CH627184A5 - Process for the preparation of antibacterial agents - Google Patents

Description

La présente invention concerne la production de céphalo-sporines, qui ont les vertus générales des composés de ce genre et qui sont particulièrement intéressantes à utiliser dans le traitement d'infections bactériennes.

Les céphalosporines constituent un groupe bien connu d'agents antibactériens semisynthétiques préparés initialement, par exemple, peu: acylation du groupe 7-amino du noyau d'acide 7-aminocéphalosporanique (7-ACA) puis par une acylation similaire de noyaux dérivés de cet acide, par exemple par modification de son substituant en position 3. Ces composés ont été passés en revue dans diverses publications parues dans la littérature scientifique (voir, par exemple, «Cephalosporins and Penicillins - Chemistry and Biology», édité par Edwin H. Flynn, Academic Press, New York, 1972, notamment pages 554—569) et dans la littérature des brevets, par exemple dans les brevets des Etats-Unis d'Amérique N° 3 687 948, N° 3 741 965, N° 3 743 644, N° 3 759 904, N° 3 759 905, N° 3 766 175, N° 3 766 906, N° 3 769 281, N° 3 769 801, N° 3 799 923, N° 3 812 116, N° 3 813 388, N° 3 814 754 etN° 3 814 755 (appartenant tous à la classe 260-243C).

Des brevets ont été déposés sur des céphalosporines thiolées en position 3, dans lesquelles le substituant en position 7 représente:

a) un groupe a-amino-a-phénylacétamido ; ce sont les brevets des Etats-Unis d'Amérique N° 3 641 021, N° 3 734 907, N° 3 687 948 précité, N° 3 741 965 précité, N° 3 757 015, N° 3 743 644 précité; le brevet Japonais N° 71/24 400 (Farmdoc 46374S), le brevet belge N° 776 222 (Farmdoc 38983T; brevet britannique N° 1 328 340, avec divers substituants sur le noyau benzénique), le brevet belge N° 772 592 (Farmdoc 19696T; brevets des Etats-Unis d'Amérique N° 3 687 948 précité, N°

3 734 907 et N° 3 757 012), le brevet de la République Fédérale d'Allemagne N° 2 202 275 (Farmdoc 50428T) correspondant au brevet des Etats-Unis d'Amérique N° 3 759 904 précité; le brevet des Pays Bas N° 7 205 644 (Farmdoc 76309T ; brevet des Etats-Unis d'Amérique N° 3 757 014);

b) un groupe o-, m- ou p-aminoéthoxyphénylacétamido ; il s'agit du brevet des Pays-Bas N° 72/13 968 (Farmdoc 24740U) correspondant au brevet des Etats-Unis d'Amérique N°

3 759 905 précité);

c) un groupe o-aminométhylphénylacétamido ; il s'agit des brevets des Etats-Unis d'Amérique N° 3 766 176 et N°

3 766 175 précité (qui passent également en revue la littérature antérieure des brevets concernant des acides 7-phénylacétami-docéphalosporaniques substitués) ;

d) un groupe N-(phénylacétimidoyl)aminoacétamido; il s'agit du brevet des Etats-Unis d'Amérique N° 3 692 779; et e) un groupe a-amino-a-(l,4-cyclohexadiényl)acétamido ; il s'agit du brevet belge N° 776 222 précité (Farmdoc 38983T ; brevet britannique N° 1 328 340 précité).

D'autres descriptions similaires sont données dans le brevet des Etats-Unis d'Amérique N° 3 692 779 (brevet belge N° 771 189 ; Farmdoc 12819T), le brevet Japonais N° 72/05 550 (Farmdoc 12921T), le brevet Japonais N° 72/05 551 (Farmdoc 12922T), le brevet des Etats-Unis d'Amérique N° 3 719 673 (brevet belge N° 759 570 ; Farmdoc 39819S), le brevet belge N° 793 311 (Farmdoc 39702U) et le brevet belge N° 793 191 (Farmdoc 39684U).

Des descriptions de céphalosporines thiolées en position 3, dans lesquelles le substituant 7 est un groupe 7-mandélamido-(7-a-hydroxyphénylacétamido), sont données, par exemple, dans le brevet des Etats-Unis d'Amérique N° 3 641 021, le bre-svet français N° 7 310 112, le brevet des Etats-Unis d'Amérique N° 3 796 801, le brevet britannique N° 1 328 340 (Farmdoc 38983T), le brevet des Etats-Unis d'Amérique N° 3 701 775, le brevet Japonais N° 48—44 293 (Farmdoc 55334U), et dans Hoover et collaborateurs, «J. Med. Chem.» 17(1), 34—41 io (1974) et dans Wiek et collaborateurs, «Antimicrobial Ag. Chemo.», 1(3), 221-234 (1972).

Le brevet des Etats-Unis d'Amérique N° 3 819 623 (de même que, par exemple, le brevet britannique N° 1 295 841 et le brevet de la République Fédérale d'Allemagne N° 1 953 861) i5 décrit en particulier, avec des détails pratiques, la préparation de l'acide 2-mercapto-l,3,4-thiadiazole-5-acétique et sa transformation en acide 7-(lH-tétrazol-l-yl-acétamido)-3-(5-carb-oxyméthyl-l,3,4-thiadiazol-2-ylthiométhyl)-3-céphem-4-carb-oxylique qui est également décrit dans la demande de brevet de 20la République Fédérale d'Allemagne DOS N° 2 262 262.

Les brevets des Etats-Unis d'Amérique N° 3 766 175 précité et N° 3 898 217 décrivent, respectivement, un composé de formule:

25

30

CSiNHi

O 8

CHr-ê—NH—CH— CH CH»

0=è N Ì—CHr-S— a

V

èooH

dans laquelle R est un groupe de formule:

35

TT

W

N—CEU N N = N

•-u--u

40 ou un sel non toxique acceptable du point de vue pharmaceutique de ce composé et un composé de formule:

55

CHA

dans laquelle R est un atome d'hydrogène ou un groupe alkyle inférieur; R' est un atome d'hydrogène, un groupe alcanoyloxy inférieur ou un groupe de formule:

N—N

-O • -s4U-1Uciv.

60

OU

v -,-Ç

65

(dans laquelle n est un nombre entier égal à 4-7) et leurs sels d'addition d'acides acceptables du point de vue pharmaceutique.

627184

Les brevets des Etats-Unis d'Amérique N° 3 883 520 et N° 3 931 160 et «Farmdoc» 22850W décrivent des 3-hétérocyclo-thiométhylcéphalosporines portant plusieurs substituants (y compris un groupe carboxyle) sur les nombreux hétérocycles qu'ils renferment, mais ces références sont de nature tout à fait générale et n'indiquent pas des constantes physiques, de rendements, de procédés de synthèse, etc., et ne nomment pas même de composé renfermant un substituant carboxyle.

Le brevet des Etats-Unis d'Amérique N° 3 928 336 passe en revue une grande partie des connaissances antérieures sur les céphalosporines.

Les brevets des Etats-Unis d'Amérique N° 3 907 786 et N° 5 3 946 000 décrivent des céphalosporines renfermant divers thiols bicycliques à noyaux condensés.

On trouve dans «Farmdoc» 18830X la description de composés de formule:

n:

-s-\

-n li,

c00h n-\

(ch2)n-c00h dans laquelle R1 est un groupe acyle ou un atome d'hydrogène, R3 est un atome d'hydrogène ou un groupe méthoxy et n est égal à 1-9).

La présente invention offre un procède de production de composés de formule I, comme défini dans la revendication 1.

Les esters des composés de formule I comprennent, à titre non limitatif, ceux qui portent le groupe:

W

-CH

dans lequel, lorsque W est un atome d'hydrogène, Z représente un groupe alcanoyle inférieur, benzoyle, naphtoyle, furoyle, thénoyle, nitrobenzoyle, méthylbenzoyle, halogénobenzoyle,

25

phénylbenzoyle, N-phtalimido, N-succinimido, N-saccharino, N-(aIkyle inférieur)carbamoyle, alkoxy inférieur, (alkyle infé-rieur)thio, phénoxy, carbalkoxy, carbobenzoxy, carbamoyle, benzyloxy, chlorobenzyloxy, carbophénoxy, carbo-tertio-but-oxy ou (alkyle inférieur) sulfonyle; lorsque W représente un groupe carbalkoxy, Z est un groupe carbalkoxy; lorsque W représente un groupe phényle, Z est un groupe benzoyle ou un groupe cyano ; ou bien W et Z s'associent pour former un groupe 2-oxocycloalkyle contenant 4 à 8 atomes de carbone. Des exemples avantageux de composés de l'invention compren-30 nent les esters de pivaloyloxyméthyle, d'acétoxyméthyle, de mé-thoxyméthyle, d'acétonyle, de phénacyle, de p-nitrobenzyle, de ß, ß,ß-trichlorethyle, de 3-phthalidyle et de 5-indanyle.

Le groupe acyle (R1) est un groupe répondant à l'une des 35 formules:

ch2nhr«

r-/ vch2c0-

y^C^NHR1

u-

ch2c0-

et ri ch2nhr'

S' CH2C0-

dans lesquelles R est un atome d'hydrogène, un groupe hydroxy Une forme de réalisation avantageuse de la présente inven-ou méthoxy et R' est un atome d'hydrogène ou un groupe mé- 45 tion comprend la production des composés de formule I dans thyle.

laquelle R1 est un groupe de formule:

ch2nh2

ch2co-

CHgNHg ch2nh2

chgco-

et

^ ch2nh2

ch2c0-

Une autre forme de réalisation avantageuse de la présente invention comprend les composés de formule I dans laquelle R1 est l'un des groupes suivants:

5

627 184

CHgNHCH^

ch2co-

CHgNHCH^

ch„nhch-

.ch2nhch3

et

Une forme de réalisation avantageuse de la présente invention comprend les composés qui répondent à la formule:

R1 -NH-CH-CH CH I I | 2

/-%^c-0h2s

0 \

C-om

If

O

dans laquelle R1 est un groupe de formule:

^CHJTHR '

vchsco-

où R est un atome d'hydrogène, un radical hydroxy ou méthoxy ; R' est un atome d'hydrogène ou un radical méthyle ; n est égal à 1 ou 2 et M est un groupe de formule:

LqJ-CH2C0'

»

N~^CH2^nC00H

ou aCH2ttKR'

ch2c0-

ou

CH2nhr1

chgco-

0

ii

0

-ckoc(cha)nr,

II

-chcc(cha)nc

'R:

r-

10

0

il .

-ckxcor r10

ou

^r nr4r5

0

ii r

1 0

'-ch-s-c-r6 r10

dans laquelle n est égal à 0-4 ; R est un atome d'hydrogène, un groupe alkyle ayant 1 à 8 atomes de carbone, un groupe cyclo-alkyle ayant 3 à 6 atomes de carbone, phényle, phénylalkyle à radical alkyle en Q à C4, pyridyle, thiényle ou pyrrolyle; R10 est un atome d'hydrogène, un groupe méthyle ou éthyle; R2 et R3 représentent chacun un atome d'hydrogène, un groupe alkyle ayant 1 à 6 atomes de carbone, phényle, pyridyle ou thiényle; R4 et R5 représentent chacun un atome d'hydrogène ou un groupe alkyle ayant 1 à 4 atomes de carbone; R6 est un groupe alkyle ayant 1 à 4 atomes de carbone phényle, phénalkyle à radical alkyle en Cl à C4, pyridyle, thiadiazolyle, amino ou alkyl-amino en Q à C4 ; X est un groupe NH ou un atome d'oxygène ;

65 et chaque groupe phényle est dépourvu de substituants ou porte un ou deux substituants choisis entre des radicaux alkyle ayant 1 à 6 atomes de carbone, alkoxy ayant 1 à 4 atomes de carbone, hydroxy, amino, NHR1, N(R1)2, nitro, fluoro, chloro, bromo ou

627184 6

carboxy ; ces composés existant également sous la forme de sels Une autre forme de réalisation avantageuse de la présente acceptables du point de vue pharmaceutique. invention comprend les composés de formule:

R1 -NH-CH-

,//

TA

0

dans laquelle R1 est un groupe de formule:

-c

~ck2 c—cHa: C-OM

ii

0

-M"

Ï-(CH 3)nCCŒ

CHoMR1

ch2co-

ou

CKpHrIR1

-CH2C0-

ou

Il Ji

CHpNHR

CHa-CO-

où R est un atome d'hydrogène, un groupe hydroxy ou méthoxy ; R' est un atome d'hydrogène ou un groupe méthyle ; n est égal à 1 ou 2 et M est un groupe de formule:

CH3 O C2Hs O I II I 11

-CH-O-C-R6, -CH-C-R6,

25

R5

o alkyle aralkyle ou -CH-X2-C-OR7

dans laquelle R5 est un atome d'hydrogène, un groupe méthyle ou éthyle ; X2 représente -O- ou -NH-; R6 est un groupe basi-30 que tel qu'un groupe alkyle ou aralkyle portant un radical NH2 substitué ou non substitué, par exemple un groupe alkyle-NHCH3, aralkyle-NHCH3,

' T"®

-CHgNHgOu-CH-CHg nh„

R7 est un groupe alkyle tel que méthyle, éthyle, propyle, isopro-pyle, butyle, isobutyle, pentyle ou 2-éthylhexyle; un groupe cy-cloalkyle tel que cyclopropyle, cyclobutyle, cyclopentyle, cyclo-hexyle ou cycloheptyle; un groupe aryle tel que phényle ou naphtyle; un groupe aralkyle tel que benzyle ou naphtylmé-thyle ; ou un groupe hétérocyclique, les groupes alkyle, cyclo-alkyle, aryle, aralkyle et hétérocycliques pouvant porter un ou plusieurs substituants choisis entre des groupes amino, des groupes amino substitués tels que méthylamino, diéthylamino

45 ou des groupes acétamido, des halogènes tels que le fluor, le chlore ou le brome, des groupes nitro, des groupes alkoxy tels que méthoxy, éthoxy, propyloxy, isopropyloxy, butoxy ou iso-butoxy ; ces composés existant également sous la forme de sels 50 non toxiques acceptables du point de vue pharmaceutique.

Avec les composés obtenus selon l'invention on peut formuler une composition pharmaceutique contenant une quantité efficace du point de vue antibactérien d'un composé de formule:

R1- ÏÎH-CH-CH CH Y ^

C—N C—CHpS-J^ vN-^/N-fCHg^COOH

o c\

C-OM

n

0

dans laquelle R1 est un groupe de formule:

7

627184

nyïHR1

R"\ ^CE2C°-

ou

C.CH2NHR' l 0h2c0-

ou a

ch2nhr*

ch2co-

où R est un atome d'hydrogène ou un radical hydroxy ou méthoxy ; R' est un atome d'hydrogène ou un radical méthyle ; n est égal à 1 ou 2 et M est un atome d'hydrogène, un groupe pivaloyloxyméthyle, acétoxyméthyle, méthoxyméthyle, acéto-•nyle, phénacyle, p-nitrobenzyle, ß,ß,ß-trichIorethyIe, 3-phta-lidyle ou 5-indanyle, de préférence un atome d'hydrogène ou un sel non toxique acceptable du point de vue pharmaceutique de ce composé.

r^-nh -ch-ch ch ! I | 2 c—n c—ch^s

0 \

c-om

II

0

(dans laquelle R1 est un groupe de formule:

Les composés obtenus selon l'invention permettent le traitement d'infections bactériennes, traitement qui consiste à administrer par injection à un animal à sang chaud ou un être humain 10 atteint d'une infection, une dose efficace mais non toxique de 250 à 1000 mg d'un composé de formule:

,N^^n-(ch2)nc0°h

:h2nhr'

ch,c0-

ou l!l—ch2c0-

ou

U-

CH^NHR

ch2co-

où R est un atome d'hydrogène ou un radical hydroxy ou méthoxy ; R' est un atome d'hydrogène ou un radical méthyle; n est égal à 1 ou 2 et M est un atome d'hydrogène ou un groupe pivaloyloxyméthyle, acétoxyméthyle, méthoxyméthyle, acéto-nyle, phénacyle, p-nitrobenzyle, ß,ß,ß-trichlorethyle, 3-phta-

lidyle ou 5-indanyle) ou un sel non toxique acceptable du point de vue pharmaceutique de ce composé.

Des infections à Shig. dvsenteriae peuvent être combattues 40 par administration à un mammifère atteint d'une telle infection d'une quantité efficace pour le traitement de cette infection d'une composition renfermant un composé de formule:

(ch2)nc0°h

(dans laquelle R1 est un groupe de formule:

O

chpco-

ou ch3CO-

OU

ch2nhr*

,co-

où R est un atome d'hydrogène ou un radical hydroxy ou méthoxy; R' est un atome d'hydrogène ou un groupe méthyle; n est égal à 1 ou 2 et M est un atome d'hydrogène, un groupe pivaloyloxyméthyle, acétoxyméthyle, méthoxyméthyle, acéto-

65 nyle, phénacyle, p-nitrobenzyle, ß,ß,ß-trichlorethyIe, 3-phta-lidyle ou 5-indanyle, de préférence un atome d'hydrogène) ou un sel non toxique acceptable du point de vue pharmaceutique de ce composé.

627184 8

Les composés de l'invention permettent également de com- efficace pour le traitement d'une telle infection, d'une composi-

battre des infections à B. anthracis par administration à un tion renfermant un composé de formule:

mammifère atteint d'une infection à B. anthracis d'une quantité,

i h1 - ìth-ch-ch ch2

c—n ^ c~ch2s

0 C\

c-om

II

0

« -(ch^ )ncooh

(dans laquelle R1 est un groupe de formule:

^H2NHR'

ch3co-

ou

CH^WR ' chaco-

ou

CH^THH

ch2co-

où R est un atome d'hydrogène ou un radical hydroxy ou mé- 25 lidyle ou 5-indanyle, de préférence l'hydrogène) ou un sel non thoxy ; R' est un atome d'hydrogène ou un radical méthyle ; n est toxique acceptable du point de vue pharmaceutique de ce com-

égal à 1 ou 2 et M est un atome d'hydrogène ou un radical pivaloyloxyméthyle, acétoxyméthyle, méthoxyméthyle, acéto-nyle, phénacyle, p-nitrobenzyle, ß,ß,ß-trichIorethyle, 3-phta-

30

pose.

La présente invention concerne le procédé de production des agents antibactériens de formule:

v

,n-(chs)nc0c:-i

(I)

cocr comme défini dans la revendication 1.

r1 -nh-ch-

i-

^S\

■ch ch2

O

I!

s

■n x-ch-o-c-chs

) * (HI)

cooh

(dans laquelle R1 est un groupe acyle) (y compris la céphalospo-rine C elle-même) avec un composé de formule:

H S-

N

■N

f (IV)

n-(ch3)nc00h

0

Les sels des composés obtenus selon l'invention comprennent les sels d'acides carboxyliques non toxiques de ces composés, parmi lesquels on mentionne les sels métalliques non toxiques tels que les sels de sodium, potassium, calcium et aluminium, le sel, d'ammonium et les sels d'ammonium substitué

tels que les sels d'aminés non toxiques comme les trialkylamines comprenant la triéthylamine, la procaïne, la dibenzylamine, la N-benzyl-bêta-phénéthylamine, la 1-éphénamine, la N,N'-di-benzyléthylènediamine, la déhydroabiéthylamine, la N,N'-bis-45 déhydroabiéthyléthylènediamine, une N-(aIkyle inférieur)-pi-péridine telle que la N-éthylpipéridine ainsi que d'autres aminés qui ont été utilisées pour former des sels avec la benzylpénicil-line; et leurs sels d'addition d'acides non toxiques (c'est-à-dire les sels d'aminés) comprenant les sels d'addition d'acides miné-50 raux tels que les chlorhydrates, bromhydrates, iodhydrates, sulfates, sulfamates et phosphates et les sels d'addition d'acides orangiques tels que les maléates, acétates, citrates, Oxalates, suc-cinates, benzoates, tartrates, fumarates, malates, mandélates, ascorbates, etc.

55 Le groupe amino dans les composés (utilisés comme intermédiaires ou comme précurseurs métaboliques) peut être «protégé» par des substituants tels que des groupes 2-iodéthoxycar-bonyle (brevet britannique N° 1 349 673), tertio-butoxycarbo-nyle, carbobenzyloxy, formyle, o-nitrophénylsulfényle, 60 ß,ß,ß-trichlorethoxycarbonyle, 4-oxo-2-pentényle-2,

l-carbométhoxy-l-propényle-2, etc. On compte notamment parmi ces groupes protecteurs les cétones (notamment l'acétone) et des aldéhydes (notamment le formaldéhyde et l'acétal-déhyde) décrits, par exemple, dans les brevets des Etats-Unis 65 d'Amérique N° 3 198 804 et N° 3 347 851, et les ß-cötoesters et P-dicétones décrits, par exemple, dans le brevet des Etats-Unis d'Amérique N° 3 325 479 et les ß-cötoamides décrits dans le brevet Japonais N° 71/24 714 (Farmdoc 47321S).

9

627 184

Les esters préférés des céphalosporines de la présente invention sont les esters de pivaloyloxyméthyle, d'acétoxymé-thyle, de méthoxyméthyle, d'acétonyle et de phénacyle. Tous sont des composés intermédiaires intéressants à utiliser dans la production de la céphalosporine à groupe carboxyle libre.

Comme indiqué ci-dessus, ces cinq esters d'acide 7-amino-céphalosporanique sont préparés chacun par des procédés connus. Un procédé excellent est celui qui a été décrit dans le brevet des Etats-Unis d'Amérique N° 3 284 451, dans lequel le sel de sodium de la céphalothine est estérifié par réaction avec le composé chloré ou bromé correspondant (par exemple le bromure de phénacyle, la chloracétone, l'éther chlorométhylique, le chlorure de pivaloyloxyméthyle [également appelé pivalate de chlo-rométhyle], le chlorure d'acétoxyméthyle), puis la chaîne latérale d'acide thiénylacétique est éliminée par voie enzymatique comme décrit dans ce même brevet ou par voie chimique comme décrit dans le brevet des Etats-Unis d'Amérique N° 3 575 970 et dans la revue intitulée «Journal of Antibiotics», XXIV (11), 767-773 (1971). Dans un autre procédé convenable, on fait réagir directement le sel de triéthylamine de l'acide 7-aminocéphalosporanique avec le composé porteur d'un halogène actif, comme décrit dans le brevet britannique N° 1 229 453.

Ces esters d'acide 7-aminocéphalosporanique sont ensuite amenés à réagir avec le nucléophile HSR3 de la manière indiquée dans le présent mémoire pour l'acide 7-aminocéphalosporanique lui-même. L'ester 3-thiolé de l'acide 7-aminocéphalosporanique est ensuite combiné avec l'acide carboxylique organique R'-OH, comme ci-dessus. Avant ou après l'élimination de tout groupe protecteur porté, par exemple, par un groupe amino de la chaîne latérale en position 7, l'ester de la céphalosporine ainsi obtenue est transformé, dans la mesure où il n'est pas utilisé sous cette forme, en acide libre correspondant, y compris son zwitterion (et, le cas échéant, un sel quelconque) par élimination du groupe estérifiant, par exemple par hydrolyse aqueuse ou enzymatique (comme dans le cas du sérum humain ou du sérum d'un animal) ou par hydrolyse acide ou alcaline ou par traitement au thiophénoxyde de sodium, comme décrit dans le brevet des Etats-Unis d'Amérique N° 3 284 451 ou, dans la série des pénicillines, par Sheehan et collaborateurs dans « J. Org. Chem. 29(7), 2006-2008 (1964).

Dans une autre variante de synthèse, l'acide 7-aminocéphalosporanique thiolé en position 3 est préparé comme décrit dans le présent mémoire puis acylé sur le groupe amino en position 7 et finalement estérifié, par exemple par réaction de l'alcool correspondant avec le chlorure d'acide préparé, par exemple, par réaction de la céphalosporine finale avec le chlorure de thionyle ou par d'autres opérations d'estérification en milieu essentiellement acide.

Dans le traitement d'infections bactériennes chez l'homme, les composés de l'invention peuvent être administrés par voie parentérale en quantité d'environ 5 à 200 mg/kg/jour et de préférence d'environ 5 à 20 mg/kg/jour en plusieurs prises, par exemple 3 à 4 fois par jour. On les administre sous la forme d'unités posologiques contenant, par exemple, 125, 250 ou 500 mg d'ingrédient actif, avec des véhicules ou excipients convenables acceptables du point de vue physiologique. Les unités posologiques peuvent être sous la forme de préparations liquides telles que solutions ou suspension.

Les autres corps réactionnels utilisés pour préparer les composés de la présente invention peuvent être obtenus par voie de synthèse, soit de la manière décrite dans la pratique (par exemple comme décrit dans les brevets et dans les publications précités), soit par des opérations strictement analogues. Toutefois, par commodité et à des fins d'illustration, on indique ci-après quelques-unes de ces synthèses particulières, par exemple pour préparer des acides carboxyliques renfermant un groupe amino libre qui est «protégé» par un groupe tertiobutoxycarbonyle.

acide 2-(tertio-butoxycarbonylaminométhyl)-l,4-cyclohexadi-énylacétique

On dilue lentement avec 500 ml de tertio-butanol anhydre une solution de 16,5 g (0,1 mole) d'acide o-aminométhylphé-5 nylacétique dans 1,5 litre d'ammoniac liquide (que l'on a traité avec 50 mg de lithium pour éliminer les traces d'humidité). On ajoute à la solution par petites portions, 3,4 g (0,5 atome-gramme) de lithium en période de 4 heures et on agite le mélange pendant 16 heures à la température ambiante en éliminant îc l'ammoniac liquide dans une hotte et finalement on l'évaporé à sec au-dessous de 40 °C. On dissout le résidu dans 500 ml d'eau et on Chromatographie la solution sur une colonne de résine «IR-120» (forme H+, 700 ml) et on l'élue avec une solution à 1 % d'ammoniaque. Les fractions de l'éluat qui donnent une ij réaction positive dans l'essai à la ninhydrine sont rassemblées et évaporées à sec. Le résidu est lavé avec quatre portions de 50 ml d'acétone chaude et recristallisé dans 500 ml de mélange à 1:1 d'éthanol et d'eau en donnant 11,2 g (67 %) d'aiguilles incolores d'acide o-(2-aminométhyl-l,4-cyclohexadiényl)acétique fon-2odantà 183 °C.

Spectre infrarouge:' v 1630,1520,1380,1356e111"1.

Résonance magnétique nucléaire: ôD20 + K2C03

25

2,72 (4H, singulet, H2C<^) , 3,01 (2H, singulet,

ÇHzCO), 3,20 (2H, singulet, CH2-N), 5,78 (2H, singulet, H^>C =).

30

C% H% N% 64,65 7,84 8,38 64,77 8,06 8,44

35 Procédé perfectionné de préparation d'acide a-(2-aminomé-thyl-l,4-cyclohexadiényl)acétique

Analyse:

Calculé pour C9H13N02 : Trouvé:

Li, tert.-BuOH

*

NH, -TEA • HCl

(/ \—CH2C02H LiCl + (C2H5)5N

On adapte le procédé de l'exemple 1 du brevet des Etats-55 Unis d'Amérique N° 3 720 665 à la préparation de l'acide D-2-amino-2-(l,4-cyclohexadiényl)acétique. Une solution de 830 ml d'ammoniac liquide distillé est déshydratée avec 40 mg de lithium sous atmosphère d'argon. On ajoute à cette solution sous agitation, 11,0 g (0,07 mole) d'acide 2-aminométhylphé-60 nyl-acétique et 340 ml de tertio-butanol. On ajoute une quantité totale de 1,6 g (0,225 mole) de lithium à la solution sous agitation énergie en une période de 2 heures. Le mélange de couleur grise est ensuite traité avec 35 g (0,215 mole) de chlorhydrate de triéthylamine (TEA) et agité pendant environ 18 65 heures à la température ambiante. Le tertio-butanol est chassé à 40 ° (15 mm) en laissant un résidu blanc qui est séché sous vide sur du pentoxyde de phosphore pendant environ 18 heures. La substance solide est dissoute dans 30 ml de mélange à 1:1 de

627 184

10

méthanol et d'eau et la solution est ajoutée sous agitation à 3,5 litres de mélange à 1:1 de chloroforme et d'acétone à 5 °C. Le mélange est agité pendant 20 minutes et l'amino-acide, à savoir l'acide a-(2-aminométhyl-l,4-cyclohexadiényl)acétique, est recueilli et séché pendant 16 heures sous vide sur du pentoxyde de phosphore en donnant 6,3 g (58%) de cristaux blancs fondant à 190 ° en se décomposant. Le spectre infrarouge et le spectre de résonance magnétique nucléaire concordent avec la formule.

On ajoute une solution de 19,31 g (0,135 mole) de tertio-butoxycarbonylazide dans 152 ml de tétrahydrofuranne (THF) à une solution sous agitation de 14,89 g (0,09 mole) d'acide 2-aminométhyl-l,4-cyclohexadiényl)acétique et de 7,20 g (0,18 mole) d'hydroxyde de sodium dans 281 ml d'eau. On agite la solution pendant 18 heures à 25 °, puis on la filtre sur de la terre de diatomées («Super-cel»). On chasse le tétrahydrofuranne à 40 ° (15 mm) et on lave la solution résiduelle avec deux fois 175 ml d'éther puis on l'acidifie à l'acide chlorhydrique 6N. On agite le mélange au bain de glace et on recueille le précipité puis on le laisse pendant 18 heures sous vide sur du pentoxyde de phosphore à 25 ° pour obtenir 17,3 g (72,6%) d'acide 2-(tertio-butoxycarbonylaminométhyl)-l,4-cyclohexadiénylacétiquesous la forme d'une poudre blanche. Le spectre infrarouge et le spectre de résonance magnétique nucléaire concordent avec la formule.

Préparation de l'acide 3-aminométhyl-2-thiophène-acétique

CH2-NH2

puis on l'extrait correctement à l'éther (deux fois 200 ml). On rassemble les phases d'extraction à l'éther, on les déshydrate sur du sulfate de magnésium et on les concentre. On distille le résidu sous pression réduite et on recueille l'huile jaune pâle à 100-5125 °C sous un vide de 0,7 mm de mercure. Rendement 277 g (56%).

Spectre infrarouge: vjj^ 3110,1660,1100 cm"1, io Résonance magnétique nucléaire: ò PFjm 3,40 (6H,

singulet, OCH3), 5,86 (1H, singulet, CH<^ J , 7,

27

n

S CH2-C02H

A) Diméthylacétal du thiophène-3-carboxaldéhyde (2a)

On fait refluer pendant 4 heures, un mélange de 322 g (2,9 moles) de thiophène-3-carboxaldéhyde (S. Gronowitz, «Arkev. kemi.», 8,411 (1955), 636 g (6 moles) de triméthoxyméthane et 6 g de résine «IR-120» (H+) dans 200 ml de méthanol. On sépare la résine et on évapore le filtrat sous pression réduite pour obtenir une huile incolore que l'on distille sous pression réduite.

Rendement 423 g (94%); Eb. 90-95 °C, 13 mm de mercure.

Spectre infrarouge: v j^x 3150,1045,1025 cm"1

Résonance magnétique nucléaire: ô 3,21 (6H,

O—

singulet, OCH3), 5,43 (1H, singulet, CH<^^ Y

^-O-'

7,0-7,4 (3H, multiplet, thiophène-H) ; s.d. = sans dilution

B)Diméthylacétal du 2-formylthiophène-3-carboxaldéhyde (3a)

On ajoute goutte à goutte en 1 heure, à une solution sous agitation de 423 g (2,68 moles) du composé 2a dans 1 litre d'éther anhydre, une solution fraîchement préparée de 27 moles de n-butyl-lithium dans l'éther en maintenant un reflux modéré, sous atmosphère d'azote. En poursuivant le reflux pendant 0,5 heure, on ajoute goutte à goutte au mélange en 0,75 heure sous agitation énergique, une solution de 432 g (6 moles) de dimé-thylformamide dans 0,8 litre d'éther anhydre. Lorsque l'additon est terminée, on agite le mélange pendant environ 18 heures, on le verse sur 1 kg de glace pilée sans interrompre l'agitation et on le laisse revenir à la température ambiante. On sépare la phase organique et on sature la phase aqueuse de chlorure de sodium,

*0-'

15 (IH, doublet, J=6Hz, thiophène-HP), 7,81 (1H, doublet de doublets, J= 1,5 et6Hz, thiophène-Ha), 10,34 (1H, doublet, J= 1,5 Hz, -CHO).

C) 1 -méthylsulfinyl-1 -méthylthio-2-(3-carboxaldé-hyde-éthylè-20 neacétal-2-thiényl)éthylène (4b)

On effectue la préparation du composé 4b en suivant un mode opératoire semblable à celui qui a été décrit par K. Ogura et collaborateus4). On ajoute du «Triton B» (à 40% dans le méthanol, 2 ml dans 5 ml de tétrahydrofuranne) à une solution 25 de sulfoxyde de méthyl-méthylthiométhyle2) (2,5 g, 20 milli-moles) et d'éthylèneacétal de 2-formyl-3-thiophène-carboxal-déhyde3) (3b). On fait refluer le mélange pendant environ 1 heure et on le concentre sous pression réduite. On dissout le résidu dans 150 ml de benzène et on extrait la solution avec trois 30 fois 20 ml d'eau. On déshydrate la phase organique sur du sulfate de magnésium et on l'évaporé à sec sous pression réduite. On Chromatographie le résidu sur une colonne de gel de silice (80 g) en effectuant successivement l'élution avec 500 ml de benzène et 500 ml de chloroforme. On isole de l'éluat chlorofor-35 mique 4,9 g (85 %) du produit 4b sous la forme d'une huile jaune pâle.

Spectre infrarouge: ,v|j^x 3110,1600 cm"1.

Résonance magnétique nucléaire: ?P?'3 2,42 (3H, singu-

40 ""

let, S-CH3), 2,78 (3H, singulet, SO-CH3), 4,15 (4H, multiplet,

CH2CH2-), 6,12 (1H, singulet, CH<^ Y 7,34 (1H, doublet,

O-'

45 J=4,5 Hz, thiophène-Hg), 7,40 (1H, doublet, J = 4,5 Hz, thiophène-Ha), 8,28 (1H, singulet, -CH=).

La semicarbazone du composé 4, est préparée de la manière usuelle et cristallisée dans un mélange d'éthanol et de diméthyl-formamide. Point de fusion 212—213 °C.

50

Analyse: C% H% N% S%

Calculé pour C10H13N3O2S2: 39,58 4,32 13,85 31,70 Trouvé: 39,46 4,24 14,05 31,63

55

2) K. Ogura et collaborateurs, «Bull. Chem. Soc.» (Japon),«, 2203 (1972)

3) D. W. McDowell et collaborateurs, «J. Org. Chem.»,31, 3592 (1966)

60 4) K. Ogura et collaborateurs, «Tetrahedron Letters», 1383 (1972).

D) l-méthylsulfinyl-l-méthylthio-2-(3-carboxaldéhydedimé-thylacétal-2-thiényl)éthylène (4a)

65 On prépare le composé 4a en suivant un mode opératoire semblable à celui que l'on utilise pour le composé 4b. On ajoute du «Triton B» (50 ml, à 40% dans le méthanol) à une solution de méthylthiométhylsulfoxyde de méthyle (72 g, 0,58 mole) et

11

627 184

de 108 g (0,58 mole) du composé 3a dans 300 ml de tétrahydrofuranne et on fait refluer le mélange pendant 4 heures. Une séparation par Chromatographie sur colonne de gel de silice (400 g), en effectuant l'élution avec 5 litres de chloroforme, donne 130,5 g (78%) du composé 4a sous la forme d'une huile de couleur jaune pâle.

Spectre infrarouge: v|j^x 3100,1580,1100,1050 cm- '. Résonance magnétique nucléaire: ò p CI4 2,42 (3H, singulet, S-CH3), 2,70 (3H, singulets, SO-CH3), 3,34 (6H, singulet,

OCH3), 5,56 (1H, singulet, CH'

O

) ,7,20(1H,

doublet,

J=6Hz, thiophène-HP), 7,40 (1H, doublet, J=6Hz, thio-phène-Ha), 8,12 (1H, singulet, -CH=).

E) 3-formyl-2-thiénylacétate d'éthyle4) (5)

On fait absorber 33 g de gaz chlorhydrique anhydre dans 500 ml d'éthanol anhydre. On ajoute à cette solution 130 g (0,45 mole) du composé 4a et on chauffe le mélange au reflux pendant 5 minutes. On dilue le mélange réactionnel avec de l'eau et on l'évaporé sous pression réduite. On extrait le résidu avec deux fois 100 ml de benzène et on rassemble les extraits benzéniques, on les lave avec 50 ml d'eau, on les déshydrate sur du sulfate de magnésium et on les évapore à sec. On Chromatographie le résidu huileux sur une colonne de gel de silice (400 g) en effectuant l'élution avec 5 litres de chloroforme. On rassemble les fractions contenant le produit désiré et on les concentre. On distille l'huile résiduelle (60 g) sous pression réduite et on obtient ainsi 23 g (23 %) de composé 5 bouillant à 120-126 °C/ 1 mm de mercure.

Spectre infrarouge: vj|^x 3110,1730,1670 cm"1.

Résonance magnétique nucléaire: ô p^p'3 1,30 (3H, tri-

plet, J=6Hz, -CH2CH3), 4,25 (2H, quadruplet, J=6Hz, -CH2CH3), 4,26 (2H, singulet, -CH2CO), 7,25 (1H, doublet, J=5Hz, thiophène-HP), 7,48 (1H, doublet, J=5Hz, thiophène-Ha), 10,15 (1H, singulet, CHO).

L'échantillon analytique du composé 5 est étudié sous la forme de la 2,4-dinitrophénylhydrazone qui est cristallisée dans le chloroforme. Point de fusion 178-179 °C.

Spectre infrarouge: v '

1720,1610,1570 cnT

Analyse: C% H% N% S%

Calculé pour C15H14N406S: 47,62 3,73 14,81 8,47 Trouvé: 47,33 3,47 14,77 8,68

En suivant un mode opératoire similaire, on traite 2,2 g (7,6 millimoles) de l'éthylène-acétal 4b avec 1,1 g de gaz chlorhydrique anhydre dans 800 ml d'éthanol anhydre pour obtenir le composé 5 que l'on purifie par Chromatographie sur colonne de 30 g de gel de silice. On obtient par élution au chloroforme 663 mg (44%) du composé 5 sous la forme d'une huile de couleur jaune pâle.

F) Oxime de 3-formyl-2-thiénylacétate d'éthyle (6)

On ajoute 1,7 g (16 millimoles) de carbonate de sodium à une solution de l'aldéhyde 5 (3,14 g, 16 millimoles) et de 2,2 g (32 millimoles) de chlorhydrate d'hydroxylamine dans 40 ml d'éthanol aqueux à 50%, à 5 °C en agitant. On laisse le mélange réactionnel se réchauffer à la température ambiante. Au bout de 2,5 heures, on concentre ce mélange sous pression réduite. On extrait le résidu avec trois fois 50 ml de benzène. On lave les extraits benzéniques avec 10 ml d'eau, on les déshydrate sur du sulfate de magnésium et on les évapore sous pression réduite. Une séparation par Chromatographie sur colonne de 60 g de gel de silice donne 2,7 g (80%) du composé 6 sous la forme d'une 5 huile incolore.

Spectre infrarouge: v J|^x 3400,1730,1620 cm"1.

Résonance magnétique nucléaire: ô ppf^one"^6 1 =23 (3H,

1C triplet, J=7,5Hz, -CH2CH3), 4,01 (2H, singulet, -CH2CO), 4,14 (2H, quadruplet, J=7,5Hz, -CH2CH3), 7,31 (2H, singulet, thiophène-H), 8,26 (1H, singulet, -CH=N), 10,15 (1H, singulet, NOH, disparaît par addition de D20).

G) ô-lactame de l'acide 3-aminométhyl-2-thiènyl-acétique (7) Procédé A: réduction catalytique On hydrogène pendant environ 18 heures un mélange de 2,65 g (12,4 millimoles) de l'oxime 6, de palladium à 10% fixé sur du charbon et de gaz chlorhydrique anhydre (1,4 g, 37,2 millimoles) dans 68 ml d'éthanol anhydre, à la pression atmosphérique et à la température ambiante. On remplace le catalyseur deux fois et on conduit la réaction pendant une période de 3 jours. On enlève le catalyseur et on concentre le filtrat sous pression réduite. On ajoute au résidu 10 ml d'eau et on lave le mélange avec deux fois 10 ml d'acétate d'éthyle. On ajuste le pH de la phase aqueuse à 9 par addition de carbonate de sodium, on la sature de chlorure de sodium et on l'extrait avec trois fois 20 ml d'acétate d'éthyle. Les phases d'extraction à l'acétate d'éthyle sont déshydratées sur du sulfate de magnésium, traitées au charbon de bois et évaporées sous pression réduite. Par recristallisation dans l'acétate d'éthyle, on obtient 417 mg (22%) d'aiguilles incolores du composé 7 fondant à 194-195 °C.

20

25

35

Spectre infrarouge: v ®|®x 3200,1650,1480 cm 1n

Résonance magnétique nucléaire: ô "^6 3,53 (2H,

triplet, J=3Hz, -CH2CO-), 4,36 (2H, doublet-triplet, J=3 et 1,5Hz, se transforme en un triplet par addition de D20, J=3Hz, CH2N), 6,95 (1H, doublet, J=4,5Hz, thiophène-HP), 7,45 (1H, doublet, J=4,5Hz, thiophène-Ha), 8,0 (1H, multiplet, disparaît par addition de D20, NH).

45

Analyse: C% H% N% S%

Calculé pour CjHyNOS: 54,88 4,61 9,14 20,93

Trouvé: 55,04 4,45 9,13 20,50

Méthode B: réduction au zinc en poudre s» On ajoute par portions en 1 heure à 40-50 °C en agitant énergiquement, 17 g (258 milli-atomes-grammes) de zinc en poudre à une solution de 18,3 g (86 millimoles) de l'oxime 6 dans 200 ml d'acide acétique. On agite le mélange réactionnel pendant environ 18 heures à la température ambiante et on le 55 chauffe à 60 °C pendant 4 heures. On filtre le contenu du réacteur et on concentre le filtrat sous pression réduite. On ajoute 100 ml d'eau à l'huile résiduelle et on lave le mélange avec deux fois 50 ml d'éther. On dépose surla solution aqueuse 100 ml d'acétate d'éthyle et on ajuste le pH à 10 par addition de carbo-60 nate de sodium. On sépare le précipité par filtration. On extrait le filtrat à l'acétate d'éthyle. On lave les phases d'extraction à l'acétate d'éthyle avec 10 ml d'eau, on les déshydrate sur du sulfate de magnésium et on les évapore sous pression réduite. On triture le résidu solide avec du benzène. Par cristallisation 65 dans l'acétate d'éthyle, on obtient 2,7 g (21 %) du lactame 7 qui est identique au composé du procédé A en ce qui concerne le spectre infrarouge et le spectre de résonance magnétique nucléaire.

627 184

12

H) Acide 3-aminométhyl-2-thiénylacétique (8)

On chauffe au reflux pendant 3 heures un mélange de 2,88 g (18,8 millimoles) du lactame 7 et de 50 ml d'acide chlorhydrique 6N. On concentre le mélange réactionnel sous pression réduite. On ajoute au résidu 20 ml d'eau et on traite le mélange avec du charbon puis on l'évaporé sous pression réduite. Par trituration du résidu avec du tétrahydrofuranne, on obtient le chlorhydrate de l'amino-acide 8 (3,72 g, 95 % ; point de fusion 171—172 °C; spectre infrarouge (Kbr), cm-1: 3450,3000, 1700,1200 ; spectre de résonance magnétique nucléaire dans D20, ppm: 4,80 (2H, singulet, -CH2CO), 4,27 (2H, singulet, CH2-N), 7,26 (1H, doublet, J=6Hz, thiophène-Hp), 7,53 (1H, doublet, J=6Hz, thiophène-Ha)). On dissout le chlorhydrate (3,71 g; 17,9 millimoles) dans 10 ml d'eau, on Chromatographie la solution sur une colonne de «IR-120» (H+, 30 ml) et on effectue l'élution avec, successivement, 100 ml d'eau et 2 litres d'ammoniaque 5N. L'éluat ammoniacal est évaporé à sec. Le résidu est cirstallisé dans de l'acétone aqueuse en donnant 3,0 g (98%) du composé 8 fondant à 223-225 °C.

Spectre infrarouge: v

3000,1620,1520 cm-

Résonance magnétique nucléaire: ô Na2C03 3^0

(2H, singulet, -CH2CO), 4,13 (2H, singulet, CH2N), 7,04 (1H, doublet, J=6Hz, thiophène-Hp), 7,30 (1H, doublet, J=6Hz, thiophène-Ha).

I) Acide 3-tertio-butoxycarbonylaminométhyl-2-thiénylacétique (9)

On ajoute goutte à goutte 5,7 g (40 millimoles) de tertio-butoxycarbonylazide en 20 minutes à 0 °C en agitant énergique-5 ment à un mélange de 3,1 g (18 millimoles) d'acide 3-aminomé-thyl-2-thiénylacétique 8 et de 8 g (80 millimoles) de triéthylamine dans 80 ml d'acétone aqueuse à 50%. On agite le mélange réactionnel pendant environ 18 heures à la température ambiante et on le concentre sous pression réduite. On lave le 10 concentré avec deux fois 20 ml d'éther, on ajuste son pH à 2 par addition d'acide chlorhydrique concentré et on l'extrait avec deux fois 50 ml d'acétate d'éthyle. Les phases d'extraction à l'acétate d'éthyle sont lavées avec une solution aqueuse saturée de chlorure de sodium, déshydratées sur du sulfate de magné-15 sium, traitées avec du charbon de bois et évaporées sous pression réduite. Le résidu est trituré dans le n-hexane et cristallisé dans un mélange de n-hexane et de benzène en donnant 4,5 g (92%) d'aiguilles incolores du composé 9 fondant à 62-63 °C.

20

Spectre infrarouge: v

3350,1700 cm-

Résonance magnétique nucléaire: Ô j^P3 1,43 (9H, singulet, BOC-H), 3,27 (2H, singulet, CH2CO), 4,16 (2H, dou-25 blet, J=6Hz, CH2-N, singulet lorsqu'on ajoute D2Ò), 5,00 (1H, large, -NH-, disparaît par addition de D20), 6,30 (1H, large singulet, -COOH, disparaît par addition de D20), 6,86 (1H, doublet, J=6Hz, thiophène-HP), 7,06 (1H, doublet, J=6Hz, thiophène-Ha).

30

Analyse:

Calculé pour CjHçNO^: Trouvé:

C% H% 49,10 5,30 48,53 5,22

N% 8,18 7,98

S%

18,73

18,97

Analyse: C% H% N% S%

Calculé pour C12H17N04S: 52,89 6,29 5,14 11,77 Trouvé: 53,30 6,39 5,13 11,72

35 Préparation des acides 2-N-méthylaminométhyl-4-méthoxy-(et 4-hydroxy)-phénylacétiques ch2nh2 ch2c02h

Ts-Cl

HgNH-Ts h2co2h

CtUI

c h,

I 3

CHpN-Ts ch2co2h

Na/NH., Liq. H^CO r >

chgnh-ch^ ch2co2h ka.

\y

HBr

HO-i

CH^NH-CHj ch2c02h

4b

13

627 184

Acide 2-N-tosylaminométhyl-4-hydroxyphénylacétique (2)

On ajoute goutte à goutte en agitant à 65-70 °C une solution de 18,5 g (0,097 mole) de chlorure de p-toluène-sulfonyle dans 50 ml d'éther anhydre à une solution de 14,56 g (0,08 mole) d'acide 2-aminométhyl-4-hydroxyphénylacétique (1) (brevet des Etats-Unis d'Amérique N° 3 823 141) et de 13 g (0,32 mole) d'hydroxyde de sodium dans 200 ml d'eau et on maintient le mélange à la même température pendant 1 heure. Après refroidissement du mélange, on sépare la phase aqueuse, on la lave avec deux fois 50 ml d'éther, on l'acidifie à l'acide chlorhydrique 6N et on l'extrait avec 400 ml d'acétate d'éthyle. On lave l'extrait avec de l'eau et avec une solution aqueuse saturée de chlorure de sodium, on le déshydrate sur du sulfate de sodium et on le traite avec 1 g de carbone actif. On concentre le filtrat à sec et on fait cristalliser le résidu dans de l'acétate d'éthyle, ce qui donne 11,0 g (40,5 %) de composé 2 fondant à 212-215 °C.

Spectre infrarouge:v 3240,1700,1380,1330,1150 cm-1.

Spectre ultraviolet: X ]^P3 al %230 nm (e: 7750)

Résonance magnétique nucléaire: ô 2,47 (3H,

singulet, Ar-CH3), 3,60 (2H, singulet, CH2CO), 3,93 (2H, doublet, J=6,0 Hz, CH2N), 6,6—8,2 (7H, multiplet, H de phényle).

Acide 2-(N-méthyl-N-tosylamino)méthyl-4-méthoxy-phénylacé-tique (3)

On chauffe un mélange de 11 g (0,033 mole) de composé 2, 10,3 ml (0,17 mole) d'iodure de méthyle et 9,2 g (0,24 mole) d'hydroxyde de sodium dans 100 ml d'eau à 80-90 °C pendant 45 minutes dans un tube bouché, en agitant de temps en temps par secousses. On lave le mélange avec 30 ml d'acétate d'éthyle et on acidifie la phase aqueuse avec de l'acide chlorhydrique 6N puis on l'extrait avec trois fois 30 ml d'acétate d'éthyle. Les extraits rassemblés sont lavés avec 30 ml d'eau et 30 ml de solution aqueuse saturée de chlorure de sodium, traités avec 1 g de carbone actif et déshydratés sur du sulfate de sodium. Le filtrat est évaporé à sec et le résidu est cristallisé dans du benzène en donnant 8 g (66,5 %) du dérivé N.O-diméthylique 3 fondant à 146-150 °C.

Spectre infrarouge: v 1690,1500,1340,1280,1150 cm-1.

Spectre ultraviolet: 229 nm (e: 20500), 278 nm

(e: 2400). maX'

Résonance magnétique nucléaire: ô 2,52 (3H,

singulet, N-CH3), 2,47 (3H, singulet, Ar-CH3), 3,67 (2H, singulet, CH2CO), 3,74 (3H, singulet, OCH3), 4,10 (2H, singulet, CH2N), 6,7-7,8 (7H, multiplet, Ar-H), 11,5 (1H, large singulet, COOH).

Analyse: C% H% N% S%

Calculé pour Ci8H21NOsS: 59,49 5,82 3,84 8,82 Trouvé: 59,48 5,68 3,37 9,22

Acide 2-N-méthylaminométhyl-4-méthoxyphénylacétique (4a) On ajoute 9,4 g (0,026 mole) de composé 3 à -50 °C à une solution de 300 ml d'ammoniac liquide et on agite le mélange jusqu'à ce qu'une solution limpide ait été obtenue à la même température. On ajote à la solution 3,3 g (0,14 atomegramme) de sodium en petits morceaux à -40 °C et on agite le mélange pendant 2 heures. On évapore l'ammoniac et on dissout soigneusement le résidu dans 100 ml d'eau. On ajoute à la solution 100 ml de « Amberlite IR-C 50» (type ammonium) et on agite le mélange pendant 30 minutes à la température ambiante. On enlève la résine et on traite le filtrat avec de l'acétate de baryum 5 jusqu'à ce qu'on n'observe plus de précipitation. On sépare le précipité par filtration et on Chromatographie le filtrat sur une colonne de résine d'échange ionique «IR-120» (forme H+, 100 ml) en effectuant l'élution avec de l'ammoniaque à 5-10%. L'é-luat (2 litres) contenant le produit désiré est évaporé à sec au-îodessous de 50 °C et le résidu est trituré avec de l'acétone en donnant 4,4 g (81 %) de composé 4a fondant à 225-227 °C.

Spectre infrarouge: v 1590,1380,1260,

. Ä 4 ili Cl /k *

1035 cm

Spectre de résonance magnétique nucléaire: ô

2,77 (3H, singulet, N-CH3), 3,6 (2H, singulet, CH2CO), 3,87 (3H, singulet, OCH3), 4,18 (2H, singulet, CH2N), 6,8-7,4 (3H, multiplet, H de phényle).

20

Acide 2-N-méthylaminométhyl-4-hydroxyphénylacétique (4b) On fait refluer un mélange de 2,9 g (0,014 mole) de composé 4a dans 30 ml d'acide bromhydrique à 48% pendant 5 heures et on évapore la solution à sec. On dissout le résidu dans 25 50 ml d'eau. On Chromatographie la solution sur une colonne de 50 ml de «Amberlite IR-120» (forme H+) en effectuant l'élution avec de l'ammoniaque à 5-10%. On recueille l'éluat en .fractions de 250 ml. Les fractions qui contiennent le produit sont rassemblées et évaporées à sec au-dessous de 50 °C. Le 30 résidu est trituré avec de l'acétone en donnant 1,3 g (48,5%) de composé 4b que l'on fait cristalliser dans de l'éthanol à 80%. Point de fusion 218—221 °C.

35 Spectre infrarouge: v 2000-3400,1610,1540, 1460,1380,1270 cm-1.

Spectre ultraviolet: X ** 1 % 243 nm (e: 4700),

297 nm (e: 1350).

40

Résonance magnétique nucléaire: ô +NaOH

2,64 (3H, singulet, N-CH3), 3,47 (2H, singulet, CH2CO), 3,94 (2H, singulet, N-CH2), 6,5-7,2 (3H, multiplet, H phénylique).

45

C % H % N % 61,53 6,71 7,17 61,44 6,81 7,20

Acide 2-N-tertio-butoxycarbonyl-N-méthylaminométhyl-4-méthoxyphénylacétique (5, R = CH3)

55 On agite à la température ambiante pendant 20 heures un mélange de 1,05 g (5 millimoles) de composé 4a, 1,43 g (6 millimoles) de 4,6-diméthylpyrimidin-2-ylthiolcarbonate de ter-tio-butyle et 1,4 ml de triéthylamin dans 40 ml de tétrahydrofuranne à 50%. La plus grande partie du tétrahydrofuranne est 60 évaporée et la solution aqueuse résultante (environ 20 ml) est lavée à l'éther. La phase d'éther est acidifiée avec de l'acide chlorhydrique 6N et extraite avec trois fois 10 ml d'éther. Les phases d'extraction à l'éther sont lavées avec 10 ml d'eau et 10 ml de solution aqueuse saturée de chlorure de sodium, traitées 65 avec une petite quantité de carbone actif et déshydratées sur du sulfate de sodium. Le filtrat est évaporé à sec en donnant 1,0 g (77,5 %) de composé 5 (R = méthyle) sous la forme d'une huile.

Analyse:

Calculé pour C10H13NO3: Trouvé:

627 184

14

Résonance magnétique nucléaire: ô j^P3 1.47 (9H,

singulet, BOC-H), 2,77 (3H, singulet, N-CH3), 3,60 (2H, singulet, CH2CO), 3,79 (3H, singulet, 0-CH3), 4,49 (2H, singulet, CH2N), 6,1-7,3 (3H, multiplet, H phénylique).

Acide 2-N-tertio-butoxycarbonyl-N-méthylamino-méthyl-4-hy-droxyphénylacétique (5, R = hydrogène)

On agite à la température ambiante pendant 20 heures un mélange de 1 g (4,78 millimoles) de composé 4b, 1,5 g (6,3 millimoles) de 4,6-diméthylpyrimidin-2-ylthiolcarbonate de ter-tio-butyle et 2,1 ml de triéthylamine dans 50 ml de solution aqueuse à 50% de tétrahydrofuranne. On concentre le mélange à 20 ml sous pression réduite. On lave le concentré avec 10 ml d'éther, on l'acidifie avec de l'acide chlorhydrique 6N et on l'extrait avec deux fois 100 ml d'acétate d'éthyle. Les extraits rassemblés sont lavés avec 30 ml d'eau et deux fois 30 ml de solution aqueuse saturée de chlorure de sodium, traités avec une petite quantité de carbone actif et déshydratés sur du sulfate anhydre de sodium. Le filtrat est évaporé à sec en donnant 1,3 g

5 (92 %) de composé 5 (R = hydrogène) sous la forme d'une huile.

Spectre infrarouge: vjjfjj3000-3600,1670,1260, 1150 cm"1.

10 Résonance magnétique nucléaire: ô 1>44 (9H,

singulet, C(CH3)3), 2,73 (3H, singulet, N-CH3), 3,54 (2H, singulet, CH2CO), 4,38 (2H, singulet, CH2N), 6,5-7,3 (3H, multiplet, H phénylique).

15 Préparation de l'acide ortho-N-méthylaminométhylphényl-acétique ch2nh2 ch2c02h ch2nhs02 chgcogh ch,i ?

ch-

CHgNSOg-^ //~CU-

ch2co2h ^'

hbr ou

Na/NH-, liq.

->

ch.

CH-

chgnh CHgCOgH

chgn-boc ch2co2h ch.,

I ^

boc : ch-.-c-0c0-~ 5 j ch..

P

15

627 184

Acide o-(p-toluènesulfonylaminométhyl)phénylacétique (2)

On ajoute 7,64 g (40 millimoles) de chlorure de p-toluène-sulfonyle par portions à 60 °C à une solution sous agitation de 7,50 g (37 millimoles) de chlorhydrate d'acide o-aminométhyl-phénylacétique et 4,74 g (118 millimoles) d'hydroxyde de sodium dans 100 ml d'eau. On agite le mélange pendant 1 heure à la même température et on l'acidifie à l'acide chlorhydrique. On extrait le mélange avec quatre fois 50 ml d'acétate d'éthyle. Les extraits rassemblés sont lavés à l'eau, traités avec une petite quantité de carbone et déshydratés. Le solvant est évaporé sous pression réduite et le résidu est cristallisé dans l'acétate d'éthyle en donnant le composé 2 sous la forme de prismes incolores. Rendement 9,84 g (84%) ; point de fusion 155-156 °C.

3300,1705,1335,

Spectre infrarouge: v j - _ Ä i iliu/v•

1170 cm-1.

Résonance magnétique nucléaire: ò ^^SO-d6 2,38 (3H,

singulet, CH3), 3,65 (2H, singulet, CH2CO), 3,97 (2H, doublet, J=5Hz, CH2N), 7,1-8,2 (9H, multiplet, H de phényle et NH).

Analyse:

C%

H %

N %

S%

Calculé pour C16Hi7N04S:

60,17

5,37

4,39

10,10

Trouvé:

60,11

5,43

4,28

9,72

60,15

5,40

4,30

9,80

Acide o-(N-p-toluènesulfonyl-N-méthylaminométhyl) -phényl-acétique (3)

Un mélange de composé 2 (9,0 g, 28 millimoles), de 6,0 g d'hydroxyde de sodium et de 6 ml d'iodure de méthyle dans 60 ml d'eau est chauffé pendant 30 minutes à 70 °C dans un tube fermé. Après refroidissement, on acidifie le mélange réactionnel par addition d'acide chlorhydrique pour séparer un précipité de couleur jaune pâle qu'on fait cristalliser dans un mélange d'acétate d'éthyle et de n-hexane, ce qui donne des prismes incolores du composé 3. Rendement 8,5 g (91 %) ; point de fusion 162-163 °C.

2700-2300,1700,1600,

Spectre infrarouge: v J®*

1345,1200,925 cm"1.

Résonance magnétique nucléaire: ô 2,37

(3H, singulet, CH3), 2,49 (3H, singulet, CH3), 3,80 (2H, singulet, CH2CO), 4,18 (2H, singulet, CH2N), 7,0-8,0 (8H, multiplet, H phénylique).

Analyse:

C%

H%

N%

S%

Calculé pour C17H19N02:

61,24

5,74

4,20

9,61

Trouvé:

61,31

5,73

4,51

9,63

61,36

5,71

4,29

9,55

Acide N-méthylaminométhylphénylacétique (4)

Procédé A (utilisant l'acide bromhydrique) — On fait refluer pendant 30 minutes un mélange de 28,6 g (0,086 mole) de composé 3 et 20 g (0,213 mole) de phénol dans 260 ml d'acide bromhydrique à 48%. On refroidit le mélange, on le dilue avec le même volume d'eau et on le lave avec deux fois 50 ml d'acétate d'éthyle. On évapore la phase aqueuse à sec sous pression réduite pour obtenir une huile que l'on Chromatographie sur une colonne de «Amberlite IR-120» (forme H+, 200 ml), en effec-5 tuant l'élution avec une solution d'hydroxyde d'ammonium à 5%. On recueille l'éluat (2,5 litres) et on l'évaporé à sec sous pression réduite. On triture le résidu avec de l'acétone et on le fait cristalliser dans de l'éthanol pour obtenir 6,7 g (43,5 %) de composé 4 sous la forme d'aiguilles incolores fondant à 168-îo 170 °C en se décomposant.

Procédé B (utilisant le sodium métallique dans l'ammoniac liquide) - On ajoute 13,3 g (0,578 atome-gramme) de sodium par petits morceaux sous agitation énergique en 2 heures à un mélange de composé 3 (35 g, 0,105 mole) dans 1000 ml d'amis moniac liquide. On évapore l'ammoniac sous agitation au bain-marie dans une hotte convenablement ventilée et, à la fin, sous pression réduite pour éliminer complètement ce gaz. On dissout le résidu dans 400 ml d'eau glacée et on agite la solution avec 400 ml de résine d'échange ionique «IRC-50» (forme H+) pen-2odant 0,5 heure à la température ambiante. On sépare la résine par filtration et on ajoute au filtrat une solution aqueuse 1M d'acétate de baryum jusqu'à ce qu'il ne se forme plus de précipité (il faut environ 50 ml de solution d'acétate de baryum. On filtre le mélange et on Chromatographie le filtrat sur une colonne 25 de résine «IR-120» (forme H+, 400 ml) comme dans le procédé A pour obtenir 13,6 g (72%) du composé 4.

Acide o- (N-méthyl-N-tertio-butoxycarbonylaminométhyl)phé-nylacétique (5)

30 On ajoute 11g (0,048 mole) de 4,6-diméthylpyrimidin-2-ylthiolcarbonate de tertio-butyle en une seule portion à un mélange du composé 4 (7,2 g 0,04 mole) et de 1,1,3,3-tétraméthyl-guanidine (6,9 g, 0,06 mole) dans du tétrahydrofuranne aqueux à 50% et on agite le mélange pendant encore 18 heures à la 35 température ambiante. Après avoir évaporé le tétrahydrofuranne sous pression réduite, on acidifie la phase aqueuse à un pH égal à 2 par addition d'acide chlorhydrique dilué et on l'extrait avec deux fois 20 ml d'acétate d'éthyle. Les extraits rassemblés sont lavés à l'eau, traités avec une petite quantité de 40 carbone actif et évaporés sous pression réduite. Le résidu est trituré à l'hexane et cristallisé dans un mélange de n-hexane et d'éther en donnant 9,2 g (83 %) du composé 5 sous la forme de prismes incolores fondant à 96-98 °C.

45

Spectre infrarouge: v 1730,1630,1430,1830,

1250 cm

-1

Spectre de résonance magnétique nucléaire: ô |^P3

1,49 (9H, singulet, tertio-butyle), 2,78 (3H, singulet, N-CH3), 50 3,72 (2H, singulet, CH2CO), 4,25 (2H, singulet, CH2N), 7,28 (4H, singulet, phényle), 9,83 (1H, singulet, -COOH).

Analyse: C% H % N%

55 Calculé pour C15H21N04: 64,50 7,58 5,01 Trouvé: 64,69 7,66 4,89

Préparation de l'acide 3-N-méthylaminométhyl-2-thiényl-acétique t

s"

-ch=n0h

-ch2co2c2h5"

O

nah, ch,i benzene

627 184

16

h ch2n-ch5 ch2c02h

œ

CH,

I 3

chon-boc cooh h-lactame de l'acide 3-aminométhyl-2-thiénylacétique (2)

On ajoute goutte à goutte 140 ml d'acide acétique cristalli-sable, en agitant, à un mélange de 41 g (0,19 mole) d'oxime de 2-éthoxycarbonylméthylthiophène-3-carboxaldéhyde £1) et 65,4 g (1 mole) de zinc en poudre dans du méthanol et on agite le mélange au reflux pendant 4 heures. On refroidit le mélange et on sépare la matière insoluble par filtration puis on le lave avec trois fois 50 ml de méthanol. On rassemble les filtrats et les liqueurs de lavage et on évapore le mélange à sec sous vide en extrayant le résidu avec cinq fois 100 ml de méthanol. Les extraits méthanoliques sont rassemblés et évaporés sous pression réduite. On ajoute au résidu 50 ml d'eau et on ajuste le pH mélange à 10 par additon de carbonate de sodium, puis on extrait ce mélange avec trois fois 100 ml de chloroforme. Les extraits chloroformiques rassemblés sont lavés avec 10 ml d'eau, déshydratés sur du sulfate de magnésium et évaporés sous pression réduite. L'huile résiduelle (30 g) est triturée avec 150 ml de benzène chaud. Les aiguilles incolores sont recueillies par filtration et recristallisées dans de l'acétate d'éthyle ; on obtient ainsi 7,7 g (26%) du lactame 2 fondant à 195-196 °C.

Spectre ultraviolet: X 232 nm (e, 6500)

Analyse: C % H% N% S %

Calculé pour QHyNOS: 54,88 4,61 9,14 20,93 Trouvé: 55,04 4,45 9,13 20,50

h-lactame d'acide 3-N-méthylaminométhyl-2-thiényl-acétique

(3)

On ajoute en agitant sous atmosphère d'azote 4,85 g (32 millimoles) du lactame 2 à une suspension de 1,82 g (38 millimoles) d'hydrure de sodium à 50% dans la paraffine dans 500 ml de benzène absolu et on fait refluer le mélange pendant 2 heures. On ajoute 22,7 g (160 millimoles) d'iodure de méthyle en une seule portion à la température ambiante et on fait de nouveau refluer le mélange pendant 2 heures. On ajoute 50 g d'eau glacée au mélange et on sépare la phase organique. On extrait la phase aqueuse successivement avec deux fois 50 ml de benzène et 50 ml de chloroforme. Les extraits sont rassemblés et déshydratés sur du sulfate de magnésium. Le solvant est évaporé sous pression réduite. On ajoute au résidu un mélange chaud de

100 ml de benzène et de n-hexane à 1:1 pour recueillir le composé 2 sous laforme d'aiguilles (2,02 g, 42%). On évapore le filtrat et on fait cristalliser le résidu dans un mélange de benzène 30et de n-hexane; on obtient ainsi des lamelles incolores du composé 3. Rendement: 2,7 g (51 %) ; point de fusion 98-100 °C.

Spectre infrarouge: v 1620 cm~1.

35 Résonance magnétique nucléaire: ò ^HC13 3^5 (3H,

singulet, N-CH3), 3,72 (2H, triplet, J=3Hz, CH2CO), 4,53 (2H, triplet, J=3Hz, -CH2-N), 6,87 (1H, doublet, 1 =4,5Hz, thiophène-HP), 7,30 (1H, doblet, J=4,5Hz, thiophène-Ha).

40

Spectre ultraviolet: X 232 nm (e, 6700)

45,

Analyse:

Calculé pour C8H9NOS: "Trouvé:

C % H % 57,46 5,42 57,56 5,26

N % 8,38 8,31

S%

19,17

19,13

Acide 3- (N-méth ylaminométh yl} -2-thién y lacé tique (4)

On chauffe au reflux pendant 12 heures, un mélange de 3,5 50g (21 millimoles) du lactame 3 et de 100 ml d'acide chlorhydrique 6N. On traite le mélange avec du carbone et on le concentre à sec sous pression réduite. On dissout l'huile résiduelle dans 10 ml d'eau et on Chromatographie la solution sur une colonne de 50 ml de «IR—120» (H+). On élue la colonne avec 200 ml d'eau 55 et 3 litres d'ammoniaque 5N. On isole l'aminoacide 4 (3,0 g, 77%) par évaporation des éluats ammoniacaux suivie d'une cristallisation dans l'acétone aqueuse. Point de fusion 181— 182 °C.

60

Spectre infrarouge: v 1570,1360 cm

Résonance magnétique nucléaire: ô ^2® 2,21 (3H,

singulet, N-CH3), 3,80 (2H, singulet, CH2CO), 4,20 (2H, sin-65gulet, CH2-N), 7,19 (1H, doublet, J=6Hz, thiophène-H(3), 7,46 (1H, doublet, J=6Hz, thiophène-Ha).

Spectre ultraviolet: X 237 nm (e, 7600)

17

627 184

Analyse: C% H% . N% S%

Calculé pour CgHuN02S: 51,87 5,99 7,56 17,31 Trouvé: 51,67 6,50 7,28 16,69

Acide 3-(N-tertio-butoxycarbonyl-N-méthylaminométhyl)-2-thiénylacétìque (5)

On ajoute goutte à goutte 4,2 g (29,2 millimoles) de tertio-butoxycarbonylazide en 20 minutes à 0 °C sous agitation énergique à un mélange de 2,7 g (14,6 millimoles) d'acide 3-N-mé-thylaminométhyl-2-thiénylacétique 4 et de 6 g (60 millimoles) de triéthylamine dans 60 ml d'acétone aqueuse à 50%. On agite le mélange réactionnel pendant environ 18 heures à la température ambiante et on le concentre sous pression réduite. On lave le concentré avec deux fois 20 ml d'éther, on ajuste son pH à 2 par addition d'acide chlorhydrique concentré et on l'extrait avec deux fois 50 ml d'acétate d'éthyle. Les phases d'extraction à l'acétate d'éthyle sont lavées avec une solution aqueuse saturée de chlorure de sodium, déshydratées sur du sulfate de magnésium, traitées au charbon de bois et évaporées sous pression réduite. Le résidu est trituré avec du n-hexane et cristallisé dans un mélange de n-hexane et de benzène en donnant 3,68 g (88%) d'aiguilles incolores du composé 5 fondant à 82-83 °C.

Spectre infrarouge: v 1730,1640 cm-1.

Résonance magnétique nucléaire: ô 1,47 (9H,

singulet, BOC-H), 2,78 (3H, singulet, N-CH3), 3,87 (2H, singulet, CH2-CO), 4,48 (2H, singulet, CH2-N), 6,91 (1H, doublet, J=6Hz, thiophène-H^), 7,20 (1H, doublet, J=6Hz, thiophène-Ha), 10,63 (1H, singulet, C02H, disparaît par addition de D20).

Analyse: C % H % N % S %

Calculé pour C13H19N04S: 54,72 6,71 4,91 11,24 Trouvé: 54,91 6,85 4,92 11,19

L'utilisation d'un groupe protecteur «énamine» avec une chaîne latérale future en position 7 portant un groupe amino libre avant l'acylation d'un noyau tel que II comme décrit dans le présent mémoire est bien connue (voir brevets des Etats-Unis d'Amérique N° 3 223 141, N° 3 813 390, N° 3 813 391 et N° 3 823 141 et brevet belge N° 773 773).

2-[N-(l-carbéthoxypropén-2-yl)aminométhyl]-l,4-cyclohexa-diénylacétate de sodium (4)

On ajoute 3,34 g (0,02 mole) d'acide 2-aminométhyl-l,4-cyclohexadiénylacétique et 3,1 g (0,024 mole) d'acétylacétate d'éthyle à une solution sous agitation de 460 mg (0,02 atome-gramme) de sodium métallique dans 100 ml d'éthanol absolu et on chauffe le mélange au reflux pendant 4 heures en l'agitant. On filtre le mélange réactionnel chaud et on maintient le filtrat au réfrigérateur pendant environ 18 heures pour obtenir 2,0 g d'aiguilles incolores du composé 4 fondant à 264 °C.

On obtient encore 3,3 g de produit par concentration de la liqueur-mère. Le rendement total est de 5,3 g (88%).

Spectre infrarouge: v 3300,1635,1600,1570,

1300,1275,1170,1090 cm"1.

Résonance magnétique nucléaire: ô 1,23 (3H, triplet, 7Hz, CH2CH3), 1,96 et 2,25 (3H, singulet, C=C-CH3, eis et trans), 2,70 (4H, singulet, H2C<^ ), 3,04 (2H, singulet,

CH2CO), 3,66 et 3,95 (2H, singulet, CH2-N, eis et trans), 4,07 (2H, quadruplet, 7Hz, CH2CH3), 4,45 et 4,56 (1H, singulet,

„H

■IX))

, eis et trans), 5,76 (2H, singulet.

Analyse: C % H % N %

Calculé pour C15H20NO4Na: 59,79 6,69 4,64 0Trouvé: 59,69 6,76 4,75

Acide 2-tertio-butyoxycarbonylaminométhyl-4-hydroxyphényl-acétique est préparé, par exemple, conformément au brevet des Etats-Unis d'Amérique N° 3 823 141.

b-lactame d'acide o-(N-méthylaminométhyl)phénylacétique n-ch.

15

On lave de l'hydrure de sodium (4,3 g; 0,11 mole, à 57% dans la paraffine) avec du n-hexane anhydre et on le met en 25 suspension dans 100 ml de benzène anhydre. On ajoute à la suspension une solution de 14,7 g (0,1 Mole) de ô-lactame d'acide o-aminométhylphénylacétique (brevet des Etats-Unis d'Amérique N° 3 796 716) dans 200 ml de benzène ou de xylène anhydre en agitant sous atmosphère d'azote. On fait refluer le 30 mélange pendant 1 heure et on le laisse refroidir à la température ambiante. On ajoute au mélange 18 ml d'iodure de méthyle en une seule portion et on le fait refluer de nouveau pendant 1,5 heure. On laisse refroidir le mélange réactionnel à la température ambiante et on le verse dans 100 ml d'eau glacée. On sé-35 pare la phase aqueuse de la phase organique et on l'extrait avec deux fois 50 ml de chloroforme. On rassemble les extraits et la phase organique et on les déshydrate sur du sulfate de magnésium. On chasse le solvant et on distille le résidu huilleux sous vide; on obtient 14,9 g (92%) de ô-lactame d'acide o-(N-mé-40 thylaminométhyl)phénylacétique bouillant à 130-135 °C/2 mm de mercure ; point de fusion 35-37 °C.

Spectre infrarouge: v 3300,1620,1490 cm"1

45

Résonance magnétique nucléaire: ô pjJnP3 3,12 (3H, singulet), 3,59 (2H, triplet, J= 1,5Hz), 4,48 (2H, triplet, J=l,5Hz), 7,21 (4H, large singulet).

50 Analyse:

Calculé pour CioHn N0 1/4H20: Trouvé:

H % N %

55

72,49 72,78 72,70

6,84 6,76 6,81

8,45 8,49 8,51

60

Acide o-N-méthylaminométhylphénylacétique

UL

nhch,

ch2cooh

65

On fait refluer pendant 40 heures un mélange de 5,0 g (0,031 mole) du ô-lactame d'acide o-(N-méthylaminométhyl)-phénylacétique produit ci-dessus et de 500 ml d'acide chlorhy-

627184

18

drique concentré. On évapore le mélange sous pression réduite et on dissout l'huile résiduelle dans 20 ml d'eau puis on traite la solution avec une petite quantité de carbon actif. On lave le filtrat avec 50 ml de benzène et on l'évaporé à sec. On fait cristalliser l'huile résiduelle par trituration avec du tétrahydrofuranne (ou de l'acétone) pour obtenier des aiguilles incolores de chlorhydrate d'acide o-N-méthylaminométhylphénylacéti-que (4,5 g, 67%).

Analyse: C % H % N % CI %

Calculé pour CI0H13NO2-HCl:55,69 6,54 6,49 16,44

Trouvé: 55,65 6,62 6,53 16,36

55,74 6,60 6,53

On récupère dans la phase benzénique et les liqueurs de lavage au tétrahydrofuranne un peu de matière première n'ayant pas réagi (1,2 g, 24%, Eb. 140-143 °C/2 mm de mercure).

Une solution aqueuse du chlorhydrate d'acide o-N-méthyl-aminométhylphénylacétique (5 g) est chromatographiée sur une colonne de résine d'échange ionique «IR-120» (forme H+, 70 ml) et éluée avec 2 litres d'ammoniaque 3N en donnant 3,9 g (93%) d'acide o-N-méthylaminométhylphényiacétique sous la forme d'aiguilles.

Spectre infrarouge: v 1650,1470 cm~l.

L'invention est illustrée par les exemples suivants, donnés à titre non limitatif. Toutes les températures y sont exprimées en degrés Celsius. L'acide 7-aminocéphalosporanique est désigné par l'abréviation 7-ACA; le radical -ACA-correspond à la formule:

-nh-ch-

•ch l

ck2

^C-CH -

c cooh et, par conséquent, le 7-ACA peut être représenté par la for-O

II

mule H-ACA-O-C-CHy La méthylisobutylcétone est désignée par l'abréviation MIBC. «Skellysolve B» est une fraction d'éther de pétrole bouillant à 60-68 °C et principalement formée de n-hexane.

La résine «LA-1 » est un mélange d'amines secondaires dont chacune répond à la formule:

R1

I

CH3(CH2)10CH2NHC -R2

I

R3

dans laquelle chacun des symboles R1, R2 et R3 est un radical hydrocarboné aliphatique monovalent et ces radicaux totalisent 11 à 14 atomes de carbone. Ce mélange particulier d'amines secondaires, que l'on appelle parfois «mélange d'amines liquide 5 N° II» dans les exemples, est un liquide clair de couleur ambrée ayant les caractéristiques physiques suivantes: viscosité à 25 °C=70 centipoises, densité à 20 °C— 0,826 ; indice de réfraction à 25 °C= 1,4554 ; gamme de distillation sous un vide de 10 mm: jusqu'à 170 °C=0,5%, 170-220 °C=3%, 220-io230 °C=90% et au-dessus de 230 °C=6,5%.

La résine «IR-120» est également appelée résine «Amberlite IR-120» et il s'agit d'une résine échangeuse de cations forts renfermant des radicaux acide sulfonique. La résine «Amberlite 15IR-120» est une résine d'échange cationique du commerce du type acide polystyrène-sulfonique; c'est donc une résine polystyrène sulfonée dans le noyau, réticulée avec du divinylben-zène, obtenue par le procédé décrit par Kunin dans «Ion Exchange Resins», seconde édition (1958), John Wiley and Sons, 2C Inc. (voir, dans cet ouvrage, par exemple les pages 84 et 87).

La résine «Amberlite IRC-50» est une résine d'échange cationique du commerce, de type carboxylique; c'est un copoly-mère d'acide méthacrylique et de divinylbenzène.

Le dicyclohexylcarbodiimide est désigné par l'abréviation 25 DCC, le tétrahydrofuranne par l'abréviation THF, le radical para-toluènesulfonyle par Ts et le méthanol par MeOH.

Lorsque les mesures instrumentales suivantes sont indiquées; la lettre grecque nu (v) est utilisée pour le spectre infrarouge, la lettre grecque X est utilisée pour le spectre ultraviolet, 30 le coefficient d'extinction moléculaire est désigné par la lettre (e) et les lettres ô et x sont utilisées pour la résonance magnétique nucléaire (ô=10-t).

Synthèse (Schémas 1,2 et 3)

35 On prépare le 2-carboxyméthyl-2,3-dihydro-s-triazolo[4,3-b]pyridazine-3-one-6-ylthio (3), (thiol à chaîne latérale en position 3) par N-éthoxycarbonylméthylation de la 6-chloro-2,3-dihydro-s-triazolo[4,3-b]pyridazine-3-one (1) avecl'hydrure de sodium et le chloracétate d'éthyle dans le diméthylformamide, 40 avec thiolation subséquente en présence d'hydrosulfure de sodium (schéma 1). Par condensation de l'acide 7-ACA (acide 7-amino-céphalosporanique) avec le composé 3 effectuée par reflux dans un tampon au phosphate (pH 7), on obtient le 7-ACA à fonction thio substituée en position 3 (composé 4) que 45 l'on combine avec un amino-acide à fonction amino protégée par un groupe BOC par la méthode à l'ester activé en utilisant le 2,4-dinitrophénol (DNP). Les céphalosporines 7 et 11 obtenues, à fonction amino protégée par un groupe BOC, sont déba-rassées du groupe protecteur au moyen de TFA (acide trifluor-50 acétique) et transformées en sel monosodique avec de l'hydr-oxyde de sodium IN (schémas 2 et 3).

Schéma 1

Préparation de l'acide 7-amino-3-(2-carboxyméthyl-2,3-di-55 hydro-s-triazolo[4,3-b]pyridazine-3-one-6-ylthiométhyl)-3-cé-phem-4-carboxylique

NaH/'DMF

cich2cooc2h5

> Cl-

' n'

,n

V

o n-ch2c00c2h5

1

2

19

627 184

NaSH

hs

•n

-N

-N i n-chgcooh

7-aca y

o

H2N-

CH2S

■n

^n-cr* cooh co^h o

h

Schéma 2

do]-3-(2-carboxyméthyl-2,3-dihydro-s-triazolo[4,3-b]pyrida-

Préparation des acides 7-[(o-aminométhylphényl)-acétami- zine-3-one-6-ylthiométhyl)-3-céphem-4-carboxylique

,1

2,4-dnp/dcc

+ il r

r r

^ i

—N-BOC

corn r"

kA/CONH-J-f A

0

a: R1 = H, R2 = H b: R1 = CH3, R2 = H c: R1 = CH3, R2 = OH

n ch2-s-

co2h 7

n"

"Y

tpa

■n i n-ch2c00h ch2s-

^ -chocooh N >r d co2h

8

0

8a: BB-S469 8b: BB-S479 8c: BB-S478

627184 20

Schéma 3 do)-3-(2-carboxyméthyl-2,3-dihydro-2-triazolo[4,3-b]pyrida-

Préparation des acides 7-(3-aminométhyl-2-thiénylacétami- zine-3-one-6-ylthiométhyl)-3-céphem-4-carboxylique r I

n-boc cooh

2,4-dnp/dcc g:

r j

n-boc

COO

ff \

no,

no,

+ Ì

• 10

11

jj^Nv^N-CKgCOOH

ce-, cooh

ch„s r=F

.N^^N-CHpCOOH

T

a: R=H b: R=CH3

12

12a: BB-S483 12b: BB-S472

6-chloro-2,3-dihydro-2-éthoxycarbonylméthyl-s-triazolo[4,3-bJpyridazine-3-one (2)

On ajoute 0,3 g (6,3 millimoles) d'hydrure de sodium (à 50% dans la paraffine) en agitant à une solution de 6-chloro-2,3-dihydro-s-triazolo[4,3-b]pyridazine-3-one[P. Francavilla et F. Lauria, «J. Het. Chem.», 8,415 (1971)] (composé 1,1,00 g, 5,9 millimoles) dans 30 ml de diméthylformamide anhydre ; il se forme des cristaux jaunes. On ajoute au mélange 1,4 ml (13

60 millimoles) de chloracétate d'éthyle et on chauffe le mélange à 90 °C pendant 8 heures en l'agitant. Après refroidissement, on verse le mélange réactionnel dans 50 ml d'eau et on l'extrait avec cinq fois 40 ml de toluène. On rassemble les extraits organiques, on les déshydrate sur du sulfate anhydre de sodium et on 65 les évapore sous pression réduite. On cristallise le résidu dans un mélange de benzène et de n-hexane pour obtenir des aiguilles jaunes du composé 2(1,16 g, 77 %) fondant à 114—115 °C (la littérature indique un point de fusion de 110 °C).

21

627 184

Spectre infrarouge: v 1735,1710 cm

Spectre ultraviolet: X ^31 nm (e, 26 000)

Résonance magnétique nucléaire: ô 7,58 (1H,

doublet, J = 10Hz, H de pyridazine), 6,98 (1H, doublet, J=10Hz, H de pyridazine), 4,80 (2H, singulet, -CH2CO), 4,27 (2H, quadruplet, J=7,5 Hz, CH2CH3), 1,29 (3H, triplet, J-7,5 Hz, CH2CH3).

Analyse:

Calculé pour C9H9N403C1: Trouvé:

C% H %

42,12 3,53

41,54 3,22

41,46 3,49

N % Cl%

21,83 13,81

21,51 13,88

21,53 13,99

Spectre ultraviolet: X aqueux à 1 % 260 nm

(e 19 500), 313 nm (ô, 7000).

Résonance magnétique nucléaire: ô ~^6 7,88

(1H, doublet, J = 10Hz, H de pyridazine), 7,45 (1H, doublet, J=10Hz, H de pyridazine), 4,72 (2H, singulet, CH2CO).

Analyse:

Calculé pour C7H6N403S: Trouvé:

C % H %

37,17 2,67

37,35 2,26

37,23 2,28

N % S %

24,77 14,17

23,58 14,32 23,69

2-carboxyméthyl-2,3-dihydro-6-mercapto-s-triazolo-[4,3-b]py-ridazine-3-one (3)

On ajoute 45,9 g (0,36 mole) de NaSH.2HzO (de pureté égale à 70%) à une solution de 30 g (0,12 mole) de 6-chloro-2,3-dihydro-2-éthoxycarbonylméthyl-s-triazole[4,3-b]pyrida-zine-3-one (composé 2) et on fait refluer le mélange pendant 0,5 heure. On évapore le mélange réactionnel sous pression réduite. On dissout le résidu dans l'eau (200 ml) et on ajoute de l'acide chlorhydrique concentré à la solution pour ajuster le pH à 2. On recueille le précipité (3) par filtration et on le lave à l'eau. Rendement 18,3 g (69%).

Spectre infrarouge: v 2900,2450,1750,

1660 cm-1. X-

Acide 7-Amino-3-(2-carboxyméthyl-2,3-dihydro-s-triazo-lo[4,3-b]pyridazine-3-one-6-ylthiométhyl)-3-céphem-4-carb-oxylique (4)

io On ajoute 8,14 g (97,0 millimoles) de NaHC03 et 7,30 g (32,2 millimoles) du thiol 3 en agitant à une suspension de 8,79 g (32,2 millimoles) d'acide 7-aminocéphalosporanique dans 149 ml de tampon au phosphate 0,1 M (pH 7). On chauffe le mélange à 80 °C pendant 0,5 heure sous un courant d'azote.

15 On traite le mélange au charbon actif et on ajuste son pH à 3 par addition d'acide chlorhydrique concentré. Le précipité résultant est recueilli par filtration et lavé à l'eau en donnant 7,59 g (54%) du composé 4.

20 Spectre infrarouge: v 1470 cm-1.

1800,1720,1600,1540,

Spectre ultraviolet: X (pH7) 252 nm (e, 19 500),

25 298 nm (e, 8400).

Résonance magnétique nucléaire: +K2C03 7 5g ^H,

rr"

doublet, J=9Hz, H de pyridazine), 7,05 (1H, doublet, J=9Hz, H de pyridazine), 5,45 (1H, doublet, J=5Hz, 6-H), 5,05 (1H, doublet, J=5Hz, 7-H), 4,43 (1H, doublet, J=14Hz, 3-CH2), 4,04 (1H, doublet, J= 14Hz, 3-CH2), 3,88 (1H, doublet, J= 18Hz, 2-H), 3,45 (1H, doublet, J= 18Hz, 2-H).

35

Exemple 1

Préparation du composé BB-S469

ch2nh2 chgconk n-ch2c00h

8a, BB-S469

o-(N-butoxycarbonylaminométhyl)phénylacétate de 2,4-dinitro-phényle (6a)

On ajoute 10,1 g (49 millimoles) de dicyclohexylcarbodi-imide (DCC) en refroidissant à l'eau (5-15 °C) à un mélange de 13 g (49 millimoles) d'acide o-(N-butoxycarbonylaminométhyl) phénylacétique (5a) et 9,02 g (49 millimoles) de 2,4-dinitrophé-nol dans 123 ml d'acétate d'éthyle et on agite le mélange pendant 30 minutes à la même température puis pendant 40 minutes àia température ambiante. Le précipité résultant est séparée par filtration et le filtrat est évaporé en donnant 23,9 g de l'ester actif 6a que l'on utilise dans la réaction d'acylation suivante, sans autre purification.

Spectre infrarouge: v 1775,1700,1600,1530 cm-Acide 7-(o-[N-butoxycarbonylaminométhyl)phénylacétamido]-

3-(2- carboxyméthyl-2,3-dihydro-s-triazolo[4,3-b]pyridazine-3-one-6-ylthiométhyl)-3-céphem-4-carboxylique (7a)

On ajoute une solution de 4,79 g de o-(N-butoxycarbonyl-55 aminométhyl)phénylacétate de 2,4-dinitrophényIe (6a) dans 20 ml de THF (tétrahydrofuranne) à un mélange froid (0 °C) de 4,38 g (10 millimoles) du composé 4,4,5 ml (30 millimoles) de Et3N, 20 ml de CH3CN et 20 ml d'eau. Après agitation à la température ambiante pendant environ 18 heures, on chasse le 60 THF et le CH3CN du mélange réactionnel sous pression réduite et on ajuste le pH de la solution aqueuse résultante à 2 par addition d'acide chlorhydrique dilué, puis on l'extrait avec dix fois 30 ml d'acétate d'éthyle. Les extraits organiques sont déshydratés sur du sulfate de sodium et évaporés. Le résidu est 65 chromatographié sur une colonne de gel de silice (60 g) et élué successivement avec du chloroforme et un mélange à 3 % de méthanol et de chloroforme, pour obtenir 2,40 g (37 %) de composé 7a fondant au-dessus de 161 °C en se décomposant.

627 184

22

Spectre infrarouge: v 1780,1720 cm 1

Spectre ultraviolet: X ^™Pon P** 7 252 nm (e, 19 800), 298 nm (e, 8900).

Résonance magnétique nucléaire: ô +D20 7^7

doublet, J=9,0Hz, H de pyridazine), 7,10 (4H, singulet, H phénylique), 7,05 (1H, doublet, J=9,0 Hz, H de pyridazine), 5,66 (1H, doublet, J=4,5 Hz, 7-H), 5,07 (1H, doublet, J=4,5 Hz, 6-H), 4,71 (2H, singulet, N-CH2-CO), 4,4-4,0 (4H, multiplet, 3-Œ2 et CH2-N), 3,8-3,5 (4H, multiplet, 2-H et CH2CO), 1,42 (9H, singulet, H de tertio-butyle).

Analyse:

C%

H %

N %

S%

Calculé pour

CaH^NrOrSî ' 2H20:

49,62

5,20

14,46

9,46

Trouvé:

49,97

4,79

14,00

9,37

49,95

4,62

13,84

9,32

BB-S469; acide 7-[(o-(aminométhylphényl)acétamido]-3-(2-carboxyméthyl-2,3-dihydro-s-triazolo[4,3-b]pyridazine-3-one-6-ylthiométhyl) -3-céphem-4-carboxylique (8a)

On ajoute 3,4 ml d'acide trifluoracétique à 2,33 g de composé 7a à 0 °C et on agite le mélange pendant 15 minutes à la température ambiante. On ajoute au mélange 100 ml d'éther anhydre et on recueille le précipité par filtration puis on le lave avec deux fois 50 ml d'éther anhydre. On dissout la matière solide dans un mélange de 100 ml de CH3CN et de 14 ml d'eau et on ajuste le pH de la solution à 4—5 par addition d'ammoniaque concentrée pour obtenir un précipité que l'on recueille par filtration et qu'on lave avec deux fois 50 ml de CH3CN, ce qui donne 1,75 g (82%) du composé 8a sous la forme du sel d'ammonium fondant au-dessus de 160 °C en se décomposant.

Spectre infrarouge: v j _ A Ä H IlldAl

1590 cm-1.

1765,1710,1640,

Spectre ultraviolet: X ~™Pon PH 7 252 nm (e, 23 900), 298 nm (e, 10 900).

Analyse:

Calculé pour

C24H22N707S2 • NH4+ • H20: Trouvé:

C % H % N % S %

46.51 3,96

46.52 4,15 46,26 4,19

18,08 10,35 17,60 10,89 17,48 10,41

Préparation du sel monosodique de BB-S469

On ajoute à une suspension de 1,58 g de composé 8a dans 10 30 ml de mélange à 50% d'acétone et d'eau une solution à 10% d'hydroxyde de sodium pour ajuster le pH à 7,7. On ajoute encore de l'acétone et on recueille le précipité par filtration puis on le lave à l'acétone pour obtenir 1,38 g (87%) du sel monosodique du composé 8a fondant au-dessus de 170 °C en se décom-15 posant.

Spectre infrarouge: v 1765,1710,1640,1600,

1540,1485 cm-1.

20 Spectre ultraviolet: X 7 252 nm (e, 20 600),

298 nm(e, 9200).

Résonance magnétique nucléaire: ô ^ K2CO3 7^52

(1H, doublet, J=9Hz, H de pyridazine), 7,27 (4H, singulet, H phénylique), 7,03 (1H, doublet, J=9Hz, H de pyridazine), 5,62 (1H, doublet, J=4,5 Hz, 7-H), 5,07 (1H, doublet, J=4,5 Hz, 6-H7).

Analyse:

Calculé pour C24H22N707S2Na • 2H20: Trouvé:

25

35

40

C%

H%

N%

S%

44,79

4,07

15,23

9,96

44,44

3,68

16,50

10,38

44,95

3,90

16,67

10,45

Exemple 2 Préparation de BB-S472

J-

CHgNHCH^ CHgCONH

12b, BB-S472

N/N^ ^N-CHoCOOK

Acide 7-(3-N-tertio-butoxycarbonyl-N-méthylaminométhyl-2-thiénylacétamido)-3-(2-carboxyméthyl-2,3-dihydro-s-triazo-lo[4,3-b]pyridazine-3-one-6-ylthiométhyl)-3-céphem-4-car-boxylique (11b)

On agite à la température ambiante pendant 12 heures un mélange de 513 mg (1,8 millimole) d'amin-acide 10b à groupe BOC protecteur, 400 mg (2,16 millimoles) de 2,4-dinitrophénol et 445 mg (2,16 millimoles) de DCC dans 5 ml de THF. On recueille l'urée précipitée et on ajoute le filtrat à un mélange de 800 mg (1,8 millimole) d'acide 7-amino-3-(2-carboxyméthyI)-2,3-dihydro-s-triazolo[4,3-b]pyridazine-3-one-6-ylthiométhyl)-3-céphem-4-carboxylique 4 et de 0,76 ml (5,4 millimoles) de triéthylamine dans 5 ml d'eau à 0 °C en agitant. On continue d'agiter jusqu'à ce que l'ester actif ait disparu d'après la Chromatographie en couche mince (plaque de gel de silice ; Rf 0,95 ;

mélange de solvants = CHCl3:MeOH à 3:1). On dilue le mé-55 lange réactionnel avec 20 ml d'eau, on lui superpose une couche de 50 ml de AcOEt et on ajuste son pH à 2 par addition d'acide chlorhydrique concentré, à 5 °C. On sépare la phase organique et on extrait la phase aqueuse avec trois fois 50 ml de AcOEt. Les phases d'extraction à l'acétate d'éthyle sont rassemblées, 60 lavées avec une solution aqueuse saturée de NaCl, déshydratées sur du sulfate de magnésium et concentrées sous pression réduite. L'huile résiduelle (1,9 g) est chromatographiée sur 40 g de gel de silice. La colonne est éluée successivement avec 400 ml de chloroforme, 100 ml de méthanol à 3% dans le chloroforme 65 et du méthanol à 10% dans le chloroforme, en effectuant des contrôles par chromatographei en couche mince (plaque de gel de silice; mélange de solvants = MeOH:CHCl3 à 1:2, détection à l'iode). On recueille dans l'éluat chloroformique un mélange

23

627 184

de 2,4-DNP et l'amino-acide 9 protégé par un groupe BOC et on recueille dans l'éluat à 3 % de méthanol dans le chloroforme, 50 mg du composé 9. Le produit désiré (11b) (Rf 0,4, mélange de solvants CHCl3:MeOH à 3:1) est obtenu par évaporation de l'éluat avec du méthanol à 10% dans le chloroforme. Rendement 490 mg (39%). Point de fusion 215-220 °C.

Spectre infrarouge: v 3400,1780,1720,1680,1550

cm

Spectre ultraviolet: X ÎSÏÏP011 pH 7 245 nm (e, 23 000), 260 nm (e, 18 000), 300 nm (e, 7900).

Résonance magnétique nucléaire: ö 1^42 (9H,

singulet, BOC-H), 2,75 (3H, singulet, N-CH3), 3,80 (4H,

large singulet, 2-H et h

4,35 (4H, large singulet,

H H

CO),

H

N

Analyse:

Calculé pour CANA^-HzO: Trouvé:

C% H% N% S%

46,46 4,60 46,67 4,71

13,55 12,79

13,29 12,81

fois 5 ml d'acétonitrile et on la sèche à 60 °C sous un vide de 1mm de mercure pendant 7 heures pour obtenir 310 mg (90%) de composé 12b fondant à 188—191 °C en se décomposant.

5 Spectre infrarouge: v 3400,1770,1720,

1680,1550 cm-1.

Spectre ultraviolet: X j^î^Pon pH 7 245 nm (e, 22 400), io260 nm (e, 18 700), 300 nm (e, 8600).

Analyse:

Calculé pour 15 C23H23N707S3 • 3H20: Trouvé:

C% H% N % S%

41,87 4,43 14,86 14,58 42,03 3,59 14,79 14,35

Préparation du sel monosodique de BB-S472

On ajoute de l'hydroxyde de sodium IN à une suspension de 20230 mg (0,38 millimole) du composé 12b dans 0,5 ml d'eau désionisée pour ajuster le pH à 8,9. On ajoute à la solution 15 ml d'acétone. On recueille le précipité par filtration, on le lave deux fois 5 ml d'acétone et on le sèche à 60 °C/lmm de mercure pendant 7 heures pour obtenir 170 mg (71%) du sel monosodi-25 que de BB-S472 fondant au-dessus de 210 °C en se décomposant.

et 3-CH2), 4,72 (2H, singulet, BOC-N-CH2), 5,10 (1H, doublet, J=4,5 Hz, 6-H), 5,70 (1H, double doublet, J=4,5 et 10,5 Hz, se changeant en un doublet J=4,5 par addition de D20, 7-H), 6,85 (1H, doublet, J=4,5 Hz, Hß de thiophène), 7,19 (1H, doublet, J=9 Hz, H de pyridazine), 7,34 (1H, doublet, j =4,5, Ha de thiophène), 7,72 (1H, doublet, J=9 Hz, H de pyridazine), 9,11 (1H, doublet, J= 10,5 Hz, disparaît par addition de D20, NH).

30

Spectre infrarouge: v 3400,1765,1710,1680,

1600 cm- '.

ComposéBB-S472; acide 7-(3-méthylaminométhyl-2-thiényl-acétamido)-3-(2-carboxyméthyl-2,3-dihydro-s-triazolo[4,3-b]-pyridazine-3-one-6-ylthiométhyl)-3-céphem-4-carboxylique (12b)

On ajoute 0,4 ml d'acide trifluoracétique à 400 mg (0,57 millimole) de composé 11b à 0 °C et on agite le mélange à la température ambiante pendant 15 minutes. On ajoute au mélange réactionnel 10 ml d'éther anhydre pour séparer un précipité que l'on recueille par filtration, qu'on lave avec deux fois 10 ml d'éther anhydre et qu'on met en suspension dans 10 ml d'acétonitrile. On ajuste le pH de la suspension à 4 par addition d'ammoniaque concentrée et on agite pendant 10 minutes. On recueille la substance solide par filtration, on la lave avec deux

Spectre ultraviolet: X j^^Pon P^ 7 245 nm (e, 21 800), 260 nm (e, 18 500), 300 nm (e, 7800).

35 Résonance magnétique nucléaire: ô 2,72 (3H, singulet, N-CH3), 3,45 (1H, doublet, J= 18 Hz, 2-H), 3,75 (1H,

X

doublet, J= 18 Hz, 2-H), 3,95 (2H, singulet, S^xCH2CO), 4,18 (4H, multiplet,

j^ch2N

40

et 3-CH2), 4,57 (2H, singulet, N-CH2),

5,00 (1H, doublet, J=4,5 Hz, 6-H), 5,53 (1H, doublet, J=4,5 Hz, 7-H), 6,97 (1H, doublet, J=9 Hz, H de pyridazine), 7,03 45 (1H, doublet J=4,5 Hz, Hß de thiophène), 7,34 (1H, doublet, J=4,5 Hz, Ha de thiophène), 7,48 (1H, doublet, 3=9 Hz, H de pyridazine).

50 Analyse:

C%

H%

N%

S%

Calculé pour

C23H22H707S3Na • 1/2 H20:

43,40

3,64

15,40

15,11

Trouvé:

43,26

4,08

14,18

13,91

55 . Exemple 3

Préparation du composé BB-S478

chgnh-ch^

CHgCONH

nJy N-CH2C00H

0

8c, BB-S478

627 184

24

Acide 7-[2-(N-tertiobutoxycarbonyl-N-méthylaminométhyl)-4-hydroxyphénylacétamido]-3-(2-carboxyméthyl-2,3-dihydro-s-triazolo[4,5-b]pyridazine-3-one-6-ylthiométhyl)-3-céphem-4-carboxylique (7c)

On agite à la température ambiante pendant 2 heures un mélange de 708 mg (2,4 millimoles) d'acide 2-N-tertio-butoxy-carbonyl-N-méthylaminométhyl-4-hydroxyphénylacétique (5c), 478 mg (2,6 millimoles) de 2,4-dinitrophénol et 536 mg (2,6 millimoles) de DCC dans 20 ml de tétrahydrofuranne anhydre. L'urée précipitée est enlevée par filtration. Le filtrat est ajouté à une solution de 876 mg (2 millimoles) d'acide 7-amino-3-(2-carboxyméthyl-2,3-dihydro-s-triazolo[4,5-b]pyridazine-3-one-6-ylthiométhyl)-3-céphem-4-carboxylique (4) dans 20 ml d'eau contenant 0,84 ml (6 millimoles) de triéthylamine et le mélange est agité à la température ambiante pendant 18 heures. Après concentration à 20 ml, on lave la solution aqueuse avec de l'éther, on l'acidifie avec de l'acide chlorhydrique 6N et on l'extrait avec 200 ml d'acétate d'éthyle. On filtre l'extrait pour enlever les matières insolubles, on le lave avec de l'eau et avec une solution aqueuse saturée de chlorure de sodium et on le déshydrate. On évapore la solution à sec et on Chromatographie le résidu huileux sur du gel de silice («Wakogel C-200», 25 g) en effectuant l'élution avec du chloroforme et 3 % de chloroforme dans le méthanol. On rassemble les fractions contenant le produit désiré (contrôlé par Chromatographie en couche mince; Rf 0,3 ; mélange de solvants, CHCl3:MeOH à 2:1) et on les évapore à sec. On triture le résidu huileux avec un mélange d'éther et de n-hexane pour obtenir 630 mg (44%) du produit 7c fondant à 200-210 °C (lente décomposition).

1780,1720,1660,1400,

Spectre infrarouge: v 1240,1150 cm-1.

Spectre ultraviolet: X J5???100 7 252 nm (e, 13 000), 300 nm (e, 5400).

Résonance magnétique nucléaire: ô 1>39 (9H,

singulet, C-CH3), 2,73 (3H, singulet, N-CH3), 3,3-3,9 (4H, multiplet, CH2CO et 2-H), 4,35 (4H, multiplet, CH2N et 3-H), 4,48 (2H, singulet, NCH2CO), 5,03 (1H, doublet, 4,5Hz, 6-H), 5,61 (1H, double doublet, 8 et4,5Hz, 7-H), 6,4-7,2 (3H, multiplet, H phénylique), 6,98 (1H, doublet, 10Hz, H de pyridazine), 7,61 (1H, doublet, 10Hz, H de pyridazine), 8,87 (1H, doublet, 8 Hz, NH).

On agite à 10 °C pendant 30 minutes un mélange de 570 mg (0,8 millimole) de composé 7c et de 1,5 ml d'acide trifluoracéti-que et on dilue le mélange avec 50 ml d'éther pour séparer le trifluoracétate de 8c que l'on recueille par filtration puis qu'on 5 dissout dans un mélange de 10 ml d'acétonitrile et de 5 ml d'eau, en filtrant ensuite la solution. On ajuste le pH du filtrat à 6 par addition d'hydroxyde d'ammonium concentré et on dilue le mélange avec 100 ml d'acétonitrile. Le précipité résultant est recueilli par filtration, lavé à l'acétonitrile et séché sous vide sur io du pentoxyde de phosphore en donnant 370 mg (75 %) du composé 8c fondant à 215—220 °C en se décomposant.

Spectre infrarouge: v KB? 1770,1710,1600,1380,

^ 1 HICIA»

1350 cm 1.

15 Spectre ultraviolet: X S^fon P^ 7 252 nm (e, 19 000), 300 nm (e, 9100).

Résonance magnétique nucléaire: ô +K2C03 2,75

2o(3H, singulet, N-CH3), 2,9—3,3-(4H, multiplet, CH2CO et 2-H), 4,0-4,3 (4H, multiplet, CH2N et 3-H), 4,57 (2H, singulet, NCH2CO), 4,81 (1H, doublet, 4,5-Hz, 6-H), 5,53 (1H, doublet, 4,5 Hz, 7-H), 6,6-7,5 (5H, multiplet, H phénylique et H de pyridazine).

25

Analyse:

Calculé pour ÇhHJBNTOA- 5/2 H20: 3oTrouvé:

C% H% N% S%

45,45 45,69

4,58 4,21

14,84 15,03

9,71 9,46

Préparation du selmonosodique de BB-S478

On ajoute 0,3-0,4 ml de NaOH IN à une suspension de 308 mg (0,5 millimole) de composé 8c dans 2 ml d'eau et on 35 agite le mélange à la température ambiante ; le pH de la solution résultante est égal à 9,2. On ajoute lentement à la solution 20 ml d'acétone. Le précipité résultant est recueilli par filtration, lavé avec 10 ml d'acétone et séché sous vide sur de pentoxyde de phosphore en donnant 290 mg (91 %) du sel monosodique de 40 BB-S478 fondant à 230-235 °C en se décomposant.

Spectre infrarouge: v ^Br 1770,1700,1600,1390,

-1

1350 cm

Spectre ultraviolet: X. ÎB™Pon 7 250 nm (e, 18 000),

300 nm(E, 8400).

Analyse: C% H% N% S%

Calculé pour C30H33N7O10S2: 50,34 4,65 13,70 8,96 Trouvé: 50,98 5,36 11,88 7,60

Composé BB-S478; acide 7-(2-N-méthylaminométhyl-4-hydr-oxyphénylacétamido)-3-(2-N-carboxymêthyl'2,3-dihydro-s-triazolo[4,5-b]pyridazine-3-one-6-ylthiométhyl)-3-céphem-4-carboxylique (8c)

Analyse: 50 Calculé pour C25H24N708S2Na' Trouvé:

C% H% N% S%

5/2 H20:

43,98 43,96

4,28 4,14

Exemple 4 55 Préparation du composé BB-S479

14,36 13,51

9,39 9,34

ch2nh-ch3

ch2conh

^ ^N-CK2C00H

8b, BB-S479

25

627 184

Acide 7-[o-(N-butoxycarbonyl-N-méthylaminométhyl)-phényl-acétamido]-3-(2-carboxyméthyl-2,3-dihydro-s-triazolo[4,3-b]-pyridazine-3-one-6-ylthiométhyl)-3-céphem-4-carboxylique (7b)

On ajoute une solution de o-(N-butoxycarbonyl-N-méthyl-aminométhyl)phénylacétate de 2,4-dinitrophényle (6b) dans du tétrahydrofuranne [préparé à partir de 3,48 g (13,5 millimoles) d'acide o-(N-butoxycarbonyI-N-méthylaminométhyl)-phényI-acétique (5b), 2,49 g (13,5 millimoles) de 2,4-dinitrophénoI et 2,79 g (13,5 millimoles) de DCC dans 37 ml de tétrahydrofuranne anhydre] à un mélange froid (0 °C) de 5,4 g (12 millimoles) du composé 4,5,5 ml de Et3N, 25 ml de CH3CN et 25 mi d'eau. On agite le mélange à la température ambiante pendant environ 18 heures. On chasse le THF et le CH3CN du mélange réactionnel par évaporation sous pression réduite et on lave la solution aqueuse résultante avec trois fois 30 ml d'éther, on ajuste son pH à 2-3 par addition d'acide chlorhydrique dilué et on l'extrait avec quatre fois 30 ml d'acétate d'éthyle. On rassemble les extraits organiques, on les déshydrate sur du sulfate de sodium et on les évapore. On Chromatographie le résidu sur une colonne de 100 g de Si02. Après lavage au chloroforme, on élue la colonne avec du méthanol à 3 % dans le chloroforme pour obtenir une fraction désirée contenant le composé 7b. Rendement 3,8 g (45 %) ; point de fusion supérieur à 200 °C (décomposition).

Spectre infrarouge: v 1780,1720,1680 cm-1.

Spectre ultraviolet: X J^Pon 7 250 nm (e, 18 800), 297 nm (e, 8400).

Résonance magnétique nucléaire: ô +DzO 7^2

(1H, doublet, J = 10,5Hz, H de pyridazine), 7,14 (4H, singulet, H phénylique), 6,98 (1H, doublet, J-10,5Hz, H de pyridazine), 5,61 (1H, doublet, J=4,5 Hz, 7-H7,5,03 (1H, doublet, J=4,5Hz, 6-H), 4,67 (2H, singulet, N-CH2), 4,42 (2H, singulet, CH2-N), 4,4,4,0 (2H, multiplet, 3-CH2), 3,8-3,4 (4H, multiplet, 2-H et CH2-CO), 2,72 (3H, singulet, N-CH3), 1,38 (9H, singulet, BOC-H).

Analyse: Calculé pour C3()H33N709S2 Trouvé:

C% H% N% S%

5/2 H,0:

48,38 48,25 48,23

5,14 4,52 4,46

13,16 12,93 12,86

8,61 8,68

Composé BB-S479; acide 7-[o-(méthylaminométhyl)-phényl-acétamido]-3-(2-carboxyméthyl-2,3-dihydro-s-triazolo[4,3-b]-pyridazine-3-one-6-ylthiométhyl)-3-céphem-4-carboxylique (8b)

5 On ajoute 7 ml d'acide trifluoracétique à 3,8 g (5,5 millimoles) du dérivé tertio-BOC 7b à 0 °C et on agite le mélange pendant 20 minutes à la température ambiante. On y ajoute ensuite 100 ml d'éther anhydre. On recueille par filtration le précipité formé et on le lave avec trois fois 100 ml d'éther an-îohydre. On dissout le précipité dans un mélange de 120 ml de CH3CN et de 18 ml d'eau et on ajuste le pH de la solution à 5-6 par addition d'ammoniaque concentrée pour obtenir un précipité huileux que l'on triture avec de l'acétonitrile pour former une substance solide. On recueille le produit 8b par filtration, on iste lave à l'acétonitrile et on le sèche. Rendement 2,55 g (77%).

cm

Spectre infrarouge: v

1770,1710,1600,1550

20

Préparation du sel monosodique de BB-S479

On ajoute en refroidissant environ 3 ml d'hydroxyde de sodium IN à une solution de 2,54 g (4,3 millimoles) de BB-S479 (8b) dans 25 ml d'eau (le pH de la solution est égal à 10). On 25 ajoute une grande quantité d'acétone à la solution et on recueille le précipité par filtration, puis on le lave à l'acétone pour obtenir 1,94 g (84%) du sel monosodique de BB-S479 fondant au-dessus de 200 °C en se décomposant.

30

Spectre infrarouge: v

1550 cm

KBr max.

1770,1710,1600,

Spectre ultraviolet: X ™ïïfon ^ 7 250 nm (e, 19 400), 297 nm (e, 8700).

35

40

Analyse: Calculé pour C25H24N707S2 ' Trouveiie:

C% H% N% S%

V2H20:

45

Préparation de BB-S483

47,'61 47,43 47,43

Exemple 5

4,00

4.67

4.68

15,55 15,97 15,70

10,17 9,25 9,84

-chgnhg -CHgCONH

n-ck^cooh

12a, BB-S483

Acide 7-(3-N-tertio-butoxycarbonylamino méthyl-2-thiénylacét- 683 mg (1,56 millimole) d'acide 7-amino-3-(2-carboxyméthyl-

amido)-3-(2-carboxyméthyl-2,3-dihydro-s-triazolo[4,3-b]pyri- 2,3-dihydro-s-triazolo[4,3-b]pyridazine-3-one-6-ylthiométhyl)-

dazine-3-one-6-ylthiométhyl)-3-céphem-4-carboxylique (lia) 3-céphem-4-carboxylique 4 et de 0,62 ml (4,68 millimoles) de

On aigte à la température ambiante pendant 12 heures un triéthylamine dans 5 ml d'eau à 0 °C en agitant. On continue mélange de 410 mg (1,56 millimoles) d'amino-acide à groupe 65 d'agiter à la température ambiante jusqu'à ce que l'ester actif ait

BOC protecteur (9), 313 mg (1,7 millimole) de 2,4-dinitrophé- disparu d'après la Chromatographie en couche mince (plaque de nolet353 mg(l,7 millimole) de DCC dans 5 ml de THF. On gel de silice ;Rf 0,95; mélange de solvants, CHCl3:MeOH à

recueille l'urée précipitée et on ajoute le filtrat à un mélange de 3:1). On dilue le mélange réactionnel avec 20 ml d'eau, on lui

627 184

26

superpose une couche de 50 ml d'acétate d'éthyle et on ajuste son pH à 2 par addition d'acide chlorhydrique concentré, à 5 °C. On sépare la phase organique et on extrait la phase aqueuse avec trois fois 50 ml d'acétate d'éthyle. Les phases d'extraction à l'acétate d'éthyle sont rassemblées, lavées avec une solution aqueuse saturée de chlorure de sodium, déshydratées sur du sulfate de magnésium et concentrées sous pression réduite. L'huile résiduelle (1,8 g) est chromatographiée sur 40 g de gel de silice. La colonne est éluée successivement avec 400 ml de CHCI3 et 500 ml de MeOH à 3 % dans CHC13. L'éluat est contrôlé par Chromatographie en couche mince (plaque de gel de silice, mélange de solvants, CHCl3:MeOH à 2:1, détection à l'iode). Le produit lia désiré (Rf 0,2) est obtenu par évapo-ration de l'éluat méthanolique-chloroformique. Rendement 450 mg (42%), point de fusion 155-160 °C.

Spectre infrarouge: v KB? 1680 cm-1.

3300,1775,1720,

Analyse Calculé pour C22H21N707S3-3H20 Trouvé:

40,90 4,21 40,39 3,62

15,17 15,87

14,89 14,35

Préparation du sel monosodique de BB-S483

On ajoute de l'hydroxyde de sodium IN à une suspension de 280 mg (0,47 mmole) de composé 12a dans 0,5 ml d'eau désio-nisée pour ajuster le pH à 9,5 et on recueille par filtration la 10matière insoluble. On ajoute 15 ml d'acétone au filtrat pour séparer le précipité que l'on recueille par filtration, on le lave avec deux fois 5 ml d'acétone et on le sèche à 70 °C/1 mm de mercure pendant 7 heures pour obtenir 220 mg (76%) de sel monosodique du composé 12a fondant au-dessus de 210 °C en 15 se décomposant lentement.

Spectre infrarouge: v J®? 3400,3250,1760,1710,

Spectre ultraviolet: X ^™Pon P** 7 245 nm (e, 23 900), 260 nm (e, 19 200), 300 nm (e, 8700).

Résonance magnétique nucléaire: ô 1>39 (9H,

singulet, BOC-H), 3,76 (4H, large singulet, 2-H et S

CH2CO), 4,05 (2H, doublet, 3=6 Hz, changé en un singulet par addition de D20, BOCNH-CH), 4,20 (2H, multiplet, 3-CH2), 4,69 (2H, singulet, N-CH2C02), 5,06 (1H, doublet, J=4,5 Hz, 6-H), 5,62 (1H, double doublet, 1 =4,5 et 9 Hz, changé en un doublet 3=4,5 Hz par addition de D20,7-H), 6,83 (IH, doublet, J=4,5 Hz, Hß de thiophène), 7,00 (1H, multiplet, disparaît par addition de DzO, NHBOC), 7,04 (1H, doublet, 3=9 Hz, H de pyridazine), 7,12 (1H, doublet, 1=4,5 Hz, Ha de thiophène), 7,65 (1H, doublet, J=9 Hz, H de pyridazine), 8,97 (1H, doublet, 3=9 Hz, disparaît par addition de D20,7-NH).

Analyse: C% H% N% S%

Calculé pour C27H29N709S3: 46,88 4,23 14,17 13,90 Trouvé: 46,42 4,37 13,49 13,61

20

1650,1600,1550 cm- •.

)

Spectre ultraviolet: X ^™Pon P^ 7 245 nm (e, 19900), 260 nm (e, 16400), 300 nm (e, 6900).

25 Résonance magnétique nucléaire: ô 3,60 (2H, m,

2-H), 3,91 (2H, s, CH2CO), 4,12 (2H, s, CH2-NH2), 4,20 (2H, m, 3-CH2), 4,55 (2H, s, N-CH2CO), 4,95 (1H, d, J=4,5 Hz, 6-H), 5,50 (1H, d, J=4,5 Hz, 7-H), 6,94 (1H, d, J=9 Hz, H de 30 pyridazine), 6,99 (1H, d, J=4,5 Hz, Hß de thiophène), 7,28 (1H, d, J=4,5 Hz, Ha de thiophène), 7,32 (1H, d, J=9 Hz, H de pyridazine).

35 Analyse: C% H% N% S%

Calculé pour

C22H2nN707S3

Na • 5/2ch3coch3 Trouvé:

40

Solubilité:

Tous les sels monosodiques de cette série ont une solubilité dans l'eau supérieure à 10%.

43,92 3,61 15,26 14,97 43,48 4,56 15,28 13,91

Composé BB-S483; Acide 7-(3-aminométhyl-2-thiényl-acét-amido)-3-(2-carboxyméthyl-2,3-dihydro-s-triazolo[4,3-b]pyri-dazine-3-one-6-ylthiométhyl)-3-céphem-4-carboxylique (12a)

On ajoute 0,4 ml d'acide trifluoracétique à 410 mg (0,59 mmole) de composé lia à 0 °C et on agite le mélange à la température ambiante pendant 15 minutes. On ajoute au mélange réactionnel 10 ml d'éther anhydre pour séparer un précipité que l'on recueille par filtration, qu'on lave avec deux fois 10 ml d'éther anhydre et qu'on met en suspension dans 10 ml d'acétonitrile. On ajuste le pH de la suspension à 4 par addition d'ammoniaque concentrée et on agite le mélange pendant 10 minutes. On recueille le précipité par filtration, on le lave avec deux fois 5 ml d'acétonitrile et on le sèche à 60 °C sous un vide de 1 mm de mercure pendant 7 heures pour obtenir 310 mg (88%) de composé 12a fondant au-dessus de 200 °C en se décomposant lentement.

Spectre infrarouge: v KBr 3400, 3150,1760,1700, 1680,1600 cm-1

Spectre ultraviolet: X ^}^Pon P^ 7 : 245 nm (e, 17100), 260 nm (e, 14100), 300 nm (e, 6500).

45 Nephrotoxicité:

Une étude préliminaire de nephrotoxicité a été effectuée par administration du composé testé à un groupe de deux lapins par voie intraveineuse de la dose de 100 mg/kg. Les résultats obtenus avec BB-S469 et BB-S479 indiquent que ces composés 50 pourraient avoir un faible potentiel nephrotoxique.

Activité in vitro: (tableau I)

Les concentrations inhibitrices minimales ont été déterminées par les méthodes de dilution en série en utilisant la gélose 55 de Mueller-Hinton, contre 51 bactéries Gram-positives et 96 bactéries Gram-négatives. Les 147 organismes d'essai ont été classés en 16 groupes conformément aux genres et aux types de résistance aux antibiotiques, 5 groupes pour les bactéries Gram-positives et 11 groupes pour les bactéries Gram-négatives. Le 60 tableau I indique l'activité in vitro exprimée par la moyenne géométrique des concentrations inhibitrices minimales. Les composés BB-S472 et BB-S479 ont une meilleure activité globale que leurs analogues respectifs BB-S483 et BB-S469 non méthylés. Le composé BB-S479 est supérieur à BB-S472 pour 65 quelques espèces de bactéries Gram-négatives. Comparativement au céfamandole, le composé BB-S479 est plus actif contre la plupart des organismes d'essai, excepté contre les espèces du genre Providentia et les staphylocoques.

27

627 184

Tableau I

Activité in vitro contre 147 organismes d'essai

Moyenne géométrique des concentrations inhibitrices minimales*

([ig/ml)

Organisme d'essai

Nombre

BB-S469

BB-S472

BB-S478

BB-S479

BB-S483

Céfam-

BL-S786

de

(ex. 1)

(ex. 2)

(ex. 3)

(ex. 4)

(ex. 5)

andole

**

souches

S. aureus (sensible)

4

0,4

0,4

0,4

0,3

0,3

0,1

1,3

S. aureus (pénicillinase+)

13

1,2

0,9

1,0

0,9

1,1

0,4

3,0

S. aureus (Méthicillino-R)

15

30

58

50

35

48

2,4

48

S. pyogenes

10

0,05

0,05

0,04

0,04

0,08

0,04

0,2

D. pneumoniae

9

0,03

0,05

0,03

0,04

0,04

0,2

0,08

E. coli (sensible)

13

0,3

0,2

0,2

0,2

0,3

0,3

0,4

E. coli (pénicillinase+)

7

11

15

10

2,6

21

5,7

9,3

Enterobacter (sensible)

3

1,0

1,3

0,8

0,5

1,3

1,0

1,3

Enterobacter (céphalosporinase'+)

7

4,7

3,2

2,6

2,1

5,2

4,7

7,7

Proteus (indole — )

6

0,6

0,3

0,4

0,5

0,7

0,6

0,9

Proteus (indole+)

14

0,5

0,3

0,3

0,2

0,4

0,5

0,7

Proteus (indole+ , céphalospirinase+)

5

11

8,3

7,3

4,8

17

3,6

29

Providencia sp.

5

4,2

4,8

4,8

4,2

2,1

0,7

1,4

Klebsiella sp.

12

0,9

0,8

0,6

0,6

1,1

2,4

0,8

S. marcescens

16

130

200

40

35

81

34

180

Divers (Salmonella, Shigella,

Citrobacter)

8

0,7

0,4

0,3

0,4

0,9

0,3

0,7

*Gélose Mueller-Hinton (importance de l'inoculum:dilution à 104)

Interruption pour une concentration inhibitrice minimale de 200 [ig/ml.

**BL-S786 est le 7-(2-aminométhylphénylacétamido)-3-(l-carboxyméthyltétrazol-5-ylthiométhyl)-3-céphem-4-carboxylate de sodium.

Exemple 6 xyphénylacétique, d'acide 2-N-tertiobutoxycarbonylaminomé-

En remplaçant dans le mode opératoire de l'exemple 3 l'a- thyl-4-méthoxyphénylacétique et respectivement d'acide 2-N-cide2-N-tertio-butoxycarbonyl-N-méthylaminométhyl-4-hydr- tertiobutoxycarbonyl-N-méthylaminométhyl-4-méthoxyphé-oxyphénylacétique utilisé dans cet exemple par un poids èqui- 35 nylacétique, on obtient les composés respectifs répondant aux molaire d'acide 2-N-tertiobutoxycarbonylaminométhyl-4-hydr- formules suivantes:

ch2nh2

choc0iffl-ch-ch

2 ! i c—n // ^ 0

c,h2

^C-CHgS

c-oh ii

0

= n

.n-^"\^n"gh2c00h et ch2nh2

choc0nh-ch-ch ch_

2 t I 1 2

0

c—n c—ch0s

// 2

c-oh ii

0

.n^\^n~ch2c00h et

627 184

28

CH-,0 D

ch2nhch3

ch7c0nh-ch-ch ch * II I 2

f-Kr*c-cn2s 0 \

c-oh n-ch^cooh

Préparation de BB-S493

Exemple 7

O

"nh-boc cooh

'nh-boc conh r

■n.

.^JK^-N-CHgCOgH

co2h

O

nh2 conh-

y

•r

-n ch2s-

■n

^n^i-ch2co2H

Y

c02h

0

3, BB-S493

Acide 7-[(2-N-tertiobutoxycarbonylaminométhyl-l, 4-cyclo-

hexadiényl)acétamido]-3-(2-N-carboxyméthyl-2-triazolo[4,5-

b]pyridazine-3-one-6-ylthiométhyl)-3-céphem-4-carboxylique

(2)

On agite pendant 1,5 heure à la température ambiante un mélange de 640 mg (2,4 mmoles) d'acide 2-N-tertiobutoxycar-bonylaminométhyl-l,4-cyclohexadiénylacétique 1, de 422 mg (2,4 mmoles) de 2,4-dinitrophénol et de 494 mg (2,4 mmoles) de DCC dans 10 ml de THF anhydre. On enlève par filtration le précipité d'urée. On ajoute le filtrat en une seule portion à une solution d'acide 7-amino-3-(2-N-carboxyméthyl-s-triazole-(4,5-b]pyridazin-3-on-6-ylthiométhyl)-3-céphem-4-carboxyli-que dans 10 ml d'eau contenant 0,56 ml (4 mmoles) de triéthyl-

55 amine et on agite le mélange à la température ambiante pendant 3 heures. On concentre le mélange réactionnel à 10 ml sous pression réduite, on le lave avec trois fois 10 ml d'éther, on l'acidifie avec de l'acide chlorhydrique 6N et on l'extrait avec cinq fois 10 ml d'acétate d'éthyle. Les extraits rassemblés sont 6o lavés avec une solution saturée de chlorure de sodium et déshydratés avec du sulfate de sodium anhydre. Le solvant est évaporé et le résidu est chromatographié sur du gel de silice (30 g de «Wako-gel C-200») en effectuant l'élution avec un mélange de chloroforme et de méthanol (0-50%). Les fractions qui contien-65 nent le produit désiré sont rassemblées. Le solvant est chassé et le résidu est trituré avec un mélange d'éther et de n-hexane en donnant 410 mg (30%) du produit 2, fondant à 110 °C en se décomposant.

29

627 184

Spectre infrarouge, v 1780,1730,1610,1530, 1250,1160 cm-1.

Spectre ultraviolet: on 7 252 nm (e, 19 000),

300 nm (e, 8600), épaulement.

Analyse:

C%

H %

N%

S%

Calculé pour

C29H33N7O9S2 * 2H20

48,12

5,15

13,54

8,86

Trouvé:

48,07

4,64

12,70

8,39

BB-S493; acide 7-[(2-aminométhyl-l,4-cyclohexadiényl)-acét-amido]-3-(2-N-carboxyméthyl-s-triazolo[4,5-b]pyridazine-3-one-6-ylthiométhyl)-3-céphem-4-carboxylique (3).

On traite 350 mg (0,51 mmole) de céphalosporine 2 à fonction amino protégée par un groupe BOC avec 1 ml d'acide tri-fluoracétique (TFA) pendant 30 min à la température ambiante. On ajoute au mélange 50 ml d'éther pour obtenir le sel de TFA du composé 3 que l'on recueille par filtration puis que l'on dissout dans un mélange de 5 ml d'acétonitrile et 2 ml d'eau. On traite la solution par addition d'une petite quantité de

Organisme carbone actif et on ajuste son pH à 6 par addition d'hydroxyde d'ammonium concentré. On recueille le précipité, on le lave avec 5 ml d'acétonitrile et on le sèche sous vide pour obtenir 235 mg (78 %) de composé 3 fondant à 220-230 °C en se dé-5 composant.

Spectre infrarouge: v ^Br 1770,1740,1710,1650, 1600,1550 cm-1.

Spectre ultraviolet: X j^?Pon 7 252 nm (e, 20 000), 300 nm (e, 9000, épaulement).

Analyse:

c%

H%

n%

s%

Calculé pour

c24h25n7o7s2h2o

47,60

4,49

16,19

10,59

Trouvé:

47,77

4,06

16,49

10,64

20

Activité antibactérienne in vitro du composé BB-S493 comparée à l'activité de BB-S479 et du céfamandole (déterminée par la méthode de dilution à la gélose de Steers sur plaque de gélose Mueller-Hinton)

Concentration inhibitrice minimale Og/ml)

BB-S493 BB-S479 Céfamandole

S. aureus Smith S. aureus

S. aureus BX-1633 St. faecalis

A9537 0,4

A9497 0,2

A9606 0,4

A9536 100

0,4 0,1

0,1 0,05

0,4 0,2

100 50

E. coli NIHJ

0,1

0,05

0,025

E. coli ATCC 8739

0,2

0,05

0,05

E. coliJuhl

A15119

0,2

0,1

0,4

E. coli BX-1373

0,4

0,2

0,4

E. coli

A15810

0,2

0,1

0,2

E. coli

A9660

0,1

0,05

0,1

E. coli

AI 5147

6,3

3,1

3,1

Kl. pneumoniae

A9678

0,4

0,4

1,6

Kl. pneumoniae

A9977

0,2

0,1

0,4

Kl. pneumoniae

A15130

0,2

0,1

0,4

Kl. pneumoniae

A9867

0,2

0,1

0,8

Pr. vulgaris

A9436

0,4

0,1

0,2

Pr. vulgaris

A9699

6,3

0,8

25

Pr. mirabilis

A9554

0,2

0,1

0,8

Pr. mirabilis

A9900

0,2

0,1

0,8

Pr. morganii

A9553

>100

>100

>100

Pr. morganii

A20031

0,4

0,1

0,8

Pr. rettgeri

A15167

0,1

0,1

0,1

Ps. aeruginosa

A9930

>100

>100

>100

Ps. aeruginosa

A9843

>100

>100

>100

Shig. dysenteriae

0,05

0,025

0,2

Shig. flexnerie

A9684

25

12,5

3,1

Shig. sonnei

A9516

0,05

0,025

0,05

Serr. marcescens

A20019

100

25

50

Enterob. cloacae

A9656

6,3

1,6

3,1

Sai. enteritidis

A9531

0,1

0,05

0,1

Sai. typhosa

A9498

0,1

0,05

0,1

B. anthracis

A9504

0,0125

0,025

0,2

Activité in vivo de BB-S479 et de c composés apparentés (souris, voie sous-cutanée)

627 184

30

(DP50, mg/kg)

Organisme BB- BB- BB- BB- BB- BB- Céfa- BL-

S469 S472 S478 S479 S483 S493 mandole S786

S. aureus Smith 0,19 0,12 0,08 0,16 0,34 0,29 0,93 0,53

0,16 0,12 0,74 0,55

0,29 0,2 0,6 0,94

0,2 0,8 0,46

0,8 0,6

E. coli Juhl 0,19 0,19 0,08 0,19 0,15 0,27 0,95 0,43

0,24 0,15 1,7 0,55

0,15 0,12 1,8 0,46

2,2 0,39 0,8

Autres matières premières:

6-chloro-2-(2-cyanéthyl)-2,3-dihydro-s-triazolo[4,3-b]pyri-dazine-3-one

On ajoute, en agitant, 0,5 g (4,5 mmoles) de tertiobutylate de potassium à une solution de 17 g (0,1 mole) de 6-chloro-2,3-dihydro-s-triazolo[4,3-b]pyridazine-3-one [P. Francabilla et F. Lauria, «J. Het. Chem. 8,415 (1971)] dans 300 ml de diméthyl-formamide anhydre. On ajoute au mélange 6,6 g (0,12 mole) d'acrylonitrile dans 10 ml de DMF anhydre. On agite le mélange à 100-110 °C pendant 24 heures puis on le verse dans 700 ml d'eau et on l'extrait avec cinq fois 400 ml d'acétate d'éthyle. On rassemble les extraits organiques, on les déshydrate sur du sulfate de sodium et on les évapore. Par cristallisation du résidu dans l'acétate d'éthyle, on obtient des aiguilles de couleur jaune clair de 6-chloro-2-(2-cyanéthyl)-2,3-dihydro-2-triazo-lo[4,3-b]pyridazine-3-one (2,5 g, 11%), fondant à 166-168 °C.

Spectre infrarouge: v 1500 cm-1.

2230,1720,1550,

Spectre ultraviolet: X ^j°£anne

373 nm (e, 2000).

Résonance magnétique nucléaire: ô j^MpO-d6 3 93 (2H, t,

J=6,0 Hz, C2H), 4,21 (2H, t, J=6,0Hz, CH,), 7,23 (1H, d, J= 10,0 Hz, H de pyridazine), 7,93 (1H, d, J= 10,0 Hz, H de pyridazine).

Analyse:

Calculé pour C8H6N5OCl Trouvé:

C% H%

42,97 2,70

42,73 2,57

42,56 2,50

N% Cl%

31,32 15,86

31,36 15,96

31,68 15,81

Spectre infrarouge: K®?

3400-2400,1730,1710,

20

Spectre ultraviolet: X Roxanne 377 nm (e, 1500). Résonance magnétique nucléaire: ô ^2®+NaHC03

2,70

25

(2H, t, J=7,0 Hz, CH2), 4,24 (2H, t, J=7,0 Hz, CH2), 7,17 (1H, d, J=10,0 Hz, H de pyridazine), 7,70 (1H, d, J= 10,0 Hz, H de pyridazine).

Analyse:

Calculé pour C8H7N403C1 Trouvé

C% H%

39,60 2,91

39,62 2,97

39,48 2,67

N% Cl%

23,09 14,61

23,05 13,93

22,70 14,12

2-(2-carboxyéthyl)-2,3-dihydro-6-mercapto-s-triazolo [4,3-b]-pyridazine-3-one

On agite à la température ambiante pendant 2 heures un 35 mélange de 567 mg (2,34 mmoles) de 2-(2-carboxyéthyI)-6-chloro-2,3-dihydro-s-triazolo[4,3-b]pyridazine-3-one et de 924 mg (7,02 mmoles) d'hydrosylfure de sodium dihydraté à 70 % dans 10 ml d'eau. On ajuste le pH du mélange réactionnel successivement à 1 par addition d'acide chlorhydrique concentré, à 4010 par addition d'hydroxyde de sodium puis à 1 par addition d'acide chlorhydrique concentré. On recueille par filtration le précipité formé de 2-(2-carboxyéthyl)-2,3-dihydro-6-mercap-to-s-triazolo[4,3-b]pyridazine-3-one et on le lave à l'eau. Rendement 418 mg (74%) ; point de fusion 174-176 °C.

45

50

Spectre infrarouge: v 3600-2600,2440,1730, 1720 (épaulement) cm-1.

Spectre ultraviolet: X 7 262 nm (e, 17000),

318 nm (e, 6600).

2-(2-carboxyéthyl)-6-chloro-2,3-dihydro-s-triazolo[4,3-b]pyri-dazine-3-one

On fait refluer pendant 6 heures une solution de 724 mg de 6-chloro-2-(2-cyanéthyl)-2,3-dihydro-s-triazolo[4,3-b]pyrid-azine-3-one dans 15 ml d'acide chlorhydrique 6N. On extrait le mélange réactionnel avec dix fois 20 ml d'acétate d'éthyle. Les extraits rassemblés sont lavés avec 50 ml de solution auquese saturée de chlorure de sodium, déshydratés sur du sulfate de sodium et évaporés en donnant 567 mg (72%) de 2-(2-carb-oxyéthyl)-6-chloro-2,3-dihydro-s-triazolo[4,3-b]pyridazine-3-one solide jaune clair fondant au-dessus de 170 °C en se sublimant.

Résonance magnétique nucléaire: p^®®~(*62,73 (2H, t,

J=7,0 Hz, CH2), 4,07 (2H, t, J=7,0 Hz, CH2), 7,30 (1H, d, J=10,0 Hz, H de pyridazine), 7,74 (1H, d, J= 10,0 Hz, H de pyridazine).

60

Analyse:

C%

H %

N %

S%

Calculé pour CgH8N403S

40,00

3,36

23,32

13,35

Trouvé

39,08

3,12

22,65

14,23

39,06

3,20

22,70

14,29

65

1540 cm

Acide 7-amino-3-[2-(2-carboxyéthyl)-2,3-dihydro-s-triazo-lo[4,3-b]pyridazine-3-one-6-ylthiomêthyl]-3-céphem-4-car-boxylique

31

627184

On agite à 80 °C pendant 30 minutes un mélange de 405 mg (1,49 mmole) de 7-ACA, 357 mg (1,49 mmole) de 2-(2-car-boxyéthyl)-2,3-dihydro-6-mercapto-s-triazolo[4,3-b]pyri-dazine-3-one (thiol) et 375 mg (4,47 mmoles) de NaHC03 dans 8 ml de tampon au phosphate 0,1 M (pH 7). On refroidit le mélange réactionnel et on le filtre pour enlever les matières insolubles. On ajuste le pH du filtrat à 1-2 par addition d'acide chlorhydrique concentré. Le précipité résultant, qui consiste en acide 7-amino-3-[2-(2-carboxyéthyl)-2,3-dihydro-s-triazo-lo[4,3-b]-pyridazine-3-one-6-ylthiométhyl]-3-céphem-4-carb-oxylique, est recueilli par filtration et lavé à l'eau. Rendement 519 mg (77%).

Spectre infrarouge: v 3600-2200,1800,1725,

Spectre ultraviolet: X ^^Pon P^ 7 253nm (e, 19800), 298 nm (e, 9400).

5 Résonance magnétique nucléaire: ô 1.37 (9H, s,

hydrogène de tertiobutyle), 2,70 (3H, s, N-CH3), 2,70 (2H, t, J=7,0 Hz, -CH2-), 3,2-4,5 (10H, m), 5,01 (lH,d, J=5 Hz, 6-H), 5,60 (1H, d-d, J=5 et 8 Hz d, le couplage 8 Hz disparaît par addition de D20,7-H), 6,93 (1H, d, J=10 Hz, H de pyri-io dazine), 7,58 (IH, d, J= 10 Hz, H de pyridazine).

-1

1620,1550,1480 cm

Spectre ultraviolet: X ^™Pon PH 7 253 nm (e, 20000), 298 nm (s, 10000).

Résonance magnétique nucléaire: ô 2,20

(2H, t, J=7,0 Hz, CH2), 3,40 (1H, d, J=17,5 Hz, 2-H), 3,85 (1H, d, J= 17,5 Hz, 2-H), 4,00-4,50 (4H, m, 3-CH2 et N-CH2-), 5,01 (1H, d, J=4,0 Hz, 6-H), 5,40 (1H, d, J=4,0 Hz, 7-H), 6,94 (1H, d, J= 10,0 Hz, H de pyridazine), 7,44 (1H, d, J= 10,0 Hz, H de pyridazine).

Analyse:

Calculé pour 15 C3IH35N709S2 • 5/2H20 Trouvé

C % H % N % S %

49,08 5,31 12,92 8,45

49,32 4,70 12,52 8,44

49,36 4,63 12,53 8,43

Analyse:

Calculé pour C16H16N606S2.3/2H20 Trouvé

C % H % N % S %

40,09 40,06 40,12

3,99

3.33

3.34

17,52 16,96 16,98

13,37 13,87 13,98

On rappelle que 7-ACA désigne l'acide 7-aminocéphaIo-sporanique et que DMF désigne le diméthylformamide.

Exemple 8

Acide 7-[o-(N-butoxycarbonyl-N-méthylaminométhyl)phényl-

acétamidai]-3-[2-(2-carboxoyéthyl)-2,3-dihydro-s-triazolo[4,3-

b]pyridazine-3-one-6-ylthiométhyl]-3-céphem-4-carboxylique.

On ajoute à un mélange de 452 mg (1 mmole) d'acide 7-amino-3-[2-(2-carboxyéthyl)-2,3-dihydro-s-triazolo[4,3-b]-pyridazine-3-one-6-ylthiométhyl]-3-céphem-4-carboxyliqueet de 0,46 ml (3,3 mmoles) de triéthylamine dans 4 ml d'acétonitrile ayueux à 50%, 3 ml de solution dans le tétrahydrofuranne de o-(N-tertiobutoxycarbonyl-N-méthylaminométhyl)phényl-acétate de 2,4-dinitrophényle obtenu à partir de 283 mg (1,1 mmole) d'acide o-(N-tertiobutoxycarbonyl-N-méthylaminomé-thyl)phénylacétique, 202 mg (1,1 mmole) de 2,4-dinitrophénol et 227 mg (1,1 mmole) de DCC. On agite le mélange à la température ambiante pendant environ 18 heures et on le concentre sous pression réduite pour chasser les solvants organiques. Le concentré aqueux est lavé avec trois fois 20 ml d'éther, acidifié à un pH égal à 2-2 par addition d'acide chlorhydrique concentré et extrait cinq fois avec 20 ml d'acétate d'éthyle. Les extraits rassemblés sont déshydratés sur du sulfate anhydre de sodium et évaporés à sec. Le résidu est chromatographié sur une colonne de gel de silice (Gel «Wako» C-200,10 g) par élution avec un mélange de méthanol et de chloroforme (MeOH- 0 à 3 %). Les éluats rassemblés qui contiennent le produit désiré sont évaporés en donnant 359 mg (50%) du composé indiqué dans le titre, fondant au-dessus de 150 °C en se décomposant.

Spectre infrarouge: v 3600-2400,1780,1720, 1680,1550,1490 cm-1.

BB-S525; acide 7-[o-(N-méthylaminométhyl)phénylacétami-20 do]-3-[2-(2-carboxyéthyl)-2,3-dihydro-s-triazolo [4,3-b]pyri-dazine-3-one-6-ylthiométhyl]-3-céphem-4-carboxylique

On laisse reposer à la température ambiante pendant 15 minutes un mélange de 1 ml d'acide trifluoracétique et de 302 mg (0,42 mmole) de la céphalosporine à groupe BOC protec-25 teur préparée comme indiqué ci-dessus, puis on dilue ce mélange avec 10 ml d'éther. Le précipité résultant est recueilli par filtration et lavé avec deux fois 10 ml d'éther anhydre, ce qui donne 263 mg d'une substance solide que l'on dissout dans un mélange de 6 ml d'eau et de 3 ml d'acétonitrile. Le pH de la 30 solution agitée est ajusté à 4 par addition de 0,36 ml d'hydroxyde de sodium IN et cette solution est diluée avec 100 ml d'acétonitrile, ce qui donne 187 mg de précipité que l'on met en suspension dans 4 ml d'eau en ajustant le pH de la suspension à 9 par addition de 0,3 ml d'hydroxyde de sodium IN. On traite la 35 solution avec une petite quantité de carbone actif et on la lyo-philyse pour obtenir le sel monosodique de BB-S525. Rendement: 106 mg (39%), point de fusion, supérieur à 180 °C (décomposition).

«o Spectre infrarouge: v ™? 3600-2400,1770,1710, 1600,1490,1400 cm"

Spectre ultraviolet: X tampon pH7 253 nm (e, 19800),

298 nm (e, 8800).

Résonance magnétique nucléaire: ô 2,70 (2H, m,

-CH2-), 2,75 (3H, s, N-CH3), 4,4-3,4 (10H, m), 4,92 (1H, d, so J=4,0 Hz, 6-H), 5,55 (1H, d, J=4,0 Hz, 7-H), 6,93 (1H, d, J=9,5 Hz, H de pyridazine), 7,28 (4H, s, H phénylique), 7,40 (1H, d, J=9,5 Hz, H de pyridazine).

55 Analyse:

Calculé pour C26H26N707S2.Na.3H20 Trouvé

C % H % N % S %

45,28 4,68 14,22 9,30

45,34 4,01 14,14 9,76

44,84 3,85 14,08

60

65

Activité antibactérienne in vitro de BB-S525 comparée à l'activité de BB-S479 et du céfamondole (déterminée par la méthode de dilution à la gélose de Steers sur plaque de gélose Mueller-Hin-ton).

627184

32

Organisme

Concentration inhibitrice minimale (ixg/ml)

BB-S525 BB-S479 Sfamandole

S. aureus Smith

0,4

0,4

0,2

S. aureus

0,2

0,2

0,05

S. aureus BX-1633

0,8

0,8

0,2

St. faecalis

>100

>100

100

E. coli NIHJ

0,2

0,1

0,1

E. coli ATCC 8739

6,3

3,1

6,3

E. coli Juhl

0,4

0,2

0,4

E. coli BX-1373

0,4

0,2

0,2

E. coli

0,2

0,1

0,1

E. coli

0,2

0,05

0,05

E. coli

6,3

3,1

1,6

Kl. pneumoniae

1,6

0,8

3,1

Kl. pneumoniae

0,2

0,1

0,2

KI. pneumoniae

0,2

0,2

0,8

Kl. pneumoniae

0,2

0,2

0,8

Pr. vulgaris

0,2

0,2

0,2

Pr. vulgaris

3,1

0,8

50

Pr. mirabilis

0,4

0,1

0,4

Pr. mirabilis

0,2

0,1

0,2

Pr. morganii

>100

>100

3,1

Pr. morganii

0,2

0,2

0,8

Pr. rettgeri

0,8

0,8

0,1

Ps. aeruginosa

>100

>100

>100

Ps. aeruginosa

>100

>100

>100

Shig. dysenteriae

0,1

0,1

0,1

Shig. flexneri

12,5

12,5

3,1

:Shig. sonnei

0,1

0,1

0,2

Serr. marcescens

25

12,5

50

Enterob. Cloacae

3,1

3,1

1,6

Sai. enteritidis

0,2

0,1

0,1

Sai. Typhosa

0,2

0,1

0,1

B. anthracis

0,2

0,2

0,05

15

Exemple 9

En remplaçant dans le mode opératoire de l'exemple 8 l'acide 2-N-tertiobutoxycarbonyl-N-aminométhyl-4-hydroxyphé-20nyl-acétique utilisé dans cet exemple par un poids équimolaire d'acide 2-N-tertiobutoxycarbonylaminométhyl-4-hydroxyphé-nyl-acétique, d'acide 2-N-tertiobutoxycarbonylaminométhyl-4-méthoxyphénylacétique et respectivement d'acide 2-N-tertio-butoxycarbonyl-N-méthyIaminométhyl-4-méthoxyphénylacéti-25 que, on obtient les composés répondant aux formules respectives suivantes:

HO.

CH2NH2

C H -,C QNH -C K - C K CH_ 1 II I 2

/-^^C-CK2S

0

C-OH

ii

0

■ K Ì

jj^r^^N-CH-jCI^COOH 0

et ciï-o.

,CH2NH2

CKoCONK-CH-CH 2 I I C—N

c,h2

^c-cs2s

C-OH

II

0

-K i

et

CH^O CH2NKCH3

^^ch .... ,. ,

II i 2 II I

^C-CH2S

CH,CCNH-CH-CK CK, f^^Y' K

0

C-CH

II

0

C

Claims (10)

1. 627184

   2

   REVENDICATIONS 1. Procédé de préparation d'un composé de formule

   ï^-KK-CK-CH

   k-(ck2)nc0ck dans laquelle n est égal à 1 ou 2 et R1 représente un groupe de formule

   (I)

   ch2nhr1

   ch->co-

   ou ch2nhr1

   ch2co-

   ou

   CHpKHR1

   ch2co-

   où R est un atome d'hydrogène ou un groupe hydroxy ou mé- 2s 3. Procédé suivant la revendication 1, caractérisé par le fait thoxy ; R' est un atome d'hydrogène ou un groupe méthyle et R2 que l'ester aisément hydrolysable obtenu de formule I est trans-est un atome d'hydrogène, le cation d'un sel ou un groupe ester ' formé en l'acide libre correspondant de formule I.

   hydrolysable acceptable du poiut de vue pharmaceutique, ou 4. Procédé suivant la revendication 1 et 2, caractérisé par le d'un sel non toxique acceptable du point de vue pharmaceutique fait que l'acide libre obtenu de formule I est transformé en un de ce composé, procédé caractérisé par le fait qu'il consiste à faire réagir un composé de formule y-nh-ch-

   //

   -ck ch2

   l i

   -n

   0

   11

   c-ch20-c-ch3 (n) cocr

   30 ester choisi entre les esters de pivaloyloxyméthyle, d'acétoxy-méthyle, de méthoxyméthyle, d'acétonyle, de phénacyle, de p-nitrobenzyle, de ß,ß,ß-trichIorethyIe, de 3-phtalidyle et de 5-indanyle.
2. 5. Procédé suivant l'une des revendications 1 à 4, caractérisé 35 en ce que R1 est un groupe de formule

   H2INKPJ

   40

   \\ CÏI2C0-

   dans laquelle Y est un atome d hydrogéné ou un groupe R1 et R2 , , „ _ ^ , ,,, , , ,
3. n . . , , , " , dans laquelle R est un atome d hydrogéné, un groupe hydroxy sont comme définis ci-dessus, avec un compose de formule iT,, _ x .

   r ou methoxy et R est un atome d hydrogéné ou un groupe me-

   45 thyle.
4. 6. Procédé suivant l'une des revendications 1 à 4, caractérisé r N en ce que R1 est un groupe de formule
5. N. ^N-(CH2)nC0CH (in)

   hs-

   so dans laquelle n est égal à 1 ou 2 et Y est un atome d'hydrogène à traiter le composé résultant avec un agent acylant de formule

   R1—X

   dans laquelle X est un atome d'halogène ou un équivalent fonctionnel et R1 a la définition donnée ci-dessus et, le cas échéant, à transformer l'acide libre ou le sel ainsi obtenu du composé de formule I en un sel non toxique acceptable du point de vue pharmaceutique correspondant, et à transformer éventuellement un sel résultant d'un composé de formule I en l'acide libre correspondant de formule I.
6. 2. Procédé suivant la revendication 1, caractérisé par le fait que l'acide libre ou l'ester aisément hydrolysable obtenu du composé de formule I est transformé en un ester non toxique et acceptable du point de vue pharmaceutique.

   .ch2rjhr'

   55

   ch2co—

   dans laquelle R' est un atome hydrogène ou un groupe méthyle.
7. 7. Procédé suivant l'une des revendications 1 à 4, caractérisé en ce que R1 est un groupe de formule

   60

   !Uf,

   co-

   65

   dans laquelle R' est un atome d'hydrogène et un groupe méthyle.

   3

   627 184
8. 8. Procédé selon la revendication 5, caractérisé en ce que R est hydrogène, hydroxy ou méthoxy.
9. 9. Procédé selon les revendications 5 à 7, caractérisé en ce que R' est hydrogène ou un groupe méthyle.
10. 10. Procédé selon la revendication 1, dans lequel n est égal à un ou deux.