CN101041652B - 从龙血竭中分离纯化的黄酮类化合物及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及从龙血竭中分离纯化的黄酮类化合物及其制备方法,属药物植物化学提取工艺技术领域。本发明的特点是采用化学提取工艺及色谱技术从龙血竭中分离纯化黄酮类化合物。本发明以龙血竭为原料,依次用石油醚、丙酮、乙酸乙酯溶剂提取,将乙酸乙酯溶剂萃取物经硅胶柱或快速硅胶柱层析分离、重结晶、制备色谱纯化,最终得到黄酮类化合物,化学名称为8-(3-(4-羟基-2-甲氧基苯基)-1-(4-羟基苯基)丙基)-2-(4-羟基苯基)-7-甲氧基-4H-苯并吡喃-4-酮。该化合物外观为棕红色,具有很强的α-葡萄糖苷酶抑制活性和降血糖作用,可作为治疗糖尿病药物的组成成分。
Description
技术领域
本发明涉及从龙血竭中分离纯化的黄酮类化合物及其制备方法,属药物植物化学提取工艺技术领域。
背景技术
黄酮类化合物是一类具有2-苯并色原酮母核结构的化合物,在植物中分布很广,而双黄酮化合物是由二分子黄酮衍生物聚合生成的二聚体。较集中分布于除松科以外的裸子植物中,尤以银杏纲为普遍,蕨类植物的卷柏属中亦有存在。常见的天然双黄酮是由二个分子芹菜素或其甲醚衍生物构成,根据它的结合方式有银杏素、异银杏素的3,8″-双芹菜素型,柏黄酮的8,8″-双芹菜素型,扁柏黄酮的双苯醚型等。双黄酮类化合物是一类重要的生物活性物质,具有解痉、降压、扩张冠状血管等作用,临床上用于治疗冠心病。
关于从百合科龙血树属植物剑叶龙血树的树脂龙血竭中分离出黄酮类化合物8-(3-(4-羟基-2-甲氧基苯基)-1-(4-羟基苯基)丙基)-2-(4-羟基苯基)-7-甲氧基-4H-苯并吡喃-4-酮的结构及其制备方法,经SciFinder检索,尚未见报道;也未见有合成该化合物工艺的相关报道。该新双黄酮化合物具有很强的α-葡萄糖苷酶的抑制活性和降血糖作用,可作为治疗糖尿病药物的组成成分。
发明内容
本发明的目的是提供一种从百合科龙血树属植物剑叶龙血树的树脂龙血竭中用化学提取工艺及色谱技术分离出黄酮化合物的方法。
本发明的一种从龙血竭中分离纯化的黄酮化合物,其特征在于具有以下的分子式和结构式:
分子式为:C32H28O7
结构式为:
化学名称为:8-(3-(4-羟基-2-甲氧基苯基)-1-(4-羟基苯基)丙基)-2-(4-羟基苯基)-7-甲氧基-4H-苯并吡喃-4-酮。
本发明一种从龙血竭中分离纯化的黄酮化合物的制备方法,其特征在于具有以下的工艺过程和步骤:
a.称取60-80目龙血竭粉料,加入1600-2000mL石油醚进行索氏抽提,索氏抽提的温度为70-80℃,抽提时间为8-15小时,萃余物挥发掉残留的石油醚,得石油醚萃余物A;
b.将上述萃余物A用250-400mL丙酮在室温下进行固液萃取,重复3-5次,合并萃取液,用旋转蒸发仪浓缩,40-50℃干燥,得丙酮萃取物B;
c.将上述萃取物B用250-400mL乙酸乙酯在室温下进行固液萃取,重复3-5次,将萃余物中残留的乙酸乙酯挥发干,得乙酸乙酯萃余物C;
d.取上述萃余物C用甲醇溶解后,加入等量硅胶混匀,挥发除去甲醇,将固体样品,放于研钵中研成粉状,过80目筛,上硅胶柱或快速硅胶柱进行层析,硅胶粒度为80-120目,用乙酸乙酯洗脱2-5个柱体积后,用乙酸乙酯∶甲醇=9.5∶0.5,9∶1两种混合液先后各洗脱2-5个柱体积,收集乙酸乙酯∶甲醇=9∶1的流份,用旋转蒸发仪浓缩,40-50℃干燥,得红色固体D;
e.取上述红色固体D放入三颈瓶中,加入150-250mL乙酸乙酯,搅拌并加热回流15-30min,趁热用砂芯漏斗减压过滤,再用30mL热乙酸乙酯分3次洗涤三颈瓶,洗液并入砂芯漏斗过滤,合并滤液,转入烧杯,待冷却至室温,4℃以下避光保存10-15小时后,烧杯中有红棕色粉末析出,先用砂芯漏斗减压过滤,后用冷乙酸乙酯15-30mL分3次洗涤析出物,取出该析出物,真空干燥,得红棕色粉状物质E;
f.取上述红棕色粉状物质E用甲醇配成10mg/mL浓度的溶液,注入高效液相制备色谱仪纯化,弃去杂质峰,收集主成分峰;
g.将收集的主成份峰流份用旋转蒸发仪浓缩,真空冷冻干燥,得新双黄酮化合物8-(3-(4-羟基-2-甲氧基苯基)-1-(4-羟基苯基)丙基)-2-(4-羟基苯基)-7-甲氧基-4H-苯并吡喃-4-酮。
上述的的制备色谱仪的条件如下:制备色谱柱为XDB-C18(Φ9.2×250mm),柱温40℃,流动相为甲醇∶0.1%醋酸水溶液=21∶29的混合物(体积比),流速v=4.0mL/min,检测波长280nm;
本发明方法所得的黄酮类化合物其外观为红棕色,它溶于甲醇、乙醇、丙酮等有机溶剂。
α-葡萄糖苷酶的抑制活性实验证明:该黄酮类化合物抑制来自酵母的α-葡萄糖苷酶活性的强度远大于α-葡萄糖苷酶抑制剂代表药物拜糖苹的药用成分acarbose。该黄酮类化合物的半抑制率IC50为0.276μg/mL,见表1。对来自大鼠小肠壁α-葡萄糖苷酶的抑制作用与拜糖苹的药用成分acarbose相同,见表2。酶动力学实验表明:该新双黄酮化合物为竞争性抑制剂,Km=0.988mmol/L,Ki=0.272μg/mL。
表1 对来自酵母的α-葡萄糖苷酶的抑制作用
拜糖苹(n=5) | 新双黄酮化合物(n=5) | |
半抑制IC<sub>50</sub>(μg/mL) | 126 | 0.276 |
表2 对来自大鼠小肠壁α-葡萄糖苷酶的抑制作用
拜糖苹(1mg/mL)50μL | 剑叶龙血素S(1mg/mL)50μL | |
抑制率% | 21.8±2.5(n=5) | 20.1±3.3(n=5) |
该黄酮类化合物具有很强α-葡萄糖苷酶的抑制活性和的降血糖作用,可作为治疗糖尿病药物的组成成分,用于新药的开发。
具体实施方式
现将本发明的具体实施例叙述于后。
实施例1:
称取60-80目龙血竭粉料100g,加入1800mL石油醚进行索氏抽提,索氏抽提的温度为75℃,抽提时间为12小时,萃余物挥发掉残留的石油醚,得石油醚萃余物A94.5g;将上述萃余物A用300mL丙酮在室温下进行固液萃取,重复3次,合并萃取液,用旋转蒸发仪浓缩,40℃干燥,得丙酮萃取物B 84.4g;将上述萃取物B用300mL乙酸乙酯在室温下进行固液萃取,重复4次,将萃余物中残留的乙酸乙酯挥干,得乙酸乙酯萃余物C 36.2g;取上述萃余物C用甲醇溶解后,加入等量硅胶混匀,挥发除去甲醇,将固体样品于研钵中研成粉状,过80目筛,上硅胶柱(Φ8.5×100cm)进行层析,硅胶粒度为100目,用乙酸乙酯洗脱2个柱体积后,用乙酸乙酯∶甲醇=9.5∶0.5,9∶1两种混合液先后各洗脱2个柱体积,收集乙酸乙酯∶甲醇=9∶1的流份,用旋转蒸发仪浓缩,40℃干燥,得红色固体D 850mg;取上述红色固体D放入三颈瓶中,加入200mL乙酸乙酯,搅拌并加热回流20min,趁热用砂芯漏斗减压过滤,再用30mL热乙酸乙酯分3次洗涤三颈瓶,洗液并入砂芯漏斗过滤,合并滤液,转入烧杯,待冷却至室温,4℃以下避光保存15小时后,烧杯中有红棕色粉末析出,先用砂芯漏斗减压过滤,后用冷乙酸乙酯30mL分3次洗涤析出物,取出该析出物,真空干燥,得红棕色粉状物质E 168mg;取上述红棕色粉状物质E用甲醇配成10mg/mL浓度的溶液,用高效液相制备色谱仪纯化,去除杂质峰,收集主成分峰;最后将上述纯化所得馏分经旋转蒸发浓缩,真空冷冻干燥,得黄酮类化合物72mg。
上述的制备色谱仪的条件如下:制备柱为XDB-C18(Φ9.2×250mm),柱温为40℃,流动相为甲醇∶0.1%醋酸水溶液=21∶29(体积比),流速为4.0mL/min。
实施例2:
称取60-80目龙血竭100g,加入2000mL石油醚进行索氏抽提,索氏抽提的温度为70℃,抽提时间为15小时,萃余物挥掉残留的石油醚,得石油醚萃余物A 97.2g;将上述萃余物A用250mL丙酮在室温下进行固液萃取,重复5次,合并萃取液,用旋转蒸发仪浓缩,45℃干燥,得丙酮萃取物B 86.7g;将上述萃取物B用250mL乙酸乙酯在室温下进行固液萃取,重复5次,将萃余物中残留的乙酸乙酯挥发干,得乙酸乙酯萃余物C 38.2g;取上述萃余物C用甲醇溶解后,加入等量硅胶混匀,挥发除去甲醇,将固体样品于研钵中研成粉状,过80目筛,上快速色谱系统FlashChromatography system型号为FlashMaster Personal快速硅胶柱(Φ4cm×15cm)进行层析,流速为8mL/min,乙酸乙酯洗脱5个柱体积后,用乙酸乙酯∶甲醇=9.5∶0.5,9∶1两种混合液先后各洗脱5个柱体积,收集乙酸乙酯∶甲醇=9∶1的流份,用旋转蒸发仪浓缩,40℃干燥,得红色固体D 871mg;取上述红色固体D放入三颈瓶中,加入250mL乙酸乙酯,搅拌并加热回流30min,趁热用砂芯漏斗减压过滤,再用30mL热乙酸乙酯分3次洗涤三颈瓶,洗液并入砂芯漏斗过滤,合并滤液,转入烧杯,待冷却至室温,4℃以下避光保存12小时后,烧杯中有红棕色粉末析出,先用砂芯漏斗减压过滤,后用冷乙酸乙酯15-30mL分3次洗涤析出物,取出该析出物,真空干燥,得红棕色粉状物质E 182mg;取上述红棕色粉状物质E用甲醇配成10mg/mL浓度的溶液,用高效液相制备色谱仪纯化,去除杂质峰,收集主成分峰;最后将上述纯化所得馏分经旋转蒸发浓缩,真空冷冻干燥,得黄酮类化合物81mg。
上述的制备色谱仪的条件如下:制备柱为XDB-C18(Φ9.2×250mm),柱温为40℃,流动相为甲醇∶0.1%醋酸水溶液=21∶29(体积比),流速为4.0mL/min。
上述两个实施例所得的本发明的黄酮类化合物分子式为C32H28O7,其外观为红棕色粉状物质,经UV-VIS、IR、NMR、MS波谱分析分子结构为:8-(3-(4-羟基-2-甲氧基苯基)-1-(4-羟基苯基)丙基)-2-(4-羟基苯基)-7-甲氧基-4H-苯并吡喃-4-酮,各波谱所得数据如下:
UV-VISλmax(MeOH)nm:285,346.5,389,511.5,524.5;IRσmax(KBr)cm-1:3443.55,1647.75,1609.71、1508.95、1455.34,2956.83;ESI-MS[M+H]+为525,EI m/z:269(C16H13O4 +),256(C16H16O3· +),239(C15H11O3 +),225(C14H9O3 +),197(C13H9O2 +),177(C10H9O3 +),153(C8H9O3 +),137(C8H9O2 +),121(C7H5O2 +),107(C7H7O+),94(C6H6O·+),77(C6H5 +);
1H-NMR1和3C-NMR(500MHz,氘代DMSO)数据见表3
表3 NMR(500MHz)1H和13C谱数据(溶剂为氘代DMSO)
由此确定结构式如下:
化合物确定为8-(3-(4-羟基-2-甲氧基苯基)-1-(4-羟基苯基)丙基)-2-(4-羟基苯基)-7-甲氧基-4H-苯并吡喃-4-酮,英文名:8-(3-(4-hydroxy-2-methoxyphenyl)-1-(4-hydroxyphenyl)propyl)-2-(4-hydroxyphenyl)-7-methoxy-4H-benzopyran-4-one,经SciFinder检索该化合物为新化合物。
该化合物有很强的α-葡萄糖苷酶的抑制活性和降血糖作用,可作为治疗糖尿病药物的组成成分,用于新药的开发。
Claims (3)
2.根据权利要求1的一种从龙血竭中分离纯化的黄酮类化合物的制备方法,其特征在于具有以下的工艺过程和步骤:
a.称取60-80目龙血竭粉料,加入1600-2000mL石油醚进行索氏抽提,索氏抽提的温度为70-80℃,抽提时间为8-15小时,萃余物挥发掉残留的石油醚,得石油醚萃余物A;
b.将上述萃余物A用250-400mL丙酮在室温下进行固液萃取,重复3-5次,合并萃取液,用旋转蒸发仪浓缩,40-50℃干燥,得丙酮萃取物B;
c.将上述萃取物B用250-400mL乙酸乙酯在室温下进行固液萃取,重复3-5次,将萃余物中残留的乙酸乙酯挥发干,得乙酸乙酯萃余物C;
d.取上述萃余物C用甲醇溶解后,加入等量硅胶混匀,挥发除去甲醇,将固体样品,放于研钵中研成粉状,过80目筛,上硅胶柱或快速硅胶柱进行层析,用乙酸乙酯洗脱2-5个柱体积后,用乙酸乙酯∶甲醇=9.5∶0.5,9∶1两种混合液先后各洗脱2-5个柱体积,收集乙酸乙酯∶甲醇=9∶1的流份,用旋转蒸发仪浓缩,40-50℃干燥,得红色固体D;
e.取上述红色固体D放入三颈瓶中,加入150-250mL乙酸乙酯,搅拌并加热回流15-30min,趁热用砂芯漏斗减压过滤,再用30mL热乙酸乙酯分3次洗涤三颈瓶,洗涤液并入砂芯漏斗过滤,合并滤液,转入烧杯,待冷却至室温,4℃以下避光保存10-15小时后,烧杯中有红棕色粉末析出,先用砂芯漏斗减压过滤,后用冷乙酸乙酯15-30mL分3次洗涤析出物,取出该析出物,真空干燥,得红棕色粉状物质E;
f.取上述红棕色粉状物质E用甲醇配成10mg/mL浓度的溶液,注入高效液相制备色谱仪纯化,弃去杂质峰,收集主成分峰;
g.将收集的主成份峰流份用旋转蒸发仪浓缩,真空冷冻干燥,得黄酮化合物8-(3-(4-羟基-2-甲氧基苯基)-1-(4-羟基苯基)丙基)-2-(4-羟基苯基)-7-甲氧基-4H-苯并吡喃-4-酮。
3.按权利要求2所述的一种从龙血竭中分离纯化的黄酮类化合物的制备方法,其特征在于所述的高效液相制备色谱的操作条件是:制备色谱柱为XDB-C18,规格为Φ9.2×250mm,柱温40℃,流动相为甲醇∶0.1%醋酸水溶液=21∶29的体积比配制成的混合液,流速v=4.0mL/min,检测波长280nm。
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Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
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---|---|---|---|---|
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CN1857570A (zh) * | 2006-03-30 | 2006-11-08 | 上海大学 | 中药龙血竭黄酮类提取物的制备工艺方法 |
Non-Patent Citations (4)
Title |
---|
Antus,Sandor,et al..Synthesis of melanervin from Melaleuca quinquenervia,thefirst naturally occurring compound with atriphenylmethane structure.Tetrahedron38 1.1982,38(1),133-137. * |
何兰等.广西血竭化学成分的研究(II).中国中药杂志28 12.2003,28(12),1195. * |
唐人九等.广西血竭石油醚和醋酸乙酯部位中的化学成分.中国中药杂志20 7.1995,20(7),421-423. |
唐人九等.广西血竭石油醚和醋酸乙酯部位中的化学成分.中国中药杂志20 7.1995,20(7),421-423. * |
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