CN101095751A - 具有祛黄褐斑、改善营养性贫血的药物组合物及制备方法 - Google Patents

具有祛黄褐斑、改善营养性贫血的药物组合物及制备方法 Download PDF

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Abstract

本发明涉及一种具有祛黄褐斑、改善营养性贫血功能的药物组合物及其制备方法和质量控制方法。该组合物以沙棘、枸杞子、当归、红花、党参、肉桂、珍珠、氯化高铁血红素为主要原料，先将红花、肉桂、珍珠、氯化高铁血红素粉碎成细粉，再将沙棘、枸杞子、当归、党参加水提取，浓缩，干燥，得干浸膏粉末，与上述药材细粉混合均匀后制成常规制剂。该组合物的质量控制指标为钙、总黄酮、粗多糖，规定每100g单位制剂含钙(以Ca计)为2.36～3.94mg、含总黄酮(以芦丁计)大于或等于350mg、含粗多糖(以葡聚糖计)大于或等于180mg。

Description

具有祛黄褐斑、改善营养性贫血的药物组合物及制备方法
技术领域
本发明涉及一种具有祛黄褐斑、改善营养性贫血功能的药物组合物及其制备方法和质量控制方法。
背景技术
营养性贫血是最为常见的贫血，尤其是严重危害妇女及老人的健康，世界各国的发病率都很高。虽然随着生活条件的改善，人们的饮食质量有了明显的提高，但由于人们对营养性贫血的知识认识不足、膳食结构不合理和大部分人群的偏食、厌食、挑食等不良生活习惯，造成营养性贫血的发病率仍然很高。血有营养和滋润全身的功能，贫血或者血虚除头晕目花、面色萎黄、面色胱白、黑色素深着、少食懒言、毛枯肌燥、肢体麻木等，还可出现健忘、失眠、甚至神志恍惚等征候。因此预防营养性贫血尤为必要。黄褐斑这一严重影响容貌美的疾患也日益引起人们的重视，现代医学认为黄褐斑与内分泌失调，雌激素水平紊乱有关，常继发于妊娠，肝病，肺结核，另外紫外线辐射，皮肤炎症及过敏，使用劣质化妆品，睡眠长期不足等均可成为诱因。祖国医学认为，该病的发生与肝，脾，肾三脏的关系尤为密切。“水亏不能制火，血弱不能华面，以致火燥结成斑，色枯不荣”。黑色为肾之本色，肾阴不足，水亏火旺，日久消灼精血；阴精不足，面颊不得荣养，血滞为瘀而成黑斑。因此治疗上宜滋补肝肾，活血祛瘀，养血和荣。
可见营养性贫血与黄褐斑的形成有密切关系，而中医中药对贫血和黄褐斑的防治有丰富的经验，在整体调整脏腑功能、促进气血的生成和祛黄褐斑方面，有独到的疗效；根据传统中医保健理论研制的保健食品，既有科学价值，又有广阔的开发前景，并可产生很高的社会和经济效益。营养性贫血是发展中国家普遍存在的健康问题，营养性贫血人群一般多发于儿童和青少年，女性居多，孕妇与乳母也是多发人群。据世界卫生组织统计：全球约有30亿人不同程度患有铁缺乏症或贫血，每年因患贫血引致各类疾病而死亡的人数达上千万。中国患贫血的人口概率高于西方国家，近年来更因减肥、营养摄入不平衡等因素而导致了贫血人群的增加。
黄褐斑足一种常见的色素沉着性面部皮肤病，俗称蝴蝶斑，表现为脸面部的色素沉着斑，对称分布，形状不规则，大小不定，颜色深浅不一，主要分布在眼睛周围、面颊部、颧部口周等处，影响患者的容貌美，一般没有自觉症状，但治疗十分棘手，多见于女性。目前认为可能的因素有口服避孕药，妊娠、内分泌、某些药物、劣质化妆品、遗传、种族、营养、肝脏疾病及紫外线等。一般来说，黄褐斑在亚洲、拉丁美洲种族人群中多发，而在白色人种中发病率较低。而且许多家系调查结果发现，黄褐斑患者具有相同家族史者要占50％以上，而男性患者具有家族史的比例更高。女性25岁以后，身体状况开始出现下滑，很多以前不曾遇到的问题，比如而部黄褐斑、乳房肿块、子宫肌瘤等问题相继出现。据有关统计表明：而部黄褐斑，雀斑，中青年女性的患病率为28.2％，其中有27.5％～31％的患者，同时患有子宫肌瘤，乳房肿块，卵巢囊肿或其他妇科病。贫血能导致妇女黄褐斑生成。
目前已批准上市的即具有改善营养性贫血又具有祛黄褐斑的保健品种并不多，且祛斑中药的研究还处于起始阶段。因此开发改善营养性贫血和祛黄褐斑的保健食品，将会有巨大的市场潜力。
发明内容
本发明的目的是提供一种具有祛黄褐斑、改善营养性贫血功能的药物组合物。
本发明的另一目的是提供该药物组合物制剂的制备方法及质量控制指标。
本发明的药物是由下列重量份数的原料组成：
沙棘10～50重量份、枸杞子10～40重量份、当归10～40重量份、红花1～15重量份、党参1～40重量份、肉桂0.5～10重量份、珍珠0.5～10重量份、氯化高铁血红素0.1～5重量份。
本发明的药物的配方最佳组方重量份数的原料是：
沙棘40重量份、枸杞子30重量份、当归30重量份、红花10重量份、党参30重量份、肉桂5重量份、珍珠5重量份、氯化高铁血红素0.83重量份。
本发明具有祛黄褐斑、改善营养性贫血功能的药物组合物，以上基础方中还可加入山麦冬1～15重量份、天冬1～15重量份、白芍1～20重量份、柴胡1～20重量份、白术1～20重量份、茯苓1～20重量份、甘草1～15重量份、延胡索1～10重量份、合欢皮1～15重量份、红景天1～10重量份、麦冬1～15重量份、赤芍1～15重量份、灵芝1～15重量份、鸡血藤1～20重量份、玫瑰花1～10重量份、香附1～10重量份、桃仁1～10重量份、益母草1～15重量份中的至少一种。
本发明具有祛黄褐斑、改善营养性贫血功能的药物组合物是由下述方法制成的：
选择原料药：
沙棘10～50重量份、枸杞子10～40重量份、当归10～40重量份、红花1～15重量份、党参1～40重量份、肉桂0.5～10重量份、珍珠0.5～10重量份、氯化高铁血红素0.1～5重量份。
先将所有原药材分别进行除杂、洗净，干燥，然后把红花、肉桂、珍珠、氯化高铁血红素粉碎成细粉备用；再将沙棘、枸杞子、当归、党参中加入药材5～15倍量的水加热提取1～4次，每次0.5～3小时，温度70～100℃，过滤，合并提取液，将提取液浓缩后干燥，得于浸膏粉碎成粉末或直接得干浸膏粉末。将上述干浸膏粉末与药材细粉混合，混合均匀后，加入常规辅料制成临床可接受的剂型。
按[《中药药剂学》(供中药类专业用)，上海科学技术出版，1997年12月第一版；《药物制剂研究开发与生产新工艺技术应用大全》，当代中国音像出版社]常规方法、常用辅料制成临床可接受的剂型。
本发明具有祛黄褐斑、改善营养性贫血功能的药物组合物优选制法为：
选择原料药：
沙棘10～50重量份、枸杞子10～40重量份、当归10～40重量份、红花1～15重量份、党参1～40重量份、肉桂0.5～10重量份、珍珠0.5～10重量份、氯化高铁血红素0.1～5重量份。
先将所有原药材分别进行除杂、洗净，干燥，然后把红花、肉桂、珍珠、氯化高铁血红素粉碎成细粉备用；再将沙棘、枸杞子、当归、党参中加入药材5～20倍量的水加热提取1～4次，每次0.5～3小时，温度70～100℃，过滤，合并提取液，将提取液浓缩后干燥，得干浸膏粉碎成粉末或直接得干浸膏粉末。将上述干浸膏粉末与药材细粉混合，混合均匀后按常规方法制成颗粒剂或散剂或片剂或装入胶囊。
本发明具有祛黄褐斑、改善营养性贫血功能的药物组合物优选制法为：
选择原料药：
沙棘10～50重量份、枸杞子10～40重量份、当归10～40重量份、红花1～15重量份、党参1～40重量份、肉桂0.5～10重量份、珍珠0.5～10重量份、氯化高铁血红素0.1～5重量份。
先将所有原药材分别进行除杂、洗净，干燥，然后把红花、肉桂、珍珠、氯化高铁血红素粉碎成细粉备用；再将沙棘、枸杞子、当归、党参中加入药材5～20倍量的水加热提取1～4次，每次0.5～2小时，温度70～100℃，过滤，合并提取液，将提取液浓缩后喷雾干燥，得干浸膏粉末。将上述干浸膏粉末与药材细粉混合，将上述干浸膏粉末与药材细粉混合，混合均匀，制粒。再将羧甲基淀粉钠0.1～10重量份和硬脂酸镁0.01～10重量份加入上述制好的颗粒中，混合均匀，压片，最后加入胃溶型薄膜包衣预混剂0.1～20重量份进行薄膜包衣，即可得到片剂。
本发明具有祛黄褐斑、改善营养性贫血功能的药物组合物最佳制法为：
选择原料药：
沙棘400重量份、枸杞子300重量份、当归300重量份、红花100重量份、党参300重量份、肉桂50重量份、珍珠50重量份、氯化高铁血红素8.3重量份。
先将所有原药材分别进行除杂、洗净，干燥，然后把红花、肉桂、珍珠、氯化高铁血红素粉碎成细粉备用；再将沙棘、枸杞子、当归、党参中加入药材10倍量的水加热提取2次，每次2小时，温度100℃，过滤，合并提取液，将提取液浓缩后喷雾干燥，得干浸膏粉末。将上述干浸膏粉末与药材细粉混合，混合均匀，制粒。再将羧甲基淀粉钠12重量份和硬脂酸镁2重量份加入上述制好的颗粒中，混合均匀，压片，最后加入胃溶型薄膜包衣预混剂15重量份进行薄膜包衣，即可得到片剂。
本发明具有以下技术效果：
本品整个配方的配伍是根据传统中医保健理论，并针对营养性贫血和黄褐斑的治则，以调补五脏，行气血津液为主，选用沙棘、枸杞子、当归、红花、党参、珍珠、肉桂、氯化高铁血红素等为主要原料，本方溶温阳补血、填精益气、祛瘀生新，活血通脉，解毒养颜于一炉；使人体精血生，气血复，颜色悦，诸症平。方中沙棘利肺，升阳，健脾，养胃，活血化瘀，消炎生肌；配以枸杞子滋补肝肾、生精益气，益精髓，健筋骨，悦颜色，可治肾阳虚所致的血虚病症；当归和红花补血活血，调经止痛；党参补中益气，健脾益肺，生津养血；当归、红花与党参配伍气血双补，气旺血生，阴生阳长。珍珠安神定惊，明目消翳，解毒生肌；肉桂温肾暖脾，既能补肾虚又能祛脾胃之虚寒之邪，因此本配方佐以肉桂可达补中益气，和颜通脉之功。生物态铁制剂氯化高铁血红素在人体内的不仅吸收率高，且无胃肠道刺激作用。众药合用，可共奏温阳补血、填精益气、活血通脉，解毒养颜，祛瘀消斑的保健功效。由于药症相符，切中病机，对营养性贫血和黄褐斑有较好的改善作用。
2、本发明生产加工简单、易行，符合现代人的快节奏的生活；同时可以实现了工业化生产。
试验例：
为表明本发明的药物的安全性及祛黄褐斑、改善营养性贫血的效果，进行了该药物的相关性实验，具体如下：
样品(试验用药物)：沙棘400g、枸杞子300g、当归300g、红花100g、党参300g、肉桂50g、珍珠50g、氯化高铁血红素8.3g为原料。先将所有原药材分别进行除杂、洗净，干燥，然后把红花、肉桂、珍珠、氯化高铁血红素粉碎成细粉备用；再将沙棘、枸杞子、当归、党参中加入药材10倍量的水加热提取2次，每次2小时，收集提取液，浓缩后喷雾干燥，得干浸膏粉末。将上述干浸膏粉末与药材细粉混合均匀，制粒。再将羧甲基淀粉钠12g和硬脂酸镁2g加入上述制好的颗粒中，混合均匀，压片，最后加入胃溶型薄膜包衣预混剂15g进行薄膜包衣，即可得到片剂(规格：0.5g/片)。用药用聚乙烯瓶包装，可得成品。
服用方法：每日2次，每次2片，成人按60kg计，每日推荐量为2.0g，试验时用蒸馏水为溶剂配制受试物。
安全性毒理学试验：
1.材料和方法
1.1动物及动物房条件：昆明种小鼠和SD大鼠均由四川抗菌素研究所实验动物中心提供，动物批准证号：川实动质2003-2004清洁级。试验动物房为SPF级，温度：20-25℃，相对湿度40-70％，使用许可证号：川实动质043。
1.2主要仪器与试剂
1.2.1主要仪器：CX4型全自动生化分析仪、METTLER电子天平、OLYMPUS BH-2型显微镜、解剖器械、血球分析仪、超净工作台。
1.2.2主要试剂：生化试剂盒、环磷酰胺、1，8-二羟基蒽醌、叠氮化钠、4-硝基喹啉-N-氧化物、2-氨基芴、2，4，7-三硝基-9-芴酮、丝裂霉素C、S-9混合液。
1.3大、小鼠急性毒性试验：分别采用昆明种小鼠和SD大鼠各20只，雌雄各半，小鼠体重18-22g，大鼠体重180-220g。试验按最大耐受剂量法设10000mg/kg一个剂量组，称量50000mg受试物加蒸馏水至100ml。因溶液过于粘稠，无法一次灌胃，故再加蒸馏水至200ml。动物禁食16h，不限饮水，于次日晨大、小鼠均按20ml/kg.bw两次经口灌胃，间隔4小时，观察14天内动物的中毒症状及死亡情况，试验结束称体重后处死动物作大体解剖。
1.4遗传毒性试验：
1.4.1 Ames试验： 使用自制多氯联苯(Aroclor1254)诱导雄性大鼠肝S9，按标准方法配制成S9混合液后作为活化系统，用间接致突变物20μg/皿2-氨基芴用于TA97、TA98、TA100S0μg/皿1，8-二羟基蒽醌用于TA102菌，测定S9活性。+S9试验时每皿加S90.5ml。试验采用TA97、TA98、TA100、TA102四种菌株，受试物设8、40、200、1000、5000μg/皿五个剂量组，同时设未处理对照组、溶剂(蒸馏水)对照组和阳性对照组。首先配制工作液：准确称取0.5g受试物，溶于10ml蒸馏水。试验时取工作液100μl加入平皿即为最高受试物浓度(5000μg/皿)，以最高浓度为准，5倍往下稀释，方法是取上一浓度液体2ml加8ml灭菌蒸馏水混匀即可。在加和不加S9的试验条件下进行平板掺入法试验。每组作三个平行皿，重复试验一次，-S9阳性对照物：TA97和TA98用0.5μg/皿的4-硝基喹啉-N-氧化物(NQNO)；TA100用1.5μg/皿的叠氮化钠(NaN3)；TA102用1.0μg/皿的丝裂霉素C(MMC)；+S9阳性对照物TA102用50μg/皿的1，8-二羟基蒽醌，其余三个菌株均采用20μg/皿的2-氨基芴(2-AF)。每皿加入阳性对照的体积为0.1ml。
1.4.2小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验：采用昆明种小鼠50只，体重25-30g，雌雄各半，试验设833mg/kg.bw、1667mg/kg.bw、3333mg/kg.bw三个剂量组，另设溶剂(蒸馏水)阴性对照及环磷酰胺阳性对照组(CP，40mg/kg.bw)，称取833、1667、3333mg受试物以及40mgCP，然后分别加蒸馏水至20ml。灌胃体积按0.2ml/10g.bw，试验采用30h两次灌胃法，两次间隔24h，于第二次给受试物后6h脱颈椎处死动物，取胸骨髓制片，固定，Giemsa染色后，在油镜下每只小鼠计数1000个嗜多染红细胞(PCE)中含微核细胞数，计算微核千分率以及观察200个嗜多染红细胞与成熟红细胞(PCE/NCE)的比值。
1.4.3小鼠精子畸形试验：采用雄性昆明种小鼠25只，体重25-30g，将小鼠随机分为5组，每组5只动物，试验设833mg/kg.bw、1667mg/kg.bw、3333mg/kg.bw三个剂量组，另设溶剂(蒸馏水)阴性对照和环磷酰胺阳性对照组(CP，40mg/kg.bw)，称取833、1667、3333mg受试物以及40mgCP，然后分别加蒸馏水至20ml。按0.2ml/10g.bw每日灌胃一次，连续灌胃5天，于首次给受试物后第35天，脱颈椎处死动物，取双侧附睾制片，甲醇固定，1％伊红染色后，在高倍镜下每只动物计数1000条完整精子，并记录精子畸形及畸形类型。
1.5 30天喂养试验：选用SD大鼠80只，雌雄各半，体重为60-90g，试验设833mg/kg.bw、1667mg/kg.bw、3333mg/kg.bw三个剂量组，(分别相当于人体推荐摄入量的25、50、100倍)，另设阴性对照组，每组20只大鼠，雌雄各半。称取4167、8333、16667mg受试物，分别加蒸馏水至100ml，冰箱保存，用完再配。按2.0ml/100g.bw每天灌胃一次连续30天，每天观察动物的一般表现、行为、中毒症状及死亡，每周计算两次进食量，并称一次体重，根据食物摄入量，计算食物利用率，试验结束时经股动脉放血后处死动物，采血用常规方法测定血液学指标，用长春汇力生物技术有限公司提供的试剂盒，测定血生化指标，解剖动物观察内脏改变，称肝、肾、脾、胃肠、睾丸重，测定其脏体比，取肝、肾、脾、胃肠、睾丸作组织病理学检查。
1.6试验数据统计：小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验采用卡方检验，小鼠精子畸形试验采用秩和检验，30天喂养试验数据经方差齐性检验，方差齐，进行方差分析，如P值小于0.05，则用Dunnett法进行两两比较；若方差不齐，则进行数据转换，仍不齐，改用秩和检验，如P值小于0.05，则用DunnettsT3法进行两两比较，上述统计均用PEMS3.0for Windows软件处理。
2、结果
2.1急性毒性试验：给受试物后大、小鼠的一般表现和行为均未见异常，观察期内未见动物死亡(表1)，试验结束处死动物尸解未见异常改变。样品对大、小鼠急性经口MTD均大于10000mg/kg.bw，按急性毒性分级属实际无毒级。
表1  样品对大、小鼠急性经口毒性结果
动物品种  性别   剂量(mg/kg)   动物数(只)   死亡情况   MTD(mg/kg.bw)
昆明种小鼠  雌雄   1000010000   1010   00 ＞10000
SD大鼠  雌雄   1000010000   1010   00 ＞10000
2.2遗传毒性试验
2.2.1 Ames试验：由表2、表3中可见无论在加和不加S9条件下，受试物各剂量组的平均回变菌落数均未超过未处理对照组菌落数二倍，而阳性对照组的平均回变菌落数均超过未处理对照组菌落数二倍以上，呈现明显阳性反应，上述结果表明该受试物未诱导四种菌株回变菌落数增加。
表2    样品Ames实验结果(第一次)
  剂量(μg/皿)                 TA97                   TA98                   TA100                TA102
  -S9    +S9     -S9     +S9     -S9     +S9     -S9     +S9
  81020010005000未处理对照溶剂对照阳性对照   139.0±14.7150.0±11.1139.0±11.8144.7±11.61438.7±13.0141.7±12.7136.3±5.7986.7±56.1   154.3±12.6145.3±15.3139.3±15.3140.3±16.6146.3±24.5150.0±10.5148.0±12.51012.0±97.5     30.3±4.033.7±2.129.7±5.532.7±4.033.7±4.232.0±4.032.0±1.0383.3±51.6     32.3±5.934.3±4.033.7±4.031.7±5.534.0±5.335.0±7.033.3±2.31426.7±89.7     141.3±12.9151.0±17.1143.3±16.2151.3±14.0145.7±16.9147.0±12.8144.7±10.81330.0±64.1     153.0±18.1151.0±13.2156.0±18.3146.0±17.1160.3±20.4154.3±10.0150.0±10.41192.0±71.5    252.0±14.0237.3±12.1244.7±20.8256.7±21.2238.0±10.6254.0±16.4244.0±10.41401.3±105.6     262.0±17.1258.0±26.9270.7±20.0249.3±15.1251.3±16.0265.7±16.4253.3±22.0870.0±46.5
注：以上结果为3个平皿的均值±标准差。
表3  样品Ames实验结果(第二次)
  剂量(μg/皿)                TA97                 TA98                 TA100                TA102
    -S9   +S9   -S9     +S9   -S9     +S9   -S9   +S9
  84020010005000未处理对照溶剂对照阳性对照   149.7±15.7146.0±12.2137.7±15.0127.0±17.3149.3±12.2142.3±8.5138.7±10.0968.7±74.9   150.7±20.5143.7±18.1151.0±17.1142.3±11.0154.0±10.4154.0±11.3150.7±14.2995.3±71.6   32.7±2.131.7±3.833.3±2.331.3±4.030.0±3.631.3±3.831.0±2.6378.0±41.6     33.3±5.135.7±4.532.0±2.631.7±5.734.0±3.534.0±3.034.7±2.51399.3±101.9   153.3±15.0138.7±15.5146.7±10.1150.0±12.2161.7±8.4150.0±10.4152.3±18.01357.3±67.1     156.7±21.0143.3±12.7161.3±22.7155.3±19.2149.3±18.158.0±10.8156.0±14.4121.4±81.1   237.3±12.1256.7±14.0236.7±11.7255.3±17.5244.0±12.2253.3±17.2252.7±19.21356.7±91.6   260.7±16.2247.3±17.9277.3±10.3266.0±27.1254.7±25.0263.3±15.3259.3±13.0891.3±48.4
注：以上结果为3个平皿的均值±标准差。
2.2.2小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验：结果见表4，受试物三个剂量组的微核千分率与阴性对照组比较，经卡方检验，雌雄鼠的微核率均无显著性差异(P＞0.05)，而环磷酰胺阳性对照组则非常显著高于阴性对照组(P＜0.01)。结果未见受试物诱发小鼠骨髓嗜多染红细胞微核率增高。
表4  样品微核实验结果
性别     剂量(mg/kg.bw)   动物数(只) 检查PCE数(个)   微核数(个)   微核率(‰) PCE/RBC
雄     08331667333340(环磷酰胺)     55555     50005000500050005000     1291310102     2.41.82.62.020.4**     1.171.231.201.091.14
雌     08331667333340(环磷酰胺)     55555     50005000500050005000     14121115106     2.82.42.23.021.2**     1.201.191.161.221.13
注：与阴性对照组比较**P＜0.01
2.2.3小鼠精子畸形试验：受试物各剂量组与阴性对照组精子畸形率(表5)经秩合检验无显著性差异(P＞0.05)，而环磷酰胺阳性对照组则非常显著高于阴性对照组(P＜0.01)。精子畸形类型主要表现以不定形、无钩为主。上述结果表明受试物未诱发小鼠精子畸形率增高。
表5  样品小鼠精子畸形实验结果
    剂量(mg/kg.bw)   动物数(只) 受检精子数(个)                       精子畸形类型   精子畸形数(条) 精子畸形率(％)
    无钩   不定形   香蕉头 胖头 双尾   双头
    08331667333340(环磷酰胺)     55555     50005000500050005000     3225263482     67697265142     2528282672   00000   00000     00000     124122126125296     2.482.442.522.505.92**
注：与阴性对照组比较**P＜0.01
2.3大鼠30天喂养试验
试验期间动物健康状况良好，体重持续增长，每日喂饲后各组动物均未出现中毒症状，也未见动物死亡。
2.3.1样品对大鼠体重的影响
由表6可见，各剂量组雌雄大鼠每周体重与对照组之间无明显差异(P＞0.05)。
表6  样品对大鼠体重的影响
Figure A20061010531000161
性别     剂量(mg/kg.bw)   动物数(只)     始重(g)     第1周(g)      第2周(g)     第3周(g)     第4周(g)
雄     083316673333     10101010   69.8±4.3769.2±3.6868.2±5.2069.4±2.99   107.2±7.50106.6±6.54103.4±8.95104.2±6.43   141.0±10.83140.0±9.48134.6±13.29135.4±10.15   172.2±14.22171.0±12.44163.2±18.21164.0±14.36   199.2±17.77197.6±15.71188.0±23.70188.2±19.52
雌     083316673333     10101010   67.8±5.3766.8±4.3467.6±4.8866.8±5.59   97.8±8.2896.0±7.1396.4±7.1294.8±10.00   129.0±11.40126.0±10.58125.6±10.06123.4±14.67   155.4±14.57151.2±14.16149.8±14.88147.0±20.48   175.8±16.07174.0±17.69170.0±20.42166.6±25.56
2.3.2样品对大鼠周进食量的影响
由表7可见，三个剂量组雌雄大鼠的每周进食量与对照组比较，经统计学检验，差异无显著性(P＞0.05)。
表7样品对大鼠周进食量的影响
Figure A20061010531000162
性别     剂量(mg/kg.bw)   第一周摄食量(g)   第二周摄食量(g)   第三周摄食量(g)   第四周摄食量(g)
雄     083316673333   85.4±3.285.8±5.385.1±7.083.5±8.2   111.5±5.4110.2±9.6107.2±10.9108.1±11.5   144.8±17.4140.7±13.6140.7±10.1139.1±14.7   152.0±18.3152.0±14.3153.8±13.3144.5±11.1
雌     083316673333   77.2±3.974.5±8.374.8±7.269.7±6.1   102.7±9.2100.5±10.399.4±8.591.2±10.2   132.4±9.0128.4±5.9128.6±10.5124.7±8.4   136.4±7.2145.1±10.3133.7±13.2139.6±11.0
2.3.3样品对大鼠食物利用率的影响
结果见表8，各剂量组的每周食物利用率以及总食物利用率与对照组之间无明显差异(P＞0.05)。
表8  样品对大鼠食物利用率的影响
Figure A20061010531000163
性别 剂量(mg/kg.bw) 动物数(只) 总增重(g) 总进食量(g)     第1周食物利用率(％) 第2周食物利用率(％)   第3周食物利用率(％)   第4周食物利用率(％)   总食物利用率(％)
雄     083316673333     10101010   129.4±14.05128.4±12.89119.8±19.10118.8±17.24     493.7±39.92488.7±36.16486.8±37.20475.2±40.64     43.85±4.4843.63±3.1141.95±8.6142.17±7.06 30.35±3.0630.91±4.3529.68±6.9729.35±6.20   21.84±3.7321.92±3.1520.58±4.6920.91±4.68   18.01±3.3817.62±2.7616.37±4.5316.93±4.45   26.37±3.5826.38±3.0924.93±5.5125.29±5.01
雌     0183316673333     10101010   108.0±11.27101.0±18.1298.04±11.4396.6±16.92     448.7±25.91448.5±30.67436.5±33.12425.2±31.50     38.99±4.9039.69±6.2738.77±5.5140.62±8.89 30.79±5.7330.03±3.8629.51±3.8431.65±6.22   20.09±3.4419.63±2.7518.85±4.0119.00±5.07   15.04±3.2515.78±2.6515.06±4.0214.09±4.37   24.22±3.5923.97±3.1623.47±3.7523.57±5.14
2.3.4血液学检查结果
由表9可见，三个剂量组雌雄大鼠的血红蛋白含量、红细胞计数、白细胞计数以及分类与对照组之间无显著性差异(P＞0.05)。
表9  样品对大鼠血液学检查的影响
性别     剂量(mg/kg.bw)   动物数(只)   血红蛋白(g/L)   红细胞计数(×1012/L)     白细胞计数(×109/L) 中性(％)     淋巴(％)     其它(％)
雄     083316673333     10101010   137.7±11.9142.3±13.1138.4±11.4140.2±10.7   7.92±0.708.13±0.767.88±0.778.06±0.74     13.96±2.9614.19±2.8013.99±2.6314.36±2.77 16.8±1.516.8±4.117.2±2.716.5±2.8     79.9±2.380.0±3.979.7±2.380.6±2.8     3.3±1.53.2±1.33.1±1.22.9±1.3
雌     083316673333     10101010   137.2±12.4141.2±11.5141.6±13.0139.1±13.8   7.94±0.728.09±0.738.26±0.677.87±0.76     13.89±2.0813.93±2.5814.07±2.5913.90±2.96 16.4±3.816.4±2.817.1±3.016.9±3.5     80.4±3.180.7±3.579.9±2.479.7±2.5     3.2±1.22.9±1.23.0±1.23.4±1.3
2.3.5末期生化检验结果
由表10可见，各剂量组雌雄大鼠未期血生化检验结果，九项指标与对照组之间均无显著性差异(P＞0.05)。
表10  样品大鼠末期生化检验结果
Figure A20061010531000171
  性别     剂量(mg/kg.bw)   动物数(只)   谷丙转氨酶(U/L)   谷草转氨酶(U/L)   尿素氮(mmol/L)   肌酐(μmol/L)     胆固醇(mmol/L)   甘油三酯(mmol/L)   血糖(mmol/L) 总蛋白(g/L) 血蛋白(g/L)
雄     083316673333   10101010   39.5±7.6437.2±10.4834.2±9.5337.7±9.96   140.3±12.13143.5±13.33135.6±14.36143.5±13.60   6.66±0.596.54±0.686.70±0.906.53±1.07   66.50±7.8965.37±7.4769.76±9.4367.38±8.89     1.82±0.271.76±0.331.81±0.311.87±0.38   0.79±0.120.71±0.050.86±0.190.82±0.15   5.2±0.585.55±0.655.50±0.735.23±0.72 68.13±5.2569.88±7.5169.43±7.1969.39±7.40 35.17±4.3234.43±4.0634.84±3.8434.01±3.31
雌     083316673333   10101010   37.2±9.1635.9±9.0333.4±10.4541.1±9.17   137.5±11.68134.4±8.42141.1±14.97133.2±16.24   6.71±0.597.03±0.776.46±0.876.74±1.31   67.38±7.9665.50±8.7769.39±8.0268.01±9.14     1.89±0.231.87±0.291.91±0.501.80±0.70   0.81±0.130.94±0.190.85±0.140.93±0.13   5.69±0.545.35±0.695.37±0.715.41±0.54 67.97±5.4070.53±6.7669.11±5.6669.88±6.03 34.73±2.2834.17±2.7535.16±3.7135.29±2.92
2.3.6样品对大鼠脏体比的影响
结果间表11，各剂量组雌雄大鼠的肝体比、脾体比、肾体比以及雄鼠的睾丸体比值与对照组之间无明显差异(P＞0.05)。
表11  样品对大鼠主要脏体比的影响
Figure A20061010531000172
  性别     剂量(mg/kg.bw)     动物数(只)     肝脏湿重(g) 肝体比(％)     脾脏湿重     脾体比(％)   肾脏湿重(g)     肾体比(％)  睾丸湿重(g)     睾体比(％)
雄     083316673333     10101010     7.29±0.837.23±1.037.08±0.997.14±1.09 3.66±0.253.65±0.343.77±0.323.80±0.45     0.70±0.100.71±0.120.71±0.110.69±0.08     0.35±0.050.36±0.040.38±0.060.37±0.04   1.36±0.141.37±0.081.36±0.141.37±0.10     0.69±0.110.70±0.060.73±0.070.73±0.05  2.03±0.122.06±0.091.99±0.162.01±0.12     1.02±0.051.04±0.051.07±0.091.08±0.12
雌     083316673333     10101010     6.42±0.746.36±1.016.36±1.186.16±0.82 3.68±0.523.65±0.433.72±0.353.73±0.44     0.62±0.090.62±0.060.65±0.080.62±0.12     0.35±0.040.36±0.050.38±0.030.38±0.07   1.22±0.071.27±0.231.22±0.071.19±0.11     0.70±0.040.74±0.150.72±0.080.72±0.09
2.3.7组织病理学检查
试验结束处死动物后进行大体解剖，肉眼未见内脏有异常改变，组织病理学检查结果显示：对照组有1例肝轴管区炎细胞轻度浸润，1例肺间质炎细胞浸润。受试物高剂量组有2例肝轴管区炎细胞轻度浸润，1例肺间质炎细胞浸润，其余受检组织形态结构正常。以上所发现均未动物自发病变，未见中毒性损伤改变。(见表12-19)。
表12样品30天喂养试验肝脏组织学观察
结构     空白对照组(N＝20)     样品高剂量组(N＝20)
    被膜改变(例)肝小叶坏死(例)肝小叶出血(例)肝小叶水样变(例)肝小叶炎症细胞浸润(例)肝轴管区炎症细胞浸润(例)     000001     000002
表13  样品30天喂养试验肺组织学观察
结构   空白对照组(N＝20)   样品高剂量组(N＝20)
    肺膜改变(例)肺泡上皮变性(例)肺出血(例)肺泡间质炎细胞浸润、间质细胞增生(例)   0001   0001
表14  样品30天喂养试验肾组织学观察
    结构     空白对照组(N＝20)     样品高剂量组(N＝20)
    被膜改变(例)肾小球细胞变性、炎细胞浸润(例)肾小管近曲管、近直管变性(例)肾小管近曲管、近直管坏死(例)肾小管远曲管、远直管变性(例)肾小管远曲管、远直管坏死(例)肾间质炎细胞浸润(例)     0000000     0000000
表15  样品30天喂养试验脾组织学观察
结构     空白对照组(N＝10)     样品高剂量组(N＝10)
    红髓扩张(例)白髓萎缩(例)髓外造血灶(例)炎细胞浸润(例)色素沉着(例)其它(例)     000000     000000
表16  样品30天喂养试验睾丸组织学观察
    结构     空白对照组(N＝10)     样品高剂量组(N＝10)
    生精上皮细胞减少(例)生精上皮细胞变性(例)生精上皮细胞坏死(例)多核巨细胞(例)间质出血(例)间质水肿(例)     000000     000000
表17  样品30天喂养试验卵巢组织学观察
结构     空白对照组(N＝10)   样品高剂量组(N＝10)
    各级卵泡数目异常(例)各级卵泡数目变性(例)各级卵泡数目坏死(例)炎细胞浸润(例)     0000   0000
表18  样品30天喂养试验胃组织学观察
基本病变     空白对照组(N＝20)     样品高剂量组(N＝20)
    粘膜上皮变性、坏死(例)粘膜上皮肠化(例)固有层炎细胞浸润(例)粘膜下层充血水肿(例)肌层及外膜炎细胞浸润(例)     00000     00000
表19  样品30天喂养试验空肠组织学观察
结构     空白对照组(N＝20)     样品高剂量组(N＝20)
    粘膜上皮变性、坏死(例)绒毛轴心炎细胞浸润(例)粘膜下层充血水肿(例)肌层及外膜炎细胞浸润(例)     0000     0000
3.小结
样品大、小鼠急性毒性试验结果MTD＞10000mg/kg.bw(涵盖人体推荐摄入量100倍)，按急性毒性分级属实际无毒级，小鼠骨髓细胞微核试验结果为阴性；小鼠精子畸形试验结果未见诱导精子畸形率增高；Ames试验结果表明受试物未诱导四种菌株回变菌落数增加。30天喂养试验可见动物生长发育良好，对动物体重、每周进食量、每周食物利用率和总食物利用率以及脏体比值无明显影响；血液常规检测、血生化指标检测结果与阴性对照组之间无显著性差异，组织病理学检查，除动物自发病变外，未见中毒性损伤改变。
改善营养性贫血功能动物试验
1.材料和方法
1.1试验动物、饲料及动物房条件：由河南医科大学实验动物中心提供的70只雄性wistar大鼠，体重60～90g，合格证号为豫医动字第4104034清洁级；低铁饲料由中国疾病预防控制中心营养与食品安全所提供，按《保健食品检验与评价技术规范》(2003年版)中的低铁饲料配方二进行配制；动物房为SPF级，使用许可证号为川实动管043，温度20-25℃，相对湿度40-70％。
1.2剂量选择：实验设167mg/kg.bw、500mg/kg.bw、1000mg/kg.bw三个剂量组(分别相当于人体每日推荐量的5倍、15倍、30倍)，分别称量4.18g、12.50g、25.00g受试物，然后再各自加蒸馏水至250ml混匀，用完再配。另设低铁模型对照组，每天按10ml/kg.bw经口灌胃一次，连续灌胃30天。
1.3主要仪器与试剂：测定血红蛋白主要采用Micor半自动生化测定仪和氰化高铁血红蛋白稀释液，测定红细胞内游离高原卟啉含量主要采用日本岛津公司生产的RF-5000型荧光分光光度仪和上海伯奥生物科技有限公司生产的肝素钠和美国SIGMA公司生产的原卟啉等；称动物体重用电子天平。
1.4试验方法
1.4.1建立缺铁性大鼠贫血模型：将70只初断乳雄性wistar大鼠在实验环境下适应5天后，开始喂低铁饲料和饮用蒸馏水，18天后称动物体重，采尾血测定血红蛋白(Hb)含量，选择Hb＜100g/L的大鼠作为实验性缺铁性贫血模型动物。
1.4.2恢复试验：根据贫血模型大鼠的Hb水平和体重将动物随机分成低铁模型对照组和三个实验组，各组动物继续在喂饲低铁饲料的同时，低铁模型对照组给予相应溶剂(蒸馏水)，三个实验组分别给予不同剂量的受试物，每天经口给予一次，连续给予30天后称动物体重，采尾血测定血红蛋白含量和红细胞内游离原卟啉含量。
1.4.3动物体重测定：分别于实验初期、中期和结束时用电子天平称量动物体重。
1.4.4红细胞内游离原卟啉含量测定：实验结束时采20μl尾血按照《保健食品检验与评价技术规范》(2003年版)中的红细胞内游离原卟啉含量测定方法，使用RF-5000型荧光分光光度仪测定荧光强度，根据荧光强度计算红细胞内游离原卟啉的含量。
1.4.5血红蛋白测定：取20μl全血加3.0ml氰化高铁血红蛋白稀释液充分混匀后，再取20μl溶液用Micro半自动生化测定仪测定血红蛋白含量。
1.5试验数据统计：采用SPSS 10.0 for Windows软件队试验数据进行方差分析，先按方差分析程序进行齐性检验，方差齐，计算F值；经数据转换后方差仍不齐者进行秩和检验。
1.6结果判定：受试样品组与低铁对照组比较，血红蛋白升高有显著性差异且试验前后的平均升高幅度达到10g/L以上，受试样品红细胞内游离原卟啉与低铁对照组比较，降低有显著性差异，即可判定该受试样品改善营养性贫血功能动物试验结果阳性。
2结果
2.1样品对小鼠体重的影响
三个剂量组及低铁对照组的初始体重经方差齐性检验，(P＞0.05)，说明方差齐，且方差分析结果(P＞0.05)，说明各组动物之间的初始体重是均衡的；三个剂量组的中期体重和结束体重与低铁模型对照组比较，可见高剂量组的中期体重及低、高剂量组的结束体重明显增加(P＜0.01、P＜0.05、P＜0.01)(见表1)。
表1样品对大鼠体重的影响
Figure A20061010531000221
    剂量组(mg/kg.bw) 动物数(只) 初始体重(g) 中期体重(g) 结束体重(g)
    01675001000   10101010   162.80±19.41173.90±29.67173.10±21.98174.90±20.00   238.30±20.71265.40±34.86239.10±27.61309.10±41.67**   270.80±19.98315.20±34.44*295.40±36.30323.40±45.25**
注：与低铁模型对照组比较*P＜0.05、**P＜0.01。
2.2样品对红细胞内游离原卟啉的影响
三个剂量组的红细胞内游离原卟啉含量与低铁模型对照组比较，经方差分析，降低有显著性差异(P＜0.01)(见表2)。
表2样品对红细胞内游离原卟啉的影响
    剂量组(mg/kg.bw)     动物数(只)     红细胞内游离原卟啉(μg/L全血)
    01675001000     10101010     496.21±76.84372.67±42.35**363.58±49.49**352.85±52.93**
注：与低铁模型对照组比较**P＜0.01。
2.3样品对大鼠血红蛋白含量的影响
表5样品对血红蛋白的影响
Figure A20061010531000223
    剂量组(mg/kg.bw)   动物数(只)   血红蛋白(g/L)
  试验前 试验后   升高值
    03336671000   10101010   82.87±11.6884.79±15.0483.42±9.5684.52±12.36 76.15±18.54113.37±5.79**114.22±6.98**112.44±8.84**   -6.72±11.5828.58±14.98**30.80±9.39**27.92±11.14**
注：与低铁模型对照组比较**P＜0.01。
3小结
样品连续30天经口灌胃给予贫血模型动物后，可见高剂量组大鼠的中期体重及低、高剂量组的结束体重明显增加；各剂量组红细胞内游离原卟啉含量与低铁模型对照组相比较，经方差分析，降低有显著性差异，试验结果未阳性；三个剂量组的血红蛋白含量显著升高，且试验前后的升高值均大于10g/L，试验结果为阳性。由此可见，样品对动物具有改善营养性贫血功能。
改善营养性贫血功能人体试食试验
1.对象和方法
1.1受试对象：受试着为小细胞低色素贫血且有明确的缺铁原因和临床表现的18～65岁志愿者。
1.2纳入者标准血红蛋白＜120g/L者
1.3排除者标准：
1.3.1合并有心脑血管、消化道、肝、肾等严重疾病及精神病患者。
1.3.2过敏体质或对该受试样品过敏者。
1.3.3再生障碍性贫血、溶血性贫血等严重贫血者。
1.3.4短期内服用与受试功能有关的物品，影响到结果的判断者。
1.3.5未按规定服用受试样品，资料不全影响功效或安全性判断者。
1.4实验设计分组及试食方法：采用自身和组间两种对照设计。120例贫血试食者，随即分为二组，每组各60例，试食组食用样品，每日2次，每次2片，对照组为空白对照，不改变原来的饮食习惯。正常饮食，受试时间30天。
1.5仪器与试剂：F-820型血球计数仪，MIDIRON尿十项分析仪(德国产)，RF-510型荧光分光光度计(日本岛津公司产)，RA1000型全自动生化分析仪(美国产)。
2.观察指标：
2.1安全性指标：
2.1.1一般状况：包括精神、睡眠、饮食、大小便、血压等。
2.1.2血尿便常规检查：红细胞计数、白细胞计数、尿常规、便常规检查。
2.1.3生化指标测定：血清白蛋白ALB、总蛋白TP、心肝肾功能(谷草转氨酶AST、谷丙转氨酶ALT、尿素UREA、肌苷CRE)，血糖GLU、血脂(总胆固醇TC、甘油三酯TG)。
2.1.4腹部B超、心电图、X线胸部透视。
2.1.5膳食调查：于试验开始前、结束前进行三天的询问法膳食调查，观察饮食因素对试验结果的影响。
2.1.6不良反应观察
2.2功效性指标：
2.2.1症状观察：详细询问病史，观察主要临床症状：食欲不振、体倦、眩晕、心慌气短等。按症状轻重(重症3分、中度2分、轻症1分)在试食前后统计积分值，并就其主要症状改善(每一症状改善2分显效，改善1分为有效)，观测症状改善率。
2.2.2功效性指标：红细胞计数、血红蛋白、红细胞压积、红细胞内游离原卟啉、血清铁蛋白。
3.数据处理和结果判定
3.1数据处理：用统计软件STATE6.0计算分析数据。凡自身对照资料采用配对t检验，两组均数比较采用成组t检验，后者需进行方差齐性检验，对非正态分布或方差不齐的数据进行适当的变量转换，待满足正态方差齐性后，用转换的数据进行t检验；若转换数据仍不能满足正态方差齐性要求，改用t’检验或秩和检验；但变异系数太大如(CV＞50％)的资料应用秩和检验。功效指标用X2检验。
3.2功效判定：试验前后自身比较和试验后组间比较，血红蛋白指标差异有显著性；同时，试食组自身前后比较，血红蛋白平均升高幅度≥10g/L，血清铁蛋白、红细胞内游离原卟啉、血清运铁蛋白的饱和度两项指标中一项指标阳性，可判定该受试物具有改善营养性贫血的功能。
4.结果：
4.1一般资料：共观察100例，样品组50例，男性3例，女性47例，年龄最小23岁，年龄最大63岁，平均44.48岁，对照组50例，均为女性，年龄最小24岁，最大65岁，平均44.86岁。试食前后试食者精神、睡眠、饮食、大小便、血压等无明显变化。
4.2两组观察前一般情况比较：
表1观察前一般情况比较
Figure A20061010531000251
分组   例数(例)   年龄(岁)    性别  血红蛋白(g/L)
 男  女
试食组对照组   5050   44.48±9.8744.86±9.45  30  4750  101.80±12.77100.14±11.03
由表1可见，两组试食前各项指标无明显差异，具有可比性。
表2试食前后心率变化  单位：次/分
分  组   例  数(例)            心    率
  试食前  试食后
试食组对照组   5050   71.12±5.3672.68±7.20  70.96±5.2772.84±7.23
表3试食前后血压变化单位：mmHg
分  组 例  数(例)           收缩压              舒张压
 试食前 试食后     试食前     试食后
试食组对照组 5050  116.70±10.77118.08±10.49 116.96±10.74117.68±10.55     74.26±6.7374.96±7.18     74.50±6.6474.72±7.41
4.3改善贫血功效：
4.3.1服药前后Hb的变化情况：
表4两组试食前后Hb的变化
Figure A20061010531000252
分组                     血红蛋白(g/L)
试食前   试食后  差值
试食组对照组 101.80±12.77100.14±11.03   112.38±16.40100.80±9.78  10.58±12.39***0.66±4.89##
自身对照***P＜0.001  组间对照##P＜0.01
治疗一个月后，样品组血红蛋白上升10.58g/L，对照组血红蛋白上升0.66g/L，两组比较有显著差异。
4.3.2服药前后FEP的变化情况：
表5两组试食前后血卟啉的变化
Figure A20061010531000261
分组                 血卟啉(ug/g)
 试食前   试食后 差值
试食组对照组  8.84±4.488.31±2.34   7.76±4.118.40±2.41 -1.07±1.90***-0.09±0.57##
自身对照***P＜0.001  组间对照##P＜0.01
4.3.3试食前后血清铁蛋白的变化清况：
表6试食前后血清铁蛋白的变化
Figure A20061010531000262
分组              血洁铁蛋白(ug/L)
 试食前   试食后   差值
试食组对照组  11.40±1.6411.76±1.81   13.18±2.3611.79±1.68   1.78±1.94***0.03±0.55##
自身对照***P＜0.001  组间对照##P＜0.01
样品组及对照组试食后血清铁蛋白组间差异显著。
4.3.4试食前后HCT的变化情况
表7试食前后HCT的变化
Figure A20061010531000263
分组                      HCT(％)
  试食前   试食后   差值
试食组对照组   31.32±3.5130.82±2.86   33.35±4.3830.94±2.50   2.03±3.91**0.12±1.12##
自身对照**P＜0.01  组间对照##P＜0.01
样品组及对照组试食后HCT组间差异显著。
4.3.5试食前后RBC的变化情况
表8试食前后RBC的变化
分组                    RBC(1012/L)
 试食前   试食后   差值
试食组对照组  4.03±0.513.87±0.55   4.28±0.553.88±0.53   0.25±0.37**0.01±0.13##
自身对照**P＜0.01  组间对照##P＜0.01
4.3.5改善贫血功效比较：
表9改善贫血功效统计
       分组     有效     无效 总有效率(％)
试食组对照组 例数功效率(％)例数功效率(％)     3060.0036.00     2040.004794.00 60.006.00##
X2检验  组间对照##P＜0.05
4.4症状改善情况：
表10主要症状改善情况
症状     例数     显效     有效     无效     改善率(％)
食欲不振体倦眩晕心慌气短     26(25)39(31)37(27)30(23)     2(0)2(0)2(0)6(0)     12(6)21(7)19(8)14(5)     12(19)16(24)16(19)10(18)     53.85(24.00)58.97(22.58)56.76(29.63)66.67(21.74)
()对照组
在各主要症状改善方面，样品组改善率高于对照组。
4.5安全性指标检测
表11安全性指标检测
           组别             试食组             对照组
项目     例数  试食前   试食后   试食前   试食后
TP(g/L)ALB(g/L)ALT(u/L)AST(u/L)GLU(mmol/L)TC(mmol/L)TG(mmol/L)UREA(mmol/L)CRE(umol/L)RBC(×1012/L)WBC(×109/L)尿常规便常规     50505050505050505050505050  73.50±4.4242.89±3.1213.44±7.8420.30±7.594.66±0.914.57±0.911.19±0.654.61±1.1273.59±12.684.03±0.515.44±1.31正常正常   73.79±3.0143.30±3.1313.16±7.4519.68±6.634.61±0.964.69±0.931.26±0.684.81±1.2273.83±11.514.28±0.555.68±1.20正常正常   73.35±3.7943.75±2.5815.04±5.7818.38±5.314.62±0.584.76±0.641.27±0.404.64±0.8070.86±9.663.87±0.555.51±1.29正常正常   73.64±3.6044.22±2.5013.88±6.1218.98±5.744.58±0.544.72±0.631.31±0.444.61±0.8570.15±9.293.88±0.535.68±1.17正常正常
试食前后各项指标均在正常范围。
4.6腹部B超、心电图、X线胸部透视，试食前后血压均在正常范围。
4.7膳食调查
表12膳食调查表(千卡/天)
    分组     例数  试食前3天  结束前3大
    试食组对照组     5050  1977.18±1176.231970.94±180.56  1982.28±168.301972.30±174.47
由表12可见，两组试食前后及组间进食量无明显差异，具有可比性。
4.8病例脱失率：试食组与对照组入选病例各为60例，其中试食组试食结束时有5例未按规定服用受试物、5例未在规定时间按时复查，对照组有7例未在规定时间按时复查，3例中途退出。试食组与对照组各有10例符合受试者排除标准，病例脱失率为16.67％。
5.总结：
5.1样品有较为明显的升高血红蛋白，降低FEP的功效，试食后血红蛋白升高10.58g/L，红细胞上升0.25×1012/L，血卟啉平均下降1.07ug/g，血清铁蛋白平均升高年高1.78ug/L，其中有效30例，总有效率60.00％；对照组有效3例，总有效率6.00％，两组比较有显著差异，说明样品对改善营养性贫血有一定的功效。
5.2样品对贫血试食者的心慌气短、食欲不振、体倦、眩晕等主要症状，又改善作用，膳食对试食者无明显影响。
5.3试食样品前后，白细胞、血清总蛋白、白蛋白、谷丙转氨酶、谷草转氨酶、肌苷、尿素、血、尿、便常规及心率、血压等在正常范围，说弥功能本品对试食者健康无不良影响。
5.4膳食调查显示试食前后及两组间膳食比较均无显著差异，可排除饮食因素对试验结果的影响。
5.5样品在试食过程中未观察到过敏及其它不良反应。
祛黄褐斑功能人体试食试验
1.对象和方法
1.1受试对象：按自愿原则选择18～65岁，有黄褐斑者。
1.1.1诊断标准：面部淡褐色至深褐色，界限清楚地斑片，通常对称性分布，无炎症表现及鳞屑，无痛痒等自觉症状。有一定的季节性，夏重冬轻。
1.1.2纳入者标准：凡生有黄褐斑的自愿受试者，经体检合格均可进行试食观察。
1.1.3排除者标准：
1.1.3.1年龄在18岁以下或65岁以上者，妊娠或哺乳期妇女，过敏体质及对本品过敏者。
1.1.3.2合并有心肝肾和造血系统等严重疾病及内分泌疾病，精神病患者。
1.1.3.3短期内服用或使用与受试功能有关的物品，影响到结果的判断者。
1.1.3.4未按规定服用受试样品，无法判定功效或资料不全影响功效或
1.2试验设计及分组要求：120例黄褐斑受试者，随机分为试食组与空白对照组，采用自身和组间两种对照形式。
1.3服用方法及时间：试食组服用样品，每日2次，每次2片，受试者在试验期间停止服用有关祛黄褐斑的药物、保健品及化妆品。不改变原来饮食习惯，正常饮食。
1.4仪器与试剂：MEK-6318K型血球计数仪(日本产)，MIDIRON尿十项分析仪(德国产)，RA1000型全自动生化分析仪(美国产)，中国科学院地理研究所设计研制，测绘出版社1992年出版《实用标准色卡》(第一版)，生化试剂盒全部由中生公司提供。
2.观察指标：试验前后各检查一次。
2.1安全性指标：
2.1.1一般状况：精神、睡眠、饮食、大小便、心率、血压等。
2.1.2血液、尿常规、便常规检查：红细胞计数、血红蛋白、白细胞计数、尿常规、便常规检查。
2.1.3生化指标测定：血清白蛋白ALB、总蛋白TP、心肝肾功能(谷草转氨酶AST、谷丙转氨酶ALT、尿素UREA、肌苷CRE)，血糖GLU、血脂(总胆固醇TC、甘油三酯TG)。
2.1.4腹部B超、心电图、X线胸部透视。(试食前检查一次)
2.1.5过敏及不良反应观察
2.2功效性指标：
2.2.1症状观察：详细询问病史，了解受试者饮食情况，观察主要临床症状：疲劳感、烦躁、睡眠等。按症状轻重(重症3分、中度2分、轻症1分)在试食前后统计积分值，并就其主要症状改善(每一症状改善2分显效，改善1分为有效)，计算改善率。
2.2.2头面部黄褐斑检测：
2.2.2.1面积大小改变：用标尺测量受试前后统一黄褐斑的长径和宽径，计算面积(cm2)。
2.2.2.2颜色深浅变化：按照中国科学院地理研究所设计研制，测绘出版社1992年出版的《实用标准色卡》(第一版)中的棕色(Y+M+BK即黄+品红+黑的叠色)色卡为黄褐斑颜色深浅的判断标准：I度(15、20、5)，II度(30、40、10)，III度(40、60、15)。
3.数据处理和结果判定
3.1数据处理：用统计软件STATE6.0计算分析数据。凡自身对照资料采用配对t检验，两组均数比较采用成组t检验，后者需进行方差齐性检验，对非正态分布或方差不齐的数据进行适当的变量转换，待满足正态方差齐性后，用转换的数据进行t检验；若转换数据仍不能满足正态方差齐性要求，改用t’检验或秩和检验；但变异系数太大如(CV＞50％)的资料应用秩和检验。功效指标用X2检验。
3.2功效判定：
有效：黄褐斑颜色下降I度，或面积缩小≥10％，不产生新的黄褐斑。试食组自身前后对照与对照组组间对照差别均有显著性。
无效：黄褐斑面积及颜色无明显变化。
4.结果：
4.1一般状况：共观察黄褐斑受试者100例，精神、睡眠、饮食、大小便均属正常。试食组男性1例，女性49例，年龄最小19岁，年龄最大63岁，平均44.74±10.03岁，平均病程5.58±4.16年。对照组均为女性，年龄最小29岁，最大59岁，平均44.86±7.76岁，平均病程5.76±4.38年。
表1观察前一般情况比较
分组     例数(例)  年龄(岁)  性  别   病程(年)
 男   女
试食组对照组     5050  44.74±10.0344.86±7.76  10   4950   5.58±4.165.76±4.38
P＞0.05。
表2试食前后心率变化  单位：次/分
分  组   例  数(例)          心    率
 试食前  试食后
试食组对照组   5050  70.26±5.4471.00±6.04  70.12±4.4471.18±5.49
表3试食前后血压变化单位：mmHg
分组 例  数(例)            收缩压            舒张压
试食前   试食后   试食前     试食后
试食组对照组 5050 106.20±13.87106.56±13.44   106.10±13.93106.10±13.03   70.70±6.6269.80±6.62     70.60±6.6769.20±6.17
4.2黄褐斑颜色深浅变化：
表4黄褐斑颜色深浅变化
  色卡(度)   例数   试食前   试食后   差值
  试食组对照组   5050   1.92±0.491.95±0.42   1.65±0.411.94±0.41   1.94±0.37**#-0.01±0.07
自身比较**P＜0.01    组间比较#P＜0.05
4.3黄褐斑面积大小变化：
表5黄褐斑面积大小变化
    黄褐斑面积(cm2)     例数  试食前  试食后 差值
    试食组对照组     5050  62.57±30.3756.72±26.88  55.05±27.8856.46±26.92 -7.52±9.88**#-0.26±1.17
自身比较**P＜0.01    组间比较#P＜0.05
4.4功效评定：
表6功效评定
    例数(白分比)     有效   无效 总有效率
    试食组对照组     31(62.00％)2(4.00％)   19(38.00％)48(96.00％) 62.00％#4.00％
组间比较#P＜0.05
4.5症状改善情况：
表7主要症状改善情况
  症状     例数   显效   有效   无效 总有效率(％)
  疲劳感烦躁睡眠     29(27)29(25)20(23)   1(0)1(0)1(0)   14(7)13(7)7(6)   14(20)15(18)12(17) 51.72(25.93)48.28(28.00)40.00(26.09)
()对照组
4.6症状积分变化：
表8症状积分变化
  组别     例数     试食前     试食中     试食后
  试食组对照组     5050     4.20±3.054.06±2.12     3.70±2.74**4.00±2.19     3.40±2.48**3.96±2.32
**P＜0.01，试食中期、试食后期与试食前期积分有显著差异。
4.9安全性指标检测
表9安全性指标检测
             组别             试食组                  对照组
  项  目     例数   试食前     试食后     试食前     试食后
  TP(g/L)ALB(g/L)ALT(u/L)AST(u/L)GLU(mmol/L)TC(mmo1/L)TG(mmol/L)UREA(mmol/L)CRE(umol/L)HGB(g/L)RBC(×1012/L)WBC(×109/L)尿常规便常规     5050505050505050505050505050   73.57±4.4444.66±3.9018.76±10.9920.20±8.094.77±0.715.16±0.951.28±0.674.67±1.3877.22±20.10129.04±13.934.39±0.365.39±1.53正常正常     73.22±3.5043.68±2.8919.48±10.3019.46±6.644.73±0.725.09±0.891.25±0.484.77±1.5378.91±19.42129.88±14.324.44±0.395.43±1.22正常正常     74.23±2.2945.02±3.0820.70±7.8018.82±6.644.93±0.775.35±0.641.41±0.594.90±0.6277.43±10.65132.62±8.294.40±0.275.78±1.11正常正常     74.37±1.8644.68±3.172L 16±6.8819.26±5.515.06±0.265..36±0.541.44±0.494.87±0.5178.03±9.84131.72±6.694.40±0.215.71±0.92正常正常
试食前后各项指标均在正常范围。
4.8腹部B超、心电图、X线胸部透视均在正常范围。
4.9病例脱失率：试食组与对照组入选病例各为60例，其中试食组试食结束时有5例未按规定服用受试物、5例未在规定时间按时复查，对照组有3例未按规定服用受试物、7例未在规定时间按时复查。试食组与对照组各有10例符合受试者排除标准，有效病例每组50例，病例脱失率为16.67％。
5.结论：
5.1 100例黄褐斑受试者随机分为试食组与对照组，试食组黄褐斑面积平均缩小7.52±9.88cm2(P＜0.01)，颜色变浅，色卡平均降低0.27±0.37度(P＜0.01)，有效31例，总有效率62.00％，对照组黄褐斑面积平均缩小0.26±1.17cm2，颜色变浅，色卡平均降低0.01±0.07度，有效2例，总有效率4.00％，两组比较有显著性差异，说明样品有祛黄褐斑的作用。
5.2样品对黄褐斑受试者的疲劳感、烦躁、睡眠等症状有改善作用。5.3试食样品前后，血常规、尿常规、便常规及生化指标均在正常范围，说明本品对受试者身体健康无不良影响。
5.4试食样品者，试食前后心率、血压都在正常范围。
5.5试食样品后，未见过敏及其它不良反应。
功效成分检验方法：
A1钙：按照GB/T 5009.92-2003《食品中钙的测定》方法测定
A2总黄酮的测定方法
A2.1仪器
分光光度计。
恒温水浴箱。
真空泵等。
A2.2试剂
A2.2.1芦丁标准品  纯度≥98.0％。
A2.2.2芦丁标准溶液：准确称取经105℃干燥至恒重的芦丁标准品5.0mg，加甲醇溶解并定容至100mL，配成50g/mL的芦丁标准溶液。
A2.2.3聚酰胺粉
A2.2.4乙醇：分析纯
A2.2.5甲醇：分析纯
A2.3分析步骤
A2.3.1试样处理：
称取一定量的试样，加乙醇定容至25mL，摇均后，超声提取20min，放置，吸取上清液1.0mL，于蒸发皿中，加1g聚酰胺粉吸附，于水浴上挥去乙醇，然后转入层析柱。先用20mL苯洗，苯液弃去，然后用甲醇洗脱黄酮，定容至25mL。此液于波长360nm测定吸收值。同时以芦丁为标准品，测定标准曲线，求回归方程，计算试样中总黄酮的含量。
A2.3.2芦丁标准曲线：
吸取芦丁标准溶液：0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0mL于10mL比色管中，加甲醇至刻度，摇匀，于波长360nm比色。求回归方程，计算试样中总黄酮的含量。
A2.4计算和结果表示：
X = A × V 2 × 100 V 1 × M × 1000
式中：
X——试样中总黄酮含量，mg/100g；
A——由标准曲线算得被测液中黄酮量，g；
M——试样质量，g；
V1——测定用试样体积，mL；
V2——试样定容总体积，mL；
计算时单位需统一，单位结果精确至小数后两位
注：本检测方法采用《保健食品检验与评价技术规范》(2003年版)中总黄酮的测定方法测定。
A3粗多糖(以葡聚糖计)的测定方法：
A3.1试剂
本方法所用试剂除特殊注明外，均为分析纯；所用水为去离子水或同等纯度蒸馏水。
A3.1.1乙醇溶液(800ml/L)：20ml水中加入无水乙醇80ml，混匀。
A3.1.2氢氧化钠溶液(100g/L)：称取100g氢氧化钠，加水溶解并稀释至1L，加入固体无水硫酸钠至饱和，备用。
A3.1.3铜储备液：称取3.0gCuSO45H2O，30.0g柠檬酸钠，加水溶解并稀释1L，混匀、备用。
A3.1.4铜试剂溶液：取铜储备液50ml，加水50ml，混匀后加入固体无水硫酸钠12.5g并使其溶解。临用新配。
A3.1.5洗涤剂：取水50ml，加入10ml铜试剂溶液，10ml氢氧化钠溶液，混匀。
A3.1.6硫酸溶液(10ml/L)：取100ml浓硫酸加入到800ml左右水中，混匀，冷却后稀释至1L。
A3.1.7苯酚溶液(50g/L)：称取精制苯酚5.0g，加水溶解并稀释至100ml，混匀。溶液置冰箱中可保存一个月。
A3.1.8葡聚糖标准储备溶液：精密称取分子量500000、干燥至恒重的葡聚糖标准0.5000g，加水溶解，并定容至50ml，混匀，置冰箱中保存。此溶液每ml含10.0mg葡聚糖。
A3.1.9葡聚糖标准使用液：吸取葡聚糖标准储备1.00ml，置于10ml容量瓶中，加水至刻度，混匀，置冰箱中保存。此溶液每ml含葡聚糖0.10mg。
A3.2仪器
A3.2.1分光光度计
A3.2.2离心机
A3.2.3旋转混匀器
A3.3分析步骤
A3.3.1标准曲线制备
精密吸取葡聚糖标准使用液0、0.10、0.20、0.40、0.60、0.80、1.00ml(相当于葡聚糖0、0.010、0.020、0.040、0.060、0.080、0.10mg)分别置于25ml比色管中，准确补充水至2.0ml，加入50g/L苯酚溶液1.0ml，在旋转混匀器上混匀，小心加入浓硫酸10.0ml，于旋转混匀器上小心混匀，置沸水浴中煮沸2min，冷却后用分光光度计在485nm波长处以试剂空白溶液为参比，1cm比色皿测定吸光度值。以葡聚糖浓度为横坐标，吸光度值为纵坐标，绘制标准曲线。
A3.3.2样品处理：
A3.3.2.1样品提取：称取混合均匀的固体样品2.0g，置于100ml容量瓶中，加水80ml左右，于沸水浴上加热2h，冷却至室温后补加水至刻度，混匀，过滤，弃去初滤液，收集余下滤液共沉淀多糖。
A3.3.2.2沉淀粗多糖：精密取3.5.2.1项下滤液5.0ml或液体样品5.0ml，置于50ml离心管中，加入无水乙醇20ml，混匀后，以3000rpm离心5min，弃去上清液，反复3-4次操作。残渣用水溶解并定溶至5.0ml，混匀后，供沉淀葡聚糖。
A3.3.2.3沉淀葡聚糖：精密取5.2.2项下溶液2ml置于20ml离心管中，加入100g/L氢氧化钠溶液2.0ml，铜试剂溶液2.0ml，沸水浴中煮沸2min，冷却后以3000rpm离心5min，弃去上清液。残渣用洗涤液数毫升洗涤，离心后弃上清液，反复3次操作后，残渣用100ml/L硫酸溶液2.0ml溶解并转移至50ml容量中，加水稀释至刻度，混匀。此溶液为样品测定液。
A3.3.3样品测定：精密吸取样品测定液2.0ml置于25ml比色管中，加入50g/L苯酚溶液1.0ml，在旋转混匀器上混匀后，小心加入浓硫酸10.0ml后于旋转混匀器上小心混匀，置沸水浴中煮沸2min，冷却至室温后用分光光度计在485nm波长处，以试剂空白参比，1cm比色皿测定吸光度值。从标准线上查出葡聚糖质量，计算样品中粗多糖含量。同时作样品空白实验。
A3.4结果计算
X = W 1 - W 2 M × V 2 / V 1 × V 4 × V 3 × V 6 × V 5
式中：
X——样品中粗多糖含量(以葡聚糖计)，mg/g；
W1——样品测定液中葡聚糖的质量，mg；
W2——样品空白液中葡聚糖的质量，mg；
M——样品质量，g；
V1——样品提取液总体积，ml；
V2——沉淀粗多糖所用样品提取液体积，ml；
V3——粗多糖溶液体积，ml；
V4——沉淀葡聚糖所用粗多糖溶液体积，ml；
V5——样品测定液总体积，ml；
V6——测定用样品测定溶液体积，ml。
A3.5准确度与精密度
在不同食品中进行不同浓度加标回收实验，回收率为87.8-110.8％；不同实验室对同一样品进行10次测定结果的相对标准偏差为5.8％。
注：本方法按照《保健食品功效成分检测方法》中的分光光度法进行测定。
具体实施方式：
下面通过具体的实施例进一步说明本发明的工艺：
实施例1：
①将沙棘100g、枸杞子100g、当归100g、红花10g、党参100g、肉桂5g、珍珠5g、氯化高铁血红素1g为原料。
②将①中所有原药材分别进行除杂、洗净，干燥；然后把红花、肉桂、珍珠、氯化高铁血红素粉碎成细粉备用；再将沙棘、枸杞子、当归、党参中加入药材10倍量的水加热提取2次，每次2小时，收集提取液，浓缩后减压干燥，得干浸膏，粉碎成细粉。将上述干浸膏粉末与药材细粉混合均匀，得混合粉。
③将②中混合粉制成胶囊剂，即可。
实施例2：
①将沙棘50g、枸杞子40g、当归40g、红花15g、党参40g、肉桂10g、珍珠10g、氯化高铁血红素5g为原料。
②将①中所有原药材分别进行除杂、洗净，干燥；然后把红花、肉桂、珍珠、氯化高铁血红素粉碎成细粉备用；再将沙棘、枸杞子、当归、党参中加入药材10倍量的水加热提取2次，每次2小时，收集提取液，浓缩后干燥，得干浸膏，粉碎成细粉。将上述干浸膏粉末与药材细粉混合均匀，得混合粉。
③将②中混合粉用水泛丸后干燥，制成0.2g丸剂。
实施例3：
①将沙棘30g、枸杞子20g、当归20g、红花10g、党参20g、肉桂5g、珍珠5g、氯化高铁血红素3g为原料。
②将①中所有原药材分别进行除杂、洗净，干燥；然后把红花、肉桂、珍珠、氯化高铁血红素粉碎成细粉备用；再将沙棘、枸杞子、当归、党参中加入药材10倍量的水加热提取2次，每次2小时，收集提取液，浓缩后喷雾干燥，得干浸膏粉末。将上述干浸膏粉末与药材细粉混合均匀，得混合粉。
③将②中混合粉制成胶囊剂，即可。
实施例4：
①将沙棘90g、枸杞子100g、当归100g、红花30g、党参150g、肉桂10g、珍珠10g、氯化高铁血红素5g为原料。
②将①中所有原药材分别进行除杂、洗净，干燥；然后把红花、肉桂、珍珠、氯化高铁血红素粉碎成细粉备用；再将沙棘、枸杞子、当归、党参中加入药材10倍量的水加热提取2次，每次2小时，收集提取液，浓缩后喷雾干燥，得干浸膏粉末。将上述干浸膏粉末与药材细粉混合均匀，得混合粉。
③将②中混合粉制成颗粒(粒径1500～2000μm)，60℃干燥，加入50g交联聚维酮、10g硬脂酸镁压片，即得。
实施例5：
①将沙棘45g、枸杞子45g、当归40g、红花15g、党参40g、肉桂10g、珍珠10g、氯化高铁血红素2g、山麦冬10g、白芍10g、桃仁2g、灵芝2g为原料。
②将①中所有原药材分别进行除杂、洗净，干燥；然后把红花、肉桂、珍珠、氯化高铁血红素、灵芝粉碎成细粉备用；再将沙棘、枸杞子、当归、党参、山麦冬、白芍、桃仁中加入药材10倍量的水加热提取2次，每次2小时，收集提取液，浓缩后喷雾干燥，得干浸膏粉末。将上述干浸膏粉末与药材细粉混合均匀，得混合粉。
③将②中混合粉制成颗粒(粒径1500～2000μm)，60℃干燥，加入30g羧甲基淀粉纳、10g硬脂酸镁压片，即得。
实施例6：
①将沙棘25g、枸杞子20g、当归20g、红花10g、党参20g、肉桂5g、珍珠5g、氯化高铁血红素3g、白术2g、红景天2g、天冬2g、柴胡2g、甘草2g为原料。
②将①中所有原药材分别进行除杂、洗净，干燥；然后把红花、肉桂、珍珠、氯化高铁血红素粉碎成细粉备用；再将沙棘、枸杞子、当归、党参、白术、红景天、天冬、柴胡、甘草中加入药材10倍量的水加热提取2次，每次2小时，收集提取液，浓缩后喷雾干燥，得干浸膏粉末。将上述干浸膏粉末与药材细粉混合均匀，得混合粉。
③将②中混合粉加入45g羟丙甲纤维素压制成块状或大片状，然后再将其破碎成颗粒(粒径为750～800μm)，加入10g滑石粉或5g微粉硅胶，压片，即可。
实施例7：
①将沙棘40g、枸杞子30g、当归30g、红花10g、党参30g、肉桂5g、珍珠5g、氯化高铁血红素1g、茯苓1g、合欢皮2g、赤芍1g、鸡血藤3g、桃仁1g为原料。
②将①中所有原药材分别进行除杂、洗净，干燥；然后把红花、肉桂、珍珠、氯化高铁血红素粉碎成细粉备用；再将沙棘、枸杞子、当归、党参、茯苓、合欢皮、赤芍、鸡血藤、桃仁中加入药材10倍量的水加热提取2次，每次2小时，收集提取液，浓缩后喷雾干燥，得干浸膏粉末。将上述干浸膏粉末与药材细粉混合均匀，得混合粉。
③将②中混合粉制成软胶囊，即可。
实施例8：
①将沙棘45g、枸杞子35g、当归30g、红花10g、党参30g、肉桂5g、珍珠5g、氯化高铁血红素1g、延胡索1g、麦冬3g、香附5g、益母草1g为原料。
②将①中所有原药材分别进行除杂、洗净，干燥；然后把红花、肉桂、珍珠、氯化高铁血红素粉碎成细粉备用；再将沙棘、枸杞子、当归、党参、延胡索、麦冬、香附、益母草中加入药材10倍量的水加热提取2次，每次2小时，收集提取液，浓缩后喷雾干燥，得干浸膏粉末。将上述干浸膏粉末与药材细粉混合均匀，制成散剂。
实施例9：
①将沙棘40g、枸杞子30g、当归30g、红花10g、党参30g、肉桂5g、珍珠5g、氯化高铁血红素1g、玫瑰花1g为原料。
②将①中所有原药材分别进行除杂、洗净，干燥；然后把红花、肉桂、珍珠、氯化高铁血红素、玫瑰花粉碎成细粉备用；再将沙棘、枸杞子、当归、党参中加入药材10倍量的水加热提取2次，每次2小时，收集提取液，浓缩后喷雾干燥，得干浸膏粉末。将上述干浸膏粉末与药材细粉混合均匀，得混合粉。
③将②中混合粉加入将适量的70％乙醇，制成颗粒(粒径为1500～2000μm)，干燥，整粒，制成颗粒剂。
实施例10：
①将沙棘100g、枸杞子90g、当归90g、红花30g、党参90g、肉桂10g、珍珠10g、氯化高铁血红素1g、白术10g、益母草10g、柴胡10g、山麦冬15g、麦冬30g为原料。
②将①中所有原药材分别进行除杂、洗净，干燥；然后把红花、肉桂、珍珠、氯化高铁血红素粉碎成细粉备用；再将沙棘、枸杞子、当归、党参、白术、益母草、柴胡、山麦冬、麦冬中加入药材10倍量的水加热提取2次，每次2小时，收集提取液，浓缩后喷雾干燥，得干浸膏粉末。将上述干浸膏粉末与药材细粉混合均匀，得混合粉。
③将②中混合粉可按照常规方法制成锭剂。
实施例11：
①将沙棘30g、枸杞子25g、当归25g、红花10g、党参25g、肉桂5g、珍珠5g、氯化高铁血红素3g、合欢皮15g为原料。
②将①中所有原药材分别进行除杂、洗净，干燥；然后把红花、肉桂、珍珠、氯化高铁血红素粉碎成细粉备用；再将沙棘、枸杞子、当归、党参、合欢皮中加入药材10倍量的水加热提取2次，每次2小时，收集提取液，浓缩后喷雾干燥，得干浸膏粉末。将上述干浸膏粉末与药材细粉混合均匀，得混合粉。
③将②中混合粉加入基质后，用常规方法制成巴布膏剂。
实施例12：
①将沙棘40g、枸杞子30g、当归30g、红花12g、党参30g、肉桂8g、珍珠8g、氯化高铁血红素4g为原料。
②将①中所有原药材分别进行除杂、洗净，干燥；然后把红花、肉桂、珍珠、氯化高铁血红素粉碎成细粉备用；再将沙棘、枸杞子、当归、党参中加入药材10倍量的水加热提取2次，每次2小时，收集提取液，浓缩后喷雾干燥，得干浸膏粉末。将上述干浸膏粉末与药材细粉混合均匀，得混合粉。
③将②中混合粉加入将适量的70％乙醇，制成颗粒(粒径为1500～2000μm)，干燥，整粒，备用。
④将③中所得的干燥颗粒中加入羧甲基淀粉钠15g和硬脂酸镁2g，混合均匀，压片即可。
实施例13：
①将沙棘30g、枸杞子30g、当归25g、红花10g、党参25g、肉桂5g、珍珠5g、氯化高铁血红素3g为原料。
②将①中所有原药材分别进行除杂、洗净，干燥；然后把红花、肉桂、珍珠、氯化高铁血红素粉碎成细粉备用；再将沙棘、枸杞子、当归、党参中加入药材10倍量的水加热提取2次，每次2小时，收集提取液，浓缩后喷雾干燥，得干浸膏粉末。将上述干浸膏粉末与药材细粉混合均匀，得混合粉。
③将②中混合粉加入将适量的70％乙醇，制成颗粒(粒径为1 500～2000μm)，干燥，整粒，备用。
④将③中所得的干燥颗粒中加入羧甲基淀粉钠15g和硬脂酸镁2g，混合均匀，制成胶囊剂即可。
实施例14：
①将沙棘400g、枸杞子300g、当归300g、红花100g、党参300g、肉桂50g、珍珠50g、氯化高铁血红素8.3g为原料。
②将①中所有原药材分别进行除杂、洗净，干燥；然后把红花、肉桂、珍珠、氯化高铁血红素粉碎成细粉备用；再将沙棘、枸杞子、当归、党参中加入药材10倍量的水加热提取2次，每次2小时，收集提取液，浓缩后喷雾干燥，得干浸膏粉末。将上述干浸膏粉末与药材细粉混合均匀，得混合粉。
③将②中混合粉加入将适量的70％乙醇，制成颗粒(粒径为1500～2000μm)，干燥，整粒，备用。
④将③中所得的干燥颗粒中加入羧甲基淀粉钠12g和硬脂酸镁2g，混合均匀，压片，备用。
⑤在④中加入胃溶型薄膜包衣预混剂15g进行薄膜包衣，即可得到薄膜包衣片。

Claims (9)

1、本发明涉及一种具有祛黄褐斑、改善营养性贫血功能的药物组合物，特征在于该组合物是由下述原料药制成的：沙棘10～50重量份、枸杞子10～40重量份、当归10～40重量份、红花1～15重量份、党参1～40重量份、肉桂0.5～10重量份、珍珠0.5～10重量份、氯化高铁血红素0.1～5重量份。
2、如权利要求1所述的一种具有祛黄褐斑、改善营养性贫血功能的药物组合物，特征在于该组合物是由下述原料药制成的：沙棘40重量份、枸杞子30重量份、当归30重量份、红花10重量份、党参30重量份、肉桂5重量份、珍珠5重量份、氯化高铁血红素0.83重量份。
3、如权利要求1、2所述的具有祛黄褐斑、改善营养性贫血功能的药物组合物，其特征在于：还可加入山麦冬1～15重量份、天冬1～15重量份、白芍1～20重量份、柴胡1～20重量份、白术1～20重量份、茯苓1～20重量份、甘草1～15重量份、延胡索1～10重量份、合欢皮1～15重量份、红景天1～10重量份、麦冬1～15重量份、赤芍1～15重量份、灵芝1～15重量份、鸡血藤1～20重量份、玫瑰花1～10重量份、香附1～10重量份、桃仁1～10重量份、益母草1～15重量份中的至少一种。
4、一种具有祛黄褐斑、改善营养性贫血功能的药物组合物的制备方法，其特征在于该药物组合物是由下述方法制成的：
选择原料药：
沙棘10～50重量份、枸杞子10～40重量份、当归10～40重量份、红花1～15重量份、党参1～40重量份、肉桂0.5～10重量份、珍珠0.5～10重量份、氯化高铁血红素0.1～5重量份。
先将所有原药材分别进行除杂、洗净，干燥，然后把红花、肉桂、珍珠、氯化高铁血红素粉碎成细粉备用；再将沙棘、枸杞子、当归、党参中加入药材5～15倍量的水加热提取1～4次，每次0.5～3小时，温度70～100℃，过滤，合并提取液，将提取液浓缩后干燥，得干浸膏粉碎成粉末或直接得干浸膏粉末。将上述干浸膏粉末与药材细粉混合，混合均匀后，加入常规辅料制成临床可接受的剂型。
5、如权利要求4所述的药物组合物的制备方法，其特征在于该药物组合物是由下述方法制成：
选择原料药：
沙棘10～50重量份、枸杞子10～40重量份、当归10～40重量份、红花1～15重量份、党参1～40重量份、肉桂0.5～10重量份、珍珠0.5～10重量份、氯化高铁血红素0.1～5重量份。
先将所有原药材分别进行除杂、洗净，干燥，然后把红花、肉桂、珍珠、氯化高铁血红素粉碎成细粉备用；再将沙棘、枸杞子、当归、党参中加入药材5～20倍量的水加热提取1～4次，每次0.5～3小时，温度70～100℃，过滤，合并提取液，将提取液浓缩后干燥，得干浸膏粉碎成粉末或直接得干浸膏粉末。将上述干浸膏粉末与药材细粉混合，混合均匀后按常规方法制成颗粒剂或散剂或片剂或装入胶囊。
6、如权利要求5所述的药物组合物的制备方法，其特征在于该药物组合物是由下述方法制成：
选择原料药：
沙棘10～50重量份、枸杞子10～40重量份、当归10～40重量份、红花1～15重量份、党参1～40重量份、肉桂0.5～10重量份、珍珠0.5～10重量份、氯化高铁血红素0.1～5重量份。
先将所有原药材分别进行除杂、洗净，干燥，然后把红花、肉桂、珍珠、氯化高铁血红素粉碎成细粉备用；再将沙棘、枸杞子、当归、党参中加入药材5～20倍量的水加热提取1～4次，每次0.5～2小时，温度70～100℃，过滤，合并提取液，将提取液浓缩后喷雾干燥，得干浸膏粉末。将上述干浸膏粉末与药材细粉混合，将上述干浸膏粉末与药材细粉混合，混合均匀，制粒。再将羧甲基淀粉钠0.1～10重量份和硬脂酸镁0.01～10重量份加入上述制好的颗粒中，混合均匀，压片，最后加入胃溶型薄膜包衣预混剂0.1～20重量份进行薄膜包衣，即可得到片剂。
7、如权利要求6所述的药物组合物的制备方法，其特征在于该药物组合物是由下述方法制成：
选择原料药：
沙棘400重量份、枸杞子300重量份、当归300重量份、红花100重量份、党参300重量份、肉桂50重量份、珍珠50重量份、氯化高铁血红素8.3重量份。
先将所有原药材分别进行除杂、洗净，干燥，然后把红花、肉桂、珍珠、氯化高铁血红素粉碎成细粉备用；再将沙棘、枸杞子、当归、党参中加入药材10倍量的水加热提取2次，每次2小时，温度100℃，过滤，合并提取液，将提取液浓缩后喷雾干燥，得干浸膏粉末。将上述干浸膏粉末与药材细粉混合，混合均匀，制粒。再将羧甲基淀粉钠12重量份和硬脂酸镁2重量份加入上述制好的颗粒中，混合均匀，压片，最后加入胃溶型薄膜包衣预混剂15重量份进行薄膜包衣，即可得到片剂。
8、如权利要求7所述的药物组方制剂，其特征在于其质量控制指标为每100g单位制剂中钙(以Ca计)2.36～3.94mg，总黄酮(以芦丁计)大于或等于350mg，粗多糖(以葡聚糖计)大于或等于180mg。
9、如权利要求1、2、3所述的药物组合物在具有祛黄褐斑、改善营养性贫血的药物中的应用。
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