CH631717A5 - Verfahren zur herstellung von cephalosporinderivaten. - Google Patents

Description

Gegenstand der Erfindung ist ein Verfahren zur Herstel-30 lung von neuen antibiotischen Verbindungen, die als pharmazeutische bzw. Arzneimittel zur Behandlung von Geflügel und Tieren, einschliesslich des Menschen, insbesondere zur Bekämpfung von Infektionskrankheiten brauchbar sind, die durch grampositive und gramnegative Bakterien verursacht 35 werden.

Die neuen Antibiotika sind Cephalosporinderivate mit neuer 7-Acylgruppe der allgemeinen Formel:

HN

HO

TÜ

•CH2-C0—NH.

r

(i)

■CH2X

COOH

wobei X Wasserstoff, Hydroxyl, Acyloxy, Alkoxy, Carba-moyloxy, quaternäres Ammonium oder eine Gruppe der Formel -SR1 bedeutet (wobei R' ein stickstoffhaltiger hetero-cyclischer Rest ist) und pharmazeutisch akzeptable Salze oder Ester derselben.

Die Cephalosporinderivate der Formel (I) erweisen sich als kräftige Antibiotika gegenüber unterschiedlichen Bakterien, insbesondere gegenüber gramnegativen Bakterien einschliesslich Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae, Proteus vulgaris, Protus mirabilis, Proteus morganii, Proteus rettgeri und Citrobacter freundii. Diese Cephalosporinderivate entfalten insbesondere eine starke antibiotische Aktivität gegenüber solchen mutanten Stämmen der vorstehend genannten Bakterien, die ß-Lactamase (Cephalosporinase) besitzen und gegenüber bekannten Cephalosporinen resistent sind.

In der obigen Formel (I) wird X durch Reste gebildet, zu denen solche gehören, die als Substituenten der 3-Methyl-gruppe bekannt sind und X wird durch einen der genannten so Reste gebildet. Zu typischen Beispielen für Acyloxygruppen gehören Alkylcarbonyloxygruppen mit 2 bis 4 Kohlenstoffatomen wie Acetyloxy oder Propionyloxy; mit einer Alkylcar-bonylgruppe mit 2 bis 4 Kohlenstoffatomen substituierte Acetyloxygruppen wie Acetoacetyloxy oder Propionylacetyl-55 oxy; Phenylacetyloxygruppen, die in a-Stellungz.B. mit Hydroxy-, Sulfo- oder Aminogruppen substituiert sein können (wie z.B. Mandeloxy, a-Sulfophenylacetyloxy, Phe-nylglycyloxy oder Phenylacetyloxy); Alkylcarbonyloxygruppen mit 2 bis 4 Kohlenstoffatomen, substituiert mit einer 60 Carboxylgruppe, wie Succinoyloxy; Gruppen der allgemeinen Formel:

<rvooo.

(wobei R2 bzw. R\ Wasserstoff, Carboxyl, Carboäthoxycar-bamoyl, Carboäthoxysulfamoyl oder Nitro bedeuten) wie z.B. 2-CarboxybenzoyIoxy, 2-(Carboäthoxycarbamoyl)-ben-zoyloxy, 2-(2-Carboäthoxysulfamoyl)-benzoyloxy, 2-Car-boxy-3 (oder 4 oder 6)-nitro-benzoyloxy oder 2,4-Dicarboxy-benzoyloxy; usw.

Die Alkoxygruppe kann eine niedere Alkoxygruppe mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen wie Methoxy oder Äthoxy sein.

Als durch X wiedergegebene quaternäre Ammoniumgruppe kann eine quaternäre Ammoniumgruppe der allgemeinen Formel genannt werden (wobei R4 Wasserstoff, Methyl, Carbamoyl, Carboxyl, Sulfonyl oder Methoxy bedeutet), die sich von Pyridinderivaten wie Pyridin, carbamoyl-substituiertem Pyridin wie Nicotinamid und Isonicotinamid, carboxyl-sub-stituiertem Pyridin wie Nicotinsäure und Isonicotinsäure und sulfonsäure-substituiertem Pyridin wie Pyridinsulfon-säure ableitet.

Ferner steht X für eine Gruppe der Formel -SR1, wobei R1 ein stickstoffhaltiger heterocyclischer Rest ist. Beispiele für stickstoffhaltige heterocyclische Reste R' sind normalerweise

5- oder 6-gliedrige stickstoffhaltige heterocyclische Reste, die wahlweise ein oder mehrere oxidierte Stickstoffatome oder solche Heteroatome wie Sauerstoff und/oder Schwefel zusätzlich zum Stickstoff aufweisen können. Unter solchen stickstoffhaltigen heterocyclischen Gruppen befinden sich

6-gliedrige heterocyclische stickstoffhaltige Reste mit einem Stickstoffatom wie Pyridyl oder N-Oxidopyridyl; 6-gliedrige heterocyclische Reste mit zwei Stickstoffatomen wie Pyri-midyl, Pyridazinyl, N-Oxidopyridazinyl usw. sowie 5-glied-rige heterocyclische Reste mit zwei Stickstoffatomen wie Pyrazolyl oder Diazolyl; 5-gliedrige heterocyclische Reste mit einem Stickstoffatom und einem Schwefelatom wie Thia-zolyl; 5-gliedrige heterocyclische Reste mit zwei Stickstoffatomen und einem Schwefelatom wie 1,2,3-, 1,2,4-, 1,3,4- und 1,2,5-Thiadiazolyl; 5-gliedrige heterocyclische Reste mit zwei Stickstoffatomen und einem Sauerstoffatom wie 1,2,3-, 1,2,4-, 1,3,4- und 1,2,5-Oxadiazolyl; 5-gliedrige heterocyclische Reste mit drei Stickstoffatomen wie 1,2,3- und 1,2,4-Triazolyl und 5-gliedrige heterocyclische Reste mit 4 Stickstoffatomen wie 1H- und 2H-Tetrazolyl. Derartige stickstoffhaltige heterocyclische Reste können Substituenten tragen, die durch einwertige Gruppen gebildet werden, wie durch niederes Alkyl mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen wie z.B.

Methyl, Äthyl, Trifluormethyl, Propyl, Isopropyl, Butyl, Iso-butyl usw.; niederes Alkoxy mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen wie z.B. Methoxy, Äthoxy, Propoxy, Isopropoxy, Butoxy usw.; Halogen wie z.B. Chlor, Brom usw.; Hydroxyl; Mercapto; Amino; Carboxyl; Carbamoyl; usw.; sowie unterschiedliche Substituenten, die über mehrwertige Gruppen wie

5 631717

niedere Alkylengruppen mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen, -S-,

I

-N- oder dergleichen angefügt sind. Wenn die mehrwertige Gruppe durch eine niedere Alkylengruppe gebildet wird, s kann der Substituent beispielsweise durch Hydroxyl, Mercapto, Amino, Guanyl, Morpholino, Carboxyl, Sulfo, Carbamoyl, Alkoxycarbonyl, niederes Alkylcarbamoyl, Alkoxy, Alkylthio, Alkylsulfonyl, Acyloxy oder Morpholinocarbonyl gebildet werden. Wenn die mehrwertige Gruppe durch -S-

10 |

oder-N- gebildet wird, kann der Substituent z.B. ein niederer Alkylrest oder eine niedere Alkylengruppe mit einem oder vorstehend genannten Substituenten sein. Wenn die mehr-

i5 wertige Gruppe durch -N- gebildet wird, können auch solche Substituenten wie Carboxyl, Alkoxycarbonyl, Acyl, Carbamoyl, niederes Alkylcarbamoyl usw. direkt angefügt sein. Spezieller können unter anderen substituierte Alkyle genannt werden, wie Carboxymethyl, Carbamoylmethyl, N-Nieder-20 alkyl-carbamoylmethyl (z.B. N,N-Dimethylcarbamoyl-methyl), Hydroxy-niederalkyle(z.B. Hydroxymethyl, 2-Hydroxyäthyl), Acyloxy-niederalkyle (z.B. Acetoxymethyl, 2-Acetoxyäthyl), Alkoxycarbonylmethyl (z.B. Methoxycar-bonylmethyl, Äthoxycarbonylmethyl, Propoxycarbonyl-25 methyl); Methylthiomethyl, Methylsulfonylmethyl,

N-Niederalkylamino-niederalkyl (z.B. N,N-Dimethylamino-methyl, N,N-Dimethylaminoäthyl, N,N,N-Trimethylammo-niumäthyl), Morpholinomethyl, Guanylmethyl, Guanyl-äthyl, etc.; substituierte Aminogruppen wie Niederalkyl-30 amino (z.B. Methylamino); Sulfo-niederalkylamino (z.B. 2-Sulfoäthylamino), Hydroxy-niederalkylamino (z.B. Hydroxyäthylamino), Niederalkylamino-niederalkylamino (z.B. 2-Dimethylaminoäthylamino, 2-Trimethylammonium-äthylamino); Acylamino (z.B. Acetylamino); 2-Dimethyl-35 aminoacetylamino, 2-Trimethylammoniumacetylamino; Niederalkoxycarbonylamino (z.B. Methoxycarbonylamino, etc.); substituierte Thiogruppen wie Methylthio, 2-Hydroxy-äthylthio, 2-Acyloxyäthylthio (z.B. 2-Acetoxyäthylthio, 2-Phenylacetoxyäthylthio, 2-Caproyloxyäthylthio); Carbo-40 xymethylthio, Alkoxycarbonylmethylthio (z.B. Methoxycar-bonylmethylthio, Äthoxycarbonylmethylthio, Propoxycar-bonylmethylthio); Carbamoylmethylthio, N-Niederalkyl-carbamoylmethylthio (z.B. N,N-Dimethylcarbamoylmethyl-thio), Acetylmethylthio, N-Niederalkylamino-niederalkyl-45 thio (z.B. 2-N,N-Dimethylaminoäthylthio, 2-N,N,N-Trime-thylammoniumäthylthio), Morpholinocarbonylmethylthio, 2-Sulfoäthylthio, etc.

Unter den Substituenten, wie sie vorstehend erwähnt werden, sind Niederalkylgruppen wie Methyl oder Niederal-50 kylengruppen mit 1 bis 2 Kohlenstoffatomen mit einem Substituenten wie z.B. Carboxymethyl, Hydroxymethyl, Dime-thylaminoäthyl, Carbamoylmethyl usw. besonders bevorzugt.

Gemäss der Erfindung ist ein Verfahren zur Herstellung 55 der Cephalosporinderivate (I) vorgesehen, bei dem eine Verbindung der Formel:

ncs-ch2coch2conh

1=0

IH]

ch2x cooh bei der X die bereits angegebene Bedeutung hat, mit Hydroxylamin umgesetzt wird. Ferner kann eine Verbindung der allgemeinen Formel:

631 717

6

wobei X die bereits angegebene Bedeutung hat und Y ein Halogen ist, entweder zuerst mit Rhodanwasserstoffsäure, um ti zu ergeben, und dann mit Hydroxylamin oder gleichzeitig mit Rhodanwasserstoffsäure und Hydroxylamin umgesetzt werden.

wobei Z eine Acyloxygruppe ist, mit einer Pyridinverbindung oder einem Thiol der allgemeinen Formel R'SH erhältlich. Zu den durch Z wiedergegebenen Acyloxyresten gehören solche, wie sie oben in Verbindung mit dem durch X wiedergegebenen Acyloxy erwähnt wurden.

Die erfindungsgemässen Cephalosporinderivate (I) werden, wie erwähnt, durch Umsetzung einer Verbindung (II) mit Hydroxylamin erhalten. Die Verbindung (II) kann normalerweise in ihrer freien Form oder als ein organisches oder anorganisches Salz (der Carboxylfunktion) umgesetzt werden, wofür Salze von Alkali- oder Erdalkalimetallen wie z.B. Lithium, Natrium, Kalium usw. oder Salze von Triäthyl-amin in Frage kommen oder als Salz organischer oder anorganischer Säuren wie z.B. von Salzsäure, Schwefelsäure usw. Das Hydroxylamin wird normalerweise als Salz einer Mineralsäure wie z.B. Salzsäure, Schwefelsäure oder Phosphorsäure oder als Salz einer organischen Säure wie z.B. Oxalsäure, Essigsäure oder p-Toluolsulfonsäure umgesetzt.

Normalerweise läuft die Reaktion vorteilhaft in einem Lösungsmittel ab, das vorzugsweise durch ein solches Lösungsmittel gebildet wird, welches die Umsetzung nicht stört. So sind gebräuchliche Lösungsmittel zu nennen, die nicht dazu neigen, mit dem ketonischen Reagens zu reagieren (wie z.B. Hydroxylamin) wie Wasser, Methanol, Äthanol, Dioxan, Acetonitril, Tetrahydrofuran, Chloroform, Methylenchlorid, Äthylenchlorid, Dimethylformamid, Dimethyl-acetamid und Hexamethylphosphoramid sowie unterschiedliche Mischungen solcher Lösungsmittel.

Obgleich normalerweise äquimolare Mengen Hydroxylamin (bezogen auf die Verbindung (II)) ausreichen, wird vorzugsweise ein geringer Überschuss, wie z.B. 1,1 Äquivalente Hydroxylamin, verwendet. Diese Reaktion läuft normalerweise unter sauren Bedingungen ab, vorzugsweise in Begleitung einer Säure der weiter oben genannten Art. Da Hydroxylamin normalerweise in Form eines sauren Salzes zur Anwendung kommt, ist dann die gesonderte Zugabe von Säure nicht erforderlich, obgleich es Fälle gibt, in denen die Zugabe eines Moläquivalents von solcher Säure zu befriedigenderen Ergebnissen führen würde. Für einen Ablauf der Reaktion mit grösserer Leichtigkeit wird das Reaktionssystem erwünschtermassen im allgemeinen innerhalb des Bereichs von pH 0,5 bis 7,0 gehalten, und zwar für bessere Ergebnisse innerhalb des Bereichs von pH 3,0 bis 6,0.

Obgleich die Reaktionstemperatur nicht besonders kritisch

[irr]

Eine Verbindung der allgemeinen Formel (I), bei der X io eine quaternäre Ammoniumgruppe oder eine Gruppe der Formel -SR1 ist (wobei R1 die bereits angegebene Bedeutung hat), ist auch durch Umsetzung einer Verbindung der allgemeinen Formel:

[iv]

2s ist, erfolgt die Umsetzung normalerweise erwünschtermassen bei Zimmertemperatur oder innerhalb eines Bereichs von 0 bis 80°C, insbesondere bei Temperaturen nicht über 60°C. Die Reaktion wird normalerweise 0,5 bis 24 Stunden lang und vorzugsweise 0,5 bis 12 Stunden lang bei Zimmertemperatur durchgeführt. Das resultierende Cephalosporinderivat (I) kann nach bekannten Verfahren isoliert und gereinigt werden, wie durch Lösungsmittelextraktion, pH-Änderung, Phasenübergang, Kristallisation, Umkristallisieren und Chromatographie.

Das Cephalosporinderivat (I) kann durch Umsetzung einer Verbindung (III) mit Rhodanwasserstoffsäure und Hydroxylamin erhalten werden. Die Verbindung (III) wird in freier Form oder als Salz eines Alkali- oder Erdalkalimetalls oder von organischen oder anorganischen Säuren, wie vorstehend im Zusammenhang mit der Verbindung (II) angegeben wurde, umgesetzt. Hydroxylamin wird in freier Form oder als das oben erwähnte Salz einer Mineralsäure oder organischen Säure angewandt. Rhodanwasserstoffsäure wird in solchen Formen wie als Salz eines Alkalimetalls wie z.B. von Kalium, Natrium oder Lithium, als Salz eines Erdalkalimetalls wie von Calcium oder als Ammoniumsalz umgesetzt. Bei der Durchführung der Reaktion können Rhodanwasserstoffsäure und Hydroxylamin beliebig an erster Stelle mit der Verbindung (III) oder beide zugleich mit dieser umgesetzt werden. Die Mengenverhältnisse von Rhodanwasserstoffsäure und Hydroxylamin sind jeweils entweder äquimolar oder leicht überschüssig, wobei vorzugsweise etwa 1,1 Moläquivalente, bezogen auf die Verbindung (III), angewandt werden. Die Reaktion erfolgt allgemein in einem Lösungsmittel, das normalerweise eines von den Lösungsmitteln ist, wie sie für die Umsetzung der Verbindung (II) mit Hydroxylamin vorgeschlagen wurden. Der pH-Wert, die Temperatur und Zeitdauer sowie anderen Bedingungen der Reaktion sind erwünschtermassen ähnlich wie die bei der Umsetzung der Verbindung (II) mit Hydroxylamin angewandten. Das resultierende Cephalosporinderivat (I) kann nach bekannten Verfahrensweisen, wie sie oben erwähnt sind, isoliert und gereinigt werden.

Das in Betracht gezogene Cephalosporinderivat (I) kann 65 auch aus einer Verbindung (IV) nach herkömmlichen Verfahrensweisen erhalten werden, die allgemein als nukleophile Substitutionsreaktion an der 3-Acyloxygruppe eingestuft werden, wobei zum Beispiel eine Verbindung (IV) mit einem

HN

rn ch2conh-l ^

j— »

ho ' u ^y^ch2z cooh

35

40

45

50

55

7

631717

Pyridin der allgemeinen Formel:

o*

umgesetzt wird, wobei die Symbole die bereits angegebene Bedeutung haben oder mit einem Thiol der allgemeinen Formel:

R'SH,

wobei R1 der bereits angegebenen Bedeutung entspricht.

Die nukleophile Substitutionsreaktion einer Verbindung (IV) mit einem Pyridin oder einem Thiol R'SH zu einer Verbindung (I) erfolgt durch Zusammenmischen in einem Lösungsmittel. Die Verbindung (IV) kann in freier Form oder als Salz eines Alkalimetalls wie Natrium oder Kalium angewandt werden. Das zu benutzende Thiol, R'SH, wird der Reaktion in freier Form oder als Salz der Thiolfunktion mit einem Alkalimetall wie Natrium oder Kalium unterworfen. Das Reagens (Pyridin oder Thiol) wird in einer Menge von 1 bis 4 Äquivalenten, bezogen auf die Verbindung (IV), angewandt. Diese Umsetzung erfolgt üblicherweise durch 1 bis 20 Stunden langes Aufheizen auf 40 bis 80°C in Nachbarschaft zum Neutralpunkt. Die Reaktion wird in einem Lösungsmittel durchgeführt, wofür Wasser und wässrige Lösungsmittel wie Mischungen von Wasser mit hochpolaren Lösungsmitteln, welche die Reaktion nicht stören, wie z.B. Aceton, Tetrahydrofuran, Dimethylformamid, Methanol, Äthanol, Dimethylsulfoxid usw. bevorzugte Beispiele sind. Für die Aufrechterhaltung des pH-Wertes des Reaktionsmediums rund um den neutralen pH-Wert kann eine geeignete Menge einer Base wie Natriumbicarbonat, Kaliumbicar-bonat oder dergleichen oder eine Säure wie Salzsäure, Phosphorsäure oder dergleichen zum Medium hinzugegeben werden. Bei Bedarf kann auch eine Pufferlösung benutzt werden. Das so erhaltene Cephalosporin (I) kann nach herkömmlichen Verfahrensweisen, ähnlich den weiter oben beschriebenen, isoliert und gereinigt werden.

In diesem Zusammenhang kann auch auf folgende Literaturstellen hingewiesen werden: «Cephalosporin and Penicillin» von E.H. Flynn, Kapitel 4, Teil 5, Seite 151 (1972), Academic Press; DT-OS 1 795727, DT-PSen 1 745624, 1 795 484, 1 445 684,1 445 701,1 795 615,1 795 600 und 1445 828 sowie die DT-OS 2 607 064 (vom 2.9.1976) und die DT-OS 2461478 (vom 26.2.1976).

Die als Ausgangsmaterialien gemäss der Erfindung benutzten Verbindungen (II) und (III) können jeweils aus den üblichen Rohmaterialien der Cephalosporin-Industrie gewerblich erzeugt werden, z.B. aus Cephalosporin C, Des-acetylcephalosporin C oder 7-Aminocephalosporinen, die aus irgendeiner dieser Verbindungen gewerblich erhältlich sind, beispielsweise nach den in den offengelegten japanischen Patentanmeldungen Nr. 95293/1975 und 111093/1975 sowie der japanischen Patentanmeldung Nr. 1274/1976 und anderer Literatur beschriebenen Verfahren oder dazu analogen Verfahrensweisen. Die Verbindung (III), bei der X ein Carbamoyloxyrest ist, ist neu und ein brauchbares Zwischenprodukt für die Herstellung des Cephalosporinderivats (I) und sie wird im Rahmen der Erfindung speziell bevorzugt. Repräsentative Verfahrensweisen für die Herstellung solcher Verbindungen werden in den weiter unten beschriebenen Referenzbeispielen gezeigt.

Das so erhaltene Cephalosporinderivat (I) kann mit unmo-difizierter freier 4-Carboxylgruppe in Gebrauch genommen werden oder alternativ abgewandelt z.B. in Form des Salzes mit einem nicht-toxischen Kation wie Natrium, Kalium oder dergleichen, einer basischen Aminosäure wie Arginin, Ornithin, Lysin oder Histidin oder einem Polyhydroxyme-thylaminomethan wie N-Methylglucamin, Diäthanolamin, Triäthanolamin oderTris-hydroxymethylaminomethan. Die

4-Carboxylgruppe kann auch verestert werden, so dass das Derivat (I) in einen biologisch aktiven Ester übergeht, der zu einer erhöhten Konzentration im Blut und/oder einer verlängerten Wirksamkeit führen kann. Als Beispiele für wirksame Esterreste, die für solche Zwecke brauchbar sind, können Alkoxymethylgruppen wie Methoxymethyl, Äthoxymethyl, Isopropoxymethyl, a-Methoxyäthyl, a-Äthoxyäthyl etc.; a-alkoxy-a-substituierte Methylgruppen wie a-Alkoxyäthyl; Alkylthiomethylgruppen wie Methylthiomethyl, Äthythio-methyl, Isopropylthiomethyl, etc.; Acyloxymethyl- oder a-acyloxy-a-substituierte Methylgruppen wie Pivaloyloxy-methyl, a-Acetoxybutyl etc.; und a-alkoxycarbonyloxy-a-substituierte Methylgruppen wie Äthoxycarbonyloxymethyl, a-Äthoxycarbonyloxyäthyl etc. genannt werden.

Ferner kann das Cephalosporinderivat (I) alternativ in Form eines Salzes mit einer Säure wie einer Mineralsäure (z.B. Salzsäure, Schwefelsäure, Phosphorsäure) oder einer organischen Sulfonsäure (z.B. Methansulfonsäure) unter Mitwirkung einer basischen Gruppe wie der Iminogruppe oder einer Gruppe in 3-Stellung vorliegen.

Die als Produkt in Betracht gezogenen Cephalosporinderivate (I) können in gleicher Weise verabreicht werden wie bekannte Cephalosporine, z.B. in fester bzw. «massiver»

Form oder in üblicher Weise zubereitet mit physiologisch annehmbaren Träger- oder Verdünnungsmitteln in Dosierungsformen wie Lösungen oder Suspensionen. Insbesondere werden die vorliegenden Derivate (I) als sichere Arzneimittel für die Behandlung von Entzündungskrankheiten, pustulösen Erkrankungen, Infektionen der Atmungsorgane, Infektionen der Gallenwege, Darminfektionen, Infektionen des Harntrakts, Unterleibsinfektionen und anderen Krankheiten, wie sie durch die genannten Bakterien verursacht werden, angewandt.

Die folgenden Derivate werden unter anderem entweder intramuskulär oder intravenös in einer täglichen Dosis von etwa 5 bis 20 mg pro Kilogramm Körpergewicht des erwachsenen Menschen in drei bis vier Einzeldosen verabreicht:

Natrium-7-[2-(2-imino-3-hydroxy-4-thiazolin-4-yl)-acet-amido]-3-( 1 -methyltetrazol-5-yl)-thiomethyl-3-cephem-4-carboxylat; 7-[2-(2-Imino-3-hydroxy-4-thiazolin-4-yl)-acet-amido]-3-[l-N,N-dimethylaminoäthyl)-tetrazol-5-yl]-thio-methyl-3-cephem-4-carbonsäure-betain; Natrium-7-[2-(2-imino-3-hydroxy-4-thiazolin-4-yl)-acetami-do]-3-( 1 -carbamoylmethyltetrazol-5-yl)-thiomethyl-3-cephe-m-4-carboxylat; Natrium-7-[2-(2-imino-3-hydroxy-4-thia-zolin-4-yl)-acetamido]-3-( 1,3,4-thiadiazol-2-yl)-thiomethyl-3-cephem-4-carboxylat; Natrium-7-[2-(2-imino-3-hydroxy-4-thiazolin-4-yl)-acetamido]-3-(2-methyl-l,3,4-thiadiazol-5-yl)-thiomethyl-3-cephem-4-carboxylat; 7-[2-(2-Imino-3-hydroxy-4-thiazolin-4-yl)-acetamido]-3-[2-(2-N,N-dimethy-laminoäthyl)-1,3,4-thiadiazol-5-yl]-thiomethyl-3-cephem-4-carbonsäure-betain; Natrium-7-[2-(2-imino-3-hydroxy-4-thia-zolin-4-yl)-acetamido]-3-(2-hydroxymethyl-1,3,4-thiadiazoI-

5-yl)-thiomethyl-3-cephem-4-carboxylat; Natrium-7-[2-(2-imino-3-hydroxy-4-thiazolin-4-yl)-acetamido]-3-(2-N,N-dimethylcarbamoylmethyl-1,3,4-thiadiazol-5-yl)-thiomethyl-3-cephem-4-carboxylat; Natrium-7-[2-(2-imino-3-hydroxy-4-thiazolin-4-yl)- acetamido]-3-[2-(2-hydroxyäthylthio)-1,3,4-thiadiazol-5-yl]-thiomethyl-3-cephem-4-carboxylat; Dinatrium-7-[2-(2-imino-3-hydroxy-4-thiazolin-4-yl)-aceta-mido]-3-(2-carboxymethyl-1,3,4-thiadiazol-5-yl)-thiomethyl-

s

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

65

631717

-3-cephem-4-carboxylat; Natrium-7-[2-(2-imino-3-hydroxy-4-thiazolin-4-yl)-acetamido]-3-( 1,2,3-triazol-4-yl)-thio-methyl-3-cephem-4-carboxylat; Natrium-7-[2-(2-imino-3-hydroxy-4-thiazolin-4-yl)-acetamido]-3-(3,4-dimethyl-1,2,4-triazol-5-yl)-thiomethyl-3-cephem-4-carboxylat; Natrium-7-[2-(2-imino-3-hydroxy-4-thiazolin-4-yl)-acetamido]-3-(3-hydroxymethyl-4-methyl-1,2,4-triazol-5-yl)-thiomethyl-3-cephem-4-carboxylat; Natrium-7-[2-(2-imino-3-hydroxy-4-thiazolin-4-yl)-acetamido]-3-(2-methyl-l,3,4-oxadiazol-5-yl)-thiomethyI-3-cephem-4-carboxyIat; Natrium-7-[2-(2-imino-3-hydroxy-4-thiazolin-4-yl)-acetamido]-3-(3-methyl-1,2,4-thiadiazol-5-yl)-thiomethyl-3-cephem-4-carboxylat; Natrium-7-[2-(imino-3-hydroxy-4-thiazolin-4-yl)-acet-amido]-3-[l-(2-hydroxyäthyl)-lH-tetrazol-5-yl]-thiomethyl-3-cephem-4-carboxylat; und Dinatrium-7-[2-(2-imino-3-hydroxy-4-thiazolin-4-yl)-acetamido]-3-(4-carboxymethylt-hiazol-2-yl)-thiomethyl-3-cephem-4-carboxylat.

Die folgenden Beispiele dienen zur weiteren Erläuterung der Herstellungsweise gemäss der Erfindung.

Bei diesen Beispielen wurden die NMR-Spektren mit einem «Varian HA 100» (100 MHz) oder «T 60» (60 MHz) Spektrophotometer mit Tetramethylsilan als Standard aufgenommen und in 5 (ppm) ausgedrückt. Das Symbol s bedeutet ein Singulett, d ein Dublett, t ein Triplett, q ein Quartett, m ein Multiple« und J eine Kopplungskonstante.

Anschliessend an jedes Beispiel folgt eine Tabelle für die minimalen inhibierenden Konzentrationen (MIC) der nach dem speziellen Beispiel erhaltenen erfindungsgemässen Verbindung (I) gegen einige repräsentative gramnegative Bakterien zusammen mit den entsprechenden Konzentrationen für Cephaloridin (7-(2-Thienylacetamido)-3-(l-pyridyl)-methyI-3-cephem-4-carbonsäure-betain) und Cefazolin (Natrium-7-( 1 H-tetrazol-1 -yl)-acetamido-3-(2-methyl-1,3,4-thiadiazol-5-yl)-thiomethyl-3-cephem-4-carboxylat), die beide typische handelsübliche Cephalosporine sind, die zurzeit klinisch eingesetzt werden (The New England Journal of Medicine 294, 24 [1976] und Journal of Pharmaceutical Science 64,1899 [1975]). Ferner werden auch die effektiven Dosen der typischen Verbindungen gemäss der Erfindung bei mit Escherichia coli infizierten Mäusen im Vergleich zu den Cephalori-dindosen angegeben.

Referenzbeispiel 1 Herstellung von 7-(4-Chlor-3-oxobutyrylamido)-3-acet-oxymethyl-3-cephem-4-carbonsäure

Eine Lösung von 4,4 g Diketen in 10 ml Methylenchlorid wurde auf-35°C abgekühlt und in die Lösung3,92 g Chlor eingeleitet. Die Lösung wurde 15 Minuten lang gerührt. Gesondert wurden 10,9 g 7-Aminocephalosporansäure und 8,1 gTriäthylamin in 100 ml Methylenchlorid gelöst und die Lösung auf -30°C abgekühlt. Diese letztere Lösung wurde mit der ersteren unter Rühren und Kühlung versetzt, so dass die Temperatur der Mischung nicht über -30°C hinausging. Die Temperatur der Lösung wurde allmählich über eine Stunde hinweg auf Zimmertemperatur erhöht, wonach das Lösungsmittel unter vermindertem Druck abdestilliert wurde. Zum Rückstand wurden 100 ml Äthylacetat hinzugegeben und die Mischung mit 100 ml 10%iger wässriger Phosphorsäurelösung heftig geschüttelt. Die wässrige Schicht wurde abgenommen, mit Natriumchlorid gesättigt und dreimal mit Äthylacetat extrahiert. Die Äthylacetatschichten wurden vereinigt, mit gesättigter wässriger Natriumchloridlösung gewaschen und nach dem Trocknen unter vermindertem Druck auf 20 ml eingeengt. Das Konzentrat wurde in der Kälte stehengelassen, woraufhin sich Kristalle bildeten. Diese wurden durch Filtrieren gesammelt. Auf diese Weise wurden 6,3 g des oben genannten Produkts erhalten.

Fp 135-140°C(Zers.)

IR (cm-1; KBr): 1790,1750, 1655

NMR (100 MHz; dö-DMSO; 5): 2,00 (s; COCHj); 3,41 & 3,64 (ABq; J = 18 Hz; 2-CHa); 3,56 (s; COCH2CO); 4,50 (s; CICH2-); 4,67 & 5,00 (ABq; J = 18 Hz; 3-CHa); 5,07 (d; J = 4,5 Hz; 6-H); 5,66 (dd; J = 4,5 & 8 Hz; 7-H); 9,04 (d; J = 8 Hz; CONH).

Elementaranalyse für C14H15CIN2O7S

Ber.: C: 43,03%; H: 3,87%; N: 7,17%

Gef.: C: 43,01%; H: 3,89%; N: 7,18%

Referenzbeispiel 2 Herstellung von 7-(4-Brom-3-oxobutyrylamido)-3-acet-oxymethyl-3-cephem-4-carbonsäure

Eine Lösung von 3,4 g Diketen in 10 ml Methylenchlorid wurde auf -30°C abgekühlt und dann tropfenweise mit einer Lösung von 6,4 g Brom in 10 ml Methylenchlorid versetzt. Gesondert wurden 10,9 g 7-Aminocephalosporansäure und 8,1 g Triäthylamin in 100 ml Methylenchlorid gelöst und die Lösung auf -30°C abgekühlt. Zu dieser Lösung wurde die erstere Reaktionsmischung unter Rühren und Kühlung derart zugegeben, dass die Temperatur des Systems nicht über -30°C hinausging. Die Temperatur des Systems wurde dann allmählich über eine Stunde hinweg auf Zimmertemperatur ansteigen gelassen, wonach das Lösungsmittel unter vermindertem Druck abdestilliert wurde. Zum Rückstand wurden 100 ml Äthylacetat hinzugegeben und die Mischung mit 100 ml 10%iger wässriger Phosphorsäurelösung geschüttelt. Die wässrige Schicht wurde abgenommen, mit Natriumchlorid gesättigt und zweimal mit Äthylacetat extrahiert. Die Äthylacetatschichten wurden vereinigt, mit gesättigter wässriger Natriumchloridlösung gewaschen, getrocknet, mit Aktivkohle behandelt und unter vermindertem Druck zur Trockne eingeengt. Zum Rückstand wurde Äther hinzugegeben und die Mischung stehengelassen. Die resultierenden Kristalle wurden abgesaugt unter Erzielung der oben genannten Verbindung. Dieses Produkt enthielt lA Mol Äthylacetat als Kristallisations-Lösungsmittel. Ausbeute: 8 g.

IR (cm-1; KBr): 1780,1735,1650

NMR ( 100 MHz; da-DMSO, 5): 2,01 (s; CHaCO); 3,54 (m; 2-CH2); 3,62 (s; COCH2CO); 4,37 (s; Br; CH2CO); 4,67 & 5,01 (ABq; J = 14 Hz; 3-CH2); 5,08 (d; J = 4 Hz; 6-H); 5,66 (dd; J = 4 & 8 Hz; 7-H); 9,04 (d; J = 8 Hz; CONH).

Elementaranalyse für Ci4Hi5BrN207S • 1 ■> C4H8O2

Ber.: C: 39,40%; H 3,75%; N: 6,13%

Gef.: C: 39,20%; H: 3,63%; N: 6,09%

Referenzbeispiel 3 Herstellung von 7-(4-Brom-3-oxobutyrylamido)-3-(man-deloxymethyl)-3-cephem-4-carbonsäure

Eine Lösung von 1,34 g (0,013 Mol) Diketen in 10 ml Methylenchlorid wurde auf -30°C abgekühlt und tropfenweise mit einer Lösung von 3,14 g (0,014 Mol) Brom in 10 ml Methylenchlorid versetzt. Daneben wurden 3,6 g (0,01 Mol) 7-Amino-3-(mandeIoxymethyl)-3-cephem-4-carbonsäure und 2,8 ml (0,02 Mol) Triäthylamin in 50 ml Methylenchlorid gelöst und die Lösung auf -20°C abgekühlt. Zu dieser Lösung wurde die obige Reaktionsmischung tropfenweise über eine Zeitdauer von 10 Minuten hinweg hinzugegeben. Das Kühlbad wurde entfernt, um die Mischung auf Zimmertemperatur zurückkehrenzulassen, wonach weitere 30 Minuten

8

s

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

65

9

631717

lang gerührt wurde. Das Methylenchlorid wurde unter vermindertem Druck abdestilliert. Zum Rückstand wurden

30 ml 10%ige Phosphorsäure, 100 ml Wasser, 20 ml Tetrahy-drofuran und 250 ml Äthylacetat hinzugegeben und die Mischung heftig geschüttelt. Die organische Schicht wurde abgenommen, mit Wasser gewaschen und getrocknet. Das Lösungsmittel wurde unter vermindertem Druck abdestil-liert. Dann wurde die Gefässwand unter Zugabe von 200 ml Äther gerieben, woraufhin die oben genannte Verbindung als Pulver erhalten wurde. Ausbeute: 4,5 g.

IR (KBr; cm-'): 3370, 1782,1736, 1672,1648, 1539

NMR (100 MHz; dô-DMSO; 8): 3,24(breit s; 2-CH2); 3,63 (s; CH2CO); 4,39 (s; BrCHi-); 4,77 & 5,05 (ABq; J = 14 Hz; 3-CH2); 5,04 (d; J = 5 Hz; 6-H); 5,17 (s; -CH-); 5,68 (dd; J = 5

& 8 Hz; 7-H); 7,3-7,5 (m; 5 H; C6H5-); 9,02 (d; J = 8 Hz; CONH). Referenzbeispiel 4

Herstellung von 7-(4-Chlor-5-oxobutyrylamido)-3-( 1 -methyltetrazol-5-yl)-thiomethyl-3-cephem-4-carbonsäure

Eine Lösung von 166,5 g ( 1,98 Mol) Diketen in 830 ml Methylenchlorid wurde unter Kühlung zur Aufrechterhaltung einer Innentemperatur zwischen -25°C und -30°C gerührt, wobei 140 g (1,97 Mol) Chlorgas in die Lösung eingeleitet wurden. Das System wurde dann bei derselben Temperatur 30 Minuten lang gerührt. Daneben wurden 500 g (1,52 Mol) 7-Amino-3-(l-methyltetrazol-5-yl)-thiomethyl-3-cephem-4-carbonsäure und 394 g (3,05 Mol) Dibutylamin in

31 Methylenchlorid gelöst und die Lösung auf-10° bis -20°C abgekühlt. Zu dieser Lösung wurde die obige Reaktionsmischung über 30 Minuten hinweg tropfenweise hinzugegeben, wonach die Mischung 40 Minuten lang gerührt wurde. Die Reaktionsmischung wurde zu einer Mischung von 61 Äthylacetat und 6110%iger Phosphorsäurelösung hinzugegeben und dann heftig gerührt. Die organische Schicht wurde mit Wasser gewaschen, getrocknet und unter vermindertem Druck zur Trockne eingeengt. Der Rückstand wurde mit Äther gelockert zur Erzielung des oben genannten Produkts als Pulver. Ausbeute: 644 g.

IR (KBr; cm-'): 1783, 1732, 1679

NMR (100 MHz; ds-DMSO; 8): 3,57 & 3,79 (ABq; J = 18 Hz; 2-CH2); 3,56 (s; COCH2CO); 3,91 (s; Tetrazol-CHj); 4,20 & 4,37 (ABq; J = 13 Hz; 3-CH2); 4,52 (s; CICH2); 5,07 (d; J = 5 Hz; 6-H); 5,67 (dd; J = 5 & 8 Hz; 7-H); 9,05 (d; J = 8 Hz; -CONH-).

Referenzbeispiel 5 Herstellung von 7-(4-Brom-3-oxobutyrylamido)-3-(l-methyltetrazol-5-yl)-thiomethyl-3-cephem-4-carbonsäure

Eine Lösung von 1,03 g (0,012 Mol) Diketen in 5 ml Methylenchlorid wurde auf -30°C abgekühlt und tropfenweise mit einer Lösung von 2,24 g (0,014 Mol) Brom in 5 ml Methylenchlorid versetzt. Daneben wurden 3,29 g (0,01 Mol) 7-Amino-3-( 1 -methyltetrazol-5-yl)-thiomethyl-3-cephem-4-carbonsäure und 2,02 g Triäthylamin in 20 ml Methylenchlorid gelöst und die Lösung auf -20°C abgekühlt. Zu dieser Lösung wurde die obige Reaktionsmischung tropfenweise über eine kurze Zeit hinweg hinzugegeben, woraufhin die Temperatur der Mischung auf 0°C ansteig. Die Temperatur wurde allmählich auf Zimmertemperatur ansteigen gelassen, wonach 15 Minuten lang gerührt wurde. Die Reaktionsmischung wurde zu einer Mischung von 150 ml Äthylacetat und 100 ml 10%iger Phosphorsäure hinzugegeben.

Nach heftigem Rühren wurde die organische Schicht mit Wasser gewaschen, getrocknet und unter vermindertem Druck zur Trockne eingeengt. Der Rückstand wurde mit

Äther gelockert, woraufhin das oben genannte Produkt als Pulver erhalten wurde. Ausbeute: 4,1 g.

IR(KBr; cm-'): 1780,1725,1674

s

NMR ( 100 MHz; da-DMSO; 8): 3,59 & 3,81 (ABq; J = 18 Hz; 2-CH2); 3,63 (s; COCH2CO); 3,93 (s; Tetrazol-CHs); 4,21 & 4,38 (ABq; J = 13 Hz; 3-CH2); 4,38 (s; BrCH2); 5,07 (d; J = 5 Hz; 6-H); 5,67 (q; J = 5 & 8 Hz; 7-H); 9,06 (d; J = 8 Hz; 10 CONH).

Referenzbeispiel 6 Herstellung von 7-(4-Brom-3-oxobutyrylamido)-3-(carba-moyloxymethyl)-3-cephem-4-carbonsäure 15 Eine Lösung von 0,101 g Diketen in 2 ml Methylenchlorid wurde auf -30°C abgekühlt und tropfenweise mit einer Lösung von 0,208 g Brom in 1,3 ml Tetrachlorkohlenstoff versetzt. Daneben wurden 0,273 g 7-Amino-3-(carbamoyl-oxymethyl)-3-cephem-4-carbonsäure und 0,303 g Triäthyl-20 amin in 4 ml Methylenchlorid gelöst und die Lösung auf -20°C abgekühlt. Zu dieser Lösung wurde die obige Reaktionsmischung tropfenweise hinzugegeben. Das Kühlbad wurde dann entfernt, um die Temperatur der Reaktionsmischung auf Zimmertemperatur ansteigenzulassen, wonach 30 25 Minuten lang gerührt wurde. Das Methylenchlorid wurde unter vermindertem Druck abdestilliert und der Rückstand heftig mit 20 ml 10%iger Phosphorsäure, 30 ml Methyläthyl-keton und 5 ml gesättigter wässriger Natriumchloridlösung geschüttelt. Die organische Schicht wurde abgenommen, mit 30 5 ml gesättigter wässriger Natriumchloridlösung gewaschen und getrocknet. Das Lösungsmittel wurde dann unter vermindertem Druck abdestilliert. Unter Zugabe von 5 ml Äther wurde die Gefässwand gerieben zur Erzielung des oben genannten Produkts als Pulver. Ausbeute: 0,148 g.

35

IR (KBr; cm-'): 3390, 3000, 1780, 1740, 1550, 1400, 1330 UV Àmax (e in Wasser); 262 nm (0,89 x 104)

NMR (100 MHz; da-DMSO; 8): 3,43 & 3,66 (ABq; J = 18 Hz; 40 2-CH2); 3,64 (s; COCHzCO); 4,40 (s; BrCH2); 4,64 & 4,93 (ABq; J = 13 Hz; 3-CH2); 5,11 (d; J = 5 Hz; 6-H); 5,68 (dd; J = 5 & 9 Hz; 7-H); 6,5 (breit s; OCONH2); 9,04 (d; J = 9 Hz; CONH).

45 Elementaranalyse für Ci3Hi4N307SBr

Ber.: C: 35,79%; H: 3,23%; N: 9,61%

Gef.: C: 35,84%; H: 3,25%; N: 8,26%

50 Referenzbeispiel 7

Herstellung von 7-(4-Thiocyanato-3-oxobutyrylamido)-3-acetoxymethyl-3-cephem-4-carbonsäure

In 10 ml Acetonitril wurden 0,39 g (1 mMol) 7-(4-Chlor-3-oxobutyrylamido)-3-acetoxymethyl-3-cephem-4-carbon-55 säure zusammen mit Kaliumthiocyanat (1,5 mMol) gelöst und die Lösung bei Zimmertemperatur 16 Stunden lang gerührt. Das Lösungsmittel wurde unter vermindertem Druck abdestilliert und 10 ml einer gesättigten wässrigen Natriumchloridlösung zugesetzt. Die Mischung wurde mit 60 50%iger Phosphorsäure angesäuert und mit Äthylester extrahiert. Der Extrakt wurde mit gesättigter wässriger Natriumchloridlösung gewaschen und getrocknet. Das Lösungsmittel wurde unter vermindertem Druck abdestilliert und der Rückstand mit Äther aufgelockert. Das resultierende Pulver 65 wurde durch Filtrieren gesammelt. Nach der vorstehenden Verfahrensweise wurde die oben genannte Verbindung erhalten. Dieses Produkt enthielt Vi Mol Äther als «Kristall-Lösungsmittel». Ausbeute: 0,39 g (94%).

631 717

10

IR (KBr; cm-'): 2350 (CN), 1785, 1730

NMR (100 MHz; ck-DMSO; Ô); 2,01 (s; COCHs); 3,42 & 3,66 (ABq; J = 18 Hz; 2-CH2); 3,62 (s; COCH2CO); 4,37 (s; SCH2CO); 4,68 & 5,00 (ABq; J = 12 Hz; 3-CH2); 5,09 (d; J = 4,5 Hz; 6-H); 5,67 (dd; J = 4,5 & 8 Hz; 7-H); 9,06 (d; J = 8 Hz; CONH).

Elementaranalyse für C15H15N3O7S2 • 0,5 (CîHs^O

Ber.; C: 43,11%; H: 3,52%; N: 9,50%

Gef.: C: 42,98%; H: 3,74%; N: 9,44%

Beispiel 1

Herstellung von Natrium-7-[2-(2-imino-3-hydroxy-4-thiazolin-4-yl)-acetamido]-3-acetoxymethyl-3-cephem-4-carboxylat

In einer Mischung von 10 ml Wasser und 10 ml Tetrahy-drofuran wurden 1,653 g 7-(4-Thiocyanato-3-oxobutyryI-amido)-3-acetoxymethyl-3-cephem-4-carbonsäure zusammen mit 0,336 g Natriumbicarbonat gelöst und die Lösung bei Zimmertemperatur gerührt. Diese Mischung wurde mit 0,278 g Hydroxylamin-hydrochlorid versetzt und nachfolgend 3 Stunden lang gerührt. Die Reaktionsmischung wurde 15 Stunden lang im Kühlschrank stehengelassen, wonach sie zur Abtrennung des Tetrahydrofurans unter vermindertem Druck eingeengt wurde. Zum Rückstand wurden 0,336 g Natriumbicarbonat hinzugegeben und die resultierende Mischung einer Säulenchromatographie an Polystyrolharz (Amberlite XAD-2®, Röhm & Haas Co.) mit Wasser als Entwickler unterworfen. Die das gewünschte Produkt enthaltenden Fraktionen wurden gesammelt und gefriergetrocknet. Auf diese Weise wurde die oben genannte Verbindung erhalten. Ausbeute: 0,382 g.

IR (KBr, cm-1): 1765,1610,1390,1240

NMR (100 MHz; DzOjS): 2,17 (s; CH3CO); 3,41 &3,73 (ABq; J = 18 Hz; 2-CH2); 3,79 (s; CH2CO); 5,17 (d; J = 4,5 Hz; 6-H); 5,76 (d; J = 4,5 Hz; 7-H); 6,74 (s; Thiazolin 5-H).

UVXmax (e, in H2O): 260 nm (1,147 x 104).

Elementaranalyse für CisHi5N407S2Na-1,5 H2O

Ber.: C: 37,73%; H: 3,80%; N: 11,73%

Gef.; C: 37,50%; H: 3,85%; N: 11,29%

Minimale inhibierende Konzentrationen (|i.g/ml; Agarver-dünnung)

Bakterien vorlieg. Verbindung

Cephalori din

~

Cefazolin

E. coli NIHJ

0,20

6,25

1,56

E. coli O-lll

0,10

3,13

1,56

E. coli T-7

3,13

>

100

>

100

K. pneumoniae DT

0,10

3,13

1,56

K. pneumoniae GN 3835

0,20

50

12,5

P. vulgaris IFO 3988

0,39

6,25

3,13

P. mirabilis GN 4359

0,20

3,13

3,13

P. morganii IFO 3168

0,39

>

100

>

100

P. rettgeri 8 (TNO 336)

SS 0,03

1,56

0,20

P. rettgeri GN 4733

0,10

>

100

>

100

Ent. cloacae IFO 12937

12,5

>

100

>

100

Cit. freundii GN 99

1,56

50

50

Cit. freundii GN 1706

3,13

>

100

>

100

Beispiel 2

Herstellung von 7-[2-(2-Imino-3-hydroxy-4-thiazolin-4-yl)-acetamido]-3-acetoxymethyl-3-cephem-4-carbonsäure In 10 ml Dimethylacetamid wurden 3,9 g 7-(4-Chlor-3-5 oxobutyrylamido)-3-acetoxymethyl-3-cephem-4-carbon-säure zusammen mit 1,0 g Kaliumthiocyanat gelöst. Die Lösung wurde 15 Stunden lang bei Zimmertemperatur stehengelassen. Diese Mischung wurde mit 0,7 g Hydroxylamin-hydrochlorid versetzt und 2 Stunden lang auf 57°C erhitzt. 10 Nach dem Abkühlen wurden 40 ml Äthyläther zu dieser Reaktionsmischung hinzugegeben, woraufhin sich ein öliges Produkt absonderte. Die überstehende Flüssigkeit wurde durch Dekantieren entfernt und der Rest mit 100 ml Äthylacetat vermischt. Beim Reiben der Gefässwände wandelte is sich das Öl in ein Pulver um. Dieses wurde abgesaugt, wodurch 6,0 g der obengenannten Verbindung als Rohprodukt erhalten wurden. Eine 1 g Portion des rohen Pulvers wurde in 50 ml 10%iger wässriger Natriumbicarbonatlösung aufgelöst und die Lösung unter Saugwirkung filtriert. Das 20 Filtrat wurde mit Essigsäure auf pH 3 eingestellt und unter vermindertem Druck auf etwa 2 ml eingeengt. Das Konzentrat wurde im Kühlschrank stehengelassen. Das resultierende kristalline Pulver wurde durch Filtrieren gesammelt und getrocknet. Auf diese Weise wurden 0,51 g der oben 25 genannten Verbindung als reines Produkt erhalten.

IR (KBr, cm-1): 1785,1775,1725, 1665,1540, 1385

NMR (100 MHz; ds-DMSO; 5): 2,03 (s; CHsCO); 3,24 & 3,52 30 (ABq; J= 18 Hz; 2-CH2); 3,59 (s; CH2CO); 4,75 & 4,98 (ABq; J = 12 Hz; 3-CHa); 4,98 (d; J = 4,5 Hz; 6-H); 5,58 (dd; J = 4,5 & 8,0 Hz; 7-H); 6,68 (s; Thiazolin 5-H); 7,6 (breit s; = NH); 10,68 (d; J = 8 Hz; CONH).

35 Beispiel 3

Herstellung von 7-[2-(2-Imino-3-hydroxy-4-thiazoIin-4-yl)-acetamido]-3-acetoxymethyl-3-cephem-4-carbonsäure In 2 ml Dimethylacetamid wurden 0,39 g 7-(4-Chlor-3-oxobutyrylamido)-3-acetoxymethyl-3-cephem-4-carbon-40 säure zusammen mit 0,07 g Hydroxylamin-hydrochlorid und 0,082 g Natriumacetat gelöst. Die Lösung wurde 5 Stunden lang bei Zimmertemperatur stehengelassen und dann mit 0,1 g Kaliumthiocyanat versetzt, wonach die Mischung 1 Stunde lang auf 60°C erhitzt wurde. Nach dem Abkühlen 45 wurden 4 ml Äthyläther zu dieser Reaktionsmischung hinzugegeben, woraufhin sich ein Öl absonderte. Die überstehende Flüssigkeit wurde durch Dekantieren entfernt und unter Zugabe von 10 ml Äthylacetat zum Rückstand wurde die Gefässwand gerieben. Daraufhin wandelte sich das Öl in ein 50 Pulver um, das durch Filtrieren unter Saugwirkung gesammelt wurde. Durch die vorstehende Verfahrensweise wurden 0,52 g des oben genannten Produkts erhalten. Die chromatographische Analyse des Produkts zeigte eine gute Übereinstimmung mit dem Produkt von Beispiel 2.

55

Beispiel 4

Herstellung von Natrium-7-[2-(2-imino-3-hydroxy-4-thia-zolin-4-yl)-acetamido]-3-(2-methyl-1,3,4-thiadiazoI-5-yl)-thiomethyl-3-cephem-4-carboxylat 60 In 20 ml Phosphatpuffer (pH 6,4) wurden 0,75 g 7-[2-(2-Imino-3-hydroxy-4-thiazolin-4-yl)-acetamido]-3-acetoxy-methyl-3-cephem-4-carbonsäure zusammen mit 0,21 g 2-Methyl-l,3,4-thiadiazol-5-thiol und 0,257 g Natriumbicarbonat gelöst. Die Mischlösung wurde 15 Stunden lang bei 65 57°C gerührt. Die Lösung wurde mit der notwendigen Menge Natriumbicarbonat auf pH 7,0 eingestellt und der Säulenchromatographie an Polystyrolharz (Amberlite XAD-2) mit Wasser als Entwickler unterworfen. Die das gewünschte Pro

11

631 717

dukt enthaltenden Fraktionen wurden gesammelt und gefriergetrocknet. Auf diese Weise wurde die oben genannte Verbindung erhalten. Ausbeute: 0,185 g

IR (cm-1, KBr): 1765, 1605,1550, 1385, 1355

NMR (100 MHz; D2O; 8): 2,78 (s; Thiadiazol 2-CH3); 3,44 & 3,84 (ABq; J = 18 Hz: 2-CH2); 3,79 (s; CH2CO); 4,01 & 4,55 (ABq; J = 14,0 Hz; 3-CH2); 5,12 (d; J = 4,5 Hz; 6-H); 5,72 (d; J = 4,5 Hz; 7-H); 6,78 (d; Thiazolin 5-H).

Elementaranalyse für CieHisNóC^Na • H2O

Ber.: C: 35,55%; H: 3,17%; N: 15,55%

Gef.: C: 35,32%; H: 3,07%; N: 15,46%

Minimale inhibierende Konzentrationen (ug/ml; Agarver-dünnung)

Bakterien vorlieg. Cephalori Verbindung din

"

Cefazolin

E. coli NIHJ

0,05

6,25

1,56

E. coli O-l 11

0,024

3,13

1,56

E. coli T-7

1,56

>100

>

100

K. pneumoniae DT

0,05

3,13

1,56

K. pneumoniae GN 3835

0,20

50

12,5

P. vulgaris IFO 3988

0,10

6,25

3,13

P. mirabilis GN 4359

0,05

3,13

3,13

P. morganii IFO 3168

0,10

>100

>

100

P. rettgeri 8 (TNO 336)

0,012

1,56

0,20

P. rettgeri G N 4733

0,10

>100

>

100

Ent. cloacae IFO 12937

50

>100

>

100

Cit. freundii GN 99

0,78

50

50

Cit. freundii GN 1706

1,56

>100

>

100

Beispiel 5

Herstellung von Natrium-7-[2-(2-imino-3-hydroxy-4-thia-zo!in-4-yI)acetamido]-3-( 1 -methyltetrazol-5-yl)-thiomethyl-3-cephem-4-carboxylat

Eine gemischte Lösung von 10 g 7-(4-Brom-3-oxobutyryl-amido)-3-( 1 -methyItetrazol-5-yl)-thiomethyl-3-cephem-4-carbonsäure und 0,376 g Kaliumthiocyanat wurde 2 Stunden lang bei Zimmertemperatur gerührt, wonach 0,14 g Hydroxyl-amin-hydrochlorid zugesetzt wurden. Die Mischung wurde auf 60°C erhitzt und 1,5 Stunden lang gerührt. Diese Reaktionsmischung wurde mit 20 ml Äthylacetat verrührt, woraufhin sich ein Niederschlag ausbildete. Der Niederschlag wurde abgesaugt und in einer Lösung von 0,5 g Natriumbicarbonat in 10 ml Wasser gelöst. Die Lösung wurde einer Säulenchromatographie an Polystyrolharz (Amberlite XAD-2) mit Wasser als Entwickler unterworfen. Die das gewünschte Produkt enthaltenden Fraktionen wurden gesammelt und gefriergetrocknet. Auf diese Weise wurde die oben genannte Verbindung erhalten. Ausbeute: 0,345 g

IR (KBr; cm-'): 1765,1675,1605,1390, 1355

NMR (100 MHz; D2O; 8): 3,47 & 3,83 (ABq; J = 18 Hz; 2-CH2); 3,77 (s; CH2CO); 4,07 (s; Tetrazol l-CHs); 4,07 & 4,38 (ABq; J = 13 Hz; 3-CH2); 5,12 (d; J = 4,5 Hz; 6-H); 5,70 (d; J = 4,5 Hz; 7-H); 6,72 (s; Thiazolin 5-H).

NMR (100 MHz; de-DMSO; Ô): 3,31 &3,61 (ABq; J = 18 Hz; 2-CH2); 3,56(s; CH2CO); 3,94(s; Tetrazol I-CH3);4,26&4,46 (ABq; J = 12 Hz; 3-CH2); 4,92 (d; J = 4,5 Hz; 6-HO); 5,53 (dd; J = 4,5 & 8 Hz; 7-H); 6,67 (s; Thiazolin 5-H); 10,9 (d; J = 8 Hz; CONH).

UV Xmax (e, in H2O): 267 nm (1325 x 104)

Elementaranalyse für CisHisNsOsSsNa • 2 H2O

Ber.: C: 33,21%; H: 3,53%; N: 20,65% Gef.: C: 33,37%; H: 3,24%; N: 20,49%

Minimale inhibierende Konzentrationen (ug/ml; Agarver-dünnung)

Bakterien voriieg. Verbindung

Cephalori din

Cefazolin

E. coli NIHJ

0,05

6,25

1,56

E. coli O-lll

S 0,03

3,13

1,56

E. coli T-7

1,56

>

100

>100

K. pneumoniae DT

0,05

3,13

1,56

K. pneumoniae GN 3835

0,10

50

12,5

P. vulgaris IFO 3988

0,20

6,25

3,13

P. mirabilis GN 4359

0,10

3,13

3,13

P. morganii IFO 3168

0,78

>

100

>100

P. rettgeri 8 (TNO 336)

S 0,03

1,56

0,20

P. rettgeri GN 4733

0,05

>

100

>100

Ent. cloacae IFO 12937

6,25

>

100

>100

Cit. freundii GN 99

0,39

50

50

Cit. freundii GN 1706

0,78

>

100

>100

Beispiel 6

Herstellung von Natrium-7-[2-(2-imino-3-hydroxy-4-thia-zolin-4-yl)-acetamido]-3-(5-methyl-1,3,4-oxadiazol-2-yl)-thiomethyl-3-cephem-4-carboxylat

In 20 ml Phosphatpuffer (pH 6,4) wurde 1,0 g 7-[2-(2-Imino-3-hydroxy-4-thiazolin-4-yl)-acetamido]-3-acetoxy-methyl-3-cephem-4-carbonsäure zusammen mit 0,312 g 5-Methyl-l,3,4-oxadiazol-2-thiol-Kaliumsalz und 0,336 g Natriumbicarbonat gelöst und die Mischlösung 12 Stunden lang bei 55°C gerührt. Nach dem Abkühlen wurde diese Reaktionsmischung einer Säulenchromatographie an Polystyrolharz (Amberlite XAD-2) mit Wasser als Entwickler unterworfen. Die das gewünschte Produkt enthaltenden Fraktionen wurden gesammelt bzw. vereinigt und gefriergetrocknet. Auf diese Weise wurde die oben genannte Verbindung erhalten. Ausbeute: 0,21 g

IR (KBr; cm-1): 1770,1680, 1600, 1485,1390, 1360

NMR (100 MHz; D2O; 8): 2,60 (s; Oxadiazol 5-CH3); 3,44 & 3,88 (ABq; J = 18 Hz; 2-CH2); 3,78 (s; CH2CO); 3,95 & 4,57 (ABq; J = 13 Hz; 3-CH2); 5,12 (d; J = 4,5 Hz; 6-H); 5,71 (d; J = 4,5 Hz; 7-H); 6,74 (s; Thiazolin 5-H).

Minimale inhibierende Konzentrationen (jig/ml; Agarver-dünnung)

Bakterien vorlieg.

Cephalori-

Cefazolin

Verbindung din

E. coli NIHJ

0,10

6,25

1,56

E. coli O-lll

0,05

3,13

1,56

E. coli T-7

3,13

>100

>100

K. pneumoniae DT

0,10

3,13

1,56

K. pneumoniae GN 3835

0,78

50

12,5

P. vulgaris IFO 3988

0,20

6,25

3,13

P. mirabilis GN 4359

0,10

3,13

3,13

P. morganii IFO 3168

0,10

>100

>100

P. rettgeri 8 (TNO 336)

^0,012

1,56

0,20

P. rettgeri GN 4733

0,10

>100

>100

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

65

631717

12

Bakterien vorlieg.

Cephalori-

Cefazolin

Verbindung din

Ent. cloacae IFO 12937

50

>100

>100

Cit. freundii GN 99

0,78

50

50

Cit. freundii GN 1706

1,56

>100

>100

Beispiel 7

Herstellung von Natrium-7-[2-(2-imino-3-hydroxy-4-thia-zolin-4-yl)-acetamido]-3-(lH-l,2,3-triazol-4-yl)-thiomethyl-3-cephem-4-carboxylat

In 1 n Natronlauge wurden 0,3 g5-Amino-l,2,3-thiadiazol gelöst. Die Lösung wurde 10 Minuten lang auf100°C erhitzt. Nach dem Abkühlen wurde Kohlendioxid in diese Mischlösung eingeleitet und nach Erreichen eines Sättigungspunktes wurden 1,0 g 7-[2-(2-Imino-3-hydroxy-4-thiazolin-4-yl)-acet-amido]-3-acetoxymethyl-3-cephem-4-carbonsäure und 20 ml Phosphatpuffer (pH 6,4) hinzugegeben. Die Mischlösung wurde 2,5 Stunden lang auf 73°C erhitzt. Nach dem Abkühlen wurde diese Reaktionsmischung einer Säulenchromatographie an Polystyrolharz (Amberlite XAD-2) mit Wasser als Entwickler unterworfen. Die das beabsichtigte Produkt enthaltenden Fraktionen wurden vereinigt und gefriergetrocknet. Auf diese Weise wurde die oben genannte Verbindung erhalten. Ausbeute: 0,285 g

IR (KBr; cm-'): 1770,1610, 1400,1360

NMR (100 MHz; D2O; 8): 3,33 & 3,78 (ABq; J = 18 Hz;

2-CH2); 3,75 (s; CH2CO); 3,63 & 4,22 (ABq; J = 4,0 Hz;

3-CH2); 5,06 (d; J = 4,0 Hz; 6-H); 5,62 (d; J = 4,0 Hz; 7-H); 6,70 (s; Thiazolin 5-H); 7,94 (s; Triazol 5-H).

Elementaranalyse für CisHuNjOsSsNa • 0,5 H2O

Ber.: C: 36,00%; H: 3,02%; N: 19,59%

Gef.: C; 35,65%; H: 3,51%; N: 19,67%

Minimale inhibierende Konzentrationen (ug/ml; Agarver-dünnung)

Bakterien vorlieg. Cephalori- Cefazolin

Verbindung din

E. coli NIHJ

0,78

6,25

1,56

E. coli O-lll

0,05

3,13

1,56

E. coli T-7

3,13

>

100

>

100

K. pneumoniae DT

0,10

3,13

1,56

K. pneumoniae GN 3835

0,10

50

12,5

P. vulgaris IFO 3988

0,20

6,25

3,13

P. mirabilis GN 4359

0,10

3,13

3,13

P. morganii IFO 3168

0,39

>

100

>

100

P. rettgeri 8 (TNO 336)

à 0,03

1,56

0,20

P. rettgeri GN 4733

0,78

>

100

>

100

Ent. cloacae IFO 12937

>100

>

100

>

100

Cit. freundii GN 99

1,56

50

50

Cit. freundii GN 1706

12,5

>

100

>

100

Beispiel 8

Herstellung von Natrium-7-[2-(2-imino-3-hydroxy-4-thia-zolin-4-yl)-acetamido]-3-(3-hydroxymethyl-4-methyl-1,2,4-triazol-5-yl)-thiomethyl-3-cephem-4-carboxylat

In 20 ml Phosphatpuffer (pH 6,4) wurde 1,0 g 7-[2-(2-Imino-3-hydroxy-4-thiazolin-4-yl)-acetamido]-3-acetoxy-methyl-3-cephem-4-carbonsäure zusammen mit 0,3 g 3-Hydroxymethyl-4-methyl-l,2,4-triazol-5-thiol und 0,336 g

Natriumbicarbonat gelöst. Die Lösung wurde 2 Stunden lang bei 70°C gerührt. Diese Reaktionsmischung wurde einer Säulenchromatographie an Polystyrolharz (Amberlite XAD-2) mit Wasser als Entwickler unterworfen. Die das beabsichtigte Produkt enthaltenden Fraktionen wurden vereinigt. Diese Lösung enthielt 3-Hydroxymethyl-4-methyl-l ,2,4-triazol-5-thiol zusammen mit der gewünschten Verbindung. Die Lösung wurde gefriergetrocknet und das resultierende Pulver erneut in Wasser gelöst. Die Lösung wurde dann einer Säulenchromatographie an Dextran-gel (Sephadex LH-20®, Pharmacia) mit Wasser als Entwickler unterworfen. Die die beabsichtigte Verbindung enthaltenden Fraktionen wurden vereinigt und gefriergetrocknet. Auf diese Weise wurde die oben genannte Verbindung erhalten. Ausbeute: 0,28 g.

IR (KBr; cm-1): 1770, 1675,1605,1390,1360

NMR (100 MHz; D2O; 8): 3,39 & 3,85 (ABq; J = 18 Hz; 2-CH2); 3,74 (s; Triazol 4-CHa); 3,77 (s; CH2CO); 3,76 & 4,35 (ABq; J = 14 Hz; 3-CH2); 4,81 (s; Triazol 3-CH2OH); 5,08 (d; J = 4,5 Hz; 6-H); 5,66 (d; J = 4,5 Hz; 7-H); 6,73 (s; Thiazolin 5-H).

Minimale inhibierende Konzentrationen (jig/ml; Agarver-dünnung)

Bakterien vorlieg. Verbindung

Cephalori din

-

Cefazolin

E. coli NIHJ

S 0,2

6,25

1,56

E. coli O-lll

SS 0,2

3,13

1,56

E. coli T-7

1,56

>

100

>

100

K. pneumoniae DT

SO,2

3,13

1,56

K. pneumoniae GN 3835

S 0,2

50

12,5

P. vulgaris IFO 3988

0,39

6,25

3,13

P. mirabilis GN 4359

S 0,2

3,13

3,13

P. morganii IFO 3168

S 0,2

>

100

>

100

P. rettgeri 8 (TNO 336)

S 0,2

1,56

g

0,2

P. rettgeri GN 4733

S 0,2

>

100

>

100

Ent. cloacae IFO 12937

12,5

>

100

>

100

Cit. freundii GN 99

0,78

50

50

Cit. freundii GN 1706

3,13

>

100

>

100

Beispiel 9

Herstellung von 7-[2-(2-Imino-3-hydroxy-4-thiazolin-4-y l)acetamido]-3-( 1 -methyltetrazol-5-yl)-thiomethy 1-3-cephem-4-carbonsäure

In 10 ml Dimethylacetamid wurden 4,0 g 7-(4-Brom-3-oxo-butyrylamido)-3-( 1 -methyltetrazol-5-yl)-thiomethyl-3-cephem-4-carbonsäure zusammen mit 1,5 Kaliumthiocyanat und 0,56 g Hydroxylamin-hydrochlorid gelöst. Die Lösung wurde 60 Minuten lang bei 60°C gerührt. Nach dem Abkühlen wurde die Reaktionsmischung mit 40 ml Äthyläther vermischt, woraufhin sich ein Öl absonderte. Die überstehende Flüssigkeit wurde durch Dekantieren verworfen und der Rückstand mit 100 ml Äthylacetat versetzt und die Gefässwand gerieben, woraufhin sich das Öl in ein Pulver umwandelte. Dieses Pulver wurde abgesaugt (5,2 g) und in 25 ml einer wässrigen Lösung von 2,2 g Natriumbicarbonat gelöst. Die Lösung wurde einer Säulenchromatographie an Polystyrolharz (Amberlite XAD-2) mit Wasser als Entwickler unterworfen. Die das gewünschte Produkt enthaltenden Fraktionen wurden vereinigt und unter vermindertem Druck auf 10 ml eingeengt. Das Konzentrat wurde mit Essigsäure auf pH 3 eingestellt und ferner unter vermindertem Druck auf 5 ml eingeengt. Das Konzentrat wurde stehengelassen, und die resultierenden Kristalle wurden durch Filtrieren s

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

65

13

631717

gesammelt und aus Wasser umkristallisiert. Auf diese Weise wurde die oben genannte Verbindung erhalten.

Fp200-2?0°C (Zers.)

IR (KBr; cnr>): 1785,1660,1630,1550,1385

NMR (100 MHz; ŒCOOH; 8): 3,87 (s; 2-CHï); 4,10 (s; CH2CO); 4,21 (s;Tetrazol l-CHa); 4,23&4,76(ABq; J= 14 Hz; 3-CH2); 5,27 (d; J = 4,5 Hz; 6-H); 5,88 (dd; J = 4,5 & 8,0 Hz; 7-H); 6,81 (s; Thiazolin 5-H); 8,09 (d; J = 8,0 Hz; CONH).

Elementaranalyse für C15H16N8O5S3 - '/i H2O

Ber.; C: 36,50%; H: 3,47%; N: 22,70%

Gef.; C: 36,68%; H: 3,37%; N: 22,71%

Toxikologische Prüfungen

Subkutan an Mäuse bzw. Ratten verabreichte Dosen von bis zu 1 g/kg der gemäss Beispiel 9 erhaltenen Verbindung zeigten keine nachteiligen Wirkungen.

Beispiel 10

Herstellung von 7-[2-(2-Imino-3-hydroxy-4-thiazolin-4-yl)-acetamido]-3-(4-carbamoyIpyridinium)-methyl-3-cephem-4-carbonsäurebetain

In 40 ml Phosphatpuffer (pH 6,4) wurden 2,0 g 7-[2-(2-Imino-3-hydroxy-4-thiazolin-4-yl)-acetamido]-3-acetoxy-methyl-3-cephem-4-carbonsäure zusammen mit 1 g Isonico-tinamid, 4,0 g Natriumjodid und 0,164 g Natriumbicarbonat gelöst. Die Lösung wurde 15 Stunden lang bei 50°C gerührt. Nach dem Abkühlen wurde die Mischung einer Säulenchromatographie an Polystyrolharz (Amberlite XAD-2) mit Wasser als Entwickler unterworfen. Die das gewünschte Produkt enthaltenden Fraktionen wurden gesammelt bzw. vereinigt und gefriergetrocknet. Auf diese Weise wurde die oben genannte Verbindung erhalten. Ausbeute: 0,254 g.

IR (KBr; cm-1): 1775,1690,1620,1395,1360

NMR (100 MHz; D2O; 8): 3,21 & 3,70 (ABq; J = 18 Hz; 2-CH2); 3,74 (s; CH2CO); 5,21 (d; J = 4,0 Hz; 6-H); 5,43 & 5,69 (ABq; J = 14 Hz; 3-CH2); 5,75 (d; J = 14 Hz; 7-H); 6,72 (s; Thiazolin 5-H); 8,40 & 9,15 (jeweils d; J = 6 Hz; Pyridin a & ß-H).

Minimale inhibierende Konzentrationen (p.g/ml; Agarver-dünnung)

Bakterien vorlieg.

Cephalori-

Cefazolin

Verbindung din

E. coli NIHJ

1,56

6,25

1,56

E. coli O-lll

0,39

3,13

1,56

E. coli T-7

25

>100

>100

K. pneumoniae DT

0,78

3,13

1,56

K. pneumoniae GN 3835

1,56

50

12,5

P. vulgaris IFO 3988

0,78

6,25

3,13

P. mirabilis GN 4359

0,78

3,13

3,13

P. morganii IFO 3168

3,13

>100

>100

P. rettgeri 8 (TNO 336)

S 0,2

1,56

S 0,2

P. rettgeri GN 4733

S 0,2

>100

>100

Ent. cloacae IFO 12937

25

>100

>100

Cit. freundii GN 99

1,56

50

50

Cit. freundii GN 1706

12,5

>100

>100

Beispiel 11

Herstellung von 7-[2-(2-Imino-3-hydroxy-4-thiazolin-4-yl)-acetamido]-3-(mandeloxymethyl)-3-cephem-4-carbonsäure

In 10 ml Dimethylacetamid wurden 5,3 g 7-(4-Brom-3-oxo-butyrylamido)-3-(mandeloxymethyl)-3-cephem-4-carbon-säure zusammen mit 1,0 g Kaliumthiocyanat gelöst. Die Lösung wurde 15 Stunden lang bei Zimmertemperatur stehengelassen. Zu dieser Lösung wurden 0,7 g Hydroxylamin-hydrochlorid hinzugegeben und die Mischung 2 Stunden lang auf 60°C erhitzt. Nach dem Abkühlen wurden 40 ml Äthyläther zur Reaktionsmischung hinzugegeben, woraufhin sich ein Öl absonderte. Die überstehende Flüssigkeit wurde durch Dekantieren verworfen und die Gefässwände nach Zugabe von 10 ml Äthyläther gerieben. Das resultierende Pulver wurde durch Fitlrieren gewonnen. Die vorstehende Verfahrensweise lieferte 5,8 g der oben genannten Verbindung als rohes Pulver. Eine 1 g Portion des Pulvers wurde in 50 ml einer wässrigen II 0%igen Natriumbicarbonatlösung aufgelöst, die unter Saugwirkung filtriert wurde. Das Filtrat wurde mit Essigsäure auf pH 3 gebracht und unter vermindertem Druck auf etwa 2 ml eingeengt. Das Konzentrat wurde im Kühlschrank stehengelassen und das resultierende kristalline Pulver durch Filtrieren gesammelt und getrocknet. Auf diese Weise wurden 0,62 g der oben genannten Verbindung als reines Produkt erhalten.

IR (KBr; cm-1): 1776

NMR (100 MHz;da-DMSO-D20;8):3,30&3,61 (ABq; J = 18 Hz; 2-CH2); 3,45 (s; CH2CO); 4,8-5,4 (m; 2H; 3-CH2); 4,90 (d; J = 5 Hz; 6-H); 5,20 (s; Ph-CH(OH)-); 5,52 (d; J = 5 Hz; 7-H); 6,68 (s; Thiazolin 5-H); 7,2-7,6 (m; 5 H; CeHs-).

Beispiel 12

Herstellung von 7-[2-(2-Imino-3-hydroxy-4-thiazolin-4-yl)-acetamido]-3-[N=heterocyclo]thiomethyl-3-cephem-4-carbonsäure [I]-betain oder -natriumsalz

Gemäss der unten beschriebenen allgemeinen Verfahrensweise wurde 7-[2-(2-Imino-3-hydroxy-4-thiazolin-4-yl)-acet-amido]-3-acetoxymethyl-3-cephem-4-carbonsäure oder 7-[2-(2-Imino-3-hydroxy-4-thiazolin-4-yl)-acetamido]-3-hydroxy-4-thiazolin-4-yl)acetamido]-3-mandeIoxymethyl-3-cephem-4-carbonsäure mit dem entsprechenden stickstoffhaltigen heterocyclischen Thiol zu den Verbindungen Nr. 1 bis 34 umgesetzt, die in der unten folgenden Tabelle angegeben sind. Diese enthält auch die physikalischen Eigenschaften der so hergestellten Verbindungen.

Allgemeine Verfahrensweise (1)

In 40 ml Phosphatpuffer (pH 6,4) wurden 0,856 g (2 mMol) 7-[2-(2-Imino-3 -hydroxy-4-thiazolin-4-yl)-acetamido]-3-acetoxymethyl-3-cephem-4-carbonsäure zusammen mit dem stickstoffhaltigen heterocyclischen Thiol (2,2 mMol) und 0,336 g (4 mMol) Natriumbicarbonat gelöst. Die Mischlösung wurde 7 bis 8 Stunden lang bei 70 bis 65°C gerührt. Die Reaktionsmischung wurde unter vermindertem Druck auf etwa 20 ml eingeengt und nach Einstellung des pH-Wertes des Konzentrats auf 6,5 (mit 10%igem Natriumbicarbonat oder 10%iger Phosphorsäure, je nach Bedarf) einer Säulenchromatographie an Polystyrolharz (Amberlite XAD-2) unterworfen. Die Elution erfolgte mit Wasser, 5%igem Äthanol und 10%igem Äthanol (in der angegebenen Reihenfolge). Die das gewünschte Produkt enthaltenden Fraktionen wurden vereinigt und der Alkohol unter vermindertem Druck abdestilliert. Der Rückstand wurde gefriergetrocknet. Auf diese Weise wurden 7-[2-(2-Imino-3-hydroxy-4-thiazolin-4-yl)-acetamido]-3-[N=heterocyclo]-thiomethyl-3-cephem-4-carbonsäure-betain oder -natriumsalz erhalten.

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

65

631717

Allgemeine Verfahrensweise (2)

In 15 ml Wasser wurde 1 g (2 mMol) 7-[2-(2-Imino-3-hydroxy-4-thiazolin-4-yl)-acetamido]-3-(mandeloxymethyl)-3-cephem-4-carbonsäure zusammen mit dem stickstoffhaltigen heterocyclischen Thiol (2 mMol) unter Zusatz von 0,25 g (3 mMol) Natriumbicarbonat gelöst. Die Mischlösung wurde 1 Stunde lang bei 60°C gerührt. Nach dem Abkühlen wurde die Lösung mit 10%iger Natriumbicarbonatlösung auf pH 6 gebracht und einer Säulenchromatographie an Dex-trangel (Sephadex LH-20) mit Wasser als Entwickler unterworfen. Die das gewünschte Produkt enthaltenden Fraktionen wurden vereinigt und gefriergetrocknet. Auf diese Weise wurde die herzustellende Verbindung 7-[2-(2-Imino-3-hydroxy-4-thiazolin-4-yl)-acetamido]-3-[N=heterocyclo]-thiomethyl-3-cephem-4-carbonsäure-betain oder -natriumsalz erhalten.

Allgemeine Verfahrensweise (3)

(1) In 40 ml Wasser wurden 10,7 g (30 mMol) 7-aceto-acetamido-3-acetoxymethyl-3-cephem-4-carbonsäure zusammen mit dem stickstoffhaltigen heterocyclischen Thiol (30 mMol) und 5,04 g (60 mMol) Natriumbicarbonat gelöst. Die Lösung wurde mit 10%iger Natronlauge auf pH 7,0 eingestellt und 4 Stunden lang bei 60 bis 65°C gerührt. Nach dem Abkühlen wurden 2,31 g (33 mMol) Hydroxylamin-hydrochlorid hinzugegeben und die Mischung mit der notwendigen Menge 1 n Salzsäure auf pH 3,6 gebracht. Die Mischung wurde über Nacht bei Zimmertemperatur stehengelassen. Die resultierenden Kristalle wurden durch Filtrieren gesammelt, mit Aceton gewaschen und getrocknet. Auf diese Weise wurde die gewünschte 7-Amino-3-[N=heterocyclo]-thio-methyl-3-cephem-4-carbonsäure erhalten.

(2) Eine Lösung von 1,03 g (13 mMol) Diketen in 5 ml Methylenchlorid wurde auf -30°C abgekühlt und mit 15 g (15 mMol) einer Lösung von 1 Mol Chlor (in Gewicht) in Tetrachlorkohlenstoff oder einer Lösung von 2,24 g (14 mMol) Brom in 5 ml Methylenchlorid tropfenweise versetzt. Getrennt davon wurden die 7-Amino-3-[N=heterocyclo]-

14

thiomethyl-3-cephem-4-carbonsäure (10 mMol) und 2,02 g (20 mMol) Triäthylamin in 20 ml Methylenchlorid gelöst und die Lösung auf -20°C abgekühlt. Zu dieser Lösung wurde die obige Reaktionsmischung tropfenweise in rascher Folge hin-5 zugegeben. In den meisten Fällen führte diese tropfenweise Zugabe zu einer Wärmeentwicklung, wodurch die Temperatur auf nahe 0°C anstieg. Die Temperatur der Mischung wurde allmählich auf Zimmertemperatur erhöht, auf welchem Niveau die Mischung 15 Minuten lang gerührt io wurde. Die Reaktionsmischung wurde dann zu einer

Mischung von 150 ml Äthylacetat und 100 ml 10%iger Phosphorsäure hinzugegeben und intensiv gerührt. Die organische Schicht wurde abgesondert, mit Wasser gewaschen, getrocknet und zur Trockne eingeengt. Der Rückstand wurde ls mit Äther gelockert. Auf diese Weise wurde die 7-(4-Chlor-[bei Anwendung von Chlor] oder -Brom- [bei Anwendung von Brom] 3-oxobutyrylamido)-3-[N=heterocyclo]-thio-methyl-3-cephem-4-carbonsäure als Pulver erhalten.

(3) In 10 ml Dimethylacetamid wurden 7-(4-Chlor- oder 20 -Brom-3-oxobutyrylamido)-3-[N=heterocyclo]-thiomethyl-3-cephem-4-carbonsäure (8 mMol) und 0,776 g (8 mMol) Kaliumthiocyanat gelöst und die Mischlösung 12 Stunden lang bei Zimmertemperatur stehengelassen. Zu dieser Reaktionsmischung wurden 0,56 g (8 mMol) Hydroxylamin-25 hydrochlorid hinzugegeben und die Mischung 60 Minuten lang bei 60°C gerührt. Nach dem Abkühlen wurde die Reaktionsmischung mit 40 ml Äthyläther gerührt und die überstehende Flüssigkeit durch Dekantieren entfernt. Unter Zugabe von 100 ml Äthylacetat wurde die Gefässwand gerieben. Das 30 resultierende Pulver wurde abgesaugt und in 20 ml 10%iger Natriumbicarbonatlösung gelöst. Die Lösung wurde einer Säulenchromatographie an Polystyrolharz (Amberlite XAD-2) mit Wasser als Entwickler unterworfen. Die das gewünschte Produkt enthaltenden Fraktionen wurden ver-35 einigt und gefriergetrocknet. Auf diese Weise wurde die oben genannte Verbindung 7-[(2-Imino-3-hydroxy-4-thiazolin-4-yl)-acetamido]-3-[N=heterocyclo]-thiomethyl-3-cephem-4-carbonsäure-betain oder -natriumsalz erhalten.

Verb. Nr.

w IR(KBr;cm-1) .c-M ' NMR; O ppm

ß-Lactam allg. Vf.

T\

^S^CH3

COONa »

CH„

Na 1765

Na 1767

(100 MHz; DaO): 2,55 (s; Thiazol 5-CH3); 3,44 & 3,86 (ABq; J= 18 Hz; 2-CH2); 3,85 (s; CH2CO); 3,91 & 4,58 (ABq; J = 14 Hz; 3-CHz); 5,15 (d; J = 4, 5 Hz; 6-H); 5,73 (d; J = 4,5 Hz; 7-H); 6,79 (s; Thiazolin 5-H); 7,52 (s; Thiazol 4-H)

(100 MHz; D2O): 3,43 & 3,83 (ABq; J = 18 Hz, 2-CH2), 3,76 (s; CH2CO); 3,84 (s; CH2CO); 4,01 & 4,59 (ABq; J = 14 Hz; 3-CH2); 5,15 (d; J = 5 Hz, 6-H); 5,72(d; J = 5 Hz; 7-H), 6,79 (s; Thiazolin ;5-H); 7,36 (s; Thiazol 5-H)

(1)

(2)

(3)

(1)

(2)

15

631717

Verb. Nr. R

M

IR(KBr:cm"') M,,D s:

NMR; O ppm p-Lactam

N—N

Na 1768

H

allg. Vf.

(100 MHz; D2O): 3,46 & 3,79 (ABq; J = 18 Hz,

2-CHz), 3,77 (s; CH2CO); 4,04 & 4,28 (ABq; J = 14 (1) 1 Hz, 3-CH2); 5,12 (d; J = 5 Hz; 6-H); 5,68 (d; J = 5 (2)

Hz; 7-H); 6,73 (s; Thiazolin 5-H); 8,36 (s; Triazol (3)

5-H)

CH-

CH-

(100 MHz; D2O): 2,53 (s; Triazol 5-CH3); 3,44 &

4,01 (ABq; J = 18 Hz; 2-CHa); 3,68 (s; Triazol (1)

Na 1765 4-CH3); 3,85 (s; CH2CO); 3,75 & 4,42 (ABq; J= 14 (2) Hz; 3-CH2); 5,14 (d; J = 4 Hz; 6-H); 5,70 (d; J = 4 (3)

Hz; 7-H); 6,73 (s; Thiazolin 5-H)

-o

N'

1

CH.

(100 MHz; D2O): 3,33 & 3,86 (ABq; J = 18 Hz;

2-CH2); 3,83 (s; CH2CO & 1,3-Diazol -CHs); 5,13 (1)

Na 1766 (d; J = 5 Hz; 6-H); 5,69 (d; J = 5 Hz; 7-H); 6,74 (s; (2)

Thiazolin 5-H); 7,14& 7,30 (je d;J=l Hz; (3)

1,3-Diazol 4-&5-H)

*5

(100 MHz; D2O): 3,48 &3,90 (ABq; J = 18 Hz;

2-CH2), 3,81 (s; CH2CO); 4,00 & 4,45 (ABq; J = 13 (1) Na 1765 Hz; 3-CH2); 5,19 (d; J = 5 Hz; 6-H), 5,75 (d; J = 5 (2)

Hz; 7-H); 6,74 (s; Thiazolin 5-H); 8,11 (s; (3)

1,2,4-Triazol 3-H)

N-N

(100 MHz; D20): 3,43 & 3,78 (ABq; J = 18 Hz; Na 1765 2-CH2); 3,77 (s; CH2CO); 4,09 & 4,54 (ABq; J = 18 Hz; 3-CH2); 5,09 (d; J = 5 Hz; 6-H); 5,65 (d; J = 5 Hz; 7-H); 6,73 (s; Thiazolin 5-H)

N-N

AJ

N'

1

CH-

(100 MHz; D2O): 3,48 & 3,90 (ABq; J = 18 Hz;

2-CH2); 3,82 (s; CH2CO & Triazol -CHs); 3,83 & (1)

Na 1767 4,38 (ABq; J = 14 Hz; 3-CH2); 5,15 (d; J = 5 Hz; (2)

6-H); 5,70 (d; J = 5 Hz; 7-H); 6,75 (s; Thiazolin (3)

5-H); 8,59 (s; Triazol 5-H)

NH,

Na 1768

(100 MHz; D2O): 3,45 & 3,89 (ABq; J = 18 Hz; 2-CH2); 3,85 (s; CH2CO); 3,90 & 4,52 (ABq; J = 13 Hz; 3-CH2); 5,19 (d; J = 5 Hz; 6-H); 5,76 (d; J = 5 Hz; 7-H); 6,74 (s; Thiazolin 5-H)

(1)

(2)

(3)

10

11

N-N

^och3 N—N

As 5-ch CO

N

(cti3)2

Na 1765

Na 1765

(100 MHz; D2O): 3,48 & 3,90 (ABq; J = 18 Hz;

2-CH2); 3,86 (s; CH2CO); 3,89 (s; OCHj); 3,90 & (1)

4,51 (ABq; J = 13 Hz; 8-CH2); 5,19 (d; J = 5 Hz; (2)

6-H); 5,76 (d; J = 5 Hz; 7-H); 6,75 (s; Thiazolin (3)

5-H)

(100 MHz; D2O): 3,13 & 3,29 (je s; N(CH3)2); 3,55 & 3,89 (ABq; J = 18 Hz; 2-CH2); 3,87 (s; CH2CO); (1)

4,21 & 4,62 (ABq; J = 14 Hz; 3-CH2); 5,22 (d; J = 5 (2) Hz; 6-H); 5,78 (d; J = 5 Hz; 7-H); 6,75 (s; Thiazolin (3) 5-H)

631717

16

Verb. Nr. R

III'

12 "sj>-?h2

COONa

M

IR(fCBr; cm"1) ß-Lactam

NMR: 8 ppm

Na 1767

'(100 MHz; D2O): 3,56 & 3,92 (ABq; J = 18 Hz; CH2); 3,81 (s; CH2CO); 4,17 (s; CH2CO2); 4,20 & 4,62 (ABq; J = 13 Hz; 3-CH2); 5,24 (d; J = 5 Hz; 6-H); 5,80 (d; J = 5 Hz; 7-H); 6,73 (s; Thiazolin 5-H)

allg. Vf.

(D (2)

N~N

13

D COOCH-

(100 MHz; D2O): 3,53 & 3,88 (ABq; J = 18 Hz; 2-CHz); 3,86 (s; CH2CO); 3,91 (s; OCHa); 4,18 & Na 1768 4,58 (ABq; J= 13 Hz;3-CH2); 5,21 (d; J = 5 Hz;

6-H); 5,77 (d; J = 5 Hz; 7-H); 6,73 (s; Thiazolin 5-H)

(2)

NN

^>?H;

i4 ^

'S • ù conh,

(100 MHz; D2O): 3,52 & 3,87 (ABq; J = 18 Hz; Na 1770 2-CH2); 3,86 (s; CH2CO); 4,18 & 4,57 (ABq; J = 13 Hz; 3-CH2); 5,19 (d; J = 5 Hz; 6-H); 5,75 (d; J = 5 Hz; 7-H); 6,73 (s; Thiazolin 5-H)

(1)

(2)

(3)

15

N-N

VuCH2SCH3 Na 1765

(100 MHz; D2O): 2,25 (s; CHaS); 3,54 & 3,86 (ABq; J = 18 Hz; 2-CH2); 3,86 (s; CH2CO); 4,22 (s; (1)

CH2S); 4,25 & 4,59 (ABq; J = 14 Hz; 3-CHz); 5,20 (2)

(d; J = 5 Hz; 6-H); 5,79 (d; J = 5 Hz; 7-H); 6,75 (s; (3)

Thiazolin 5-H)

16

N-N

xs 3^-ch2och3

(100 MHz; D2O): 3,36 (s; OCHa); 3,30 & 3,64 (ABq; J = 18 Hz; 2-CH2); 3,63 (s; CH2CO); 3,97 & (1)

4,38 (ABq; J = 14 Hz; 3-CH2); 4,77 (s; CH2O); 4,96 (2) (d; J = 5 Hz;6-H);5,52(d; J=5 Hz;7-H);6,74(s; (3)

Thiazolin 5-H)

17

Ä

U Na 1765

ls^s?h2

COONa

(100 MHz; D2O): 3,37 & 3,77 (ABq; J = 17 Hz; 2-CH2); 3,76 (s; CH2CON); 3,97 & 4,40 (ABq; J = 14 Hz; 3-CH2); 5,08 (d; J = 5 Hz; 6-H); 5,64 (d; J = 5 Hz; 7-H); 6,71 (s; Thiazolin 5-H)

(2)

18

N-N

Ji s^-SCH2CH20H

Na 1768

(100 MHz; D2O): 3,4-3,8 (m; s x CH2); 3,97 (t; J = 6 Hz; CH2O); 4,01 & 4,42 (ABq; J = 14 Hz; 3-CH2); 5,06 (d; J = 5 Hz; 6-H); 5,64 (d; J = 5 Hz; 7-H); 6,75 (s; Thiazolin 5-H)

(1)

(2)

(3)

19

N-N

h ch2ch2n(ch3)2

0 1768

(100 MHz; D2O): 3,02 (s; N(CH3»; 3,48 & 3,78 (ABq; J = 18 Hz; 2-CH2); 3,75 (s; CH2CO); 3,79 (t; J = 6 Hz; CH2N Me2) 4,12 &4,29 (ABq; J = 13 Hz; 3-CH2); 4,83 (t; J = 6 Hz; Tetrazol -CH2-); 5,10 (d; J = 5 Hz; 6-H); 5,61 (d; J = 5 Hz; 7-H); 6,72 (s; Thiazolin 5-H)

(2)

20

N-N

JL x N

C^C0NH2

• (100 MHz; D2O): 3,53 & 3,85 (ABq; J = 18 Hz;

2-CH2); 3,85 (s; CH2CO); 4,25 & 4,49 (ABq; J = 13 (1) Na 1767 Hz; 3-CH2); 5,21 (d; J = 5 Hz; 6-H); 5,42 (s; (2)

NCH2CO); 5,76 (d; J = 5 Hz; 7-H); 6,74 (s; (3)

Thiazolin 5-H)

17

631717

Verb. Nr. R M IR(KBr: cm'1) NMR;5ppm allg.Vf.

ß-Lactam

(100 MHz; CFaCOOH): 3,79 (s; 2-CHz); 4,12 (s; N-N NH CH2CO); 4,40 & 4,81 (ABq; J= 14 Hz; 3-CH2);

// \\_CH jtxjq u 177fì , 5,12 (d;J = 7 Hz; Thiadiazol-CH2-); 5,27 (d;

21 21 J = 4,5 Hz; 6-H); 5,88 (dd; J = 4,5 & 8 Hz; 7-H); ^

■ J "}•' lü» v 11.J) nJ)00 ^UU, J ' j-7 ix» O Iii) / "11^,

NHo 6,4-7,0 (breit; 5H; -NHC (=NH)NH2 & Thiazolin

5-H)

'2

n-n

N 1

CH^OONa 1 Thiazolin 5-H)

(100 MHz; D2O): 3,44 & 3,68 (ABq; J = 18 Hz; 2-CH2); 3,72 (s; CH2CO); 4,23 & 4,42 (ABq; J = 13

22 ^N Na 1765 Hz; 3-CH2); 4,71 (s; Tetrazol -CH2CO); 4,96 (d; (1)

J = 5 Hz; 6-H); 5,58 (d; J = 5 Hz; 7-H); 6,73 (s;

N -N (100 MHz; D2O): 3,42 & 3,80 (ABq; J = 18 Hz;

23 Ji N Na 1765 2-CH2); 3,73 (s; CH2CO); 3,99 & 4,36 (ABq; J= 13 n

N^ Hz; 3-CH2); 5,16 (d; J = 5 Hz; 6-H); 5,74 (d; J = 5 w jvj Hz; 7-H); 6,80 (s; Thiazolin 5-H)

N—N (100 MHz; D2O): 3,44 & 3,85 (ABq; J = 18 Hz;

// v\ 2-CH2); 3,79 (s;CH2CO); 4,08 & 4,58 (ABq; J= 13 (1)

24 —CH20H Na 1772 Hz; 3-CH2); 5,01 (s; Thiadiazol-CH20); 5,12 (d; (2)

J = 4,5 Hz 6-H); 5,71 (d; J = 4,5 Hz; 7-H); 6,74 (s; (3)

Thiazolin 5-H)

N-n çh3 ( 100 MHz; D2O): 2,51 (s; N(CH3)2); 3,77 (s;

// \\_ch«n CHzCO); 3,44 & 3,79 (ABq; J = 18 Hz; 2-CH2);

25 Na 1767 4,12 & 4,53 (ABq; J = 13 Hz; 3-CH2); 4,22 (s; (2)

CHj Thiadiazol -CH2N); 5,10 (d; J = 5 Hz; 6-H); 5,66

(d; J = 5 Hz; 7-H); 6,70 (s; Thiazolin 5-H)

n-n

■is M

S (100 MHz; D2O): 3,0-3,8 (m; 8H); 4,02 & 4,27

26 ÇH, Na 1768 (ABq; J = 13 Hz; 3-CH2); 5,04 (d; J = 5 Hz; 6-H); (1)

5,58 (d; J = 5 Hz; 7-H); 6,75 (s; Thiazolin 5-H)

»c3.^

N -N O00 MHz; D2°); 3>46 (s; OCH3); 3,47 &3,82

// \V (ABq; J = 18 Hz; 2-CH2); 3,77 (s; CH2CO); 4,18 & (1)

27 «/" Na 1768 4,45(ABq; J= 13 Hz;3-CTL); 5,12(d; J = 4,5 Hz; (2)

I 6-H); 5,67 (d;J = 4,5 Hz; 7-HO; 5,77 (s; Tetrazol (3)

ch oOCH, -CH2O); 6,73 (s; Thiazolin 5-H)

2

CI^SCH3

(100 MHz; D2O): 2,21 (s; SCHa); 3,45 & 3,77 (ABq;

J = 18 Hz; 2-CHï); 3,78 (s; CH2CO); 4,20 & 4,44 (1 )

28 ""^n' Na 1767 (ABq; J = 13 Hz; 3-CH2); 5,12 (d; J = 5 Hz; 6-H); (2)

5,46 (s; Tetrazol-CH2S); 5,68 (d;J = 5 Hz; 7-H); (3)

6,72 (s; Thiazolin 5-H)

N (100 MHz; D2O): 2,93 (t; J = 6 Hz; Thiadiazol

(D

,Q Ji W Na 1769 2-CH2); 3,4-3,9 (m; 6H); 4,03 & 4,56 (ABq; J = 14

^S-^CHoCHoOH Hz; 3-CH2); 5,12 (d; J = 4,5 Hz; 6-H); 5,73 (d; 2

2 2 J = 4,5 Hz; 7-H); 6,74 (s; Thiazolin 5-H) w

631 717

18

Verb- Nr.

M

IR(KBr; cm" ß-Lactam

NMR: 5 ppm allg. Vf.

30

n-n

N

I

ch0ch^nk.? 2 % 3

(100 MHz; DaO + NaHCCh): 3,45-3,78 (m; 6H; 2-CHa; CH2CO & CH2 NH2); 4,23 & 4,45 (ABq; 0 1770 J= 13 Hz; 3-CH2); 4,6-4,8 (m; Tetrazol-CH2); 5,15 (d; J = 4; 5 Hz; 6-H); 5,73 (d; J = 4,5 Hz; 7-H); 6,73 (s; Thiazolin 5-H)

(2)

(100 MHz; D2O): 3,45 & 4,03 (ABq; J = 18 Hz;

2-CH2); 3,62 (s; Triazol 4-CH3); 3,78 (s; Triazol PnnM, Na 1765 5-CH2CO);3,85(s;CH2CO);3,75&4,43 (ABq; (1)

N ^"2 J = 14 Hz; 3-CH2); 5,14 (d; J = 4 Hz; 6-H); 5,71 (d;

J = 4 Hz; 7-H); 6,73 (s; Thiazolin 5-H)

n-n

32 Na 1768

ch2ch2n(ch3)2

(100 MHz; D2O): 3,02 (s; (CH3)2N); 3,46 & 3,84

(ABq; J = 18 Hz; 2-CH2); 3,67 (breit s; CH2CH2N);

3,78 (s; CH2CO); 4,06 & 4,53 (ABq; J = 14 Hz; (2)

3-CH2); 5,16 (d; J = 5 Hz; 6-H); 5,71 (d; J = 5 Hz;

7-H); 6,75 (s; Thiazolin 5-H)

n-n

33 JL Na 1760

n ch2ch2nhcoch3

(100 MHz; D2O): 2,03 (s; COCHs); 3,54 & 3,87 (ABq; J = 18 Hz; 2-CH2); 3,84 (s; CH2CO); 4,22 & (1) 4,48 (ABq; J = 13 Hz; 3-CH2); 3,7-3,9 & 4,5-4,8 (je (2) m; CH2CH2); 5,20 (d; J = 4,5 Hz; 6-H); 5,77 (d; (3)

J = 4,5 Hz; 7-H); 6,80 (s; Thiazolin 5-H)

w _N (100MHz;D2O):2,96(s;NCH3);3,63&3,93

/, u (ABq; J = 18 Hz; 2-CH2); 3,83 (t; J = 6 Hz;

X^ CHîNMe);3,92(s; CH2CO);4,23 &4,44(ABq; m

34 n © 1768 J= 14 Hz; 3-CH2); 4,94 (t;J = 6 Hz; Tetrazol {)

' „ -CH2-);5,24(d;J = 5Hz;6-H);5,75(d;J = 5Hz;

Uti2utt2wiiun3 7-H); 6,81 (s; Thiazolin 5-H)

h

Beispiel 13 IR (KBr; cm-'): 3400,1760,1710, 1600,1400, 1330

Herstellung von Natrium-7-[2-(2-Imino-3-hydroxy-4-thia-zolin-4-yl)-acetamido]-3-(carbamoyloxymethyl)-3-cephem-4- NMR (100 MHz; de-DMSO; 5): 3,12 & 3,43 (ABq; J = 18 Hz; carboxylat 50 2-CH2); 3,47 & 3,66 (ABq; J = 14 Hz; CH2CO); 4,70 & 4,87

In 0,5 ml Dimethylacetamid wurden 0,088 g 7-(4-Brom-3- (ABq; J = 13 Hz; 3-CH2); 4,91 (d; J = 5 Hz; 6-H); 5,50 (dd; oxobutyrylamido)-3-(carbamoyloxymethyl)-3-cephem-4-car- J = 5 & 9 Hz; 7-H); 6,47 (breit s; OCONH2); 6,68 (s; Thiazolin; bonsäure zusammen mit 0,019 g Kaliumthiocyanat gelöst 5-H); 7-8 (breit s; 1 H;HN=).

und die resultierende Lösung 1 Stunde lang bei Zimmertemperatur gerührt. Zu dieser Lösung wurden 0,014 g Hydroxyl- ss amin-hydrochlorid hinzugegeben. Die erhaltene Lösung NMR (100 MHz; D2O; S): 3,46 & 3,77 (ABq; J = 18 Hz;

wurde auf 60°C erhitzt und 1 Stunde lang gerührt. Zu dieser 2-CH2); 3,85 (s; CH2CO); 4,80 & 5,00 (ABq; J = 12 Hz; Reaktionsmischung wurden 10 ml Äther hinzugegeben und 3-CH2); 5,24 (d; J = 5 Hz; 6-H); 5,81 (d; J = 5 Hz; 7-H); 6,82 (s; die überstehende Flüssigkeit durch Dekantieren entfernt. Thiazolin 5-H).

Unter Zugabe von 10 ml Äther wurde der Rückstand gerührt, 60 woraufhin ein Pulver erhalten wurde. Dieses wurde abgesaugt und in einer 10%igen wässrigen Natriumbicarbonatlö- UV À.max (H2O; e); 264 nm (1,27 x 104)

sung gelöst. Die Lösung wurde einer Säulenchromatographie an Polystyrolharz (Amberlite XAD-2) mit Wasser als Entwickler unterworfen. Die das oben genannte Produkt enthal- 65 Elementaranalyse für Ci4Hi4Ns07S2Na • 2 H2O tenden Fraktionen wurden vereinigt und gefriergetrocknet.

Auf diese Weise wurde die oben genannte Verbindung Ber.; C: 34,50%; H; 3,72%; N: 14,37%

erhalten. Ausbeute: 0,03 g. Gef.: C: 34,58%; H: 3,83%; N: 13,75%

19

631717

Minimale inhibierende Konzentrationen (jig/ml; Agarver-dünnung)

Bakterien vorlieg.

Cephalori-

Cefazolin

Verbindung din

5

E. coli NIHJ

0,20

6,25

1,56

E. coli O-l 11

0,10

3,13

1,56

E. coli T-7

1,56

>100

>100

K. pneumoniae DT

0,20

3,13

1,56

10

K. pneumoniae GN 3835

0,20

50

12,5

P. vulgaris IFO 3988

0,39

6,25

3,13

P. mirabilis GN 4359

0,20

3,13

3,13

P. morganii IFO 3168

0,78

>100

>100

P. rettgeri 8 (TNO 336)

SO,012

1,56

0,20

15

P. rettgeri GN 4733

0,20

>100

>100

Ent. cloacae IF 12937

50

>100

>100

Cit. freundii GN 99

0,78

50

50

Cit. freundii GN 1706

3,13

>100

>100

Schutzwirkung der erfindungsgemässen Verbindungen im Vergleich zu Cephaloridin bei infizierten Mäusen

Verbindung gemäss Beispiel

EDso* in mg/kg

1

0,075

4

0,019

6

0,071

7

0,056

9

0,04

10

0,089

13

0,084

Cephaloridin

2,60

* Test-Tiere: männliche Mäuse (ICR/SLC). 5 Mäuse pro Gruppe-Einzeldosis. Infektion: intraperitoneal mit Escherichia coli O-l 11.

Verabreichung: eine einzelne subkutane Dosis unmittelbar nach der Infizierung.

Beobachtungszeit: 7 Tage.

Beispiel 14

Herstellung von Natrium-7-{2-(2-Imino-3-hydroxy-4-thia-zolin-4-yl)-acetamido]-3-(carbamoyloxymethyl)-3-cephem-4-carboxylat

( 1 ) 7-(4-Chlor-3-oxobutyrylamido)-3-(carbamoyloxy-methyl)-3-cephem-4-carbonsäure

Eine Lösung von 37,8 g Diketen in 190 ml Methylenchlorid wurde auf -60°C abgekühlt und unter Rühren wurden 31,9 g Chlor in die Lösung eingeführt. Daneben wurden 82,0 g 7-Amino-3-(carbamoyl-oxymethyl)-3-cephem-4-carbonsäure und 66,8 g Triäthylamin in einer Mischlösung von 300 ml Dimethylformamid und 300 ml Methylenchlorid gelöst und die Lösung auf -25°C abgekühlt. Zu dieser Lösung wurde die obige Reaktionsmischung tropfenweise mit einer solchen Geschwindigkeit hinzugegeben, dass die Reaktionstemperatur nicht über -18°C hinausging. Nach 30 Minuten Rühren bei dieser Temperatur wurden 1000 ml Methyläthylketon, 600 ml Äthylacetat, 200 g Phosphorsäure und 750 ml Salzlösung dazugegeben und die Mischung gerührt. Die organische Schicht wurde abgetrennt, mit Salzlösung gewaschen und zur Trockne eingeengt. Der Rückstand wurde mit 50 ml Äthylacetat gemischt und das gebildete Pulver gesammelt, woraufhin die oben genannte Verbindung erhalten wurde. Ausbeute: 79,6 g.

lR(KBr;cm-'): 1773, 1720, 1660, 1540, 1410, 1335

NMR (100 MHz; dô-DMSO; 5): 3,42 & 3,66 (ABq; J = 18 Hz; 2-CH2); 3,60 (s; COCH2CO); 4,56 (s; CICH2); 4,64 & 4,94 (ABq; J = 13 Hz; 3-CH2); 5,12 (d; J = 5 Hz; 6-H); 5,68 (dd; J = 5 & 8 Hz; 7-H); 6,52 (breit s; CONH2); 9,02 (d; J = 8 Hz; CONH).

(2) In 10 ml Dimethylacetamid wurden 3,13g des wie vorstehend hergestellten 7-(4-Chlor-3-oxobutyrylamido)-3-(car-bamoyloxymethyl)-3-cephem-4-carbonsäure und 0,776 g Kaliumthiocyanat gelöst und die resultierende Lösung 12 Stunden lang bei Zimmertemperatur gerührt. Die Lösung wurde mit 0,56 g Hydroxylamin-hydrochlorid versetzt und 60 Minuten lang auf 60°C erhitzt. Nach dem Abkühlen wurden 40 ml Äther mit der Lösung gemischt und die überstehende Flüssigkeit verworfen. Zum Rückstand wurden 100 ml Äthylacetat hinzugegeben und die Gefässwand gerieben. Das gebildete Pulver wurde abgesaugt und in 20 ml 10%iger Natriumbicarbonatlösung gelöst. Die Lösung wurde einer Säulenchromatographie an Polystyrolharz (Amberlite 20 XAD-2) mit Wasser als Entwickler unterworfen. Die das oben genannte Produkt enthaltenden Fraktionen wurden vereinigt und gefriergetrocknet. Auf diese Weise wurde die oben genannte Verbindung erhalten. Ausbeute: 1,08 g.

Die IR- und NMR-Spektren der Probe waren in zufrieden-25 stellender Übereinstimmung mit denjenigen der gemäss Beispiel 13 hergestellten Probe.

Beispiel 15

Herstellung von Natrium-7-[2-(2-Imino-3-hydroxy-4-thia-30 zolin-4-yl)-acetamido]-3-(3-methyl-1,2,4-thiadiazol-5-yl)-thiomethyl-3-cephem-4-carboxylat

In 20 ml Phosphatpuffer (pH 6,4) wurden 0,482 g 7-[2-(2-Imino-3-hydroxy-4-thiazolin-4-yl)-acetamido]-3-acetoxy-methyl-3-cephem-4-carbonsäure zusammen mit 0,176 g 35 3-Methyl-l,2,4-thiadiazol-5-thiol und 0,168 g Natriumbicarbonat gelöst und die Lösung 3 Stunden lang bei 70°C gerührt. Diese Reaktionsmischung wurde einer Säulenchromatographie an Polystyrolharz (Amberlite XAD-2) unterworfen und mit Wasser und 20%igem Äthanol eluiert. Die das 40 gewünschte Produkt enthaltenden Fraktionen wurden vereinigt, unter vermindertem Druck eingeengt und gefriergetrocknet. Auf diese Weise wurde die oben genannte Verbindung erhalten. Ausbeute: 0,17 g.

45 IR (KBr; cm-'): 1765

NMR (100 MHz; D2O; 8): 2,59 (s; CHj); 3,43 & 3,76 (ABq; J = 18 Hz; 2-CH2); 3,76 (s; CH2CO); 4,15 & 4,57 (ABq; J = 14 Hz; 3-CH2); 5,12 (d; J = 4,5 Hz; 6-H); 5,70 (d; J = 4,5 Hz; 7-H); 50 6,72 (s; Thiazolin 5-H).

Elementaranalyse für CióHisNsOsSf 1,5 H2O

Ber.: C: 34,97%; H: 3,30%; N: 15,29%

55 Gef.: C: 35,16%; H: 3,28%; N: 15,47%

Minimale inhibierende Konzentrationen (jig/ml; Agarver-dünnung)

SO Bakterien vorlieg. Cephalori- Cefazolin

Verbindung din

E. coli NIHJ 0,39 6,25 1,56

E. coli O-l 11 0,1 3,13 1,56

65 E. coli T-7 6,25 >100 >100

K. pneumoniae DT 0,1 3,13 1,56

P. vulgaris IFO 3988 0,1 6,25 3,13

P. mirabilis GN 4359 0,1 3,13 3,13

631 717

20

Bakterien vorlieg.

Cephalori-

Cefazolin

Verbindung din

P. morganii IFO 3168

1,56

>100

>100

P. rettgeri 8 (TNO 336)

5J0,012

1,56

0,20

P. rettgeri G N 4733

0,2

>100

>100

Cit. freundii GN 99

0,78

50

50

Cit. freundii GN 1706

12,5

>100

>100

Beispiel 16

Herstellung von Natrium-7-[2-(2-imino-3-hydroxy-4-thia-zolin-4-yl)-acetamido]-3-(2-trifluormethyI-l,3,4-thiadiazol-5-yl)-thiomethyl-3-cephem-4-carboxylat

Die Verfahrensweise von Beispiel 15 wurde wiederholt, nur dass 0,186 g 2-Trifiuormethyl-l ,3,4-thiadiazol-5-thiol anstelle von 3-Methyl-l ,2,4-thiadiazol-5-thiol verwendet wurden. Die Verfahrensweise lieferte das oben genannte Produkt. Ausbeute: 0,084 g.

IR (KBr; cm-1): 1760

NMR (100 MHz; DaO; 8): 3,46 & 3,81 (ABq; J = 18 Hz;

2-CH2); 3,75 (s; CH2CO); 4,19 & 4,61 (ABq; J = 14 Hz;

3-CH2): 5,13 (d; J = 5 Hz; 6-H); 5,69 (d; J = 5 Hz; 7-H); 6,72 (s; Thiazolin 5-H).

Elementaranalyse für CióHnFsNaOsSaNa • 3,5 H2O

Ber.: C: 31,62%; Gef.: C: 31,44%;

H: 3,15%; H: 2,84%;

N: 13,83% N: 13,40%

P. rettgeri 8 (TNO 336) S 0,012 1,56 0,20

P. rettgeri GN 4733 1,56 > 100 > 100

Cit. freundii GN 99 0,78 50 50

Cit. freundii GN 1706 6,25 >100 >100

Beispiel 17

Herstellung von Natrium-7-[2-(2-imino-3-hydroxy-4-thia-zolin-4-yl)-acetamido]-3-[l -(2-hydroxyäthyl)-1 H-tetrazol-5-10 yl]-thiomethyl-3-cephem-4-carboxylat

Die Verfahrensweise von Beispiel 15 wurde wiederholt, nur dass 0,146 g 1 -(2-Hydroxyäthyl)-1 H-tetrazol-5-thiol anstelle von 3-Methyl-l ,2,4-thiadiazol-5-thiol verwendet wurden. Die Verfahrensweise lieferte das oben genannte Pro-is dukt. Ausbeute: 0,215 g

IR (KBr; cm-'): 1758

NMR (100 MHz; DzO; 5): 3,45 & 3,80 (ABq; J = 18 Hz; 20 2-CH2);3,78 (s; CH2CO); 4,04 (t; CH2O); 4,14 & 4,41 (ABq; J = 13 Hz; 3-CH2); 4,57 (t; Tetrazol-CH2-); 5,13 (d; J = 5 Hz; 6-H); 5,65 (d; J = 5 Hz; 7-H); 6,74 (s; Thiazolin 5-H).

25

30

Elementaranalyse für CiòHnNsOóSaNa • 2 H2O

Ber.: C: 33,56%; H: 3,70%; N: 19,57%

Gef.: C: 33,72%; H: 3,76%; N: 18,28%

Minimale inhibierende Konzentrationen (jig/ml; Agarver-dünnung)

Bakterien vorlieg.

Cephalori-

Cefazolin

Verbindung din

Minimale inhibierende Konzentrationen (us/ml; Agarver-

1,56

dünnung)

35 E. coli NIHJ

0,1

6,25

E. coli O-lll

0,05

3,13

1,56

Bakterien vorlieg.

Cephalori«

Cefazolin

E. coli T-7

1,56

>100

>100

Verbindung din

K. pneumoniae DT

0,05

3,13

1,56

K. pneumoniae GN 3835

0,1

50

12,5

E. coli NIHJ

0,78

6,25

1,56

40 P. vulgaris IFO 3988

0,2

6,25

3,13

E. coli O-l 11

0,39

3,13

1,56

P. mirabilis GN 4359

0,1

3,13

3,13

E. coli T-7

12,5

>100

>100

P. morganii IFO 3168

0,39

>100

>100

K. pneumoniae DT

0,39

3,13

1,56

P. rettgeri 8 (TNO 336)

SSO,012

1,56

0,20

P. vulgaris IFO 3988

0,2

6,25

3,13

P. rettgeri G N 4733

0,05

>100

>100

P. mirabilis GN 4359

0,78

3,13

3,13

45 Cit. freundii GN 99

0,39

50

50

P. morganii IFO 3168

3,13

>100

>100

■ Cit. freundii GN 1706

12,5

>100

>100

B

Claims (7)

631 717

1

cooh wobei X Wasserstoff, Hydroxyl, Acyloxy, Alkoxy, Carba- is tigen heterocyclischen Rest gebildet wird, oder von pharma-moyloxy, quaternäres Ammonium oder eine Gruppe der zeutisch akzeptablen Salzen oder Estern derselben, indem

Formel -SR1 bedeutet, in der R1 durch einen stickstoffhal- man eine Verbindung der allgemeinen Formel II

ncs-ch2coch2conh hÇL'

cooh ch2x (ii)

in der X die bereits angegebene Bedeutung hat, oder ein Salz 2. Verfahren zur Herstellung von Cephalosporinderivaten oder einen Ester derselben mit Hydroxylamin umsetzt. der allgemeinen Formel I

30

EN

XX

s

_h-conh-i f

2 j7.j- ch2x <*>

0 Loh wobei X Wasserstoff, Hydroxyl, Acyloxy, Alkoxy, Carba- tigen heterocyclischen Rest gebildet wird, oder von pharma-

moyloxy, quaternäres Ammonium oder eine Gruppe der zeutisch akzeptablen Salzen oder Estern derselben, indem

Formel -SR1 bedeutet, in der R1 durch einen stickstoffhal- man eine Verbindung der allgemeinen Formel III

45

Y-ch2coch2conh

^— ny ch2x cooh

(iii)

in der X die bereits angegebene Bedeutung hat und Y ein 5S die Verbindung I überführt.

Halogen darstellt, oder ein Salz oder einen Ester derselben

3. Verfahren zur Herstellung von Cephalosporinderivaten mit Rhodanwasserstoffsäure umsetzt und die so erhaltene der allgemeinen Formel I Verbindung II nach dem Verfahren des Patentanspruchs 1 in

HH

r

M

HO' "CHjCONH- - ^ (I)

-j—r ì

:h2 x cooh

wobei X Wasserstoff, Hydroxyl, Acyloxy, Alkoxy, Carba-moyloxy, quaternäres Ammonium oder eine Gruppe der Formel -SR1 bedeutet, in der R1 durch einen stickstoffhal631 717

tigen heterocyclischen Rest gebildet wird, oder von pharmazeutisch akzeptablen Salzen oder Estern derselben, indem man eine Verbindung der allgemeinen Formel III

y-ch2coch2conh jxX

?— ny ch2x cooh

(iii)

in der X die bereits angegebene Bedeutung hat und Y ein Halogen darstellt, oder ein Salz oder einen Ester derselben nach Anspruch 1, bei denen X eine quaternäre Ammoniumgruppe ist oder von pharmazeutisch akzeptablen Salzen oder gleichzeitig mit Rhodanwasserstoffsäure und Hydroxylamin 15 Estern derselben, dadurch gekennzeichnet, dass man eine umsetzt.

2

PATENTANSPRÜCHE 1. Verfahren zur Herstellung von Cephalosporinderivaten der allgemeinen Formel I

HN

XX

HO ^HjCONH-i T ^

(I)

ch-x

4

carbamoyl-pyridinium)-methyl]-3-cephem-4-carbonsäure, oder Salze derselben herstellt.

14. Verfahren nach Anspruch 5, dadurch gekennzeichnet, dass man die Verbindung s 7-[2-(2-Imino-3-hydroxy-4-thiazolin-4-yl)-acetamido]-3-(5-methyl-1,3,4-oxadiazol-2-yl)thiomethyl-3-cephem-4-carbon-säure,

7-[2-(2-Imino-3-hydroxy-4-thiazolin-4-yl)-acetamido]-3-[(2-methyl-1,3,4,-thiadiazoi-5-yl)-thiomethyl]-3-cephem-4-car-io bonsäure,

7-[2-(2-Imino-3-hydroxy-4-thiazolin-4-yl)-acetamido]-3-[(3-methyl-1,2,4,-thiadiazol-5-yl)-thiomethyl]-3-cephem-4-car-bonsäure,

7-[2-(2-Imino-3-hydroxy-4-thiazolin-4-yl)-acetamido]-3-[( 1 -is methyl-tetrazol-5-yl)-thiomethyl]-3-cephem-4-carbonsäure, 7-[2-(2-Imino-3-hydroxy-4-thiazolin-4-yl)-acetamido]-3-[(lH-l,2,3-triazol-4-yl)-thiomethyl]-3-cephem-4-carbon-säure,

7-[2-(2-Imino-3-hydroxy-4-thiazolin-4-yI)-acetamido]-3-[(3-20 hydroxymethyl-4-methyl-1,2,4-triazol-5-yl)-thiomethyI]-3-cephem-4-carbonsäure,

4. Verfahren zur Herstellung von Cephalosporinderivaten hm erhaltene Verbindung der Formel IV

r n

ho

(iv)

h„ z cooh wobei Z eine Acyloxygruppe ist oder ein Salz derselben mit einer Pyridinverbindung der Formel:

O"-*4

umsetzt, wobei R4 Wasserstoff, Methyl, Carbamoyl,

30 Carboxyl, einen Sulfonsäurerest oder Methoxy bedeutet.

5. Verfahren zur Herstellung von Cephalosporinderivaten nach Anspruch 1, bei denen X ein Rest der Formel -SR1 ist, wobei R1 der bereits angegebenen Bedeutung entspricht oder von pharmazeutisch akzeptablen Salzen oder Estern der-35 selben, dadurch gekennzeichnet, dass man eine erhaltene Verbindung der Formel V

HM c rü

ho' xh conh s

cooh w

wobei Z eine Acyloxygruppe ist oder ein Salz derselben mit einem Thiol der Formel R'SH, wobei R1 die bereits angegebene Bedeutung hat, umsetzt.

6. Verfahren nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, dass X ein Rest der Formel -SR1 ist, wobei R1 ein stickstoffhaltiger heterocyclischer Rest mit einem 5- oder 6-gliedrigen Ring ist und dass der Ring 1 bis 4 Stickstoffatome als Hete-roatome enthält.

7. Verfahren nach Anspruch 6, dadurch gekennzeichnet, dass der heterocyclische Ring durch einen Rest aus der Gruppe Pyridyl, N-Oxidopyridyl, Pyrimidyl, Pyridazinyl, N-Oxido-pyridazinyl, Pyrazolyl, Diazolyl, Triazolyl und Tetrazolyl gebildet wird.

8. Verfahren nach Anspruch 6, dadurch gekennzeichnet, dass der heterocyclische Ring mit einem oder mehreren Resten aus der Gruppe Niederalkyl, Niederalkoxy, Halogen, Amino, Mercapto, Hydroxyl, Carboxyl oder Carbamoyl substituiert ist.

9. Verfahren nach Anspruch 6, dadurch gekennzeichnet, dass der heterocyclische Ring über eine niedere Alkylengruppe mit 1 bis 2 Kohlenstoffatomen mit einem Rest aus der so Gruppe Hydroxyl, Mercapto, Amino, Guanyl, Morpholino, Carboxyl, Sulfo, Carbamoyl, Alkoxycarbamoyl, Bis- niederalkyl -amino, Niederalkylcarbamoyl, Alkoxy, Alkylthio, Alkylsulfonyl, Acyloxy und Morpholinocarbonyl substituiert ist.

55 10. Verfahren nach Anspruch 6, dadurch gekennzeichnet, dass der heterocyclische Ring mit einer niederen Alkylgruppe oder einer niederen Alkylengruppe mit zumindest einem Substituenten aus der Gruppe Hydroxyl, Mercapto, Amino, Guanyl, Morpholino, Carboxyl, Sulfo, Carbamoyl, Alkoxy-60 carbamoyl, Bis- niederalkyl -amino, Alkylthio, Alkylsulfonyl, Acyloxy und Morpholinocarbonyl substituiert ist.

11. Verfahren nach Anspruch 6, dadurch gekennzeichnet, dass der heterocyclische Ring mit einer Gruppe der Formel _Npip2 substituiert ist, wobei P1 und P2 eine niedere Alkyl-65 gruppe, Carboxyl, Alkoxycarbonyl, Acyl, Carbamoyl, eine niedere Alkylcarbamoyl oder eine niedere Alkylengruppe mit zumindest einem Substituenten aus der Gruppe Hydroxyl, Mercapto, Amino, Guanyl, Morpholino, Carboxyl, Sulfo,

631717

Carbamoyl, Alkoxycarbamoyl, Bis- niederalkyl -amino, Alkoxy, Alkylthio, Alkylsulfonyl, Acyloxy und Morpholinocarbonyl bedeutet.

12. Verfahren nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, dass man die Verbindung

7-[2-(2-Imino-3-hydroxy-4-thiazolin-4-yl)-acetamido]-3-

acetoxymethyl-3-cephem-4-carbonsäure,

7-[2-(2-Imino-3-hydroxy-4-thiazolin-4-yl)-acetamido]-3-

mandeloxymethyl-3-cephem-4-carbonsäure,

7-[2-(2-Imino-3-hydroxy-4-thiazolin-4-yl)-acetamido]-3-

(carbamoyloxymethyl)-3-cephem-4-carbonsäure,

7-[2-(2-Imino-3-hydroxy-4-thiazolin-4-yl)-acetamido]-3-[(4-

carbamoyl-pyridinium)-methyl]-3-cephem-4-carbonsäure,

7-[2-(2-Imino-3-hydroxy-4-thiazolin-4-yI)-acetamido]-3-(5-

methyl-1,3,4-oxadiazol-2-yl)thiomethyl-3-cephem-4-carbon-

säure,

7-[2-(2-Imino-3-hydroxy-4-thiazolin-4-yl)-acetamido]-3-[(2-methyl-1,3,4,-thiadiazoI-5-yl)-thiomethyI]-3-cephem-4-car-bonsäure,

7-[2-(2-Imino-3-hydroxy-4-thiazolin-4-yl)-acetamido]-3-[(3-methyl-l,2,4,-thiadiazol-5-yl)-thiomethyl]-3-cephem-4-car-bonsäure,

7-[2-(2-Imino-3-hydroxy-4-thiazolin-4-yl)-acetamido]-3-[( 1 -methyl-tetrazol-5-yl)-thiomethyl]-3-cephem-4-carbonsäure, 7-[2-(2-Imino-3-hydroxy-4-thiazolin-4-yl)-acetamido]-3-[( 1 H-1,2,3-triazol-4-yl)-thiomethyl]-3-cephem-4-carbon-säure,

7-[2-(2-Imino-3-hydroxy-4-thiazolin-4-yl)-acetamido]-3-[(3-

hydroxymethyl-4-methyl-l,2,4-triazoI-5-yl)-thiomethyl]-3-

cephem-4-carbonsäure,

7-[2-(2-Imino-3-hydroxy-4-thiazoIin-4-yl)-acetamido]-3-[(l-(2-hydroxyäthyl)-1 H-tetrazol-5-yl)-thiomethyI]-3-cephem-4-carbonsäure oder Salze derselben herstellt.

13. Verfahren nach Anspruch 4, dadurch gekennzeichnet, dass man die Verbindung

7-[2-(2-Imino-3-hydroxy-4-thiazolin-4-yl)-acetamido]-3-[(4-

7-[2-(2-Imino-3-hydroxy-4-thiazolin-4-yl)-acetamido]-3-[( 1 -(2-hydroxyäthyl)-IH-tetrazol-5-yl)-thiomethyl]-3-cephem-4-carbonsäure oder Salze derselben herstellt.