CN101301287A - 射干异黄酮类化合物在制备抗肝炎药物中的应用 - Google Patents

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Abstract

本发明属于医药技术领域，具体为一种射干异黄酮类化合物在制备抗肝炎病毒药物中的应用。经乙肝表面抗原(HBsAg)和核心抗原(HBeAg)检测试剂实验，结果表明，射干异黄酮类化合物能显著抑制乙肝表面抗原(HBsAg)和核心抗原(HBeAg)，具有显著防治乙肝病毒作用。因此，可将射干异黄酮类化合物用于制备防治肝炎病毒的药物或保健食品。

Description

射干异黄酮类化合物在制备抗肝炎药物中的应用
技术领域
本发明属于天然医药技术领域，具体涉及一种射干Belamcanda chinensis(L.)DC.中异黄酮类化合物在制备防治肝炎病毒药物或保健食品中的应用。
背景技术
射干是鸢尾科射干属植物射干Belamcanda chinensis(L.)DC.的干燥根茎。已报道的射干含有的主要成分为野鸢尾苷元，鸢尾黄素，次野鸢尾黄素，鸢尾黄酮新苷元A，白射干素，野鸢尾苷，鸢尾苷等19个异黄酮蕾成分[Jin Li，Chen Hai-Sheng et al.New flavone andisoflavone glycoside from Belamcanda chinensis，Chinese Chemical Letters2007，18：158-160；Jin Li，Chen Hai-sheng*，Jin Yong-Sheng，Liang Shuang，Liu Jian-GuoChemical constituents from Belamcanda chinensis Journal of Asian Natural Products Research2008，10(1)：89-91；胡小兰，徐谥，黄天霞等，射干中化学成分的分离与鉴定，中药通报，1982，7(1)：29～30；吉文亮，秦民坚，王峥涛.射干的化学成分研究(I)，中国药科大学学报，2001，32(3)：197～199；余亚纲，汪聪慧，刘岱等，B.Chinensis根茎中亲脂性组分的研究，药学学报，1983，18(12)：969～972；Yamaki M，et al.，Planta Med.，1990，56(3)：335；Hydeyuki Ito，Satomi Onoue，et al.，Isoflavonoids from Belamcanda chinensis，Chem.Pharm.Bull，2001，49(9)：1229～1231；周立新，林茂，赫兰峰，射干的化学成分研究(I)，中草药，1996，27(1)：8～10；秦民坚，吉文亮，王峥涛，射干的化学成分研究(II)，中草药，2004，35(5)：487～489；Won Sick Woo，Eun Hee Woo，An Isoflavone Noririsflorentinfrom Belamcanda chinensis，Phytochemistry，1993，33(4)：939～940；周立新等，中国化学快报，1997，8(2)：133]。但至今未见次野鸢尾黄素、野鸢尾苷元、野鸢尾苷和鸢尾苷等化合物抗乙型肝炎病毒方面的报道。
它们的化学结构通式为：
其中R基分别为：R1为OH或OCH3；R2：为OCH3或OH或H；R3为OH或Oglu；R4为OCH3或H；R5为OCH3或OH或H；R6为OCH3或OH或Oglu；R7为OCH3或H；(见表1)
表1  19个异黄酮成分的名称与结构
Figure A20081003886000051
Figure A20081003886000061
发明内容
本发明的目的在于提出一种射干异黄酮类化合物在制备防治肝炎药物中的应用。
本发明采用HBsAg诊断试剂盒和HBeAg诊断试剂盒(上海科华生物技术有限公司)检测试剂对射干异黄酮进行了抗乙肝表面抗原(HBsAg)和乙肝核心抗原(HBeAg)试验，实验结果表明次野鸢尾黄素、野鸢尾苷元、野鸢尾苷、鸢尾苷者具有显著抗乙肝病毒作用，因此，可将射干异黄酮用于制备抗乙肝病毒的药物或保健食品。
具体实施方式
下面通过具体实施实例，对本发明作进一步说明。
野鸢尾苷元(BC-1)、次野鸢尾黄素(BC-3)、野鸢尾苷(BC-13)、鸢尾苷(BC-14)抗乙肝病毒试验
一、实验药物、试剂及材料
化合物BC-1，BC-3，BC-13，BC-14。
立可读HBsAg诊断试剂盒(上海科华生物技术有限公司)
立可读HBeAg诊断试剂盒(上海科华生物技术有限公司)
细胞培养液(10％胎牛血清，0.03％谷氨酰胺，G418 390μg/ml，卡那霉素50U/ml，调pH至7.2)
细胞消化液(0.25％胰蛋白酶，用磷酸缓冲液配置)
HBV-DNA克隆转染人肝癌细胞的2.2.15细胞系(HepG2215)。
二、方法
对数生长期细胞(HepG2.2.15)，调整细胞浓度为2×105个/ml，取100μl种96孔板；药物不同浓度稀释培养24小时后加药，8天后取上清测表面抗原(HBsAg)和核心抗原(HBeAg)。
(1)每孔加入待测标本50ul，设阴、阳性对照各2孔，每孔加入阴性对照(或阳性对照)各一滴，并设空白对照一孔。
(2)每孔加入酶结合物1滴(空白对照孔除外)，充分混匀，封板，置37度孵育30分钟；
(3)弃去孔内液体，洗涤液注满各孔，静置5秒，甩干，重复五次后拍干；
(4)每孔加显色剂A液、B液各1滴，充分混匀，封板，置37度孵育15分钟；
(5)每孔加入终止液1滴，混匀；
(6)用酶标仪读数，取波长450nm，参考波长630nm，读取各孔读数。
三、结果(表2，表3)：
表2射干异黄酮对乙肝表面抗原(HBsAg)抑制活性
  HBsAg(％)   BC-3   BC-13   BC-14   BC-1
  10μg/ml   22.4   10.8   26.2   25.9
  20μg/ml   35.8   17.8   61.8   48.2
  50μg/ml   55.6   54.1   76.5   76.4
  100μg/ml   65.9   63.7   86.5   -
表3射干异黄酮对乙肝核心抗原(HBeAg)抑制活性
  HBeAg(％)   BC-3   BC-13   BC-14   BC-1
  10μg/ml   5.1   2.2   1.0   14.3
  20μg/ml   13.7   4.3   6.5   14.5
  50μg/ml   23.3   5.7   8.9   20.6
  100μg/ml   17.6   8.2   11.2   -
注：以上数字均为百分比
“-”表示在该浓度下，药物的细胞毒性强，细胞大部分已死亡。
上述实验结果表明，次野鸢尾黄素、野鸢尾苷元、野鸢尾苷和鸢尾苷等一系列化合物具有显著抗乙肝病毒作用。因此可将射干异黄酮用于制备防治乙肝病毒的药物或保健食品。

Claims (2)

1、射干异黄酮类化合物在制备抗肝炎病毒的药物或保健食品中的应用，该类化合物化学结构通式为：
Figure A2008100388600002C1
其中R1＝OH或OCH3；R2：＝OCH3或OH或H；R3＝OH或Oβ-D-葡萄糖(β-D-glu)；R4＝OCH3或H；R5＝OCH3或OH或H；R6＝OCH3或OH或Oβ-D-葡萄糖(β-D-glu)；R7＝OCH3或H。
2、按权利要求1所述的射干异黄酮类化合物的应用，所述化合物是指表1中所列化合物：
表119个异黄酮成分的名称与结构
Figure A2008100388600002C2
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