CN101184473B

CN101184473B - 包含类脂和苯乙烯与马来酸的共聚物的组合物

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Publication number: CN101184473B
Application number: CN2006800189572A
Authority: CN
Inventors: S·汤奇
Original assignee: Malvern Cosmeceutics Ltd
Current assignee: Malvern Cosmeceutics Ltd
Priority date: 2005-05-31
Filing date: 2006-05-31
Publication date: 2012-03-21
Anticipated expiration: 2026-05-31
Also published as: WO2006129127A1; JP5142989B2; CA2611144A1; CN101184473A; GB2426703A; GB0510968D0; AU2006253886B2; EP1890675A1; US20090155375A1; GB2426703B; JP2008542351A; CA2611144C; AU2006253886A1; EP1890675B1; US8623414B2

Abstract

本发明涉及一种包含类脂和苯乙烯与马来酸的共聚物的组合物，其中所述苯乙烯与马来酸的共聚物为非交替的，并且其中所述聚合物和类脂为大分子组装体的形式。

Description

包含类脂和苯乙烯与马来酸的共聚物的组合物

本发明涉及在使疏水性物质增溶，尤其是使在化妆品或药物领域中使用的疏水性活性剂增溶，以及使肽和蛋白质增溶以研究其结构和他们与其他物质的相互作用中使用的组合物。

将油溶性活性材料送入身体中或局部上的位置中，弱水溶性显示出基础性问题。已采取大量配制助剂以克服此局限，旨在产生在功能和/或美感上更可接受的含水配制剂。其中，途径包括使用表面活性剂体系、脂质体、乙氧基脂肪醇类构成的脂质体(niosome)和环糊精。然而，所有这些体系具有特殊缺点。例如：脂质体和环糊精可具有低载荷能力；脂质配制剂可在静脉内给药后迅速从体循环中移除；脂质体和乙氧基脂肪醇类构成的脂质体可遭受透明度的缺乏；一些表面活性剂的使用可导致刺激性组合物的形成。

油溶性活性材料常常作为油包水或水包油乳液部分，通常以乳膏或洗剂的形式用于皮肤。这些通常接触为油质的，并且可能是美感上令人不愉悦的，导致低消费者吸引力。此外，他们可能为物理上不稳定的，意欲分离出或静置时“成膏”，限制了贮存期并且潜在引起组合物中的不均匀性，其可导致活性剂应用中的不可预见性。

疏水缔合聚合物(由于它们的两亲性质，也称为两亲聚合物(amphipols)或超卷曲聚合物)可与磷脂缔合以形成扁平的盘状分子组装体。例如乙基丙烯酸的均聚物(即聚[2-乙基丙烯酸]，也称为PEAA)已显示与纯DLPC、DMPC、DPPC、DSPC(分别为二月桂基、二肉豆蔻基、二棕榈基和二硬脂基磷脂酰胆碱)和DPPG(二棕榈基磷脂酰甘油)，以及DPPC/DPPA(二棕榈基磷脂酸)的混合物相互作用，导致光学透明水溶液的形成(Seki，K andTirrell，D Macromolecules 1983 17：1692-1698；Tirrell，D，Takigawa，Dand Seki，K Ann.New York Acad.Sci.1985 446：237-248；Thomas，JL，Devlin BP and Tirrell，DA Biochinmica et Biophysica Acta 1996 1278：73-78)。这个效果是由于在低pH下聚电解质典型伸直链经过作为无规线团的中间态向紧密超卷曲状态构象转变的结果。

其他疏水缔合聚合物也已知与磷脂相互作用以形成大分子组装体(macromolecular assemblies)，例如含亲水和疏水单体组分的共聚物。国际专利申请WO 99/009955(相当于已授权专利EP 1007002和US 6426905)公开了马来酸酐(以它的水解马来酸形式为阴离子、亲水性的)与苯乙烯或烷基乙烯基醚(疏水性的)的水解的交替共聚物的用途。直径为10-40nm范围的结构使用马来酸酐与苯乙烯的水解的交替聚合物，连同纯DLPC或DPPC而制备(其他信息见综述文章-Tonge，SR and Tighe，BJ AdvancedDrug Delivery Reviews 2001 53：109-122)。

苯乙烯与马来酸酐的交替共聚物

这种聚合物/类脂大分子络合物作为使具有弱水溶性的活性剂增溶的手段而被建议。然而，这些体系都具有大量缺点。PEAA不是市售的，并且它用于化妆品和药物中的适用性还未确定。此外，这些合成聚合物仅在接近或低于它们各自的pK_a值的PH下，在PEAA的情况下该值为6.5，与磷脂相互作用以形成大分子组装体(Fichtner，F and Schonert，H Colloid&Ploymer Sci.1 977 255：230-232；Thomas，JL，Devlin BP and Tirrell DABiochimica et Biophysica Acta 1996 1278：73-78)。

苯乙烯与马来酸的交替共聚物(即水解的苯乙烯/马来酸酐聚合物)的pK_a在3.75-4.0范围内(Sugai，S and Ohno，N Biophys.Chem.198011：387-395)，对于各个酸官能的pK_a为约1.97和6.24。清澈溶液和因此大分子组装体的制备要求将pH降低至3-5之间。这种pH水平通常不适合于将施用于身体敏感表面的组合物。尽管这些交替共聚物配制剂的pH可以在聚合物/类脂络合物形成后升高，这种调整导致不稳定性，其可观察到随大分子组装体降解透明度随时间而损失。

尽管苯乙烯/马来酸酐或相应的马来酸水解产物和半酯已广泛用于工业和家庭应用，包括用作涂料，以及用于乳化作用和分散剂目的，这些聚合物在个人护理和生物医学产品中应用有限。

已描述为了去皮肤色斑、抗衰老、保护不受UV辐射、晒斑和防止皮肤坚固性和/或弹性损失(如US 20040001792、US 20040042990、US20040052739和US 20040047824所述)或为了促进表皮神经酰胺的合成以及改善皮肤的屏障作用以对皮肤保湿并改善肤色(US 20040175342)，以及为了掺入磷酸化的抗坏血酸的金属盐以用于去皮肤色斑和作为防皱和抗衰老剂(US 20040096406)，苯乙烯与马来酸酐的共聚物作为稳定抗坏血酸和它的亲水衍生物的手段而用于化妆品。每种情况下，优选使用1∶1的马来酸酐与苯乙烯的共聚物。聚合物作为形成适用于化妆品或皮肤病用途的含含水芯的微胶囊的不溶于水蜡涂层的组分的用途公开于US 6,531,160。

聚[苯乙烯-共-马来酸/酐]半丁基酯作为与抗癌剂新制癌菌素结合的药物制剂描述于US 4,732,933，其中聚合物用来提高分子量和亲油性，这样导致某些靶组织中药物的积聚。这种药物结合物称为SMANCS(Maeda，HAdvanced Drug Delivery Reviews 2001 46：169-185)。JP 01061424A公开了SMANCS，苯乙烯/马来酸单丁基酯共聚物键合到药物新制癌菌素分子上的结合物的药物配制剂，其通过将SMANCS在碳酸铵缓冲剂(pH为7.5-9.5)中的溶液与磷脂如蛋黄也在碳酸铵(pH为7.5-9.5)缓冲剂中的溶液混合以形成混合物，冻干以除去水后其分散在非水的油质造影剂中，然后以便提供其中SMANCS结合物的清澈透明分散体。

明显需要制备能使油溶性活性剂以高浓度掺入含水介质中的稳定、不刺激的配制助剂，而同时形成足够小而不破坏光在产生的溶液中的穿过，即保持基本清澈的大分子络合物。

已令人惊讶地发现，与本领域技术人员的期望相反，并且与WO99/009955的教导相反，苯乙烯/马来酸酐的水解嵌段共聚物(即苯乙烯/马来酸的嵌段共聚物)可以用于聚合物/类脂络合物的制备中，这种聚合物/类脂络合物例如用于油溶性活性剂的增溶。与现有技术的途径相比，包含苯乙烯/马来酸酐水解嵌段共聚物的组合物具有一种或多种如下优点：

(i)更稳定，

(ii)产生更少刺激，

(iii)允许更高的活性剂负载，

(iv)能使油溶性活性剂配制成基本清澈的水溶液，

(v)易于增强皮肤的渗透，

(vi)能使膜蛋白质和/或肽在接近模拟天然膜的环境中增溶。

在本发明的第一方面中，提供一种包含类脂和苯乙烯与马来酸的共聚物的组合物，其中苯乙烯与马来酸的共聚物为非交替的，其中聚合物和类脂为大分子组装体的形式。这里，这种组合物可称作本发明组合物。

根据本发明，还提供一种包含类脂和苯乙烯与马来酸的共聚物的组合物，其中苯乙烯与马来酸单体单元之比大于1∶1，其中聚合物和类脂呈大分子组装体的形成。这种组合物为本发明组合物的实例。

对于聚合物规定的单体比基于聚合物中各个单体单元数而定义，例如苯乙烯与马来酸酐之比为3∶1指聚合物链中对于每个马来酸酐单体单元存在三个苯乙烯单体单元。应当理解规定的单体比为平均的，由于聚合反应中的不确定性，对于任何具体聚合物链不需要代表确切比。通常大于50％，特别是大于75％，尤其是大于90％(基于重量比重量基准)，适合的是所有聚合物链的单体比将为规定值的50％以内，例如35％以内，适合的是25％(例如15％以内)，更特别是10％以内，尤其是5％以内。例如具有10％变化的3∶1苯乙烯与马来酸酐之比涵盖3.3∶1-2.7∶1。

大分子组装体(不通过共价键合而保持的大分子结构内各个分子的缔合)，也称作大分子络合物的存在可通过本领域技术人员可得到的测量粒度的大量方法，例如电子显微镜(例如Tonge，SR and Tighe，BJ AdvancedDrug Delivery Reviews 2001 53：109-122中用于掺入苯乙烯/马来酸交替共聚物的大分子组装体)或激光衍射技术而确认。然而，在实践中，大分子组装体的形成将常常为肉眼可见的。例如，当聚合物和类脂的浑浊乳液在相对高的pH下制备(以使聚合物为高度带电荷并且最可能以伸直链形式)，然后pH随后降低至聚合物链中亲水性/疏水性平衡适合于大分子组装体形成的水平(该pH水平可称作临界pH)时，可看到类脂的显著增溶，其取决于存在的各个组分的数量和确切性质，产生混合物的明显的部分或完全清澈。

临界pH指可形成大分子组装体以下的pH水平。取决于它们的具体单体比，苯乙烯/马来酸共聚物具有不同的临界pH值，苯乙烯含量越大，临界pH越高。尽管大分子组装体通常在这种条件下不稳定并且将随时间而降解(临界pH上的大幅度增加导致更快的降解)，一旦形成，则含大分子组装体的溶液的pH可升高至临界pH以上。因为聚合物链的疏水性可达到聚合物不再溶于水的水平，基本上临界pH以下的pH水平也可导致大分子组装体降解。

关于共聚物，这里还使用的术语“嵌段”指聚合物中的单体单元以非交替的方式分布的事实。根据定义，由于存在含多于一个的单独单体单元的嵌段，含除1∶1以外的单体比的共聚物不可以为交替的。取决于存在的单体和生产方法，单体比为1∶1的共聚物性质上可以为交替的或可以为嵌段的。

本发明中使用的水解的苯乙烯/马来酸酐共聚物将为非交替的，即苯乙烯和马来酸残余物不以交替关系排列。

溶液的透明度可通过本领域技术人员已知的方法，例如通过使用浊度仪如Orbeco-Helling提供的那些而测定。其他浊度测量设备的供应者包括Hach-Lange。浊度可以基于大量标准单位，例如散射浊度单位(NTU)。散射浊度单位(NTU)可直接与福尔马肼浊度单位(FTU)互换。当这里使用时，术语“清澈”意指浊度读数为小于150NTU，尤其是小于100NTU，特别是小于50NTU，适合的是小于25NTU(例如小于5NTU)的溶液。无色溶液为透光光而无任何特殊可见波长的吸收的那些。清澈溶液可以为有色的，其中它们含吸收可见范围内的光的组分(例如某种活性剂，或着色剂)。

当这里关于溶液透明度所使用时，术语“稳定”，以及其中适合的“稳定性”指溶液保持在恒定透明度下的能力。通常当在恒温(例如在4℃下，适合的是在25℃下)下储存时，溶液的透明度经过一段时间(例如至少一天，尤其是至少一星期，特别是至少一个月，适合的是至少六个月)将基本保持不变(例如改变小于100NTU，尤其是小于50NTU，特别是小于25NTU，适合的是小于5NTU)。

“稳定”的可选择定义(以及其中适合的是“稳定性”)为尽管显示经过给定时间期间的一些程度的改变，但溶液的透明度保持在所需浊度范围内。在这种情况下，通常当在恒温(例如在4℃下，适合的是在25℃下)下储存时，经过一段时间(例如至少一天，尤其是至少一星期，特别是至少一个月，适合的是至少六个月)，溶液的浊度读数保持小于150NTU，尤其是小于100NTU，特别是小于50NTU，适合的是小于25TNU(例如小于5NTU)。

在本发明的一个实施方案中，稳定溶液为经过一段时间(如上所述)基本保持不变的那种。在本发明的第二个实施方案中，稳定溶液为保持在所需浊度范围内一段时间(如上所述)的那种。在本发明的第三个实施方案中，稳定溶液为经过一段时间(如上所述)基本保持不变和在所需浊度范围内的那种。

如先前所讨论的，WO 99/009955教导了为了与成膜类脂相互作用以形成直径为10-40nm等级的大分子结构(因此光波长更小，在水溶液显示基本清澈且无色)，聚合物必须为具有线性骨架且疏水性基团和阴离子亲水性基团沿着线性骨架均匀排列的交替共聚物(即非嵌段共聚物)的形式。

本领域技术人员将预期对于形成两亲性卷曲结构，需要精确定义的均聚物或交替共聚物的分子构造，并且相信对于与类脂相互作用需要此结构(Borden，KA，Voycheck，CL，Tan，IS and Tirrell DA Polym.Prep.(Am.Chem.Soc.Div.Poly.Chem.)1987 28(1)：284-285)。将不会期望用苯乙烯/马来酸嵌段共聚物替换均聚物或苯乙烯/马来酸交替共聚物显示类似的与成膜类脂的相互作用。现在已令人惊讶地发现事实上不需要使用具有疏水性和亲水性单体单元的严格交替的均聚物或共聚物，但以水解形式的苯乙烯与马来酸酐(即作为苯乙烯/马来酸)的嵌段共聚物也可与类脂相互作用以形成聚合物/类脂大分子络合物，由此形成基本清澈且无色的水溶液。

没有理论限制，相信尽管嵌段聚合物中酸官能的pK_a可以细微不同于交替聚合物中的，但是发生类脂相互作用的pH主要取决于聚合物链中达到特别的亲水性/疏水性平衡。由于它们相对高的酸含量，苯乙烯与马来酸的交替聚合物得到恰当的亲水性/疏水性平衡之前需要显著含量的的待被中和的酸官能，在3-5的pH下仅引发与类脂相互作用，其中一旦pH基本升高至该水平以上(例如pH 5.5以上)，则相互作用变得不稳定。由于更高含量的苯乙烯单体单体和更少的马来酸单体单元的存在，苯乙烯与马来酸残余物之比大于1∶1的苯乙烯与马来酸的嵌段共聚物更疏水。因而，为了得到恰当的亲水性/疏水性平衡，必须中和更小含量的酸官能(即平衡可在更高的pH下得到)。鉴于此发现，可调整苯乙烯与马来酸酐单体单元之比使得聚合物在特点pH范围下与类脂相互作用，由此能选择理想地适合于所选择的应用的苯乙烯/马来酸共聚物。

苯乙烯与马来酸酐的自由基引发的共聚是极好的特征聚合反应(Trivedi，BC and Culbertson，BM Maleic Anhydride，Plenum(1982)，ISBN0306409291)。任何单体对的竞聚率r₁和r₂可用作评价共聚反应中的交替频率的指数。当r₁、r₂和r₁r₂等于1时，存在理想(即无规)共聚条件。其中r₁、r₂和r₁r₂趋于0，则交替度增加。苯乙烯(单体1)和马来酸酐(单体2)的竞聚率分别为0.097和0.001(Fried，J Polymer Science andTechnology，第2版，Prentice Hall(2003)，ISBN 0130181684)，表明尽管两种单体优选相互反应，苯乙烯比马来酸酐明显更少有差别。因此，苯乙烯与马来酸酐共聚物中的顺序分布取决于单体进料组成且产生的共聚物可不同于1∶1交替。在苯乙烯与马来酸酐之比大于1∶1(例如2∶1、3∶1或4∶1)的情况下，存在增加数的苯乙烯-苯乙烯顺序。

苯乙烯/马来酸酐共聚物便利地通常在芳族烃溶剂如甲苯或二氯苯中通过沉淀方法制备。聚合可使用自由基引发剂如AIBN(偶氮异丁腈)引发，分子量可通过使用封端剂，例如高度烷基化的芳族烃如对甲基异丙基苯而控制。聚合物中单体的比可通过进料组成的改变而控制，并且可通过本领域技术人员已知的方法如通过滴定法以测定水解聚合物的马来酸含量而测定。

本发明使用的苯乙烯/马来酸共聚物的平均分子量(M_w)将通常为小于500,000道尔顿，尤其是小于150,000道尔顿，特别是小于50,000道尔顿，适合的是小于20,000道尔顿(例如1,500-15,000道尔顿)。M_w/M_n(M_n为数均分子量)表示多分散性，将通常为小于5，特别是小于4，尤其是小于3，适合的是小于2(例如小于1.5)。聚合物应足够长使得它们可显示超卷曲能力，但适合的是不会长到由于链间相互作用带来粘度的困难的长度。

大量嵌段苯乙烯/马来酸酐共聚物由Sartomer Inc.市售，并在商品名SMA2000、SMA3000和SMA4000下出售。在SMA2000、SMA3000和SMA4000的情况下，苯乙烯与马来酸酐之比分别为2∶1、3∶1和4∶1。在这些实例中，随苯乙烯含量增加，苯乙烯形成短嵌段数增加。SMA2000、SMA3000和SMA4000可作为粉末、薄片或超细粉制剂而得到。当通过凝胶渗透色谱法(GPC)分析时，对于SMA2000，通常分子量为M_w7,500(M_n2,700)；对于SMA3000为M_w9,500(M_n3,050)，对于SMA4000为M_w11,000(M_n3,600)。

苯乙烯/马来酸酐共聚物必须水解以用于本发明，这种水解聚合物可任选以盐的形式使用。聚合物可通过大量方法，例如通过在水溶液中回流，适合的是在强碱如氢氧化钠的存在下水解。部分水解的苯乙烯/马来酸酐共聚物也可用于本发明，然而，在水溶液中这些可能进一步水解，由于稳定性的原因，通常使用完全水解的聚合物。

苯乙烯/马来酸酐水解共聚物的某些盐为市售的，例如SMA3000HNa为水解的SMA3000的钠盐，SMA3000HK为水解的SMA3000的钾盐，SMA4000HNa为水解的SMA4000的钠盐。其他盐形式也为市售的，例如铵盐。尽管铵盐适用于本发明，但由于它们关联的气味在化妆品和药物应用中通常不理想。

大量苯乙烯/马来酸酐共聚物半酯为市售的。这些酯可以水解以用于本发明。这种半酯包括作为SMA1440、SMA17352、SMA2625、SMA3840和SMA3190已知的Sartomer Inc.产品。

用于工业用途的商品级苯乙烯/马来酸酐共聚物可含单体、封端剂残余物和引发剂残余物(例如马来酸酐、苯乙烯、异丙基苯和苯乙酮)，其残余物通常在用于个人护理、化妆品、药物或生物医学产品的组合物中为不想要的。可通过本领域技术人员已知的方法除去或在数量上降低残余杂质，这种技术包括但不限于将残余组分选择性溶于醇(例如甲醇、乙醇或异丙醇) 或氯化溶剂(例如氯仿或二氯甲烷)中。

本发明中使用的水解的苯乙烯/马来酸酐共聚物，即苯乙烯/马来酸，及其盐(例如化妆品和药物可接受盐，例如碱金属盐，如钾或钠)的苯乙烯与马来酸之单体比将通常为大于1∶1，特别是大于1.2∶1，尤其是大于1.5∶1，适合的是大于2.5∶1；然而另外苯乙烯与马来酸之比通常为小于4.5∶1，尤其是小于3.5∶1。用于本发明的示例性单体比包括：2∶1、3∶1和4∶1，适合的是2∶1或3∶1。在本发明的一个实施方案中，苯乙烯与马来酸单体单元之比为2∶1。在本发明的第二个实施方案中，苯乙烯与马来酸单体单元之比为3∶1。

在本发明的一个实施方案中，苯乙烯与马来酸的共聚物(或其盐)的平均分子量为4,500-12,000，苯乙烯与马来酸之比为约2∶1、3∶1或4∶1，尤其是约2∶1或约3∶1。

尽管重复应用于皮肤的配制剂可以为轻微酸性的，但通常为pH5.0-7.5范围内，尤其是pH 5.5-7.5，用于其他部位或内部给药的配制剂应通常保持在pH 6.5-7.5左右。特别用于眼睛的配制剂理想地为pH 7.1-7.8范围内，更特别为pH 7.3-7.6(Carney，LG和Hill，RM Arch.Ophthalmol.197694(5)：821-824)。苯乙烯与马来酸单体比大于1∶1且小于4.5∶1的苯乙烯/马来酸共聚物可与类脂相互作用以形成适合于生理用途的pH水平(例如在上述范围内)下稳定的大分子络合物。应注意的是本发明的具体实施方案可不需要整数遍及规定的整个pH范围稳定的聚合物和类脂大分子组装体。

在本发明的一个实施方案中，聚合物和类脂大分子组装体在5.0-7.5，尤其是5.5-7.5的pH下在水溶液中稳定(例如适用于通常用于皮肤的典型配制剂)。

在本发明的一个实施方案中，聚合物和类脂大分子组装体在6.5-7.5的pH下在水溶液中稳定(例如适用于通常用于身体的典型配制剂)。

在本发明的一个实施方案中，聚合物和类脂大分子组装体在7.1-7.8，尤其是7.3-7.6的pH下在水溶液中稳定(例如适用于通常用于眼睛的典型配制剂)。

本发明中使用的类脂将通常为成膜类脂。成膜类脂包含各种范围的结构，其中包括磷脂(磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰甘油、磷脂酰肌醇和磷脂酰丝氨酸)、神经酰胺和神经鞘磷脂。成膜类脂通常具有极性头基(其在膜中对准水相)和一个或多个(例如两个)疏水性尾基(其在膜中缔合以形成疏水性芯)。疏水性尾基将通常为酰基酯的形式，其可以在它们的长度(例如8-26个碳原子)和它们的不饱和度(例如1、2或3个双键)中变化。

本发明使用的类脂可以为天然或合成来源的，且可以为单一纯组分(例如基于重量基准90％纯，尤其是95％纯，适合的是99％醇)，单一类别的类脂组分(例如磷脂酰胆碱的混合物，或作为选择具有保存的酰基链类型的类脂的混合物)或可以为多种不同类脂类型的混合物。

在本发明的一个实施方案中，类脂为单一纯组分。

纯类脂通常为合成或半合成来源。本发明使用的纯类脂的实例包括磷脂酰胆碱(例如DLPC、DMPC、DPPC和DSPC；特别是DLPC、DMPC和DPPC；例如DLPC和DPPC；尤其是DLPC)和磷脂酰甘油(例如DPPG)，适合的是磷脂酰胆碱。由于它们的定义组成，使用纯类脂是理想的，然而，它们通常非常昂贵。

在本发明的一个实施方案中，类脂为组分的混合物。

本发明中使用的类脂混合物可以为天然来源，通过借助本领域技术人员已知的方法提取和提纯而得到。天然来源的类脂混合物通常比纯的合成类脂明显更便宜。天然衍生的类脂包括蛋或大豆的类脂提取物，其中提取物将通常含具有酰基链长、不饱和度和头基类型的混合物的类脂。本发明中使用的示例性类脂提取物包括：由Degussa Texturant Systems UK Ltd得到的Epikuron 200；由Lucas Meyer Cosmetics SA得到的Emulmetik950、Emulmetik 930、Pro-Lipo H和Pro-Lipo Duo；由Lipoid GmbH得到的Liposome 0041、S 75、S 100、S PC、SL 80和SL 80-3；由PhospholipidGmbH得到的Phospholipon

90 H、Phospholipon

80 H、Phospholipon

90NG、Nat 8539。通常期望植物来源的类脂提取物显示比动物来源的那些更高的不饱和度。应注意的是，由于来源的不同，类脂提取物的组成可一批批地变化。由于不存在不饱和，氢化类脂较不易于过氧化，通常具有更少的颜色且具有更低气味。

在本发明的一个实施方案中，类脂为含至少50重量％，尤其是至少75重量％，适合的是至少90重量％的单一头基类型的磷脂的类脂提取物(例如磷脂酰胆碱)。在本发明的第二个实施方案中，由于它们的相对便宜的成本，可优选特殊类脂提取物。在本发明的第三个实施方案中，优选的类脂提取物为产生最高透明度的溶液的那些。在本发明的第四个实施方案中，类脂为具有保存的酰基链长(例如至少50重量％，尤其是至少75重量％，适合的是至少90重量％)，例如链长中具有12(如月桂酰)、14(如肉豆蔻酰)、16(如棕榈酰)或18(如硬脂酰)个碳原子，尤其是12-16(如14或16)个碳原子的类脂混合物。在本发明的另一个实施方案中，类脂为氢化的(即酰基链完全饱和)类脂混合物。

适合的是，本发明中使用的类脂提取物将包含至少50重量％磷脂(例如磷脂酰胆碱和磷脂酰乙醇胺)，尤其是至少55重量％磷脂，特别是至少60重量％(例如75％或90％)磷脂。

一种适合的类脂提取物衍生于大豆且包含：至少92％磷脂酰胆碱，最大3％溶血磷脂酰胆碱和最大2％油；其中14-20％酰基链为棕榈酰，3-5％为硬脂酰，8-12％为油酰，62-66％为亚油酰，6-8％为亚麻酰。第二种适合的类脂提取物衍生于大豆且包含：至少90％氢化磷脂酰胆碱，最大4％氢化溶血磷脂酰胆碱和最大2％油以及甘油三酯；其中至少80％酰基链为硬脂酰，至少10％为棕榈酰。

类脂混合物也可通过纯类脂的组合，或通过一种类脂提取物与其他类脂提取物或与纯类脂的组合而制备。

利用具有相对低相转变温度的类脂(纯类脂或类脂混合物)可能是理想的，这是由于这可促进没有热存在下本发明组合物的制备。

对于化妆品和药物应用，类脂(例如纯类脂或类脂混合物)通常为已证明适合于用于化妆品和/或药物应用的那种。

本领域技术人员将承认本发明中使用的类脂混合物可包含非成膜类脂组分(例如胆固醇)，或在某些环境中可以仅为组合显示成膜能力和对本发明应用适合的非成膜类脂的混合物。

具体纯类脂或类脂混合物对本发明应用的适合性可通过本领域技术人员通过基于这里提供的指导的例行实验而确定。

通常，本发明组合物中聚合物与类脂之比将基于重量基准为大于1∶2，尤其是大于1∶1(例如约1.5∶1或2.5∶1)。适合的是，本发明组合物中聚合物与类脂之比将大于1.25∶1。不足量的聚合物可导致具有次最佳的透明度的溶液。过量的聚合物可导致提高的溶液粘度(取决于具体应用其可能是或可能不是所需特征)。适合的是，本发明组合物中聚合物与类脂之比将小于100∶1，例如小于25∶1，特别是小于10∶1(例如小于5∶1)。

少量助表面活性剂材料的存在可增强苯乙烯/马来酸共聚物溶解类脂(特别是类脂混合物)的能力。此助表面活性剂可以呈低分子材料的形式，例如，在商品名S LPC下由Lipoid GmbH得到的天然存在的溶血磷脂酰胆碱(溶血PC)，或聚合表面活性剂材料，例如称作泊洛沙姆(poloxamer)且由BASF Corporation提供(例如在商品名Lutrol

F127下已知的具体牌号)的合成聚氧乙烯/聚氧丙烯嵌段共聚物。助表面活性剂也可以为多于一种的表面活性剂的组合。适合的助表面活性剂以等于类脂重量的0.1-5％，尤其是0.5-2.5％，特别是0.75-1.5％(例如约1重量％)的量加入组合物中。在本发明的一个实施方案中，助表面活性剂为聚氧乙烯/聚氧丙烯的嵌段共聚物(例如如Lutrol

F127中所发现，分子量为5000-15000道尔顿，特别是10000-13000道尔顿，例如12600道尔顿左右)。在本发明的第二个实施方案中，助表面活性剂为溶血PC。应注意的是某种类脂提取物可以已经含溶血PC，然而，这不排除助表面活性剂的加入。

作为助表面活性剂的溶血PC可以以它的纯形式(例如来自LipoidGmbH的S LPC)或作为类脂混合物的一种组分(例如高溶血PC含量的卵磷脂，例如溶血PC含量为至少10重量％，尤其是至少15重量％的那些)而加入。示例性的高溶血PC含量的卵磷脂为来自Lipoid GmbH的SL80-3。

已含高溶血PC含量的类脂混合物(例如类脂提取物)通常不明显受益于其他溶血PC作为助表面活性剂加入。因而，对助表面活性剂的需要可通过选择已含足够量的溶血PC的类脂混合物而简单地避免。

本发明的组合物可以为水溶液，尤其是稳定清澈水溶液，适合的是稳定清澈且无色的水溶液的形式。然而，为了易于运输和处理，一旦制备，则可将组合物冻干以形成具有体积和重量均更低的优点的干燥粉末。在本发明的一个实施方案中，组合物为水溶液形式。在本发明的其他实施方案中，组合物为冻干形式(例如作为粉末、树脂或薄片，尤其是作为粉末或薄片，特别是作为粉末)。水溶液包括含水的半固体如凝胶。

本发明组合物的水溶液可以以相对高的浓度制备，例如30重量％浓度，已由含活性剂TECA的再形成的冻干组合物制备。高浓度可表示增加的粘度。在本发明的一个实施方案中，提供一种包含0.001-10重量％本发明组合物的水溶液(百分数通过本发明组合物的干重相对于组合物和水的总重量而确定)。在本发明的第二个实施方案中，提供一种包含10-20重量％本发明组合物的水溶液。在本发明的第三个实施方案中，提供一种包含大于20重量％本发明组合物的水溶液。

本发明组合物可适合地通过将苯乙烯/马来酸共聚物的溶液与含类脂的水乳液混合，其中苯乙烯与马来酸的共聚物为非交替的，以及如果需要的话调整产生的混合物的pH使得形成聚合物/类脂大分子组装体而制备。

本发明的其他组合物可适合地通过将苯乙烯与马来酸单体之比为大于1∶1的苯乙烯/马来酸共聚物与含类脂的水乳液混合，以及如果需要的话调整产生的混合物的pH使得形成聚合物/类脂大分子组装体而制备。

聚合物溶液可通过任选搅拌和加热(例如至约50℃)使聚合物溶于水中而制备。类脂乳液可通过干燥类脂在搅拌和加热(适合地至类脂组分的相转变温度以上的温度，例如约50℃)下与水混合，其后均化而制备。适合的是，聚合物溶液和类脂乳液通过将类脂乳液加入聚合物溶液中(例如缓慢加入)，同时任选加热(例如至50℃左右)而混合。

溶液的pH可适当地使用酸或碱调整。用于化妆品或药物领域的组合物将通常使用生理上可接受的酸和/或碱。生理上可接受的酸包括盐酸。生理上可接受的碱包括氢氧化钠或氢氧化钾，适合的是氢氧化钠。

当存在时，助表面活性剂将通常在水乳液形成之前与类脂混合。

在本发明的另一方面中，提供一种制备包含类脂和苯乙烯与马来酸的共聚物的组合物的方法，其中苯乙烯与马来酸的共聚物为非交替的，其中聚合物和类脂为大分子组装体的形式，该方法包括如下步骤：

(i)制备苯乙烯与马来酸的共聚物的水溶液，其中苯乙烯与马来酸的共聚物为非交替的；

(ii)制备类脂水乳液；

(iii)将类脂水乳液与共聚物水溶液混合；

(iv)如果需要的话，调整混合物的pH使得形成聚合物/类脂大分子组装体。

如果需要的话，可进行除去水的其他任选步骤。

在本发明的另一方面中，提供一种制备包含类脂和苯乙烯与马来酸的共聚物的组合物的方法，其中苯乙烯与马来酸单体单元之比大于1∶1，其中聚合物和类脂为大分子组装体形式，该方法包括如下步骤：

(i)制备苯乙烯与马来酸的共聚物的水溶液，其中苯乙烯与马来酸单体单元之比大于1∶1；

(ii)制备类脂水乳液；

(iii)将类脂水乳液与共聚物水溶液混合；

如果需要的话，可进行除去水的其他任选步骤。

水溶液形式的本发明组合物可冻干以产生冻干粉末形式的本发明组合物。冻干组合物可易于通过在搅拌和加热下加入水而再形成水溶液。本发明组合物冻干的耐久性可以通过加入保护剂，例如糖如海藻糖(由CMSChemicals Ltd(UK)得到的α，α-D-海藻糖二水合物)而改善。

水可通过其他方法，例如在降低的压力和升高的温度(例如65-75℃)下旋转蒸发而除去。

本发明组合物的一个用途是作为增溶剂。

增溶剂可以用作配制助剂、具有弱水溶性(例如水溶性小于1％w/w，适合的是小于0.1％w/w或小于0.01％w/w)的增溶活性剂。增溶剂也可用作优选分配到增溶剂的活性剂(例如与水相反分配到辛醇的活性剂)的载体。活性剂可例如为治疗或防止医学紊乱的药物，或作为选择可以为化妆剂或用于化妆目的的剂。

具有弱水溶性的活性剂包括油溶性维生素(包括维生素A、D、E和K)和水溶性维生素(包括维生素C)的油溶性衍生物，其通常作为油包水或水包油乳液的一部分作为抗氧化剂、去色斑剂、保湿剂、胶原刺激剂、抗衰老剂、防皱剂和消炎剂而用于皮肤。

维生素A族包括视黄醇、棕榈酸视黄醇酯、乙酸视黄醇酯和相关视黄酸类(retinoids)，以及前维生素A，例如β-胡萝卜素。维生素C的油溶性衍生物包括抗坏血酸棕榈酸酯、抗坏血酸二棕榈酸酯和抗坏血酸四异棕榈酸酯(尤其是抗坏血酸棕榈酸酯和抗坏血酸二棕榈酸酯)。维生素D和它的衍生物包括胆钙化甾醇/骨化三醇(维生素D₃)、钙泊三醇和他卡西醇(尤其是胆钙化甾醇)，其可用于牛皮癣的治疗。维生素E系列包括K1(植物甲萘醌)可用于损伤皮肤的治疗和毛细血管损伤的修复。7-脱氢胆甾醇是维生素D的前体。

大量显示弱水溶性的活性剂基于三萜系化合物或甾核周围。许多这些剂具有有效的生物活性，广泛用于化妆品和药物。

基于三萜系化合物结构的油溶性活性物质包括天然提取物(例如来自积雪草(Centella asiatica)(Hydrocoty)，如TECA、积雪草苷、积雪草酸和羟基积雪草酸(尤其是TECA、作为选择积雪草苷)，其用于调节和激发胶原合成；或甘草提取物如光甘草定，其用作抗酪氨酸酶和抗微生物剂，和甘草查尔酮(licochalcone)A，其用作5-α-还原酶的抑制剂和抗微生物剂)。另外的活性物质包括来自七叶树属(Aesculus)(马栗树(horse chestnut))的提取物。其他活性物质包括七叶素(三萜系化合物)和马栗树糖苷(七叶苷，香豆素)。其他糖苷活性物质包括假叶树属(Ruscus)(金雀花(Butcher’s broom))提取物，包括鲁斯可皂苷元(ruscogenin)和神经鲁斯可皂苷元(neuroruscogenin)。包括来自Sabinsa Corporation USA的BoswellinCG的乳香属(Boswellia)(乳香)的三萜系化合物提取物也是这类活性物质的实例。其他基于甾族结构的油溶性活性物质包括用来治疗炎症的那些(例如氢化可的松、丁氯倍他松、丁酸氢化可的松、丙酸氯倍他素、丙酸氟替卡松和地塞米松，尤其是氢化可的松、丁氯倍他松、丁酸氢化可的松、丙酸氯倍他素和地塞米松)和激素(例如睾酮、雌甾激素(oestrogen)和雌激素(oestrogens))。其他甾族化合物包括乙酸地塞米松酐、乙酸氢化可的松和乙酸可的松。类甾族化合物包括例如用于保湿的胆固醇和胆固醇硫酸钾。

其他活性剂包括大豆异黄酮；甘草提取物，例如来自SabinsaCorporation USA的Licorice GG，来自Maruzen Pharmaceuticals Co.Ltd.Japan的P-U和PT-40。

内源性皮肤类脂，包括神经酰胺(如神经酰胺IIIA)具有弱水溶性，并用作皮肤保湿剂和增白剂。其他神经酰胺包括神经酰胺IIIB和合成神经酰胺，例如来自Sederma，France的神经酰胺HO3。

其他相对油溶性活性物质包括散沫花素(2-羟基-1，4-萘醌)、散沫花(Lawsonia alba)的天然指甲花提取物、咖啡碱和长压定(minoxidil)。

抗微生物活性剂包括：抗菌剂，例如红霉素、新霉素(例如作为硫酸盐)；抗真菌剂，例如环吡司胺(ciclopirox olamine)、吡啶酮乙醇胺盐(piroctoneolamine)(各自为吡啶酮抗真菌剂的实例)、克霉唑(clotrimazole)、氟康唑(fluconazole)、益康唑(econazole)、酮康唑(ketaconazole)和制真菌素(nystatin)(尤其是吡啶酮乙醇胺盐(piroctone olamine)、克霉唑(clotrimazole)、酮康唑(ketaconazole)和制真菌素(nystatin))。

具有肽结构的活性剂的油溶性衍生物包括Matrixyl^TM(棕榈酰-KTTKS，其下调胶原酶并因此增加胶原产生)和Argireline

(乙酰基六肽-3，其抑制乙酰胆碱结合，减少神经肌肉信号的强度并因此减少肌肉收缩)。

其他油溶性活性植物提取物包括来自Sabinsa Corporation USA的迷迭香酸和绿茶提取物、荨麻提取物和银杏提取物。

来自Sabiusa Corporation USA的Cosmoperine

为油溶性渗透增强剂。

一种油溶性抗氧化剂为来自Whyte Chemicals UK的NDGA(去甲二氢愈创木酸)。

另一类活性剂包括遮光剂。示例性的遮光剂包括甲氧基肉桂酸辛酯、二苯甲酮3、3-亚苄基樟脑、avobenzene、对氨基苯甲酸(PABA)和高良姜(galanga)(乙基己基对甲氧基肉桂酸酯)。

其他类活性剂还有包括melaleucole oil和薄荷油的精油和包括由Arriva Fragrances，UK提供的Unisex Bouquet(AFL-3607/A)、Apricosal(AFL-3607/E)和Fouger(AFL-3607/D)的芳香剂。

其他类活性剂还有冷却剂和天然保湿剂如由Quest International，UK提供的Questice CQ U/A(Menthyl PCA)。

其他类活性剂为染料。

可组合并增溶于本发明组合物中的活性剂的量将通常为聚合物和类脂重量的0.001-50％，尤其是0.001-25％(例如5-20％)。

本发明的另一方面提供一种包含本发明组合物，并且另外包含活性剂的配制剂。在本发明的第一个实施方案中，活性剂为油溶性维生素或油溶性维生素衍生物(例如抗坏血酸棕榈酸酯、抗坏血酸二棕榈酸酯和抗坏血酸四异棕榈酸酯，尤其是抗坏血酸棕榈酸酯和抗坏血酸二棕榈酸酯)。在本发明的第二个实施方案中，活性剂具有三萜系化合物(例如TECA或积雪草酸)或甾核。在本发明的第三个实施方案中，活性剂为油溶性肽(例如棕榈酰基-KTTKS或乙酰基六肽-3)。在本发明的第四个实施方案中，活性剂为遮光剂。

活性剂可在制备类脂水乳液之前，且在将乳液和聚合物溶液混合之前便利地通过将活性剂加入类脂中(以及其中适当地加入类脂和助表面活性剂中)而掺入本发明组合物中。

提供一种包含本发明组合物，以及进一步包含活性剂的含水配制剂。

以类似于本发明组合物的方式，本发明含水配制剂(其包含活性剂)可通常冻干并根据需要再形成。因而，还提供包含本发明组合物，以及进一步包含活性剂的冻干形式的配制剂(例如作为粉末、树脂或薄片，尤其是粉末或薄片)。

通常，本发明的配制剂将掺入被调整以适用于具体目的、使用方式和给药模式的化妆品或药物制剂中。配制剂可与一种或多种化妆品或药物可接受载体或赋形剂(抗氧化剂、防腐剂、粘度改进剂、着色剂、调味剂、香料、缓冲剂、酸度调节剂、螯合剂，或其他赋形剂)，以及需要的话任选与其他治疗成分混合。这种制剂可通过本领域已知的任何方法制备，可以例如设计为吸入、局部或肠胃外(包括静脉内、关节内、肌肉内、皮内和皮下)给药。

全身输送的制剂适合地使用低分子量共聚物制备，尽管这种聚合材料为不可降解的，但先前丁基半酯已用于药物并且可易于通过肾脏排泄。一些此申请中所述的磷脂用于肠胃外营养并且可非常容易地在身体内完全分解而不引起严重问题。肠胃外输送将适当地为无菌的。

相信本发明组合物特别适合于将活性剂输送至皮肤。

当活性剂输送至皮肤，通常重要的是粒度小于在皮肤外层内的角膜细胞之间发现的类脂间隙，这是为了使材料充分吸收至角质层中。角膜细胞间间隙的厚度在50-100nm范围内，因此，粒子(例如本发明的大分子组装体)应理想地尺寸为小于100nm，尤其是小于50nm，更特别是小于25nm以便有效吸收。皮肤内角膜细胞和类脂薄层之间的亲水性孔/空间基本上小于类脂间隙，起始于0.4nm直径但能扩大至20-30nm左右的能力(Gevc，G Advanced Drug Delivery Reviews 2004 56：675-711)。此申请中所述的新型大分子组装体可很好地适合于渗透角膜细胞间类脂层以及亲水性孔，因此可用于输送油质材料如活性剂。由于大分子组装体可截留在角质层内，它们可充当活性剂的储存器以能持续释放至皮肤更深层，由此提供独特的治疗能力。有利地是，这可改善产物功效，降低施用数和所需活性剂的量，将更便于消费者或病人。

局部施用的制剂可例如包括抗氧化剂(例如α-生育酚、丁基化的羟基茴香醚(BHA)或丁基化的羟基甲苯(BHT))、防腐剂(例如2-苯氧基乙醇、山梨酸或对羟基苯甲酸酯类)、粘度改进剂(例如水溶性胶和树脂，如黄原胶，或轻微交联的合成聚合物如卡波普(carbopol))、着色剂、调味剂、香料、缓冲剂、酸度调节剂、螯合剂(例如如EDTA、乙二胺四乙酸钠、乙二胺四乙酸二钠或乙二胺四乙酸钙二钠)、渗透增强剂和防粘剂。适合的卡波姆包括Carbopol980和Ultrez20。

局部施用的制剂可掺入水凝胶片(即固定结构的三维凝胶)中。使用水凝胶的施用可有利之处在于：(i)水凝胶片可充当推迟给药的便利储存器和/或(ii)水凝胶片可提供可计量的剂量形式，使得可有效控制给药的活性剂的量。

因此，提供一种包含本发明组合物和活性剂，以及进一步包含化妆品可接受载体或赋形剂的化妆品制剂。

还提供一种包含本发明组合物和活性剂，以及进一步包含化妆品可接受载体或赋形剂的药物制剂。

因此，还提供一种用于治疗的本发明组合物。

本发明的另一方面提供本发明组合物作为，例如在使活性剂(例如油溶性维生素或油溶性维生素衍生物，具有三萜系化合物或甾核的剂，或油溶性肽)增溶中作为增溶剂的用途。可增溶的其他活性剂包括萜类化合物。

本发明组合物的其他潜在用途包括用作使膜肽或蛋白质增溶以研究它们的结构的手段。已确认需要可用于在磷脂膜内使膜肽和蛋白质(包括整体、膜范围或膜缔合蛋白质，例如药物受体蛋白质)增溶的增溶剂，这样以便保持它们的天然构象，并由此能研究它们的结构(例如通过NMR光谱法)。

除结构研究外，研究膜蛋白质和肽与其他种的相互作用。这种其他种也可以为膜肽和蛋白质。在膜受体的情况下，这种其他种包括配体和配体片段(例如促效剂和对抗剂)。在酶的情况下，这种其他种类可以为配体和配体片段(例如基质和抑制剂)。

可以为研究主题的其他膜结合或膜缔合分子包括糖脂。

除NMR外，存在许多其他适合的本领域技术人员熟知的用于研究肽和蛋白质的光谱技术(包括x射线结晶法、红外光谱法和圆二色性)。

存在大量用于膜蛋白质由清洗剂增溶状态向脂双层状态转移的技术。例如生物珠可用来除去清洗剂并由此促进转移，但也可使用其他技术，例如冻融。冻融为膜蛋白质群落中一种广泛使用的技术，包括速冻(例如使用液氮)和融化(例如37℃)循环(其重复多次，例如4次)，其引起膜蛋白质掺入本发明大分子组装体中。最适用于掺入特殊蛋白质的技术可取决于所用清洗剂的绝对和临界胶束浓度而改变。

为了重建膜肽和蛋白质本发明组合物可优于使用bicelles(Sanders，CR和Landis，GC Biochemistry 1995 34(12)：4030-4040)。

因此，提供本发明组合物在膜肽或蛋白质增溶中的用途。还提供另外包含膜肽或蛋白质的本发明组合物(例如干或含水形式)。

还提供一种膜肽或蛋白质增溶的方法，其包括形成包含所述膜肽或蛋白质的本发明组合物。

另外，提供一种筛选用于与膜蛋白质或肽相互作用的候选剂的方法，其包括如下步骤：

(i)使膜蛋白质或肽溶于本发明组合物中；

(ii)测试候选剂以确定它是否与溶解的膜蛋白质或肽相互作用。

候选剂可以为被公认的配体或配体片段(例如促效剂、对抗剂、抑制剂等)。

也可设想本发明组合物可用来使实际上为免疫原的肽或蛋白质(例如抗原)增溶。作为选择，可指出的是WO 95/11700公开了一种用作疫苗辅助剂以增强免疫力和改善疫苗中抗原的免疫反应的水包油亚微乳液(SME)。本发明组合物也可用作微粒疫苗辅助剂。

此外，需要影响粘膜表面的医学疾病的治疗，例如眼科使用如称作“干眼”综合症的疾病的治疗，以及润滑生物膜(例如滑液)。泪膜具有对于稳定泪膜的形成必需的磷脂涂层。泪膜不足的疾病可潜在地通过加入磷脂水溶液如本发明组合物的水溶液而治疗。在这一点上本发明组合物为有利的，这是由于它们为清澈且无色的而不像可不透明的磷脂的常规含水制剂。

还需要润滑磷脂以治疗与关节炎疾病有关的关节连接的表面或以润滑安装在身体内和身体上的医疗设备和假体，例如人工关节和接触透镜的表面，或以防止组织之间的焦点粘合如可在外科手术过程中发生的那些。在这点上本发明组合物可以为有用的(例如通过关节内注射)。

本发明组合物还可具有将活性剂局部输送至肺或经由列于肺深处的高度可渗透的膜输送至体循环中的能力。本发明磷脂组合物与列于内部肺泡和肺的支气管表面的表面活性剂流体之间的相似性可确保本发明组合物适合于将活性剂输送至肺，尤其是肺深处，或充当将磷脂输送至肺以治疗新生儿或成人呼吸窘迫综合症的手段，疾病的特征在于天然肺表面活性剂或磷脂的不足水平。输送至肺可通过气溶胶或通过喷雾。

如下实施例并非限制而是用来阐明本发明组合物的制备和使用使得本领域技术人员可更易于评价本发明的性质并将本发明投入实践作用。

比较例

比较例1一普通表面活性剂使类脂增溶的能力

测试四种常用表面活性剂使大量类脂混合物增溶的能力以便与本发明增溶组合物比较。

方法

适合量的两倍浓度的类脂乳液通过加热至约50℃而制备，并搅拌直至形成均匀乳液。然后将混合物均化10分钟。将表面活性剂加入水中以形成双倍浓度的储液，然后向其中在搅拌和加热下逐滴加入等量类脂乳液。

在此实验中指定的百分比值指作为组合物总重量的一部分的所述组分的重量。

一旦制备了混合物，则可目测它们以确定表面活性剂组分是否使类脂组分在含水介质中增溶。如果没有明显肉眼可见的不透明，则混合物的透明度归类为清澈，而如果对于光通过有明显可见的破坏，则混合物的透明度归类为浑浊。

表面活性剂

十二烷基硫酸钠(CAS号151-21-3)，通常简称SDS，为最广泛使用的阴离子表面活性剂之一，例如它用于许多通用的清洁剂。SDS作为实验室试剂级粉末使用。

Mackanate DC30由Mclntyre Group Ltd(美国)生产，并且以属名聚二甲基硅氧烷共聚醇磺基琥珀酸二钠已知。Mackanate为用于个人护理清洁剂的温和阴离子表面活性剂。Mackanate作为30％浓度的清澈液体而供应。

以属名泊罗沙姆(poloxamer)407已知的Lutrol

F 127(CAS号9003-11-6)由BASF生产，为聚氧乙烯/聚氧丙烯嵌段共聚物表面活性剂。F127为非离子聚合表面活性剂，具有70％的聚氧化乙烯含量，平均分子量为12,600，作为粉末供应。由于具有低皮肤和眼睛刺激性，F127广泛用于个人护理应用。

溶血磷脂酰胆碱(CAS号9008-30-4)可在商品名S LPC下由Lipoid GmbH得到。结构上与磷脂酰胆碱结构相关，区别在于它仅含一个脂肪酸链，导致高得多的表面活性。S LPC用作个人护理应用中的温和乳化剂。这里所用的S LPC为93.9％纯度，作为粉末供应。

类脂

可由Phospholipid GmbH(德国)得到的Phospholipon

90 H，这里简称90H，为至少90％磷脂酰胆碱含量的氢化大豆卵磷脂提取物，已批准用于药物和化妆品。它通常作为乳化剂使用并且已知以形成脂质体。

Pro-LipoH，这里简称ProH，为含20％磷脂酰胆碱和80％的水、醇和甘油含量的氢化大豆磷脂凝胶浓缩物。它是一种前体脂质体组合物，可由Lucas Meyer Cosmetice SA得到。ProH在药物应用中的用途涵盖在EP0158441中。

结果

下表1汇总了实验结果。

表1-普通表面活性剂使类脂增溶的能力

^*所用的ProH的量为5％，使得1％类脂存在于最终制剂中，以及4％醇和甘油

如由表1的数据可看到的，通常，浓度为5％w/w的常规表面活性剂不能使浓度为1.0％w/w的类脂增溶以形成清澈且无色的溶液。然而，当所用类脂为ProH时，SDS和S LPC二者产生浓度为2.5％的清澈且无色的溶液，当类脂为90H时SDS产生浓度为5％的清澈且无色的溶液。由于它的预处理形式和它的残余醇含量，ProH可看作类脂的一种典型实例。

比较例2-普通表面活性剂使活性剂增溶的能力

测试四种常用表面活性剂使具有弱水溶性的示例性活性剂增溶的能力以便与本发明增溶组合物比较。

方法

将适量表面活性剂和活性剂加入水中，然后加热至约50℃并搅拌。然后将混合物均化10分钟。

一旦制备了混合物，则可目测它们以确定表面活性剂组分是否使活性剂在含水介质中增溶。如果没有明显肉眼可见的不透明，则混合物的透明度归类为清澈，而如果对于光通过有明显可见的破坏，则混合物的透明度归类为浑浊。

表面活性剂

四种表面活性剂(SDS、Mackanate、F127和S LPC)为如上比较例1中所述的。

活性剂

积雪草(Centella asiatica)的滴定提取物，这里称作TECA，可由RocheNicholas Laboratories SA-Serdex Division(法国)，现在为Bayer SantéFamiliale得到。TECA为用于调节胶原合成、伤口愈合、防皱、调肤色和抗脂肪治疗的54-66％(即60％左右)自由配基(积雪草酸和羟基积雪草酸)和 36-44％(即40％左右)积雪草苷的混合物。使用药物级(95％纯度)，作为粉末供应。

结果

下表2汇总了实验结果。

表2-普通表面活性剂使活性剂增溶的能力

在测试浓度下，示例性的常规表面活性剂不能使具有弱水溶性的示例性活性剂增溶。

比较例3-类脂使活性剂增溶的能力

测试三种类脂组合物使具有弱水溶性的示例性活性剂增溶的能力以便与本发明增溶组合物比较。

方法

将适量类脂和活性剂加入水中，然后加热至约50℃并搅拌直至形成均匀乳液。然后将乳液均化10分钟。

一旦制备了混合物，则可目测它们以确定类脂组分是否使活性剂在含水乳液中增溶。如果没有明显肉眼可见的不透明，则混合物的透明度归类为清澈，而如果对于光通过有明显可见的破坏，则混合物的透明度归类为浑浊。

类脂

三种类脂组合物(90H、ProH和Em930)为如上比较例1中所述的。

活性剂

示例性活性剂，TECA如比较例2所述。

结果

下表3汇总了实验结果。

表3-类脂使活性剂增溶的能力

三种示例性类脂组合物在测试浓度下不与TECA相互作用以形成清澈且无色的水溶液。

比较例4-苯乙烯/马来酸嵌段共聚物使活性剂增溶的能力

测试示例性苯乙烯/马来酸嵌段共聚物(即水解苯乙烯/马来酸酐共聚物)使具有弱水溶性的示例性活性剂增溶的能力以便与本发明增溶组合物比较。

方法

制备双倍浓度的苯乙烯/马来酸嵌段聚合物的含水储液。为此，加入相等体积的双倍浓度的TECA水乳液，以提供含所需浓度的两种组分的最终混合物。在均化10分钟之前将该混合物加热至约50℃并搅拌另外20分钟。

一旦制备了混合物，则可目测它们以确定聚合物组分是否已使活性剂在含水介质中增溶。如果没有明显肉眼可见的不透明，则混合物的透明度归类为清澈，而如果对于光通过有明显可见的破坏，则混合物的透明度归类为浑浊。

聚合物

SMA3000 HNa由Sartomer Inc.得到，它是一种钠盐形式的水解SMA3000(即苯乙烯/马来酸钠盐)并且含3∶1比的苯乙烯与马来酸单体单元(即嵌段聚合物)。聚合物作为树脂供应。

活性剂

示例性活性剂，TECA如比较例2所述。

结果

下表4汇总了实验结果。

表4-苯乙烯/马来酸嵌段共聚物使活性剂增溶的能力

SMA3000 HNa，含3∶1比的苯乙烯与马来酸单体单元的苯乙烯/马来酸嵌段共聚物，在测试浓度下不能使示例性的活性剂增溶以产生清澈且无色的水溶液。

比较例5-类脂和表面活性剂混合物使活性剂增溶的能力

测试类脂和表面活性剂混合物使具有弱水溶性的示例性活性剂增溶的能力以便与本发明增溶组合物比较。

方法

将适量类脂、表面活性剂和活性剂加入水中，然后加热至约50℃并搅拌直至形成均匀乳液。然后将混合物均化10分钟。

一旦制备了混合物，则可目测它们以确定类脂和表面活性剂混合物是否已使活性剂在含水介质中增溶。如果没有明显肉眼可见的不透明，则混合物的透明度归类为清澈，而如果对于光通过有明显可见的破坏，则混合物的透明度归类为浑浊。

表面活性剂

F127和S LPC如上比较例1所述。

SDS如上比较例1所述。

类脂

90H如上比较例1所述。

活性剂

示例性活性剂，TECA如比较例2所述。

结果

下表5汇总了实验结果。

表5-类脂和表面活性剂混合物使活性剂增溶的能力

表5中的结果表明单独的类脂和少量表面活性剂不具有充分增溶以形成清澈且无色的示例性活性剂水溶液的能力。

SDS为有力的表面活性剂，不令人惊讶的是在高浓度下，它能使TECA和类脂增溶。然而在2.5％w/w的浓度下，SDS不能形成清澈且无色的活性剂和类脂溶液。

比较例6-苯乙烯/马来酸嵌段共聚物和表面活性剂使活性剂增溶的能力

测试示例性的苯乙烯/马来酸嵌段共聚物(即水解的苯乙烯/马来酸共聚物)和表面活性剂混合物使具有弱水溶性的示例性活性剂增溶的能力以便与本发明增溶组合物比较。

方法

制备双倍浓度的苯乙烯/马来酸嵌段聚合物的含水储液。为此，加入等体积的双倍浓度的表面活性剂和TECA的水乳液以提供含含所需浓度的各个组分的最终混合物。将混合物加热并搅拌另外20分钟。

一旦制备了混合物，则可目测它们以确定聚合物和表面活性剂是否已使活性剂在含水介质中增溶。如果没有明显肉眼可见的不透明，则混合物的透明度归类为清澈，而如果对于光通过有明显可见的破坏，则混合物的透明度归类为浑浊。

聚合物

SMA3000HNa如比较例4所述。

表面活性剂

F127和S LPC如上比较例1所述。

活性剂

示例性活性剂，TECA如比较例2所述。

结果

下表6汇总了实验结果。

表6-苯乙烯/马来酸嵌段共聚物和表面活性剂使活性剂增溶的能力

SMA3000 HNa，含3∶1比的苯乙烯与马来酸单体单元的苯乙烯/马来酸嵌段共聚物和少量表面活性剂，在测试浓度下不能使示例性的活性剂增溶以产生清澈且无色的水溶液。

比较例7-交替苯乙烯/马来酸共聚物和类脂络合物在生理pH下的稳定性

研究交替苯乙烯/马来酸共聚物和现有技术的类脂在生理pH下形成稳定的大分子络合物的能力。

方法

以双倍所需最终浓度制备脂族的储备乳液。将类脂加入适当体积的水中，其后搅拌并加热至约50℃直至形成均匀乳液。然后将乳液均化10分钟。

以双倍所需最终浓度制备每一种聚合物的储液。作为苯乙烯/马来酸酐供应的聚合物通过在过量氢氧化钠存在下在水中回流两小时而水解，之后在4℃下放置48小时以确保反应完成。储液通过将水解的聚合物与适当体积的水混合而制备。

聚合物/类脂混合物然后通过将类脂乳液逐滴加入相等体积的聚合物溶液中，同时搅拌并加热至约50℃而制备。

产生的混合物的pH使用盐酸而降低直至混合物形成清澈且无色的溶液(然后记录此pH值)。随后使用氢氧化钠溶液谨慎地使pH升高至约pH7.0。然后在分析之前将溶液在4℃下储存1小时。

可目测混合物以确定聚合物组分是否已使类脂组分在含水介质中增溶。如果没有明显肉眼可见的不透明，则混合物的透明度归类为清澈，而如果对于光通过有明显可见的破坏，则混合物的透明度归类为浑浊。

聚合物

称作Ald的聚合物可由Aldrich Chemical Company(美国)得到，目录编号为43,529-5。聚合物为1∶1的交替的苯乙烯与马来酸的共聚物并且作为含水浓缩物供应。

SMA1000P由Sartomer Inc.得到，含1∶1比的苯乙烯与马来酸酐单体单元。聚合物以粉末形式，作为未水解酐供应。

类脂

Pro H如上比较例1所述。

结果

下表7汇总了实验结果。

表7-交替苯乙烯/马来酸共聚物和类脂络合物在生理pH下的稳定性

^*表示聚合物在使用之前水解

所用ProH的量为5％，使得1％类脂存在于最终制剂中，以及4％醇和甘油

尽管这些交替苯乙烯/马来酸聚合物使类脂混合物ProH在pH3.3-3.5范围内增溶，当在生理pH下储存时试样都不稳定，在调整至pH7.0的一小时内从溶液中沉淀出。这些发现突出了现有技术聚合物/类脂大分子络合物存在的稳定性问题。

本发明实施例

实施例1-苯乙烯/马来酸嵌段共聚物在聚合物/类脂大分子络合物的形成中的使用

测试示例性苯乙烯/马来酸嵌段共聚物(即水解的苯乙烯/马来酸酐嵌段共聚物)并与交替苯乙烯/马来酸共聚物比较它们使纯类脂增溶的能力，表明大分子聚合物/类脂络合物的形成。

方法

以双倍所需最终浓度制备成膜类脂的储备乳液。将类脂加入适当体积的水中，其后搅拌并加热至约50℃直至形成均匀乳液。然后将乳液均化10分钟。

将产生的混合物的pH降低至约pH7，或对于这一点上不产生清澈且无色溶液的那些混合物，进一步降低直至溶液清澈。随后升高在pH降低至7以下之后最终产生清澈且无色溶液的那些混合物的pH以观察当恢复至生理pH水平并在4℃下放置整夜时它们是否将保持清澈。注意两个信息内容，首先是否可制备清澈且无色的溶液，第二，稳定的清澈且无色的溶液是否可在生理pH(即约pH7)下制备。

聚合物

Ald如比较例7所述。

SMA1000P如比较例7所述。

SMA3000P由Sartomer Inc.得到，含3∶1比的苯乙烯与马来酸酐单体单元(即为嵌段共聚物)。聚合物以粉末形式，作为未水解的酐供应。

类脂

DLPC(二月桂酰基磷脂酰胆碱)，CAS号18194-25-7在99％纯度下由Sigma-Aldrich得到。

DPPC(二棕榈酰基磷脂酰胆碱)，CAS号63-89-8在99％纯度下由Sigma-Aldrich得到。

DPPG(二棕榈酰基磷脂酰甘油)，CAS号67232-81-9作为钠盐在99％纯度下由Sigma-Aldrich得到。

结果

下表8汇总了实验结果。

表8-苯乙烯/马来酸嵌段和交替共聚物在聚合物/类脂大分子络合物的形成中的使用

^*表示聚合物在使用之前水解

基于表8中的数据可得到大量令人惊讶的结论。首先与本领域技术人员对于两亲性聚合物与成膜类脂的相互作用需要高度规定的交替结构的预期相反，已证实嵌段共聚物可以以类似方式相互作用。第二，嵌段聚合物中精确的单体比的选择可使聚合物/类脂的相互作用在生理pH下稳定发生。

实施例1-补充

为了定量比较与本发明混合物相比现有技术混合物的性能，根据实施例1中列举的通用程序(加入共表面活性剂)制备代表性试样并使用浊度仪(来自Hach-Lange的Nephla)检测。将浊度仪在使用之前用两种已知标准(0和40FNU)校准。

试样制备的最后阶段(即将pH调整至生理pH)后，将试样通过Whatman 541滤纸过程过滤以除去可妨碍浊度测量的任何粗大物质。过滤后立即进行第一次浊度测量。初始测量后将混合物在4℃下储存，在更后时间点再次测量。

在此补充实验中所用的组分的所有描述可在实施例别处中得到。

表8a-嵌段和交替苯乙烯/马来酸共聚物在聚合物/类脂大分子络合物的形成中的使用

^*表示聚合物在使用之前水解

实施例1中的补充实验的结果提供了大量证明当与现有技术的组合物相比时本发明组合物在生理pH(即pH7)下具有改善的稳定性。

实施例2-苯乙烯/马来酸嵌段共聚物和天然类脂混合物在聚合物/类脂大分子络合物形成中的使用

根据实施例1的结果，以及苯乙烯/马来酸嵌段聚合物能在生理pH下操作的知识，测试一系列天然类脂提取物对于用于本发明的适合性。分析大量市售的衍生于蛋或大豆的类脂组合物。

方法

以双倍(即2％)的所需1％的最终浓度制备成膜类脂的储被乳液。将类脂加入适当体积的水中，其后搅拌并加热至约50℃直至形成均匀乳液。然后将乳液均化10分钟。

以双倍(即5％)所需2.5％的最终浓度制备每一种聚合物的储液。作为苯乙烯/马来酸酐供应的聚合物通过在过量氢氧化钠存在下在水中回流两小时而水解，之后在4℃下放置48小时以确保反应完成。储液通过将水解的聚合物与适当体积的水混合而制备。

对于不立即产生清澈且无色溶液的那些混合物，将混合物的pH降低以确定是否可在更低的pH水平下形成清澈且无色的溶液。

聚合物

SMA2000P由Sartomer Inc.得到并且含2∶1比的苯乙烯与马来酸酐单体单元(即为嵌段共聚物)。聚合物以粉末形式作为未水解的酐供应。

SMA3000P如实施例1所述。

类脂

Epikuron 200(Ep200)为至少92％纯度的大豆磷脂酰胆碱。它用作药物(包括肠胃外)应用的乳化剂并已知形成脂质体。Ep200可由DegussaTexturant Systems UK Ltd得到。

Epikuron 145V(Ep145V)为至少45％纯度的富含磷脂酰胆碱的脱油大豆卵磷脂馏分。Ep145V可由Degussa Texturant Systems UK Ltd得到。

Emulmetik 970(Em970)为含至少59％磷脂酰胆碱的部分脱脂蛋卵磷脂。它用作助乳化剂并且形成脂质体。Em970可由Lucas Meyer CosmeticsSA得到。

Emulmetik 950(Em950)为含至少94％磷脂酰胆碱的纯的氢化大豆提取物。它用作乳化剂并且形成脂质体。Em950可由Lucas Meyer CosmeticsSA得到。

Emulmetik 930(Em930)如比较例1所述。

Emulmetik 900(Em900)为至少45％纯度的富含磷脂酰胆碱的脱油纯大豆提取物。它用作乳化剂并且形成脂质体。Em900可由Lucas MeyerCosmetics SA得到。

Emulmetik 300(Em300)为含至少97％磷脂和糖脂的脱油纯大豆提取物。它用作助乳化剂。Em300可由Lucas Meyer Cosmetics SA得到。

Epikuron 130P(Ep130P)为至少30％纯度的富含磷脂酰胆碱的脱油大豆卵磷脂馏分。它用作乳化剂，已批准用于药物用途。Ep130P可由DegussaTexturant Systems UK Ltd得到。

Ovothin 120(OVA120)为含至少22％磷脂酰胆碱的蛋卵磷脂与蛋黄油的天然混合物。它具有饮食用途，可由Degussa Texturant Systems UK Ltd得到。

Pro H如比较例1所述。

Pro-Lipo Duo(Pro Duo)为一种前体脂质体组合物，为液体，含约50％大豆磷脂含量，剩余50％由甘油和醇组成。Pro-Duo由Lucas MeyerCosmetics SA得到。

Lipsosome 0041(Lip0041)为提纯的大豆卵磷脂脂质体配制剂，与丙二醇和水一起含10％磷脂。Lip0041可由Lipoid GmbH得到。

S 75为含68-73％磷脂酰胆碱的提纯的大豆提取物。它可由LipoidGmbH得到。

S 100为含至少94％磷脂酰胆碱的提纯的大豆提取物。它可由LipoidGmbH得到。

S PC为含98％磷脂酰胆碱的提纯的大豆提取物。它可由Lipoid GmbH得到。

SL 80为含69％磷脂酰胆碱的提纯的大豆提取物。它可由LipoidGmbH得到。

SL 80-3为含54％磷脂酰胆碱的提纯的大豆提取物。它可由LipoidGmbH得到。

90H如比较例1所述。

可由Phospholipid GmbH(德国)得到的Phospholipon80H，这里简称80H，为至少60％磷脂酰胆碱含量的氢化大豆卵磷脂提取物，用作乳化剂并形成脂质体。它为用于化妆品而出售。

可由Phospholipid GmbH(德国)得到的Phospholipon90NG，这里简称90NG，为至少90％磷脂酰胆碱含量的大豆卵磷脂提取物。它用作乳化剂并形成脂质体，为用于药物和化妆品而出售。

Nat 8539为预先配制的衍生于大豆提取物的脂质体组合物，它含73-79％磷脂酰胆碱，其余为乙醇。

结果

下表9汇总了实验结果，类脂提取物混合物的组合物基于干重(其中可得到)。

实施例2证实两种示例性的苯乙烯/马来酸嵌段共聚物能使宽范围的衍生于天然来源的成膜类脂混合物增溶。这个发现具有重要意义，这是由于现有技术的聚合物/类脂体系仅例证了高度纯的合成类脂单独，或仅在一个实施例中仅作为双组分混合物的用途。以上显示的类脂提取物为极复杂的天然产物，其内容物在存在的磷脂头基的性质和它们缔合的酰基链(链长和饱和度)方面都不同。因此，实验证实了本发明聚合物在使宽范围成膜类脂混合物增溶以形成基本清澈且无色的水溶液中的通用性。

实施例2-补充

为了定量证实当用不同类脂混合物制备时本发明混合物的透明度和稳定性，根据实施例2中列举的通用程序制备试样并使用浊度仪(来自Hach-Lange的Nephla)检测。将浊度仪在使用之前用两种已知标准(0和40FNU)校准。

试样制备的最后阶段(即将pH调整至生理pH)后，将试样通过Whatman 541滤纸过程过滤以除去可妨碍浊度测量的任何粗大物质。过滤后立即进行第一次浊度测量。初始测量后将混合物在4℃下储存，在更后时间点上再次测量。

这些实验的结果显示于以下表9a中。

尽管存在大量细微差异，表9a中的结果一般地与上面表9中的那些一致。这些差异可解释为较早结果的主观性质和表9中所指定的仅两类透明度(清澈或浑浊)这一事实的结果。也可归因于实验变化和类脂(其为天然提取物，因此经受一些变化)的一批批的改变。

总之，显然，使用一系列类脂组分制备的本发明组合物可达到比现有技术的相应组合物更高水平的透明度和/或可更稳定。

实施例3-一系列苯乙烯/马来酸嵌段共聚物和类脂在聚合物/类脂大分子络

合物形成中的使用

为确认苯乙烯/马来酸嵌段共聚物适用于聚合物/类脂大分子络合物的形成，和它适用于宽范围单体比这一令人惊讶的发现，测试大量不同的市售聚合物的实例。

方法

以双倍(即2％)所需1％的最终浓度制备成膜类脂的储备乳液。将类脂加入适当体积的水中，其后搅拌并加热至约50℃直至形成均匀乳液。然后将乳液均化10分钟。

调整混合物的pH以测量形成大分子组装体的临界水平，以及在生理pH下是否将保持产生的清澈且无色的溶液。

聚合物

SMA2000P如实施例2所述。

SMA3000P如实施例1所述。

SMA3000HNa如比较例4所述。

SMA4000HNa由Sartomer Inc.得到，含4∶1比的苯乙烯与马来酸单体单元(即为嵌段共聚物)。聚合物以水解钠盐的形式作为树脂供应。

类脂

Em930如比较例1所述。

结果

下表10汇总了实验结果。

表10-一系列苯乙烯/马来酸嵌段共聚物和类脂在聚合物/类脂大分子络合物形成中的使用

^*表示聚合物在使用前水解

表10中的数据表明当与示例性的类脂Em930结合时SMA2000、SMA3000(各自为水解形式)和SMA3000HNa能产生清澈且无色的水溶液，且溶液在pH7下稳定。SMA4000HNa不使Em930在pH7下增溶，因为聚合物由溶液中沉淀出，然而它能使Em930在这点以上的pH水平下增溶。

实施例3-补充

为了定量比较具有一系列苯乙烯与马来酸之比的本发明混合物在生理pH下的性能，根据实施例3中列举的通用程序制备代表性试样并使用浊度仪(来自Hach-Lange的Nephla)检测。将浊度仪在使用之前用两种已知标准(0和40FNU)校准。

此补充实验中所用的组分的完整描述可在实施例别处中得到。

表10a-嵌段和交替苯乙烯/马来酸共聚物在聚合物/类脂大分子络合物形成中的使用

^*表示聚合物在使用前水解

实施例3中的补充实验的结果提供了大量证明具有2∶1或3∶1的苯乙烯与马来酸之比的共聚物都能在生理pH(即pH7)下产生稳定的大分子组装体。

实施例4-助表面活性剂在本发明组合物中的使用

如上所述，嵌段苯乙烯/马来酸共聚物能与一系列类脂相互作用以形成大分子聚合物/类脂络合物。尽管在所示实施例中对光通过不存在显著水平的破坏，然而，测试加入助表面活性剂作为确保溶液完全清澈而无对光通过的破坏的手段。

方法

以双倍所需最终浓度制备助表面活性剂与成膜类脂的储备乳液。助表面活性剂溶于水中，同时加热(约50℃)并搅拌。然后加入类脂，其后连续搅拌和加热直至形成均匀乳液。然后将乳液均化10分钟。

聚合物/类脂混合物然后通过将含类脂乳液逐滴加入相等体积的聚合物溶液中，同时搅拌并加热至约50℃而制备。

调整混合物的pH以测量形成大分子组装体的临界pH水平，以及在生理pH下是否将保持产生的清澈且无色的溶液。

可目测混合物以确定聚合物和表面活性剂组分是否已使类脂组分在含水介质中增溶。如果没有明显肉眼可见的不透明，则混合物的透明度归类为清澈，而如果对于光通过有明显可见的破坏，则混合物的透明度归类为浑浊。

聚合物

SMA3000HNa如比较例4所述。

SMA4000HNa如实施例3所述。

类脂

Em930如比较例1所述。

表面活性剂

F127和S LPC如比较例1所述。

结果

下表11汇总了实验结果。

少量助表面活性剂(仅相当于类脂组分的1％)的使用不破坏组合物形成在pH7下稳定的清澈且无色溶液的能力。相反，甚至少量助表面活性剂有助于提供为“水”清澈的溶液的透明度。

实施例4-补充

为了定量比较含助表面活性剂的本发明混合物与没有助表面活性剂的混合物的性能，根据实施例4中列举的通用程序制备代表性试样并使用浊度仪(来自Hach-Lange的Nephla)检测。将浊度仪在使用之前使用两种已知标准(0和40FNU)校准。

表11a-嵌段和交替苯乙烯/马来酸共聚物在聚合物/类脂大分子络合物形成中的使用

^*表示聚合物在使用前水解

实施例4中的补充实验的结果提供了大量证明少量助表面活性剂可有助于本发明组合物的透明度。

实施例5-本发明组合物使示例性活性剂增溶的用途

如上所述，嵌段苯乙烯/马来酸共聚物能与一系列类脂相互作用以形成大分子聚合物/类脂络合物。这种聚合物/类脂络合物预期可用于具有弱水溶性的活性剂的增溶。因此用一系列弱水溶性示例性活性剂测试本发明组合物以阐明组合物在化妆品和药物领域的潜在应用。

方法

以双倍所需最终浓度制备助表面活性剂、成膜类脂与活性物质的储备乳液。助表面活性剂溶于水中，同时加热(约50℃)并搅拌。然后加入类脂，其后连续搅拌和加热直至形成均匀乳液。然后将乳液均化10分钟。再加热至约50℃后在搅拌下缓慢加入活性组分直至存在均匀乳液。然后将最终乳液均化另外10分钟。

可目测混合物以确定聚合物/类脂组装体是否已使活性组分在含水介质中增溶。如果没有明显肉眼可见的不透明，则混合物的透明度归类为清澈，而如果对于光通过有明显可见的破坏，则混合物的透明度归类为浑浊。

此外，将一些实例冻干，然后在水中再形成(随搅拌和加热)以确定大分子组装体在这些处理条件下是否保持稳定。再形成后，再次测量溶液的透明度。

聚合物

SMA3000HNa如比较例4所述。

SMA2000P如实施例3所述。

SMA3000P如实施例1所述。

类脂

类脂90H、Pro H和Em930如比较例1所述。

表面活性剂

F127和S LPC如比较例1所述。

活性剂

TECA如比较例2所述。

Argireline

(Argir)，也称作乙酰基六肽3，可由Lipotec SA(西班牙)得到。

L-抗坏血酸棕榈酸酯(Asc-P)为维生素C单棕榈酸酯衍生物，CAS号137-66-6。它可由DSM(瑞士)得到。

Nikkol CP(CP)为维生素C二棕榈酸酯衍生物，CAS号28474-90-0。CP可由Nikko Chemicals Co Ltd(日本)得到。

Nikkol VC-IP(VC-IP)为维生素C四异棕榈酸酯衍生物，CAS号183476-82-6。VC-IP可由Nikko Chemicals Co Ltd(日本)得到。

积雪草苷(Asiaticoside)(Asi)为积雪草酸的糖苷衍生物。它以95％纯度使用，可由Roche Nicholas Laboratories SA-Serdex Division(法国)，现在的Bayer Santé Familiale得到。

B-胡萝卜素(B-Car)为前维生素A，作为30％FS级由DSM NutritionalProducts Ltd.提供。CAS号7235-40-7。

神经酰胺IIIA(Cera)由Degussa/Goldschmidt AG(德国)提供。

胆固醇(Cholesterol)(Chol)，CAS号57-88-5，以＞95BP/Ph Eur级使用。Chol可由Merck KGaA得到。

Matrixyl^TM(Mat)为棕榈酰基KTTKS。它作为凝胶使用，含120ppm肽，可由Sederma SAS(法国)得到。

视黄醇棕榈酸酯(Ret-P)为维生素A棕榈酸酯，CAS号79-81-2。Ret-P以1,700,000IU每克由DSM(瑞士)提供。

结果

下表12汇总了实验结果。

基于一系列聚合物或类脂组分，本发明组合物证实使具有已知弱水溶性的活性剂增溶以形成在生理pH下稳定的清澈且无色水溶液的潜在能力。例如，示例性活性剂TECA增溶0.8％，相当于总干重的约18.5％(80％类脂重量)。比较例2表明四种普通表面活性剂SDS、Mackanate、F127、S LPC无一能使TECA增溶总干重的9.1％，而不管这些表面活性剂可具有的任何其他潜在问题。

此时，并未检测高于上面列出的那些的活性物质的浓度。因此，存在一些活性剂可在比指定的那些更高水平下通过本发明组合物增溶。

在冻干的那些试样中，所有都易于在水中以与冻干之前相同的浓度再形成。该过程上的稳定性在商业应用中有价值，其中冻干配制剂的运输可显著降低运输和处理费用。

含SMA300P(以水解形式)、90H、F127和TECA(表12中由所示)的冻干组合物的再形成在30％总重量的浓度(即活性剂在最终水溶液中合计5.5％浓度)下为成功的。这个发现表明不同浓度的配制剂可由单一冻干原料制备。

实施例5-补充

为了定量证实本发明组合物作为一系列具有弱水溶性的示例性活性剂的增溶剂的性能，根据实施例5中列举的通用程序制备代表性试样并使用浊度仪(来自Hach-Lange的Nephla)检测。将浊度仪在使用之前用两种已知标准(0和40FNU)校准。

此补充实验中所用的组分的完整描述可在实施例别处中得到。其他活性剂包括：

由Sanofi Aventis Pharma SA.(法国)提供的氢化可的松(Hydrocortisone)(HC)Ph.Eur./USP/JP级。CAS 50-23-7。

由Farmabios S.p.A.(意大利)提供的丙酸氯倍他素微粉(Clobetasol Propoinate Micronized)(Clo.P)BP/USP级。CAS 25122-46-7。

由Sanofi Aventis Pharma SA.(法国)提供的地塞米松(Dexamethasone)(DEX)Ph.Eur./USP/JP级。CAS 50-02-2。

由Sigma-Aldrich(英国)提供的丁氯倍他松(Clobetasone Butyrate)(Clo.But.)。CAS 25122-57-0。

由Sigma-Aldrich(英国)提供的丁酸氢化可的松(HydrocortisoneButyrate)(HC But.)氢化可的松17-丁酸酯。CAS 13609-67-1。

由Sanofi Aventis Pharma SA.(法国)提供的无水乙酸地塞米松(Dexamethasone Acetate Anhydrous)(DEX A.A.)Ph.Eur./USP级。

由Sanofi Aventis Pharma SA.(法国)提供的醋酸可的松微粉(CortisoneAcetate Micronised)(Cort.A.)Ph.Eur./USP/JP级。

由Sanofi Aventis Pharma SA.(法国)提供的醋酸氢化可的松微粉(Hydrocortisone Acetate Micronised)(HC A)Ph.Eur./USP/JP级。

由Rona，Merck KgaA.(德国)提供的Eusolex 2292(甲氧基肉桂酸辛酯)。CAS 5466-77-3。

由Merck KgaA.(德国)提供的Eusolex 4360(二苯甲酮-3)。CAS131-57-7。

由Sabinsa Corp.(美国)提供的大豆异黄酮(Soy Isoflavones)55％CG(Soy Iso.)野生大豆(Glycine Soja)提取物。

由Sabinsa Corp.(美国)提供的迷迭香酸(Rosmarinic Acid)90％(Ros.Acid)香蜂花(Melissa officinalis)提取物。CAS 84604-14-8。

Licorice CG，由Sabinsa Corp.(美国)提供的洋甘草(Clycyrrhiza glabra)提取物。CAS 84775-66-6。

Green Tea CG，由Sabinsa Corp.(美国)提供的茶(Camellia sinensis)(表没食子儿茶素(Epigallocatechin))提取物。CAS 84650-60-2。

由Flamma S.p.A.(意大利)提供的长压定(Minoxidil)。CAS 38304-91-5。

由SM Biomed Sdn.Bhd.(马来西亚)提供的硫酸红霉素(ErythromycinSulphate)(Erythro.)。CAS 114-07-8。

由Leshan Sanjiu-LongMarch Pharmarceuticals Co.，Ltd.(中国)提供的硫酸新霉素(Neomycin Sulphate)(Neo.Sulphate)。CAS 1405-10-3。

由Nicholas Piramal India Limited.(印度)提供的酮康唑(Ketaconazole)(Keta.)Ph.Eur级。CAS 65277-42-1。

由Merck KGaA(德国)提供的PABA(4特纯4-氨基苯甲酸)USP。CAS150-13-0。

Boswellin

CG，Sabinsa Corp.(美国)提供的乳香(Boswellia serrata)提取物(β-乳香酸)。CAS 97952-72-2。

由MMP Inc.(美国)提供的胆固醇硫酸钾(Chol.Sulphate)。CAS6614-96-6。

7-脱氢胆固醇(7-DHC)，前维生素D₃，由MMP Inc.(美国)提供。CAS000434-16-2。

由SNP Natural Products Pty Ltd.(澳大利亚)提供的Melaleucole(Melal.)松油烯-4-醇。CAS 562-74-3。

由Sabinsa Corp.(美国)提供的山柰(Kaempferia galanga)的高良姜(Galanga)提取物(乙基-对-甲氧基肉桂酸酯98％)。CAS 99880-64-5。

由Sabinsa Corp.(美国)提供的Cosmoperine(Cosm.)胡椒(Pipernigrum)提取物(四氢胡椒碱)。

由Maruzen Pharmaceuticals Co.Ltd.(日本)提供的P-U.(多元醇可溶甘草提取物)胀果甘草(Glycyrrhiza inflata)的提取物。

由Maruzen Pharmaceuticals Co.Ltd.(日本)提供的PT-40(多元醇可溶甘草提取物P-T(40))光果甘草(Glycyrrhiza glabra)的提取物。CAS84775-66-6。

由Degussa Care Specialities.Cosmoferm B.V(荷兰)提供的神经酰胺(Ceramide)IIIB(Cera.IIIB)。

由Antibiotice S.A.(罗马尼亚)提供的制霉菌素(Nystatin)BP/Eur.Ph.级，CAS 1400-61-9。

由Induchem(瑞士)提供的Unisol S-22(3-亚苄基樟脑)。CAS15087-24-8。

由Unifect(英国)提供的Avobenzene。CAS 70356-09-1。

由Farchemia S.R.L.(意大利)提供的克霉唑(Clotrimazole)(Clot.)USP/Ph.Eur.级。CAS 23593-75-1。

由Sederma S.A.S.(法国)提供的神经酰胺(Ceramide)HO3(Cera.HO3)，CAS 131276-37-4。

由Quest International(英国)提供的Questice CQ U/A(Menthyl PCA)。CAS 68127-22-0。

由Arriva Fragrances(英国)提供的Unisex Bouquet(AFL-3607/A)。

由Arriva Fragrances(英国)提供的Apricosal(AFL-3607/E)。

由Arriva Fragrances(英国)提供的Fougere(AFL-3607/D)。

由Arriva Fragrances(英国)提供的薄荷油(Peppermint Oil)(Pep-mintOil)(AFL-3607/C)。

由Whyte Chemicals Ltd.(英国)提供的NDGA(去甲二氢愈创木酸)。CAS 500-38-9。

由Merck KGaA.(德国)提供的Vitamin D₃(胆钙化醇)。CAS 67-97-0。

由Breckland Scientific Supplies(英国)提供的Caffeine实验室试剂级。CAS 58-08-2。

由Cognis Iberia s.l.(西班牙)提供的Herbalia Nettle欧荨麻(Urticadioica)提取物。

由Cognis Iberia s.l.(西班牙)提供的马栗树(Horse Chestnut)欧洲七叶树(Aesculus hippocastanum)提取物。

由Cognis Iberia s.l.(西班牙)提供的Ginkgo(Herbalia Ginkgo CG)银杏(Ginkgo biloba)提取物。

由Linnea SA(瑞士)提供的GSF(Ginkgo Biloba Extract G320)银杏(Ginkgo biloba)提取物。

由Linnea SA(瑞士)提供的G38(Ginkgo Biloba Extract G38)银杏(Ginkgo biloba)提取物。

由Clariant UK Ltd.(英国)提供的Octopirox(吡啶铜乙醇胺盐(Piroctone olamine))，CAS 68890-66-4。

结果

下表12a汇总了实验结果。

实施例6-含胶原刺激剂的制剂

为了例证本发明聚合物/类脂大分子组装体在化妆品制剂中的用途，本发明组合物用来使胶原刺激剂TECA增溶，并与防腐剂和粘度改进剂结合。

方法

以双倍所需最终浓度制备助表面活性剂、成膜类脂与活性物质的储备乳液。将助表面活性剂溶于水中，同时加热(约50℃)并搅拌。然后加入类脂，其后连续搅拌和加热直至形成均匀乳液。然后将乳液均化10分钟。预热至约50℃后在搅拌下缓慢加入活性组分直至存在均匀乳液。然后将最终乳液均化另外10分钟。

以双倍(即5％)所需2.5％的最终浓度制备每一种聚合物的储液。作为苯乙烯/马来酸酐供应的聚合物首先通过在过量氢氧化钠存在下在水中回流两小时而水解，之后在4℃下放置48小时以确保反应完成。储液通过将水解的聚合物与适当体积的水混合而制备。

然后将防腐剂加入溶液中并调整pH。产生的溶液称作溶液A，它的组成汇总于表13中。

表13-溶液A组成

^*表示聚合物在使用前水解

将黄原胶和卡波普(carbopol)与水混合并搅拌直至形成均匀凝胶。然后将pH调整至7。产生的溶液称作溶液B，它的组成汇总于表14中。

表14-溶液B组成

然后将溶液A与溶液B以相等体积混合以产生最终制剂。

聚合物

SMA3000P如实施例1所述。

类脂

90H如比较例1所述。

表面活性剂

S LPC如比较例1所述。

活性剂

TECA如比较例2所述。

防腐剂

Phenonip可由Clariant UK Ltd得到，为2-苯氧基乙醇与其他剂(对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丙酯、对羟基苯甲酸丁酯和对羟基苯甲酸异丁酯)的混合物。它作为60-80％纯度的液体使用。

粘度改性剂

Keldent为黄原胶，可以以粉末形式由CP Kelco(英国)得到。CAS号11138-66-2。

Carbopol

980NF为与烯丙基蔗糖交联的丙烯酸的聚合物，可以以粉末形式由Noveon Inc/Surfachem Group Ltd(英国)得到。

结果

具有弱水溶性的活性剂TECA的化妆品制剂成功地在pH7下以清澈且无色的含水凝胶制备。

实施例7-抗氧化剂的化妆品制剂

为了例证本发明聚合物/类脂大分子组装体在化妆品制剂中的用途，本发明组合物用来使抗氧化剂维生素C衍生物Asc-P增溶，并与防腐剂和粘度改进剂结合。

方法

以双倍所需最终浓度制备助表面活性剂、成膜类脂与活性物质的储备乳液。助表面活性剂溶于水中，同时加热(约50℃)并搅拌。然后加入类脂，其后连续搅拌和加热直至形成均匀乳液。然后将乳液均化10分钟。预热至约50℃后在搅拌下缓慢加入活性组分直至存在均匀乳液。然后将最终乳液均化另外10分钟。

然后将防腐剂加入溶液中并调整pH。产生的溶液称作溶液A，它的组成汇总于表15中。

表15-溶液A组成

^*表示聚合物在使用前水解

将黄原胶和卡波普(carbopol)与水混合并搅拌直至形成均匀凝胶。然后将pH调整至7。产生的溶液称作溶液B，它的组成汇总于表16中。

表16-溶液B组成

然后将溶液A与溶液B以相等体积混合以产生最终制剂。

聚合物

SMA3000P如实施例1所述。

类脂

90H如比较例1所述。

表面活性剂

S LPC如比较例1所述。

活性剂

Asc-P如实施例5所述。

防腐剂

Phenonip如实施例6所述。

粘度改性剂

Keldent

和Carbopol980NF如实施例6所述。

结果

具有弱水溶性的活性剂Asc-P的化妆品制剂成功地在pH7下以清澈且无色的含水凝胶制备。

实施例8-为了结构分析将PagP掺入本发明组合物中

沉淀的PagP(根据先前由Hwang，P.M等Proc.Natl.Acad.Sci.USA2002 99(21)：13560-13565出版的草案表述并提纯为沉淀物)溶于5％SDS中以得到0.5mM的最终浓度，并对50mM磷酸钠(pH6)渗析(截留分子质量3500道尔顿)5天以除去SDS。缓慢加入β-辛基吡喃葡糖苷(β-OG)以得到100mM的最终浓度，然后加入乙醇至1％。将试样(约3ml约0.5mM PagP)加入10ml的2％DMPC(w/w)在50mM Tris.HCl(pH 8)、200mM NaCl和100mM β-OG中的溶液。使用Biobeads(Bio-Rad)将β-OG经2小时的过程除去以得到不透明的溶液。随后，以1∶1的比(v/v)加入10ml浓度为5重量％的聚合物溶液(水解的SMA3000P，如实施例1所述)，在室温下放置5分钟以使大分子组装体形成。将溶液过滤(0.22um)，然后使用标准镍亲合色谱法程序提纯。为了提纯通过使用SDS/PAGE评估柱馏分。汇集最纯的馏分，然后通过尺寸排阻色谱法进一步提纯。

蛋白质构象的分析使用Far UV圆二色性(Far UV CD)和傅里叶变换红外(FTIR)光谱法进行。

实施例9-为结构分析而将细菌视紫红质(bacteriorhodopsin)掺入本发明组合物中

使来自盐生盐杆菌(Halobacterium halobium)的冻干的细菌视紫红质紫膜(8mg，Sigma Ltd.)悬浮在1ml的50mM Tris.HCl(pH 8.0)、200mMNaCl和2％DMPC(w/w)中，然后通过探针超声波掺入膜中。以1∶1比(v/v)加入浓度为5重量％的聚合物(水解的SMA3000P，如实施例1所述)并在室温下放置5分钟以使大分子组装体形成。将溶液过滤(0.22um)，然后通过尺寸排阻色谱法进一步提纯。

构象分析使用Far UV CD、可视CD和FTIR进行。

实施例10-为结构分析而将短杆菌肽掺入本发明组合物中

使来自短芽孢杆菌(Bacilus Brevis)的冻干的短杆菌肽A(Sigma Ltd.)溶于100％乙醇中至最终浓度为20mg/ml。然后将溶液(80ul)缓慢加入3.5重量％的DMPC/聚合物大分子组装体(1∶2.5类脂∶水解SMA3000P比)在50mM Tris.HCl(pH8)和200mM NaCl(920ul)中的溶液中。在65℃下将试样加热10分钟，然后离心(16000×g)以除去未掺入的材料，最后使用尺寸排阻色谱法提纯。

构象分析通过Far UV CD进行。

实施例11-用于测定大分子组装体至皮肤的皮肤吸收的建议方法

(a)使用标记剂

还掺入标记剂的本发明大分子组装体将通过类似于前述组合物而制备。标记剂可以为在正常光下可见的染料(例如D&C Red No.27，也称作2′，4′，5′，7′-四溴-4，5，6，7-四氯荧光素)，或在UV光下可见的荧光标记剂，其中之一在没有本发明大分子组装体的含水介质中具有弱溶解性。其他标记剂是可能的，例如放射性同位素示踪剂，但可能是不太理想的。

含标记剂的大分子组装体的含水制剂用于皮肤试样允许发生吸收的一段时间。然后在分析吸收程度之前将过量含水制剂从皮肤表面除去。然后使用适于所述标记剂的方法测量吸收程度。例如在正常光下可见的标记剂可使用市售的适于标记剂波长特征的探测器，或通过拍摄吸收面积并使用常规图像分析法分析照片而量化。

吸收深度可通过使用皮肤分离技术以除去皮肤层并分析每层的吸收程度而研究。

(b)通过局部或全身生理反应测量

还掺入具有弱水溶性的活性剂的本发明大分子组装体通过类似于前述组合物而制备。剂将为导致可检测和量化的生理反应的那种(例如血管扩张剂趋于局部增加皮肤发红并可系统影响血压，类固醇可引起导致发白的局部血管收缩)。

含活性剂的大分子组装体的含水制剂用于皮肤试样允许发生吸收的一段时间。然后在分析吸收效果之前将过量含水制剂从皮肤表面上除去。然后使用适用于所述剂的方法测量吸收效果。例如，皮肤发红/发白可使用市售探测器，或通过拍摄吸收面积并使用常规图像分析法分析照片而量化，全身影响如血压变化或活性剂在血液中的浓度可通过本领域技术人员已知的常规方法测量。

所有本申请中所参考的参考文献，包括专利和专利申请，在此尽可能最全面地引入作为参考。

整个说明书和之后的权利要求，除非文中另有要求，术语“包含”和变式“包含”和“包含”将应理解为意思是包括规定的数、步骤、数组或步骤组但不排除任何其他数、步骤、数组或步骤。

本申请的权利要求可涉及这里所描述的任何特征或特征组合。它们可以呈产品、组合物、方法，或用途权利要求的形式，且可包括例如但不限于如下权利要求。

Claims

1.一种包含磷脂和苯乙烯与马来酸的共聚物的组合物，其中所述苯乙烯与马来酸单体单元之比大于1∶1且小于4.5∶1，其中所述共聚物和磷脂呈大分子组装体的形式。

2.根据权利要求1的组合物，其中所述苯乙烯与马来酸单体单元之比大于1.2∶1。

3.根据权利要求2的组合物，其中所述苯乙烯与马来酸单体单元之比大于1.5∶1。

4.根据权利要求3的组合物，其中所述苯乙烯与马来酸单体单元之比大于2.5∶1。

5.根据权利要求1的组合物，其中所述苯乙烯与马来酸单体单元之比小于3.5∶1。

6.根据权利要求2的组合物，其中所述苯乙烯与马来酸单体单元之比小于3.5∶1。

7.根据权利要求3的组合物，其中所述苯乙烯与马来酸单体单元之比小于3.5∶1。

8.根据权利要求3的组合物，其中所述苯乙烯与马来酸单体单元之比为4∶1。

9.根据权利要求3的组合物，其中所述苯乙烯与马来酸单体单元之比为3∶1。

10.根据权利要求3的组合物，其中所述苯乙烯与马来酸单体单元之比为2∶1。

11.根据权利要求1的组合物，其中所述苯乙烯与马来酸的共聚物的平均分子量小于500,000道尔顿。

12.根据权利要求11的组合物，其中所述苯乙烯与马来酸的共聚物的平均分子量小于150,000道尔顿。

13.根据权利要求12的组合物，其中所述苯乙烯与马来酸的共聚物的平均分子量小于50,000道尔顿。

14.根据权利要求13的组合物，其中所述苯乙烯与马来酸的共聚物的平均分子量小于20,000道尔顿。

15.根据权利要求1组合物，其中所述苯乙烯与马来酸的共聚物的平均分子量为4,500-12,000，且苯乙烯与马来酸之比为2∶1、3∶1或4∶1。

16.根据权利要求1的组合物，其中所述共聚物和磷脂大分子组装体在pH为5.0-7.5下在水溶液中稳定。

17.根据权利要求16的组合物，其中所述共聚物和磷脂大分子组装体在pH为5.5-7.5下在水溶液中稳定。

18.根据权利要求17的组合物，其中所述共聚物和磷脂大分子组装体在pH为6.5-7.5下在水溶液中稳定。

19.根据权利要求1的组合物，其中所述共聚物和磷脂大分子组装体在pH为7.1-7.8下在水溶液中稳定。

20.根据权利要求19的组合物，其中所述共聚物和磷脂大分子组装体在pH为7.3-7.6下在水溶液中稳定。

21.根据权利要求1的组合物，其中所述磷脂为单一组分。

22.根据权利要求21的组合物，其中所述单一组分为磷脂酰胆碱。

23.根据权利要求22的组合物，其中所述磷脂酰胆碱为二月桂酰基磷脂酰胆碱、二肉豆蔻基磷脂酰胆碱、二棕榈基磷脂酰胆碱或二硬脂基磷脂酰胆碱。

24.根据权利要求23的组合物，其中所述磷脂酰胆碱为二棕榈基磷脂酰胆碱。

25.根据权利要求23的组合物，其中所述磷脂酰胆碱为二肉豆蔻基磷脂酰胆碱。

26.根据权利要求23的组合物，其中所述磷脂酰胆碱为二月桂酰基磷脂酰胆碱。

27.根据权利要求21的组合物，其中所述单一组分为磷脂酰甘油。

28.根据权利要求27的组合物，其中所述磷脂酰甘油为二棕榈基磷脂酰甘油。

29.根据权利要求1的组合物，其中磷脂为组分的混合物。

30.根据权利要求29的组合物，其中所述磷脂为具有保存的酰基链长的类脂混合物。

31.根据权利要求30的组合物，其中所述保存的酰基链长为长度上12、14、16或18个碳原子。

32.根据权利要求31的组合物，其中所述保存的酰基链长为长度上12、14或16个碳原子。

33.根据权利要求29的组合物，其中所述磷脂为至少50重量％具有单一头基类型的磷脂的类脂混合物。

34.根据权利要求33的组合物，其中所述磷脂为至少75重量％具有单一头基类型的磷脂的类脂混合物。

35.根据权利要求34的组合物，其中所述磷脂为至少90重量％具有单一头基类型的磷脂的类脂混合物。

36.根据权利要求33的组合物，其中所述单一头基类型为磷脂酰胆碱。

37.根据权利要求34的组合物，其中所述单一头基类型为磷脂酰胆碱。

38.根据权利要求35的组合物，其中所述单一头基类型为磷脂酰胆碱。

39.根据权利要求29的组合物，其中所述磷脂为天然来源的类脂提取物。

40.根据权利要求39的组合物，其中所述类脂提取物衍生于蛋。

41.根据权利要求39的组合物，其中所述类脂提取物衍生于大豆。

42.根据权利要求41的组合物，其中所述类脂提取物包含至少92重量％磷脂酰胆碱，最大3重量％溶血磷脂酰胆碱和最大2重量％油；在类脂提取物中14-20重量％酰基链为棕榈酰，3-5重量％为硬脂酰，8-12％重量％为油酰，62-66％重量％为亚油酰，以及6-8重量％为亚麻酰。

43.根据权利要求41的组合物，其中所述类脂提取物包含：至少90重量％氢化磷脂酰胆碱，最大4重量％氢化溶血磷脂酰胆碱和最大2重量％油和甘油三酯；在类脂提取物中至少80重量％酰基链为硬脂酰，以及至少10重量％为棕榈酰。

44.根据权利要求1的组合物，其中基于重量基准所述共聚物与磷脂之比大于1∶2。

45.根据权利要求44的组合物，其中基于重量基准所述共聚物与磷脂之比大于1∶1。

46.根据权利要求45的组合物，其中基于重量基准所述共聚物与磷脂之比为1.5∶1。

47.根据权利要求45的组合物，其中基于重量基准所述共聚物与磷脂之比为2.5∶1。

48.根据权利要求1的组合物，其另外包含助表面活性剂。

49.根据权利要求48的组合物，其中助表面活性剂以等于磷脂重量的0.1-5％的量加入组合物中。

50.根据权利要求49的组合物，其中助表面活性剂以等于磷脂重量的0.5-2.5％的量加入组合物中。

51.根据权利要求50的组合物，其中助表面活性剂以等于磷脂重量的0.75-1.5％的量加入组合物中。

52.根据权利要求51的组合物，其中助表面活性剂以等于磷脂重量的1％的量加入组合物中。

53.根据权利要求48的组合物，其中所述助表面活性剂为氧化丙烯/氧化乙烯的嵌段共聚物。

54.根据权利要求48的组合物，其中所述助表面活性剂为溶血磷脂酰胆碱。

55.根据权利要求1的组合物，其中所述大分子组装体直径小于100nm。

56.根据权利要求55的组合物，其中所述大分子组装体直径小于50nm。

57.根据权利要求56的组合物，其中所述大分子组装体直径小于25nm。

58.根据权利要求1-57中任一项的组合物，其为冻干形式。

59.一种包含根据权利要求1-57中任一项的组合物的水溶液。

60.根据权利要求59的水溶液，其包含0.001-10重量％根据权利要求1-57中任一项的组合物。

61.根据权利要求59的水溶液，其包含10-20重量％根据权利要求1-57中任一项的组合物。

62.根据权利要求59的水溶液，其包含大于20重量％根据权利要求1-57中任一项的组合物。

63.根据权利要求59的水溶液，其为清澈且稳定的，并且pH为5.0-7.5。

64.根据权利要求63的水溶液，其为清澈且稳定的，并且pH为5.5-7.5。

65.根据权利要求64的水溶液，其为清澈明且稳定的，并且pH为6.5-7.5。

66.根据权利要求59的水溶液，其为清澈且稳定的，并且pH为7.1-7.8。

67.根据权利要求66的水溶液，其为清澈且稳定的，并且pH为7.3-7.6。

68.根据权利要求59的水溶液，其为清澈且无色的。

69.一种包含根据权利要求1-57中任一项的组合物的配制剂，其另外包含活性剂。

70.根据权利要求69的配制剂，其中所述活性剂为油溶性维生素或油溶性维生素衍生物。

71.根据权利要求70的配制剂，其中所述油溶性维生素或油溶性维生素衍生物为抗坏血酸棕榈酸酯、抗坏血酸四异棕榈酸酯或抗坏血酸二棕榈酸酯。

72.根据权利要求69的配制剂，其中所述活性剂为三萜系化合物或甾核。

73.根据权利要求72的配制剂，其中所述三萜系化合物来自积雪草。

74.根据权利要求69的配制剂，其中所述活性剂为油溶性肽。

75.根据权利要求74的配制剂，其中所述油溶性肽为棕榈酰-KTTKS或乙酰基六肽-3。

76.一种包含根据权利要求1-57中任一项的组合物的配制剂，其另外包含膜肽或蛋白质。

77.包含根据权利要求69的配制剂的化妆品制剂，其另外包含化妆品可接受的赋形剂。

78.根据权利要求77的化妆品制剂，其中所述化妆品可接受的赋形剂为载体。

79.包含根据权利要求69的配制剂的药物制剂，其另外包含药物可接受的赋形剂。

80.根据权利要求79的药物制剂，其中所述药物可接受的赋形剂为载体。

81.根据权利要求1-57中任一项的组合物作为增溶剂的用途。

82.根据权利要求81的用途，用于使活性剂增溶。

83.根据权利要求82的用途，其中所述活性剂为油溶性维生素或油溶性维生素衍生物。

84.根据权利要求82的用途，其中所述活性剂具有三萜系化合物或甾核。

85.根据权利要求82的用途，其中所述活性剂为油溶性肽。

86.根据权利要求81的用途，使膜肽或蛋白质增溶。

87.一种制备根据权利要求1-57中任一项的组合物的方法，其包括如下步骤：

(i)制备苯乙烯与马来酸的共聚物的水溶液，其中苯乙烯与马来酸单体单元之比大于1∶1且小于4.5∶1；

(ii)制备磷脂水乳液；

(iii)将磷脂乳液与共聚物水溶液混合；

(iv)如果需要的话，调整混合物的pH使得形成共聚物/磷脂大分子组装体；

(v)任选除去水。

88.一种制备根据权利要求69的配制剂的方法，其包括如下步骤：

(ii)制备磷脂和活性剂的水乳液；

(iii)将水乳液与共聚物水溶液混合；

(v)任选除去水。

89.一种使磷脂在水溶液中增溶的方法，其包括形成磷脂和苯乙烯与马来酸的共聚物的大分子组装体，其中所述苯乙烯与马来酸单体单元之比大于1∶1且小于4.5∶1。

90.一种使具有弱水溶性的活性剂在水溶液中增溶的方法，其包括形成磷脂、活性剂和苯乙烯与马来酸的共聚物的大分子组装体，其中所述苯乙烯与马来酸单体单元之比大于1∶1且小于4.5∶1。

91.一种筛选用于与膜蛋白质或肽相互作用的候选剂的方法，其包括如下步骤：

(i)使膜蛋白质或肽在磷脂和苯乙烯与马来酸的共聚物的组合物中增溶，其中所述苯乙烯与马来酸单体单元之比大于1∶1且小于4.5∶1，其中所述共聚物和磷脂呈大分子组装体的形式；

(ii)测试候选剂以确定它是否与增溶的膜蛋白质或肽相互作用。