CN113662938B

CN113662938B - 一种胺类衍生物在制备抗肿瘤药物组合物中的应用

Info

Publication number: CN113662938B
Application number: CN202111130148.3A
Authority: CN
Inventors: 玉万国; 汪煦; 梁妮
Original assignee: Guangxi University of Science and Technology
Current assignee: Guangxi University of Science and Technology
Priority date: 2021-09-26
Filing date: 2021-09-26
Publication date: 2022-08-16
Anticipated expiration: 2041-09-26
Also published as: CN113662938A

Abstract

本发明公开了一种胺类衍生物在制备抗肿瘤药物组合物中的应用，具体是N‑(叔丁基)‑3‑甲基‑1,2,4‑恶二唑‑5‑胺类衍生物在制备抗肿瘤药物组合物中的应用。本发明提供的N‑(叔丁基)‑3‑甲基‑1,2,4‑恶二唑‑5‑胺类衍生物对肝癌、肺癌、宫颈癌、乳腺癌、胃癌和淋巴癌具有显著抑制作用，表现出优良的抗肿瘤特性，可以作为抗肿瘤的先导药物分子，在研制抗肿瘤药物方面具有良好的开发应用前景。

Description

一种胺类衍生物在制备抗肿瘤药物组合物中的应用

【技术领域】

本发明涉及抗肿瘤药物技术领域，涉及一种胺类衍生物在制备抗肿瘤药物组合物中的应用，具体涉及N-(叔丁基)-3-甲基-1,2,4-恶二唑-5-胺类衍生物在制备抗肿瘤药物组合物中的应用。

【背景技术】

肿瘤是细胞发生异常突变或遗传变异，机体失去对其生长繁殖的正常调控而导致的恶性异常增生，目前随着全球范围内发病率和死亡率的逐年递增，预防和治疗癌症已成为世界公共卫生关注的焦点问题。研发抗肿瘤新药，挽救更多备受癌症痛苦煎熬的患者，是各国竞相争夺的健康制高点。

目前，已经有很多抗肿瘤药物的研究，例如中国专利申请号CN200780051553.8公开了用于治疗癌症的4-{4-[({3-叔丁基-1-[3-(羟基甲基)苯基]-1H-吡唑-5-基}-氨基甲酰基)-氨基]-3-氟苯氧基}-N-甲基吡啶-2-甲酰氨及其前药和盐，涉及化合物4-{4-[({3-叔丁基-1-[3-(羟基甲基)苯基]-1H-吡唑-5-基}-氨基甲酰基)-氨基]-3-氟苯氧基}-N-甲基吡啶-2-甲酰氨及其可选形式(例如：盐、溶剂合物、水合物、前药、多晶型物和代谢物)，具体是4-{4-[({3-叔丁基-1-[3-(羟基甲基)苯基]-1H-吡唑-5-基}-氨基甲酰基)-氨基]-3-氟苯氧基}-N-甲基吡啶-2-甲酰氨、其药学可接受的盐、其代谢物、其溶剂合物、其水合物、其前药或者其多晶型物，或者以分离的立体异构体形式存在或在立体异构体的混合物中的其盐或前药的非对映异构体形式，还包含它们的药物组合物以及使用它们治疗癌症的方法。

又例如中国专利申请号CN201610157077.9公开了具有抗肿瘤活性的叔丁基取代的不对称哌啶酮化合物及其制备方法，涉及六个具有抗肿瘤活性的叔丁基取代的不对称哌啶酮化合物及其制备方法，具有抗肿瘤活性的叔丁基取代的不对称哌啶酮化合物，分别命名为3-(4-叔丁基苯亚甲基)-5-(2-甲氧基苯亚甲基)-4-哌啶酮A、3-(4-叔丁基苯亚甲基)-5-(4-甲氧基苯亚甲基)-4-哌啶酮B、3-(4-叔丁基苯亚甲基)-5-(3,4-二甲氧基苯亚甲基)-4-哌啶酮C、3-(4-叔丁基苯亚甲基)-5-(3,5-二甲氧基苯亚甲基)-4-哌啶酮D、3-(4-叔丁基苯亚甲基)-5-(3,4,5-三甲氧基苯亚甲基)-4-哌啶酮E、3-(4-叔丁基苯亚甲基)-5-(2-溴-4-氟苯亚甲基)-4-哌啶酮F，其制备方法是通过N-甲基-4-哌啶酮、4-叔丁基苯甲醛和另一种芳醛，进行克莱森-施密特缩合反应得到发明产物A-F，该化合物抗肿瘤活性好，可避免现在使用的抗肿瘤药的基因毒性，对正常细胞的毒性小，制备方法操作简便，反应条件温和，合成产率高，利于其在抗肿瘤领域的广泛推广。

因为肿瘤细胞特殊的发病机理和转移机制，容易产生多药耐药性、药物选择性、非靶向性、干扰性等，对抗肿瘤新药的研发提出了更高的要求。因此，设计与合成具有高选择性、高效、靶向、低毒副作用的抗癌新药，是医药学届的重大课题与挑战，而含氮原子的杂环化合物在新药设计和研发中占有突出的地位。

目前尚无N-(叔丁基)-3-甲基-1,2,4-恶二唑-5-胺类衍生物用于抗肿瘤生物活性或临床应用方面的相关研究报道。

【发明内容】

针对现有技术中缺少具有高选择性、高效、靶向、低毒副作用的抗癌新药的问题，本发明提供了一种胺类衍生物在制备抗肿瘤药物组合物中的应用，具体是N-(叔丁基)-3-甲基-1,2,4-恶二唑-5-胺类衍生物在制备抗肿瘤药物组合物中的应用。本发明研究表明N-(叔丁基)-3-甲基-1,2,4-恶二唑-5-胺类衍生物对多种肿瘤细胞均具有抑制活性，可作为治疗肿瘤的候选药物或先导化合物，为开发抗肿瘤新药奠定基础。

为了实现上述目的，本发明所采用以下技术方案：

N-(叔丁基)-3-甲基-1,2,4-恶二唑-5-胺类衍生物，是由N′-hydroxybenzimidamide与tert-butyl isocyanide通过Pd(OAc)₂(5mol％)催化合成的，N-(叔丁基)-3-甲基-1,2,4-恶二唑-5-胺类衍生物的化学结构式如下所示：

其中，R为Ph、4-CF₃C₆H₄、4-FC₆H₄、4-ClC₆H₄、4-BrC₆H₄、4-MeOC₆H₄、4-MeC₆H₄、3-MeC₆H₄、2-MeC₆H₄、3,4-dimethyl-C₆H₄、3,2-dimethyl-C₆H₄、3-C₁₀H₇、3-NC₅H₄、3-SC₄H₃中的一种。

所述的由N′-hydroxybenzimidamide与tert-butyl isocyanide通过Pd(OAc)₂(5mol％)催化合成，具体包括如下步骤：

N′-hydroxybenzimidamide1a(0.2mmol),tert-butylisocyanide(0.3mmol),Pd(PPh₃)₄(5mol％),K₂CO₃(3equiv.)在甲苯(1mL)中常温常压反应4小时，hydroxybenzimidamide1a骨架的缺电子基团(4-CF₃,4-F,4-Cl 4-Br)和富电子基团(4-OMe,4-Me,3-Me,2-Me，3,4-dimethyl，3,2-dimethyl)反应得到。

上述N-(叔丁基)-3-甲基-1,2,4-恶二唑-5-胺类衍生物在制备抗肿瘤药物组合物中的应用。

所述的N-(叔丁基)-3-甲基-1,2,4-恶二唑-5-胺类衍生物在制备抗肿瘤药物组合物中的应用，是将N-(叔丁基)-3-甲基-1,2,4-恶二唑-5-胺类衍生物作为治疗肿瘤的候选药物或先导化合物，利用N-(叔丁基)-3-甲基-1,2,4-恶二唑-5-胺类衍生物对多种肿瘤细胞均具有抑制活性，为开发抗肿瘤新药奠定基础。

所述的N-(叔丁基)-3-甲基-1,2,4-恶二唑-5-胺类衍生物在制备抗肿瘤药物组合物中的应用，所述的药物组合物的治疗对象为哺乳动物或人。

所述的N-(叔丁基)-3-甲基-1,2,4-恶二唑-5-胺类衍生物在制备抗肿瘤药物组合物中的应用，所述的肿瘤包括但不限于肝癌、肺癌、宫颈癌、乳腺癌、胃癌和淋巴癌。

进一步的，所述的N-(叔丁基)-3-甲基-1,2,4-恶二唑-5-胺类衍生物在制备抗肿瘤药物组合物中的应用，所述药物组合物是以N-(叔丁基)-3-甲基-1,2,4-恶二唑-5-胺类衍生物为主要成分，加上药学中可接受的辅料或辅助性成分制备成临床上可接受的药物制剂，所述的N-(叔丁基)-3-甲基-1,2,4-恶二唑-5-胺类衍生物在药物组合物中的含量通常为0.1-95.0％(w/w)。

进一步的，所述的N-(叔丁基)-3-甲基-1,2,4-恶二唑-5-胺类衍生物在制备抗肿瘤药物组合物中的应用，所述药物制剂包括口服制剂和注射制剂两种剂型。

进一步的，所述的N-(叔丁基)-3-甲基-1,2,4-恶二唑-5-胺类衍生物在制备抗肿瘤药物组合物中的应用，所述口服制剂为口服胶囊，所述注射制剂为静脉注射液。

通常而言，作为药物，均是在制备成制剂后才临床应用。本发明所述的药物组合物，作为药物组合物可根据本领域公知的方法制备。可通过将本发明药物组合物与一种或多种药学上可接受的固体或液体赋形剂和/或辅剂结合，制成适于人或动物使用的任何剂型。本发明药物组合物或含有它的药物组合物可以单位剂量形式给药，给药途径可为肠道或非肠道，如口服、静脉注射、肌肉注射、皮下注射、鼻腔、口腔粘膜、眼、肺和呼吸道、皮肤、阴道、直肠等。

给药剂型可以是液体剂型、固体剂型或半固体剂型。液体剂型可以是溶液剂(包括真溶液和胶体溶液)、乳剂(包括o/w型、w/o型和复乳)、混悬剂、注射剂(包括水针剂、粉针剂和输液)、滴眼剂、滴鼻剂、洗剂和搽剂等；固体剂型可以是片剂(包括普通片、肠溶片、含片、分散片、咀嚼片、泡腾片、口腔崩解片)、胶囊剂(包括硬胶囊、软胶囊、肠溶胶囊)、颗粒剂、散剂、微丸、滴丸、栓剂、膜剂、贴片、气(粉)雾剂、喷雾剂等；半固体剂型可以是软膏剂、凝胶剂、糊剂等。

本发明药物组合物可以制成普通制剂、也可以制成缓释制剂、控释制剂、靶向制剂及各种微粒给药系统。为了将本发明药物组合物制成片剂，可以广泛使用本领域公知的各种赋形剂，包括稀释剂、黏合剂、润湿剂、崩解剂、润滑剂、助流剂。稀释剂可以是淀粉、糊精、蔗糖、葡萄糖、乳糖、甘露醇、山梨醇、木糖醇、微晶纤维素、硫酸钙、磷酸氢钙、碳酸钙等；润湿剂可以是水、乙醇、异丙醇等；黏合剂可以是淀粉浆、糊精、糖浆、蜂蜜、葡萄糖溶液、微晶纤维素、阿拉伯胶浆、明胶浆、羧甲基纤维素钠、甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素、乙基纤维素、丙烯酸树脂、卡波姆、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙二醇等；崩解剂可以是干淀粉、微晶纤维素、低取代羟丙基纤维素、交联聚乙烯吡咯烷酮、交联羧甲基纤维素钠、羧甲基淀粉钠、碳酸氢钠与枸橼酸、聚氧乙烯山梨糖醇脂肪酸酯、十二烷基磺酸钠等；润滑剂和助流剂可以是滑石粉、二氧化硅、硬脂酸盐、酒石酸、液体石蜡、聚乙二醇等。

还可以将片剂进一步制成包衣片，例如糖包衣片、薄膜包衣片、肠溶包衣片，或双层片和多层片。

为了将给药单元制成胶囊剂，可以将有效成分本发明药物组合物与稀释剂、助流剂混合，将混合物直接置于硬胶囊或软胶囊中。也可将有效成分本发明药物组合物先与稀释剂、黏合剂、崩解剂制成颗粒或微丸，再置于硬胶囊或软胶囊中。用于制备本发明药物组合物片剂的各稀释剂、黏合剂、润湿剂、崩解剂、助流剂品种也可用于制备本发明药物组合物的胶囊剂。

为将本发明药物组合物制成注射剂，可以用水、乙醇、异丙醇、丙二醇或它们的混合物作溶剂并加入适量本领域常用的增溶剂、助溶剂、pH调剂剂、渗透压调节剂。增溶剂或助溶剂可以是泊洛沙姆、卵磷脂、羟丙基-β-环糊精等；pH调剂剂可以是磷酸盐、醋酸盐、盐酸、氢氧化钠等；渗透压调节剂可以是氯化钠、甘露醇、葡萄糖、磷酸盐、醋酸盐等。如制备冻干粉针剂，还可加入甘露醇、葡萄糖等作为支撑剂。

此外，如需要，也可以向药物制剂中添加着色剂、防腐剂、香料、矫味剂或其他添加剂。

和现有技术相比，本发明具有如下优点：

1、本发明所述的N-(叔丁基)-3-甲基-1,2,4-恶二唑-5-胺类衍生物在制备抗肿瘤药物组合物中的应用，抗肿瘤效果好，N-(叔丁基)-3-甲基-1,2,4-恶二唑-5-胺类衍生物对肿瘤细胞的抑制效果好于阳性药物5-氟尿嘧啶。

2、本发明所述的N-(叔丁基)-3-甲基-1,2,4-恶二唑-5-胺类衍生物在制备抗肿瘤药物组合物中的应用，抗肿瘤范围广，N-(叔丁基)-3-甲基-1,2,4-恶二唑-5-胺类衍生物对肝癌、肺癌、宫颈癌、乳腺癌、胃癌和淋巴癌等均显示出良好的抑制活性。

3、本发明所述的N-(叔丁基)-3-甲基-1,2,4-恶二唑-5-胺类衍生物在制备抗肿瘤药物组合物中的应用，成本优势明显，N-(叔丁基)-3-甲基-1,2,4-恶二唑-5-胺类衍生物是由N′-hydroxybenzimidamide与tert-butyl isocyanide通过Pd(OAc)₂(5mol％)催化合成的，催化条件温和，价格低，可减轻患者的经济负担。

【附图说明】

图1是本发明所述的N-(叔丁基)-3-甲基-1,2,4-恶二唑-5-胺类衍生物的化学结构式的图。

【具体实施方式】

以下结合实施例对本发明的具体实施方式做进一步说明。

实施例：

N-(叔丁基)-3-甲基-1,2,4-恶二唑-5-胺类衍生物在制备抗肿瘤药物组合物中的应用：

所述的N-(叔丁基)-3-甲基-1,2,4-恶二唑-5-胺类衍生物，化学结构式如下所示：

其中，R分别是：

所述的N-(叔丁基)-3-甲基-1,2,4-恶二唑-5-胺类衍生物，

由N′-hydroxybenzimidamide与tert-butyl isocyanide通过Pd(OAc)₂(5mol％)催化合成，具体包括如下步骤：

实验例：

N-(叔丁基)-3-甲基-1,2,4-恶二唑-5-胺类衍生物的体外抗肿瘤细胞活性测试：

1.细胞和药物：

人肝癌细胞HepG-2、人肺癌细胞A549、人宫颈癌细胞Hela、人乳腺癌细胞MDA-MB-231、人胃癌细胞MKN45、人恶性淋巴癌细胞NK-92均购自中国科学院上海细胞库；

阳性药物：5-氟尿嘧啶(5-Fu)，购自Sigma Aldrich Company(St.Louis,MO,USA)，纯度>99.5％(HPLC)。

2.实验方法

取对数生长期的肿瘤细胞5.0×10⁴cells/mL接种至96孔板中，每孔200μL，37℃和5％CO₂条件下培养24h；

用二甲基亚砜(DMSO)溶解受试样品，再使用新鲜培养基配制成终浓度为2.5-20μM的样品培养液，加入96孔板中，37℃和5％CO₂条件下孵育24h；

除去培养基，每孔加入浓度0.5mg/mL MTT 100μL，37℃和5％CO₂条件下孵育3-4h；小心除去培养液，加入150μL DMSO，充分振荡溶解结晶物；

酶标仪以570nm为实验波长，630nm为参照波长检测吸光值，IC₅₀值通过LOGIT法计算得出。

3.实验结果

如表1所示，实验结果表明，N-(叔丁基)-3-甲基-1,2,4-恶二唑-5-胺类衍生物对人肝癌细胞HepG-2、人肺癌细胞A549、人宫颈癌细胞Hela、人乳腺癌细胞MDA-MB-231、人胃癌细胞MKN45、人恶性淋巴癌细胞NK-92均具有明显的抑制作用，其对上述肿瘤细胞的IC₅₀值在0.08—16.57μmol/L，作用效果优于阳性药物5-Fu。

表1 N-(叔丁基)-3-甲基-1,2,4-恶二唑-5-胺类衍生物对多种肿瘤细胞的IC₅₀值

综上，本发明所述的N-(叔丁基)-3-甲基-1,2,4-恶二唑-5-胺类衍生物对肝癌、肺癌、宫颈癌、乳腺癌、胃癌和淋巴癌具有显著抑制作用，表现出优良的抗肿瘤特性，可以作为抗肿瘤的先导药物分子，在研制抗肿瘤药物方面具有良好的开发应用前景。

上述说明是针对本发明较佳可行实施例的详细说明，但实施例并非用以限定本发明的专利申请范围，凡本发明所提示的技术精神下所完成的同等变化或修饰变更，均应属于本发明所涵盖专利范围。

Claims

1.一种胺类衍生物在制备抗肿瘤药物组合物中的应用，其特征在于：具体是N-(叔丁基)-3-甲基-1,2,4-恶二唑-5-胺类衍生物在制备抗肿瘤药物组合物中的应用；

所述的N-(叔丁基)-3-甲基-1,2,4-恶二唑-5-胺类衍生物的化学结构式如下所示：

其中，R为Ph、4-CF₃C₆H₄、4-FC₆H₄、4-ClC₆H₄、4-BrC₆H₄、4-MeOC₆H₄、4-MeC₆H₄、3-MeC₆H₄、2-MeC₆H₄、3,4-dimethyl-C₆H₄、3,2-dimethyl-C₆H₄、3-C₁₀H₇、3-NC₅H₄、3-SC₄H₃中的一种；

所述的肿瘤为肝癌、肺癌、宫颈癌、乳腺癌、胃癌和淋巴癌。

2.根据权利要求1所述的一种胺类衍生物在制备抗肿瘤药物组合物中的应用，其特征在于：所述的N-(叔丁基)-3-甲基-1,2,4-恶二唑-5-胺类衍生物，是由N′-hydroxybenzimidamide与tert-butyl isocyanide通过Pd(OAc)₂ 5mol%催化合成，具体包括如下步骤：N′-hydroxybenzimidamide1a 0.2mmol,tert-butylisocyanide 0.3mmol,Pd(PPh₃)₄5mol%,K₂CO₃3 equiv.在甲苯1mL中常温常压反应4小时，hydroxybenzimidamide1a骨架的缺电子基团4-CF₃,4-F,4-Cl,4-Br和富电子基团4-OMe,4-Me,3-Me,2-Me,3,4-dimethyl,3,2-dimethyl反应得到。

3.根据权利要求1所述的一种胺类衍生物在制备抗肿瘤药物组合物中的应用，其特征在于：是将N-(叔丁基)-3-甲基-1,2,4-恶二唑-5-胺类衍生物作为治疗肿瘤的候选药物。

4.根据权利要求1所述的一种胺类衍生物在制备抗肿瘤药物组合物中的应用，其特征在于：所述的药物组合物的治疗对象为哺乳动物。

5.根据权利要求4所述的一种胺类衍生物在制备抗肿瘤药物组合物中的应用，其特征在于：所述的哺乳动物为人。

6.根据权利要求1所述的一种胺类衍生物在制备抗肿瘤药物组合物中的应用，其特征在于：所述药物组合物是以N-(叔丁基)-3-甲基-1,2,4-恶二唑-5-胺类衍生物为主要成分，加上药学中接受的辅料或辅助性成分制备成临床上接受的药物制剂，所述的N-(叔丁基)-3-甲基-1,2,4-恶二唑-5-胺类衍生物在药物组合物中的含量为0.1-95.0% w/w。

7.根据权利要求6所述的一种胺类衍生物在制备抗肿瘤药物组合物中的应用，其特征在于：所述药物制剂包括口服制剂和注射制剂两种剂型。

8.根据权利要求7所述的一种胺类衍生物在制备抗肿瘤药物组合物中的应用，其特征在于：所述口服制剂为口服胶囊，所述注射制剂为静脉注射液。