CN101048172A - 用于慢性hcv患者的hcv疫苗 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了聚阳离子化合物在制备和制造用于治疗HCV慢性感染患者的药物、药物组合物，特别是疫苗中的用途。

Description

用于慢性HCV患者的HCV疫苗
丙型肝炎病毒(HCV)是黄病毒科(flaviviridiae)的成员，在世界范围内慢性感染约1亿7千万个人。至少存在6种HCV基因型并且已经描述了超过50种亚型。在美洲、欧洲和日本，基因型1、2和3是最常见的。HCV基因型的地理分布变化很大，基因型1a主要在美国和部分西欧，而1b主要在南欧和中欧(Bellentani 2000)。HCV通过肠胃外的或经皮肤(percutan)的途径传播，并在肝细胞中复制。约15％的患者经历与病毒清除和痊愈有关的急性自限(self-limited)肝炎。约80％的感染者成为慢性携带者。感染经常随着缓慢进展无症状地持续好几年，然而最终HCV是肝硬化、晚期肝病和肝癌的主要原因(Liang 2000)。HTL和CTL二者应答的强度和品质决定患者是否痊愈(自发地或由于治疗)或发展成慢性感染(Liang 2000)。
HCV的标准治疗包括组合聚乙二醇化的干扰素-α和抗病毒的利巴韦林(Fried 2002)。然而，取决于所述基因型，仅在约50％的用所述标准治疗的HCV患者中实现病毒学应答(定义为在治疗中止24周以后不存在可检测出的HCV RNA)。而且，存在许多与干扰素(IFN)和利巴韦林都有关的副作用。IFN(同样在它的聚乙二醇化的形式中)以非-特异的方式刺激免疫系统而引起实质的副作用，所述副作用包括流感样综合征、发烧、头痛、关节痛、肌痛、抑郁、重量减轻、脱发、白细胞减少和血小板减少6。这些副作用可迫使一些受试者的治疗中止。用IFN的治疗在具有原先存在血液学疾病(由于伴有脾大的肝硬化而引起的白细胞减少和血小板减少)的受试者中也是禁忌的。利巴韦林可以引起暂时性的肝酶升高和精神病症状、溶血和贫血并且与具有冠心病的受试者中的心肌梗死有关。利巴韦林也显示致畸的、致突变的和致癌的潜力。因此，对于用利巴韦林治疗的能育的雄性和雌性受试者必须避孕。因此，该疗法的低可容许性和相当大的副作用显然需要包括治疗性疫苗在内的新的治疗介入，并且对于慢性HCV感染迫切需要新的治疗选择，原因在于有效治疗的限制和缺乏(Cornberg2002)。
本发明要解决的问题是，通过提供有效的药物或药物组合物特别是用于慢性HCV感染治疗的疫苗，克服所述标准干扰素-α/利巴韦林联合治疗的限制，特别是对于原标准HCV疗法不应答或仅部分应答或者已经复发的那些患者。
因此本发明提供聚阳离子化合物在制备用于治疗HCV慢性感染患者的药物、药物组合物，特别是疫苗中的用途。优选地，所述HCV慢性感染的患者是对于原标准HCV疗法不应答、部分应答或者已经复发的那些患者，所述原标准HCV疗法为聚乙二醇化的干扰素α和所述抗病毒的利巴韦林的组合。
当HCV RNA在用Peg-干扰素α和利巴韦林的原标准HCV疗法上变得检测不到时而在所述治疗的disclontinuation以后再次检出时，认为患者已经复发。认为HCV RNA水平在治疗上保持稳定的人是非-应答者，而将那些HCV RNA水平下降(例如＞2logs)但是从未变成探测不到的人称为部分应答者。
根据本发明要使用的一种或多种聚阳离子化合物可以是任何聚阳离子化合物，其显示根据WO 97/30721的特征效果。优选的聚阳离子化合物选自碱性多肽、有机聚阳离子、碱性聚氨基酸或其混合物。这些聚氨基酸应当具有链长至少为4个氨基酸残基(WO 97/30721)。特别优选的是类似聚赖氨酸、聚精氨酸和多肽的物质，所述物质在超过8个，特别是超过20个氨基酸残基或其混合物的范围内含有超过20％，特别是超过50％的碱性氨基酸。其它优选的聚阳离子和它们的药物组合物描述在WO 97/30721(例如聚乙烯亚胺)和WO 99/38528中。优选这些多肽含有20和500之间的氨基酸残基，特别是30和200之间的残基。
这些聚阳离子化合物可以化学或重组产生或者可以从天然来源衍生。
阳离子的(多)肽也可以是抗微生物的，具有如在{Ganz，T.，1999}中所评述的性质。这些(多)肽可以是原核的或者动物或植物来源的，或者可以是化学或重组产生的(WO 02/13857)。肽也可以属于抵御素(defensins)的类别(WO 02/13857)。例如，可以在下列网络地址下的抗微生物序列数据库(Antimicrobial Sequences Database)中发现这样的肽的序列：
http://www.bbcm.univ.trieste.it/～tossi/pag2.html
这样的宿主防御肽或防御(defensives)也是根据本发明的聚阳离子聚合物的优选形式。一般地，将允许作为适应性免疫系统的终产物活化(或减量调节)，优选通过APCs(包括树突细胞)介导的化合物用作聚阳离子聚合物。
在本发明中特别优选用作聚阳离子物质的是组织蛋白酶抑制素(cathelicidin)衍生的抗微生物肽或其衍生物(国际专利申请WO 02/13857，通过参考结合于此)，特别是从哺乳动物优选人、牛或小鼠的组织蛋白酶抑制素衍生的抗微生物肽。
从天然来源衍生的聚阳离子化合物包括HIV-REV或HIV-TAT(衍生的阳离子的肽、触角足肽、脱乙酰壳多糖或其它壳多糖的衍生物)或通过生物化学或重组生产从这些肽或蛋白质衍生的其它肽。其它优选的聚阳离子化合物是抗微生物肽前体或者来自抗微生物肽前体的相关或衍生的物质。例如，小鼠抗微生物肽前体是一种肽，其具有氨基酸序列NH2-RLAGLLRKGGEKIGEKLKKIGQKIKNFFQKLVPQPE-COOH。相关或衍生的抗微生物肽前体物质含有抗微生物肽前体序列的全部或部分，具有至少15-20个氨基酸残基。衍生可以包括用不在20种标准氨基酸之中的氨基酸置换或修饰天然氨基酸。而且，可以将另外阳离子残基引入到这样的抗微生物肽前体分子。这些抗微生物肽前体分子优选与所述抗原结合。意外地，这些抗微生物肽前体分子已经证明在不加入另外佐剂的情况下也有效作为用于抗原的佐剂。因此可以在有或者没有其它免疫活化的物质的情况下将这样的抗微生物肽前体分子在疫苗制剂中用作有效的佐剂。
根据本发明要使用的另外优选的聚阳离子物质是含有至少2个由3至7个疏水性氨基酸的接头分开的KLK-基序的合成肽(，国际专利申请WO02/32451，通过参考结合于此)。在WO 02/32451中，公开了一种类型1诱导佐剂(免疫者(Immunizer))，所述佐剂能强烈增强对于特异性共施用的抗原的免疫应答并因此构成高度有效的佐剂。根据WO 02/32451的佐剂(Immunizer)是一种包含序列R1-XZXZNXZX-R2的肽，其中N是3和7之间的整数、优选是5，X是正电荷的天然的和/或非天然的氨基酸残基，Z是选自由L、V、I、F和/或W组成的组的氨基酸残基，并且R1和R2分别独立选自由H、-NH2、-COCH3、-COH、具有高达20个氨基酸残基的肽或者在有或没有肽情况下的肽反应性基团或肽接头组成的组；X-R2也可以是所述C-末端氨基酸残基的酰胺、酯或硫代酸酯。特别优选的肽是KLKLLLLLKLK。
根据本发明，所述聚阳离子化合物可以用于制造任何药物，药物组合物，特别是疫苗，其可以用于治疗慢性HCV感染，特别是用于治疗对于原标准HCV疗法无应答、部分应答或已经复发的那些患者，所述原标准HCV疗法借助于聚乙二醇化的干扰素-α和抗病毒的三氮唑核苷的组合。
优选地，所述聚阳离子化合物用于制造包含HCV抗原、HCV热点表位和HCV表位的药物，药物组合物，特别是疫苗。最优选地，在WO01/24822和PCT/EP2004/007540中描述了所述HCV表位。因此，特别优选的HCV表位包括：一种或多种，特别是二、三、四、五或六种下列表位：
MWNFISGIQYLAGLSTLPGN，HMWNFISGI，NFISGIQYLAGLSTLPGNPA，
HMWNFISGIQYLAGLSTLPGNPA，IGLGKVLVDILAGYGAGVAGALVAFK，
AAWYELTPAETTVRLR，DYPYRLWHYPCTVNYTIFKI，DYPYRLWHYPCTVNFTIFKI，
AYSQQTRGLL，TAYSQQTRGLLG，SMSYTWTGALITP，SPGALVVGVI，LPRRGPRL，
IGLGKVLVDILAGYGAGVAGALVAFK，GSIGLGKVLVDILAG，IGLGKVLVDILAGYG，
LGKVLVDILAGYGAG，LVDILAGYGAGVAGA，DILAGYGAGVAGALV，
LAGYGAGVAGALVAF，AAWYELTPAETTVRLR，AGAAWYELTPAETTV，
AAWYELTPAETTVRL，TAYSQQTRGLLG，TAYSQQTRGLLGCIV，
SMSYTWTGALITP，VVCCSMSYTWTGALITPC，
VDYPYRLWHYPCTVNFTIFKVRMYVGGVEHRL，DYPYRLWHYPCTVNF，
YPYRLWHYPCTVNFT，LWHYPCTVNFTIFKV，TVNFTIFKVRMYVGG，
TIFKVRMYVGGVEHR，VDYPYRLWHYPCTVNYTIFIRMYVGGVEHRL，
DYPYRLWHYPCTVNYTIFKI，DYPYRLWHYPCTVNY，LWHYPCTVNYTIFKI，
TVNYTIFKIRMYVGG，TIFKIRMYVGGVEHR，RMYVGGVEHRL，
HMWNFISGIQYLAGLSTLPGNPA，NFISGIQYLAGLSTLPGNPA，
MWNFISGIQYLAGLSTLPGN，KFPGGGQIVGGVYLLPRRGPRLGVRATRK，
KFPGGGQIVGGVYLLPRRGPRL，YLLPRRGPRL，LPRRGPRL，GPRLGVRAT，
RLGVRATRK，GYKVLVLNPSVAAT，AYAAQGYKVL，AYAAQGYKVLVLNPSVAAT，
DLMGYIPAV，GYIPLVGAPL，DLMGYIPLVGAPL，CINGVCWTV，GEVQVVSTATQSFLAT，
GEVQVVSTATQSFLATCINGVCWTV，HMWNFISGIQYLAGLSTLPGNPA，
MWNFISGIQYLAGLSTLPGN，NFISGIQYLAGLSTLPGNPA，QYLAGLSTL，HMWNFISGI，
VDYPYRLWHYPGTVNFTIFKVRMYVGGVEHRL，DYPYRLWHYPCTVNFTIFKI，
DYPYRLWHYPCTVNFTIFKV，VDYPYRLWHYPCTVNYTIFKIRMYVGGVEHRL，
DYPYRLWHYPCTVNYTIFKI，DYPYRLWHY，TVNYTIFKE，TINYTIFK，TVNFTIFKV，
HYPCTVNYTI，HYPCTVNFTI，RMYVGGVEHR，AAWYELTPAETTVRLR，
TPAETTVRL，GWRLLAPITAYSQQTRGLLGCIV，TAYSQQTRGLLGCIV，TAYSQQTRGLLG，
GQGWRLLAPITAYSQ，RLLAPITAY，GQGWRLLAPITAYSQQTRGLLGCIV，
GQGWRLLAPITAYSQQTRGLLG，AYSQQTRGLL，AYSQQTRGL，
IGLGKVLVDILAGYGAGVAGALVAFK，ILAGYGAGV，VAGALVAFK，
GYGAGVAGAL，VVCCSMSYTWTGALITPC，SMSYTWTGALITP，SMSYTWTGAL，
SYTWTGALI，FTDNSSPPAVPQTFQV，LEDRDRSELSPLLLSTTEW，LEDRDRSELSPLLLST，
RSELSPLLL，ELSPLLLST，DRDRSELSPL，LEDRDRSEL，LEDRDRSEL，
YLVAYQATVCARAQAPPPSWD，YLVAYQATV，MSTNPKPQRKTKRNTNR，
PQRKTKRNTNR，QRKTKRNTN，RKTKRNTNR，MSTNPKPQR，MSTNPKPQK，
LINTNGSWHINRTALNCNDSL，NGSWHINRTALNCNDSL，LINTNGSWHI，
RTALNCNDSL，LINTNGSWHINRTALN，SWHINRTALN，TTILGIGTVLDQAET，
TTILGIGTV，TILGIGTVL，FDSSVLCECYDAGAAWYE，FDSSVLCECYDAGCA，
VLCECYDAGA，VVLCECYDAGAAWYE，ARLIVFPDLGVRVCEKMALY，ARLIVFPDL，
RLIVFPDLGV，RVCEKMALY，AFCSAMYVGDLCGSV，
GVLFGLAYFSMVGNW，TRVPYFVRAQGLIRA，TTLLFNILGGWVAAQ，
LLFNILGGWV或含有T-细胞表位(至少7个，优选至少8个，还更优选至少9个氨基酸残基长度)的片段。优选地，根据本发明的疫苗含有两个或更多，还更优选三个或更多，特别是四个或更多的组合的表位。优选的疫苗在一种制剂(或者分别储存和重构并且一起应用的两种制剂)中含有3、4、5、6或7个单独表位。
根据本发明使用的药物优选用于CD4+辅助-T-细胞和CD8+细胞毒性的T-细胞的诱导。特别优选的应用领域是将所述药物施用到特定的患者群：将本药物用于替代或者补充用干扰素α和利巴韦林的HCV标准疗法，特别是在这样的标准疗法无效或者不再有效的患者中。
优选地，将根据本发明的药物与诸如干扰素治疗的标准疗法组合使用。优选地，可以将它用于诱导慢性HCV患者中的类型I的T-细胞应答，和/或用于诱导正如在成功的标准疗法期间/之后所见类似的T-细胞应答，和/或用于在标准疗法以后增加应答者比率和/或减少复发比率。特别是，根据本发明的药物在临床试验中用作标准疗法稍后的附加物(add-on)；结果证实所述药物优异的安全性，所述药物不加重标准疗法的副作用诸如白细胞减少。
根据本发明的药物优选是为HCV基因型1特别设计的。基因型1患者已经在标准疗法期间显示最低的应答者比率。因而由于它在慢性HCV患者中诱导类型I的T-细胞应答的能力，优选将根据本发明的药物用于替代或补充利巴韦林(即IFN/IC41代替IFN/利巴韦林(riba))。
根据本发明的药物也可以与小分子的蛋白酶抑制剂组合使用。优选地，可以将它用于诱导慢性HCV患者中的类型I的T-细胞应答和/或用于诱导如在成功的标准疗法期间/之后类似的T-细胞应答。由此根据本发明的药物可以提供明显不同于小分子抑制剂的作用方式(mode-of-action)。由此它可以依据应答速率、应答持续时间、复发率、最适剂量/时刻表补充小分子抑制剂的功效。根据本发明的药物没有显著的副作用，特别是可以改善小分子抑制剂的功效/副作用的比例。
根据本发明的药物可以与咪喹莫特(一种TLR7激动剂，已经许可的产品Aldara/3M)组合使用。特别是抗原提呈细胞的局部动员可以增加根据本发明的药物的免疫潜能。特别是，可以预料较少疫苗接种之后针对更多肽的更强的应答；可以增加免疫应答者比率和应答持续时间，还有由此的病毒学应答；针对更多肽的更强的T-细胞应答可以克服RNA的回跳效应，例如，如利用根据本发明的药物的IC41-201研究中所示。
本发明也包括用有效量的所述药物治疗描述于此的HCV患者的方法。
通过下面的图、实施例进一步阐明了本发明，从中可以获得另外的特征、实施方案和优点。应当理解，本实施例仅通过举例说明的方式给出，而不作为所述内容的限制。
图1：慢性HCV患者中的CD4+辅助-T-细胞增殖。IC41而不是单独的肽，或者单独的聚-L-精氨酸可以诱导显著的增殖。在0、1、2、3、4、5月提供疫苗接种。能够诱导CD4+辅助-T-细胞应答的IC41肽的刺激指数是单独确定的，加上有效应答。显示每剂量组的全部12名患者的中值应答。
图2：用IC41或单独用肽或单独用聚-L-精氨酸接种疫苗的患者的干扰素-γ的ELIspot应答者比率。每个组由12名患者组成。上图：CD4+辅助-和CD8+细胞毒性的T-细胞，下图：仅CD8+细胞毒性的T-细胞。
实施例
实施例I：慢性HCV患者中HCV肽疫苗的人临床研究：
第一个疫苗，其中聚-L-精氨酸已经施用于人，是完全合成的治疗性丙型肝炎病毒(HCV)疫苗。该疫苗名为IC41并且由提供保守的HCV的T细胞表位的合成肽加上作为合成的T细胞佐剂的聚-L-精氨酸的混合物组成。IC41包括来自与HCV多肽不同的区域的五种肽，即下列三种表位：HMWNFISGIQYLAGLSTLPGNPA、CINGVCWTV和DLMGYIPAV。该治疗方法的目的是在慢性感染患者中恢复针对HCV的所谓类型I的T细胞应答。在大约15％的感染者中通常见到这样一种应答，他们对慢性不进行应答，然而可以在感染的急性期期间清除HCV。因为早先所描述的用聚-L-精氨酸的前期临床经验已经显示它在动物模型中诱导类型I免疫反应的能力，所以它代表一种用于治疗HCV的肽疫苗的有希望的T细胞佐剂。
已经在数个包含超过200名受试者的临床试验中测试了所提到疫苗的多种剂量：在初始1期研究中，获得了数个剂量的安全性和初步免疫原性数据。来自所述试验的结果促使剂量优化研究的启动，所述研究在10个不同的剂量组中包含128名健康志愿者。所述研究是随机化的、单盲的、平行组的受控研究，旨在评价所述HCV肽疫苗，IC41在健康受试者中的剂量优化和安全性，并且所述研究在奥地利中的一个中心中进行。随机分配128名受试者接受含有聚-L-精氨酸的HCV肽疫苗、单独的HCV肽疫苗、单独的聚-L-精氨酸或盐溶液的七种不同剂量和比率之一。全部受试者以每月一次的时间间隔接受四个所施用的疫苗接种。在上次疫苗接种后的各自一个月和三个月的这些时间点的每一个时间点评定免疫原性。
在慢性丙型肝炎病毒患者的2期临床试验中测试聚-L-精氨酸的T细胞刺激功效，所述患者对于标准的干扰素/利巴韦林疗法不应答或从其复发。
对于本发明，在慢性HCV患者中进行HCV肽疫苗，IC41的随机化的、双盲的研究，所述患者对于原标准HCV疗法无应答或已经复发。所述研究在德国、奥地利和波兰的11个中心中进行。随机分配六十名患者接受含有聚-L-精氨酸的HCV肽疫苗、单独的HCV肽疫苗或单独的聚-L-精氨酸的三种不同剂量和比率。
将符合下列采用(inclusion)标准的男性和女性患者包括在所述研究中：
·慢性丙型肝炎的诊断，记录的病程至少为六个月(在两个或更多的时间点，ALT＞1.5倍的正常的上限[ULN])。
·对于6至12个月的原标准HCV疗法非应答或复发(取决于HCV的基因型)。
·HCV-RNA阳性。
·HLA-A2阳性。
·HCV抗体阳性。
·在包括(inclusion)之前30个月内的肝活组织检查，表明肝炎和/或纤维化。
·对于患者群(肝值最大为5×ULN)通常预期的限制之内的血液学和生物化学实验室结果。
·年龄从18至65岁。
·在进入研究之前获得书面通知的同意。
在本临床研究中，每个组由12名对于HLA-A2是阳性的受试者组成。受试者在每月一次的时间间隔中接受6次疫苗接种(访问者(visit)3至8)。在疫苗接种之前并且在访问者6至8、在最后疫苗接种以后一个月(访问者9)、在最后疫苗接种以后三个月(访问者9)和在最后疫苗接种以后6个月(访问者11)时抽出血液用于免疫分析。为了临床试验的免疫监控，在GLP/GCP一致性之下应用现有技术的T细胞检定法以确定免疫终点：干扰素-γ的ELIspot检定法、T细胞增殖检定法、HLA-四聚体/FACS检定法。这些检定法可以可靠测量由治疗性HCV疫苗IC41诱导的表位-特异性T细胞应答。所述疫苗-诱导的T细胞免疫应答用作功效的替代参数(Keilholz等2002)。
作为主要终点，通过T-细胞增殖检定法确定T-细胞免疫原性。所述增殖检定法可以检测生物试样像人血液中的肽-特异性的T细胞。所述检定法的基础是，T细胞在用由它们的T细胞受体特异性识别的肽刺激时，通过细胞因子的分泌和随后的增殖起反应。可以通过多种方法测量细胞增殖；其中最灵敏的方法归类于将放射性标记的胸腺嘧淀脱氧核苷结合到在细胞分裂前合成的DNA中。该反应可以在96-孔板中进行。每个孔含有固定数目的细胞，将所述细胞在抗原/肽存在下培养几天。在最后16-20小时，加入用氚标记的胸腺嘧淀脱氧核苷(3H-胸腺嘧淀脱氧核苷)。然后将细胞收获到过滤板上：洗去不含有放射性的介质，而DNA粘到所述过滤器。可以借助于β-闪烁计数器定量结合的放射性，确定每分钟的计数(cpm)。将通常的输出作为刺激指数给出，将所述刺激指数定义为所述试样的cpm除以阴性对照的cpm。
作为次级终点，通过干扰素γ的ELIspot测定T-细胞免疫原性。ELIspot可以定量生物试样像人的血液中的肽-特异性的、功能性的(即细胞因子分泌的)T细胞。所述检定法的基础是，T细胞在用由所述T细胞受体特异性识别的肽刺激时，通过分泌细胞因子像IFN-γ的分泌起反应。该反应可以在96-孔板中进行。将该板的过滤孔用对于IFN-γ特异的Mab包被。因此，每个分泌IFN-γ的细胞留下IFN-γ斑点，所述斑点可以用随后的显色反应显现。可以利用自动的板读出器计数斑点。测量获得的数目以确定样品中肽-特异性的、IFN-γ-分泌的T细胞的频率。
作为另外的次级终点，进行HLA-四聚体/FACS分析。HLA类别I的四聚体，HLA分子和抗原肽的复合物的可溶性重组体形式，结合用于T细胞识别的抗原-特异性T细胞受体。通过利用具有荧光四聚体的流式细胞术，可以可靠地列举并表征抗原-特异性的CD8+T淋巴细胞。所述检定法使用由Beckman Coulter Immunomics生产的用IC41类别I表位复合的HLA-A*0201定制iTagTM-四聚体。
将受试者分类为应答者，倘若它们在访问者4至11的任一个显示显著的T-细胞应答并且在治疗之前不应答。在原先存在的免疫性的情况(针对已经预先疫苗接种的IC41之内任何肽的显著T-细胞应答)下，需要原先存在值至少3倍的增加而将所述效果分类为应答。
作为第一重要的结果，这些临床试验总的来说证实完全合成的肽的优异的安全性概貌并且特别是证实聚-L-精氨酸的优异的安全性概貌。而且，教导了关于人的T细胞活化的数个重要经验：在二者的研究中，利用[3H]-胸腺嘧淀脱氧核苷增殖和IFN-γ的ELIspot检定法和流式细胞术(FACS)评定T细胞应答。这些检定法，已经在Intercell AG′s Clinical ImmunologyLaboratory标准化并批准，可以可靠测量由疫苗接种诱导的表位-特异性的T细胞应答。全部检定按照Good Laboratory Practice(GLP)/Good ClinicalPractice(GCP)要求进行。在不同研究地点的血细胞分离程序的标准化产生高速率的有价值得检定法。然而，由于实验室之间T细胞检定法标准化的缺乏，难以将本研究的结果与来自类似的试验的公开数据进行比较。使用冰冻-保存的血细胞，导致可能低估与利用新鲜血液的检定法相比较的T细胞应答。
在2期的慢性HCV患者研究群中，获得稍有不同的图象：总的来说，相比于来自用肽或聚-L-精氨酸单独免疫的那些患者的样品，在来自那些用肽和聚-L-精氨酸一起免疫的患者周围血液样品中对于IC41肽的CD4+和CD8+T细胞应答是更频繁的并且更有力的，证实需要聚-L-精氨酸作为T细胞佐剂。所述verum组中的疫苗应答者比率比所述对照组中高接近两至三倍(图1)。所述verum组中的T细胞增殖应答者比所述对照组(0-17％)中更多(30-60％)。
然而最重要的是，仅在verum组观察到干扰素-γ的ELIspot应答者(图2)。这些结果首次表明即使在患者的慢性HCV感染设定中，聚-L-精氨酸也能诱导类型I应答，所述患者通过干扰素/利巴韦林标准疗法不能治愈。针对HLA-类别II(由辅助T细胞识别)和HLA-类别I(由细胞毒性T细胞识别)的肽都检出了显著的干扰素-γ的ELIspot应答。在上次免疫进行6个月以后，截至并包括在第二免疫检验(访问者11)获得的那些的数据分析揭示，与在访问者1至10获得的数据相比较，在免疫应答者比率中没有重要的区别，表明IC41-诱导的免疫应答的可持续性。所述研究也公开了针对所述病毒的T细胞免疫性可以增加至不太区别于在健康疫苗中诱导的那种的水平。因而，在患者中免疫抑制可能不如所预期那样占优势。尚待阐明的是，如何可以将这样的T细胞应答最佳应用于减少疾病进行或改善症状并最终清除所述感染。
合起来，聚-L-精氨酸代表一种首次合成的T细胞佐剂，其一致地—从体外实验直到不能治愈的慢性感染患者—能够诱导并增加所需种类的免疫应答。它的容易的可制造性，优异的安全性概貌和它的即使在作为慢性HCV感染的这样困难的状态中的功效，使它在与传染病和癌症斗争中成为有希望的新工具。
实施例II：可以由IC41，而不是由单独的肽，或单独的聚-L-精氨酸，诱导慢性HCV患者中的CD4+辅助-T-细胞增殖
如图1所示，IC41能够在慢性HCV患者中诱导显著的增殖应答。有趣的是，单独的肽还有单独的精氨酸都不具有该能力，证明聚-L-精氨酸的佐剂效果。
实施例III：需要聚-L-精氨酸在慢性HCV患者中诱导类型I(干扰素γ)T-细胞应答
如图2中所示，IC41可以在慢性HCV患者中诱导分泌干扰素γ的T-细胞，而单独的肽或单独的聚-L-精氨酸不能诱导任何应答。重要的是，CD4+辅助-T-细胞和CD8+细胞毒性的T-细胞都是可以诱导的。
干扰素γ分泌是类型I的T-细胞应答的标志。在HCV患者的子集合中的感染急性期期间可以见到这样的应答，他们除去所述病毒并且不发展成慢性感染。类型I的T-细胞应答也在经历用干扰素和利巴韦林的标准疗法的患者中见到。因而，通过IC41实现的类型I的T-细胞应答的引入是针对HCV的治疗性疫苗接种的主要目标。
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Claims (8)

1.聚阳离子化合物在制造和制备用于治疗HCV慢性感染患者的药物、药物组合物特别是疫苗中的用途。
2.根据权利要求1的用途，其中所述药物、药物组合物特别是疫苗包含HCV抗原或HCV表位。
3.根据权利要求1或2的用途，其特征在于所述患者是对于原标准HCV疗法没有应答、部分应答或复发的那些患者，所述原标准HCV疗法通过聚乙二醇化的干扰素-α和抗病毒的利巴韦林的组合进行。
4.根据权利要求1至3任何一项的用途，其特征在于所述聚阳离子化合物是聚阳离子肽。
5.根据权利要求4的用途，其特征在于所述聚阳离子肽含有20-500个氨基酸残基，特别是30-200个氨基酸残基。
6.根据权利要求3的用途，其特征在于所述聚阳离子肽是聚精氨酸或聚赖氨酸。
7.根据权利要求1至6任何一项的用途，其特征在于将所述药物用于诱导CD4+辅助-T-细胞和CD8+细胞毒性的T-细胞。
8.根据权利要求1至7任何一项的用途，其特征在于将所述药物用于替代或补充利用干扰素α和利巴韦林的HCV标准疗法，特别是在这样的标准疗法无效或不再有效的患者中。
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