖提取物可以参照现有技术中的水提醇沉法得到。
实施例1 虫草多糖含片的制备
原辅料的组合①虫草多糖提取物:经粉碎后过100目筛的虫草多糖提取物,多糖含量大于30%;②罗汉果提取物:罗汉果甜甙≥80%;③绿茶提取物,茶多酚≥80%;④复合填充剂:喷雾干燥甘露醇200SD为主要填充剂,附加适量的柠檬酸(或薄荷脑)、10%的聚乙烯吡咯烷酮(PVP)乙醇溶液,硬脂酸镁、甘露醇和阿斯巴甜等,符合国家食品卫生要求。
制作的各种原料按照以下重量百分比组合成混合物进行下一步制作。
制作工艺虫草多糖提取物、罗汉果提取物、绿茶提取物、+填充剂→(加95%乙醇)制粒→(过14目尼龙筛)干燥(55-60℃,2h)→整粒(过12目不锈钢筛)→压片(5.0-7.0kg压力下)→灭菌→包装。具体操作如下:
(1)混合
虫草多糖提取物、罗汉果提取物、茶叶提取物和复合填充剂按一定量比例配制后投入多项运动混合机中混合20min,充分混合。试验证明,投入混合器内的全部用水必须保持全部投料重的7%-9%之间。
使用香精,先用95%的酒精溶解后,在充分混合其它料后,把香精喷洒在软料中搅匀。
(2)造粒与干燥
①配润湿剂:将纯化水9.5kg与95%的乙醇5.5kg混合,搅拌,使均匀分散,配制成35%的乙醇溶液15kg.
②制软材:将混合均匀的药粉置槽型混合机中,然后加入配好的润湿剂,搅拌10min。
③制湿颗粒:混合充分的软料投入摇摆式颗粒机中用14目尼龙筛进行造粒。
④干燥:再把颗粒入真空干燥机中进行干燥,真空度控制在0.053-0.060Mpa,温度控制在55-60℃,使颗粒的水分控制在5%~7%左右。
【注:以14目筛为造粒工具,将软材压过筛网变成颗粒状,将湿粒置于温度为60℃的电热鼓风干燥箱,每隔30min翻动一次,以加快干燥速度。干燥终点主要依靠感观判断,当手捏干粒时,手感干脆、不粘手,用力一捏可勉强捏碎为宜。】
(3)压片与灭菌
①压片:颗粒经检验符合要求后,按照0.545g平均重量压片,片重差异限度为±3%,硬度4.0-5.0kg.
②筛片:除去细粉、残片,将加工好的素片贴上桶签待检验。
③灭菌:并将片剂放在紫外线下照射15-20min,然后及时包装。
(4)包装:内外包装必须检验合格,符合国家卫生要求和相关标准。
(5)入库:成品按批次分别码放并挂上待验标牌,合格后办理入库手续。
以上几个单元操作均在十万级洁净车间进行,各单元操作要求温度控制在18~26℃,相对湿度控制在45%~65%,人员、物料、设备、环境均需按各自的清洁规程进行清洁。
实施例2 含片中虫草多糖的检测
分别取组合1、组合2、组合3制成的含片成品进行多糖含量的检测。
1.样品处理
(1)样品提取:取制成含片10片研钵磨碎,称取混合均匀的固体样品2.0g,至于100mL的容量瓶中,加水80mL左右,与沸水上加热2h,冷却至室温后补加水至刻度,混匀后,过滤,弃去初滤液,收集余下滤液供沉淀多糖。
(2)沉淀粗多糖:准确吸取最终滤液样品5.0mL(或液体样品5mL),置于50mL离心管中,加入无水乙醇20mL,混匀5min后,以3000r/min离心5min,弃去上清液。残渣用80%(体积分数)乙醇溶液数毫升洗涤,离心后弃上清液,反复操作3-4次。残渣用水溶解并定容至5.0mL,混匀后,供沉淀葡聚糖。
2.标准曲线的绘制:准确吸取葡萄糖标准使用液0、0.10、0.20、0.40、0.60、0.80、1.00mL(相当于葡萄糖0、0.01、0.02、0.04、0.06、0.08、0.10mg)分别置于20mL加塞试管中,准确补充水至2.0mL,加入50g/L苯酚溶液1.0mL,在旋转混匀器上混匀,小心加入浓硫酸10.0mL,于旋转混匀器上小心混匀,置沸水浴中煮沸2min,冷却后用分光光度计在490nm波长处以试剂空白溶液为参比,1cm比色皿测定吸光度值。以葡萄糖浓度为横坐标,吸光度值为纵坐标,绘制标准曲线(见图2)。
3.样品测定:准确吸取样品测定液2.0mL置于20ml带塞的试管中,加入50g/L苯酚溶液1.0mL,在旋转混匀器上混匀,小心加入浓硫酸10.0mL于旋转混匀器上小心混匀,置沸水浴中煮沸2min,冷却至室温,用分光光度计在490nm波长处,以试剂空白为参比,1cm比色皿测定吸光度值。从标准曲线上查出葡萄含量,计算样品中粗多糖含量。同时做样品空白实验。
根据表2数据,经过Origin 6.0处理得到得标准曲线,并得到回归方程为:Y=0.07664+1.53476X,回归系数R2=0.99269(n=6),根据样品测得吸光值可知样品的粗多糖含量为分别为:组合1制成的含片中多糖含量为6.01%/、组合2为6.56%、组合3为7.05%。
实施例3含片中罗汉果糖苷V的TLC(thin-layer chromatography)定性鉴别
分别取组合1、组合2、组合3制成的含片成品进行汉果糖苷V的定性鉴别。
(1)薄层色谱条件
用0.5%羧甲基纤维素钠溶液为粘合剂铺制的硅胶G板,板厚0.3mm,在105℃活化30min。以正丁醇-乙醇-水(8∶2∶3)为展开剂,上行展开,展距为11cm,以10%硫酸乙醇显色,在105℃烘至斑点清晰。
(2)对照品溶液制备
精密称取Mogro side V对照品10.0mg,用蒸馏水定容于10mL容量瓶中,制成1.0mg/mL溶液。
(3)供试品溶液制备
供试品溶液制备:准确称取复方虫草口含片(相当于罗汉果提取物0.2g),用蒸馏水适量溶解后,转移至25ml容量瓶中,加蒸馏水稀释至刻度、摇匀,配制成供试品溶液。
(4)薄层分离及扫描试验
分别精确吸取Mogro side V对照品溶液5.0μL和供试品溶液10.0μL点于同一硅胶G薄层板上,按(1)所述色谱条件展开、显色。
(5)结果判断
对照品和供试品在Mogro side V斑点的Rf值一致,供试品的斑点较多(见图3)。
Claims (7)
1.一种虫草多糖含片,其特征在于,其组分及其重量百分比含量为:虫草多糖提取物50%-70%、绿茶提取物2%-10%、罗汉果提取物5%-15%、填充剂20%-30%;
所述虫草多糖提取物,其中多糖含量按照重量百分比计算大于30%;
所述罗汉果提取物,其中罗汉果甜甙按照重量百分比计算大于80%;
所述绿茶提取物,其中茶多酚按照重量百分比计算大于80%。
2.根据权利要求1所述的虫草多糖含片,其特征是,重量百分比为:虫草多糖提取物55%-65%、绿茶提取物4%-8%、罗汉果提取物7%-12%、填充剂20%-29%。
3.一种如权利要求1所述的虫草多糖含片的制备方法,其特征在于,将虫草多糖提取物、绿茶提取物、罗汉果提取物、填充剂按比例充分混合,将混合均匀的药粉置槽型混合机中,然后加入乙醇溶液作为润湿剂,搅拌,之后将混合充分的软料投入摇摆式颗粒机中过尼龙筛造粒,再把颗粒入真空干燥机中进行干燥,整粒,用压片机器压片。
4.根据权利要求3所述的虫草多糖含片的制备方法,其特征是,所述润湿剂,其配制方法为:将纯化水乙醇混合,搅拌,使均匀分散,配制成体积百分比为90%-95%的乙醇溶液,作为润湿剂。
5.根据权利要求3所述的虫草多糖含片的制备方法,其特征是,所述颗粒入真空干燥机中进行干燥,是指:干燥温度为55-60℃,时间为2小时,真空度控制在0.053-0.060Mpa,颗粒的水分控制在5%~7%。
6.根据权利要求3所述的虫草多糖含片的制备方法,其特征是,所述整粒,是指:把干燥过程中部分互相粘结成块的颗粒经过14目筛整粒,未能通过筛网的块或粗粒,加以研碎,过过12目-14目尼龙筛。
7.根据权利要求3所述的虫草多糖含片的制备方法,其特征是,所述压片,是指:在5.0-7.0kg压力下,采用压片机器进行压片,在压片前挥发性的成分先用乙醇溶解或研磨使共熔后,再喷射在颗粒上混匀,然后再压片。
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C14 | Grant of patent or utility model | ||
GR01 | Patent grant |