CN101245324A - 乳酸菌的一种高密度培养方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及乳酸菌的一种高密度培养方法，以植物乳杆菌、保加利亚乳杆菌和乳酸片球菌为菌种，使用专门的乳酸菌培养基，其基础配方包括：3％大豆蛋白胨、2％酵母浸提粉、0.5％乙酸钠、复合微量元素液、复合维生素液等，调节起始pH值为7.0－7.2；并在培养过程中流加Na2CO3、KOH、NaOH或氨水使培养液的pH值稳定在6.0－6.8。解除了自身代谢产物对其生长的抑制，获得高活性、高浓度的乳酸菌培养液，培养液中乳酸菌活菌数达到9.0×109－1.0×1010cfu/ml。
Description
技术领域
本发明涉及乳酸菌的一种高密度培养方法，属于微生物发酵工程领域。
背景技术
乳酸菌是人和动物正常微生物群或区系的组成部分。由于其特殊的生理功能被广泛应用于食品、医药及饲料等许多行业上。乳酸菌是生产发酵乳制品、泡菜、干酪、发酵香肠等传统发酵食品，赋予其特殊质地、风味和口感的重要微生物菌群；乳酸菌在家畜饲养和饲料中有重要的作用，特别是在青贮饲料的发酵过程中起主导作用，能够有效地改善青贮饲料的发酵品质，提高动物的生产性能。
乳酸菌菌剂的活性与其数量密切相关，因此为推进其应用，最关键的是解决菌剂的高密度培养问题。由于乳酸菌生长的营养要求较高，需要一些特殊的营养组分；同时，乳酸菌在生长过程中分泌有机酸类代谢产物，使培养液中的pH值不断下降，当pH值降至4.10以下时，菌体的生长繁殖就会受到抑制，因此采用传统的菌种生产工艺，菌种质量得不到保证，而且生产成本高。高密度培养技术广泛地应用于各种微生物的生产中，它是指采用一定的工艺技术，保证微生物生长的适宜条件，延长微生物的指数增殖过程，从而得到高浓度的细胞。乳酸菌的高密度培养增加了单位体积培养液中的菌体数量，降低了生产成本，从而提高产品在市场上的竞争力。对于加速乳酸菌制剂的商品化进程，更好地满足市场需求，具有重要的意义。
发明内容
本发明提供了乳酸菌的一种高密度培养技术，通过使用专门的培养基(以下称乳酸菌培养基)，其基础配方包括：3％大豆蛋白胨、2％酵母浸提粉、0.5％乙酸钠、复合微量元素液、复合维生素液等，并在培养过程中流加碱以调节培养液的pH值，延长乳酸菌对数生长期，获得高活性、高浓度的培养液，培养液中乳酸菌活菌数达到9.0×109-1.0×1010cfu/ml。培养的乳酸菌可应用于饲料青贮、乳制品接种、其它食品添加剂(如奶酪制作、葡萄酒脱酸)及医用等。
具体实施方式
本发明以植物乳杆菌、保加利亚乳杆菌、乳酸片球菌为菌种，经常规方法活化后、接种于乳酸菌培养基，调节起始pH值为7.0-7.2；在培养过程中流加碱使培养液的pH值稳定在6.0-6.8。
实施例1：
挑取活化的植物乳杆菌于MRS液体培养基中，37℃培养12h，以6％的接种量接种到含乳酸菌培养基的发酵罐中，培养基起始pH值为7.0，当pH值低于6.6时流加30％Na2CO3溶液，保持培养液pH值稳定在6.7±0.1，37℃培养30h。
实施例2：
挑取活化的植物乳杆菌于MRS液体培养基中，37℃培养12h，以6％的接种量接种到含乳酸菌培养基的发酵罐中，培养液起始pH值为7.0，当pH值低于6.6时流加20％NaOH溶液，保持培养液pH值稳定在6.7±0.1，37℃培养30h。
实施例3：
挑取活化的保加利亚乳杆菌于MRS液体培养基中，37℃培养12h，以10％的接种量接种到含乳酸菌培养基的发酵罐中，培养液起始pH值为7.2，当pH值低于6.0时流加20％KOH溶液，保持培养液pH值稳定在6.2±0.2。42℃培养24h。
实施例4：
挑取活化的保加利亚乳杆菌于MRS液体培养基中，37℃培养12h，以10％的接种量接种到含乳酸菌培养基的发酵罐中，培养液起始pH值为7.2，当pH值低于6.0时流加氨水，保持培养液pH值稳定在6.2±0.2。42℃培养24h。
实施例5：
挑取活化的乳酸片球菌于MRS液体培养基中，32℃培养12h，以6％的接种量接种到含乳酸菌培养基的发酵罐中，培养液起始pH值为7.2，当pH值低于6.4时流加30％Na2CO3溶液，保持培养液pH值稳定在6.5±0.1，32℃培养30h。
Claims (3)
1. 乳酸菌的一种高密度培养方法，以植物乳杆菌、保加利亚乳杆菌、乳酸片球菌为菌种，采用乳酸菌培养基，调节起始pH值为7.0-7.2；并在培养过程中流加碱使培养液的pH值稳定在6.0-6.8。
2. 根据权利要求1所述的乳酸菌的一种高密度培养方法，其特征在于乳酸菌培养基的基础配方包括：3％大豆蛋白胨、2％酵母浸提粉、0.5％乙酸钠、复合微量元素液、复合维生素液等。
3. 根据权利要求1所述的乳酸菌的一种高密度培养方法，其特征在于在培养过程中流加的碱为30％Na2CO3、20％KOH、20％NaOH或氨水。
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