CN101323594A - 卤苄叔胺类双唑抗微生物化合物及其制备方法和医药用途 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一类具有抗微生物活性的卤苄叔胺类双唑化合物及其在药学上可接受的盐，结构通式为式I：本发明还涉及卤苄叔胺类双唑化合物及其在药学上可接受的盐的制备方法：即以取代卤苄与二乙醇胺为原料合成中间体卤苄叔胺二羟基化合物，再经溴化得卤苄叔胺二溴或经氯化得到卤苄叔胺二氯化合物，再与一系列唑类化合物反应制得卤苄叔胺类双唑化合物，最后再将卤苄叔胺类双唑化合物转化为硝酸盐或盐酸盐。本发明还涉及卤苄叔胺类双唑化合物及其在药学上可接受的盐及其药物组合物的医药用途。

Description

卤苄叔胺类双唑抗微生物化合物及其制备方法和医药用途

技术领域

本发明涉及有机化学和药物化学领域，具体涉及卤苄叔胺类双唑化合物及其药学上可接受的盐，本发明还涉及卤苄叔胺类双唑化合物及其药学上可接受的盐的制备方法、生物活性。本发明还涉及这些化合物的医药用途。

背景技术

真菌感染是一种常见病、多发病。真菌感染可分为浅表感染和深部感染。浅表感染主要由表皮癣菌、发癣菌和小孢霉菌等引起的头癣、足癣、指(趾)癣及体癣等；深部感染主要由真菌引起的深部组织和内脏器官感染，如肺、胃肠道、泌尿道等感染，严重者可引起心内膜炎、脑膜炎和败血症等。深部真菌感染可分为两大类：1、由致病性真菌所致的组织胞浆菌病、球孢子菌病、类球孢子菌病、芽生菌病、足分支菌病、着色霉菌病、孢子丝菌病等，多呈地区性流行。2、条件致病性真菌所致的念珠菌病、曲菌病、隐球菌病、毛霉菌病、放线菌病、奴卡菌病等。两类深部真菌感染治疗应用的药物基本相同。深部真菌感染多为念珠菌(70％～80％)和隐球菌所传播，侵犯内脏器官和血液系统。其发病率虽较浅表感染低，但危害性大、死亡率高。

现已有多种药物用于治疗真菌感染，目前临床常用的抗真菌药物主要有：1、多烯类：能损害真菌膜脂质结构及功能，如两性霉素B(AmpB)、制霉菌素。2、唑类：抑制真菌羊毛甾醇14α去甲基化酶(P450_14DM)，阻滞了真菌细胞中羊毛甾醇14α位去甲基化反应，干扰细胞膜脂质合成，如氟康唑、酮康唑、伊曲康唑等。3、烯丙胺类/硫代氨甲酸酯类：能竞争性抑制角鲨烯环氧化酶，干扰细胞膜脂质合成，如萘替芬、特比萘芬、托萘酯等。4、核苷类：能干扰真菌核酸的合成及功能，如氟胞嘧啶。5、吗啉类及一些相关的化合物：如阿莫洛芬等。

抗真菌药物，特别是氮唑类药物的产生，开辟了真菌病药物治疗的新时代。自从1969年第一个咪唑类抗真菌药物克霉唑用于临床以来，氮唑类药物引起广泛关注。该类药物抗真菌的作用部位是真菌的细胞壁。即通过抑制细胞内细胞色素P450催化的羟化反应，使麦角甾醇合成受阻从而破坏了真菌细胞的完整性，阻止了真菌细胞的生长及繁殖。常用的该类药物有酮康唑、氟康唑、伊曲康唑等。氟康唑对真菌细胞色素P450的结合力远远高于哺乳类动物，因此对人体无明显的肝毒性，对类固醇激素合成亦无明显的抑制作用。且氟康唑既可口服亦可注射，两种给药途径都表现出良好的体内动态，毒性低，对念珠菌病与隐球菌病均有效。伊曲康唑不但对念珠菌病与隐球菌病有效，而且对曲霉菌也有很强作用。

大量的构效关系研究表明，唑类抗真菌药物作为羊毛甾醇14α去甲基化酶的竞争性抑制剂必需有以下3种基团：1、能与酶活力位点血红素辅基螯合的特定基团；2、能与酶活力位点疏水空穴结合的专一疏水基团；3、能与酶活力位点及底物进出通道残基作用的基团。分子中唑环(咪唑或三唑环等)是必需基团，咪唑环的3位，三唑环的4位N原子与血红素Fe原子形成配位键，竞争性抑制该酶的活力。该N原子必需有一定程度的裸露，当被其他基团取代时，抗真菌活力丧失。咪唑或三唑环上的取代基团必须与氮杂环的1位N原子相连，1位N原子与中央C原予相连或相隔几个亚甲基。苯环4位一定体积和电负性取代基、苯环2位电负性取代基以及3位C原子上有取代基均能一定程度增强抗真菌活力。

目前临床应用的氮唑类抗真菌药物在有效控制致病真菌感染方面发挥了巨大作用，但还存在一些不足，该类药物在抑制真菌P450_14DM的同时对哺乳动物的P450系统也具有抑制作用，进而产生毒副反应，少数使用者还可出现严重的肝毒性；氟康唑、伊曲康唑、酮康唑等均有引起肝坏死或肝毒性致死的报道。同时，随着唑类药物应用日益广泛，真菌耐药性问题日趋严重，导致真菌耐药性产生的机制主要是真菌细胞摄入/透入的抗真菌药物药量减少，药物作用的靶酶基因突变或过量表达，将药物泵出/转运到细胞外的能力增强。真菌耐药性也给抗真菌治疗带来新的更严峻的挑战。

因此，对现有抗真菌化合物进行结构修饰以降低毒副作用及寻找作用于新靶点的高效低毒抗真菌新药已成为近年来抗真菌药物研究的两大热点。

发明内容

本发明的目的在于提供一类结构新型，且具有高效、低毒、广谱的卤苄叔胺类双唑抗微生物化合物及其在药学上可接受的盐。具体而言，本发明提供了一类具有下式I所示的化合物：

式中R是2-氯、3-氯、4-氯、2，3-二氯、2，4-二氯、2，5-二氯、2，6-二氯、3，4-二氯、3，5-二氯、2-氟、3-氟、4-氟、2，3-二氟、2，4-二氟、2，5-二氟、2，6-二氟、3，4-二氟或3，5-二氟；Im为唑类基团，是咪唑、2-甲基咪唑、2-乙基-4-甲基咪唑、2-苯基咪唑、2-硝基咪唑、4-硝基咪唑、2-甲基-5-硝基咪唑、三唑、2-甲基苯并咪唑、2-甲基-5-硝基苯并咪唑或5，6-二甲基苯并咪唑基团。R最佳可以为下列之一：2-氯、2，4-二氯。Im最佳可以为三唑。

本发明的另一目的是提供了式I化合物及其在药学上可接受的盐的制备方法。

本发明的另一目的是提供了式I化合物及其在药学上可接受的盐用于抗真菌、抗细菌等抗微生物药物的用途。

本发明还提出的卤苄叔胺类双唑化合物及其在药学上可接受的盐的合成方法，即以取代卤苄与二乙醇胺为原料合成中间体卤苄叔胺二羟基化合物，再经溴化或氯化得对应卤苄叔胺二溴或卤苄叔胺二氯化合物，再与一系列唑类化合物反应制得卤苄叔胺类双唑化合物，最后再将卤苄叔胺类双唑化合物转化为硝酸盐或盐酸盐。

具体制备包括如下步骤：

1)、卤苄叔胺二羟基化合物的合成

二乙醇胺与取代卤苄在溶剂中反应，或不使用溶剂直接混合反应，于室温至80℃下生成中间体卤苄叔胺二羟基化合物；所述溶剂是极性非质子溶剂乙腈、二甲亚砜或N，N-二甲基甲酰胺，或是极性质子溶剂甲醇或乙醇；

2)、卤苄叔胺二溴化合物或卤苄叔胺二氯化合物的合成

卤苄叔胺二羟基化合物在溶剂中、室温至80℃下，用三溴化磷溴化或氯化亚砜氯化，得对应中间体卤苄叔胺二溴化合物或卤苄叔胺二氯化合物；所述溶剂是氯仿或乙腈；

3)、卤苄叔胺类双唑化合物的合成

乙腈、四氢呋喃、二甲亚砜或N，N-二甲基甲酰胺为溶剂，卤苄叔胺二溴化合物或卤苄叔胺二氯化合物与三唑或咪唑等唑类化合物在室温至60℃，碳酸钾或氢化钠作碱条件下反应，得到对应卤苄叔胺类双唑化合物；

4)、卤苄叔胺类双唑硝酸盐或盐酸盐的制备

将上述步骤3)合成的卤苄叔胺类双唑化合物溶于乙醚或四氢呋喃中，缓慢滴加硝酸水溶液或盐酸水溶液，至无白色沉淀生成为止，然后用乙醚或四氢呋喃洗涤固体后干燥得产品；

或将上述步骤3)合成的卤苄叔胺类双唑化合物溶于乙醇，再将该乙醇溶液加至硝酸水溶液或盐酸水溶液中，除去溶剂后干燥得产品；

卤苄叔胺类双唑化合物在乙醚、四氢呋喃或乙醇中溶解度较差时，可加入氯仿助溶。

其中，所述步骤1)中，取代卤苄∶二乙醇胺∶无水碳酸钾的摩尔比为1∶1.1～1.2∶1.2～1.4；步骤2)中，叔胺二羟基化合物∶三溴化磷的摩尔比为1∶1.0～1.2；叔胺二羟基化合物∶氯化亚砜的摩尔比为1∶2.2～2.4；步骤3)中，叔胺二溴化合物∶唑类化合物∶碱(无水碳酸钾或氢化钠)的摩尔比为1∶1.8～2.4∶2.4～3.0；步骤4)中，所使用硝酸水溶液的浓度为1～5mol·L^-1，盐酸水溶液浓度为1～5mol·L^-1。

本发明采用上述合成路线和方法，得到本发明的目标化合物的合成方法简便，原料易得，成本较低。

采用上述卤苄叔胺类双唑化合物或其在药学上可接受的盐预期可制备获得抗微生物活性药物组合物，该药物组合物含有生理有效量的卤苄叔胺类双唑化合物或其药学上可接受的盐，它们在组合物中的用量重量比为0.1％～90％。

本发明的卤苄叔胺类双唑化合物或其药学上可接受的盐可以以单位剂量形式给药，给药途径可为肠道和非肠道，如口服、肌肉、皮下、鼻腔等。

本发明的卤苄叔胺类双唑化合物或其药学上可接受的盐的给药途径可为静脉给药。注射包括静脉注射、肌肉注射、皮下注射和穴位注射等。

本发明的卤苄叔胺类双唑化合物或其药学上可接受的盐的给药剂型可以是片剂、胶囊剂、气雾剂、分散片、口服液、栓剂、滴丸剂、大输液、小针、冻干粉针、软膏或搽剂等剂型药物，包括采用现已公认的药剂学常识常规制备而得的各种缓释、控释剂型或纳米制剂。

具体实施方式

以下通过对若干具体化合物合成实例的实施方式再对本发明的上述内容作进一步的详细说明，但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于下述的实例，根据本发明的实质对本发明进行的简单改进都属于本发明的保护范围。

实施例1：N-(2-(1H-1，2，4-三唑-1-基)乙基)-N-(2，4-二氟苄基)-2-(1H-1，2，4-三唑-1-基)乙胺(简称化合物1)的制备

将30mL乙腈、5.11g(37.0mmol)无水碳酸钾和1，2，4-三唑2.24g(32.4mmol)加入到装置有冷凝回流管及干燥管的100mL单颈圆底烧瓶中，搅拌升温至50℃，反应一小时，冷至室温后，搅拌下加入2-溴-N-(2-溴乙基)-N-(2，4-二氟苄基)乙胺5.52g(15.4mmol)。反应完成后，减压蒸出溶剂，残留物加水20mL，用二氯甲烷萃取三次，所有二氯甲烷层用饱和食盐水洗一次，之后用无水硫酸钠干燥。旋转蒸出溶剂后，经柱层析得微黄色固体4.30g，即化合物1，产率83.6％。mp.90.0～93.0℃；IR(KBr)v：3118(Ar-H)，2955，2841(CH₂)，1619，1506，1431(aryl skeleton，C＝C)，1275，1140(C-N)，962，855，679cm^-1；¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ：7.84(d，J 3.6Hz，2H，triazole 3-H)，7.78(d，J 4.0Hz，2H，triazole 5-H)，6.93～6.88(m，1H，Ph 6-H)，6.77～6.72(m，2H，Ph 3，5-H)，4.04～4.01(q，4H，triazole¹NCH₂CH₂)，3.58(s，2H，PhCH₂N)，2.94～2.91(q，4H，triazole ¹NCH₂CH₂)ppm；MS(ESI，m/z)：334[M]⁺.

实施例2：N-(2-(1H-咪唑-1-基)乙基)-N-(2，4-二氟苄基)-2-(1H-咪唑-1-基)乙胺(简称化合物2)的制备

将30mL新蒸四氢呋喃、1.04g(43.5mmol)氢化钠、咪唑2.53g(37.2mmol)加入到装置有冷凝回流管、干燥管和N₂保护装置的100mL三颈圆底烧瓶中，搅拌升温至50℃，反应一小时，冷至室温后，搅拌下加入2-溴-N-(2-溴乙基)-N-(2，4-二氟苄基)乙胺5.67g(15.9mmol)。反应完成后，减压蒸出溶剂，残留物冰水冷却下加入冰水混合物，用二氯甲烷萃取三次，所有二氯甲烷层用饱和食盐水洗一次，之后用无水硫酸钠干燥。旋转蒸出溶剂后，经柱层析得无色液体4.52g，即化合物2，产率85.8％。IR(KBr)v：3112(Ar-H)，2947，2834(CH₂)，1618，1505，1452(aryl skeleton，C＝C)，1280，1137(C-N)，961，850，666cm^-1；¹HNMR(400MHz，CDCl₃)δ：7.26(s，2H，imidazole 2-H)，6.94(d，J 3.0Hz，3H，imidazole 4-H，Ph 6-H)，6.76～6.71(m，4H，imidazole 5-H，Ph 3，5-H)，3.79(t，J 4.5Hz，4H，imidazole¹NCH₂CH₂)，3.60(s，2H，PhCH₂N)，2.71(t，J 4.5Hz，4H，imidazole ¹NCH₂CH₂)ppm；MS(ESI，m/z)：332[M]⁺。

实施例3：N-(2-(1H-1，2，4-三唑-1-基)乙基)-N-(2，4-二氯苄基)-2-(1H-1，2，4-三唑-1-基)乙胺(简称化合物3)的制备

按实施例1的合成方法。1，2，4-三唑2.50g(36.0mmol)，2-溴-N-(2-溴乙基)-N-(2，4-二氯苄基)乙胺5.86g(15.0mmol)，合成得到无色粘稠液体4.52g，即化合物3，产率82.3％。¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ：8.10(m，4H，triazole 3-H，5-H)，6.69～7.10(m，3H，Ar-H)，3.84(bs，4H，triazole ¹NCH₂CH₂)，3.61(s，2H，PhCH₂N)，2.80(t，4H，triazole ¹NCH₂CH₂)ppm；MS(ESI，m/z)：366[M]⁺.

实施例4：N-(2-(1H-咪唑-1-基)乙基)-N-(2，4-二氯苄基)-2-(1H-咪唑-1-基)乙胺(简称化合物4)的制备

按实施例2的合成方法。咪唑1.26g(18.5mmol)，2-溴-N-(2-溴乙基)-N-(2，4-二氯苄基)乙胺3.49g(9.0mmol)，合成得到无色液体2.80g，即化合物4，产率85.4％。IR(KBr)v：2924，2853(CH₂)，1644，1590，1562，1505，1453(aryl skeleton，C＝C)，1287，1079(C-N)，821，736，663cm^-1；¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ：7.29(s，2H，imidazole 2-H)，7.23(s，1H，Ph 3-H)，7.05(d，J 8.3Hz，1H，Ph 5-H)，6.96(bs，2H，imidazole 4-H)，6.85(d，J 8.3Hz，1H，Ph 6-H)，6.69(bs，2H，imidazole 5-H)，3.80(t，J 6.0Hz，4H，imidazole ¹NCH₂CH₂)，3.65(s，2H，PhCH₂N)，2.74(t，J 6.0Hz，4H，imidazole ¹NCH₂CH₂)ppm；MS(ESI，m/z)：364[M]⁺.

实施例5：N-(2-(1H-1，2，4-三唑-1-基)乙基)-N-(3，4-二氯苄基)-2-(1H-1，2，4-三唑-1-基)乙胺(简称化合物5)的制备

按实施例1的合成方法。1，2，4-三唑1.36g(19.7mmol)，2-溴-N-(2-溴乙基)-N-(3，4-二氯苄基)乙胺3.55g(9.2mmol)，合成得到无色液体2.55g，即化合物5，产率75.7％。IR(KBr)v：3118(Ar-H)，2953，2832(CH₂)，1508，1470(aryl skeleton，C＝C)，1275，1139(C-N)，960，875，670cm^-1；¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ：7.86(s，2H，triazole 3-H)，7.80(s，2H，triazole5-H)，7.23(t，J 4.8Hz，1H，Ph 5-H)，7.00(d，J 1.6Hz，1H，Ph 2-H)，6.72～6.70(m，1H，Ph6-H)，4.03(t，J 6Hz，1H，triazole ¹NCH₂CH₂)，3.48(s，2H，PhCH₂N)，2.90(t，J 6.0Hz，4H，triazole ¹NCH₂CH₂)ppm；MS(ESI，m/z)：366[M]⁺。

实施例6：N-(2-(1H-咪唑-1-基)乙基)-N-(3，4-二氯苄基)-2-(1H-咪唑-1-基)乙胺(简称化合物6)的制备

按实施例2的合成方法。咪唑1.38g(20.3mmol)，2-溴-N-(2-溴乙基)-N-(3，4-二氯苄基)乙胺3.56g(9.2mmol)，合成得到白色固体2.42g，即化合物6，产率72.2％。mp.90.6～93.0℃。IR(KBr)v：3093，3050(Ar-H)，2965，2930，2859(CH₂)，1594，1505，1486，1458(arylskeleton，C＝C)，1265，1212，1139(C-N)，956，847，752，720，681，659cm^-1；¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ：7.25(s，2H，imidazole 2-H)，7.24(d，J 2.4Hz，1H，Ph 5-H)，7.10(s，1H，Ph 2-H)，6.96(bs，2H，imidazole 4-H)，6.80～6.78(m，1H，Ph 6-H)，6.68(bs，2H，imidazole 5-H)，3.80(t，J 7.2Hz，4H，imidazole ¹NCH₂CH₂)，3.49(s，2H，PhCH₂N)，2.70(t，J 6.0Hz，4H，imidazole¹NCH₂CH₂)ppm；MS(ESI，m/z)：364[M]⁺。

实施例7：N-(2-(1H-1，2，4-三唑-1-基)乙基)-N-(2-氯苄基)-2-(1H-1，2，4-三唑-1-基)乙胺(简称化合物7)的制备

按实施例1的合成方法。1，2，4-三唑1.89g(27.4mmol)，2-溴-N-(2-溴乙基)-N-(2-氯苄基)乙胺4.23g(11.9mmol)，合成得到白色固体2.64g，即化合物7，产率66.8％。mp.91.0～92.6℃。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ：7.79(s，2H，triazole 3-H)，7.75(s，2H，triazole 5-H)，7.26～7.23(m，1H，Ph 3-H)，7.13～7.04(m，2H，Ph 4，5-H)，6.91～6.87(m，1H，Ph 6-H)，3.96(t，J 5.6Hz，4H，triazole ¹NCH₂CH₂N)，3.66(s，2H，PhCH₂N)，2.92(t，J 6.0Hz，4H，triazole¹NCH₂CH₂)ppm；¹³CNMR(400MHz，CDCl₃)δ：151.70(triazole 3-C)，143.45(triazole 5-C)，135.45(Ph 1-C)，133.73(Ph 2-C)，130.22(Ph 6-C)，129.53(Ph 4-C)，128.65(Ph 3-C)，126.81(Ph 5-C)，56.17(PhCH₂N)，53.95(triazole ¹NCH₂CH₂)，47.81(triazole ¹NCH₂CH₂)ppm；MS(ESI，m/z)：332[M]⁺.

实施例8：N-(2-(1H-咪唑-1-基)乙基)-N-(2-氯苄基)-2-(1H-咪唑-1-基)乙胺(简称化合物8)的制备

按实施例2的合成方法。咪唑1.14g(16.7mmol)，2-溴-N-(2-溴乙基)-N-(2-氯苄基)乙胺2.60g(7.3mmol)，合成得到无色液体1.50g，即化合物8，产率：62.2％。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ：7.35～7.33(m，1H，Ph 3-H)，7.34(s，2H，imidazole 2-H)，7.20～7.17(m，2H，Ph 4，5-H)，7.10～7.07(m，1H，Ph 6-H)，7.01(t，J 1.2Hz，2H，imidazole 4-H)，6.76(t，J 1.2Hz，2H，imidazole 5-H)，3.82(t，J 6.0Hz，4H，imidazole ¹NCH₂CH₂N)，3.77(s，2H，PhCH₂N)，2.80(t，J 6.0Hz，4H，imidazole ¹NCH₂CH₂)ppm；¹³CNMR(400MHz，CDCl₃)δ：137.26(imidazole 2-C)，135.34(Ph 1-C)，133.95(Ph 2-C)，130.23(Ph 6-C)，129.70(Ph 4-C)，129.45(Ph 3-C)，128.80(imidazole 4-C)，127.10(Ph 5-C)，118.92(imidazole 5-C)，56.18(PhCH₂N)，55.90(imidazole ¹NCH₂CH₂)，45.47(imidazole ¹NCH₂CH₂)ppm；MS(ESI，m/z)：330[M]⁺.

实施例9：N-(2-(1H-1，2，4-三唑-1-基)乙基)-N-(3-氯苄基)-2-(1H-1，2，4-三唑-1-基)乙胺(简称化合物9)的制备

按实施例1的合成方法。1，2，4-三唑1.31g(18.9mmol)，2-溴-N-(2-溴乙基)-N-(3-氯苄基)乙胺3.00g(8.4mmol)，合成得到白色固体1.41g，即化合物9，产率50.5％。mp.91.6～93.4℃。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ：7.89(s，2H，triazole 3-H)，7.82(s，2H，triazole 5-H)，7.20～7.13(m，2H，Ph 4，5-H)，6.98(d，J 1.6Hz，1H，Ph 2-H)，6.84～6.82(m，1H，Ph 6-H)，4.03(t，J 6.0Hz，4H，triazole ¹NCH₂CH₂N)，3.56(s，2H，PhCH₂N)，2.94(t，J 6.0Hz，4H，triazole ¹NCH₂CH₂)ppm；¹³CNMR(400MHz，CDCl₃)δ：151.96(triazole 3-C)，143.48(triazole 5-C)，140.05(Ph 1-C)，134.37(Ph 3-C)，129.86(Ph 5-C)，128.35(Ph 2-C)，127.70(Ph4-C)，126.30(Ph 6-C)，58.86(PhCH₂N)，53.93(triazole ¹NCH₂CH₂)，47.92(triazole¹NCH₂CH₂)ppm；MS(ESI，m/z)：332[M]⁺.

实施例10：N-(2-(1H-咪唑-1-基)乙基)-N-(3-氯苄基)-2-(1H-咪唑-1-基)乙胺(简称化合物10)的制备

按实施例2的合成方法。咪唑1.45g(21.3mmol)，2-溴-N-(2-溴乙基)-N-(3-氯苄基)乙胺3.19g(9.0mmol)，合成得到无色液体1.70g，即化合物10，产率：58.6％。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ：7.34(s，2H，imidazole 2-H)，7.20(d，J 2.4Hz，1H，Ph 4-H)，7.18(d，J 8.0Hz，1H，Ph 5-H)，7.11(s，1H，Ph 2-H)，7.02(s，2H，imidazole 4-H)，6.97～6.94(m，1H，Ph 6-H)，6.74(t，J 1.2Hz，2H，imidazole 5-H)，3.82(t，J 6.0Hz，4H，imidazole ¹NCH₂CH₂N)，3.58(s，2H，PhCH₂N)，2.76(t，J 6.0Hz，4H，imidazole ¹NCH₂CH₂)ppm；¹³CNMR(400MHz，CDCl₃)δ：140.02(Ph 1-C)，137.16(imidazole 2-C)，134.36(Ph 3-C)，129.96(Ph 5-C)，129.48(Ph2-C)，128.39(imidazole 4-C)，127.69(Ph 4-C)，126.36(Ph 6-C)，118.86(imidazole 5-C)，58.72(PhCH₂N)，55.44(imidazole ¹NCH₂CH₂)，45.40(imidazole ¹NCH₂CH₂)ppm；MS(ESI，m/z)：330[M]⁺.

实施例11：N-(2-(1H-1，2，4-三唑-1-基)乙基)-N-(4-氯苄基)-2-(1H-1，2，4-三唑-1-基)乙胺(简称化合物11)的制备

按实施例1的合成方法。1，2，4-三唑1.73g(25.0mmol)，2-溴-N-(2-溴乙基)-N-(4-氯苄基)乙胺4.05g(11.4mmol)，合成得到无色液体2.17g，即化合物11，产率57.4％。¹HNMR(400MHz，CDCl₃)δ：7.88(s，2H，triazole 3-H)，7.81(s，2H，triazole 5-H)，7.18(d，J 6.4Hz，2H，Ph 3，5-H)，6.89(d，J 8.4Hz，2H，Ph 2，6-H)，4.03(t，J 6.0Hz，4H，triazole ¹NCH₂CH₂)，3.54(s，2H，PhCH₂N)，2.93(t，J 6.0Hz，4H，triazole ¹NCH₂CH₂)ppm；MS(ESI，m/z)：332[M]⁺.

实施例12：N-(2-(1H-咪唑-1-基)乙基)-N-(4-氯苄基)-2-(1H-咪唑-1-基)乙胺(简称化合物12)的制备

按实施例2的合成方法。咪唑1.26g(18.5mmol)，2-溴-N-(2-溴乙基)-N-(3-氯苄基)乙胺3.14g(8.8mmol)，合成得到无色液体1.82g，即化合物12，产率：62.8％。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ：7.38(s，2H，imidazole 2-H)，7.25(d，J 2.4Hz，2H，Ph 3，5-H)，7.06(d，J 2.4Hz，2H，Ph 2，6-H)，7.01(s，2H，imidazole 4-H)，6.81(t，J 1.2Hz，2H，imidazole 5-H)，3.80(t，J 6.0Hz，4H，imidazole ¹NCH₂CH₂N)，3.61(s，2H，PhCH₂N)，2.78(t，J 6.0Hz，4H，imidazole¹NCH₂CH₂)ppm；¹³CNMR(400MHz，CDCl₃)δ：139.08(Ph 1-C)，138.05(imidazole 2-C)，133.69(Ph 3-C)，129.87(Ph 5-C)，128.69(Ph 2-C)，128.06(imidazole 4-C)，127.58(Ph 4-C)，126.62(Ph 6-C)，117.86(imidazole 5-C)，60.72(PhCH₂N)，56.28(imidazole ¹NCH₂CH₂)，46.23(imidazole ¹NCH₂CH₂)ppm；MS(ESI，m/z)：330[M]⁺.

实施例13：N-(2，4-二氯苄基)-2-(2-甲基-5-硝基-1H-咪唑-1-基)-N-(2-(2-甲基-5-硝基-1H-咪唑-1-基)乙基)乙胺(简称化合物13)的制备

按实施例1的合成方法。用二甲亚砜代替乙腈作溶剂，2-甲基-5-硝基咪唑5.97g(47.0mmol)，2-溴-N-(2-溴乙基)-N-(2，4-二氯苄基)乙胺10.13g(26.0mmol)，合成得到白色固体9.96g，即化合物13，产率87.9％。mp.189～191℃。IR(KBr)：3126，2815，1587，1536，1496(C＝C，C＝N)，1462，1422，1386，1330，1290，1183，1112，826，750cm^-1；¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ：7.86(s，2H，imidazole 2-H)，6.95～7.62(m，3H，Ar-H)，4.20(t，J 5.8Hz，4H，imidazole ¹NCH₂CH₂N)，3.71(s，2H，PhCH₂N)，2.83(t，J 5.8Hz，4H，imidazole ¹NCH₂CH₂)，2.31(s，6H，imidazole-CH₃)ppm；MS(ESI，m/z)：482[M]⁺.

实施例14：N-(2，4-二氯苄基)-2-(2-乙基-4-甲基-1H-咪唑-1-基)-N-(2-(2-乙基-4-甲基-1H-咪唑-1-基))乙基)乙胺(简称化合物14)的制备

按实施例2的合成方法。用N，N-二甲基甲酰胺代替四氢呋喃作溶剂，2-乙基-4-甲基咪唑8.40g(76.2mmol)，2-溴-N-(2-溴乙基)-N-(2，4-二氯苄基)乙胺14.14g(36.0mmol)，合成得到白色固体13.71g，即化合物14，产率：85.0％。mp.142～144℃。IR(KBr)：3355，2975(CH₂)，2510，1644，1588，1503(C＝C，C＝N)，1451，1382，1301，1101，1047，863，823，750cm^-1；¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ：7.32～7.86(m，3H，Ar-H)，6.97(s，2H，imidzaole 5-H)，3.83(t，J 6.0，Hz，4H，¹NCH₂CH₂)，3.62(s，2H，PhCH₂N)，2.84(t，J 6.0Hz，4H，¹NCH₂CH₂)，2.59(q，4H，inidazole-CH₂CH₃)，2.27(s，6H，imidazole-CH₃)，1.53(t，J 5.4Hz，6H，imidazole-CH₂CH₃)ppm；MS(ESI，m/z)：448[M]⁺.

实施例15：N-(2，4-二氯苄基)-2-(2-苯基咪唑-1-基)-N-(2-(2-苯基咪唑-1-基)乙基)乙胺(简称化合物15)的制备

按实施例2的合成方法。2-苯基咪唑11.99g(83.0mmol)，2-溴-N-(2-溴乙基)-N-(2，4-二氯苄基)乙胺14.76g(38.0mmol)，合成得到白色固体17.06g，即化合物15，产率：87.0％。mp.143～145℃。IR(KBr)：2958(CH₂)，2804，1587(C＝C，C＝N)，1469，1417，1363，1275，1136，1115，836，776，706cm^-1；¹HNMR(300MHz，CDCl₃)δ：7.37(m，8H，Ar-H)，6.64～7.22(m，7H，Ar-H)，3.83(t，J 5.6Hz，4H，¹NCH₂CH₂)，3.36(s，2H，PhCH₂N)，2.52(t，J 5.6Hz，4H，¹NCH₂CH₂)ppm；MS(ESI，m/z)：516[M]⁺.

实施例16：N-(2，4-二氯苄基)-2-(5，6-二甲基-1H-苯并咪唑-1-基)-N-(2-(5，6-二甲基-1H-苯并咪唑-1-基)乙基)乙烷基胺(简称化合物16)的制备

按实施例2的合成方法。5，6-二甲基苯并咪唑11.98g(82.0mmol)，2-溴N-(2-溴乙基)-N-(2，4-二氯苄基)乙胺15.43g(39.6mmol)，合成得到白色固体17.91g，即化合物16，产率：87.0％。mp.190～192℃。IR(KBr)：3085，2936，2830，1585，1499，1466(C＝C，C＝N)，1356，1272，1221，1139，845cm^-1；¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ：7.45(s，2H，benzoimidazole2-H)，6.72～7.19(m，7H，Ar-H)，3.87(t，J 6.8Hz，4H，¹NCH₂CH₂)，3.65(s，2H，PhCH₂N)，2.82(t，J 6.8Hz，4H，¹NCH₂CH₂)，2.28(s，12H，Ar-CH₃)ppm；MS(ESI，m/z)：520[M]⁺.

实施例17：N-(2-(1H-1，2，4-三唑-1-基)乙基)-N-(2，4-二氯苄基)-2-(1H-1，2，4-三唑-1-基)乙胺硝酸盐(简称化合物17)的制备

将0.40g化合物3溶于乙醚/氯仿中，缓慢滴加硝酸溶液，至无白色沉淀生成为止，过滤后干燥得白色固体0.31g，即化合物17，产率66.0％。mp.132.5～134.5℃。¹H NMR(300MHz，D₂O)δ：8.90(s，2H，triazole 3-H)，8.27(s，2H，triazole 5-H)，7.55(s，1H，Ph 3-H)，7.37(s，2H，Ph 5，6-H)，4.69(t，J 5.4Hz，4H，triazole ¹NCH₂CH₂)，4.38(s，2H，PhCH₂N)，3.71(t，J5.4Hz，4H，triazole ¹NCH₂CH₂)ppm；MS(ESI，m/z)：366[M-n HNO₃]⁺.

实施例18：N-(2-(1H-1，2，4-三唑-1-基)乙基)-N-(2-氯苄基)-2-(1H-1，2，4-三唑-1-基)乙胺硝酸盐(简称化合物18)的制备

将0.22g化合物7溶于乙醇，再将该乙醇溶液加至硝酸水溶液中，除去溶剂干燥后得白色固体0.15g，即化合物18，产率57.7％。mp.129.8～131.5℃。¹H NMR(300MHz，D₂O)δ：8.68(s，2H，triazole 3-H)，8.11(s，2H，triazole 5-H)，7.52～7.43(m，3H，Ph 3，4，5-H)，7.37(t，J 7.2Hz，1H，Ph 6-H)，4.87(t，J 5.4Hz，4H，triazole ¹NCH₂CH₂)，4.59(s，2H，PhCH₂N)，3.86(t，J 5.4Hz，4H，triazole ¹NCH₂CH₂)ppm；MS(ESI，m/z)：332[M-n HNO₃]⁺.

本发明的卤苄叔胺类双唑化合物及其药学上可接受的盐及其溶剂化物预期可以与药学上常用的辅料或载体结合，制备得到具有真菌、细菌生长抑制活性从而可以用于防治真菌、细菌感染的药物组合物。上述各类药物组合物可以采用片剂、胶囊剂、气雾剂、分散片、口服液、栓剂、滴丸剂、大输液、小针、冻干粉针、软膏或搽剂等剂型药物，包括采用现已公认的药剂学常识常规制备而得的各种缓释、控释剂型或纳米制剂。

本发明的卤苄叔胺类双唑化合物及其药学上可接受的盐及其溶剂化物预期可以与现已上市的抗真菌、抗菌药物如氟康唑、磷氟康唑、伊曲康唑、磺胺甲噁唑、环丙沙星等联合使用，制备得到具有真菌、细菌生长抑制活性从而可以用于防治真菌、细菌感染的药物组合物。该类药物组合物可以采用片剂、胶囊剂、气雾剂、分散片、口服液、栓剂、滴丸剂、大输液、小针、冻干粉针、软膏或搽剂等剂型药物，包括采用现已公认的药剂学常识常规制备而得的各种缓释、控释剂型或纳米制剂。

为了更好理解本发明的实质，下面分别用化合物对两种真菌及五种细菌生长的抑制作用的药理实验结果，说明这些化合物在药物领域中潜在的用途。药理实施例给出了代表性化合物的部分活性数据。必须说明，本发明的药理实施例是用于说明本发明而不是对本发明的限制。根据本发明的实质对本发明进行的简单改进都属于本发明的保护范围。

实施例19：体外抗微生物活性实验

试验方法：

本发明化合物使用倍比稀释法和标准微量滴定技术，针对真菌、革兰氏阴性和革兰氏阳性菌进行实验。实验结果以最低抑菌浓度(MIC)值判断。

最低抑菌浓度的测试采用符合1993年美国国家委员会制定的临床实验标准(NationalCommittee for Clinical Laboratory Standards，NCCLS)的96孔微量稀释法，用二甲亚砜(DMSO)溶解样品，水稀释配成浓度为12.8mg·mL^-1，用培养液稀释至512μg·mL^-1。在35℃下培养24～72小时。将培养板于振荡器上充分搅匀后，根据样品组的混浊度于分光光度计490nm处测定MIC₅₀。

试验结果：

卤苄叔胺类双唑化合物的初步抗微生物活性结果见表1。

初步药理试验结果：

抗真菌方面，化合物3、14、18对白色念珠菌具有显著的抑制作用；化合物4对白色念珠菌具有中等的抑制作用。化合物1、6对烟曲霉菌具有显著的抑制作用；化合物2、17对烟曲霉菌具有中等的抑制作用。这些化合物有可能发展成为新的具有抗真菌作用及治疗真菌感染疾病的药物。

表1：卤苄叔胺类双唑化合物的体外抗微生物活性

抗细菌方面，化合物1、4、14、15、17对金黄色葡萄球菌具有显著抑制作用；化合物2、6、7、9、10、11、12、13、18对金黄色葡萄球菌具有中等抑制作用。化合物1、3、9、11、14、17、18对铜绿假单胞菌具有显著抑制作用；化合物2、5、6、7、10、12、13、15、16对铜绿假单胞菌具有中等抑制作用。化合物6、11、15对枯草杆菌具有显著抑制作用；化合物2、9、12、13、14、16、17、18对枯草杆菌具有中等抑制作用。化合物3、5、9、13、14、15、16对变形杆菌具有显著抑制作用；化合物2、6、11、12对变形杆菌具有中等抑制作用。化合物15、16、18对大肠杆菌具有显著抑制作用；化合物3、4、5、6、7、8、9、11、12、13对大肠杆菌具有中等抑制作用。这些化合物有可能发展成为新的具有抗菌作用及治疗细菌感染疾病的药物。

本发明的化合物可用于制成防治微生物(真菌、细菌等)感染疾病的药物组合物，这种组合物含有有效量的本发明化合物和可药用辅料；本发明化合物可与其他抗微生物药物联合使用，制成药物组合物。本发明的药物组合物可以用常规的方法制备，可以制成例如片剂、胶囊剂、气雾剂、分散片、口服液、栓剂、滴丸剂、大输液、小针、冻干粉针、软膏或搽剂等剂型药物，包括采用现已公认的药剂学常识常规制备而得的各种缓释、控释剂型或纳米制剂。

实施例20：所发明化合物3片剂的制备方法

处方：

所发明化合物3                      100g

淀粉                               40g

微晶纤维素                         80g

硬脂酸镁                           3.0g

羟丙基甲基纤维素(E-30)(40％溶液)   适量

                                                    

制成1000片

制法：配制4％经丙基甲基纤维素(E-30)溶液，备用。称取10g淀粉置105℃干燥5小时备用。称取20g淀粉和处方量的所发明化合物3、微晶纤维素，混匀，粉碎过80目筛。用4％经丙基甲基纤维素(E-30)溶液将物料制软材，用20目筛制粒，于50℃～60℃干燥至颗粒中的水份3％左右。过20目筛整粒，加入处方量的干淀粉(105℃干燥5小时)、硬脂酸镁，终混，测中间体含量，定片重；压片。

实施例21：所发明化合物3注射液的制备方法

处方：

所发明化合物3                     10g

丙二醇                            500ml

注射用水                          500ml

                                             

制成1000ml

制法：称取处方量的所发明化合物3和丙二醇，加注射用水500ml，搅拌溶解；向上述溶液中加入0.1％活性炭，搅拌，放置15分钟，5μm钛棒脱炭，再经筒式滤器0.45μm和0.22μm的微孔滤膜精滤；灌封于10ml安瓿瓶中，100℃流动蒸汽灭菌45分钟，即得所发明化合物3注射液。

Claims (8)

1、一种卤苄叔胺类双唑化合物及其在药学上可接受的盐，其特征在于化合物的结构用下式表示：

式中R是2-氯、3-氯、4-氯、2，3-二氯、2，4-二氯、2，5-二氯、2，6-二氯、3，4-二氯、3，5-二氯、2-氟、3-氟、4-氟、2，3-二氟、2，4-二氟、2，5-二氟、2，6-二氟、3，4-二氟或3，5-二氟；Im为唑类基团，是咪唑、2-甲基咪唑、2-乙基-4-甲基咪唑、2-苯基咪唑、2-硝基咪唑、4-硝基咪唑、2-甲基-5-硝基咪唑、三唑、2-甲基苯并咪唑、2-甲基-5-硝基苯并咪唑或5，6-二甲基苯并咪唑基团；

所述盐为无机酸盐。

2、根据权利要求1所述的卤苄叔胺类双唑化合物及其在药学上可接受的无机酸盐，其特征在于所述无机酸为硝酸或盐酸。

3、根据权利要求1所述的卤苄叔胺类双唑化合物及其在药学上可接受的无机酸盐，其特征在于R是2-氯或2，4-二氯，Im是三唑。

4、按照权利要求1～3所述的卤苄叔胺类双唑化合物及其在药学上可接受的盐的制备方法，其特征在于：以取代卤苄与二乙醇胺为原料经过一系列反应合成卤苄叔胺类双唑化合物及其在药学上可接受的盐，包括如下步骤：

1)、卤苄叔胺二羟基化合物的合成

二乙醇胺与取代卤苄在溶剂中反应，或不使用溶剂直接混合反应，于室温至80℃下生成中间体卤苄叔胺二羟基化合物；所述溶剂是极性非质子溶剂乙腈、二甲亚砜或N，N-二甲基甲酰胺，或是极性质子溶剂甲醇或乙醇；

2)、卤苄叔胺二溴化合物或卤苄叔胺二氯化合物的合成

卤苄叔胺二羟基化合物在溶剂中、室温至80℃下，用三溴化磷溴化或氯化亚砜氯化，得对应中间体卤苄叔胺二溴化合物或卤苄叔胺二氯化合物；所述溶剂是氯仿或乙腈；

3)、卤苄叔胺类双唑化合物的合成

以乙腈、四氢呋喃、二甲亚砜或N，N-二甲基甲酰胺为溶剂，卤苄叔胺二溴化合物或卤苄叔胺二氯化合物与三唑或咪唑等唑类化合物在室温至60℃，碳酸钾或氢化钠作碱条件下反应，得到对应卤苄叔胺类双唑化合物；

4)、卤苄叔胺类双唑硝酸盐或盐酸盐的制备

将上述步骤3)合成的卤苄叔胺类双唑化合物溶于乙醚或四氢呋喃中，缓慢滴加硝酸水溶液或盐酸水溶液，至无白色沉淀生成为止，然后用乙醚或四氢呋喃洗涤固体后干燥得产品；

或将上述步骤3)合成的卤苄叔胺类双唑化合物溶于乙醇，再将该乙醇溶液加至硝酸水溶液或盐酸水溶液中，除去溶剂后干燥得产品；

卤苄叔胺类双唑化合物在乙醚、四氢呋喃或乙醇中溶解度较差时，可加入氯仿助溶；

上述步骤的反应过程如下：

5、根据权利要求4所述的方法，其特征在于：

所述步骤1)中，取代卤苄∶二乙醇胺∶无水碳酸钾的摩尔比为1∶1.1～1.2∶1.2～1.4；

步骤2)中，叔胺二羟基化合物∶三溴化磷的摩尔比为1∶1.0～1.2；叔胺二羟基化合物∶氯化亚砜的摩尔比为1∶2.2～2.4；

步骤3)中，叔胺二溴化合物∶唑类化合物∶碱的摩尔比为1∶1.8～2.4∶2.4～3.0；

步骤4)中，所使用硝酸水溶液的浓度为1～5mol·L^-1，盐酸水溶液浓度为1～5mol·L^-1。

6、权利要求1～3之一的化合物或者它们的可药用盐或它们的溶剂化物或它们的混合物用于制备抗微生物药物。

7、根据权利要求1～3之一的化合物或者它们的可药用盐或它们的溶剂化物或它们的混合物用于制备抗真菌、抗细菌药物。

8、一种药物组合物，该药物组合物含有权利要求1～3任意之一项所述的生理有效量的卤苄叔胺类双唑化合物或其药学上可接受的盐，它们在组合物中的用量重量比为0.1％～90％；组合物以以下药学上可接受的制剂形式存在：片剂、胶囊剂、气雾剂、分散片、口服液、栓剂、滴丸剂、大输液、小针、冻干粉针、软膏或搽剂等剂型药物，包括采用现已公认的药剂学常识常规制备而得的各种缓释、控释剂型或纳米制剂。