CN100413857C - 一种低聚体原花青素及制备方法和应用 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种低聚体原花青素和这种低聚体原花青素的生产工艺，以及这种低聚体原花青素在食品、保健品、饲料添加剂和兽药中的应用。所述的低聚体原花青素为2～4聚体，并以缩合单宁为原料，以浓度为20～60%的双氧水或氯酸钾为氧化剂进行氧化降解，得黄色至棕黄色半透明液体，再经过分离纯化制得。本发明所述的低聚体原花青素具有较强的抗氧化功能和抗菌功能，作为抗氧化剂应用于食品中口感涩性消失，对消化道淀粉酶活性无不良影响；应用于饲料添加剂中可以有效地降低禽类动物对球虫病的感染率和死亡率，并且在鸡日粮中添加低聚体原花青素能显著降低蛋中胆固醇的含量。

Description

一种低聚体原花青素及制备方法和应用

(一)技术领域

本发明涉及一种低聚体原花青素和这种低聚体原花青素的生产工艺，以及这种低聚体原花青素在食品、保健品、饲料添加剂和兽药中的应用。尤其是指4个聚合度以下的低聚体原花青素，是用9-10聚合度以上的高聚体原花青素降解制成，这种饲料添加剂可以有效地降低禽类动物对球虫病的感染率和死亡率。

(二)背景技术

在植物化学领域中，原花青素是指一切在热酸中处理下能产生花色素的物质，它包括单体原花色素和聚合体原花色素。单体原花色素对应于黄烷-4-醇和黄烷-3，4-醇，聚合体原花色素对应于缩合单宁、红粉和酚酸。

聚合体原花青素是近几年来越来越受到公众欢迎的新型保健品和药品。它具有极强的抗氧化性，同时在抗病毒、抗癌症等方面也显示出突出的效果。原花青素多聚体广泛存在于自然界植物中，是构成植物防御系统的主要有效成分，同时也是我国多种中草药中的主要活性组份，如槟榔、仙鹤草、石榴皮等中草药都含有大量的聚合体原花青素。其中，葡萄籽单宁、茶多酚对人体心血管系统的保护作用和抗菌、抗病毒、抗氧化、抗癌变的特殊生理生化活性已经得到科学上的证实。从植物中，尤其是葡萄籽和松树皮中提取原花青素聚合物已形成大规模生产。

聚合体原花青素的另一主要产品是从树皮中提取的各类栲胶，如杨梅栲胶、落叶松栲胶、黑荆树栲胶、槲树栲胶。这些被称为缩合单宁或栲胶的聚合原花青素，是两聚花青素再和黄烷-3，4-醇缩合的产物。黑荆树皮单宁结构单元是A环为间苯二酚型的原刺槐定，平均聚合度为4～5。落叶松单宁的结构单元为间苯三酚性的原花青定，平均聚合度为9～10。杨梅单宁的结构单元为原翠雀定，平均聚合度为12。落叶松单宁的结构单元为间苯三酚性的原花青定，平均聚合度为9～10。缩合单宁或栲胶的平均聚合度高，低聚体原花青素的含量偏低，是造成蛋白质沉淀，口感涩性的主要原因。

常见的提取原花青素的方法包括水提取，有机溶剂提取和二氧化碳超临界提取。由于提取方法的不同，制得的原花青素聚合度不同，低聚体原花青素(2～4聚体)的生理活性远远大于原花青素的高聚体(5聚体以上)，在专利申请号为01109225.4和03117429.9的发明专利中是采用乙酸乙酯等有机溶剂萃取方法从花青素的混合物中分离原花青素的低聚体和高聚体，但萃取法所制得的低聚体原花青素的得率较低，且较难分离，同时使用大量有机溶剂易造成环境污染，所以迫切需要寻找一种可以快速转化高聚体原花青素为低聚体原花青素的方法。

球虫病是禽类养殖过程中危害极为严重的疾病。通常在15-50日龄的雏鸡发病率最高，严重时的死亡率可达80％以上。病鸡痊愈后生长缓慢，发育不良，日增重和产蛋率受到一定的影响。在本发明之前，防治球虫病的常规方法是在饲料中或饮水里添加抗球虫药，常用的抗球虫药包括盐霉素钠、莫能霉素、氨丙啉、磺胺二甲氧嘧啶、氯苯胍、磺胺喹恶啉和常山酮等。这些抗球虫药疗效明显，价格适中，使用方便，已在禽类养殖行业中广泛使用。但是，由于这些抗生素类和化学合成类的抗球虫药在动物体内的残留量比较高，对肉食产品的口感和风味有一定的影响，同时长期食用这些抗生素和化学合成药品对人体的健康不利。预防球虫病的另一种有效的方法是使用球虫疫苗。可是由于球虫疫苗使用方法繁琐，价格昂贵使球虫疫苗在养殖业中推广和应用范围十分有限。

近几年来，随着人们对食品安全问题的日益关注，中草药提取物的抗球虫作用越来越受到养殖业的青睐。和化学合成的抗球虫药物相比，中草药的抗球虫效果具有无毒，无残留，无副作用和不易引起球虫产生耐药性等特点，是属于绿色、环保、安全的新型饲料添加剂。常用的中草药类抗球虫药包括马鞭草、天名精、常山、黄花篙、苦参，白头翁等。

虽然单宁预防和治疗禽类动物球虫病已有专利发表(美国专利US5135746，US6106838)，但是以上专利中发表的单宁为直接从植物中提取出的缩合单宁。此类缩合单宁的聚合度较高，从动物营养学角度来看，不适合加入动物饲料中使用，这主要是因为单宁和蛋白质结合后生成不溶于水的复合物。一方面，单宁和饲料中的蛋白质结合导致了动物体对饲料中蛋白质的吸收和利用，另一方面，单宁和肠道消化酶结合，降低了动物肠道中酶的活性。正是因为单宁在动物营养过程中的负面作用，单宁一直被认为是饲料中重要的抗营养因子。所以，直接利用植物提取物中的缩合单宁作为抗球虫药物添加到饲料中将会影响动物生长和发育。

(三)发明内容

本发明即是为了提供一种4个聚合度以下的低聚体原花青素和这种低聚体原花青素的生产工艺，以及这种低聚体原花青素在食品、保健品、饲料添加剂和兽药中的应用。

本发明为达到发明目的所采用的技术方案是：

一种低聚体原花青素，所述的低聚体原花青素为2～4聚体，并以缩合单宁为原料，以浓度为20～60％的双氧水或氯酸钾为氧化剂对所述的缩合单宁进行氧化降解，氧化反应条件为：pH值调至6～7、温度控制在30～50℃，氧化降解时间为15～120分钟，得黄色至棕黄色半透明液体，再经过分离纯化制得。

一种制备如上所述的低聚体原花青素的方法，所述的方法是以缩合单宁为原料，以浓度为20～60％的双氧水或氯酸钾为氧化剂，在pH6～7、温度30～50℃下进行氧化反应15～120分钟，得黄色至棕黄色半透明液体，经常规物理或生化方法除去多余氧化剂，再经干燥制得低聚体原花青素。

上述低聚体原花青素的制备方法中，所述的缩合单宁属黄烷醇的聚合物，分子骨架为C₆·C₃·C₆，为2到5个黄烷醇单体的聚合体，分子量分布在500至3000MW之间。所述的缩合单宁可以是缩合单宁提取物，所述缩合单宁提取物以新鲜含有高含量单宁的植物碎片为原料，以如下顺序步骤制备：以极性溶剂为提取剂，在60～100℃提取0.5～6小时，过滤去除残渣，收集提取液浓缩至相对密度为1.201～1.452，得缩合单宁提取物，所述的极性溶剂为水、或乙醇、或甲醇、或乙酸乙酯；所述的缩合单宁也可以为富含单宁的植物栲胶。

所述的低聚体原花青素制备方法的优选条件为：所述的氧化剂为双氧水，浓度为20～60％，所述双氧水体积为缩合单宁提取物或植物栲胶的2～4倍。

具体的，所述的制备方法按如下步骤进行：

(1)提取：取富含单宁的植物碎片加入4～6倍重量的水、在80～100℃温度下加热0.5～1小时，过滤去除残渣，残渣再用以上同样的提取条件重复1～2次；收集滤液，浓缩至相对密度为1.205～1.332的缩合单宁提取物；

(2)氧化降解：往步骤(1)所得缩合单宁提取物中加入2倍体积的27.3％至50％的双氧水，调pH为6.7，在40℃降解30分钟，得黄色至黄棕色半透明液体为降解产物；

(3)分离纯化：将降解产物减压浓缩使剩余双氧水挥发干净，干燥得低聚体原花青素。

上述步骤(3)中，也可以加入过氧化氢酶，分解剩余的双氧水或是加入1～2倍体积的水，在常压40℃下通过不断搅拌挥发除去余下的氧化剂。

所述的低聚体原花青素具有较强的抗氧化功能和抗菌功能，可以作为食品添加剂和食品抗氧化剂添加进奶制品及各种饮料中，添加量为0.2％至0.8％。

所述的低聚体原花青素在生产低胆固醇含量鸡蛋的产蛋鸡饲料添加剂中的应用。在鸡日粮中添加低聚体原花青素能显著影响蛋中胆固醇的含量，低聚体原花青素使26周龄、28周龄鸡产的蛋中的胆固醇的含量分别降低了10.4％和11.2％(P＜0.01)，而蛋形指数、蛋壳厚度、蛋黄指数和哈夫单位无显著影响。

此外，由于所述的低聚体原花青素可以有效地降低禽类动物对球虫病的感染率和死亡率，而对禽类动物的生长发育没有负面影响，故可以应用于治疗动物球虫病饲料添加剂和兽药的制备。这种饲料添加剂或兽药可以治疗球虫感染后所引起的拉血、肠黏膜损坏等临床症状，降低球虫感染后的死亡率。所述的低聚体原花青素在全价料中的添加量为0.04％～0.06％，更好的添加量是0.02％～0.04％，作为治疗药物使用时，可在饲料中添加0.04％～0.5％本发明产品。

为达到低聚体原花青素的最大效果，还可在所述的饲料添加剂加入0.05％～0.1％抗坏血酸或维生素C。抗坏血酸或维生素C的存在可以增强低聚花青素抗病原菌，抗氧化和抗球虫的功效。上述饲料添加剂可用于下列动物：①鸡、②鸭、③鹌鹑、④鸽子、⑤兔，或是反刍类动物。

本发明所述的低聚体原花青素的制备方法及应用的有益效果主要体现在：(1)采用氧化降解方法使缩合单宁中的高聚体原花青素降解为低聚体原花青素，步骤简单，降低了成本，也减少了污染；(2)降解所得低聚体原花青素一定浓度对蛋白质的沉降能力下降了几乎100％，口感涩性消失，对消化道淀粉酶活性无不良影响；(3)所得低聚体原花青素具有较强的抗氧化功能和抗菌功能，应用于饲料添加剂中可以有效地降低禽类动物对球虫病的感染率和死亡率。

(四)具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明进行进一步描述，但不能将方案中所涉及的方法及技术参数理解为对本发明的限制。

实施例1：新鲜松科松亚科松属马尾松松针叶单宁的提取与分解。

10公斤新鲜松针叶剁成小段，加水50公斤至60公斤，在90～100℃温度下加热30分钟。过滤去除残渣，上清液继续加热浓缩至原体积的5公斤，加入20公斤27.3％含量的双氧水，用氢氧化钠调pH至7，加热至50℃降解30分钟。降解完成后继续加热搅拌挥发干净双氧水，浓缩至3公斤，得金黄或棕黄色产品低聚体原花青素。

实施例2：落叶松栲胶的分解

1公斤落叶松栲胶加水1公斤，再加入2公斤50％含量的双氧水，用氢氧化钠溶液调pH至7，加热至30℃降解30分钟。降解完成后，继续加热搅拌，并加入1～2公斤的水补充，挥发干净双氧水，浓缩至2公斤，得金黄或棕黄色产品低聚体原花青素。

实施例3：黑荆树皮单宁

1公斤黑荆树皮单宁加水1公斤，再加入2公斤50％含量的双氧水，用氢氧化钠调pH至6，加热至40℃降解30分钟。降解完成后，继续加热搅拌，并加入1-2公斤的水补充，挥发干净双氧水，浓缩至2公斤，得金黄或棕黄色产品低聚体原花青素。

实施例4：低聚体原花青素平均分子量的测定

采用国际上通用的薄层层析法(TLC)来测定低聚体原花青素的平均分子量。具体方法如下：使用Merk公司生产的TLC60F硅胶板测定分子量。分析之前，硅胶板用异丙醇预处理，然后在130℃烘箱中干燥2个小时。低聚体原花青素经过减压浓缩、冷冻干燥后的固形物，40mg固形物溶解于10ml甲醇中。标准品(表儿茶素，EGCE，原花青素B-1，原花青素C-1和落叶松单宁)40mg溶解于10ml甲醇中。10ul降解物样品和标准品在硅胶板上点样，展开剂为丙酮∶水∶甲酸＝90∶5∶5。分离后，硅胶板用1％的4-二甲基氨基肉桂醛乙醇溶液，和37％的盐酸溶液1∶1混合，均匀喷雾，显现出灰蓝色斑点的为原花青素类物质。

经测定，以上试验中所生产出的低聚体原花青素的分子量为400MW至1000MW之间，大部分降解产物分子量在800MW左右。

实施例5：低聚体原花青素对鸡肠道蛋白质沉淀的影响

实验步骤：

1.取1克实施例1制备的含50％马尾松单宁的样品溶于20ml水中，得到5％的深棕色溶液，为1号溶液。另取1克实施例1制备的含50％马尾松单宁的样品，放入500ml烧杯中，加入1ml水和2ml50％双氧水后，搅拌均匀，调PH至7，加热反应30min，溶液由稠变稀，色泽变浅棕红色，无沉淀出现，定容至20ml，为2号溶液。

2.取七只试管，分别加上述1号溶液1ml，0.5ml，0.25ml，0.125ml，0.063ml，0.031ml，0.016ml，依次加dh₂o水0ml，0.5ml，0.75ml，0.875ml，0.937ml，0.969ml，0.984ml。(即每个试管加水到为1ml)，再依次加1mg/ml的明胶溶液1ml，定容至10ml，上述试管中相当于含单宁最终浓度为5.00g/l，2.50g/l，1.25g/l，0.63g/l，0.31g/l，0.16g/l，0.08g/l，震荡均匀后，在恒温30℃静置24hr，测出浊度。各组对照品用1ml的dh₂o替代1ml明胶溶液，其它操作与前面一样。

3.同样取七只试管，用2号溶液，按上述方法操作，测出浊度。

4.将各组试管经浊度测定后，在5000r/min离心，将沉淀物烘干后，称出重量。实验数据见表1：

表1低聚体原花青素和马尾松单宁对蛋白质沉淀能力的影响

浓度(g/l)	5.0	2.5	1.25	0.63	0.31	0.16	0.08
								OD值1	2.500	1.019	0.948	0.384	0.197	0.085	0.071
OD值2	0.070	0.043	0.035	0.026	0.022	0.015	0.003
								沉淀重(g)1	0.0161	0.0068	0.0041	0.0035	0.0027	0.0020	0.0017
沉淀重(g)2	0.0016	0.0009	0.0007	0.0005	0.0002	0.0000	0.0000

从上表中，我们可以看出，低聚体原花青素和马尾松单宁相比，对蛋白质沉淀的能力明显下降。

实施例6：低聚体原花青素对鸡肠道淀粉酶活性的影响

5羽20日龄仔鸡屠宰后立即取出小肠至结肠处肠内容物，制成15％含量的磷酸缓冲液悬浮液，离心后取上清液为待测酶液。另备1％可溶性淀粉为底物。实施例1制备的低聚体原花青素和马尾松单宁制成0.1％水溶液。测试试管中加入2ml底物，1ml酶液，和0、0.02％、0.04％、0.06％、0.08％、0.1％的低聚体原花青素或马尾松单宁溶液，混合均匀后，在37℃水浴中保温60分钟。在0小时，和1小时时分别取出1ml样品，立刻在100℃水浴中加热30分钟使酶失活，冷却，用3，5-二硝基水杨酸比色法测定还原糖含量。蛋白质含量用考马斯亮兰G250比色法测定。淀粉酶活性(IU)计算为：微摩尔还原糖/微克蛋白质.分钟。实验数据见表2。

表2不同浓度的低聚体原花青素和马尾松单宁对鸡肠道淀粉酶活性的影响

从表2中可以看出，低聚体原花青素和马尾松单宁相比，对仔鸡肠道淀粉酶活性的影响明显减小。

实施例7：低聚体原花青素对病原微生物生长的影响

按实施例1所述工艺，选用30％、50％、60％双氧水对落叶松栲胶单宁进行氧化降解，产品浓度为1.5％，使用贴滤纸方法测定对下列病原菌的抑制程度。大肠杆菌，沙门氏菌，金黄色葡萄球菌，蜡状芽孢杆菌，铜绿假单胞菌，志贺氏痢疾杆菌生长在肉汤培养基，37℃条件下生长18小时后测定抑菌圈直径。黑曲霉和黑根霉生长在PDA固体培养基上，于25℃的温度培养10天后测定抑菌圈直径。数据为二次实验结果平均值见表3。

表3落叶松栲胶及其降解产物抑菌圈(mm)

实施例8：低聚体原花青素在植物油中抗氧化效果

取已干燥好的实施例2的50％双氧水降解的上述产物，在电子天平上精确称量后，放入小烧杯中，加入适量的乙醇和乙酸乙酯的混合物，用玻璃棒搅动使其溶解，按0、0.2％、0.4％、0.6％、0.8％、1.0％添加到菜籽油中，40℃恒温箱保温，在间隔时间内测定其氧化值，比较其抗氧化效果。

表4低聚体原花青素在菜籽油中的抗氧化效果(POV)(MEQ/kg)

剂量(％)	2d	4d	6d	9d	10d	11d
							0	10.2287	15.3618	31.3641	49.6982	94.1512	400.4701
0.2	11.5261	15.0870	23.1458	37.5741	65.7890	311.8955
							0.4	11.2535	15.2341	23.6510	37.2173	80.0162	375.1748
0.6	11.0296	15.8597	22.8982	36.6857	81.1790	378.3585
							0.8	10.1478	15.3681	21.9824	36.4561	83.7481	380.4142
1.0	9.5685	15.2311	21.7413	36.4610	82.9885	379.8183

从表中可见，过氧化值随着时间的延长而增加，前4天效果不明显，但是4～11天表现出低聚体原花青素的抗氧化性，从数值比较，0.2％添加量对植物油的稳定效果最好。0.6％、0.8％、1.0％次之，0.4％再次之。因此，低聚体原花青素对菜籽油的稳定性不是随浓度的增加而增加的。

实施例9：低聚体原花青素对产蛋鸡蛋品质的影响

选24周龄健康父母代岭南黄种鸡2212羽，随机分为两组，每组1106羽，分别为对照组及添加低聚体原花青素0.04％。饲养于同一密闭鸡舍内，三层全阶梯笼养，采用限料饲喂方式饲养，其它饲养管理条件完全相同。

蛋品质测定(一般质量指标)：称蛋重后用游标卡尺测量蛋的纵径与最大横径。再将蛋打开，把内容物放在玻璃平面上，蛋壳用清水冲洗内面，然后用滤纸吸干，剔除蛋壳膜后称蛋壳重；取出蛋壳钝端、中部、锐部各一小块，再用游标卡尺测量其厚度，求其平均厚度；然后用游标卡尺测量蛋黄边缘与浓厚蛋白边缘的中点，避开系带，测定三个等距离中点的平均只值，即为浓蛋白高度(H)，再测蛋黄高度和蛋黄直径后，收集全蛋备用。

蛋形指数＝横径/纵径×100％；蛋壳相对重＝蛋壳重/蛋重×100％；蛋壳厚度；蛋黄指数＝蛋黄高度/蛋黄直径×100％；哈夫单位＝100×Log(H-1.7×W⁰³⁷+7.57)，H为浓蛋白高度(mm)，W为蛋重(g)。全蛋中胆固醇含量的测定：参照王惠芸等鸡蛋中胆固醇快速测定方法。

表5低聚体原花青素对蛋品质的影响

注：^*表示差异显著(P＜0.05)，^**表示差异极显著(P＜0.01)。

表5表明，日粮中添加低聚体原花青素显著影响蛋中胆固醇的含量。低聚体原花青素使26周龄、28周龄鸡产的蛋中的胆固醇的含量分别降低了10.4％和11.2％(P＜0.01)，蛋形指数、蛋壳厚度、蛋黄指数和哈夫单位无显著影响。

实施例10：低聚体原花青素对鸡球虫病的治疗效果

试验动物AA肉鸡(雏鸡)80只，隔离平养至11日龄称重分组，每组8只，随机分组，组内体重相近，组间误差±10克，在试验前检查粪便，确定未感染球虫鸡作为试验用鸡。待测样品与饲料混合均匀，接种前24小时开始饲喂含药饲料，连续饲喂7天，待测样品分别为0.13％实施例3制得的低聚体原花青素、盐霉素66ppm。

12日龄接种柔嫩艾美耳球虫，除了不攻击组外，其余每组每羽鸡经口感染10×10⁴个孢子化卵囊。在感染后每天检查精神、食欲和粪便变化，至第7天收集粪便，进行卵囊计数，第8天称重捕杀，观察盲肠病变情况。实验数据见表6。

表6

组别	含量	存活率	相对增重率	血便记分	病变记分	病变值	OPG(×10<sup>4</sup>)	卵囊值	ACI
										1组	0.13％低聚体原花青素	100％	102	0.125	1.1	11	1.6	10	181
2组	盐霉素66ppm	100％	109	0.375	2.0	20	3.52	20	169
										3组	攻击不给药组	100％	92	2.25	2.8	28	4.84	40	124
4组	不攻击组	100％	100	0	0	0	0	0	200

从表中可见，增重效果盐霉素组效果最好，从血便记分、病变值、卵囊值、抗球虫指数(ACI)来看，低聚体原花青素组最好，达到了优秀水平。

表7生产性能

组别	含量	羽数(只)	初均重(克/只)	末均重(克/只)	日增重(克/天)	料肉比
							1组	0.13％低聚体原花青素	8	143	442	33	1.63
2组	盐霉素66ppm	8	141	458	35	1.57
							3组	攻击不给药组	8	142	410	30	1.79
4组	不攻击组	8	142	434	33	1.71

从表中可见，低聚体原花青素组的日增重、料肉比较不攻击组好，而较盐霉素差。

实施例11：低聚体原花青素对鸡球虫病的治疗效果

“岭南黄”肉鸡(雏鸡)200只，隔离平养至11日龄称重分组，每组12只，组内体重相近，组间误差±10克，在试验前检查粪便，确定未感染球虫鸡作为试验用鸡。待测样品与饲料混合均匀，接种前24小时开始饲喂含药饲料，连续饲喂7天。待测样品分别为不同剂量实施例2制得的低聚体原花青素、盐霉素66ppm，各组试验剂量见表6。

12日龄接种柔嫩艾美耳球虫，除了不攻击组外，其余每组每羽鸡经口感染12×10⁴个孢子化卵囊。在感染后每天检查精神、食欲和粪便变化，至第7天收集粪便，进行卵囊计数，第8天称重捕杀，观察盲肠病变情况。实验数据见表8。

表8：药效指标

组别	含量	羽数	存活率	相对增重率	血便记分	病变记分	病变值	OPG (×10<sup>3</sup>)	卵囊值	ACI
											1组	不攻击组	12	100％	100％	0	0	0	0	0	200
2组	攻击不给药组	12	100％	57％	1.75	3.0	30	345	40	87
											3组	盐霉素66ppm	12	92％	74％	1.50	3.0	30	286	40	96
4组	低聚原花青素(0.02％)	12	83％	64％	2.42	3.3	33	657	40	73
											7组	低聚原花青素(0.04％)	12	100％	80％	1.17	3.2	32	233	20	128
8组	低聚原花青素(0.06％)	12	100％	50％	1.58	2.8	28	219	20	102

从表中血便记分、病变值、卵囊值、抗球虫指数(ACI)来看，低聚体原花青素组中剂量组最好，比盐霉素的抗球虫性能有明显提高。

表9：生产性能

组别	含量	羽数(只)	初均重(克/只)	末均重(克/只)	日增重(克/天)
						1组	不攻击组	12	115	296	22.6
2组	攻击不给药组	12	115	218	12.9
						3组	盐霉素66ppm	12	115	248	16.6
4组	低聚原花青素(0.02％)	12	115	231	14.5
						5组	低聚原花青素(0.04％)	12	115	259	18
6组	低聚原花青素(0.06％)	12	115	205	11.3

从表中可见，低聚体原花青素在饲料中添加的剂量过低(0.02％)没有显示出抗球虫的效果，而剂量过高(＞0.06％)对鸡的生长产生负面影响。在合适的剂量下，日增重、料肉比和抗球虫指数比盐霉素优秀。

Claims (11)

1. 低聚体原花青素在制备治疗动物球虫病饲料添加剂中的应用。

2. 如权利要求1所述的应用，其特征在于所述的低聚体原花青素为2～4聚体，并以缩合单宁为原料，以浓度为20～60％的双氧水或氯酸钾为氧化剂对所述的缩合单宁进行氧化降解，氧化反应条件为：pH值调至6～7、温度控制在30～50℃，氧化降解时间为15～120分钟，得黄色至棕黄色半透明液体，再经过分离纯化制得。

3. 如权利要求2所述的应用，其特征在于所述的低聚体原花青素在全价料中的添加量为0.04％～0.06％。

4. 如权利要求2所述的应用，其特征在于所述低聚体原花青素在全价料中的添加量为0.04％～0.5％。

5. 如权利要求4所述的应用，其特征在于所述的饲料添加剂还加入0.05％～0.1％抗坏血酸。

6. 如权利要求1～5之一所述的应用，其特征在于所述动物为下列之一：①鸡、②鸭、③鹌鹑、④鸽子、⑤兔。

7. 如权利要求2所述的应用，其特征在于所述的缩合单宁属黄烷醇的聚合物，分子骨架为C₆·C₃·C₆，为2到5个黄烷醇单体的聚合体，分子量分布在500至3000MW之间。

8. 如权利要求2所述的应用，其特征在于所述的缩合单宁是缩合单宁提取物，所述缩合单宁提取物以新鲜含有高含量单宁的植物碎片为原料，以如下顺序步骤制备：以极性溶剂为提取剂，在60～100℃提取0.5～6小时，过滤去除残渣，收集提取液浓缩至相对密度为1.201～1.452，得缩合单宁提取物，所述的极性溶剂为水、或乙醇、或甲醇、或乙酸乙酯。

9. 如权利要求2所述的应用，其特征在于所述的缩合单宁为富含单宁的植物栲胶。

10. 如权利要求8或9所述的应用，其特征在于所述的氧化剂为双氧水，浓度为20～60％，所述双氧水体积为缩合单宁提取物或植物栲胶的2～4倍。

11. 如权利要求2所述的应用，其特征在于所述的低聚体原花青素按如下步骤制备得到：

(1)提取：取富含单宁的植物碎片加入4～6倍重量的水、在80～100℃温度下加热0.5～1小时，过滤去除残渣，残渣再用以上同样的提取条件重复1～2次；收集滤液，浓缩至相对密度为1.205～1.332缩合单宁提取物；

(2)氧化降解：往步骤(1)所得缩合单宁提取物中加入2倍体积的27.3％至50％的双氧水，调pH为6.7，在40℃降解30分钟，得黄色至黄棕色半透明液体为降解产物；

(3)分离纯化：将降解产物减压浓缩使剩余双氧水挥发干净，干燥得低聚体原花青素。