CN100571699C

CN100571699C - 用于治疗癌的硒吩化合物及包含其的医药组合物

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Publication number: CN100571699C
Application number: CNB2005101320741A
Authority: CN
Inventors: 陈思丰; 谢琬萍; 洪宝春; 邹先岩; 庄声宏; 李育真; 许碧真; 陈世上; 黄礼源; 张锦哲; 徐证礼; 黄清玮
Original assignee: Development Center for Biotechnology
Current assignee: Development Center for Biotechnology
Priority date: 2005-12-21
Filing date: 2005-12-21
Publication date: 2009-12-23
Anticipated expiration: 2025-12-21
Also published as: CN1985818A

Abstract

本发明提供一种用来治疗肝癌的硒吩化合物以及包含其的医药组合物。该用于治疗癌的硒吩化合物具有式(I)所述的结构，其中，每一R₁及R₂为彼此独立地，可为H、含1至10个碳的烷基、含3至20个碳的环烷基、芳基、杂芳基、或(见右下式)；X可为Se、S、O、或NR_b；而每一R₃、R₄、R₅及R₆为彼此独立地，可为H、含1至10个碳的烷基、含3至20个碳的环烷基、芳基、或杂芳基；此外，R_a及R_b为彼此独立地，可为H、或含1至10个碳的烷基。

Description

用于治疗癌的硒吩化合物及包含其的医药组合物

技术领域

本发明涉及一种用于治疗癌的硒吩化合物，特别涉及一种治疗肝癌的硒吩化合物及包含其的医药组合物。

背景技术

硒吩(Selenophene)化合物为包含硒(selenium)的杂环化合物，且硒吩(Selenophene)化合物在结构上与天然产生的噻吩(thiophene)、呋喃(furan)、吡咯(pyrrole)等化合物相似。近年来，硒吩(Selenophene)化合物由于其在治疗癌症上的效能，使得硒吩化合物被广泛且积极地研究着。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的之一在于提供具有特殊结构的硒吩(Selenophene)化合物，而该硒吩化合物在肝癌的治疗上具有特别的效能。该硒吩化合物的使用方法可包括对一患部施与一有效剂量的上述硒吩化合物。

本发明的另一目的则在于提供一种用来治疗肝癌的医药组合物，其具有上述的硒吩化合物及一医药上可接受的载剂。

即，本发明如下所述。

(1)一种治疗肝癌的医药组合物，其包括具有式(I)所述的硒吩化合物及一医药上可接受的载剂，

式(I)

其中，每一R₁及R₂为彼此独立地，可为H、含1至10个碳的烷基、含3至20个碳的环烷基、芳基、杂芳基、或

X可为Se、S、O、或NR_b；而每一R₃、R₄、R₅及R₆为彼此独立地，可为H、含1至10个碳的烷基、含3至20个碳的环烷基、芳基、或杂芳基；此外，R_a及R_b为彼此独立地，可为H、或含1至10个碳的烷基。

在本发明的一较佳实施例中，该具有式(I)的硒吩化合物，其R₁及R₂之一为而另一者则为H、-CH₂OH、或-CHO；Y可为Se、S、O、或NR_b1；R_a1、R_a2、R_a3为彼此独立地，可为H、含1至10个碳的烷基、含3至20个碳的环烷基、芳基、杂芳基或

X可为Se、S、O、或NR_b2；而每一R₃、R₄、R₅及R₆为彼此独立地，可为H、或-CH₂OH；R_b1、R_b2及R_a4为彼此独立地，可为H、或含1至10个碳的烷基。此外，R_a1、R_a2、R_a3为彼此独立地，可例如为H、-CH₂OH、-CHO、或

在本发明的其他较佳实施例中，该具有式(I)的硒吩化合物，其X的定义同上所述，而R₁、R₂、R₃、R₄、R₅及R₆为彼此独立地，可为H或-CH₂OH。

即，本发明还如下所述。

(2)如(1)所述的治疗肝癌的医药组合物，其中R₁及R₂之一为

Y为Se、S、O、或NR_b1；R_a1、R_a2、R_a3为彼此独立地，且为H、含1至10个碳的烷基、含3至20个碳的环烷基、芳基、杂芳基或

R_b1及R_a4为彼此独立地，且为H、或含1至10个碳的烷基。

(3)如(2)所述的治疗肝癌的医药组合物，其中Y为S。

(4)如(3)所述的治疗肝癌的医药组合物，其中X为S或NCH₃。

(5)如(4)所述的治疗肝癌的医药组合物，其中R₁及R₂为彼此独立地，且为H或CH₂OH。

(6)如(5)所述的治疗肝癌的医药组合物，其中R₃、R₄、R₅及R₆为彼此独立地，且为H或CH₂OH。

(7)如(6)所述的治疗肝癌的医药组合物，其中R_a1、R_a2、R_a3为彼此独立地，且为H、CH₂OH、CHO、或

(8)如(7)所述的治疗肝癌的医药组合物，其中该具有式(I)的硒吩化合物为

(9)如(2)所述的治疗肝癌的医药组合物，其中Y为Se。

(10)如(9)所述的治疗肝癌的医药组合物，其中X为S或NCH₃。

(11)如(10)所述的治疗肝癌的医药组合物，其中R₁及R₂为彼此独立地，且为H或CH₂OH。

(12)如(11)所述的治疗肝癌的医药组合物，其中R₃、R₄、R₅及R₆为彼此独立地，且为H或CH₂OH。

(13)如(12)所述的治疗肝癌的医药组合物，R_a1、R_a2、R_a3为彼此独立地，且为H或CH₂OH。

(14)如(13)所述的治疗肝癌的医药组合物，其中该具有式(I)的硒吩化合物为

(15)如(2)所述的治疗肝癌的医药组合物，其中Y为NH₃。

(16)如(15)项所述的治疗肝癌的医药组合物，其中X为S。

(17)如(16)所述的治疗肝癌的医药组合物，其中R₁及R₂为CH₂OH。

(18)如(17)所述的治疗肝癌的医药组合物，其中R₃、R₄、R₅及R₆为H。

(19)如(12)所述的治疗肝癌的医药组合物，R_a1、R_a2、R_a3为H。

(20)如(1)所述的治疗肝癌的医药组合物，其中R₁及R₂为彼此独立地，且为H或CH₂OH。

(21)如(20)所述的治疗肝癌的医药组合物，其中X为S或Se。

(22)如(21)所述的治疗肝癌的医药组合物，其中R₃、R₄、R₅及R₆为彼此独立地，且为H或CH₂OH。

(23)如(22)所述的治疗肝癌的医药组合物，其中该具有式(I)的硒吩化合物为

本发明的治疗肝癌的医药组合物具有抑制肝癌细胞增生的功能，可用于治疗肝癌。

具体实施方式

以下通过数个实施例及比较实施例并配合所附图式，以更进一步说明本发明的方法、特征及优点，但并非用来限制本发明的保护范围，本发明的保护范围应以本申请的权利要求书所界定的范围为准。

为进一步阐明本发明的技术特征，以下列出数个符合本发明所述的具有式(I)的硒吩化合物：

化合物1 化合物2 化合物3

化合物4 化合物5 化合物6

化合物7 化合物8 化合物9

化合物10 化合物11 化合物12

化合物13 化合物14 化合物15

化合物16 化合物17 化合物18

化合物19 化合物20 化合物21

化合物22 化合物23

本发明所述的可用来治疗肝癌的硒吩化合物，是指当一患有肝癌、具有肝癌症状、或具有肝癌倾向的对象(subject)被施与至少一种本发明所述的硒吩化合物，可达到治疗的效果，所谓的/治疗的效果是例如治愈、缓和、影响、改善或防止肝癌或其症状及倾向。

而本发明所述的“有效量”是指上述至少一种硒吩化合物对一患部可达到有效治疗效果所需要的用量。本发明所述的“烷基”是指饱合或不饱含、直链或分枝的非芳香性碳氢官能基，例如-CH₃、-CH₂-、-CH₂CHCH-、或分枝的-C₃H₇。本发明所述的“环烷基”是指饱合或不饱合的非芳香性环状碳氢官能基，例如环已基或3-环己烯。本发明所述的“杂环烷基(heterocycloalkyl)”是指具有至少一杂原子(例如氧、氮、或硫)于该环上的饱含或不饱合非芳香性环状官能基，例如4-四氢吡喃基(4-tetrahydropyranyl)或4-吡喃基(4-pyranyl)。本发明所述的“芳香基”是指具有至少一芳香环的碳氢官能基，例如具有苯基、亚苯基(phenylene)、萘基(naphthyl)、亚萘基(naphthylene)、芘基(pyrenyl)、蒽基(anthryl)、或菲基(phenanthryl)。本发明所述的“杂芳基(heteroaryl)”是指具有至少一杂原子(例如氧、氮、或硫)于一芳香环的官能基，例如：呋喃基(furyl)、亚呋喃基(furylene)、芴基(fluorenyl)、吡咯基(pyrrolyl)、噻吩基(thienyl)、噁唑基(oxazolyl)、咪唑基(imidazolyl)、噻唑基(thiazolyl)、吡啶基(pyridyl)、嘧啶基(pyrimidinyl)、喹唑啉基(quinazolinyl)、喹啉基(quinolyl)、异喹啉基(isoquinolyl)、或吲哚基(indolyl)。

此外，本发明所述的烷基、环烷基、杂环烷基、芳香基、或杂芳基其上的氢也可被其他的取代基所取代。该环烷基、杂环烷基、芳香基或杂芳基可能的取代基可例如为：含1至10个碳的烷基、含2至10个碳的烯基、含2至10个碳的炔基、含3至8个碳的环烷基、含5至8个碳的环烯基、含1至10个碳的烷氧基、芳基、芳氧基、杂芳基、杂芳氧基、胺基、含1至10个碳的烷胺基、含2至20个碳的二烷基胺基、芳胺基(arylamino)、二芳基胺基(diarylamino)、羟基、卤素、硫醇、含1至10个碳的烷硫基、芳硫基、含1至10个碳的烷基磺酰基、具有芳基的磺酰基、具有芳基的胺基、氨酰基(aminoacyl)、脒基(amidino)、胍基(guanidine)、脲基(ureido)、氰基(cyano)、硝基(nitro)、酰基(acyl)、酰氧基(acyloxy)、羰基、或羰基酯基。另一方面，该烷基可能的取代基可例如为以上所述的取代基除了含1至10个碳的烷基、含2至10个碳的烯基、或含2至10个碳的炔基。此外，本发明所述的环烷基、杂环烷基、芳香基、或杂芳基可为稠环的形式。

根据本发明的某一较佳实施例，本发明所述的哂吩化合物是选自由上述化合物1-10、12-16、19、21、23及其所组成的群中。

此外，本发明的另一较佳实施例提供一种医药组合物，该医药组合物包含具有一有效量的至少一种本发明所述的哂吩化合物及一医药上可接受的载剂。

本发明所述的哂吩化合物是指该哂吩化合物本身及该哂吩化合物的盐类、前体药物(prodrug)、或溶剂化物(solvate)。所谓的哂吩化合物盐类，可例如为带阳离子基团(例如铵)的哂吩化合物与一阴离子结合而成的盐类，该阴离子可例如为氯离子、溴离子、碘离子、硫酸根离子、硝酸根离子、磷酸根离子、柠檬酸根离子、甲基磺酸根离子(methanesulfonate)、三氟醋酸根离子(trifluoroacetate)或醋酸根离子。同样地，该哂吩化合物盐类，也可例如为带阴离子基团(例如羧酸离子)的哂吩化合物与一阳离子结合而成的盐类，该阳离子可例如为钠离子、钾离子、镁离子、钙离子、或是包含铵的阳离子(例如四甲基铵离子)，此外上述该哂吩化合物盐类也可为具有四级铵的盐类。

上述哂吩化合物前体药物可包含酯或其它医药上可接受的衍生物，当施予该前体药物于一对象时可有效释放出有活性的哂吩化合物。

该哂吩化合物的溶剂化物(solvate)是指至少一种本发明所述的哂吩化合物与一医药上可使用的溶剂所形成的复合体，其中该医药上可使用的溶剂包括水、乙醇、异丙醇、乙酸乙酯、醋酸、或乙醇胺(ethanolamine)。

在结构上，硒吩化合物与天然产生的噻吩(thiophene)、呋喃(furan)、吡咯(pyrrole)等化合物十分相似。

本发明所述的哂吩化合物可以由已知的合成方法所制备而成，例如以下所列出的反应流程(I)～(IV)。经由该反应流程(I)～(IV)所述的合成方式，可获得本发明上述的哂吩化合物1～23，而该哂吩化合物1～23的实际制备方式分别详述于实施例1～23。

反应流程(I)

反应流程(II)

反应流程(III)

反应流程(IV)

请参照反应流程1，一具有两个五元环(即噻吩、吡咯、及硒吩环)的硒吩化合物可经由将一具有卤素取代的第一五元环化合物与一具有三甲基锡烷基(trimethylstannyl)取代的第二五元环化合物进行反应而得。请参照反应流程2，将反应流程1所得的硒吩化合物进一步卤素化，并与一具有三甲基锡烷基(trimethylstannyl)取代的第三五元环化合物进行与上述相同的反应，可得一由三个五元环构成的硒吩化合物。请参照反应流程3，一具有三个五元环的硒吩化合物也可经由将一具有双三甲基锡烷基(trimethylstannyl)取代的五元环化合物与相同或不同的具有卤素取代的五元环化合物同时进行反应而得。请参照反应流程4，一具有三个五元环的硒吩化合物也可通过适当的反应，以将醛基或甲氧基等官能基导入该三个五元环的硒吩化合物。

反应所得的硒吩化合物可以进一步通过管柱层析、高压液体层析、或再结晶等方法进一步纯化。

本发明主要提供可用于治疗癌症的硒吩化合物，因此对于本发明所述的硒吩化合物的制备方法没有限定。本案于发明内容中所述及的硒吩化合物可利用其它合适的起始物，并利用上述或其它已知的合成途径与方法来制备。

本发明上述的反应流程，也可在其任一步骤之前或之后还包含其它的反应，导入或移除保护基，以致使顺利合成本发明所述的硒吩化合物。此外，不同的反应步骤也可在不影响最终硒吩产物的前提下调换反应的顺序。用于硒吩化合物的化学合成方式及保护基形成/移除方法为本领域技术人员所熟知，例如可见于R.Larock所著的“Comprehensive Organic Transformations”(由VCH于1989印制、T.W.Greene及P.G.M.Wuts所著的“Protective Groups in Organic Synthesis”(第二版，由JohnWiley and Sons发行(1991))、L.Fieser及M.Fieser所著“Fieserand Fieser′s Reagents for Organic Synthesis”(由John Wileyand Sons于1994发行)、以及L.Paquette，et.al.，所著“Encyclopedia of Reagents for Organic Synthesis”(由JohnWiley and Sons于1995发行)。

本发明所述的硒吩化合物也可具有非芳香的双键及一或一以上个不对称中心，因此该硒吩化合物可为消旋混合物(racemates)、单一对映异构体、各别的非对映异构体、非对映异构混合物、或cis-/trans-同分异构体。

本发明的较佳实施例还提供一种医药组合物，该医药组合物包含具有一有效量的至少一种本发明所述的哂吩化合物及一医药上可接受的载剂。此外，本发明的其它较佳实例也提供一种治疗癌的方法包括对一肝癌患者施予一有效量的至少一种本发明所述的哂吩化合物。该哂吩化合物的有效剂量，如熟悉本项技术的人员所了解，可依据治疗方式、施予途径、辅助药剂的使用及配合使用的治疗方式，作调整及变动。

依据本发明的较佳实施例，该医药组合物可包含一种或一种以上的硒吩化合物，而该一种或一种以上的硒吩化合物可以通过口服方式、非口服方式、鼻吸入、直肠吸收、局部施予或粘膜吸收等方式施予一患者。在此，所谓的非口服方式是指皮下(subcutaneous)注射，内皮(intracutaneous)注射，静脉(intravenous)注射、肌肉(intramuscular)注射、关节内(intraarticular)注射、动脉(intraarterial)注射、滑膜内(intrasynovial)注射、胸骨内(intrasternal)注射、脊髓内(intrathecal)注射、病灶内(intralesional)注射、颅内(intracranial)注射、或者其他任何适当的注入技术。

一包含硒吩化合物的无菌可供注射的组合物可以是一溶液或是一悬浮液，并以一药学上可接受的无毒稀释剂或溶剂(例如1，3-丁二醇(1，3-butanediol))作为载剂。此外，该载剂也可为甘露醇(mannitol)、水、林格氏注射液(Ringer′s solution)、或生理食盐水注射液(isotonic sodium chloride solution)。再者，固定油(fixed oil)为熟知可作为溶液或悬浮液的媒介。脂肪酸，例如应用在注射组合物制备上的油酸及其甘油脂衍生物，为自然且在药学上可使用的油，橄榄油或蓖麻油都是属于这一类，尤其是经聚乙醇化之后。

由包含上述油类的溶液或悬浮液更可进一步包含一具有长链的醇类稀释剂或分散剂、羧甲基纤维素(carboxymethylcellulose)、或其它相似的分散剂。其它普遍使用的界面活性剂，例如吐温类(Tweens)或司盘类(Spans)、其它类似的乳化剂、或生物有益性增进剂也可在发明中被使用，以用来制作医药上可接受的固体(药碇)、液体、或其它型式的药剂。根据本发明，一口服吸收的组合物可以是任何可服用的药剂型式，例如：胶囊、片剂、乳液、悬浮液、分散液、或是溶液。一般常用来作为片剂的载剂可为乳糖及淀粉，此外添加适当的润滑剂，例如硬脂酸镁盐。此外，乳糖及干淀粉也可用来作为可供口服的胶囊。

若该口服吸收的组合物为一乳液或悬浮液的型式时，有效成分(即硒吩化合物)可以悬浮或溶解于一乳化或悬浮剂中，而呈油状。此外，甘味剂、调味剂，或着色剂可视需要而添加。

根据本发明，一具有本发明所述的硒吩化合物的鼻用气化喷雾剂或鼻用吸入剂可以依据熟知的相关技术而被制备。举例来说，该鼻吸收的药剂可以被制备成一食盐水，也可视需要额外添加使用苯甲醇、其它适当的防腐剂、吸收促进剂、生物有益性增进剂、碳氟化合物、或其它熟知的溶剂或分散剂。本发明所述的具有一种或一种以上硒吩化合物的组合物，也可被制被成一栓剂，以利直肠吸收并且被执行以栓剂的形式直肠投药。

此外，该医药组合物所使用的载剂必需与本发明所述的硒吩化合物兼容，意即，该载剂不会与该硒吩化合物有产生任何有害的反应或产物。在本发明一较佳实施例中，该载剂能进一步稳定该硒吩化合物。一或一以上的增溶剂可被利用作为药用的赋形剂以传送该硒吩化合物。其它可作为载剂的例子包括：胶质氧化硅、硬脂酸镁盐、纤维素，钠十二烷基硫化物，或是D&C Yellow#10。

硒吩化合物的制备

以下举实施例1～23，用以说明本发明所述的硒吩化合物及其制备方法，并提供其化学结构及分子量的相关分析资料，以期使本发明能更为清楚：

实施例1

硒吩化合物1的制备：

硒吩化合物1

首先，以1ml的THF(四氢呋喃)溶解0.08ml(0.72mmol)的N-甲基哌嗪(N-methylpiperazine)。接着，在0℃下将0.4ml的正丁基锂(n-butyl lithium，溶于己烷中，浓度为1.6M(0.64mmol))加入上述溶液中。在持续搅动15分钟后，将0.23g(0.64mmol)的2，5-二-硒吩-2-基-噻吩-3-甲醛(2，5-di-selenophen-2-yl-thiophene-3-carbaldehyde)(溶于7ml的THF)加入，并在0℃下继续搅拌15分钟。接着，将0.6ml(4.0mmol)TMEDA(四甲基乙二胺)及2.5ml(4.0mmol)正丁基锂(溶于己烷中)加入上述溶液中。接着，将上述混合物在0℃搅拌两小时后，在-78℃下加入0.8ml(10mmol)的DMF(二甲基甲酰胺)。接着，将上述混合物在两小时间缓慢回温至室温。接着，加入冰水并以乙酸乙酯萃取。接着，收集该有机层的萃取液，并以盐水洗清并浓缩。所得的粗产物以管柱层析法(充填硅胶，并以乙酸乙酯与己烷(3∶1)作为冲提液)纯化，得到81mg的三醛基的化合物，产率为30％。

接着，以20ml的THF/甲醇(比例为1∶1)溶解24mg(0.05mmol)的上述三醛基化合物。接着，在0℃下加入过量NaBH₄于上述溶液中。在搅拌一小时后，加入乙酸乙酯稀释。接着，分离该有机层，并以盐水清洗并浓缩。所得的粗产物以管柱层析法(充填硅胶，并以乙酸乙酯与己烷(3∶1)作为冲提液)纯化，得到18mg的硒吩化合物1，产率为30％。

该硒吩化合物1的NMR光谱及质谱分析如下：

¹H-NMR(500MHz，丙酮-d₆)：δ7.28(d，1H)，7.25(d，IH)，7.23(s，1H)，7.13(d，1H)，7.06(d，1H)，4.83(m，4H)，4.67(d，2H)，4.65(d，2H)，4.32(d，1H)。

LC-MS质谱分析：419(40％)，417(M⁺+1-18，100％)，415(98％)，413(50％)，411(20％)。

实施例2

硒吩化合物2的制备：

硒吩化合物2

以如实施例1的相同方式进行，但以(2-硒吩-2-基)-(5-噻吩-2-基-)N-甲基-吡咯-3-甲醛((2-selenophen-2-yl)-(5-thiophene-2-)-N-methyl-pyrrole-3-carbaldehyde)作为起始物。

硒吩化合物2的NMR光谱分析如下：

¹H-NMR(500MHz，丙酮-d₆)：δ7.10(m，2H)，7.00(m，2H)，6.36(s，1H)，4.80(m，4H)，4.42(m，2H)，3.65(s，3H)。

实施例3

硒吩化合物3的制备：

硒吩化合物3

以如实施例1的相同方式进行，但以2，5-二-硒吩-2-基-N-甲基-吡咯-3-甲醛(2，5-di-selenophen-2-yl-N-methyl-pyrrole-3-carbaldehyde)作为起始物。

硒吩化合物3的NMR光谱分析如下：

¹H-NMR(500MHz，丙酮-d₆)：δ7.12(m，4H)，6.36(s，1H)，4.82(m，4H)，4.43(d，2H)，3.67(s，3H)。

实施例4

硒吩化合物4：

硒吩化合物4

硒吩化合物4的NMR光谱分析如下：

¹H-NMR(500MHz，丙酮-d₆)：δ8.26(q，1H)，7.38(q，1H)，7.31(q，1H)，7.11(m，2H)，6.36(s，1H)，4.80(s，2H)，4.42(s，2H)，3.66(s，3H)。

实施例5

硒吩化合物5的制备：

硒吩化合物5

首先，以10ml的THF溶解0.8g(2.8mmol)的5-碘-硒吩-2-甲醛(5-iodo-selenophne-2-carbaldehyde)及0.83g(3.4mmol)三甲基-噻吩-2-基-锡烷(trimethyl-thiophen-2-yl-stannane)。接着，将0.025g(0.04mmol)二氯-双(三苯基磷)钯(dichloro bis(triphenylphosphine)palladium)加入上述溶液中，并在65℃下加热16小时。接着，将上述反应的产物利用快速管柱层析法(flash column chromatography，以乙酸乙酯与己烷(1∶10)作为冲提液)纯化，得到510mg的单取代醛基化合物，产率为75％。

接着，以10ml的THF/甲醇(比例为1∶1)溶解150mg(0.62mmol)上述单取代醛基化合物。接着，在0℃下加入过量的NaBH₄于上述溶液中。在搅拌一小时后，加入乙酸乙酯稀释。接着，分离该有机层，并以盐水洗清并浓缩。所得的粗产物以再结晶法(以乙酸乙酯与己烷(1∶1)再结晶)纯化，得到130mg的硒吩化合物5，产率为85％。

该硒吩化合物1的NMR光谱及质谱分析如下：

¹H-NMR(500MHz，丙酮-d₆)：δ7.36(d，1H)，7.22(m，1H)，7.16(d，1H)，7.03(m，2H)，4.78(d，2H)，4.58(t，1H)。

LC-MS质谱分析：229(30％)，227(M⁺+1-18，100％)，225(80％)。

实施例6

硒吩化合物6：

硒吩化合物6

硒吩化合物6以如实施例5的相同方式进行。

硒吩化合物6的NMR光谱分析如下：

¹H-NMR(500MHz，丙酮-d₆)：δ7.12(d，2H)，7.02(d，2H)，4.78(s，4H)。

实施例7

硒吩化合物7：

硒吩化合物7

硒吩化合物7以如实施例5的相同方式进行。

硒吩化合物7的NMR光谱及质谱分析如下：

¹H-NMR(500MHz，丙酮-d₆)：δ8.03(d，1H)，7.35(d，1H)，7.28(m，1H)，7.07(d，1H)，6.90(d，1H)，4.76(d，2H)，4.47(t，1H)。

LC-MS质谱分析：229(30％)，227(M⁺+1-18，100％)，225(80％)。

实施例8

硒吩化合物8：

硒吩化合物8

硒吩化合物8以如实施例5的相同方式进行。

硒吩化合物8的NMR光谱及质谱分析如下：

¹H-NMR(500MHz，丙酮-d₆)：δ7.18(d，1H)，7.04(d，1H)，7.01(d，1H)，6.89(d，1H)，4.80(d，2H)，4.75(d，2H)，4.58(t，1H)，4.44(t，1H)。

LC-MS质谱分析：259(20％)，257(M⁺+1-18，100％)，255(60％)。

实施例9

硒吩化合物9：

硒吩化合物9

硒吩化合物9以如实施例5的相同方式进行。

硒吩化合物9的NMR光谱及质谱分析如下：

¹H-NMR(500MHz，丙酮-d₆)：δ8.02(q，1H)，7.34(t，1H)，7.27(t，1H)，7.13(s，1H)，4.77(d，2H)，4.59(d，2H)，4.42(t，1H)，4.10(t，IH)。

LC-MS质谱分析：259(20％)，257(M⁺+1-18，100％)，255(70％)。

实施例10

硒吩化合物10的制备：

硒吩化合物10

首先，以20ml的氯仿溶解0.6g(2.49mmol)5-噻吩-2-基-硒吩-2-甲醛(5-thiophen-2-yl-selenophene-2-carbaldehyde)及0.252g(3.0mmol)碳酸氢钠(sodiumbicarbonate)。接着，于30分钟间，逐滴加入0.437g(2.74mmol)的溴(溶于20ml的氯仿)。将上述反应回流4小时后，降至室温并加以过滤。接着，加入冰水并以乙酸乙酯萃取。接着，将滤液以盐水清洗并以硫酸镁除水。所得的溶液利用真空抽气法浓缩，并进一步利用快速管柱层析法(flash column chromatography，以乙酸乙酯与己烷(1∶15)作为冲提液)纯化，得到600mg的1，5-(5-溴-噻吩-2-基)-硒吩-2-甲醛(1，5-(5-bromo-thiophen-2-yl)-selenophene-2-carbaldehyde)，产率为76％。

以10ml的THF溶解0.23g(0.72mmol)1，5-(5-溴-噻吩-2-基)-硒吩-2-甲醛及0.275g(0.86mmol)5-(1，3)二氧戊环-2-基-噻吩-2基)-三甲基锡烷((5-(1，3)dioxolan-2-yl-thiophen-2-yl)-trlmethylstannane)。接着，加入0.025g(0.04mmol)二氯-双(三苯基磷)钯(dichloro-bis(triphenylphosphine)palladium)。

接着，将上述混合物在75℃下反应16小时。反应完全后，将反应溶液浓缩，并利用快速管柱层析法(flash columnchromatography，以乙酸乙酯与己烷(1∶5)作为冲提液)纯化，得到165mg的中间物，产率为58％。

接着，以20ml的THF/甲醇(比例为1∶1)溶解80mg(0.02mmol)的上述中间物。接着，在0℃下加入过量的NaBH₄于上述溶液中。在搅拌一小时后，加入乙酸乙酯稀释。接着，分离该有机层，并以盐水洗清并浓缩。所得的粗产物以再结晶法(以乙酸乙酯与己烷(1∶1)再结晶)纯化，得到70mg的硒吩化合物10，产率为87％。

该硒吩化合物10的NMR光谱及质谱分析如下：

¹H-NMR(500MHz，丙酮-d₆)：δ7.28(d，1H)，7.21(d，1H)，7.19(d，1H)，7.15(m，2H)，7，07(d，1H)，6.06(s，1H)，4.82(d，2H)，4.66(t，1H)，4.12(m，2H)，4.02(m，2H)。

LC-MS质谱分析：401(30％)，399(M⁺+1，100％)，397(60％)。

实施例11

硒吩化合物11：

硒吩化合物11

硒吩化合物11以如实施例10的相同方式进行。

硒吩化合物11的NMR光谱及质谱分析如下：

¹H-NMR(500MHz，丙酮-d₆)：δ8.10(d，1H)，7.34(d，1H)，7.29(d，1H)，7.12(m，2H)，6.28(d，1H)，6.25(d，1H)，4.80(d，2H)，3.77(s，3H)。

LC-MS质谱分析：372(M⁺+1，100％)，370(50％)，368(15％)。

实施例12

硒吩化合物12：

硒吩化合物12

硒吩化合物12以如实施例10的相同方式进行。

硒吩化合物12的NMR光谱及质谱分析如下：

¹H-NMR(500MHz，丙酮-d₆)：δ7.94(dd，1H)，7.20(dd，1H)，7.15(dd，2H)，6.85(d，1H)，6.83(d，1H)，6.15(d，1H)，6.13(d，1H)，4.64(d，2H)，4.32(t，1H)，3.63(s，3H)。

LC-MS质谱分析：324(M⁺+1，100％)，322(60％)，320(20％)。

实施例13

硒吩化合物13：

硒吩化合物13

硒吩化合物13以如实施例10的相同方式进行。

硒吩化合物13的NMR光谱及质谱分析如下：

¹H-NMR(500MHz，丙酮-d₆)：δ7.12(d，2H)，7.08(s，1H)，6.27(s，2H)，4.82(d，2H)，4.80(d，2H)，4.63(d，2H)，4.46(t，1H)，4.11(t，1H)，3.79(s，3H)，3.42(t，1H)。

LC-MS质谱分析：384(M⁺+1，30％)，368(30％)，366(M⁺+1-H₂O，100％)，364(70％)。

实施例14

硒吩化合物14：

硒吩化合物14

硒吩化合物14以如实施例10的相同方式进行。

硒吩化合物14的NMR光谱分析如下：

¹H-NMR(500MHz，丙酮-d₆)：δ7.31(d，1H)，7.16(d，1H)，7.05(d，2H)，6.91(dd，1H)，6.82(t，1H)，6.29(dd，1H)，6.06(dd，1H)，4.74(s，2H)，3.79(s，3H)。

实施例15

硒吩化合物15：

硒吩化合物15

硒吩化合物15以如实施例10的相同方式进行。

硒吩化合物15的NMR光谱及质谱分析如下：

¹H-NMR(500MHz，丙酮-d₆)：δ7.28(d，1H)，7.23(s，1H)，7.22(d，1H)，7.14(d，1H)，7.07(d，1H)，6.30(s，1H)，5.98(s，1H)，4.82(d，2H)，4.65(t，1H)，4.13(m，4H)，4.01(m，4H)。

LC-MS质谱分析：473(30％)，371(M⁺+1，100％)，469(80％)。

实施例16

硒吩化合物16：

硒吩化合物16

硒吩化合物16以如实施例10的相同方式进行。

硒吩化合物16的NMR光谱及质谱分析如下：

¹H-NMR(500MHz，丙酮-d₆)：δ9.92(s，1H)，7.92(d，1H)，7.47(m，2H)，7.34(d，1H)，7.21(d，1H)，7.08(d，1H)，4.81(d，2H)，4.69(t，1H)。

LC-MS质谱分析：357(30％)，355(M⁺+1，100％)，353(80％)。

实施例17

硒吩化合物17：

硒吩化合物17

硒吩化合物17以如实施例10的相同方式进行。

硒吩化合物17的NMR光谱及质谱分析如下：

¹H-NMR(500MHz，丙酮-d₆)：δ9.80(s，1H)，8.14(m，2H)，7.61(d，1H)，7.51(t，1H)，7.45(d，1H)，7.32(q，1H)，7.26(d，1H)。

LC-MS质谱分析：375(20％)，373(M⁺+1，100％)，371(70％)，369(35％)。

实施例18

硒吩化合物18的制备：

硒吩化合物18

首先，以10ml的THF溶解0.5g(1.22mmol)的5-碘-硒吩-2-甲醛(5-iodo-selenophene-2-carbaldehyde)及0.76g(2.66mmol)2，5-双-三甲基锡烷-噻吩(2，5-bis-trimethylstannanyl-thiophene)。接着，将0.025g(0.04mmol)二氯-双(三苯基磷)钯(dichloro bis(triphenylphosphine)palladium)加入上述溶液中，并在65℃下加热16小时。接着，将上述反应的产物以快速管柱层析法(flash columnchromatography，以乙酸乙酯与己烷(1∶3)作为冲提液)纯化，得到584mg的双醛基化合物，产率为55％。

接着，以45ml的TH F/甲醇(比例为2∶1)溶解50mg(0.12mmol)上述单取代醛基化合物。接着，在0℃下加入过量的NaBH₄于上述溶液中。在搅拌一小时后，加入乙酸乙酯稀释。接着，分离该有机层，并以盐水洗清并浓缩。所得的粗产物以再结晶法(以乙酸乙酯与己烷(1∶1)再结晶)纯化，得到41mg的硒吩化合物18，产率为80％。

该硒吩化合物1的NMR光谱及质谱分析如下：

¹H-NMR(500MHz，丙酮-d₆)：δ7.27(d，2H)，7.14(s，2H)，7.04(d，2H)，5.66(t，2H)，4.64(d，4H)。

LC-MS质谱分析：389(50％)，387(M⁺+1-18，100％)，385(90％)，383(80％)，381(30％)。

实施例19

硒吩化合物19：

硒吩化合物19

硒吩化合物19以如实施例18的相同方式进行。

硒吩化合物19的NMR光谱及质谱分析如下：

¹H-NMR(500MHz，丙酮-d₆)：δ7.13(m，2H)，7.00(m，2H)，6.27(s，2H)，4.82(d，2H)，4.79(d，2H)，3.78(s，3H)。

LC-MS质谱分析：356(10％)，354(M⁺+1，50％)，352(30％)，350(10％)，336(M⁺+1-18，100％)。

实施例20

硒吩化合物20：

硒吩化合物20

硒吩化合物20以如实施例18的相同方式进行。

硒吩化合物20的NMR光谱分析如下：

¹H-NMR(500MHz，丙酮-d₆)：δ7.14(s，2H)，6.93(d，2H)，6.77(d，2H)，4.62(d，4H)，4.36(t，2H)。

实施例21

硒吩化合物21：

硒吩化合物21

硒吩化合物21以如实施例18的相同方式进行。

硒吩化合物21的NMR光谱及质谱分析如下：

¹H-NMR(500MHz，丙酮-d₆)：δ7.27(s，2H)，7.14(s，2H)，4.75(d，4H)，4.59(d，4H)，4.54(t，2H)，4.20(t，2H)。

实施例22

硒吩化合物22：

硒吩化合物22

硒吩化合物22以如实施例18的相同方式进行。

硒吩化合物22的NMR光谱分析如下：

¹H-NMR(500MHz，丙酮-d₆)：δ7.10(m，4H)，6.24(s，2H)，4.80(d，4H)，3.77(s，3H)。

实施例23

硒吩化合物23：

硒吩化合物23

硒吩化合物23以如实施例1的相同的方式进行。

硒吩化合物23的NMR光谱分析如下：

¹H-NMR(500MHz，丙酮-d₆)：δ7.10(m，2H)，7.00(m，2H)，6.35(s，1H)，4.80(m，4H)，4.42(m，2H)，3.64(s，3H)。

硒吩化合物的分析实验

本发明所述的硒吩化合物其对待肝癌的效能可通过一动物体外分析实验(请参照以下所述的实施例24)而作初步的被筛选，并进一步通过一活体体内分析实验(请参照以下所述的实施例25)来加以证实。

实施例24

动物体外分析实验：

在此实施例中，22种组合物(即分别包含上述硒吩化合物1及3-22的药学组合物，与包含上述硒吩化合物2及23的药学组合物)被用来测试其抑制八种不同肿瘤(tumor)细胞(包括：Hep-3B肝癌细胞、MKN-45胃癌细胞、HCT-116结肠细胞、NPC-TW01鼻咽癌(nasopharyngeal cancer)细胞、NCI-H226肺癌(ung cancer)细胞、A-498肾脏癌(kidney cancer)细胞，LN Cap前列腺癌(prostate cancer)细胞、及MCF-乳癌细胞)的效能。一般来说，该肿瘤细胞在被用来进行测试的16小时前，以一介于2x10³至8x10³个细胞/孔的密度范围被培育在一具有96孔(well)的细胞培养皿中。在加入不同浓度的硒吩组合物培育72小时后，0.2mg/ml的MTS((3-(4，5-二甲基噻唑-2-基)-5-(3-羧基甲氧基苯基)-2-(4-磺苯基)-2H-四唑，(3-(4，5-dimethythiazol-2-yl)-5-(3-carboxymethoxyphenyl)-2-(4-sulfophenyl)-2H-tetrazolium)，MTS)被加入该肿瘤细胞的培养皿中进一步培育两小时。由于MTS会被存活的细胞代谢成为有机色素formazan(甲臢)，因此通过微量滴定侦测仪器测量在波长490nm下的吸收强度可得知该MTS的转换率。

一未加入硒吩组合物的肿瘤细胞培养皿用来作为对照组，以判定加入哪一种硒吩化合物的培养皿其肿瘤细胞的成长率被抑制在50％以下(即所谓的IC₅₀)。

意外地，在抑制Hep-3B肝癌细胞方面，有12种组合物的IC₅₀值(半数抑制浓度)介于0.1μM到1μM之间，此外，还有10种组合物的IC₅₀值介于0.01μM到0.1μM之间。上述硒吩组合物在抑制Hep-3B肝癌细胞上的增生上，与抑制HCT-116直肠癌细胞增生相比，更具有2～30倍以上的效能。此外，21种上述硒吩组合物在抑制Hep-3B肝癌细胞上的增生上，与抑制MKN-45胃癌细胞增生相比，更具有4～500倍以上的效能。

实施例25

活体体内分析实验：

在此实施例中，硒吩化合物3被用来测试了其对抑制Hep-3B肝癌细胞增生的效能。两只被植入Hep-3B肝癌细胞的老鼠每日被喂食的剂量分别为50mg/kg和75mg/kg。另一只被植入Hep-3B肝癌细胞且未接受任何治疗的老鼠作为对照组。在此实施例中所使用的是公的先天性无胸腺大鼠(Male athymic mice(Hernu/nu))，其年龄约为4-6个星期，重量约为20-25g。老鼠被安置在具有通风设备的笼子内，且被喂食无菌食物和水。温度被维持在23-25℃之间，而湿气维持在50±10％。在光线的控制方面则是12小时光/黑暗的周期交替。所有的实验依据由台湾财团法人生物技术开发中心所采行的IACUC指南。

Hep-3B肝癌细胞以皮下方式植于老鼠体内。在实验组中，当老鼠体内的肿瘤达到大约50mm³的体积时，老鼠每二天三次被施与50mg/kg或75mg/kg的硒吩化合物3。实验组与对照组所使用的老鼠各为7只。化合物3经由腹腔吸收以提供给老鼠。肿瘤的大小至少每个星期经轮尺测量两次，且肿瘤体积已同时被计算出来。老鼠的体重与肿瘤体积同时监测。肿瘤成长的百分比由实验组所得的肿瘤体积除以对照组所得的肿瘤体积。

结果显示，在施予药量50mg/kg三剂之后，老鼠的肿瘤体积在第14天减少了37％。而在施予药量75mg/kg三剂之后，老鼠的肿瘤体积在第14天减少了63％。

以上所述仅为本发明较佳实施例，然其并非用以限定本发明的范围，任何熟悉本项技术的人员，在不脱离本发明的精神和范围内，可在此基础上做进一步的改进和变化，因此本发明的保护范围当以本申请的权利要求书所界定的范围为准。

Claims

1.一种治疗肝癌的医药组合物，包括下列所述的硒吩化合物

以及医药上可接受的载剂。

2.根据权利要求1所述的治疗肝癌的医药组合物，其中该硒吩化合物为

3.一种抑制肝癌细胞增生的化合物，包括下列所述的硒吩化合物

4.根据权利要求3所述的抑制肝癌细胞增生的化合物，其中该硒吩化合物为