CN101134012A - 以混聚酸酐为中小分子药物载体制备可注射给药制剂的方法和应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开一个以混聚酸酐为中小分子药物的载体制造注射给药制剂的方法和应用；其主要特点是承载于混聚酸酐系统中的药物结晶态和不定型态的比例，承载于系统中的药量和混聚酸酐承载微粒系统粒径的大小是按照承载的药物的溶出速度，注射制剂应用范围和应用环境控制性制造的；其他特点包括承载于混聚酸酐中的药物量和药物的溶出速度可以通过混加不同比例的脂溶，水溶或两性物质控制性完成。

Description

以混聚酸酐为中小分子药物载体制备可注射给药制剂的方法和应用

技术领域

本发明涉及的是以混聚酸酐，尤其是[1，3-双-对-羧酸苯氧丙烷:葵二酸]混聚酸酐]，为中小分子药物的载体，制备可注射给药制剂的方法和应用。其特点是用于注射的载药混聚酸酐颗粒系统中药物型态(结晶态和不定型态)的比例，包载药量，粒径大小和混加的脂溶、水溶或两性物质的量都是根据它们对药物溶出速度的影响、注射剂应用的范围、和应用环境控制性制造的。

技术背景

早在一百来年前，就有合成聚酸酐的报道(Bucher and Slade，J.Am.Chem.Soc.1909，31，1319)，1930s年代Hill和Carothers合成了二脂肪酸的聚酸酐(J.Am.Chem.Soc.1930，52，4110；ibid 1932，54，5169)，1950s和1960s两个年代中Conix(J.Polym.Sci.1958，29，1319)和Yoda(Makromol，Chem.1962，55，174；J.Polym.Sci.，Part A，1963，1，1323)以芳香酸和杂环酸为单体合成了100多个聚酸酐。这个时期合成聚酸酐的目的多是为了应用于纺织业。直到进入1980年代，美国麻省理工学院Langer为首的研究组首先合成了[1，3-双-对-羧酸苯氧丙烷:葵二酸]混聚酸酐(US4757128和US4789724)，并开始研究它作为药物载体在控释药物中的应用(Rosen et al.，Biomaterials，Vol.4，Apr.1983，pp131-133，Bioerodible Polyanhydrides for controlleddrug Delivery)。Langer科研组将1，3-双-对-羧酸苯氧丙烷∶葵二酸]混聚酸酐作为药物载体制备埋植剂型用于体内控制释放给药。Langer等在US4891225中描述了理想的用于植入控释生物活性物质的混聚酸酐基质块(matrix)应是圆片状的，尺寸在1mm-10mm厚，直径在0.01-2.00厘米，总表面积是1-100平方厘米。并指出这种型状的[1，3-双-对-羧酸苯氧丙烷∶葵二酸]混聚酸酐基质块表现出表面侵蚀型降解，零级释放药物机制，并具有良好的生物相容性，无毒，可安全用于人体。Langer等在US4891225中也描述了制造植入[1，3-双-对-羧酸苯氧丙烷∶葵二酸]混聚酸酐基质块的方法。一种方法是将固体药物和混聚酸酐均匀混合后使用模具压制成所需的型状。另一种方法是将聚酸酐溶解在合适的溶剂中，例如无水乙醚，再加入适量的固体药物(最多可达50％)，然后搅拌均匀，再将搅拌均匀的液体浇铸到预制的模具中制成所需的型状，经过干燥，硬化后，这些疏水性的[1，3-双-对-羧酸苯氧丙烷∶葵二酸]混聚酸酐基质块可以植入到体内用于控释生物活性物质。在US4888176中，Langer等使用分子量大于20,000的[1，3-双-对-羧酸苯氧丙烷∶葵二酸]混聚酸酐制造出0.5mm厚的膜埋植剂用于控释分子量大于6000的激素和胰岛素。Langer组在US5122367中描素了制备生长激素埋植片的方法和使用，先将生长激素与糖稳定剂混合通过冷冻干燥制成粉末，然后同聚酸酐混合，再压制成直径为150mm，厚为0.5mm，重200mg的埋植片供使用。

根据Langer等发明的技术，Langer组及其他人已报道了几种药物的埋植剂的研究：(1)紫三醇(taxol)的埋植剂是通过将20-40％紫三醇同[1，3-双-对-羧酸苯氧丙烷∶葵二酸]混聚酸酐溶解于溶剂中，蒸干溶剂后压制成片制得，动物试验显示一定的效果，但至今没有产品(Cancer Research，1994，54，2207-2212)；(2)顺铂(cisplatin)的埋植剂是将17％顺铂同[1，3-双-对-羧酸苯氧丙烷∶葵二酸]混聚酸酐先研磨成细粉，加热熔融，然后铸造成型，实验证明顺铂埋植剂与照射疗法结合效果不错，但至今没有产品{In.J.Radiation Oncology Bio.Phys.，1997，39(2)，497-504}；(3)使用制造顺铂(cisplatin)埋植剂的方法也制造了氟尿嘧啶(fluorouracil)的埋植剂，实验证明氟尿嘧啶埋植剂与照射疗法结合效果不错，但至今没有产品{In.J.Radiation Oncology Bio.Phys.，2002，54(5)，1550-1557}；(4)卡氮介(carmustine)的埋植剂是先将定量的卡氮介和[1，3-双-对-羧酸苯氧丙烷：葵二酸]混聚酸酐制成体积为14mm×1mm的圆片剂型(wafer){Abraham J.Domb，et al.PharmaceuticalResearch 1999，16(5)，762-765}.所得圆片埋植剂将在脑癌手术后埋植在手术部位释放药物。这是目前唯一的一个已经成功的开发成了临床使用的药物，它的商品名是Gliadel。美国FDA于1996年批准Gliadel埋植控释片用于治疗复发多形性胶质母细胞瘤(GBM){H.Brem和P.Gabikian，J.Controlled Release，2001，74，63-67}。(5)在WO2004028534中王永峰和费丹描述了替莫唑胺[1，3-双-对-羧酸苯氧丙烷∶葵二酸]混聚酸酐埋植片(temozolomide)的制造和使用。(6)Wesley等使用热熔铸型法制造了[1，3-双-对-羧酸苯氧丙烷∶葵二酸]混聚酸酐含5％阿霉素(doxorubicin)的埋植片并在大鼠脑瘤模型上进行了研究{Wesley Hsu et al，Journal of Neuro-Oncology，2005，74(2)，135-140；Lesniak et al.Local delivery of doxorubicin for the treatmentof malignant brain tumors in rats.Anticancer Res.2006，26(1a)，445}。(7)Mastors等报道了使用热熔铸型法制造了含20％布比卡因(bupivacaine)聚酸酐埋植剂用于产生延长的局部麻醉效果，可望用于手术后镇痛、交感神经痛及慢性疼痛的治疗{Masters et al.，Pharmaceutical Research，1993，10(10)，1527-1532}。

在研究[1，3-双-对-羧酸苯氧丙烷∶葵二酸]混聚酸酐用于埋植控释药物的时候，也有其它一些混聚酸酐被合成出来用作药物载体的研究。Stephens等使用聚(芥酸二聚体-葵二酸)[P(EAD-SA)，50∶50w/w]制成直径为4mm，长12mm，重为150mg含20mg庆大霉素的控释药棒(Septacin)用于治疗感染性骨髓炎{Luk ChiuLi，John Deng and Dennis Stephens，Polyanhydride implant for antibiotic delivery-from the bench to the clinic，Advanced Drug Delivery Reviews 2002，5(7)，963-986}。Park等使用聚[十八碳烯(9)酸二聚体-葵二酸]P(FAD-SA，50∶50w/w)通过热熔铸型法制造了含10％头孢唑林钠(cefazolin Na)，紫杉醇(taxol)和bupivacacine直径为0.4cm厚为0.1cm的埋植片；体外实验显示释放90％的头孢唑林钠(cefazolin Na)和bupivacaine分别需要14天和35天，但是77天只释放了15％的紫杉醇{J.Controlled Release，1998，52(1-2)，179-189}。Karsten Mder等使用聚[十八碳烯(9)-葵二酸][P(FAD-SA)，50∶50和20∶80]制造了以PCA(3-carboxy-2，2，5，5-tetramethyl-pyrrollidine-1-oxyl)为活性药物的的埋植片，并证明P(FAD-SA，50∶50)的埋植片在44天基本上都被吸收了，而P(FAD-SA)20∶80的埋植片需要65天以上{Pharmaceutical Research，1997，14(6)，820-826}。Mathiowitz等将聚富马酸-葵二酸酸酐P(FA-SA)用于口服制剂的研究，发现有增加生物利用度的作用{Biotechnology and Bioengineering，1996，52(1)，96-101}。

由此可见，实验和使用都证明混聚酸酐，如聚[1，3-双-对-羧酸苯氧丙烷∶葵二酸][P(CPP：SA)20∶80w/w]，聚[芥酸二聚体∶葵二酸][P(EAD-SA)，50∶50w/w]，聚[十八碳烯(9)酸二聚体∶葵二酸]P(FAD-SA，50∶50w/w)和聚[富马酸-葵二酸酸酐]P(FA-SA)混聚酸酐，具有良好的生物相容性和生物可降解性，无毒，可安全地用于传递药物。尤其[1，3-双-对-羧酸苯氧丙烷∶葵二酸]混聚酸酐的降解发生在材料表面，能按零级动力学控制释放药物{J.Biomedical Materials Research，1985，19，941-955}。

虽然，以上的发现为药物传递开辟了一个新的领域，但是局限性和不足之处还很多。第一，到目前这个领域的主要工作都集中在延长性的局部埋植控释给药方面。第二，制造埋植剂时混聚酸酐中药物的物态(结晶态和不定形态)得不到合理的控制。第三，药物释放的速度和方式得不到有效和合理的调整和控制。第四，混聚酸酐和药物二者的理化性质的相斥与相容性，使得所造的埋植剂的药物载量不稳定，释放速度不规则或释放率不理想。例如紫杉醇释放率有时只有15-20％{Ophthalmic Surgery，1991，22(11)，676-680；Journal ofControlled release，1998，52，179-189}。第五，混聚酸酐埋植剂一般通过手术植入体内，有时还要靠手术取出{Warde和Pack，Expert Opinion on Biological Theory，2004，4(1)，35-51}。因此，它们在使用上受到身体部位可埋植性等限制，同时病人还要经受再次手术之苦。

发明内容

本发明中使用的概念。

中小分子药物：分子量100-2000道尔顿(Dalton)的有生物活性的化合物。

注射剂：可以通过注射给药的溶液，悬浊液，乳液等.

注射剂载体：可以同药物及其赋形剂混合，然后完成注射给药的物质。注射剂的载体可以是水性物质(aqueous)例如，生理盐水，葡萄糖，甘露(糖)醇等溶液，缓冲溶液；或非水性物质(non-aqueous)包括植物油，甘油，聚乙二醇，醇类，油酸酯，土温80等；例如：0.5％土温80的生理食盐水；5％甘露(糖)醇；0.5％羧甲基纤维素钠；0.1％土温80的生理食盐水。

注射应用制剂：可以使用常规的注射器和注射针头，注射导管，以及其它注射使用的器材完成给药的制剂。混聚酸酐：有两种或两种以上的有机酸通过聚合反应生成的聚合物。例如聚[1，3-双-对-羧酸苯氧丙烷：葵二酸][p(CPP∶SA)20∶80](结构式1)，聚[十八碳烯(9)酸二聚体∶葵二酸][p(FAD∶SA)50∶50](结构式2)，聚[芥酸二聚体∶葵二酸][p(EAD∶SA)50∶50](结构式3)和聚[富马酸-葵二酸酸酐][p(FA∶SA)](结构式4)的结构如下：

结构式1.p(CPP∶SA)20∶80

结构式2.p(FAD∶SA)50∶50

结构式3.p(EAD∶SA)(k+j＝19)

结构式4.p(FA∶SA)

混聚酸酐颗粒：1μm-200μm的颗粒。

本发明利用混聚酸酐的生物可降解性和生物相容性，以混聚酸酐为载体发明和制造了含有确定药物物态的混聚酸酐颗粒系统的方法，每一种含确定药物物态的混聚酸酐颗粒系统具有确定的理化和药学性质，适合指定的注射应用环境的使用。

本发明中制造含有确定药物物态的混聚酸酐颗粒系统的方法，指的是控制性的制造以不定形态药物为主，或以结晶态药物为主，或不定形态与结晶态药物比例固定的混聚酸酐颗粒的方法。药物在颗粒中的形态直接影响药物的溶出速度，因此，含药物物态不同的混聚酸酐颗粒将适合用途和目的不同的注射给药环境的应用。一般地说含不定形态药物比例高的颗粒，药物溶出的快，含结晶态药物比例高的颗粒，药物溶出相对的慢。本发明还通过调整混聚酸酐颗粒的药物包容量和粒径，有效地控制药物溶出速度，使其适合指定的环境的应用。本发明还在制备混聚酸酐颗粒时通过加入不同比例的水溶性，酯溶性或两性物质，调整和控制药物溶出速度和药物的包载率。

本发明中适合于注射使用的混聚酸酐颗粒系统是同一种或多种药学上可接受的注射剂载体混合(悬浮)在一起用于注射的。根据制剂学的工艺，注射剂中可能混加抗菌保护剂，抗氧化剂，助(tonicity)效剂，缓冲剂，稳定剂和其它制剂工艺允许的成分。注射剂可以注射到身体的任何一个器官和部位，包括：静脉，肌肉，皮内，皮下，关节内，滑液内，脊柱内，鞘内，动脉内，心内，以及颅内，病灶内，肿瘤内等。

本发明中制备适合于注射应用的混聚酸酐颗粒系统的方法，包括喷雾干燥法和单或复乳法。

喷雾干燥广泛的应用于食品，化工和医药领域制造颗粒状产品。喷雾干燥在医药领域上的应用主要是生产以不定型态为主的颗粒，据称以不定型态为主的颗粒磨粉制成的片剂或胶囊剂的生物利用度，比晶体磨粉制成的片剂或胶囊剂的生物利用度高。近几年，喷雾干燥技术也用于研制适合于制造气体口腔喷雾剂的颗粒；同时喷雾干燥也用于研制聚酯(PLGA)等聚合物包载药物的微球。一般地说，喷雾干燥的原理是将固体物质溶于或分散于溶剂中，然后经过喷嘴，喷入到减压和贯穿高压热气流的封闭室里，在这种情况下，喷进的雾滴(droplets)中的溶剂将迅速挥发并随贯穿的气流离去，结果雾滴中的固体物质将以颗粒状沉落于收集器中(图1)。因为溶剂是在瞬间挥发的，因此，失去溶剂后沉落于收集瓶中的固体颗粒的物态几乎完全是不定型态。因为是不定形态，所以相对溶解速度加快，溶解度增加。如何来控制和改变喷雾干燥所得的固体颗粒的物态，使其适合不同环境的需要是一个较为艰深的学术课题和实践中的难题。当喷雾干燥颗粒是单一物质的时候，问题相对简单。但是当以一种固体物质(载体)包载另外一种固体物质(乘载物)，利用喷雾干燥制造固体颗粒的时候，如何通过调整条件来有效地控制喷雾干燥所得的固体颗粒中乘载物的物态(不定型态和结晶态)，问题就变得复杂了。也就是说还没有人研究和应用使用混聚酸酐为药物载体，通过喷雾干燥，制造含理想药物物态比例的固体颗粒，用于不同环境传递药物的应用。

喷雾干燥的过程实际上是一个溶剂挥发和乳粒(droplets)硬化的过程，由于溶剂是在瞬间挥发的，虽然乳粒中的物质是处于超饱和状态，但是由于固体物质没有得到充分的时间来聚集和晶体化，所以，通常喷雾干燥制得到的固体颗粒的物态几乎完全是不定型态。本发明在深刻理解精细物态转化原理的基础上推断，当乳粒是由一种大分子聚合物包裹一种小分子固体物质形成的时候，因为小分子结晶化的速度远比大分子聚合物快(多数大分子聚合物不存在结晶态)，如果把乳粒硬化速度调整到(慢到)适合于小分子物质结晶时，小分子物质就会率先结晶出来。而且小分子物质结晶的量和比例，将由工艺条件来决定。基于这个原理，本发明通过有效地配置和调整喷雾干燥的条件，达到控制溶剂挥发速度和乳滴硬化速度，从而有效地控制性的制造出含不定型态和结晶态药物比例相对固定和粒径大小相对固定的颗粒。

本发明在研究药物的溶释速度时，不仅揭示了混聚酸酐颗粒系统中药物的溶释速度与颗粒中药物的不定型态和结晶态比例相关，还揭示了药物的溶出和释放速度与混聚酸酐颗粒系统粒径大小以及混聚酸酐颗粒系统载药量高低相关。

本发明是使用混聚酸酐这样的大分子固体物质作为中小分子药物的载体，制造含不定型态和结晶态药物比例相对固定和粒径大小相对一致的颗粒。一般地说，药物的用量是混聚酸酐用量的1％-50％。喷雾干燥的过程中，混聚酸酐一般不会晶体化，同混聚酸酐相比药物结晶化相对较快，尤其是在超饱和状态。因此，通过有效的控制喷雾干燥中的溶剂挥发和乳粒硬化的过程，将条件精细化和系统化，有效的制造出了含不同比例不定型态和结晶态药物的混聚酸酐颗粒。

一般地说，适合于产生不定形态药物为主的混聚酸酐颗粒的条件是配制相对低浓度药物的喷雾液，选用沸点相对低的溶剂，采用相对低的加液速度，采用相对高的雾化气压力，采用相对高的热气流量，采用相对高的进气和出气的温度。一句话，加速溶剂挥发速度。适合于产生结晶态药物为主的混聚酸酐颗粒的条件是配制相对高浓度药物的喷雾液，选用沸点相对高的溶剂，采用相对高的加液速度，采用相对低的雾化气压力，采用相对低的热气流量，采用相对低的进气和出气的温度。一句话，延长溶剂挥发时间。

例如，抗癌药氟他胺(flutamide)混聚酸酐颗粒系统的制备。当分析采用三种不同结合条件制得的包含氟他胺混聚酸酐颗粒系统时，明显地观察到氟他胺在混聚酸酐颗粒中物态的区别。如，当采用上述的适合于产生混聚酸酐颗粒中药物以不定形态为主的条件时，得到的颗粒在光学电镜(optical microscope)下几乎观察不到氟他胺的晶体(图2，a)；当采用上述的适合于产生混聚酸酐颗粒中药物以结晶态为主的条件时，得到的颗粒在光学电镜(optical microscope)下可以观察到大量的氟他胺晶体(图2，c)；当采用上述的两种极端条件下的折衷条件时，得到的颗粒在光学电镜(optical microscope)下可以观察到部分氟他胺的晶体(图2，b)。

DSC(differential scanning calorimetry)热分析也可用来分析承载氟他胺的(flutamide)混聚酸酐颗粒系统(图3)。在图3中A是氟他胺和混聚酸酐的混合物，B是混聚酸酐纯品，C是氟他胺纯品，D是承载氟他胺混聚酸酐系统。DSC(differential scanning calorimetry)热分析也从宏观上显示出药品，载体，药品和载体，和载药系统存在明显的区别。由于DSC技术本身的灵敏度的局限性，DSC分析不能显示颗粒a，b，c的区别。图4是含包物态不同的氟他胺的三种混聚酸酐颗粒(图2中a，b，c)药物溶释速率的比较。从图4可以清楚地看到混聚酸酐颗粒系统中药物的物态对药物的溶释率有相当大的影响。因此，通过制备含确定比例的不定形态和结晶态药物的混聚酸酐颗粒系统，可以有效地控制药物的溶出率，使其适合不同目的的应用。上述喷雾干燥方法尤其适合于脂溶性好的药物，由于混聚酸酐优良的脂溶性，在制备混聚酸酐颗粒系统时，首选溶剂是二氯甲烷或氯仿，因此在二氯甲烷或氯仿中溶解度好的药物，可以用这种制造技术制备含不定形态和结晶态药物不同比例的可供注射使用的混酸酐颗粒系统。

使用单或复乳法制备混聚酸酐颗粒系统时，也同样可以通过调整制备过程的条件，控制性地制备出含不定形态和结晶态药物不同比例的混聚酸酐颗粒系统。单乳化法是先将药物和混聚酸酐溶于有机溶剂中，通过搅拌或超声等方法使药物和混聚酸酐充分均一化，然后将制得的有机溶液加入到数倍于它的含有表面活性剂(例如PVA，VETPCS等)高速(速度可以500-10000转/分钟)搅拌下的水溶液中。搅拌持续一段时间后，混合物转移到更大体积的水溶剂中。继续搅拌使有机溶剂挥发，乳粒硬化。控制性地制备含不定形态和结晶态药物不同比例的混聚酸酐颗粒系统的关键是调整和控制有机溶剂挥发和乳粒硬化的速度。道理同喷雾干燥一样，乳粒硬化的速度快，制备的混聚酸酐颗粒中药物的不定形态高，因为药物没有得到充分时间聚集和晶体化。乳粒硬化的速度慢，制备的混聚酸酐颗粒中结晶态药物比例高，因为药物得到充分时间聚集和晶体化。用单乳化法制备的含10％氟他胺混聚酸酐颗粒光学电镜分析得的图像同喷雾干燥法制得的一样(图2)。

一般地说，药物分成脂溶性和水溶性药物，但药物在脂性溶剂和水性溶剂中溶解度的差别是很大的，除少数在两种溶剂中溶解度都不好的药物，例如，甲氨蝶呤(methotrexate)不溶于水和有机溶剂，但溶于酸碱性介质中；替莫唑胺在水中的溶解度只有1mg/ml，又不溶于二氯甲烷；顺铂(cisplatin)在水中的溶解度只有1mg/ml，也不溶于二氯甲烷。例如脂溶性药物，紫杉醇在水中的溶解度只有0.4μg/ml，但是溶解于二氯甲烷中；而水溶性药物，盐酸阿霉素在水中的溶解度是100mg/ml，不溶于二氯甲烷；阿扎胞苷(azacitidine)在水中的溶解度是40mg/ml，不溶于二氯甲烷；环磷酰胺(cyclophosphamide)在水中的溶解度是40mg/ml，不溶于二氯甲烷；阿糖胞苷(cytarabine)在水中的溶解度是200mg/ml，在氯仿中溶解度是1mg/ml。

本发明的中的方法既适合脂性溶药物也适合水溶性药物，包括：

抗生素类：头孢呋辛酯(cefuroxime)，头孢泊兀酯(cepodoxime)，头孢地尼(cefdinir)，头孢特仑(cefteram)，红霉素(erythromycin)，乙酰螺旋霉素(acetylspiramycin)，利富平(rifampin)，李福定(rifandin)，左氧氟沙星(levofloxacin)，培氟沙星(pefloxacin)，托氟沙星(tosufloxacin)，两性霉素B(amphotericin B)，咪康唑(miconazole)，酮康唑(ketoconazole)，氟康唑(fluconazole)，伊曲康唑(itaraconazole)，特比萘芬(terbinafine)，Ganciclovir，硫酸庆大霉素(gentamycin sulfate)，西索米性(sisomicin)，奈替米性(netilmicin)，依托红霉素(erythromycinestolate)，环丙沙星(ciprofloxacin)，阿昔洛韦(acyclovir)，阿糖腺苷(adenine arabinoside)，金刚胺(amantadine HCl)，吗啉呱(moroxydine HCl)；

抗癌药物：阿巴瑞克(abarelix)，苯丁酸氮芥(chlorambucil)，甘磷酰芥(glyfosfin)，硝卡芥(nitrocaphane)，美法仑(melphalan)，甲酰溶肉瘤素(formylmerphalan)，卡莫司汀(carmustine)，洛莫司汀(lomustine)，司莫司汀(semustine)，尼莫司汀(nimustine)，卡波醌(carboquone)，塞替派(ledertepa)，白消安(busulfan)，六甲蜜胺(altretamine)，放线菌素D(dactinomycin)，达卡巴嗪(dacarbazine)，顺铂(cisplatin)，甲胺喋呤(methotrexate)，替加氟(tegafur)，卡莫氟(carmofur)，硫鸟嘌呤(thioguanine)，喜树碱(camptothecin)，羟喜树碱(hydroxycamptothecin)，盐酸长春碱(vinblastine sulfate)，盐酸长春新碱(vincristine sulfate)，替尼泊苷(teniposide)，秋水仙碱(colchicines)，三尖杉酯碱(harringtonine)，高三尖杉酯碱(homoharringtonine)，氟他胺(flutamide)，氨鲁米特(aminoglutethimide)，甲羟孕酮醋酸酯(medroxyprogesterone)，紫杉醇(paclitaxel)，DTC(doxetaxel)，环孢菌素(cyclosporine)，睾酮(testosterone)，甲睾酮(methyltestosterone)，苯丙酸诺龙(nandrolone)，司坦唑醇(stanozolol)，乙烯雌酚(diethylstilbestrol)，甲地孕酮(megestrol)，他莫昔芬(tamoxifen)，替莫唑胺(temozolomide)，盐酸氮芥(chlormethine HCl)，雌莫司厅磷酸钠(estramustine phosphate sodium)，环磷酰胺(cyclophosphamide)，异环磷酰胺(ifosfamide)，博来霉素(bleomycin)，平阳霉素(bleomycin As)，培洛霉素(peplomycin)，丝裂霉素(mitomycin)，阿霉素(doxorubicin HCl)，柔红霉素(daunorubicin)，表柔比星(epirubicin)，盐酸伊达比星(idarubicin HCl)，阿柔比星(aclarubicin)，克拉霉素(aclarubicin)，米托蒽醌(mitoxantrone)，丙卡巴肼(procabazine)，卡铂(carboplatin)，5-氟尿嘧啶(fluorouracil)，巯嘌呤(mercaptopurine)，羟基脲(hydroxycarbamide)，盐酸阿糖胞苷(cytarabine HCl)，长春瑞宾(vinorelbine)，vinorelbine，长春地辛(vindesine)，依托泊苷(etoposide)，醋酸亮丙瑞林(leuprorelin acetate)，氯磷酸二钠(clodronate disodium)，卡铂(carboplatin)，氨磷汀(Amifostine)，氮杂胞苷(azacitidine)，bortezomib，卡培他滨(capecitabine)，克拉屈滨(cladribine)，氟尿嘧啶脱氧核苷(floxuridine)，fludarabine phosphate，2，2-二氟脱氧胞嘧啶核苷(gemcitabine HCl)，醋酸性瑞林(goserelin acetate)，甲磺酸伊马替尼(imatinib mesylate)，依立替康(irinotecan HCl 3H2O)，奥沙利铂(oxaliplatin)，链唑霉素(streptozocin)，非洛地平(Plenaxis)，阿那曲唑(anastrazole)，阿那曲唑(bexarotene)，比卡鲁胺(bicalutamide)，依西美坦(exemestane)，氟维司群(fulvestrant)，来曲唑(gefitinib)，来曲唑(letrozole)，来曲唑(mitotane)，尼鲁米特(nilutamide)，喷司他丁(pentostatin)，盐酸拓扑特肯(topotecan HCl)，尿嘧啶氮芥(uracil mustard)，戊柔比星(valrubicin)，乙烯雌酚(diethylstilbestrol)；

镇静类药物(antianxiety，sedative)：地西泮(diazepam)，氯氮卓(chlordiazepoxide)，奥沙西泮(oxazepam)，硝西泮(nitrazepam)，氯硝西泮(clonazepam)，艾司唑仑(estazolam)，阿普唑仑(alprazolam)，劳拉西泮(lorazepam)，马来酸乙酰丙嗪(acepromazine maleate)，马来酸丙氯拉嗪(prochlorperazine)，盐酸三氟丙嗪(triflupromazine)，硫酸苯丙氨(amphetamine sulfate)，盐酸哌醋甲酯(methlphenidate HCl)；

神经系统药物[包括[镇静药(sedative)，镇痛药(analgesia)，抗癫痫(Antiepileptic)，抗帕金森(Antiparkinson)，抗精神病(Antipsychotics)，抗忧郁(Antidepressant)，麻醉(Anesthetics)戒毒和戒烟药物(antiaddiction)，镇痛类药物(Analgesic)]：盐酸本海索(benzhexol HCl)，盐酸丙环定(procyclidine HCl)，甲磺酸苯扎托品(benztropine mesylate)，盐酸司来吉林(selegiline HCl)，左旋多巴(levodopa)，biperiden HCl，pergolide mesylate，pramipexole HCl，ropinirole HCl，trihexyphenidyl HCl，盐酸甲氯芬酯(meclofenoxate)，硝酸叶秋碱(securininenitrate)，盐酸罂粟碱(papaverine HCl)，盐酸尼莫地平(nimodipine HCl)，盐酸尼卡地平(nicardipine HCl)，苯巴比妥(Phenobarbital)，异戊巴比妥(amobarbital)，甲喹酮(methaqualone)，格鲁米特(glutethimide)，甲丙氨酯(meprobamate)，羟嗪(hydroxyzine)，氯美扎酮(chlormezanone)，氯丙嗪(chlorpromazine)，奋乃静(perphenazine)，氟奋乃静(fluphenazine)，三氟拉嗪(trifluoperazine)，氟奋乃静奎酸酯(fluphenazine decanoate)，替沃噻吨(tiotixene)，氟哌啶醇(haloperidol)，三氟哌多(trifluperidol)，氯噻平(clotiapine)，利培酮(risperidone)，硫利达嗪(thioridazine).马普替林(maprotiline)，异卡波肼(isocarboxazid)，duloxetine HCl，venlafaxine HCl，sertraline HCl，escitaopram oxalate，咖啡因(caffeine)，桂利嗪(cinnarizine)，长春碱(vincamine)，长春西丁(vinpocetine)，海得琴(hydergine)，尼麦角林(nicergoline)，溴麦角隐亭(bromocriptine)，tolcapone，bethanechol；辛可卡因(cinchocain)，布比卡因(bupivacaine)，甲哌卡因(mepivacaine)，地布卡因(dibukaine)，布比卡因(bupivacaine)，利多卡因(lidocaine)，xylocaine，氨基苯甲酸酯(bupivacaine)，盐酸美沙酮(methadone HCl)，莨菪碱；naloxone，naltrexone，L-methadone，环佐辛(cyclazocine)，度冷丁(meperidine)，纳屈酮(naltrexone)，美散痛(methadone)，硫酸吗啡，盐酸吗啡(morphine HCl)，盐酸哌替定(pethidine HCl)，盐酸美沙酮(methadoneHCl)，枸橼酸芬太尼(fentanyl citrate)，盐酸二氢埃托菲(dihydroetorphine HCl)，盐酸萘福潘(nefupam，HCl)，去痛定(piminodine esylate)，酒石酸麦角胺(ergotamine tartrate)，琥珀酸舒马坦(sumatriptan succinate)，氢溴酸烯丙吗啡(nalorphine HCl)，盐酸纳洛酮(naloxone HCl)

抗炎类药物(Antiinflammation)：布洛芬(ibuprofen)，酮布洛芬(ketoprofen)，氟比洛芬(flurbiprofen)，吡罗昔康(piroxicam)，金诺芬(auranofin)，甲泼尼龙(methylprednisolone)，methylprednisone，醋酸可的松(cortisoneacetate)，氢化可的松(hydrocortisone)；

甾体激素药物(包括避孕药)：炔雌醇(ethinylestradiol)，炔诺酮(norethisterone)，炔诺孕酮(norgestrel)，炔雌醚(quinestrol)，孕三烯酮(gestrinone)，米非司酮(mifepristone)，双炔失碳酯(anordrin)，左炔诺孕酮(levonorgestrel)，黄体酮(progesterone)，丙酸睾丸酮(testosterone propionate)，黄体激素(progesterone)，肟炔诺酮(norgestimate)，乙炔基雌二醇(ethinyl estradiol)，苯甲酸雌二醇(estradiol benzoate)。

抗甲状腺类药物：碘塞罗宁(liothyronine)；

治疗糖尿病类药物：格列本脲(glibenclamide)；

抗疟类药物：奎尼丁(quinidine)，WR-158122，青蒿素，quinazoline，sulfadiazine；

抗过敏类药物：朴尔敏(chlorpheniramine)；

镇咳类药物：盐酸异丙嗪(promethazine)；

降压类药物：硝苯地平；

抗血管生成(angiogenesis inhibitors)类药物：可的松，肝素(heparin)。

肽类药物：阿巴瑞克(abarelix)，阿拉瑞林(alarelin)，安替肽(antide)，阿托西班(atosiban)，布舍瑞林(buserelin)，Cetrorelix，Cyclosporin A，去氨加压素(desmopressin)，德舍瑞林(deslorelin acetate)，强啡肽A(dynorphin)，埃替非巴肽(eptifibatide)，戈那瑞林(gonadorelin)，戈舍瑞林(goserelin)，海沙瑞林(hexarelin)，组胺瑞林(hisrelin)，醋酸亮丙瑞林(leuprorelin，leuprolide acetate)，那法瑞林(nafarelin)，奥曲肽(octreotide)，ORG-2766，缩宫素(oxytocin)，普罗瑞林(protirelin)，Ramorelix，RC-160，辛卡利特(sincalide)，曲普瑞林(triptorelin)，苯甲酸雌二醇(vasopressin)，伐普肽(Vapreotide(RC-160).

上述喷雾干燥法和单乳法制备含10％氟他胺混聚酸酐颗的工艺都适合制备脂溶性药物混聚酸酐颗系统的使用。

对于水溶性药物，制备混聚酸酐颗粒系统中药物不定形态和结晶态比例一定的产品时，可以采用复乳法(w/o/w)，也可以采用喷雾干燥法。两种方法都是先将药物溶于少许量的水中，再同含混聚酸酐的有机溶液(例如二氯甲烷或氯仿等)充分均一乳化。喷雾干燥法是将所得的乳化液直接喷雾干燥，由调整和控制喷雾干燥的条件，制取药物以理想比例的不定形态和结晶态存在的混聚酸酐颗粒系统。双乳法是将所得的第一个乳化液再加入到数倍于它的含有表面活性剂(例如PVA，VETPCS等)高速(速度可以500-10000转/分钟)搅拌下的水溶液中，搅拌持续一段时间后，混合物转移到更大体积的水溶剂中，继续搅拌使有机溶剂挥发，乳粒硬化，由调整和控制乳粒硬化的速度，制取药物以理想比例的不定形态和结晶态存在的混聚酸酐颗粒系统。制备混聚酸酐颗粒系统中水溶性药物以结晶态为主的产品时，也可以不使用水相，直接将定量的磨细的药物晶体细粉加入到混聚酸酐的有机溶剂中(二氯甲烷或氯仿)，经过充分均一化(悬浮或乳化)后，在经喷雾干燥或使用单乳化法，制得的混聚酸酐颗粒系统中的药物以结晶态为主。

高分子聚合物作为药物的载体传递药物的时候，总有这样一些问题，例如，1.不能充分的包载药物，即不充分和不完全，也就是说药物流失在溶剂中，而制得的颗粒又没有足够量的药品；2.包载在聚合物中的药物不能充分有效地在指定的时间内溶释出来，也就是说虽然颗粒中包载了足够量的药物，但是在相当长的时间内只有一部分药物溶释出来。

本发明在以混聚酸酐为药物的载体制备适合于注射使用的混聚酸酐颗粒系统时，发明了解决这些问题的方法。本发明根据对脂溶性、水溶性、和两性化合物相互间溶出率影响规律的理解，根据药物的性质和使用的要求，在制造混聚酸酐颗粒过程中混合入不同比例的水溶性，酯溶性或两性化合物。加入这些化合物对药物的包载率，包载药物的混聚酸酐颗粒系统的收率，混聚酸酐颗粒的内部和外部形态(morphology)，以及药物释出速度影响很大。可以用来制造适合于不同注射应用目的的混聚酸酐颗粒系统。

例如，当以混聚酸酐[1，3-双-对-羧酸苯氧丙烷：葵二酸]混聚酸酐]为紫杉醇的载体，制备适合于注射使用的混聚酸酐颗粒系统时，不同比例的胆固醇，普鲁兰，聚乙二醇，肉都冠酸异丙酯(IPM)和1，2-二棕榈酰磷脂胆碱(1，2-Dipalmitoylphosphatidylcholine DPPC)等分别或一同混入混聚酸酐对药物的包载率和混聚酸酐颗粒的收率的影响列于表1中，对药物释出速度的影响展示在图5和图6中。

表1.混加物在制备紫杉醇聚酸酐颗粒系统时对药物的包载率和收率的影响

乳化剂(％)	方法	混加物(％)	药物的包载率(％)	混聚酸酐颗粒的收率(％)
					VETPGS*(0.015％)	单乳	-------	12.85％	60.91％
VETPGS(0.03％)	单乳	-------	26.23％	88.42％
					PVA**(1％)	单乳	-------	48.29％	75.81％
PVA(1.5％)	单乳	-------	27.54％	78.97％

PVA(2％)	单乳	-------	14.89％	77.45％
					PVA(1％)	单乳	胆固醇(5％)	72.96％	69.64％
PVA(1％)	单乳	胆固醇(10％)	99.19％	77.60％
					PVA(1％)	双乳	普鲁兰(5％)	48.47％	86.36％
PVA(1％)	双乳	普鲁兰(10％)	90.99％	69.63％
					PVA(1％)	双乳	普鲁兰(15％)	95.02％	66.03％
PVA(1％)	双乳	聚乙二醇(PEG，5％)	66.41％	70.25％
					PVA(1％)	双乳	聚乙二醇(10％)	90.21％	69.53％
PVA(1％)	双乳	明胶(2％)	88.51％	89.53％
					PVA(1％)	单乳	IPM(5％)	21.77％	99.80％
PVA(1％)	单乳	DPPC(0.01％)	45.75％	82.25％
					PVA(1％)	单乳	DPPC(0.02％)	44.52％	78.21％
无	单乳	DPPC(0.05％)	65.81％	90.02％
					无	喷雾干燥	-------	87.17％	75.45％
无	喷雾干燥	IPM(5％)	81.62％	73.25％
					无	喷雾干燥	普鲁兰(5％)	75.16％	78.32％
无	喷雾干燥	胆固醇(5％)	91.71％	80.21％

^*VETPGS＝维生素E琥泊酸酐聚乙二醇酯；^**PVA＝聚乙烯醇。

从表1可见，在以PVA和VETPGS作为乳化剂制造混聚酸酐颗粒系统时，在处方中加入和不加入胆固醇，普鲁兰，聚乙二醇，明胶(gelatin)，肉都冠酸异丙酯和1，2-二棕榈酰磷脂胆碱，对混聚酸酐颗粒的载药量和收率的影响不只是百分之几，而是几十，或者是翻番。图5和图6更清楚地显示了，处方中加入和不加入胆固醇，普鲁兰，聚乙二醇，明胶(gelatin)，IPM，DPPC制造的混聚酸酐颗粒的药物释放的区别，差距非常悬殊。因此，在制造的混聚酸酐颗粒时，只要合理的利用这个原理，在处方中混加入适量的水溶性，酯溶性或两性化合物，就能制造出理想的混聚酸酐颗粒系统，它的收率、载药量、药物释放速率等都能满足指定的注射应用环境。

在本发明中，适应于不同注射环境应用的混聚酸酐颗粒中药物的释放速度(量)，不仅可以通过制得含药物物态比例不同的混聚酸酐颗粒和混加入适量的水溶性、酯溶性、或两性化合物来实现，还可以通过调整混聚酸酐颗粒系统载药量和混聚酸酐颗粒粒径大小来实现。

实验证明当混聚酸酐颗粒中载药量超过10％(包括10％)时，药物的释放速度(量)明显的同混聚酸酐颗粒中载药量成比例的变化。也就是随着混聚酸酐颗粒中载药量的增加，单位时间内药物的释放量增加。因此，可以通过调整混聚酸酐颗粒中载药量的高低来实现理想的药物溶释速度，用于指定的环境使用。例如：由双乳法制得的含不同浓度阿霉素的混聚酸酐颗粒的药物溶释(图7)。

在本发明中，实验证明混聚酸酐颗粒载药量在1-10％范围内时，载药量的高低对药物从混聚酸酐颗粒中溶释速度影响不显著，但是对于相同载药量的混聚酸酐颗粒系统，混聚酸酐颗粒粒径越小，药物释放越快；混聚酸酐颗粒粒径越大，药物释放越慢。因此对于载药量在1-10％范围内混聚酸酐颗粒的药物溶释可以通过制备粒径范围不同的混聚酸酐颗粒来调整。一般地说，制备混聚酸酐颗粒时，当其他条件相同的时候，乳液中混聚酸酐比例越低，制得的混聚酸酐颗粒粒径越小；有机溶液相中能与水混合的溶剂比例越高，制得的混聚酸酐颗粒粒径越小；水溶液中表面活性剂浓度越高，制得的混聚酸酐颗粒粒径越小。在所有条件都相同的时候，搅拌速度是影响制得的混聚酸酐粒径粒径的主要因素：搅拌速度低，生成的混聚酸酐颗粒粒径大；搅拌速度高，生成的混聚酸酐颗粒粒径小。

图8展示了载9％奥曲肽粒径范围不同的混聚酸酐颗粒药物溶释的比较。非常明显地看到混聚酸酐颗粒粒径大小对药物溶释速度影响很大.因此可以根据药物的特点和要求，在必要的情况下通过制备粒径不同的混聚酸酐颗粒，去实现药效要求。

本发明进一步揭示了，承载药物的混聚酸酐颗粒的酸酐降解和药物释放过程形成的微酸性微观环境是混聚酸酐作为药物载体一个巨大的优势。由于混聚酸酐键对水高度的敏感性，混聚酸酐颗粒的降解，发生在颗粒的表面，缠绕在表面的酸性降解产物形成一个微酸性微观环境。因此对很多碱性环境敏感药物的稳定性非常有利，例如：如紫杉醇，替莫唑胺，卡氮芥(carmustine，decomposes when pH greater than 7)，右丙亚胺(dexrazoxane)(阿霉素的减毒剂，pH高于7，迅速分解)。本发明还揭示了，混聚酸酐作为肽类药物的载体远远优越于PLGA类聚酯化合物。已有报道指出PLGA类聚酯化合物作为肽类药物的载体产生酰化副产物(Intemational Journal of Pharmaceutics，2005，297，62-72)，影响药效。本发明实验证明以混聚酸酐作为肽类药物的载体没有酰化副产物的产生。

附图说明

图1喷雾干燥图解。

图2三种不同喷雾干燥条件制得的包含10％氟他胺混聚酸酐颗粒光学电镜下的图像，a.几乎观察不到氟他胺的晶体；b.观察到一部分氟他胺的晶体；c.观察到大量的氟他胺晶体。

图3DSC(differential scanning calorimetry)热分析氟他胺，混聚酸酐载体，氟他胺与聚合物混合物，和承载氟他胺混聚酸酐系统。

图4含不定型态和结晶态比例不同的氟他胺的混聚酸酐颗粒药物释放曲线。a.图2中颗粒a的药物释放曲线；b.图2中颗粒b的药物释放曲线；c.图2中颗粒c的药物释放曲线。

图5以混聚酸酐为紫杉醇的载体，制备适合于注射使用的混聚酸酐颗粒时，混加入不同比例的脂溶性和水溶性物质对药物的释出率的影响。

图6以混聚酸酐为紫杉醇的载体，制备适合于注射使用的混聚酸酐颗粒时，混加入不同比例的脂溶性和水溶性物质对药物的释出量的影响。

图7含不同浓度阿霉素的混聚酸酐颗粒系统的药物溶释速率的比较。

图8含9％奥曲肽粒径范围不同的混聚酸酐颗粒系统药物溶释的比较。a.粒径为230-250μm；b.粒径为180-200μm；c.粒径为150-100μm；d.粒径为50-20μm；e.粒径<10μm。

图9EMS(scanning electron microscopy)分析喜树碱混聚酸酐颗粒系统形态。

图10包载5％紫杉醇的聚酸酐注射给药系统腹腔注射(i.p.)和癌组织直接注射(i.t.)抑制非小细胞肺癌生长的比较。

图11阿霉素的聚酸酐注射给药系统抑制癌生长活性。

图12包载9％喜树碱聚酸酐注射给药系统癌组织直接注射(i.t.)同腹腔注射(i.p.)抑制癌生长活性的比。

图13一次注射11％亮丙瑞林的聚酸酐注射给药系统后四周内血清中亮丙瑞林浓度和雄性动物血液中睾丸激素的浓度。

图14接受承载氟哌啶醇混聚酸酐给药系统和连续21天腹腔注射氟哌啶醇运动能力的比较。

具体实施例

喷雾干燥法制造适合注射的混酸酐颗粒系统

仪器：BUCHI MiniSpray Dryer B-191和B-290.

将0.1克氟他胺(flutamide)溶于含有1g聚[1，3-双-对-羧酸苯氧丙烷：葵二酸][p(CPP∶SA)20∶80]的20毫升二氯甲烷中，超声10分钟后，喷雾干燥。

喷雾干燥条件1：制备药物以不定形态为主的混聚酸酐颗粒：

入口温度(℃)：60

出口温度(℃)：45

液体注加速度(泵液参数)(ml/分钟)：1.8

加压雾化气(氮气)压力(大气压bar)：8

空气流量(m³/小时)：35

收集喷雾后得到的干粉颗粒，收率80％.所得颗粒在光学电镜(optical microscope)下观察结果如图2a所示，几乎见不到氟他胺的晶体。

喷雾干燥条件2：制备部分药物以结晶态存在的混聚酸酐颗粒：

入口温度(℃)：50

出口温度(℃)：40

液体注加速度(泵液参数)(ml/分钟)：2

加压雾化气(氮气)压力(大气压bar)：6

空气流量(m³/小时)：30，

收集喷雾后得到的干粉颗粒，收率80％.所得颗粒在光学电镜(optical microscope)下观察结果如图2b所示，观察到部分氟他胺的晶体。

喷雾干燥条件3：制备药物以结晶态为主的混聚酸酐颗粒：

入口温度(℃)：40

出口温度(℃)：35

液体注加速度(泵液参数)(ml/分钟)：2.2

加压雾化气(氮气)压力(大气压bar)：5

空气流量(m³/小时)：20，

收集喷雾后得到的干粉颗粒，收率80％.所得颗粒在光学电镜(optical microscope)下观察结果如图2c所示，观察到大量的氟他胺晶体。

单乳法制造适合注射的混酸酐颗粒系统

紫杉醇：

在室温下，首先将250mg聚[1，3-双-对-羧酸苯氧丙烷：葵二酸][p(CPP∶SA)20∶80]和25mg紫杉醇溶于5ml二氯甲烷中，所得的有机溶液缓慢的加入到搅拌下(搅拌速度800-10000转/分钟，Silverson Labortory MixerSL2T)的75ml含有表面活性剂PVA(1-2％)或者VETPGS(0.015-0.03％)的双次蒸馏水中。有机相加完，在继续搅拌5分钟后，将容器转移到15-40度水浴中并将搅拌速度降到600转/分钟，继续搅拌。待有机溶剂挥发干净后，混合物置于离心机上离心，倾出上清液，再加入双次蒸馏水与沉淀物充分混合后，再离心，反复操作3次。沉淀物经深冻后，置于冷冻干燥机上冷冻干燥。

利富平(rifampin)：

2.8g聚[1，3-双-对-羧酸苯氧丙烷∶葵二酸][p(CPP∶SA)20∶80]溶于12ml二氯甲烷中，然后加入150mg利富平，高速搅拌下形成均相溶液，生成的均相溶液加入到300ml含有PVA的水溶液中形成乳液，形成的乳液再转移到5升水中。离心分离收集微粒，然后冷冻干燥。

双乳法制造适合注射的混酸酐颗粒系统

奥曲肽(octreotide)：

在室温下，首先将80mg奥曲肽溶于1ml水中，所得的水溶液与含有800mg聚[1，3-双-对-羧酸苯氧丙烷∶葵二酸][p(CPP∶SA)20∶80]的10ml二氯甲烷溶液混合，所得的混合物在10000转/分钟高速下搅拌2分钟(Silverson Labortory Mixer SL2T)成乳。所得的乳剂加入到20ml1％的PVA(w/v)水溶液中，混合物至于高速旋涡机上在10000转/分钟高速下涡旋2分钟，所得的乳剂加入到500ml0.3％的PVA水溶剂中后，将容器转移到15-40℃水浴中，并将搅拌速度降到600转/分钟，持续搅拌。待有机溶剂挥发干净后，混合物置于离心机上离心，倾出上清液，再加入双次蒸馏水与沉淀物充分混合后，再离心，反复操作3次。沉淀物经深冻后，至于冷冻干燥机上冷冻干燥。

EMS(scanning electron microscopy)分析混聚酸酐颗粒系统形态

仪器：Cambridge Instruments，ISI Model DS-130.

干燥的样品置于铝管中，用金覆盖后，在氩气下分析(图9)。

光学显微镜(optical microscope)分析混聚酸酐颗粒系统内部结构

仪器：美国Bausch and Lomb，Rochester，NY

聚酸酐颗粒的内部物态在光学显微镜下观察和摄制。

差示扫描量热法(DSC，Differential scanning calorimetry)

仪器：Perkin Elmer System 4。

2-10mg样品密封在标准的铝制圆形样品池中，在连续的氮气流除气的状态下，以10℃/分钟的速度自-40℃到250℃恒定升温。记录的量热曲线经计算机热力分析软件分析。

高压液相测定聚酸酐颗粒系统中载药量的方法

以承载紫杉醇的聚酸酐颗粒系统为例

高压液相的条件：ODS反相柱(250x4.6mm)；流动相为乙腈：2mM磷酸(60∶40，v/v)；液流速度1ml/min；检测波长为227nm；布洛芬(ibuprofen)为内标物。

HPLC样品的配制：含紫杉醇的聚酸酐颗粒3mg，溶于1ml二氯甲烷中，然后加入3ml流动相，振荡混合后向混合液中通入氩气，直到溶解澄清。将液体转移到5ml容量瓶，加入0.25ml内标物(600ug/ml ibuprofen)，然后用流动相稀释到5ml。样品在HPLC进样前，要经过针头过滤器(13mm diameter and0.45 poresize)过滤，标准曲线由已知Taxol0.05ug/ml-50ug/ml决定。

药物释放实施例

以承载紫杉醇的聚酸酐颗粒系统为例

取混含5％紫杉醇聚酸酐颗粒系统20毫克，加入到20毫升含0.1％(v/v)吐温80pH7.4PBS缓冲液中.所得的混合物置于37℃的摇床上摇动。在事先指定的10个时间点取样。样品至于离心机上(转数4000rpm)离心10分钟后，取出上清液分析。再取新鲜的含0.1％(v/v)吐温80pH7.4PBS缓冲液(约19ml)补足样品瓶中总体积20毫升液体后，置于37℃的摇床上继续摇动.在取出的上清液中加入2毫升二氯甲烷，混合物激烈震动后，放置12小时。然后离心(转数4000rpm)10分钟，取出1毫升二氯甲烷使用HPLC分析含量。

动物活性实验

包载紫杉醇的聚酸酐系统：

包载5％紫杉醇的聚酸酐0.5％土温80的生理食盐水注射给药系统：种植人非小细胞肺癌症细胞A549的无胸腺Balb/c裸鼠的癌块长到200-300mm³(长X宽X高)，在给药之前，称重每一个动物决定其公斤体重的剂量(15mg/kg)。对于腹腔注射(i.p.)，动物接受的总注射量为0.1ml.对于癌组织直接注射(i.t.)，使用21号针头在动物癌组织中心在10-15秒内直接注射量为0.1ml，然后，针头在动物癌组织保持15-20秒后再拔出。给药以后，动物标记，每周使用游标卡尺测量记录癌组织生长状态三次，并且每周称量体重一次。结果如图10所示。

包载阿霉素的聚酸酐系统：

10周龄的雌性BALB/c小鼠购得后在笼中侍养两周，在大腿上种植EMT6癌细胞。当种植癌瘤的腿的直径长到9±10mm(约5±7天)开始治疗。控制组使用的是不含药的聚酸酐颗粒，治疗组接受含阿霉素的聚酸酐注射给药系统。聚酸酐颗粒悬浮在9％Pluronic F-127去离子水中，用20号针头在癌块内注射50±100L。从治疗开始的第一天，至少每两天测一次种植癌瘤的腿的直径，当控制组种植癌瘤的腿的直径超过15mm，相应的癌块重量达到1.7g时，处死动物(图11)。

包载喜树碱(Camptothec in)的聚酸酐系统

当种植癌组织的雌性小鼠体内的癌块达到约100mm³，将鼠(体重20g)分为4组。一组为不接受药物的控制组；两组接受载有的微球的癌组织直接注射，使用26G注射针头，注射到癌组织的中心。完成注射时，注射针头停留3-4秒后再拔出，防止注射液流出。Camptothecin的注射量相当于24mg/kg.第四组腹腔注射50mlcamptothecin注射液(Camptothecin注射剂是camptothecin溶在8.3％Cremophor EL/8.3％乙醇的0.75％盐水中)，相当于60mg/kg.。癌块每天测量一次，当控制组的癌块达到起始时的四倍，处死动物，取出癌块，称重比较(图12)。

包载布比卡因(bupivacaine)的聚酸酐系统

四只雄性大鼠(150-250g)先使用50-70mg/kg戊巴比妥(pentobarbital)麻醉。臀部和膝部间的后侧去毛后，在后腿腱肌肉注射含布比卡因(bupivacaine)20％的微球300mg.然后使用大鼠前爪触热试验测量麻醉镇痛效果(Masters et al.，Pharmaceutical Research，1993，10(10)，1527-1532)。

包载亮丙瑞林的聚酸酐系统：

雄性大鼠：使用包载11％亮丙瑞林的混聚酸酐给药系统给每只动物注射(s.c)1.35g亮丙瑞林.图13显示了四周内血清中保持了有效的亮丙瑞林浓度，显著性的控制了雄性动物血液中睾丸激素的浓度。

包载氟哌啶醇(haloperidol，HAL)的聚酸酐系统：

动物：50雄性大鼠(200-250克).

氟哌啶醇诱导的超敏感性：一组大鼠(10只)，每天一次连续21天腹腔注射氟哌啶醇(1.0mg/kg体重)，诱导产生多巴胺超敏感性，控制组(9只大鼠)接受注射相同数量的生理盐水，治疗组大鼠(15只)接受一次皮下注射承载氟哌啶醇混聚酸酐给药系统(载氟哌啶醇100mg)，另一组接受皮下注射无药混聚酸酐系统。测量运动能力：在动物接受承载氟哌啶醇混聚酸酐给药系统治疗的第24天，也就是腹腔注射组停药的第三天，以上四组动物全部接收腹腔注射阿朴吗啡(apomorphine)(0.5mg/kg)，20分钟后使用运动能力测量仪(Moti-test system)测量运动能力20分钟。结果如图14所示，一次皮下注射承载氟哌啶醇混聚酸酐给药系统产生的氟哌啶醇诱导的运动能力同每天一次连续21天腹腔注射氟哌啶醇基本相同。

Claims (13)

1.一个以混聚酸酐为中小分子药物的载体制造注射给药制剂的方法和应用；其特点之一是承载于混聚酸酐中的药物结晶态和不定型态的比例，承载的药量，和混聚酸酐承载微粒系统粒径的大小是按照承载的药物的溶出速度，注射应用的范围和环境控制性制造的；另外的特点是承载于混聚酸酐中的药物量和药物的溶出速度可以通过混加不同比例的脂溶，水溶或两性物质控制性完成。

2.权利要求1中作为中小分子药物的载体的混聚酸酐包括由任意两个不同有机酸通过聚合反应生成的混聚酸酐，聚[1，3-双-对-羧酸苯氧丙烷∶葵二酸][p(CPP∶SA)20∶80]，聚[十八碳烯(9)酸二聚体∶葵二酸][p(FAD∶SA)50∶50]，聚[芥酸二聚体∶葵二酸][p(EAD∶SA)50∶50]和聚[富马酸-葵二酸酸酐][p(FA∶SA)]等，尤其是聚[1，3-双-对-羧酸苯氧丙烷∶葵二酸][p(CPP∶SA)20∶80]。

3.权利要求1中混聚酸酐载体承载的中小分子药物包括分子量100-2000道尔顿(Dalton)的抗生素(antibiotics)，抗癌药(antitumor)，抗炎药(Antiinflammation)，甾体激素，肽类药物，中枢神经系统药物[镇静药(sedative)，镇痛药(analgesia)，抗癫痫(Antiepileptic)，抗帕金森(Antiparkinson)，抗精神病(Antipsychotics)，抗忧郁(Antidepressant)，戒毒和戒烟药物(antiaddiction)]麻醉(Anesthetics)，抗甲状腺，糖尿病∶抗疟∶抗过敏∶镇咳∶降压∶抗血管生成药。

4.权利要求1中以混聚酸酐为中小分子药物的载体制造注射给药的制剂，包括混有和不混有抗菌保护剂，抗氧化剂，助(tonicity)效剂，助溶剂，缓冲剂，稳定剂等可注射给药的溶液，悬浊液，和乳液.

5.权利要求1和4中以混聚酸酐为中小分子药物的载体制造注射给药制剂的液体系统，包括生理盐水，醇类，和混合一定比例的土温(Tween)，甘露(糖)醇，羧甲基纤维素钠，植物油，甘油，聚乙二醇，及油酸酯的生理盐水和醇类。

6.权利要求1，4和5中以混聚酸酐为中小分子药物的载体制造注射给药制剂，可以注射到身体的任何一个器官和部位，包括：静脉，肌肉，皮内，皮下，关节内，滑液内，脊柱内，鞘内，动脉内，心内，以及颅内，病灶内，肿瘤内等。

7.权利要求1中以混聚酸酐为中小分子药物载体，制造含相对固定比例的结晶态和不定型态的药物的注射给药制剂，是通过控制喷雾干燥，单乳化法和复(双)乳化法的条件和工艺，制造出含不定形态药物比例高的药物溶出快的系统，含结晶态药物比例高的药物溶出慢的系统，和含不定形态和结晶态药物比例适中的载药系统。

8.权利要求1和7中以混聚酸酐为中小分子药物载体，由喷雾干燥法制造药物以不定型态为主，适合注射给药制剂的条件和工艺是配制相对低浓度药物的喷雾液，选用沸点相对低的溶剂，采用相对低的加液速度，采用相对高的雾化气压力，采用相对高的热气流量，采用相对高的进气和出气的温度。制造药物以结晶态药物为主的制剂是配制相对高浓度的药物喷雾液，选用沸点相对高的溶剂，采用相对高的加液速度，采用相对低的雾化气压力，采用相对低的热气流量，采用相对低的进气和出气的温度。

9.权利要求1和7中以混聚酸酐为中小分子药物载体，由单乳化法和复(双)乳化法制造药物以不定型态为主适合注射给药的制剂条件和工艺是调整和控制有机溶剂挥发和乳粒硬化的速度，乳粒硬化的速度快，制备的混聚酸酐颗粒中药物的不定形态高，乳粒硬化的速度慢，制备的混聚酸酐颗粒中结晶态药物比例高.

10.权利要求1中，以混聚酸酐为中小分子药物的载体，制造承载药量剂量高低不同的注射给药制剂系统，是获得理想的药物溶释速度和适合理想的注射应用的范围和环境的一个重要手段，承载的药量超过10％(包括10％)时，药物的释放速度(量)明显的同混聚酸酐颗粒中载药量成比例的变化。

11.权利要求1中，以混聚酸酐为中小分子药物的载体，制造粒径不同的承载药物注射给药制剂系统，是获得理想的药物溶释速度和适合理想的注射应用的范围和环境的一个重要手段，混聚酸酐颗粒载药量在1-10％范围内时，对于相同载药量的混聚酸酐颗粒，混聚酸酐颗粒粒径越小，药物释放越快；混聚酸酐颗粒粒径越大，药物释放越慢。

12.权利要求1中，以混聚酸酐为中小分子药物的载体，制造的注射给药制剂系统中承载的药物量和药物的溶出速度可以通过混加不同比例的脂溶，水溶或两性物质控制性的完成。

13.权利要求1和13中，混加入以混聚酸酐为中小分子药物的载体，制造的注射给药制剂系统中的脂溶，水溶或两性物质控制性包括胆固醇，普鲁兰，聚乙二醇，明胶(gelatin)，IPM，DPPC，维生素E琥泊酸酐聚乙二醇酯(VETPGS)，聚乙烯醇(PVA)等。

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