CN101153031B

CN101153031B - 原花青素的提取方法

Info

Publication number: CN101153031B
Application number: CN2006100536211A
Authority: CN
Inventors: 徐奎根; 江月仙
Original assignee: Individual
Current assignee: Individual
Priority date: 2006-09-27
Filing date: 2006-09-27
Publication date: 2011-05-04
Anticipated expiration: 2026-09-27
Also published as: CN101153031A

Abstract

本发明公开了一种原花青素的提取方法，它是以桑果为原料，将清洗后的桑果打成果浆，搅拌均匀，然后脱水脱糖，然后在-20℃以下干燥，至其含水率低于5％，超微粉碎；然后用已知的提取手段提取。本发明得率高，不会产生溶剂残留和环境污染，综合利用价值也高。

Description

原花青素的提取方法

技术领域

本发明属于生物化工技术领域，特别是涉及一种原花青素的提取方法。

背景技术

原花青素是广泛存在于植物界的属于双黄酮衍生物的天然多酚化合物，这类化合物是由不同数目的儿茶素或表儿茶素聚合而成，目前研究最广的是存在于葡萄籽的由5，7，3’，4’-四羟基黄烷-3醇(5，7，3′，4′-tetrahydroxyflavan-3-o1)，即(+)-儿茶素((+)-catechin)、(-)-表儿茶素((-)-epicatechin)为单位聚合而成的这类化合物，又称leucocyanidins或procyanidins。最简单的原花青素是儿茶素或表儿茶素或儿茶素和表儿茶素形成的二聚体，此外还有三聚体、四聚体等直至十五聚体，通常将二～四聚体称为低聚体(Procyanidolic Oligomers，简称OPC)，将五聚体以上的称为高聚体(Procyanidolic Polymers，简称PPC)。OPC为水溶性物质(PPC水溶性较差)、极易吸收；OPC消除自由基的能力与分子结构、聚合度有关。二聚体中，因两个单体的构象或键合位置的不同，可有多种异构体，易分离鉴定的8种结构形式分别命名为B1～B8，其中，B1～B8是由C4一C8键合，B5一B8由C4一C6键合。在各类原花青素中，二聚体(式1)分布最广，研究得最多，也是最重要的一类原花青素。三聚体中，也因组成的单体及其相连接碳原子位置的不同形成各种各样的结构并命名为C1、C2........等等，其中C1在自然界中分布最丰富。

原花青素是一种多酚类物质，具有极强的抗氧化性、酶抑制活性、抗致突变活性等。因此在抗氧化、抗辐射、抗肿瘤及保护心血管和预防高血压方面已经有了较多的应用，目前市场上已有多种以原花青素为有效成分的保健品、化妆品、辅助治疗的药品等。

原花青素一般存在于果实的皮及植物的木实部，早在50年代法国科学家就发现可以从松树皮中提取大量原花青素，其提取物中可含85％的原花青素。70年代则发现葡萄籽是提取原花青素的更好资源，葡萄籽提取物中原花青素含量可高达95％。常用的提取方法是压榨法、有机溶剂萃取法、水提醇沉-树脂吸附法、超临界CO₂萃取法等，如一种传统的方法是这样的：将干燥的植物原料粉碎；制备含原花青素的浸出液；以极性有机溶剂萃取低聚原花青素；以非极性有机溶剂使低聚原花青素从极性有机溶剂中析出；对析出的产物作纯化处理。

现有原花青素提取，仍以松树皮和葡萄籽为主要原料，这些植物中原花青素的含量并不甚高，自然影响了提取的效率、产率。

发明内容

本发明的目的是提供一种更佳的原花青素提取方法。

为此，本发明采用的技术方案是这样的：原花青素的提取方法，其特征在于：以桑果为原料，用已知的提取手段提取。

进一步地，本发明的方法是以桑果为原料，将清洗后的桑果打成果浆，搅拌均匀，然后脱水脱糖，然后在-20℃以下干燥，至其含水率低于5％，超微粉碎；然后用已知的提取手段提取。

所述已知的提取手段可以是有机溶剂萃取法提取；也可以是水提醇沉-树脂吸附法提取；也可以是用超临界CO₂萃取法提取。

前述步骤中，所述的脱水脱糖是将搅拌后的果浆装盘速冻，使其温度降至-20℃以下，完全成为固态，然后在20-50℃温度下解冻，使其重新成为浆状，并将沥出的水滤去。

前述脱水脱糖过程的控制是这样的：在脱水脱糖开始时，测试果浆的含水率和含糖率，设为S₀％和T₀％，在脱水脱糖过程中继续检测其含水率S％，当S<6S₀/(6S₀+19T₀)时，脱水脱糖完成，进行下一步操作。

桑果又名桑椹，即桑树的果实，嫩时色青，味酸，成熟时紫黑、多汁，味道甘美，属深色水果，含有丰富的天然的紫色素，其主要功能特点有补肝、强肾、养阴、安神、益智等，亦有“长生果”、“中华果皇”、“民间圣果”等美誉，中华传统医学典籍对此多有记载。发明人经过大量的研究发现，桑果中含有丰富的原花青素类物质，其含量大大高于现有的主要提取源葡萄籽。因此采用本发明的方法，可以得到较高的产率，优于现有的原花青素提取方法。

桑椹鲜果中，含水量高达90％，同时还含有蔗糖和麦芽糖、葡萄糖、果糖等大量的糖分，这些特点使得从桑果中提取原花青素较为困难，本发明采用脱水脱糖的步骤后，特别是脱除桑果中的大部分糖分后，减少了其对各种溶剂的影响，这样不管是用有机溶剂萃取法，还是水提醇沉-树脂吸附法，或超临界CO₂萃取法，都能较完全地提取出原花青素来。

具体实施方式

实施例一

脱糖桑椹冻干粉的制备

采摘后用清水鼓泡翻洗，而后喷淋，常温风干后进入打浆机打成果浆，继续搅拌5分钟。检测所得果浆，其含水率为90％，含糖率为7％。将果浆装入速冻盘，控制果浆厚度为4cm，速冻至-20℃，使其完全固化。取出速冻盘，在室温(30℃)下解冻，滤去沥出的水，检得剩余果浆的含水率为80％，经计算，符合S<6S₀/(6S₀+19T₀)的公式要求，脱水脱糖完成。将其在-20℃低温下风干，至含水率为5％，用气流进行粉碎，使颗粒粒径小于10微米，则加工完成。

实施例二

原花青素的提取

取实施例一的脱糖桑椹冻干粉1Kg，加入40％乙醇30Kg，在40℃下，在120W功率下超声10分钟，冷冻干燥，得到95％的原花青素90g。

实施例三

原花青素的提取

取实施例一的脱糖桑椹冻干粉1Kg，加入10倍量PH＝8的水溶液，在80℃下提取90min，重复提取2次；滤液调至中性上大孔吸附树脂柱，水洗后收集50％乙醇洗脱液，减压真空干燥，得到95％的原花青素95g。

实施例四

原花青素的提取

取实施例一的脱糖桑椹冻干粉1Kg，加入95％乙醇，在30℃下震荡提取30min；滤液减压真空干燥，得到95％的原花青素65g。

实施例五

原花青素的分析方法

1.试样的制备精取50—100mg试样置于50mL容量瓶中，加入30mL甲醇，超声处理20min，放冷至室温后，加甲醇至刻度，摇匀，放置至澄清后取上清液备用。

2.标准曲线称取原花青素标准品(葡萄籽提取物，纯度95％)10.0mg溶于10mL甲醇中，吸取该溶液0、0.1、0.25、0.5、1.0、1.5mL置于10mL容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀。各取1mL测定。与试样测定方法相同。

3.试样测定将正丁醇与盐酸按95：5的体积比混合后，取出6mL置于具塞锥瓶中，再加入0.2mL硫酸铁铵(NH₄Fe(SO₄)₂·12H₂O)溶液(用浓度为2mol/L盐酸配成2％(w/v)的溶液)和1mL试样溶液，混匀，置沸水浴回流，精确加热40min后，立即置冰水中冷却，在加热完毕15min后，于546nm波长处测吸光度，由标准曲线计算试样中原花青素的含量。显色在1小时内稳定。

4.分析结果计算：

m₁×v×1000

X(％)＝———————————×100

m×1000×1000

式中：X—试样中原花青素的百分含量g/100g；

m_1-反应混合物中原花青素的量μg；

v—待测样液的总体积；

m—试样的质量mg。

实施例六

结果分析

用实施例五的方法分别进行分析测定发现，实施例二在1000g脱糖桑椹冻干粉中提取了95％的原花青素90g，换算成桑椹鲜果，相当于1000g桑椹鲜果中提取95％的原花青素约9.5g；实施例三在1000g脱糖桑椹冻干粉中提取了95％的原花青素95g，换算成桑椹鲜果，相当于1000g桑椹鲜果中提取95％的原花青素约10g；实施例四在1000g脱糖桑椹冻干粉中提取了95％的原花青素65g，换算成桑椹鲜果，相当于1000g桑椹鲜果中提取95％的原花青素约7g。应当说，得率是比较令人满意的。

几个实施例中，均未使用非极性溶剂，因此也不会产生溶剂残留和环境污染；提取原花青素后的剩余物质(沉淀物)，仍然可用作多种食品原料，颇具综合利用价值。因此，本发明在各方面均优于原有技术，安全卫生，较好地实现了发明目的。

Claims

1.原花青素的提取方法，其特征在于：它是以桑果为原料，将清洗后的桑果打成果浆，搅拌均匀，装盘速冻，使其温度降至-20℃以下，完全成为固态，然后在20-50℃温度下解冻，使其重新成为浆状，并将沥出的水滤去，然后在-20℃以下干燥，至其含水率低于5％，超微粉碎；然后用有机溶剂萃取法或者水提醇沉-树脂吸附法或者超临界CO₂萃取法提取。