CA2712339A1 - Utilisation d'inhibiteurs d'aminopeptidase ou de composes azaindole pour la prevention ou le traitement de metastases cancereuses d'origine epitheliale - Google Patents
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Abstract
Utilisation d'un composé choisi parmi un composé inhibiteur d'aminopeptidase et un composé aza-indole pour la fabrication d'un médicament destiné à la prévention ou au traitement des métastases cancéreuses chez l'homme ou l'animal.
Description
Utilisation d'inhibiteurs d'aminopeptidase ou de composés azaindole pour la prévention ou le traitement de métastases cancéreuses d'origine épithéliale s Domaine de l'invention La présente invention se rapporte au domaine du traitement thérapeutique des cancers, et plus particulièrement à la prévention ou au traitement des métastases, dans le cas de cancer chez l'homme ou l'animal.
Art antérieur De manière générale, environ 35% des patients nouvellement diagnostiqués comme étant affectés d'un cancer sont exempts de métastases. Ces patients peuvent être guéris par des traitements locaux dirigés contre la tumeur, tels que la chirurgie ou l'exposition à certains rayonnements.
L'autre partie des patients nouvellement diagnostiqués comprend (i) les patients ayant déjà des métastases détectables (30% des patients) et (ii) les patients n'ayant pas de métastases détectables au moment du diagnostic (35% des patients). Le traitement de cette autre partie des patients est en général un traitement systémique incluant, par exemple, l'administration de médicaments chimio-thérapeutiques qui interfèrent avec la croissance des cellules cancéreuses.
Les processus d'invasion tumorale constituent la cause essentielle de la mortalité chez les patients affectés d'un cancer.
On sait que, dans certains cancers, les cellules tumorales ont non seulement une forte capacité à proliférer, mais aussi une forte capacité à
détruire les tissus et à s'infiltrer dans les tissus voisins, y compris dans les vaisseaux sanguins et les vaisseaux lymphatiques, puis à migrer par la circulation sanguine ou la circulation lymphatiquevers des tissus localisés à des endroits du corps très éloignés de la tumeur primaire. Ainsi, dans certains cancers, les cellules tumorales ont la capacité
de circuler puis de former des tumeurs secondaires, aussi appelées métastases, dans des tissus 3o distants de la tumeur primaire.
La formation de métastases est un phénomène physiologique à étapes multiples, au cours duquel des cellules tumorales se détachent de la tumeur primaire, envahissent la matrice extra-cellulaire, pénètrent au travers des vaisseaux sanguins, entrent dans le système vasculaire par intravasation, puis arrêtent leur migration dans la circulation sanguine ou lymphatique à un site distant, sortent de la circulation par extravasation, puis se fixent dans un tissu distant et prolifèrent pour former une tumeur secondaire.
Par ailleurs, l'épithélium représente le type de tissu le plus abondant dans l'organisme humain ou animal. C'est sans doute l'une des raisons pour lesquelles plus 4o de 90% des cancers chez l'homme ont pour origine la transformation maligne de
Art antérieur De manière générale, environ 35% des patients nouvellement diagnostiqués comme étant affectés d'un cancer sont exempts de métastases. Ces patients peuvent être guéris par des traitements locaux dirigés contre la tumeur, tels que la chirurgie ou l'exposition à certains rayonnements.
L'autre partie des patients nouvellement diagnostiqués comprend (i) les patients ayant déjà des métastases détectables (30% des patients) et (ii) les patients n'ayant pas de métastases détectables au moment du diagnostic (35% des patients). Le traitement de cette autre partie des patients est en général un traitement systémique incluant, par exemple, l'administration de médicaments chimio-thérapeutiques qui interfèrent avec la croissance des cellules cancéreuses.
Les processus d'invasion tumorale constituent la cause essentielle de la mortalité chez les patients affectés d'un cancer.
On sait que, dans certains cancers, les cellules tumorales ont non seulement une forte capacité à proliférer, mais aussi une forte capacité à
détruire les tissus et à s'infiltrer dans les tissus voisins, y compris dans les vaisseaux sanguins et les vaisseaux lymphatiques, puis à migrer par la circulation sanguine ou la circulation lymphatiquevers des tissus localisés à des endroits du corps très éloignés de la tumeur primaire. Ainsi, dans certains cancers, les cellules tumorales ont la capacité
de circuler puis de former des tumeurs secondaires, aussi appelées métastases, dans des tissus 3o distants de la tumeur primaire.
La formation de métastases est un phénomène physiologique à étapes multiples, au cours duquel des cellules tumorales se détachent de la tumeur primaire, envahissent la matrice extra-cellulaire, pénètrent au travers des vaisseaux sanguins, entrent dans le système vasculaire par intravasation, puis arrêtent leur migration dans la circulation sanguine ou lymphatique à un site distant, sortent de la circulation par extravasation, puis se fixent dans un tissu distant et prolifèrent pour former une tumeur secondaire.
Par ailleurs, l'épithélium représente le type de tissu le plus abondant dans l'organisme humain ou animal. C'est sans doute l'une des raisons pour lesquelles plus 4o de 90% des cancers chez l'homme ont pour origine la transformation maligne de
2 cellules épithéliales. En particulier, le cancer épithélial de type colo-rectal constitue la deuxième cause de mortalité par cancer dans les pays industrialisés.
Dans la plupart des cas de cancers, y compris pour les cancers épithéliaux, la mortalité n'est pas due à la tumeur primaire, mais aux métastases qui s disséminent de manière systémique dans l'organisme, à partir de la tumeur primaire.
Cette progression maligne qui conduit à l'invasion tumorale, qui se manifeste cliniquement par la génération de métastases, est conditionnée initialement par la perte d'adhésion cellulaire de certaines cellules tumorales ainsi que par une augmentation de la motilité cellulaire, ce qui entraîne que ces cellules tumorales invasives quittent le io tissu de la tumeur primaire puis colonisent un ou plusieurs tissus cibles, parfois très distants du site de la tumeurs primaire, dans l'organisme humain ou animal.
Dans les cancers épithéliaux, la progression maligne est accompagnée d'une perte des jonctions inter-cellulaires réalisées par la E-cadhérine, au niveau de la tumeur primitive.
Parmi les cancers épithéliaux, les cancers colo-rectaux représentent les 15 seconds cancers les plus fréquents dans les pays industrialisés.
L'évolution du cancer colo-rectal est une succession d'évènements qui débute par une phase d'initiation due à une dérégulation génomique affectant les propriétés prolifératives des cellules. La seconde phase est une phase de progression tumorale qui conduit à des changements de morphologie cellulaire et à l'émergence de clones cellulaires transformés.
Enfin, la 20 dernière phase consiste en la phase d'invasion consécutive à la transition épithélio-mésenchymateuse, transition définie comme la capacité d'une cellule épithéliale à se séparer des cellules voisines et à migrer vers d'autres sites de l'organisme.
Dans la pratique, il a été montré que les traitements thérapeutiques anti-cancéreux systémiques ont peu d'effet sur les métastases, et en particulier sur les 25 macro-métastases, qui résident dans des organes distants du site de la tumeur primaire, tels que le poumon, le foie, la moelle osseuse ou le cerveau. Ainsi, les patients cancéreux décèdent souvent du fait des cancers métastatiques provoqués par les métastases des cellules cancéreuses.
De plus, jusqu'à présent, la recherche de molécules anti-invasives a 30 généralement été basée (i) soit sur la capacité des composés candidats à
inhiber la croissance des cellules tumorales, (ii) soit sur l'aptitude des composés candidats à
inhiber la migration des cellules. Mais, selon la première stratégie, les composés sélectionnés n'ont pas d'effet sur la dissémination des cellules invasives et donc pas d'effet sur le processus métastatique lui-même. Et, dans le second cas, les composés 35 peuvent avoir une activité d'inhibition de la capacité des cellules à
migrer dans l'organisme et à former des métastatses, mais n'ont pas d'effet sur les cellules métastatiques qui ont déjà migré.
Il existe donc un besoin dans l'état de la technique pour l'identification de substances actives possédant la capacité de prévenir ou de traiter les métastases chez
Dans la plupart des cas de cancers, y compris pour les cancers épithéliaux, la mortalité n'est pas due à la tumeur primaire, mais aux métastases qui s disséminent de manière systémique dans l'organisme, à partir de la tumeur primaire.
Cette progression maligne qui conduit à l'invasion tumorale, qui se manifeste cliniquement par la génération de métastases, est conditionnée initialement par la perte d'adhésion cellulaire de certaines cellules tumorales ainsi que par une augmentation de la motilité cellulaire, ce qui entraîne que ces cellules tumorales invasives quittent le io tissu de la tumeur primaire puis colonisent un ou plusieurs tissus cibles, parfois très distants du site de la tumeurs primaire, dans l'organisme humain ou animal.
Dans les cancers épithéliaux, la progression maligne est accompagnée d'une perte des jonctions inter-cellulaires réalisées par la E-cadhérine, au niveau de la tumeur primitive.
Parmi les cancers épithéliaux, les cancers colo-rectaux représentent les 15 seconds cancers les plus fréquents dans les pays industrialisés.
L'évolution du cancer colo-rectal est une succession d'évènements qui débute par une phase d'initiation due à une dérégulation génomique affectant les propriétés prolifératives des cellules. La seconde phase est une phase de progression tumorale qui conduit à des changements de morphologie cellulaire et à l'émergence de clones cellulaires transformés.
Enfin, la 20 dernière phase consiste en la phase d'invasion consécutive à la transition épithélio-mésenchymateuse, transition définie comme la capacité d'une cellule épithéliale à se séparer des cellules voisines et à migrer vers d'autres sites de l'organisme.
Dans la pratique, il a été montré que les traitements thérapeutiques anti-cancéreux systémiques ont peu d'effet sur les métastases, et en particulier sur les 25 macro-métastases, qui résident dans des organes distants du site de la tumeur primaire, tels que le poumon, le foie, la moelle osseuse ou le cerveau. Ainsi, les patients cancéreux décèdent souvent du fait des cancers métastatiques provoqués par les métastases des cellules cancéreuses.
De plus, jusqu'à présent, la recherche de molécules anti-invasives a 30 généralement été basée (i) soit sur la capacité des composés candidats à
inhiber la croissance des cellules tumorales, (ii) soit sur l'aptitude des composés candidats à
inhiber la migration des cellules. Mais, selon la première stratégie, les composés sélectionnés n'ont pas d'effet sur la dissémination des cellules invasives et donc pas d'effet sur le processus métastatique lui-même. Et, dans le second cas, les composés 35 peuvent avoir une activité d'inhibition de la capacité des cellules à
migrer dans l'organisme et à former des métastatses, mais n'ont pas d'effet sur les cellules métastatiques qui ont déjà migré.
Il existe donc un besoin dans l'état de la technique pour l'identification de substances actives possédant la capacité de prévenir ou de traiter les métastases chez
3 PCT/FR2009/050081 des patients affectés d'un cancer, afin d'accroître significativement les chances de guérison de ces patients.
Résumé de l'invention s La présente invention a pour objet l'utilisation d'un composé choisi parmi un composé inhibiteur d'aminopeptidase et un composé aza-indole pour la fabrication d'un médicament destiné à la prévention ou au traitement des métastases cancéreuses chez l'homme ou l'animal.
Elle est en particulier relative à l'utilisation, pour la fabrication d'un io médicament destiné à la prévention ou au traitement des métastases cancéreuses chez l'homme ou l'animal, d'un composé anti-métastatique choisi parmi les composés de formule (I), (II), (III), (IV), (V) et (VI) qui sont décrits en détail plus loin dans la présente description.
L'invention a trait à l'utilisation définie ci-dessus, pour la prévention ou le 15 traitement des métastases dans le cas de cancers épithéliaux, y compris dans le cas de cancers colo-rectaux, de cancers mammaires, de foie, pancréas, prostate et utérus.
Description des figures 20 La figure 1 est un digramme illustrant l'effet anti-métastatique de chacun des composés de formules (I) ; (II), (III), (IV), (V) et (VI) de l'invention. En ordonnées : la capacité d'invasion des cellules testées, en pourcentage par rapport à la capacité
d'invasion des cellules de la lignée SW620 (ATCC n CCL-227) qui a été
arbitrairement fixée à 100%. En abscisse, de gauche à droite : (i) cellules de la lignée 25 SW620 métastatique colo-rectale incubées avec le milieu de culture seul, (ii) cellules de la lignée Hct116 non métastatique incubées avec le milieu seul, et (iii) cellules de la lignée SW620 métastatiques incubées avec le milieu de culture additionné de chacun des composés de formule (I), (II), (III), (IV), (V) et (VI). Les résultats représentés sur la figure 1 sont une moyenne de trois expériences.
30 La Figure 2 est un diagramme illustrant l'effet anti-métastatique de chacun des composés de formules (I) ; (II), (III), (IV), (V) et (VI) de l'invention dans d'autres lignées cellulaires. En ordonnées : la capacité d'invasion des cellules testées, en pourcentage par rapport à la capacité d'invasion des cellules de la lignée CoLo205 (ATCC n CCL-222) qui a été arbitrairement fixée à 100%. En abscisse, de gauche à droite :
(i) 35 cellules de la lignée CoLo205 métastatique colo-rectale (ATCC n CCL-222) incubées avec le milieu de culture seul ou additionné de chacun des composés de formule (I), (II), (III), (IV), (V) et (VI). Les résultats représentés sur la figure 2 sont une moyenne de trois expériences.
La Figure 3 est un digramme illustrant l'effet anti-métastatique de chacun des 40 composés de formules (I) ; (II), (III), (IV), (V) et (VI) de l'invention.
En ordonnées : la
Résumé de l'invention s La présente invention a pour objet l'utilisation d'un composé choisi parmi un composé inhibiteur d'aminopeptidase et un composé aza-indole pour la fabrication d'un médicament destiné à la prévention ou au traitement des métastases cancéreuses chez l'homme ou l'animal.
Elle est en particulier relative à l'utilisation, pour la fabrication d'un io médicament destiné à la prévention ou au traitement des métastases cancéreuses chez l'homme ou l'animal, d'un composé anti-métastatique choisi parmi les composés de formule (I), (II), (III), (IV), (V) et (VI) qui sont décrits en détail plus loin dans la présente description.
L'invention a trait à l'utilisation définie ci-dessus, pour la prévention ou le 15 traitement des métastases dans le cas de cancers épithéliaux, y compris dans le cas de cancers colo-rectaux, de cancers mammaires, de foie, pancréas, prostate et utérus.
Description des figures 20 La figure 1 est un digramme illustrant l'effet anti-métastatique de chacun des composés de formules (I) ; (II), (III), (IV), (V) et (VI) de l'invention. En ordonnées : la capacité d'invasion des cellules testées, en pourcentage par rapport à la capacité
d'invasion des cellules de la lignée SW620 (ATCC n CCL-227) qui a été
arbitrairement fixée à 100%. En abscisse, de gauche à droite : (i) cellules de la lignée 25 SW620 métastatique colo-rectale incubées avec le milieu de culture seul, (ii) cellules de la lignée Hct116 non métastatique incubées avec le milieu seul, et (iii) cellules de la lignée SW620 métastatiques incubées avec le milieu de culture additionné de chacun des composés de formule (I), (II), (III), (IV), (V) et (VI). Les résultats représentés sur la figure 1 sont une moyenne de trois expériences.
30 La Figure 2 est un diagramme illustrant l'effet anti-métastatique de chacun des composés de formules (I) ; (II), (III), (IV), (V) et (VI) de l'invention dans d'autres lignées cellulaires. En ordonnées : la capacité d'invasion des cellules testées, en pourcentage par rapport à la capacité d'invasion des cellules de la lignée CoLo205 (ATCC n CCL-222) qui a été arbitrairement fixée à 100%. En abscisse, de gauche à droite :
(i) 35 cellules de la lignée CoLo205 métastatique colo-rectale (ATCC n CCL-222) incubées avec le milieu de culture seul ou additionné de chacun des composés de formule (I), (II), (III), (IV), (V) et (VI). Les résultats représentés sur la figure 2 sont une moyenne de trois expériences.
La Figure 3 est un digramme illustrant l'effet anti-métastatique de chacun des 40 composés de formules (I) ; (II), (III), (IV), (V) et (VI) de l'invention.
En ordonnées : la
4 capacité d'invasion des cellules testées, en pourcentage par rapport à la capacité
d'invasion des cellules de la lignée SK-Col métastatique colo-rectale (ATCC n HTB-77 )qui a été arbitrairement fixée à 100%. En abscisse, de gauche à droite :
(i) cellules de la lignée SK-Col métastatique colo-rectale (ATCC n HTB-77) incubées avec le s milieu de culture seul ou additionné de chacun des composés de formule (I), (II), (III), (IV), (V) et (VI). Les résultats représentés sur le figure 3 sont une moyenne de trois expériences.
La Figure 4 est un digramme illustrant l'effet anti-métastatique de chacun des composés de formules (I) ; (II), (III), (IV), (V) et (VI) de l'invention. En ordonnées : la io capacité d'invasion des cellules testées, en pourcentage par rapport à la capacité
d'invasion des cellules de la lignée MDA-MB-231 métastatique d'adénocarcinome mammaire (ATCC n HTB-26) qui a été arbitrairement fixée à 100%. En abscisse, de gauche à droite : (i) cellules de la lignée SW620 métastatiques incubées avec le milieu de culture seul, (ii) cellules de la lignée Hctl16 non métastatique incubées avec le 15 mileiu seul, et (iii) cellules de la lignée MDA-MB-231 métastatique d'adénocarcinome mammaire (ATCC n HTB-26) métastatiques incubées avec le milieu de culture seul ou additionné de chacun des composés de formule (I), (II), (III), (IV), (V) et (VI). Les résultats représentés sur la figure 4 sont une moyenne de trois expériences.
20 Description détaillée de l'invention La présente invention fournit de nouveaux moyens pour prévenir ou traiter les métastases dans divers cancers, en particulier dans les cancers épithéliaux, y compris dans des cancers colo-rectaux, des cancers mammaires, des cancers du foie, des cancers du pancréas, des cancers de la prostate et des cancers de l'utérus..
25 De manière surprenante, il a été montré selon l'invention que des composés inhibiteurs d'aminopeptidase et des composés de la famille des azaindoles ont la capacité d'inhiber ou de bloquer les propriétés invasives de cellules cancéreuses initialement aptes à générer des métastases.
Plus précisément, il est montré selon l'invention que des composés 30 inhibiteurs d'aminopeptidase et des composés de la famille des azaindoles ont la capacité d'inhiber ou de bloquer les propriétés de migration de cellules métastatiques originaires de divers cancers épithéliaux, tels que des cancers colo-rectaux ou bien encore des cancers mammaires.
L'identification des propriétés anti-métastatiques de ces composés a 35 permis au demandeur de mettre au point des compositions pharmaceutiques pour prévenir ou traiter les métastases cancéreuses chez l'homme ou l'animal, comprenant, à titre de principe actif au moins un composé choisi parmi un composé
inhibiteur d'aminopeptidase et un composé azaindole. Cette identification de propriétés préventives ou thérapeutiques nouvelles a rendu possible l'utilisation de ces composés 40 pour la fabrication de compositions pharmaceutiques à activité anti-métastatique.
Ainsi, la présente invention est relative à un composé choisi parmi un composé
inhibiteur d'aminopeptidase et un composé aza-indole pour la prévention ou le traitement de métastases cancéreuses chez l'homme ou l'animal.
La présente invention a aussi pour objet l'utilisation d'un composé choisi s parmi un composé inhibiteur d'aminopeptidase et un composé aza-indole pour la fabrication d'un médicament destiné à la prévention ou au traitement des métastases cancéreuses chez l'homme ou l'animal.
Comme cela est illustré dans les exemples, les composés inhibiteurs d'aminopeptidase et les composés aza-indole identifiés selon l'invention ont la capacité
io d'induire une réversion du phénotype invasif de cellules cancéreuses telles que des cellules de carcinome colo-rectal métastatiques et des cellules d'adénocarcinome mammaire métastatiques.
De plus, le demandeur a montré que les composés inhibiteurs d'aminopeptidase et les composés aza-indole identifiés selon l'invention ne sont pas cytotoxiques.
Sans vouloir être lié par une quelconque théorie, le demandeur pense que les propriétés anti-métastatiques des composés inhibiteurs d'aminopeptidase et des composés aza-indole identifiés selon l'invention sont dues à la capacité
commune de la totalité de ces composés à induire le rétablissement des jonctions cellulaires associées à l'expression de la E-cadhérine à la surface des cellules cancéreuses métastatiques.
La capacité des composés anti-métastatiques de l'invention à induire l'expression de la E-cadhérine à la surface des cellules cancéreuses et ainsi induire le rétablissement des jonctions cellulaires associées à cette expression de la E-cadhérine peut être vérifiée, notamment en réalisant le test décrit dans la demande PCT
publiée sous le n WO 2006/134305 (Centra National de la Recherche Scientifique -ROUX
Pierre et DE TOLEDO Marion).
Selon un premier mode de réalisation d'un composé anti-métastatique qui est utilisé selon l'invention, ledit composé consiste en un composé inhibiteur d'aminopeptidase de formule (I) suivante :
N
O
NN
p-N
N
~ (I) [Analogues structuraux du composé (I) à préciser par les inventeurs, SVP]
Le composé de formule (I) est également désigné dans la présente description le composé 2-(4-[(4-amino-1,2,5-oxadiazol-3-yl) (hydroxyimino)méthyl]-1-piperazinyl)éthanol.
Les composés de formule (I) peuvent être synthétisés selon tout procédé
de synthèse connu de l'homme du métier. Pour synthétiser un composé de formule (I), l'homme du métier peut en particulier se référer au procédé décrit dans le document suivant : Synthesis of secondary and tertiary aminofurazans. Sheremetev, A.
B.;
s Andrianov, V. G.; Mantseva, E. V.; Shatunova, E. V.; Aleksandrova, N. S.;
Yudin, I. L.;
Dmitriev, D. E.; Averkiev, B. B.; Antipin, M. Yu. N. D. Zelinsky Institute of Organic Chemistry, Russian Academy of Sciences, Moscow, Russia. Russian Chemical Bulletin (Translation of Izvestiya Akademii Nauk, Seriya Khimicheskaya) (2004), 53(3), 596-614.
Publisher: Kluwer Academic/Consultants Bureau, CODEN: RCBUEY ISSN: 1066-5285.
1o Journal written in English. CAN 142:219211 AN 2004:589877 CAPLUS
Selon un second mode de réalisation d'un composé anti-métastatique qui est utilisé selon l'invention, ledit composé consiste en un composé azaindole de formule (II) suivante O R, O-N
N \ / O
15 / (Il) dans laquelle le groupe R, est un alkyle linéaire ou ramifié ayant de 1 à 8 atomes de carbone Par alkyle , on entend un groupe hydrocarboné aliphatique linéaire ou ramifié, éventuellement interrompu par un hétéroatome, l'alkyle pouvant être non 20 substitué ou substitué sur les atomes de carbone par un ou plusieurs substituants identiques ou différents, les substituants étant choisis parmi : aryle, hydroxy, alcoxy, aryloxy, alkyloxy, aralkyloxy. Par alkyle ramifié , on entend un alkyle inférieur, ayant 1, 2, 3, 4 ou 5 atomes de carbone, tel que méthyle, éthyle ou propyle qui est lié à une chaîne linéaire alkyle. Les groupes alkyles préférés consistent en des groupes alkyle 25 ayant 1, 2, 3 , 4, 5, 6, 7 ou 8 atomes de carbone. Des exemples de groupes alkyles sont méthyle, éthyle, i-propyle, & butyle, heptyle, decyle ou cyclohexylmethyle.
Par alcoxy , on entend un groupe alkyle-O- dans le quel le groupe alkyle est tel que défini précédemment. Les groupes alcoxy incluent méthoxy, éthoxy, n-propoxy, i-propoxy, n-butoxy et heptoxy.
30 Par aryloxy , on entend un groupe aryle-O dans lequel le groupe aryle est tel que défini précédemment. Les groupes aryloxy incluent le phénoxy et le naphthoxy.
Par aralkyle , on entend un groupe alkyle substitué par un ou plusieurs groupes aryles.
35 Par aralkyloxy , on entend un groupe aralkyle-O- dans lequel le groupe aralkyle est tel que défini précédemment. Les groupes aralkyloxy incluent le benzyloxy.
Un composé de formule (II) préféré selon l'invention est le composé dans lequel le groupe R1 signifie un groupe propyle, qui peut également être désigné dans la présente description comme le composé méthyl 4-[([3-(4-fluorophenyl)-4-oxo-2-thioxo-1,3-thiazolidin-5-ylidene)methyl)benzoate.
s Les composés de formule (II) peuvent être synthétisés selon tout procédé
de synthèse connu de l'homme du métier. Pour synthétiser un composé de formule (ll), l'homme du métier peut en particulier se référer au procédé décrit dans le document suivant : quinazolinone compounds. (Tanabe Seiyaku Co., Ltd., Japan). Jpn.
Kokai Tokkyo Koho (1982), 5 pp. CODEN: JKXXAF JP 57011970 A 19820121 Showa. Patent io written in Japanese. Application: JP 80-86044 19800624. Priority: . CAN
97:72383 AN
1982:472383 CAPLUS Selon un troisième mode de réalisation d'un composé anti-métastatique qui est utilisé selon l'invention, ledit composé consiste en un composé
azaindole de formule (III) suivante N
R, (III) 15 dans laquelle les groupes R1, R2, R3 et R4 représentent chacun, indépendamment l'un de l'autre, un alkyle de 1 à 8 atomes de carbone, dont la définition est identique à celle du groupe R1 du composé de formule (II).
Un composé de formule (III) préféré est le composé dans lequel le groupe R1 signifie un groupe méthyle et les groupes R2, R3 et R4 signifient un groupe éthyle, 20 ledit composé pouvant éagelement être désigné comme le composé 3,4,5-triethoxy-N-(2-methyl-4-nitrophenyl) benzamide.
Les composés de formule (III) peuvent être synthétisés selon tout procédé
de synthèse connu de l'homme du métier. Pour synthétiser un composé de formule (III), l'homme du métier peut en particulier se référer au procédé décrit dans le document 25 suivant : Microwave-assisted synthesis of salicylamide via BC13 mediated coupling.
Zhang, Lei; Zhang, John Y. CytRx Laboratories, Inc., Worcester, MA, USA.
Journal of Combinatorial Chemistry (2005), 7(4), 622-626. Publisher: American Chemical Society, CODEN: JCCHFF ISSN: 1520-4766. Journal written in English. CAN 143:211699 AN
2005:538799 CAPLUS Selon un quatrième mode de réalisation d'un composé anti-30 métastatique qui est utilisé selon l'invention, ledit composé consiste en un composé
azaindole de formule (IV) suivante :
R, NI LN
O O
RZ
O
R3 (IV), dans laquelle les groupes R,, R2 et R3 représentent chacun, indépendamment l'un de l'autre, un halogène choisi parmi un atome de fluor (F), de chlore (C)I, d'iode (I) et de brome (B)r.
Un composé de formule (IV) préféré selon l'invention est le composé dans lequel les groupes R, et R3 signifient chacun un atome de chlore et le groupe R2 signifie un atome de brome, ledit composé pouvant aussi être désigné comme le composé 5-(5-bromo-3-chloro-2-hydroxybenzylidene)-1-(4-chlorophenyl)-2,4,6(1 H,3H,5H)-io pyrimidinetrione.
Les composés de formule (IV) peuvent être synthétisés selon tout procédé
de synthèse connu de l'homme du métier. Pour synthétiser un composé de formule (IV), l'homme du métier peut en particulier se référer au procédé décrit dans le document suivant : Synthesis of pyrimidine derivatives possessing an antioxidative property and is their inhibitory effects on picryl chloride-induced contact hypersensitivity reaction. Isobe, Yoshiaki; Hirota, Kosaku. Pharmaceuticals and Biotechnology Laboratory, Japan Energy Corporation, Saitama, Japan. Chemical & Pharmaceutical Bulletin (2003), 51(12), 1451-1454. Publisher: Pharmaceutical Society of Japan, CODEN: CPBTAL
ISSN: 0009-2363. Journal written in English. CAN 140:174446 AN 2003:989349 Selon un cinquième mode de réalisation d'un composé anti-métastatique qui est utilisé selon l'invention, ledit composé consiste en un composé
azaindole de formule (V) suivante O
R\ N
N
R2 (V), dans laquelle - le groupe R, est un halogène choisi parmi un atome de fluor (F), de chlore (C)I, d'iode (I) et de brome (B)r, et - le groupe R2 est un alkyle linéaire ou ramifié ayant de 1 à 8 atomes de carbone, dont la définition est identique à celle du groupe R, du composé de formule (II).
Un composé de formule (V) préféré est le composé dans lequel le groupe R1 signifie un atome de brome et le groupe R2 signifie un groupe éthyle, ledit composé
s pouvant également être désigné comme le composé 5-bromo-N-(4-butoxyphenyl) nicotinamide.
Les composés de formule (V) peuvent être synthétisés selon tout procédé
de synthèse connu de l'homme du métier. Pour synthétiser un composé de formule (V), l'homme du métier peut en particulier se référer au procédé décrit dans le document io suivant : Application of organolithium and related reagents in synthesis, 30. Behavior of N-pyridylbenzamides versus benzanilides in the ortho-directed lithiation of masked aromatic carboxylic acids. Jozwiak, Andrzej; Brzezinski, Jacek Z.; Plotka, Mieczyslaw W.; Szczesniak, Aleksandra K.; Malinowski, Zbigniew; Epsztajn, Jan. Department of Organic Chemistry, Institute of Chemistry, University of Lodz, Lodz, Pol.
European is Journal of Organic Chemistry (2004), (15), 3254-3261. Publisher: Wiley-VCH
Verlag GmbH & Co. KGaA, CODEN: EJOCFK ISSN: 1434-193X. Journal written in English.
CAN 141:295825 AN 2004:636845 CAPLUS
Selon un sixième mode de réalisation d'un composé anti-métastatique qui est utilisé selon l'invention, ledit composé consiste en un composé azaindole de formule 20 (VI) suivante (VI), dans laquelle le groupe R, est un halogène choisi parmi un atome de fluor (F), de chlore (C)I, d'iode (I) et de brome (B)r.
Le composé de formule (VI) peut être aussi désigné le composé 3-chloro-25 1-phenyl-4-[(2-phenylethyl)amino]-1 Hpyrrole-2,5-dione.
Les composés de formule (VI) peuvent être synthétisés selon tout procédé
de synthèse connu de l'homme du métier. Les composés de formule (VI) consistent en des composés aisément accessibles dans le commerce. On peut citer notamment le composé de formule VI consistant en le 3-chloro-1-phenyl-4-[(2-phenylethyl)amino]-1 H-30 pyrrole-2,5-dione qui est notamment commercialisé par la société Chembridge (San Diego, Etats-Unis d'Amérique) sous la référence ID 6137235.
Ainsi, selon l'invention, les principes actifs préférés qui sont utilisés pour fabriquer un médicament destiné à la prévention ou au traitement des métastases cancéreuses chez l'homme ou l'animal sont choisis parmi :
35 - le méthyl 4-[([3-(4-fluorophenyl)-4-oxo-2-thioxo-1,3-thiazolidin-5-ylidene)methyl)benzoate ;
- le 3,4,5-triethoxy-N-(2-methyl-4-nitrophenyl) benzamide ;
- le 5-(5-bromo-3-chloro-2-hydroxybenzylidene)-1-(4-chlorophenyl)-2,4,6(1 H,3H,5H)-pyrimidinetrione ;
- le 5-bromo-N-(4-butoxyphenyl) nicotinamide ; et s - le 3-chloro-1-phenyl-4-[(2-phenylethyl)amino]-1 Hpyrrole-2,5-dione.
Selon un premier aspect préféré, les composés inhibiteurs d'aminopeptidase et les composés azaindoles d'intérêt selon l'invention sont utilisés pour la fabrication d'un médicament destiné à la prévention ou au traitement des cancers épithéliaux.
10 Selon un second aspect préféré, les composés inhibiteur d'aminopeptidase et les composés azaindoles d'intérêt selon l'invention sont utilisés pour la fabrication d'un médicament destiné à la prévention ou au traitement d'un cancer épithélial choisi parmi un cancer colo-rectal et un cancer mammaire.
Parmi les compositions pharmaceutiques selon l'invention, on pourra citer plus particulièrement celles qui conviennent pour l'administration orale, parentérale, nasale, percutanée, transcutanée, rectale, perlinguale ou respiratoire et notamment les comprimés simples ou dragéifiés, les comprimés sublinguaux, les gélules, les tablettes, les suppositoires, les crèmes, les pommades, les gels dermiques, et les ampoules buvables ou injectables.
La posologie varie selon le sexe, l'âge et le poids du patient, selon la voie d'administration, et selon le type de cancer, l'état de progression du cancer, en particulier selon que des métastases ont été détectées ou non chez le patient.
La posologie peut également varier selon le type du ou des traitement(s) anti-cancéreux associé(s).
De manière générale, on utilise un composé anti-métastatique tel que défini dans la présente description dans des quantités allant de 0,01 mg à 1 g par 24 heures pour un homme ou une femme adulte d'un poids moyen de 80 Kilos, en une ou plusieurs prises.
Une composition pharmaceutique selon l'invention comprend le composé
3o anti-métastatique en association avec au moins un excipient choisi dans le groupe constitué par les excipients pharmaceutiquement acceptables.
De manière générale, une composition pharmaceutique selon l'invention comprend de 0,01 % à 99% en poids, et avantageusement de 1 % à 90% en poids, d'un composé anti-métastatique , par rapport au poids total de ladite composition.
De manière générale, une composition pharmaceutique selon l'invention comprend de 1% à 99,99% en poids, et avantageusement de 10% à 99% en poids, d'un excipient ou d'une combinaison d'excipients pharmaceutiquement acceptables.
La composition pharmaceutique de la présente invention peut être utilisée pour une administration parentérale, topique ou locale et de manière prophylactique et/ou thérapeutique. Ainsi le composé anti-métastatique selon la présente invention est préparé sous une forme adaptée au type d'administration choisi, par exemple sous forme liquide ou sous forme lyophilisée. Les compositions pharmaceutiques comprenant un composé anti-métastatique selon l'invention peuvent contenir un excipient et/ou un véhicule pharmaceutique ment acceptable, de préférence aqueux. De s nombreux excipients et/ou véhicules pharmaceutiquement acceptables peuvent être utilisés, par exemple, l'eau, l'eau tamponnée, une solution saline, une solution de glycine et leurs dérivés ainsi que des agents nécessaires pour reproduire les conditions physiologiques comme par exemple des agents tampons et ajusteurs de pH, des surfactants comme l'acétate de sodium, le lactate de sodium, le chlorure de sodium, le 1o chlorure de potassium, le chlorure de calcium, cette liste n'étant pas limitative. De plus, la composition pharmaceutique peut être stérilisée par des techniques de stérilisation bien connues de l'homme du métier.
Pour les excipients ou véhicules inertes, non toxiques, pharmaceutiquement acceptables, on peut aussi citer à titre indicatif et non limitatif les diluants, les solvants, 15 les conservateurs, les agents mouillants, les émulsifiants, les agents dispersants, les liants, les agents gonflants, les agents désintégrants, les retardants, les lubrifiants, les absorbants, les agents de suspension, les colorants, les agents d'arôme, etc.
Lorsqu'on prépare une composition solide sous forme de comprimés, on mélange l'ingrédient actif principal avec un véhicule pharmaceutique tel que la gélatine, 20 l'amidon, le lactose, le stéarate de magnésium, le talc, la gomme arabique ou analogues.
On peut enrober les comprimés de saccharose ou d'autres matières premières appropriées ou encore on peut les traiter de telle sorte qu'ils aient une activité
prolongée ou retardée et qu'ils libèrent d'une façon continue une quantité
25 prédéterminée de principe actif.
On obtient une préparation en gélules en mélangeant l'ingrédient actif avec un diluant et en versant le mélange obtenu dans des gélules molles ou dures.
Une composition pharmaceutique sous forme de sirop ou d'élixir peut contenir l'ingrédient actif conjointement avec un édulcorant, acalorique de préférence, du 30 méthylparaben et du propylparaben comme antiseptiques, ainsi qu'un agent donnant du goût et un colorant approprié.
Les poudres ou les granules dispersibles dans l'eau peuvent contenir l'ingrédient actif en mélange avec des agents de dispersion ou des agents mouillants ou des agents de mise en suspension, comme le polyvinylpyrrolodinone, de même qu'avec des 35 édulcorants ou des correcteurs de goût.
Le principe actif peut être formulé également sous forme de microcapsules, éventuellement avec un ou plusieurs supports ou additifs.
De manière générale, pour fabriquer une composition pharmaceutique conforme à l'invention, l'homme du métier peut avantageusement se référer à la dernière édition 4o de la Pharmacopée Européenne, par exemple à la 5è édition de la Pharmacopée Européenne publiée en janvier 2005, ou bien encore à la 6è édition de la Pharmacopée Européenne, disponible au public en juin 2007.
Des techniques de préparation de compositions pharmaceutiques selon l'invention peuvent être aisément retrouvées par l'homme du métier, par exemple dans s l'ouvrage Remmingston's Pharmaceutical Sciences, Mid. Publishing Co, Easton, PA, USA.
Des adjuvants, des véhicules et des excipients physiologiquement acceptables sont aussi décrits dans l'ouvrage intitulé "Handbook of Pharmaceutical Excipients, Seconde édition, American Pharmaceutical Association, 1994.
Pour formuler une composition pharmaceutique selon l'invention, l'homme du métier pourra avantageusement se référer à la dernière édition de la Pharmacopée Européenne ou de la Pharmacopée des Etats-Unis d'Amérique (USP).
L'homme du métier pourra notamment avantageusement se référer à
l'édition USP 30-NF 25 de la Pharmacopée Américaine (U.S. Pharmacopeia).
Avantageusement, une composition pharmaceutique telle que définie ci-dessus est adaptée pour une administration orale, parentérale ou intraveineuse.
Lorsque la composition pharmaceutique selon l'invention comprend au moins un excipient pharmaceutique ou physiologiquement acceptable, il s'agit en particulier d'un excipient approprié pour une administration de la composition par voie orale ou d'un excipient approprié pour une administration de la composition par voie parentérale.
L'invention concerne aussi une méthode pour prévenir ou traiter un trouble lié à un déséquilibre du métabolisme osseux, en particulier un trouble associé
à une perte de la masse osseuse, ladite méthode comprenant une étape au cours de laquelle on administre aux patients une quantité thérapeutique ment efficace d'un composé anti-métastatique tel que défini dans la présente description ou encore d'une composition pharmaceutique contenant ledit composé anti-métastatique.
Une composition pharmaceutique comprenant un composé anti-métastatique selon l'invention se présente indifféremment sous une forme solide ou sous une forme liquide.
Pour une administration orale, on préférera une composition pharmaceutique solide, sous la forme de comprimés, de capsules ou de gélules.
Sous la forme liquide, on préférera une composition pharmaceutique sous la forme d'une suspension aqueuse ou d'une suspension non aqueuse, ou encore sous la forme d'une émulsion eau-dans-huile ou huile-dans-eau.
Des formes pharmaceutiques solides peuvent comprendre, en tant que véhicules, adjuvants ou excipients, au moins un agent diluant, un arôme, un agent solubilisant, un agent lubrifiant, un agent de suspension, un agent liant, un agent désintégrant et un agent d'encapsulation.
De tels composés sont par exemple le carbonate de magnésium, le stéarate de magnésium, le talc, le lactose, la pectine, la dextrine, l'amidon, la gélatine, des matériaux cellulosiques, du beurre de cacao, etc.
Les compositions sous forme liquide peuvent comprendre également de s l'eau, le cas échéant en mélange avec du propylène glycol ou du polyéthylène glycol, et éventuellement aussi des agents de coloration, des arômes, des stabilisants et des agents épaississants.
L'invention est en outre illustrée, sans pour autant être limitée, par l'exemple suivant.
Exemple 1 : Propriétés anti-invasives des composés anti-métastatiques de l'invention.
A. MATERIEL ET METHODES
1. Protocole de marquage E-cadherine en plaques 96 puits 1- Ensemencer environ 10.000 cellules par puits pour des lignées colorectales (dans des plaques 96 puits Falcon, ref : 353072).
2- Faire les traitements nécessaires (contrôle, composé (I), (II) etc..
.pendant 48h) et fixer 10 minutes à la formalin (Formadéhyde 3,7% dans PBS) 3- Saturation, 10 minutes PBS-BSA
4- Incubation de l'anticorps primaire, dilué au 1:500 dans PBS-BSA, 2 heures à
37 C (Anti E-cadhérine de souris, ZYMED, ref : 13-1700)
d'invasion des cellules de la lignée SK-Col métastatique colo-rectale (ATCC n HTB-77 )qui a été arbitrairement fixée à 100%. En abscisse, de gauche à droite :
(i) cellules de la lignée SK-Col métastatique colo-rectale (ATCC n HTB-77) incubées avec le s milieu de culture seul ou additionné de chacun des composés de formule (I), (II), (III), (IV), (V) et (VI). Les résultats représentés sur le figure 3 sont une moyenne de trois expériences.
La Figure 4 est un digramme illustrant l'effet anti-métastatique de chacun des composés de formules (I) ; (II), (III), (IV), (V) et (VI) de l'invention. En ordonnées : la io capacité d'invasion des cellules testées, en pourcentage par rapport à la capacité
d'invasion des cellules de la lignée MDA-MB-231 métastatique d'adénocarcinome mammaire (ATCC n HTB-26) qui a été arbitrairement fixée à 100%. En abscisse, de gauche à droite : (i) cellules de la lignée SW620 métastatiques incubées avec le milieu de culture seul, (ii) cellules de la lignée Hctl16 non métastatique incubées avec le 15 mileiu seul, et (iii) cellules de la lignée MDA-MB-231 métastatique d'adénocarcinome mammaire (ATCC n HTB-26) métastatiques incubées avec le milieu de culture seul ou additionné de chacun des composés de formule (I), (II), (III), (IV), (V) et (VI). Les résultats représentés sur la figure 4 sont une moyenne de trois expériences.
20 Description détaillée de l'invention La présente invention fournit de nouveaux moyens pour prévenir ou traiter les métastases dans divers cancers, en particulier dans les cancers épithéliaux, y compris dans des cancers colo-rectaux, des cancers mammaires, des cancers du foie, des cancers du pancréas, des cancers de la prostate et des cancers de l'utérus..
25 De manière surprenante, il a été montré selon l'invention que des composés inhibiteurs d'aminopeptidase et des composés de la famille des azaindoles ont la capacité d'inhiber ou de bloquer les propriétés invasives de cellules cancéreuses initialement aptes à générer des métastases.
Plus précisément, il est montré selon l'invention que des composés 30 inhibiteurs d'aminopeptidase et des composés de la famille des azaindoles ont la capacité d'inhiber ou de bloquer les propriétés de migration de cellules métastatiques originaires de divers cancers épithéliaux, tels que des cancers colo-rectaux ou bien encore des cancers mammaires.
L'identification des propriétés anti-métastatiques de ces composés a 35 permis au demandeur de mettre au point des compositions pharmaceutiques pour prévenir ou traiter les métastases cancéreuses chez l'homme ou l'animal, comprenant, à titre de principe actif au moins un composé choisi parmi un composé
inhibiteur d'aminopeptidase et un composé azaindole. Cette identification de propriétés préventives ou thérapeutiques nouvelles a rendu possible l'utilisation de ces composés 40 pour la fabrication de compositions pharmaceutiques à activité anti-métastatique.
Ainsi, la présente invention est relative à un composé choisi parmi un composé
inhibiteur d'aminopeptidase et un composé aza-indole pour la prévention ou le traitement de métastases cancéreuses chez l'homme ou l'animal.
La présente invention a aussi pour objet l'utilisation d'un composé choisi s parmi un composé inhibiteur d'aminopeptidase et un composé aza-indole pour la fabrication d'un médicament destiné à la prévention ou au traitement des métastases cancéreuses chez l'homme ou l'animal.
Comme cela est illustré dans les exemples, les composés inhibiteurs d'aminopeptidase et les composés aza-indole identifiés selon l'invention ont la capacité
io d'induire une réversion du phénotype invasif de cellules cancéreuses telles que des cellules de carcinome colo-rectal métastatiques et des cellules d'adénocarcinome mammaire métastatiques.
De plus, le demandeur a montré que les composés inhibiteurs d'aminopeptidase et les composés aza-indole identifiés selon l'invention ne sont pas cytotoxiques.
Sans vouloir être lié par une quelconque théorie, le demandeur pense que les propriétés anti-métastatiques des composés inhibiteurs d'aminopeptidase et des composés aza-indole identifiés selon l'invention sont dues à la capacité
commune de la totalité de ces composés à induire le rétablissement des jonctions cellulaires associées à l'expression de la E-cadhérine à la surface des cellules cancéreuses métastatiques.
La capacité des composés anti-métastatiques de l'invention à induire l'expression de la E-cadhérine à la surface des cellules cancéreuses et ainsi induire le rétablissement des jonctions cellulaires associées à cette expression de la E-cadhérine peut être vérifiée, notamment en réalisant le test décrit dans la demande PCT
publiée sous le n WO 2006/134305 (Centra National de la Recherche Scientifique -ROUX
Pierre et DE TOLEDO Marion).
Selon un premier mode de réalisation d'un composé anti-métastatique qui est utilisé selon l'invention, ledit composé consiste en un composé inhibiteur d'aminopeptidase de formule (I) suivante :
N
O
NN
p-N
N
~ (I) [Analogues structuraux du composé (I) à préciser par les inventeurs, SVP]
Le composé de formule (I) est également désigné dans la présente description le composé 2-(4-[(4-amino-1,2,5-oxadiazol-3-yl) (hydroxyimino)méthyl]-1-piperazinyl)éthanol.
Les composés de formule (I) peuvent être synthétisés selon tout procédé
de synthèse connu de l'homme du métier. Pour synthétiser un composé de formule (I), l'homme du métier peut en particulier se référer au procédé décrit dans le document suivant : Synthesis of secondary and tertiary aminofurazans. Sheremetev, A.
B.;
s Andrianov, V. G.; Mantseva, E. V.; Shatunova, E. V.; Aleksandrova, N. S.;
Yudin, I. L.;
Dmitriev, D. E.; Averkiev, B. B.; Antipin, M. Yu. N. D. Zelinsky Institute of Organic Chemistry, Russian Academy of Sciences, Moscow, Russia. Russian Chemical Bulletin (Translation of Izvestiya Akademii Nauk, Seriya Khimicheskaya) (2004), 53(3), 596-614.
Publisher: Kluwer Academic/Consultants Bureau, CODEN: RCBUEY ISSN: 1066-5285.
1o Journal written in English. CAN 142:219211 AN 2004:589877 CAPLUS
Selon un second mode de réalisation d'un composé anti-métastatique qui est utilisé selon l'invention, ledit composé consiste en un composé azaindole de formule (II) suivante O R, O-N
N \ / O
15 / (Il) dans laquelle le groupe R, est un alkyle linéaire ou ramifié ayant de 1 à 8 atomes de carbone Par alkyle , on entend un groupe hydrocarboné aliphatique linéaire ou ramifié, éventuellement interrompu par un hétéroatome, l'alkyle pouvant être non 20 substitué ou substitué sur les atomes de carbone par un ou plusieurs substituants identiques ou différents, les substituants étant choisis parmi : aryle, hydroxy, alcoxy, aryloxy, alkyloxy, aralkyloxy. Par alkyle ramifié , on entend un alkyle inférieur, ayant 1, 2, 3, 4 ou 5 atomes de carbone, tel que méthyle, éthyle ou propyle qui est lié à une chaîne linéaire alkyle. Les groupes alkyles préférés consistent en des groupes alkyle 25 ayant 1, 2, 3 , 4, 5, 6, 7 ou 8 atomes de carbone. Des exemples de groupes alkyles sont méthyle, éthyle, i-propyle, & butyle, heptyle, decyle ou cyclohexylmethyle.
Par alcoxy , on entend un groupe alkyle-O- dans le quel le groupe alkyle est tel que défini précédemment. Les groupes alcoxy incluent méthoxy, éthoxy, n-propoxy, i-propoxy, n-butoxy et heptoxy.
30 Par aryloxy , on entend un groupe aryle-O dans lequel le groupe aryle est tel que défini précédemment. Les groupes aryloxy incluent le phénoxy et le naphthoxy.
Par aralkyle , on entend un groupe alkyle substitué par un ou plusieurs groupes aryles.
35 Par aralkyloxy , on entend un groupe aralkyle-O- dans lequel le groupe aralkyle est tel que défini précédemment. Les groupes aralkyloxy incluent le benzyloxy.
Un composé de formule (II) préféré selon l'invention est le composé dans lequel le groupe R1 signifie un groupe propyle, qui peut également être désigné dans la présente description comme le composé méthyl 4-[([3-(4-fluorophenyl)-4-oxo-2-thioxo-1,3-thiazolidin-5-ylidene)methyl)benzoate.
s Les composés de formule (II) peuvent être synthétisés selon tout procédé
de synthèse connu de l'homme du métier. Pour synthétiser un composé de formule (ll), l'homme du métier peut en particulier se référer au procédé décrit dans le document suivant : quinazolinone compounds. (Tanabe Seiyaku Co., Ltd., Japan). Jpn.
Kokai Tokkyo Koho (1982), 5 pp. CODEN: JKXXAF JP 57011970 A 19820121 Showa. Patent io written in Japanese. Application: JP 80-86044 19800624. Priority: . CAN
97:72383 AN
1982:472383 CAPLUS Selon un troisième mode de réalisation d'un composé anti-métastatique qui est utilisé selon l'invention, ledit composé consiste en un composé
azaindole de formule (III) suivante N
R, (III) 15 dans laquelle les groupes R1, R2, R3 et R4 représentent chacun, indépendamment l'un de l'autre, un alkyle de 1 à 8 atomes de carbone, dont la définition est identique à celle du groupe R1 du composé de formule (II).
Un composé de formule (III) préféré est le composé dans lequel le groupe R1 signifie un groupe méthyle et les groupes R2, R3 et R4 signifient un groupe éthyle, 20 ledit composé pouvant éagelement être désigné comme le composé 3,4,5-triethoxy-N-(2-methyl-4-nitrophenyl) benzamide.
Les composés de formule (III) peuvent être synthétisés selon tout procédé
de synthèse connu de l'homme du métier. Pour synthétiser un composé de formule (III), l'homme du métier peut en particulier se référer au procédé décrit dans le document 25 suivant : Microwave-assisted synthesis of salicylamide via BC13 mediated coupling.
Zhang, Lei; Zhang, John Y. CytRx Laboratories, Inc., Worcester, MA, USA.
Journal of Combinatorial Chemistry (2005), 7(4), 622-626. Publisher: American Chemical Society, CODEN: JCCHFF ISSN: 1520-4766. Journal written in English. CAN 143:211699 AN
2005:538799 CAPLUS Selon un quatrième mode de réalisation d'un composé anti-30 métastatique qui est utilisé selon l'invention, ledit composé consiste en un composé
azaindole de formule (IV) suivante :
R, NI LN
O O
RZ
O
R3 (IV), dans laquelle les groupes R,, R2 et R3 représentent chacun, indépendamment l'un de l'autre, un halogène choisi parmi un atome de fluor (F), de chlore (C)I, d'iode (I) et de brome (B)r.
Un composé de formule (IV) préféré selon l'invention est le composé dans lequel les groupes R, et R3 signifient chacun un atome de chlore et le groupe R2 signifie un atome de brome, ledit composé pouvant aussi être désigné comme le composé 5-(5-bromo-3-chloro-2-hydroxybenzylidene)-1-(4-chlorophenyl)-2,4,6(1 H,3H,5H)-io pyrimidinetrione.
Les composés de formule (IV) peuvent être synthétisés selon tout procédé
de synthèse connu de l'homme du métier. Pour synthétiser un composé de formule (IV), l'homme du métier peut en particulier se référer au procédé décrit dans le document suivant : Synthesis of pyrimidine derivatives possessing an antioxidative property and is their inhibitory effects on picryl chloride-induced contact hypersensitivity reaction. Isobe, Yoshiaki; Hirota, Kosaku. Pharmaceuticals and Biotechnology Laboratory, Japan Energy Corporation, Saitama, Japan. Chemical & Pharmaceutical Bulletin (2003), 51(12), 1451-1454. Publisher: Pharmaceutical Society of Japan, CODEN: CPBTAL
ISSN: 0009-2363. Journal written in English. CAN 140:174446 AN 2003:989349 Selon un cinquième mode de réalisation d'un composé anti-métastatique qui est utilisé selon l'invention, ledit composé consiste en un composé
azaindole de formule (V) suivante O
R\ N
N
R2 (V), dans laquelle - le groupe R, est un halogène choisi parmi un atome de fluor (F), de chlore (C)I, d'iode (I) et de brome (B)r, et - le groupe R2 est un alkyle linéaire ou ramifié ayant de 1 à 8 atomes de carbone, dont la définition est identique à celle du groupe R, du composé de formule (II).
Un composé de formule (V) préféré est le composé dans lequel le groupe R1 signifie un atome de brome et le groupe R2 signifie un groupe éthyle, ledit composé
s pouvant également être désigné comme le composé 5-bromo-N-(4-butoxyphenyl) nicotinamide.
Les composés de formule (V) peuvent être synthétisés selon tout procédé
de synthèse connu de l'homme du métier. Pour synthétiser un composé de formule (V), l'homme du métier peut en particulier se référer au procédé décrit dans le document io suivant : Application of organolithium and related reagents in synthesis, 30. Behavior of N-pyridylbenzamides versus benzanilides in the ortho-directed lithiation of masked aromatic carboxylic acids. Jozwiak, Andrzej; Brzezinski, Jacek Z.; Plotka, Mieczyslaw W.; Szczesniak, Aleksandra K.; Malinowski, Zbigniew; Epsztajn, Jan. Department of Organic Chemistry, Institute of Chemistry, University of Lodz, Lodz, Pol.
European is Journal of Organic Chemistry (2004), (15), 3254-3261. Publisher: Wiley-VCH
Verlag GmbH & Co. KGaA, CODEN: EJOCFK ISSN: 1434-193X. Journal written in English.
CAN 141:295825 AN 2004:636845 CAPLUS
Selon un sixième mode de réalisation d'un composé anti-métastatique qui est utilisé selon l'invention, ledit composé consiste en un composé azaindole de formule 20 (VI) suivante (VI), dans laquelle le groupe R, est un halogène choisi parmi un atome de fluor (F), de chlore (C)I, d'iode (I) et de brome (B)r.
Le composé de formule (VI) peut être aussi désigné le composé 3-chloro-25 1-phenyl-4-[(2-phenylethyl)amino]-1 Hpyrrole-2,5-dione.
Les composés de formule (VI) peuvent être synthétisés selon tout procédé
de synthèse connu de l'homme du métier. Les composés de formule (VI) consistent en des composés aisément accessibles dans le commerce. On peut citer notamment le composé de formule VI consistant en le 3-chloro-1-phenyl-4-[(2-phenylethyl)amino]-1 H-30 pyrrole-2,5-dione qui est notamment commercialisé par la société Chembridge (San Diego, Etats-Unis d'Amérique) sous la référence ID 6137235.
Ainsi, selon l'invention, les principes actifs préférés qui sont utilisés pour fabriquer un médicament destiné à la prévention ou au traitement des métastases cancéreuses chez l'homme ou l'animal sont choisis parmi :
35 - le méthyl 4-[([3-(4-fluorophenyl)-4-oxo-2-thioxo-1,3-thiazolidin-5-ylidene)methyl)benzoate ;
- le 3,4,5-triethoxy-N-(2-methyl-4-nitrophenyl) benzamide ;
- le 5-(5-bromo-3-chloro-2-hydroxybenzylidene)-1-(4-chlorophenyl)-2,4,6(1 H,3H,5H)-pyrimidinetrione ;
- le 5-bromo-N-(4-butoxyphenyl) nicotinamide ; et s - le 3-chloro-1-phenyl-4-[(2-phenylethyl)amino]-1 Hpyrrole-2,5-dione.
Selon un premier aspect préféré, les composés inhibiteurs d'aminopeptidase et les composés azaindoles d'intérêt selon l'invention sont utilisés pour la fabrication d'un médicament destiné à la prévention ou au traitement des cancers épithéliaux.
10 Selon un second aspect préféré, les composés inhibiteur d'aminopeptidase et les composés azaindoles d'intérêt selon l'invention sont utilisés pour la fabrication d'un médicament destiné à la prévention ou au traitement d'un cancer épithélial choisi parmi un cancer colo-rectal et un cancer mammaire.
Parmi les compositions pharmaceutiques selon l'invention, on pourra citer plus particulièrement celles qui conviennent pour l'administration orale, parentérale, nasale, percutanée, transcutanée, rectale, perlinguale ou respiratoire et notamment les comprimés simples ou dragéifiés, les comprimés sublinguaux, les gélules, les tablettes, les suppositoires, les crèmes, les pommades, les gels dermiques, et les ampoules buvables ou injectables.
La posologie varie selon le sexe, l'âge et le poids du patient, selon la voie d'administration, et selon le type de cancer, l'état de progression du cancer, en particulier selon que des métastases ont été détectées ou non chez le patient.
La posologie peut également varier selon le type du ou des traitement(s) anti-cancéreux associé(s).
De manière générale, on utilise un composé anti-métastatique tel que défini dans la présente description dans des quantités allant de 0,01 mg à 1 g par 24 heures pour un homme ou une femme adulte d'un poids moyen de 80 Kilos, en une ou plusieurs prises.
Une composition pharmaceutique selon l'invention comprend le composé
3o anti-métastatique en association avec au moins un excipient choisi dans le groupe constitué par les excipients pharmaceutiquement acceptables.
De manière générale, une composition pharmaceutique selon l'invention comprend de 0,01 % à 99% en poids, et avantageusement de 1 % à 90% en poids, d'un composé anti-métastatique , par rapport au poids total de ladite composition.
De manière générale, une composition pharmaceutique selon l'invention comprend de 1% à 99,99% en poids, et avantageusement de 10% à 99% en poids, d'un excipient ou d'une combinaison d'excipients pharmaceutiquement acceptables.
La composition pharmaceutique de la présente invention peut être utilisée pour une administration parentérale, topique ou locale et de manière prophylactique et/ou thérapeutique. Ainsi le composé anti-métastatique selon la présente invention est préparé sous une forme adaptée au type d'administration choisi, par exemple sous forme liquide ou sous forme lyophilisée. Les compositions pharmaceutiques comprenant un composé anti-métastatique selon l'invention peuvent contenir un excipient et/ou un véhicule pharmaceutique ment acceptable, de préférence aqueux. De s nombreux excipients et/ou véhicules pharmaceutiquement acceptables peuvent être utilisés, par exemple, l'eau, l'eau tamponnée, une solution saline, une solution de glycine et leurs dérivés ainsi que des agents nécessaires pour reproduire les conditions physiologiques comme par exemple des agents tampons et ajusteurs de pH, des surfactants comme l'acétate de sodium, le lactate de sodium, le chlorure de sodium, le 1o chlorure de potassium, le chlorure de calcium, cette liste n'étant pas limitative. De plus, la composition pharmaceutique peut être stérilisée par des techniques de stérilisation bien connues de l'homme du métier.
Pour les excipients ou véhicules inertes, non toxiques, pharmaceutiquement acceptables, on peut aussi citer à titre indicatif et non limitatif les diluants, les solvants, 15 les conservateurs, les agents mouillants, les émulsifiants, les agents dispersants, les liants, les agents gonflants, les agents désintégrants, les retardants, les lubrifiants, les absorbants, les agents de suspension, les colorants, les agents d'arôme, etc.
Lorsqu'on prépare une composition solide sous forme de comprimés, on mélange l'ingrédient actif principal avec un véhicule pharmaceutique tel que la gélatine, 20 l'amidon, le lactose, le stéarate de magnésium, le talc, la gomme arabique ou analogues.
On peut enrober les comprimés de saccharose ou d'autres matières premières appropriées ou encore on peut les traiter de telle sorte qu'ils aient une activité
prolongée ou retardée et qu'ils libèrent d'une façon continue une quantité
25 prédéterminée de principe actif.
On obtient une préparation en gélules en mélangeant l'ingrédient actif avec un diluant et en versant le mélange obtenu dans des gélules molles ou dures.
Une composition pharmaceutique sous forme de sirop ou d'élixir peut contenir l'ingrédient actif conjointement avec un édulcorant, acalorique de préférence, du 30 méthylparaben et du propylparaben comme antiseptiques, ainsi qu'un agent donnant du goût et un colorant approprié.
Les poudres ou les granules dispersibles dans l'eau peuvent contenir l'ingrédient actif en mélange avec des agents de dispersion ou des agents mouillants ou des agents de mise en suspension, comme le polyvinylpyrrolodinone, de même qu'avec des 35 édulcorants ou des correcteurs de goût.
Le principe actif peut être formulé également sous forme de microcapsules, éventuellement avec un ou plusieurs supports ou additifs.
De manière générale, pour fabriquer une composition pharmaceutique conforme à l'invention, l'homme du métier peut avantageusement se référer à la dernière édition 4o de la Pharmacopée Européenne, par exemple à la 5è édition de la Pharmacopée Européenne publiée en janvier 2005, ou bien encore à la 6è édition de la Pharmacopée Européenne, disponible au public en juin 2007.
Des techniques de préparation de compositions pharmaceutiques selon l'invention peuvent être aisément retrouvées par l'homme du métier, par exemple dans s l'ouvrage Remmingston's Pharmaceutical Sciences, Mid. Publishing Co, Easton, PA, USA.
Des adjuvants, des véhicules et des excipients physiologiquement acceptables sont aussi décrits dans l'ouvrage intitulé "Handbook of Pharmaceutical Excipients, Seconde édition, American Pharmaceutical Association, 1994.
Pour formuler une composition pharmaceutique selon l'invention, l'homme du métier pourra avantageusement se référer à la dernière édition de la Pharmacopée Européenne ou de la Pharmacopée des Etats-Unis d'Amérique (USP).
L'homme du métier pourra notamment avantageusement se référer à
l'édition USP 30-NF 25 de la Pharmacopée Américaine (U.S. Pharmacopeia).
Avantageusement, une composition pharmaceutique telle que définie ci-dessus est adaptée pour une administration orale, parentérale ou intraveineuse.
Lorsque la composition pharmaceutique selon l'invention comprend au moins un excipient pharmaceutique ou physiologiquement acceptable, il s'agit en particulier d'un excipient approprié pour une administration de la composition par voie orale ou d'un excipient approprié pour une administration de la composition par voie parentérale.
L'invention concerne aussi une méthode pour prévenir ou traiter un trouble lié à un déséquilibre du métabolisme osseux, en particulier un trouble associé
à une perte de la masse osseuse, ladite méthode comprenant une étape au cours de laquelle on administre aux patients une quantité thérapeutique ment efficace d'un composé anti-métastatique tel que défini dans la présente description ou encore d'une composition pharmaceutique contenant ledit composé anti-métastatique.
Une composition pharmaceutique comprenant un composé anti-métastatique selon l'invention se présente indifféremment sous une forme solide ou sous une forme liquide.
Pour une administration orale, on préférera une composition pharmaceutique solide, sous la forme de comprimés, de capsules ou de gélules.
Sous la forme liquide, on préférera une composition pharmaceutique sous la forme d'une suspension aqueuse ou d'une suspension non aqueuse, ou encore sous la forme d'une émulsion eau-dans-huile ou huile-dans-eau.
Des formes pharmaceutiques solides peuvent comprendre, en tant que véhicules, adjuvants ou excipients, au moins un agent diluant, un arôme, un agent solubilisant, un agent lubrifiant, un agent de suspension, un agent liant, un agent désintégrant et un agent d'encapsulation.
De tels composés sont par exemple le carbonate de magnésium, le stéarate de magnésium, le talc, le lactose, la pectine, la dextrine, l'amidon, la gélatine, des matériaux cellulosiques, du beurre de cacao, etc.
Les compositions sous forme liquide peuvent comprendre également de s l'eau, le cas échéant en mélange avec du propylène glycol ou du polyéthylène glycol, et éventuellement aussi des agents de coloration, des arômes, des stabilisants et des agents épaississants.
L'invention est en outre illustrée, sans pour autant être limitée, par l'exemple suivant.
Exemple 1 : Propriétés anti-invasives des composés anti-métastatiques de l'invention.
A. MATERIEL ET METHODES
1. Protocole de marquage E-cadherine en plaques 96 puits 1- Ensemencer environ 10.000 cellules par puits pour des lignées colorectales (dans des plaques 96 puits Falcon, ref : 353072).
2- Faire les traitements nécessaires (contrôle, composé (I), (II) etc..
.pendant 48h) et fixer 10 minutes à la formalin (Formadéhyde 3,7% dans PBS) 3- Saturation, 10 minutes PBS-BSA
4- Incubation de l'anticorps primaire, dilué au 1:500 dans PBS-BSA, 2 heures à
37 C (Anti E-cadhérine de souris, ZYMED, ref : 13-1700)
5- 2 rinçages rapides au PBS - 0.1 % Tween
6- Incubation Ac anti-mouse biotynilé, dilution 1:1000 dans PBS-BSA, 30 minutes à 37 C, (Anti-Mouse IgG, Heavy and light chain specific biotin conjugate, CALBIOCHEM, ref : 401213)
7- 2 rinçages rapides au PBS - 0.1 % Tween
8- Incubation Streptavidine-HRP, dilution entre 1:1000 dans PBS-BSA, 30 minutes à 37 C, (ECL strptavidine-Horseradish Peroxidase conjugate, AMERSHAM
BIOSCIENCES, ref : RPN1231)
BIOSCIENCES, ref : RPN1231)
9- 2 rinçages rapides au PBS - 0.1 % Tween
10- Révélation Dissoudre une capsule de Phosphate-citrate buffer containing sodium perborate (SIGMA, ref : P4922) dans 100 ml d'eau désionisée. Ce tampon doit être s utilisé dans les 30 minutes qui suivent sa reconstitution.
Dissoudre des tablettes d'o-Phenylenediamine (OPD) dihydrochloride (SIGMA, ref : P6787) dans ce tampon pour obtenir une concentration finale de 0.4 mg/ml (1 pastille d'OPD à 10 mg dans 40 ml de Tampon perborate).
Mettre 100 pl d'OPD/Perborate par puits et incuber à température ambiante pendant 5 minutes.
Stopper la réaction avec 50 pl de HCI 3N.
Lire la DO à 490 nm.
2. Test d'invasion 1 - à J-2, décongeler le matriciel à 4 C toute la nuit...
2- à J-1, couler le matriciel dans les nacelles Placer l'ensemble du matériel nécessaire dans la glace (matrigel, milieu de culture, cônes, eppendorfs, etc...).
Placer les inserts fluoroblocks (FALCON, ref : 351152) dans les plaques 24 puits (FALCON, ref : 353504).
Diluer le matrigel à 2mg/ml dans du milieu de culture sans sérum froid (si les cellules doivent subir un traitement X, inclure le produit dans le matrigel, ex : Y27632) Répartir 100 l de matrigel 2mg/ml par insert en évitant de faire des bulles...
Laisser O/N à 37 C dans une atmosphère humide 3- Le jour J, ensemencer les cellules sur le matriciel Dans un premier temps, mettre 700 I de milieu 10% sérum dans une plaque 24 puits et transférer les inserts dans cette plaque.
Trypsiner les cellules (préalablement traitées ou non...) et les reprendre dans du milieu 2% sérum.
Ensemencer 50.000 cellules par insert dans 200 I de milieu 2% sérum sur le matrigel (mettre éventuellement du Y27632 dans les cellules ensemencées).
4- Le temps de migration est variable en fonction du type cellulaire mais généralement laisser migrer 8 heures en fixant un point toutes les 2 heures semble convenable.
Pour fixer, transférer les inserts dans une plaque 24 puits contenant l ml de s formalin (Formaldéhyde 3,7% dans PBS), aspirer le milieu de culture à
l'intérieur des nacelles et ajouter également de la formalin (très important, évite aux cellules de continuer à migrer dans le matrigel !!!). Incuber 10 minutes.
Faire 3 rinçages rapides au PBS
Ensuite, réaliser le marquage au Iodure de propidium en incubant les inserts 1o dans 1 ml de Iodure de propidium (SIGMA, ref : P-4864) 1:500 dans PBS, O/N
à 4 C, à
l'abri de la lumière.
B. RESULTATS
B.1. Capacité des composés anti-métastatiques de l'invention à induire le is rétablissement des jonctions inter-cellulaires Les composés de formule (I) à (VI) ont été testés pour leur capacité à
induire le rétablissement des jonctions inter-cellulaires dans des cultures in vitro de cellules de la ignée SW620, en utilisant le test de marquage E-cadhérine décrit dans la partie Matériel et Méthodes.
Comme contrôle négatif, on a utilisé les cellules de la lignée SW620 incubées dans le milieu de culture seul, en l'absence de composé anti-métastatique. On a obtenu une D.O. moyenne de 0,147.
Comme contrôle positif, on a utilisé des cellules de la lignée HCT116 incubées dans le milieu de culture seul, en l'absence de composé anti-métastatique. On a obtenu une D.O. moyenne de 0,734.
Les essais ont été réalisés en incubant les cellules de la lignée SW620 avec chacun des composés (I) à (VI).
Dans ces essais, la D.O. moyenne obtenue avec chacun des composés (I) à (VI) a toujours été supérieure à 0,300, ce qui signifie que les composés (I) à (VI) sont capables d'induire l'étalement cellulaire, la formation d'îlots cellulaires compacts, et d'induire la génération de néo-jonctions inter-cellulaires de type E-cadhérine.
B.2. Propriétés anti-invasives des composés anti-métastatiques de l'invention On a mesuré la capacité de chacun des composés de formule (I) à (VI) à
inhiber ou bloquer les propriétés invasives de cellules cancéreuses métastatiques, avec le test d'invasion décrit dans la partie Matériel et Méthodes.
Les cellules de la lignée métastatique SW620 incubées en l'absence de composé anti-métastatique ont été utilisées comme contrôle négatif, dont la valeur de contrôle a été arbitrairement fixée à 100%.
Les cellules de la lignée cancéreuse non métastatique HCT116 ont été
utilisées comme témoin positif.
Les résultats sont représentés sur les figures 1.
Sur la figure 1, on montre que tous les composés de formule (I) à (VI) sont s capables de bloquer les propriétés invasives des cellules de la lignée cellulaire de cancer colo-rectal métastatique, puisque les cellules traitées ont une activité invasive similaire ou inférieure à celle de la ligné HCT116 de cancer colo-rectal non-métastatique.
De plus, les résultats de la figure 2, 3 et 4 montrent que les propriétés anti-1o invasives de chacun des composés de formule (I) à (VI) sont mis en évidence sur des types variés de cellules cancéreuses humaines métastatiques, y compris des cellules originaires d'un cancer mammaire (figure 4).
Dissoudre des tablettes d'o-Phenylenediamine (OPD) dihydrochloride (SIGMA, ref : P6787) dans ce tampon pour obtenir une concentration finale de 0.4 mg/ml (1 pastille d'OPD à 10 mg dans 40 ml de Tampon perborate).
Mettre 100 pl d'OPD/Perborate par puits et incuber à température ambiante pendant 5 minutes.
Stopper la réaction avec 50 pl de HCI 3N.
Lire la DO à 490 nm.
2. Test d'invasion 1 - à J-2, décongeler le matriciel à 4 C toute la nuit...
2- à J-1, couler le matriciel dans les nacelles Placer l'ensemble du matériel nécessaire dans la glace (matrigel, milieu de culture, cônes, eppendorfs, etc...).
Placer les inserts fluoroblocks (FALCON, ref : 351152) dans les plaques 24 puits (FALCON, ref : 353504).
Diluer le matrigel à 2mg/ml dans du milieu de culture sans sérum froid (si les cellules doivent subir un traitement X, inclure le produit dans le matrigel, ex : Y27632) Répartir 100 l de matrigel 2mg/ml par insert en évitant de faire des bulles...
Laisser O/N à 37 C dans une atmosphère humide 3- Le jour J, ensemencer les cellules sur le matriciel Dans un premier temps, mettre 700 I de milieu 10% sérum dans une plaque 24 puits et transférer les inserts dans cette plaque.
Trypsiner les cellules (préalablement traitées ou non...) et les reprendre dans du milieu 2% sérum.
Ensemencer 50.000 cellules par insert dans 200 I de milieu 2% sérum sur le matrigel (mettre éventuellement du Y27632 dans les cellules ensemencées).
4- Le temps de migration est variable en fonction du type cellulaire mais généralement laisser migrer 8 heures en fixant un point toutes les 2 heures semble convenable.
Pour fixer, transférer les inserts dans une plaque 24 puits contenant l ml de s formalin (Formaldéhyde 3,7% dans PBS), aspirer le milieu de culture à
l'intérieur des nacelles et ajouter également de la formalin (très important, évite aux cellules de continuer à migrer dans le matrigel !!!). Incuber 10 minutes.
Faire 3 rinçages rapides au PBS
Ensuite, réaliser le marquage au Iodure de propidium en incubant les inserts 1o dans 1 ml de Iodure de propidium (SIGMA, ref : P-4864) 1:500 dans PBS, O/N
à 4 C, à
l'abri de la lumière.
B. RESULTATS
B.1. Capacité des composés anti-métastatiques de l'invention à induire le is rétablissement des jonctions inter-cellulaires Les composés de formule (I) à (VI) ont été testés pour leur capacité à
induire le rétablissement des jonctions inter-cellulaires dans des cultures in vitro de cellules de la ignée SW620, en utilisant le test de marquage E-cadhérine décrit dans la partie Matériel et Méthodes.
Comme contrôle négatif, on a utilisé les cellules de la lignée SW620 incubées dans le milieu de culture seul, en l'absence de composé anti-métastatique. On a obtenu une D.O. moyenne de 0,147.
Comme contrôle positif, on a utilisé des cellules de la lignée HCT116 incubées dans le milieu de culture seul, en l'absence de composé anti-métastatique. On a obtenu une D.O. moyenne de 0,734.
Les essais ont été réalisés en incubant les cellules de la lignée SW620 avec chacun des composés (I) à (VI).
Dans ces essais, la D.O. moyenne obtenue avec chacun des composés (I) à (VI) a toujours été supérieure à 0,300, ce qui signifie que les composés (I) à (VI) sont capables d'induire l'étalement cellulaire, la formation d'îlots cellulaires compacts, et d'induire la génération de néo-jonctions inter-cellulaires de type E-cadhérine.
B.2. Propriétés anti-invasives des composés anti-métastatiques de l'invention On a mesuré la capacité de chacun des composés de formule (I) à (VI) à
inhiber ou bloquer les propriétés invasives de cellules cancéreuses métastatiques, avec le test d'invasion décrit dans la partie Matériel et Méthodes.
Les cellules de la lignée métastatique SW620 incubées en l'absence de composé anti-métastatique ont été utilisées comme contrôle négatif, dont la valeur de contrôle a été arbitrairement fixée à 100%.
Les cellules de la lignée cancéreuse non métastatique HCT116 ont été
utilisées comme témoin positif.
Les résultats sont représentés sur les figures 1.
Sur la figure 1, on montre que tous les composés de formule (I) à (VI) sont s capables de bloquer les propriétés invasives des cellules de la lignée cellulaire de cancer colo-rectal métastatique, puisque les cellules traitées ont une activité invasive similaire ou inférieure à celle de la ligné HCT116 de cancer colo-rectal non-métastatique.
De plus, les résultats de la figure 2, 3 et 4 montrent que les propriétés anti-1o invasives de chacun des composés de formule (I) à (VI) sont mis en évidence sur des types variés de cellules cancéreuses humaines métastatiques, y compris des cellules originaires d'un cancer mammaire (figure 4).
Claims (10)
1. Utilisation d'un composé choisi parmi un composé inhibiteur d'aminopeptidase et un composé aza-indole pour la fabrication d'un médicament destiné à la prévention ou au traitement des métastases cancéreuses chez l'homme ou l'animal.
2. Utilisation selon la revendication 1, caractérisée en ce que le composé
inhibiteur d'aminopeptidase est le composé de formule (I) suivante:
inhibiteur d'aminopeptidase est le composé de formule (I) suivante:
3. Utilisation selon la revendication 1, caractérisée en ce que le composé
azaindole est le composé de formule (II) suivante dans laquelle le groupe R1 est un alkyle linéaire ou ramifié ayant de 1 à 6 atomes de carbone.
azaindole est le composé de formule (II) suivante dans laquelle le groupe R1 est un alkyle linéaire ou ramifié ayant de 1 à 6 atomes de carbone.
4. Utilisation selon la revendication 1, caractérisée en ce que le composé
azaindole est le composé de formule (III) suivante:
dans laquelle les groupes R1, R2, R3 et R4 représentent chacun, indépendamment l'un de l'autre, un alkyle de 1 à 6 atomes de carbone
azaindole est le composé de formule (III) suivante:
dans laquelle les groupes R1, R2, R3 et R4 représentent chacun, indépendamment l'un de l'autre, un alkyle de 1 à 6 atomes de carbone
5. Utilisation selon la revendication 2, caractérisée en ce que le composé
azaindole est le composé de formule (IV) suivante:
dans laquelle les groupes R1, R2 et R3 représentent chacun, indépendamment l'un de l'autre, un halogène choisi parmi F, CI, I et Br.
azaindole est le composé de formule (IV) suivante:
dans laquelle les groupes R1, R2 et R3 représentent chacun, indépendamment l'un de l'autre, un halogène choisi parmi F, CI, I et Br.
6. Utilisation selon la revendication 1, caractérisée en ce que le composé
azaindole est le composé de formule (V) suivante dans laquelle - le groupe R1 est un halogène choisi parmi F, CI, I et Br, et - le groupe R2 est un alkyle linéaire ou ramifié ayant de 1 à 6 atomes de carbone.
azaindole est le composé de formule (V) suivante dans laquelle - le groupe R1 est un halogène choisi parmi F, CI, I et Br, et - le groupe R2 est un alkyle linéaire ou ramifié ayant de 1 à 6 atomes de carbone.
7. Utilisation selon la revendication 1, caractérisée en ce que le composé
azaindole est le composé de formule (VI) suivante:
dans laquelle le groupe R1 est un halogène choisi parmi F, CI, 1 et Br.
azaindole est le composé de formule (VI) suivante:
dans laquelle le groupe R1 est un halogène choisi parmi F, CI, 1 et Br.
8. Utilisation selon la revendication 1, caractérisé en ce que le composé
azaindole est choisi parmi les composés suivants:
- le méthyl 4-[([3-(4-fluorophenyl)-4-oxo-2-thioxo-1,3-thiazolidin-5-ylidene)methyl)benzoate;
- le 3,4,5-triethoxy-N-(2-methyl-4-nitrophenyl)benzamide;
- le 5-(5-bromo-3-chloro-2-hydroxybenzylidene)-1-(4-chlorophenyl)-2,4,6(1H,3H,5H)-pyrimidinetrione;
- le 5-bromo-N-(4-butoxyphenyl) nicotinamide ; et - le 3-chloro-1-phenyl-4-[(2-phenylethyl)amino]-1 Hpyrrole-2,5-dione.
azaindole est choisi parmi les composés suivants:
- le méthyl 4-[([3-(4-fluorophenyl)-4-oxo-2-thioxo-1,3-thiazolidin-5-ylidene)methyl)benzoate;
- le 3,4,5-triethoxy-N-(2-methyl-4-nitrophenyl)benzamide;
- le 5-(5-bromo-3-chloro-2-hydroxybenzylidene)-1-(4-chlorophenyl)-2,4,6(1H,3H,5H)-pyrimidinetrione;
- le 5-bromo-N-(4-butoxyphenyl) nicotinamide ; et - le 3-chloro-1-phenyl-4-[(2-phenylethyl)amino]-1 Hpyrrole-2,5-dione.
9. Utilisation selon l'une des revendications 1 à 8, caractérisée en ce que ledit médicament est destiné à la prévention ou au traitement des cancers épithéliaux.
10. Utilisation selon la revendication 9, caractérisée en ce que le cancer épithélial est choisi parmi un cancer colo-rectal et un cancer mammaire.
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| FR0850389 | 2008-01-22 | ||
| FR0850389A FR2926463B1 (fr) | 2008-01-22 | 2008-01-22 | Utilisation d'inhibiteurs d'aminopeptidase ou de composes azaindole pour la prevention ou le traitement de metastases cancereuses d'origine epitheliale |
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