CN100510744C - 克咳口服制剂的检测方法 - Google Patents
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Abstract
本发明是一种克咳口服制剂的检测方法,它包括性状、检查、鉴别和含量测定,所述性状包括:对于膏滋,产品为棕褐色稠厚的半流体,味甜,微苦;对于糖浆剂,产品为棕黄色粘稠液体,味甜,微苦;对于口服液,产品为棕黄色液体,久置有轻摇易散沉淀,味甜,微苦;所述鉴别包括对方中麻黄、罂粟壳、甘草的薄层鉴别的部分或全部;所述含量测定包括对盐酸麻黄碱、磷酸可待因的含量测定的部分或全部。本发明可有效的控制克咳膏滋、克咳糖浆剂、克咳口服液制剂的质量,保证其临床疗效。
Description
技术领域:
本发明涉及一种克咳口服制剂的检测方法,属于药品的技术领域。
背景技术:
咳嗽是我们日常生活中的一种常见病,克咳制剂是在我国中医名典《伤寒论》的麻杏石甘汤基础上研制而成的,由麻黄、罂粟壳、甘草、苦杏仁、莱菔子、桔梗、石膏共七味药组成;具有宣肺清热,止咳、平喘的功效,对上呼吸道感染、气管炎、肺炎,咳嗽等疾病有确切的疗效。“克咳胶囊”刊登在中华人民共和国卫生部药品标准第十七册,该药物在临床上应用多年,在治疗咳嗽、气喘发面取得比较满意的治疗效果,虽然该产品在治疗咳嗽等疾病方面取得一定成果,但是,现有市面上的剂型仅有胶囊剂,难以满足患者的需要。且由于咳嗽、哮喘大多发生在冬季,由于冬季天气干燥,病人除了咳嗽,还常伴有咽干口渴、干咳痰少或无痰等症状,此时需服用具有润燥生津功能的药物,方能起到好的治疗效果。一般的固体制剂就其剂型本身的特点来说,没有润燥生津的作用,不能达到最佳治疗效果。因此本申请人将常规的克咳制剂制成了膏滋、口服液或糖浆剂,在干燥的季节服用,就能起到事半功倍的效果。但如何有效控制克咳膏滋、口服液或糖浆剂的质量,目前还没有相关的质量标准可供应参考。
发明内容:
本发明的目的在于:提供一种克咳口服制剂的检测方法。该口服制剂包括膏滋、口服液和糖浆,通过本发明的检测方法,有效控制这种克咳口服制剂的质量,保证该制剂的临床疗效。
本发明所述克咳口服制剂是这样构成的:按照重量组份计算:它主要由麻黄43.2-240、罂粟壳43.2-240、甘草43.2-240、苦杏仁43.2-240、莱菔子13.6-75、桔梗13.6-75、石膏13.6-75及辅料制备而成。
本发明所述克咳膏滋和糖浆剂是这样制备的:麻黄、罂粟壳粉碎,加入3-30倍量酸性水溶液,浸泡0.5-5小时后煎煮1-5次,每次0.5-5小时,滤过,合并滤液,药液调PH至6-8备用;苦杏仁先蒸20-60分钟,甘草、莱菔子、桔梗、石膏四味药加3-15倍量水浸泡0.5-5小时,然后与苦杏仁一起煎煮1-5次,每次0.5-5小时,滤过,滤液合并,与麻黄,罂粟壳提取液混合,减压浓缩,再加入不同的辅料,用常规的方法可以制成糖浆剂或膏滋。
本发明所述克咳口服液是这样制备的:麻黄、罂粟壳粉碎,加入3-30倍量酸性水溶液,浸泡0.5-5小时后煎煮1-5次,每次0.5-5小时,滤过,合并滤液,药液调PH至6-8备用;苦杏仁先蒸20-60分钟,甘草、莱菔子、桔梗、石膏四味药加3-15倍量水浸泡0.5-5小时,然后与苦杏仁一起煎煮1-5次,每次0.5-5小时,滤过,滤液合并,与麻黄,罂粟壳提取液混合,减压浓缩,放冷,加入乙醇醇沉,静置,滤液回收乙醇并继续浓缩成稠膏,再加入水冷藏30-150小时,滤过,滤液加入辅料溶解,加水至1000ml,调PH至3-7,即得。
本发明克咳口服制剂的检测方法是这样的:它包括性状、检查、鉴别和含量测定,所述性状包括:对于膏滋,产品为棕褐色稠厚的半流体,味甜,微苦;对于糖浆剂,产品为棕黄色粘稠液体,味甜,微苦;对于口服液,产品为棕黄色液体,久置有轻摇易散沉淀,味甜,微苦;所述检查包括:相对密度,膏滋相对密度应为1.30~1.50之间,糖浆剂相对密度不低于1.20;pH值,口服液PH值应为3.5~6.5;其他,应符合中国药典糖浆剂、煎膏剂或合剂项下有关的各项规定;所述鉴别包括以盐酸麻黄碱对照品鉴别方中麻黄,以磷酸可待因对照品及罂粟壳对照药材鉴别方中罂粟壳,以甘草次酸对照品鉴别方中甘草的薄层鉴别的部分或全部;所述含量测定包括对盐酸麻黄碱、磷酸可待因的含量测定的部分或全部。
具体说,本制剂中麻黄的鉴别方法包括以盐酸麻黄碱对照品为对照,以醋酸乙酯:丙酮:氨水=2-10:2-10:0.3-2为展开剂的薄层鉴别方法。
本制剂中罂粟壳的鉴别方法包括以磷酸可待因对照品及罂粟壳对照药材为对照,以甲苯:丙酮:无水乙醇:氨水=10-35:10-35:0.5-5:0.5-3为展开剂的薄层鉴别方法。
本制剂中甘草的鉴别方法包括以甘草次酸对照品为对照,以30~60℃石油醚:氯仿:冰醋酸=5-25:1-9:0.2-3为展开剂的薄层鉴别方法。
更具体的说,本制剂的鉴别选自以下方法中的一种或几种:
(1)麻黄:取膏滋、糖浆或口服液,其中膏滋先加水混匀,糖浆需加水稀释,药液用氨水调pH8~13,用氯仿提取1-5次,合并氯仿提取液,用盐酸溶液提取,酸液蒸干,残渣用甲醇或乙醇溶解,作为供试品溶液;另取盐酸麻黄碱对照品,用甲醇或乙醇溶解,作为对照品溶液;照中国药典薄层色谱法试验,吸取上述供试品溶液及对照品溶液,分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上,以醋酸乙酯:丙酮:氨水=2-10:2-10:0.3-2为展开剂,展开,取出,晾干,喷以茚三酮试液,热风吹至斑点显色清晰,供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点;
(2)罂粟壳:取膏滋、糖浆或口服液,加醋酸乙酯与氨水混合液,超声提取,提取液滤过,滤液蒸干,残渣加甲醇或乙醇溶解,作为供试品溶液;另取罂粟壳对照药材,加醋酸乙酯与氨水的混合液,超声提取,提取液滤过,滤液蒸干,残渣加甲醇或乙醇使溶解,制成对照药材溶液;另取磷酸可待因对照品适量,用甲醇溶解,作为对照品溶液;照中国药典薄层色谱法试验,吸取供试品溶液、对照药材溶液及对照品溶液各5-20μl,分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上,以甲苯:丙酮:无水乙醇:氨水=10-35:10-35:0.5-5:0.5-3为展开剂,层析缸中另置一小杯浓氨试液预平衡10-60分钟,展开,取出,晾干,喷以稀碘化铋钾试液,加热至斑点显色清晰,供试品色谱中,在与对照药材及对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点;
(3)甘草:取膏滋、糖浆或口服液,加入甲醇或乙醇超声提取,提取液滤过,滤液蒸干,残渣加水使溶解并转移至分液漏斗中,加稀硫酸,摇匀,用乙醚提取1-5次,弃去乙醚液,水液用水饱和的正丁醇提取1-5次,合正丁醇提取液,再用正丁醇饱和过的水洗1-5次,弃去水洗液,正丁醇提取液蒸干,残渣用甲醇溶解至烧瓶中,蒸干,加盐酸及氯仿,加热回流0.5-5小时,分取氯仿液蒸干,残渣加甲醇或乙醇溶液使溶解,作为供试品溶液;另取甘草次酸对照品适量,用甲醇或乙醇溶解,作为对照品溶液;照中国药典薄层色谱法试验,吸取供试品溶液及对照品溶液各5-20μl,分别点于同一硅胶GF254薄层板上,以30~60℃石油醚:氯仿:冰醋酸=5-25:1-9:0.2-3为展开剂,展开,取出,晾干,置紫外光灯200-500nm下检视,供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点。
准确的说,本制剂的上述鉴别选自以下方法中的一种或几种:
(1)麻黄:取膏滋2g,加水10-50ml混匀;或取糖浆5ml,加水10-50ml混匀;或取口服液20ml。用氨水调pH8~13,用氯仿提取1-5次,每次10-50ml,合并氯仿提取液,用10-50ml盐酸溶液1→200提取1-5次,酸液蒸干,残渣用甲醇1ml使溶解,作为供试品溶液;另取盐酸麻黄碱对照品,用甲醇溶解制成每1ml含0.5-1mg的溶液,作为对照品溶液;照中国药典薄层色谱法试验,吸取上述供试品溶液及对照品溶液各5-25μl,分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上,以醋酸乙酯:丙酮:氨水=2-10:2-10:0.3-2为展开剂,展开,取出,晾干,喷以茚三酮试液,热风吹至斑点显色清晰,供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点;
(2)罂粟壳:取膏滋5g或糖浆5ml或口服液20ml,加醋酸乙酯10-100ml及氨水0.5-5ml,超声处理10-60分钟,滤过,滤液蒸干,残渣加甲醇1ml使溶解,作为供试品溶液;另取罂粟壳对照药材1g,加醋酸乙酯10-100ml及氨水0.5-5ml的混合液,超声处理10-60分钟,滤过,滤液蒸干,残渣加甲醇1ml使溶解,制成对照药材溶液;另取磷酸可待因对照品适量,用甲醇溶解制成每1ml含1mg的溶液,作为对照品溶液;照中国药典薄层色谱法试验,吸取供试品溶液、对照药材溶液及对照品溶液各5-20μl,分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上,以甲苯:丙酮:无水乙醇:氨水=10-35:10-35:0.5-5:0.5-3为展开剂,层析缸中另置一小杯浓氨试液预平衡10-60分钟,展开,取出,晾干,喷以稀碘化铋钾试液,加热至斑点显色清晰,供试品色谱中,在与对照药材及对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点;
(3)甘草:取膏滋5g或糖浆5ml或口服液20ml,用氨试液调PH8~13,用醋酸乙酯提取1-5次,每次10-100ml,合并醋酸乙酯液,水浴蒸干,残渣加甲醇1ml使溶解,作为供试品溶液;另取罂粟壳对照药材1g,加醋酸乙酯10-100ml,超声处理10-60分钟,滤过,滤液蒸干,残渣加甲醇1ml使溶解,制成对照药材溶液;另取磷酸可待因对照品适量,用甲醇溶解制成每1ml含1mg的溶液,作为对照品溶液;照中国药典薄层色谱法试验,吸取供试品溶液、对照药材溶液及对照品溶液各5-20μl,分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上,以甲苯:丙酮:无水乙醇:氨水=5-25:1-9:0.2-3为展开剂,层析缸中另置一小杯浓氨试液预平衡10-60分钟,展开,取出,晾干,喷以稀碘化铋钾试液,加热至斑点显色清晰,供试品色谱中,在与对照药材及对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点。
本制剂的另一种鉴别方法选自以下方法中的一种或几种:
(1)麻黄:取膏滋、糖浆或口服液,其中膏滋先加水混匀,糖浆需加水稀释,药液用氨水调pH8~13,用氯仿提取1-5次,合并氯仿提取液,用盐酸溶液提取,酸液蒸干,残渣用甲醇或乙醇溶解,作为供试品溶液;另取盐酸麻黄碱对照品,用甲醇或乙醇溶解,作为对照品溶液;照中国药典薄层色谱法试验,吸取上述供试品溶液及对照品溶液,分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上,以醋酸乙酯:丙酮:氨水=2-10:2-10:0.3-2为展开剂,展开,取出,晾干,喷以茚三酮试液,热风吹至斑点显色清晰,供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点;
(2)罂粟壳:取膏滋、糖浆或口服液,用氨试液调PH8~13,用醋酸乙酯提取1-5次,合并醋酸乙酯液,水浴蒸干,残渣加甲醇或乙醇溶解,作为供试品溶液;另取罂粟壳对照药材,加醋酸乙酯,超声提取,提取液滤过,滤液蒸干,残渣加甲醇或乙醇使溶解,制成对照药材溶液;另取磷酸可待因对照品适量,用甲醇溶解,作为对照品溶液;照中国药典薄层色谱法试验,吸取供试品溶液、对照药材溶液及对照品溶液各5-20μl,分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上,以甲苯:丙酮:无水乙醇:氨水=10-35:10-35:0.5-5:0.5-3为展开剂,层析缸中另置一小杯浓氨试液预平衡10-60分钟,展开,取出,晾干,喷以稀碘化铋钾试液,加热至斑点显色清晰,供试品色谱中,在与对照药材及对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点。
(3)甘草:取膏滋、糖浆或口服液,加水稀释并转移至分液漏斗中,加稀硫酸,摇匀,用乙醚提取1-5次,弃去乙醚液,水液用水饱和的正丁醇提取1-5次,合正丁醇提取液,再用正丁醇饱和过的水洗1-5次,弃去水洗液,正丁醇提取液蒸干,残渣用甲醇溶解至烧瓶中,蒸干,加盐酸及氯仿,加热回流0.5-5小时,分取氯仿液蒸干,残渣加甲醇或乙醇使溶解,作为供试品溶液;另取甘草次酸对照品适量,用甲醇或乙醇溶解,作为对照品溶液;照中国药典薄层色谱法试验,吸取供试品溶液及对照品溶液各5-20μl,分别点于同一硅胶GF254薄层板上,以石油醚(30~60℃):氯仿:冰醋酸=5-25:1-9:0.2-3为展开剂,展开,取出,晾干,置紫外光灯200-500nm下检视,供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点。
准确的说,本制剂的上述另一种鉴别方法选自以下方法中的一种或几种
(1)取膏滋2g,加水10-50ml混匀;或取糖浆5ml,加水10-50ml混匀;或取口服液20ml。用氨水调pH8~13,用氯仿提取1-5次,每次10-50ml,合并氯仿提取液,用10-50ml盐酸溶液1→200提取1-5次,酸液蒸干,残渣用甲醇1ml使溶解,作为供试品溶液;另取盐酸麻黄碱对照品,用甲醇溶解制成每1ml含0.5-1mg的溶液,作为对照品溶液;照中国药典薄层色谱法试验,吸取上述供试品溶液及对照品溶液各5-25μl,分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上,以醋酸乙酯:丙酮:氨水=2-10:2-10:0.3-2为展开剂,展开,取出,晾干,喷以茚三酮试液,热风吹至斑点显色清晰,供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点。
(2)取膏滋5g或糖浆5ml或口服液20ml,用氨试液调PH8~13,用醋酸乙酯提取1-5次,每次10-100ml,合并醋酸乙酯液,水浴蒸干,残渣加甲醇1ml使溶解,作为供试品溶液;另取罂粟壳对照药材1g,加醋酸乙酯10-100ml,超声处理10-60分钟,滤过,滤液蒸干,残渣加甲醇1ml使溶解,制成对照药材溶液;另取磷酸可待因对照品适量,用甲醇溶解制成每1ml含1mg的溶液,作为对照品溶液;照中国药典薄层色谱法试验,吸取供试品溶液、对照药材溶液及对照品溶液各5-20μl,分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上,以甲苯:丙酮:无水乙醇:氨水=10-35:10-35:0.5-5:0.5-3为展开剂,层析缸中另置一小杯浓氨试液预平衡10-60分钟,展开,取出,晾干,喷以稀碘化铋钾试液,加热至斑点显色清晰,供试品色谱中,在与对照药材及对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点。
(3)甘草:取膏滋3g、糖浆5ml或口服液20ml,加10-50ml水使稀释并转移至分液漏斗中,加稀硫酸1-5ml,摇匀,用乙醚提取1-5次,每次10-100ml,弃去乙醚液,水液用水饱和的正丁醇提取1-5次,每次10-100ml,合正丁醇提取液,再用正丁醇饱和过的水洗1-5次,每次10-100ml,弃去水洗液,正丁醇提取液蒸干,残渣用甲醇5-20ml溶解至烧瓶中,蒸干,加盐酸1-10ml及氯仿20-100ml,加热回流0.5-5小时,分取氯仿液蒸干,残渣加乙醇0.5-2ml使溶解,作为供试品溶液;另取甘草次酸对照品适量,用乙醇溶解制成每1ml含0.5-2mg的溶液,作为对照品溶液。照中国药典薄层色谱法试验,吸取供试品溶液及对照品溶液各5-20μl,分别点于同一硅胶GF254薄层板上,以石油醚(30~60℃):氯仿:冰醋酸=5-25:1-9:0.2-3为展开剂,展开,取出,晾干,置紫外光灯200-500nm下检视,供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点。
具体说,本制剂中盐酸麻黄碱的含量测定方法包括采用色谱柱为C18或C4或C8柱,以0.05-1%磷酸溶液:甲醇或乙腈:三乙胺=50-115:3-15:0.05-2为流动相,检测波长为200-500nm的高效液相色谱测定法。
本制剂中磷酸可待因的含量测定方法包括采用色谱柱为C18或C4或C8柱,以0.01-1mol/L乙酸钠溶液:甲醇=1-9:9-1为流动相,检测波长为200-500nm的高效液相色谱测定法,其中0.01-1mol/L乙酸钠溶液需用冰醋酸调pH=2-5。
更具体的说,本制剂的含量测定方法选自以下方法中的一种或几种:
盐酸麻黄碱:采用高效液相色谱法,色谱柱为C18或C4或C8柱,以0.05-1%磷酸溶液:甲醇或乙腈:三乙胺=50-115:3-15:0.05-2为流动相,检测波长为200-500nm;取盐酸麻黄碱对照品,精密称定,用甲醇溶解,摇匀,即得对照品溶液;取膏滋、糖浆剂或口服液,用流动相稀释,摇匀,用0.65μm及小于0.65μm的微孔滤膜滤过,即得供试品溶液;分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液,注入液相色谱仪测定含量;膏滋中含麻黄以盐酸麻黄碱计,不得少于0.5mg/g,糖浆剂中含麻黄以盐酸麻黄碱计,不得少于0.5mg/ml,口服液中含麻黄以盐酸麻黄碱计,不得少于0.25mg/ml;
磷酸可待因:照高效液相色谱法,色谱柱为C18或C4或C8柱,以0.01-1mol/L乙酸钠溶液(冰醋酸调pH=2-5):甲醇=1-9:9-1为流动相,检测波长为200-500nm;取磷酸可待因对照品,用0.5-5倍量的甲醇-水溶液溶解,摇匀,精密量取1ml,置5-25ml量瓶中,加流动相溶解并稀释至刻度,摇匀,即得对照品溶液;取膏滋5.0g、糖浆剂5.0ml或口服液5ml,加入硅燥土拌匀,并转移至圆底烧瓶中,用乙醇水浴回流提取,滤过,并用乙醇洗涤烧瓶及滤器,合并滤液及洗液,蒸干,残渣加水溶解并转移至分液漏斗中,用氢氧化钠试液调pH8~13,氯仿萃取1-8次,合并氯仿提取液,水浴挥至10-30ml,定量转移至分液漏斗中,用盐酸溶液提取1-5次,合并酸液,再用氢氧化钠试液调pH8~13,用水饱和过氯仿提取2-8次,合并氯仿提取液,水浴蒸干,残渣用流动相溶解,摇匀,用0.65μm及小于0.65μm的微孔滤膜滤过,即得供试品溶液;分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液,注入液相色谱仪测定含量,该克咳口服制剂中,膏滋中含罂粟壳以磷酸可待因计,不得少于0.05mg/g、糖浆剂中含罂粟壳以磷酸可待因计,不得少于0.05mg/ml、口服液中含罂粟壳以磷酸可待因计,不得少于0.025mg/ml。
准确的说,上述本制剂的含量测定方法选自以下方法中的一种或几种:
盐酸麻黄碱:采用高效液相色谱法,色谱柱为C18或C4或C8柱,以0.05-1%磷酸溶液:甲醇或乙腈:三乙胺=50-115:3-15:0.05-2为流动相,检测波长为200-500nm;取盐酸麻黄碱对照品,精密称定,用甲醇溶解制成每1ml含盐酸麻黄碱对照品0.05-0.15mg的对照品溶液,摇匀,即得;另取膏滋5.0g、糖浆剂2.0ml或口服液5ml,置25ml量瓶中,流动相稀释至刻度,摇匀,用0.65μm及小于0.65μm的微孔滤膜滤过,即得供试品溶液;分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5-20μl,注入液相色谱仪测定含量;该克咳制剂中,膏滋中含麻黄以盐酸麻黄碱计,不得少于0.5mg/g、糖浆剂中含麻黄以盐酸麻黄碱计,不得少于0.5mg/ml、口服液中含麻黄以盐酸麻黄碱计,不得少于0.25mg/ml;
磷酸可待因:照高效液相色谱法,色谱柱为C18或C4或C8柱,以0.01-1mol/L乙酸钠溶液(冰醋酸调pH=2-5):甲醇=1-9:9-1为流动相,检测波长为200-500nm;取磷酸可待因对照品10mg,精密称定,置5-50ml量瓶中,用甲醇-水溶液溶解并稀释至刻度,摇匀,精密量取1ml,置5-25ml量瓶中,加流动相溶解并稀释至刻度,摇匀,即得每1ml含磷酸可待因对照品0.10mg的对照品溶液;取膏滋5.0g、糖浆剂5.0ml或口服液5ml,加入硅燥土拌匀,并转移至圆底烧瓶中,用10-100ml乙醇水浴回流提取0.5-5小时,滤过,并用乙醇洗涤烧瓶及滤器,合并滤液及洗液,蒸干,残渣加5-50ml水溶解并转移至分液漏斗中,用氢氧化钠试液调pH8~13,氯仿萃取1-8次,每次5-50ml,合并氯仿提取液,水浴挥至10-30ml,定量转移至分液漏斗中,用盐酸溶液1→200提取1-5次,每次5-50ml,合并酸液,再用氢氧化钠试液调pH8~13,用水饱和过氯仿提取2-8次,每次5-50ml,合并氯仿提取液,水浴蒸干,残渣用流动相溶解并定溶至5-25ml量瓶中,摇匀,用0.65μm及小于0.65μm的微孔滤膜滤过,即得供试品溶液;分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液,注入液相色谱仪测定含量,该克咳口服制剂中,膏滋中含罂粟壳以磷酸可待因计,不得少于0.05mg/g、糖浆剂中含罂粟壳以磷酸可待因计,不得少于0.05mg/ml、口服液中含罂粟壳以磷酸可待因计,不得少于0.025mg/ml。
本制剂的另一种含量测定方法选自以下方法中的一种或几种:
盐酸麻黄碱:采用高效液相色谱法,色谱柱为C18或C4或C8柱,以0.05-1%磷酸溶液:甲醇或乙腈:三乙胺=50-115:3-15:0.05-2为流动相,检测波长为200-500nm;取盐酸麻黄碱对照品,精密称定,用甲醇溶解,摇匀,即得对照品溶液;取膏滋、糖浆剂或口服液,用流动相稀释,摇匀,用0.65μm及小于0.65μm的微孔滤膜滤过,即得供试品溶液;分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液,注入液相色谱仪测定含量;该克咳制剂中,膏滋中含麻黄以盐酸麻黄碱计,不得少于0.5mg/g、糖浆剂中含麻黄以盐酸麻黄碱计,不得少于0.5mg/ml、口服液中含麻黄以盐酸麻黄碱计,不得少于0.25mg/ml。
磷酸可待因:照高效液相色谱法,色谱柱为C18或C4或C8柱,以0.01-1mol/L乙酸钠溶液(冰醋酸调pH=2-5):甲醇=1-9:9-1为流动相,检测波长为200-500nm;取磷酸可待因对照品,用0.5-5倍量的甲醇-水溶液溶解,摇匀,精密量取1ml,置5-25ml量瓶中,加流动相溶解并稀释至刻度,摇匀,即得对照品溶液;取膏滋5.0g、糖浆剂5.0ml或口服液5ml,加水稀释并转移至分液漏斗中,用氢氧化钠试液调pH8~13,氯仿萃取2-8次,合并氯仿提取液,水浴挥至10-30ml,定量转移至分液漏斗中,用盐酸溶液提取1-5次,合并酸液,再用氢氧化钠试液调pH8~13,用水饱和过氯仿提取2-8次,合并氯仿提取液,水浴蒸干,残渣用流动相溶解,摇匀,用0.65μm及小于0.65μm的微孔滤膜滤过,即得供试品溶液;分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液,注入液相色谱仪测定含量,该克咳口服制剂中,膏滋中含罂粟壳以磷酸可待因计,不得少于0.05mg/g、糖浆剂中含罂粟壳以磷酸可待因计,不得少于0.05mg/ml、口服液中含罂粟壳以磷酸可待因计,不得少于0.025mg/ml。
准确说,上述本制剂的另一种含量测定方法选自以下方法中的一种或几种:
盐酸麻黄碱:采用高效液相色谱法,色谱柱为C18或C4或C8柱,以0.05-1%磷酸溶液:甲醇或乙腈:三乙胺=50-115:3-15:0.05-2为流动相,检测波长为200-500nm;取盐酸麻黄碱对照品,精密称定,用甲醇溶解制成每1ml含盐酸麻黄碱对照品0.05-0.15mg的对照品溶液,摇匀,即得;另取膏滋5.0g、糖浆剂2.0ml或口服液5ml,置25ml量瓶中,流动相稀释至刻度,摇匀,用0.65μm及小于0.65μm的微孔滤膜滤过,即得供试品溶液;分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5-20μl,注入液相色谱仪测定含量;该克咳制剂中,膏滋中含麻黄以盐酸麻黄碱计,不得少于0.5mg/g、糖浆剂中含麻黄以盐酸麻黄碱计,不得少于0.5mg/ml、口服液中含麻黄以盐酸麻黄碱计,不得少于0.25mg/ml。
磷酸可待因:照高效液相色谱法,色谱柱为C18或C4或C8柱,以0.01-1mol/L乙酸钠溶液(冰醋酸调pH=2-5):甲醇=1-9:9-1为流动相,检测波长为200-500nm;取磷酸可待因对照品10mg,精密称定,置5-50ml量瓶中,用甲醇-水溶液溶解并稀释至刻度,摇匀,精密量取1ml,置5-25ml量瓶中,加流动相溶解并稀释至刻度,摇匀,即得每1ml含磷酸可待因对照品0.10mg的对照品溶液;取膏滋5.0g、糖浆剂5.0ml或口服液5ml,加5-50ml水稀释并转移至分液漏斗中,用氢氧化钠试液调pH8~13,氯仿萃取2-8次,每次5-50ml,合并氯仿提取液,水浴挥至10-30ml,定量转移至分液漏斗中,用盐酸溶液1→200提取1-5次,每次5-50ml,合并酸液,再用氢氧化钠试液调pH8~13,用水饱和过氯仿提取2-8次,每次5-50ml,合并氯仿提取液,水浴蒸干,残渣用流动相溶解并定溶至5-25ml量瓶中,摇匀,用0.65μm及小于0.65μm的微孔滤膜滤过,即得供试品溶液;分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液,注入液相色谱仪测定含量,该克咳口服制剂中,膏滋中含罂粟壳以磷酸可待因计,不得少于0.05mg/g、糖浆剂中含罂粟壳以磷酸可待因计,不得少于0.05mg/ml、口服液中含罂粟壳以磷酸可待因计,不得少于0.025mg/ml。
总的说,本发明所述克咳口服制剂的检测方法包括性状、检查、鉴别和含量测定,其中性状包括:
对于膏滋,产品为棕褐色稠厚的半流体,味甜,微苦;
对于糖浆剂,产品为棕黄色粘稠液体,味甜,微苦;
对于口服液,产品为棕黄色液体,久置有轻摇易散沉淀,味甜,微苦;
检查包括:
相对密度:膏滋相对密度应为1.30~1.50之间,糖浆剂相对密度不低于1.20;
pH值:口服液PH值应为3.5~6.5;
其他:应符合中国药典糖浆剂、煎膏剂或合剂项下有关的各项规定;
鉴别包括:
(1)麻黄:取膏滋2g,加水20ml混匀;或取糖浆5ml,加水20ml混匀;或取口服液20ml,用氨水调pH10~11,用氯仿提取2次,每次20ml,合并氯仿提取液,用20ml盐酸溶液1→200提取1次,酸液蒸干,残渣用甲醇1ml使溶解,作为供试品溶液;另取盐酸麻黄碱对照品,用甲醇溶解制成每1ml含1mg的溶液,作为对照品溶液;照中国药典薄层色谱法试验,吸取上述供试品溶液及对照品溶液各5μl,分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上,以醋酸乙酯:丙酮:氨水=5:5:1为展开剂,展开,取出,晾干,喷以茚三酮试液,热风吹至斑点显色清晰,供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点;
(2)罂粟壳:取膏滋5g或糖浆10ml或口服液20ml,加醋酸乙酯40ml及氨水1ml,超声处理20分钟,滤过,滤液蒸干,残渣加甲醇1ml使溶解,作为供试品溶液;另取罂粟壳对照药材1g,加醋酸乙酯40ml及氨水1ml的混合液,超声处理20分钟,滤过,滤液蒸干,残渣加甲醇1ml使溶解,制成对照药材溶液;另取磷酸可待因对照品,用甲醇溶解制成每1ml含1mg的溶液,作为对照品溶液;照中国药典薄层色谱法试验,吸取供试品溶液、对照药材溶液及对照品溶液各5μl,分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上,以甲苯:丙酮:无水乙醇:氨水=20:20:3:1为展开剂,层析缸中另置一小杯浓氨试液预平衡30分钟,展开,取出,晾干,喷以稀碘化铋钾试液,加热至斑点显色清晰,供试品色谱中,在与对照药材及对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点;
(3)甘草:取膏滋3g、糖浆5ml或口服液20ml,加甲醇50ml,超声提取5分钟,滤过,滤液蒸干,残渣加20ml水使溶解并转移至分液漏斗中,加稀硫酸2ml,摇匀,用乙醚提取2次,每次30ml,弃去乙醚液,水液用水饱和的正丁醇提取3次,每次20ml,合正丁醇提取液,再用正丁醇饱和过的水洗2次,每次50ml,弃去水洗液,正丁醇提取液蒸干,残渣用甲醇10ml溶解至烧瓶中,蒸干,加盐酸4ml及氯仿50ml,加热回流1小时,分取氯仿液蒸干,残渣加乙醇1ml使溶解,作为供试品溶液;另取甘草次酸对照品适量,用乙醇溶解制成每1ml含1mg的溶液,作为对照品溶液;照中国药典薄层色谱法试验,吸取供试品溶液及对照品溶液各5μl,分别点于同一硅胶GF254薄层板上,以30~60℃石油醚:氯仿:冰醋酸=10:5:1为展开剂,展开,取出,晾干,置紫外光灯254nm下检视,供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点;
含量测定包括:
盐酸麻黄碱:采用高效液相色谱法,色谱柱为C18柱,以0.1%磷酸溶液:甲醇或乙腈:三乙胺94:6:0.1为流动相,检测波长为207nm;取盐酸麻黄碱对照品,精密称定,用甲醇溶解制成每1ml含盐酸麻黄碱对照品0.08mg的对照品溶液,摇匀,即得;另取膏滋5.0g、糖浆剂2.0ml或口服液5ml,置25ml量瓶中,流动相稀释至刻度,摇匀,用0.45μm的微孔滤膜滤过,即得供试品溶液;分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5-20μl,注入液相色谱仪测定含量;膏滋中含麻黄以盐酸麻黄碱计,不得少于0.5mg/g,糖浆剂中含麻黄以盐酸麻黄碱计,不得少于0.5mg/ml,口服液中含麻黄以盐酸麻黄碱计,不得少于0.25mg/ml;
磷酸可待因:照高效液相色谱法,色谱柱为C18柱,以冰醋酸调pH=3.5的0.03mol/L乙酸钠溶液:甲醇=8:2为流动相,检测波长为238nm;取磷酸可待因对照品10mg,精密称定,置10ml量瓶中,用50%溶液溶解并稀释至刻度,摇匀,精密量取1ml,置10ml量瓶中,加流动相溶解并稀释至刻度,摇匀,即得每1ml含磷酸可待因对照品0.10mg的对照品溶液;取膏滋5.0g、糖浆剂5.0ml或口服液5ml,加入1倍量的硅燥土拌匀,并转移至圆底烧瓶中,用50ml乙醇水浴回流提取1小时,滤过,并用乙醇洗涤烧瓶及滤器,合并滤液及洗液,蒸干,残渣加20ml水溶解并转移至分液漏斗中,用氢氧化钠试液调pH10~11,氯仿萃取4次,每次20ml,合并氯仿提取液,水浴挥至20ml,定量转移至分液漏斗中,用盐酸溶液1→200提取3次,每次20ml,合并酸液,再用氢氧化钠试液调pH10~11,用水饱和过氯仿提取4次,每次20ml,合并氯仿提取液,水浴蒸干,残渣用流动相溶解并定溶至5ml量瓶中,摇匀,用0.45μm的微孔滤膜滤过,即得供试品溶液;分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液,注入液相色谱仪测定含量;膏滋中含罂粟壳以磷酸可待因计,不得少于0.05mg/g,糖浆剂中含罂粟壳以磷酸可待因计,不得少于0.05mg/ml,口服液中含罂粟壳以磷酸可待因计,不得少于0.025mg/ml。
总的说,本发明所述克咳口服制剂的检测方法也可以是这这样的,它包括性状、检查、鉴别和含量测定,其中性状为:
对于膏滋,产品为棕褐色稠厚的半流体,味甜,微苦;
对于糖浆剂,产品为棕黄色粘稠液体,味甜,微苦;
对于口服液,产品为棕黄色液体,久置有轻摇易散沉淀,味甜,微苦;
检查包括:
相对密度:膏滋相对密度应为1.30~1.50之间,糖浆剂相对密度不低于1.20;
pH值:口服液PH值应为3.5~6.5;
其他:应符合中国药典糖浆剂、煎膏剂或合剂项下有关的各项规定;
鉴别为:(1)麻黄:取膏滋2g,加水20ml混匀;或取糖浆5ml,加水20ml混匀;或取口服液20ml,用氨水调pH10~11,用氯仿提取2次,每次20ml,合并氯仿提取液,用20ml盐酸溶液1→200提取1次,酸液蒸干,残渣用甲醇1ml使溶解,作为供试品溶液;另取盐酸麻黄碱对照品,用甲醇溶解制成每1ml含1mg的溶液,作为对照品溶液;照中国药典薄层色谱法试验,吸取上述供试品溶液及对照品溶液各5μl,分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上,以醋酸乙酯:丙酮:氨水=5:5:1为展开剂,展开,取出,晾干,喷以茚三酮试液,热风吹至斑点显色清晰,供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点;
(2)罂粟壳:取膏滋5g或糖浆5ml或口服液20ml,用氨试液调PH9~10,用醋酸乙酯提取2次,每次20ml,合并醋酸乙酯液,水浴蒸干,残渣加甲醇1ml使溶解,作为供试品溶液;另取罂粟壳对照药材1g,加醋酸乙酯20ml,超声处理20分钟,滤过,滤液蒸干,残渣加甲醇1ml使溶解,制成对照药材溶液;另取磷酸可待因对照品适量,用甲醇溶解制成每1ml含1mg的溶液,作为对照品溶液;照中国药典薄层色谱法试验,吸取供试品溶液、对照药材溶液及对照品溶液各5μl,分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上,以甲苯:丙酮:无水乙醇:氨水=20:20:3:1为展开剂,层析缸中另置一小杯浓氨试液预平衡30分钟,展开,取出,晾干,喷以稀碘化铋钾试液,加热至斑点显色清晰,供试品色谱中,在与对照药材及对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点;
(3)甘草:取膏滋3g、糖浆5ml或口服液20ml,加20ml水使稀释并转移至分液漏斗中,加稀硫酸2ml,摇匀,用乙醚提取2次,每次30ml,弃去乙醚液,水液用水饱和的正丁醇提取3次,每次20ml,合正丁醇提取液,再用正丁醇饱和过的水洗2次,每次50ml,弃去水洗液,正丁醇提取液蒸干,残渣用甲醇10ml溶解至烧瓶中,蒸干,加盐酸4ml及氯仿50ml,加热回流1小时,分取氯仿液蒸干,残渣加乙醇1ml使溶解,作为供试品溶液;另取甘草次酸对照品,用乙醇溶解制成每1ml含1mg的溶液,作为对照品溶液;照中国药典薄层色谱法试验,吸取供试品溶液及对照品溶液各5μl,分别点于同一硅胶GF254薄层板上,以30~60℃石油醚:氯仿:冰醋酸=10:5:1为展开剂,展开,取出,晾干,置紫外光灯254nm下检视,供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点;
含量测定为:
盐酸麻黄碱:采用高效液相色谱法,色谱柱为C18柱,以0.1%磷酸溶液:甲醇或乙腈:三乙胺94:6:0.1为流动相,检测波长为207nm;取盐酸麻黄碱对照品,精密称定,用甲醇溶解制成每1ml含盐酸麻黄碱对照品0.08mg的对照品溶液,摇匀,即得;另取膏滋5.0g、糖浆剂2.0ml或口服液5ml,置25ml量瓶中,流动相稀释至刻度,摇匀,用0.45μm的微孔滤膜滤过,即得供试品溶液;分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5-20μl,注入液相色谱仪测定含量;膏滋中含麻黄以盐酸麻黄碱计,不得少于0.5mg/g,糖浆剂中含麻黄以盐酸麻黄碱计,不得少于0.5mg/ml,口服液中含麻黄以盐酸麻黄碱计,不得少于0.25mg/ml;
磷酸可待因:照高效液相色谱法,色谱柱为C18柱,以冰醋酸调pH=3.5的0.03mol/L乙酸钠溶液:甲醇=8:2为流动相,检测波长为238nm;取磷酸可待因对照品10mg,精密称定,置10ml量瓶中,用50%甲醇溶液溶解并稀释至刻度,摇匀,精密量取1ml,置10ml量瓶中,加流动相溶解并稀释至刻度,摇匀,即得每1ml含磷酸可待因对照品0.10mg的对照品溶液;取膏滋5.0g、糖浆剂5.0ml或口服液5ml,加20ml水稀释并转移至分液漏斗中,用氢氧化钠试液调pH10~11,氯仿萃取4次,每次20ml,合并氯仿提取液,水浴挥至20ml,定量转移至分液漏斗中,用盐酸溶液1→200提取3次,每次20ml,合并酸液,再用氢氧化钠试液调pH10~11,用水饱和过氯仿提取4次,每次20ml,合并氯仿提取液,水浴蒸干,残渣用流动相溶解并定溶至5ml量瓶中,摇匀,用0.45μm的微孔滤膜滤过,即得供试品溶液;分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液,注入液相色谱仪测定含量;膏滋中含罂粟壳以磷酸可待因计,不得少于0.05mg/g、糖浆剂中含罂粟壳以磷酸可待因计,不得少于0.05mg/ml、口服液中含罂粟壳以磷酸可待因计,不得少于0.025mg/ml。
克咳口服制剂包括膏滋、口服液和糖浆,麻黄及罂粟壳是克咳口服制剂中起主要作用的药物,由于麻黄中盐酸麻黄碱和罂粟壳中磷酸可待因不仅是克咳口服制剂中起主要作用的有效物质,同时也是毒麻物质,故本发明中对盐酸麻黄碱和磷酸可待因的含量建立测定方法,以便能够更好的控制药品质量;而且本发明还对麻黄、罂粟壳和甘草三个药材进行薄层鉴别研究。
本发明的检测方法是经过大量的筛选得到的最佳方案,以下实验研究为本发明的优选过程。
一、盐酸麻黄碱含量测定方法研究
1、供试品溶液制备方法研究:
方法1:取膏滋5.0g、糖浆剂2.0ml或口服液5ml,用甲醇水浴回流提取,提取液滤过,滤液挥干,加入甲醇溶解,并稀释至25ml,摇匀,用0.45μm的微孔滤膜滤过,即得。
方法2:取膏滋5.0g、糖浆剂2.0ml或口服液5ml,置25ml量瓶中,流动相稀释至刻度,摇匀,用0.45μm的微孔滤膜滤过,即得。
样品 | 方法1(mg/g) | 方法2(mg/g) |
1 | 0.5642 | 0.7295 |
2 | 0.5037 | 0.7152 |
3 | 0.5127 | 0.7224 |
根据试验结果可知,采用方法2制备供试品溶液,盐酸麻黄碱提取更为完全。
2、流动相的选择:
流动相1:以乙腈与0.2磷酸溶液的混合溶液为流动相。
流动相2:以0.01mol/L磷酸二氢钾溶液与甲醇的混合溶液为流动相。
流动相3:以磷酸溶液、甲醇或乙腈及三乙胺的混合溶液为流动相。
结果:以0.05-1%磷酸溶液:甲醇或乙腈:三乙胺=50-115:3-15:0.05-2为流动相;阴性样品色谱图在盐酸麻黄碱位置处无假阳性峰,盐酸麻黄碱和相近的杂质峰分离完全(分离度>1.5),即在该条件下盐酸麻黄碱与其他组分分离完全。最佳流动相为:0.1%磷酸溶液:甲醇或乙腈:三乙胺=94:6:0.1。
二、磷酸可待因含量测定方法研究
1、供试品溶液制备方法研究:
方法一:取膏滋5.0g、糖浆剂5.0ml或口服液5ml,加1倍量的硅燥土拌匀并转移至圆底烧瓶中,加入50ml甲醇、乙醇或无水乙醇水浴回流提取1小时,滤过,并用甲醇、乙醇或无水乙醇洗滴烧瓶及滤器,滤液水浴蒸干,残渣加20ml水溶解并转移至分移漏斗中,用氢氧化钠试液调pH 10~11,氯仿萃取4次,每次20ml,合并氯仿提取液,水浴挥至约20ml,定量转移至分移漏斗中,用盐酸溶液(1→200)提取3次,每次20ml,合并酸液,再用氢氧化钠试液调pH10~11,用水饱和过氯仿提取4次,每次20ml,合并氯仿提取液,水浴蒸干,残渣用流动相溶解并定溶至5ml量瓶中,摇匀,滤过(0.45μm),即得。
结果:甲醇和乙醇为提取溶剂,对制剂中的磷酸可待因浸出效果相当,但甲醇在回流提取过程中,浸出的糖类杂质甚多,对在氯仿萃取时乳化程度加大,不利于操作,故本发明中,提取溶剂选用乙醇。
方法二:取膏滋5.0g、糖浆剂5.0ml或口服液5ml,加20ml水稀释并转移至分液漏斗中,用氢氧化钠试液调pH10~11,加入氯仿或乙醚萃取4次,每次20ml,合并氯仿提取液,水浴挥至约20ml,定量转移至分液漏斗中,用盐酸溶液(1→200)提取3次,每次20ml,合并酸液,再用氢氧化钠试液调pH10~11,用水饱和过氯仿提取4次,每次20ml,合并氯仿提取液,水浴蒸干,残渣用流动相溶解并定溶至5ml量瓶中,摇匀,滤过(0.45μm),即得。
结果:选用氯仿作为萃取溶剂,磷酸可待因提取较为完全。
2、流动相的选择:
流动相1:以乙腈、乙酸铵溶液与三乙胺的混合溶液为流动相。
流动相2:以磷酸二氢钾溶液、甲醇与四氢呋喃的混合溶液为流动相。
流动相3:以乙酸钠溶液与甲醇的混合溶液为流动相。
结果:以0.01-1mol/L乙酸钠溶液(冰醋酸调pH=2-5):甲醇=1-9:9-1为流动相;阴性样品色谱图在磷酸可待因位置处无假阳性峰,磷酸可待因和相近的杂质峰分离完全(分离度>1.5),即在该条件下磷酸可待因与其他组分分离完全。最佳流动相为:0.03mol/L乙酸钠溶液(冰醋酸调pH=3.5):甲醇=80:20。
三、麻黄薄层鉴别研究
供试品溶液制备方法一:取膏滋2g,加水20ml混匀;或取糖浆5ml,加水20ml混匀;或取口服液20ml。用氨水调PH10~11,用氯仿提取2次,每次20ml,合并氯仿提取液,用20ml(1→200)盐酸溶液提取1次,酸液蒸干,残渣用甲醇1ml使溶解,作为供试品溶液;同法制备缺麻黄阴性对照液。
供试品溶液制备方法二:取膏滋2g、糖浆2ml或取口服液5ml。加甲醇20ml,溶解,滤过,作为供试品溶液;同法制备缺麻黄阴性对照液。
展开剂选择:分别以醋酸乙酯、丙酮和氨水的混合溶液;氯仿、甲醇和氨水的混合溶液为展开剂。
结果:采用方法一制备供试品溶液,以醋酸乙酯:丙酮:氨水=2-10:2-10:0.3-2为展开剂,其分离度好,斑点显色清晰,阴性对照无干扰,方法重现性好。最佳展开剂为:醋酸乙酯:丙酮:氨水=5:5:1
四、罂粟壳鉴别研究
供试品溶液制备方法一:取膏滋10g、糖浆10ml或口服液20ml,加醋酸乙酯40ml及氨水1ml,超声处理20分钟,滤过,滤液蒸干,残渣加甲醇1ml使溶解,作为供试品溶液;同法制备缺罂粟壳阴性对照液。
供试品溶液制备方法二:取膏滋10g、糖浆10ml或口服液10ml,加甲醇50ml,超声处理30分钟,滤过,滤液蒸干,残渣加甲醇5ml使溶解,作为供供试品溶液;同法制备缺罂粟壳阴性对照液。
供试品溶液制备方法三:取膏滋10g、糖浆10ml或口服液20ml,用氨试液调pH9~10,用醋酸乙酯提取2次,每次20ml,合并醋酸乙酯液,水浴蒸干,残渣加甲醇1ml使溶解,作为供试品溶液;同法制备缺罂粟壳阴性对照液。
供试品溶液制备方法四:取膏滋10g、糖浆10ml或口服液10ml,用乙醇超声处理30分钟,滤过,滤液蒸干,加甲醇2ml使溶解,作为供试品溶液;同法制备缺罂粟壳阴性对照液。
展开剂选择:分别以甲苯、丙酮、无水乙醇和氨水的混合溶液;氯仿、甲醇和氨水的混合溶液;甲苯、丙酮和氨水的混合溶液为展开剂。
结果:采用方法一或方法三制备供试品溶液,以甲苯:丙酮:无水乙醇:氨水=10-35:10-35:0.5-5:0.5-3为展开剂,其分离度好,斑点显色清晰,阴性对照无干扰,方法重现性好。最佳展开剂为:甲苯:丙酮:无水乙醇:氨水=20:20:3:1。
五、甘草鉴别研究
供试品溶液制备方法一:取膏滋5g、糖浆5ml或口服液20ml,加甲醇50ml,超声提取5分钟,滤过,滤液蒸干,残渣加20ml水使溶解并转移至分液漏斗中,加稀硫酸2ml,摇匀,用乙醚提取两次,每次30ml,弃去乙醚液,水液用水饱和过正丁醇提取3次,每次20ml,合正丁醇提取液,再用正丁醇饱和过的水洗2次,每次50ml,弃去水洗液,正丁醇提取液蒸干,残渣用甲醇10ml溶解至烧瓶中,蒸干,加盐酸4ml及氯仿50ml,加热回流1小时,分取氯仿液蒸干,残渣加乙醇1ml使溶解,作为供试品溶液;同法制备缺甘草阴性对照液。
供试品溶液制备方法二:取膏滋5g、糖浆5ml或口服液20ml,加30ml水使溶解并转移至分液漏斗中,加稀硫酸2ml,摇匀,用乙醚提取两次,每次30ml,弃去乙醚液,水液用水饱和过正丁醇提取3次,每次20ml,合正丁醇提取液,再用正丁醇饱和过的水洗2次,每次50ml,弃去水洗液,正丁醇提取液蒸干,残渣用甲醇10ml溶解至烧瓶中,蒸干,加盐酸4ml及氯仿50ml,加热回流1小时,分取氯仿液蒸干,残渣加乙醇1ml使溶解,作为供试品溶液;同法制备缺甘草阴性对照液。
供试品溶液制备方法三:取膏滋5g、糖浆5ml或口服液20ml,加氯仿30ml,盐酸5ml,水浴回流提取30分钟,放冷,滤过,滤液转移至分液漏斗中用水洗涤3次,每次20ml,弃水层,氯仿液加适量无水硫酸钠,滤过,滤液蒸干,残渣加乙醇1ml使溶解,作为供试品溶液;同法制备缺甘草阴性对照液。
供试品溶液制备方法四:取膏滋5g、糖浆5ml或口服液20ml,加稀盐酸1ml,水40ml摇匀,加水饱和正丁醇提取5次,每次30ml,合并正丁醇液,水浴蒸干,残渣用甲醇5ml分次溶解,转移至100ml圆底烧瓶中,挥发去甲醇液,残渣加盐酸5ml,氯仿50ml,加热回流3h。放冷,分取氯仿层,滤过,用10ml氯仿分次洗涤滤纸,合并滤液,水浴蒸干,残渣加甲醇溶解定容至5ml,作为供试品液;同法制备缺甘草阴性对照液。
展开剂选择:分别以石油醚(30~60℃)、氯仿和冰醋酸的混合溶液;石油醚(60~90℃)、苯、醋酸乙酯和冰醋酸的混合溶液;环己烷、醋酸乙酯和冰醋酸的混合溶液;环己烷、醋酸乙酯、苯和甲酸的混合溶液为展开剂。
结果:采用方法一或方法二制备供试品溶液,以石油醚(30~60℃):氯仿:冰醋酸=5-25:1-9:0.2-3为展开剂,其分离度好,斑点显色清晰,阴性对照无干扰,方法重现性好。最佳展开剂为石油醚(30~60℃):氯仿:冰醋酸=10:5:1。
与现有技术相比,采用本发明的检测方法可对克咳口服制剂的质量进行有效的控制,从而保证克咳口服制剂的临床疗效。
具体实施方式:以下通过实施例进一步说明本发明,但不作为对本发明的限制。
本发明的实施例1:
性状:对于膏滋,产品为棕褐色稠厚的半流体,味甜,微苦;对于糖浆剂,产品为棕黄色粘稠液体,味甜,微苦;对于口服液,产品为棕黄色液体,久置有轻摇易散沉淀,味甜,微苦;
检查:相对密度:膏滋相对密度应为1.30~1.50之间,糖浆剂相对密度不低于1.20;pH值:口服液PH值应为3.5~6.5;其他:应符合中国药典糖浆剂、煎膏剂或合剂项下有关的各项规定;
鉴别:
(1)麻黄:取膏滋2g,加水20ml混匀;或取糖浆5ml,加水20ml混匀;或取口服液20ml,用氨水调pH10~11,用氯仿提取2次,每次20ml,合并氯仿提取液,用20ml盐酸溶液1→200提取1次,酸液蒸干,残渣用甲醇1ml使溶解,作为供试品溶液;另取盐酸麻黄碱对照品,用甲醇溶解制成每1ml含1mg的溶液,作为对照品溶液;照中国药典薄层色谱法试验,吸取上述供试品溶液及对照品溶液各5μl,分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上,以醋酸乙酯:丙酮:氨水=5:5:1为展开剂,展开,取出,晾干,喷以茚三酮试液,热风吹至斑点显色清晰,供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点;
(2)罂粟壳:取膏滋5g或糖浆10ml或口服液20ml,加醋酸乙酯40ml及氨水1ml,超声处理20分钟,滤过,滤液蒸干,残渣加甲醇lml使溶解,作为供试品溶液;另取罂粟壳对照药材1g,加醋酸乙酯40ml及氨水1ml的混合液,超声处理20分钟,滤过,滤液蒸干,残渣加甲醇1ml使溶解,制成对照药材溶液;另取磷酸可待因对照品,用甲醇溶解制成每1ml含1mg的溶液,作为对照品溶液;照中国药典薄层色谱法试验,吸取供试品溶液、对照药材溶液及对照品溶液各5μl,分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上,以甲苯:丙酮:无水乙醇:氨水=20:20:3:1为展开剂,层析缸中另置一小杯浓氨试液预平衡30分钟,展开,取出,晾干,喷以稀碘化铋钾试液,加热至斑点显色清晰,供试品色谱中,在与对照药材及对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点;
(3)甘草:取膏滋3g、糖浆5ml或口服液20ml,加甲醇50ml,超声提取5分钟,滤过,滤液蒸干,残渣加20ml水使溶解并转移至分液漏斗中,加稀硫酸2ml,摇匀,用乙醚提取2次,每次30ml,弃去乙醚液,水液用水饱和的正丁醇提取3次,每次20ml,合正丁醇提取液,再用正丁醇饱和过的水洗2次,每次50ml,弃去水洗液,正丁醇提取液蒸干,残渣用甲醇10ml溶解至烧瓶中,蒸干,加盐酸4ml及氯仿50ml,加热回流1小时,分取氯仿液蒸干,残渣加乙醇1ml使溶解,作为供试品溶液;另取甘草次酸对照品适量,用乙醇溶解制成每1ml含1mg的溶液,作为对照品溶液;照中国药典薄层色谱法试验,吸取供试品溶液及对照品溶液各5μ1,分别点于同一硅胶GF254薄层板上,以30~60℃石油醚:氯仿:冰醋酸=10:5:1为展开剂,展开,取出,晾干,置紫外光灯254nm下检视,供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点;
含量测定:
盐酸麻黄碱:采用高效液相色谱法,色谱柱为C18柱,以0.1%磷酸溶液:甲醇或乙腈:三乙胺94:6:0.1为流动相,检测波长为207nm;取盐酸麻黄碱对照品,精密称定,用甲醇溶解制成每1ml含盐酸麻黄碱对照品0.08mg的对照品溶液,摇匀,即得;另取膏滋5.0g、糖浆剂2.0ml或口服液5ml,置25ml量瓶中,流动相稀释至刻度,摇匀,用0.45μm的微孔滤膜滤过,即得供试品溶液;分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5-20μl,注入液相色谱仪测定含量;膏滋中含麻黄以盐酸麻黄碱计,不得少于0.5mg/g,糖浆剂中含麻黄以盐酸麻黄碱计,不得少于0.5mg/ml,口服液中含麻黄以盐酸麻黄碱计,不得少于0.25mg/ml;
磷酸可待因:照高效液相色谱法,色谱柱为C18柱,以冰醋酸调pH=3.5的0.03mol/L乙酸钠溶液:甲醇=8:2为流动相,检测波长为238nm;取磷酸可待因对照品10mg,精密称定,置10ml量瓶中,用50%溶液溶解并稀释至刻度,摇匀,精密量取1ml,置10ml量瓶中,加流动相溶解并稀释至刻度,摇匀,即得每1ml含磷酸可待因对照品0.10mg的对照品溶液;取膏滋5.0g、糖浆剂5.0ml或口服液5ml,加入1倍量的硅燥土拌匀,并转移至圆底烧瓶中,用50ml乙醇水浴回流提取1小时,滤过,并用乙醇洗涤烧瓶及滤器,合并滤液及洗液,蒸干,残渣加20ml水溶解并转移至分液漏斗中,用氢氧化钠试液调pH10~11,氯仿萃取4次,每次20ml,合并氯仿提取液,水浴挥至20ml,定量转移至分液漏斗中,用盐酸溶液1→200提取3次,每次20ml,合并酸液,再用氢氧化钠试液调pH10~11,用水饱和过氯仿提取4次,每次20ml,合并氯仿提取液,水浴蒸干,残渣用流动相溶解并定溶至5ml量瓶中,摇匀,用0.45μm的微孔滤膜滤过,即得供试品溶液;分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液,注入液相色谱仪测定含量;膏滋中含罂粟壳以磷酸可待因计,不得少于0.05mg/g,糖浆剂中含罂粟壳以磷酸可待因计,不得少于0.05mg/ml,口服液中含罂粟壳以磷酸可待因计,不得少于0.025mg/ml。
本发明的实施例2:
性状:对于膏滋,产品为棕褐色稠厚的半流体,味甜,微苦;对于糖浆剂,产品为棕黄色粘稠液体,味甜,微苦;对于口服液,产品为棕黄色液体,久置有轻摇易散沉淀,味甜,微苦;
检查:相对密度:膏滋相对密度应为1.30~1.50之间,糖浆剂相对密度不低于1.20;pH值:口服液PH值应为3.5~6.5;其他:应符合中国药典糖浆剂、煎膏剂或合剂项下有关的各项规定;
鉴别:
(1)麻黄:取膏滋2g,加水20ml混匀;或取糖浆5ml,加水20ml混匀;或取口服液20ml,用氨水调pH10~11,用氯仿提取2次,每次20ml,合并氯仿提取液,用20ml盐酸溶液1→200提取1次,酸液蒸干,残渣用甲醇1ml使溶解,作为供试品溶液;另取盐酸麻黄碱对照品,用甲醇溶解制成每1ml含1mg的溶液,作为对照品溶液;照中国药典薄层色谱法试验,吸取上述供试品溶液及对照品溶液各5μl,分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上,以醋酸乙酯:丙酮:氨水=5:5:1为展开剂,展开,取出,晾干,喷以茚三酮试液,热风吹至斑点显色清晰,供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点;
(2)罂粟壳:取膏滋5g或糖浆5ml或口服液20ml,用氨试液调PH9~10,用醋酸乙酯提取2次,每次20ml,合并醋酸乙酯液,水浴蒸干,残渣加甲醇1ml使溶解,作为供试品溶液;另取罂粟壳对照药材1g,加醋酸乙酯20ml,超声处理20分钟,滤过,滤液蒸干,残渣加甲醇1ml使溶解,制成对照药材溶液;另取磷酸可待因对照品适量,用甲醇溶解制成每1ml含1mg的溶液,作为对照品溶液;照中国药典薄层色谱法试验,吸取供试品溶液、对照药材溶液及对照品溶液各5μl,分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上,以甲苯:丙酮:无水乙醇:氨水=20:20:3:1为展开剂,层析缸中另置一小杯浓氨试液预平衡30分钟,展开,取出,晾干,喷以稀碘化铋钾试液,加热至斑点显色清晰,供试品色谱中,在与对照药材及对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点;
(3)甘草:取膏滋3g、糖浆5ml或口服液20ml,加20ml水使稀释并转移至分液漏斗中,加稀硫酸2ml,摇匀,用乙醚提取2次,每次30ml,弃去乙醚液,水液用水饱和的正丁醇提取3次,每次20ml,合正丁醇提取液,再用正丁醇饱和过的水洗2次,每次50ml,弃去水洗液,正丁醇提取液蒸干,残渣用甲醇10ml溶解至烧瓶中,蒸干,加盐酸4ml及氯仿50ml,加热回流1小时,分取氯仿液蒸干,残渣加乙醇1ml使溶解,作为供试品溶液;另取甘草次酸对照品,用乙醇溶解制成每1ml含1mg的溶液,作为对照品溶液;照中国药典薄层色谱法试验,吸取供试品溶液及对照品溶液各5μl,分别点于同一硅胶GF254薄层板上,以30~60℃石油醚:氯仿:冰醋酸=10:5:1为展开剂,展开,取出,晾干,置紫外光灯254nm下检视,供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点;
含量测定:
盐酸麻黄碱:采用高效液相色谱法,色谱柱为C18柱,以0.1%磷酸溶液:甲醇或乙腈:三乙胺94:6:0.1为流动相,检测波长为207nm;取盐酸麻黄碱对照品,精密称定,用甲醇溶解制成每1ml含盐酸麻黄碱对照品0.08mg的对照品溶液,摇匀,即得;另取膏滋5.0g、糖浆剂2.0ml或口服液5ml,置25ml量瓶中,流动相稀释至刻度,摇匀,用0.45μm的微孔滤膜滤过,即得供试品溶液;分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5-20μl,注入液相色谱仪测定含量;膏滋中含麻黄以盐酸麻黄碱计,不得少于0.5mg/g,糖浆剂中含麻黄以盐酸麻黄碱计,不得少于0.5mg/ml,口服液中含麻黄以盐酸麻黄碱计,不得少于0.25mg/ml;
磷酸可待因:照高效液相色谱法,色谱柱为C18柱,以冰醋酸调pH=3.5的0.03mol/L乙酸钠溶液:甲醇=8:2为流动相,检测波长为238nm;取磷酸可待因对照品10mg,精密称定,置10ml量瓶中,用50%甲醇溶液溶解并稀释至刻度,摇匀,精密量取1ml,置10ml量瓶中,加流动相溶解并稀释至刻度,摇匀,即得每1ml含磷酸可待因对照品0.10mg的对照品溶液;取膏滋5.0g、糖浆剂5.0ml或口服液5ml,加20ml水稀释并转移至分液漏斗中,用氢氧化钠试液调pH10~11,氯仿萃取4次,每次20ml,合并氯仿提取液,水浴挥至20ml,定量转移至分液漏斗中,用盐酸溶液1→200提取3次,每次20ml,合并酸液,再用氢氧化钠试液调pH10~11,用水饱和过氯仿提取4次,每次20ml,合并氯仿提取液,水浴蒸干,残渣用流动相溶解并定溶至5ml量瓶中,摇匀,用0.45μm的微孔滤膜滤过,即得供试品溶液;分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液,注入液相色谱仪测定含量;膏滋中含罂粟壳以磷酸可待因计,不得少于0.05mg/g、糖浆剂中含罂粟壳以磷酸可待因计,不得少于0.05mg/ml、口服液中含罂粟壳以磷酸可待因计,不得少于0.025mg/ml。
本发明的实施例3:
性状:对于膏滋,产品为棕褐色稠厚的半流体,味甜,微苦;对于糖浆剂,产品为棕黄色粘稠液体,味甜,微苦;对于口服液,产品为棕黄色液体,久置有轻摇易散沉淀,味甜,微苦;
检查:相对密度:膏滋相对密度应为1.30~1.50之间,糖浆剂相对密度不低于1.20;pH值:口服液PH值应为3.5~6.5;其他:应符合中国药典糖浆剂、煎膏剂或合剂项下有关的各项规定;
鉴别:
(1)取膏滋2g,加水10ml混匀;或取糖浆5ml,加水10ml混匀;或取口服液20ml。用氨水调pH8,用氯仿提取1次,每次10ml,合并氯仿提取液,用10ml盐酸溶液1→200提取1-5次,酸液蒸干,残渣用甲醇1ml使溶解,作为供试品溶液;另取盐酸麻黄碱对照品,用甲醇溶解制成每1ml含0.5mg的溶液,作为对照品溶液;照中国药典薄层色谱法试验,吸取上述供试品溶液及对照品溶液各5μl,分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上,以醋酸乙酯:丙酮:氨水=2:2:0.3为展开剂,展开,取出,晾干,喷以茚三酮试液,热风吹至斑点显色清晰,供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点。
(2)取膏滋5g或糖浆5ml或口服液20ml,用氨试液调PH13,用醋酸乙酯提取5次,每次10ml,合并醋酸乙酯液,水浴蒸干,残渣加甲醇1ml使溶解,作为供试品溶液;另取罂粟壳对照药材1g,加醋酸乙酯100ml,超声处理60分钟,滤过,滤液蒸干,残渣加甲醇1ml使溶解,制成对照药材溶液;另取磷酸可待因对照品适量,用甲醇溶解制成每1ml含1mg的溶液,作为对照品溶液;照中国药典薄层色谱法试验,吸取供试品溶液、对照药材溶液及对照品溶液各20μl,分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上,以甲苯:丙酮:无水乙醇:氨水=10:35:0.5:0.5为展开剂,层析缸中另置一小杯浓氨试液预平衡60分钟,展开,取出,晾干,喷以稀碘化铋钾试液,加热至斑点显色清晰,供试品色谱中,在与对照药材及对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点。
(3)甘草:取膏滋3g、糖浆5ml或口服液20ml,加50ml水使稀释并转移至分液漏斗中,加稀硫酸1-5ml,摇匀,用乙醚提取5次,每次10ml,弃去乙醚液,水液用水饱和的正丁醇提取5次,每次10ml,合正丁醇提取液,再用正丁醇饱和过的水洗5次,每次10ml,弃去水洗液,正丁醇提取液蒸干,残渣用甲醇20ml溶解至烧瓶中,蒸干,加盐酸10ml及氯仿100ml,加热回流5小时,分取氯仿液蒸干,残渣加乙醇2ml使溶解,作为供试品溶液;另取甘草次酸对照品适量,用乙醇溶解制成每1ml含2mg的溶液,作为对照品溶液。照中国药典薄层色谱法试验,吸取供试品溶液及对照品溶液各20μl,分别点于同一硅胶GF254薄层板上,以石油醚(30~60℃):氯仿:冰醋酸=5:9:0.2为展开剂,展开,取出,晾干,置紫外光灯500nm下检视,供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点。
含量测定:
盐酸麻黄碱:采用高效液相色谱法,色谱柱为C8柱,以1%磷酸溶液:甲醇或乙腈:三乙胺=115:15:2为流动相,检测波长为500nm;取盐酸麻黄碱对照品,精密称定,用甲醇溶解制成每1ml含盐酸麻黄碱对照品0.05mg的对照品溶液,摇匀,即得;另取膏滋5.0g、糖浆剂2.0ml或口服液5ml,置25ml量瓶中,流动相稀释至刻度,摇匀,用0.65μm的微孔滤膜滤过,即得供试品溶液;分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各20μl,注入液相色谱仪测定含量;该克咳制剂中,膏滋中含麻黄以盐酸麻黄碱计,不得少于0.5mg/g、糖浆剂中含麻黄以盐酸麻黄碱计,不得少于0.5mg/ml、口服液中含麻黄以盐酸麻黄碱计,不得少于0.25mg/ml。
磷酸可待因:照高效液相色谱法,色谱柱为C8柱,以1mol/L乙酸钠溶液(冰醋酸调pH=5):甲醇=9:1为流动相,检测波长为500nm;取磷酸可待因对照品10mg,精密称定,置50ml量瓶中,用甲醇-水溶液溶解并稀释至刻度,摇匀,精密量取1ml,置25ml量瓶中,加流动相溶解并稀释至刻度,摇匀,即得每1ml含磷酸可待因对照品0.10mg的对照品溶液;取膏滋5.0g、糖浆剂5.0ml或口服液5ml,加50ml水稀释并转移至分液漏斗中,用氢氧化钠试液调pH13,氯仿萃取8次,每次5ml,合并氯仿提取液,水浴挥至30ml,定量转移至分液漏斗中,用盐酸溶液1→200提取5次,每次5ml,合并酸液,再用氢氧化钠试液调pH13,用水饱和过氯仿提取8次,每次5ml,合并氯仿提取液,水浴蒸干,残渣用流动相溶解并定溶至25ml量瓶中,摇匀,用0.65μm的微孔滤膜滤过,即得供试品溶液;分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液,注入液相色谱仪测定含量,该克咳口服制剂中,膏滋中含罂粟壳以磷酸可待因计,不得少于0.05mg/g、糖浆剂中含罂粟壳以磷酸可待因计,不得少于0.05mg/ml、口服液中含罂粟壳以磷酸可待因计,不得少于0.025mg/ml。
本发明的实施例4:
性状:对于膏滋,产品为棕褐色稠厚的半流体,味甜,微苦;对于糖浆剂,产品为棕黄色粘稠液体,味甜,微苦;对于口服液,产品为棕黄色液体,久置有轻摇易散沉淀,味甜,微苦;
检查:相对密度:膏滋相对密度应为1.30~1.50之间,糖浆剂相对密度不低于1.20;pH值:口服液PH值应为3.5~6.5;其他:应符合中国药典糖浆剂、煎膏剂或合剂项下有关的各项规定;
鉴别:
(1)麻黄:取膏滋2g,加水50ml混匀;或取糖浆5ml,加水50ml混匀;或取口服液20ml。用氨水调pH13,用氯仿提取5次,每次50ml,合并氯仿提取液,用50ml盐酸溶液1→200提取5次,酸液蒸干,残渣用甲醇1ml使溶解,作为供试品溶液;另取盐酸麻黄碱对照品,用甲醇溶解制成每1ml含1mg的溶液,作为对照品溶液;照中国药典薄层色谱法试验,吸取上述供试品溶液及对照品溶液各25μl,分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上,以醋酸乙酯:丙酮:氨水=10:10:2为展开剂,展开,取出,晾干,喷以茚三酮试液,热风吹至斑点显色清晰,供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点;
(2)罂粟壳:取膏滋5g或糖浆5ml或口服液20ml,加醋酸乙酯10ml及氨水0.5ml,超声处理10分钟,滤过,滤液蒸干,残渣加甲醇1ml使溶解,作为供试品溶液;另取罂粟壳对照药材1g,加醋酸乙酯10ml及氨水5ml的混合液,超声处理10分钟,滤过,滤液蒸干,残渣加甲醇1ml使溶解,制成对照药材溶液;另取磷酸可待因对照品适量,用甲醇溶解制成每1ml含1mg的溶液,作为对照品溶液;照中国药典薄层色谱法试验,吸取供试品溶液、对照药材溶液及对照品溶液各5μl,分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上,以甲苯:丙酮:无水乙醇:氨水=35:10:5:3为展开剂,层析缸中另置一小杯浓氨试液预平衡10分钟,展开,取出,晾干,喷以稀碘化铋钾试液,加热至斑点显色清晰,供试品色谱中,在与对照药材及对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点;
(3)甘草:取膏滋5g或糖浆5ml或口服液20ml,用氨试液调PH8,用醋酸乙酯提取1次,每次100ml,合并醋酸乙酯液,水浴蒸干,残渣加甲醇1ml使溶解,作为供试品溶液;另取罂粟壳对照药材1g,加醋酸乙酯10ml,超声处理10分钟,滤过,滤液蒸干,残渣加甲醇1ml使溶解,制成对照药材溶液;另取磷酸可待因对照品适量,用甲醇溶解制成每1ml含1mg的溶液,作为对照品溶液;照中国药典薄层色谱法试验,吸取供试品溶液、对照药材溶液及对照品溶液各5μl,分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上,以甲苯:丙酮:无水乙醇:氨水=5:9:0.2为展开剂,层析缸中另置一小杯浓氨试液预平衡10分钟,展开,取出,晾干,喷以稀碘化铋钾试液,加热至斑点显色清晰,供试品色谱中,在与对照药材及对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点。
含量测定:
盐酸麻黄碱:采用高效液相色谱法,色谱柱为C4柱,以0.05%磷酸溶液:甲醇或乙腈:三乙胺=50:3:2为流动相,检测波长为200nm;取盐酸麻黄碱对照品,精密称定,用甲醇溶解制成每1ml含盐酸麻黄碱对照品0.15mg的对照品溶液,摇匀,即得;另取膏滋5.0g、糖浆剂2.0ml或口服液5ml,置25ml量瓶中,流动相稀释至刻度,摇匀,用0.1μm的微孔滤膜滤过,即得供试品溶液;分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl,注入液相色谱仪测定含量;该克咳制剂中,膏滋中含麻黄以盐酸麻黄碱计,不得少于0.5mg/g、糖浆剂中含麻黄以盐酸麻黄碱计,不得少于0.5mg/ml、口服液中含麻黄以盐酸麻黄碱计,不得少于0.25mg/ml;
磷酸可待因:照高效液相色谱法,色谱柱为C4柱,以1mol/L乙酸钠溶液(冰醋酸调pH=5):甲醇=9:1为流动相,检测波长为200nm;取磷酸可待因对照品10mg,精密称定,置50ml量瓶中,用甲醇-水溶液溶解并稀释至刻度,摇匀,精密量取1ml,置25ml量瓶中,加流动相溶解并稀释至刻度,摇匀,即得每1ml含磷酸可待因对照品0.10mg的对照品溶液;取膏滋5.0g、糖浆剂5.0ml或口服液5ml,加入硅燥土拌匀,并转移至圆底烧瓶中,用10ml乙醇水浴回流提取0.5小时,滤过,并用乙醇洗涤烧瓶及滤器,合并滤液及洗液,蒸干,残渣加5ml水溶解并转移至分液漏斗中,用氢氧化钠试液调pH8,氯仿萃取8次,每次5ml,合并氯仿提取液,水浴挥至10ml,定量转移至分液漏斗中,用盐酸溶液1→200提取1次,每次50ml,合并酸液,再用氢氧化钠试液调pH8,用水饱和过氯仿提取2次,每次50ml,合并氯仿提取液,水浴蒸干,残渣用流动相溶解并定溶至5ml量瓶中,摇匀,用0.65μm的微孔滤膜滤过,即得供试品溶液;分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液,注入液相色谱仪测定含量,该克咳口服制剂中,膏滋中含罂粟壳以磷酸可待因计,不得少于0.05mg/g、糖浆剂中含罂粟壳以磷酸可待因计,不得少于0.05mg/ml、口服液中含罂粟壳以磷酸可待因计,不得少于0.025mg/ml。
本发明的实施例5:
性状:对于膏滋,产品为棕褐色稠厚的半流体,味甜,微苦;对于糖浆剂,产品为棕黄色粘稠液体,味甜,微苦;对于口服液,产品为棕黄色液体,久置有轻摇易散沉淀,味甜,微苦;
检查:相对密度:膏滋相对密度应为1.30~1.50之间,糖浆剂相对密度不低于1.20;pH值:口服液PH值应为3.5~6.5;其他:应符合中国药典糖浆剂、煎膏剂或合剂项下有关的各项规定;
鉴别:
(1)麻黄:取膏滋2g,加水10ml混匀;或取糖浆5ml,加水50ml混匀;或取口服液20ml。用氨水调pH12,用氯仿提取3次,每次30ml,合并氯仿提取液,用10ml盐酸溶液1→200提取1次,酸液蒸干,残渣用甲醇1ml使溶解,作为供试品溶液;另取盐酸麻黄碱对照品,用甲醇溶解制成每1ml含1mg的溶液,作为对照品溶液;照中国药典薄层色谱法试验,吸取上述供试品溶液及对照品溶液各5μl,分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上,以醋酸乙酯:丙酮:氨水=10:2:0.3为展开剂,展开,取出,晾干,喷以茚三酮试液,热风吹至斑点显色清晰,供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点;
(2)罂粟壳:取膏滋5g或糖浆5ml或口服液20ml,加醋酸乙酯100ml及氨水5ml,超声处理60分钟,滤过,滤液蒸干,残渣加甲醇1ml使溶解,作为供试品溶液;另取罂粟壳对照药材1g,加醋酸乙酯100ml及氨水0.5ml的混合液,超声处理60分钟,滤过,滤液蒸干,残渣加甲醇1ml使溶解,制成对照药材溶液;另取磷酸可待因对照品适量,用甲醇溶解制成每1ml含1mg的溶液,作为对照品溶液;照中国药典薄层色谱法试验,吸取供试品溶液、对照药材溶液及对照品溶液各20μl,分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上,以甲苯:丙酮:无水乙醇:氨水=10:35:0.5:0.5为展开剂,层析缸中另置一小杯浓氨试液预平衡60分钟,展开,取出,晾干,喷以稀碘化铋钾试液,加热至斑点显色清晰,供试品色谱中,在与对照药材及对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点;
(3)甘草:取膏滋5g或糖浆5ml或口服液20ml,用氨试液调PH13,用醋酸乙酯提取5次,每次10ml,合并醋酸乙酯液,水浴蒸干,残渣加甲醇1ml使溶解,作为供试品溶液;另取罂粟壳对照药材1g,加醋酸乙酯100ml,超声处理60分钟,滤过,滤液蒸干,残渣加甲醇1ml使溶解,制成对照药材溶液;另取磷酸可待因对照品适量,用甲醇溶解制成每1ml含1mg的溶液,作为对照品溶液;照中国药典薄层色谱法试验,吸取供试品溶液、对照药材溶液及对照品溶液各20μl,分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上,以甲苯:丙酮:无水乙醇:氨水=25:1:3为展开剂,层析缸中另置一小杯浓氨试液预平衡60分钟,展开,取出,晾干,喷以稀碘化铋钾试液,加热至斑点显色清晰,供试品色谱中,在与对照药材及对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点。
含量测定:
盐酸麻黄碱:采用高效液相色谱法,色谱柱为C18柱,以0.05%磷酸溶液:甲醇或乙腈:三乙胺=50:3:0.05为流动相,检测波长为200nm;取盐酸麻黄碱对照品,精密称定,用甲醇溶解制成每1ml含盐酸麻黄碱对照品0.05mg的对照品溶液,摇匀,即得;另取膏滋5.0g、糖浆剂2.0ml或口服液5ml,置25ml量瓶中,流动相稀释至刻度,摇匀,用0.65μm的微孔滤膜滤过,即得供试品溶液;分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5μl,注入液相色谱仪测定含量;该克咳制剂中,膏滋中含麻黄以盐酸麻黄碱计,不得少于0.5mg/g、糖浆剂中含麻黄以盐酸麻黄碱计,不得少于0.5mg/ml、口服液中含麻黄以盐酸麻黄碱计,不得少于0.25mg/ml;
磷酸可待因:照高效液相色谱法,色谱柱为C8柱,以1mol/L乙酸钠溶液(冰醋酸调pH=2):甲醇=1:9为流动相,检测波长为500nm;取磷酸可待因对照品10mg,精密称定,置5ml量瓶中,用甲醇-水溶液溶解并稀释至刻度,摇匀,精密量取1ml,置5ml量瓶中,加流动相溶解并稀释至刻度,摇匀,即得每1ml含磷酸可待因对照品0.10mg的对照品溶液;取膏滋5.0g、糖浆剂5.0ml或口服液5ml,加入硅燥土拌匀,并转移至圆底烧瓶中,用100ml乙醇水浴回流提取5小时,滤过,并用乙醇洗涤烧瓶及滤器,合并滤液及洗液,蒸干,残渣加50ml水溶解并转移至分液漏斗中,用氢氧化钠试液调pH13,氯仿萃取1次,每次50ml,合并氯仿提取液,水浴挥至30ml,定量转移至分液漏斗中,用盐酸溶液1→200提取5次,每次5ml,合并酸液,再用氢氧化钠试液调pH13,用水饱和过氯仿提取8次,每次5ml,合并氯仿提取液,水浴蒸干,残渣用流动相溶解并定溶至25ml量瓶中,摇匀,用0.1μm的微孔滤膜滤过,即得供试品溶液;分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液,注入液相色谱仪测定含量,该克咳口服制剂中,膏滋中含罂粟壳以磷酸可待因计,不得少于0.05mg/g、糖浆剂中含罂粟壳以磷酸可待因计,不得少于0.05mg/ml、口服液中含罂粟壳以磷酸可待因计,不得少于0.025mg/ml。
本发明的实施例6:
性状:对于膏滋,产品为棕褐色稠厚的半流体,味甜,微苦;对于糖浆剂,产品为棕黄色粘稠液体,味甜,微苦;对于口服液,产品为棕黄色液体,久置有轻摇易散沉淀,味甜,微苦;
检查:相对密度:膏滋相对密度应为1.30~1.50之间,糖浆剂相对密度不低于1.20;pH值:口服液PH值应为3.5~6.5;其他:应符合中国药典糖浆剂、煎膏剂或合剂项下有关的各项规定;
鉴别:
(1)取膏滋2g,加水50ml混匀;或取糖浆5ml,加水10ml混匀;或取口服液20ml。用氨水调pH13,用氯仿提取5次,每次10ml,合并氯仿提取液,用10ml盐酸溶液1→200提取4次,酸液蒸干,残渣用甲醇1ml使溶解,作为供试品溶液;另取盐酸麻黄碱对照品,用甲醇溶解制成每1ml含0.5mg的溶液,作为对照品溶液;照中国药典薄层色谱法试验,吸取上述供试品溶液及对照品溶液各10μl,分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上,以醋酸乙酯:丙酮:氨水=2:10:0.3为展开剂,展开,取出,晾干,喷以茚三酮试液,热风吹至斑点显色清晰,供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点。
(2)取膏滋5g或糖浆5ml或口服液20ml,用氨试液调PH8,用醋酸乙酯提取1次,每次100ml,合并醋酸乙酯液,水浴蒸干,残渣加甲醇1ml使溶解,作为供试品溶液;另取罂粟壳对照药材1g,加醋酸乙酯10ml,超声处理10分钟,滤过,滤液蒸干,残渣加甲醇1ml使溶解,制成对照药材溶液;另取磷酸可待因对照品适量,用甲醇溶解制成每1ml含1mg的溶液,作为对照品溶液;照中国药典薄层色谱法试验,吸取供试品溶液、对照药材溶液及对照品溶液各5μl,分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上,以甲苯:丙酮:无水乙醇:氨水=35:10:5:3为展开剂,层析缸中另置一小杯浓氨试液预平衡10分钟,展开,取出,晾干,喷以稀碘化铋钾试液,加热至斑点显色清晰,供试品色谱中,在与对照药材及对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点。
(3)甘草:取膏滋3g、糖浆5ml或口服液20ml,加10ml水使稀释并转移至分液漏斗中,加稀硫酸1ml,摇匀,用乙醚提取1次,每次100ml,弃去乙醚液,水液用水饱和的正丁醇提取1次,每次100ml,合正丁醇提取液,再用正丁醇饱和过的水洗1次,每次100ml,弃去水洗液,正丁醇提取液蒸干,残渣用甲醇5ml溶解至烧瓶中,蒸干,加盐酸1ml及氯仿20ml,加热回流0.5小时,分取氯仿液蒸干,残渣加乙醇0.5ml使溶解,作为供试品溶液;另取甘草次酸对照品适量,用乙醇溶解制成每1ml含0.5mg的溶液,作为对照品溶液。照中国药典薄层色谱法试验,吸取供试品溶液及对照品溶液各5-20μl,分别点于同一硅胶GF254薄层板上,以石油醚(30~60℃):氯仿:冰醋酸=25:1:3为展开剂,展开,取出,晾干,置紫外光灯200nm下检视,供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点。
含量测定:
盐酸麻黄碱:采用高效液相色谱法,色谱柱为C8柱,以1%磷酸溶液:甲醇或乙腈:三乙胺=115:15:2为流动相,检测波长为500nm;取盐酸麻黄碱对照品,精密称定,用甲醇溶解制成每1ml含盐酸麻黄碱对照品0.15mg的对照品溶液,摇匀,即得;另取膏滋5.0g、糖浆剂2.0ml或口服液5ml,置25ml量瓶中,流动相稀释至刻度,摇匀,用0.2μm的微孔滤膜滤过,即得供试品溶液;分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各20μl,注入液相色谱仪测定含量;该克咳制剂中,膏滋中含麻黄以盐酸麻黄碱计,不得少于0.5mg/g、糖浆剂中含麻黄以盐酸麻黄碱计,不得少于0.5mg/ml、口服液中含麻黄以盐酸麻黄碱计,不得少于0.25mg/ml。
磷酸可待因:照高效液相色谱法,色谱柱为C4柱,以0.01mol/L乙酸钠溶液(冰醋酸调pH=2):甲醇=1:9为流动相,检测波长为200nm;取磷酸可待因对照品10mg,精密称定,置5ml量瓶中,用甲醇-水溶液溶解并稀释至刻度,摇匀,精密量取1ml,置5ml量瓶中,加流动相溶解并稀释至刻度,摇匀,即得每1ml含磷酸可待因对照品0.10mg的对照品溶液;取膏滋5.0g、糖浆剂5.0ml或口服液5ml,加5ml水稀释并转移至分液漏斗中,用氢氧化钠试液调pH8,氯仿萃取2次,每次50ml,合并氯仿提取液,水浴挥至10ml,定量转移至分液漏斗中,用盐酸溶液1→200提取1次,每次50ml,合并酸液,再用氢氧化钠试液调pH8,用水饱和过氯仿提取2次,每次50ml,合并氯仿提取液,水浴蒸干,残渣用流动相溶解并定溶至5ml量瓶中,摇匀,用0.1μm的微孔滤膜滤过,即得供试品溶液;分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液,注入液相色谱仪测定含量,该克咳口服制剂中,膏滋中含罂粟壳以磷酸可待因计,不得少于0.05mg/g、糖浆剂中含罂粟壳以磷酸可待因计,不得少于0.05mg/ml、口服液中含罂粟壳以磷酸可待因计,不得少于0.025mg/ml。
Claims (6)
- 【权利要求1】一种克咳口服制剂的检测方法,该口服制剂为膏滋、糖浆剂和口服液,所述检测方法为性状、检查、鉴别和含量测定,其特征在于:性状:对于膏滋,产品为棕褐色稠厚的半流体,味甜,微苦;对于糖浆剂,产品为棕黄色粘稠液体,味甜,微苦;对于口服液,产品为棕黄色液体,久置有轻摇易散沉淀,味甜,微苦;检查:相对密度:膏滋相对密度应为1.30~1.50之间,糖浆剂相对密度不低于1.20;pH值:口服液PH值应为3.5~6.5;其他:应符合中国药典糖浆剂、煎膏剂或合剂项下有关的各项规定;鉴别:(1)麻黄:取膏滋2g,加水20ml混匀;或取糖浆5ml,加水20ml混匀;或取口服液20ml,用氨水调pH10~11,用氯仿提取2次,每次20ml,合并氯仿提取液,用20ml盐酸溶液1→200提取1次,酸液蒸干,残渣用甲醇1ml使溶解,作为供试品溶液;另取盐酸麻黄碱对照品,用甲醇溶解制成每1ml含1mg的溶液,作为对照品溶液;照中国药典薄层色谱法试验,吸取上述供试品溶液及对照品溶液各5μl,分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上,以醋酸乙酯:丙酮:氨水=5:5:1为展开剂,展开,取出,晾干,喷以茚三酮试液,热风吹至斑点显色清晰,供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点;(2)罂粟壳:取膏滋5g或糖浆10ml或口服液20ml,加醋酸乙酯40ml及氨水1ml,超声处理20分钟,滤过,滤液蒸干,残渣加甲醇1ml使溶解,作为供试品溶液;另取罂粟壳对照药材1g,加醋酸乙酯40ml及氨水1ml的混合液,超声处理20分钟,滤过,滤液蒸干,残渣加甲醇1ml使溶解,制成对照药材溶液;另取磷酸可待因对照品,用甲醇溶解制成每1ml含1mg的溶液,作为对照品溶液;照中国药典薄层色谱法试验,吸取供试品溶液、对照药材溶液及对照品溶液各5μl,分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上,以甲苯:丙酮:无水乙醇:氨水=20:20:3:1为展开剂,层析缸中另置一小杯浓氨试液预平衡30分钟,展开,取出,晾干,喷以稀碘化铋钾试液,加热至斑点显色清晰,供试品色谱中,在与对照药材及对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点;(3)甘草:取膏滋3g、糖浆5ml或口服液20ml,加甲醇50ml,超声提取5分钟,滤过,滤液蒸干,残渣加20ml水使溶解并转移至分液漏斗中,加稀硫酸2ml,摇匀,用乙醚提取2次,每次30ml,弃去乙醚液,水液用水饱和的正丁醇提取3次,每次20ml,合正丁醇提取液,再用正丁醇饱和过的水洗2次,每次50ml,弃去水洗液,正丁醇提取液蒸干,残渣用甲醇10ml溶解至烧瓶中,蒸干,加盐酸4ml及氯仿50ml,加热回流1小时,分取氯仿液蒸干,残渣加乙醇1ml使溶解,作为供试品溶液;另取甘草次酸对照品适量,用乙醇溶解制成每1ml含1mg的溶液,作为对照品溶液;照中国药典薄层色谱法试验,吸取供试品溶液及对照品溶液各5μl,分别点于同一硅胶GF254薄层板上,以30~60℃石油醚∶氯仿∶冰醋酸=10∶5∶1为展开剂,展开,取出,晾干,置紫外光灯254nm下检视,供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点;含量测定:盐酸麻黄碱:采用高效液相色谱法,色谱柱为C18柱,以0.1%磷酸溶液:甲醇或乙腈:三乙胺=94:6:0.1为流动相,检测波长为207nm;取盐酸麻黄碱对照品,精密称定,用甲醇溶解制成每1ml含盐酸麻黄碱对照品0.08mg的对照品溶液,摇匀,即得;另取膏滋5.0g、糖浆剂2.0ml或口服液5ml,置25ml量瓶中,流动相稀释至刻度,摇匀,用0.45μm的微孔滤膜滤过,即得供试品溶液;分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5-20μl,注入液相色谱仪测定含量;膏滋中含麻黄以盐酸麻黄碱计,不得少于0.5mg/g,糖浆剂中含麻黄以盐酸麻黄碱计,不得少于0.5mg/ml,口服液中含麻黄以盐酸麻黄碱计,不得少于0.25mg/ml;磷酸可待因:照高效液相色谱法,色谱柱为C18柱,以冰醋酸调pH=3.5的0.03mol/L乙酸钠溶液:甲醇=8:2为流动相,检测波长为238nm;取磷酸可待因对照品10mg,精密称定,置10ml量瓶中,用50%甲醇溶液溶解并稀释至刻度,摇匀,精密量取1ml,置10ml量瓶中,加流动相溶解并稀释至刻度,摇匀,即得每1ml含磷酸可待因对照品0.10mg的对照品溶液;取膏滋5.0g、糖浆剂5.0ml或口服液5ml,加入1倍量的硅燥土拌匀,并转移至圆底烧瓶中,用50ml乙醇水浴回流提取1小时,滤过,并用乙醇洗涤烧瓶及滤器,合并滤液及洗液,蒸干,残渣加20ml水溶解并转移至分液漏斗中,用氢氧化钠试液调pH10~11,氯仿萃取4次,每次20ml,合并氯仿提取液,水浴挥至20ml,定量转移至分液漏斗中,用盐酸溶液1→200提取3次,每次20ml,合并酸液,再用氢氧化钠试液调pH10~11,用水饱和过氯仿提取4次,每次20ml,合并氯仿提取液,水浴蒸干,残渣用流动相溶解并定溶至5ml量瓶中,摇匀,用0.45μm的微孔滤膜滤过,即得供试品溶液;分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液,注入液相色谱仪测定含量;膏滋中含罂粟壳以磷酸可待因计,不得少于0.05mg/g,糖浆剂中含罂粟壳以磷酸可待因计,不得少于0.05mg/ml,口服液中含罂粟壳以磷酸可待因计,不得少于0.025mg/ml。
- 【权利要求2】按照权利要求1所述克咳口服制剂的检测方法,其特征在于:所述性状为:对于膏滋,产品为棕褐色稠厚的半流体,味甜,微苦;对于糖浆剂,产品为棕黄色粘稠液体,味甜,微苦;对于口服液,产品为棕黄色液体,久置有轻摇易散沉淀,味甜,微苦;检查为:相对密度:膏滋相对密度应为1.30~1.50之间,糖浆剂相对密度不低于1.20;pH值:口服液PH值应为3.5~6.5;其他:应符合中国药典糖浆剂、煎膏剂或合剂项下有关的各项规定;鉴别为:(1)麻黄:取膏滋2g,加水20ml混匀;或取糖浆5ml,加水20ml混匀;或取口服液20ml,用氨水调pH10~11,用氯仿提取2次,每次20ml,合并氯仿提取液,用20ml盐酸溶液1→200提取1次,酸液蒸干,残渣用甲醇1ml使溶解,作为供试品溶液;另取盐酸麻黄碱对照品,用甲醇溶解制成每1ml含1mg的溶液,作为对照品溶液;照中国药典薄层色谱法试验,吸取上述供试品溶液及对照品溶液各5μl,分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上,以醋酸乙酯:丙酮:氨水=5:5:1为展开剂,展开,取出,晾干,喷以茚三酮试液,热风吹至斑点显色清晰,供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点;(2)罂粟壳:取膏滋5g或糖浆5ml或口服液20ml,用氨试液调PH9~10,用醋酸乙酯提取2次,每次20ml,合并醋酸乙酯液,水浴蒸干,残渣加甲醇1ml使溶解,作为供试品溶液;另取罂粟壳对照药材1g,加醋酸乙酯20ml,超声处理20分钟,滤过,滤液蒸干,残渣加甲醇1ml使溶解,制成对照药材溶液;另取磷酸可待因对照品适量,用甲醇溶解制成每1ml含1mg的溶液,作为对照品溶液;照中国药典薄层色谱法试验,吸取供试品溶液、对照药材溶液及对照品溶液各5μl,分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上,以甲苯:丙酮:无水乙醇:氨水=20:20:3:1为展开剂,层析缸中另置一小杯浓氨试液预平衡30分钟,展开,取出,晾干,喷以稀碘化铋钾试液,加热至斑点显色清晰,供试品色谱中,在与对照药材及对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点;(3)甘草:取膏滋3g、糖浆5ml或口服液20ml,加20ml水使稀释并转移至分液漏斗中,加稀硫酸2ml,摇匀,用乙醚提取2次,每次30ml,弃去乙醚液,水液用水饱和的正丁醇提取3次,每次20ml,合正丁醇提取液,再用正丁醇饱和过的水洗2次,每次50ml,弃去水洗液,正丁醇提取液蒸干,残渣用甲醇10ml溶解至烧瓶中,蒸干,加盐酸4ml及氯仿50ml,加热回流1小时,分取氯仿液蒸干,残渣加乙醇1ml使溶解,作为供试品溶液;另取甘草次酸对照品,用乙醇溶解制成每1ml含1mg的溶液,作为对照品溶液;照中国药典薄层色谱法试验,吸取供试品溶液及对照品溶液各5μl,分别点于同一硅胶6F254薄层板上,以30~60℃石油醚:氯仿:冰醋酸=10:5:1为展开剂,展开,取出,晾干,置紫外光灯254nm下检视,供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点;含量测定为:盐酸麻黄碱:采用高效液相色谱法,色谱柱为C18柱,以0.1%磷酸溶液:甲醇或乙腈:三乙胺=94:6:0.1为流动相,检测波长为207nm;取盐酸麻黄碱对照品,精密称定,用甲醇溶解制成每1ml含盐酸麻黄碱对照品0.08mg的对照品溶液,摇匀,即得;另取膏滋5.0g、糖浆剂2.0ml或口服液5ml,置25ml量瓶中,流动相稀释至刻度,摇匀,用0.45μm的微孔滤膜滤过,即得供试品溶液;分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5-20μl,注入液相色谱仪测定含量;膏滋中含麻黄以盐酸麻黄碱计,不得少于0.5mg/g,糖浆剂中含麻黄以盐酸麻黄碱计,不得少于0.5mg/ml,口服液中含麻黄以盐酸麻黄碱计,不得少于0.25mg/ml;磷酸可待因:照高效液相色谱法,色谱柱为C18柱,以冰醋酸调pH=3.5的0.03mol/L乙酸钠溶液:甲醇=8:2为流动相,检测波长为238nm;取磷酸可待因对照品10mg,精密称定,置10ml量瓶中,用50%甲醇溶液溶解并稀释至刻度,摇匀,精密量取1ml,置10ml量瓶中,加流动相溶解并稀释至刻度,摇匀,即得每1ml含磷酸可待因对照品0.10mg的对照品溶液;取膏滋5.0g、糖浆剂5.0ml或口服液5ml,加20ml水稀释并转移至分液漏斗中,用氢氧化钠试液调pH10~11,氯仿萃取4次,每次20ml,合并氯仿提取液,水浴挥至20ml,定量转移至分液漏斗中,用盐酸溶液1→200提取3次,每次20ml,合并酸液,再用氢氧化钠试液调pH10~11,用水饱和过氯仿提取4次,每次20ml,合并氯仿提取液,水浴蒸干,残渣用流动相溶解并定溶至5ml量瓶中,摇匀,用0.45μm的微孔滤膜滤过,即得供试品溶液;分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液,注入液相色谱仪测定含量;膏滋中含罂粟壳以磷酸可待因计,不得少于0.05mg/g、糖浆剂中含罂粟壳以磷酸可待因计,不得少于0.05mg/ml、口服液中含罂粟壳以磷酸可待因计,不得少于0.025mg/ml。
- 【权利要求3】按照权利要求1或2所述克咳口服制剂的检测方法,其特征在于:性状:对于膏滋,产品为棕褐色稠厚的半流体,味甜,微苦;对于糖浆剂,产品为棕黄色粘稠液体,味甜,微苦;对于口服液,产品为棕黄色液体,久置有轻摇易散沉淀,味甜,微苦;检查:相对密度:膏滋相对密度应为1.30~1.50之间,糖浆剂相对密度不低于1.20;pH值:口服液PH值应为3.5~6.5;其他:应符合中国药典糖浆剂、煎膏剂或合剂项下有关的各项规定;鉴别:(1)取膏滋2g,加水10ml混匀;或取糖浆5ml,加水10ml混匀;或取口服液20ml。用氨水调pH8,用氯仿提取1次,每次10ml,合并氯仿提取液,用10ml盐酸溶液1→200提取1-5次,酸液蒸干,残渣用甲醇1ml使溶解,作为供试品溶液;另取盐酸麻黄碱对照品,用甲醇溶解制成每1ml含0.5mg的溶液,作为对照品溶液;照中国药典薄层色谱法试验,吸取上述供试品溶液及对照品溶液各5μl,分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上,以醋酸乙酯:丙酮:氨水=2:2:0.3为展开剂,展开,取出,晾干,喷以茚三酮试液,热风吹至斑点显色清晰,供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点。(2)取膏滋5g或糖浆5ml或口服液20ml,用氨试液调PH13,用醋酸乙酯提取5次,每次10ml,合并醋酸乙酯液,水浴蒸干,残渣加甲醇1ml使溶解,作为供试品溶液;另取罂粟壳对照药材1g,加醋酸乙酯100ml,超声处理60分钟,滤过,滤液蒸干,残渣加甲醇1ml使溶解,制成对照药材溶液;另取磷酸可待因对照品适量,用甲醇溶解制成每1ml含1mg的溶液,作为对照品溶液;照中国药典薄层色谱法试验,吸取供试品溶液、对照药材溶液及对照品溶液各20μl,分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上,以甲苯:丙酮:无水乙醇:氨水=10:35:0.5:0.5为展开剂,层析缸中另置一小杯浓氨试液预平衡60分钟,展开,取出,晾干,喷以稀碘化铋钾试液,加热至斑点显色清晰,供试品色谱中,在与对照药材及对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点。(3)甘草:取膏滋3g、糖浆5ml或口服液20ml,加50ml水使稀释并转移至分液漏斗中,加稀硫酸1-5ml,摇匀,用乙醚提取5次,每次10ml,弃去乙醚液,水液用水饱和的正丁醇提取5次,每次10ml,合正丁醇提取液,再用正丁醇饱和过的水洗5次,每次10ml,弃去水洗液,正丁醇提取液蒸干,残渣用甲醇20ml溶解至烧瓶中,蒸干,加盐酸10ml及氯仿100ml,加热回流5小时,分取氯仿液蒸干,残渣加乙醇2ml使溶解,作为供试品溶液;另取甘草次酸对照品适量,用乙醇溶解制成每1ml含2mg的溶液,作为对照品溶液。照中国药典薄层色谱法试验,吸取供试品溶液及对照品溶液各20μl,分别点于同一硅胶GF254薄层板上,以石油醚(30~60℃):氯仿:冰醋酸=5:9:0.2为展开剂,展开,取出,晾干,置紫外光灯500nm下检视,供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点。含量测定:盐酸麻黄碱:采用高效液相色谱法,色谱柱为C8柱,以1%磷酸溶液:甲醇或乙腈:三乙胺=115:15:2为流动相,检测波长为500nm;取盐酸麻黄碱对照品,精密称定,用甲醇溶解制成每1ml含盐酸麻黄碱对照品0.05mg的对照品溶液,摇匀,即得;另取膏滋5.0g、糖浆剂2.0ml或口服液5ml,置25ml量瓶中,流动相稀释至刻度,摇匀,用0.65μm的微孔滤膜滤过,即得供试品溶液;分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各20μl,注入液相色谱仪测定含量;该克咳制剂中,膏滋中含麻黄以盐酸麻黄碱计,不得少于0.5mg/g、糖浆剂中含麻黄以盐酸麻黄碱计,不得少于0.5mg/ml、口服液中含麻黄以盐酸麻黄碱计,不得少于0.25mg/ml。磷酸可待因:照高效液相色谱法,色谱柱为C8柱,以1mol/L乙酸钠溶液(冰醋酸调pH=5)∶甲醇=9∶1为流动相,检测波长为500nm;取磷酸可待因对照品10mg,精密称定,置50ml量瓶中,用甲醇-水溶液溶解并稀释至刻度,摇匀,精密量取1ml,置25ml量瓶中,加流动相溶解并稀释至刻度,摇匀,即得每1ml含磷酸可待因对照品0.10mg的对照品溶液;取膏滋5.0g、糖浆剂5.0ml或口服液5ml,加50ml水稀释并转移至分液漏斗中,用氢氧化钠试液调pH13,氯仿萃取8次,每次5ml,合并氯仿提取液,水浴挥至30ml,定量转移至分液漏斗中,用盐酸溶液1→200提取5次,每次5ml,合并酸液,再用氢氧化钠试液调pH13,用水饱和过氯仿提取8次,每次5ml,合并氯仿提取液,水浴蒸干,残渣用流动相溶解并定溶至25ml量瓶中,摇匀,用0.65μm的微孔滤膜滤过,即得供试品溶液;分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液,注入液相色谱仪测定含量,该克咳口服制剂中,膏滋中含罂粟壳以磷酸可待因计,不得少于0.05mg/g、糖浆剂中含罂粟壳以磷酸可待因计,不得少于0.05mg/ml、口服液中含罂粟壳以磷酸可待因计,不得少于0.025mg/ml。
- 【权利要求4】按照权利要求1或2所述克咳口服制剂的检测方法,其特征在于:性状:对于膏滋,产品为棕褐色稠厚的半流体,味甜,微苦;对于糖浆剂,产品为棕黄色粘稠液体,味甜,微苦;对于口服液,产品为棕黄色液体,久置有轻摇易散沉淀,味甜,微苦;检查:相对密度:膏滋相对密度应为1.30~1.50之间,糖浆剂相对密度不低于1.20;pH值:口服液PH值应为3.5~6.5;其他:应符合中国药典糖浆剂、煎膏剂或合剂项下有关的各项规定;鉴别:(1)麻黄:取膏滋2g,加水50ml混匀;或取糖浆5ml,加水50ml混匀;或取口服液20ml。用氨水调pH13,用氯仿提取5次,每次50ml,合并氯仿提取液,用50ml盐酸溶液1→200提取5次,酸液蒸干,残渣用甲醇1ml使溶解,作为供试品溶液;另取盐酸麻黄碱对照品,用甲醇溶解制成每1ml含1mg的溶液,作为对照品溶液;照中国药典薄层色谱法试验,吸取上述供试品溶液及对照品溶液各25μl,分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上,以醋酸乙酯:丙酮:氨水=10:10:2为展开剂,展开,取出,晾干,喷以茚三酮试液,热风吹至斑点显色清晰,供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点;(2)罂粟壳:取膏滋5g或糖浆5ml或口服液20ml,加醋酸乙酯10ml及氨水0.5ml,超声处理10分钟,滤过,滤液蒸干,残渣加甲醇1ml使溶解,作为供试品溶液;另取罂粟壳对照药材1g,加醋酸乙酯10ml及氨水5ml的混合液,超声处理10分钟,滤过,滤液蒸干,残渣加甲醇1ml使溶解,制成对照药材溶液;另取磷酸可待因对照品适量,用甲醇溶解制成每1ml含1mg的溶液,作为对照品溶液;照中国药典薄层色谱法试验,吸取供试品溶液、对照药材溶液及对照品溶液各5μl,分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上,以甲苯:丙酮:无水乙醇:氨水=35:10:5:3为展开剂,层析缸中另置一小杯浓氨试液预平衡10分钟,展开,取出,晾干,喷以稀碘化铋钾试液,加热至斑点显色清晰,供试品色谱中,在与对照药材及对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点;(3)甘草:取膏滋5g或糖浆5ml或口服液20ml,用氨试液调PH8,用醋酸乙酯提取1次,每次100ml,合并醋酸乙酯液,水浴蒸干,残渣加甲醇1ml使溶解,作为供试品溶液;另取罂粟壳对照药材1g,加醋酸乙酯10ml,超声处理10分钟,滤过,滤液蒸干,残渣加甲醇1ml使溶解,制成对照药材溶液;另取磷酸可待因对照品适量,用甲醇溶解制成每1ml含1mg的溶液,作为对照品溶液;照中国药典薄层色谱法试验,吸取供试品溶液、对照药材溶液及对照品溶液各5μl,分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上,以甲苯:丙酮:无水乙醇:氨水=5:9:0.2为展开剂,层析缸中另置一小杯浓氨试液预平衡10分钟,展开,取出,晾干,喷以稀碘化铋钾试液,加热至斑点显色清晰,供试品色谱中,在与对照药材及对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点。含量测定:盐酸麻黄碱:采用高效液相色谱法,色谱柱为C4柱,以0.05%磷酸溶液:甲醇或乙腈:三乙胺=50:3:2为流动相,检测波长为200nm;取盐酸麻黄碱对照品,精密称定,用甲醇溶解制成每1ml含盐酸麻黄碱对照品0.15mg的对照品溶液,摇匀,即得;另取膏滋5.0g、糖浆剂2.0ml或口服液5ml,置25ml量瓶中,流动相稀释至刻度,摇匀,用0.1μm的微孔滤膜滤过,即得供试品溶液;分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl,注入液相色谱仪测定含量;该克咳制剂中,膏滋中含麻黄以盐酸麻黄碱计,不得少于0.5mg/g、糖浆剂中含麻黄以盐酸麻黄碱计,不得少于0.5mg/ml、口服液中含麻黄以盐酸麻黄碱计,不得少于0.25mg/ml;磷酸可待因:照高效液相色谱法,色谱柱为C4柱,以1mol/L乙酸钠溶液(冰醋酸调pH=5):甲醇=9:1为流动相,检测波长为200nm;取磷酸可待因对照品10mg,精密称定,置50ml量瓶中,用甲醇-水溶液溶解并稀释至刻度,摇匀,精密量取1ml,置25ml量瓶中,加流动相溶解并稀释至刻度,摇匀,即得每1ml含磷酸可待因对照品0.10mg的对照品溶液;取膏滋5.0g、糖浆剂5.0ml或口服液5ml,加入硅燥土拌匀,并转移至圆底烧瓶中,用10ml乙醇水浴回流提取0.5小时,滤过,并用乙醇洗涤烧瓶及滤器,合并滤液及洗液,蒸干,残渣加5ml水溶解并转移至分液漏斗中,用氢氧化钠试液调pH8,氯仿萃取8次,每次5ml,合并氯仿提取液,水浴挥至10ml,定量转移至分液漏斗中,用盐酸溶液1→200提取1次,每次50ml,合并酸液,再用氢氧化钠试液调pH8,用水饱和过氯仿提取2次,每次50ml,合并氯仿提取液,水浴蒸干,残渣用流动相溶解并定溶至5ml量瓶中,摇匀,用0.65μm的微孔滤膜滤过,即得供试品溶液;分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液,注入液相色谱仪测定含量,该克咳口服制剂中,膏滋中含罂粟壳以磷酸可待因计,不得少于0.05mg/g、糖浆剂中含罂粟壳以磷酸可待因计,不得少于0.05mg/ml、口服液中含罂粟壳以磷酸可待因计,不得少于0.025mg/ml。
- 【权利要求5】按照权利要求1或2所述克咳口服制剂的检测方法,其特征在于:性状:对于膏滋,产品为棕褐色稠厚的半流体,味甜,微苦;对于糖浆剂,产品为棕黄色粘稠液体,味甜,微苦;对于口服液,产品为棕黄色液体,久置有轻摇易散沉淀,味甜,微苦;检查:相对密度:膏滋相对密度应为1.30~1.50之间,糖浆剂相对密度不低于1.20;pH值:口服液PH值应为3.5~6.5;其他:应符合中国药典糖浆剂、煎膏剂或合剂项下有关的各项规定;鉴别:(1)麻黄:取膏滋2g,加水10ml混匀;或取糖浆5ml,加水50ml混匀;或取口服液20ml。用氨水调pH12,用氯仿提取3次,每次30ml,合并氯仿提取液,用10ml盐酸溶液1→200提取1次,酸液蒸干,残渣用甲醇1ml使溶解,作为供试品溶液;另取盐酸麻黄碱对照品,用甲醇溶解制成每1ml含1mg的溶液,作为对照品溶液;照中国药典薄层色谱法试验,吸取上述供试品溶液及对照品溶液各5μl,分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上,以醋酸乙酯:丙酮:氨水=10:2:0.3为展开剂,展开,取出,晾干,喷以茚三酮试液,热风吹至斑点显色清晰,供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点;(2)罂粟壳:取膏滋5g或糖浆5ml或口服液20ml,加醋酸乙酯100ml及氨水5ml,超声处理60分钟,滤过,滤液蒸干,残渣加甲醇1ml使溶解,作为供试品溶液;另取罂粟壳对照药材1g,加醋酸乙酯100ml及氨水0.5ml的混合液,超声处理60分钟,滤过,滤液蒸干,残渣加甲醇1ml使溶解,制成对照药材溶液;另取磷酸可待因对照品适量,用甲醇溶解制成每1ml含1mg的溶液,作为对照品溶液;照中国药典薄层色谱法试验,吸取供试品溶液、对照药材溶液及对照品溶液各20μl,分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上,以甲苯:丙酮:无水乙醇:氨水=10:35:0.5:0.5为展开剂,层析缸中另置一小杯浓氨试液预平衡60分钟,展开,取出,晾干,喷以稀碘化铋钾试液,加热至斑点显色清晰,供试品色谱中,在与对照药材及对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点;(3)甘草:取膏滋5g或糖浆5ml或口服液20ml,用氨试液调PH13,用醋酸乙酯提取5次,每次10ml,合并醋酸乙酯液,水浴蒸干,残渣加甲醇1ml使溶解,作为供试品溶液;另取罂粟壳对照药材1g,加醋酸乙酯100ml,超声处理60分钟,滤过,滤液蒸干,残渣加甲醇1ml使溶解,制成对照药材溶液;另取磷酸可待因对照品适量,用甲醇溶解制成每1ml含1mg的溶液,作为对照品溶液;照中国药典薄层色谱法试验,吸取供试品溶液、对照药材溶液及对照品溶液各20μl,分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上,以甲苯:丙酮:无水乙醇:氨水=25:1:3为展开剂,层析缸中另置一小杯浓氨试液预平衡60分钟,展开,取出,晾干,喷以稀碘化铋钾试液,加热至斑点显色清晰,供试品色谱中,在与对照药材及对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点。含量测定:盐酸麻黄碱:采用高效液相色谱法,色谱柱为C18柱,以0.05%磷酸溶液:甲醇或乙腈:三乙胺=50:3:0.05为流动相,检测波长为200nm;取盐酸麻黄碱对照品,精密称定,用甲醇溶解制成每1ml含盐酸麻黄碱对照品0.05mg的对照品溶液,摇匀,即得;另取膏滋5.0g、糖浆剂2.0ml或口服液5ml,置25ml量瓶中,流动相稀释至刻度,摇匀,用0.65μm的微孔滤膜滤过,即得供试品溶液;分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5μl,注入液相色谱仪测定含量;该克咳制剂中,膏滋中含麻黄以盐酸麻黄碱计,不得少于0.5mg/g、糖浆剂中含麻黄以盐酸麻黄碱计,不得少于0.5mg/ml、口服液中含麻黄以盐酸麻黄碱计,不得少于0.25mg/ml;磷酸可待因:照高效液相色谱法,色谱柱为C8柱,以1mol/L乙酸钠溶液(冰醋酸调pH=2):甲醇=1:9为流动相,检测波长为500nm;取磷酸可待因对照品10mg,精密称定,置5ml量瓶中,用甲醇-水溶液溶解并稀释至刻度,摇匀,精密量取1ml,置5ml量瓶中,加流动相溶解并稀释至刻度,摇匀,即得每1ml含磷酸可待因对照品0.10mg的对照品溶液;取膏滋5.0g、糖浆剂5.0ml或口服液5ml,加入硅燥土拌匀,并转移至圆底烧瓶中,用100ml乙醇水浴回流提取5小时,滤过,并用乙醇洗涤烧瓶及滤器,合并滤液及洗液,蒸干,残渣加50ml水溶解并转移至分液漏斗中,用氢氧化钠试液调pH13,氯仿萃取1次,每次50ml,合并氯仿提取液,水浴挥至30ml,定量转移至分液漏斗中,用盐酸溶液1→200提取5次,每次5ml,合并酸液,再用氢氧化钠试液调pH13,用水饱和过氯仿提取8次,每次5ml,合并氯仿提取液,水浴蒸干,残渣用流动相溶解并定溶至25ml量瓶中,摇匀,用0.1μm的微孔滤膜滤过,即得供试品溶液;分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液,注入液相色谱仪测定含量,该克咳口服制剂中,膏滋中含罂粟壳以磷酸可待因计,不得少于0.05mg/g、糖浆剂中含罂粟壳以磷酸可待因计,不得少于0.05mg/ml、口服液中含罂粟壳以磷酸可待因计,不得少于0.025mg/ml。
- 【权利要求6】按照权利要求1或2所述克咳口服制剂的检测方法,其特征在于:性状:对于膏滋,产品为棕褐色稠厚的半流体,味甜,微苦;对于糖浆剂,产品为棕黄色粘稠液体,味甜,微苦;对于口服液,产品为棕黄色液体,久置有轻摇易散沉淀,味甜,微苦;检查:相对密度:膏滋相对密度应为1.30~1.50之间,糖浆剂相对密度不低于1.20;pH值:口服液PH值应为3.5~6.5;其他:应符合中国药典糖浆剂、煎膏剂或合剂项下有关的各项规定;鉴别:(1)取膏滋2g,加水50ml混匀;或取糖浆5ml,加水10ml混匀;或取口服液20ml。用氨水调pH13,用氯仿提取5次,每次10ml,合并氯仿提取液,用10ml盐酸溶液1→200提取4次,酸液蒸干,残渣用甲醇1ml使溶解,作为供试品溶液;另取盐酸麻黄碱对照品,用甲醇溶解制成每1ml含0.5mg的溶液,作为对照品溶液;照中国药典薄层色谱法试验,吸取上述供试品溶液及对照品溶液各10μl,分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上,以醋酸乙酯:丙酮:氨水=2:10:0.3为展开剂,展开,取出,晾干,喷以茚三酮试液,热风吹至斑点显色清晰,供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点。(2)取膏滋5g或糖浆5ml或口服液20ml,用氨试液调PH8,用醋酸乙酯提取1次,每次100ml,合并醋酸乙酯液,水浴蒸干,残渣加甲醇1ml使溶解,作为供试品溶液;另取罂粟壳对照药材1g,加醋酸乙酯10ml,超声处理10分钟,滤过,滤液蒸干,残渣加甲醇1ml使溶解,制成对照药材溶液;另取磷酸可待因对照品适量,用甲醇溶解制成每1ml含1mg的溶液,作为对照品溶液;照中国药典薄层色谱法试验,吸取供试品溶液、对照药材溶液及对照品溶液各5μl,分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上,以甲苯:丙酮:无水乙醇:氨水=35:10:5:3为展开剂,层析缸中另置一小杯浓氨试液预平衡10分钟,展开,取出,晾干,喷以稀碘化铋钾试液,加热至斑点显色清晰,供试品色谱中,在与对照药材及对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点。(3)甘草:取膏滋3g、糖浆5ml或口服液20ml,加10ml水使稀释并转移至分液漏斗中,加稀硫酸1ml,摇匀,用乙醚提取1次,每次100ml,弃去乙醚液,水液用水饱和的正丁醇提取1次,每次100ml,合正丁醇提取液,再用正丁醇饱和过的水洗1次,每次100ml,弃去水洗液,正丁醇提取液蒸干,残渣用甲醇5ml溶解至烧瓶中,蒸干,加盐酸1ml及氯仿20ml,加热回流0.5小时,分取氯仿液蒸干,残渣加乙醇0.5ml使溶解,作为供试品溶液;另取甘草次酸对照品适量,用乙醇溶解制成每1ml含0.5mg的溶液,作为对照品溶液。照中国药典薄层色谱法试验,吸取供试品溶液及对照品溶液各5-20μl,分别点于同一硅胶GF254薄层板上,以石油醚(30~60℃):氯仿:冰醋酸=25:1:3为展开剂,展开,取出,晾干,置紫外光灯200nm下检视,供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点。含量测定:盐酸麻黄碱:采用高效液相色谱法,色谱柱为C8柱,以1%磷酸溶液:甲醇或乙腈:三乙胺=115:15:2为流动相,检测波长为500nm;取盐酸麻黄碱对照品,精密称定,用甲醇溶解制成每1ml含盐酸麻黄碱对照品0.15mg的对照品溶液,摇匀,即得;另取膏滋5.0g、糖浆剂2.0ml或口服液5ml,置25ml量瓶中,流动相稀释至刻度,摇匀,用0.2μm的微孔滤膜滤过,即得供试品溶液;分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各20μl,注入液相色谱仪测定含量;该克咳制剂中,膏滋中含麻黄以盐酸麻黄碱计,不得少于0.5mg/g、糖浆剂中含麻黄以盐酸麻黄碱计,不得少于0.5mg/ml、口服液中含麻黄以盐酸麻黄碱计,不得少于0.25mg/ml。磷酸可待因:照高效液相色谱法,色谱柱为C4柱,以0.01mol/L乙酸钠溶液(冰醋酸调pH=2):甲醇=1:9为流动相,检测波长为200nm;取磷酸可待因对照品10mg,精密称定,置5ml量瓶中,用甲醇-水溶液溶解并稀释至刻度,摇匀,精密量取1ml,置5ml量瓶中,加流动相溶解并稀释至刻度,摇匀,即得每1ml含磷酸可待因对照品0.10mg的对照品溶液;取膏滋5.0g、糖浆剂5.0ml或口服液5ml,加5ml水稀释并转移至分液漏斗中,用氢氧化钠试液调pH8,氯仿萃取2次,每次50ml,合并氯仿提取液,水浴挥至10ml,定量转移至分液漏斗中,用盐酸溶液1→200提取1次,每次50ml,合并酸液,再用氢氧化钠试液调pH8,用水饱和过氯仿提取2次,每次50ml,合并氯仿提取液,水浴蒸干,残渣用流动相溶解并定溶至5ml量瓶中,摇匀,用0.1μm的微孔滤膜滤过,即得供试品溶液;分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液,注入液相色谱仪测定含量,该克咳口服制剂中,膏滋中含罂粟壳以磷酸可待因计,不得少于0.05mg/g、糖浆剂中含罂粟壳以磷酸可待因计,不得少于0.05mg/ml、口服液中含罂粟壳以磷酸可待因计,不得少于0.025mg/ml。
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Title |
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HPLC法测定小儿清热止咳泡腾片及麻黄中盐酸麻黄碱的含量. 常增荣,王萌萌,张小茜.中国药品标准,第5卷第2期. 2004 |
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高效液相色谱法测定克咳胶囊中盐酸麻黄碱的含量. 张丽萍.医药导报,第24卷第8期. 2005 |
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高效液相色谱法测定消咳颗粒含量的研究. 李明玉,李明炬.贵州医药,第28卷第11期. 2004 |
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