CN101098695A

CN101098695A - 吡喃并吲哚衍生物及其用于治疗丙型肝炎病毒感染或者疾病的用途

Info

Publication number: CN101098695A
Application number: CNA2005800057795A
Authority: CN
Inventors: S·M·康顿; R·W·杰克逊; M·G·拉波尔特; C·J·伯恩斯; T·赫尔伯茨; J·A·加布里
Original assignee: Wyeth LLC; Viropharma Inc
Current assignee: Wyeth LLC; Viropharma Biologics LLC
Priority date: 2004-03-01
Filing date: 2005-03-01
Publication date: 2008-01-02
Also published as: AU2005218553A1; BRPI0508079A; JP2007526320A; WO2005084315A3; CA2557160A1; WO2005084315A2; MXPA06009881A; EP1765330A2; US20070219212A1; EP1765330A4

Abstract

本发明涉及新颖的吡喃并吲哚衍生物及其类似物以及含有上述化合物的组合物，并且涉及其用于治疗、预防或者抑制由丙型肝炎病毒引起的病毒感染和相关疾病的用途。

Description

吡喃并吲哚衍生物及其用于治疗丙型肝炎病毒感染或者疾病的用途

背景技术

丙型肝炎是一种能够引起慢性肝炎、肝硬化、肝衰竭和肝细胞癌的常见病毒感染。在至少85％的情形中，丙型肝炎病毒(HCV)感染都会引起慢性肝炎，这在美国是肝移植的首要原因，并且每年至少有10,000患者因此而死亡(Hepatology，1997，26(Suppl.1)，2S-10S)。

丙型肝炎病毒是黄病毒科(Flaviviridae)家族的成员，并且HCV的基因组是单正链线性RNA(Hepatology，1997，26(Suppl.1)，11S-14S)。HCV呈现广泛地遗传异质性；已经鉴定出了至少6种基因型和超过50种亚型。

现在还没有预防HCV感染的有效疫苗。当前唯一可用的治疗法是用干扰素-α(INF-α)进行治疗或者用INF-α与核苷类似物利巴韦林的联合疗法进行治疗(Antiviral Chemistry and Chemotherapy，1997，8，281-301)。然而，仅仅约40％的治疗病人产生持续的响应，因此需要更为有效的抗HCV治疗剂。

上述HCV基因组包括许多非结构蛋白质：N S2、NS3、NS4A、NS4B、NS5A和NS5B(J.General Virology，2000，81，1631-1648)。NS5B是病毒复制所必需的RNA依赖性RNA聚合酶，因此，抑制NS5B是研制治疗剂的适宜目标。

在以下US专利中，公开了吡喃并吲哚衍生物并且据称这些化合物具有抗抑郁和抗溃疡活性：3,880,853(4/29/75)，4,118,394(10/3/78)。在US专利4,179,503(12/18/78)中公开了吡喃并吲哚化合物并且称这些化合物具有利尿活性。在以下US专利中，公开了吡喃并吲哚衍生物并且据称这些化合物具有消炎、止痛、抗菌和抗真菌活性：3,843,681、(10/22/74)、3,939,178(2/17/76)、3,974,179(8/10/76)、4,070,371(1/24/78)、4,076,831(2/28/78)。在以下US专利中，公开了吡喃并吲哚衍生物并且据称这些化合物具有消炎和止痛活性：4,670,462(6/2/87)、4,686,213(8/11/87)、4,785,015(11/15/88)、4,810,699(3/7/89)、4,822,781(4/18/89)、4,960,902(10/2/90)。在US专利5,776,967(7/7/98)和US专利5,830,911(11/3/98)中，公开了吡喃并吲哚衍生物并且据称这些化合物能够抑制环氧化酶-2并且可以用于治疗关节炎、结肠直肠癌和阿尔茨海默氏病。

并且，在以下US专利中公开了制备吡喃并吲哚衍生物的方法：4,012,417(3/15/77)、4,036,842(7/19/77)、4,585,877(4/29/86)、4,822,893(4/18/89)。拆分外消旋吡喃并吲哚衍生物的方法公开于以下US专利中：4,501,899(2/26/85)、4,515,961(5/7/85)、4,520,203(5/28/85)、4,544,757(10/1/85)。

临时申请No.60/382,148(提交于2002年5月21日)公开了使用吡喃并吲哚化合物治疗丙型肝炎感染的方法。临时申请No.60/382,154(提交于2002年5月21日)公开了可用于治疗丙型肝炎感染或者疾病的吡喃并吲哚组合物。

发明概述

本发明涉及吡喃并吲哚衍生物、它们的制备方法和含有它们的药物组合物，并且涉及它们治疗丙型肝炎病毒感染的用途。

根据本发明提供了下式I所代表的化合物：

其中：

R₁为氢、1～8个碳原子的直链烷基、3～12个碳原子的支链烷基、3～12个碳原子的环烷基、2～7个碳原子的烯基、2～7个碳原子的炔基、或者7～12个碳原子的芳基烷基或烷基芳基；

R₂为氢、1～12个碳原子的直链烷基、3～12个碳原子的支链烷基、3～12个碳原子的环烷基、2～7个碳原子的烯基、2～7个碳原子的炔基、2～12个碳原子的烷氧基烷基、7～12个碳原子的芳基烷基或者烷基芳基、1～8个碳原子的氰基烷基、2～16个碳原子的烷基硫代烷基、4～24个碳原子的环烷基-烷基、取代或者未取代的芳基、或者杂芳基；

R₃-R₆独立地为氢、1～8个碳原子的直链烷基、3～12个碳原子的支链烷基、3～12个碳原子的环烷基、2～7个碳原子的烯基、取代或者未取代的芳基、呋喃甲基、7～12个碳原子的芳基烷基或者烷基芳基、2～7个碳原子的炔基、或者R5和R6连同它们连接的环碳原子一起形成羰基；

R₇-R₈以及R₁₀独立地为氢、1～8个碳原子的直链烷基、3～12个碳原子的支链烷基、3～12个碳原子的环烷基、2～7个碳原子的烯基、取代或者未取代的芳基、取代或者未取代的杂芳基、呋喃甲基、7～12个碳原子的芳基烷基或者烷基芳基、2～7个碳原子的炔基、苯基炔基、1～8个碳原子的烷氧基、7～12个碳原子的芳基烷氧基、1～8个碳原子的烷硫基、三氟甲氧基、三氟乙氧基、三氟甲硫基、三氟乙硫基、1～6个碳原子的酰基、COOH、COO-烷基、CONR₁₁R₁₂、F、Cl、Br、I、CN、CF₃、NO₂、1～8个碳原子的烷基亚磺酰基、1～6个碳原子的烷基磺酰基、吡咯烷基或者噻唑烷基；

R₉为氢、1～8个碳原子的直链烷基、3～12个碳原子的支链烷基、3～12个碳原子的环烷基、4～24个碳原子的环烷基-烷基、2～7个碳原子的烯基、2～7个碳原子的炔基、2～12个碳原子的烷氧基烷基、3～18个碳原子的烷氧基烷氧基烷基、3～18个碳原子的芳基烷氧基烷基、3～18个碳原子的环烷基烷氧基烷基、3～18个碳原子的芳氧基烷基、3～18个碳原子的杂芳氧基烷基、3～18个碳原子的芳硫基烷基、3～18个碳原子的杂芳硫基烷基、1～12个碳原子的羟烷基、2～16个碳原子的烷氧基亚氨基烷基、2～16个碳原子的烷硫基烷基、2～16个碳原子的烷基磺酰基烷基、2～16个碳原子的单烷基氨基烷基、3～16个碳原子的二烷基氨基烷基、3～16个碳原子的取代二烷基氨基烷基、取代或者未取代的芳基、7～12个碳原子的芳基烷基、7～12个碳原子的取代或者未取代杂芳基、取代或者未取代的杂芳基烷基、取代或者未取代的杂环基、和杂环-烷基；

R₁₁-R₁₂独立地为H、1～8个碳原子的直链烷基、3～12个碳原子的支链烷基、3～12个碳原子的环烷基、取代或未取代的芳基或者杂芳基；

M为一个键、CH₂或者CH₂CH₂，条件是当M为一个键时，那么R₉不是羟基、1～8个碳原子的直链烷基、3～12个碳原子的支链烷基、或者芳基烷基；

Y为一个键、CH₂、CH₂CH₂、芳基、或者R₂和Y可以连同它们连接的环碳原子一起另外形成3～8个碳原子的螺环烷基环；

或者其结晶形式或药学上可接受的盐。

优选本发明化合物包括具有下式的式I化合物：

其中R₁至R₁₀如上所定义。

本发明优选的实施方案包括式I化合物，其中R₁-R₈、R₁₀和Y如上对式I化合物所定义；

R₉为氢、1～8个碳原子的直链烷基、3～12个碳原子的支链烷基、3～12个碳原子的环烷基、4～24个碳原子的环烷基-烷基、2～7个碳原子的烯基、2～7个碳原子的炔基、2～12个碳原子的烷氧基烷基、3～18个碳原子的烷氧基烷氧基烷基、3～18个碳原子的芳基烷氧基烷基、3～18个碳原子的环烷基烷氧基烷基、3～18个碳原子的芳氧基烷基、3～18个碳原子的杂芳氧基烷基、3～18个碳原子的芳硫基烷基、3～18个碳原子的杂芳基硫基烷基、1～12个碳原子的羟烷基、2～16个碳原子的烷氧基亚氨基烷基、2～16个碳原子的烷硫基烷基、2～16个碳原子的烷基磺酰基烷基、2～16个碳原子的单烷基氨基烷基、3～16个碳原子的二烷基氨基烷基、3～16个碳原子的取代二烷基氨基烷基、取代或者未取代的芳基、7～12个碳原子的芳基烷基、7～12个碳原子的取代或者未取代杂芳基、取代或者未取代的杂芳基烷基、取代或者未取代的杂环基、和杂环-烷基；

和M为CH₂或者CH₂CH₂；

或者其结晶形式或者药学上可接受的盐。

另一优选的实施方案包括式I化合物，其中：

R₁-R₈、R₁₀和Y如上对式I化合物所定义；

R₉为3～12个碳原子的环烷基、4～24个碳原子的环烷基-烷基、2～7个碳原子的烯基、2～7个碳原子的炔基、2～12个碳原子的烷氧基烷基、3～18个碳原子的烷氧基烷氧基烷基、3～18个碳原子的芳基烷氧基烷基、3～18个碳原子的环烷基烷氧基烷基、3～18个碳原子的芳氧基烷基、3～18个碳原子的杂芳氧基烷基、3～18个碳原子的芳基硫基烷基、3～18个碳原子的杂芳基硫基烷基、1～12个碳原子的羟烷基、2～16个碳原子的烷氧基亚氨基烷基、2～16个碳原子的烷硫基烷基、2～16个碳原子的烷基磺酰基烷基、2～16个碳原子的单烷基氨基烷基、3～16个碳原子的二烷基氨基烷基、3～16个碳原子的取代二烷基氨基烷基、取代或者未取代的芳基、7～12个碳原子的取代或者未取代杂芳基、取代或者未取代的杂芳基烷基、取代或者未取代的杂环基、和杂环-烷基；

和M为一个键；

或者其结晶形式或者药学上可接受的盐。

对于本发明而言，术语“烷基”包括直链和支链烷基部分，优选具有1～8个碳原子。术语“烯基”是指含有至少一个双键的脂肪烃基团，并且包括2～7个碳原子的直链和支链烯基部分。上述烯基部分可以存在E或者Z构型；本发明化合物包括这两种构型。术语“炔基”包括具有至少一个三键的含有2～7个碳原子的直链和支链部分。

术语“环烷基”是指具有3～12个碳原子的脂环烃基团，并且包括但不限于：环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、降莰烷基和金刚烷基。

对于本发明而言，术语“芳基”是指芳烃部分并且可以被取代或者未被取代。芳基选自但不限于：苯基、α-萘基、β-萘基、联苯基、蒽基、四氢萘基、菲基、芴基、2，3-二氢化茚基、亚联苯基(biphenylenyl)、苊基、1，2-亚二氢苊基(acenaphthylenyl)或者亚菲基(phenanthrenyl)。在一种实施方案中，所述取代芳基可以任选被独立地选自但不限于以下的取代基单取代、二取代、三取代或者四取代：烷基、酰基、烷氧羰基、烷氧基、烷氧基烷基、烷氧基烷氧基、氰基、卤素、羟基、硝基、三氟甲基、三氟甲氧基、三氟丙基、氨基、烷氨基、二烷基氨基、酰氨基、二烷基氨基烷基、烷氧基亚氨基烷基、羟烷基、环烷基、烷硫基、-SO₃H、烷基磺酰基、-SO₂NH₂、-SO₂NH烷基、-SO₂N(烷基)₂、烷基亚磺酰氨基、烯基亚磺酰氨基、炔基亚磺酰氨基、-CO₂H、-CO₂NH₂、-CO₂NH烷基和-CO₂N(烷基)₂。优选的芳基取代基包括：烷基、烷氧基、环烷基、酰基、卤素、羟烷基、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、酰氨基、烷基亚磺酰氨基、烷基磺酰基、-CO₂H、-CO₂NH₂、三氟甲基、三氟甲氧基、芳基烷基和烷基芳基。

对于本发明而言，术语“杂芳基”是指可以被取代或者未被取代的芳香杂环体系(单环或者双环)，其中杂芳基部分为含有1～4个选自S、N和O的杂原子的五元或者六元环，并且包括但不限于：(1)单环芳香杂环，比如呋喃、噻吩、吲哚、氮杂吲哚、_唑、噻唑、异_唑、异噻唑、咪唑、N-甲基咪唑、吡啶、嘧啶、吡嗪、吡咯、N-甲基吡咯、吡唑、N-甲基吡唑、1，3，4-_二唑、1，2，4-_二唑、1，2，4-三唑、1-甲基-1，2，4-三唑、1，3，4-噻二唑、1，2，4-噻二唑、1H-四唑和1-甲基四唑；(2)双环芳香杂环，其中苯基、吡啶、嘧啶或者哒嗪(pyridizine)环：(i)与具有一个氮原子的6元芳香(不饱和)杂环稠合；(ii)与具有两个氮原子的5元或者6元芳香(不饱和)杂环稠合；(iii)与具有一个氮原子以及一个氧原子或者一个硫原子的5元芳香(不饱和)杂环稠合；或者(iv)与具有一个选自O、N或者S的杂原子的5元芳香(不饱和)杂环稠合。双环芳香杂环包括但不限于：苯并_唑、苯并噻唑、苯并呋喃、苯并异_唑、苯并咪唑、N-甲基苯并咪唑、氮杂苯并咪唑、吲唑、喹唑啉、喹啉和吡咯烷。在一种实施方案中，所述取代杂芳基可以任选被独立地选自但不限于以下的取代基单取代、二取代、三取代或者四取代：烷基、酰基、烷氧羰基、烷氧基、烷氧基烷基、烷氧基烷氧基、氰基、卤素、羟基、硝基、三氟甲基、三氟甲氧基、三氟丙基、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、酰氨基、二烷基氨基烷基、烷氧基亚氨基烷基、羟烷基、环烷基、烷硫基、-SO₃H、烷基磺酰基、-SO₂NH₂、-SO₂NH烷基、-SO₂N(烷基)₂、烷基亚磺酰氨基、烯基亚磺酰氨基、炔基亚磺酰氨基、-CO₂H、-CO₂NH₂、-CO₂NH烷基和-CO₂N(烷基)₂。优选的杂芳基的取代基包括：烷基、烷氧基、环烷基、酰基、卤素、羟烷基、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、酰氨基、烷基亚磺酰氨基、烷基磺酰基、-CO₂H、-CO₂NH₂、三氟甲基、三氟甲氧基、芳基烷基和烷基芳基。

对于本发明而言，术语“烷氧基”是指C1-C12-烷基-O-；术语“芳氧基”是指芳基-O-；术语“杂芳氧基”是指杂芳基-O-；其中烷基、芳基和杂芳基如上所定义。

对于本发明而言，术语“芳基烷基”是指芳基-C1-C6-烷基-，并且可以被取代或者未被取代；芳基烷基部分包括苄基、1-苯基乙基、2-苯基乙基、3-苯基丙基和2-苯基丙基等等。在一种实施方案中，所述取代芳基烷基可以任选被独立地选自但不限于以下的取代基单取代、二取代、三取代或者四取代：烷基、酰基、烷氧羰基、烷氧基、烷氧基烷基、烷氧基烷氧基、氰基、卤素、羟基、硝基、三氟甲基、三氟甲氧基、三氟丙基、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、酰氨基、二烷基氨基烷基、烷氧基亚氨基烷基、羟烷基、环烷基、烷硫基、-SO₃H、烷基磺酰基、-SO₂NH₂、-SO₂NH烷基、-SO₂N(烷基)₂、烷基亚磺酰氨基、-CO₂H、-CO₂NH₂、-CO₂NH烷基和-CO₂N(烷基)₂。优选的芳基烷基的取代基包括：烷基、烷氧基、环烷基、酰基、卤素、羟烷基、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、酰氨基、烷基亚磺酰氨基、烷基磺酰基、-CO₂H、-CO₂NH₂、三氟甲基、三氟甲氧基、芳基烷基和烷基芳基。

对于本发明而言，术语“杂芳基烷基”是指杂芳基C1-C6-烷基-，并且可以被取代或者未被取代。在一种实施方案中，所述取代杂芳基烷基可以任选被独立地选自但不限于以下的取代基单取代、二取代、三取代或者四取代：烷基、酰基、烷氧羰基、烷氧基、烷氧基烷基、烷氧基烷氧基、氰基、卤素、羟基、硝基、三氟甲基、三氟甲氧基、三氟丙基、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、酰氨基、二烷基氨基烷基、烷氧基亚氨基烷基、羟烷基、环烷基、烷硫基、-SO₃H、烷基磺酰基、-SO₂NH₂、-SO₂NH烷基、-SO₂N(烷基)₂、烷基亚磺酰氨基、吗啉、-CO₂H、-CO₂NH₂、-CO₂NH烷基和-CO₂N(烷基)₂。优选的杂芳基烷基取代基包括：烷基、烷氧基、环烷基、酰基、卤素、羟烷基、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、酰氨基、烷基亚磺酰氨基、烷基磺酰基、-CO₂H、-CO₂NH₂、吗啉、三氟甲基、三氟甲氧基、芳基烷基和烷基芳基。

对于本发明而言，术语“烷基芳基”是指C1-C6-烷基-芳基-。

对于本发明而言，术语“烷硫基”是指C1-C6-烷基-S-。

对于本发明而言，术语“烷氧基烷基”、“环烷基-烷基”、“烷硫基烷基”、“芳氧基烷基”和“杂芳氧基烷基”表示进一步被如上所定义的烷氧基、环烷基、烷硫基、芳氧基或者杂芳氧基所取代的如上所定义的烷基。

对于本发明而言，“芳基烷氧基”、“烷氧基烷氧基”、和“环烷基烷氧基”是指进一步被如上所定义的芳基、烷氧基、烷硫基、环烷基或者杂芳基所取代的如上所定义的烷氧基。

对于本发明而言，“芳硫基烷基”和“杂芳基硫基烷基”表示进一步被如上所定义的芳基硫基或者杂芳基硫基基团所取代的如上所定义的烷基。

对于本发明而言，“芳氧基烷硫基”是指芳氧基-C1-C8-烷基-S-；“杂芳氧基烷硫基”是指杂芳氧基-C1-C8-烷基-S-；其中芳氧基、杂芳氧基和烷基如上所定义。

对于本发明而言，“烷氧基亚氨基”是指烷氧基-N＝C-；烷氧基亚氨基烷基表示进一步被烷氧基亚氨基所取代的如上所定义的烷基。

对于本发明而言，“芳基烷氧基烷基”、“烷氧基烷氧基烷基”和“环烷基烷氧基烷基”表示进一步被如上所定义的芳基烷氧基、烷氧基烷氧基或者环烷基烷氧基所取代的如上所定义的烷基。

对于本发明而言，“苯基炔基”是进一步被苯基取代的炔基。

在本发明最优选的实施方案中，取代甲基包括进一步被例如呋喃基取代的甲基取代基。在本发明的另一实施方案中，呋喃基取代基进一步被甲基所取代。

在本发明优选的实施方案中，三氟甲氧基为CF₃O-。在本发明另一实施方案中，三氟甲硫基为CF₃S-。

在本发明的一种实施方案中，三氟乙氧基包括但不限于CF₃CH₂O-。在本发明的另一实施方案中，三氟乙硫基包括但不限于CF₃CH₂S-。

术语“单烷基氨基”和“二烷基氨基”是指具有一个或两个烷基的部分，其中烷基链具有1～8个碳原子并且所述烷基可以相同或者不同。术语“单烷基氨基烷基”和“二烷基氨基烷基”是指具有一个或者两个键接在连接1～8碳原子烷基的氮原子上的烷基(相同或者不同)的单烷基氨基和二烷基氨基部分。术语“取代的单烷基氨基烷基”和“取代的二烷基氨基烷基”是指进一步被独立地选自芳基的一个或多个取代基所取代的单烷基氨基烷基和二烷基氨基烷基部分。

“酰基”是式-(C＝O)-烷基或者-(C＝O)-全氟烷基的基团，其中烷基或者全氟烷基具有1～7个碳原子；优选的实例包括但不限于乙酰基、丙酰基、丁酰基、三氟乙酰基。

“酰氨基”是指式-NH(C＝O)-烷基或者-N(烷基)(C＝O)-烷基，其中烷基独立地具有1～7个碳原子。

对于本发明而言，术语“烷基亚磺酰基”是指R′SO-基团，其中R′为1～8个碳原子的烷基。“烷基磺酰基”是指R′SO₂-基团，其中R′为1～8个碳原子的烷基。“烷基磺酰基烷基”是指进一步被烷基磺酰基所取代的1～8个碳原子的烷基。“烷基亚磺酰氨基”、 “烯基亚磺酰氨基”、“炔基亚磺酰氨基”为R′SO₂NR″-基团，其中R′分别为1～8个碳原子的烷基、2～8个碳原子的烯基或者2～8个碳原子的炔基，并且R″为氢或者1～8个碳原子的烷基。

对于本发明而言，术语“杂环基团”是指含有至少一个如上所定义的饱和或者部分饱和杂芳基的杂环体系(单环或者双环)，并且它可以被取代或者未被取代。杂环基团包括但不限于：(1)含有1～4个选自S、N和O的杂原子的五元或者六元单环饱和或者部分饱和杂芳基；和(2)其中苯基、吡啶、嘧啶或者哒嗪环稠合至含有1～4个选自S、N和O的杂原子的五元或者六元饱和或部分饱和杂芳基的双环杂环。杂环基团的实例包括但不限于以下部分：氮杂环丁烷基、1，4-二氧六环、1，3-二氧戊环、环己亚胺、哌嗪、哌啶、吡咯烷、吗啉、硫代吗啉、二氢苯并咪唑、二氢苯并呋喃、二氢苯并噻吩、二氢苯并_唑、二氢呋喃、二氢咪唑、二氢吲哚、二氢异_唑、二氢异噻唑、二氢_二唑、二氢_唑、二氢吡嗪、二氢吡唑、二氢吡啶、二氢嘧啶、二氢吡咯、二氢喹啉、二氢四唑、二氢噻二唑、二氢噻唑、二氢噻吩、二氢三唑、二氢氮杂环丁烷、二氢-1，4-二氧六环、四氢呋喃、四氢吡喃、四氢噻吩、四氢噻喃、四氢喹啉和四氢异喹啉。在本发明的一种实施方案中，所述取代杂芳基可以任选被独立地选自但不限于羰基和烷基磺酰基的基团单取代、二取代、三取代或者四取代。

对于本发明而言，术语“杂环-烷基”表示进一步被如上定义的杂环基所取代的如上定义的烷基。

对于本发明而言，术语“BB7”表示源于HCV复制子的RNA依赖性RNA聚合酶丙型肝炎病毒蛋白质序列。关于BB7的论述和相关技术可以得自于Blight，K.等人的(2000)Science 290：1972-1974。BB7根据Apath，LLC(893 North Warson Road，Saint Louis Missouri 63141，USA)的许可可以使用。BB7还被称为Con1 HCV序列，关于Con1的论述可以得自于以下文献中：Lohmann，V.等人(1999)Science285：110-113；Pietschmann，T.等人(2001)J.Virol.73：1252-1264；Lohmann V.等人(2001)J.Virol.75：1437-1449。

本发明化合物可以含有不对称碳原子并且本发明的一些化合物可以含有一个或多个不对称中心，与此产生了立体异构体，比如对映异构体和非对映异构体。本发明立体异构体根据Cahn-Ingold-PrelogSystem进行命名。虽然在式I中并没有表明其立体化学，但是本发明包括所有可能的立体异构体；以及外消旋混合物与其它R和S立体异构体混合物(不等量对映异构体的混合物的scalemic混合物)及其药学上可接受的盐。应当注意，取决于所示手性中心上的取代基，在手性中心上具有相同相对构型的本发明立体异构体可能仍会具有不同的R和S命名。

对于含有两个手性中心的本发明化合物，四种可能的立体异构体都是可能的；可以将这四种立体异构体分为两对非对映异构体的外消旋对。本发明的这些化合物可以以外消旋非对映异构体的形式存在，它们可以根据1997 Chemical Abstracts Index Guide，Appendix IV(Columbus，OH)中所述约定进行命名，将第一个提及的手性原子命名为R^*，如果下一个提及的手性原子与第一个提及的立构中心具有相同手性，那么也将其命名为R^*，如果它与第一个提及的立构中心具有相反的手性则将其命名为S^*。另外，由于存在预定义的立构中心，因此本发明的这些化合物可以作为两种非对映异构体的非外消旋混合物存在。在这些情形中，预定义的立构中心基于Cahn-Ingold-PrelogSystem进行指定，将不明确的立构中心表示为R^*，从而表示在此中心上R和S立体异构体都存在。本发明具有两个手性中心但是作为单个立体异构体存在的化合物利用Cahn-Ingold-Prelog System进行描述。

基于式I中C1碳位置上的手性中心，本发明优选的实施方案为如下所示的式I(a)化合物：

异构体A

对于本发明而言，在式I(a)中在C₁上的构型还被称为“异构体A”，在本文中C1上的相反构型定义为“异构体B”，其具有如下所示的式I(b)：

并构体B

在本发明的一个实施方案中，本发明化合物包括比例大于1∶1的异构体A和异构体B。在最优选的实施方案中，本发明化合物包括100％的异构体A。在本发明的另一实施方案中，本发明化合物包括比例至少为约9∶1的异构体A和异构体B之比。在本发明的另一实施方案中，本发明化合物包括比例至少为约8∶1的异构体A和异构体B之比。另外，本发明化合物包括比例至少为约7∶1的异构体A和异构体B之比。

本发明的另一实施方案为式I中R₂为仲丁基。在优选的实施方案仲，仲丁基手性碳的S与R构型比例为1∶1。在另外的实施方案仲，仲丁基手性碳的S与R构型比例选自：至少7∶1、至少8∶1和至少9∶1。

在本发明最优选的实施方案仲，仲丁基手性碳的构型为100％S构型。

本发明优选的方面包括式I(c)化合物：

其中R₂、R₉、M和Y如上对式I化合物所定义。

在本发明另外的实施方案中，所述化合物选自如上所述的任何化合物。

本发明提供含有式I化合物和药学上可接受的载体介质的药物组合物：

其中：

R₂为氢、1～12个碳原子的直链烷基、3～12个碳原子的支链烷基、3～12个碳原子的环烷基、2～7个碳原子的烯基、2～7个碳原子的炔基、2～12个碳原子的烷氧基烷基、7～12个碳原子的芳基烷基或者烷基芳基、1～8个碳原子的氰基烷基、2～16个碳原子的烷硫基烷基、4～24个碳原子的环烷基-烷基、取代或者未取代的芳基、或者杂芳基；

R₃-R₆独立地为氢、1～8个碳原子的直链烷基、3～12个碳原子的支链烷基、3～12个碳原子的环烷基、2～7个碳原子的烯基、取代或者未取代的芳基、呋喃甲基、7～12个碳原子的芳基烷基或者烷基芳基、2～7个碳原子的炔基或者R₅和R₆与它们连接的环碳原子一起形成羰基；

R₇-R₈和R₁₀独立地为氢、1～8个碳原子的直链烷基、3～12个碳原子的支链烷基、3～12个碳原子的环烷基、2～7个碳原子的烯基、取代或者未取代的芳基、取代或者未取代的杂芳基、呋喃甲基、7～12个碳原子的芳基烷基或者烷基芳基、2～7个碳原子的炔基、苯基炔基、1～8个碳原子的烷氧基、7～12个碳原子的芳基烷氧基、1～8个碳原子的烷硫基、三氟甲氧基、三氟乙氧基、三氟甲硫基、三氟乙硫基、1～6个碳原子的酰基、COOH、COO-烷基、CONR₁₁R₁₂、F、Cl、Br、I、CN、CF₃、NO₂、1～8个碳原子的烷基亚磺酰基、1～6个碳原子的烷基磺酰基、吡咯烷基或者噻唑烷基；

R₉为氢、1～8个碳原子的直链烷基、3～12个碳原子的支链烷基、3～12个碳原子的环烷基、4～24个碳原子的环烷基-烷基、2～7个碳原子的烯基、2～7个碳原子的炔基、2～12个碳原子的烷氧基烷基、3～18个碳原子的烷氧基烷氧基烷基、芳基烷氧基烷基、环烷基烷氧基烷基、1～12个碳原子的羟烷基、2～16个碳原子的烷氧基亚氨基烷基、2～16个碳原子的烷硫基烷基、2～16个碳原子的烷基磺酰基烷基、2～16个碳原子的单烷基氨基烷基、3～16个碳原子的二烷基氨基烷基、3～16个碳原子的取代二烷基氨基烷基、取代或者未取代的芳基、7～12个碳原子的芳基烷基、7～12个碳原子的取代或者未取代杂芳基、取代或者未取代的杂芳基烷基、取代或者未取代的杂环基、和杂环-烷基；

M为一个键、CH₂或者CH₂CH₂，条件是当M为一个键时，那么R₉不是羟基、1～8个碳原子的直链烷基、3～12个碳原子的支链烷基或者芳基烷基；

或者其结晶形式或药学上可接受的盐。

本发明还提供含有式I(c)化合物和药学上可接受的载体介质的药物组合物：

其中R₂、R₉、M和Y如对式I所定义。

在R₃、R₄、R₅、R₆、R₇、R₈、R₉或者R₁₀上具有酸性部分的式I化合物的药学上可接受的盐可以由有机和无机碱形成。例如碱金属盐(钠、锂或者钾盐)和N-四烷基铵盐(比如四丁基铵盐)。类似地，当本发明化合物在R₃、R₄、R₅、R₆、R₇、R₈、R₉或者R₁₀上含有碱性部分时，其盐可以由有机和无机酸形成。例如，所述盐可以由以下酸形成：乙酸、丙酸、乳酸、柠檬酸、酒石酸、琥珀酸、富马酸、马来酸、丙二酸、扁桃酸、苹果酸、邻苯二甲酸、氢氯酸、氢溴酸、磷酸、硝酸、硫酸、甲磺酸、萘磺酸、苯磺酸、甲苯磺酸、樟脑磺酸和类似已知的可接受的酸。

在一种实施方案中，本发明提供了抑制丙型肝炎RNA依赖性RNA聚合酶NS5B的方法。该方法包括使细胞接触有效量的化合物，从而降低或者防止NS5B发挥功能。上述细胞可以是哺乳动物细胞，并且更明确而言为人类细胞。上述细胞还可以是细菌细胞，比如，例如为大肠埃希菌。上述细胞包括但不限于神经元细胞、内皮细胞、胶质细胞、小神经胶质细胞、平滑肌细胞、体细胞、骨髓细胞、肝细胞、肠细胞、生殖细胞、肌细胞、单核吞噬细胞、内皮细胞、肿瘤细胞、淋巴细胞、系膜细胞、视网膜上皮细胞、视网膜血管细胞、神经节细胞或者干细胞。所述细胞可以是正常细胞、活化细胞、新塑细胞、病态细胞或者受感染细胞。

在另一实施方案中，本发明提供了治疗或者预防哺乳动物中丙型肝炎感染的方法。据此，本发明提供给哺乳动物包括组合或者结合有药学上可接受的载体的本发明化合物的药物组合物。本发明化合物可以作为单一治疗剂或者协同其它用于治疗或者预防丙型肝炎病毒感染的治疗有效化合物或治疗剂一起给药哺乳动物。

优选所述化合物经口服或者皮下施用而进行提供。所述化合物可以通过以下方式进行提供：病灶内、腹膜内、肌内或者静脉内注射；输液；微脂粒介导传递；局部、经鼻、肛门、阴道、舌下、尿道、透皮、鞘内、眼睛或者耳传递。为了在提供本发明化合物中获得一致性，优选本发明化合物为单位剂量的形式。适宜的单位剂型包括片剂、胶囊、和在小袋或者管形瓶中的粉剂。上述单位剂型可以含有0.1～100mg本发明化合物，优选2～50mg。更进一步优选的单位剂型含有5～25mg本发明化合物。本发明化合物可以以约0.01～100mg/kg或者优选以0.1～10mg/kg的剂量范围口服给药。上述化合物可以分为每天1～6次给药，并且更通常为每天1～4次。其有效量对于本领域熟练的技术人员是显而易见的，并且这还取决于化合物的形式。本领域熟练的技术人员按常规进行经验性活性试验，从而确定化合物在生物测定中的生物活性并且由此确定给药的适当剂量。

本发明化合物可以与常规的赋形剂进行配制，比如填料、崩解剂、粘合剂、润滑剂、增香剂、着色剂或者载体。上述载体可以是，例如稀释剂、湿润剂、局部载体、水溶液、非水溶液或者固体载体。所述载体可以是聚合物或者牙膏。本发明中药学上可接受的载体介质包括任何标准的药学上可接受的载体，比如磷酸盐缓冲盐水溶液、乙酸盐缓冲盐水溶液、水、乳剂(比如油/水乳剂或者甘油三酸酯乳剂)、各种形式的润湿剂、片剂、包衣片剂和胶囊。

当口服或者局部提供时，本发明化合物通过在不同的载体中递送提供给对象。一般地，上述载体包括赋形剂，比如淀粉、牛奶、食糖、某些类型的粘土、凝胶、硬脂酸、滑石、植物脂肪或者植物油、树胶或者乙二醇。具体的载体将以期望的传递方法为基础进行选择，例如，磷酸盐缓冲盐水(PBS)可以用于静脉内或者系统传递，和植物脂肪、乳膏、油膏、软膏或者凝胶可以用于局部传递。

本发明化合物可以与对治疗或者预防丙型肝炎感染有用的适宜稀释剂、防腐剂、增溶剂、乳化剂、助剂和/或载体一起递送。上述组合物为液剂或者冻干剂或者否则为无水制剂，并且其包括多种缓冲范围(例如，Tris-HCl，乙酸盐，磷酸盐)、pH值和离子强度的稀释剂、防止吸收在表面的比如清蛋白或者凝胶的添加剂、净洗剂(例如，TWEEN 20，TWEEN 80，PLURONIC F68，胆汁酸盐)、增溶剂(例如，甘油、聚乙烯甘油)、抗氧化剂(例如抗坏血酸、偏硫酸氢钠)、防腐剂(例如，水杨乙汞、苄醇、对羟基苯甲酸酯)、胀量物质或者强壮改性剂(例如，乳糖、甘露醇)、比如聚乙二醇共价连接聚合物、金属离子络合物，或者将上述化合物并入或者结合在水凝胶或者微脂粒的微粒制剂、微乳剂、胶团、单层或者多层囊、红细胞影或者球粒体之中或者之上。上述组分将影响所述化合物或者组合物的物理状态、溶解度、稳定性、体内释放速率和体内清除速率。组合物的选择将取决于能够治疗或者预防丙型肝炎病毒感染的化合物的物理和化学性质。

本发明化合物可以经使化合物在一段时间内缓释的胶囊进行局部递送。控释或者缓释组合物包括亲油贮存(例如，脂肪酸、石蜡、油)的制剂。

此外，本发明提供了用作预防丙型肝炎感染的活性治疗物质的本发明化合物。式I化合物就是用于治疗丙型肝炎病毒感染的具体化合物。

此外，本发明提供了治疗人类丙型肝炎感染的方法，该方法包括给药受感染个体有效量的本发明化合物或者药物组合物。

此外，本发明提供了药物组合物的控释治疗学剂型，其中所述组分被结合入传递体系中。

上述剂型控制药物组合物的释放，使得血液中药物组合物的有效浓度可以在延长期间得到保持，并且组合物的释放应当使得其在血液中的浓度在延长期间保持相对固定，从而改良其治疗学效果和/或使副作用最小。另外，控释系统将影响药物组合物的血浆浓度产生极小的波峰向波谷的波动。

本发明提供了在哺乳动物中治疗或者预防丙型肝炎病毒感染的方法，包括向哺乳动物提供有效量的至少一种药物组合物，其中至少一种药物组合物含有下式化合物：

其中：

R₁为氢、1～8个碳原子的直链烷基、3～12个碳原子的支链烷基、3～12个碳原子的环烷基、2～7个碳原子的烯基、2～7个碳原子的炔基或者7～12个碳原子的芳基烷基或烷基芳基；

Y为一个键、CH₂、CH₂CH₂、芳基、或者R₂和Y可以连同它们连接的环碳原子一起另外形成3～8个碳原子的螺环烷基环；或者

其结晶形式或药学上可接受的盐。

本发明还提供了在哺乳动物中治疗或者预防丙型肝炎病毒感染的方法，包括提供给哺乳动物有效量的至少一种药物组合物，其中所述至少一种药物组合物包括式I(c)化合物：

其中R₂、R₉、M和Y如上对式I化合物所定义。

此外，本发明方法包括提供给哺乳动物有效量的至少一种生物活性剂。

在本发明方法的实施方案中，所述至少一种生物活性剂在上述至少一种药物组合物提供之前提供、与上述至少一种药物组合物同时提供或者在上述至少一种药物组合物提供之后提供。在本发明方法的另一实施方案中，所述化合物为其结晶形式或者药学上可接受的盐。

在本发明方法的另一实施方案中，所述至少一种生物活性剂选自干扰素、聚乙二醇化(pegylated)干扰素、利巴韦林、蛋白酶抑制剂、聚合酶抑制剂、小分子干扰RNA化合物、反义化合物、核苷酸类似物、核苷类似物、免疫球蛋白、免疫调节剂、肝保护药、消炎药、抗生素、抗病毒剂和抗感染化合物。在另一实施方案中，所述至少一种生物活性剂为聚乙二醇化干扰素。在另一实施方案中，聚乙二醇化干扰素为聚乙二醇化干扰素-α。

当彼此组合使用(即含有所述化合物的药物组合物彼此同时给药或者以任何次序顺序给药)时，本发明化合物或者其前体和它们的异构体及其药学上可接受的盐还可以用于在有生命宿主中治疗和预防病毒感染(特别是丙型肝炎感染)和疾病。此外，在此提供的化合物的组合可以以各自相应的药物组合物提供给对象，同时或者顺序提供其它生物活性剂，包括但不限于：干扰素、聚乙二醇化干扰素、利巴韦林、蛋白酶抑制剂、聚合酶抑制剂、小分子干扰RNA化合物、反义化合物、核苷酸类似物、核苷类似物、免疫球蛋白、免疫调节剂、肝保护药、消炎药、抗生素、抗病毒药和抗感染化合物。此外，本发明提供了使用一种或多种吡喃并吲哚衍生物的联合疗法，即至少两种各自含有本发明不同化合物的药物组合物同时或者顺序提供给需要其的对象，并且上述疗法还可以进一步包括同时或者顺序提供其它药剂或者增效剂，比如阿昔洛韦、泛昔洛韦、缬更昔洛韦和相关化合物、利巴韦林和相关化合物、金刚烷胺和相关化合物、多种干扰素(比如，例如干扰素-α、干扰素-β和干扰素-γ等等)以及干扰素的其它形式(比如聚乙二醇化的干扰素)。另外，例如利巴韦林和干扰素的组合药物可以作为多重组合疗法的附加组合药物与至少一种本发明化合物一起给药。

使用上述任何生物活性剂的联合疗法还可以顺序给药，即首先用含有本发明化合物的第一种药物组合物进行治疗，然后用含有本发明第二种化合物的第二种药物组合物进行治疗，其中第二种化合物不同于第一种化合物；另外，可以使用两种或者更多种药物组合物同时进行治疗，其中每种药物组合物都含有不同的本发明化合物。序贯治疗可以在使用药物组合物完成第一种疗法之后的合理时间内进行。用各自含有不同本发明化合物的相应药物组合物进行的治疗可以同时提供于相同的日剂量或者分开的剂量种。也可以提供联合疗法，其中含有至少一种本发明一种化合物的药物组合物施用在另外含有至少一种生物活性剂的组合物中，即为单个剂量。同时和顺序联合疗法(对于含有至少两种本发明化合物的组合药物组合物或者含有至少一种本发明化合物和至少一种生物活性剂的组合物)的剂量都将取决于药物组合物各组分的吸收、分布、代谢作用和排泄速率以及本领域熟练技术人员熟知的其它因素。药物组合物的剂量值还随需要缓解的疾病的严重程度而变化。此外，应当理解，对于任何具体的对象，具体的给药方案和日程可以在不同时间根据个体需要以及给药或者指导给药药物组合物的人的专业判断进行调整。

在另一实施方案中，本发明化合物可以用来与其它HCV聚合酶抑制剂联合以联合疗法的方式治疗人类HCV。

在另一实施方案中，本发明化合物可以用来与其它HCV生活周期抑制剂以联合疗法的方式治疗人类HCV，所述HCV生活周期抑制剂例如HCV细胞附着或者病毒进入抑制剂、HCV翻译、HCV RNA转录或者复制抑制剂、HCV成熟、装配或者病毒释放抑制剂或者HCV酶活性抑制剂(比如HCV转核苷酸转移酶、解螺旋酶、蛋白酶或者聚合酶)。

药物组合物的组合疗法意图包括任何的本发明化合物与本发明其它化合物或者本发明之外的其它化合物在化学上兼容的组合，只要所述组合不会消除本发明化合物的抗病毒活性或者药物组合物自身的抗病毒活性即可。

本文使用的术语“干扰素-α”是指抑制病毒复制和细胞增殖以及调节免疫反应的高度同源特异性蛋白质家族。一般适宜的干扰素-α包括但不限于重组细胞干扰素α-2b(比如INTRON-A干扰素，得自于Schering Corporation，Kenilworth，NJ)、重组细胞干扰素α-2a(比如Roferon干扰素，得自于Hofman-La Roche，Nutley，NJ)重组细胞干扰素α-2C(比如BEROFOR ALPHA 2干扰素，得自于BoehringerIngelheim Pharmaceutical，Inc.，Ridgefield，Conn.)、干扰素α-n1(天然α干扰素的纯化混合物，比如SUMFERON，得自于Sumitomo，Japan，或者Wellferon干扰素α-n1(INS)，得自于Glaxo-WellcomeLtd.，London，Great Britain)、复合α干扰素(比如描述于U.S.专利Nos.4,897,471和4,695,623中的那些(其全部内容在此引入作为参考，尤其是其实施例7、8或者9)和得自于Amgen，Inc.，NewburyPark，Calif.的具体产品)、或者干扰素α-n3(通过Interferon Sciences进行制备的一种天然干扰素混合物，得自于Purdue Frederick Co.，Norwalk，Conn.，商品名为ALFERON)。优选使用干扰素α-2a或者α-2b。在所有干扰素中，由于干扰素α-2b在全世界被广泛批准用于治疗慢性丙型肝炎感染，因此最优选使用干扰素α-2b。所述干扰素α-2b的制备方法描述于U.S.专利No.4,503,901中。

本文使用的术语“聚乙二醇化干扰素”是指聚乙二醇修饰的干扰素偶联物，优选干扰素α-2a和α-2b。优选的聚乙烯-乙二醇-干扰素α-2b偶联物是PEG.sub.12000-干扰素α-2b。本文使用的词组“PEG.sub.12000-IFN α”是指比如根据国际申请No.WO 95/13090的方法制备并且在于扰素α-2a或者α-2b氨基和平均分子量12000的聚乙二醇之间含有尿烷连接的偶联物。

发明详述

本发明化合物根据以下反应方案或者其变形或者另外使用已知的化学方法可以轻易得到制备。在以下反应方案中，R₁、R₂、R₃、R₄、R₅、R₆、R₇、R₈、R₉、或者R₁₀、R₁₁、R₁₁和Y选自如上定义。

本发明优选的化合物可以如以下方案所述得到合成(方案1～6)。

方案1

方案2

方案3

方案4

方案5

方案6

本发明化合物抑制丙型肝炎聚合酶的能力通过以下试验方法进行证实：

将来自BK株(基因型1b)的NS5B用大肠埃希菌表达为其中21个C-末端氨基酸被替换成短衔接物和六组氨酸(GSHHHHHH)的蛋白质。将纯化蛋白质与放射性核苷酸混合并且使其复制填装内原性短发夹序列的杂聚RNA基质，形成大约760nt产物。将放射性产物俘获在过滤器上并且在除去未结合核苷酸之后对其进行定量。

试剂：

10mM尿核苷5′-三磷酸盐(UTP)(Promega#p116B)

10mM腺嘌呤5′-三磷酸盐(ATP)(Promega#p113B)

10mM胞嘧啶核苷5′-三磷酸盐(CTP)(Promega#p114B)

10mM鸟嘌呤5′-三磷酸盐(GTP)(Promega#p115B)

牛血清蛋白(BSA)10mg/ml NEB(100X为10mg/ml)#007-BSA

RNasein(Promega#N251X)40U/μl

A-[33P]-GTP(NEN-easytides NEG/606H 3000 Ci/mmol，370MBq/ml，10mCi/ml)

Falcon聚丙烯96孔板(Becton Dickinson#351190)

微孔多屏测定体系-96孔-过滤板#MADE NOB 50

通过Fisher配制的Optiphase Supermix(Wallac)

用于微β(microbeta)1450-106盒的微孔多屏衬套[(Wallac)PerkinElmer#1450-433]

1M(N-[2-羟乙基]哌嗪-N′-[2-乙磺酸])(HEPES)，pH值7.3

Amersham Pharmacia Biotec(US16924-500ml)

1M MgCl₂(SIGMA#M1028)

二硫苏糖醇(DTT)(固体)(SIGMA#D9779)

无核糖核酸酶水(GIBCO-BRL#10977-023)

二甲亚砜(Aldrich#27685-5)

Basilen Blue(Sigma，B5520)

0.5M乙二胺四乙酸(EDTA)，pH值8(GIBCO-BRL#15575-020)

磷酸氢二钠(七水合物)(Na₂HPO₄·7H₂O；Baker#3824-07)

磷酸(Baker，#0262.02)

其它试剂的制备：

0.5M磷酸钠缓冲液。每升中，称重134g Na₂HPO₄·7H₂O，加入水至900ml。用磷酸将pH值调节至7.0。加满水至1L。

将核苷酸1∶1000～10μM(GTP和CTP)或者1∶100～100μM(ATP和UTP)稀释到无核糖核酸酶水中。

方法：

(1)10μl在15％二甲亚砜(DMSO)中为10μg/ml的化合物

当以1％DMSO中的100μg/ml化合物作为原料开始时：

将5μl30％DMSO分配到每个孔中

将5μl(100μg/ml)化合物分配到每个孔中。

当以15％DMSO中的50μg/ml化合物作为原料开始时：

向每个孔中加入10μl化合物。

(2)酶混合：

原料	最终浓度(在50μl测定容积中)	每20μl混合物(1个反应)	每600个反应
原料	最终浓度(在50μl测定容积中)	每20μl混合物(1个反应)	每600个反应	焦碳酸二乙酯(DEPC)水		17.06μl	10236μl
1M HEPES，pH7.5	20mM	0.5μl	300μl	焦碳酸二乙酯(DEPC)水		17.06μl	10236μl
1M HEPES，pH7.5	20mM	0.5μl	300μl	1M MgCl₂	5mM	0.25μl	150μl
100mM DTT	1mM	0.5μl	300μl	1M MgCl₂	5mM	0.25μl	150μl
100mM DTT	1mM	0.5μl	300μl	100μM UTP	0.5μM	0.25μl	150μl
100μM ATP	1μM	0.5μl	300μl	100μM UTP	0.5μM	0.25μl	150μl
100μM ATP	1μM	0.5μl	300μl	10μM CTP	0.08μM	0.4μl	240μl
10μM GTP	0.025μM	0.125μl	75μl	10μM CTP	0.08μM	0.4μl	240μl
10μM GTP	0.025μM	0.125μl	75μl	BSA，10mg/ml	0.05mg/ml	0.25μl	150μl
HCV RdRp NS5B d21BK(500μ/ml或者～7.5μM)	24nM	0.16μl	96μl	BSA，10mg/ml	0.05mg/ml	0.25μl	150μl

总计：20μl 12ml

将20μl酶混合物加入到测定板的各个孔中。将化合物和酶在室温下培养15分钟。

(3)模板混合物的提前准备

在4℃下，在微量离心机中旋转沉淀一管RNA(5μg/管，贮存在75％乙醇和0.3M乙酸钠中)20分钟。一管足以用于1～1.5个板。通过翻转上述管，从管中除去尽可能多的乙醇。注意应当平缓，团粒RNA可能没粘附在管上。真空干燥RNA。通过加入1ml DEPC水溶液再次悬浮RNA，紧紧闭合该管盖。为了溶解RNA，在冰上将RNA溶液培养～60分钟并且温和地进行涡旋。略略旋转以确保在打开盖子之前，所有的RNA溶液都沉积在管的底部。将RNA溶液平缓地转移入5ml或者更大的管内。另外加入3ml DEPC水溶液(总体积为4ml)。

加入以下体积的试剂

原料	最终浓度	每20μl混合物(1个反应)	每600个反应
原料	最终浓度	每20μl混合物(1个反应)	每600个反应	不含RNAse的水		2.98μl	1788μl
HEPES，1M	20mM	0.5μl	300μl	不含RNAse的水		2.98μl	1788μl
HEPES，1M	20mM	0.5μl	300μl	RNase抑制剂(40U/μl)	0.4μ/μl	0.5μl	300μl
33P-GTP 3000Ci/mmol，10μCi/μl(3.3μM)	0.025μM	0.0125μl	7.5μl	RNase抑制剂(40U/μl)	0.4μ/μl	0.5μl	300μl
33P-GTP 3000Ci/mmol，10μCi/μl(3.3μM)	0.025μM	0.0125μl	7.5μl	POFRNA模板	3nM	16μl	9600μl

每个反应中加入20μl模板混合物(即每个反应中20ng pOF或者～3nM)

(4)在室温下(22-25℃)发展反应2小时。

(5)通过加入50μl的170mM EDTA终止反应。

EDTA的最后浓度为85mM。

(6)通过将200μl pH值7.0的0.5M磷酸钠缓冲液加入各个孔中，预湿微孔多屏测定板的过滤器。将其在室温下放置2～3分钟。

(7)将多屏过滤板置于Millipore Manifold上并且开启真空，使得缓冲液流过。关上真空。将80μl反应产物转移到过滤板的各个孔中。放置2～3分钟。打开真空从而过滤反应产物。

(8)关上真空。将200μl pH值7.0的0.5M磷酸钠缓冲液加入到各个孔中，从而洗涤过滤器。打开真空。

再重复步骤(8)三次。

(9)除去聚丙烯底板。在底部用纸巾点样干燥过滤器。在工作台上风干过滤板1小时。加入40μl Super Mix闪烁体。用带子密封板的顶部。将上述板置入Packard载体或者微β载体中。

(10)利用Packard Top计数或者微β计数管对板进行计数。计数(例如使用程序10)Top计数中的³³P或者微β中的³³P程序。

参阅，Ferrari等人，1999，J.Virology 73：1649-1654：″Characterization of soluble Hepatitis C virus RNA-dependent RNApolymerase expressed in E.coli and Takamizawa et al 1991″和J.Virology 65：1105-1113：″Structure and characterization of theHepatitis C virus genome isolated from humancarriers,″，它们的内容在此引入作为参考。

本发明化合物抑制丙型肝炎聚合酶如表1中所示：

表1

实施例	BKIC₅₀A＝＜0.5μM，B＝0.5 to＜5.0μM，C＝≥5μM	BB7IC₅₀A＝＜0.5μM，B＝0.5 to＜5.0μM，C＝≥5μM
实施例	BKIC₅₀A＝＜0.5μM，B＝0.5 to＜5.0μM，C＝≥5μM	BB7IC₅₀A＝＜0.5μM，B＝0.5 to＜5.0μM，C＝≥5μM	1	A	A
2	B	A	1	A	A
2	B	A	3	B	A
4	B	A	3	B	A
4	B	A	5	B	A
6	B	A	5	B	A
6	B	A	7	B	B
8	B	A	7	B	B
8	B	A	9	B	B
10	B	B	9	B	B
10	B	B	11	B	B
12	B	B	11	B	B
12	B	B	13	B	B
14	B	B	13	B	B

实施例	BKIC₅₀A＝＜0.5μM，B＝0.5 to＜5.0μM，C＝≥5μM	BB7IC₅₀A＝＜0.5μM，B＝0.5 to＜5.0μM，C＝≥5μM
实施例	BKIC₅₀A＝＜0.5μM，B＝0.5 to＜5.0μM，C＝≥5μM	BB7IC₅₀A＝＜0.5μM，B＝0.5 to＜5.0μM，C＝≥5μM	15	A	A
16	B	A	15	A	A
16	B	A	17	B	C
18	B	A	17	B	C
18	B	A	19	B	B
20	B	B	19	B	B
20	B	B	21	A	A
22	A	A	21	A	A
22	A	A	23	A	A
24	A	A	23	A	A
24	A	A	25	A	A
26	A	A	25	A	A
26	A	A	27	A	A
28	A	A	27	A	A
28	A	A	29	A	A
30	A	A	29	A	A
30	A	A	31	B	B
32	A	A	31	B	B
32	A	A	33	A	A
34	A	A	33	A	A
34	A	A	35	A	A
36	A	A	35	A	A
36	A	A	37	A	A
38	A	A	37	A	A
38	A	A	39	A	A
40	A	A	39	A	A
40	A	A	41	A	A
42	A	B	41	A	A
42	A	B	43	A	A
44	A	A	43	A	A
44	A	A	45	A	A
46	A	A	45	A	A
46	A	A	47	C	B
48	A	A	47	C	B
48	A	A	49	A	A
50	A	A	49	A	A
50	A	A	51	A	A
52	A	A	51	A	A

实施例	BKIC₅₀A＝＜0.5μM，B＝0.5 to＜5.0μM，C＝≥5μM	BB7IC₅₀A＝＜0.5μM，B＝0.5 to＜5.0μM，C＝≥5μM
实施例	BKIC₅₀A＝＜0.5μM，B＝0.5 to＜5.0μM，C＝≥5μM	BB7IC₅₀A＝＜0.5μM，B＝0.5 to＜5.0μM，C＝≥5μM	53	A	A
54	A	A	53	A	A
54	A	A	55	A	A
56	A	A	55	A	A
56	A	A	57	C	B
58	B	B	57	C	B
58	B	B	59	A	A
60	A	A	59	A	A
60	A	A	61	A	A
62	A	A	61	A	A
62	A	A	63	A	A
64	A	A	63	A	A
64	A	A	65	A	A
66	A	A	65	A	A
66	A	A	67	A	A
68	A	A	67	A	A
68	A	A	69	A	A
70	A	A	69	A	A
70	A	A	71	A	A
72	A	A	71	A	A
72	A	A	73	A	A
74	A	A	73	A	A
74	A	A	75	A	A
76	A	A	75	A	A
76	A	A	77	A	A
78	A	A	77	A	A
78	A	A	79	A	A
80	A	A	79	A	A
80	A	A	81	A	A
82	A	A	81	A	A
82	A	A	83	A	A
84	A	A	83	A	A
84	A	A	85	A	A
86	A	A	85	A	A
86	A	A	87	A	A
88	A	A	87	A	A
88	A	A	89	A	A
90	A	A	89	A	A

实施例	BKIC₅₀A＝＜0.5μM，B＝0.5to＜5.0μM，C＝≥5μM	BB7IC₅₀A＝＜0.5μM，B＝0.5 to＜5.0μM，C＝≥5μM
实施例	BKIC₅₀A＝＜0.5μM，B＝0.5to＜5.0μM，C＝≥5μM	BB7IC₅₀A＝＜0.5μM，B＝0.5 to＜5.0μM，C＝≥5μM	91	A	A
92	A	A	91	A	A
92	A	A	93	A	A
94	A	A	93	A	A
94	A	A	95	A	A
96	A	A	95	A	A
96	A	A	97	A	A
98	B	A	97	A	A
98	B	A	99	A	A
100	A	A	99	A	A
100	A	A	101	A	A
102	A	A	101	A	A
102	A	A	103	A	A
104	A	A	103	A	A
104	A	A	105	A	A
106	A	A	105	A	A
106	A	A	107	A	A
108	A	A	107	A	A
108	A	A	109	A	A
110	A	A	109	A	A
110	A	A	111	A	A
112	A	A	111	A	A
112	A	A	113	A	A
114	A	A	113	A	A
114	A	A	115	A	A
116	A	A	115	A	A
116	A	A	117	A	A
118	A	A	117	A	A
118	A	A	119	A	A
120	A	A	119	A	A
120	A	A	121	A	A
122	A	A	121	A	A
122	A	A	123	A	A
124	A	A	123	A	A
124	A	A	125	A	A
126	A	A	125	A	A
126	A	A	127	A	A
128	A	A	127	A	A

实施例	BKIC₅₀A＝＜0.5μM，B＝0.5 to＜5.0μM，C＝≥5μM	BB7IC₅₀A＝＜0.5μM，B＝0.5 to＜5.0μM，C＝≥5μM
实施例	BKIC₅₀A＝＜0.5μM，B＝0.5 to＜5.0μM，C＝≥5μM	BB7IC₅₀A＝＜0.5μM，B＝0.5 to＜5.0μM，C＝≥5μM	129	A	A
130	A	A	129	A	A
130	A	A	131	-	-
132	A	A	131	-	-
132	A	A	133	A	A
134	A	A	133	A	A
134	A	A	135	A	A
136	A	A	135	A	A
136	A	A	137	A	A
138	A	A	137	A	A
138	A	A	139	A	A
140	A	A	139	A	A
140	A	A	141	A	A
142	A	A	141	A	A
142	A	A	143	A	A

本发明化合物抑制基本用人类肝细胞株表示的丙型肝炎病毒复制的能力通过以下试验方法进行证实：

克隆A细胞(经Apath，LLC批准)源自Huh-7细胞(人类肝癌细胞系)并且基本用伴生放大HCV复制子(1b)基因组表达HCV复制蛋白质。将细胞保存并且使其在DMEM/10％FCS/1mg/ml G418中传代(遗传霉素来自Gibco#11811-023；其它介质组分如下“elisa介质”中所述)。注意，每3～4天应当将细胞单层通过1∶3或者1∶4通道以使其保持在未汇合状态。复制子对细胞代谢/增殖态是极端敏感的，在汇合成片的单层中复制子复制数将迅速下降(静止细胞)。在理想条件下，平均每个细胞复制1000个HCV复制子基因组。

试剂：

Elisa介质：

Dulbecco′s Modified Eagle Media(DMEM)(Gibco#12430-047)

2％胎牛血清(FCS)(HyClone#SH₃0070.03)

1X pen/链球菌(Gibco#15140-122)

1X非必需氨基酸(NEAA)(Gibco#11140-050)

无G418

戊二醛(Fisher#02957-4)

TWEEN-20，10％(Roche#1332465)

TRITON X-100(Sigma#T-8787)

在磷酸盐缓冲盐水中的Superblock(PBS)(Pierce#37515)

NS5a单克隆抗体(Virostat#1873)

Goat antimouse-HRP单克隆抗体(BioRad#172-1011)

3，3′，5，5′-四甲基联苯胺(TMB)基质(Sigma#T-0440)

化合物稀释/细胞板：

药物板制备(母板)

将10μl化合物(在DMSO中)加入到母板的柱3中。剩余的柱中加入5μl DMSO。将母板放在一边，直至准备进行连续稀释为止。

对照药物

药物和细胞加成

各个板的制备方法包括：

通过将52μlElisa介质加入到各个孔中，制备细胞板(子系板)

在母板中，从柱3至柱12连续转移50μl/孔。

从母板中转移8μl至子系板(全部96个孔)。

将子系板放置在细菌培养器中直至细胞得到制备。

收集克隆A细胞并且直接将其以0.7×10⁵个细胞/ml，100μl/孔置于子系板中。

所有的板都在37℃下、5％CO₂中培养3天。

Elisa测定：

通过轻弹成为沉淀，从96孔板中除去介质(细胞应当大约80％汇合)。

加入130μl/孔1X PBS+0.05％戊二醛。

在37℃下培养1小时。

通过轻弹形成沉淀进行移除。

用300μl/孔PBS洗涤3X，每次洗涤振荡5分钟。通过轻弹形成沉淀进行移除。

加入130μl/孔PBS+0.05％TWEEN-20+0.1％TRITON X-100。

在37℃下培养10分钟。

通过轻弹形成沉淀进行移除。

向PBS中加入300μl/孔Superblock。

在37℃下培养1小时。

通过轻弹形成沉淀进行移除。

在最后洗涤期间，在Superblock+0.02％TWEEN-20中形成NS5aMonoclonal-抗体(Mab)的1∶100稀释物。

在最后洗涤之后，加入50μl/孔经稀释的Mab。

在37℃下培养1小时。

通过轻弹形成沉淀进行移除。

用300μl/孔 PBS+0.02％TWEEN-20洗涤5X，每次洗涤振荡5分钟。

通过轻弹形成沉淀进行移除。

在最后洗涤期间，在Superblock+0.02％TWEEN-20中形成goatantimouse-HRP Mab的1∶500稀释物。

在最后洗涤之后，加入50μl/孔经稀释的Mab。

在37℃下培养1小时。

通过轻弹形成沉淀进行移除。

用300μl/孔PBS+0.02％TWEEN-20洗涤3X，每次洗涤振荡5分钟。通过轻弹形成沉淀进行移除。

在最后洗涤之后，加入130μl/孔室温TMB基质。

对其进行培养，直至蓝色加深。

加入130μl/孔1N HCl以终止反应(颜色由蓝色变成黄色)。

读取板的吸光度(O.D.)450光栅。

结果分析：IC₅₀(μM)；IC₅₀(μg/ml)；％抑制

参考化合物：干扰素-a₂；4-30U/ml IC50

以下非限制具体实施例用于阐明制备式I化合物的合成方法。在这些实施例中，所有的化学品和中间体或者可以市场购买到或者可以通过文献中公开的标准方法进行制备或者它们对于有机合成领域熟练的技术人员是熟知的。

实施例1

5-溴-1-乙氧基羰基甲基-8-甲基-l-丙基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-7-羧酸苄酯

向1000mL圆底烧瓶(RBF)中加入4-溴-3-(2-羟基-乙基)-7-甲基-1H-吲哚-6-羧酸苄酯(12.03g，0.031mol)、丁酰乙酸乙酯(5.45mL，0.034mol)和500mL二氯甲烷(DCM)。在搅拌下将上述混合物冷却至0℃。在大约5分钟时间内，将三氟化硼乙醚配合物(BF₃·Et₂O)(9.82mL，0.078mol)加入到上述搅拌的混合物中。将该反应升温至环境温度并且搅拌1小时。然后用乙酸乙酯(EtOAc)对上述反应进行稀释、用饱和NaHCO₃(2×)和饱和NaCl进行洗涤、干燥(MgSO₄)并进行浓缩。使所得黄色油通过快速柱色谱在SiO₂上进行纯化，用10％EtOAc/己烷～20％EtOAc/己烷梯度进行洗脱。在己烷中研磨，从而得到13.71g(84.0％)白色粉末。

¹H NMR(CDCl₃)δ9.81(brs，1H)，7.89(s，1H)，7.40(m，5H)，5.35(s，2H)，4.21(m，2H)，3.95(m，2H)，3.15(t，J＝4.7Hz，2H)，3.00(m，J＝22.3Hz，2H)，2.73(s，3H)，2.00(m，2H)，1.29(m，4H)，0.88(t，J＝7.6Hz，3H).

5-氰基-1-乙氧基羰基甲基-8-甲基-1-丙基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-7-羧酸苄酯

向500mL RBF中加入5-溴-1-乙氧基羰基甲基-8-甲基-1-丙基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-7-羧酸苄酯(12.00g，23mmol)、100mL1-甲基-2-吡咯烷酮(NMP)和CuCN(20.34g，0.227mol)。将该反应加热至190℃，同时剧烈搅拌45分钟。然后将该反应冷却至环境温度并且用EtOAc进行稀释。将水(300mL)加入到上述混合物中，随后加入Celite/硅胶的1∶1混合物。将此悬浮液搅拌几分钟，然后将其滤过Celite垫片。用EtOAc对上述Celite进行洗涤，并且所得滤液用H₂O(5×)和饱和NaCl(1×)洗涤、用MgSO₄干燥并且进行浓缩。通过用己烷研磨，得到8.82g(81.8％)浅棕褐色固体。

¹H NMR(CDCl₃)δ10.11(brs，1H)，8.12(s，1H)，7.40(m，5H)，5.37(s，2H)，4.22(m，2H)，3.95(m，2H)，3.00(m，4H)，2.83(s，3H)，2.00(m，2H)，1.30(m，4H)，0.89(t，J＝7.6 Hz，3H).

5-氰基-1-乙氧基羰基甲基-8-甲基-1-丙基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-7-羧酸

向500mL Parr烧瓶中加入5-氰基-1-乙氧基羰基甲基-8-甲基-1-丙基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-7-羧酸苄酯(14.24g，0.030mol)、180mL 1∶1 MeOH/EtOAc和Pd(OH)₂(在C上为20％，3.02g)。在Parr振荡器上，在高于环境压力5psi的压力下，将上述烧瓶振荡30分钟。将上述反应混合物滤过Celite垫片、用甲醇洗涤并且进行浓缩。用己烷进行研磨，得到11.1g(96.4％)灰白色粉末。

¹H NMR(CDCl₃)δ10.21(brs，1H)，8.22(s，1H)，4.22(m，2H)，4.00(m，2H)，3.09(m，4H)，2.89(s，3H)，2.00(m，2H)，1.30(m，4H)，0.90(t，J＝7.6Hz，3H).

(5-氰基-7-羟甲基-8-甲基-1-丙基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-基)-乙酸乙酯

向0℃的可以根据上述步骤制备的5-氰基-1-乙氧基羰基甲基-8-甲基-1-丙基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-7-羧酸(11.1g，29.0mmol)的四氢呋喃(THF)(150mL)溶液中加入BH₃·THF(在THF中为1.0M，72.2mL，72.2mmol)。将冷却浴除去并且将所得溶液搅拌1.5小时。反应用3％HCl猝灭、用EtOAc稀释并且将各层分离。所得有机层用饱和NaHCO₃、H₂O和盐水洗涤、干燥(MgSO₄)并且在真空下进行浓缩。经快速色谱法在SiO₂上进行纯化，使用20％乙酸乙酯/二氯甲烷(EtOAc/DCM)作为洗脱液，得到8.28g(77％)浅绿色泡沫体。

ESI-MS m/z 369(M-H)-.¹H NMR(CDCl₃)δ9.72(bs，1H)，7.43(s，1H)，4.80(d，J＝5.5Hz，2H)，4.25(m，2H)，4.15(m，1H)，3.93(m，1H)，3.02(m，3H)，2.92(d，J＝17.0Hz，1H)，2.57(s，3H)，2.00(m，2H)，1.30(m，5H)，0.88(t，J＝7.6Hz，3H).

实施例2

(5-氰基-7-甲氧基甲基-8-甲基-1-丙基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-基)-乙酸

[5-氰基-8-甲基-1-丙基-7-(2，2，2-三氯-乙酰亚氨基氧基甲基)-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-基]-乙酸乙酯

向(5-氰基-7-羟甲基-8-甲基-1-丙基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-基)-乙酸乙酯(0.75g，2.0mmol)的DCM(12mL)溶液中加入氢化钠(9.7mg，4.0mmol)。10分钟之后，将三氯乙腈(608μL，6.0mmol)加入其中。将该反应搅拌4小时，在此之后再向其中另外加入三氯乙腈(200mL)。再搅拌45分钟之后，将氢化钠(4mg)加入其中。将上述反应置于0℃的致冷器中过夜。次日早晨，在将其升温至室温之后，再将另一等份氢化钠(9.7mg)加入其中。将该反应搅拌1.5小时、用H₂O猝灭并且用EtOAc进行稀释。将各层分离，所得有机层用盐水洗涤、干燥(MgSO₄)并进行浓缩，从而得到1.14g(109％)灰白色固体，该固体不经进一步纯化即可使用。

¹H NMR(CDCl₃)δ9.84(s，1H)，8.43(s，1H)，7.53(s，1H)，5.44(s，2H)，4.22(m，2H)，4.090(m，1H)，3.95(m，1H)，3.07(m，3H)，2.96(d，J＝15.2Hz，1H)，2.61(s，3H)，2.06(m，1H)，1.95(m，1H)，1.42(m，1H)，1.12(m，4H)，0.91(t，J＝7.3Hz，3H).

向0℃下的粗[5-氰基-8-甲基-1-丙基-7-(2，2，2-三氯-乙酰亚氨基氧基甲基)-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-基]-乙酸乙酯(45.7mg，0.089mmol)的DCM/环己醇(0.5mL/0.5mL)溶液中加入甲醇(14μL，0.35mmol)，随后加入三氟甲磺酸(2mL，0.022mmol)。将冷浴除去并且将所得溶液在环境温度下搅拌20分钟。通过加入饱和NaHCO₃将反应猝灭并且用EtOAc对其进行提取。所得有机层用H₂O和盐水洗涤、干燥(Na₂SO₄)和进行浓缩。所得粗物质在SiO₂上用DCM中0.5％乙醚～4％乙醚/DCM梯度进行色谱分离，从而得到13.3mg(53％)无色油。

¹H NMR(CDCl₃)δ9.67(s，1H)，7.40(s，1H)，4.55(s，2H)，4.21(m，2H)，4.05(m，1H)，3.91(m，1H)，3.34(s，3H)，3.06(m，3H)，2.91(d，J＝16.4Hz，1H)，2.53(s，3H)，2.11(m，1H)，1.95(m，1H)，1.29(m，5H)，0.88(t，J＝7.3Hz，3H).

在乙醇中使用10％NaOH(水溶液，150μL)将所得乙酯皂化过夜，从而得到8.8mg(71％)羧酸。

ESI-MS m/z 355(M-H)-；¹H NMR(CD₃OD)δ10.71(s，1H)，7.38(s，1H)，4.58(s，2H)，4.03(m，2H)，3.39(s，3H)，3.03(d，J＝14.1Hz，1H)，2.98(m，2H)，2.85(d，J＝14.1Hz，1H)，2.56(s，3H)，2.04(m，2H)，1.42(m，1H)，1.01(m，1H)，0.87(t，J＝7.3Hz，3H).

实施例3～19根据上述实施例1的方法进行合成，使用中间体[5-氰基-8-甲基-1-丙基-7-(2，2，2-三氯-乙酰亚氨基氧基甲基)-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-基]-乙酸乙酯并且使其与以下的醇进行偶合：乙醇、1-丙醇、异丙醇、环丁醇、环己醇、环丙烷甲醇、环丁烷甲醇、环戊烷甲醇、2-丁炔-1-醇、四氢-4H-吡喃-4-醇、(S)-3-羟基四氢呋喃、(R)-3-羟基四氢呋喃、苄醇、胡椒基醇、2，4-二甲基苄醇、3-噻吩甲醇和2，4-二甲基噻唑-5-甲醇。所得的酯在乙醇(EtOH)中使用10％NaOH(水溶液)进行水解。

实施例20

(5-氰基-8-甲基-7-苯氧基甲基-1-丙基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-基)-乙酸

向(5-氰基-7-羟甲基-8-甲基-1-丙基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-基)-乙酸乙酯(42mg，0.11mmol)的THF(1.1mL)溶液中加入三苯基膦(42mg，0.16mmol)和苯酚(15.3mg，0.16mmol)。将偶氮二甲酸二乙酯(DEAD，26μL，0.16mmol)经注射加入其中并且将该反应搅拌1.5小时，此时将另外一份DEAD和三苯基膦加入其中。再将该反应搅拌1.5小时。将EtOAc和10％NaOH加入其中并且将各层分离。所得有机层用10％NaOH(2×)、3％HCl(1×)、饱和NaHCO₃(1×)和盐水进行洗涤，干燥(Na₂SO₄)并进行浓缩。在SiO₂上用5％EtOAC/己烷～15％EtOAc/己烷梯度对粗产品进行快速色谱分离，得到16.3mg(32％)无色固体。

¹H NMR(CDCl₃)δ9.76(s，1H)，7.50(s，1H)，7.3(m，3H)，6.98(m，2H)，5.13(s，2H)，4.26(m，2H)，4.12(m，1H)，3.95(m，1H)，3.08(m，2H)，3.01(d，J＝17.0 Hz，1H)，2.92(d，J＝17.0Hz，1H)，2.56(s，3H)，2.04(m，1H)，1.97(m，1H)，1.3(m，5H)，0.89(t，J＝7.3Hz，3H).

在乙醇中使用10％NaOH(水溶液，150μL)在乙醇(1.5mL)中将所得乙酯皂化过夜，从而得到15.7mg(99％)羧酸。

ESI-MS m/z 417(M-H)-；¹H MR(d₆-DMSO)δ11.16(brs，1H)，7.58(s，1H)，7.32(m，2H)，7.05(m，2H)，6.96(t，J＝7.3Hz，1H)，5.20(s，2H)，3.98(m，2H)，2.98(d，J＝13.5Hz，1H)，2.88(m，2H)，2.75(d，J＝13.5Hz，1H)，2.57(s，3H)，2.00(m，2H)，1.25(m，1H)，0.80(m，4H).

实施例21利用上述实施例20的方法进行制备，使用中间体(5-氰基-7-羟甲基-8-甲基-1-丙基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-基)-乙酸乙酯并且使其与3-氟苯酚偶合。所得的酯在乙醇(EtOH)中使用10％NaOH(水溶液)进行水解。

实施例22

(5-氰基-7-环丙基甲氧基-8-甲基-1-丙基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-基)-乙酸

5-溴-2-甲基-1，3-二硝基-苯

将2，6-二硝基甲苯(1.0g，5.5mmol)悬浮在4mL浓H₂SO₄中。在10分钟时间期间，将1，3-二溴-5，5-二甲基乙内酰脲(0.86g，3mmol)分份加入到上述混合物中。经轻微放热之后，上述混合物暂时得到溶解，随后就形成了沉淀。将上述混合物在室温下搅拌1小时，然后将固体滤出。所得浅黄色固体在真空泵上进行干燥，从而给出1.33g(92％)产品。纯度94％(GC)；

MS 260，262m/z(Br图案)；¹H NMR(CDCl₃)δ8.13(s，2H)，2.52(s，3H).

5-溴-2-甲基-3-硝基-苯胺

将5-溴-2-甲基-1，3-二硝基-苯(1.0g，3.8mmol)与EtOH(23mL)和吡啶(1.56mL，19.0mmol)进行混合并且将其加热至回流。用4mL水对20％的硫化铵(3.89g)水溶液进一步进行稀释，然后在1小时期间通过加料漏斗将其加入到上述回流混合物中。加入完成之后，继续回流2小时。将上述反应冷却至室温，然后将其倾倒在水和冰(200mL)的1∶1混合物上。将所得嫩黄色沉淀固体滤出并且在真空泵上进行干燥，从而给出0.73g(83％)产品。纯度100％(GC)；

MS 230，232m/z(Br图案)；¹H NMR(CDCl₃).δ7.29(d，J＝1.7Hz，1H)，6.99(d，J＝1.7Hz，1H)，3.97(bs，2H)，2.18(s，3H).

5-溴-2-甲基-3-硝基-苯酚

将5-溴-2-甲基-3-硝基-苯胺(5.0g，21.5mmol)悬浮在浓H₂SO₄(6.4mL)和水(21.2mL)溶液中。用冰浴将上述混合物冷却至～0℃，然后将亚硝酸钠(1.66g，24.0mmol)的水(6.4mL)溶液通过加料漏斗以保持其中温度低于10℃的速度加入到混合物中。将此混合物在此温度下搅拌1小时。将上述混合物通过塑料导管转移到加热至130～150℃的浓H₂SO₄(21.2mL)和水(14.9mL)溶液中。在加入期间，混合物的内部温度降低至～80℃。对上述混合物进行加热，直至其内部温度返回到至少110℃为止。对混合物进行轻微冷却，然后将其倾倒在冰上(200mL)，随后用叔丁基甲基醚(3×100mL)对其进行萃取。所得有机层用MgSO₄干燥、过滤并且在减压下将溶剂除去，从而给出3.61g(72％)为暗橙红色固体的产品。纯度98.5％(GC)；

MS 231，233m/z(Br图案)；¹HNMR(CDCl₃)δ10.82(s，1H)，7.53(d，J＝1.7Hz，1H)，7.25(d，J＝1.7Hz，1H)，2.17(s，3H).

1-苄氧基-5-溴-2-甲基-3-硝基-苯

在0℃下，向NaH(767mg，32mmol)的DMF(10mL)浆液中加入5-溴-2-甲基-3-硝基-苯酚(6.4g，27mmol)的DMF(10mL)溶液。15分钟之后，上述溶液通过滴加苄基溴(3.4mL，28mmol)进行处理。将反应混合物升温至室温。16小时之后，所得溶液用盐水小心地进行稀释并且用乙醚(3×)进行提取。合并的有机物用Na₂SO₄干燥、过滤并进行浓缩。所得粗产品经快速色谱法(SiO₂，6/l己烷/EtOAc)进行纯化，从而给出5.4g(62％)褐黄色固体。

GCMS M⁺321m/z.¹H NMR(CDCl₃)δ7.57(s，1H)，7.42-7.36(m，6H)，5.10(s，2H)，2.35(s，3H).

3-苄氧基-4-甲基-5-硝基-苄腈

在室温下，用CuCN(18g，202mmol)对1-苄氧基-5-溴-2-甲基-3-硝基-苯(11g，34mmol)的NMP(40mL)溶液进行处理。将此溶液加热至180℃保持1小时。然后，将上述溶液冷却至室温、用H₂O和EtOAc进行稀释并且将其滤过Celite/硅胶垫片。所得滤饼用EtOAc进行充分地冲洗。所得滤液用EtOAc和盐水(2×)提取、用Na₂SO₄干燥、过滤并进行浓缩。所得的残余的油用乙醚稀释、用盐水洗涤、用Na₂SO₄干燥、过滤并进行浓缩。通过快速色谱法(SiO₂，5/1己烷/EtOAc)对所得残余油进行纯化，随后用Et₂O/己烷进行研磨，从而得到3.9g(43％)为灰白色固体的苄腈以及3g(37％)为亮棕褐色固体的氰基苯胺。

GCMS M⁺ 268m/z.¹H NMR(CDCl₃)δ7.69(s，1H)，7.43-7.39(m，6H)，5.17(s，2H)，2.47(s，3H).

3-氨基-5-苄氧基-4-甲基-苄腈

在室温下，用铁粉(2.5g)对3-苄氧基-4-甲基-5-硝基-苄腈(3.9g，14.5mmol)的EtOH(40mL)溶液进行处理，随后用乙酸(4.0mL)对其进行处理。然后，将该溶液加热回流2小时。然后，将上述溶液冷却至室温、滤过Celite/硅胶垫片并且用EtOAc对其进行冲洗。所得滤液在真空中浓缩、用EtOAc和饱和NaHCO₃(2×)提取、用盐水洗涤、用Na₂SO₄干燥、过滤并进行浓缩，从而给出3.3g(96％)亮棕褐色固体。

GCMS M⁺238 m/z.¹H NMR(CDCl₃)δ7.43-7.32(m，6H)，6.62(s，1H)，5.04(s，2H)，3.80(bs，2H)，2.11(s，3H).

3-氨基-5-苄氧基-2-碘-4-甲基-苄腈

在室温下，用CaCO₃(9g，90mmol)对3-氨基-5-苄氧基-4-甲基-苄腈(4.2g，22mmol)的二氯乙烷(40mL)和甲醇(20mL)溶液进行处理，随后用苄基三甲基铵二氯碘酸盐(9.2g，26mmol)对其进行处理。将此溶液加热回流7小时。然后，将上述反应冷却至室温、滤过Celite/硅胶垫片并且用EtOAc对其进行充分冲洗。所得滤液用10％NaHSO₃和盐水提取(2×)、用Na₂SO₄干燥、过滤并进行浓缩。所得残余物经快速色谱法(SiO₂，4/1己烷/EtOAc)进行纯化，随后用乙醚/己烷进行研磨，从而给出5.9g(86％)亮棕褐色固体。

GCMS M⁺364m/z.¹HNMR(CDCl₃)δ7.41-7.35(m，5H)，6.71(s，1H)，5.04(s，2H)，4.36(bs，2H)，2.20(s，3H).

6-苄氧基-3-(2-羟基-乙基)-7-甲基-2-三乙基甲硅烷基-1H-吲哚-4-腈

在室温下，用3-氨基-5-苄氧基-2-碘-4-甲基-苄腈(497mg，1.4mmol)的DMF(2mL)溶液对4-三乙基甲硅烷基-丁-3-炔-1-醇(913mg，4.9mmol)的DMF(2mL)溶液进行处理，随后用四丁基氯化铵(401mg，1.4mmol)、三苯基膦(115mg，0.43mmol)、乙酸钯(90mg，0.40mmol)和二异丙基乙胺(1.0mL，5.7mmol)对其进行处理。将此溶液加热至85℃保持3.5小时。将上述反应冷却至室温后，将反应混合物滤过Celite/硅胶垫片。滤板用EtOAc进行充分地冲洗。所得滤液用盐水(2×)提取、用Na₂SO₄干燥、过滤并进行浓缩。所得的残余物用乙醚稀释、用盐水洗涤(2×)、用Na₂SO₄干燥、过滤并进行浓缩。所得粗油状产物经快速色谱法(SiO₂，4/1～1/1己烷/EtOAc)进行纯化，从而给出422mg(72％)橙色油，经放置固化。

LCMS(M-H)419m/z.¹H NMR(CDCl₃)δ7.99(s，1H)，7.47-7.34(m，5H)，7.17(s，1H)，5.12(s，2H)，3.95-3.91(m，2H)，3.33-3.28(m，2H)，2.47(s，3H)，2.12-2.09(m，1H)，1.05-0.92(m，15H).

(±)-(7-苄氧基-5-氰基-8-甲基-1-丙基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-基)-乙酸乙酯

在室温下，用BF₃·OEt₂(0.08mL，0.64mmol)对6-苄氧基-3-(2-羟基-乙基)-7-甲基-2-三乙基甲硅烷基-1H-吲哚-4-腈(242mg，0.58mmol)的DCM(4mL)溶液进行处理。0.5小时之后，再将另外的BF₃·OEt₂(0.10mL)加入其中。0.5小时之后，将丁酰乙酸乙酯(0.12mL，0.75mmol)加入其中。3小时之后，该反应用盐水稀释、用EtOAc提取(3×)、用Na₂SO₄干燥、过滤并进行浓缩。将所得残余物与乙醚/己烷一起研磨，从而得到130mg(50％)为灰白色固体的吡喃化合物。

LCMS(M-H)445m/z.¹H NMR(CDCl₃)δ9.44(s，1H)，7.45-7.33(m，5H)，7.10(s，1H)，5.11(s，2H)，4.29-4.11(m，2H)，4.08-4.02(m，1H)，3.95-3.79(m，1H)，3.06-3.02(m，2H)，2.96(q，J_AB＝18Hz，2H)，2.43(s，3H)，2.12-1.83(m，2H)，1.42-1.33(m，1H)，1.29(t，J＝6.9Hz，3H)，1.23-1.14(m，1H)，0.88(t，J＝7.2Hz，3H).

(±)-(5-氰基-7-羟基-8-甲基-1-丙基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-基)-乙酸乙酯

使用Parr振荡器，用Pd(OH)₂(20mg)对(±)-(7-苄氧基-5-氰基-8-甲基-1-丙基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-基)-乙酸乙酯(143mg，0.32mmol)的EtOAc(10mL)和MeOH(10mL)溶液进行处理，并且使其经受H₂处理。1小时之后，将上述溶液滤过Celite塞。滤板用EtOAc进行充分地冲洗。将滤液浓缩，然后将所得残余物与乙醚/己烷一起进行研磨，从而给出为灰白色固体的苯酚化合物(69mg，61％)。

¹H NMR(CDCl₃)δ9.45(s，1H)，6.94(s，1H)，4.65(s，1H)，4.26-4.11(m，2H)，4.07-4.00(m，1H)，3.94-3.86(m，1H)，3.04-3.01(m，2H)，2.96(q，J_AB＝17Hz，2H)，2.41(s，3H)，2.12-2.01(m，1H)，1.96-1.86(m，1H)，1.43-1.33(m，1H)，1.29(t，J＝7.5Hz，3H)，1.23-1.17(m，1H)，0.88(t，J＝7.5Hz，3H).

向(5-氰基-7-羟基-8-甲基-1-丙基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-基)-乙酸乙酯(36.8mg，0.10mmol)的THF(2mL)溶液中加入三苯基膦(52mg，0.20mmol)和环丙烷甲醇(16μL，0.2mmol)。将偶氮二甲酸二异丙酯(DIAD，39μL，0.2mmol)加入其中。将此反应搅拌20分钟，然后用H₂O将反应猝灭并且用EtOAc进行稀释。合并的有机层用H₂O(1×)洗涤、干燥(Na₂SO₄)并进行浓缩。在SiO₂上使用8％EtOAc/己烷，经快速色谱法得到29.5mg(70％)为白色固体的产品。

¹H NMR(CDCl₃)δ9.43(brs，1H)，7.03(s，1H)，4.21(m，2H)，4.07(m，1h)，3.9(m，3H)，3.02(m，3H)，2.90(d，J＝16.4Hz)，1H)，2.43(s，3H)，2.03(m，1H)，1.96(m，1H)，1.3(m，5H)，0.88(t，J＝7.3Hz)，0.64(m，2H)，0.37(m，2H).

向上述乙酯(29.4mg，0.072mmol)的EtOH(2mL)和THF(0.15mL)溶液中加入10％NaOH(水溶液，0.2mL)。搅拌17.25小时之后，上述溶液用3％HCl进行酸化并且用EtOAc进行提取。所得有机层用H₂O和盐水洗涤、干燥(Na₂SO₄)并进行浓缩，从而得到26.9mg(98％)为白色固体的标题化合物。

ESI-MS m/z383(MH)+.¹H NMR(CD₃OD)δ7.07(s，1H)，4.05(m，2H)，3.87(d，J＝6.4Hz)，2.99(m，3H)，2.83(d，J＝14.1Hz，1H)，2.43(s，3H)，2.02(m，2H)，1.40(m，2H)，1.02(m，1H)，0.86(t，J＝7.3Hz，3H)，0.61(m，2H)，0.36(m，2H).

实施例23

(R)-[5-氰基-8-甲基-7-(5-甲基-异_唑-3-基甲氧基)-1-丙基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-基]-乙酸

(R)-(5-氰基-7-羟基-8-甲基-1-丙基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-基)-乙酸乙酯

经使用CHIRALPAK AS(250×20mm)的制备手性HPLC和20％异丙醇的庚烷溶液作为洗脱液后，给出为白色固体的(5-氰基-7-羟基-8-甲基-1-丙基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-基)-乙酸乙酯的(R)和(S)对映异构体。具有CHIRALPAK AS的分析手性HPLC HP 100，250×4.6mm，异丙醇/庚烷(20/80)，1.0mL/min，235nm UV检测；tR＝5.70min(R对映异构体)，12.74min(S对映异构体)。

向(R)-(5-氰基-7-羟基-8-甲基-1-丙基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-基)-乙酸乙酯(0.17g，0.47mmol)的无水DMF(3mL)溶液中加入研磨碳酸钾(71mg，0.52mmol)。将其搅拌15分钟，此时将3-溴甲基-5-甲基-异_唑(91mg，0.52mmol)加入其中。在环境温度下将此反应搅拌16小时、用H₂O稀释并且用EtOAc进行提取。合并的有机层用H₂O洗涤几次以及用盐水洗涤一次、干燥(MgSO₄)并进行浓缩。所得残余物在SiO₂上经快速色谱法分离，使用20％ EtOAc洗脱，从而得到185mg(88％产率)油状产品，经放置结晶。

向(R)-[5-氰基-8-甲基-7-(5-甲基-异_唑-3-基甲氧基)-1-丙基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-基]-乙酸乙酯(185mg，0.40mmol)的乙醇(10mL)溶液中加入2M氢氧化钠(0.4mL)。对其搅拌36小时之后，将反应在真空中进行浓缩。将所得残余物吸收在水中并且用EtOAc进行提取。对水层进行酸化并且再次用EtOAc进行提取。对合并的有机层进行干燥(MgSO₄)和浓缩，从而给出150mg(92％)标题化合物。

ESI-MS m/z 424(MH)+.¹H NMR(CD₃OD)δ7.20(s，1H)，6.25(s，1H)，5.15(s，2H)，3.0(m，3H)，2.83(d，J＝14.1Hz，1H)，2.43(s，3H)，2.42(s，3H)，2.04(m，2H)，1.40(m，1H)，1.01(m，1H)，0.86(t，J＝7.3Hz，3H).

实施例24

[5-氰基-8-甲基-1-丙基-7-(吡啶-4-基甲氧基)-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-基]-乙酸

向(R)-(5-氰基-7-羟基-8-甲基-1-丙基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-基)-乙酸乙酯(140mg，0.39mmol)的THF(6mL)溶液中加入4-吡啶甲醇(87mg，0.80mmol)和三苯基膦(207mg，0.80mmol)。冷却至0℃后，将DIAD(157μL，0.80mmol)加入其中。将冷浴除去，在环境温度下将此溶液搅拌2.5小时。反应用水猝灭并且用EtOAc进行提取。所得有机层用盐水洗涤、干燥(Na₂SO₄)并进行浓缩。将所得残余物溶于乙醚中，并且将4N HCl的二氧六环(大约1mL)溶液加入其中。经过滤对沉淀的固体进行收集、用乙醚洗涤并且将其在EtOAc和5％NaHCO₃之间进行分配。所得水层用EtOAc进行提取。合并的有机层用H₂O和盐水洗涤、干燥(Na₂SO₄)并进行浓缩，从而得到95.9mg(54％)浅黄色固体。

向上述乙酯(95mg，0.21mmol)的EtOH(5mL)溶液中加入10％NaOH(水溶液，0.5mL)。对其搅拌18小时之后，将H₂O加入其中并且用3％HCl将其pH值调节至6～7。所得混合物用EtOAc进行提取(3×)。合并的有机层用盐水洗涤、干燥(Na₂SO₄)并进行浓缩，从而得到67.3mg(76％)为浅黄色固体的标题化合物。

ESI-MS m/z 420(MH)+.¹H NMR(d₆-DMSO)δ10.97(s，1H)，8.60(m，2H)，7.47(m，2H)，7.28(s，1H)，5.25(s，2H)，3.93(m，2H)，2.94(d，J＝14.1Hz，1H)，2.83(m，2H)，2.72(d，J＝14.1Hz，1H)，2.47(s，3H)，1.99(m，2H)，1.20(m，2H)，0.80(m，3H).

实施例25

(R)-[5-氰基-7-(1，5-二甲基-1H-吡唑-3-基甲氧基)-8-甲基-1-丙基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-基]-乙酸

(±)-(5-氰基-7-羟基-8-甲基-1-丙基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-基)-乙酸

向(±)-(5-氰基-7-羟基-8-甲基-1-丙基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-基)-乙酸乙酯(3.0g，8.43mmol)的乙醇(120mL)溶液中加入2M氢氧化钠(10mL)。将其搅拌20小时之后，将反应混合物浓缩并且将所得残余物吸收在水中。将上述水溶液酸化，通过过滤对固体进行收集并且用水对其进行洗涤。将所得湿固体在真空箱中在40℃下干燥过夜，从而得到2.7g(96％产率)产品。

ESI-MS m/z 329(MH)+.¹H NMR(d₆-DMSO)δ11.96(s，1H)，10.71(s，1H)，9.35(s，1H)，6.93(s，1H)，3.95(m，2H)，2.93(d，J＝13.5Hz，1H)，2.80(m，2H)，2.71(d，J＝13.5Hz，1H)，2.33(s，3H)，1.96(m，2H)，1.28(m，1H)，0.80(m，4H).

(R)-(5-氰基-7-羟基-8-甲基-1-丙基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-基)-乙酸甲酯

向60℃下的(±)-(5-氰基-7-羟基-8-甲基-1-丙基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-基)-乙酸(2.7g，8.22mmol)的甲醇(50mL)溶液中加入(-)奎宁(2.9g，8.94mmol)的甲醇(40mL)溶液。在60℃下保持30分钟之后，产生白色固体沉淀。在60℃下将此溶液搅拌20小时。冷却至室温后，通过过滤对固体进行回收并且用甲醇进行洗涤，从而得到2.3g(R)-(5-氰基-7-羟基-8-甲基-1-丙基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b ]吲哚-1-基)-乙酸的奎宁盐。将所得固体在1M HCl(50mL)和EtOAc(50mL)之间进行分配。所得有机层用盐水洗涤、干燥(MgSO₄)并进行浓缩，从而给出为白色固体的(R)-(5-氰基-7-羟基-8-甲基-1-丙基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-基)-乙酸。将所得固体吸收在甲苯(30mL)和三甲基原乙酸酯(60mL)中，并且将该溶液在100℃下加热2小时。将该反应在真空中进行浓缩，并且将所得残余物在SiO₂上进行色谱分离，用30％EtOAc的己烷溶液洗脱，从而得到1.25g(46％)手性纯度确定为98.5％的甲酯(97％ee，带有CHIRALPAK AS的手性HPLC BP 100，250×4.6mm，异丙醇/庚烷(20/80)，1.0mL/min，235nm UV检测；tR＝6.35min(R对映异构体)，8.53min(S对映异构体))。

¹H NMR(CDCl₃)δ9.40(s，1H)，6.94(s，1H)，4.69(s，1H)，4.02(m，1H)，3.92(m，1H)，3.75(s，3H)，2.94-3.06(m，2H)，2.41(s，3H)，1.91-2.04(m，2H)，1.26-1.53(m，2H)，0.88(t，J＝7.0Hz，3H).

[5-氰基-7-(1，5-二甲基-1H-吡唑-3-基甲氧基)-8-甲基-1-丙基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-基]-乙酸

向(5-氰基-7-羟基-8-甲基-1-丙基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-基)-乙酸甲酯(50mg，0.15mmol)的DCM(1mL)溶液中加入(1，5-二甲基-1H-吡唑-3-基)-甲醇(20mg，0.17mmol)和三苯基膦(95mg，0.37mmol)。向上述溶液中加入1，1′-(偶氮二羰基)二哌啶(ADDP，92mg，0.37mmol)。将此反应搅拌1.5小时、用EtOAc稀释并且用H₂O和盐水洗涤两次。对所得EtOAc层进行干燥(MgSO₄)并进行浓缩。在SiO₂上经快速色谱法分离，用1∶1己烷/EtOAc洗脱，从而得到53mg(80％)黄色油状物，经放置结晶。

向上述甲酯(53mg，0.12mmol)的EtOH(5mL)溶液中加入2N NaOH(1mL)。将此反应在40℃下搅拌1小时并且在真空中对其进行浓缩。将所得残余物吸收在H₂O中、酸化并且用EtOAc进行提取。合并的有机层用盐水洗涤、干燥(MgSO₄)并进行浓缩。所得固体用DCM/己烷研磨，得到36mg(71％)为灰白色固体的酸。

ESI-ms m/z 437(MH)+¹H NMR(d₆-DMSO)δ11.98(s，1H)，10.87(s，1H)，7.32(s，1H)，6.10(s，1H)，4.98(s，2H)，3.95(m，2H)，3.69(s，3H)，2.93(d，J＝13.5Hz，1H)，2.82(m，2H)，2.70(d，J＝13.5Hz，1H)，2.35(s，3H)，2.23(s，3H)，1.96(m，2H)，1.16(m，1H)，0.82(m，4H)

实施例26

(R)-[5-氰基-7-(2-异丙氧基-乙氧基)-8-甲基-1-丙基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-基]-乙酸

2-(2-溴乙氧基)丙烷

向装配有回流冷凝器、磁力搅拌棒和隔片的2口烧瓶中加入2-异丙氧基乙醇(2mL，17.34mmol)。将三溴化磷(0.52mL，5.45mmol)通过注射滴加加入其中。此时，反应温度上升并且产生了轻微地回流。在室温下，在氩气中将反应搅拌24小时、用水猝灭并且用己烷对其进行提取。所得有机层用硫酸镁干燥并且进行浓缩，从而得到1g(34％)为无色油的产品。

¹H NMR(CDCl₃)δ3.78(t，2H)；3.61(m，1H)；3.42(t，2H)；1.18(d，6H).

向(R)-(5-氰基-7-羟基-8-甲基-1-丙基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-基)-乙酸甲酯(125mg，0.365mmol)和2-(2-溴乙氧基)丙烷(0.07mL，0.539mmol)的无水N，N-二甲基甲酰胺(2.5mL)溶液中加入碳酸铯(250mg，0.767mmol)和催化量的碘化钠。将该反应在60℃下加热1小时、冷却至室温、用水猝灭并且用乙酸乙酯对其进行提取。所得有机层用盐水洗涤、用硫酸镁干燥并进行浓缩。在硅胶上通过柱色谱进行纯化，使用3/1己烷/乙酸乙酯作为洗脱液，从而得到52mg(33％)为白色固体的产品。

ESI-MS m/z 429(M+H)⁺.¹H NMR(CDCl₃)δ9.36(s，.1H)；7.07(s，1H)；4.14(t，2H)；4.05(m，1H)；3.90(m，1H)；3.78(t，2H)；3.74(s，3H)；3.68(m 1H)；3.03(m，3H)；2.91(d，1H)，2.42(s，3H)；2.03(m 1H)；1.96(m，1H)；1.39(m 1H)，1.22(d，6H)；1.17(m，1H)；0.94(t，3H).

向上述甲酯(48mg，0.112mmol)的乙醇(2mL)溶液中加入10％氢氧化钠水溶液(0.2mL，过量)。在室温下将其搅拌24小时之后，通过旋转蒸发将溶剂除去。将所得残余物溶于水中并且用1N HCl对其进行酸化。通过抽滤对固体沉淀进行收集、用水洗涤和干燥，从而得到43mg(93％)为白色固体的产品。

ESI-MS m/z 413.2 (M-H)^-.¹H NMR(d₆-DMSO)δ11.98(s，1H)；10.90(s，1H)；7.20(s，1H)；4.11(t，2H)；3.89(m，2H)；3.69-3.58(m，3H)；2.90(d，1H)，2.81(m，2H)；2.68(d，1H)；2.37(s，3H)；1.96(m，2H)；1.28(m，1H)；1.10(d，6H)；0.76(m，4H).

实施例27

(R)-[5-氰基-7-(3-甲氧基-丙氧基)-8-甲基-1-丙基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-基]-乙酸

向(R)-(5-氰基-7-羟基-8-甲基-1-丙基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-基)-乙酸甲酯(100mg，0.292mmol)和3-甲氧基丙基溴(67mg，0.438mmol)的无水N，N-二甲基甲酰胺(2mL)溶液中加入碳酸铯(143mg，0.438mmol)和催化量的碘化钠。将该反应在60℃下加热24小时、冷却至室温、用水猝灭并且用乙酸乙酯对其进行提取。所得有机层用盐水洗涤、用硫酸镁干燥并进行浓缩。在硅胶上通过柱色谱进行纯化，使用2/1己烷/乙酸乙酯作为洗脱液，从而得到为白色固体的产品。

ESI-MS m/z 415(M+H)⁺

向上述甲酯的乙醇(2mL)溶液中加入10％氢氧化钠水溶液(0.2mL，过量)。在室温下将其搅拌24小时之后，通过旋转蒸发将溶剂除去。将所得残余物溶于水中并且用1N HCl对其进行酸化。通过抽滤对固体沉淀进行收集、用水洗涤和干燥，从而得到33mg(28％，两个步骤的总产量7)为白色固体的产品。

ESI-MS m/z 399(M-H)^-.¹H NMR(DMSO)δ11.99(s，1H)；10.87(s，1H)；7.17(s，1H)；4.05(t，2H)；3.91(m，2H)；3.49(t，2H)；3.24(s，3H)；2.89(d，1H)；2.81(m，2H)；2.72(d，1H)；2.36(s，3H)；1.94(m，4H)；0.77(m，4H).

实施例28

(1R，2′R)-[5-氰基-7-(2-甲氧基-丙氧基)-8-甲基-1-丙基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-基]-乙酸

(R)-2-甲氧基丙-1-醇

向装配有回流冷凝器、氩气入口管和隔片的2口烧瓶中加入氢化铝锂(442mg，11.64mmol)和乙醚(5mL)。将上述悬浮液置于氩气中，并且将(R)-(-)-2-甲氧基丙酸乙酯(2g，15.13mmol)的乙醚(5mL)溶液注射滴加加入其中。将上述混合物在回流下加热1小时，冷却至室温，并且将氢氧化钾(1.7g，30.30mmol)的水(4mL)溶液加入其中。将乙醚层轻轻倒出，并且用乙醚将含水混合物再洗涤两次，随后将其轻轻倒出。将乙醚洗涤液合并、用硫酸镁干燥并且在减压下，在冷水浴中将其蒸发。蒸馏混合物，从而得到818mg(60％)为无色油的产品，b.p＝130℃。

¹H NMR(CDCl₃)δ3.59(m，1H)，3.40(s，3H)；2.19(brs，1H)；1.39(d，2H)；1.11(d，3H).

向(R)-(5-氰基-7-羟基-8-甲基-1-丙基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-基)-乙酸甲酯(100mg，0.292mmol)、三苯基膦(115mg，0.438mmol)和1，1′-(偶氮羰基)二哌啶(110mg，0.438mmol)的无水二氯甲烷(2mL)溶液中加入2-甲氧基丙-1-醇(39mg，0.438mmol)溶液。在室温下，该反应在氩气下搅拌48小时，随后通过旋转蒸发将溶剂除去。在硅胶上通过柱色谱进行纯化，使用2/1己烷/乙酸乙酯作为洗脱液，从而得到为白色固体的产品。ESI-MS m/z 415(M+H)⁺

向上述甲酯的乙醇(2mL)溶液中加入10％氢氧化钠水溶液(0.2mL，过量)。在室温下将其搅拌24小时之后，通过旋转蒸发将溶剂除去。将所得残余物溶于水中并且用1N HCl对其进行酸化。通过抽滤对固体沉淀进行收集、用水洗涤和干燥，从而得到27mg(23％，两个步骤的总产量)为白色固体的产品。

ESI-MS m/z 399(M-H)^-.¹H NMR(d₆-DMSO)δ11.99(s，1H)，10.88(s，1H)；7.21(s，1H)；3.99-3.88(m，4H)；3.67(m，1H)；3.34(s，3H)；2.94(d，1H)；2.83(m，2H)；2.71(d，1H)；2.39(s，3H)，1.97(m，2H)；1.29(m，1H)；1.20(d，3H)；0.76(m，4H).

实施例29

[5-氰基-8-甲基-7-(5-甲基-[1，3，4]噻二唑-2-基甲氧基)-1-丙基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-基]-乙酸

氯-乙酸N¹-乙酰肼

在50mL圆底烧瓶中，将1.07g(13.0mmol)乙酰肼溶于水(5mL)中并且将其与Na₂CO₃(0.814g，7.69mmol)合并。首先在冰浴中对上述所得混合物进行冷却，然后在搅拌下，在10分钟时间内将氯乙酰氯(1.1mL，13.8mmol)滴加加入其中。当所有的氯乙酰氯都已经加入完成之后，使反应室温至室温并且继续搅拌1.5小时。将所得产品滤出并且在真空中对其进行干燥，从而给出0.202g(10％)纯净的氯乙酸N¹-乙酰肼：¹H NMR(CDCl₃)δ10.17(s，1H)，9.93(s，1H)，4.11(s，2H)，1.86(s，3H).

2-氯甲基-5-甲基-[1，2，4]噻二唑

在250mL圆底烧瓶中，将氯乙酸N¹-乙酰肼(0.400g，2.66mmol)与THF(40mL)和五硫化二磷(P₂S₅)(1.83g，4.12mmol)合并。将所得混合物在回流下加热2小时，然后冷却至室温。一旦达到室温，将5％Na₂CO₃(16mL)和过量乙醚加入其中，将所得悬浮液过滤。将有机层分开、用MgSO₄对其进行干燥、过滤并且在真空下进行浓缩，从而得到0.160g(41％)2-氯甲基-5-甲基-[1，2，4 ]噻二唑：

¹H NMR(CDCl₃)δ4.91(s，2H)，2.80(s，3H).

(R)-[5-氰基-8-甲基-7-(5-甲基-[1，3，4]噻二唑-2-基甲氧基)-1-丙基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-基]-乙酸甲酯

在50mL圆底烧瓶中并且在氩气下，将(R)-(5-氰基-7-羟基-8-甲基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-基)-乙酸甲酯(0.100g，0.292mmol)与2-氯甲基-5-甲基-[1，2，4]噻二唑(0.108g，0.730mmol)和无水NMP(4mL)合并。在搅拌的同时，将K₂CO₃(0.101g，0.730mmol)和KI(0.012g，0.073mmol)加入其中。在室温下，继续搅拌上述所得混合物24小时。然后，将反应混合物倾倒在水中，并且用EtOAc对所得产品进行提取。所得有机层用冰水洗涤两次、用盐水洗涤一次、用MgSO₄干燥、过滤并在真空中进行浓缩，从而得到油状物，经快速色谱法进行纯化得到0.084g(63％)(R)-[5-氰基-8-甲基-7-(5-甲基-[1，3，4]噻二唑-2-基甲氧基)-1-丙基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-基]-乙酸甲酯：

¹H NMR(CDCl₃)δ9.52(s，1H)，7.11(s，1H)，5.46(s，2H)，4.07(m，1H)，3.94(m，1H)，3.75(s，3H)，3.06(m，4H)，2.81(s，3H)，2.34(s，3H)，2.11(m，2H)，1.43(m，1H)，1.28(m，1H)，0.90(t，J＝7.3Hz，3H).

(R)-[5-氰基-8-甲基-7-(5-甲基-[1，3，4]噻二唑-2-基甲氧基)-1-丙基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-基]-乙酸

在25mL圆底烧瓶中，将(R)-[5-氰基-8-甲基-7-(5-甲基-[1，3，4]噻二唑-2-基甲氧基)-1-丙基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-基]-乙酸甲酯(0.084g，0.185mmol)与EtOH(8mL)和10％NaOH(0.38mL)合并。在室温下，将所得溶液搅拌24小时。反应溶液在真空中进行浓缩，从而得到一种残余物，然后将该残余物吸收在水中并且用乙醚洗涤一次。然后，用4M HCl对所得水层进行酸化、用EtOAc对所得沉淀产品进行提取、用MgSO₄干燥并且在真空中进行浓缩，从而给出0.069g(85％)(R)-[5-氰基-8-甲基-7-(5-甲基-[1，3，4]噻二唑-2-基甲氧基)-1-丙基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-基]-乙酸：纯度98％(HPLC)；

MS(M-H)^-439.1 m/z；¹HNMR(CDCl₃)δ9.53(s，1H)，7.03(s，1H)，5.46(d，J＝2.9Hz，2H)，4.17(m，2H)，3.12(m，4H)，2.83(s，3H)，2.15(s，3H)，2.13(m，2H)，1.49(m，1H)，1.29(m，1H)，0.9189(t，J＝7.3Hz，3H).

实施例30

(R)-[5-氰基-7-(5-二甲基氨基-[1，2，4]噻二唑-3-基甲氧基)-8-甲基-1-丙基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-基]-乙酸

5-(N，N-二甲基氨基)-3-(氯甲基)-1，2，4-噻二唑

将5-氯-3-(氯甲基)-1，2，4-噻二唑(0.2g，1.2mmol)溶于无水THF(2mL)中，随后将2M二甲胺的THF(1.18mL，2.4mmol)溶液加入。其中该反应在室温下搅拌过夜。将沉淀固体滤出并且在减压下将溶剂除去。将所得残余物吸收在乙醚中，并且用水和饱和NaCl对其进行洗涤。所得有机层用MgSO₄干燥、过滤并且在减压下将溶剂除去，从而给出为定量产率的油状物(0.210g)。

¹HNMR(CDCl₃)δ4.51(s，2H)，3.16(s，6H).

(R)-[5-氰基-7-(5-二甲基氨基-[1，2，4]噻二唑-3-基甲氧基)-8-甲基-1-丙基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-基]-乙酸甲酯

将(R)-(5-氰基-7-羟基-8-甲基-1-丙基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-基)-乙酸甲酯(0.1g，0.29mmol)溶于无水NMP(3mL)中，随后向其中加入5-(N，N-二甲基氨基)-3-(氯甲基)-1，2，4-噻二唑(0.124g，0.70mmol)、研磨碳酸钾(0.096g，0.70mmol)和碘化钾(0.011g，0.070mmol)。将该反应在室温下搅拌过夜。将EtOAc(50mL)加入到该反应中，然后用冰水将其洗涤几次，最后用饱和NaCl对其进行洗涤。所得有机层用MgSO₄干燥、过滤并且将溶剂在减压下除去，从而得到残余物，经硅胶快速色谱法纯化得到0.104g(74％产率)为白色固体的产物。纯度99.3％(HPLC)；

MS(M-H)^-482.2 m/z；¹H NMR(CDCl₃)δ9.38(s，1H)，7.18(s，1H)，5.11(s，2H)，4.05(m，1H)，3.90(m，1H)，3.75(s，3H)，3.18(s，6H)，3.03(m，3H)，2.92(d，J＝16.4Hz，1H)，2.48(s，3H)，2.06(m，1H)，1.92(m，1H)，1.38(m，1H)，1.19(m，1H)，0.89(t，J＝7.3Hz，3H).

(R)-[5-氰基-7-(5-二甲基氨基-[1，2，4]噻二唑-3-基甲氧基)-8-甲基-1-丙基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b ]吲哚-1-基]-乙酸

将(R)-[5-氰基-7-(5-二甲基氨基-[1，2，4 ]噻二唑-3-基甲氧基)-8-甲基-1-丙基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-基]-乙酸甲酯(0.100g，0.207mmol)溶于EtOH(4mL)中，随后向其中加入10％氢氧化钠溶液(0.41mL)。将此反应在室温下搅拌过夜，然后在减压下将溶剂除去。将所得残余物溶于水(50mL)中并且用乙醚(2×25mL)进行洗涤。所得水层用1M HCl酸化至pH值约为4，然后用EtOAc对其进行提取。所得有机层用MgSO₄干燥、过滤并且在减压下将溶剂除去，从而给出为灰白色固体的产品(0.09g，93％产率)。纯度97.5％(HPLC)；

MS(M+H)⁺470.1 m/z；¹H NMR(CDCl₃)δ11.98(s，1H)，10.91(s，1H)，731(s，1H)，5.09(s，2H)，3.92(m，2H)，3.10(s，6H)，2.93(d，J＝13.5Hz，1H)，2.82(m，2H)，2.71(d，J＝13.5Hz，1H)，2.41(s，3H)，1.97(m，2H)，1.30(m，1H)，0.78(m，4H).

实施例31

5-氰基-7-(2-甲氧基-乙氧基)-8-甲基-1-丙基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-基-羧酸

5-溴-2-甲基-3-硝基苯甲酸

向装配有悬挂式搅拌器的5000mL三口RBF中加入2-甲基-3-硝基苯甲酸(150.0g，0.82mol)和浓硫酸(600mL)。在剧烈搅拌下，在十分钟时间内，向上述溶液中加入1，3-二溴-5，5-二甲基乙内酰脲(130.7g，0.455mol)。在环境温度下反应剧烈搅拌5小时。然后在30分钟时间内，将此反应混合物加入到已在冰浴中冷却的H₂O(4000mL)中。然后将此混合物过滤，所得固体用H₂O洗涤两次并且进一步的真空下干燥，从而得到217.7g(99.8％)灰白色固体。

¹H NMR(CDCl₃)δ8.18(s，1H)，7.95(s，1H)，2.59(s，3H).

5-溴-2-甲基-3-硝基苯甲酸苄酯

向装配有悬挂式搅拌器和温度计的5000mL三口RBF中加入5-溴-2-甲基-3-硝基苯甲酸(116.2g，0.45mol)、THF(1L)和苄基溴(84.90mL，0.715mol)。在搅拌下向此溶液中加入二异丙基乙胺(78mL，0.450mol)。然后，该反应产生回流。回流5.5小时后，将反应冷却至40℃并且将吡咯烷(83mL，1.00mol)加入其中。将此反应在40℃下搅拌10分钟，然后在大约20分钟时间内将其冷却至环境温度。该反应用EtOAc稀释和用2×3％HCl、1×H₂O、1×饱和NaCl洗涤、干燥(MgSO₄)并进行浓缩。将所得棕色油吸收在DCM中，并且用大约300g硅胶将其调为浆液。将所得浆液过滤，所得固体用EtOAc洗涤，所得滤液浓缩，从而得到一种黄色油。通过在己烷中研磨，得到244.9g(83.8％)灰白色粉末。

¹H NMR(CDCl₃)δ8.10(s，1H)，7.96(s，1H)，7.41(m，5H)，5.37(s，2H)，2.55(s，3H).

3-氨基-5-溴-2-甲基苯甲酸苄酯

向装配有悬挂式搅拌器的1000mL RBF中加入5-溴-2-甲基-3-硝基苯甲酸苄酯(75.0g，0.214mol)和H₂O(200mL)。在剧烈搅拌下，将铁粉(～325目，47.81g，0.857mol)和NH₄Cl(13.88g，0.257mol)加入其中。将此混合物加热回流4.5小时。然后，将上述反应冷却至室温、用EtOAc稀释并且将其滤过Celite垫片。所得滤液用H₂O(2×)和饱和NaCl(1×)洗涤、干燥(Na₂SO₄)并进行浓缩。通过在己烷中研磨，得到63.2g(92.1％)灰白色粉末。

¹HNMR(CDC1₃)δ7.38(m，6H)，6.90(s，1H)，5.31(s，2H)，3.76(brs，2H)，2.25(s，3H).

5-溴-3-肼基-2-甲基苯甲酸苄酯盐酸盐

向装配有悬挂式搅拌器的1000mL三口RBF中加入3-氨基-5-溴-2-甲基苯甲酸苄酯(25.0g，0.078mol)、H₂O(150mL)和浓HCl(150mL)。对此混合物进行剧烈搅拌，同时将其在MeOH/冰浴中冷却至-10℃。将NaNO₂(8.08g，0.120mol)的H₂O(150mL)溶液冷却至-10℃，然后在15分钟内将其滴加加入上上述反应混合物中。在-10℃下将此反应剧烈搅拌1.5小时，然后在20分钟时间内将-10℃的SnCl₂·2H₂O(73.99g，0.330mol)的浓HCl(150mL)溶液滴加加入到上述反应混合物中。在-10℃下，在非常剧烈地搅拌下使反应进行1.5小时。然后，将反应混合物加入到6N NaOH(600mL)中并且用EtOAc进行提取。将有机层分离并且用饱和NaCl对其进行洗涤、用MgSO₄干燥并且进行浓缩。将所得黄色固体吸收在THF(100mL)中，用4NHCl二氧六环(30mL)稀释，然后在真空下将溶剂除去。用DCM/己烷研磨，得到27.1g(93.5％)白色粉末。

¹H NMR(d₆-DMSO)δ10.47(brs，2H)，8.39(brs，1H)，7.40(m，7H)，5.33(s，2H)，2.2.26(s，3H).

4-溴-3-(2-羟基-乙基)-7-甲基-1H-吲哚-6-羧酸苄酯

向1000mL RBF中加入5-溴-3-肼基-2-甲基苯甲酸苄酯盐酸盐(30.0g，0.081mol)、乙二醇(350mL)和H₂O(60mL)。然后，将此混合物加热到40℃并且将二氢呋喃(7.63mL，0.101 mol)加入其中。然后，将此反应混合物加热到100～105℃，搅拌2.25小时。将反应冷却至环境温度、用EtOAc稀释、用饱和NaCl(2×)洗涤、干燥(MgSO₄)并进行浓缩。然后在SiO₂上对所得红色油进行色谱分离，用10％EtOAc/DCM～50％EtOAc/DCM梯度洗脱。分离得到不纯的固体，随后用DCM和己烷对其进行研磨，从而得到8.45g(27.0％)浅黄色固体。

¹H NMR(CDCl₃)δ8.28(brs，1H)，7.94(s，1H)，7.40(m，6H)，5.36(s，1H)，3.96(q，J＝6.4Hz，2H)，3.28(t，J＝6.4Hz，2H)，2.72(s，3H)，

5-溴-8-甲基-1-丙基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1，7-二羧酸7-苄酯1-乙酯

向4-溴-3-(2-羟基-乙基)-7-甲基-1H-吲哚-6-羧酸苄酯(0.96g，2.5mmol)的二氯乙烷(60mL)溶液中加入2-氧代-戊酸乙酯(0.57g，3.9mmol)的二氯乙烷(5mL)溶液。将此溶液加热至70℃，并且随后将BF₃·OEt₂(0.80mL，6.3mmol)加入其中。将上述溶液冷却至室温并且将其搅拌2小时。所得溶液用盐水稀释、用EtOAc(3×)提取、用Na₂SO₄干燥、过滤并进行浓缩。所得残余物通过快速色谱法(SiO₂，2/1己烷/EtOAc)进行纯化，从而得到为橙色油的吡喃并吲哚(781mg，61％)。

APCI(M+H)461m/z.¹H NMR(CDCl₃)δ8.60(s，1H)，7.89(s，1H)，7.46-7.32(m，5H)，5.35(s，2H)，4.34-4.21(m，4H)，4.08-3.91(m，1H)，3.18-3.12(m，2H)，2.70(s，3H)，2.10-2.00(m，2H)，1.37-1.32(m，4H)，0.95(t，J＝7.8Hz，3H).

5-氰基-8-甲基-1-丙基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1，7-二羧酸7-苄酯1-乙酯

在室温下，用CuCN(1.5g，17mmol)对5-溴-8-甲基-1-丙基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1，7-二羧酸7-苄酯1-乙酯(861mg，1.7mmol)的NMP(10mL)溶液进行处理。然后，将此溶液在180℃下加热2小时。将该反应冷却至室温，用H₂O和EtOAc稀释并且滤过Celite。滤板用EtOAc进行充分地冲洗。所得滤液用盐水(2×)提取、用Na₂SO₄干燥、过滤并进行浓缩。所得残油通过快速色谱法(SiO₂，3/1己烷/EtOAc)进行纯化，从而得到为淡黄色固体的苄腈(680mg，87％)。

APCI(M+H)461 m/z.¹H NMR(CDCl₃)δ8.69(s，1H)，8.12(s，1H)，7.48-7.36(m，5H)，5.37(s，2H)，4.33-4.26(m，3H)，3.99-3.91(m，1H)，3.13-3.02(m，2H)，2.83(s，3H)，2.20-2.14(m，1H)，2.12-2.02(m，1H)，1.43-1.33(m，1H)，1.34(t，J＝7.2Hz，3H)，1.31-1.22(m，1H)，0.90(t，J＝6.9Hz，3H).

5-氰基-8-甲基-1-丙基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1，7-二羧酸1-乙酯

用Pd(OH)₂(280mg)对5-氰基-8-甲基-1-丙基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1，7-二羧酸7-苄酯1-乙酯(718mg，1.6mmol)的EtOAc/MeOH(30mL/2/1)混合溶液进行处理，并且使用Parr振荡器使其与H₂反应。16小时之后，将上述溶液滤过Celite。所得滤饼用EtOAc和MeOH进行充分地冲洗。将所得滤液浓缩，从而得到为淡黄色固体的酸(551mg，93％)。

LCMS(M-H)369m/z.¹H NMR(DMSO)δ11.58(s，1H)，7.93(s，1H)，4.19-4.01(m，3H)，3.87-3.78(m，1H)，2.97-2 93(m，2H)，2.85(s，3H)，2.49-2.16(m，2H)，1.25-1.07(m，5H)，0.83(t，J＝7.5Hz，3H).

5-氰基-7-羟甲基-8-甲基-1-丙基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-羧酸乙酯

在0℃下，用BH₃·THF(1M，4.5mL)对5-氰基-8-甲基-1-丙基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1，7-二羧酸1-乙酯(551mg，1.5mmol)的THF(20mL)溶液进行处理。将该溶液缓缓升温至室温。2小时之后，所得反应混合物用1M HCl进行稀释并且用EtOAc(3×)进行提取。合并的有机物用饱和NaHCO₃洗涤、用Na₂SO₄干燥、过滤并进行浓缩。所得残余物通过快速色谱法(SiO₂，1/1己烷/EtOAc)进行纯化，从而得到350mg(66％)为淡黄色泡沫的醇。

GCMS M⁺356 m/z.¹H NMR(CDCl₃)δ8.77(s，1H)，7.77(s，1H)，4.73(s，2H)，4.34-4.24(m，3H)，3.99-3.90(m，1H)，3.17-3.03(m，2H)，2.38(s，3H)，2.35(bs，1H)，2.21-1.99(m，2H)，1.44-1.23(m，5H)，0.89(t，J＝7.8 Hz，3H).

5-氰基-7-甲酰基-8-甲基-1-丙基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-羧酸乙酯

在室温下，用活化MnO₂(0.58g，6.7mmol)对5-氰基-7-羟甲基-8-甲基-1-丙基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-羧酸乙酯(350mg，0.98mmol)的二氯乙烷(20mL)溶液进行处理。然后，将该溶液加热回流1小时。将上述混合物滤过Celite/硅胶塞，该塞用EtOAc进行充分地冲洗。将所得滤液浓缩，从而得到341mg(98％)为淡黄色固体的醛。

GCMS M⁺ 354 m/z.¹H NMR(CDCl₃)δ10.28(s，1H)，8.92(s，1H)，7.92(s，1H)，4.35-4.24(m，3H)，3.98-3.92(m，1H)，3.16-3.09(m，2H)，2.87(s，3H)，2.39-2.00(m，2H)，1.45-1.37(m，4H)，0.91(t，J＝7.5Hz，3H).

5-氰基-7-羟基-8-甲基-1-丙基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-羧酸乙酯

用活化SeO₂(13mg，0.11mmol)对5-氰基-7-甲酰基-8-甲基-1-丙基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-羧酸乙酯(146mg，0.36mmol)的叔丁醇(15mL)溶液进行处理，随后用H₂O₂(30％，0.2mL)和TFA(2滴)对其进行处理。1.5小时之后，另外将SeO₂(12mg)和H₂O₂(0.2mL)加入其中。4小时之后，所得溶液用缓冲液(pH值6.9)稀释并且用EtOAc进行提取。合并的有机物用Na₂SO₄干燥、过滤并进行浓缩。所得粗产物不经进一步纯化即可使用。LCMS(M-H)423m/z。在室温下，所得残余物用MeOH(10mL)进行稀释并且用10％K₂CO₃进行处理。1小时之后，将上述溶液浓缩。所得物质用EtOAc和1M HCl(2×)提取、用Na₂SO₄干燥、过滤并进行浓缩，从而得到灰白色固体(47mg，33％，2步反应)。

LCMS(M-H)341 m/z.¹H NMR(CDCl₃)δ8.20(s，1H)，6.97(s，1H)，5.10(s，1H)，4.30-4.23(m，3H)，3.99-3.91(m，1H)，3.13-2.99(m，2H)，2.40(s，3H)，2.17-1.93(m，2H)，1.42-1.29(m，5H)，0.89(t，J＝7.8Hz，3H).

5-氰基-7-(2-甲氧基-乙氧基)-8-甲基-1-丙基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-羧酸

在室温下，将5-氰基-7-羟基-8-甲基-1-丙基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-羧酸乙酯(50mg，0.15mmol)的DMF(5mL)溶液加入到含有Cs₂CO₃(20mg，61mmol)的溴乙基-甲醚(0.1mL，1.0mmol)的DMF(2mL)溶液中。将该反应在60℃下加热1小时、冷却至室温、用盐水稀释并且用EtOAc(3×)对其进行提取。合并的有机物用Na₂SO₄干燥、过滤并进行浓缩。所得残余物通过快速色谱法(SiO₂，2/1～1/1己烷/EtOAc)进行纯化，从而得到为黄色油的醚，不经进一步纯化即可使用。LCMS(M-H)399.

在室温下，用1M NaOH(1mL)对上述乙酯(30mg，0.07mmol)的EtOH(5mL)溶液进行处理。16小时之后，将溶液浓缩、用H₂O稀释并且用EtOAc(2×)进行提取。合并的含水层用1M HCl进行酸化、用EtOAc提取、用Na₂SO₄干燥、过滤并进行浓缩。所得残余物通过快速色谱法(SiO₂，10％MeOH/DCM～3％TFA/10％MeOH/CHCl₃)进行纯化，随后用Et₂O/己烷进行研磨，从而得到7mg(61％)为灰白色固体的甲酸。

LCMS(M-H)371m/z.¹H NMR(CDCl₃+CD₃OD)δ8.99(s，1H)，7.06(s，1H)，4.17-4.14(m，1H)，3.80-3.76(m，2H)，3.47(s，3H)，3.05(m，2H)，2.94(m，7H)，2.43(s，3H)，2.14-2.09(m，1H)，1.37-1.35(m，2H)，0.89(t，J＝7.2Hz，3H).

实施例32

5-氰基-8-甲基-7-(5-甲基-异_唑-3-基甲氧基)-1-丙基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-羧酸

在室温下，用Cs₂CO₃(52mg，0.16mmol)对5-氰基-7-羟基-8-甲基-1-丙基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-羧酸乙酯(25mg，0.07mmol)的DMF(5mL)溶液进行处理。然后，用溴甲基异_唑(20mg，0.11mmol)的DMF(2mL)混合物对上述溶液进行处理，随后将其在60℃下加热1.5小时。将所得溶液冷却至室温以及用盐水稀释、用EtOAc(3×)提取、用Na₂SO₄干燥、过滤并进行浓缩。所得残余物通过快速色谱法(SiO₂，2/1己烷/EtOAc)进行纯化，从而得到为黄色油的醚，不经进一步纯化即可使用。LCMS(M-H)436m/z.

在室温下，用1M NaOH(1mL)对乙酯(36mg，0.08mmol)的EtOH(10mL)溶液进行处理。将上述溶液在60℃下加热0.5小时，然后对其进行浓缩。所得残余物用H₂O稀释、用1M HCl酸化并且用EtOAc(3×)进行提取。合并的有机物用Na₂SO₄干燥、过滤并进行浓缩。所得产物通过制备LCMS进行纯化，经冻干法之后得到为灰白色蓬松固体的甲酸(12mg，36％)。

LCMS(M-H)408m/z.¹H NMR(CDCl₃)δ8.38(bs，1H)，7.13(s，1H)，6.10(s，1H)，5.14(s，2H)，4.22-4.11(m，2H)，3.16-3.12(m，2H)，2.45(s，3H)，2.40(s，3H)，2.25-2.15(m，1H)，2.11-2.00(m，1H)，1.42-1.38(m，2H)，0.94(t，J＝7.8Hz，3H).

实施例33

(1R^*，10S)-[1-仲丁基-5-氰基-7-(2-乙氧基-乙氧基)-8-甲基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-基]-乙酸

(1R^*，10S)-5-溴-1-仲丁基-1-乙氧基羰基甲基-8-甲基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-7-羧酸苄酯

在室温下，向4-溴-3-(2-羟基-乙基)-7-甲基-1H-吲哚-6-羧酸苄酯(2.00g，5.15mmol)和(S)-乙基4-甲基-3-氧代己酸酯(0.89g，5.15mmol)的CH₂Cl₂(50mL)溶液中滴加加入BF₃·OEt₂(0.80g，5.66mmol)。将上述溶液搅拌4小时，然后通过加入饱和Na₂CO₃水溶液(10mL)将反应猝灭。反应混合物用水稀释并且用乙醚(250mL)提取三次。合并的有机层用盐水洗涤、用无水Na₂SO₄干燥、过滤并浓缩至无水。所得粗产品经硅胶色谱法(5％～20％EtOAc/己烷)进行纯化，从而得到0.77g(28％)为两种～1∶1的非对映异构体的酯。¹H NMR(CDCl₃)：两种非对映异构体的～1∶1混合物，δ9.78(brs，0.5H，非对映异构体1的吲哚NH)，9.76(br s，0.5H，非对映异构体2的吲哚NH)，

7.88(s，1H)，7.31-7.47(m，5H)，5.35(s，2H)，4.27-4.05(m，3H)，3.73(m，1H)，3.21-2.96(m，4.5H)，2.72(s，3H)，2.16(m，1H)，1.66(m，0.5H)，1.35(m，0.5H)，1.28(t，J＝7Hz，3H)，1.10(m，0.5H)，1.03(d，J＝7Hz，1.5H)，0.93(t，J＝7Hz，1.5H)，0.73(t，J＝7Hz，1.5H)，0.63(d，J＝7Hz，1.5H).

(1R^*，10S)-1-仲丁基-5-氰基-1-乙氧基羰基甲基-8-甲基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-7-羧酸苄酯

将(1R^*，10S)-5-溴-1-仲丁基-1-乙氧基羰基甲基-8-甲基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-7-羧酸苄酯(0.77g，1.41mmol)和CuCN(0.63g，7.09mmol)的N-甲基-2-吡咯烷酮(30mL)混合物浸入预热的油浴(190℃)中。2小时之后，通过TLC分析测定反应完成并且将其冷却至室温。所得反应混合物用水(30mL)和乙醚(30mL)稀释并且将其滤过Celite垫片。所得滤液用乙醚(150mL)提取三次。合并的有机层用水(5×)和盐水(1×)洗涤、用无水Na₂SO₄干燥、过滤并且进行浓缩，从而得到为两种非对映异构体～1∶1混合物的粗酯产物，该酯产物直接用于下一反应。¹H NMR(CDCl₃)：两种非对映异构体的～1∶1混合物，δ10.05(br s，0.5H，非对映异构体1的吲哚NH)，10.03(brs，0.5H，非对映异构体2的吲哚NH)，

8.11(s，1H)，7.48-7.35(m，5H)，5.36(s，2H)，4.28-4.09(m，3H)，3.37(m，0.5H)，3.17-2.99(m，4H)，2.83(s，3H)，2.36(m，0.5H)，2.16(m，1H)，2.01(m，0.5H)，1.66(m，0.5H)，1.36(m，0.5H)，1.26(t，J＝7Hz，3H)，1.14(m，0.5H)，1.05(d，J＝6Hz，1.5H)，0.93(t，J＝8Hz，1.5H)，0.76(t，J＝7Hz，1.5H)，0.65(d，J＝6Hz，1.5H).

(1R^*，10S)-1-仲丁基-5-氰基-1-乙氧基羰基甲基-8-甲基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-7-羧酸

在环境温度下，在氢气气囊作用下，将含有粗(1R^*，10S)-1-仲丁基-5-氰基-1-乙氧基羰基甲基-8-甲基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-7-羧酸苄酯(0.81g)和10％Pd-碳(0.2g)的EtOAc(20mL)溶液搅拌3小时。将反应混合物滤过Celite_垫片、用甲醇洗涤并且进行浓缩，从而得到为两种非对映异构体～1∶1混合物的粗酸产物，该酸产物直接用于下一反应中。¹H NMR(CDCl₃)：两种非对映异构体的～1∶1混合物，δ10.12(br s，0.5H，非对映异构体1的吲哚NH)，10.10(brs，0.5H，非对映异构体2的吲哚NH)，

8.20(s，1H)，4.30-4.08(m，2.5H)，3.78(m，1H)，3.40(t，J＝7Hz，1H)，3.19-2.98(m，3.5H)，2.88(s，3H)，2.43(app t，J＝7Hz，0.5H)，2.20(m，0.5H)，2.03(m，0.5H)，1.68(m，0.5H)，1.36(m，0.5H)，1.29(t，J＝7Hz，3H)，1.14(m，0.5H)，1.06(d，J＝6Hz，1.5H)，0.94(t，J＝8Hz，1.5H)，0.75(t，J＝7Hz，1.5H)，0.65(d，J＝6Hz，1.5H).

(1R^*，10S)-(1-仲丁基-5-氰基-7-羟甲基-8-甲基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-基]-乙酸乙酯

向0℃的粗(1R^*，10S)-1-仲丁基-5-氰基-1-乙氧基羰基甲基-8-甲基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-7-羧酸(0.6g)的THF(20mL)溶液中加入BH₃·THF(在THF中为1.0M，3mL，3.00mmol)。将冷却浴除去并且将所得溶液搅拌1小时。将上述反应混合物再次冷却至0℃，将第二份BH₃·THF(1.0M，3mL，3.00mmol)加入其中。将反应混合物在环境温度下再搅拌1小时，然后用水小心地将其猝灭。所得反应混合物用1.0N HCl和EtOAc稀释，并且将各层分离。合并的有机层用水和盐水洗涤、用无水Na₂SO₄干燥、过滤并且进行浓缩，从而得到为两种非对映异构体～1∶1混合物的粗醇产物，该粗醇产物可以直接用于下一反应。

¹H NMR(CDCl₃)：两种非对映异构体的～1∶1混合物，δ9.66(br s，1H，吲哚1H)，

7.43(s，1H)，4.80(s，2H)，4.27-4.06(m，3H)，3.77(m，1H)，3.16-2.98(m，3H)，2.57(s，3H)，2.19(m，0.5H)，1.63(m，0.5H)，1.34(m，0.5H)，1.28(t，J＝7Hz，3H)，1.18(m，0.5H)，1.04(d，J＝6Hz，1.5H)，0.93(t，J＝8Hz，1.5H)，0.74(t，J＝7Hz，1.5H)，0.63(d，J＝6Hz，1.5H)

(1R^*，10S)-(1-仲丁基-5-氰基-7-甲酰基-8-甲基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-基)-乙酸乙酯

向粗(1R^*，10S)-(1-仲丁基-5-氰基-7-羟甲基-8-甲基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-基)-乙酸乙酯(0.57g)的无水苯(20mL)溶液中加入活化85％MnO₂(＜5μ粒径，0.3g，2.96mmol)和Celite_(0.5g)的均匀混合物。将上述混合物浸入预热的油浴(60℃)中并且对其进行剧烈搅拌。1小时之后，将第二份MnO₂(1.0g)和Celite_(1.0g)加入其中并且持续加热1小时。将上述反应混合物冷却至环境温度，然后将其滤过Celite_。所得固体用EtOAc洗涤，对所得黄色滤液进行浓缩，从而得到为两种非对映异构体～1∶1混合物的粗醛产物，该醛产物直接用于下一反应中。¹H NMR(CDCl₃)：两种非对映异构体的～1∶1混合物，

δ10.27(s，1H)，7.90(s，1H)，4.30-4.11(m，3H)，3.79(m，1H)，3.18-3.02(m，3H)，2.88(s，3H)，2.17(m，0.5H)，1.67(m，0.5H)，1.36(m，0.5H)，1.30(t，J＝7Hz，3H)，1.23(m，0.5H)，1.06(d，J＝6Hz，1.5H)，0.94(t，J＝8Hz，1.5H)，0.75 (t，J＝7Hz，1.5H)，0.64(d，J＝6Hz，1.5H).

(1R^*，10S)-(1-仲丁基-5-氰基-7-羟基-8-甲基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-基)-乙酸乙酯

向(1R^*，10S)-(1-仲丁基-5-氰基-7-甲酰基-8-甲基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-基)-乙酸乙酯(0.53g)的叔丁醇(10mL)溶液中加入SeO₂(46mg，0.41mmol)，随后向其中加入30％H₂O₂(5mL)和三氟乙酸(20μL)。在环境温度下将上述反应混合物搅拌1小时，然后用EtOAc稀释，用饱和NaHCO₃(2×)、水和盐水洗涤；用无水Na₂SO₄干燥；过滤并且进行浓缩，从而得到两种非对映异构体～1∶1混合物的粗甲酸酯，该甲酸酯直接用于下一反应中。

将上述所得粗残余物溶于MeOH(15mL)中，并且向该溶液中加入10％K₂CO₃水溶液(10mL)。1小时之后，上述反应混合物用EtOAc稀释、用水(2×)和盐水洗涤、用无水Na₂SO₄干燥、过滤并进行浓缩。所得粗苯酚经硅胶色谱法(20％～30％EtOAc/己烷)进行纯化，从而得到0.19g为非对映异构体～1∶1混合物的(1R^*，10S)-(1-仲丁基-5-氰基-7-羟基-8-甲基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-基)-乙酸乙酯(36％，6步反应)。¹H NMR(CDCl₃)：两种非对映异构体的～1∶1混合物，δ9.38(br s，0.5H，非对映异构体1的吲哚NH)，9.36(br s，0.5H，非对映异构体2的吲哚NH)，

6.96(s，1H)，5.26(br s，1H)，4.26-4.06(m，3H)，3.76(m，1H)，3.15-2.96(m，3H)，2.41(s，3H)，2.16(m，0.5H)，1.68(m，0.5H)，1.35(m，0.5H)，1.27(t，J＝7Hz，3H)，1.14(m，0.5H)，1.03(d，J＝6Hz，1.5H)，0.93(t，J＝8 Hz，1.5H)，0.75(t，J＝7Hz，1.5H)，0.65(d，J＝6Hz，1.5H).

(1R^*，10S)-[1-仲丁基-5-氰基-7-(2-乙氧基-乙氧基)-8-甲基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-基]-乙酸乙酯

向含有(1R^*，10S)-(1-仲丁基-5-氰基-7-羟基-8-甲基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-基)-乙酸乙酯(50mg，0.13mmol)的无水DMF(5mL)溶液中加入Cs₂CO₃(66mg，0.20mmol)和1-溴-2-乙氧基乙烷(23μL，0.20mmol)。将上述反应混合物浸入预热的油浴(60℃)中。2小时之后，将另外的1-溴-2-乙氧基乙烷(23μL，0.20mmol)加入其中，并且将反应混合物在60℃下保持3小时。将反应混合物冷却至环境温度，并且用乙醚和水稀释。将各层分离，所得有机相用水(5×)和盐水(1×)洗涤、用无水Na₂SO₄干燥、过滤并进行浓缩，从而得到两种非对映异构体～1∶1混合物的粗产品，该产品直接用于下一反应中。1HNMR(CDCl₃)：两种非对映异构体的～1∶1混合物，δ9.40(brs，0.5H，非对映异构体1的吲哚NH)，9.38(brs，0.5H，非对映异构体2的吲哚NH)，

7.06(s，1H)，4.26-4.01(m，5H)，3.82-3.72(m，3H)，3.62(t，J＝7 Hz，2H)，3.15-2.97(m，3H)，2.42(s，3H)，2.17(m，0.5H)，1.66(m，0.5H)，1.35(m，0.5H)，1.32-1.18(m，6H)，1.14(m，0.5H)，1.03(d，J＝6Hz，1.5H)，0.93(t，J＝8Hz，1.5H)，0.75(t，J＝7Hz，1.5H)，0.65(d，J＝6 Hz，1.5H)ppm.

在环境温度下，向含有粗(1R^*，10S)-[1-仲丁基-5-氰基-7-(2-乙氧基-乙氧基)-8-甲基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-基]-乙酸乙酯(～50mg)的乙醇(4mL)和THF(1mL)溶液中加入3N NaOH(1mL)。5小时之后，上述反应混合物用水稀释并且用乙醚洗涤。所得水相用1N HCl进行酸化，产品用乙醚进行提取。所得乙醚提取物用1N HCl和盐水洗涤、用无水Na₂SO₄干燥、过滤并进行浓缩。所得粗产品经硅胶色谱法(1％～20％MeOH/DCM)进行纯化，并且将纯化的酸与乙醚/己烷共同研磨。将产品收集在Hirsch漏斗上，用己烷对其进行洗涤并且随后在真空中对其进行干燥，从而得到34mg两种非对映异构体1∶1混合物的(1R^*，10S)-[1-仲丁基-5-氰基-7-(2-乙氧基-乙氧基)-8-甲基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-基]-乙酸(62％，2步反应)。ESI MSm/z 413.2(M-H)^-.

¹H NMR(CDCl₃)：两种非对映异构体的～1∶1混合物，δ9.13(br s，0.5H，非对映异构体1的吲哚NH)，9.09(br s，0.5H，非对映异构体2的吲哚NH)，

7.05(s，1H)，4.18-4.00(m，2H)，3.97-3.77(m，3H)，3.63(t，J＝7Hz，2H)，3.50(t，J＝7Hz，2H)，3.13-3.03(m，4H)，2.27(s，3H)，2.17-1.61(m，2H)，1.36-1.06(m，5H)，1.04(d，J＝6Hz，1.5H)，0.93(t，J＝8Hz，1.5H)，0.75(t，J＝7Hz，1.5H)，0.65(d，J＝6 Hz，1.5H).

实施例34

(1R^*，10S)-[1-仲丁基-5-氰基-7-(2-异丙氧基-乙氧基)-8-甲基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-基]-乙酸

(1R^*，10S)-[1-仲丁基-5-氰基-7-(2-异丙氧基-乙氧基)-8-甲基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-基]-乙酸乙酯

向含有(1R^*，10S)-(1-仲丁基-5-氰基-7-羟基-8-甲基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-基)-乙酸乙酯(50mg，0.13mmol)的无水DMF(5mL)溶液中加入Cs₂CO₃(66mg，0.20mmol)和1-溴-2-异丙氧基乙烷(～40μL，＞0.20mmol)。将上述反应混合物浸入预热的油浴(60℃)中。4小时之后，将另外的1-溴-2-异丙氧基乙烷(～40μL，＞0.20mmol)加入其中，并且将反应混合物在60℃下保持3小时。将反应混合物冷却至环境温度，并且用乙醚和水稀释。将各层分离，所得有机相用水(5×)和盐水(1×)洗涤、用无水Na₂SO₄干燥、过滤并进行浓缩。所得粗酯产品经硅胶色谱法(25％EtOAc/己烷)进行纯化，从而得到为两种非对映异构体～1∶1混合物的酯。¹H NMR(CDCl₃)：两种非对映异构体的～1∶1混合物，δ9.40(br s，0.5H，非对映异构体1的吲哚NH)，9.38(br s，0.5H，非对映异构体2的吲哚NH)，

7.06(s，1H)，4.35-3.92(m，5H)，3.79-3.57(m，3H)，3.44(m，2H)，3.19-2.80(m，3H)，2.40(s，3H)，2.17(m，0.5H)，1.66(m，0.5H)，1.39-1.09(m，12H)，103(d，J＝6Hz，1.5H)，0.93 (t，J＝8Hz，1.5H)，0.75(m，3H).

在环境温度下，向含有粗(1R^*，10S)-[1-仲丁基-5-氰基-7-(2-异丙氧基-乙氧基)-8-甲基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-基]-乙酸乙酯(～50mg)的乙醇(4mL)和THF(1mL)溶液中加入3N NaOH(1mL)。5小时之后，上述反应混合物用水稀释并且用乙醚洗涤。所得水相用1N HCl进行酸化，产品用乙醚进行提取。所得乙醚提取物用1N HCl和盐水洗涤、用无水Na₂SO₄干燥、过滤并进行浓缩。所得粗产品经硅胶色谱法(1％～20％MeOH/DCM)进行纯化，并且将纯化的酸与乙醚/己烷共同研磨。将产品收集在Hirsch漏斗上、用己烷洗涤并且在真空中干燥，从而得到16mg作为两种非对映异构体～1∶1混合物的(1R^*，10S)-[1-仲丁基-5-氰基-7-(2-异丙氧基-乙氧基)-8-甲基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-基]-乙酸(29％，2步反应)。ESI MS m/z 429.2(M+H)⁺.¹H NMR(CDCl₃)：两种非对映异构体的～1∶1混合物，δ8.88(br s，0.5H，非对映异构体1的吲哚NH)，8.83(br s，0.5H，非对映异构体2的吲哚NH)，

7.06(s，1H)，4.19-4.11(m，3H)，3.89(m，1H)，3.78(app t，J＝5Hz，2H)，3.69(m，1H)，3.12-3.04(m，4H)，2.32(s，3H)，2.17(m，1H)，1.65(m，1H)，1.27(m，1H)，1.21(d，J＝5Hz，6H)，1.05(d，J＝7Hz，1.5H)，0.93(t，J＝8Hz，1.5H)，0.77(m，3H).

实施例35

(1R^*，10S)-[1-仲丁基-5-氰基-7-(5-二甲基氨基-[1，2，4]噻二唑-3-基甲氧基)-8-甲基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-基]-乙酸

(1R^*，10S)-[1-仲丁基-5-氰基-7-(5-二甲基氨基-[1，2，4]噻二唑-3-基甲氧基)-8-甲基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-基]-乙酸乙酯向含有(1R^*，10S)-(1-仲丁基-5-氰基-7-羟基-8-甲基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-基)-乙酸乙酯(43mg，0.11mmol)的无水NMP(2mL)溶液中加入Cs₂CO₃(57mg，0.17mmol)、KI(19mg，cat.)和3-氯甲基-5-二甲基氨基-1，2，4-噻二唑(27mg，0.17mmol)。将上述反应混合物保持在环境温度下。16小时之后，用乙醚和10％HCl水溶液对上述反应混合物进行稀释。将各层分离，所得有机相用水(5×)和盐水(1×)洗涤、用无水Na₂SO₄干燥、过滤并进行浓缩。所得粗产品经硅胶色谱法(30％～60％EtOAc/己烷)进行纯化，从而得到46mg为两种非对映异构体～1∶1混合物的酯。¹H NMR(CDCl₃)：两种非对映异构体的～1∶1混合物，δ9.42(br s，0.5H，非对映异构体1的吲哚NH)，9.39(br s，0.5H，非对映异构体2的吲哚NH)，

7.18(s，1H)，5.11(s，2H)，4.30-4.04(m，3H)，3.75(m，1H)，3.39(t，J＝7Hz，1H)，3.18(s，6H)，3.13-2.95(m，3H)，2.44(s，3H)，2.39(m，1H)，2.18(m，1H)，2.01(m，1H)，1.66(m，0.5H)，1.30(t，J＝7Hz，3H)，1.35(m，0.5H)，1.16(m，0.5H)，1.03(d，J＝6Hz，1.5H)，0.93(t，J＝8Hz，1.5H)，0.75(t，J＝7Hz，1.5H)，0.63 (d，J＝7Hz，1.5H).

在环境温度下，向含有(1R^*，10S)-[1-仲丁基-5-氰基-7-(5-二甲基氨基-[1，2，4]噻二唑-3-基甲氧基)-8-甲基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-基]-乙酸乙酯(46mg)的乙醇(2mL)和THF(1mL)溶液中加入3N NaOH(1mL)。16小时之后，上述反应混合物用水进行稀释并且用1N HCl进行酸化。所得产品用乙醚进行提取。所得乙醚提取物用1N HCl和盐水洗涤、用无水Na₂SO₄干燥、过滤并进行浓缩。将所得粗产品与乙醚/己烷一起研磨。将产品收集在Hirsch漏斗上、用己烷洗涤并且在真空中进行干燥，从而得到29mg两种非对映异构体～1∶1混合物的(1R*，10S)-[1-仲丁基-5-氰基-7-(5-二甲基氨基-[1，2，4]噻二唑-3-基甲氧基)-8-甲基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-基]-乙酸(54％，2步反应)。ESI MS m/z 484.1(M+H)⁺.¹H NMR(CDCl₃)：两种非对映异构体的～1∶1混合物，δ9.04(br s，0.5H，非对映异构体1的吲哚NH)，8.98(br s，0.5H，非对映异构体2的吲哚NH)，

7.15(s，1H)，5.09(s，2H)，4.12(m，1H)，3.88(m，1H)，3.19(s，6H)，3.13-2.98(m，3H)，2 38(s，3H)，2.20(m，1H)，1.68(m，1H)，1.28(m，1H)，1.12(m，1H)，1.09(d，J＝6Hz，1.5H)，0.93(t，J＝8Hz，1.5H)，0.75(t，J＝7Hz，1.5H)，0.63(d，J＝7Hz，1.5H).

实施例36

(1R^*，10S)-[1-仲丁基-5-氰基-7-(1，5-二甲基-1H-吡唑-3-基甲氧基)-8-甲基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-基]-乙酸

(1R^*，10S)-[1-仲丁基-5-氰基-7-(1，5-二甲基-1H-吡唑-3-基甲氧基)-8-甲基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-基]-乙酸乙酯

向含有(1R^*，10S)-(1-仲丁基-5-氰基-7-羟基-8-甲基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-基)-乙酸乙酯(47mg，0.12mmol)的无水NMP(2mL)溶液中加入Cs₂CO₃(83mg，0.25mmol)和3-溴甲基-1，5-二甲基吡唑(48mg，0.25mmol)。将上述反应混合物保持在环境温度下。16小时之后，用乙醚和10％HCl水溶液对上述反应混合物进行稀释。将各层分离，所得有机相用水(5×)和盐水(1×)洗涤、用无水Na₂SO₄干燥、过滤并进行浓缩。所得粗酯产品经硅胶色谱法(50％～60％EtOAc/己烷)进行纯化，从而得到为两种非对映异构体～1∶1混合物的酯。¹H NMR(CDCl₃)：两种非对映异构体的～1∶1混合物，δ9.37(br s，0.5H，非对映异构体1的吲哚NH)，9.35(br s，0.5H，非对映异构体2的吲哚NH)，

7.16(s，1H)，6.10(s，1H)，5.02(s，2H)，4.26-4.06(m，3H)，3.77(s，3H)，3.74(m，2H)，3.15-2.96(m，3H)，2.41(s，3H)，2.27(s，3H)，2.17(m，1H)，1.66(m，0.5H)，1.35(m，0.5H)，1.26(t，J＝7Hz，3H)，1.16(m，0.5H)，1.03(d，J＝6Hz，1.5H)，0.94(t，J＝8Hz，1.5H)，0.76(t，J＝7Hz，1.5H)，0.65(d，J＝7Hz，1.5H).

(1R^*，10S)-[1-仲丁基-5-氰基-7-(1，5-二甲基-1H-吡唑-3-基甲氧基)-8-甲基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-基]-乙酸在环境温度下，向含有(1R^*，10S)-[1-仲丁基-5-氰基-7-(1，5-二甲基-1H-吡唑-3-基甲氧基)-8-甲基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-基]-乙酸乙酯(～50mg)的乙醇(4mL)和THF(1mL)溶液中加入3N NaOH(2mL)。16小时之后，上述反应混合物用水进行稀释并且用1N HCl进行酸化。所得产品用乙醚进行提取。所得乙醚提取物用1N HCl和盐水洗涤、用无水Na₂SO₄干燥、过滤并进行浓缩。将所得粗产品与乙醚/己烷一起研磨。将产品收集在Hirsch漏斗上、用己烷洗涤然后在真空中进行干燥，从而得到27mg为两种非对映异构体～1∶1混合物的(1R^*，10S)-[1-仲丁基-5-氰基-7-(1，5-二甲基-1H-吡唑-3-基甲氧基)-8-甲基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-基]-乙酸(50％，2步反应)。ESIMS m/z 449.2(M-H)^-.¹H NMR(CDCl₃)：两种非对映异构体的～1∶1混合物，δ9.16(br s，0.5H，非对映异构体1的吲哚NH)，9.13(brs，0.5H，非对映异构体2的吲哚NH)，

7.06(s，1H)，6.12(s，1H)，4.99(m，2H)，4.13-4.08(m，1H)，3.85(m，1H)，3.78(s，3H)，3.12(m，2H)，3.00(m，3H)，2.28(s，3H)，2.23(s，3H)，1.70(m，0.5H)，1.35(m，0.5H)，1.16(m，0.5H)，1.06(d，J＝6Hz，1.5H)，0.94(t，J＝8Hz，1.5H)，0.75(t，J＝7Hz，1.5H)，0.68(d，J＝7Hz，1.5H).

通过适当选择适宜的原料，本发明的其它化合物可以根据上述实施例所述方法得到制备。

由此制备的其它吡喃并吲哚衍生物及其类似物的代表性实施例列于下表2中。

表2.吡喃并吲哚衍生物

如果未明确指出，则 R₃，R₄，R₅，R₆，R₈＝H

^*质谱数据表示(M+1)或者(M-1)分子离子的质荷比(m/z)。

^**实施例No.s45-47化合物用于制备式I化合物。

实施例1

(5-氰基-7-羟甲基-8-甲基-1-丙基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-基)-乙酸

实施例2

实施例3

(5-氰基-7-乙氧基甲基-8-甲基-1-丙基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-基)-乙酸

实施例4

(5-氰基-8-甲基-7-丙氧基甲基-1-丙基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-基)-乙酸

实施例5

(5-氰基-7-异丙氧基甲基-8-甲基-1-丙基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-基)-乙酸

实施例6

(5-氰基-7-环丁氧基甲基-8-甲基-1-丙基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-基)-乙酸

实施例7

(5-氰基-7-环己氧基甲基-8-甲基-1-丙基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-基)-乙酸

实施例8

(5-氰基-7-环丙基甲氧基甲基-8-甲基-1-丙基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-基)-乙酸

实施例9

(5-氰基-7-环丁基甲氧基甲基-8-甲基-1-丙基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-基)-乙酸

实施例10

(5-氰基-7-环戊基甲氧基甲基-8-甲基-1-丙基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-基)-乙酸

实施例11

(7-丁-2-炔氧基甲基-5-氰基-8-甲基-1-丙基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-基)-乙酸

实施例12

[5-氰基-8-甲基-1-丙基-7-(四氢-吡喃-4-基甲氧基甲基)-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b ]吲哚-1-基]-乙酸

实施例13

(3′S，1S^*)[5-氰基-8-甲基-1-丙基-7-(四氢-呋喃-3-基氧基甲基)-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-基]-乙酸

实施例14

(3′R，1S^*)[5-氰基-8-甲基-1-丙基-7-(四氢-呋喃-3-基氧基甲基)-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-基]-乙酸

实施例15

(7-苄氧基甲基-5-氰基-8-甲基-1-丙基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-基)-乙酸

实施例16

[7-(苯并[1，3]二氧杂环戊烯-5-基甲氧基甲基)-5-氰基-8-甲基-1-丙基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-基]-乙酸

实施例17

[5-氰基-7-(2，4-二甲基-苄氧基甲基)-8-甲基-1-丙基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-基]-乙酸

实施例18

[5-氰基-8-甲基-1-丙基-7-(噻吩-3-基甲氧基甲基)-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-基]-乙酸

实施例19

[5-氰基-7-(2，4-二甲基-噻唑-5-基甲氧基甲基)-8-甲基-1-丙基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-基]-乙酸

实施例20

实施例21

[5-氰基-7-(3-氟-苯氧基甲基)-8-甲基-1-丙基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-基]-乙酸

实施例22

实施例23

实施例24

实施例25

实施例26

实施例27

实施例28

实施例29

实施例30

实施例31

实施例32

5-氰基-8-甲基-7-(5-甲基-异_唑-3-基甲氧基)-1-丙基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b ]吲哚-1-羧酸

实施例33

实施例34

实施例35

实施例36

Claims

1.一种具有下式的化合物：

其中：

R₂为氢、1～12个碳原子的直链烷基、3～12个碳原子的支链烷基、3～12个碳原子的环烷基、2～7个碳原子的烯基、2～7个碳原子的炔基、2～12个碳原子的烷氧基烷基、7～12个碳原子的芳基烷基或者烷基芳基、1～8个碳原子的氰基烷基、2～16个碳原子的烷硫基烷基、4～24个碳原子的环烷基-烷基、取代或者未取代的芳基，或者杂芳基；

R₃-R₆独立地为氢、1～8个碳原子的直链烷基、3～12个碳原子的支链烷基、3～12个碳原子的环烷基、2～7个碳原子的烯基、取代或者未取代的芳基、呋喃甲基、7～12个碳原子的芳基烷基或者烷基芳基、2～7个碳原子的炔基，或者R₅和R₆与它们连接的环碳原子一起形成羰基；

R₇-R₈和R₁₀独立地为氢、1～8个碳原子的直链烷基、3～12个碳原子的支链烷基、3～12个碳原子的环烷基、2～7个碳原子的烯基、取代或者未取代的芳基、取代或者未取代的杂芳基、呋喃甲基、7～12个碳原子的芳基烷基或者烷基芳基、2～7个碳原子的炔基、苯基炔基、1～8个碳原子的烷氧基、7～12个碳原子的芳基烷氧基、1～8个碳原子的烷硫基、三氟甲氧基、三氟乙氧基、三氟甲硫基、三氟乙硫基、1～6个碳原子的酰基、COOH、COO-烷基、CONR₁₁R₁₂、F、Cl、Br、I、CN、CF₃、NO₂、1～8个碳原子的烷基亚磺酰基、1～6个碳原子的烷基磺酰基、吡咯烷基、或者噻唑烷基；

R₉为氢、1～8个碳原子的直链烷基、3～12个碳原子的支链烷基、3～12个碳原子的环烷基、4～24个碳原子的环烷基-烷基、2～7个碳原子的烯基、2～7个碳原子的炔基、2～12个碳原子的烷氧基烷基、3～18个碳原子的烷氧基烷氧基烷基、3～18个碳原子的芳基烷氧基烷基、3～18个碳原子的环烷基烷氧基烷基、3～18个碳原子的芳氧基烷基、3～18个碳原子的杂芳氧基烷基、3～18个碳原子的芳硫基烷基、3～18个碳原子的杂芳基硫基烷基、1～12个碳原子的羟烷基、2～16个碳原子的烷氧亚氨基烷基、2～16个碳原子的烷硫基烷基、2～16个碳原子的烷基磺酰基烷基、2～16个碳原子的单烷基氨基烷基、3～16个碳原子的二烷基氨基烷基、3～16个碳原子的取代二烷基氨基烷基、取代或者未取代的芳基、7～12个碳原子的芳基烷基、7～12个碳原子的取代或者未取代杂芳基、取代或者未取代的杂芳基烷基、取代或者未取代的杂环基、和杂环-烷基；

或者其结晶形式或药学上可接受的盐。

2.根据权利要求1的化合物，其中：

R₂-R₆独立地为氢、1～8个碳原子的直链烷基、3～12个碳原子的支链烷基、3～12个碳原子的环烷基、2～7个碳原子的烯基、取代或者未取代的芳基、呋喃甲基、7～12个碳原子的芳基烷基或者烷基芳基、2～7个碳原子的炔基，或者R₅和R₆与它们连接的环碳原子一起形成羰基；

R₇-R₈和R₁₀独立地为氢、1～8个碳原子的直链烷基、3～12个碳原子的支链烷基、3～12个碳原子的环烷基、2～7个碳原子的烯基、取代或者未取代的芳基、取代或者未取代的杂芳基、呋喃甲基、7～12个碳原子的芳基烷基或者烷基芳基、2～7个碳原子的炔基、苯基炔基、1～8个碳原子的烷氧基、7～12个碳原子的芳基烷氧基、1～8个碳原子的烷硫基、三氟甲氧基、三氟乙氧基、三氟甲硫基、三氟乙硫基、1～6个碳原子的酰基、COOH、COO-烷基、CONR₁₁R₁₂、F、Cl、Br、I、CN、CF₃、NO₂、1～8个碳原子的烷基亚磺酰基、1～6个碳原子的烷基磺酰基、吡咯烷基，或者噻唑烷基；

R₉为氢、1～8个碳原子的直链烷基、3～12个碳原子的支链烷基、3～12个碳原子的环烷基、4～24个碳原子的环烷基-烷基、2～7个碳原子的烯基、2～7个碳原子的炔基、2～12个碳原子的烷氧基烷基、3～18个碳原子的烷氧基烷氧基烷基、3～18个碳原子的芳基烷氧基烷基、3～18个碳原子的环烷基烷氧基烷基、3～18个碳原子的芳氧基烷基、3～18个碳原子的杂芳氧基烷基、3～18个碳原子的芳基硫基烷基、3～18个碳原子的杂芳基硫基烷基、1～12个碳原子的羟烷基、2～16个碳原子的烷氧基亚氨基烷基、2～16个碳原子的烷基硫基烷基、2～16个碳原子的烷基磺酰基烷基、2～16个碳原子的单烷基氨基烷基、3～16个碳原子的二烷基氨基烷基、3～16个碳原子的取代二烷基氨基烷基、取代或者未取代的芳基、7～12个碳原子的芳基烷基、7～12个碳原子的取代或者未取代杂芳基、取代或者未取代的杂芳基烷基、取代或者未取代的杂环基、和杂环-烷基；

M为CH₂或者CH₂CH₂；

或者其结晶形式或药学上可接受的盐。

3.根据权利要求1的化合物，其中：

R₁为氢、1～8个碳原子的直链烷基、3～12个碳原子的支链烷基、3～12个碳原子的环烷基、2～7个碳原子的烯基、2～7个碳原子的炔基，或者7～12个碳原子的芳基烷基或烷基芳基；

M为一个键；

Y为一个键、CH₂、CH₂CH₂、芳基，或者R₂和Y连同它们连接的环碳原子可以一起另外形成3～8个碳原子的螺环烷基环；或者

其结晶形式或药学上可接受的盐。

4.根据权利要求1的化合物，选自：

(5-氰基-7-羟甲基-8-甲基-1-丙基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-基)-乙酸；

(5-氰基-7-甲氧基甲基-8-甲基-1-丙基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-基)-乙酸；

(5-氰基-7-乙氧基甲基-8-甲基-1-丙基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-基)-乙酸；

(5-氰基-8-甲基-7-丙氧基甲基-1-丙基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-基)-乙酸；

(5-氰基-7-异丙氧基甲基-8-甲基-1-丙基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-基)-乙酸；

(5-氰基-7-环丁氧基甲基-8-甲基-1-丙基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-基)-乙酸；

(5-氰基-7-环己氧基甲基-8-甲基-1-丙基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-基)-乙酸；

(5-氰基-7-环丙基甲氧基甲基-8-甲基-1-丙基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-基)-乙酸；

(5-氰基-7-环丁基甲氧基甲基-8-甲基-1-丙基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-基)-乙酸；

(5-氰基-7-环戊基甲氧基甲基-8-甲基-1-丙基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-基)-乙酸；

(7-丁-2-炔氧基甲基-5-氰基-8-甲基-1-丙基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-基)-乙酸；

[5-氰基-8-甲基-1-丙基-7-(四氢-吡喃-4-基甲氧基甲基)-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-基]-乙酸；

(3′S，1S^*)-[5-氰基-8-甲基-1-丙基-7-(四氢-呋喃-3-基氧基甲基)-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-基]-乙酸；

(3′R，1S^*)-[5-氰基-8-甲基-1-丙基-7-(四氢-呋喃-3-基氧基甲基)-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-基]-乙酸；

(7-苄氧基甲基-5-氰基-8-甲基-1-丙基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-基)-乙酸；

[5-氰基-7-(2，4-二甲基-苄氧基甲基)-8-甲基-1-丙基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-基]-乙酸；

[5-氰基-8-甲基-1-丙基-7-(噻吩-3-基甲氧基甲基)-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-基]-乙酸；

[5-氰基-7-(2，4-二甲基-噻唑-5-基甲氧基甲基)-8-甲基-1-丙基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-基]-乙酸；

(5-氰基-8-甲基-7-苯氧基甲基-1-丙基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-基)-乙酸；

[5-氰基-7-(3-氟-苯氧基甲基)-8-甲基-1-丙基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-基]-乙酸；

(5-氰基-7-环丙基甲氧基-8-甲基-1-丙基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-基)-乙酸；

(R)-[5-氰基-8-甲基-7-(5-甲基-异_唑-3-基甲氧基)-1-丙基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-基]-乙酸；

[5-氰基-8-甲基-1-丙基-7-(吡啶-4-基甲氧基)-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-基]-乙酸；

[5-氰基-7-(1，5-二甲基-1H-吡唑-3-基甲氧基)-8-甲基-1-丙基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-基]-乙酸；

(R)-[5-氰基-7-(2-异丙氧基-乙氧基)-8-甲基-1-丙基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-基]-乙酸；

(R)-[5-氰基-7-(3-甲氧基-丙氧基)-8-甲基-1-丙基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-基]-乙酸；

(1R，2′R)-[5-氰基-7-(2-甲氧基-丙氧基)-8-甲基-1-丙基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-基]-乙酸；

[5-氰基-8-甲基-7-(5-甲基-[1，3，4]噻二唑-2-基甲氧基)-1-丙基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-基]-乙酸；

(R)-[5-氰基-7-(5-二甲基氨基-[1，2，4]噻二唑-3-基甲氧基)-8-甲基-1-丙基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-基]-乙酸；

5-氰基-7-(2-甲氧基-乙氧基)-8-甲基-1-丙基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-羧酸；

5-氰基-8-甲基-7-(5-甲基-异_唑-3-基甲氧基)-1-丙基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-羧酸；

(1R^*，10S)-[1-仲丁基-5-氰基-7-(2-乙氧基-乙氧基)-8-甲基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-基]-乙酸；

(1R^*，10S)-[1-仲丁基-5-氰基-7-(2-异丙氧基-乙氧基)-8-甲基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-基]-乙酸；

(1R^*，10S)-[1-仲丁基-5-氰基-7-(5-二甲基氨基-[1，2，4]噻二唑-3-基甲氧基)-8-甲基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-基]-乙酸；和

(1R^*，10S)-[1-仲丁基-5-氰基-7-(1，5-二甲基-1H-吡唑-3-基甲氧基)-8-甲基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-基]-乙酸。

5.根据权利要求1的化合物，具有下式：

6.含有下式化合物和药学上可接受的载体的药物组合物：

其中：

或者其结晶形式或药学上可接受的盐。

7.一种治疗或者预防哺乳动物中丙型肝炎病毒感染的方法，包括向哺乳动物提供有效量的下式化合物：

其中：

Y为一个键、CH₂、CH₂CH₂、芳基、或者R₂和Y连同它们连接的环碳原子可以一起另外形成3～8个碳原子的螺环烷基环；或者

其结晶形式或药学上可接受的盐。

8.权利要求7的方法，其中所述化合物选自：

(7-丁-2-炔氧基甲基-5-氰基-8-甲基-1-丙基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b ]吲哚-1-基)-乙酸；

[7-(苯并[1，3]二氧杂环戊烯-5-基甲氧基甲基)-5-氰基-8-甲基-1-丙基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-基]-乙酸；

(1R^*，10S)-[1-仲丁基-5-氰基-7-(1，5-二甲基-1 H-吡唑-3-基甲氧基)-8-甲基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-基]-乙酸。

9.权利要求7的方法，其中该式化合物异构体A与异构体B的比例大于1∶1，其中异构体A和异构体B具有相应的下式：

异构体A

异构体B。

10.权利要求7的方法，其中该式化合物为100％的异构体A。

11.权利要求7的方法，其中该式化合物异构体A与异构体B的比例至少为9∶1。

12.权利要求7的方法，其中该式化合物异构体A与异构体B的比例至少为8∶1。

13.权利要求7的方法，其中该式化合物异构体A与异构体B的比例至少为7∶1。

14.一种抑制丙型肝炎病毒复制的方法，包括用下式化合物接触丙型肝炎病毒：

其中：

其结晶形式或药学上可接受的盐。

15.权利要求14的方法，其中该式化合物异构体A与异构体B的比例大于1∶1，其中异构体A和异构体B具有相应的下式：

异构体A

异构体B。

16.权利要求14的方法，其中该式化合物R-对映异构体与S-对映异构体的比例大于1∶1。

17.权利要求14的方法，其中该式化合物为100％的异构体A。

18.权利要求14的方法，其中该式化合物异构体A与异构体B的比例至少为9∶1。

19.权利要求14的方法，其中该式化合物异构体A与异构体B的比例至少为8∶1。

20.权利要求14的方法，其中该式化合物异构体A与异构体B的比例至少为7∶1。

21.权利要求14的方法，其中化合物选自：

(5-氰基-7-环丙基甲氧基甲基-8-甲基-1-丙基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b ]吲哚-1-基)-乙酸；

(1 R，2′R)-[5-氰基-7-(2-甲氧基-丙氧基)-8-甲基-1-丙基-1，3，4，9-四氢-吡喃并[3，4-b]吲哚-1-基]-乙酸；