CN101317883B - 夏枯草活性部位及其在制备药物组合物中的应用 - Google Patents
夏枯草活性部位及其在制备药物组合物中的应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN101317883B CN101317883B CN 200710041690 CN200710041690A CN101317883B CN 101317883 B CN101317883 B CN 101317883B CN 200710041690 CN200710041690 CN 200710041690 CN 200710041690 A CN200710041690 A CN 200710041690A CN 101317883 B CN101317883 B CN 101317883B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- active site
- spica prunellae
- preparing
- extracting solution
- extraction
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
Images
Landscapes
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
Abstract
本发明属中医药领域,具体涉及中草药夏枯草活性部位及提取分离技术,和在制备抗结肠癌的药物组合物中的应用。本发明所述的夏枯草的活性部位是经过对夏枯草进行提取、分离,得到不同的极性部位。经药效学实验,培养人结肠癌细胞,将分离所得的样品在细胞水平上进行生物活性的检测,结果表明,用本发明方法获得的水饱和正丁醇提得的活性部位对结肠癌细胞有较明显的抑制作用(IR>30%)。本发明提取的夏枯草活性部位可用于制备治疗结肠癌的药物。
Description
技术领域
本发明属中医药领域,具体涉及中草药夏枯草活性部位及提取分离技术,和在制备抗结肠癌的药物组合物中的应用。
背景技术
夏枯草始载于《神农本草经》,是最常用的中药材之一,现载于2005年版《中国药典》一部,为唇形科植物夏枯草(Prunella.vulgaris L.)的干燥果穗,具有清火,明目,散结,消肿之功效。现代药理学研究发现夏枯草具有降压、降血糖、细胞毒、抗病毒、抗菌、抗氧化、抗过敏、免疫活性和抗炎活性等多种作用。夏枯草中主要含有三萜类(熊果酸、齐墩果酸)、甾体类(β-谷甾醇、豆甾醇)、黄酮类(芸香苷、槲皮素)、香豆素类(伞型酮、莨菪亭)、苯丙素类(咖啡酸、迷迭香酸)、糖类(葡萄糖、果糖)、挥发油(1,8-桉油精、β-蒎烯)、无机盐(KCl)等成分。其中夏枯草皂苷具有明显抗艾滋病毒作用;熊果酸及衍生物对细胞P388、L1210和人体肺肿瘤细胞A-549均具有显著的细胞毒作用;夏枯草总苷与降压作用有关;酚酸类成分具抗炎、镇痛作用,对类风湿性关节炎具确切的治疗作用,且具有增强免疫抑制作用。从夏枯草中提出的多糖具显著的刺激免疫作用。夏枯草中的鞣质可能是其抗HIV-1gp41的6-螺旋束构型的主要成分。夏枯草水提物200mg/ml对HIV-1蛋白酶有显著抑制作用(>90%),此外水提物还具免疫调节和抗炎活性。醇提物可对抗肾上腺素升高血糖作用,具有改善糖耐量、增加肝糖元合成的作用,还具免疫抑制活性。夏枯草有机提取物(OF)(25.7%w/w的迷迭香酸)有消除DPPH的活性,体外试验有抑制人LDL Cu(II)-mediated氧化,对暴露于的tert-丁基过氧化物或Cu(II)和Fe(III)离子下的大鼠线粒体和肝细胞有保护作用。OF可能还有抑制溶血和减少通过5-lipoxygenase途径产生的牛PMNL中LTB的生成量。另有试验证明其有抑制HaCaT细胞和小鼠表皮纤维原细胞增生作用,中剂量的OF可抗革兰氏阳性菌。临床上以单味夏枯草制得的夏枯草注射液用以治疗肺癌胸水、白血病、中晚期胃、大肠癌等疗效显著。但迄今未见夏枯草抗结肠癌活性成分研究的报道。
发明内容
本发明的目的是提供中药夏枯草(Prunella.vulgaris L.)的活性部位及其提取方法。
本发明的另一目的是将上述活性部位作为药物制剂的原料。
本发明还有一个目的是提供上述活性部位在制备防治结肠癌及结肠癌转移药物中的应用。
本发明对传统中药夏枯草进行提取分离,获得药效作用明确,具有药用价值的抗结肠癌活性部位。
本发明公开的夏枯草活性部位以夏枯草药材为原料,经水提后通过一系列分离纯化技术获得不同的极性部位;然后通过培养人结肠癌细胞,将分离所得的样品在细胞水平上进行生物活性的检测、确定后的具有药理作用的夏枯草有效部位。
所述的夏枯草活性部位,占夏枯草药材的2.7‰(g/g)。对所述活性部位进行HPLC指纹图谱分析,条件为:Diamonsil C18柱(200mm×4.6mm,5μm);流动相:A:甲醇,B:乙腈,C:0.5%醋酸水溶液,线性梯度洗脱,0min:0.5%B,97.5%C;10min:10%B,80%C;20min:25%B,75%C;30min:30%B,70%C;50min:97.5%B,2.5%C;流速:0~20min:0.7ml/min;30min:1ml/min;柱温:25℃;检测波长:247nm;以迷迭香酸为参照,结果显示,夏枯草活性部位的HPLC图谱(图4)有3个共有峰,其保留时间范围为:共有峰1约为15.56~15.91min,共有峰2约为21.30~21.43min,共有峰3约为30.90~31.43mim。各批次药材所得活性部位及所含成分相似度较高,均大于0.9。
表1是10批夏枯草活性部位HPLC指纹图谱保留时间(min)。
表1
上述活性部位可作为药物制剂的原料。
本发明公开的夏枯草活性部位通过下述方法制备:
1、取夏枯草(全草)用水煎煮提取,水提取液过滤,浓缩后加不同浓度的乙醇沉淀,取上清液浓缩至一定相对密度的清膏,依次加入酸、碱溶液,冷藏,滤过,得夏枯草提取液;或,
取夏枯草用水煎煮提取,水提取液经大孔吸附树脂,用70%乙醇洗脱,收集洗脱液,浓缩至一定相对密度的清膏,得夏枯草提取液;或,
取夏枯草用水煎煮提取,水提取液加吸附澄清剂,放置,高速离心,上清液浓缩至一定相对密度的清膏,依次加入酸、碱溶液,冷藏,抽滤,得夏枯草提取液。
所述的夏枯草药材用水煎煮提取时夏枯草与水的重量比为夏枯草:水=1:10~16,煎煮次数为2~4次;
所述的水提取液浓缩至相对密度为1.05~1.0960~65℃,放至室温,加入75%~95%乙醇,使含醇量为70%,冷藏48小时以上,回收乙醇至溶液相对密度为1.25~1.2880℃,放至室温,再以乙醇调含醇量至85%,冷藏48小时以上,上清液浓缩至1.25~1.2880℃的清膏;
所述的大孔吸附树脂为非极性树脂,优选HPD100和D101;
所述的吸附澄清剂选自甲壳素、壳聚糖、101果汁澄清剂、ZTC1+1中的任一种。优选壳聚糖以及ZTC1+1系列中的ZTC-II、ZTC-III;
所述的酸溶液优选浓盐酸调pH为2,碱溶液优选40%氢氧化钠溶液调pH为7-8;冷藏时间均在24小时以上。
2、夏枯草提取液依次以石油醚、乙酸乙酯、水饱和正丁醇萃取,提取液:溶剂为1~3:1;将分离所得的样品进行细胞水平生物活性的检测,确定水饱和正丁醇提得的部位为活性部位。
上述方法制得的夏枯草活性部位,占夏枯草药材的2.7‰。取10批夏枯草活性部位进行HPLC指纹图谱研究,所用HPLC条件为:Diamonsil C18柱(200mm×4.6mm,5μm);流动相:A:甲醇,B:乙腈,C:0.5%醋酸水溶液,线性梯度洗脱,0min:0.5%B,97.5%C;10min:10%B,80%C;20min:25%B,75%C;30min:30%B,70%C;50min:97.5%B,2.5%C;流速:0~20min:0.7ml/min;30min:1ml/min;柱温:25℃;检测波长:247nm。以迷迭香酸为参照,HPLC图谱见图1,结果显示各批次药材所得活性部位及所含成分相似度较高,均大于0.9,说明本发明提取分离工艺的稳定可行,为得到稳定可靠的有效成分提供了保证。
本发明选择结肠癌细胞株LS174-T进行细胞水平生物活性的检测。
经药效学实验研究表明,用本发明方法获得的水饱和正丁醇提得的活性部位对结肠癌细胞有较明显的抑制作用(IR>30%)。本发明提取的夏枯草活性部位可用于制备治疗结肠癌的药物。
附图说明
图1是10批夏枯草活性部位的HPLC指纹谱重叠图。
图2是空白溶液对照图。
图3是迷迭香酸对照品溶液HPLC图谱。
图4是夏枯草活性部位的HPLC图谱。
具体实施方式
实施例1提取夏枯草活性部位
1、主要仪器及试剂和药材:
HP1100(美国惠普公司);Diamonsil C18柱(200mm×4.6mm,5μm;迪马公司);迷迭香酸(中国科学院上海药物研究所);甲醇(色谱纯,上海陆都化学试剂厂)、乙腈(色谱纯,上海吴泾化工有限公司);冰醋酸(分析纯,宜兴市洋溪镇徐渎化工厂)。
夏枯草,批号为060628,060819,061006,061114,061212,购于上海徐重道中药饮片厂,产地为安徽;批号为060726,060919,061012,061211,070123,购于上海虹桥药业股份有限公司,产地为湖北。
2、实验方法
分别制备供试品和参照物溶液:
取夏枯草药材,按本发明的方法制得活性部位,过0.45μm微孔滤膜,滤液进样量10μl。
取迷迭香酸对照品适量,加甲醇溶解并定容,得迷迭香酸对照品溶液,浓度为0.40mg/ml,进样量5μl。
液相色谱(HPLC)条件:λ:247nm;柱温:25℃;流动相配比:A:甲醇;B:乙腈;C:0.5%醋酸溶液。
表2是流动相配比。
表2
方法学考察:
精密度:取批号为060628的夏枯草制得活性部位,其溶液在上述色谱条件下连续进样6次,考察仪器的精密度。对测定结果以相似度计算软件计算。
结果表明6次进样的相似度均大于0.99,单峰面积占总峰面积大于10%的色谱峰面积RSD不大于2.32%,保留时间RSD不大于0.21%,峰面积比值RSD不大于1.90%,相对保留时间RSD不大于0.09%。
重现性:取批号为060628的夏枯草,同法制备6个供试品溶液进行测定,对测定结果以相似度计算软件计算。
结果表明6个供试品的相似度均大于0.99,单峰面积占总峰面积大于10%的色谱峰面积RSD不大于1.15%,保留时间RSD不大于0.16%,峰面积比值RSD不大于1.54%,相对保留时间RSD不大于0.15%。
稳定性:取批号为060628的夏枯草,制备供试品溶液,分别于0、3、6、26h进行测定,考察其26h内的稳定性。
结果表明供试品在6h内的相似度均大于0.99,单峰面积占总峰面积大于10%的色谱峰面积RSD不大于1.78%,保留时间RSD不大于0.20%,峰面积比值RSD不大于2.28%,相对保留时间RSD均为0%。说明供试品在26h内稳定。
精密度、稳定性、重复性试验说明在上述检测条件下,HPLC指纹图谱稳定,可作为夏枯草活性部位HPLC指纹图谱的检测方法。
以上述检测方法检测10批夏枯草活性部位供试品,以迷迭香酸为参照峰,其相对保留时间为1.0,标示夏枯草活性部位指纹图谱共有峰。夏枯草有效组分HPLC指纹图谱显示,10批夏枯草活性部位的相似度较高,均大于0.9。说明经过进一步的提取分离,10批夏枯草提取分离所得的活性部位所含成分种类相似。
表3是夏枯草活性部位HPLC指纹图谱相对保留时间。
表4是夏枯草活性部位HPLC指纹图谱共有峰相对峰面积。
表5是10批夏枯草活性部位指纹图谱的相似度。
表3
表4
表5
实施例2
取夏枯草3kg,加16倍水煎煮三次,第一次1.5h,第二次1h,第三次0.5h,滤过,合并滤液,浓缩至3000ml,通过装有D101大孔吸附树脂的柱子,以7倍柱体积70%乙醇洗脱至与FeCl3-K3Fe(CN)6溶液反应呈阴性,合并洗脱液,浓缩为每毫升含4g生药,得夏枯草提取液,提取液依次以石油醚、乙酸乙酯各萃取5次(提取液:提取溶剂=2:1),弃去萃取液,水溶液再用水饱和正丁醇萃取,挥去正丁醇,得活性部位。
实施例3
取夏枯草3kg,用14倍水煎煮二次,第一次1h,第二次0.5h,合并两次煎液,滤过,浓缩至1.05-1.07(60℃),放至室温,加入95%乙醇调含醇量至70%,冷藏48小时以上后回收乙醇至1.28(60℃),放至室温,再以乙醇调含醇量至85%,冷藏48小时以上后回收乙醇,浓缩至1.25~1.28(80℃),用浓盐酸调pH至2,冷藏24小时以上,滤过,滤液以40%氢氧化钠溶液调pH至7-8,得夏枯草提取液。将提取液依次以石油醚、乙酸乙酯各萃取6次(提取液:提取溶剂=3:1),弃去萃取液,水溶液再用水饱和正丁醇萃取,挥去正丁醇,得活性部位。
实施例4
取夏枯草1kg,加12倍水煎煮四次,前二次各1h,后二次各0.5h,滤过,合并滤液,浓缩至6000ml,加入1%壳聚糖醋酸溶液300ml,摇匀,放置12h,高速离心(4000rpm,离心10min),取上清液,浓缩为每毫升含4g生药,以浓盐酸调pH2,冷藏24h以上,滤过,滤液以40%氢氧化钠溶液调pH7~8,得夏枯草提取液,提取液依次以石油醚、乙酸乙酯各萃取5次(提取液:提取溶剂=3:1),弃去萃取液,水溶液再用水饱和正丁醇萃取,挥去正丁醇,得活性部位。
实施例5
取夏枯草2kg,加10倍水煎煮三次,前二次各1h,第三次0.5h,滤过,合并滤液,浓缩至2000ml,加入5%的101果汁澄清剂800ml,搅拌15min,放冷,冷藏12h,取上清液,浓缩为每毫升含4g生药的溶液,以浓盐酸调pH2,冷藏24h以上,滤过,滤液以40%氢氧化钠溶液调pH7~8,得夏枯草提取液,提取液依次以石油醚、乙酸乙酯各萃取5次(提取液:提取溶剂=1:1),弃去萃取液,水溶液再用水饱和正丁醇萃取,挥去正丁醇,得活性部位。
实施例6
取夏枯草2kg,加12倍水煎煮二次,每次各1h,滤过,合并滤液,浓缩至2000ml。取ZTC-II天然澄清剂A组分用水配制成1%粘胶液,溶胀24h;B组分用1%醋酸配制成1%的粘胶液,溶胀24h。取上述夏枯草提取液,加热至80℃,按3B:2A的比例先加入组分B,边加边搅拌,保温30min后在60℃时再加入组分A,边加边搅拌,保温30min,冷藏24h,过滤,滤液浓缩为每毫升含4g生药,以浓盐酸调pH2,滤过,滤液以40%氢氧化钠溶液调pH7~8,得夏枯草提取液,提取液依次以石油醚、乙酸乙酯各萃取6次(提取液:提取溶剂=3:1),弃去萃取液,水溶液再用水饱和正丁醇萃取,挥去正丁醇,得活性部位。
实施例7
取夏枯草1kg,加13倍量水煎煮二次,第一次1h,第二次0.5h,滤过,合并滤液,浓缩至1000ml,上HPD100大孔吸附树脂柱,以8倍柱体积70%乙醇洗脱至与FeCl3-K3Fe(CN)6溶液反应呈阴性,合并洗脱液,浓缩为每毫升含4g生药,得夏枯草提取液,提取液依次以石油醚、乙酸乙酯各萃取5次(提取液:提取溶剂=3:1),弃去萃取液,水溶液再用水饱和正丁醇萃取,挥去正丁醇,得活性部位。
实施例8
取夏枯草2kg,加10倍水煎煮四次,前两次各1h,后两次各0.5h,滤过,合并滤液,浓缩8000ml,在40℃时加入240ml的1%甲壳素盐酸溶液,边加边搅拌25min,离心15min(4000rpm),取上清液,浓缩为每毫升4g生药,以浓盐酸调pH2,冷藏24h以上,滤过,滤液以40%NaOH调pH7~8,得夏枯草提取液,提取液依次以石油醚、乙酸乙酯各萃取5次(提取液:提取溶剂=3:1),弃去萃取液,水溶液再用水饱和正丁醇萃取,挥去正丁醇,得活性部位。
实施例9
取夏枯草2kg,用10倍水煎煮三次,前二次各1h,第二次0.5h,合并煎液,滤过,浓缩至1.05-1.07(60℃),放至室温,加入85%乙醇调含醇量至70%,冷藏48小时,回收乙醇至1.25(60℃),放至室温,再以乙醇调含醇量至85%,冷藏24小时以上后回收乙醇,浓缩至1.28(80℃),用浓盐酸调pH至2,冷藏24小时以上,滤过,滤液以40%氢氧化钠溶液调pH至8,得夏枯草提取液。将提取液依次以石油醚、乙酸乙酯各萃取5次(提取液:提取溶剂=3:1),弃去萃取液,水溶液再用水饱和正丁醇萃取,挥去正丁醇,得活性部位。
实施例10
取夏枯草1kg,加16倍量水煎煮二次,第一次1h,第二次0.5h,滤过,合并滤液,浓缩至1000ml,取ZTC-III天然澄清剂A组分用水配制成1%粘胶液,溶胀24h;B组分用1%醋酸配制成1%的粘胶液,溶胀24h。取上述夏枯草提取液,加热至80℃,按3B:2A的比例先加入组分B,边加边搅拌,保温30min后在60℃时再加入组分A,边加边搅拌,保温30min,冷藏24h,过滤,滤液浓缩为每毫升4g生药,以浓盐酸调pH2,滤过,滤液以40%NaOH调pH7,得夏枯草提取液。将提取液依次以石油醚、乙酸乙酯各萃取5次(提取液:提取溶剂=3:1),弃去萃取液,水溶液再用水饱和正丁醇萃取,挥去正丁醇,得活性部位。
实施例11
取夏枯草2kg,加10倍水煎煮四次,前二次各1h,后二次各0.5h,滤过,合并滤液,浓缩至2000ml,上D101大孔吸附树脂柱,以8倍柱体积的65%乙醇洗脱至与FeCl3-K3Fe(CN)6溶液反应呈阴性,合并洗脱液,浓缩为每毫升含4g生药,以浓盐酸调pH2,冷藏24h以上,滤过,滤液以40%NaOH调pH7~8,得夏枯草提取液。将提取液依次以石油醚、乙酸乙酯各萃取5次(提取液:提取溶剂=3:1),弃去萃取液,水溶液再用水饱和正丁醇萃取,挥去正丁醇,得活性部位。
实施例12夏枯草活性部位药理作用实验
(一)、实验材料
唇型科植物夏枯草(Prunella.vulgaris L.)的全草(产地安徽);人结肠癌细胞株LS174-T(中国科学研究院上海细胞生物学研究所细胞库);噻唑蓝(3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl tetrazolium bromide,MTT)、RPMI1640培养基、MEM培养基、小牛血清(Life Technologies公司);胰酶(Sigma公司);氨卞青霉素、硫酸链霉素(华美生物工程公司)。
(二)、供试样品
(1)石油醚部位 0.378g
(2)乙酸乙酯部位 1.714g
(3)水饱和正丁醇部位 5.548g
(4)萃后水层 22.714g
将样品(1)-(3)分别用生理盐水定容至100ml,样品(4)定容至200ml,备用。
(三)、细胞培养及活性检测
取对数生长期的LS174-T细胞,用0.125%的胰酶于0.01%EDTA1:1的混合液将细胞消化为单细胞悬液,用10%小牛血清1640培养液悬浮,以5×103个每孔接种到96孔培养板孔内,每孔200μl,培养24h后,细胞贴壁,细胞近乎融合,吸弃培养液,按实验方案加入干预药物,此时实验用培养液为0.2%小牛血清1640培养液,继续培养24后,每孔加入MTT溶液(5mg/ml)20μl,37℃,继续孵育4h,终止培养,小心吸弃孔内培养上清液。每孔加入150μlDMSO,振荡10min,使结晶物充分溶解。以490nm为测定波长,在酶联免疫检测仪上比色测定各孔光吸收值OD490,记录结果。空白对照组:不加细胞,只加培养液。需要补充体积时用生理盐水代替。对照组:加细胞和培养液,正常培养。每组设5个复孔。按下式计算细胞生长抑制率(IR)。
IR(%)=(对照组OD值—实验组OD值)/(对照组OD值—空白组OD值)×100%
经对结肠癌细胞株LS174-T进行筛选的实验结果证实,上述水饱和正丁醇部位为本发明夏枯草活性部位。可用于制备治疗结肠癌的药物。
表6是四种样品对LS174-T的抑制率。
表7是水饱和正丁醇部位在不同浓度下对LS174-T的抑制率。
表6
其中:负值表示对细胞无抑制作用。
表7
Claims (11)
1.夏枯草活性部位,其特征在于所述的活性部位占夏枯草药材的2.7‰ g/g,其HPLC指纹图谱有3个共有峰,其保留时间范围为:共有峰1为15.56~15.91min,共有峰2为21.30~21.43min,共有峰3为30.90~31.43min;以迷迭香酸为参照,分析条件为:Diamonsil C18柱(200mm×4.6mm,5μm);流动相:A:甲醇,B:乙腈,C:0.5%醋酸水溶液,线性梯度洗脱,0min:0.5%B,97.5%C;10min:10%B,80%C;20min:25%B,75%C;30min:30%B,70%C;50min:97.5%B,2.5%C;流速:0~20min:0.7ml/min;30min:1ml/min;柱温:25℃;检测波长:247nm;通过下述步骤制备:
取夏枯草Prunella.vulgaris L.用水煎煮提取,水提取液过滤,浓缩后加不同浓度的乙醇沉淀,取上清液浓缩至80℃时相对密度为1.25~1.28的清膏,依次加入酸、碱溶液,冷藏,滤过,得夏枯草提取液;或,
取夏枯草用水煎煮提取,水提取液经大孔吸附树脂,用70%乙醇洗脱,收集洗脱液,回收乙醇后加水稀释,活性炭脱色并浓缩至80℃时相对密度为1.25~1.28的清膏,得夏枯草提取液;或,
取夏枯草用水煎煮提取,水提取液加吸附澄清剂,放置,高速离心,上清液浓缩至一定相对密度的清膏,依次加入酸、碱溶液,冷藏,抽滤,得夏枯草提取液;
上述夏枯草提取液依次以石油醚、乙酸乙酯、水饱和正丁醇萃取,将分离所得的样品进行细胞生物活性的检测,确定水饱和正丁醇提得的部位为活性部位。
2.根据权利要求1所述的夏枯草活性部位的制备方法,其特征在于所述的水煎煮提取中夏枯草与水的重量比为夏枯草∶水=1∶10~16,煎煮次数为2~4次。
3.根据权利要求1所述的夏枯草活性部位的制备方法,其特征在于所述的水提取液浓缩至相对密度为1.05~1.09 60~65℃,放至室温,加入75%~95%乙醇,使含醇量为70%,冷藏48小时以上,回收乙醇至溶液相对密度为1.25~1.28 80℃,放至室温,再以乙醇调含醇量至85%,冷藏48小时以上,上清液浓缩至1.25~1.28 80℃的清膏。
4.根据权利要求1所述的夏枯草活性部位的制备方法,其特征在于所述的大孔吸附树脂为非极性树脂。
5.根据权利要求4所述的夏枯草活性部位的制备方法,其特征在于所述的大孔吸附树脂选自HPD100或D101。
6.根据权利要求1所述的夏枯草活性部位的制备方法,其特征在于所述的吸附澄清剂选自甲壳素、壳聚糖、101果汁澄清剂或ZTC1+1中的任一种。
7.根据权利要求6所述的制备方法,其特征在于所述的吸附澄清剂壳聚糖以及ZTC1+1系列中的ZTC-II或ZTC-III。
8.根据权利要求1所述的夏枯草活性部位的制备方法,其特征在于所述的酸溶液选自浓盐酸调pH为2,碱溶液选自40%氢氧化钠溶液调pH为7-8;冷藏时间24小时以上。
9.根据权利要求2所述的制备方法,其特征在于所述的夏枯草提取液依次以石油醚、乙酸乙酯、水饱和正丁醇萃取,其中提取液:溶剂为1~3∶1。
10.根据权利要求1所述的夏枯草活性部位的制备方法,其特征在于所述的生物活性检测的细胞是结肠癌细胞株LS174-T。
11.权利要求1所述的夏枯草活性部位在制备治疗结肠癌药物组合物中的用途。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN 200710041690 CN101317883B (zh) | 2007-06-06 | 2007-06-06 | 夏枯草活性部位及其在制备药物组合物中的应用 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN 200710041690 CN101317883B (zh) | 2007-06-06 | 2007-06-06 | 夏枯草活性部位及其在制备药物组合物中的应用 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN101317883A CN101317883A (zh) | 2008-12-10 |
CN101317883B true CN101317883B (zh) | 2012-01-04 |
Family
ID=40178322
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN 200710041690 Active CN101317883B (zh) | 2007-06-06 | 2007-06-06 | 夏枯草活性部位及其在制备药物组合物中的应用 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN101317883B (zh) |
Families Citing this family (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN101575636B (zh) * | 2009-05-14 | 2012-08-15 | 北京农学院 | 一种筛选磷酸二酯酶(pde)抑制剂的方法 |
CN102018759B (zh) * | 2009-09-17 | 2012-08-22 | 上海中医药大学附属曙光医院 | 迷迭香酸、含迷迭香酸的夏枯草有效组分及其制备方法和其在防治癌症术后转移方面的应用 |
CN101816702B (zh) * | 2009-10-13 | 2012-09-26 | 贾晓斌 | 取自夏枯草的防治肺癌组合物及其在制备防治肺癌药物中的应用 |
CN101862373B (zh) * | 2010-06-12 | 2012-01-04 | 广州星群(药业)股份有限公司 | 一种夏桑菊颗粒的检测方法 |
CN107865828B (zh) * | 2016-09-24 | 2020-03-27 | 上海中医药大学附属曙光医院 | 防治结肠癌转移的口服结肠定位制剂、制备方法及其应用 |
CN109444289A (zh) * | 2018-12-21 | 2019-03-08 | 广东方制药有限公司 | 一种鉴别夏枯草药材成熟度的uplc特征图谱构建方法 |
CN115300470B (zh) * | 2022-08-26 | 2023-07-25 | 雅安迅康药业有限公司 | 一种夏枯草片及其制备方法 |
Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN1965896A (zh) * | 2006-11-03 | 2007-05-23 | 深圳清华大学研究院 | 一种夏枯草属植物提取物和制备方法及医药用途与应用 |
-
2007
- 2007-06-06 CN CN 200710041690 patent/CN101317883B/zh active Active
Patent Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN1965896A (zh) * | 2006-11-03 | 2007-05-23 | 深圳清华大学研究院 | 一种夏枯草属植物提取物和制备方法及医药用途与应用 |
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
孙红等.4种夏枯草提取物对家兔离体胸主动脉的作用.《西安交通大学学报(医学版)》.2005,(第01期), * |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CN101317883A (zh) | 2008-12-10 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN101317883B (zh) | 夏枯草活性部位及其在制备药物组合物中的应用 | |
CN102018759B (zh) | 迷迭香酸、含迷迭香酸的夏枯草有效组分及其制备方法和其在防治癌症术后转移方面的应用 | |
CN102772499B (zh) | 热淋清颗粒原料的醇提有效部位及其制备方法和用途 | |
CN102138966B (zh) | 藏茵陈提取物及其制备方法、药物组合物和用途 | |
CN105294623B (zh) | 一种倍半萜内酯类化合物、其制备方法以及应用 | |
CN102772500B (zh) | 具有抗炎作用的热淋清颗粒原料头花蓼提取物 | |
CN102286056A (zh) | 一种齐墩果酸衍生物及其制备方法 | |
CN102805767B (zh) | 具有抗淋球菌作用的热淋清颗粒原料头花蓼提取物 | |
CN108245501B (zh) | 野马追的链状二萜化合物在制备抗乙肝病毒药物中的应用 | |
CN104387362B (zh) | 一种环烯醚萜酯类化合物、其制备方法以及应用 | |
CN101028322B (zh) | 毛裂蜂斗菜提取物用于制备防治肿瘤疾病药物的用途 | |
CN109232491A (zh) | 一种华泽兰中苯并呋喃类化合物的制备方法及用途 | |
CN101531721B (zh) | 一种三萜皂苷单体的工业化制备方法 | |
CN1709417A (zh) | 一种杏香兔耳风提取物及其制备方法 | |
CN101880269B (zh) | 二萜单体及从大青中分离制备二萜单体的方法 | |
CN101559066B (zh) | 荭草素-2"-O-β-L-半乳糖苷及组合物在制备抗心肌缺血药物中的应用 | |
CN103340916A (zh) | 一种野马追提取物、制备方法及其应用 | |
CN102145040A (zh) | 采用大孔树脂吸附提取肾茶有效部位的工艺方法 | |
CN105348364B (zh) | 一种从女贞子中提取齐墩果酸的方法 | |
CN111001189A (zh) | 一种利用混合模式琼脂糖凝胶介质对甘草中有效组分的捕获与分离方法 | |
CN101642492B (zh) | 治疗慢性盆腔炎的药物及其制备方法 | |
CN103977391A (zh) | 一种小柴胡胶囊的制备方法及应用 | |
CN102093210A (zh) | 6种银杏酸单体的纯化制备方法 | |
CN100343266C (zh) | 一种胡黄连总苷提取物及其在制备肝病药物中的应用和制备方法 | |
CN104474068A (zh) | 鸡矢藤提取物及其用途 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
C10 | Entry into substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
C14 | Grant of patent or utility model | ||
GR01 | Patent grant |