CN101002836B - 白首乌总苷提取物在制药中的用途 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种白首乌总苷提取物在制备治疗或预防抑郁症的药物中的用途。该提取物是由萝藦科鹅绒藤属植物耳叶牛皮消、戟叶牛皮消或隔山牛皮消的块根提取制备的。与现有技术相比,本发明白首乌提取物的总苷部分有显著的抗抑郁作用,可用于制备治疗或预防抑郁症的药物;且其毒副作用较小,可长期服用,宜于在临床上进行推广应用。
Description
技术领域:本发明涉及一种白首乌总苷提取物的用途,属于药物技术领域。
背景技术:抑郁症属情感性精神障碍性疾病,1999年世界卫生组织(WHO)估计发病率占世界总人口的3%~5%。近年来抗抑郁药物的研究非常活跃。20世纪50年代就有了对抑郁症状有效的三环类抗抑郁药物(TCA),但因缺乏选择性而存在严重毒副作用,之后出现的单胺氧化酶抑制剂(MAO1)也因不可逆和无选择性而在应用上受到限制。1988年美国礼来公司推出选择性5-羟色胺(5-HT)重摄取抑制剂(SSRl)氟西汀(百忧解),才使抑郁症的治疗有了进展。
近年开发的抗抑郁药物品种多,包括氟西汀、氟伏沙明(nuvoxamine)、帕罗西汀(Pmoxetine)、舍曲林(sertraline)等。目前临床上使用的抗抑郁化学药,虽然较当初的三环类抗抑郁药物有很大的改进,但仍然存在着副作用较大的缺点。但由于抗抑郁药物为长期服用,在保证其疗效的前提下,副作用的大小直接决定了这个药物能否在临床上进行推广。即使是目前临床首推的氟西汀,也有其诱发自杀倾向的报道。如何保持抗抑郁药物的疗效,同时降低其副作用,或者选择一种疗效好、副作用小的新型抗抑郁药物一直是临床医生和科研工作者所面临的一个问题。
选用植物来源的天然产物,是寻找疗效独特、副作用相对较低的活性物质的有效途径之一。特别是从中药资源中寻找新的活性物质,或是寻找一些已知物质的新用途,正受到越来越多的重视。植物来源的抗抑郁药物,比较著名的有贯叶连翘提取物、卡瓦胡椒提取物等,很多传统中药也有很好的抗抑郁活性。
常用中药“白首乌”,其使用历史悠久,从唐代的本草著作开始便有记载。其主要来源植物有3种:萝藦科鹅绒藤属植物耳叶牛皮消Cynanchum auriculatum Royle ex Wight、戟叶牛皮消(泰山白首乌)Cynanchum bungei Decne和隔山牛皮消(隔山消)Cynanchumwilfordii(Maxim)Hook.F,中医理论中白首乌具有养肝益血、固肾益精、强筋健骨的的功效,并兼有健脾益气的功能,用于治疗失眠健忘、须发早白、筋骨不健、胸闷心痛以及消化不良等症。不同来源的白首乌均含有C21甾体苷等生物活性物质,从不同来源的白首乌药材中分离到多种不同结构的C21甾体苷类化合物(陈纪军等,云南植物研究,1990,12(2):197~210;张如松等,药学学报,2000,35(6):431-437)。同时,白首乌还含有多种营养成分及生物活性物质,近年来研究证明,不同来源的白首乌均有防癌抗癌、抗衰老、增强免疫及保护肝脏等功能,并且在治疗胃肠道疾病方面有较好的疗效(张卫东等,发明专 利申请公开说明书,CN1660865A)。但到目前为止,白首乌在治疗抑郁症方面的用途未见报道。
发明内容:
本发明的目的在于:提供一种白首乌总苷提取物的新用途。本发明白首乌提取物的总苷部分有显著的抗抑郁作用,可用于制备治疗或预防抑郁症的药物。
本发明是这样构成的:白首乌总苷提取物在制备治疗或预防抑郁症的药物中的用途。
所述的白首乌总苷提取物是由萝藦科鹅绒藤属植物耳叶牛皮消Cynanchum auriculatumRoyle ex Wight、戟叶牛皮消(泰山白首乌)Cynanchum bungei Decne或隔山牛皮消(隔山消)Cynanchum wilfordii(Maxim.)Hook.F,的块根提取制备的。
白首乌总苷提取物是这样制备的:取白首乌根茎,粉碎成颗粒,用醇或酮溶剂提取2~3次,合并提取液并加热浓缩回收溶剂;浓缩液用水稀释,然后用石油醚或汽油萃取2~3次,水层再用氯仿或乙酸乙酯或甲酸乙酯萃取2~3次,合并第二次萃取的溶剂部分,回收溶剂,即得。
具体地说,白首乌总苷提取物是这样制备的:取白首乌根茎,粉碎成小于10目的颗粒,用75%~80%醇或酮溶剂提取2~3次,每次加入溶剂的量须没过原料面,合并提取液并在50℃~80℃下加热浓缩回收溶剂;浓缩液用水稀释,浓缩液与水的重量比为1∶3~5,然后用石油醚或汽油萃取2~3次,水层再用氯仿或乙酸乙酯或甲酸乙酯萃取2~3次,合并第二次萃取的溶剂部分,回收溶剂,即得。
白首乌总苷提取物制备时所用的醇或酮溶剂为乙醇、甲醇或丙酮。
为了确保本发明的效果,申请人对所述白首乌总苷提取物进行了药理试验研究,具体如下:
1.急性毒性试验:
取小鼠120只,每组10只,灌胃给不同剂量的药物,连续观察7天,计数死亡小鼠。计算LD50,试验结果见表1。
表1急性毒性试验结果
组别 | LD50(mg/kg) |
CA | 1350 |
CB | 1120 |
CW | 950 |
注:LD50用CALC2.0版软件计算,CA为耳叶牛皮消总苷的简称、CB为戢叶牛皮消总苷的 简称,CW为隔山牛皮消总苷的简称。
2.小鼠强迫游泳试验
玻璃缸,直径14cm,高19cm,内放自来水,水深14cm,水温26℃。小鼠置入缸内,游15分钟后取出,自然晾干后,分为8组:正常对照组、丙咪嗪组及CA、CB、CW各自的20mg/kg、60mg/kg剂量组,在游泳后0、4.5和23.5小时后分别灌胃给药三次,最后一次给药半小时后再次进行强迫游泳,丙咪嗪组仅在第二次游泳前30分钟腹腔注射一次。用电子秒表记录5分钟内每只小鼠的游泳不动时间。试验采用盲法,观测者不知动物给药情况。
第二次强迫游泳前24、5、0.5小时连续3次灌胃CA、CB、CW后,CA、CB、CW各自的20mg、60mg剂量组小鼠的强迫游泳不动时间均缩短,其中CA、CB和CW的60mg/kg剂量组效果最为显著,与正常对照组比较具有统计学意义(P<0.05),且作用优于10mg/kg的丙咪嗪组。试验结果如表2所示。
表2对小鼠强迫游泳不动时间的影响(X±SE)
组别 | 剂量(mg/kg) | 不动时间(秒) | 缩短率(%) |
正常对照 | 88.2±5.5 | ||
丙咪嗪 | 10 | 65.1±2.7 | 26.2 |
CA | 20 | 57.7±3.3 | 36.8 |
CA | 60 | 32.5±2.0* | 63.2* |
CB | 20 | 59.5±1.2 | 32.5 |
CB | 60 | 31.4±2.5* | 64.4* |
CW | 20 | 55.2±2.5 | 37.4 |
CW | 60 | 30.5±4.2 | 65.4* |
与对照组相比,*P<0.05。
3.小鼠悬尾试验
将动物随机分为8组:正常对照组、丙咪嗪组、CA、CB和CW各自的20mg/kg、60mg/kg剂量组(通称给药组)。给药组灌胃给药4次,丙咪嗪ip给药一次,30分钟后,用胶布将小鼠在距尾尖1cm处固定,使其头朝下,距地面50cm。小鼠悬尾6分钟,记录后4分钟内不动时间。
给药组灌服30分钟后,CA、CB和CW的20mg/kg和60mg/kg剂量组小鼠的悬尾不动时间减少,与正常对照组比较均有统计学意义,试验结果见表3,表明能显著缩短小鼠悬尾不动时间。
表3对小鼠悬尾不动时间的影响(X±SE)
组别 | 剂量(mg/kg) | 不动时间(秒) | 缩短率(%) |
正常对照 | 130.1±3.5 | ||
丙咪嗪 | 10 | 30.5±0.5** | 76.6 |
CA | 20 | 60.2±2.3* | 53.7 |
CA | 60 | 53.8±3.7* | 58.6 |
CB | 20 | 62.1±4.3* | 52.3 |
CB | 60 | 55.5±1.2* | 57.3 |
CW | 20 | 57.6±3.4* | 55.7 |
CW | 60 | 48.5±2.8** | 62.7 |
与对照组相比,*P<0.05,**P<0.01。
4.小鼠自由活动试验
小鼠被灌胃不同剂量的CA、CB、CW组后30分钟,依次放入小鼠自主活动箱,该仪器由计算机自动记录动物活动次数,共有四个活动室,每次每箱放两只动物,记录5分钟内小鼠活动次数。试验结果与正常组对比,一次性灌胃给CA、CB、CW20mg/kg、60mg/kg、180mg/kg后,小鼠自主活动数均无显著差异,说明对动物无明显兴奋性,在药理试验3、4中反应的结果是其抗抑郁效果的表现。试验结果见表4。
表4CA、CB、CW对小鼠5分钟内活动次数的影响(X±SD)
组别 | 剂量(mg/kg) | 不动时间(秒) |
正常对照 | 210.5±2.5 | |
CA | 20 | 220.5±0.5 |
CA | 60 | 216.8±3.6 |
CA | 180 | 205.6±0.1 |
CB | 20 | 225.1±0.0 |
CB | 60 | 220.5±5.0 |
CB | 180 | 207.8±0.3 |
CW | 20 | 218.5±2.1 |
CW | 60 | 220.5±5.5 |
CW | 180 | 222.6±2.0 |
[0034] 5.利血平拮抗试验:
取小鼠随机分成12组,每组12只。每鼠皮下注射利血平注射液3mg/kg,同时给予相应药物,1.5小时后分别观测上眼睑下垂、运动不能的动物只数。
其中:上眼睑下垂:观察30秒内眼睑至少闭合一半的动物个数。运动不能:将小鼠放入直径7.5cm的圆形白纸中央,观察15秒内仍呆在圈内的动物个数。试验结果见表5。
表5对利血平所致眼睑下垂、运动不能作用的影响(x±s)
组别 | 剂量(mg/kg) | 眼睑下垂(只) | 对抗百分率(%) | 运动不能(只) | 对抗百分率(%) |
对照组 | 10/12 | 16.7 | 7/12 | 41.7 | |
丙咪嗪 | 10 | 3/12 | 75.0** | 10/12 | 16.7 |
阿米替林 | 70 | 2/12 | 83.3** | 10/12 | 16.7 |
CA | 60 | 6/12 | 60.0* | 6/12 | 50.0 |
CA | 20 | 7/12 | 41.7 | 7/12 | 41.7 |
CA | 10 | 8/12 | 33.3 | 11/12 | 8.33 |
CB | 60 | 5/12 | 58.3* | 7/12 | 41.7 |
CB | 20 | 8/12 | 33.3 | 8/12 | 33.3 |
CB | 10 | 8/12 | 33.3 | 11/12 | 8.3 |
CW | 60 | 5/12 | 58.3* | 6/12 | 50.0 |
CW | 20 | 7/12 | 41.7 | 7/12 | 41.7 |
CW | 10 | 8/12 | 33.3 | 10/12 | 16.7 |
与对照组相比,*P<0.05,**P<0.01;n=12。
在对抗利血平模型上,60mg/kg剂量出现明显的对抗眼睑下垂效应,表明的抗抑郁作用机制与相关神经递质有关。对运动不能的小鼠未表现出明显的作用,阳性药也未表现出明显的效应。
结论:通过以上的试验结果表明,本发明白首乌总苷提取物的毒性较小,能明显缩短小鼠的强迫游泳不动时间,减少小鼠的悬尾不动时间,对动物无明显兴奋性,对利血平所致眼睑下垂有明显的对抗效应,具有良好的抗抑郁效果。
与现有技术相比,本发明白首乌提取物的总苷部分有显著的抗抑郁作用,可用于制备治疗或预防抑郁症的药物;且其毒副作用较小,可长期服用,宜于在临床上进行推广应用。
具体实施方式:
通过下面给出的具体实施例可以进一步清楚地了解本发明,但不是对本发明内容的限定
本发明的实施例1:白首乌总苷提取物的制备1:
取耳叶牛皮消块根10kg,粉碎成小于10目的颗粒,用80%乙醇提取三次,每次加入溶剂的量以没过原料面为宜,合并提取液,在70℃下加热浓缩回收溶剂,至无明显的溶剂气味。浓缩液用水稀释,浓缩液与水的重量比为1∶4,然后用石油醚萃取三次,水层再用氯仿萃取三次,合并氯仿部分,回收氯仿,得浅黄色粉末211克,得率为2.11%。所得浅黄色粉末为耳叶牛皮消总苷,以告达廷苷元(caudatin)为对照品,参照药品标准(WS3-B-2343-97)方法,测得总苷含量为70.5%。
Lieberman-Burchard和Keller-Killiani反应均呈阳性,表明总苷为含2-去氧糖的甾体化合物。
本发明的实施例2:白首乌总苷提取物的制备2:
取戢叶牛皮消块根10kg,粉碎成小于10目的颗粒,用75%甲醇提取三次,每次加入溶剂的量以没过原料面为宜,合并提取液,在50℃下加热浓缩回收溶剂,至无明显的溶剂气味。浓缩液用水稀释,浓缩液与水的重量比为1∶3,然后用汽油萃取三次,水层再用乙酸乙酯萃取三次,合并乙酸乙酯部分,回收乙酸乙酯,得浅黄色粉末185克,得率为1.85%。所得浅黄色粉末为戢叶牛皮消总苷。以告达廷苷元为对照品,参照药品标准(WS3-B-2343-97)方法,测得总苷含量为72.4%。
Lieberman-Burchard和Keller-Killiani反应均呈阳性,表明总苷为含2-去氧糖的甾体化合物。
本发明的实施例3:白首乌总苷提取物的制备3:
取隔山牛皮消块根10kg,粉碎,用80%丙酮提取二次,每次加入溶剂的量以没过原料面为宜,合并提取液,在80℃下加热浓缩回收溶剂,至无明显的溶剂气味。浓缩液用水稀释,浓缩液与水的重量比为1∶5,然后用石油醚萃取二次,水层再用甲酸乙酯萃取二次,合并甲酸乙酯部分,回收甲酸乙酯,得浅黄色粉末205克,得率为2.05%。所得浅黄色粉末为隔山牛皮消总苷。以告达廷苷元为对照品,参照药品标准(WS3-B-2343-97)方法,测得总苷含量为73.6%。
Lieberman-Burchard和Keller-Killiani反应均呈阳性,表明总苷为含2-去氧糖的甾体化合物。
本发明的实施例4:抗抑郁症的药物的制备1:
将耳叶牛皮消总苷100g、淀粉60g、糊精5g混合均匀,加入10%淀粉浆制软材,用14目 尼龙筛网制粒,60~70℃通风干燥,16目筛整粒,加入硬脂酸镁1.5g、羧甲基淀粉钠5g混匀,压制成1000片,包衣,即得抗抑郁症的片剂,每片含耳叶牛皮消总苷100mg。
本发明的实施例5:抗抑郁症的药物的制备2:
取耳叶牛皮消总苷100g,加入淀粉50g、硬脂酸镁2g混匀,直接用全自动胶囊填充机填充,制成1000粒,抛光,即得抗抑郁症的胶囊。每粒含耳叶牛皮消总苷100mg。
本发明的实施例6:抗抑郁症的药物的制备3:
取耳叶牛皮消总苷20g,投入30g熔融的聚乙二醇6000中,搅拌至溶解,转移至贮液瓶中,密闭并保温在80~90℃,调节滴丸机液滴定量阀门,由上往下滴入10~15℃的液状石蜡中,滴制1000粒,将形成的滴丸沥干并擦除液状石蜡,干燥,即得抗抑郁症的滴丸。每粒含耳叶牛皮消总苷20mg。
本发明的实施例7:抗抑郁症的药物的制备4:
取耳叶牛皮消总苷20g,溶于蒸馏水500ml中,加入蜂蜜100g、蔗糖10g、苯甲酸钠2g,加热至80℃~90℃,搅拌使溶解,保温30min,滤过,滤液加水稀释至1000ml,搅匀,灌封,每支10ml,灭菌,即得抗抑郁症的口服液。
本发明的实施例8:抗抑郁症的药物的制备5:
取耳叶牛皮消总苷1份、糊精4份及乙醇适量,混匀,过10目筛制成颗粒,于60℃~70℃干燥,整粒,分装,即得抗抑郁症的颗粒剂,每包重1000mg。
本发明的实施例9:抗抑郁症的药物的制备6:
取耳叶牛皮消总苷20g,加注射用水适量溶解,加配置量的0.02%活性炭搅拌5~10min,滤过,滤液稀释至5000ml,加氯化钠调节渗透压至等渗,调pH至6.5~8.0,超滤,灌封成1000支,即得抗抑郁症的注射剂。每支5ml含耳叶牛皮消总苷20mg,肌肉注射用。
本发明的实施例10:抗抑郁症的药物的制备7:
取耳叶牛皮消总苷50g,加注射用水使溶解,加配制量的0.02%活性炭搅拌5~10min,滤过,滤液加水稀释至1000ml,调pH至6.5~8.0,超滤,喷雾干燥,干粉无菌分装,即得抗抑郁症的注射用粉针剂。每支20mg,肌肉注射用。
本发明的实施例11:抗抑郁症的药物的制备8:
无菌条件下取耳叶牛皮消总苷20g,置于无菌容器内,加注射用水1000ml,调节pH至6.5~8.0,加配制量的0.02%活性炭搅拌5~10min,用无菌抽滤漏斗过滤,再用灭菌垂熔漏斗精滤或超滤,滤液检验合格后分装于2ml安瓿中,低温冷冻干燥,无菌熔封,即得抗抑郁症的粉针剂,每支含耳叶牛皮消总苷20mg。临用前加注射用水适量使之溶解,肌肉注射用。
Claims (4)
1.白首乌总苷提取物在制备治疗或预防抑郁症的药物中的用途;所述的白首乌总苷提取物是由萝藦科鹅绒藤属植物耳叶牛皮消Cynanchum auriculatum Royle exWiaht、戟叶牛皮消Cynanchum bungei Decne或隔山牛皮消Cynanchum wilfordii Hook.F,的块根提取制备的。
2.按照权利要求1所述白首乌总苷提取物的用途,其特征在于:白首乌总苷提取物是这样制备的:取白首乌根茎,粉碎成颗粒,用醇或酮溶剂提取2~3次,合并提取液并加热浓缩回收溶剂;浓缩液用水稀释,然后用石油醚或汽油萃取2~3次,水层再用氯仿或乙酸乙酯或甲酸乙酯萃取2~3次,合并第二次萃取的溶剂部分,回收溶剂,即得。
3.按照权利要求2所述白首乌总苷提取物的用途,其特征在于:白首乌总苷提取物是这样制备的:取白首乌根茎,粉碎成小于10目的颗粒,用75%~80%醇或酮溶剂提取2~3次,每次加入溶剂的量须没过原料面,合并提取液并在50℃~80℃下加热浓缩回收溶剂;浓缩液用水稀释,浓缩液与水的重量比为1∶3~5,然后用石油醚或汽油萃取2~3次,水层再用氯仿或乙酸乙酯或甲酸乙酯萃取2~3次,合并第二次萃取的溶剂部分,回收溶剂,即得。
4.按照权利要求3所述白首乌总苷提取物的用途,其特征在于:白首乌总苷提取物制备时所用的醇或酮溶剂为乙醇、甲醇或丙酮。
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