CN101250535A - 水稻抗病相关基因OsDR9及其在改良水稻抗病性中的应用 - Google Patents

Abstract

本发明属于植物基因工程技术领域。具体涉及包含水稻抗病相关基因OsDR9的DNA片段的分离克隆和功能验证。通过抑制水稻中OsDR9基因的表达，增强水稻对稻瘟病和胡麻叶斑病的抗性，证明OsDR9基因在水稻抗真菌病害反应中是负调控因子，可以通过抑制OsDR9基因表达培育抗病水稻品种。

Description

水稻抗病相关基因OsDR9及其在改良水稻抗病性中的应用

技术领域

本发明涉及植物基因工程技术领域。具体涉及一个水稻抗病相关基因OsDR9的分离克隆、功能验证和应用。OsDR9基因是水稻抗病反应中的负调控因子。抑制OsDR9基因的功能可以显著增强水稻抵抗病害的能力。

背景技术

植物在生长的过程中，受到多种病原物的侵害。植物病原物的种类繁多，包括病毒、细菌、霉菌和线虫等。病原物侵入植物导致两种结果：(1)病原体成功的在寄主植物内繁殖，引起相关的病症；(2)寄主植物产生抗病反应，杀死病原物或阻止其生长。利用抗性基因资源改良植物的抗病性，是预防病害同时又保护环境的根本出路。

植物的抗病反应是多基因参于调控的复杂过程。参于植物抗病反应的基因分为两类：(1)抗病(主效)基因，又称R(resistance)基因和(2)抗病相关基因。

根据目前人们对抗病基因功能的认识，抗病基因的产物主要是作为受体，直接或间接与病原蛋白相互作用，启动植物体内的抗病信号传导路径(Tang等，1996；Baker等，1997；Jia等，2000；Dangl和Jones，2001；Nimchuk等，2001)。抗病基因介导的抗病反应抗性强，是很好的基因资源。但由于下述原因，使利用这类基因改良植物抗性受到限制：(1)抗病基因的资源有限，如目前知道的抵抗水稻重要病害白叶枯病的抗病基因少于30个，抵抗另一水稻重要病害—稻瘟病的抗病基因也只有大约40个；目前还没有发现抵抗水稻胡麻叶斑病的抗病基因；(2)抗病基因具有病原种类和病原生理小种特异性，抗病范围有限；(3)因为病原的快速突变，一个抗病基因的作用往往几年或者十几年后就丧失了。

抗病相关基因是指除抗病基因外所有参于抗病反应的基因，它们的编码产物参于合成植物体内抗病信号分子、参于信号传导、阻止信号传导或参于防卫反应等。这类基因的共同特点是病原诱导后它们的表达量升高或减少。因此人们可以根据病原诱导前后基因的表达量的差异大规模地鉴定植物抗病相关基因(Schenk等，2000；Zhou等，2002；Chu等，2004)或者通过筛选抗性发生改变的突变体发掘新的抗病相关基因。目前，人们对抗病相关基因的认识有限。根据已有报道，大多数抗病相关基因单独作用时的抗性能力可能比抗病基因小。但根据下述原因，它们是值得大力开发的基因资源：(1)由于绝大多数抗病相关基因的产物不需要直接与病原物相互作用，这类基因是具有持久抗性的基因资源；(2)大多数抗病相关基因参于的抗病反应没有病原特异性，因此它们是具有广谱抗性的基因资源；(3)这类基因的资源丰富。但是，水稻中虽然鉴定了很多抗病相关基因(Zhou等，2002；Chu等，2004)，这些基因在水稻抗病反应中的作用机理、以及单个抗病相关基因是否会引起水稻抗病表型的改变都不清楚。

水稻是世界上重要的粮食作物，但病害的影响常常造成其产量和品质的下降。因此，了解病害的发病机制，有助于利用高效途径改良水稻品种的抗性，控制病害的发生，减少或避免植物病害所带来的损失。

分离克隆抗病相关基因是利用这类基因改良植物抗病性的前提。通过农杆菌的T-DNA插入标签的方法大规模分离功能基因(包括抗病相关基因)是一个行之有效的方法(Wu等，2003；Yuan等，2007)。T-DNA插入被认为是一个随机的事件，因而只要有足够多的遗传转化植株就可以获得饱和水稻基因组的突变体材料，即使基因组内每个基因都可能有相应的T-DNA标签插入(Aziprozi等，1997；Krysan等，1999)。本发明研究人员所在的实验室已经构建了约含129,000个独立转化植株的水稻T-DNA插入突变体库(Wu等，2003；Zhang等，2006)，通过筛选这些突变体可以发掘大量可以用于改良水稻的抗病相关基因。同时，与抗病基因的应用相比，抗病相关基因的应用能提供植物更为广谱及长效的抗性。通过抑制作为抗病反应负调控因子的抗病相关基因的功能进行水稻品种的改良，将进一步增强植物的抗病性，拓宽植物的抗谱。这些方面是采用常规植物育种和改良技术所不能达到的。

发明内容

本发明的目的是从水稻T-DNA插入突变体中分离克隆一个抗病相关基因完整编码区段的DNA片段，这个基因被命名为OsDR9(Oryza sativa defense responsive 9)。

本发明涉及分离和应用一种包含OsDR9基因的DNA片段，该基因负调控水稻对由稻瘟病菌(Magnaporthe grisea)引起的稻瘟病(blast)和由胡麻叶斑病菌(Bipolaris oryzae)引起的胡麻叶斑病(Cochliobolus miyabeanus)的抗病反应。其中，所述片段如序列表SEQ ID NO：1所示，或者基本上相当于SEQ ID NO：1所示的DNA序列，或者其功能相当于SEQ ID NO：1所示序列的亚片段。对其序列进行分析表明它是一个编码功能未知蛋白的水稻新基因。抑制序列表SEQ ID NO：1所示序列的表达可以增强水稻对稻瘟病和胡麻叶斑病的抗性。

可以采用已经克隆的OsDR9基因作探针，从cDNA和基因组文库中筛选得到本发明的基因或同源基因。同样，采用PCR(polymerase chain reaction)技术，也可以从基因组、mRNA和cDNA中扩增得到本发明的OsDR9基因以及任何感兴趣的一段DNA或与其同源的一段DNA。

本发明为增强水稻对真菌性病害的抗性提供了一种新的方法。这种方法是通过转基因技术抑制OsDR9基因的表达，增强水稻对病原菌的抗性。采用这类转基因技术创造抗病植物是传统育种技术所不能达到的。

在本发明的实施例部分，申请人阐述了OsDR9基因的分离、功能验证和应用过程以及该基因的特点。

附图说明

序列表SEQ ID No：1.本发明分离克隆的OsDR9基因的序列和它编码的蛋白质的氨基酸序列。

图1.本发明鉴定和分离克隆水稻抗病相关基因OsDR9以及验证OsDR9基因功能的流程图。

图2.水稻类病斑突变体02Z15AM37具有粳稻品种中花15的遗传背景。突变体02Z15AM37和中花15的叶片取于水稻抽穗期。突变体02Z15AM37叶片上的黄褐色斑块是类病斑。

图3.水稻类病斑突变体02Z15AM37的T2代家系和野生型对照中花15的田间抗性鉴定。“阴性植株”是从02Z15AM37的T2代家系中分离的不携带T-DNA插入片段的植株。(A)突变体02Z15AM37在湖北远安县稻瘟病高发地区田间自然感染稻瘟病结果。CO39是稻瘟病感病对照。(B)突变体02Z15AM37在湖北武汉市华中农业大学水稻实验基地大田自然感染胡麻叶斑病结果。

图4.OsDR9基因的结构和T-DNA插入位点。黑色长方框表示OsDR9基因的编码区，阴影线长方框表示了5’非翻译区和3’非翻译区，方框之间的线条表示内含子，数值表示各个结构的碱基数。“ATG”和“TAG”分别是翻译起始密码和终止密码。箭头代表进行基因结构分析中所用PCR引物位置。T-DNA插入在ATG前方216bp的位置。箭头a，b，c分别表示用来验证类病斑和T-DNA插入共分离的引物；a表示在T-DNA插入位点上游设计的引物，b表示在插入位点下游设计的引物，c表示根据T-DNA内部序列设计的引物。箭头1、2、3、4、5、6、7、8分别表示用来验证OsDR9基因结构的PCR引物SPL19RTF5、SPL19RTR5、SPL19RTF4、SPL19RTR4、SPL19RTF3、SPL19RTR3、SPL19RTF6、SPL19RTR6。

图5.突变体02Z15AM37的T1代植株T-DNA插入和类病斑表型共分离检测。“+”表示植株形成假病斑，“-”表示植株没有假病斑，中花15是野生型对照。

图6.突变体02Z15AM37中OsDR9基因不表达与出现类病斑相关。泳道1、2、3、4、5的样品分别是野生型中花15的愈伤、突变体02Z15AM37的愈伤、中花15的叶子、突变体的叶子、突变体叶子。

图7.OsDR9基因功能互补验证用遗传转化载体结构示意图。图中：图7A是pCAMBIA2301载体结构示意图；图7B是重组质粒载体D中的水稻DNA插入位点示意图。黑色长方框表示OsDR9基因，OsDR9基因左侧的粗线条表示5’非翻译区上游的DNA序列(包含OsDR9基因的启动子)，OsDR9基因右侧的粗线条表示3’非翻译区下游的DNA序列，数值表示各个结构的碱基数。RB和LB分别表示T-DNA的右边界和左边界。“GUS”表示葡糖醛酸酶基因。“Kan”表示抗卡那霉素基因。

图8.OsDR9基因功能互补验证。(A)遗传转化阴性植株(C1)和阳性植株(C2)叶片表型。叶片取于抽穗期。(B)RT-PCR分析转基因植株中OsDR9基因的表达。C1是遗传转化阴性植株，C2、C5、C7、C10是遗传转化阳性植株，CK为中花15(野生型对照)。

具体实施方式

以下实施例中进一步定义本发明，图1描叙了鉴定和分离克隆OsDR9基因以及互补验证OsDR9基因功能的流程。根据以上的描述和这些实施例，本领域技术人员可以确定本发明的基本特征，并且在不偏离本发明精神和范围的情况下，可以对本发明作出各种改变和修改，以使其适用各种用途和条件。

实施例一：鉴定水稻抗病的类病斑突变体和分离鉴定突变基因

1.鉴定类病斑突变体

病原侵染植物后通常在侵染部位导致植物细胞死亡，形成病斑(lesion)(Agrios，1988)。类病斑(lesion mimic)是在没有病原侵染情况下形成类似病原侵染的病斑。研究证明，因为基因突变导致水稻植株形成类病斑的某些基因可能是抗病相关基因(Yamanouchi等，2002；Zeng等，2004；Mori等，2007；Yuan等，2007)。因此，在水稻突变体库中检测形成类病斑的植株，有助于鉴定新的抗病相关基因。本发明所在单位华中农业大学创建了约含129,000个独立转化植株的水稻T-DNA插入突变体库(Wu等，2003；Zhang等，2006)，为鉴定类病斑的突变体奠定了基础。这些水稻突变体的创建采用了农杆菌介导的遗传转化方法，使不同突变体材料的基因组中携带随机插入的由农杆菌T-DNA作为边界序列的外源DNA；这段外源DNA如果插入到某一基因内或基因的调控序列(如启动子)内，则基因功能丧失或表达量发生改变，植株由此可能产生肉眼可见的表型改变(Wu等，2003)。

本发明研究人员通过观察大田种植的水稻T-DNA插入突变体库的突变体植株(Wu等，2003；Zhang等，2006)，发现一个T1代遗传转化家系中的部分植株上形成了肉眼可见的类病斑，其编号为02Z15AM37[水稻突变体数据库RMD(Rice Mutant Database，http://rmd.ncpgr.cn；Zhang等，2006)]。该突变体具有粳稻品种中花15的遗传背景，在田间正常种植条件下从五叶期开始在叶片上自发产黄褐色的类病斑。其类病斑的黄褐色斑点大小不一，斑点周围还有浅黄色的晕圈(图2、图3)。

2.类病斑与插入的T-DNA序列共分离

本发明所在单位的研究人员采用TAIL-PCR的方法(Liu等，1995)分离了水稻T-DNA插入突变体库中部分突变体材料的T-DNA插入位点两侧的水稻基因组序列，即侧翼序列(Wu等，2003；Zhang等，2007)，并将这些侧翼序列收集在水稻突变体数据库RMD(Rice MutantDatabase，http://rmd.ncpgr.cn)中；任何数据库使用者可以通过检索突变体的编号，查看目标突变体是否有T-DNA插入位点的水稻基因组侧翼序列(Zhang等，2006)。

通过检索RDM数据库，发现突变体02Z15AM37具有94bp的侧翼序列(序列表SEQ IDNO：1中的122-215bp)。以这条94bp序列作模板，用BLAST方法检索公共核苷酸数据库(Altschul等，1997)，发现公共核苷酸数据库中来自水稻品种日本晴的一条位于水稻4号染色体、长147,254bp序列(核苷酸数据库GenBank(http://www.ncbi.nlm.nih.gov)注册号：AL662948)的一段序列(第124,809至124,902bp处)与这条侧翼序列的同源性达到96％(E值＝6e-39)。通过序列分析发现，在突变体02Z15AM37中T-DNA插入在一个基因(本发明命名为OsDR9)的编码区前端的5’非翻译区中(图4)，这个T-DNA的插入可能对其后面基因的表达产生影响(详细内容见实施例二)。

为了确定突变体02Z15AM37类病斑的形成是否因为T-DNA插入在4号染色体的这个位点，本发明研究人员根据与02Z15AM37的侧翼序列同源的AL662948的序列设计了一对位于T-DNA插入位点两侧的PCR引物(图4)：引物a(5′-TGGAGAACCTTCTATGCCAATT-3’)和引物b(5′-GGAGCACGGCACGATGAG-3’)；另外，根据T-DNA序列设计了PCR引物c(5′-ATAGGGTTTCGCTCATGTGTTGAGGCAT-3’，图4)(Wu等，2003；Zhang等，2007)。利用这三条引物，采用常规PCR方法(Wu等，2003；Zhang等，2007)分析突变体02Z15AM37类病斑是否与T-DNA插入共分离。这一分析的基本原理是：在02Z15AM37的纯合突变体(一对同源染色体中都有T-DNA的插入)植株中，由于插入的T-DNA片段大约14kb(Wu等，2003)，利用引物a和引物b、采用常规PCR方法无法扩增如此大的DNA片段，而用引物a和引物c可以扩增一段大小已知的水稻基因组和T-DNA的杂合DNA片段；在杂合突变体(一对同源染色体中只有一条染色体中有T-DNA插入)植株中，用引物a和引物b可以扩增一段大小已知的水稻基因组的DNA片段，用引物a和引物c也可以扩增一段大小已知的水稻基因组和T-DNA的杂合DNA片段；在02Z15AM37的阴性(家系中分离出的没有T-DNA插入的)植株中，用引物a和引物b可以扩增一段大小已知的水稻基因组DNA片段，但是用引物a和引物c不能够扩增DNA片段。本发明对10株02Z15AM37家系的T1植株进行了上述PCR分析。结果显示其中7株形成了类病斑的植株是纯合突变体，3株没有类病斑的植株中有2株是阴性植株，1株是杂合突变体(图5)。这些结果说明02Z15AM37家系中类病斑的形成与T-DNA插入在一对同源染色体上共分离。

将T1代植株的种子种植得到T2代植株，进一步分析T2代植株的类病斑表型是否与T-DNA插入共分离。分析发现来源于纯合T1植株的T2后代不再分离，表型一致；而来源于杂合T1植株的T2后突代出现3∶1的表型分离，其中大约1/4的植株出现类病斑，而大约3/4的植株没有类病斑。使用上述同样的方法进行PCR检测，结果表明T-DNA插入在一对同源染色体上与类病斑表型共分离。由此证明，这个突变体02Z15AM37是由于T-DNA插入造成的单位点隐性突变。因此，我们可以根据02Z15AM37家系的植株是否形成类病斑确定纯合T-DNA插入突变体。

3.突变体02Z15AM37对水稻病原真菌的抗性增强

稻瘟病由真菌—稻瘟病菌引起，是水稻的三大重要病害之一。在湖北省远安县的稻瘟病自然发病圃中种植02Z15AM37的T2代纯合植株。发现与对应于O2Z15AM37的野生型水稻品种中花15和高感稻瘟病的对照品种CO39相比，所有具有类病斑的02Z15AM37植株高抗稻瘟病，它们的叶片上仅有及少数由稻瘟病菌侵染所至的点状病斑；而所有不形成类病斑的02Z15AM37植株(T2代植株中分离出的不携带T-DNA插入片段的植株)、中花15和CO39公共植株高感稻瘟病，它们的叶片上形成大量黑褐色的病斑，有的叶片部位许多病斑连接成片(图3A)。

胡麻叶斑病也是由真菌引发的水稻病害。目前还未见有关抗胡麻叶斑病的水稻抗性基因的报道。本发明研究人员在武汉市华中农业大学水稻实验基地的大田种植02Z15AM37的T2代纯合植株时，发现中花15和所有不形成类病斑的02Z15AM37植株(T2代植株中分离出的不携带T-DNA插入片段的植株)都感染了胡麻叶斑病，它们的叶片上出现典型的点状黑色病斑(图3B)；而所有形成类病斑的02Z15AM37植株都抗胡麻叶斑病。

实施例二：确定OsDR9基因结构以及类病斑与OsDR9基因表达的关系

1.OsDR9基因结构分析

利用GENSCAN(http://genes.mit.edu/GENSCAN.html)、GeneFinder(http://genomic.sanger.ac.uk/gf/gf.shtml)、Gene Feature Searches(http://dot.imgen.bem.tmc.edu：9331/)、GeneMark(http://genemark.biology.gatech.edu/GeneMark/hmmchoice.html)等多个基因结构的预测软件和BLAST分析方法(Altschul等，1997)，分析预测来源于水稻品种日本晴的一条基因组序列AL662948(实施例一中的第2节)中与突变体02Z15AM37的侧翼序列同源的序列以及两侧的序列的结构特征。分析结果显示，在突变体02Z15AM37中，T-DNA插入在一个预测的基因内，本发明将这个基因命名为OsDR9(Oryza sativa defense responsive 9)。

本发明研究人员根据预测的OsDR9基因的结构设计了8条PCR引物SPL19RTF5(5’-CCACCGTCCTGTCTCGCTCTT-3’)、SPL19RTR5(5’-TCTTCCTCCTCGGGCTCCTC-3’)、SPL19RTF4(5’-GAGGAGCCCGAGGAGGAAGA-3’)、SPL19RTR4(5’-GCAGGCAGGCGGTGAAT-3’)、SPL19RTF3(5’-ACGACCGAGACCTTCTTGTAT-3’)、SPL19RTR3(5’-AGGAAATGGGCCATGCTA-3’)、SPL19RTF6(5’-CGTGCCGTGCTCCACGCT-3’)、SPL19RTR6(5’-GGATCAATTCTGAACATCAGATCA-3’)(图4)。采用PCR和反转录(RT)-PCR方法，通过比较OsDR9基因的基因组序列和cDNA序列验证该基因的5’末端非翻译区(untranslated region，5’-UTR)序列、3’末端非翻译区(3’-UTR)序列和内含子剪切位点。具体分析方法如下：采用TRIzol Reagent(购自美国Invitrogen公司)，根据公司提供的使用说明书从粳稻品种中花15中抽提总RNA；将1～5μg上法得到的总RNA用DNaseI(Invitrogen，美国)处理30分钟以去除基因组DNA污染，然后参照Zhou等(2002)的方法，使用oligo(dT)15寡聚引物和SuperScriptII反转录酶(购自美国Invitrogen公司)进行反转录获得cDNA。利用上述PCR引物扩增cDNA。用美国Applied Biosystems公司的测序试剂盒，以双脱氧核苷酸末端终止法(美国Applied Biosystems公司)对PCR扩增片段进行测序。序列拼接后得到一长1709bp的cDNA序列。这条1709bp序列对应于序列表SEQID NO：1所示序列的1-881、882-1147、3364-3424、4064-4151、4225-4637bp处，它包括完整的OsDR9基因的编码序列。

对照比较OsDR9的基因组序列和cDNA序列，OsDR9基因全长4637bp，由4个外显子组成，分别位于序列表SEQ ID NO：1所示序列的1-1147、3364-3424、4064-4151、4225-4637bp处；其编码序列位于第一个外显子中，位于序列表SEQ ID NO：1所示序列的339-878bp处(图4)。OsDR9基因的5’非翻译区长338bp，位于序列表SEQ ID NO：1所示序列的1至338bp处；在突变体02Z15AM37中，T-DNA插入在5’非翻译区的第122位核苷酸后(即T-DNA插入在序列表SEQ ID NO：1所示序列的122和123bp之间)。OsDR9基因的3’非翻译区长828bp，被3个内含子隔断，分别位于序列表SEQ ID NO：1所示序列的882-1147、3364-3424、4064-4151、4225-4637bp处(图4)。OsDR9基因编码一个由180个氨基酸组成的未知功能的新蛋白。

2.类病斑与OsDR9基因不表达相关

为了进一步验证是OsDR9基因的缺失引起了突变表型，本发明研究人员同时也验证了OsDR9基因在突变体02Z15AM37和野生型植株中花15中的表达差异。总RNA的抽提采用TRIzol Reagent(购自美国Invitrogen公司)，操作方法按公司提供的试剂盒说明书进行。将1～5μg上法得到的总RNA用DNaseI(Invitrogen，美国)处理30分钟以去除基因组DNA污染，然后参照Zhou等(2002)的方法，使用oligo(dT)15寡聚引物和SuperScriptII反转录酶(Invitrogen)进行反转录。RT-PCR技术中用的引物是AM37F2(5’-GCATCTGACCCTGGCTGTGT-3’)和AM37R2(5’-AACCAGTCCAATTAATCAGGAAATG-3’)。肌动蛋白(actin)PCR引物序列是actinF(5’-TGCTATGTACGTCGCCATCCAG-3’)和actinR(5’-AATGAGTAACCACGCTCCGTCA-3’)。T-DNA插入在OsDR9基因5‘UTR区，应该导致OsDR9基因不能表达。检测结果如图6所示，野生型中花15的愈伤和叶片组织中OsDR9基因表达正常，而突变体02Z15AM37的愈伤和叶片组织中没有检测到OsDR9基因的表达，说明OsDR9基因的表达缺失和突变体类病斑表型相关。

实施例三：OsDR9基因的功能互补验证

本发明研究人员采用遗传转化方法将包含OsDR9基因及其自身启动子的DNA片段导入突变体02Z15AM37中。所用遗传转化载体是pCAMBIA2301(图7A)。pCAMBIA2301载体是国际上常用的植物农杆菌介导的遗传转化载体pCAMBIA1301(Sun等，2004)的系列载体，由澳大利亚CAMBIA实验室(Center for the Application of Molecular Biology to InternationalAgriculture)惠赠。

遗传转化载体的构建采用常规重组质粒构建方法(Sambrook和Russell，2001)。主要步骤是：采用限制性内切酶消化的方法，将包含有OsDR9基因的水稻品种日本晴的BAC克隆OSJNBa0060B20用限制性内切酶EcoRI和XbaI进行酶切，获得包含有OsDR9基因和它自身启动子的10.5kb片段；同时，用EcoRI和XbaI酶切遗传转化载体pCAMBIA2301；酶切完毕，用氯仿∶异戊醇(24∶1体积比)混和液抽提、纯化酶切产物。然后用去磷酸化酶Alk对纯化的酶切产物进行去磷酸化处理。用包含OsDR9基因的酶切片段和去磷酸化的载体做连接反应。通过酶切和PCR筛选阳性克隆。对筛选到的阳性克隆用转化载体上的特异PCR引物P2301F(5’-TCACTCATTAGGCACCCC-3’)和P2301R(5’-CCTCTTCGCTATTACGC-3’)引物进行测序，验证转化片段的正确性。获得的重组质粒载体被命名为D(见图7B)。

采用农杆菌介导的遗传转化方法(Hiei等，1994)将D导入类病斑突变体02Z15AM37。本发明共获得独立遗传转化水稻植株11株，其中6株转化植株没有类病斑(图8A)。用RT-PCR方法(PCR引物是OsDR9基因的特异引物AM37F2和AM37R2)分析转基因植株中OsDR9基因的表达，发现表型恢复的植株(没有类病斑)中OsDR9基因的表达也得到了恢复(图8B)。进一步说明OsDR9基因的突变引起了类病斑表型。

这些结果说明OsDR9基因的编码产物是水稻抗病反应的负调控因子，抑制OsDR9基因表达可增强水稻对真菌病害的抗病性。

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                                  序列表

Claims (4)

1、影响水稻对稻瘟病和胡麻叶斑病产生抗性的DNA序列，它是SEQ ID NO：1中所示的DNA序列，它包括完整的OsDR9基因。

2、OsDR9基因的编码区，它是SEQ ID NO：1中第339-878位所示的DNA序列或者是编码与SEQ ID NO：1编码的蛋白质相同的蛋白质的DNA序列。

3、权利要求1或2所述的基因在改良水稻抗病性中的应用。

4、权利要求3的应用，其特征在于，通过抑制OsDR9基因表达增强水稻对稻瘟病和胡麻叶斑病抗性的应用。

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