CN101161686B - 一种免疫增强剂β-葡聚糖的制备方法 - Google Patents
一种免疫增强剂β-葡聚糖的制备方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN101161686B CN101161686B CN2007100316358A CN200710031635A CN101161686B CN 101161686 B CN101161686 B CN 101161686B CN 2007100316358 A CN2007100316358 A CN 2007100316358A CN 200710031635 A CN200710031635 A CN 200710031635A CN 101161686 B CN101161686 B CN 101161686B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- precipitation
- yeast
- centrifugal
- heated
- glucan
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
Images
Landscapes
- Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)
Abstract
本发明涉及一种碱不溶性β-葡聚糖的制备方法,其特征是将由新鲜酵母菌体或干酵母粉得到的酵母细胞壁,或者直接采用酵母提取后废弃的酵母细胞壁,用0.70~0.80mol/L NaOH溶液均匀悬浮,加热煮沸保持15~20分钟,冷却,3000~4500r/min离心得沉淀,沉淀用0.70~0.80mol/L NaOH溶液均匀悬浮,加热煮沸保持15~20分钟,降温至65~80℃,恒温保持12~18小时,冷却后用HCl调pH至4.0~5.0,3000~4500r/min离心得到的沉淀用蒸馏水均匀悬浮后,煮沸8~15分钟,3000~4500r/min离心得到沉淀,重复处理2~3次,除去水分,得到产物。本发明工艺简单,设备投资少,产品纯度高,还提高了废弃物酵母渣的利用价值,因而具有良好的应用前景。
Description
技术领域
本发明涉及一种葡聚糖的制备方法,具体来说是涉及一种碱不溶性β-葡聚糖的制备方法。
背景技术
葡聚糖存在于酵母菌等真菌细胞壁中,是D-葡萄糖的聚合物。碱不溶性β-葡聚糖是一种良好的生物免疫调节剂,被广泛应用于食品、医药等行业。目前国内外制备碱不溶性β-葡聚糖的方法主要是酶法、Sevage法、酸法或酸法与有机溶剂相结合的方法,这些方法各有利弊:酶法工艺复杂且提取的葡聚糖纯度不高;酸法会使设备受到腐蚀,而且产物中还含有甘露聚糖,葡聚糖的纯度也不高;Sevage法只适用于提取水溶性葡聚糖。
发明内容
本发明的目的在于开发出一种能得到高纯度的碱不溶性β-葡聚糖的方法。
我们以酵母细胞壁为原料,用稀碱提取得到的碱不溶性β-葡聚糖不含有甘露聚糖,因此纯度很高,从而实现了本发明的目的。
本发明的一种碱不溶性β-葡聚糖的制备方法,其特征包括以下的步骤:
(1)将酵母细胞壁用0.70~0.80mol/L NaOH溶液均匀悬浮,加热煮沸保持15~20min,冷却,3000~4500r/min离心去上清液得到沉淀;
(2)将步骤(1)得到的沉淀用0.70~0.80m0l/L NaOH溶液均匀悬浮,加热煮沸保持15~20min,再降温至65~80℃,恒温保持12~18h,冷却后用HCl调pH至4.0~5.0,3000~4500r/min离心去上清液得到沉淀;
(3)将步骤(2)得到的沉淀用蒸馏水均匀悬浮后,煮沸8~15min,3000~4500r/min离心去上清液得到沉淀,此过程重复2~3次,除去离心获得的沉淀中的水份,得到产物。
步骤(1)所述的酵母细胞壁可以通过将面包酵母(Baking yeast)、啤酒酵母(Brewingyeast)等新鲜酵母菌体或干酵母粉重新悬浮,自溶或加酶处理后使细胞破裂除去内含物得到,或者直接采用酵母提取内含物后废弃的酵母渣——酵母细胞壁,得到的酵母细胞壁还可以进一步用蒸馏水离心洗涤1~2次除去残留的细胞内含物等水溶性成分,获得较纯的酵母细胞壁。
步骤(3)所述的沉淀可以采用真空干燥、冷冻干燥或用无水乙醇、无水乙醚分次脱水然后风干等方法除去水分,最好采用冷冻干燥除去水分。
本发明原料来源广泛,工艺简单,设备投资少,产品纯度高,不含甘露聚糖,可避免酸法中酸对设备的腐蚀和对工人健康的损害,另外还可以提高废弃物酵母渣的利用价值,因而本发明具有良好的应用前景。
附图说明
图1:样品红外吸收图谱。
图2:标准β-(1,3)葡聚糖样品红外吸收图谱。
具体实施方式
以下实施例是对本发明的进一步说明,不是对本发明的限制。
实施例1:
将酵母提取内含物后的酵母渣30g,用蒸馏水1000mL均匀悬浮,4000r/min离心15分钟,去上清得沉淀,重复一次上述悬浮离心步骤得到纯酵母细胞壁。
将纯酵母细胞壁用1000mL浓度是0.75mol/L的NaOH溶液均匀悬浮,加热煮沸保持15min,冷却后4000r/min离心15min,去上清液,沉淀再用1000mL浓度0.75mol/L的NaOH溶液悬浮,加热煮沸保持15min,降温至70℃水浴中维持13h,冷却后用HCl调pH至4.6,然后4000r/min离心15min去上清液得沉淀。
将上一步得到的沉淀加300mL蒸馏水均匀悬浮,然后加热煮沸10min,冷却,4000r/min离心10min,去上清液,如此重复两次,得到的沉淀用300mL无水乙醇分两次脱水,再用300mL无水乙醚分两次脱水,所得物质38℃条件下风干,得到浅灰白色产物5.40g,委托广东省农业科学院兽医研究所进行红外图谱分析,结果表明其红外吸收图谱(见图1)与标准β-葡聚糖(见图2)相近,具有的特征峰证明其糖苷键为β-(1,3)构型,产品主要含有β-(1,3)葡聚糖,而无甘露聚糖吸收峰,表明不存在甘露聚糖。
实施例2
取鲜啤酒酵母菌体300g,用1L的0.5%木瓜酶溶液悬浮,60℃恒温水浴中维持水解12h,并在水解过程中间歇搅拌,结束后水解液冷却,4000r/min离心10min,去上清,沉淀用蒸馏水离心洗涤2次,得到纯酵母细胞壁。
将纯酵母细胞壁用1000mL浓度是0.70mol/L的NaOH溶液均匀悬浮,加热煮沸保持18min,冷却后3000r/min离心15min,去上清液,沉淀再用1000mL浓度为0.70mol/L的NaOH溶液均匀悬浮,加热煮沸保持18min,降温至65℃水浴中维持18h,冷却,用HCl调pH至4.0,然后3000r/min离心15min去上清液得沉淀。
将上一步得到的沉淀加300mL蒸馏水均匀悬浮,然后加热煮沸8min,冷却,3000r/min离心15min,去上清液,如此重复两次,得到的沉淀冷冻干燥得到浅灰白色产物5.8g,委托广东省农业科学院兽医研究所进行红外图谱分析,结果表明其红外吸收图谱与标准β-葡聚糖相近,具有的特征峰证明其糖苷键为β-(1,3)构型,产品主要含有β-(1,3)葡聚糖,而无甘露聚糖吸收峰,表明不存在甘露聚糖。
实施例3
取干面包酵母粉100g,用1mol/L的NaOH溶液1000ml均匀悬浮,90℃下搅拌中自溶反应3小时,反应液冷却后4000r/min离心15min。沉淀用1000mL浓度是0.80mol/L的NaOH溶液均匀悬浮,加热煮沸保持20min,冷却后4500r/min离心10min,去上清液,得到沉淀,沉淀1000mL浓度是0.80mol/L的NaOH溶液均匀悬浮,加热煮沸保持20min,降温至80℃水浴中维持12h,冷却,用HCl调pH至5.0,然后4500r/min离心15min去上清液得沉淀。
将上一步得到的沉淀加300mL蒸馏水均匀悬浮,然后加热煮沸15min,冷却,4500r/min离心10min,去上清液,如此重复两次,得到的沉淀用真空干燥得到浅灰白色产物5.88g,委托广东省农业科学院兽医研究所进行红外图谱分析,结果表明其红外吸收图谱与标准β-葡聚糖相近,具有的特征峰证明其糖苷键为β-(1,3)构型,产品主要含有β-(1,3)葡聚糖,而无甘露聚糖吸收峰,表明不存在甘露聚糖。
Claims (3)
1.一种碱不溶性β-葡聚糖的制备方法,其特征包括以下的步骤:
(1)将酵母细胞壁用0.70~0.80mol/L NaOH溶液均匀悬浮,加热煮沸保持15~20min,冷却,3000~4500r/min离心去上清液得到沉淀,所述的酵母细胞壁是直接采用酵母提取内含物后的酵母渣;
(2)将步骤(1)得到的沉淀用0.70~0.80mol/L NaOH溶液均匀悬浮,加热煮沸保持15~20min,再降温至65~80℃,恒温保持12~18h,冷却后用HCl调pH至4.0~5.0,3000~4500r/min离心去上清液得到沉淀;
(3)将步骤(2)得到的沉淀用蒸馏水均匀悬浮后,煮沸8~15min,3000~4500r/min离心去上清液得到沉淀,此过程重复2~3次,除去离心获得的沉淀中的水份,得到产物。
2.根据权利要求1的一种碱不溶性β-葡聚糖的制备方法,其特征是步骤(3)中所述的沉淀采用真空干燥、冷冻干燥或用无水乙醇、无水乙醚分次脱水然后风干除去水分。
3.根据权利要求2的一种碱不溶性β-葡聚糖的制备方法,其特征是步骤(3)中采用冷冻干燥除去水分。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN2007100316358A CN101161686B (zh) | 2007-11-23 | 2007-11-23 | 一种免疫增强剂β-葡聚糖的制备方法 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN2007100316358A CN101161686B (zh) | 2007-11-23 | 2007-11-23 | 一种免疫增强剂β-葡聚糖的制备方法 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN101161686A CN101161686A (zh) | 2008-04-16 |
CN101161686B true CN101161686B (zh) | 2010-04-14 |
Family
ID=39296677
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN2007100316358A Expired - Fee Related CN101161686B (zh) | 2007-11-23 | 2007-11-23 | 一种免疫增强剂β-葡聚糖的制备方法 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN101161686B (zh) |
Families Citing this family (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN101548674B (zh) * | 2009-05-15 | 2013-08-21 | 山西省农业科学院旱地农业研究中心 | 微生物抗旱诱导剂及其制法 |
CN105646730B (zh) * | 2014-11-12 | 2019-03-08 | 中国科学院天津工业生物技术研究所 | 一种从真菌的细胞壁中提取β-1,3-D-葡聚糖的方法 |
CN112760346B (zh) * | 2020-12-29 | 2022-09-09 | 唐山拓普生物科技有限公司 | 一种高免疫活性酵母细胞壁多糖的提取方法 |
Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN1583802A (zh) * | 2004-06-02 | 2005-02-23 | 中国农业大学 | 一种提取β-1,3-葡聚糖的方法 |
CN101012468A (zh) * | 2007-02-07 | 2007-08-08 | 天津科技大学 | 一种酵母葡聚糖的提取工艺 |
CN101020915A (zh) * | 2007-03-07 | 2007-08-22 | 中国农业科学院农产品加工研究所 | 一种制备酵母β-葡聚糖的方法 |
-
2007
- 2007-11-23 CN CN2007100316358A patent/CN101161686B/zh not_active Expired - Fee Related
Patent Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN1583802A (zh) * | 2004-06-02 | 2005-02-23 | 中国农业大学 | 一种提取β-1,3-葡聚糖的方法 |
CN101012468A (zh) * | 2007-02-07 | 2007-08-08 | 天津科技大学 | 一种酵母葡聚糖的提取工艺 |
CN101020915A (zh) * | 2007-03-07 | 2007-08-22 | 中国农业科学院农产品加工研究所 | 一种制备酵母β-葡聚糖的方法 |
Non-Patent Citations (3)
Title |
---|
李花霞,杨文鸽,徐大伦,黄小春.废酵母中碱不溶性葡聚糖的制备及其理化性质.广州食品工业科技20 4.2004,20(4),53-55. |
李花霞,杨文鸽,徐大伦,黄小春.废酵母中碱不溶性葡聚糖的制备及其理化性质.广州食品工业科技20 4.2004,20(4),53-55. * |
胡晓忠,明杰,甄宝贵,冯万祥.用碱法从面包酵母中提取β-(1-3)D葡聚糖.工业微生物30 1.2000,30(1),28-31. * |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CN101161686A (zh) | 2008-04-16 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN110183510B (zh) | 天然低共熔溶剂一步分离昆虫蛋白质、油脂和甲壳素的方法及其应用 | |
CN102575422A (zh) | 木质素的高温分离方法 | |
CN101560252B (zh) | 一种微波提取玉米醇溶蛋白的方法 | |
CN101985641B (zh) | 一种利用麦秆制备细菌纤维素的方法 | |
CN103694374B (zh) | 一种以江蓠为原料酶法提取琼脂、岩藻多糖和蛋白质的方法 | |
CN101161686B (zh) | 一种免疫增强剂β-葡聚糖的制备方法 | |
CN102560122A (zh) | 一种铅回收的方法 | |
CN102051395A (zh) | 一种利用玉米秆制备细菌纤维素的方法 | |
CN102603917B (zh) | 一种酶法提取酵母葡聚糖的方法 | |
CN101530201A (zh) | 一种鲟鱼软骨素提取、应用及其制备方法 | |
CN104211727A (zh) | 一种磷酸三丁酯的制备方法 | |
CN103238723A (zh) | 一种低氟南极磷虾水解蛋白质粉的制备方法 | |
CN102040633A (zh) | 利用微波技术生产葡萄糖胺及乙酰葡萄糖胺的方法 | |
CN1663986A (zh) | 一种用煤炭生产黄腐植酸的技术 | |
CN101985642B (zh) | 一种利用稻秆制备细菌纤维素的方法 | |
CN104357428A (zh) | 一种木聚糖酶的液态深层发酵方法 | |
CN101693907A (zh) | 一种由薯干粉生产柠檬酸钾的方法 | |
CN115852723B (zh) | 一种利用玉米秸秆提取高纯度木糖液和纤维素的方法 | |
CN102766671B (zh) | 一种从维生素c发酵醪液中提取蛋白质的方法 | |
CN101541819A (zh) | 从微生物质生产氨基葡萄糖的方法 | |
CN1241489C (zh) | 味精高浓度废液转化为饲料蛋白的工艺 | |
CN104788533B (zh) | 一种利用亚临界水从高温饼粕中生产寡肽与氨基酸的方法 | |
CN102864180A (zh) | 从麦糟中同时制备阿魏酸、低聚木糖及乙醇的方法 | |
CN107502636A (zh) | 一种利用氨水低温预处理杂交狼尾草的方法 | |
CN105483184A (zh) | 一种高产率低聚木糖的生产方法 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
C10 | Entry into substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
C14 | Grant of patent or utility model | ||
GR01 | Patent grant | ||
CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |
Granted publication date: 20100414 Termination date: 20211123 |
|
CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |