CN101108200A - 繁缕磺酸或硫酸多糖酯总酚苷组合物及其制备方法和抗病毒应用 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种广谱抗病毒天然药物。目前全世界都缺乏临床高效、安全的广谱抗病毒药物。本发明是从植物繁缕或其它一种繁缕属植物中用两种树脂吸附的方法及一种水提醇沉法提取的硫酸多糖酯或磺酸多糖酯及其盐类，与酚类尤其是与包括芹菜素在内的总黄酮以碳苷键或/和氧苷键形成的分子量分布在50,000以下，但主要为分子量分布在4,000以下的一类总酚苷成分，与包括芹菜素在内的总黄酮及其不含硫元素的糖苷类成分形成的棕黄色组合物作为广谱抗病毒药物应用。组合物可作为治疗艾滋病毒、肝炎病毒、包括高致病性禽流感病毒在内的流感病毒、副流感病毒、腺病毒等呼吸道病毒及尖锐湿疣病毒、肠病毒、腮腺炎病毒、单纯性疱疹病毒、带状疱疹病毒和水痘-带状疱疹病毒等病毒病的药物应用，且未见毒性，并可制成10种药物剂型及消毒剂和保健品等。

Description

繁缕磺酸或硫酸多糖酯总酚苷组合物及其制备方法和抗病毒应用

一、技术领域：

本发明涉及从植物繁缕或其它一种繁缕属植物中提取的硫酸多糖酯或磺酸多糖酯及其盐类，与酚类尤其是与包括芹菜素在内的总黄酮以碳苷键或/和氧苷键形成的分子量分布在50,000以下，但主要为分子量分布在4,000以下的一类总酚苷成份，与包括芹菜素在内的总黄酮及其不含硫元素的糖苷类成份形成的棕黄色组合物作为广谱抗病毒药物应用。

其中繁缕硫酸多糖酯的总酚苷类成份或繁缕磺酸多糖酯的总酚苷类成份与包括芹菜素在内的总黄酮及其不含硫元素的糖苷类成份的比例为9.0～9.8比1.0～0.2。

二、背景技术：

经检索美国《化学文摘》(Chemical Abstracts)从1920年起至2001年第134卷为止，所报道的繁缕属植物的化学成分主要是黄酮及黄酮甙类、皂甙及皂甙原类、环缩氨酸类、阿魏酸及其酯类、绿原酸、新绿原酸、咖啡酸、奎宁酸、抗坏血酸类、草酸及草酸钙、单酰基半乳糖类脂物、生物碱类、吡喃半乳糖-SN-丙三氧基类、菠菜甾醇、豆甾烯醇、谷甾醇类等等。

本发明人曾在公开号为CN 1377680A及CN 1498630A两份专利中公开了从繁缕属植物繁缕或其它一种繁缕属植物中提取的分子结构中含较多硫元素和钙元素的总有机酚酸及其糖苷类化合物以及总黄酮及其糖苷类等大极性化合物的组合物作为抗病毒药物的应用。

另有公开号CN1521193A的专利公开并声称用热稀醇从繁缕属植物中提取到分子量分布在4000～2000000并含肽的灰白色多糖类成份具有抗病毒作用。

但至今尚未见从繁缕属植物中提取分离到硫酸多糖酯或磺酸多糖酯及其盐类，与酚类尤其是与包括芹菜素在内的总黄酮以碳苷键或/和氧苷键形成的分子量分布在50,000以下，但主要为分子量分布在4,000以下的一类总酚苷成份，作为广谱抗病毒药物应用的报道。

三、发明内容：

1、本发明要解决的技术问题：提供一种从繁缕或其它一种繁缕属植物提取分离的硫酸多糖酯或磺酸多糖酯及其盐类，与酚类尤其是与包括芹菜素在内的总黄酮以碳苷键或/和氧苷键形成的分子量分布在50,000以下，但主要为分子量分布在4,000以下的一类繁缕硫酸多糖酯总酚苷成份或繁缕磺酸多糖酯的总酚苷成份与2％～10％的包括芹菜素在内的总黄酮及其不含硫元素的糖苷类成份组成的棕黄色组合物，作为广谱抗病毒药物应用，并具有更好的广谱抗病毒作用，还提供一种得率更高的制备方法。

2、本发明采用的技术方案：在本发明人已经公开的CN 1377680A及CN1498630A两份专利基础上，经深入研究后，根据有关波谱数据及药效、毒理等试验结果，进一步提供一种从植物繁缕Stellaria media(L.)Cyr.及其它一种繁缕属植物中提取分离得到的硫酸多糖酯或磺酸多糖酯及其盐类与酚类，尤其是与包括芹菜素在内的总黄酮以碳苷键或/和氧苷键形成的分子量分布在50,000以下，但主要为分子量分布在4,000以下的繁缕硫酸多糖酯总酚苷类成份，或繁缕磺酸多糖酯的总酚苷类成份与2％～10％的包括芹菜素在内的总黄酮及其不含硫元素的糖苷类成份组成的棕黄色组合物(以下称“组合物”)，作为广谱抗病毒药物应用，并具有更好的抗病毒作用。

同时还提供改善树脂柱上洗脱条件后提高组合物得率和用水提醇沉工艺的制备方法。

本发明所述的组合物，是从下列一种植物中提取，这些植物包括了繁缕属植物Stellaria L.及牛繁缕属植物Malachium Fries的以下79种，即繁缕Stellariamedia(L.)Cyr.、雀舌草Stellaria alsine Grimm.、褐瓣雀舌草Stellaria alsinevar.phaeuspetala Hand.-Mazz.、安徽繁缕Stellaria anhwiensis Migo.、钝萼繁缕Stellaria amblyosepala Schrenk.、细尖繁缕Stellaria apiculata Wils.、鹅肠草Stellariaaquatica(L)Scop.、沙生繁缕Stellaria arenaria Maxim、阿里山繁缕Stellariaarisanensis Hayata.、薄叶阿里山繁缕Stellaria arisanensis var.leptophylla Hayata.、北繁缕Stellaria borealis Bigel.、短瓣繁缕Stellaria brachypetala Bge.、长瓣繁缕Stellaria bungeana Fenzl.、东北繁缕Stellaria cherleriae(Fisch.)Will.、华繁缕Stellaria chinensis Regel、台湾繁缕Stellaria cicrantha Hayata、厚叶繁缕Stellariacrassifolia Ehrh.、皱叶繁缕Stellaria crispate Wall.、大卫繁缕Stellaria davidiiHemsl.、偃卧繁缕Stellaria decumbens Edgew.、针状偃卧繁缕Stellaria decunbensvar.acicularia Edgew.et Hook.f.、西南繁缕Stellaria delavayi Franch.、石竹叶繁缕Stellaria dianthifolia Williams、二歧聚伞花繁缕Stellaria dichasioides Williams、双歧繁缕Stellaria dichotoma L.、窄叶双歧繁缕Stellaria dichotoma var.lanceolataBge.、线叶双歧繁缕Stellaria dichotoma var.stepheniana Willd.、铺散繁缕Stellariadiffusa Wills.、翻白繁缕Stellaria discolor Turcz.、泽繁缕Stellaria diversifloraMaxim.、裸蕊异花繁缕Stellaria diversiflora var.gymnandra Franch.、凹脉繁缕Stellaria depressa Schnid.、杜氏繁缕Stellaria duthiei Gandoger、线茎繁缕Stellariafilicaulis Mak.、线柄繁缕Stellaria filipes Komar.、多花繁缕Stellaria florida Fisch.、禾叶繁缕Stellaria graminea L.、疏柔毛禾叶繁缕Stellaria graminea var.pilosulaMaxim.、变绿禾叶繁缕Stellaria graminea var.viridescens Maxim.、江孜繁缕Stellaria gyantsensis Williams、霞草繁缕Stellaria gypsophiloides Fenzl.、湖北繁缕Stellaria henryi Williams、兴安繁缕Stellaria hsinganensis Kitagawa、内曲繁缕Stellaria infracta Maxim.、薄叶繁缕Stellaria leptophylla Hance、东繁缕Stellariamaximowixziana Franch.、繁缕Stellaria media(L.)Cyr.、小花繁缕Stellariamicrantha Hayata、柔繁缕Stellaria mitans Williams、鹅肠繁缕Stellaria neglectaWeihe、新沼生繁缕Stellaria neo-palustris Kitagawa、八蕊繁缕Stellaria octandraFobedim.、红莓繁缕Stellaria oxycoccoides Komar.、沼生繁缕Stellaria palustris L.、展叶繁缕Stellaria patentifolia Kitagawa、柄花繁缕Stellaria peduncularis Bge.、柄叶繁缕Stellaria petiolaris Hand-Mazz.、长毛繁缕Stellaria pilosa Franch.、假石生繁缕Stellaria pseudosaxatilis Hand.-Mass.、小繁缕Stellaria pusilla Schmid.、燧瓣繁缕Stellaria radians L.、网脉繁缕Stellaria reticulivena Hayata、岩繁缕Stellariarupestris Hemsl.、石生繁缕Stellaria saxatilis Buch.-Ham.、抱茎石生繁缕Stellariasaxatilis var.amplexicaulis Hand.-Mazz.、准葛尔繁缕Stellaria soongorica Roshev.、苏氏繁缕Stellaria souliei Williams、星毛繁缕Stellaria stellato-pilosa Hayata、园萼繁缕Stellaria strongylosepala Hand.-Mazz.、拟伞花繁缕Stellaria subumbellataEdgew.、小茸毛繁缕Stellaria tomentella Ohwi、三型繁缕Stellaria trimorpha Nakai、土耳其斯坦繁缕Stellaria turkestanica Schischk.、湿地繁缕Stellaria uda Williams、伞花繁缕Stellaria umbellata Turcz.、绿花繁缕Stellaria virdiflora Pax et O.Hoffm.、巫山繁缕  Stellaria wushanensis Williams、五台繁缕  Stellaria wutaicaHand.-Mazz.、云南繁缕Stellaria yunnanensis franch.j或牛繁缕属植物牛繁缕Malachium aquaticum(L.)Fries等。

深入研究发现这种从繁缕及其它一种繁缕属植物中提取分离到的组合物作为广谱抗病毒药物应用具有以下特点：

1)、本人曾在CN 1377680A及CN 1498630A两份专利中公开了该组合物中含较多的硫元素和钙元素，现经深入研究发现是由其形成了繁缕硫酸多糖酯类或磺酸多糖酯类结构及其钙盐，并可被其它金属如钾、钠、铜、铁等取代钙形成其它金属盐类。

2)、由于上述硫酸多糖酯或磺酸多糖酯的酚苷类在其核磁共振波谱上除有酚羟基信号外，还出现饱和的或/和不饱和的糖羟基信号，表明这是形成了饱和的或/和不饱和的硫酸多糖酯或磺酸多糖酯的一类总酚苷成份。

3)、繁缕硫酸多糖酯或磺酸多糖酯及其盐类尤其是与包括芹菜素在内的总黄酮类以碳苷键或/和氧苷键形成了一类总酚苷成份。

4)、组合物经葡聚糖凝胶测得其分子量分布应在50,000以下，但主要为分子量分布在4,000以下的繁缕硫酸多糖酯总酚苷类成份或繁缕磺酸多糖酯的总酚苷类成份

5)、组合物经Sephadex LH20分离后可得到2％～10％的包括芹菜素在内的总黄酮及其不含硫元素的糖苷类成份，所以组合物中繁缕硫酸多糖酯的总酚苷类成份或繁缕磺酸多糖酯的总酚苷类成份与总黄酮及其不含硫元素的糖苷类成份的比例为9.0～9.8比1.0～0.2。

6)、组合物抗病毒作用的强度，与其化合物结构中的硫酸多糖酯或磺酸多糖酯部份所占比例成正比、与酚类部份所占比例呈反比；因此，随着分子量逐步增大，当其结构中的硫酸多糖酯或磺酸多糖酯的糖苷部份所占比例由50％～55％增至80％～90％、酚部份所占比例由50％～45％减少至仅占约20％～10％时，其溶液颜色也由鲜黄色逐步变成棕红色至深棕红色，其抗病毒作用也逐步增强，而组合物中总黄酮及其不含硫元素的糖苷类成份的抗病毒作用最弱。

7)、组合物在聚酰胺薄层层析时，层析斑点在365nm紫外光下很清楚地显现深棕红色、棕褐色、棕色、棕黄色、及黄色等荧光斑点，在254nm紫外光下也可显现同样颜色的荧光斑点，只是较弱。

8)、组合物中有部份化合物具有聚合性，可聚合并得到一种在365nm紫外光下呈“棕黑色”的荧光斑点的组分，薄层层析时该组分往往停留在原点或Rf值0.15以下，这是前所未见的特殊色荧光斑点，表明此类化合物具有更大的分子量、并且其抗病毒作用也最强；但当其聚合到分子量达到50,000甚至更大时即呈现一种近黑色块状或粉末状物，其溶解性也降低。

9)、组合物易溶于水形成棕色、棕红色或深棕褐色透明溶液。

10)、从组合物中分离得到的单体化合物水溶液在260nm～273nm和327～335nm有两个紫外吸收峰，表明其是具有苯甲酰和桂皮酰结构的黄酮类化合物，进一步研究可知其中至少包括芹菜素，并以碳苷键或氧苷键与糖类形成总黄酮苷类化合物。

11)、因组合物中分离得到的单体化合物既可与三氯化铁试液反应显现酚类的深茶色或深茶棕色，并在405nm～430nm左右出现新的吸收峰，同时又可与苯酚-浓硫酸反应呈现糖的棕黄色并在480nm左右出现新的吸收峰，所以组合物是由一种总酚苷类化合物组成。

3、组合物具有以下有益效果：

组合物可抗病毒包括：艾滋病毒、肝炎病毒、包括高致病性禽流感病毒在内的流感病毒、副流感病毒、腺病毒等呼吸道病毒及尖锐湿疣病毒、肠病毒、腮腺炎病毒、单纯性疱疹病毒、带状疱疹病毒和水痘-带状疱疹病毒等。

四、具体实施方式：

一)、组合物的制备方法包括下列三种：

1、其第一种制备方法：将植物繁缕或其它一种繁缕属植物的鲜草或干鲜草洗净泥沙、粉碎后提取水溶液，将此水溶液经沉淀、离心或过滤后得到液体A；将液体A通过预先已处理好的大孔树脂柱以吸附所述组合物的成份，用水洗柱，将大孔树脂柱加温后用热蒸馏水洗柱以洗净杂质，收集流出的深褐色蒸馏水液，再用加温后浓度在59％以下的低级醇从树脂柱上洗脱，并收集洗脱得到的棕红色或暗棕红色溶液，将此棕红色或暗棕红色溶液回收乙醇后与收集的深褐色水液合并，浓缩至比重达0.8左右静置后再离心去除沉淀物，继续浓缩至比重1.00至1.20后通过喷雾干燥或真空干燥即得，组合物性状及性质为：一种具中药干浸膏常见的棕黄色粉粉末，有通常中药干浸膏气味，其性质稳定、易溶于水、略有苦味；

其中柱温为40℃～59℃，低级醇包括59％以下的甲醇、乙醇、丙醇、正丁醇、异丁醇；优选50℃～55℃的柱温及相同温度的50％～55％乙醇。

2、其第二种制备方法：将植物繁缕或其它一种繁缕属植物的鲜草或鲜干草洗净、粉碎后提取水溶液，将此水溶液经沉淀、离心或过滤后得到液体A；将此液体A经阴离子交换剂柱，使所述组合物成份吸附在柱上，用氯化钠溶液将所述组合物成份从加温后的柱上洗脱下来，再经脱盐处理、浓缩至比重0.8左右后静置，离心去除沉淀物，再继续浓缩至比重达1.00至1.20后经喷雾干燥或真空干燥即得，组合物性状及性质为：一种具有中药干浸膏常见棕黄色粉末，有通常中药干浸膏气味，其性质稳定、易溶于水，略有苦味；

其中阴离子交换剂柱包括弱阴离子交换树脂柱和阴离子交换纤维素柱；柱温为40℃～59℃，优选50℃～55℃。

3、其第三种制备方法：将植物繁缕或其它一种繁缕属植物的鲜草或鲜干草洗净、粉碎后提取水溶液，将此水溶液经沉淀、离心或过滤后减压浓缩至比重约0.8左右，加入低级醇并使低级醇浓度达到75％，溶液即出现大量浑浊，静置12小时左右，吸出上层清液，沉淀物经离心或过滤得组合物粗品，将此粗品再用纯水溶解后加入低级醇使达85％浓度进行二次醇沉，静置12小时左右吸出上层清液，将沉淀物经减压抽滤并及时先后加适量无水乙醇和丙酮洗涤，抽滤至干，并立即经适当温度真空干燥即得粉末状组合物。

4、组合物作为抗病毒药物应用至少可做成以下剂型：

1).针剂，可用于治疗艾滋病、肝炎、SAS病毒引发的非典型肺炎、高致病性禽流感病毒H5N1型等引发的病毒性肺炎等各种病毒性疾病。

2).粉针剂，可用于治疗艾滋病、肝炎、SAS病毒引发的非典型肺炎、高致病性禽流感病毒H5N1型引发的病毒性肺炎等各种病毒性疾病。

3).气雾剂，用于小儿治疗流感、腮腺炎等，并可作为空气及口腔抗病毒的消毒剂、保健品或抗病毒功能性食品。

4).含片或咀嚼片，用于治疗腮腺炎等，可作为空气及口腔抗病毒的消毒剂、保健品或抗病毒功能性食品。

5).胶囊剂，口服用于治疗艾滋病、肝炎、流感等各种病毒性疾病。

6).微囊剂，用以缓释药物治疗慢性病毒疾病。

7).滴鼻剂，用于治疗流感等，还可作为鼻腔抗病毒的消毒剂、保健品等。

滴鼻剂也可通过雾化器雾化吸入给药，用以治疗治疗病毒性肺炎，如SAS病毒引发的非典型肺炎、高致病性禽流感病毒H5N1型引发的病毒性肺炎等。

8).膜剂或涂膜剂等，用于疱疹、尖锐湿疣等皮肤病的治疗。

9).胶浆剂，用于治疗疱疹等皮肤病。

10).水剂，用于临床直接涂抹治疗疱疹、尖锐湿疣等皮肤病。

11).液体口香糖，可作为口腔抗病毒消毒剂、抗病毒保健品或功能性食品。

12).口香糖，可作为口腔抗病毒消毒剂、抗病毒保健品或功能性食品等。

二)、组合物的实施例：

1、用第一种方法的实施例1：取拣净杂质的繁缕鲜草30kg用自来水洗净泥土后，粉碎、离心、过滤，提取得药液，残渣弃去并可制成青饲料或归田作肥料；将药液经过沉淀、离心或过滤后即得到液体A，将此液体A不断地通过id30cm×120cm的市售大孔树脂柱，控制流速在3ml/min至6ml/min。可见大孔树脂柱由上而下逐渐变成一种棕红色或深棕褐色直至柱子吸满药物。弃去柱子中流出的液体，并先用自来水洗净柱中的残液。用约2倍柱体积的55℃蒸馏水洗涤大孔树脂柱，弃去最先流出的无色及色泽较浅淡的水液，收集随后流出的深褐色水液。此时大孔树脂柱已被加温至45℃～50℃，继用55℃约为柱体积3倍量的50％乙醇洗脱并收集棕红色乙醇溶液，本例用量约为300L 50％的乙醇。将乙醇溶液经减压干燥器回收乙醇，所得浓缩液与收集到的深褐色水液合并浓缩至比重0.85，约为1010ml左右，静置过夜，然后以4000r/min离心5分钟，弃去沉淀物，上清液经0.5μm滤膜过滤于已灭菌的洁净容器中，在无菌条件下再经减压浓缩成比重为1.1的稠膏状，经喷雾干燥或真空干燥即得组合物；组合物为棕黄色疏松粉末，有中药通常的气味，计得80.38g，得率按鲜草计算为2.68‰，反复用此法共制得组合物606g。

2、用第二种方法的实施例2：取新鲜的繁缕干全草5kg，用自来水洗净泥土后，粉碎，离心，提取得药液；残渣弃去，并可提供制成青饲料或归田作肥料。将药液经过沉淀、离心或过滤后即得到液体A，将此液体A通过id 10cm×120cm的市售阴离子交换树脂柱，吸附所述组合物成份后，用约为柱体积3倍的新鲜蒸馏水或去离子水洗净弱碱性阴离子交换树脂柱，弃去从柱中流出的由浅黄色逐渐变淡直至几乎无色的洗柱液，本例用量约为30 L水；然后将树脂柱加温至45℃～50℃继用2倍于柱体积的并加热到约55℃的浓度为2N的NaCl溶液将吸附在柱上的所述组合物成份迅速洗脱并收集此深棕红色洗脱液，本例用量为20 L盐溶液。将此含盐溶液适当浓缩至750ml左右后置于半透膜袋中，先后对自来水和蒸馏水进行透析直至溶液对AgNO₃溶液反应很弱或无咸味为止；将透析后所得深棕红色溶液转移至减压干燥器中减压干燥至比重0.82呈粘稠状，约为400ml，静置过夜，然后以4000r/min离心5分钟弃去沉淀物；上清液再经0.5μm滤膜过滤于已灭菌的洁净容器中，在无菌条件下经减压浓缩达比重1.05，再经真空干燥或喷雾干燥得棕黄色粉末，有一般的中药气味，共得71.65g，得率按干草计算约为1.433％，用此法共制得精制品512.73g。

3、用第三种方法的实施例3：取植物繁缕鲜干草5kg洗净、粉碎后，用水15kg、15kg提取两次，合并所得水溶液，将此水溶液经沉淀、离心或过滤后得到液体；将此液体经减压浓缩至比重为0.8左右，加入95％乙醇，使乙醇的浓度达到75％，溶液即出现大量浑浊，静置12小时过夜，吸出上层清液弃去，将下层沉淀物经离心或过滤得组合物粗品，将此粗品再用400ml纯水溶解后加入低级醇使达85％浓度进行二次醇沉，静置12小时左右吸出上层清液，将沉淀物经减压抽滤干并及时先后加适量无水乙醇350ml和丙酮350ml洗涤，抽滤至干，并经55℃真空干燥即得粉末状组合物74.29g，用此法共制得465g。

多次取10g组合物粉末用30ml水溶解后，经id4.5×55cm的Sephadex LH20柱用水层析洗脱分离，均可最先得到呈乳光的深棕色溶液，是分子量分布最大的一部份，约在4,000～50,000，约占组合物的0.5％～2％；其后得到深棕色透明溶液，减压浓缩并真空干燥后得到近棕黑色块状或粉末状干浸膏，其分子量分布约在2,000～4,000，约占组合物的10％～20％，以上两部份是抗病毒作用最强的部份；其后得到棕红色溶液，减压浓缩并经真空干燥后得到深棕黄色块状或粉末状干浸膏，其分子量分布约在900～2,000并具有强抗病毒作用，约占组合物的65％～75％；以上三部份均是由硫酸多糖酯或磺酸多糖酯及其盐类，与酚类尤其是与黄酮类例如芹菜素等、以碳苷键或/和氧苷键形成的一类总酚苷类。最后得到鲜黄色溶液，经减压浓缩并真空干燥后得到黄色干浸膏，其为分子量分布最小，约在900以下，是包括芹菜素在内的总黄酮及其不含硫元素的糖苷类成份，其抗病毒作用最弱，约占组合物的2％～10％。

表1.给出从大孔树脂柱上洗脱组合物时，温度变化对得率的影响：

表1.实施例1中从柱上洗脱组合物时温度变化对得率的影响

编号	温度	药物色泽	得率(鲜草计)	备注
					12345	约15℃的室温30℃40℃50℃59℃	棕红色微黄深棕红色深棕红色深棕红色发暗深棕红色发暗	2.19‰2.47‰2.53‰2.68‰2.54‰	通常采用

表2.给从大孔树脂柱上洗脱组合物时乙醇浓度变化对得率的影响：

表2.实施例1中从柱上洗脱组合物时乙醇浓度变化对得率的影响

编号	乙醇浓度％	药物色泽	得率(鲜草计)	备注
					123456	20％30％40％50％60％70％	棕红色微黄深棕红色深棕红色深棕红色发暗暗深棕红色深棕红色发黑	2.25‰2.31‰2.34‰2.68‰2.45‰2.35‰	通常采用杂质较多

表3.给出用繁缕属14种植物提取组合物得率比较：

表3.实施例1中从繁缕属不同种植物提取组合物的得率比较

编号	植物品种	药物色泽	得率(鲜草计)	备注
					123456789101112	安徽繁缕繁缕北繁缕华繁缕西南繁缕石竹叶繁缕泽繁缕湖北繁缕东繁缕小花繁缕鹅肠繁缕巫山繁缕	深棕色深棕色，暗红深棕色，发黑棕黑色棕色深棕色深棕色，发暗暗棕色棕色微黄棕红色深棕色，发黑棕色	2.19‰2.68‰2.12‰2.30‰2.16‰2.35‰2.08‰2.19‰2.60‰2.43‰2.37‰1.99‰	质量较好

3、各种剂型的制备实施例如下：

3.1.针剂：将实施例提取分离得到的药物精制品200g用0.9％氯化钠注射液2000ml溶解后用离心机离心5分钟(4000r/min)，将离心后所得上层清液经0.5μm滤膜密封过滤于已灭菌的洁净容器中，经灌封机灌装于注射剂用安瓿中，视需要分别分装成1ml/支的1000支、0.1g/支，2ml/支的450支、0.2g/支，再经钴60照射灭菌即得注射剂。

3.2.粉针剂：将实施例提取分离得到的药物精制品200g用蒸馏水50ml溶解后经离心机离心5分钟(4000r/min)，将离心后所得上层清液经0.5μm滤膜密封过滤于已灭菌的洁净容器中，经喷雾干燥机喷干成药粉，再经灌封机灌封在安瓿中，再经钴60照射灭菌即可制成2ml的粉针剂，共计2000支，100mg/支。使用时用灭菌注射用水溶解后使用。

3.3.气雾剂：取4g药物精制品加入0.9％氯化钠注射液100ml溶解、离心、过滤于洁净的10ml装气雾剂瓶中，即制成10支气雾剂，200mg/支。可作为口腔抗病毒的消毒剂。

3.4.含片剂：取按实施例1制得的药物精制品100g与片剂的敷料、香料、矫味剂等一起用压片机制成含片2000片，50mg/片。可作为口腔抗病毒的消毒剂、保健食品或抗病毒功能性食品。

3.5.胶囊剂：取按实施例1制得的药物真空干燥后研成粉状的精制品100g在无菌条件下，灌装成1000粒胶囊，100mg/胶囊。可用于治疗各种病毒病，还可作为口腔抗病毒的消毒剂、保健食品或抗病毒功能性食品。

3.6.微囊剂：取按实施例1制得的经过精制处理的药物干粉3g使混悬于3.6g液状石蜡中；再另取阿拉百胶10g加入蒸馏水200ml，待溶解后煮沸半小时以破坏氧化酶，将温热的液状石蜡注入阿拉百胶液中，于组织捣碎机中乳化1～2分钟，制成水包油乳剂。再取明胶10g加入蒸馏水200ml，置于60℃水浴上溶解，并与上述阿拉百胶液混合于1000ml烧杯中，维持胶液在45℃～50℃，慢速搅拌。用新鲜配制的5％醋酸溶液5ml加至胶液中，调节溶液的PH值至约为4.1，产生凝聚作用。成囊后注入蒸馏水750ml，再移至冰浴中冷却，降温至5～10℃，使明胶囊膜冻凝。这时的微囊呈球状。再加37％的甲醛7ml进行固化。搅拌15分钟，使微囊定型。然后用20％的氢氧化钠溶液调节囊液至PH8.0左右。于低温搅拌1小时后，用离心机滤过，洗涤至中性无甲醛味。再加入囊重3％的硬脂酸镁作稀释剂，混合均匀后过16目筛，再50℃真空干燥，得此药物的微囊剂，得率72.2％，计16.6g微囊，180mg/g。

3.7.滴鼻剂：将按实施例1提取分离得到的药物精制品2g用0.9％氯化钠注射液100ml溶解后用离心机离心5分钟(4000r/min)，将离心后所得上层清液经0.5μm滤膜密封过滤于已灭菌的洁净塑料眼药水瓶中分装成10支滴鼻剂，200mg/支。

3.8.膜剂：取按实施例1制得的药物精制品30g、氮酮0.3ml加水100ml溶解后离心、经0.5μm滤膜过滤于洁净容器内，加入PVA(05-88)19.5g适当加热搅拌使其溶解，洁净条件下在平板玻璃上涂成宽100mm、长约100mm、厚约0.1mm的药膜。再将宽约100mm、长100mm、厚约0.05mm的避光包衣薄膜在药膜上下两面各覆一层作为包衣膜，然后封装成膜剂。其剂量为0.3g/cm²，临用时按需要及其剂量剪切使用。

3.9.胶浆剂：取白芨胶质(中等粉)2g分装于10个15ml的干燥玻璃瓶中，各加入甘油2ml作分散剂，振摇分散均匀后，另取氯仿水100ml加入3g药物精制品搅拌使其溶解，离心后经0.5μm滤膜分别过滤于分散均匀的白芨胶质玻璃瓶中，猛烈振摇，得药物胶浆剂，200mg/瓶。

3.10.水剂或滴鼻液：取按实施例1制得的精制处理的药物干粉10g使溶于250ml水中，即可分装成25瓶水剂，400mg/瓶。

3.11.液体口香糖：在水剂中加入香料、矫味剂等制成液体口香糖，可作为口腔抗病毒消毒剂、抗病毒保健食品或功能性食品等。

3.12.口香糖：100g口香糖胶、0.1ml薄荷油香料、戊糖1g作为矫味剂等制成口香糖可作为口腔抗病毒消毒剂、抗病毒保健食品或功能性食品等。

4、组合物作为药物应用的安全性

4.1、组合物小鼠口服给药的急性毒性实验：

摘要：小鼠口服给药的实验结果表明一日内连续两次灌胃给予小鼠组合物最大给药量为32g(干粉)/kg，相当于临床日用量的1916.17倍；连续观察7天，未发现动物出现毒性反应及死亡现象。表明组合物毒性很低，按拟定临床剂量服用是安全的。

4.1.1、试验目的：

观察一次或数次给予小鼠组合物饱和溶液后，试验动物所产生的急性毒性反应和死亡情况，为临床用量提供参考依据。

4.1.2、试验材料：

4.1.2.1、动物：健康普通级昆明种小鼠，体重18～22g，雌雄各半，由安徽省医学科学研究所实验动物实验室提供。合格证：皖医实动准字01号。

4.1.2.2、药物：组合物粉，批号：050224；由朱耕新先生提供，使用前用蒸馏水配制成所需浓度。

4.1.3、试验方法：

4.1.3.1、预试验：

组合物粉的饱和溶液(400mg/ml)：取小白鼠12只，禁食14～16小时，体重19-21克，雌雄各半。视性别和体重将动物随机分为3组，每组4只，组间剂距比1∶0.5。各组动物分别以0.4ml/10g体重灌胃给予组合物粉的溶液(400mg/ml、200mg/ml、100mg/ml)，观察口服受试药一周内，引起实验动物0％和100％死亡的致死剂量和动物所表现的症状。结果：3组动物服药后，均未发现有动物发生中毒症状和死亡情况，故采用最大给药量试验。

4.1.3.2、最大给药量试验(MTD)：

组合物粉：取小鼠20只，雌雄各半，体重18～20g。在24小时内，分别给各鼠连续灌胃给药两次(两次给药间隔为6小时)，每次灌胃给予组合物粉饱和溶液(400mg/ml)0.8ml/20g，累计灌服1.6ml，即时起观察小鼠中毒和死亡情况，连续观察7天。

4.1.3.3、试验结果：

(1).试验小鼠体重变化情况：

样品组动物给药后一周内，均无出现死亡，动物的活动、精神状态、饮食、排便等均未见异常。试验前与试验结束时小鼠体重变化分别见表4.：

表4.组合物粉急性毒性试验小鼠体重变化(X±S)

性别	实验前体重(g)	一周后体重(g)
			雌性雄性	18.7±0.8218.9±0.74	24.3±1.1125.8±1.01

(2).组合物粉的最大给药量计算：

小鼠最大耐受量：组合物饱和液每毫升含组合物粉400毫克，小鼠平均体重为20g，每次灌胃容积0.8ml，共计2次。小鼠日服组合物粉最大耐受量＝1.6ml×0.4g/ml/0.02kg＝32g/kg

安全限度：以成人平均体重60kg为标准，组合物粉的日用量为1g。小鼠平均体重为20g，日最大用药量为1.6ml×0.4g/ml。

安全限度＝0.64g/20g÷1g/60000g＝1916.17(倍)

4.1.3.4、结论：

上述数据表明组合物口服给药的动物体内急性毒性试验未见有明显毒性等，因此组合物是一种很安全的天然药物。

组合物粉小鼠口服给药，最大耐受量为32g/kg，较本发明人曾在CN1377680A及CN 1498630A两份专利中公开的口服给药最大耐受量为11.25g/kg更好约3倍，相当于临床给药日剂量的1916.17倍。实验结果说明：组合物粉在动物口服给药条件下未产生明显毒性反应，实验观察期间样品组实验动物体重自然增长，活动、精神状态、饮食以及排便等也未见明显改变，表明组合物毒性较低，按拟定临床剂量服用是安全的。

5、组合物滴鼻剂的一般药理实验及其结果：

5.1、对小鼠和大鼠精神神经系统的影响，

5.1.1、组合物滴鼻剂对小鼠和大鼠精神神经系统的影响，

5.1.1.1、对小鼠入睡个数的影响：

取KM小鼠100只，体重18-22g，雌雄各半，随机均分为5组，即(1)正常对照组：等体积蒸馏水；(2)戊巴比妥钠+蒸馏水组：1ml/kg；(3)戊巴比妥钠+组合物滴鼻剂I组：0.16g/kg；(4)戊巴比妥钠+组合物滴鼻剂II组：0.33g/kg；(5)戊巴比妥钠+组合物滴鼻剂III组：0.67g/kg。各组均按1ml/kg的容积分别滴鼻给药。15min后除正常对照组外各组腹腔注射阈下睡眠剂量的戊巴比妥钠25mg/kg，观察并记录注射戊巴比妥钠30min内每组入睡小鼠的个数(以小鼠翻正反射消失达1分钟以上者作为入睡反应)。结果见表5：

表5组合物滴鼻剂对小鼠入睡只数的影响

组别	剂量g/kg	动物数	入睡只数	入睡率(％)
					正常对照组戊巴比妥钠组组合物滴鼻剂I组组合物滴鼻剂II组组合物滴鼻剂III组	1ml/kg1ml/kg0.160.330.67	2020202020	01122	0551010

实验结果表明，组合物滴鼻剂三个剂量组对小鼠戊巴比妥钠阈下睡眠剂量无协同作用，与戊巴比妥钠组比较，无显著性差异(P＞0.05)，提示组合物滴鼻剂对小鼠无催眠作用。

5.1.1.2、组合物滴鼻剂对小鼠自发活动的影响：

取体重18～22g的昆明种小鼠40只，雌雄各半，随机分为4组：即(1)对照组：等体积蒸馏水；(2)组合物滴鼻剂I组：0.16g/kg；(3)组合物滴鼻剂II组：0.33g/kg；(4)组合物滴鼻剂III组：0.67g/kg。各组均按1ml/kg的容积分别滴鼻给药。用小动物测定仪观察小鼠给药后15min、30min、45min、60min、90min自发活动情况，记录小鼠5min内活动次数。结果见表6：

表6组合物滴鼻剂对小鼠活动计数的影响(

n＝10)

组别	剂量(g/kg)	活动计数(次数/5min)
								药前	15min	30min	45min	60min	90min
		对照组组合物滴鼻剂I组组合物滴鼻剂II组组合物滴鼻剂III组	----0.160.330.67	25.1±7.324.8±8.422.6±8.824.4±7.6	20.6±10.319.5±8.821.5±9.825.7±6.2	18.6±8.223.8±7.918.9±9.824.3±9.6	17.5±7.020.1±13.520.5±8.423.3±5.0							18.6±9.716.5±9.318.6±9.420.3±6.0	26.1±10.023.0±8.522.6±12.324.8±9.0

实验结果表明，组合物滴鼻剂各剂量组在给药后15min、30min、45min、60min、90min的小鼠活动计数，与对照组比较无显著性差异(P＞0.05)，提示组合物滴鼻剂对小鼠的中枢神经系统无影响。

5.1.1.3、对大鼠在转棒上掉落次数的影响

筛选合格的SD大鼠(经1次适应后，大鼠在转棒上至少停留3分钟者作为合格大鼠)40只，雌雄各半，随机均分为4组，即(1)对照组：等体积的蒸馏水；(2)组合物滴鼻剂I组：0.08g/kg；(3)组合物滴鼻剂II组：0.16g/kg；(4)组合物滴鼻剂III组：0.33g/kg。各组均按1ml/kg的容积滴鼻给药。分别在给药后15、30、45、60、90min时，观察大鼠5min内的掉落次数。结果见表7：

表7组合物滴鼻剂对大鼠在转棒上掉落次数影响(

n＝10)

组别	剂量(g/kg)	掉落次数(次/5min)
								药前	15min	30min	45min	60min	90min
		对照组组合物滴鼻剂I组组合物滴鼻剂II组组合物滴鼻剂III组	--0.080.160.33	0000	0.2±0.40.2±0.40.5±0.50.4±0.5	0.4±0.50.3±0.50.3±0.50.1±0.3	0.3±0.70.1±0.30.2±0.40.1±0.3							0.3±0.50.1±0.30.4±0.50.3±0.5	0.5±0.50.2±0.40.2±0.40.3±0.5

结果表明，组合物滴鼻剂三个剂量组在给药后30min、45min、60min、90min、120min不同时间段大鼠转棒掉落次数，与对照组比较无显著性差异(P＞0.05)，提示组合物滴鼻剂对大鼠的行为没有影响。

5.1.1.4、结论

(1)组合物滴鼻剂0.67g/kg，0.33g/kg，0.16g/kg三个剂量组对小鼠戊巴比妥钠阈下睡眠剂量无协同作用，与戊巴比妥钠组比较无显著差异(P＞0.05)，提示组合物滴鼻剂对小鼠无催眠作用。

(2)组合物滴鼻剂0.67g/kg，0.33g/kg，0.16g/kg各剂量组在给药后不同时间段对小鼠的自发活动计数，与对照组比较无显著性差异(P＞0.05)，提示组合物滴鼻剂对小鼠的中枢神经系统无影响。

(3)组合物滴鼻剂0.33g/kg，0.16g/kg，0.08g/kg各剂量组在给药后不同时间段大鼠转棒掉落次数，与对照组比较无显著差异(P＞0.05)，提示组合物滴鼻剂对大鼠的行为没有影响。

综上所述，组合物滴鼻剂对大鼠、小鼠的正常行为活动没有影响，与阈下睡眠剂量的戊巴比妥钠无协同作用，表明组合物滴鼻剂在受试剂量范围内对动物的精神神经系统无明显影响。

5.2、组合物滴鼻剂对麻醉犬心血管及呼吸系统的影响

5.2.1、方法和观察指标、观察时间及统计处理：

受试杂种犬禁食24小时，自由饮水。戊巴比妥钠(30mg/kg，iv)麻醉后，股动脉插管，经压力换能器与八道生理记录仪相连，备记血压(收缩压、舒张压、平均动脉压)、心率；呼吸带在剑突处经换能器测呼吸；针电极剌入皮下测标准II导联心电图。手术毕，待各参数稳定后滴鼻给药，观察各项指标。

①观察指标：心血管系统：观察收缩压、舒张压、平均动脉压、心率、心律等。呼吸系统：观察呼吸频率及呼吸幅度。

②分组、给药剂量和观察时间：实验动物随机均分为4组，每组动物数5只，雌雄不拘。

(1)对照组：给予等容积蒸馏水；

(2)组合物滴鼻剂低剂量组给予：0.16g/kg；

(3)组合物滴鼻剂中剂量组给予：0.33g/kg；

(4)组合物滴鼻剂高剂量组给予：0.67g/kg。

各组均按0.4ml/只一次经滴鼻给药。

观察时间为给药前和给药后5、15、30、45、60、90、120min。

③统计处理

所有数据资料采用Student’s-t检验。

Δ％＝(给药后不同时相测定值-给药前测定值)/给药前测定值×100％

5.2.2、试验结果

结果显示：组合物滴鼻剂低、中、高剂量组对受试麻醉犬的血压无明显影响，与对照组比较无显著性统计学意义(P＞0.05)。三个剂量组对受试麻醉犬的心率、心电图无明显影响，与对照组比较无显著性统计学意义(P＞0.05)。

组合物滴鼻剂三个剂量组对受试麻醉犬的呼吸频率及幅度无明显影响，与对照组比较无显著性统计学意义(P＞0.05)。

6、组合物作为抗病毒药物应用的实施

6.1、组合物具有更好的广谱抗呼吸道病毒效能

6.1.1、小鼠口服组合物体内抗流感病毒的实验研究

6.1.1.1、组合物组合物系纯中药提取物，为研究其抗流感病毒的作用，采用流感病毒感染小鼠病毒性肺炎模型，对口服组合物体内抗流感病毒作用进行了研究。

本发明人已在CN 1377680A及CN 1498630A两份专利中公开了从繁缕属植物繁缕或其它一种繁缕属植物中提取的分子结构中含硫元素的总有机酚酸及其糖苷类或总黄酮及其糖苷类等大极性化合物的组合物作为抗病毒药物的应用，包括细胞试验证明组合物能对分属RNA类的流感病毒、副流感病毒、鼻病毒、埃柯病毒、疱疹病毒和属于DNA类的腺病毒等两大类呼吸道病毒有较强的抑制作用，特别是对流感病毒、副流感病毒及腺病毒3具有强大的抑制，因此具有独特的广谱抗病毒性能。其滴鼻剂在小鼠动物体内抗流感病毒FM₁的试验结果显示50％小鼠保护率(ED₅₀)为0.51mg/kg，体内治疗指数高达4500以上证明组合物具有强大的抗流感病毒作用。

本次公开组合物口服给药在小鼠动物体内抗流感病毒FM₁的试验结果，由于口服给药后药物受消化道及肝脏首过效应的影响等，因此其治疗指数理应低于滴鼻剂给药的治疗指数，但其在保持临床效果的同时达到使用更方便的目的。

6.1.1.2、材料与药物

6.1.1.2.1、动物昆明种小鼠，体重18～22g，雌雄各半，雌性未孕。

6.1.1.2.2、药物受试药：组合物干粉，批号：050224，由朱耕新先生提供。样品试验动物各给药组剂量为128mg/kg、64mg/kg、32mg/kg和16mg/kg(按体表面积计算)，分别相当于人临床日用量的6倍、3倍、2倍和1倍。阳性对照药：双黄连口服液，哈药集团三精药业有限公司产品，规格：10ml/支，批号：03051841，试验动物给药剂量为9ml/kg(按体表面积计算)，相当于人临床日使用量的9倍。利巴韦林，四川美达康药业有限公司产品，规格：100mg/片，批号：030212。试验动物给药剂量为106mg/kg(按体表面积计算)，相当于人临床日使用量的9倍。以上药物均在使用前以蒸馏水配制成所需浓度。

6.1.1.2.3、病毒流感病毒甲1型鼠肺适宜株(FM₁)，引自国家流感中心，由本所病毒研究室传代保存毒株。血凝效价E＝1∶1280。

6.1.1.3、方法与结果

6.1.1.3.1、FM₁的增毒与保存

取9日龄鸡胚尿囊腔接种FM₁毒种液，34℃常规培养，48小时收集尿囊液。用微量血凝法收集血凝效价＞1∶1280的尿囊液，小管分装，置-70℃冰箱备用。

6.1.1.3.2流感病毒鼠肺适应株毒力的测定(LD₅₀)

取普通级昆明种小鼠30只，体重18～22g，雌雄各半，雌性未孕。视体重和性别将小鼠分层随机分为5组，每组6只，其中雌雄各3只。在无水乙醚浅麻醉下，用FM₁鼠肺适宜株流感病毒液50ul/只滴鼻感染小鼠，各组小鼠感染病毒的稀释度分别为1、10^-1、10^-2、10^-3、10^-4。小鼠感染病毒后，逐日观察和记录各组动物死亡数，连续观察14天。根据各组动物死亡总数，按Reed-Muench法计算小鼠感染病毒的半数致死量(LD₅₀)。

结果见表8.动物死亡百分率计算表

表8.动物死亡百分率计算表

病毒稀释度	活鼠	死鼠	累积和		死亡比例	死亡百分率
							活鼠	死鼠	感染数/死亡数
			110-110-210-310-4	03466	63200					0371319	115200	▲11/11*5/82/90/130/19	100％62.5％22.22％0％0％

^*分母为感染小鼠总数(包括死、活鼠)^▲分子为死亡小鼠数

从表8可见：各稀释度感染小鼠的死亡率分别为100％、62.5％、22.22％、0％和0％。，能使半数感染小鼠死亡的稀释度应在10^-1～10^-2之间。据此计算LD₅₀值。

第一步：按公式距离比例＝＞50％死亡百分率-50/＞50％死亡百分率-＜50％死亡百分率，将表中与LD₅₀值上(55％)和下(22％)相邻的数代入公式，求得距离比例数＝62.5-50/62.5-22.22＝0.31

第二步：将＞50％动物死亡的病毒稀释度之对数，加上距离比例数，再乘以稀释系数的对数，即求得LD₅₀值。＞50％动物死亡的病毒稀释度之对数为10^-1

LD₅₀＝1+0.31×1(稀释系数10的对数)＝1.31

根据计算结果，求得小鼠滴鼻吸入感染FM₁的LD₅₀为10^-1.31。

6.1.1.3.3、组合物对流感病毒感染所致小鼠病毒性肺炎的治疗作用

取普通级昆明种小鼠80只，体重18～22g，雌雄各半。按表1所示剂量，视动物性别和体重将小鼠分层随机分为8组，每组10只，雌雄各半。在无水乙醚浅麻醉下，以5倍LD₅₀同批鸡胚传代毒种流感病毒液50ul滴鼻吸入感染7组小鼠，正常对照组滴入等量生理盐水溶液。各给药组动物于病毒感染的同时给予灌胃给药，每日2次，每次0.4ml/20g体重，连续给药6天，正常对照组及病毒对照组均灌胃给予等容积蒸馏水。自感染病毒之日起，逐日观察和记录各实验组死亡动物数，连续观察14天。以14天内每组动物死亡的总数按下列公式计算死亡率(生存率)、死亡保护率和平均存活时间。死亡率(生存率)＝存活(死亡)数/实验动物数×100％；死亡保护率(％)＝(对照组死亡率-实验组死亡率)×100％；平均生存日＝同组内每只动物生存日数相加/实验动物数；延长生命率(％)＝(实验组平均存活天数-对照组平均存活天数)/对照组平均存活天数×100％。X²、t检验比较组间差异。结果见表9.、表10.：

表9.组合物溶液对流感病毒感染小鼠死亡保护率的影响

次数	组别	剂量mg/kg×d	死亡数/动物数	死亡率％	死亡保护率％
						1	正常对照组病毒对照组双黄连口服液利巴韦林片组合物液	--9ml×6106×612.5×625.0×650.0×6100×6	0/1212/1210/128/126/124/123/122/12	-10083.3366.6750.0033.3325.0016.67	--16.6733.3350.0066.6775.0083.33
2	正常对照组病毒对照组双黄连口服液利巴韦林片组合物液	--9ml×6106×616×632×664×6128×6	0/1212/128/127/127/125/123/122/12	-10066.6758.3358.3341.6725.0016.67	--33.3341.6741.6758.3375.0083.33

表10.组合物溶液对流感病毒感染小鼠平均生存时间的影响

次数	组别	剂量mg/kg×d	存活数/动物只数	存活率％	平均生存日X±S	延长生命率％
							1	正常对照组病毒对照组双黄连口服液利巴韦林片组合物液	--9ml×6106×616×632×664×6128×6	12/120/122/124/126/128/129/1210/12	--16.6733.3350.0066.6775.0083.33	＞14.0±05.08±1.16▲▲8.5±3.03**10.17±3.10**9.08±3.15**9.88±3.25**10.39±3.15**10.88±3.25**	--67.32100.2078.74100.23100.43100.65

2

正常对照组病毒对照组双黄连口服液利巴韦林片组合物液

--9ml×6106×616×632×664×6128×6

10/120/122/125/125/127/129/1210/12

--16.6741.6741.6758.3375.0083.33

＞14.0±05.2±0.92▲▲8.6±3.34*10.2±2.94**8.91±2.77*9.56±3.35**10.39±3.15**10.88±3.28**

--65.3896.1596.15100.15100.43100.65

与正常组相比：^▲▲P＜0.01；与病毒组相比：^*P＜0.05，^**P＜0.01

表9与表10结果显示：病毒对照组小鼠基本在病毒感染后5天左右全部死亡，而给予不同剂量的组合物溶液后，均可降低感染小鼠的死亡率，使感染动物平均生存日明显延长(以128mg/kg、64mg/kg剂量组极为显著)。其作用在一定范围内，可随着剂量的加大而增强。与病毒对照组相比，有显著统计学意义。组合物溶液64mg/kg、128mg/kg剂量组降低感染小鼠的死亡率和延长其平均生存时间作用与利巴韦林片相近，明显优于双黄连口服液组。

6.1.1.3.4、组合物对流感病毒感染致小鼠病毒性肺炎模型肺病变影响：

取健康普通级昆明种小鼠80只，体重18～22g，雌雄各半。按表11所示剂量，视动物性别和体重将小鼠分存随机分为8组，每组10只，雌雄各半。在无水乙醚浅麻醉下，以5倍LD₅₀同批鸡胚传代毒种流感病毒液50ul滴鼻吸入感染7组小鼠，正常对照组滴鼻吸入等量生理盐水。各给药组动物在病毒感染的同时分别给予灌胃给药，每天2次，给药容积每次0.4ml/20g体重，连续给药4天，正常对照组和病毒对照组均灌胃给予等容积生理盐水。感染动物隔离喂养，自由摄食，饮水。于末次给药后1小时，将动物称体重后固定，剪开胸部皮肤，切断左腋下动脉放血处死动物。解剖打开小鼠胸腔，取出全肺，剔除气管和肺门等淋巴组织后，用滤纸吸干肺脏表面液体，置天平称重，按肺重除以体重逐个计算肺指数和各组肺指数抑制率。用t检验比较组间差异性。留取肺组织标本，进行组织形态学观察和摄片。结果见表11.。

表11组合物溶液对流感病毒感染小鼠致病毒性肺炎肺指数影响

组别	剂量mg/kg×d	动物数只	肺指数g/100g	肺指数抑制率％	P值
						正常对照组		10	0.93±0.13

病毒对照组组合物溶液双黄连口服液利巴韦林片

16×432×464×4128×49ml×4106×4

10101010101010

1.60±0.26▲▲1.28±0.20*1.22±0.23*1.16±0.14**1.08±0.19**1.32±0.21*1.19±0.10**

19.8923.2525.8330.2517.525.63

P＜0.01P＜0.05P＜0.01P＜0.01P＜0.01P＜0.05P＜0.01

^▲▲与正常组比较；^**与病毒组比较

由表11结果可见：与正常组相比，病毒对照组小鼠的肺指数明显增加，统计学意义极显著。给予不同剂量的组合物溶液后，感染动物肺湿重指数均明显低于病毒对照组(P＜0.01～0.05)，其治疗效果可随着药物剂量的增加，肺指数值也相应的减少，呈现较好的相关关系。组合物溶液128mg/kg、64mg、32mg/kg剂量组动物治疗效果优于利巴韦林片，显著优于双黄连口服液组。

6.1.2、口服给药使用于流感病人的临床实际效果：

取1.32g的组合物用1号胶囊填装成胶囊剂6粒，每次口服一粒，每天3次，可在1天半内治愈一例流感病人，最快的只需半天即可治愈。二年来临床自用治疗病毒流感有100多例次，无论是在流感病程的第几天，一旦使用了组合物即可在1～2两天左右控制临床症状进而达到治愈流感的目的，并可正常工作和学习了；包括服药后十多分钟至三十分钟内即可完全消除头痛，继而通鼻、消除清鼻涕、眼泪及浑身痛等症状，在24小时至36小时内退烧。越是发病早期使用效果越好，最快的病例曾在发病当晚(头疼、浑身痛、39.5℃、流眼泪、鼻涕等)临睡前用一次药，仅1粒，第二天早上即正常工作学习了。组合物预防及治疗病毒流感可达高效甚至特效药程度。

6.2、口服和静脉注射给药的动物体内试验及其结果还表明组合物可明显降低动物体内乙肝病毒DNA，对肝炎病毒也有明显抑制效果：

6.2.1、材料和方法

6.2.1.1、药物：组合物由朱耕新先生提供的棕黄色药粉用生理盐水配制。

阳性对照药物拉米夫定由葛兰素康威制药公司产品，批号：B008923用生理盐水配制。

6.2.1.2、病毒：

鸭乙肝炎病毒鸭乙肝病毒DNA(DHBV-DNA)强阳性血清，-70℃保存。

6.2.1.3、动物：

1日龄北京鸭，购自北京前进种鸭动物饲养场。

6.2.1.4、试剂：

α^-32 P-dCTP购自北京福瑞生物技术工程公司，缺口翻译药盒购自普洛麦格公司(Promega Co.)；Sephadex G-50，Ficoll PVP购自瑞典Pharmacia公司；SDS西德Merck公司产品；鱼精DNA、牛血清白蛋白为中国科学院生物物理所产；硝酸纤维素膜0.45μm Amersham产。

6.2.2、实验方法：

6.2.2.1、鸭乙型肝炎病毒感染：

1日龄北京鸭经腿胫静脉注射上海麻鸭DHBV-DNA阳性鸭血清，每只0.2ml，在感染后7天取血，分离血清，-70℃保存待检。

6.2.2.2、药物治疗试验：

DHBV感染雏鸭7天后随机分组进行药物治疗试验，每组6只，给药组分2个剂量组，口服给药分别为250mg/kg和500mg/kg，腹腔注射给药组分别为25mg/kg和50mg/kg组，1天2次，给药10天。

设病毒对照组(DHBV)，以生理盐水代替药物。阳性药用拉米夫定，口服给药50mg/kg，1天2次，给药10天。

在感染后第7天即用药前(TO)，用药第5天(T5)，用药第10天(T10)和停药后第3天(P3)，自鸭腿胫静脉取血，分离血清，于-70℃保存待检。

6.2.2.3、检测方法：

取上述待检鸭血清，每批同时点膜，测定鸭血清中DHBV-DNA水平的动态，按缺口翻译药盒说明书方法，用32P标记DHBV-DNA探针，并作鸭血清斑点杂交，放射自显影膜片斑点，在酶标检测仪测定OD值(滤光片为490nm)，计算血清DHBV-DNA密度，以杂交斑点OD值作为标本DHBV-DNA水平值。

6.2.2.4、药效计算：

6.2.2.4.1、计算每组鸭不同时间血清DNA OD值的平均值(X±SD)，并将每组鸭用药后不同时间(T5、T10)和停药后第3天(P3)血清DHBV-DNA水平与同组给药前(T0)OD值比较，采用配对t检验，计t1、P1值。分析差异的显著性，判断药物对病毒感染的抑制效果。

6.2.2.4.2、计算每组鸭用药后不同时间(T5、T10)和停药后第3天(P3)血清DHBV-DNA抑制率，并作图，比较各组鸭血清DHBV-DNA抑制率的动态。

6.2.2.4.3、将给药治疗组不同时间DHBV-DNA抑制率分别与病毒对照组相同时间DHBV-DNA抑制率比较，采用成组t检验，作统计学处理，计算t2、P2值，分析差异的显著性，判断药效。

6.2.2.5、结果：

6.2.2.5.1、1日龄北京鸦感染DHBV后，血清DHBV-DNA动态

DHBV-DNA感染鸭口服生理盐水后DHBV-DNA斑点杂交结果见表1。实验感染鸭36只血清DHBV-DNA全部阳性。病毒对照组6只雏鸭感染后第7天血清DHBV-DNA全部阳性，实验全程21天内血清DHBV-DNA水平感染后基本平稳。

6.2.2.5.2、阻性药拉米夫定对DHBV-DNA的影响

DHBV感染鸭口服阳性药拉米夫定50mg/kg，1天2次，给药10天。结果见表1、表2。配对分析，给药第10天(T10)与给药前(TO)的OD值比较，下降有非常显著性(P＜0.01)，给药后对血清DHBV-DNA抑制率与病毒对照组，成组分析给药第10天(T10)有非常显著性差异(P＜0.01)。停药后3天(P3)无统计学意义，有反跳现象。

6.2.2.5.3、组合物在DHBV感染鸭体内对鸭血清DHBV-DNA的影响的实验结果：

实验分口服给药和腹腔注射给药两种，分别选用两个剂量组，口服给药分别为100mg/kg，200mg/kg，1天两次，给药10天(Bid×10)；腹腔注射给药为15mg/kg，30mg/kg，1天2次，给药10天(Bid×10)观察药物对鸭的毒性和鸭血清乙肝病毒DNA(DHBV-DNA)d的影响。

6.2.2.5.3.1、口服给药实验表明，组合物大剂量组口服给药200mg/kg，1天两次，无毒性，按配对统计，200mg/kg组给药后第5天、第10天，治疗组鸭血清DHBV-DNA有非常显著下降(P＜0.01)。按成组统计与各自对照组比较，给药后第5天，10天和停药后3天，治疗组鸭血清DHBV-DNA均有非常显著下降(P＜0.01，0.01)。

6.2.2.5.3.2、腹腔注射给药，大剂量组30mg/kg组，1天两次给药10天，按配对统计给药后第5天，治疗组鸭血清DHBV-DNA即有非常显著下降(P＜0.01)。成组统计与各自对照组比较有非常显著下降(P＜0.01，0.01)。15mg/kg组，按配对统计，停药后3天，治疗组鸭血清DHBV-DNA有显著下降(P＜0.05)。按成组统计与各自对照组比较，给药后第5天和停药后3天，治疗组鸭血清DHBV-DNA有显著下降(P＜0.05)。

口服给药和腹腔注射给药均未见反跳现象是其重要特点。

所以，从繁缕属植物中用科学方法提取的组合物可作为安全和有效的抗肝炎病毒药物应用。

6.3、组合物的有益效果还可由以下2个报告和临床应用结果给出：

6.3.1、报告1.细胞试验证明组合物能有效抑制艾滋病毒-1(HIV-1)

结果：

6.3.1.1、抗病毒活性

体外试验表明组合物具有抗艾滋病毒(HIV-1)的作用，结果如下：

药物浓度(mg/ml)     0.20      0.10        0.05      0.025

抑制率(％)          98.58％   64.3400％   23.90％   12.11％

经统计计算IC₅₀＝0.113mg/ml

阳性对照药AZT浓度在1g/ml时，抑制率为100％。

6.3.1.2、细胞毒性试验结果如下：

药物浓度(mg/ml)    5      2.5     1.25     0.625

细胞死亡率(％)     72     40.04   14.88    0

6.3.1.3、经统计计算TC₅₀＝3.235mg/ml，故安全指数(TC₅₀/IC₅₀)为29.09。

6.3.2、报告2.细胞试验证明组合物能有效抑制禽流感H5N1型病毒的结果。

6.3.2.1、药物：“组合物”为繁缕提取物，朱耕新先生提供。

6.3.2.2、病毒：禽流感H5N1型

6.3.2.3、细胞：人胚肺细胞

6.3.2.4、结果：组合物对细胞无毒界限选择的结果见表12.：

表12.组合物对细胞无毒界限选择(药物浓度mg/ml)

结果：组合物以1mg/ml为无毒浓度

6.3.2.5、细胞试验中组合物对禽流感H5N1型病毒的抑毒效果见表13.：

表13.组合物对腺病毒3型的抑毒效果

其方法为：病毒以100TCID₅₀为感染量，先感染细胞单层，3小时后加药。

6.3.2.6、结论：“组合物”以1mg/ml浓度于体外细胞培养上有强烈抑制禽流感H5N1型病毒的作用。

6.3.3、组合物口服给药临床治疗流感的实际疗效：

6.3.3.1、方法：

将组合物制成每片含组合物50mg的“含片”，每小时含化1片，每天给药10次，两天共给药1g。

6.3.3.2、结果：应用组合物的“含片”治疗12例流感病人的结果见表15.：

表15.临床给组合物“含片”50mg/次治疗12例流感病人的实例

姓名	性别	年龄	时间	临床症状	结果
						唐××高××林××觊  ×许××黄××顾××季  ×朱××何  ×蔺××杨××	男女女女男男女男男男女女	25352945487332748153677	03.1.1003.1.2503.3.1703.12.1604.1.1004.1.2804.2.1604.11.0704.12.2205.2.0805.2.2605.11.19	头及浑身痛，流清鼻涕，39.5℃头及浑身痛，流清鼻涕，39.5℃鼻塞流清涕39.8℃，血相不高头痛流清涕39.5℃，血相不高头及浑身痛，流清鼻涕，39.5℃头及浑身痛，流清鼻涕，39.5℃鼻塞流清涕39.8℃，血相不高头痛流清涕39.5℃，血相不高头及浑身痛，流清鼻涕，39.5℃头及浑身痛，流清鼻涕，39.5℃鼻塞流清涕39.8℃，血相不高头痛流清涕39.5℃，血相不高	36小时后上班36小时后上班次日上学次日上班次日上班48小时痊愈次日上学次日上学36小时后上班次日上学次日上班36小时内退烧

6.3.3.3、结论：组合物临床给以“含片”治疗12例流感病人，均可在两天内治愈，在最快的仅仅只需要半天即可退烧并消除流感症状，从而可以上学或上班，组合物至少可缩短病毒流感疗程5天以上，因此，具有非常好的预防及治疗流感的功能，其疗效显著优于英、美的Zanamivir和Oseltamivir等流感病毒神经氨酸酶抑制剂，可达特效药程度。

6.3.4、组合物临床治疗单纯疱疹和带状疱疹的实际疗效：

6.3.4.1、方法：患单纯疱疹和带状疱疹的病人用组合物水剂不断涂抹于患处。

6.3.4.2、结果：见表16.

表16.临床给药0.5g/25ml的胶浆剂治疗11例单纯疱疹和带状疱疹的实例

姓名	性别	年龄	时间	临床症状	结果
						黄××金  ×苏××束  ×蒋××柯××蔺  ×安××党  ×万××单××	男女男女男男女男男女男	5561483745291835716922	03.5.2603.9.1803.10.1498.11.999.1.699.3.1499.5.599.9.999.12.2400.2.2500.9.27	左腿上部带状疱疹，淋巴结大右背部带状疱疹，疼痛，发热左腿上部带状疱疹，淋巴结大右额带状疱疹，淋巴结肿大口角起疱，红，痛右肩部带状疱疹，淋巴结大口角起疱，红，痛背部带状疱疹，红，疼痛腰部带状疱疹，疼痛，发热前额至发际有带状疱疹，疼痛右小腿带状疱疹，淋巴结大	2.5天消疱结痂3天消疱结痂2.5天消疱结痂2.5天消疱结痂2天消疱结痂2.5天消疱结痂1.5天消疱结痂2天消疱结痂2.5天消疱结痂3天消疱结痂3天消疱结痂

6.3.4.2、结论：从表16.可见临床使用组合物治疗单纯疱疹和带状疱疹的病人，其用药量在0.2g～0.5g之间、并可在1至3天内止痛、消疱、结痂从而达到痊愈，达到很满意的疗效。其中药物的浓度及疱疹面积大小与疗效有密切关系。

6.3.5、组合物临床治疗小儿腮腺炎的实施结果：

6.3.5.1、方法：取组合物制成每片含组合物50mg的“含片”，每小时含化1片，每天给药3次，两天共给药0.3g。

6.3.5.2、临床治疗小儿腮腺炎的实施结果见表17.：

表17.临床给含片50mg/片治疗12例腮腺炎儿童的实例

姓名	性别	年龄	时间	临床症状	结果
						郑×解×佟××	女男男	8710	03.4.1403.5.903.9.22	右侧腮腺肿大发红疼痛右侧腮腺肿大发烧疼痛双侧腮腺红肿发烧疼痛	次日消肿，退烧次日消肿，两天痊愈1.5天消肿退烧痊愈

梁  ×巫××庞××桑  ×柯××凌××檀××缪××

女女男女女男男男

911613101058

04.3.904.4.604.42804.10.2104.11.1305.4.1905.04.1905.11.06

左侧腮腺红肿发烧疼痛右侧腮腺红肿发烧疼痛双侧腮腺肿大发红疼痛双侧腮腺红肿发烧疼痛双侧腮腺肿大发红疼痛右侧腮腺红肿发烧疼痛左侧腮腺肿大发红疼痛双侧腮腺肿大发红疼痛

次日消肿1.5天痊愈次日消肿2天痊愈1.5天消肿两天痊愈次日消肿1.5天痊愈1天消肿1.5天痊愈1天退烧1.5天痊愈次日消肿，并痊愈次日消肿，并痊愈

6.3.5.3、结论：组合物临床治疗小儿腮腺炎的实施结果可以看出腮腺炎病儿临床使用组合物的含片50mg×3片/天后、仅仅只需2天左右即可痊愈，可获特效药的疗效。

6.3.6、组合物临床治疗病毒性性病尖锐湿疣的实际疗效：

6.3.6.1、方法：组合物临床治疗病毒性性病尖锐湿疣时，采用口服和外用相结合的方法，即临床给予0.25g/cm²的膜剂并给予含量为0.1g的片剂口服进行治疗，取得更好的效果。

6.3.6.2、疗效：见表18.：

表18.临床给予膜剂和片剂治疗7例尖锐湿疣病人的实例

姓名	性别	年龄	时间	病症及用法	结果
						胡××唐××方××桂  ×蓝××董××欧××	男女男男女女男	41264839292328	03.04.2203.08.1704.10.1504.12.0705.02.2605.05.0905.10.17	全部经医院诊断为外生殖器尖锐湿疣。治疗时令其用药膜沾水湿润后贴附在患处，每日换药一次并辅以片剂口服坚持至好转或痊愈。	20天治愈23天治愈21天治愈27天治愈15天好转18天好转19天好转

6.3.6.3、结论：组合物临床应用治疗病毒性性病“尖锐湿疣”同样取得令人更为满意的效果。

6.3.7、组合物作为“消毒剂”应用预防流感、腮腺炎等的实例。

6.3.7.1、方法：使用组合物的“消毒剂”如：气雾剂喷雾在口腔中喷雾、滴鼻液在鼻腔中滴鼻、口服口香糖或液体口香糖等。

6.3.7.2、结果：组合物“消毒剂”预防流感和腮腺炎效果见表19.：

表19.组合物“消毒剂”预防流感、腮腺炎等的实例

姓名	性别	年龄	时间	生活环境	使用结果
						居××吴××曾××郝  ×桑  ×方  ×顾××嫪××庞  ×蔡××楚××佟  ×康××	女男女女男男女女男女女男女	27101182147955631429719	03.1.1303.1.2203.2.1503.11.0903.12.2404.01.1704.04.0604.02.2104.02.2704.11.2304.12.2605.01.1205.02.07	家中数人患流感学校腮腺炎流行学校腮腺炎流行学校腮腺炎流行办公室流感流行单位流感流行弟妹均患腮腺炎家中数人患流感家中数人患流感班上同学流感流行朋友间流感流行幼儿园腮腺炎流行同事间流感流行	用滴鼻消毒剂后未发病用液体口香糖后未感染用气雾消毒剂后未发病用滴鼻消毒剂后未发病用口香糖后未感染用滴鼻消毒剂后未发病用气雾消毒剂后未发病用气雾消毒剂后未发病用气雾消毒剂后未发病用滴鼻消毒剂后未发病用气雾消毒剂后未发病用滴鼻消毒剂后未发病用液体口香糖后未感染

6.3.7.3、结论：用组合物制成的气雾剂、滴鼻液、口香糖、液体口香糖等应用为预防呼吸道病毒的“消毒剂”取得令人更满意的效果。

Claims (14)

1.一种广谱抗病毒药物，其特征是从一种繁缕属植物提取的硫酸多糖酯或磺酸多糖酯及其盐类，与酚类尤其是与包括芹菜素在内的总黄酮以碳苷键或/和氧苷键形成的分子量分布在50,000以下，但主要为分子量分布在4,000以下的一类总酚苷成份，与包括芹菜素在内的总黄酮及其不含硫元素的糖苷类成份形成的棕黄色组合物作为广谱抗病毒药物应用。

其中繁缕硫酸多糖酯的总酚苷类成份或繁缕磺酸多糖酯的总酚苷类成份与包括芹菜素在内的总黄酮及其不含硫元素的糖苷类成份的比例为9.0～9.8比1.0～0.2。

2.权利要求1所述的总酚苷类成份是由饱和的或/和不饱和的硫酸多糖酯或磺酸多糖酯及其盐类与酚类，尤其是与包括芹菜素在内的总黄酮以碳苷键或/和氧苷键形成的总酚苷类成份。

3.权利要求1所述“一种繁缕属植物”包括以下79种：繁缕、雀舌草、褐瓣雀舌草、安徽繁缕、钝萼繁缕、细尖繁缕、鹅肠草、沙生繁缕、阿里山繁缕、薄叶阿里山繁缕、北繁缕、短瓣繁缕、长瓣繁缕、东北繁缕、华繁缕、台湾繁缕、厚叶繁缕、皱叶繁缕、大卫繁缕、偃卧繁缕、针状偃卧繁缕、西南繁缕、石竹叶繁缕、二歧聚伞花繁缕、双歧繁缕、窄叶双歧繁缕、线叶双歧繁缕、铺散繁缕、翻白繁缕、泽繁缕、裸蕊异花繁缕、凹脉繁缕、杜氏繁缕、线茎繁缕、线柄繁缕、多花繁缕、禾叶繁缕、疏柔毛禾叶繁缕、变绿禾叶繁缕、江孜繁缕、霞草繁缕、湖北繁缕、兴安繁缕、内曲繁缕、薄叶繁缕、东繁缕、小花繁缕、柔繁缕、鹅肠繁缕、新沼生繁缕、八蕊繁缕、红莓繁缕、沼生繁缕、展叶繁缕、柄花繁缕、柄叶繁缕、长毛繁缕、假石生繁缕、小繁缕、燧瓣繁缕、网脉繁缕、岩繁缕、石生繁缕、抱茎石生繁缕、准葛尔繁缕、苏氏繁缕、星毛繁缕、园萼繁缕、拟伞花繁缕、小茸毛繁缕、三型繁缕、土耳其斯坦繁缕、湿地繁缕、伞花繁缕、绿花繁缕、巫山繁缕、五台繁缕、云南繁缕或牛繁缕属植物牛繁缕。

4.权利要求1所述组合物的制备方法1，其步骤包括：将植物繁缕或其它一种繁缕属植物的鲜草或干鲜草洗净泥沙、粉碎后提取水溶液，将此水溶液经沉淀、离心或过滤后得到液体A；将液体A通过预先已处理好的大孔树脂柱以吸附所述组合物的成份，用水洗柱，将大孔树脂柱加温后用热蒸馏水洗柱以洗净杂质，收集流出的深褐色蒸馏水液，再用加温后浓度在59％以下的低级醇从树脂柱上洗脱，并收集洗脱得到的棕红色或暗棕红色溶液，将此棕红色或暗棕红色溶液回收乙醇后与收集的深褐色水液合并，浓缩至比重达0.8左右静置后再离心去除沉淀物，继续浓缩至比重1.00至1.20后通过喷雾干燥或真空干燥即得，组合物性状及性质为：一种具中药干浸膏常见的棕黄色粉粉末，有通常中药干浸膏气味，其性质稳定、易溶于水、略有苦味；

其中柱温为40℃～59℃，低级醇包括59％以下的甲醇、乙醇、丙醇、正丁醇、异丁醇；优选50℃～55℃的柱温及相同温度的50％～55％乙醇。

5.权利要求1所述组合物的制备方法2，其步骤包括：将植物繁缕或其它一种繁缕属植物的鲜草或鲜干草洗净、粉碎后提取水溶液，将此水溶液经沉淀、离心或过滤后得到液体A；将此液体A经阴离子交换剂柱，使所述组合物成份吸附在柱上，用氯化钠溶液将所述组合物成份从加温后的柱上洗脱下来，再经脱盐处理、浓缩至比重0.8左右后静置，离心去除沉淀物，再继续浓缩至比重达1.00至1.20后经喷雾干燥或真空干燥即得，组合物性状及性质为：一种具有中药干浸膏常见棕黄色粉末，有通常中药干浸膏气味，其性质稳定、易溶于水，略有苦味；

其中阴离子交换剂柱包括弱阴离子交换树脂柱和阴离子交换纤维素柱；柱温为40℃～59℃，优选50℃～55℃。

6.权利要求1所述组合物的制备方法3，其步骤包括：将植物繁缕或其它一种繁缕属植物的鲜草或鲜干草洗净、粉碎后提取水溶液，将此水溶液经沉淀、离心或过滤后减压浓缩至比重约0.8左右，加入低级醇并使低级醇浓度达到75％，溶液即出现大量浑浊，静置12小时左右，吸出上层清液，沉淀物经离心或过滤得组合物粗品，将此粗品再用纯水溶解后加入低级醇使达85％浓度进行二次醇沉，静置12小时左右吸出上层清液，将沉淀物经减压抽滤并及时先后加适量无水乙醇和丙酮洗涤，抽滤至干，并立即经适当温度真空干燥即得粉末状组合物。

7.权利要求1所述组合物在制备治疗艾滋病病毒药物中的应用。

8.权利要求1所述组合物在制备治疗流感病毒，包括治疗禽流感病毒的药物中的应用。

9.权利要求1所述组合物在制备治疗肝炎病毒药物中的应用。

10.权利要求1所述组合物在制备治疗疱疹病毒药物中的应用。

11.权利要求1所述组合物在制备治疗腮腺炎病毒药物中的应用。

12.权利要求1所述组合物在制备治疗尖锐湿疣病药物中的应用。

13.权利要求1所述组合物在制备抗病毒的消毒剂中的应用。

14.权利要求1所述组合物在制备抗病毒的保健品中的应用。