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PATENTANSPRÜCHE
1. Verfahren zur Herstellung von Dipeptidderivaten der Formel 11,
EMI1.1
worin
R1 für die Cyanogruppe oder für -COX, wobei X die Aminogruppe oder einen -O-(nieder)-Alkylrest bedeutet, steht,
R2 niederes Alkyl bedeutet,
R3 für Wasserstoff oder niederes Alkyl steht,
R4 für Wasserstoff, niederes Alkyl, Phenyl, Benzyl oder für durch niederes Alkoxy monosubstituiertes Benzyl steht, R5 Wasserstoff oder niederes Alkyl bedeutet und
R6 für einen Pentafluor- oder Pentachlorphenoxy-, einen N-Succinimidoxy-, einen Phenylthio- oder p-Chlorphenylthiorest oder einen gegebenenfalls durch Nitro und/oder Methyl oder Chlor mono- oder disubstituierten Nitrophenoxyrest steht, dadurch gekennzeichnet,
dass man Verbindungen der Formel III,
EMI1.2
worin R1 bis R5 obige Bedeutung besitzen und R7 Wasserstoff oder Benzyl bedeutet, debenzyliert und die erhaltene freie Säure der Formel IV,
EMI1.3
worin die Variablen R1, R2, R3, R4 und R5 obige Bedeutung besitzen, a) mit einer Verbindung der Formel V,
R6H V worin R6 obige Bedeutung besitzt, oder b) mit einer Verbindung der Formel Va,
EMI1.4
worin R6 obige Bedeutung besitzt, umsetzt.
2. Verwendung der nach dem Verfahren gemäss Patentanspruch 1 erhaltenen Verbindungen der Formel II zur Herstellung von Octahydro-oxazolo-[3 ,2-a]-pyrrolo-[2, t-cj-pyrazin- derivaten der Formel 1,
EMI1.5
wonn
R1 für die Cyanogruppe oder für -COX, wobei X die Aminogruppe oder einen -O-(nieder)-Alkylrest bedeutet, steht,
R2 niederes Alkyl bedeutet,
R3 für Wasserstoff oder niederes Alkyl steht,
R4 für Wasserstoff, niederes Alkyl, Phenyl, Benzyl oder für durch niederes Alkoxy monosubstituiertes Benzyl steht und R5 Wasserstoff oder niederes Alkyl bedeutet, dadurch gekennzeichnet, dass man Verbindungen der Formel II, worin R1, R2, R3, R4, Rs und R6 obige Bedeutung haben, einer intramolekularen Kondensationsreaktion unterwirft.
Die Erfindung betrifft ein Verfahren zur Herstellung von Dipeptidderivaten der Formel II,
EMI1.6
worin
R1 für die Cyanogruppe oder für WOX, wobei X die Aminogruppe oder einen -O-(nieder)-Alkylrest bedeutet, steht,
R2 niederes Alkyl bedeutet,
R3 für Wasserstoff oder niederes Alkyl steht,
R4 für Wasserstoff, niederes Alkyl, Phenyl, Benzyl oder für durch niederes Alkoxy monosubstituiertes Benzyl steht, R5 Wasserstoff oder niederes Alkyl bedeutet und
R6 für einen Pentafluor- oder Pentachlorphenoxy-, einen N-Succinimidoxy-, einen Phenylthio- oder p-Chlorphenylthiorest oder einen gegebenenfalls durch Nitro und/oder Methyl oder Chlor mono- oder disubstituierten Nitrophenoxyrest steht, dadurch gekennzeichnet,
dass man Verbindungen der Formel III,
EMI1.7
worin R, bis R5 obige Bedeutung besitzen und R7 Wasser
stoff oder Benzyl bedeutet, debenzyliert und die erhaltene freie Säure der Formel IV,
EMI2.1
worin die Variablen R1, R2, R3, R4 und R5 obige Bedeutung besitzen, a) mit einer Verbindung der Formel V,
R6H V worin R5 obige Bedeutung besitzt, oder b) mit einer Verbindung der Formel Va,
EMI2.2
worin R6 obige Bedeutung besitzt, umsetzt.
Die Verbindungen der Formel II werden verwendet zur Herstellung von Octahydro-oxazolo-[3,2-al-pyrrolo-[2, 1 -cl- pyrazinderivaten der Formel I,
EMI2.3
wonn
R1 für die Cyanogruppe oder für WOX, wobei X die Aminogruppe oder einen -O-(nieder)-Alkylrest bedeutet, steht,
R2 niederes Alkyl bedeutet,
R3 für Wasserstoff oder niederes Alkyl steht,
R4 für Wasserstoff, niederes Alkyl, Phenyl, Benzyl oder für durch niederes Alkoxy monosubstituiertes Benzyl steht und R5 Wasserstoff oder niederes Alkyl bedeutet, indem man Verbindungen der Formel II, worin R1, R2, R3, R4, R5 und R6 obige Bedeutung haben, einer intramolekularen Kondensationsreaktion unterwirft.
Der O-(nieder)-Alkylrest des für R1 definierten -COX kann beispielsweise 1-6 Kohlenstoffatome, vorzugsweise 1 bis 4 Kohlenstoffatome und insbesondere 1 oder 2 Kohlenstoffatome, enthalten.
Die für R2, R3 und R5 genannten niederen Alkylgruppen setzen sich beispielsweise aus bis zu 5 Kohlenstoffatomen, vorzugsweise auf 1-4 Kohlenstoffatomen, zusammen.
Stehen R3 sowie R5 für niedere Alkylgruppen, so bedeuten diese insbesondere die Methylgruppe.
Die bei der Definition von R4 genannte niedere Alkylgruppe kann beispielsweise aus bis zu 6 Kohlenstoffatomen, vorzugsweise aus 1-4 Kohlenstoffatomen zusammengesetzt sein. Die als möglicher Substituent einer Benzylgruppe R4 angeführte (nieder)-Alkoxygruppe enthält vorzugsweise 1 bis 4 Kohlenstoffatome und steht insbesondere für die Methoxygruppe.
Vorzugsweise verwendet man für die Reaktion Verbindungen der Formel II, die als Gruppe R6 einen o,p-Dinitrophenoxy-, einen o-Methyl-o',p-dinitrophenoxy-, einen Pentachlorphenoxy- oder insbesondere einen p-Nitrophenoxyrest enthalten.
Die Cyclisierung gemäss dem Verfahren vorliegender Erfindung ist in entscheidendem Masse abhängig von dem gewählten Lösungsmittel, der Temperatur, dem Verdünnungsgrad sowie der Basenstärke; diese Variablen beeinflussen sich gegenseitig.
So ist die Wahl der Basen bzw. die Basenstärke insbesondere von dem gewählten Lösungsmittel abhängig: während in wasserfreiem, aprotischem Medium starke Basen eingesetzt werden können, wird die Cyclisierung in wässrigem Medium zweckmässig unter schonenden Bedingungen durchgeführt, da sonst die Verbindungen der Formel I direkt zu den entsprechenden Verbindungen der Formel I, in denen R1 für die Carboxyl-Gruppe steht, verseift werden und die Säuren sehr schwer aus dem Reaktionsgemisch isoliert werden können.
Die erfindungsgemässe Cyclisierung wird zweckmässig in einem polaren Lösungsmittel durchgeführt.
Geeignete aprotische, polare Lösungsmittel sind beispielsweise Dimethylsulfoxid, Hexamethylphosphorsäuretrisamid, Acetonitril, di-(nieder)-Alkylamide organischer Carbonsäure wie Dimethylformamid usw.
Starke Basen, die bei der Cyclisierung in wasserfreiem, aprotischem Medium eingesetzt werden können, sind Basen, die das dem > CR3R4 benachbarte Stickstoffatom entprotonisieren können und nicht mit Carbonylgruppen in Reaktion treten, z. B. Alkalimetallhydride wie Natriumhydrid, Alkalimetallalkoholate wie Natriumäthylat usw. Bei Verwendung eines Alkalimetallalkoholates als Base wird, falls X für niederes Alkoxy steht, zweckmässig das dem Alkohol HX entsprechende Alkoholat eingesetzt (sonst Umesterung). Aus einem ähnlichen Grund (Umsetzung R1 = COO-(nieder)-Alkoxy zu R1 = CONH2) werden dann zweckmässig auch keine Alkalimetallamide als Base eingesetzt. Man verwendet bei dieser Verfahrensvariante vorteilhaft 1 bis 1,5 Mol einer starken Base pro Mol Verbindung der Formel II.
Bei der Cyclisierung in wässrigem Medium werden zweckmässig Lösungsvermittler eingesetzt.
Geeignete, unter den Reaktionsbedingungen inerte, mit Wasser mischbare Lösungsmittel sind z. B. Dimethylsulfoxid, Dimethoxyäthan, offenkettige oder cyclische Äther wie Dioxan oder Tetrahydrofuran, di-(nieder)-Alkylamide organischer Carbonsäure wie Dimethylformamid usw.
Aus den oben erwähnten Gründen wird die erfindungsgemässe Cyclisierung in wässrigem Medium unter schwach basischen Bedingungen, insbesondere bei einem pH-Wert von 8 bis 10, durchgeführt.
Als wässrige Pufferlösung ist z. B. eine Borat-, Carbonatoder Phosphatlösung mit Hydroxylionen geeignet. Besonders geeignet ist die Verwendung eines Boratpuffers (pH = 9) unter Zugabe katalytischer Mengen von 2-Hydroxypyridin.
Gute Resultate werden mit einer Reaktionstemperatur zwischen etwa 0 und 30 erreicht. Man arbeitet vorteilhaft bei Raumtemperatur und, falls in wasserfreiem Medium gearbeitet wird, unter Rühren.
Die Reaktionszeit ist von den übrigen Reaktionsbedingungen und von der Bedeutung der Substituenten in der Formel II abhängig: sie kann zwischen etwa 1-10 Stunden variieren.
Die Aufarbeitung der erhaltenen Reaktionsgemische zur Isolierung der gewünschten Endprodukte kann auf an sich bekannte Weise erfolgen, beispielsweise durch Extraktion und gegebenenfalls anschliessende Chromatographie.
Die Ausgangsverbindungen der Formel II sind neu, ihre Herstellung bildet ebenfalls einen Teil der vorliegenden Erfindung.
Man gelangt zu den Verbindungen der Formel II, indem man eine Säure der Formel
EMI3.1
worin die Variablen R1 bis Rs obige Bedeutung besitzen, mit einer Verbindung der Formel
R6H worin R6 obige Bedeutung besitzt, oder mit einer Verbindung der Formel
EMI3.2
worin R6 obige Bedeutung hat, umsetzt.
Die Umsetzung der Verbindungen der Formel IV mit den Verbindungen der Formel V oder Va kann nach an sich bekannten Methoden erfolgen. Die Umsetzung mit einer Verbindung der Formel V wird beispielsweise in Gegenwart von Dicyclohexylcarbodiimid durchgeführt. Man verwendet vorzugsweise einen Überschuss an Verbindungen der Formel V.
Die Umsetzung mit einer Verbindung der Formel Va erfolgt beispielsweise in Gegenwart einer schwachen tertiären organischen Base wie Pyridin oder dessen Homologen.
Die so erhaltenen Verbindungen der Formel II können in an sich bekannter Weise aus dem Reaktionsgemisch isoliert werden.
Die Verbindungen der Formel IV, die ebenfalls neu sind, erhält man erfindungsgemäss, indem man Verbindungen der Formel
EMI3.3
worin die Variablen R1 bis Rs obige Bedeutung besitzen und R, Wasserstoff oder Benzyl bedeutet, debenzyliert.
Die Debenzylierung der Verbindungen der Formel III kann nach an sich bekannten Methoden erfolgen. Die hydrogenolytische Abspaltung der Benzylgruppe(n) wird vorzugsweise durch Hydrierung in Gegenwart eines Edelmetallkatalysators, vorzugsweise mit Palladium, auf einem geeigneten Träger wie Kohle durchgeführt. Als Lösungsmittel sind z. B. Eisessig oder Äthanol oder ein Gemisch beider Lösungsmittel, jedoch vorzugsweise Essigester, insbesondere für die Debenzylierung von Verbindungen der Formel III, worin R2 eine Isopropylgruppe bedeutet, geeignet.
Verbindungen der Formel III können beispielsweise wie folgt erhalten werden: Ein Tartronsäurederivat der Formel
EMI3.4
worin R1 und R2 obige Bedeutung besitzen, oder der Formel
EMI3.5
worin R1 und R2 obige Bedeutung besitzen und Z für eine aktive Säurekomponente, z. B. Halogen, vorzugsweise Chlor, steht, wird mit einem Aminosäurebenzylester der Formel
EMI3.6
worin R3 und R4 obige Bedeutung besitzen, nach in der Peptidchemie üblichen Methoden, z. B. mittels Carbodiimidsynthese für Verbindungen der Formel VI oder bevorzugt in Gegenwart von N-Äthyldiisopropylamin, in Anwesenheit eines geeigneten Lösungsmittels, wie beispielsweise Methylenchlorid/Dioxan oder Dimethoxyäthan, kondensiert.
Hierauf spaltet man aus einer entstandenen Verbindung der Formel
EMI3.7
worin die Variablen R1 bis R4 sowie R, obige Bedeutung besitzen, die Benzyl-Schutzgruppe(n), d. h. wahlweise Ester Benzyl und gegebenenfalls vorhandenes Äther-Benzyl gleichzeitig oder gegebenenfalls selektiv nur Ester-Benzyl, nach an sich bekannten Methoden hydrogenolytisch ab, vorzugsweise durch katalytische Hydrierung mit Palladium auf Kohle, z. B.
in Eisessig oder Äthanol oder einem Gemisch beider Lösungs mittel, jedoch bevorzugt in Essigester, insbesondere für eine Verbindung der Formel IX, worin R2 eine Isopropylgruppe bedeutet, und kondensiert die erhaltene freie Säure der Formel
EMI3.8
worin die Variablen R1 bis R4 und R, obige Bedeutung besitzen, mit einer Verbindung der Formel
EMI4.1
worin R5 obige Bedeutung hat, nach in der Peptidchemie üblichen Methoden, z. B. mittels Carbodiimidsynthese, in Gegens wart eines geeigneten Lösungsmittels, wie z. B. Methylenchlorid, Dioxan oder Dimethoxyäthan, bei Raumtemperatur, wobei vorteilhaft zur Vermeidung möglicher Racemisierung 1-Hydroxybenztriazol in mindestens äquimolarer Menge zugesetzt werden kann.
Ein Teil der erfindungsgemäss hergestellten Verbindungen der Formel list neu. Die neuen Verbindungen sind in der nachfolgenden Tabelle angeführt: Formel Verbindungen der Formel I
R1 R2 R3 R4 Rs Ia CN o. Bed. o. Bed. o. Bed. o. Bed.
CONH2 Ib COOAlkyl* o. Bed.* o. Bed. H, Alkyl, Phenyl, Alkyl
Alkoxybenzyl Ic COOAlkyl Alkyl mit o. Bed. Benzyl CH3 mehr als 1C Id COOAlkyl CH3 Alkyl Benzyl CH3 Ie COOAlkyl CH3 H Benzyl Alkyl mit mehr als
1C If COOAlkyl Alkyl Alkyl (nieder)Alkoxy- H benzyl Ig COOAlkyl Alkyl mit H (nieder)Alkoxy- H mehr als benzyl
2C Ih COOAlkyl CH3 H Benzyl durch H (nieder)Alkoxy mit mind. 2 C monosubst., o-Methoxybenzyl m-Methoxybenzyl Ik COOCH3 CH3 H p-Methoxybenzyl H oder
COOAlkyl (Alk=nied.
Alkyl mit mind. 3 C) * o. Bed.; die in Anspruch 1 für diesen Subst. angegebene Bedeutung Alkyl steht jeweils für (nieder)Alkyl
Die Synthese von Verbindungen der Formel list im Hinblick auf die synthetische Darstellung von Peptidalkaloiden des Mutterkorntypus von Bedeutung. In den Verbindungen der Formel I kann der Rest R1 = COO-(nieder)-Alkyl nach an sich bekannten Methoden in eine Aminogruppe umgewandelt werden. Die Umwandlung der Verbindungen der Formel I, worin R1 für die Carboxamido- oder Cyanogruppe steht, in die entsprechenden Aminoverbindungen kann ebenfalls nach an sich bekannten Methoden durchgeführt werden. Auch die Umsetzung der Salze der 2-Amino-Derivate der Verbindungen der Formel I mit Lysergsäure oder Derivaten davon kann nach an sich bekannten Methoden durchgeführt werden.
In pharmakodynamischer Hinsicht weisen diese Peptidalkaloide bekanntermassen zentrale Effekte auf und beeinflussen zentrale wie auch periphere Kreislaufparameter; beispielsweise zeigen sie serotoninantagonistische, gefässtonisierende und a-rezeptorblockierende Aktivität.
Die Ausgangsverbindungen sind entweder bekannt oder können nach an sich bekannten oder analog zu den hier oder analog zu an sich bekannten Methoden hergestellt werden.
In den nachfolgenden Beispielen, welche die Ausführung des Verfahrens illustrieren sollen, erfolgen alle Temperaturangaben in Celsiusgraden.
Beispiel 1
2 -Carbäthoxy-2-methyl-5-benzyl- 1 Ob-hydroxy3, 6dioxo- octahydro-SH-oxazolo-[3 ,2-aj-pyrrolo-[2, 1 -ci-pyrazin
10,54 g (20 m Mol) N-(2R-2-Hydroxy-2-carbäthoxypropionyl)-L-phenylalanyl-L-prolin-p-nitrophenylester in 250 ml abs. Dimethylformamid werden bei Raumtemperatur mit 5 g Linde-Molekularsieb (3 ) versetzt und 15 Minuten gerührt. Dann trägt man 25 mMol Natriumhydrid (z. B.
950 mg einer 63 %igen öligen Suspension) ein und rührt unter Feuchtigkeitsausschluss noch 2 Stunden bei Raumtemperatur.
Zur Aufarbeitung wird ein Grossteil des Lösungsmittels im Hochvakuum abdestilliert, der Rückstand unter starker Kühlung mit ca. 50 ml Äthanol zersetzt und sofort in gekühlte 1n Sodalösung gegossen. Das Reaktionsgemisch wird gut mit Chloroform extrahiert und 2mal mit 1n Sodalösung gewaschen.
Nach Trocknen über Natriumsulfat und Abdampfen des Lösungsmittels erhält man ein kristallines Rohprodukt, aus welchem die Titelverbindung in Form farbloser Nadeln durch Kristallisation aus Isopropyläther gewonnen wird; Smp. 134 bis 136 , [ai020=-25,2 (c= 1,5 in Äthanol).
Der als Ausgangsmaterial verwendete N-(2R-2-Hydroxy 2-carbäthoxy-propionyl)-L-phenylalanyl-L-prolin-p-nitro- phenylester wird beispielsweise wie folgt hergestellt: a) N-(2R-2-Benzyloxy-2-carbäthoxy-propionyl)-L-phenyl alaninbenzylester
12,75 g (50 m Mol) L-Phenylalaninbenzylester in 250 ml abs. Methylenchlorid werden bei 0 mit 12,9 ml (75 m Mol) N-Äthyl-diisopropylamin versetzt. Anschliessend tropft man unter Rühren eine Lösung von 13,5g (50 mMol) S-(+)-Methyl-benzyloxy-malonsäuremonoäthylesterchlorid in 50 ml abs. Methylenchlorid zu und rührt 1 Stunde bei 0 weiter. Zur Aufarbeitung wird das Reaktionsgemisch kalt mit gesättigter Natriumbicarbonat-Lösung gewaschen.
Durch Nachextraktion mit Methylenchlorid, Trocknen über Natriumsulfat und Eindampfen des Lösungsmittels erhält man die Titelverbindung als öligen Rückstand, der sofort weiterverarbeitet wird.
[alD20 = + 390 (c = 2, Chloroform).
b) N- (2R-2-Hydroxy-2-carbäthoxy-propionyl)
L-phenylalanin
Zur Abspaltung der Benzyl-Schutzgruppen wird der in Stufe a) erhaltene ölige Rückstand in 450 ml Essigester gelöst und mit 10 g Palladium-Kohle (10% Palladium-Katalysator) bei Normaldruck und Raumtemperatur hydriert. Nach 8 bis 16 Stunden sind ca. 2,2 1 Wasserstoff verbraucht. Man filtriert und erhält nach Einengen des Filtrates die Titelverbindung als farbloses Harz.
Brucinsalz: Aus abs. Essigester, Smp. 110-112"; [alD20 =f 29,8" (c= 1, Chloroform).
c) N-(2R-2-Hydroxy-2-carbäthoxy-propionyl)-L-phenyl alanyl-L-prolinbenzylester
14 g des in Stufe b) erhaltenen Harzes werden in 300 ml Essigester bei Raumtemperatur gelöst und nach Zugabe von 13,5 g (0,1 Mol) 1-Hydroxy-benztriazol (trocken oder angefeuchtet) 10 Minuten gerührt. In die fast klare Lösung trägt man dann 10,3 g (50 mMol) Dicyclohexylcarbodiimid ein und rührt weitere 10 Minuten. Zuletzt tropft man 10,3 g (50 mMol) L-Prolinbenzylester in 50 ml Essigester innert 5 Minuten zu und rührt noch 90 Minuten. Nach Filtration des Niederschlages wird das Filtrat eingedampft und der Rückstand in Äther aufgenommen, um letzte Spuren von Dicyclohexylcarbodiimid durch Kristallisation zu entfernen. Das Filtrat wird mit kalter in Salzsäure, Natriumbicarbonat-Lösung und Eiswasser gewaschen.
Nach Trocknen über Natriumsulfat und Abdestillieren des Lösungsmittels verbleibt die Titelverbindung als ein harziger Rückstand.
d) N-(2R-2-Hydroxy-2-carbäthoxy-propionyl)-L-phenyl alanyl-L-prolin
Der unter c) erhaltene Ester wird in 300 ml Essigester gelöst und wie in Stufe b) beschrieben mit 5 g Palladium-Kohle (10% Palladium) hydriert. Nach gleicher Aufarbeitung erhält man ein farbloses Harz, das als solches in der nächsten Stufe weiterverarbeitet wird.
e) N-(2R-2-Hydroxy-2-carbäthoxy-propionyl)-L-phenyl alanyl-L-prolin-p-nitrophenylester
16,5 g der unter c) erhaltenen Säure werden in 400 ml Essigester gelöst und der Reihe nach mit 13,9 g (0,1 Mol) p-Nitrophenol und 10,3 g (0,05 Mol) Dicyclohexylcarbodiimid versetzt. Nach 1 Stunde Rühren bei Raumtemperatur wird filtriert und das Filtrat eingedampft. Der Rückstand wird in Chloroform gelöst und mit 1n Sodalösung und Natriumbicarbonat-Lösung gründlich gewaschen. Nach Trocknen über Natriumsulfat und Eindampfen des Lösungsmittels kristallisiert die zunächst ölige Titelverbindung aus Methylenchlorid/ Isopropyläther. Man erhält gelbliche Kristalle, die zur weiteren Reinigung in Essigester gelöst werden. Man filtriert vom unlöslichen Bestandteil, dampft schonend ein und kristallisiert wieder aus Isopropyläther.
Nach Trocknen bei 60 im Hochvakuum werden leicht gelbliche Kristalle erhalten vom Smp.
121-123 , [alD2 =-60 (c = 1, Chloroform).
Beispiel 2
2-Carbäthoxy-2-methyl-5-benzyl- 1 Ob-hydroxy-3,6-dioxo octahydro-8H-oxazolo-[3 ,2-a]-pyrrolo-[2, 1 -c-pyrazin
Man verfährt analog zu Beispiel 1 und erhält durch Cyclisierung von N-(2R-2-Hydroxy-2-carbäthoxy-propionyl) L-phenylalanyl-L-prolin-2,4-dinitrophenylester (Smp. 152 bis 155 aus Äther; [a1020=-640 [c= 1, Chloroform]) die Titelverbindung vom Smp. 1341360, [a1n20=-25,20 (c= 1,5 in Äthanol).
Der als Ausgangsmaterial verwendete Ester wird analog zu Stufe e) des Beispiels 1 durch Umsetzung der Säure mit 18,4 g (0,1 Mol) 2,4-Dinitrophenol erhalten.
Beispiel 3 2-Carbäthoxy-2-methyl-5-benzyl-1 Ob-hydroxy-3 ,6-dioxo- octahydro-8H-oxazolo-[3,2-a]-pyrrolo-[2, 1 -c]-pyrazin
Man verfährt analog zu Beispiel 1 und erhält durch Cyclisierung von N-(2R-2-Hydroxy-2-carbäthoxy-propionyl) L-phenylalanyl-L-prolin-2,4-dinitro-6-methylphenylester (Smp. 140-141" aus Äther; [0lD20=-380 [c= 1, Chloro forml) die Titelverbindung vom Smp. 134-136 , [alD20= - 25,2" (c= 1,5 in Äthanol).
Der als Ausgangsmaterial verwendete Ester wird analog zu Stufe e) des Beispiels 1 durch Umsetzung der Säure mit 19,8 g (0,1 Mol) 4,6-Dinitro-o-kresol erhalten.
Beispiel 4
2-Carbäthoxy-2-methyl-5-benzyl-1 Ob-hydroxy-3,6-dioxo- octahydro-8H-oxazolo-[3,2-a]-pyrrolo-[2, 1 pyrazin
Man verfährt analog zu Beispiel 1 und erhält durch Cyclisierung von N-(2R-2-Hydroxy-2-carbäthoxy-propionyl) L-phenylalanyl-L-prolin-pentachlorphenylester (Smp. 140 bis 142" aus Äther/Isopropyläther; [a120 =270 [ci, Chloro forml) die Titelverbindung vom Smp. 1341360, [alD20= -25,2" (c= 1,5 in Äthanol).
Der als Ausgangsmaterial verwendete Ester wird analog zu Stufe e) des Beispiels 1 durch Umsetzung der Säure mit 26,6 g Pentachlorphenol erhalten.
Beispiel 5
2-Carbäthoxy-2-isopropyl-5-benzyl- 1 Ob-hydroxy-3,6-dioxo octahydro-8H-oxazolo-[3 ,2-al-pyrrolo-[2, 1 -cl-pyrazin
Der in Beispiel 1 beschriebenen Methode völlig analog wird durch Cyclisierung von N-(2R-2-Hydroxy-2-carbäthoxy isovaleryl)-L-phenylalanyl-L-prolin-p-nitrophenylester die Titelverbindung nach Chromatographie an Kieselgel kristallin erhalten, Smp. 152-154 ; k,ln2o= =- 17" (cl, Äthanol).
Das als Ausgangsmaterial eingesetzte N-(2R-2-Hydroxy2-carbäthoxy-isovaleryl)-L-phenylalanyl-L-prolin wird analog Stufe d) und dessen p-Nitrophenylester analog Stufe e) des Beispiels 1 gewonnen. In Stufe a) wird dabei als Umsetzungskomponente S-(+ )-Isopropyl-benzyloxy-malonsäuremono äthylester-chlorid verwendet. Die in den einzelnen Stufen anfallenden Zwischenprodukte konnten nicht kristallin erhalten werden und auch das unter d) gewonnene Prolin bzw. der unter e) gewonnene p-Nitrophenylester wurden als Rohprodukt weiterverarbeitet.
Beispiel 6
2-Carbäthoxy-2,5-diisopropyl- 1 Ob-hydroxy-3,6-dioxo octahydro-8H-oxazolo-[3,2-al-pyrrolo-[2, 1 -cl-pyrazin
Der in Beispiel 1 beschriebenen Methode völlig analog wird durch Cyclisierung von N-(2R-2-Hydroxy-2-carbäthoxyisovaleryl)-L-valyl-L-prolin-p-nitrophenylester die reine Titelverbindung erhalten, Smp. 103-104 ; [am20 = + 60 (c= 1, Äthanol).
Das als Ausgangsmaterial eingesetzte N-(2R-2-Hydroxy 2-carbäthoxy-isovaleryl)-L-valyl-L-prolin wird analog Stufe d) und dessen p-Nitrophenylester analog Stufe e) des Beispiels 1 gewonnen. In Stufe a) werden dabei als Umsetzungskomponenten S-(+ )-Isopropyl-benzyloxy-malonsäuremono äthylester-chlorid und L-Valin-benzylester kondensiert. Die Zwischenprodukte der einzelnen Stufen fielen harzig an und konnten nicht kristallin erhalten werden.
Der in Beispiel 1 beschriebenen Methode analog können auch die folgenden Verbindungen der Formel I durch Cyclisierung einer Verbindung der Formel II hergestellt werden.
Die in der Tabelle angegebenen Schmelzpunkte gelten für aus Isopropyläther kristallisierte Verbindungen der Formel I.
Ebenso können die als Ausgangsmaterial verwendeten Verbindungen der Formel IV analog Stufe d) und die Verbindungen der Formel II analog Stufe e) des Beispiels 1, ausgehend von einer Verbindung der Formel VIII und einer Verbindung der Formel VII in Stufe a), gewonnen werden.
Beispiel Verbindung I Smp. [alD20 Ausgangsmaterialien Verbindung VII
IV und II mit VIII gemäss
Stufe a des
Beispiels 1
7 2-Carbäthoxy-2-methyl- 104-105 -7" N-(2R-2-Hydroxy- S-(+)-Methyl 5-isopropyl-lob- (c = 2,
2-carbäthoxy- benzyloxy-malon hydroxy-3,6-dioxo- Äthanol) pionyl)-L-valyl- säuremonoäthyl octahydro-8H-oxazolo- L-prolin und esterchlorid [3,2-alpyrrolo[2,1-cl- dessen p-Nitro- (VIIa) mit pyrazin phenylester L-Valinbenzyl ester
8 2-Carbäthoxy-2,5,5- 111-113 +42,7 N-(2R-2-Hydroxy- VIIa mita- trimethyl-l0b-hydroxy- (c = 1, 2 -carbäthoxy-pro- Methyl-alanin
3,6-dioxo-octahydro- Äthanole) pionyl)-a-methyl- benzylester 8H-oxazolo[3,2-al- alanyl-L-prolin pyrrolo [2,1 ipyrazin und dessen p-Nitro phenylester
9 2-Carbäthoxy-2-methyl- 100-101 -21" N-(2R-2-Hydroxy- VIIa mit L-Leucin 5-isobutyl-lOb-hydroxy- (c =
1, 2-carbäthoxy- benzylester
3,6-dioxo-octahydro- Äthanol) L-prolin und 8H-oxazolo[3,2-a]- dessen p-Nitro pyrrolo[2,1-cl-pyrazin phenylester 10 2-Carbäthoxy-2-methyl- 156-158 -23" N-(2R-2-Hydroxy- VIIa mit L-(p
5-(p-methoxybenzyl)- (c = 1, 2-carbäthoxy- Methoxy)-phenyl 10b-hydroxy- Pyridin) propionyl)-L-(p- alaninbenzylester
3, 6-dioxo-octahydro- methoxy)phenyl 8H-oxazolo[3,2-al- alanyl-L-prolin pyrrolo[2,1-c]pyrazin und dessen p-Nitrophenylester 11 2-Carbäthoxy-2,5ss- 115-117 +70 N-(2R-2-Hydroxy- VIIa mit L-a dimethyl-5a-benzyl- (c = 1,
2-carbäthoxy- Methyl-phenyl 1 0b-hydroxy-3,6- Äthanol) propionyl)-l-cx- alaninbenzyl dioxo-octahydro-8H- methyl-phenyl- ester oxazolo[3,2-al- alanyl-L-prolin pyrrolo[2,1-clpyrazin und dessen p-Nitro phenylester 12 2-Carbäthoxy-2,10a- 112-114 +20,8 N-(2R-2-Hydroxy- VIIa mit L dimethyl-5-benzyl- (c = 1,
2-carbäthoxy-pro- Phenylalanin 10b-hydroxy-3,6- Äthanol) pionyl)-L-phenyl- benzylester dioxo-octahydro-8H- alanyl-L-a-methyl- sowie bei Stufe oxazolo[3 2-al prolin und dessen c) + L-a pyrrolo[2,1-clpyrazin p-Nitrophenyl- Methyl-prolin ester benzylester 13 2-Carbäthoxy-2-äthyl- 161-163 -15,7 N-(2R-2-Hydroxy- S-(+)-Äthyl 5-benzyl-iOb-hydroxy- (c = 1, 2-carbäthoxy- benzyloxymalon
3,6-dioxo-octahydro- Pyridin), butyryl-L-phenyl- säuremonoäthyl
8H-oxazolo[3,2-al- -21,6 alanyl-L-prolin esterchlorid pyrrolo[2,1-clpyrazin (c = 1,
und dessen p-Nitro- (VIIb) mit Äthanol) phenylester L-Phenylalanin benzylester 14 2-Carbäthoxy-2-äthyl- 94-95 +0,8 N-(2R-2-Hydroxy- VIIb mit L-Valin-
5-isopropyl-lOb- (c = 2, 2-carbäthoxy- benzylester hydroxy-3 ,6-dioxo- Äthanol) butyryl)-L-valyl octahydro-8H-oxazolo- L-prolin und [3 ,2-a]pyrrolo[2,1 -ci- dessen p-Nitro pyrazin phenylester Beispiel Verbindung I Smp. [(LiD20 Ausgangsmaterialien Verbindung VII
IV und II mit VIII gemäss
Stufe a des
Beispiels 1 15 2-Carbäthoxy-2-äthyl- 94-96 -3,5 N-(2R-2-Hydroxy- VIIb mit 5-isobutyl- 1 Ob-hydroxy- (c = l, 2-carbäthoxy- L-Leucinbenzyl
3,6-dioxo-octahydro- Methylen- butyryl)-L-leucyl- ester <RTI
ID=7.6> 8H-oxazolo[3,2-a]- chlorid); L-prolin und pyrrolo[2,1-c]pyrazin -5,2 dessen p-Nitro (c = 2, phenylester Äthanol) 16 2-Carbäthoxy-2-iso- 196 +68 N-(2R-2-Hydroxy- L-a-Methyl-phenyl- propyl-5a -benzyl-5ss - (c = 1, 2-carbäthoxy- alaninbenzyl methyl-lOb-hydroxy- Äthanol) isovaleryl)-L-a- ester mit S-(+)
3,6-dioxo-octahydro- methylphenylalanyl- Isopropylbenzyl 8H-oxazolo[3,2-a]- L-prolin und oxy-malonsäure pyrrolo[2,1-clpyrazin dessen p-Nitro- monoäthylester phenylester chlorid (VIIc) 17 2-Carbäthoxy-2-iso- 109-110 +27 N-(2R-2-Hydroxy- VIIc mit L-Nor propyl-5-n-propyl- (c = 2,
2-carbäthoxy- valinbenzyl 1 Ob-hydroxy-3,6-dioxo- Dimethyl- isovaleryl)-L- ester octahydro-8H-oxa- form- norvalyl-L-prolin zolo[3,2-alpyrrolo- amid) und dessen p-Nitro [2,1-clpyrazin phenylester 18 2-Carbäthoxy-2-iso- 103-104 +20 N-(2R-2-Hydroxy- VIIc mit L-Iso- propyl-5-sec.-butyl- (c = 1, 2-carbäthoxy-iso- leucinbenzyl 10b-hydroxy-3,6- Äthanol) valeryl)-L-iso- ester dioxo-octahydro-8H- leucyl-L-prolin oxazolo[3 ,2-ajpyrrolo- und dessen p-Nitro [2,1-clpyrazin phenylester 19 2-Carbäthoxy-2-iso- 99-100 -6,3 N-(2R-2-Hydroxy- VIIc mit L-Leucin propyl-5-isobutyl- (c = 2,
2-carbäthoxy- benzylester 10b-hydroxy-3,6- Pyridin); isovaleryl)-L dioxo-octahydro-8H- -0,5" leucyl-L-prolin oxazolo[3,2-alpyrrolo- (c = 2, und dessen p-Nitro [2,1-clpyrazin Äthanol) phenylester 20 2-Carbäthoxy-2-n- 88-89 +42 N-(2R-2-Hydroxy- a-Methyl-alanin propyl-5,5-dimethyl- (c = 2,
2-carbäthoxy-n- benzylester mit 1 Ob-hydroxy- Äthanol) valeryl)-a-methyl- S-(+)-n-Propyl
3,6-dioxo-octahydro- alanyl-L-prolin benzyloxy-malon 8H-oxazolo-[3,2-a]- und dessen p-Nitro- säuremonoäthyl pyrrolo[2,1-clpyrazin phenylester esterchlorid 21 2-Carbäthoxy-2- 110-111 +45,5 N-(2R-2-Hydroxy- VIIb mit o-Methyl- äthyl-5,5-dimethyl- (c = 1,
2-carbäthoxy- alaninbenzylester 10b-hydroxy-3,6- Äthanol) butyryl)-a-methyl- dioxo-octahydro-8H- alanyl-L-prolin und oxazolo[3,2-alpyrrolo- dessen p-Nitro [2,1 -c]pyrazin phenylester 22 2-Carboxamido-2- amorph N-(2S-Hydroxy- S-Methyl-hydroxy methyl-5-benzyl- 2-carboxamido- malonsäure
10b-hydroxy-3,6- propionyl)-L. halbamid** mit dioxo-octahydro-8H- phenyl-alanyl-L- L-Phenylalanin oxazolo[3,2-a]pyrrolo- prolin und dessen benzylester [2,1-c]pyrazin p-Nitrophenylester ** = Verbindung
VI 23 2-Cyano-2,5-diiso- amorph N-(2S-2-Hydroxy- S-Isopropyl propyl-lOb-hydr- 2-cyano-isovaleryl)- cyano-benzyloxy oxy-3,6-dioxo-octa- L-valyl-L-prolin acetylchlorid hydro-8H-oxazolo- und dessen p-Nitro- mit L-Valin
[3,2-a]pyrrolo[2,1-cl- phenylester benzylester pyrazin
Beispiel 24 2-Carbäthoxy-2-methyl-5-benzyl-1 Ob-hydroxy-3 ,6-dioxo- octahydro-oxazolo-[3 ,2-a]-pyrrolo-[2, 1 -c]-pyrazin
527 mg N-(2R-2-Hydroxy-2-carbäthoxy-propionyl) L-phenylalanyl-L-prolin-p-nitrophenylester werden bei 20 in 40 ml Dioxan gelöst und mit 10 ml einer wässrigen Natriumhydrogencarbonat-/Natriumcarbonatlösung (pH = 10) versetzt. Nach drei Stunden verdünnt man mit 100 ml Methylenchlorid und 50 ml 2n Natriumcarbonatlösung und extrahiert 3mal mit 50 ml Methylenchlorid nach. Die organische Phase wird 3mal mit 2n Natriumcarbonatlösung gewaschen, über Natriumsulfat getrocknet und eingedampft.
Der Rückstand wird an der 50fachen Menge Kieselgel chromatographiert, wobei die Titelverbindung mit 1 % Methanol in Methylenchlorid eluiert wird. Die Titelverbindung kristallisiert aus Isopropyläther in Form farbloser Nadeln vom Smp. 134136 , [alD20 = ¯ 34 (c = 0,5, Pyridin).
Der als Ausgangsmaterial verwendete N-(2R-2-Hydroxy 2-carbäthoxy-propionyl)-L-phenylalanyl-L-prolin-p-nitro- phenylester wird wie folgt hergestellt: a) N- (2R-2-Benzyloxy-2 -carbäthoxy-propionyl) -L-phenyl- alanyl-L-prolinbenzylester
4,47 g (10 mMol) L-Phenylalanyl-L-prolinbenzylester Hydrobromid werden in 100 ml abs. Methylenchlorid gelöst, bei T40" unter Rühren mit 2,5 g (10 mMol) S-(+) Methyl-benzyloxy-malonsäuremonoäthylesterchlorid und anschliessend mit 20 ml abs. Pyridin versetzt. Nach Erwärmen auf 0 wird noch 15 Stunden bei dieser Temperatur gehalten.
Zur Aufarbeitung wird das Reaktionsgemisch mit 50 ml gesättigter Natriumcarbonatlösung gut geschüttelt und mit Wasser gewaschen. Nach Nachextraktion mit 100 ml Methylenchlorid werden die vereinigten organischen Phasen getrocknet und im Vakuum eingedampft. Die Titelverbindung kristallisiert nach Aufnehmen des Rückstandes in Äther, Smp. 120-121" C, [(LlD20=- 120 (cl, Pyridin).
b) N-(2R-2-Hydroxy-2-carbäthoxy-propionyl)-L-phenyl alanyl-L-prolin
2,2 g des unter a) erhaltenen Esters werden in 50 ml Eisessig und 50 ml Äthanol mit 1 g Palladium-Kohle (10So Palladium) bei Raumtemperatur unter Normaldruck hydriert. Nach Filtration wird das Filtrat eingedampft, wobei mit Xylol die letzten Reste Eisessig entfernt werden.
c) N-(2R-2-Hydroxy-2-carbäthoxy-propionyl)-L-phenyl alanyl-L-prolin-p-nitrophenylester
406 mg (1 mMol) des so erhaltenen Schaums werden in 50 ml Methylenchlorid gelöst, mit 0,8 ml Pyridin abs.
(10 mMol) und 325 mg Di-p-nitrophenylsulfit versetzt. Nach Stehen über Nacht bei 0 wird wie üblich mit Natriumhydrogencarbonat/Methylenchlorid extrahiert. Nach Eindampfen des mit Natriumsulfat getrockneten Extraktes kristallisiert die Titelverbindung direkt aus Methylenchlorid/Isopropyläther; Smp. 122-123 , [(L154620= 67,80 (c = 0,4, Chloroform).
** WARNING ** beginning of DESC field could overlap end of CLMS **.
PATENT CLAIMS
1. Process for the preparation of dipeptide derivatives of the formula 11,
EMI1.1
wherein
R1 stands for the cyano group or for -COX, where X represents the amino group or an -O- (lower) -alkyl radical,
R2 means lower alkyl,
R3 represents hydrogen or lower alkyl,
R4 represents hydrogen, lower alkyl, phenyl, benzyl or represents benzyl monosubstituted by lower alkoxy, R5 represents hydrogen or lower alkyl and
R6 represents a pentafluoro or pentachlorophenoxy, an N-succinimidoxy, a phenylthio or p-chlorophenylthio radical or a nitrophenoxy radical which is mono- or disubstituted by nitro and / or methyl or chlorine, characterized in that
that compounds of formula III,
EMI1.2
in which R1 to R5 are as defined above and R7 is hydrogen or benzyl, debenzylated and the free acid of the formula IV obtained,
EMI1.3
wherein the variables R1, R2, R3, R4 and R5 have the above meaning, a) with a compound of the formula V,
R6H V in which R6 has the above meaning, or b) with a compound of the formula Va,
EMI1.4
where R6 has the above meaning.
2. Use of the compounds of the formula II obtained by the process according to claim 1 for the preparation of octahydro-oxazolo- [3, 2-a] pyrrolo- [2, t-cj-pyrazine derivatives of the formula 1,
EMI1.5
bliss
R1 stands for the cyano group or for -COX, where X represents the amino group or an -O- (lower) -alkyl radical,
R2 means lower alkyl,
R3 represents hydrogen or lower alkyl,
R4 represents hydrogen, lower alkyl, phenyl, benzyl or benzyl monosubstituted by lower alkoxy and R5 represents hydrogen or lower alkyl, characterized in that compounds of the formula II in which R1, R2, R3, R4, Rs and R6 have the above meaning have undergone an intramolecular condensation reaction.
The invention relates to a process for the preparation of dipeptide derivatives of the formula II,
EMI1.6
wherein
R1 represents the cyano group or WOX, where X represents the amino group or an -O- (lower) -alkyl radical,
R2 means lower alkyl,
R3 represents hydrogen or lower alkyl,
R4 represents hydrogen, lower alkyl, phenyl, benzyl or represents benzyl monosubstituted by lower alkoxy, R5 represents hydrogen or lower alkyl and
R6 represents a pentafluoro or pentachlorophenoxy, an N-succinimidoxy, a phenylthio or p-chlorophenylthio radical or a nitrophenoxy radical which is mono- or disubstituted by nitro and / or methyl or chlorine, characterized in that
that compounds of formula III,
EMI1.7
wherein R, to R5 have the above meaning and R7 water
means substance or benzyl, debenzylated and the free acid of formula IV obtained,
EMI2.1
wherein the variables R1, R2, R3, R4 and R5 have the above meaning, a) with a compound of the formula V,
R6H V in which R5 has the above meaning, or b) with a compound of the formula Va,
EMI2.2
where R6 has the above meaning.
The compounds of the formula II are used for the preparation of octahydro-oxazolo- [3,2-al-pyrrolo- [2, 1 -cl-pyrazine derivatives of the formula I,
EMI2.3
bliss
R1 stands for the cyano group or for WOX, where X represents the amino group or an -O- (lower) -alkyl radical,
R2 means lower alkyl,
R3 represents hydrogen or lower alkyl,
R4 represents hydrogen, lower alkyl, phenyl, benzyl or benzyl monosubstituted by lower alkoxy and R5 represents hydrogen or lower alkyl by using compounds of the formula II in which R1, R2, R3, R4, R5 and R6 have the above meaning, one subject to intramolecular condensation reaction.
The O- (lower) -alkyl radical of the -COX defined for R1 can contain, for example, 1-6 carbon atoms, preferably 1 to 4 carbon atoms and in particular 1 or 2 carbon atoms.
The lower alkyl groups mentioned for R2, R3 and R5 are composed, for example, of up to 5 carbon atoms, preferably 1-4 carbon atoms.
If R3 and R5 stand for lower alkyl groups, these mean in particular the methyl group.
The lower alkyl group mentioned in the definition of R4 can be composed, for example, of up to 6 carbon atoms, preferably of 1-4 carbon atoms. The (lower) alkoxy group mentioned as a possible substituent for a benzyl group R4 preferably contains 1 to 4 carbon atoms and in particular represents the methoxy group.
Compounds of the formula II which contain as group R6 an o, p-dinitrophenoxy, an o-methyl-o ', p-dinitrophenoxy, a pentachlorophenoxy or in particular a p-nitrophenoxy radical are preferably used for the reaction.
The cyclization according to the process of the present invention is crucially dependent on the solvent chosen, the temperature, the degree of dilution and the base strength; these variables influence each other.
The choice of bases or the base strength depends, in particular, on the solvent chosen: while strong bases can be used in anhydrous, aprotic medium, the cyclization in an aqueous medium is expediently carried out under mild conditions, since otherwise the compounds of the formula I are added directly the corresponding compounds of formula I, in which R1 represents the carboxyl group, are saponified and the acids are very difficult to isolate from the reaction mixture.
The cyclization according to the invention is expediently carried out in a polar solvent.
Suitable aprotic, polar solvents are, for example, dimethyl sulfoxide, hexamethylphosphoric trisamide, acetonitrile, di- (lower) alkylamides of organic carboxylic acid such as dimethylformamide, etc.
Strong bases which can be used for the cyclization in an anhydrous, aprotic medium are bases which can deprotonize the nitrogen atom adjacent to the> CR3R4 and do not react with carbonyl groups, e.g. B. alkali metal hydrides such as sodium hydride, alkali metal alcoholates such as sodium ethylate etc. When using an alkali metal alcoholate as the base, if X is lower alkoxy, the alcoholate corresponding to the alcohol HX is expediently used (otherwise transesterification). For a similar reason (conversion R1 = COO- (lower) alkoxy to R1 = CONH2), no alkali metal amides are then expediently used as the base. This process variant advantageously uses 1 to 1.5 moles of a strong base per mole of compound of the formula II.
Solubilizers are expediently used in the cyclization in an aqueous medium.
Suitable water-miscible solvents which are inert under the reaction conditions are e.g. B. dimethyl sulfoxide, dimethoxyethane, open-chain or cyclic ethers such as dioxane or tetrahydrofuran, di- (lower) alkylamides of organic carboxylic acid such as dimethylformamide etc.
For the reasons mentioned above, the cyclization according to the invention is carried out in an aqueous medium under weakly basic conditions, in particular at a pH of 8 to 10.
As an aqueous buffer solution z. B. a borate, carbonate or phosphate solution with hydroxyl ions suitable. The use of a borate buffer (pH = 9) with the addition of catalytic amounts of 2-hydroxypyridine is particularly suitable.
Good results are achieved with a reaction temperature between about 0 and 30. It is advantageous to work at room temperature and, if working in an anhydrous medium, with stirring.
The reaction time depends on the other reaction conditions and the importance of the substituents in formula II: it can vary between about 1-10 hours.
The reaction mixtures obtained for isolating the desired end products can be worked up in a manner known per se, for example by extraction and, if appropriate, subsequent chromatography.
The starting compounds of formula II are new, their preparation also forms part of the present invention.
The compounds of the formula II are obtained by using an acid of the formula
EMI3.1
wherein the variables R1 to Rs have the above meaning, with a compound of the formula
R6H wherein R6 has the above meaning, or with a compound of the formula
EMI3.2
where R6 has the above meaning.
The compounds of the formula IV can be reacted with the compounds of the formula V or Va by methods known per se. The reaction with a compound of formula V is carried out, for example, in the presence of dicyclohexylcarbodiimide. An excess of compounds of the formula V is preferably used.
The reaction with a compound of the formula Va takes place, for example, in the presence of a weak tertiary organic base such as pyridine or its homologues.
The compounds of formula II thus obtained can be isolated from the reaction mixture in a manner known per se.
The compounds of formula IV, which are also new, are obtained according to the invention by using compounds of the formula
EMI3.3
where the variables R1 to Rs have the above meaning and R is hydrogen or benzyl, debenzylated.
The compounds of formula III can be debenzylated by methods known per se. The hydrogenolytic cleavage of the benzyl group (s) is preferably carried out by hydrogenation in the presence of a noble metal catalyst, preferably with palladium, on a suitable support such as coal. Z. B. glacial acetic acid or ethanol or a mixture of both solvents, but preferably ethyl acetate, in particular for the debenzylation of compounds of the formula III, in which R2 is an isopropyl group, suitable.
Compounds of the formula III can be obtained, for example, as follows: a tartronic acid derivative of the formula
EMI3.4
wherein R1 and R2 have the above meaning, or the formula
EMI3.5
wherein R1 and R2 have the above meaning and Z for an active acid component, e.g. B. halogen, preferably chlorine, is with an amino acid benzyl ester of the formula
EMI3.6
wherein R3 and R4 have the above meaning, by methods customary in peptide chemistry, e.g. B. by carbodiimide synthesis for compounds of formula VI or preferably in the presence of N-ethyldiisopropylamine, in the presence of a suitable solvent, such as methylene chloride / dioxane or dimethoxyethane, condensed.
Then one splits from a resulting compound of the formula
EMI3.7
wherein the variables R1 to R4 and R, have the above meaning, the benzyl protective group (s), d. H. optionally ester benzyl and optionally present ether-benzyl simultaneously or optionally selectively only ester-benzyl, according to methods known per se from hydrogenolysis, preferably by catalytic hydrogenation with palladium-on-carbon, e.g. B.
in glacial acetic acid or ethanol or a mixture of both solvents, but preferably in ethyl acetate, in particular for a compound of the formula IX, in which R 2 is an isopropyl group, and the free acid of the formula obtained is condensed
EMI3.8
wherein the variables R1 to R4 and R have the above meaning, with a compound of the formula
EMI4.1
where R5 has the above meaning, according to methods customary in peptide chemistry, e.g. B. by means of carbodiimide synthesis, in contrast were a suitable solvent such. As methylene chloride, dioxane or dimethoxyethane, at room temperature, it being possible to add 1-hydroxybenzotriazole in at least equimolar amount to avoid possible racemization.
Some of the compounds of the formula prepared according to the invention are new. The new compounds are listed in the table below: Formula Compounds of the formula I.
R1 R2 R3 R4 Rs Ia CN or Bed or Bed or Bed or Bed
CONH2 Ib COOalkyl * o. Bed. * O. Bed. H, alkyl, phenyl, alkyl
Alkoxybenzyl Ic COOAlkyl alkyl with no conditions. Benzyl CH3 more than 1C Id COOAlkyl CH3 alkyl Benzyl CH3 Ie COOAlkyl CH3 H Benzyl alkyl with more than
1C If COOalkyl alkyl alkyl (lower) alkoxy- H benzyl Ig COO alkyl alkyl with H (lower) alkoxy- H more than benzyl
2C Ih COOAlkyl CH3 H Benzyl by H (lower) alkoxy with at least 2 C monosubst., O-methoxybenzyl m-methoxybenzyl Ik COOCH3 CH3 H p-methoxybenzyl H or
COOalkyl (alk = low
Alkyl with at least 3 C) * no conditions; the meaning given in claim 1 for this Subst. alkyl stands for (lower) alkyl
The synthesis of compounds of the formula is important with regard to the synthetic preparation of peptide alkaloids of the ergot type. In the compounds of the formula I, the radical R1 = COO- (lower) alkyl can be converted into an amino group by methods known per se. The conversion of the compounds of the formula I, in which R1 is the carboxamido or cyano group, into the corresponding amino compounds can also be carried out by methods known per se. The reaction of the salts of the 2-amino derivatives of the compounds of the formula I with lysergic acid or derivatives thereof can also be carried out by methods known per se.
From a pharmacodynamic point of view, these peptide alkaloids are known to have central effects and influence central as well as peripheral circulatory parameters; for example, they show serotonin-antagonistic, vasonizing and α-receptor blocking activity.
The starting compounds are either known or can be prepared by methods known per se or analogously to the methods here or analogously to methods known per se.
In the following examples, which are intended to illustrate the implementation of the method, all temperatures are given in degrees Celsius.
example 1
2-Carbäthoxy-2-methyl-5-benzyl-1 Ob-hydroxy3, 6dioxo-octahydro-SH-oxazolo- [3, 2-aj-pyrrolo- [2, 1 -ci-pyrazine
10.54 g (20 m mol) of N- (2R-2-hydroxy-2-carbäthoxypropionyl) -L-phenylalanyl-L-proline-p-nitrophenyl ester in 250 ml abs. Dimethylformamide is mixed with 5 g of Linde molecular sieve (3) at room temperature and stirred for 15 minutes. Then you carry 25 mmol sodium hydride (e.g.
950 mg of a 63% oily suspension) and stirred under exclusion of moisture for a further 2 hours at room temperature.
For working up, a large part of the solvent is distilled off under high vacuum, the residue is decomposed with vigorous cooling with about 50 ml of ethanol and immediately poured into cooled 1N sodium carbonate solution. The reaction mixture is extracted well with chloroform and washed twice with 1N sodium carbonate solution.
After drying over sodium sulfate and evaporation of the solvent, a crystalline crude product is obtained, from which the title compound is obtained in the form of colorless needles by crystallization from isopropyl ether; Mp 134-136, [ai020 = -25.2 (c = 1.5 in ethanol).
The N- (2R-2-hydroxy 2-carbethoxy-propionyl) -L-phenylalanyl-L-proline-p-nitro-phenyl ester used as starting material is, for example, prepared as follows: a) N- (2R-2-benzyloxy-2 -carbäthoxy-propionyl) -L-phenyl alanine benzyl ester
12.75 g (50 m mol) L-phenylalanine benzyl ester in 250 ml abs. At 0, methylene chloride is mixed with 12.9 ml (75 m mol) of N-ethyl-diisopropylamine. A solution of 13.5 g (50 mmol) of S - (+) - methyl-benzyloxy-malonic acid monoethyl chloride in 50 ml of abs is then added dropwise with stirring. Add methylene chloride and continue stirring at 0 for 1 hour. For working up, the reaction mixture is washed cold with saturated sodium bicarbonate solution.
After extraction with methylene chloride, drying over sodium sulfate and evaporation of the solvent, the title compound is obtained as an oily residue which is immediately processed further.
[alD20 = + 390 (c = 2, chloroform).
b) N- (2R-2-hydroxy-2-carbethoxy-propionyl)
L-phenylalanine
To remove the benzyl protective groups, the oily residue obtained in step a) is dissolved in 450 ml of ethyl acetate and hydrogenated with 10 g of palladium-carbon (10% palladium catalyst) at normal pressure and room temperature. After 8 to 16 hours, about 2.2 l of hydrogen are consumed. It is filtered and, after concentrating the filtrate, the title compound is obtained as a colorless resin.
Brucine salt: From abs. Ethyl acetate, m.p. 110-112 "; [alD20 = f 29.8" (c = 1, chloroform).
c) N- (2R-2-Hydroxy-2-carbethoxy-propionyl) -L-phenyl alanyl-L-proline benzyl ester
14 g of the resin obtained in stage b) are dissolved in 300 ml of ethyl acetate at room temperature and, after addition of 13.5 g (0.1 mol) of 1-hydroxy-benzotriazole (dry or moistened), stirred for 10 minutes. 10.3 g (50 mmol) of dicyclohexylcarbodiimide are then introduced into the almost clear solution and the mixture is stirred for a further 10 minutes. Finally, 10.3 g (50 mmol) of L-proline benzyl ester in 50 ml of ethyl acetate are added dropwise within 5 minutes and stirring is continued for 90 minutes. After filtration of the precipitate, the filtrate is evaporated and the residue is taken up in ether in order to remove last traces of dicyclohexylcarbodiimide by crystallization. The filtrate is washed with cold in hydrochloric acid, sodium bicarbonate solution and ice water.
After drying over sodium sulfate and distilling off the solvent, the title compound remains as a resinous residue.
d) N- (2R-2-Hydroxy-2-carbethoxy-propionyl) -L-phenylalanyl-L-proline
The ester obtained under c) is dissolved in 300 ml of ethyl acetate and hydrogenated with 5 g of palladium-carbon (10% palladium) as described in step b). After the same work-up, a colorless resin is obtained, which is further processed as such in the next step.
e) N- (2R-2-Hydroxy-2-carbethoxy-propionyl) -L-phenyl alanyl-L-proline-p-nitrophenyl ester
16.5 g of the acid obtained under c) are dissolved in 400 ml of ethyl acetate and 13.9 g (0.1 mol) of p-nitrophenol and 10.3 g (0.05 mol) of dicyclohexylcarbodiimide are added in succession. After stirring for 1 hour at room temperature, the mixture is filtered and the filtrate is evaporated. The residue is dissolved in chloroform and washed thoroughly with 1N sodium carbonate solution and sodium bicarbonate solution. After drying over sodium sulfate and evaporation of the solvent, the initially oily title compound crystallizes from methylene chloride / isopropyl ether. Yellowish crystals are obtained which are dissolved in ethyl acetate for further purification. The insoluble constituent is filtered off, gently evaporated and recrystallized from isopropyl ether.
After drying at 60 in a high vacuum, slightly yellowish crystals are obtained from the mp.
121-123, [alD2 = -60 (c = 1, chloroform).
Example 2
2-Carbäthoxy-2-methyl-5-benzyl-1 Ob-hydroxy-3,6-dioxo octahydro-8H-oxazolo- [3, 2-a] -pyrrolo- [2, 1-c-pyrazine
The procedure is analogous to Example 1 and the cyclization of N- (2R-2-hydroxy-2-carbethoxy-propionyl) L-phenylalanyl-L-proline-2,4-dinitrophenyl ester (mp 152 to 155 from ether; [a1020 = -640 [c = 1, chloroform]) the title compound of mp 1341360, [a1n20 = -25.20 (c = 1.5 in ethanol).
The ester used as starting material is obtained analogously to stage e) of Example 1 by reacting the acid with 18.4 g (0.1 mol) of 2,4-dinitrophenol.
Example 3 2-Carbäthoxy-2-methyl-5-benzyl-1 Ob-hydroxy-3, 6-dioxo-octahydro-8H-oxazolo- [3,2-a] -pyrrolo- [2, 1-c] -pyrazine
The procedure is analogous to Example 1 and the cyclization of N- (2R-2-hydroxy-2-carbäthoxy-propionyl) L-phenylalanyl-L-proline-2,4-dinitro-6-methylphenyl ester (mp. 140-141 " from ether; [0lD20 = -380 [c = 1, chloro forml) the title compound of mp 134-136, [alD20 = - 25.2 "(c = 1.5 in ethanol).
The ester used as starting material is obtained analogously to stage e) of Example 1 by reacting the acid with 19.8 g (0.1 mol) of 4,6-dinitro-o-cresol.
Example 4
2-Carbäthoxy-2-methyl-5-benzyl-1 Ob-hydroxy-3,6-dioxo-octahydro-8H-oxazolo- [3,2-a] -pyrrolo- [2, 1 pyrazine
The procedure is analogous to Example 1 and is obtained by cyclization of N- (2R-2-hydroxy-2-carbäthoxy-propionyl) L-phenylalanyl-L-prolin-pentachlorophenyl ester (mp 140 to 142 "from ether / isopropyl ether; [a120 = 270 [ci, chloro forml) the title compound of mp 1341360, [alD20 = -25.2 "(c = 1.5 in ethanol).
The ester used as starting material is obtained analogously to stage e) of Example 1 by reacting the acid with 26.6 g of pentachlorophenol.
Example 5
2-Carbäthoxy-2-isopropyl-5-benzyl-1 Ob-hydroxy-3,6-dioxo octahydro-8H-oxazolo- [3, 2-al-pyrrolo- [2, 1 -cl-pyrazine
The method described in Example 1, completely analogous, is obtained in crystalline form by cyclization of N- (2R-2-hydroxy-2-carbäthoxy isovaleryl) -L-phenylalanyl-L-prolin-p-nitrophenyl ester after chromatography on silica gel, mp. 152 -154; k, ln2o = = - 17 "(cl, ethanol).
The N- (2R-2-Hydroxy2-carbäthoxy-isovaleryl) -L-phenylalanyl-L-proline used as starting material is obtained analogously to stage d) and its p-nitrophenyl ester analogously to stage e) of Example 1. In stage a), S - (+) -isopropyl-benzyloxy-malonic acid monoethyl ester chloride is used as the reaction component. The intermediate products obtained in the individual stages could not be obtained in crystalline form, and the proline obtained under d) or the p-nitrophenyl ester obtained under e) were further processed as the crude product.
Example 6
2-carbethoxy-2,5-diisopropyl-1 ob-hydroxy-3,6-dioxo octahydro-8H-oxazolo- [3,2-al-pyrrolo- [2,1-cl-pyrazine
The method described in Example 1, completely analogous, is obtained by cyclization of N- (2R-2-hydroxy-2-carbäthoxyisovaleryl) -L-valyl-L-proline-p-nitrophenyl ester, the pure title compound, mp. 103-104; [am20 = + 60 (c = 1, ethanol).
The N- (2R-2-hydroxy 2-carbäthoxy-isovaleryl) -L-valyl-L-proline used as starting material is obtained analogously to stage d) and its p-nitrophenyl ester analogously to stage e) of Example 1. In stage a), S - (+) -isopropyl-benzyloxy-malonic acid mono ethyl ester chloride and L-valine-benzyl ester are condensed as reaction components. The intermediate products of the individual stages were resinous and could not be obtained in crystalline form.
Analogously to the method described in Example 1, the following compounds of the formula I can also be prepared by cyclizing a compound of the formula II.
The melting points given in the table apply to compounds of the formula I crystallized from isopropyl ether.
Likewise, the compounds of the formula IV used as starting material can be obtained analogously to stage d) and the compounds of the formula II analogously to stage e) of Example 1, starting from a compound of the formula VIII and a compound of the formula VII in stage a).
Example Compound I mp [alD20 starting materials compound VII
IV and II with VIII according to
Level a of
Example 1
7 2-carbethoxy-2-methyl-104-105 -7 "N- (2R-2-hydroxy-S - (+) - methyl 5-isopropyl-lob- (c = 2,
2-carbäthoxy-benzyloxy-malon hydroxy-3,6-dioxo-ethanol) pionyl) -L-valyl-acid monoethyl octahydro-8H-oxazolo-L-proline and ester chloride [3,2-alpyrrolo [2,1-cl- its p-Nitro- (VIIa) with pyrazine phenyl ester L-valine benzyl ester
8 2-Carbäthoxy-2,5,5-111-113 +42,7 N- (2R-2-Hydroxy-VIIa mita- trimethyl-10B-hydroxy- (c = 1,2-carbäthoxy-pro-methyl-alanine
3,6-dioxo-octahydroethanols) pionyl) -a-methyl-benzyl ester 8H-oxazolo [3,2-alanyl-L-proline pyrrolo [2,1 ipyrazine and its p-nitro phenyl ester
9 2-carbäthoxy-2-methyl-100-101 -21 "N- (2R-2-hydroxy-VIIa with L-leucine 5-isobutyl-lOb-hydroxy- (c =
1, 2-carbäthoxy-benzyl ester
3,6-dioxo-octahydroethanol) L-proline and 8H-oxazolo [3,2-a] - its p-nitro pyrrolo [2,1-cl-pyrazine phenyl ester 10 2-carbäthoxy-2-methyl- 156- 158-23 "N- (2R-2-Hydroxy- VIIa with L- (p
5- (p-methoxybenzyl) - (c = 1,2-carbethoxy-methoxy) -phenyl 10b-hydroxy-pyridine) propionyl) -L- (p-alanine benzyl ester
3, 6-dioxo-octahydro-methoxy) phenyl 8H-oxazolo [3,2-al-alanyl-L-proline pyrrolo [2,1-c] pyrazine and its p-nitrophenyl ester 11 2-carbäthoxy-2,5ss-115 -117 +70 N- (2R-2-hydroxy- VIIa with la dimethyl-5a-benzyl- (c = 1,
2-carbäthoxy-methyl-phenyl 1 0b-hydroxy-3,6-ethanol) propionyl) -l-cx-alanine-benzyl dioxo-octahydro-8H-methyl-phenyl-ester oxazolo [3,2-al-alanyl-L-proline pyrrolo [2,1-clpyrazine and its p-nitro phenyl ester 12 2-carbethoxy-2,10a- 112-114 +20.8 N- (2R-2-hydroxy-VIIa with L dimethyl-5-benzyl- (c = 1,
2-carbäthoxy-pro-phenylalanine 10b-hydroxy-3,6-ethanol) pionyl) -L-phenyl-benzyl ester dioxo-octahydro-8H-alanyl-la-methyl- as well as in the stage oxazolo [3 2-al proline and its c ) + La pyrrolo [2,1-clpyrazine p-nitrophenyl-methyl-prolin ester benzyl ester 13 2-carbethoxy-2-ethyl-161-163 -15.7 N- (2R-2-hydroxy-S - (+) - Ethyl 5-benzyl-iOb-hydroxy- (c = 1, 2-carbäthoxy-benzyloxymalon
3,6-dioxo-octahydro-pyridine), butyryl-L-phenyl-acid monoethyl
8H-oxazolo [3,2-al- -21,6 alanyl-L-prolin ester chloride pyrrolo [2,1-clpyrazine (c = 1,
and its p-nitro- (VIIb) with ethanol) phenyl ester L-phenylalanine benzyl ester 14 2-carbethoxy-2-ethyl-94-95 +0.8 N- (2R-2-hydroxy-VIIb with L-valine
5-isopropyl-lOb- (c = 2, 2-carbäthoxy-benzyl ester hydroxy-3, 6-dioxo-ethanol) butyryl) -L-valyl octahydro-8H-oxazolo-L-proline and [3, 2-a] pyrrolo [2,1-ci- its p-nitro pyrazine phenyl ester example compound I mp. [(LiD20 starting materials compound VII
IV and II with VIII according to
Level a of
Example 1 15 2-Carbäthoxy-2-ethyl- 94-96 -3.5 N- (2R-2-Hydroxy- VIIb with 5-isobutyl- 1 Ob-hydroxy- (c = 1, 2-carbäthoxy- L-Leucinbenzyl
3,6-dioxo-octahydro-methylene-butyryl) -L-leucyl ester <RTI
ID = 7.6> 8H-oxazolo [3,2-a] chloride); L-proline and pyrrolo [2,1-c] pyrazine -5,2 whose p-nitro (c = 2, phenyl ester ethanol) 16 2-carbethoxy-2-iso- 196 +68 N- (2R-2-hydroxy- La-methyl-phenyl-propyl-5a-benzyl-5ss - (c = 1, 2-carbäthoxy-alaninbenzyl methyl-lOb-hydroxy-ethanol) isovaleryl) -laester with S - (+)
3,6-dioxo-octahydro-methylphenylalanyl-isopropylbenzyl 8H-oxazolo [3,2-a] - L-proline and oxy-malonic acid pyrrolo [2,1-clpyrazine whose p-nitro-monoethyl ester phenyl chloride (VIIc) 17 2- Carbäthoxy-2-iso- 109-110 +27 N- (2R-2-Hydroxy-VIIc with L-Nor propyl-5-n-propyl- (c = 2,
2-carbäthoxy-valinbenzyl 1 Ob-hydroxy-3,6-dioxo-dimethyl-isovaleryl) -L- ester octahydro-8H-oxa- form-norvalyl-L-proline zolo [3,2-alpyrrolo-amide) and its p -Nitro [2,1-clpyrazine phenyl ester 18 2-carbäthoxy-2-iso- 103-104 +20 N- (2R-2-hydroxy-VIIc with L-isopropyl-5-sec-butyl- (c = 1, 2-carboxy-iso-leucine benzyl 10b-hydroxy-3,6-ethanol) valeryl) -L-iso-ester dioxo-octahydro-8H-leucyl-L-proline oxazolo [3, 2-ajpyrrolo- and its p- Nitro [2,1-clpyrazine phenyl ester 19 2-carbethoxy-2-iso-99-100 -6.3 N- (2R-2-hydroxy-VIIc with L-leucine propyl-5-isobutyl- (c = 2,
2-carbethoxybenzyl ester 10b-hydroxy-3,6-pyridine); isovaleryl) -L dioxo-octahydro-8H- -0.5 "leucyl-L-proline oxazolo [3,2-alpyrrolo- (c = 2, and its p-nitro [2,1-clpyrazine ethanol) phenyl ester 20 2- Carbäthoxy-2-n- 88-89 +42 N- (2R-2-Hydroxy-a-methyl-alanine propyl-5,5-dimethyl- (c = 2,
2-carbäthoxy-n-benzyl ester with 1 Ob-hydroxy-ethanol) valeryl) -a-methyl-S - (+) - n-propyl
3,6-dioxo-octahydroalanyl-L-proline benzyloxy-malon 8H-oxazolo- [3,2-a] - and its p-nitroacid monoethyl pyrrolo [2,1-clpyrazine phenyl ester chloride 21 2-carbethoxy-2 - 110-111 +45.5 N- (2R-2-hydroxy-VIIb with o-methyl-ethyl-5,5-dimethyl- (c = 1,
2-carbäthoxy-alanine benzyl ester 10b-hydroxy-3,6-ethanol) butyryl) -a-methyl-dioxo-octahydro-8H-alanyl-L-proline and oxazolo [3,2-alpyrrolo- whose p-nitro [2,1 -c] pyrazine phenyl ester 22 2-carboxamido-2-amorphous N- (2S-hydroxy-S-methyl-hydroxy-methyl-5-benzyl-2-carboxamido-malonic acid
10b-hydroxy-3,6-propionyl) -L. Halbamid ** with dioxo-octahydro-8H-phenyl-alanyl-L-L-phenylalanine oxazolo [3,2-a] pyrrolo-prolin and its benzyl ester [2,1-c] pyrazine p-nitrophenyl ester ** = compound
VI 23 2-cyano-2,5-diiso-amorphous N- (2S-2-hydroxy-S-isopropyl propyl-10b-hydr-2-cyano-isovaleryl) - cyano-benzyloxy oxy-3,6-dioxo-octa - L-valyl-L-prolin acetyl chloride hydro-8H-oxazolo- and its p-nitro- with L-valine
[3,2-a] pyrrolo [2,1-cl-phenyl ester benzyl ester pyrazine
Example 24 2-Carbäthoxy-2-methyl-5-benzyl-1 Ob-hydroxy-3, 6-dioxo-octahydro-oxazolo- [3, 2-a] -pyrrolo- [2, 1-c] -pyrazine
527 mg of N- (2R-2-hydroxy-2-carbäthoxy-propionyl) L-phenylalanyl-L-proline-p-nitrophenyl ester are dissolved in 40 ml of dioxane at 20 and with 10 ml of an aqueous sodium hydrogen carbonate / sodium carbonate solution (pH = 10 ) offset. After three hours, the mixture is diluted with 100 ml of methylene chloride and 50 ml of 2N sodium carbonate solution and extracted three times with 50 ml of methylene chloride. The organic phase is washed 3 times with 2N sodium carbonate solution, dried over sodium sulfate and evaporated.
The residue is chromatographed on 50 times the amount of silica gel, the title compound being eluted with 1% methanol in methylene chloride. The title compound crystallizes from isopropyl ether in the form of colorless needles, mp 134136, [alD20 = ¯ 34 (c = 0.5, pyridine).
The N- (2R-2-hydroxy 2-carbethoxy-propionyl) -L-phenylalanyl-L-proline-p-nitro-phenyl ester used as starting material is prepared as follows: a) N- (2R-2-benzyloxy-2 - carbethoxy-propionyl) -L-phenyl-alanyl-L-prolinbenzyl ester
4.47 g (10 mmol) of L-phenylalanyl-L-prolinbenzyl ester hydrobromide are dissolved in 100 ml of abs. Dissolved methylene chloride, at T40 "with stirring with 2.5 g (10 mmol) of S - (+) methyl-benzyloxy-malonic acid monoethyl chloride and then mixed with 20 ml of absolute pyridine. After heating to 0, the mixture is kept at this temperature for a further 15 hours.
For working up, the reaction mixture is shaken well with 50 ml of saturated sodium carbonate solution and washed with water. After extraction with 100 ml of methylene chloride, the combined organic phases are dried and evaporated in vacuo. The title compound crystallized after taking up the residue in ether, mp. 120-121 "C, [(LlD20 = - 120 (cl, pyridine).
b) N- (2R-2-Hydroxy-2-carbethoxy-propionyl) -L-phenylalanyl-L-proline
2.2 g of the ester obtained under a) are hydrogenated in 50 ml of glacial acetic acid and 50 ml of ethanol with 1 g of palladium-carbon (10So palladium) at room temperature under normal pressure. After filtration, the filtrate is evaporated, the last residues of glacial acetic acid being removed with xylene.
c) N- (2R-2-Hydroxy-2-carbethoxy-propionyl) -L-phenyl alanyl-L-proline-p-nitrophenyl ester
406 mg (1 mmol) of the foam thus obtained are dissolved in 50 ml of methylene chloride, with 0.8 ml of abs.
(10 mmol) and 325 mg of di-p-nitrophenyl sulfite were added. After standing overnight at 0, extraction is carried out as usual with sodium hydrogen carbonate / methylene chloride. After evaporation of the extract dried with sodium sulfate, the title compound crystallizes directly from methylene chloride / isopropyl ether; M.p. 122-123, [(L154620 = 67.80 (c = 0.4, chloroform).