CN101099496A - 杨梅枝叶提取物杀菌剂及其生产方法 - Google Patents
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Abstract
杨梅枝叶提取物杀菌剂及其生产方法，包括下列工序：干燥与粉碎、回流溶解、离心分离得提取液、真空浓缩得提取物，再用30－80重量份的提取物、20～50重量份(下同)溶剂、10～20份农药助剂配制成杀菌剂乳油或用20～40份提取物、10－20份溶剂、10－20份农药助剂、30－50份去离子水配制成杀菌微乳剂。本杀菌剂对黄瓜炭疽病菌、苹果腐烂病菌、水稻纹枯病菌、番茄灰霉病菌、棉花枯萎病菌等植物病原菌均有良好抑制活性和田间防效。将作为废弃物处理的杨梅枝叶开发生产为植物源杀菌剂的原料，变废为宝，大大提高了经济价值，对地方经济发展具有重要意义。
Description
技术领域
本发明涉及一种植物源农药及其生产方法，尤其是用杨梅枝叶作原料的杀菌剂及其生产方法。
背景技术
杨梅(Myrica rubra Sieb.et Zucc)，为杨梅科，杨梅属果树，主产江浙赣粤等省。《本草纲目》记载，杨梅的根、茎、果可入药，有止血、止痛、疗烫伤、治痈肿、止腹泻等功效。杨梅叶还可以治疗烫伤、痈肿、腹痛等疾病。杨梅叶中含有多种酚类化合物，主要有黄酮类及原花色素类化合物。曾有将杨梅枝叶提取物作为食品保鲜的抗氧化剂的报道，未见有关制备农药的资料报道和产品问世。另外，杨梅产地每年都需要整枝修剪，大量枝叶作为柴薪或就地焚烧，大量资源未进行有效利用。
发明内容
本发明的目的是提供一种利用修剪下来的几乎废弃的杨梅枝叶为原料的杨梅枝叶提取物杀菌剂及其生产方法。
本发明的目的用如下措施实现：
本杨梅叶枝叶提取物杀菌剂生产方法按下列步骤生产：
(1)杨梅枝叶的干燥与粉碎；
(2)提取液的获得：用提取溶剂在回流提取釜中，经回流提取、在50-70℃中提取12h、离心或过滤分离，的提取液；
(3)将所得提取液真空浓缩，得杨梅枝叶提取物；
(4)将杨梅枝叶提取物、溶剂、农药助剂按比例用反应釜配制成乳油或在45-55℃、高速搅拌中配制成微乳剂两种剂型杀菌剂。
杀菌乳油，由下列原料及其重量份配比而成：30～80份提取物，20～50份溶剂、10～20份农药助剂；较满意的配比为50～70份提取物、30～50份溶剂、13～18份农药助剂；更满意的配比为60～70份提取物、40～50份溶剂、14～16份农药助剂。
杀菌微乳剂，由下列原料及其重量份配比而成：20～40份提取物、10～20份溶剂、10～20份农药助剂、30～50份去离子水；较满意的配比为25～40份提取物、12～18份溶剂、12～18份农药助剂、38～48份去离子水；更满意的配比为30～38份提取物、14～16份溶剂、14～16份农药助剂、43～47份去离子水。
本发明的目的还用如下措施完善：
上述步骤(2)中所说的提取溶剂为甲醇、或乙醇、或乙酸己酯中的任意一种。
制备乳油或微乳剂所采用的溶剂为甲醇、乙醇、乙酸乙酯、异丙醇、二甲基亚砜、二甲基甲酰胺中至少一种。
乳油或微乳剂制备时采用的农药助剂是十二烷基磺酸钙、壬基酚聚氧乙烯醚磷酸酯、壬基酚聚氧乙烯醚、辛基酚聚氧乙烯醚、辛基酚聚氧乙烯醚磷酸酯中至少一种。
本发明的有益效果是：将几乎废弃的杨梅修剪枝叶作为植物源农药的优良资源，开辟了新的经济增长渠道，植物源农药的应用减少了对环境的压力和对农产品的污染，有益于环境和人类食品安全。
具体实施方式
本发明下面结合实施例予以进一步详述。
杨梅枝叶提取物杀菌剂(简称杀菌剂)生产步骤是：
(1)杨梅枝叶的干燥与粉碎。要求干燥后含水率小于10％，粒度过30目筛。
(2)提取液的获得：用3倍于杨梅枝叶粉碎物重量的甲醇等提取溶剂，在回流提取釜中，温度50-70℃，提取12h，离心分离后得到杨梅枝叶提取液。
(3)真空浓缩。将提取液浓缩至与加入的杨梅枝叶粉碎物等重，即获得杨梅枝叶提取物(简称提取物)。
(4)将提取物、溶剂、农药助剂按比例，在反应釜中配制成乳油或微乳剂两种剂型的杀菌剂。
步骤(2)中所说的提取溶剂是甲醇、乙醇、乙酸乙酯、丙酮中任选一种，或用乙醇∶丙酮＝1∶1的混合溶剂。
杀菌剂乳油的配制：原料及其重量份配比而成：30～80份提取物，20～50份溶剂、10～20份农药助剂；较满意的配比为50～70份提取物、30～50份溶剂、13～18份农药助剂；更满意的配比为60～70份提取物、40～50份溶剂、14～16份农药助剂。在反应釜中，按上述配比重量份，将各原料依次加入，搅拌均匀即可。
杀菌微乳剂的配制：原料及其重量份配比而成：20～40份提取物、10～20份溶剂、10～20份农药助剂、30～50份去离子水；较满意的配比为25～40份提取物、12～18份溶剂、12～18份农药助剂、38～48份去离子水；更满意的配比为30～38份提取物、14～16份溶剂、14～16份农药助剂、43～47份去离子水。先将提取物、农药助剂溶解于溶剂中，在45-55℃、高速搅拌(400-500r/min)情况下，加去离子水，50℃下恒温搅拌0.5h，即制得杀菌微乳剂。
上述两种剂型的杀菌剂在配制时采用的溶剂是甲醇、乙醇、乙酸乙酯、异丙醇、二甲基亚砜、二甲基甲酰胺中至少一种。两剂型采用的农药助剂是十二烷基磺酸钙、壬基酚聚氧乙烯醚磷酸酯、壬基酚聚氧乙烯醚、辛基酚聚氧乙烯醚、辛基酚聚氧乙烯醚磷酸酯中至少一种。
现将两剂型各原料及配比重量份各按8项实施例列表1：
表1及下文中，原料名称较长的用省略法表示，如十二烷基璜酸钙，取其头尾两字“十二”与“酸钙”，中间其余文字如“烷基磺”用“/”表示，其余类同。
表中各实施例中提取物和溶剂加入量的多少，决定杀菌剂有效成分在制剂中的含量，杨梅枝叶提取物对不同植物病原菌的活性不同，同时要考虑杀菌剂成本、原料来源等诸多因素。
实施例1：将杨梅枝条、叶子干燥至含水率为10％，粉碎成30目粉状，称得100kg粉碎物；用300kg甲醇，在回流提取釜中，温度50℃提取12h，离心分离后得到提取液；再进行真空浓缩到浓缩液接近100kg时结束，即得提取物100kg，备用。
再按照表1中实施例1所对应的原料及其重量份配比分别制得杀菌剂乳油或杀菌剂微乳剂。下面进行具体说明：
对照表1中的实施例1制备杀菌剂乳油：用80kg上述制备的提取物、50kg甲醇、20kg十二/酸钙，依次加入到反应釜中，搅拌均匀即成。
再对照表1中的实施例1制备杀菌剂微乳剂：用上述制备的提取物40kg、二甲/亚砜10kg、二甲/酰胺10kg、壬基/烯醚10kg、辛基/烯醚10kg、去离子水50kg，先将前5种原料加入反应釜中，加热至45℃，搅拌使其充分溶解；在高速搅拌(400～500r/min)下，缓慢加入去离子水。加完后恒温搅拌0.5h即成。
实施例2：将杨梅枝叶干燥至含水率为8％，粉碎成40目粉状，称得80kg粉碎物；用乙醇240kg，在60℃温度条件下提取，其余与实施例1方法相同，最后浓缩得提取物80kg备用。再对照表1中实施例2的对应原料及其重量份分别与实施例1相同的方法(高速搅拌温度50℃)制得杀菌剂乳油或微乳剂。
实施例3：将杨梅枝叶干燥至含水率为7％，粉碎成45目粉状，称得150kg粉碎物；用乙酸乙酯450kg，在70℃温度条件下提取，其余与实施例1方法相同，最后浓缩得提取物150kg备用。再对照表1中实施例3的对应原料及其重量份分别与实施例1相同的方法(高速搅拌温度55℃)制得杀菌剂乳油或微乳剂。
有了上述三项实施例，其余五项实施例可据此与依据表1配比类推，不再一一罗列。
在制备提取物时，从成本、溶解有效成分的性能等因素考虑选择提取溶剂外，在表1中所列的8项实施例中，以实施例6、7、8优选。
下面将杨梅枝叶甲醇提取物对植物病原菌的抑制、杀菌乳油及微乳杀菌剂的室内、田间药效实验等介绍如下：
1、杨梅枝叶甲醇提取物对植物病原菌的抑制活性测定
本实验在离体条件下，测定了杨梅枝叶甲醇提取物对植物病原菌的抑制活性，实验方法和实验结果如下：
1)供试菌种
小麦赤霉病菌、玉米大斑病菌、辣椒疫霉病菌、苹果炭疽病菌、番茄灰霉病菌、黄瓜菌核病菌、小麦纹枯病菌、甘蓝黑斑病菌，均由浙江林学院森林病理实验室提供。
2)试验方法
将上述杨梅提取物杀菌乳油采用菌丝生长速率法和孢子萌发法对供试病原菌进行离体生物活性测定，按下列公式计算抑制率：
3)试验结果
用生长速率法测定了杨梅提取物杀菌乳油对供试病原菌的毒力，从而求出其提取物对供试病原菌的毒力，结果见表2。
表2杨梅枝叶提取物抑制菌丝生长的毒力(72h)
| 供试菌种 | LD-P线 | EC50 | EC50标准误(×102) | 卡方值 |
| (y＝) | (g/L) | (Sx50) | X2 | |
| 苹果炭疽病菌小麦赤霉病菌辣椒疫霉病菌玉米大斑病菌番茄灰霉病菌黄瓜菌核病菌小麦纹枯病菌甘蓝黑斑病菌 | 1.8804+2.8060x3.4521+1.5485x3.0681+2.0058x2.0333+2.4488x2.1214+2.4273x2.2846+1.8220X4.1136+0.9495X0.2491+2.8452X | 12.32459.99269.186616.273915.343630.928037.718540.2228 | 4.00068.65155.43504.45503.45204.42303.82602.3342 | 2.321.890.860.554.202.371.373.7860 |
2、杨梅提取物杀菌乳油田间药效试验
供试作物与防治对象
供试作物：番茄(Lycopersicon esculentum)，品种为“强选1号”；
防治对象：番茄灰霉病(Botrytis cirerea Pers.)。
试验地块的选择与试验处理
(1).试验地块的选择：冬茬大棚番茄地，番茄连作5年。土壤肥力中等；
(2).试验处理与小区设计：供试药剂为杨梅提取物杀菌乳油150X、250X、350X；对照药剂施佳乐1000X和空白对照(清水)共五种处理。每种处理面积为27m2，处理间隔随机排列；
(3).施药方法：按亩兑水量48kg，用“MATABI”背负式手动喷雾器进行叶面喷雾。2001年2月17日第一次施药，2月22日第二次施药。试验期间大棚内气温偏低，最高温度为22℃，最低温度为12℃。棚内湿度高；
(4).调查方法：每处理对角线5点取样，每点随机选3株，共15株，每株从上中随机选3个果。第一次施药前调查病情基数(2月17日)，分别在第一次施药后5天(2月22日)及第二次施药后5天(2月27日)进行药效调查，并根据以下分级标准记录果实发病情况；
番茄灰霉病病果分级标准
0级：无病斑；
1级：病斑直径小于1cm；
3级：病斑直径1-2cm；
5级：病斑直径2-3cm；
7级：病斑直径3-4cm；
9级：病斑直径大于5cm。
(5)药效计算：根据病指按下列公式计算防治效果。
病情指数＝Σ(各级病果数×相对级数值)/(调查果数×最高分级数)×100
防治效果＝(对照病指数-处理病指数)/对照病指数×100
结果与分析
杨梅提取物杀菌乳油防治大棚番茄灰霉病果药效结果见下表，杨梅提取物杀菌乳油第一次施药后5天调查，杨梅提取物杀菌乳油350X、250X、150X的防效为62.1％～76.2％，对照药剂施佳乐防效为52.9％，杨梅提取物杀菌乳油的三种处理的防效均达到60％以上，与照药剂施佳乐相比防效较好；第二次施药后5天调查，杨梅提取物杀菌乳油处理350X与150X的防效高于80％，与照药剂施佳乐1000X的防效75.8％相近，而杨梅提取物杀菌乳油处理250X的防效仅有49.5％。
表3杨梅提取物杀菌乳油对大棚番茄灰霉的防治效果
| 药 剂 | 供试浓度 | 药前病指 | 第一次施药第后5天 | 第二次施药后第5天 | ||
| 病指 | 防效％ | 病指 | 防效％ | |||
| 施佳乐杀菌乳油空白对照 | 1000X350X250X150X | 0.0900.1370.0120.1070.015 | 0.1270.1110.0120.1220.044 | 52.972.966.162.1 | 0.1510.1810.0420.1250.104 | 75.880.949.583.2 |
注：表中的杀菌乳油即为本发明的杨梅提取物杀菌乳油。
通过大棚试验表明，杨梅提取物杀菌乳油按150X、250X和350X施药后，对大棚番茄灰霉病具有较好的防治效果。
3、杨梅提取物杀菌微乳剂田间药效试验
(1)供试药剂
杨梅提取物杀菌微乳剂；速克灵：50％WP，日本住友化学株式会社产品；
施佳乐：40％SP，德国艾格福公司产品。
(2)供试作物与防治对象
供试作物：番茄(Lycopersicon esculentum)，品种为“强选1号”；
防治对象：番茄灰霉病(Botrytis cirerea Pers.)。
(3)试验地块的选择与试验处理
试验地块的选择：冬茬大棚番茄地，番茄连作5年。土壤肥力中等；
试验处理与小区设计：供试药剂为杨梅提取物杀菌乳油100x、200x、400x；对照药剂施佳500ppm、速可500ppm和空白对照(清水)共六个处理。每个处理设3个重复，每小区面积为27m2，小区间随机排列；
施药方法：按亩兑水量72kg，用“MATABI”背负式手动喷雾器进行叶面喷雾。试验期间大棚内气温较高，最高温度为29℃，最低温度为18℃。棚内湿度低。
调查方法：每小区对角线5点取样，每点随机选2～3株，在2～3株中随机选6个果。施药前调查病情基数(3月18日)，在施药后5天(3月23日)进行药效调查，并根据以下两分级标准分别记录果发病情况。
番茄灰霉病病果分级标准(一)
0级：无病斑；
1级：残留花瓣或柱头发病；
3级：萼片腐烂或柱头发病蔓延到果脐部；
5级：果蒂部或果脐部有浸润斑，无霉层；
7级：果蒂部或果脐部有霉层，但未扩展及果的其它部位；
9级：霉层扩展到其它部位。
药效计算：根据病指按下列公式计算防治效果。
病情指数＝Σ(各级病果数×相对级数值)/(调查果数×最高分级数)×100
病指增长率＝(处理后病指数-处理病指数)/处理后病指数×100
防治效果＝(处理病指增长率±对照病指增长率)/(100±对照病指增长率)×100
(4)结果与分析
由表4可见，供试药剂杨梅提取物杀菌微乳剂对大棚番茄灰霉有较好防治效果。杨梅提取物杀菌微乳剂的200x处理出现病指下降，杨梅提取物杀菌微乳剂的100x处理与对照药剂施佳乐、速克灵的防效均在80.0％以上，而杨梅提取物杀菌微乳剂400x的防效较低，其防效仅为54.4％。
表4杨梅提取物杀菌乳油对大棚番茄灰霉的防治效果
| 药 剂 | 供试浓度 | 药前病指 | 施药第后5天病指 | 病指增长率％ | 防效％ |
| 施佳乐速克灵杀菌微乳剂空白对照 | 500ppm500ppm100x200x400x | 148012440.20960.15960.15390.1217 | 1.15690.12650.21290.10800.17890.1726 | 5.05981.6601.550-13.97429.490 | 82.794.494.7-54.4 |
注：表中的杀菌微乳剂即为本发明的杨梅提取物杀菌乳油。
2.表中“-”表示病指增长率下降或病指增长率大于对照病指增长率未计算的防效；
3.表中的杀菌微乳剂即为本发明的杨梅提取物杀菌乳油。
4、杨梅提取物杀菌微乳剂防治小麦白粉病盆栽试验结果
测定了杨梅提取物杀菌微乳剂对小麦白粉病(Blumeriagraminis(DC.)Speer)的保护作用和治疗作用(表5)，结果表明：7d后，杨梅提取物杀菌微乳剂对小麦白粉的保护作用比治疗作用效果好。在保护作用中，随着浓度的升高，防治效果也越高，稀释倍数为100倍时，其防效可达68.64％，略低于对照药剂粉锈宁在100mg(a.i.)/L剂量(稀释倍数500倍)处理的药效。杨梅提取物杀菌微乳剂对小麦白粉的治疗作用不明显，防治效果较差。表明在田间应用时，应预防施药。
表5杨梅提取物杀菌微乳剂对小麦白粉病的防治效果(7d)
| 供试样品 | 稀释倍数 | 治疗作用 | 保护作用 | ||
| 病情指数 | 防效(％) | 病情指数 | 防效(％) | ||
| 杨梅提取物杀菌微乳剂 | 400 | 57.93b | 11.41c | 49.72b | 26.37c |
| 200 | 55.4b | 15.28c | 30.19c | 55.29b | |
| 100 | 50.6b | 22.62b | 21.00d | 68.64a | |
| 50％粉锈宁WP | 500 | 16.32c | 75.04a | 19.68d | 70.86a |
| 空白对照 | 65.39a | - | 67.53a | - | |
注：采用DMRT对试验结果进行统计分析，同数列标后不同字母是指在α＝0.05水平上呈显著差异。
Claims (6)
1、一种杨梅叶枝叶提取物杀菌剂生产方法，其特征是按下列步骤生产：
(1)杨梅枝叶的干燥与粉碎；
(2)提取液的获得：用提取溶剂在回流提取釜中，经回流提取、在50-70℃中提取12h、离心或过滤分离，得提取液；
(3)将所得提取液真空浓缩，得杨梅枝叶提取物；
(4)将杨梅枝叶提取物、溶剂、农药助剂按比例用反应釜配制成乳油或在45-55℃、高速搅拌0.5h中配制成微乳剂两种剂型杀菌剂。
2、如权利要求1所述的杨梅枝叶提取物杀菌剂生产方法，其特征是上述步骤(2)中所说的提取溶剂为甲醇、或乙醇、或乙酸己酯中的任意一种。
3、如权利要求1所述的杨梅枝叶提取物杀菌剂生产方法生产的杀菌剂乳油，其特征是由下列原料及其重量份配比而成：30～80份提取物，20～50份溶剂、10～20份农药助剂；较满意的配比为50～70份提取物、30～50份溶剂、13～18份农药助剂；更满意的配比为60～70份提取物、40～50份溶剂、14～16份农药助剂。
4.如权利要求1所述的杨梅枝叶提取物杀菌剂生产方法生产的杀菌剂微乳剂，其特征是由下列原料及其重量份配比而成：20～40份提取物、10～20份溶剂、10～20份农药助剂、30～50份去离子水；较满意的配比为25～40份提取物、12～18份溶剂、12～18份农药助剂、38～48份去离子水；更满意的配比为30～38份提取物、14～16份溶剂、14～16份农药助剂、43～47份去离子水。
5.如权利要求3或4所述的杨梅枝叶提取物杀菌剂生产方法生产的杀菌剂，其特征是制备乳油或微乳剂所采用的溶剂为甲醇、乙醇、乙酸乙酯、异丙醇、二甲基亚砜、二甲基甲酰胺中至少一种。
6.如权利要求3或4所述的杨梅枝叶提取物杀菌剂生产方法生产的杀菌剂，其特征是所说的乳油或微乳剂制备时采用的农药助剂是十二烷基磺酸钙、壬基酚聚氧乙烯醚磷酸酯、壬基酚聚氧乙烯醚、辛基酚聚氧乙烯醚、辛基酚聚氧乙烯醚磷酸酯中至少一种。
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