CN101219167A - 一种排石胶囊的制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及天然药物领域,具体涉及一种排石胶囊的制备方法。本发明的制备方法是将不同的中药材分别提取后再混合制成,如果按与颗粒剂同样的生药量计,则本发明制备方法所制备的胶囊患者服用剂量小,提高了患者服用顺应性;另外药理毒理试验结果显示,本品毒副作用较少,药效优于目前的颗粒剂。
Description
技术领域
本发明涉及天然药物领域,具体涉及一种排石胶囊的制备方法。
背景技术
“排石颗粒”是上世纪70年代,由南京同仁堂制药厂(申请人前身)在《太平惠明和剂局方》“八正散”的基础上,结合临床病情特点精心筛选研究设计出的排石处方来。排石颗粒处方原收载于江苏省质量标准88年版的排石冲剂,现收载于中国药典2005年版。选用下列中药材:连钱草、车前子(盐水炒)、木通、徐长卿、石韦、忍冬藤、滑石、瞿麦、苘麻子和甘草,通过用水煎煮,浓缩成浸膏,再将浸膏与药用辅料混合制成颗粒剂,每袋装20g(每g颗粒含生药2.7g),患者一次服用1袋,一日3次。相当于每日服用生药量为162g。
由于原制剂开发上市较早,提取制备工艺较简单,质控方法较落后,服用剂量较大,冲剂服用不便而且味道不适,给患者带来了很多不便。
发明内容
本发明运用现代提取、分离、纯化以及制剂技术,在将药材提取后再制成胶囊,如果按与颗粒剂同样的生药量162g计,则本发明的胶囊患者服用剂量小,每日3次,每次服4粒,方便了患者服用;药理毒理试验结果显示,本品毒副作用较少,另外,胶囊剂生产、储运、携带方便,经研究,所选工艺可行。
本发明的制备方法如下:
a、连钱草用乙醇提取、浓缩,过D101大孔树脂,乙醇洗脱,浓缩得浸膏;
b、徐长卿用水蒸气蒸馏,蒸馏液冷却,得丹皮酚结晶,药渣备用;丹皮酚溶于乙醇中,再加入到β-环糊精的水溶液中,搅拌,冷藏,抽滤,烘干,得白色干燥粉末;
c、木通、忍冬藤、石韦、瞿麦、苘麻子、车前子、滑石、甘草及徐长卿药渣加水煎煮,滤过,滤液浓缩,得浸膏;
d、将a、c两部分浸膏合并,干燥得药粉,再与b步骤的干燥粉末混匀,加入药用辅料制成胶囊。
优选的配方中各中药材的重量比:
连钱草40-60 车前子5-10 木通5-10
徐长卿5-10 石韦5-10 忍冬藤10-18
滑石10-18 瞿麦5-10 苘麻子5-10
甘草10-18。
上述中c步骤在滤液浓缩后进一步包括:将浓缩的滤液加入乙醇,静置,过滤,滤液减压回收乙醇,进一步浓缩,得浸膏。其中乙醇的浓度优选50~80%,本发明中乙醇的浓度均为重量百分比。
上述a步骤中提取用的乙醇浓度优选40~80%。
上述a步骤中洗脱用的乙醇浓度优选95%。
上述b步骤中β-环糊精的量优选丹皮酚重量的5~15倍。更优选10倍。
上述药用辅料优选自填充剂、崩解剂、稀释剂、粘合剂、润滑剂中的一种或几种。更优选的药用辅料是淀粉和硬脂酸镁。以干燥药粉重量计,淀粉和硬脂酸镁的重量优选分别占30%、0.5%。
在排石颗粒的配方中,连钱草为方中君药,且用量占处方量的1/3之多,针对其利尿排石、抗炎的药理作用,主要含黄酮和以熊果酸为代表的三萜酸类成分,以脂溶性为主,因此,原水提取工艺利用率低,我们以乙醇提取代替原工艺的水提,且在此基础上用大孔树脂纯化,以降低其出膏率。下面是提取连钱草的几个因素的选择试验:
一、提取用乙醇浓度选择
下表中试验号1、2、3分别代表用45%、60%、75%的乙醇提取后浸膏中各成分的含量
表1正交试验的验证试验结果
试验号 | 总黄酮含量(mg/g生药) | 出固率(%) | 三萜酸(mg/g生药) |
123平均 | 9.588.959.359.29 | 11.0611.8711.3811.44 | 5.6755.4905.5455.570 |
验证试验结果说明,用40%~80%乙醇提取工艺基本稳定。
结合预实验结果,考虑到连钱草处方量大且出膏率高的特点,我们拟选用大孔树脂精制工艺。
二、树脂类型选择的试验:
分别称取处理好的不同型号树脂(预先用布氏漏斗抽滤至干)10g,装柱。取连钱草样品溶液(0.5g/ml)30ml上样,静置2h,用0.5ml/min流速过柱,反复上样两次,用水洗脱,收集水洗液700ml至无色,继用95%乙醇洗脱,收集洗脱液700ml,分别将洗脱液浓缩至100ml。以总黄酮、总三萜为指标考察不同树脂的比吸附量,比洗脱量。
比吸附量为单位质量干树脂所吸附指标成分的总和,计算公式为A=(M上-M残-M水)/M,比洗脱量为吸附达饱和后,用一定浓度的乙醇洗脱至终点,单位质量干树脂洗脱成分的总和,计算公式为E=M醇/M,实验结果如下:
表2总黄酮测定结果
树脂型号 | 比吸附量(mg/g) | 比洗脱量(mg/g) | 洗脱率% |
AB-8型D101型DH201型DH301型 | 4.374.394.564.46 | 4.094.294.234.06 | 93.4297.7792.1790.99 |
表3三萜酸测定结果
树脂型号 | 比吸附量(mg/g) | 比洗脱量(mg/g) | 洗脱率% |
AB-8型D101型DH201型DH301型 | 4.434.174.284.75 | 3.613.513.433.62 | 81.5184.1080.1076.17 |
结合各指标的测定结果,优选D101大孔树脂。
三、洗脱溶媒的选择
分别取十份D101大孔树脂约30g,装柱(2.5cm×18cm,预测柱体积为40ml),用水洗至无醇味,取上述供试品溶液40ml(0.5g生药/ml)分别上样,静置过夜,用水洗脱至无色,每根柱用不同浓度的乙醇10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、95%分别洗脱,收集洗脱液500ml,测定其总黄酮及总三萜酸的含量,实验结果如下表。
表4不同部位洗脱液总黄酮的测定结果
总黄酮量(mg) | 洗脱率(%) | |
原液水10%20%30%40%50%60%70%80%95% | 179.56143.84114.35323.49049.10678.481110.959124.32129.336132.03134.04 | 10.58%17.31%36.1857.8381.7691.6095.3097.2898.76 |
表5不同部位洗脱液总三萜酸的测定结果
总三萜量(mg) | 洗脱率(%) | |
原液水10%20%30%40%50%60%70%80%95% | 108.343.9234.7237.46812.41220.45329.23039.95054.73167.90084.572 | 4.52%7.15%11.89%19.59%27.99%38.26%52.41%65.03%80.99% |
结果表明,三萜酸成分95%乙醇洗脱部位洗脱率可达80.99%,黄酮类成分约98%可被95%乙醇洗脱,收集95%洗脱液,因此最优选的洗脱用乙醇浓度是95%。
徐长卿含有1%丹皮酚,具有显著的镇痛作用,根据丹皮酚挥发性大、熔点低、水溶性差的特点,为提高制剂的提取利用率以及为保证制剂的稳定性,本发明单独用水蒸气提取并采用包合技术提高其稳定性。考虑到其非挥发性成分活性不明确,故将其药渣合并其它药味水煎,以确保疗效。
木通、石韦、忍冬藤、苘麻子、车前子、瞿麦、甘草等味根据原工艺及文献报道水煎剂利尿作用明显,故采用水提。考虑到水提物中含杂质多,优选在水提后采用醇沉,以分离纯化。不同的乙醇浓度醇沉后结果不同,见表
表6木通等除杂工艺的研究结果
醇沉浓度 | 出固率% | 总黄酮mg/g | 甘草酸含量mg/g |
50%醇沉60%醇沉70%醇沉 | 4.083.553.24 | 3.2063.1523.266 | 15.51716.59217.647 |
表6可见:最优选的醇沉浓度为70%乙醇。
采用本发明制备方法得到的药物粉末平均每克相当于35克生药,远远高于现有技术中每克相当于2.7克生药。这对制备成制剂及方便患者服用具有积极所用。因此通过添加简单的辅料如淀粉等即可制备成胶囊,方便储存及服用。除此之外,在折合成相同生药量的剂量后,用本发明方法制备方法的排石胶囊药效还优于现有的排石颗粒。
一、预防给药大鼠肾结石模型试验
取清洁级雄性SD大鼠60只,于清洁级环境中适应性饲养1周后随机均分为6组,每组10只,分别为正常对照组、模型对照组、阳性药(排石颗粒,即原剂型)对照组、本发明排石胶囊大、中、小剂量组(即表7~表10中的大剂量组、中剂量组、小剂量组)。除正常对照组每天灌胃给予蒸馏水10ml/kg外,其余5组大鼠参照文献的方法开始造模(每天均用含1%乙二醇的冷开水作为饮用水,另用2%氯化铵按2ml/只灌胃),同时阳性药对照组、排石胶囊大、中、小剂量组分别按56、56、28、14g生药/kg的剂量灌胃给药(其中排石胶囊大剂量约相当于拟临床人用量的20倍),模型对照组灌胃给予蒸馏水,各组动物给药容量均为10ml/kg。连续造模且灌胃给药4周。实验结束前1d用代谢笼分别收集各大鼠24h空腹尿液,测定24h排尿量及24h尿钙(Ca2+)分泌量(甲基百里香酚蓝比色法测定),且每组各解剖2只大鼠(解剖采血并分离血清),发现模型成功且有一定的药效作用。末次给药1h后,大鼠眼眶静脉丛采血2ml,3600rpm离心10min后取上层血清用于生化测定:二乙酰-肟比色法测血清尿素氮(BUN)水平、除蛋白法测肌酐(Crea)水平。大鼠颈椎脱臼处死后取两侧肾称重,计算肾脏的脏器系数。每只大鼠取右肾10%甲醛溶液固定,用于肾组织病理学检查;左肾超低温(-65℃)保存,用于测定肾组织总钙(Ca2+)含量。
模型对照组大鼠在饮用乙二醇加氯化铵溶液后,1周后相继出现食欲减退、精神萎靡、毛发渐黄而乱、活动减少,比同时间的正常对照组大鼠体重明显减小(P<0.05~0.01);给药组的大鼠的尿量明显增加,精神、饮食活动等好于对照组,但体重比同时间的模型对照组大鼠未见明显增加。解剖后肾脏的肉眼观察结果:正常对照组大鼠的肾脏呈规则的弯月形,鲜红色或略带紫红色;模型组大鼠肾脏肿胀、发白或泛黄,其中7只肾盏内肉眼可见微结石,用手触摸肾组织有明显的细砂、摩擦感;给药组大鼠肾脏则多为红色,肿胀等情况较模型组轻。与模型对照组比较,大剂量组大鼠肾脏重量显著减轻,24h排尿量显著增加(P<0.05~0.01);排石颗粒(原剂型)组大鼠的上述指标仅24h排尿量有显著增加(P<0.01)。结果见表7~表10。
组别 | 给药前 | 给药1周 | 给药2周 | 给药3周 | 给药4周 |
模型对照组正常对照组原剂型对照组大剂量组中剂量组小剂量组 | 200.6±8.5200.5±8.7206.4±5.2205.5±7.3203.7±7.9202.0±8.6 | 238.4±12.1253.1±14.6*245.9±13.6244.1±13.6248.2±10.7243.4±9.5 | 251.9±12.4293.6±16.9***252.5±9.5254.7±11.9252.9±9.7251.0±13.8 | 280.3±11.6347.8±25.0***288.8±25.1289.8±22.3293.4±23.3288.6±17.0 | 294.3±19.0393.8±25.6***302.3±24.4300.9±19.0301.2±19.4297.5±27.6 |
注:与模型对照组比较,*p<0.05;***p<0.001。
组别 | 剂量(g/kg) | 肾重量(g) | 肾脏系数(g/100g) | 24h尿量(mL/24h) |
模型对照组正常对照组原剂型对照组大剂量组中剂量组小剂量组 | //56562814 | 4.814±0.8282.472±0.229***4.298±1.2663.666±0.811**4.379±1.4394.547±0.740 | 1.64±0.310.63±0.07***1.41±0.391.22±0.24**1.47±0.521.55±0.33 | 30.09±5.7332.14±11.0239.49±6.10**38.83±9.94*34.00±7.4429.32±6.61 |
注:与模型对照组比较,*p<0.05;**p<0.01;***p<0.001。
组别 | Crea(μmol/L) | 血清Ca2+(mmol/L) | 肾组织Ca2+(μmol/g) | 尿Ca2+分泌量(μmol/24h) |
模型对照组正常对照组原剂型对照组大剂量组中剂量组小剂量组 | 240.8±34.6101.0±15.5***204.8±35.7*192.8±28.8**224.8±28.9230.8±29.6 | 3.13±0.253.02±0.432.65±0.42**2.43±0.38***2.20±0.54***2.49±0.46** | 8.05±3.152.70±0.50***6.14±1.185.25±1.06*5.40±0.97*5.83±1.63 | 55.42±21.8421.93±14.73***52.52±19.6139.00±10.51*42.19±14.6245.72±12.98 |
注:与模型对照组比较,*p<0.05;**p<0.01;***p<0.001。
组别 | 剂量(g/kg) | 肾结石积分值 | 肾小管直径(μm) | 肾小管内坏死积分值 |
模型对照组正常对照组原剂型对照组大剂量组中剂量组 | //565628 | 5.0±0.01.0±0.0***2.3±1.1***2.7±1.1***3.3±1.3*** | 127.17±20.2928.46±6.73***93.55±23.29**49.11±9.89***70.70±31.30*** | 3.8±1.01.0±0.0***2.1±1.2**1.9±0.9***2.0±1.1** |
小剂量组 | 14 | 4.9±0.3 | 99.27±23.20* | 3.0±0.9 |
注:与模型对照组比较,*p<0.05;**p<0.01;***p<0.001。
由上可知,相同剂量的本发明的排石胶囊预防用药的作用优于原剂型对照组。
二、大鼠肾结石模型治疗给药试验
方法同一,只是在造模两周后给药,药物与剂量同一,结果见表11~13。
组别 | 剂量(g/kg) | 肾重量(g) | 肾脏系数(g/100g) | 尿量(mL/24h) |
模型对照组正常对照组原剂型对照组大剂量组中剂量组小剂量组 | //56562814 | 3.612±0.5662.258±0.318***3.469±0.6002.697±0.374***3.138±0.5393.241±0.756 | 1.05±0.220.56±0.08***0.94±0.190.72±0.09***0.85±0.17*0.89±0.22 | 31.29±8.6631.89±8.8546.50±10.96**41.52±10.36*33.26±6.1233.17±10.80 |
注:与模型对照组比较,*p<0.05;**p<0.01;***p<0.001。
组别 | BUN(mmol/L) | Crea(μmol/L) | 血清Ca2(mmol/L) | 肾组织Ca2+(μmol/g) | 尿Ca2+(μmol/24h) |
模型对照组正常对照组原剂型对照组大剂量组中剂量组小剂量组 | 6.8±2.42.9±1.2***4.8±1.94.8±1.95.1±1.26.1±2.6 | 119.2±28.686.4±11.8**116.7±27.5109.8±34.2102.9±20.6109.2±30.9 | 2.53±0.242.53±0.262.50±0.351.90±0.33***2.00±0.41**2.30±0.31 | 8.46±2.135.84±0.96**6.72±1.27*5.87±1.09**7.56±1.508.59±2.49 | 41.85±16.0416.99±6.70***39.38±14.2637.91±15.5623.06±11.12**37.19±15.29 |
注:与模型对照组比较,*p<0.05;**p<0.01;***p<0.001。
组别 | 剂量(g/kg) | 肾结石积分值 | 肾小管直径(μm) | 肾小管内坏死积分值 |
模型对照组正常对照组原剂型对照组大剂量组中剂量组小剂量组 | //56562814 | 3.9±1.11.0±0.0***2.3±1.1**1.6±0.7***1.8±0.8***2.6±1.3* | 91.77±30.7028.27±5.39***56.45±18.21**36.94±9.02***60.63±27.59*100.44±64.53 | 1.4±0.51.0±0.0*1.0±0.0*1.0±0.0*1.1±0.31.2±0.4 |
注:与模型对照组比较,*p<0.05;**p<0.01;***p<0.001。
由上可知,相同剂量的本发明的排石胶囊治疗用药的作用优于原剂型对照组。
具体实施方式
实施例1
药材按1000粒胶囊计:
连钱草5093g 车前子(盐水炒)764g 木通764g
徐长卿764g 石韦764g 忍冬藤1274g
滑石1274g 瞿麦764g 苘麻子764g
甘草1274g
制备方法:
连钱草加10倍量60%乙醇,回流提取3次,每次1小时,合并乙醇液,滤液减压回收乙醇,浓缩至每毫升含0.5g生药的浓缩液。将连钱草提取液加到已经前处理过的D101大孔树脂(每10克大孔树脂上样量为8克药材),过柱流出液重复吸附2次,静置2小时,先用水洗脱,洗脱至水液近无色,再用10倍树脂体积量的95%的乙醇洗脱,洗脱至流出液无色为止,收集95%的洗脱液,减压回收乙醇,浓缩至相对密度1.10,得浸膏。
徐长卿加14倍量水,水蒸气蒸馏8倍量蒸馏液,蒸馏液冷藏24小时,过滤,得丹皮酚结晶,药渣备用。
取丹皮酚10倍重量的β-环糊精加入15倍量的水使溶解,丹皮酚溶解于10倍量95%乙醇中再加入到β-环糊精的水溶液中,于50℃时,搅拌2小时,冷藏24小时,抽滤,滤渣于50℃烘干,得白色干燥粉末。
木通、忍冬藤、石韦、瞿麦、苘麻子、车前子、滑石、甘草及徐长卿药渣加8倍量的水,煎煮3次,每次1小时。合并煎煮液,滤过,滤液浓缩至相对密度1.15。加入乙醇,使含醇量达70%,静置24小时,过滤,滤液减压回收乙醇,进一步浓缩至相对密度1.10,得浸膏。
将各浸膏合并,混匀,喷雾干燥,得干燥药粉。
将喷雾干燥药粉、丹皮酚β-环糊精包合物,混匀,加入药粉量30%淀粉,再加入0.5%硬酯酸镁搅匀,干法制粒,装入胶囊,制成1000粒,即得。
Claims (10)
1.一种排石胶囊的制备方法,其特征是包括下列步骤:
a、连钱草用乙醇提取、浓缩,过D101大孔树脂,乙醇洗脱,浓缩得浸膏;
b、徐长卿用水蒸气蒸馏,蒸馏液冷却,得丹皮酚结晶,药渣备用;丹皮酚溶于乙醇中,再加入到β-环糊精的水溶液中,搅拌,冷藏,抽滤,烘干,得白色干燥粉末;
c、木通、忍冬藤、石韦、瞿麦、苘麻子、车前子、滑石、甘草及徐长卿药渣加水煎煮,滤过,滤液浓缩,得浸膏;
d、将a、c两部分浸膏合并,干燥得药粉,再与b步骤的干燥粉末混匀,加入药用辅料制成胶囊。
2.权利要求1的制备方法,其中各药材的重量份数比为:
连钱草40-60 车前子5-10 木通5-10
徐长卿5-10 石韦5-10 忍冬藤10-18
滑石10-18 瞿麦5-10 苘麻子5-10
甘草10-18。
3.权利要求1的制备方法,其中c步骤在滤液浓缩后进一步包括:将浓缩的滤液加入乙醇,静置,过滤,滤液减压回收乙醇,进一步浓缩,得浸膏。
4.权利要求3的制备方法,其中乙醇的浓度是50~80%,为重量百分比。
5.权利要求1的制备方法,其中提取用的乙醇浓度是40~80%,为重量百分比。
6.权利要求1的制备方法,其中洗脱用的乙醇浓度是95%,为重量百分比。
7.权利要求1的制备方法,其中β-环糊精的量是丹皮酚重量的5~15倍。
8.权利要求1的制备方法,其中药用辅料选自填充剂、崩解剂、稀释剂、粘合剂、润滑剂中的一种或几种。
9.权利要求1的制备方法,其中药用辅料是淀粉和硬脂酸镁。
10.权利要求9的制备方法,以干燥药粉重量计,淀粉和硬脂酸镁的重量分别占30%、0.5%。
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